Влияние некоторых пептидов и их координационных соединений с биоактивными металлами на биохимические и иммунологические процессы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат наук Файзуллоева Мукаррама Махмуджоновна

• Файзуллоева Мукаррама Махмуджоновна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Файзуллоева Мукаррама Махмуджоновна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Пептиды: структура и биологическая активность

1.2.Биологически активные тимусные пептиды и их свойства

1.2.1.Тимусные пептиды, полученные синтетическим путем

1.2.2.Применение тимусных пептидов

1.3.Биологическая роль железа

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1.Методика получения тетрапептида И-Рго-Ьув-Ьув-01у-0И

2.2.Методика получения тетрапептида Н-Рго-Л1а-ЬуБ-Уа1-ОН

2.3.Получение пентапептида Н-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-Рго-ОН ПСА-методом

2.4.Получение пентапептида Н-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-Рго-ОН методом активированных эфиров

2.5.Получение пентапептида Н-8ег-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-ОН методом активированных эфиров ступенчатым наращиванием пептидной цепи

2.6.Получение пентапептида Н-8ег-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-ОН блочной конденсацией

2.6.1.Получение дипептида 7-8ег(ОБ71)-Рго-ОИ методом активированных эфиров

2.6.2.Получение трипептида ИС1И-Ьув(7)-Ьув(7)-Л1а-ОБ71

2.6.3.Получение зашищенного пентапептида методом смешанных ангидридов

2.6.4.Получение зашищенного пентапептида карбодиимидным

методом

2.6.5.Получение Н-8ег-Рго-Ьув-Ьув-А1а-ОН

2.7.Методика применения 1-(хлорметил)силатрана и

биокоординационных соединений триптофана с железом при

лечении авитаминоза кроликов

2.8.Определение белковых фракций сыворотки крови

2.9.Определение железа

2.10.Методика применения изолейцил-триптофана при лечении гнездной алопеции

2.11. Методика применения комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа (II) при лечении анемии

2.12. Методика применения комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа (II) при лечении болезни Рейна

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.Синтез защищенного дипептида РЬШ-Л1а-Ьу8(РЫ:Ь)-ОН

3.2.Получение лизинсодержащих тетрапептидов

3.3.Разработка биотехнологической схемы получения лизинсодержащих пентапептидов

3.3.1.Выбор оптимальной схемы получения лизинсодержащих пентапептидов

3.3.2.Биотехнологические схемы получения лизинсодержащих пентапептидов

3.4. Комплексообразование триптофана с ионами цинка и железа

(II)

3.4.1.Изучение комплексообразования триптофана с ионами цинка и железа (II) с методом рН-метрического титрования

3.4.2.УФ-спектрофотометрическое определение состава

биокоординационных соединений триптофана с ионом цинка с

использованием растворов изомолярной серии

3.4.3.Изучение взаимодействия триптофана с ионом железа

3.5.Влияние 1-(хлорметил) силатрана и биокоординационных соединений триптофана с ионом железа на биохимические показатели крови и рост шерсти у кроликов при 98 экспериментальном авитаминозе

3.6.Применение изолейцил-триптофана и 1-(хлорметил)силатрана при лечении гнездной алопеции

3.7.Влияние комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа (II)

на содержание ОЖСС железа при анемии

3.8. Применения комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа (II) при железодефицитной анемии и его влияние на иммунологические показатели

3.9.Влияние комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа (II) на биохимические процессы организма у больных с сосудистыми заболеваниями

4.ЗАКЛЮЧЕНИЕ

4.1.выводы

ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

Аг - антиген

АЛС - аминолевулинат синтетаза АКТГ - адренокортикотропный гормон ВИЧ - вирус иммунодефицита человека ЕКК - естественные киллерные клетки Инф -интерферон

Да - дальтон (единица измерения молекулярного веса) ЖДА- железодефицитная анемия ИБС - ишемическая болезнь сердца ИЛ - интерлейкин

КСФ-ГМ - колиниестимулирующий фактор ЛГ - лютеотропный гормон ЛПС - липополисахарид Мв - молекулярный вес

МНС - главный комплекс гистосовместимости МФ - макрофаг

ОЖСС- общая железосвязывающая способность сыворотки

ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ПРТ - пептид роста тимоцитов

ПСА - вариант метода смешанных ангидридов

РТПХ - реакция трансплантат против хозяина

ТАФ - тимусный активный фактор

ТДТ- терминальная деоксинуклеотидил трансфераза

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТФ - трансферрин

ТЭА - триэтиламин

ФММ - фактор миграции макрофагов

ФОС - фосфорорганические соединения

ФНО - фактор некроза опухолей

ХВГ - хронический вирусный гепатит

ЦТЛ - цитотоксические лимфоциты

цГМФ - циклический гуанозинмонофосфат

цАМФ - циклический аденозинмонофосфат

IBP - железосвязывающий белок

Вос - трет-бутилоксикарбонильная группа

Ig - иммуноглобулин

IL - интерлейкин

IRE - железо-отвечающие элементы CD - клеточный маркер

NMM - N-метилморфолин

-OBzl - сложноэфирная бензильная группа

ONp - п-нитрофениловый эфир

OPfp - пентафторфениловый эфир

-ОРср - пентахлорфениловый эфир

Phtl - фталильная группа

Z - бензилоксикарбонильная группа

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние некоторых пептидов и их координационных соединений с биоактивными металлами на биохимические и иммунологические процессы»

Актуальность проблемы

В последние десятилетия значительно увеличилось количество лекарственных препаратов, являющиеся синтетическими аналогами природных биологически активных веществ. Значительно безопасными из них являются препараты, созданные на базе синтетических пептидов, поскольку последние не чужеродны живому организму и поэтому вызывают наименьшее количество побочных реакций. Значительную часть из этих препаратов составляют иммуномодулирующие препараты, в частности, на базе тимусных пептидов [Демидев С.В. и др., 1991]. Обнаружено, что имеющиеся в тимусных экстрактах дипептиды H-Ile-Trp-OH, H-Lys-Glu-OH, H-Glu-Trp-OH обладают иммуномодулирующим свойствами. С использованием указанных дипептидов были разработаны препараты тимоген (H-Glu-Trp-OH) [Смирнов В.С. и др., 2003], вилон (H-Lys-Glu-OH) [Хавинсон В.Х. и др., 2000; Кудрявцева Т.А. и др., 2006] тимогар (H-Ile-Trp-OH)[Бобиев Г.М. и др., 2000], обладающие значительной иммуномодулирующей активностью. Кроме этих пептидов важное участие в работе иммунной системы принимают определенные микроэлементы, одним из которых является цинк. Несомненно, цинк активно участвует в действиях клеточного и гуморального иммунитета против бактерий, вирусов, паразитов и опухолевых клеток. Показано, что при формировании координационных соединений ионов различных биоактивных металлов с иммуноактивными пептидами происходит увеличение специфической и расширение спектра биологической активности последних [Бобиев Г.М. и др., 2003, 2009].

На базе комплексов иммуноактивного дипептида H-Ile-Trp-OH с ионом цинка в Таджикистане был создан иммуномодулирующий препарат тимоцин [Бобиев Г.М. и др., 1998], который показал высокую эффективность при лечении хронических вирусных гепатитов, онкологических болезней, псориаза и нейродермита, а на базе комплекса этого же дипептида с ионом железа (II) был создан иммуномодулирующий препарат тимофер [Бобиев Г.М. и др., 1998], который

показал повышенный терапевтический эффект не только при лечении болезней, сопровождающихся возникновением вторичных иммунодефицитных состояний, но и железодефицитных состояний

Считается общепринятым, что биологическая активность пептидов обусловлена биологической активностью содержащихся в них аминокислот [Хаитов Р.М. и др., 2005]. Определенная группа аминокислот выступает в качестве автономных регуляторов, в том числе деятельности мозга и иммунной системы. К примеру, на хорошем уровне исследованы глутамат- и аспартатергические нейротрансмиттерные мозговые системы, их разделение, механизмы рецепции и функциональные свойства.

Имеются данные о том, что иммуномодулирующие качества присущи аминокислотам: глицину, лизину, триптофану, глутаминовой кислоте и их смесям [Морозов В.Г. и др., 1996; Бобиев Г.М. и др., 2000; Северянова Л.А. и др., 2007]. Лизин и триптофан, кроме этого, проявляют также и некоторую нейротропную активность. Однако все ещё недостаточно в литературе сведений о комплексообразовании этих аминокислот с биоактивными металлами в растворе, смешаннолигандном образовании координационных соединений их и биологической активности формирующихся при этом комплексных форм.

Поэтому исследование процессов комплексообразования лизина, триптофана и глутаминовой кислоты с ионами биоактивных металлов, как по отдельности, так и в смеси, и изучение влияния образованных комплексов на биохимические и иммунологические процессы является весьма актуальным, поскольку может привести к разработке новых препаратов с высокой терапевтической эффективностью.

Изложенное выше определило цель работы: - изучение синтезированных иммуноактивных низкомолекулярных пептидов и их комплексов с биоактивными металлами на биохимические процессы.

Чтобы достигнуть обозначенную цель целесообразно решить нижеследующие задачи:

- синтезировать новые иммуноактивные пептиды;

- исследовать процессы комплексообразования триптофана и пептидов с

ионами биоактивных металлов;

- изучение биохимического эффекта образованных комплексов с триптофаном

и пептидами;

- изучение влияния полученных соединений на иммунологические процессы.

Предмет и объект исследования.

Предметом исследования были тимусные иммунноактивные пептиды, образованные в результате их синтеза, новые полипептидные лизинсодержащие соединения, процессы комплексообразования триптофана с ионами железа и цинка, их биологическая активность при терапии разных болезней, новые синтезированные пептиды и их комплексы. Объектами исследования биологической активности были кролики, молодняк крупного рогатого скота, пациенты.

Методологическая, теоретическая и эмпирическая база исследования.

При получении потенциально иммуноактивных лизинсодержащих низкомолекулярных пептидов применялся метод тактики максимальной защиты; при получении дипептидов - выполнение конденсации методом смешанных ангидридов; при синтезе больших пептидов - как ступенчатое пополнение пептидной цепи с участием пентафторфениловых эфиров, как активированных эфиров, образующихся при применении дипентафторфенилкарбоната, так и проведение блочной конденсации с применением метода смешанных ангидридов.

Очистку промежуточных защищенных ди-, три- и тетрапептидов выполняли стандартным методом посредством промывки их этилацетатных растворов кислыми и основными реагентами.

Производные аминокислот были получены по стандартным методикам [Гершкович А.А. и др., 1992; Гринштейн Дж. И др., 1965].

Изучение процесса формирования координационных соединений триптофана с ионами цинка и железа (II) проводилось методом УФ - спектрофотометрического анализа с применением растворов изомолярной серии и рН-метрического титрования. Использовался спектрофотометр СФ-46 с кюветами длиной поглощающего слоя 10 мм с участием в качестве контрольного раствора дистиллированной воды.

Оценку биологических и иммунологических свойств проводили как по результатам анализов биохимических, гематологических и иммунологических показателей крови.

Научная новизна.

1. Впервые получены новые иммуноактивные лизинсодержащие пептиды Н-Рг0-Ьу8-ЬуБ-О1у-ОН, Н-Рго-Л1а-ЬуБ-Уа1-ОН, Н-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-Рго-ОН и Н-Бег-Рго-ЬуБ-ЬуБ-Ак-ОН.

2. Исследованы процессы комплексообразования при взаимодействии триптофана с ионами цинка и железа в растворе методом изомолярной серии с применением вторых производных УФ-спектров.

3. Установлено, что применение биокоординационных соединений триптофана с ионом железа совместно с 1 -(хлорметил)силатраном способствует нормализации биохимических показателей крови и ускорению роста шерсти при экспериментальном авитаминозе. Комплекс изолейцил-триптофан с ионом железа, представляющий собой биокоординационное соединение низкомолекулярного иммуноактивного пептида, обладающего активностью тимозина а1 с ионом железа, нормализует содержание ОЖСС и биохимические показатели крови при железодефицитной анемии.

4. Доказано, что применение комплекса изолейцил-триптофан с ионом железа у больных сосудистыми заболеваниями - болезнью Рейно способствует нормализации биохимических и иммунологических показателей крови.

Теоретическая и практическая ценность работы.

- изложенная методология синтеза соединений пептидов, процессов образования координационных соединений их с ионами железа и цинка и оценка их биологической активности может быть полезна при получении других соединений пептидов и разработке новых препаратов;

- составлены оптимальные схемы биотехнологии получения лизинсодержащих тетра- и пентапептидов;

- разработаны технологические схемы получения лизинсодержащих пентапептидов Н-Рго-Ьу8-Ьув-Л1а-Рго-ОН и Н-8ег-Рго-Ьув-Ьув-Л1а-ОН, получения комплексов триптофана с ионами железа и цинка совместно с 1 -(хлорметил)силатраном.

- доказана биологическая эффективность полученных новых соединений низкомолекулярных пептидов, а также их координационных соединений с ионами железа и цинка.

Положения, выносимые на защиту:

1. Методика синтеза новых соединений пептидов.

2. Получение и биологические свойства биокоординационных соединений триптофана с ионами железа и цинка совместно с 1-(хлорметил)силатраном;

3. Схемы получения лизинсодержащих пептидов;

4. Схемы применения и результаты биологических исследований биокоординационных соединений триптофана с ионом железа совместно с 1 -(хлорметил)силатраном при экспериментальном авитаминозе кроликов;

5. Влияние изолейцил-триптофана и его комплекса с ионом железа на различные биохимические и иммунологические показатели крови.

Апробация работы. Содержание Диссертации представлялось и обсуждалось на республиканской конференции «Природные ресурсы Таджикистана: рациональное использование и охрана окружающей среды» (Душанбе, 2001),

научном симпозиуме «Актуальные проблемы спектроскопии водородной связи» (Душанбе, 2001), Международной научно-практической конференции, посв. 60-летию ТаджНИВИ «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях» (Душанбе, 2003), Третьей республиканской научной конференции биохимиков РТ «Вклад биохимиков в развитие биологической науки» (Душанбе, 2003), научно-теоретической конференции «Современные проблемы физики и астрофизики» (Душанбе, 2005), научно-практической конференции «Основные достижения и перспективы развития фармацевтического сектора Таджикистана» с международным участием, посвященной 25-летию фармацевтического факультета ТГМУ им. Абуали ибни Сино (Душанбе, 2006), Материалы республиканской научно-практической конференции «Проблемами таълими тафрикав!» (Душанбе, 2009).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 16 работ, из них 4 в рецензируемых журналах по перечню ВАК РФ.

Вклад автора состоит в постановке задач исследований выборе способов получения пептидов, в разработке методологии и проведении биологических экспериментов, в получении и обработке экспериментальных данных, в обобщении результатов эксперимента, в формулировке выводов и положений диссертации. Основная часть работ выполнена в 2003 - 2004 годах в период обучения в очной аспирантуре при кафедре органической и биологической химии ТГПУ им. С. Айни. Подготовка к печати научных работ, отражающих результаты диссертационного исследования, осуществлена автором самостоятельно или при участии соавторов.

Структура и объём работы.

Диссертационная работа включает введение, три главы основного текста, заключение, выводы, список использованной литературы из 137 наименований. Данные проиллюстрированы 12 таблицами и 14 рисунками. Объем диссертационной работы составляет 145 страниц компьютерного набора.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Пептиды: структура и биологическая активность

Соединение из двух и более аминокислотных остатков, связанное пептидной связью, называется пептидом. Олигопептиды включают в себя до 10 аминокислот, если количество аминокислотных остатков более чем 10, то такие образования считаются полипептидами. Олигопептид в зависимости от количества в нем аминокислот приобретает названии я трипептид, пентапептид, октапептид и т.д. Полипептиды, включающие в своем составе более чем 50 аминокислотных остатков, называются белками. До середины XX в. пептиды не причислялись к независимому классу органических соединений, а считались продуктом неполного гидролиза белков, что формируются при переваривании пищи, или при их хранении. Вслед за определением со стороны В. Дю Виньо (1953) последовательности остатков аминокислот двух гормонов задней доли гипофиза -окситоцина и вазопрессина - и воссоздания их синтеза химическим путем, возник новый взгляд на физиологическую роль и значение этой группы соединений.

Молекулярная масса пептидов невысока, состоят из широкого набора аминокислотных остатков, имеют циклические и разветвленные структурные схемы.

Существует несколько классификаций пептидов. В частности, [Лелевич В.В.,2009] они могут составить следующие классы:

1. Регуляторные пептиды: глутатион, ангиотензин, брадикинин.

2. Пептиды - гормоны: окситоцитонин, вазопрессин, гастрин и др.

3. Нейропептиды (разделяются на 18 групп: энкефалины, эндорфины, гипоталамические либерины и статины и др.)

4. Алкалоиды: эрготамин, пандамин.

5. Пептиды - антибиотики: грамицидины А, В, С; актиномицин Д; полимиксины.

6. Токсины и антитоксины: фаллоидин, аманитин, антаманид, меллитин.)

Известны два вида природных пептидов: первый - синтезируется и имеет физиологическое значение для жизнедеятельности организма, второй -формируется в результате химического или ферментативного гидролиза белков в организме или вне его. Пептиды, появляющиеся в ходе гидролиза вне организма (in vitro), имеют обширное применение при анализе аминокислотной последовательности белков.

Установлены методы синтеза и роли большого ряда природных пептидов. Физиологическая и функциональная роли наиболее распространенных групп пептидов, влияющие на здоровье человека [Нечаев А.П., 2015] изображены на рисунке 1.

Рисунок 1 - Важнейшие группы пептидов

Выделены четыре уровня [Щербаков В.Г., и др., 2003.]структурной организации пептидной цепи: первичная, вторичная, третичная и четвертичная. Специфичность их такова.

1. Первичной структурой называют последовательность чередования аминокислот в полипептидной цепи. Данная структура формирует пептидные связи между а-амино- и а-карбоксильными группами аминокислот. Первичная структура каждого белка своеобразна и сохраняется генетически.

Вторичная структура состоит из полипептидной цепи, свёртыванной в спиральную или иную конформацию. В этой цепи появляются водородные связи между СО- и МН-группами пептидного остова одной цепи или смежных полипептидных цепей. Обнаружены три главных типа вторичной структуры пептидных цепей: а-спираль, Р-складчатый слой (рис.2,3) и беспорядочный клубок:

- а-Спиралъ - формируется благодаря водородным связям в рамках одной полипептидной цепи. В ней СО- группа любого аминокислотного остатка взаимодействует с МН-группой четвёртого от него остатка. Водородные связи устремлены вдоль оси спирали, боковые радикалы аминокислот ориентированы во внешнюю сторону.

Рисунок 2 - а-Спираль

-в-Спираль. Образовывается при помощи водородных связей в одной или нескольких полипептидных цепях. Пептидные цепи собираются в одной линии (параллельно) или в противоположных линиях (антипараллельно).

Рисунок 3 - Р-Спираль

- неупорядоченный клубок. Ориентация клубка не владеет пространственной правильной пространственной направленностью и конформация полипептидной цепь легко изменяема.

3. Третичная структура - это пространственно ориентированная полипептидная спираль. Третичная структура формируется главным образом за счет водородных, ионных, гидрофобных и дисульфидных связей, появляющиеся в результате взаимодействия между радикалами аминокислот.

При анализе таких структур [Рамачандран Г.,1975] обнаружил, что свертывание биомолекул происходит по-разному, вместе с тем нередко происходит такой специфический вид этого свертывания, что оно соответствует минимуму энергии. При этом наблюдается стабильная конформация, и разъяснение

биохимической активности данных молекул целесообразно искать в пространственном распределении активных групп. Очень часто биологически активная, молекула, например молекула фермента, не только принимает стабильную конформацию, когда сближаются активные группы, но приобретает также свойство притягивать молекулы субстрата, на который действует фермент. Биологическая активность молекул белка объясняется также и образованием третичной структуры [Н.И. Волков, Э.Н. и др., 2000] .

4. Четвертичная структура - пространственное расположение нескольких взаимодействующих между собой полипептидных цепей, считается высшим уровнем организации белковой молекулы. Белки с четвертичной структурой названы олигомерными, а образующие их полипептидные цепи - протомерами (субъединицы). Образцами четвертичной структуры являются ферменты лактатдегидрогеназа и глютаматдегидрогеназа, содержащие, четыре и восемь протомеров, соответственно.

Важность выяснения последовательности пептидных цепей [Нечаев А.П., 2015; Щербаков В.Г., и др., 2003.] связана с тем, что:

- для разработки принципов, благодаря которым образовываются пространственные структуры, влияющие на физико-химические и функциональные свойства этих соединений;

- сопоставительный анализ последовательностей аминокислот дает возможность прослеживатьь эволюцию форм жизни на молекулярном уровне;

- установление тех принципов, на основе которых из полипептидных цепей образовываются специфичные пространственные структуры;

- это нужно для определения молекулярной основы биологической активности.

Большинство биологических свойств белков (ферментативная, гормональная активность и др.) имеет зависимость от пространственной структуры и способа свертывания пептидных цепей. Следовательно, одна из основных задач химии

белка [Гауровитц Ф.,1953] состоит в выяснении внутренней структуры белковой макромолекулы и распределения в ней функциональных групп. Только таким образом можно найти связь между биологическими свойствами белков и их структурой.

1.2. Биологически активные тимусные пептиды и их свойства

Органом, контролирующим развитие и дифференцировку Т-лимфоцитов [Игнатов 2002; Ройт А. и др. 2000; Poulin J.F. и др., 1999] и координирующим функционирование нервной, эндокринной и иммунной систем, поддерживающих гомеостаз организма [Poulin J.F. и др., 1999; Beauman J,G,, 2005; Tran C.D., 1999], является тимус.

Инволюция тимуса берет начало в первом году жизни и к 40 годам большая часть его паренхимы тимуса жировой тканью [Кветной И.М. и др.,2005;Аврта1 R. и др., 2000; Hsu H.C. и др. 2005]. В дальнейшем данный процесс проходит с быстротой 0,1% в год [Ройт А. и др. 2000].

Значительная часть тимусных экстрактов содействуют развитию Т-лимфоцитов в Т-хелперы, Т-эффекторы и Т-супрессоры, ликвидируют определенные формы иммунодефицитов [Игнатов 2002; Ройт А. и др. 2000]. Из них получены следующие иммунологически активные пептиды: тимозины а1, а5, а7, а11, а22, ß3, ß4, ß8, ß9, ß10, ß10-Arg, ßn, ß12, ß15, тимопоэтины I, II, III, протимозин-а, тимозин-ада, паратимозин-а, тимулин (H-Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH), THF, октапептид THF-y-2 (Leu-Glu-Asp-Gly-Pro-Lys-Phe-Leu), пептид роста тимоцитов (ПРТ), тимусный активный фактор II H-Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-OH (TAФ-II) [Joshi J.G. и др., 1994]. Вышеприведенное дает возможность включить тимус также в группу органов эндокринной системы [Морозов В.Г и др., 2000; Choi S.Y. и др., 2006; Shevchenko A.A. и др., 1994; Savino W. и др., 2000,Koutrafouri V. и др., 2003].

Из экстрактов бурсы Фабрициуса у птиц получен ответственный за дифференциацию В-клеток гормон бурсин (H-Lys-His-Gly-NH2) и способствующие

дифференцировку В-лимфоцитов пептиды Tyr-Glu-Gly и Trp-Thr-Ala-Glu-Glu-Gln-Leu [Степанов А.В. и др., 2002; Цепелев В.Л.и др., 2000,2001, 2003].

О биологических свойствах ряда тимусных гормонов имеются сведения в следующих обзорах [Калинина Н.М. и др., 2008; Ройт А. и др. 2000; Цепелев В.Л.и др., 2003; Stephen C. и др., 2004; Koutrafouri V. и др., 2003; Varilin A.A. и др., 2003].

Тимозиновая фракция 5 включает в себя немного полипептидов (Мв от 1000 до 15000 Да), индуцирует дифференциацию Т-клеток и укрепляет иммунологические функции в животных моделях и у человека, содействует продукцию ФММ, IL-2, а- и Y - Инф и лимфокинов, деятельных в воссоздании специфичных Т-клеточных функций у человека.

Протимозин-а принимает разное строение в зависимости от видов. Крысиный и человеческий имеют в составе 111 аминокислот, начальные 28 аминокислот на N-конце аналогичны подобным телячьим тимозину-а1, телячий включает в себя 109 аминокислот. Биологические свойства характеризуются тем, что этот полипептид увеличивает экспрессию антигена (Аг) класса MHC 2 в Аг-представляющих клетках, повышает или целиком возрождает недостаточную функцию цитотоксических эффекторов периферийных мононуклеарных клеток у больных со злокачественными опухолями. Человеческий протимозин активен в меньшей степени, по сравнению с крысиным в защите мышей от C. albicans и in vivo в способствующие формирования фактора ингибирующего миграцию.

Тимозин-aim является N-концевым фрагментом протимозина - а (М.в. = 3,1 кДа)

Паратимозин-a имеет в своем составе 101 аминокислоту, выявляет 43% структурной гомологии с тимозином-а1 в 30 N-концевых аминокислотах, модулирует влияние протимозина-а в предохранении мышей от инфекции C. albicans и in vivo препятствует иммуноповышающим эффектам протимозина-а.

Тимозин-ai является полипептидом и состоит из 28 аминокислотных остатков (М.в. = 3108 Да), содействует росту продукции ФММ, Инф и лимфотоксина,

модулирует ТДТ-активность, повышает вирусный, противоопухолевый иммунитет, у человека усиливает Т - клеточный иммунитет.

Тимозин-а7 это кислотный полипептид (М.в. = 2500 Да, pI 3,5), увеличивающий in vitro число супрессорных Т-клеток и содействующий экспрессии Ьу1-1,2,3-положительных клеток.

Тимозин-aii содержит 35 аминокислотных остатков, 28 N-концевых остатков аналогичны тимозину-а1, обладает биологической активностью наподобие тимозина-а1.

Тимозин-в4 имеет в своем составе 43 аминокислотных остатка (М.в. = 4963 Да, pI 5,1), in vitro и in vivo индуцирует ТДТ в клетках костного мозга у нормальных и бестимусных мышей, in vivo индуцирует ТДТ у иммуносупрессированных мышей, развивает повышение LN-RM (LRF) и LH.

Тимозин-в8 имеет 39 аминокислотных остатков, 80% гомологии с начальными 39 аминокислотными остатками тимозина-р4, биологическую активность как у тимозина-р4.

Тимозин-в9 есть полипептид из 41 аминокислотного остатка, владеющий 78% гомологии с первыми 41 остатком тимозина-р4.

Тимопоэтин I включает в себя 49 аминокислот, действует на нейромышечную передачу, индуцирует дифференцировку Т-лимфоцитов.

Тимопоэтин II имеет в составе 49 аминокислот, имеет отличие от тимопоэтина I по трем аминокислотам, действует на нейромышечную передачу, индуцирует дифференцировку Т-лимфоцитов.

Тимопоэтин III состоит также из 49 аминокислот, различается от тимопоэтина I по двум аминокислотам, действует на нейромышечную передачу, индуцирует дифференцировку В-лимфоцитов.

ПРТ - нонапептид с прибавленным к N-концу рибофолатом (Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn), биологически активный ПРТ имеет в своем составе Zn2+ и инициирует синтез ДНК в незрелых тимоцитах.

Бурсин является трипептидом с аминокислотной последовательностью H-Lys-His-Gly-NH2, ответственный за дифференцировку В-лимфоцитов.

Тимозин-Рю является полипептидом, включающий 43 аминокислотных остатка, имеет 75% гомологии с тимозином-р4, защищает клетки от апоптоза.

Тимозин-Ри - полипептид из 41 аминокислотного остатка, владеющим 80% гомологии с первыми 41 остатком тимозина-р4.

Тимозин-р^ имеет в своем составе 43 аминокислот, обладает 79% гомологии с тимозином-р4 и 84% - тимозином-р11.

Тимозин-в15 защищает клетки от апоптоза.

Сывороточный тимусный фактор (тимулин) является нонапептидом (М.в. = 857 Да, pI 7,5), имеет в составе цинк, in vitro и in vivo усиливает генерацию эффекторных цитотоксичных Т-клеток, ингибирует контактную чувствительность у нормальных мышей.

THF - полипептид с М.в. = 3,2 кДа, индуцирует формирование IL-2 у тимусных и бестимусных мышей и in vitro и in vivo увеличивает пролиферацию лимфоцитов.

THF-y-2 состоит из последовательности H-Leu-Glu-Asp-Gly-Pro-Lys-Phe-Leu-ОН, индуцирует формирование IL-2 у тимусных и бестимусных мышей и in vitro и in vivo, усиливает пролиферацию лимфоцитов.

Следовательно, присутствие обширного диапазона иммунологической активности у тимусных пептидов означает перспективность использования их в создании иммуномодулирующих лекарственных препаратов.

использования их в создании иммуномодулирующих лекарственных препаратов.

1.2.1. Тимусные пептиды, полученные синтетическим путем

Интенсивные исследования по синтезу тимусных гормонов и поиску их активных центров, проведенные в 80-х годах ХХ века, показали идентичность

синтетических гормонов природным по биологической активности [Бобиев Г.М. и др., 2009], позволили определить активные центры этих пептидов: у тимопоэтинов -фрагмент 32-36 (H-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH), у тимулина - фрагмент 3-6 (H-Lys-Ser-Gln-Gly-OH), у тимозина-ai - фрагмент 1-6 (H-Lys-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-OH). В эти же годы выделены иммунологически активные дипептиды глутамил-триптофан и изолейцил-триптофан [Хавинсон и др., 2000; Смирнов В.С. и др., 2000; Бобиев Г.М. и др., 2009 ].

Впоть до исследования тимусных гормонов о биологической активности глутамил-триптофана не было информации и не выполнялись работы по его синтезу. В научной литературе описаны две схемы синтеза этого дипептида методом активированных эфиров [Бобиев Г.М. и др., 2009]. В одной использовали N-гидроксисукцинимидный эфир у-бензил-Ы-карбобензокси-Ь-глутаминовой кислоты и защитные группы удаляли формиатом аммония. Общий выход мононатриевой соли L-глутамил-L-триптофана был равен 37% по глутаминовой кислоте или 90% по у-бензиловому эфиру №бензилоксикарбонил-Ь-глутаминовой кислоты.

В другой - применяли пентахлорфениловые эфиры, выделение дипептида в виде натриевой соли и гидрирование. Общий выход был равен около 54%.

Из-за сложности названных способов и высокой стоимости реагентов был предложен новый способ получения этого дипептида N-карбоксиангидридным методом [Смирнов В.С. и др., 2000]. При этом общий выход продукта раняется 56 -67%, чистота - более 98%, а после перекристаллизации - более 99%.

О ферментативном синтезе N-концевого фрагмента тимопентина Z-Arg-Lys-NH2 приводится в [Li S.J. et all., 2008].

1.2.2. Применение тимусных пептидов

Несомненно, деятельность иммунной, нервной, эндокринной и вегетативной нервной систем выполняется в тесном взаимодействии друг с другом и с

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Файзуллоева Мукаррама Махмуджоновна, 2018 год

ЛИТЕРАТУРА

1. Авруцкий, Г.Я. Руководство по психиатрии / Авруцкий Г.Я., Мосолов С.Н.; под ред. А.С. Тиганова.// - М., 1999. - С. 202 - 206.

2. Адильгожина С.М. Иммунологические и биохимические нарушения у больных псориазом и их коррекция. Автореф. дис. канд. мед. наук, Республика Казахстан, Семей, 2009, 23 с.

3. Алексеенко, И.Ф. Железодефицитные состояния./ И.Ф. Алексеенко. -М., 1996.-192 с.

4. Балицкий, К.П. Экспериментальные данные о противоопухолевом и иммуностимулирующем действии кремнийорганических соединений -силатранов./ К.П. Балицкий, И.Г. Векслер, В.М. Дьяков [и др.] // II Всес. симп. «Биологически активные соединения элементов IVE группы».: тез. докл. -Иркутск, 1977.-С.153-158.

5. Белокрылов, Г.А. Неоднозначность действия пептидов и составляющих их аминокислот на антителогенез и фагоцитарную активность нейтрофилов у мышей / Г.А. Белокрылов, О.Я. Попова, И.В. Молчанова [и др.] // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1991. - Т. 111, № 1. - С. 53-55.

6. Белокрылов, Г.А. Способность некоторых аминокислот, входящих в состав белка, стимулировать тимусзависимый иммунный ответ./ Г.А. Белокрылов, И.В.Молчанова, Е.И. Сорочинская // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1986. - Т. 102, № 7. - С. 51-53.

7. Белокрылов, Г.А., Попова О.Я., Сорочинская Е.И. Сходство иммуно-, фагоцитозстимулирующих и антитоксических свойств дипептидов и составляющих их аминокислот./ Г.А. Белокрылов, О.Я. Попова, Е.И. Сорочинская // Бюлл. эксперим. биол. мед. -1999. -Т. 127. № 6. -С. 674-676.

8. Бобиев, Г.М. Иммуноактивные пептиды и их координационные соединения в медицине./ Г.М. Бобиев, Н.Д. Бунятян, Х.С. Саядян [и др.]. - М.: Издательский дом «Русский врач». - 2009.-228 с.

9. Бобиев, Г.М. Синтез и иммуностимулирующая активность координационных соединений некоторых триптофансодержащих дипептидов с ионами металлов. / Г.М. Бобиев, С.Д. Исупов, А.Н. Шахматов [и др.]//Химико-фармацевтический журнал.-2000.-Т. 34.-№ 5.-С.24-25.

10.Ботвиньева, В.В. Перспективы диагностики и лечения различных видов анемии у детей / В.В. Ботвиньева, О.Б. Гордеева, Л.С. Намазова-Баранова // Педиатрическая фармакология.-2012.-Т.5, №9.-С.35-40.

11.Быкова, В.П. Морфофункциональная организация лимфоэпителиальных органов глотки человека / В.П. Быкова, Г.П. Сатдыкова // Изв. РАН. Серия биол. - 2002. - 4. - С. 28 - 33.

12.Венедиктова, М.Г. Применение тактивина и иммунофана при лечении больных аденокарциномой эндометрия / М.Г. Венедиктова // Эксперимент. и клинич. фармакол. - 2001.-Т.64. - №5. -С. 46-49

13.Ветлугина, Т.П. Иммунная система при шизофрении / Т.П. Ветлугина-Томск: Раско, 2000.-112с.

14.Ветлугина, Т.П. Фармакологическая модель анализа взаимодействия нервной и иммунной систем / Т.П. Ветлугина, С.А. Иванова // Бюлл. эксп. биол. и мед.

- 2000. - Т. 129. - С. 47 - 50.

15. Возбуждающие аминокислоты как нейромедиаторы (под ред. К.С. Раевского). ВИНИТИ. Итоги науки и техники. Серия "Физиология человека и животных".

- М., 1989. - Т. 36. - 184 с.

16.Волков, Н.И. Биохимия мышечной деятельности / Н.И. Волков, Э.Н. Несен, А.А. Осипенко //-Киев: Олимпийская литература. - 2000. -503с.

17.Гауровитц, Ф. Химия и биология белков. пер с англ. Под ред. С.Я.

Капланского.- М.: Иностранная литература. -1953. -435с.

18.Гершкович, А.А. Химический синтез пептидов./ А.А. Гершкович, В.К. Кибирев.-Киев: Наукова думка, -1992.-360 с.

19.Григорьев, Е.И. О роли водной среды в механизмах действия иммуноактивных пептидов в сверхмалых дозах / Е.И. Григорьев, В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин [и др.] // Бюлл. эксперимент. биол. и медицины. - 2003. - Т. 138, №8. - С. 173

- 178.

20.Гринштейн, Дж. Химия аминокислот и пептидов./ Дж. Гринштейн, М. Виниц.

- М.: Мир, 1965.-822 с.

21. Демидов С.В. Молекулярно-генетические и клеточные механизмы фармакологического действия препаратов из тимуса (тималина, тимогена, вилозена): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. -Киев, -1991. -45 с.

22.Демченко, А.П. Ультрафиолетовая спектрофотометрия и структура белков./ А.П. Демченко.-Киев: Наукова думка. - 1981. - 208 с.

23.Диже, Э.Б. Комплексы ДНК с катионными пептидами: условия формирования и факторы, влияющие на эффективность проникновения в клетки млекопитающих/ Э.Б. Диже, И.А. Игнатович, С.В. Буров [и др.]// Биохимия, -2006, -том 71, -вып. 12, -С. 1659 - 1667.

24.Захарова, И.Н. Синдром анемии в практике педиатра: дифференциальная диагностика и терапия/ И.Н. Захарова, Ю.А. Дмитриева // Эффективная фармакотерапия. Педиатрия. -2011.-№3.-С.40-45.

25. Зоирова, Н.П. Влияние 1 -(хлорметил)силатрана и биоко-ординационных соединений триптофана с железом на рост шерсти у кроликов при экспериментальном авитаминозе / Н.П. Зоирова, М.М. Файзуллоева, Г.М. Бобиев, А.Н. Шахматов // Международная научно - практ. конф., посв. 60-летию ТаджНИВИ «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях»: тез. докл.-Душанбе, -2003.-С.119-120.

26.Зоирова, Н.П. Влияние 1-(хлорметил)силатрана и биокоординационных соединений триптофана с железом на рост шерсти у кроликов при экспериментальном авитаминозе / Н.П. Зоирова, М.М. Файзуллаева, А.Н.

Шахматов // III Респ. научн. конф. «Вклад биохимиков в развитие биологической науки»: Труды. -Душанбе.-2003.-С.88-90.

27.Зоирова, Н.П. Лечение гнездной алопеции 1-(хлорметил)-силатраном и тимогаром/ Н.П. Зоирова, М.М. Расулов, М.М. Файзуллоева, [и др.]// Здравоохранение Таджикистана.-2005.-№ 4.-С.125-130.

28.Игнатов, П.Е. Иммунитет и инфекция / П.Е. Игнатов. - М.: Время, 2002. - 352 с.

29. Калинина, Н.М. Заболевания иммунной системы. Диагностика и фармакотерапия / Калинина Н.М. С.А. Кетлинский, С.В. Оковитый [и др.]. -М.: Эксмо, 2008. - 496 с.

30.Калинкин, М.И. Практическое руководство по фотометрическим методам анализа./ М.И. Калинкин, И.П. Булатов.-Л.: Химия, -1986.-432 с.

31.Кветной, И.М. Нейроиммуноэндокринология тимуса / И.М. Кветной, А. А. Ярилин, В. О. Полякова, [и др.]. - СПб.: Деан, -2005. - 160 с.

32.Ким, К.Ф. Влияние тимических пептидов на синтез и внутриклеточное содержание некоторых цитокинов / К.Ф. Ким, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин [и др.] // Иммунология. - 2002. - №5.-С.274-279.

33. Клиническая иммунология (Под ред. А.В. Караулова). - М.: Мед. информ. агентство, -1999. - 604 с.

34. Клиническая фармакология тимогена ( Ред. В.С. Смирнова). - СПб, 2003. -106 с.

35. Козловская, Г.В. Предварительные результаты применения нового иммуномодулятора ронколейкина в комплексной терапии детей, больных шизофренией / Г.В. Козловская, Т.П. Клюшкин, М.А. Калинина [и др.] // Психиатрия и психофармакотерапия. - 2005. - Т. 7, - №5. -С.259-262.

36.Комаров, Ф.И. Биохимические показатели в клинике внутренних болезней. / Ф.И. Комаров, Б.Ф. Коровкин //-М.: МЕДпресс, --1999. -232 с.

37.Линева, А. Физиологические показатели нормы животных:справочник/А. Линева//-Киров:ФГУИППВ, М.:Аквариум ЛТД. -2001. -256с.

38.Кратенок, Б.В. Особенности влияния лизил-глутамата на гуморальный иммунный ответ у мышей / Б.В. Кратенок // Белорусский мед. журн. - 2006. -3 (17). - С. 56-61.

39.Кудрин, А.В. Иммунофармакология микроэлементов./ А.В. Кудрин, А.В. Скальный, А.А. Жаворонков [и др.]. Москва: КМК.-2000. -537 с.

40.Кудрявцев, А.А., Показатели крови и костного мозга у здоровых животных./ А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М. -1968. -46 с.

41. Кудрявцева, Т.А. Действие вилона на нейроэндокринный статус и половое поведение старых самцов крыс / Т.А. Кудрявцева, И Н Зайченко, О М Ефремов [и др.] // Успехи геронтол. - 2006. - Вып. 19. - С. 97 - 101.

42.Кузник, Б.И. Влияние вилона на иммунитет у детей с хроническими заболеваниями легких / Б.И. Кузник, И.Н. Гаймоленко, Б.Ц. Цыбенова // Цитокины и воспаление. - 2003. - Т. 2, -№4. - С. 21 - 26.

43.Кулагин В. И. Современные особенности клиники, нейроэндокринные, сосудистые, иммунные механизмы патогенеза гнездной алопеции и дифференцированные методы терапии больных. Автореф. дисс. канд. мед. наук. М. 1992.

44.Лелевич В.В. Уровни организации белков. Курс лекций по биохимии./ В.В. Лелевич, И.О. Леднева, М.Н. Курбат [и др.]//-Гродно:ГрГМУ.-2009. -31с.

45.Малашенкова, И.К. Индивидуальная иммунокоррекция в комплексном лечении вторичного бесплодия / И.К. Малашенкова, А. В. Ледов, И. Н. Зуйкова [и др.] // Лечащий врач. - 2006. - №3. -С.38-43.

46.Малашенкова, И.К. Принципы иммунокорригирующей терапии вторичных иммунодефицитов, ассоциированных с хронической вирусно-бактериальной инфекцией / И.К. Малашенкова, Н.А. Дидковский // Рос. мед. журн. - 2002. -Т. 10. - №21. -С. 973-977.

47.Мирзоев, М.Ш. Состояние иммунной системы у больных гнойно-воспалительными заболеваниям челюстно-лицевой области / М.Ш. Мирзоев, Б.М. Холназаров, М.Н. Шакиров [и др.]// Доклады АН наук Республики Таджикистан.-2011, -Т.54, -№ 5.-С.397-401

48.Мозгов, И.Е. Фармакология./ И.Е. Мозгов //-М.: Колос, 1979.-416 с.

49.Морозов, В.Г. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения) / Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. - СПб.: Наука, 1996. - 74 с.

50.Морозов, В.Г. Пептидные тимомиметики / Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. - СПб.: Наука, 2000. - 158 с.

51.Наботов, М. Перспектива разработки новых терапевтических агентов на основе биокоординационных соединений аминокислот и низкомолекулярных пептидов с биометаллами / Наботов М., Файзуллоева М. Хайдаров К.Х. [и др.]// Паёми Сино. Вестник Авиценны.-Душанбе, -2006.-№ 1-2. -С.491-503.

52.Наботов, М.Ш. Влияние тимофера на клинико-иммунологические показатели у больных в послеоперационный период / М.Ш. Наботов, Б.М. Холназаров, Г.М. Бобиев // Вестник педагогического университета.-2011.-№5.-С.66-70.

53.Найденова, Н.Н. Интерферон и другие цитокины при основной нервно-психической патологии / Н.Н. Найденова, Т.И Невидимова, Л.П. Якутенок [и др.] // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2001. Т. 85, №7. - С. 85-87.

54. Нечаев, А.П. Пищевая химия. Учебник/ А.П. Нечаев, С.Е.Траубенберг , А.А Кочеткова// -СПб:ГИОРД. -2015 г. - 672 с.

55.Оковитый, С.В. Иммунные механизмы реализации гепатопротекторных эффектов этомерзола и тимогена / С.В. Оковитый, В.В. Гайворонская //Эксперимент. и клинич. фармакол. - 2002.- Т. 65,- № 3. С. 44-46.

56.Пат. № 255. Республика Таджикистан, МПК С07К5/062, А61К38/05. Способ получения иммуностимулирующего препарата тимофер./ Г.М. Бобиев . ООО

«Занд», заявл. 980005/2 от 28.04.98, опубл. в Пат. вестник, Душанбе, № 2(10), 1998

57.Пат. № 282. Республика Таджикистан. МПК С07К5/062, А61К38/05. Способ получения иммуномодулирующего препарата Тимоцин./Г.М. Бобиев. заявл. 980005/8 от 08.05.98, опубл. в Пат. вестник, Душанбе, № 2(10), 1998.

58.Пат. № 283. Республика Таджикистан. МПК С07К5/062, А61К38/05. Способ получения иммуностимулирующего препарата тимогар и его состав./Г.М. Бобиев. заявл. 980005/9 от 23.10.1998,опубл. в Пат. вестник, Душанбе, № 4(20),2000 г.

59.Пат. № 2202375. Российская Федерация. МПК А61Р37/04, А61К35/74, А61М1/36. Способ профилактики сепсиса у детей после хирургического вмешательства / И.В. Дударев, Л.П. Сизякина, И.А. Суханов [и др.]. заявл. 05.07.2001; опубл. 20. 04.2003.

60.Пат. № 2120446. Российская Федерация. МПК С07К1/107, С07К5/072, А61К38/05, А61К31/40. Способ получения L-глутамил-Lтриптофана и его солей / С.В.Куликов, В.С.Смирнов, И.А. Стукань. заявл. 01.08.1996; опубл.

20.10.1998. -2000

61.Пат. № 2158595. Российская Федерация. МПК А61К33/26, А61К33/44, А61К31/675, А61Р7/06. Способ лечения иммунопатий при железодефицитной анемии у часто болеющих детей, проживающих в крупном промышленном городе с развитой химической и нефтехимической промышленностью / Л.Ф. Латыпова, Ф.Г. Садыков, В.И. Никуличева. заявл.

07.07.1999. Опубл. 10.11.2000.

62.Пат. № 2177325. Российская Федерация. МПК А61К35/12. Способ получения вещества, обладающего иммуностимулирующей активностью / В.Л. Цепелев, С.Л. Цепелев, Н.Н. Цыбиков. заявл. 19.09.2000; опубл. 27.12.2001 г.

63.Пат. № 2139085. Российская Федерация. МПК А61К38/05. Средство, стимулирующее репаративные процессы, и способ его применения / В.Х.

Хавинсон В.Г. Морозов, В.В. Малинин [и др.]. заявл 23.06.1998; опубл 10.10.1999.

64.Пат. № 2155068. Российская Федерация. МПК A61K39/00, A61K35/12. Способ получения вещества, стимулирующего антигеннезависимую дифференцировку В-лимфоцитов / С.Л. Цепелев, В.Л. Цепелев, Н.Н. Цыбиков. заявл. 27.05.1999; опубл. 27.08.2000 г.

65.Пигарева, Н.В. Характеристика иммуностимулирующего действия синтетического дипептида «бестим» / Н.В. Пигарева, Н.М. Калинина, А.С. Симбирцев // Мед. иммунология. - 1999. - Т. 1. - №3 - 4. - С. 127.

66. Поверенный, А.М. Тимодепрессин, ингибирующий развитие реакции трансплантат против хозяина / А.М. Поверенный О. В.Семина, Т. Н Семенец [и др.] // Иммунол. - 2002. - №2.-С. 97-101.

67.Разводовский, Ю.Е. Применение l-триптофана с целью коррекции дисбаланса центральных нейроактивных соединений при синдроме отмены морфина/ Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко, М.И. Селевич // Экспериментальная и клиническая фармакология. -2003. -№ 1, -С.12-16.

68.Ройт, А. Иммунология / Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д.; пер. с англ. - М.: Мир, -2000. - 592 с.

69.Румянцев, А.Г. Влияние тимодепрессина на пролиферацию кроветворных клеток-предшественников человека / А.Г. Румянцев, Е.Б. Владимирская, Е.Ю. Осипова [и др.]// Гематология и трансфузиология.-1999, -№4, -С.10-14.

70. Ряховский, В.В. Коньюгаты 2',3'-дидегидро-3'-дезокситимидина с тимогеном. Синтез, анти-ВИЧ-активность / В.В. Ряховский // Биоорг. химия. - 1999. - Т. 25, №7. - С. 499 - 504.

71.Северьянова, Л.А. Влияние L-аргинина на электрокожную и температурную болевую чувствительность у крыс / Л.А. Северьянова, И.И. Бобынцев, Н.А. Кирьянова [и др.] // Курский науч.-практ. вестн. "Человек и его здоровье".-Курск: КГМУ, 2005. - № 2. - С. 44-49.

72.Северьянова, Л.А. Нейропептиды и активные аминокислоты: эффекты на различные виды болевой чувствительности и вызванное болью поведение / Л.А. Северьянова, И.И. Бобынцев, Н.А. Кирьянова [и др.] // Науч.-практ. журн. "Патогенез". - М.: ГУ НИИ ОПП РАМН, 2005. - Т. 3, -№ 1. - С. 23-24.

73. Северьянова, Л.А. Современные представления о действии аминокислоты L-лизина на нервную и иммунную регуляторную системы / Л.А. Северьянова, М.Е. Долгинцев // Курский научно-практический вестник "Человек и его здоровье", -2007, -№ 2.-С.67-79

74.Северьянова, Л.А. Эффекты L-аргинина на различные виды болевой чувствительности / Л.А. Северьянова, И.И. Бобынцев, Н.А. Кирьянова [и др.] // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - М., 2006. - Т. 141, № 5. - С. 503506.

75.Смирнов, В.С. Состояние иммунной системы у людей через два года после воздействия факторов радиационной аварии / В.С. Смирнов, В.И. Ващенко, В.Г. Морозов // Иммунология. -1990. -№ 6. -С. 63-65.

76.Степанов, А.В.Пептидные регуляторы гуморального иммунитета / А.В. Степанов, В.Л. Цепелев, В.Л. Цепелев [и др.].- Чита, 2002.-160с.

77.Стукова, Н.Ю. Разработка критериев оценки и прогноза иммунотерапии различных заболеваний и использованием препаратов тимуса / Н.Ю. Стукова, Н.В. Емельянова, В.В. Фирстова [и др.] // Тез. докл. IV Российского национального конгр. «Человек и лекарство». -М., -1997. с. 296.

78.Табаров, М.С. Норма в практической медицине (Справочник)./ М.С. Табаров, Д.З. Иргашева //-Душанбе, ООО "Мир полиграфии", -2009.-30 с.

79. Тутельян, А.В. Сравнительная оценка антиоксидантных свойств иммунорегуляторных препаратов / А.В. Тутельян // Бюлл. эксперимент. биол. и медицины. - 2003. - Т. 136, -№8. - С. 179 - 183.

80.Тухватуллина, З.Г. Нарушения кератинизации при лимфомах кожи / З.Г. Тухватуллина, И.М. Байбеков, Р.М. Абдуллаев //Новости дерматологии и венерологии.- 1999.- № 4.- С.22-28.

81.Файзуллаева, М.М. Метод изучения взаимодействия триптофана с ионом железа / М.М. Файзуллоева, А.Н. Шахматов Г.М. Бобиев// Материалы Респ. научно - практ. конф. «Проблемы дифференцированного обучения»-Душанбе, -2009.- С.244 - 247.

82. Файзуллаева, М.М. Изучение комплексообразования триптофана с ионом цинка/ М.М. Файзуллаева, А.Н. Шахматов, У.З. Зубайдов // III Респ. научн. конф. «Вклад биохимиков в развитие биологической науки»: Труды. -Душанбе.-2003.-С.117-119.

83. Файзуллаева, М.М. Результаты применения тимофера при лечении анемии у детей./ М.М. Файзуллаева, А. Хафизов, Г.М. Бобиев//Известия АН Республики Таджикистан.-2015. №1(189).-С.60-63.

84. Файзуллаева, М.М. Синтез и токсические свойства дипептида лейцил-триптофан. / М.М. Файзуллаева, А.Н. Шахматов, У.З. Зубайдов // Науч. симп. «Актуальные проблемы спектроскопии водородной связи».-Душанбе,- 2001.-С. 99-101.

85. Файзуллаева, М.М. Удаление Nps-группы с триптофан-содержащих дипептидов со свободной индольной группой. / М.М. Файзуллаева, А.Н. Шахматов, У.З. Зубайдов // Респ. конф. «Природные ресурсы Таджикистана: рациональное использование и охрана окружающей среды»: тез. докл.-Душанбе, -2001.-С.106.

86. Файзуллаева, М.М. Влияние тимофера на биохимические процессы организма у больных с сосудистыми заболеваниями / М.М. Файзуллоева // Вестник педагогического университета. -2014.-№2(57). -С.37-40.

87. Файзуллаева, М.М. Изучение комплексообразования триптофана и дипептида изолейцил-триптофан с ионом цинка методом рН-метрического титрования /

М.М. Файзуллаева, А.Н. Шахматов, У.З. Зубайдов // Международная научно -практ. конф., посв. 60-летию ТаджНИВИ «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях»: тез. докл.-Душанбе, -2003. -С.158-159.

88.Файзуллоева, М.М. Изучение комплексообразования триптофана и дипептида изолейцил-триптофан с ионом цинка методом рН-метрического титрования/ М.М. Файзуллаева,Г.М. Бобизода// Известия АН Республики Таджикистан.-2016. №4(195).-С.39-44.

89. Файзуллаева, М.М. Изучение комплексообразования цинка и железа (II) с триптофаном методом рН-метрического титрования. I. Определение экспериментальных констант диссоциации / М.М. Файзуллоева, А.Н. Шахматов, Г.М. Бобиев [и др.] // Вестник педагогического университета.-2005.-№ 3.-С.12-15.

90.Файзуллаева, М.М. Шахматов А.Н., Зубайдов У.З. Изучение взаимодействия цинка и железа (II) с триптофаном методом рН-метрического титрования / М.М. Файзуллаева, А.Н. Шахматов, У.З. Зубайдов // Научно-теорет. конф. «Современные проблемы физики и астрофизики».: тез. докл. -Душанбе, -2005,-С.52-53.

91.Феденко, Е.С. Принципы патогенетической терапии атопического дерматита / Е.С. Феденко // Лечащий врач. - 2001. - №4.-С.4-11.

92.Хавинсон, В.Х. Влияние вилона на показатели биологического возраста и продолжительность жизни мышей / В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов, Н.Ю. Заварзина // Бюлл. эксперимент. биол. и медицины. - 2000. - Т. 130, -№7. - С. 88 - 91.

93.Холин, Ю.В. Количественный физико-химический анализ комплексообразования в растворах и на поверхности химически модифицированных кремнеземов: содержательные модели, математические методы и их приложения./ Ю.В. Холин. - Харьков: Фолио, -2000.- 288 с.

94. Хусайнов, А.А. Применение тимогара и 1-(хлорметил)силатрана при лечении гнездной алопеции / А.А Хусайнов, М.М. Расулов, М.М. Файзуллоева, [и др.]// Новости дерматологии и венерологии.-Ташкент, -2002.- № 2.-С.37-38.

95.Цепелев, В.Л. Изучение активности синтетических бурсопептидов при иммунодефиците, вызванном циклофосфамидом / В.Л. Цепелев, С.Л. Цепелев, С.И. Курупанов // Бюлл. СО РАМН. - 2003. - Т. 107, -№1. - С. 84 -86.

96.Цымбал, И.Н. Железодефицитная анемия у детей/И.Н. Цымбал // Лечащий врач - 2001.-№ 10. -С.22-27.

97. Шатаева, Л.К. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы) / Л.К. Шатаева, В.Х. Хавинсон, И.Ю. Ряднова.- СПб.: Наука, -2003. - 222 с.

98.Шахматов, А.Н. УФ-спектроскопическое определение состава биокоординационных соединений цинка и триптофана с использованием растворов изомолярной серии / А.Н. Шахматов, М.М. Файзуллоева, Х.Ш. Бобиев Г.М. [и др.] // Межд. научно - практ. конф., посв. 60-летию ТаджНИВИ «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях»: тез. докл.-Душанбе, -2003.-С.161-162.

99.Щербаков, В.Г. Биохимия / В.Г. Щербаков, В.Г. Лобанов, Т.Н. Прудникова [и др.] - СПб: ГИОРД, 2003. -440 с.

100. Эйнштейн, Е. Белки мозга и спинномозговой жидкости в норме и

патологии./ Е. Эйнштейн . -М.: Мир, 1988.-280 с.

101. Эфендиев, А.М. Взаимосвязь биохимических показателей и авидности антител у больных сахарным диабетом типа 2 / А.М. Эфендиев, Г.И. Азизова, Г.Р. Гусейнова // Бюллетень сибирской медицины, -2009. -№ 3, -С.74-79.

102. Юнкеров, В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований./ В.И. Юнкеров, С.Г. Григорьев.- СПб.: ВМедА, -2002.-266 с.

103. Aisen, P. Transferrin metabolism and the liver/ P. Aisen //Semin. Liver Disease.-1984-Vol.4,- No. 3.-P.193-206.

104. Aspinal, R. Thymic atrophy in the mouse is a soluble problem of the thymic environment / R. Aspinal, D. Andrew // J. Vaccine. - 2000. - Vol. 18. - P. 1629 -1637.

105. Beauman, J.G. Genital herpes: a review / J.G. Beauman // American Family Physician. - 2005. - Vol. 72, -No 8. - P. 1527-1534.

106. Boldwin, G.S. Comparison of transferring sequences from different species/ G.S. Boldwin //Comp. Biochem. Physiol.- 1993.- B. -Vol.106, -No. 1. P. 203-218.

107. Brekelmans, P. Inhibition of proliferation during early T-cell development by anti-transferrin receptor antibody./ P. Brekelmans, P. Soest, P.J.M. Leenen //-Eur. J. Immunol.-1994.-Vol.24.-No. 11.-P.2896-2902.

108. Choi, S.Y. Anti-apoptotic function of thymosin-beta in developing chick spinal motoneurons / S.Y. Choi, D.K. Kim, D. Eun [et al.] // Biochemical Biophysical Research Communications. - 2006. - Vol. 346, -issue 3. - P. 872 - 878.

109. Dawson, R.M.C. Data for Biochemical Research / R.M.C. Dawson, D.C. Elliott, W.H. Elliott, [et all] (3rd ed.)// Clarendon Press Oxford, -1986. -pp.370.

110. Djeha, A. Cytokine-medieted regulation of transferrin synthesis in mouse macrophages and human T-lymphocytes/ A. Djeha, J.L. Perez-Arellano, S.L. Hayes //Blood.-1995.-Vol.85.-No. 4.-P.1036-1042.

111. Edecer, B.L. Bicarbonate and phosphate ions protect transferrin from myeloperoxidase-mediated damage/ B.L. Edecer, G.T. Rasmussen, B.E. Britigan //J. Leukos. Biol.- 1995.-Vol.58.-No.1.-P.59-64.

112. Fabrizi, F. Meta-analysis: the adjuvant role of thymopentin on immunological response to hepatitis B virus vaccine in end-stage renal disease / F. Fabrizi, V.M. Dixit // Alimentary Pharmacology & Therapeutics. - 2006. - Vol. 23, -No.1. - P. 1559 - 1566.

113. Fung, S.K. Hepatitis B virus genotypes: do they play a role in the outcome of HBV infection? / S.K. Fung, A.S. Lok //Hepatology. - 2004. - Vol. 40. - P. 790 -792

114. Hsu, H.-C. Genetic regulation of thymic involution / H.-C. Hsu // Mechanisms of ageing and development. - 2005. - Vol. 126. - P. 87 - 97.

115. Janiszewska, J. Synthesis, antimicrobial activity and structural studies of low molecular mass lysine dendrimers / J. Janiszewska, Z. Zofia Urbanczyk-Lipkowska // Acta Biochimica Polonica.-2006.-Vol.53, -No. 1.-P.77-82

116. Joshi, J.G. Iron and homeostasis in neural disorders/ J.G. Joshi, M. Clauberg, V. Chauthaiwale // Envoron. Health. Perspect. -1994.-Vol.102.-Suppl. 3.-P.207-213

117. Khavinson, V.Kh. Age dynamics of regulatory peptides / V.Kh. Khavinson, I.P. Ashmarin, V.V. Malinin // Science of Longevity. - 2001. - No.1. - P. 18 - 22.

118. Koutrafouri, V. Synthesis and angiogenetic activity in the chick chorioallantoic membrane model of thymosin beta-15 / V. Koutrafouri, L. Leondiadis , N. Ferderigos, [et al.] // Peptides. - 2003. - Vol. 24, issue 1. - P. 107 - 115.

119. Lash, A. Iron metabolism and its regulation / A. Lash, A. Saleem // Ann. Clin. Lab. Sci.-1995.-Vol.25.-No. 1.-P.20-30.

120. Li, S.J. Synthesis of a precursor dipeptide of thymopentin in organic solvents by an enzymatic method / S.J. Li, Y.B. Huang, Z. Yi, [et al.] // Preparative Biochemistry and Biotechnology. - 2008. - Vol. 38, issue 2. - P. 158 - 171.

121. Liu, S.P. Multivalent Antimicrobial Peptides as Therapeutics: Design Principles and Structural Diversities/ S.P. Liu, L. Zhou, R. Lakshminarayanan, R.W. Beuerman // Int J Pept Res Ther. -2010. -No. 16. -P. 199-213.

122. Liu, Z. Molecular Analysis of Thymopentin Binding to HLA-DR Molecules / Z. Liu, X. Zheng, J. Wang, [et al.] // PLoS ONE. - 2007. - Vol. 2, -No.12. - pp. 1348.

123. Midura-Nowaczek, K. Biological activity of amide derivatives of lysine./ K. Midura-Nowaczek, I. Lepietuszko, I. Bruzgo, [et al.] // Acta Polon Pharm. -2008. -No. 65.-P. 377-381.

124. Mrabet, B., Jouini M., Laplue G. Potentiometric, colorimetric and spectroscopic study of copper (II) complex of leucine -enkephalin and tripeptides, containing

tyrosine./ B. Mrabet, M. Jouini, G. Laplue //J.Clin.et phys.-chim.Biol.-1992.-Vol.89.-No 11-12.-p.2187-2205.

125. Oria, R. Effect of nitric oxide on cellular iron metabolism in K562 human erytroleukemia cells/ R. Oria, L. Sanchez, T. Houston //Blood.-1995.-Vol.85.-No 10. -P. 2962-2966.

126. Poulin, J.F.Direct Evidence for Thymic Function in Adult Humans / J.F. Poulin, M.N. Viswanathan, J.M. Harris, [et al.] // J. Exp. Med. - 1999. - Vol. 190, -No 4. -P. 479 - 486.

127. Ross, J. mRNA stability in mammalian cells/ J. Ross //Microbiol. Rev.-1995.-Vol.59.-No 3.-P.423-450.

128. Rossi, M.C. Selective stimulation of pristatic carcinoma cell proliferation by transferring/ M.C.Rossi, B.R. Zettler // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1992.-Vol.89.-P.6197-6201.

129. Savino, W. Neuroendocrine Control of Thymus Physiology / W. Savino, M. Dardenne // Endocrine Reviews. - 2000. - Vol. 21, No4. - P. 412 - 443.

130. Selligman, P.A. Lymphocyte proliferation is controlled by both iron availability and regulation of iron uptake pathways/ P.A. Selligman, J. Kovar, E.W. Gelfand //-Pathobiol.-1992.-Vol.60.-No.1.-P.19-26.

131. Shevchenko, A.A. A quantitative method for estimation of structure and conformational stability of proteins by the 2nd derivative uv spectroscopy/ A.A. Shevchenko O.A. Kost, N.F. Kazanskaya //Bioorganicheskaya Khimiya.-1994.-T.20.-№ 3. -C.263-267.

132. Sills, R. H. Practical algorithms in pediatric hematology and oncology./ R.H. Sills. -Israel. -2003. -pp. 114.

133. Smriga M. Metabolic interactions between restraint stress and L-lysine: the effect on urea cycle components / M. Smriga, K.Torii // Amino Acids. - 2003. - Vol. 24, No. 4. - P. 435-437.

134. Stephen, C. Thymulin evokes IL-6-C/EBP regenerative repair and TNF- silencing during endotoxin exposure in fetal lung explants / C. Stephen, S.C. Land, F. Darakhshan // Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. - 2004. - Vol. 286. - P. 473 - 487.

135. Templeton, D.M. Recent trends in iron chelation/ D.M. Metal ions in biology and medicine / D.M. Templeton, N.F. Olivieri, J.D. Parkes (Eds. Ph.Collery, P.Bratter, V.Negretti de Bratter, [et al.]) //-Etienne. Paris: John Libbey Eurotext.--1998.-Vol.5. -P.71-76

136. Tran, C.D. Dietary intake and biochemical, hematologic andimmune status of vegans compared with nonvegetarians / C.D. Tran // Am. J. Clin. Nutr. - 1999. -Vol. 70, suppl. 3. - P. 586S - 593S.

137. Yarilin, A.A. Cytocines in the thymus. Production and reception of cytocines / A.A. Yarilin // J. Cytokines & Inflammation. - 2003. - No1.-P.10-21.