Влияние полиэлектролитов на транспорт доксорубицина через бислойную липидную мембрану тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Китаева, Марина Викторовна

• Китаева, Марина Викторовна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Китаева, Марина Викторовна

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Использование полимеров в качестве компонентов лекарственных препаратов.

2.1.1. Синтетические полимеры как наполнители и материалы для создания препаратов пролонгированного действия.

2.1.1.1. Иммобилизация лекарств на полимерных носителях.

2.1.1.2. Получение полиэлектролитных нанокапсул.

2.1.1.3. Полимерные липосомы.

2.1.2. Полимеры в конструкциях для направленной доставки лекарств.

2.1.3. Полимерные конструкции для направленной доставки доксорубицина.

2.1.4. Избирательность, достигаемая введением между лекарством и носителем лабильной развязки, чувствительной к действию определенных протеаз.

2.1.5. Полимеры как биологически активные вещества. Влияние полимеров на клеточные функции.

2.1.5.1. Противоопухолевая активность сополимеров на основе малеинового ангидрида.

2.1.5.2. Блок-сополимеры алкиленоксидов как вещества, влияющие на проницаемость биологических мембран.

2.2. Взаимодействие полиэлектролитов с противоположно заряженными соединениями.

2.2.1. Комплексы полиэлектролит-ПАВ.

2.2.1.1. Движущие силы комплексообразования полиэлектролитов и ПАВ.

2.2.1.2. Растворимость комплексов полиэлектролит-ПАВ.

2.2.1.3. Ассоциация молекул ПАВ на полимерной матрице.

2.2.1.4. Образование комплексов полиэлектролит-ПАВ в присутствии низкомолекулярного электролита.

2.2.1.5. Влияние гидрофобности полимера на устойчивость комплексов полиэлектролит-ПАВ.

2.2.2. Комплексы полиэлектролитов с противоположно заряженными красителями.

2.3. Влияние полимеров на структуру и проницаемость мембран.

2.3.1. Проницаемость биологических мембран.

2.3.2. Факторы, влияющие па проницаемость липидного бислоя.

2.3.3. Взаимодействие полианионов с липосомальными мембранами.

2.3.4. Взаимодействие поликатионов с отрицательно заряженными липосомами.

2.3.4.1. Изменение температуры фазового перехода.

2.3.4.2. Встраивание поликатионов в липидный бислой.

2.3.4.3. Изменение проницаемости липидного бислоя.

2.3.4.4. Латеральная сегрегация в липидном бислое.

2.3.4.5. Индуцированный поликатионом флип-флоп.

2.3.4.6. Агрегация липосом.

2.3.4.7. Слияние липосом.

2.3.4.8. Разрушение липосом.

3. ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ.

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

• МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

4.1. Материалы.

4.2. Методы.

4.2.1. Спектральные методы.

4.2.2. Определение концентрации Доке в растворе.

4.2.3. Определение концентрации ПАК в растворе.

4.2.4. Определение степени ионизации ПАК в зависимости отрН.

4.2.5. Изучение комплексообразования Доке и ПАК методом центрифугирования.

4.2.6. Комплексообразование Доке с полиакриловой кислотой в присутствии низкомолекулярной соли.

4.2.7. Определение количества связанного с ПАК Доке в зависимости от рН раствора.

4.2.8. Определение количества несвязанных компонентов комплекса ПАК-Докс методом ультрафильтрации.

4.2.9. Получение малых моноламеллярных липосом.

4.2.9.1. Получение малых безградиентных липосом.

4.2.9.2. Получение малых градиентных липосом.

4.2.10. Метод резонансного переноса энергии.

4.2.11. Изучение взаимодействия комплексов ПАК-Докс с липосомальной мембраной методом ультрафильтрации.

4.2.12. Исследование кинетики проникновения доксорубицина через липосомальную мембрану. ф 4.2.13. Модификация полиакриловой кислоты алифатическими спиртами.

4.2.14. Определение критической концентрации мицеллообразования растворов этерифицированных полиакриловых кислот.

4.2.15. Определение степени модификации ПАК алифатическими спиртами.

4.2.16. Электрофорез в полиакриламидном геле.

4.2.17. Получение больших моноламеллярных липосом.

5. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

5.1. Влияние полианионов на скорость транспорта доксорубицина через липидную мембрану.

5.1.1. Комплексообразование полиакриловой кислоты с доксорубицином.

5.1.1.1. Условия формирования комплексов.

5.1.1.2. Определение состава комплекса.

5.1.1.3. Устойчивость комплексов ПАК-Докс.

5.1.1.4. Модификация полиакриловой кислоты алифатическими спиртами.

5.1.2. Взаимодействие комплексов ПАК-Докс с малыми электронейтралы 1ыми липосомами.

5.1.2.1. Образование тройных комплексов «ПАК-Докс-Мембрана».

5.1.2.2. Изменение структуры комплексов при их взаимодействии с мембранами малых липосом.

5.1.2.3. Влияние комплексов на проницаемость липосомальных мембран по отношению к малым ионам.

5.1.2.4. Изменение состава комплексов ПАК-Докс при их взаимодействии с рН-градиентными липосомами.

5.1.2.5. Исследование скорости мембранного транспорта доксорубицииа, включенного в состав комплексов с гидрофобиыми полианионами.

5.1.2.6. Комплексообразоваиия ПАК-Докс в присутствии БСА.

5.1.2.7. Взаимодействие комплексов ПАК-Докс с отрицательно заряженными рН-градиентными липосомами при физиологической ионной силе и в присутствии белка ф 5.2. Влияние поликатионов на проникновение доксорубицина через липидный бислой.

5.2.1. Влияние полилизина на проницаемость мембран больших отрицательно заряженных липосом.

6. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние полиэлектролитов на транспорт доксорубицина через бислойную липидную мембрану»

Контролируемая доставка лекарственных препаратов в пораженные клетки является одной из ключевых проблем современной фармакологии. Известно, что эффективное использование в фармакологической практике накопленного к настоящему времени арсенала лекарственных соединений в значительной мере ограничивается побочными эффектами, вызываемыми лекарственными соединениями в организме [1-2]. Использование подходов контролируемой доставки позволяет снижать неблагоприятные эффекты химиотерапевтических средств и увеличивать их биодоступность, благодаря чему усиливается фармакологическое действие лекарств [3].

В течение последних 30 лет появилось множество работ, посвященных использованию синтетических и природных полиэлектролитов в качестве средств, способствующих контролируемой доставке биологически активных соединений. Показано, что комплексообразование лекарств с полиэлектролитами позволяет существенно улучшать их фармакологическое действие и увеличить время их циркуляции в кровотоке.

Доксорубицин (синоним - адриамицин) является одним из наиболее широко используемым противоопухолевым антибиотиком, относящимся к классу антрациклинов [4]. Его противоопухолевый эффект обусловлен встраиванием в двойную спираль ДНК, что приводит к образованию двухцепочечных разрывов в молекулах ДНК и гибели клетки. Доксорубицин представляет собой катионную молекулу, которая, помимо ДНК, способна взаимодействовать с другими компонентами клетки. Поэтому изменение проницаемости липидной мембраны по отношению к доксорубицину представляет собой важную с практической точки зрения задачу. Для решения этой задачи предложено использовать синтетические полимеры, способные возмущать биологические мембраны, увеличивая их проницаемость по отношению к доксорубицину [4-5].

С другой стороны, доксорубицин способен накапливаться не только в пораженных клетках, но и в других клетках организма, поэтому значительные усилия направлены на разработку подходов, позволяющих увеличить избирательность действия антибиотика и увеличить время его циркуляции в кровотоке (биодоступность). Один из таких подходов состоит в получении электростатических комплексов доксорубицина с полианионами. [6]

Несмотря на значительные успехи в этой области, ряд вопросов остается неисследованным. В частности неизвестно, способны ли комплексы полианионов с доксорубицином взаимодействовать с липидными мембранами? Неисследованным также остается вопрос о влиянии размеров липидных везикул на характер их взаимодествия с полиэлектролитами.

В настоящей работе мы исследовали влияние полиэлектролитов на способность доксорубицина проникать через мембраны липидных бислойных везикул (липосом). В первой части работы было исследовано влияние полианионов на скорость проникновения доксорубицина через липосомальные мембраны, и изучены перестройки в составе комплексов, происходящие при их взаимодействии с липосомами. Во второй части работы было исследовано влияние катионного полипептида полилизина на проникновение доксорубицина через липосомальные мембраны.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Китаева, Марина Викторовна

выводы

Связывание Доке с макромолекулами ПАК приводит в образованию комплекса характеристического состава [ПАК]:[Докс]=1,6. Размер частиц комплекса достигает нескольких сотен нанометров. Стабилизация комплексов обеспечивается электростатическими взаимодействиями катионных групп Доке с анионными группами ПАК, а также гидрофобными и стэкинг-взаимодействиями между включенными в комплекс молекулами Доке.

Взаимодействие комплекса ПАК-Докс с малыми электронейтральными ФХ липосомами (диаметр около 100 нм) сопровождается разрушением межмолекулярных контактов Докс-Докс и встраиванием высвободившегося Доке во внешний слой липосомальной мембраны. При этом ионные контакты молекул Доке со звеньями ПАК сохраняются. В результате этих структурных перестроек в системе формируются тройные комплексы ПАК-Докс-липосома. При добавлении комплекса ПАК-Докс к суспензии электронейтральных рН-градиентных липосом (с буфером рН 4 внутри и рН 7 снаружи) наблюдается проникновение молекул Доке через липосомальную мембрану. Скорость мембранного транспорта Доке уменьшается по мере увеличения концентрации ПАК в системе.

Модификация молекул ПАК боковыми гидрофобными радикалами повышает стабильность ее комплексов с Доке в водно-солевых средах и приводит к дополнительному замедлению скорости мембранного транспорта Доке. Включенный в такие комплексы Доке способен проникать через липосомальную мембрану при физиологической ионной силе раствора и в присутствии значительных избытков белка.

Скорость транспорта Доке через отрицательно заряженную мембрану увеличивается при адсорбции на ней катионного полипептида ПЛ и достигает максимума в области полной нейтрализации зарядов мембраны адсорбированным поликатионом Эффект ускорения становится более выраженным при переходе от малых липосом к большим с диаметром около 600 нм.

Таким образом, использование полиэлектролитов позволяет в широких пределах манипулировать скоростью транспорта Доке через липидную мембрану. Это открывает новые возможности управления кинетикой захвата антибиотика в биологических системах. Предложенный подход может рассматриваться как инструмент для направленного изменения фармакологических свойств лекарственных веществ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Китаева, Марина Викторовна, 2006 год

1. Suzuki Н., Nakai D., Seita Т. and Sugiyama Y. (1996) Design of a drug delivery system for targeting based on pharmacokinetic consideration., Adv. Drug Del. Rev. 19(3), 335357.

2. Kabanov A.V., Okano T. (2003) Challenges in polymer therapeutics: state of the art and prospects of polymer drugs., Adv. Exp. Med. Biol. 519,1-27.

3. Torchilin V.P. (2001) Structure and design of polymeric surfactant-based drug delivery systems. J. Control. Release 73(2-3), 137-172.

4. Melik-Nubarov N.S., Krylova O.O. (2005) The control of membrane properties by synthetic polymers., Advances in Planar В (layers and Liposomes 2(5), 122-166.

5. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Okuneva I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A., Kabanov V.A., Menger F.M. (2001) Interaction of a cationic polymer with negatively charged proteoliposomes., Biochim. Biophys. Acta 1514 (1), 139-151.

6. Bromberg L, Alakhov V. (2003) Effects of polyether-modified poly(acrylic acid) microgels on doxorubicin transport in human intestinal epithelial Caco-2 cell layers., J. Control. Release. 88(1), 11-22.

7. Торчилин В.П., Клибанов A.Jl. (1987) Липосомы как средства направленного транспорта лекарств. Журнал Всесоюзного химического общества им. Д. И. Менделеева т. XXXII №5, 502-514.

8. Konar N., Kim С., J. (1999) Drug release from drug-polyanion complex tablets: poly(acrylamido-2-methyl-l-propanesulfonate sodium -co- methyl methacrylate)., J. Control. Release 57,141-150

9. Zhu G., Oto E., Vaage J., Quinn Y., Newman M., Engbers C., Uster P. (1996) The effect of vincristine-polyanion complexes in STEALTH liposomes on pharmacokinetics, toxicity and anti tumor activity., Cancer Chemother. Pharmacol. 39, 138-142.

10. Gibaud S., Weingarten C., Andreux J.P., Couvreur P. (1999) Targeting bone marrow with the help of polyalkylcyanoacrylate nanoparticles., Ann. Pharm. Fr. 57,324-331.

11. Oda Т., Sato F., Maeda H. (1987) Facilitated internalization of neocarzinostatin and its lipophilic polymer conjugate, SMANCS, into cytosol in acidic pH. J. Natl. Cancer Inst. 79,1205-1211.

12. Gerweck L.E., Seetharaman K. (1996) Cellular pH gradient in tumor versus normal tissue: potential exploitation for the treatment of cancer., Cancer Res. 15, 1194-1198.

13. Yokoyama M., Kwon G.S., Okano Т., Sakurai Y., Seto Т., Kataoka K. (1992) Preparation of micelle-forming polymer-drug conjugates., Bioconjug. Chem. 3,295-301.

14. Kwon G.S., Yokoyama M., Okano Т., Sakurai Y., Kataoka K. (1993) Biodistribution of micelle-forming polymer-drug conjugates., Pharm. Res. 10, 970-974.

15. Yamamoto H., Miki Т., Oda Т., Hirano Т., Sera Y., Akagi M., Maeda H. (1990) Reduced bone marrow toxicity of neocarzinostatin by conjugation with divinyl ether-maleic acid copolymer., Eur. J. Cancer 26, 253-260.

16. Zunino F., Pratesi G., Pezzoni G. (1987) Increased therapeutic efficacy and reduced toxicity of doxorubicin linked to pyran copolymer via the side chain of the drug., Cancer Treat. Rep. 71, Ъ61-Ъ1Ъ.

17. Hirano Т., Ohashi S., Todoroki Т., Ihaba M., Tsukagoshi S. (1990) Antitumor activity of polyanion and its application for drug delivery system of antitumor drugs. Gan To KagakiRyoho 17, 542-547.

18. Thu В., Bruheim P., Espevik Т., Smidsrod O. (1996) Alginate polycation microcapsules. II. Some functional properties., Biomaterials 17, 1069-1079.

19. Baumler H., Artmann G., Voigt A., Mitlohner R., Neu В., Kiesewetter H. (2000) Plastic behaviour of polyelectrolyte microcapsules derived from colloid templates. J. Microencapsul. 17, 651-655.

20. Lvov Yu.M., Sukhorukov G.B. (1997) Protein architecture: assembly of ordered films by means of alternated adsorption of oppositely charged macromolecules., Membr. Cell Biol. 77,277-303.

21. Shu X.Z., Zhu K.J. (2000) A novel approach to prepare tripolyphosphate/chitosan complex beads for controlled release drug delivery., Int. J. Pharm. 15,51-58.

22. Elcin A.E., Elcin Y.M. (2000) Polycation-coated polyanion microspheres of urease for urea hydrolysis., Artif. Cells Blood Substit. Immobil. Biotechnol. 28, 95-111.

23. Trubetskoy V.S., Loomis A., Hagstrom J.E., Budker V.G., Wolff J.A. (1999) Layer-by-layer deposition of oppositely charged polyelectrolytes on the surface of condensed DNA particles., Nucleic Acids Res. 27, 3090-3095.

24. Lacik I., Brissova M., Anilkumar A.V., Powers A.C., Wang T. (1998) New capsule with tailored properties for the encapsulation of living cells., J. Biomed. Mater. Res. 39, 52-60.

25. New R.R.C. Liposomes, New York: IRL Press (1990), p. 221-251.

26. Allen T.M., Hansen C. (1991) Pharmacokinetics of stealth versus conventional liposomes: effect of dose. Biochim. Biophys. Acta 1068(2), 133-141.

27. Торчилин В.П., Трубецкой B.C. (1994) Можно ли предсказать транспортные свойства полимеров, исходя из химического строения цепей (Обзор)., ВМС 36 № 11, 1880-1893.

28. Torchilin V.P., Trubetskoy V.S., Whiteman K.R., Caliceti P., Ferruti P., Veronese F.M. (1995) New synthetic amphiphilic polymers for steric protection of liposomes in vivo., J. Pharm. Sci. 84,1049-1053.

29. Srinath P., Chary M.G., Vyas S.P., Diwan P.V. (2000) Long-circulating liposomes of indomethacin in arthritic rats-a biodisposition study., Pharm. Acta Helv. 74, 399-404.

30. Bader H. (1985) Membrane-spanning symmetric and asymmetric diyne amphiphiles., Polym. Sci. 64,1-9.

31. Kunitake Т., Okahata Y. (1977) Bilayer Membranes Prepared from Modified Dialkylammonium Salts and Methyldialkylsulfonium Salts., Chem. Lett., 1337-1343.

32. Okahata Y., Kunitake T. (1979) Formation of Stable Monolayer Membranes and Related Structures in Dilute Aqueous. Solution from Two-headed Ammonium Amphiphiles., J. Amer. Chem. Soc.102, 5231-5237.

33. Рингсдорф Г., Шмидт Б. (1987) Системы полимерных носителей лекарств. Журнал Всесоюзного химического общества им. Д.И. Менделеева т. XXXII №5,487-501.

34. Anikin A.V., Chupin V.V., Anikin M.V., Serebrennikova G.A., Evstigneeva R.P. (1991) Highly stable polymeric liposomes based on a diene-containing phosphatidylcholine., Dokl. Akad. Nauk SSSR 321(5), 1103-1105.

35. Freeman F.J., Hayward J.A., Chapman D. (1987) Permeability studies on liposomes formed from polymerizable diacetylenic phospholipids and their potential applications as drug delivery systems., Biochim. Biophys. Acta 924 (2), 341-351.

36. Hayward J.A., Johnston D.S., Chapman D. (1985) Polymeric phospholipids as new biomaterials., Ann. N.Y. Acad. Sci. 446, 267-281.

37. Wagner N. (1983) Incorporation of ATP synthetase into long-term stable liposomes of a polymerizable synthetic sulfolipid., FEBS Lett. 132,313-317.

38. Elbert R., Folda Т., Ringsdorf H. (1984) Liposomes from polymerizable phospholipids., J. Amer. Chem. Soc. 106, 7687-7693.

39. Regen S.L., Singh M., Samuel N.K. (1984) Funetionalized polymeric liposomes. Efficient immobilization of alpha chymotrypsin., Biochem. Biophys. Res. Commun. 119 (2), 646-651.

40. Regen S.L. (1985) Polymerized phosphatidylcholine vesicles as drug carriers., Ann. N.Y. Acad. Sci. 446,296-307.

41. Gaub H., Buachl R., Ringsdorf H. (1984) Lateral diffusion and phase separation in two-dimensional solutions of polymerized butadiene lipid in dimyristoylphosphatidylcholine bilayers. A photobleaching and freeze fracture study., Biophys. J. 45, 725-734.

42. Choi M.J., Han H.S., Kim H. (1992) pH-sensitive liposomes containing polymerized phosphatidylethanolamine and fatty acid., J. Biochem. 112(5), 694-699.

43. Геннис P. Биомембраны. Молекулярная структура и функции. Москва: Мир (1997), 289-331.

44. Reiner R., Antibiotics., Basle, Switzerland: "Roche" (1982), 31-32.

45. Neidle S., Sanderson M.R., Molecular Aspects of Anti-cancer Drug Action., New York: Neidle & Waring, Plenum Press (1983), p. 35-36.

46. Trail P.A., Willner D., Lasch S.J., Henderson A.J., Hofstead S., Casazza A.M., Firestone R.A., Hellstrom I., Hellstrom K.E. (1993) Cure of xenografted human carcinomas by BR96-doxorubicin immunoconjugates., Science 261, 212-215.

47. Shih L.B., Goldenberg D.M., Xuan H., Lu H., Sharkey R.M., Hall T.C. (1991) Anthracycline immunoconjugates prepared by a site-specific linkage via an amino-dextran intermediate carrier., Cancer Research 51, 4192-4198.

48. Shih L.B., Goldenberg D.M., Xuan H., Lu H. W.-Z., Mattes M.J., Hall T.C. (1994) Internalization of an intact doxorubicin immunoconjugate., Cancer Immunology Immunotherapy 38, 92-98.

49. Lavie E., Hirschberg D.L., Schreiber G., Thor K., Hill L., Hellstorm I., Hellstorm K.-E. (1991) Monoclonal antibody L6-daunomycin conjugates constructed to release free drug at the lower pH of tumor tissue., Cancer Immunology Immunotherapy 33, 223-230.

50. Subr V., Kopecek J., Pohl J., Baudys M., Kostka V. (1988) Daunomycin- and adriamycin-N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide copolymer conjugates; toxicity reduction by improved drug-delivery., J. Control. Release 8, 133-140.

51. Duncan R., Kopecek J., Lloyd J.B. (1984) Drug targeting to lysosomes., Biochemical Society Transactions, 608th meeting, Keele 12, 913-915.

52. Subr V., Duncan R, Kopecek J. (1990) Release of macromolecules and daunomycin from hydrophilic gels containing enzymatically degradable bonds., J. Biomater. Sci. Polymer Edn. 1№4, 261-278.

53. Suda Y., Kusumoto S. (1994) Therapeutic efficacy of 5-fluorouracil prodrugs using endogenous serum proteins as drug carriers: a new strategy in drug delivery system., Macromol. Rep. A31, 1077-1083.

54. Stolfi R.L., Martin D.S. (1978) Therapeutic activity of maleic anhydride-vinyl ether copolymers against spontaneous, autochthonous murine mammary tumors., Cancer Treat. Rep. 62 (11), 1791-1796.

55. Schmolka I.R. (1977) Artificial blood emulsifiers., J. American Oil Society, 110-116.

56. Elworthy P.H., Ireon J.F. In: Nonionic Surfactants, ed. Shick M.J., 3-rd ed., NY., 1971, p.9317.

57. Alexandridis P., Holzwarth J.F., Hatton T.A. (1994) Micellization of Polyethylene oxide)-Poly(propylene oxide)-Poly(ethylene oxide) Triblock Copolymers in Aqueous Solutions. Thermodynamics of Copolymer Association. Macromolecules 27,2414-2120.

58. Mortensen K., Brown W. (1993) Poly(ethylene oxide)-poly(propylene oxide)-poly(ethylene oxide) triblock copolymers in aqueous solution. The influence of relative block size., Macromolecules 26,4128-4131.

59. Wanka, G., Hoffinannn H., Ulbricht W. (1990) Structural studies of aqueous solutions of PEO PPO - PEO triblock copolymers, their micellar aggregates and mesophases; a small-angle neutron scattering study., Colloid. Polym. Sci. 268, 101-107.

60. Mortensen K., Pedersen J.S. (1993) Structural study on the micelle formation of poly(ethylene oxide)-poly(propylene oxide)-poly(ethylene oxide) triblock copolymer in aqueous solution., Macromolecules 26, 805-812.

61. Alexandridis, P., Athanassiou, V., Fukuda, S., Hatton, T.A. (1994) Dynamics of Micro-and Macrophase Separation of Amphiphilic Block-Copolymers in Aqueous Solution., Macromolecules 27, 2604-2610.

62. Bentley P.K., Davis S.S., Johnson O.L., Lowe K.C., Washington C. (1989) Purification of pluronic F-68 for perfluorochemical emulsification., J. Pharm. Pharmacol. 41, 661663.

63. Иваницкий Г.Р., Белоярцев Ф.Ф., Медико-биологические аспекты применения эмульсий перфторированных углеводородов., Пущино (1983), с.9.

64. Forman М.В., Ingram D.A., Murray J.J. (1992) Role of perfluorochemical emulsions in the treatment of myocardial reperfusion injury., Amer. Heart J. 124,1347-1357.

65. Hurter P.N., Scheutjens J.M., Hatton, T.A. (1993) Molecular modeling of micelle formation and solubilization in block copolymer micelles. 2. Lattice theory for monomers with internal degrees of freedom., Macromolecules 26, 5030-5036.

66. Justicz A.G., Famsworth W.V., Soberman M.S., Tuvlin M.B., Bonner G.D., Hunter R.L., Martino-Saltzman D., Sink, J.D., Austin G.E. (1991) Reduction of myocardial infarct size by poloxamer 188 and mannitol in a canine model., Amer. Heart J. 122, 671-676.

67. Howell J.M., Stair Т.О., Howell A.W., Mundt D.J., Falcone A., Peters S.R. (1993) The effect of scrubbing and irrigation with normal saline, povidone iodine, and cefazolin on wound bacterial counts in a guinea pig model., Am .J. Emerg. Med. 11, 134-120.

68. Fults K.A., Johnston T.P. (1990) Sustained-release of urease from a poloxamer gel matrix., J. Parenteral Science & Technology 44, 58-64.

69. Miyazaki S., Ohkawa Y., Takada M., Attwood D. (1992) Antitumor effect of pluronic F-127 gel containing mitomycin С on sarcoma-180 ascites tumor in mice., С hem. Pharm. Bull. 40, 2224-2230.

70. Carter K.C., Gallagher G., Baillie A.J., Alexander J. (1989) The induction of protective immunity to Leishmania major in the BALB/c mouse by interleukin 4 treatment., Eur. J. Immunol. 19, 779-786.

71. Nutting D.F., Tso P. (1989) Hypolipidemic effect of intravenous pluronic L-81 in fasted rats treated with Triton WR-1339: possible inhibition of hepatic lipoprotein secretion., Hormone & Metabolic Research 21,113-118.

72. Chi S.C., Jun H.W. (1991) Release rates of ketoprofen from poloxamer gels in a membraneless diffusion cell., J. Pharm. Sci. 80,280-289.

73. Chi S.C., Jun H.W. (1990) Anti-inflammatory activity of ketoprofen gel on carrageenan-induced paw edema in rats., J. Pharm. Sci. 79,974-981.

74. Durand-Cavagna G., Duprat P. (1989) Molon-Noblot S., Delort P., Rozier A., Corneal endothelial changes with azone, a penetration enhancer., Lens & Eye Tox. Res. 6, 109113.

75. Кабанов В.A. (1994) Физико-химические основы и перспективы использования растворимых интерполиэлектролитных комплексов., ВМС 36 №2,183-197.

76. Goddard E.D., Ananthapadmanabhan К.Р. Interactions of Surfactants with Polymers and Proteins. CRC Press (1993), 205-238.

77. Thalberg K., Lindman B. (1989) Interaction between hyaluronan and cationic surfactants., J. Phys. Chem. 93,1478-1484.

78. Binana-Limbele W., Zana R. (1987) Fluorescence probing of microdomains in aqueous solutions of polysoaps. 1. Use of pyrene to study the conformational state of polysoaps and their comicellization with cationic surfactants., Macromolecules 20,1331-1339.

79. Hayakava K, Santerre J.P., Kwak J.C.T. (1983) Study of surfactant-polyelectrolyte interactions. Binding of dodecyl- and tetradecyltrimethylammonium bromide by some carboxylic polyelectrolytes., Macromolecules 16, 1642-1645.

80. Keifer J.J., Somasundaran P., Ananthapadmanabhan K.P. (1993) Interaction of tetradecyltrimethylammonium bromide with poly(acrylic acid) and poly(methacrylic acid). Effect of charge density., Langmuir 9,1187-1192.

81. Chandar P., Somasundaran P., Turro N.J. (1988) Fluorescence probe investigation of anionic polymer-cationic surfactant interactions., Macromolecules 21, 950-953.

82. Satake I., Takahashi Т., Hayakava K., Maeda Т., Aoyagi M. (1990) The conformational change of poly(L-ornithine) with organic counterions in aqueous sodium 1-dodecanesulfonate solution., Bull. Chem. Soc. Jpn. 63,926-932.

83. Thalberg K., van Stam J., Lindblad C., Almgren M., Lindman B. (1991) Time-resolved fluorescence and self-diffusion studies in systems of a cationic surfactant and an anionic polyelectrolyte., J. Phys. Chem. 95, 8975-8983.

84. Iliopoulos I., Wang Т.К., Audebert R. (1991)Viscometric evidence of interactions between hydrophobically modified poly(sodium acrylate) and sodium dodecyl sulfate., Langmuir 7, 617-623.

85. Colby R.H., Plucktaveesak N., Bromberg L. (2001) Critical Incorporation Concentration of Surfactants Added to Micellar Solutions of Hydrophobically Modified Polyelectrolytes of the Same Charge., Langmuir ASAP article, p. B-E.

86. Касаикин B.A. (1988) Диссертация на соискание ученой степени доктора химических наук, Москва, МГУ.

87. Michaelis L., Granick. S. (1945) Metachromasy of Basic Dyestuffs., J. Amer. Chem. Soc. 67 №7,1212-1219.

88. Haugen G.R., Hardwick E.R. (1963) Ionic Association in Aqueous Solutions of Thionine., J.Phys.Chem. 67, 725-731.

89. Mukeijee P., Ghosh A.K. (1970) Thermodynamic aspects of the self-association and hydrophobic bonding of methylene blue. Model system for stacking interactions., J. Amer. Chem. Soc. 92, 6419-6424.

90. Ortona O., Vitagliano V., Sartorio R., Costantino L. (1984) Spectrophotometry study of the interaction of poly(styrenesulfonic acid) with a metachromatic die in methanol., J. Phys, Chem. 88,3244-3248.

91. Pal M.K., Schubert M. (1961) Ultracentrifugal Separation of the Metachromatic Compound of Methylene Blue and Chondriotin Sulfate., J. Phys. Chem. 65, 872-877.

92. Vitagliano V., Costantino L., Zagari A. (1973) Interaction between Acridine Orange and poly(styrenesulfonic acid)., J. Phys. Chem. 77, 204-210.

93. Block M.C., van Deenen L.M.M., de Gier J. (1976) Effect of the gel to liquid crystalline phase transition on the osmotic behaviour of phosphatidylcholine liposomes., Biochim. Biophys. Acta 433,1-12.

94. Xiang T.-X., Anderson B.D. (1988) Transport methods for probing the barrier domain of lipid bilayer membranes., Biochim. Biophys. Acta 1370, 64-76.

95. Frezard G., Garnier-Suillerot Т. M. (1998) Permeability of lipid bilayer to anthracycline derivatives. Role of the bilayer composition and of the temperature., Biochim. Biophys. Acta 1389(1), 13-22.

96. Aldwincle T.J., Ahkong Q.F., Bangham A. D., Fisher D., Lucy J.A. (1982) Effects of poly(ethylene glycol) on liposomes and erythrocytes. Permeability changes and membrane fusion., Biochim. Biophys. Acta 689, 548-560.

97. Удалых О.Ю. (1999) Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук. Москва, МГУ.

98. Mitrakos P., Macdonald P.M. (1996) DNA-induced lateral segregation of cationic amphiphiles in lipid bilayer membranes as detected via 2H NMR., Biochemistry 35, 16714-16722.

99. Mitrakos P., Macdonald P.M. (2000) Nucleotide chain length and the morphology of complexes with cationic amphiphiles: 31P-NMR observations., Biochim. Biophys. Acta 1463,355-373.

100. Мальцева E.A., Антоненко Ю.Н., Мелик-Нубаров H.C., Ягужинский Jl.С. (2002) Влияние синтетических амфифильных полианионов на транспорт ионов черезф плоскую бислойную липидную мембрану., Биологические мембраны 19, 347-350.

101. Thomas J., Devlin В.Р., Tirrell D.A. (1996) Kinetics of membrane micellization by the hydrophobic polyelectrolyte poly-(2-ethylacrylic acid)., Biochim. Biophys. Acta 1278, 73-78. ;

102. Thomas J.L., Tirrell D.A. (2000) Polymer-induced leakage of cations from dioleoylphosphatidylcholine and phosphatidylglycerol liposome., J. Control. Release 67, 203-209.

103. Chung J. C., Gross D. J., Thomas, J. L., Tirrell D. A., Opsahl-Ong L. R. (1996) pH

104. Sensitive, Cation-Selective Channels Formed by a Simple Synthetic Polyelectrolyte in

105. Artificial Bilayer Membranes., Macromolecules 29(13), 4636-4641.

106. Carrier D., Pezolet M. (1984) Study of the effect of poly(L-lysine) on phosphatidic acid and phosphatidylcholine/phosphatidic acid bilayers by raman spectroscopy., BiophysJ., 46, 497-506.

107. Carrier D., Dufourcq J., Faucon J.-F., Pezolet M. (1985) A Fluorescence Investigation of the Effects of Polylysine on Dipalmitoylphosphatidylglycerol Bilayers.,

108. Ф Biochim.Biophys.Acta 820, 131-139.

109. Carrier D., Pezolet M. (1986) Investigation of polylysine-dipalmitoylphosphatidylglycerol Interactions in model membranes., Biochemistry 25, 4167-4174.

110. Takahashi H., Matuoka S., Kato S., Ohki K., Hatta I. (1992) Electrostatic interaction of poly(L-lysine) wilh dipalmitoylphosphatidic acid studied by x-ray diffraction., Biochim.Biophys.Acta 1110,29-36.

111. Hartmann W., Galla H.-J. (1978) Binding of polylysine to charged bilayer membranes: molecular organization of a lipid/peptide complex., Biochim.Biophys.Acta 509,474-490.

112. Laroche G., Carrier D., Pezolet M. (1988) Study of the effect of poly(L-lysine) on phosphatidic acid and phosphatidylcholine/phosphatidic acid bilayers by Raman spectroscopy., Biochemistry 27, 6220-6228.

113. Laroche G., Pezolet M., Dufourcq J., Dufourc E.J. (1989) Modifications of the structure and dynamics of dimyristoylphosphatidic acid model membranes by calcium ions and poly-L-lysines., Progr.Colloid Polym.Sci. 79, 38-42.

114. Galla H.-J., Sackmann E. (1975) Chemically induced lipid phase separation in model membranes containing charged lipids: a spin label study., Biochim.Biophys.Acta 401, 509-529.

115. Papahadjopoulos D., Moscarello M., Eylar E.H., Isac T. (1975) Effects of proteins on thermotropic phase transitions of phospholipid membranes., Biochim.Biophys.Acta 401, 317-335.

116. Cevc G., Marsh D., Phospholipid bilayers, NY: Willey (1987).

117. Takahashi H., Matuoka S., Kato S., Ohki K., Hatta I., (1991) Electrostatic interaction of poly(L-lysine) wilh dipalmitoylphosphatidic acid studied by x-ray diffraction., Biochim.Biophys.Acta 1069, 229-234.

118. Cornell D.G., Dluhy R.A. (1989) Conformations and orientations of a signal peptide interacting with phospholipid monolayers., Biochemistry 28, 2789-2797.

119. Ringsdorf H., Sackmann E., Simon J., Winnik F.M. (1993) Interactions of liposomes and hydrophobically-modified poly-(N-isopropylacrylamides): an attempt to model the cytoskeleton., Biochim. Biophys.Acta 1153, 335-344.

120. Mittler-Neher S., Knoll W. (1989) Phase Separation in Bimolecular Mixed Lipid Membranes Induced by Polylysine., Biochem.Biophys.Res.Commun 162,124-129.

121. Huschilt J.C., Millman B.M., Davis J.H. (1989) Orientation of-helical peptides in A lipid bilayer., Biochim.Biophys.Acta 979, 139-141.

122. Ohno H., Maeda Y., Tsushida E. (1981) 1H-NMR study of the effect of synthetic polymers on the fluidity, transition temperature and fusion of dipalmitoyl phosphatidylcholine small vesicles., Biochim.Biophys.Acta 642, 27-36.

123. Ikeda Т., Lee В., Yamaguchi H., Tazuke S. (1990) Phase separation in phospholipid bilayers induced by biologically active polycations., Biochim.Biophys. Acta 1021, 56-62.

124. Ringsdorf H., Simon J., Winnik F.M. (1993) Colloid-Polymer Interactions: Particulate, Amphiphilic, and Biological Surfaces., Washigton: ACS, p.216.

125. Oku N., Shibamoto S., Ito F., Gondo H., Nango M. (1987) Low pH induced membrane fusion of lipid vesicles containing proton-sensitive polymer., Biochemistry 26, 81458150.

126. Yaroslavov A.A., Kul'kov V.Ye., Efimova A.A., Ignatiev M.O. (1995) Synthetic polycations on the surface of negatively charged liposomes., Thin Solid Films 265, 66-70.

127. Torchilin V.P., Shtilman M.I., Trubetskoy V.S., Whiteman K., Milstein A.M. (1994) Targeted polymeric micelles for delivery of poorly soluble drugs., Biochim.Biophys.Acta 1195,181-184.

128. Yaroslavov A.A., Sukhishvili S.A., Obolsky O.L., Yaroslavova E.G., Kabanov A.V., Kabanov V.A. (1996) DNA Affinity to Biological Membranes is Enhanced Due to Complexation with Hydrophobized Polycation., FEBS Lett. 384,177-180.

129. Kabanov V.A., Yaroslavov A.A., Sukhishvili S.A. (1996) Interaction of Polyions with Cell-Mimetic Species: Physico-Chemical and Biomedical Aspects., J.Control. Rel. 39, 173-189.

130. Сухишвили C.A., Обольский O.JL, Астафьева И.В., Кабанов А.В., Ярославов А.А. (1993) Интерполиэлектролитные комплексы ДНК: Взаимодействие с липосомами., ВМС 35,1895-1899.

131. Ikeda Т., Ledwith A., Bamford C.N., Hann R.A. (1984) Interaction of a polymeric biguanide biocide with phospholipid membranes., Biochim.Biophys.Acta 769, 57-66.

132. Hammes G.G., Schullery S.E. (1970) Structure of macromolecular aggregates. II. Construction of model membranes from phospholipids and polypeptides., Biochemistry 9, 2555-2563.

133. Oku N. Yamaguchi N., Yamaguchi N. Shibamoto S., Ito F., Nango M. (1986) The Fusogenic Effect of Synthetic Polycations on Negatively Charged Lipid Bilayers., J.Biochem. 100, 935-944.

134. Yaroslavov A.A., Kul'kov V.Ye., Polinsky A.S., Baibakov B.A., Kabanov V.A. (1994) A polycation causes migration of negatively charged phopholipids from the inner to outer leaflet of the liposomal membrane., FEBS Lett. 340, 121-123.

135. Yantvin M.B., Kreutz W., Horwitz B.A., Shinitzky N. (1980) X-ray and neutron scattering density profiles of the intact human red blood cell membrane., Science 210, 253-257.

136. Petrukhina O.O., Ivanov N.N., Feldshtein M.N., Vasilev A.E., Plate N.A., Torchilin V.P. (1986) Micelles from polyethylene glycol/phosphatidylethanolamine conjugates for tumor drug delivery., J.Control. Rel. 3, 137-143.

137. Ярославов А.А., Ефимова А.А., Лобышев В.И., Ермаков Ю.А., Кабанов В.А. (1996) Обратимость изменения структуры липидных мембран, индуцированных адсорбцией поликатиона., Биологические мембраны 13,628-633.

138. Kubesch P., Boggs J., Luciano L., Maass G., Tummler B. (1987) Interaction of polymyxin В nonapeptide with anionic phospholipids., Biochemistry 26, 2139-2149.

139. Ikeda Т., Yamaguchi H., Tazuke S. (1990) Phase separation in phospholipid bilayers induced by biologically active polycations., Biochim.Biophys.Acta 1026,105-112.

140. Raudino A., Castelli F. (1997) Polyelectrolyte-Multicomponent Lipid Bilayer Interactions. Unusual Effects on Going from the Dilute to the Semidilute Regime., Macromolecules 30, 2495-2502.

141. Ярославов A.A., Киселева E.A., Удалых О.Ю., Кабанов В.А. (1996) Композиционный предел стабильности жидких отрицательно заряженных липосом при контакте с поликатионом., Докл.Акад.наук 349, 67-69.

142. Ярославов А.А., Ефимова А.А., Кульков В.Е., Кабанов В.А. (1994) Адсорбция поликатиона на поверхности отрицательно заряженных липосом. Влияние фазового состояния липидного бислоя на строение комплекса поликатион-липосома., ВМС 36,264-270.

143. Uster P.S., Deamer D.W. (1985) pH-Dependent fusion of liposomes using titratable polycations., Biochemistry 24, 1-8.

144. Suenaga M., Lee S., Park N.G., Aoyagi H., Kato Т., Umeda A., Amako K. (1989) Basic amphipathic helical peptides induce destabilization and fusion of acidic and neutral liposomes., Biochim.Biophys.Acta 981,143-150.

145. Gad A.E., Silver B.L., Eytan G.D. (1982)Polycation-induced fusion of negatively-charged vesicles., Biochim.Biophys.Acta 373, 124-132.

146. Gad A.E., Elyashiv G., Rosenberg N. (1986) Changes in the integrity of large unilamellar vesicles due to their interaction with tobacco cell suspensions., Biochim.Biophys.Acta 860,314-324.

147. Марголис JI.Б., Бергельсон JI.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками., Москва:Наука (1986).

148. Gad А.Е. (1983) Cationic polypeptide-induced fusion of acidic liposomes., Biochim.Biophys.Acta 728, 377-382.

149. Gad A.E., Eytan G.D. (1983) Calcium-induced fusion of proteoliposomes and protein-free liposomes. Effect of their phosphatidylethanolamine content on the structure of fused vesicles., Biochim.Biophys.Acta 727, 170-176.

150. Петров P.B., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины. Москва: Медицина (1988).

151. Soderlund Т., Jutila A., Kinnunen Р. К., Walter А. (1985) Continuous mixing experiments allow to determine the size of binding sites for anthracyclines complexed to DNA., Biomed Biochim Acta. 44(9), 1321-1327.

152. Harrigan P.R., Wong K.F., Redelmeier Т.Е., Wheeler J.J., Cullis P.R. (1993) Accumulation of doxorubicin and other lipophilic amines into large unilamellar vesicles in response to transmembrane pH gradients., Biochim. Biophys. Acta 1149, 329-338.

153. McLellan Т. (1982)Electrophoresis buffers for polyacrylamide gels at various pH., Analytical Biochemistry 126, 94-99.

154. Van Holde K.E., Physical Biochemistry, Prentice Hall 2nd. Edition (1971), 168-181

155. Menozzi M., Valentini L., Vannini E., Arcamone F. (1984) Self-association of doxorubicin and related compounds in aqueous solution., J. Pharm.Sci. 73, 766-770.

156. Wang C., Tam K.C. (2004) Interaction between Polyelectrolyte and Oppositely Charged Surfactant: Effect of Charge Density., J. Phys. Chem. В 108(26), 8976-8982

157. Tribet C. (1998) Hydrophobically driven attachments of synthetic polymers onto surfaces of biological interest: lipid bilayers and globular proteins., Biochimie 80 (5-6), 461-73

158. Lee N.K., Abrams C.F. (2004) Kinetics of a polysoap collapse., J Chem Phys. 121(15), 7484-7493.

159. Uchegbu I.F., Sadiq L., Arastoo M., Gray A.I., Wang W., Waigh R.D., Schatzlein A.G. (2001) Quaternary ammonium palmitoyl glycol chitosan~a new polysoap for drug delivery., Int JPharm. 224(1-2), 185-199.

160. Griffin E. A., Vanderkooi J. M., Maniara G., Erecinska M. (1986) Anthracycline binding to synthetic and natural membranes. A study using resonance energy transfer., Biochemistry 25, 7875-7880.

161. Dupou-Cezanne L., Sautereau A. M., Tocanne J. F. (1989) Localization of adriamycin in model and natural membranes. Influence of lipid molecular packing., Eur. J.Biochem. 181, 695-702.

162. Heywang С., Chazalet M. S.-P., Masson M. C., Bolard J. (1998) Orientation of anthraeyelines in lipid monolayers and planar asymmetrical bilayers: a surface-enhanced resonance Raman scattering study., Biophys. J. 75,2368-2381.

163. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I. Kabanov V.A. (2002) Reversibility of structural rearrangements in the negative vesicular membrane upon electrostatic adsorption/desorption of the polycation., Biochim.Biophys.Acta 1560, 14-15.

164. Hartmann W., Galla H.J. (1978) Binding of polylysine to charged bilayer membranes: molecular organization of a lipid.peptide complex., Biochim.Biophys.Acta 509,474-490.

165. Fukushima K., Sakamoto Т., Tsuji J., Kondo K., Shimozawa R. (1994) The transition of alpha-helix to beta-structure of poly(L-lysine) induced by phosphatidic acid vesicles and its kinetics at alkaline pH., Biochim. Biophys.Acta 1191, 133-135.

166. Шульц Г.Е., Ширмер P.X. Принципы структурной организации белков. Москва: Мир (1982).

167. Кантор Ч., Шиммел П. Основы биофизической химии. Т.2. Москва: Мир (1984).

168. Rudek M.A., Sparreboom A., Garrett-Mayer E.S., Armstrong D.K., Wolff A.C., Verweij J., Baker S.D. (2004) Factors affecting pharmacokinetic variability following doxorubicin and docetaxel-based therapy., Eur. J. Cancer 40(8), 1170-1178.

169. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Okuneva I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A., Kabanov V.A., Menger F.M. (2001) Interaction of a cationic polymer with negatively charged proteoliposomes., Biochim Biophys Acta 1514(1), 139-151.

170. Mouritsen O.G., Jorgensen К. (1998) A new Look at Lipid-Membrane Structure in Realtion to Drug Research., Pharmaceutical Research 15, 10-25.

171. Yaroslavov A.A., Sukhishvili S.A., Obolsky O.L., Yaroslavova E.G., Kabanov A.V., Kabanov V.A. (1996) DNA affinity to biological membranes is enhanced due to complexation with hydrophobized polycation., FEBSLett. 384(2), 177-180.

172. Ferdous A.J., Ishida Т., Shinohara M., Harashima H., Kiwada H. (1996) Size-dependent release of carboxyfluorescein from cetylmannoside-modified liposomes in human plasma., Biopharm Drug Dispos. 17(2), 145-154.

173. Thoren P.E., Persson D., Lincoln P., Norden B. (2005) Membrane destabilizing properties of cell-penetrating peptides., Biophys Chem. 114(2-3), 169-179.