Влияние нагрузок различной интенсивности на концентрацию белка теплового шока с молекулярной массой 70 кДа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.51, кандидат медицинских наук Шкурников, Максим Юрьевич

• Шкурников, Максим Юрьевич
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шкурников, Максим Юрьевич

Введение.:.

Глава I. Современное состояние проблемы оценки адаптации к нагрузкам различной интенсивности.

Биохимические и гормональные показатели адаптации к нагрузкам различной интенсивности.

Белки теплового шока, как показатель адаптации к физическим нагрузкам.

Глава II. Методы исследования.

Организация исследования.

Определение концентрации БТШ70 методом ИФА.

Определение биохимических и гормональных показателей.

Определение концентрации малонового диальдегида.

Статистическая обработка.

Глава III. Разработка иммунохимического метода определения БТШ

Глава IV. Влияние нагрузок максимальной интенсивности на концентрацию БТШ70.

Определение изменения экспрессии мРНК БТШ70 и концентрации БТШ70 в сыворотке в ответ на максимальную аэробную нагрузку.

Определение изменения концентрации БТШ70 в сыворотке в ответ на максимальную анаэробную нагрузку.

Глава V. Изменение уровня БТШ70 в ответ на нагрузку в различных видах спорта.

Глава VI. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние нагрузок различной интенсивности на концентрацию белка теплового шока с молекулярной массой 70 кДа»

Исследования проведены с целью разработки медико-биологических " критериев адаптации к нагрузкам различной интенсивности в ходе учебно-тренировочного процесса высококвалифицированных спортсменов.

Прогрессирующее развитие тренированности спортсмена является результатом того, что следовые реакции, наблюдающиеся в организме после отдельных тренировочных нагрузок, не устраняются полностью, а сохраняются и закрепляются конструктивными изменениями функциональных систем организма спортсменов, возникающими в восстановительном периоде, которые служат основой повышения тренированности. Оптимальное сочетание процессов утомления и восстановления - физиологическая основа постоянной и долговременной адаптации организма к физическим и спортивным нагрузкам.

В настоящее время довольно подробно разработаны биохимические критерии адаптации при нагрузках высокой интенсивности в циклических видах спорта. Остается открытым вопрос поиска биохимического критерия адаптации к нагрузкам не только в циклических, но и в других видах спорта.

Актуальность

Актуальность темы определяется как теоретической, так и практической значимостью проблемы оптимизации учебно-тренировочного процесса высококвалифицированных спортсменов с помощью разработки новых критериев адаптации к нагрузкам различной интенсивности.

Особенность адаптации организма к спортивной деятельности заключается в этапности ее формирования на протяжении многолетнего процесса тренировки и участия в соревнованиях. Развитие адаптационных изменений и ускорение периода восстановления сопряжено с применением продолжительных нагрузок различной интенсивности, что значительно повышает вероятность формирования у спортсмена синдрома переутомления. Синдром переутомления — это совокупность симптомов, которые обуславливают неспособность адекватно переносить тренировочный процесс. Спортсмены не способны поддерживать свой тренировочный график или повторять результаты достигнутые ранее. Зачастую диагноз переутомления ставится на основании ретроспективных данных. К сожалению, на сегодняшний день способ реабилитации только один — полноценный (иногда продолжительный) отдых, что отрицательно сказывается на карьере спортсмена. Общеизвестно, что заболевание легче поддается лечению на начальном этапе. Чтобы определить критическое состояние спортсмена необходимы объективные показатели физического состояния во время тренировочного процесса.

Одним из актуальных направлений поиска биохимических маркеров утомления и адаптации является исследование роли белка теплового шока (БТШ) 70 в организме человека. Белок БТШ70 является индуцибельным представителем семейства белков теплового шока. БТШ необходимы клетке во всех процессах ее жизнедеятельности, включая адаптацию к огромному числу цитотоксических факторов, как ксенобиотического, так и естественного происхождения.

Одна из функций БТШ70 в клетке заключается в том, что он связывается с поврежденными или вновь синтезированными полипептидами и помогает им принять нативную конформацию. То, что БТШ70 спасает клетки от огромного числа факторов, в том числе, вызывающих апоптоз, было подтверждено в многочисленных опытах in vitro и in vivo с использованием широкого спектра модельных организмов, находящихся на разных ступенях эволюции.

БТШ70 и считается индуцибельным, что означает, что его экспрессия резко возрастает в ответ на стресс, в клетках человека его синтез, хотя и на невысоком уровне, происходит и в нормальных условиях. В частности, было показано, что увеличение экспрессии митохондриального БТШ70 приводит к повышению образования АТФ, то есть улучшает энергообеспечение. Надо отметить, что в разных тканях и клетках организма степень экспрессии БТШ70 различается. Например, она очень высока в тканях сердца, и крайне низка (и не запускается в ответ на стресс) в некоторых типах нейронов головного мозга. Несколько лет тому назад появились данные о том, что БТШ70, ранее считавшийся исключительно цитоплазматическим белком, может находиться во внеклеточном пространстве, в биологических жидкостях человека.

Не смотря на то, что в целом ряде работ показано, что физическая нагрузка является сильным стимулом к внутриклеточной экспрессии БТШ70 клетками иммунной системы, миоцитами скелетной и сердечной мускулатуры, а также такими органами, как печень, селезенка и мозг, исследований, посвященных взаимосвязи уровня БТШ70 в сыворотке крови и специфике физической нагрузки (специальная работоспособность) не проводилось.

Не смотря на то, что в целом ряде работ показана зависимость стимуляции внутриклеточной экспрессии БТШ70 при возрастании физической нагрузки клетками иммунной системы миоцитами скелетной и сердечной мускулатуры, печенью, селезенкой и мозгом, исследований, посвященных взаимосвязи уровня БТШ70 в сыворотке крови и спецификой физической нагрузки (специальная работоспособность) не проводилось.

Определение БТШ70 сыворотке крови может существенно повысить точность методов лабораторного контроля спортивной деятельности, углубить представления о молекулярно-биологических процессах, протекающих в организме высококвалифицированных спортсменов в ходе тренировочной и соревновательной деятельности.

Предмет исследования

Биохимические показатели, показатели гормонального статуса, t экспрессия БТШ70 в лейкоцитах, концентрация БТШ70 в сыворотке крови при нагрузках различной интенсивности у спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта.

Объект исследования

Биологические закономерности адаптации организма спортсмена к нагрузкам различной интенсивности.

Цель исследования

Изучение влияния нагрузок различной интенсивности на концентрацию БТШ70 в сыворотке крови спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта, экспрессии мРНК БТШ70 в лейкоцитах; разработка критериев оценки адаптационных резервов организма высококвалифицированных спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта в процессе тренировочной и соревновательной деятельности основанных на динамике изменения концентрации БТШ70 в сыворотке крови.

Гипотеза

Предполагается, что БТШ70 не только защищает миоциты от воздействия факторов острого и хронического физиологического стресса, но и отвечает за повышение эффективности работы митохондрий и их гиперплазию в миоцитах скелетной мускулатуры. Контроль уровня БТШ70 в сыворотке крови может помочь оптимизировать тренировочный процесс высококвалифированных спортсменов различной специализации.

Задачи исследования

1. Разработать модификацию иммунохимического метода определения БТ1П70 в сыворотке.

2. Исследовать экспрессию БТШ70 в лейкоцитах в ответ на кратковременную нагрузку высокой интенсивности.

3. Исследовать динамику гормональных и биохимических показателей, БТШ70 у высококвалифицированных спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта на различных этапах учебно-тренировочной и соревновательной деятельности.

4. Определить базальный уровень БТШ70 для разработки рекомендаций по медицинскому контролю над функциональным состоянием высококвалифицированных спортсменов с учетом полученных данных.

Методы исследования

Для решения задач исследования применялись следующие методы: анализ и обобщение литературных данных, биохимические методы исследования, электрофизиологические методы исследования, гематологические методы исследования, иммунохимические методы исследования, методы педагогического тестирования, методы математической статистики.

Научная новизна

Впервые при использовании протокола кратковременных высокоинтенсивных упражнений удалось достичь физиологического стресса, приводящего к достоверному увеличению экспрессии мРНК БТШ70 в лейкоцитах. Показана индивидуальность ответа организма на стресс у подготовленных спортсменов. Выявлены статистически значимые различия в базальном уровне БТШ70 у спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта. Установлено отсутствие взаимосвязи уровня перекисного окисления липидов и уровня БТШ70 в сыворотке.

Теоретическая значимость

Результаты исследования расширяют знания о медико-биологических способах оптимизации учебно-тренировочного процесса спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта, как методах защиты организма и поддержания здоровья спортсменов и повышения спортивного результата.

Практическая значимость

Практическая значимость работы определяется разработкой информативного метода оценки срочной адаптации к мышечной нагрузке различной интенсивности на основе концентрации БТШ70 в сыворотке крови, а также созданием тест-системы для определения БТШ70 в биологических жидкостях.

Результаты работы могут использоваться для коррекции учебно-тренировочной работы в процессе подготовки спортсменов. Материалы исследования могут быть использованы в преподавании медико-биологических дисциплин в высших учебных заведениях, на семинарах и курсах повышения квалификации врачей спортивной медицины, тренеров, инструкторов ЛФК, врачей команд по видам спорта. Результаты исследований внедрены в работу кафедры спортивной медицины ФГУ РГУФКСиТ и кафедры физического воспитания и спорта МГУ им. М.В. Ломоносова, что подтверждено актами о внедрении.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

• Работа максимальной аэробной мощности повышает концентрацию БТШ70 в сыворотке и увеличивает экспрессию его мРНК в лейкоцитах.

• Работа максимальной анаэробной мощности не вызывает повышения концентрации БТШ70 в сыворотке крови.

• Диапазон значений уровня БТШ70 в сыворотке крови высококвалифицированных спортсменов сложнокоординационных и циклических видов спорта статистически значимо различается в подготовительный период, и не различается в предсоревновательный.

Заключение диссертации по теме «Восстановительная медицина, спортивная медицина, курортология и физиотерапия», Шкурников, Максим Юрьевич

102 ~ ВЫВОДЫ

1. Разработана тест-система определения концентрации белка теплового шока с молекулярной массой 70 кДа (БТШ70). В ходе разработки тест—системы получен БТШ70 с гексагистидиновым тэгом на N-конце, а также аффинно очищенные поликлональные антитела кролика против БТШ70.

2. Показано отсутствие корреляции между экспрессией генов БТШ70 в лейкоцитах и концентрацией БТШ70 в сыворотке при исследовании экспрессии мРНК БТШ70 в ответ на кратковременную нагрузку высокой интенсивности.

3. При анализе изменения уровня БТШ70 и ряда других биохимических и гормональных параметров при нагрузках различной интенсивности в команде по академический гребле и спортивной гимнастике был показан статистически значимо более высокий уровень БТШ70 в начале подготовительного периода у юношей и девушек, специализирующихся в спортивной гимнастике (64,2±58,9 нг/мл и 24±12,9 нг/мл соответственно) по сравнению с гребцами—академистами (11,5±7,0 нг/мл).

4. Установлен базальный уровень БТШ70 у высококвалифицированных спортсменов циклических и сложнокоординационных видов спорта на различных этапах учебно-тренировочного и соревновательного процесса.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Врачам команд циклических и сложнокоординационных видов спорта необходимо контролировать концентрацию БТШ70, так как повышение базального уровня БТП170 в сыворотке крови выше концентрации 14-15 нг/мл в восстановительный период является признаком перенапряжения адаптационных систем организма спортсмена.

2. При интерпретации уровня БТШ70 врачам команд необходимо учитывать, что в начале тренировочного этапа базальный уровень этого показателя может достигать значений 64,2±58,9 нг/мл в сложнокоординационных видах спорта и уровня 11,5±7,0 нг/мл в циклических. При этом в процессе адаптации к нагрузкам концентрация БТШ70 снижается и стабилизируется на уровне 7,1 ±3,3 нг/мл.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шкурников, Максим Юрьевич, 2009 год

1. Андреева Л.И. Теоретическое и прикладное значение белков теплового шока 70 кДа; возможность практического применения и фармакологической коррекции // Обз. Клин. Фармакол. Лек. Тер. —2002.-№1.-С. 2-18.

2. Астратенкова И.В. и Чайковский B.C. Метаболизм аспартатаминотрансферазы при физических нагрузках // Укр. биохим. журн. 1990. - Т. 62 - С. 98-101.

3. Владимиров Ю.А. и Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука. - 1972. - 252 с.

4. Гужова И.В., Ласунская Е.Б., Нильссон К. и др. Влияние теплового шока на процессы дифференцировки и апоптоза в клетках U-937 // Цитология. 2000. - Т. 42. - 7. - С. 653-8.

5. Гужова И.В., Новоселова Т.В., Вербова М.В., Маргулис Б.А. Шаперон Hsp70 и перспективы его использования противоопухолевой терапии // Цитология. 2005. - Т. 47. - С. 210-27.

6. Зезеров А.Е., Ивонова С.М. и Ушаков Л.С. Перекисное окисление липидов в тканях крыс при антиортостатической гипокинезии, действии физической нагрузки и иммобилизационного стресса // Косм, биол. авиакосм. мед. 1987. - Т. 21. - С. 39-43.

7. Маргулис Б.А., Гужова И.В. Белки стресса в эукариотической клетке // Цитология. 2000. - №42. - С. 323-342.

8. Меерсон Ф.З. и Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина. — 1988. — 256 с.

9. Ю.Морозов В.И. и Петрова Т.Н. Выявление протеиназ нейтрофилов в скелетных мышцах крыс после мышечной деятельности. // Укр. биохим. журн. 1993. - Т. 65. - С. 40-44.

10. П.Пастухов Ю.Ф., Максимов А.Д., Хаскин В.В. Адаптация к холоду и условиям субарктики: проблемы термофизиологии. Т. 1. Магадан: МЦИК "Арктика". - 2003. - 373 с.

11. Скулачев В.П. Эволюция, митохондрии и кислород // Соросовский образовательный журнал. №9 - 1999. - С. 4-10.

12. Чаговец Н.Р. Биохимический анализ компенсаторных процессов в скелетных мышцах после функциональной деятельности. Автореф. дисс докт. биол. наук.Л. - 1974. — 36 с.

13. Чайковский B.C., Башарина О.Б., Шаляпина И.В. и Рогозкин В.А. Физические нагрузки и содержание миоглобина и тропомиозина в мышцах и миоглобина в крови крыс // Вопр. мед. Химии — 1987. — Т. 33 -№ 4. — С.79-83.

14. Шаляпина И.В., Чайковский B.C. и Рогозкин В.А. Метаболизм тропомиозина в мышцах и его содержание в крови при физических нагрузках // Укр. биохим. журн. № 4. - 1987 - С. 14-18.

15. Яковлев Н.Н. Биохимия спорта. М.: ФиС. - 1974. - 288 с.

16. Position of The American Dietetic Association: nutrition for physical fitness and athletic performance for adults // J Am Diet Assoc. 1987. - Vol. 87. -N7.-P. 933-9.

17. Position of the American Dietetic Association and the Canadian Dietetic Association: nutrition for physical fitness and athletic performance for adults //J Am Diet Assoc. 1993.-Vol. 93.-N6.-P. 691-6.

18. Adlercreutz H., Harkonen M., Kuoppasalmi K. et al. Effect of training on plasma anabolic and catabolic steroid hormones and their response during physical exercise // Int J Sports Med. 1986. - Vol. 7 Suppl 1. P. 27-8.

19. Alessio Н.М. and Goldfarb А.Н. Lipid peroxidation and scavenger enzymes during exercise: adaptive response to training // J Appl Physiol. 1988. — Vol. 64.-N4,-P. 1333-6.

20. Arrigo A.P. In search of the molecular mechanism by which small stress proteins counteract apoptosis during cellular differentiation // J Cell Biochem. 2005. - Vol. 94. - N2.- P. 241-6.

21. Asea A. Stress proteins and initiation of immune response: chaperokine activity of hsp72 // Exerc Immunol Rev. 2005. - Vol. 11. P. 34^15.

22. Avula С .P., Muthukumar A.R., Zaman K. et al. Inhibitory effects of voluntary wheel exercise on apoptosis in splenic lymphocyte subsets of C57BL/6 mice // J Appl Physiol. 2001. - Vol. 91. - N6,- P. 2546-52.

23. Baler R., Zou J. and Voellmy R. Evidence for a role of Hsp70 in the regulation of the heat shock response in mammalian cells // Cell Stress Chaperones. 1996. - Vol. 1. - N1.- P. 33-9.

24. Banfi G. and Dolci A. Free testosterone/cortisol ratio in soccer: usefulness of a categorization of values // J Sports Med Phys Fitness. 2006. - Vol. 46. -N4.-P. 611-6.

25. Banfi G., Marinelli M., Roi G.S. et al. Usefulness of free testosterone/cortisol ratio during a season of elite speed skating athletes // Int J Sports Med. 1993. - Vol. 14. - N7,- P. 373-9.

26. Bardwell J.C. and Craig E.A. Major heat shock gene of Drosophila and the Escherichia coli heat-inducible dnaK gene are homologous // Proc Natl Acad Sci USA.- 1984. Vol. 81.-N3- P. 848-52.

27. Basu S., Binder R.J., Suto R. et al Necrotic but not apoptotic cell death releases heat shock proteins, which deliver a partial maturation signal to dendritic cells and activate the NF-kappa В pathway // Int Immunol. 2000. -Vol. 12.-Nil.-P. 1539^16.

28. Blanchard R.J., Yudko E.B., Rodgers R.J. et al. Defense system psychopharmacology: an ethological approach to the pharmacology of fear and anxiety // Behav Brain Res. 1993. - Vol. 58. - N1-2,- P. 155-65.

29. Bohen S.P. The Biology of Heat Shock Proteins and Molecular Chaperones Book., 1994.

30. Вогк P., Sander C. and Valencia A. An ATPase domain common to prokaryotic cell cycle proteins, sugar kinases, actin, and hsp70 heat shock proteins // Proc Natl Acad Sci USA.- 1992. Vol. 89. - N16.- P. 7290-4.

31. Brouns F., Saris W.H., Stroecken J. et al. Eating, drinking, and cycling. A controlled Tour de France simulation study, Part I // Int J Sports Med. — 1989a. Vol. 10 Suppl 1. P. S32-40.

32. Brouns F., Saris W.H., Stroecken J. et al. Eating, drinking, and cycling. A controlled Tour de France simulation study, Part II. Effect of diet manipulation // Int J Sports Med. 1989b. - Vol. 10 Suppl 1. P. S41-8.

33. Brown M.D., Jeal S., Bryant J. et al. Modifications of microvascular filtration capacity in human limbs by training and electrical stimulation // Acta Physiol Scand. 2001. - Vol. 173.-N4.-P. 359-68.

34. Buchner J. Supervising the fold: functional principles of molecular chaperones//FASEB J. 1996.-Vol. 10.-N1.-P. 10-9.

35. Buchner J. Hsp90 & Co. a holding for folding // Trends Biochem Sci. -1999.-Vol. 24.-N4.-P. 136^11.

36. Butterfield G.E. Whole-body protein utilization in humans // Med Sci Sports Exerc. 1987. - Vol. 19. -N5 Suppl.-P. SI57-65.

37. Buttner P., Mosig S., Lechtermann A. et al. Exercise affects the gene expression profiles of human white blood cells // J Appl Physiol. — 2007. — Vol. 102. -Nl.- P. 26-36.

38. Cahill C.M., Waterman W.R., Xie Y. et al. Transcriptional repression of the prointerleukin lbeta gene by heat shock factor 1 // J Biol Chem. — 1996. — Vol. 271. -N40,-P. 24874-9.

39. Campisi J., Leem Т.Н. and Fleshner M. Stress-induced extracellular Hsp72 is a functionally significant danger signal to the immune system // Cell Stress Chaperones. 2003a. - Vol. 8. - N3.- P. 272-86.

40. Campisi J., Leem Т.Н., Greenwood B.N. et al. Habitual physical activity facilitates stress-induced HSP72 induction in brain, peripheral, and immune tissues // Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003b. - Vol. 284. -N2.-P. R520-30.

41. Caplan A.J., Cyr D.M. and Douglas M.G. Eukaryotic homologues of Escherichia coli dnaJ: a diverse protein family that functions with hsp70 stress proteins // Mol Biol Cell. 1993. - Vol. 4. - N6.- P. 555-63.

42. Cardile V., Scifo C., Russo A. et al. Involvement of HSP70 in resveratrol-induced apoptosis of human prostate cancer // Anticancer Res. 2003. — Vol. 23. -N6C.-P. 4921-6.

43. Chang R.T., Lambert G.P., Moseley P.L. et al. Effect of estrogen supplementation on exercise thermoregulation in premenopausal women // J Appl Physiol. 1998. - Vol. 85. - N6,- P. 2082-8.

44. Chappell T.G., Konforti B.B., Schmid S.L. et al. The ATPase core of a clathrin uncoating protein // J Biol Chem. 1987. - Vol. 262. - N2.- P. 746-51.

45. Clark N. Nutrition support programs for young adult athletes // Int J Sport Nutr. 1998. - Vol. 8. -N4.-P. 416-25.

46. Connolly P.H., Caiozzo V.J., Zaldivar F. et al. Effects of exercise on gene expression in human peripheral blood mononuclear cells // J Appl Physiol. — 2004. Vol. 97. - N4,- P. 1461-9.

47. Constable S.H., Favier R.J., McLane J.A. et al Energy metabolism in contracting rat skeletal muscle: adaptation to exercise training // Am J Physiol.-1987.-Vol. 253.-N2 Pt l.-P. C316-22.

48. Craig E.A. The heat shock response // CRC Crit Rev Biochem. 1985. — Vol. 18.-N3.-P. 239-80.

49. Cvoro A. and Matic G. Hyperthermic stress stimulates the association of both constitutive and inducible isoforms of 70 kDa heat shock protein with rat liver glucocorticoid receptor // Int J Biochem Cell Biol. 2002. — Vol. 34.-N3.-P. 279-85.

50. Dall'Era M.A., Oudes A., Martin D.B. et al HSP27 and HSP70 interact with CD 10 in C4-2 prostate cancer cells // Prostate. 2007. - Vol. 67. - N7.- P. 714-21.

51. Davies M.J. Direct detection of radical production in the ischaemic and reperfused myocardium: current status // Free Radic Res Commun. 1989.- Vol. 7. N3-6.-P. 275-84.

52. Deak Т., Meriwether J.L., Fleshner M. et al Evidence that brief stress may induce the acute phase response in rats // Am J Physiol. — 1997. — Vol. 273.- N6 Pt 2.- P. R1998-2004.

53. Diamond D.M. and Park C.R. Predator exposure produces retrograde amnesia and blocks synaptic plasticity. Progress toward understanding how the hippocampus is affected by stress // Ann N Y Acad Sci. 2000. — Vol. 911. P. 453-5.

54. Dishman R.K., Dunn A.L., Youngstedt S.D. et al Increased open field locomotion and decreased striatal GABAA binding after activity wheel running // Physiol Behav. 1996. - Vol. 60. - N3.- P. 699-705.

55. Dohm G.L., Israel R.G., Breedlove R.L. et al Biphasic changes in 3— methylhistidine excretion in humans after exercise // Am J Physiol. 1985.- Vol. 248. N5 Pt 1.- P. E588-92.

56. Dybdahl В., Wahba A., Lien Е. et al. Inflammatory response after open heart surgery: release of heat-shock protein 70 and signaling through tolllike receptor-4 // Circulation. 2002. - Vol. 105. - N6.- P. 685-90.

57. Fabian Т.К., Gaspar J., Fejerdy L. et al. Hsp70 is present in human saliva // Med Sci Monit. 2003. - Vol. 9. -Nl.-P. BR62-5.

58. Febbraio M.A. and Koukoulas I. HSP72 gene expression progressively increases in human skeletal muscle during prolonged, exhaustive exercise // J Appl Physiol. 2000. - Vol. 89. -N3.-P. 1055-60.

59. Fehrenbach E. and Niess A.M. Role of heat shock proteins in the exercise response // Exerc Immunol Rev. 1999. — Vol. 5. P. 57-77.

60. Fehrenbach E., Niess A.M., Schlotz E. et al. Transcriptional and translational regulation of heat shock proteins in leukocytes of endurance runners // J Appl Physiol. 2000. - Vol. 89. - N2.- P. 704-10.

61. Flaherty K.M., DeLuca-Flaherty C. and McKay D.B. Three-dimensional structure of the ATPase fragment of a 70K heat-shock cognate protein // Nature. 1990. - Vol. 346. - N6285.-P. 623-8.

62. Fleshner M. Exercise and neuroendocrine regulation of antibody production: protective effect of physical activity on stress-induced suppression of the specific antibody response // Int J Sports Med. 2000. — Vol. 21 Suppl 1. P. S14-9.

63. Fleshner M., Campisi J., Amiri L. et al. Cat exposure induces both intra-and extracellular Hsp72: the role of adrenal hormones // Psychoneuroendocrinology. 2004. - Vol. 29. - N9,- P. 1142-52.

64. Garrido С. Size matters: of the small HSP27 and its large oligomers // Cell Death Differ. 2002. - Vol. 9. - N5.- P. 483-5.

65. Glatz J.F., Van der Vusse G.J., Maessen J.G. et al. Fatty acid-binding protein as marker of muscle injury: experimental findings and clinical application // Acta Anaesthesiol Scand Suppl. 1997. - Vol. 111. P. 292^1.

66. Goldberg A.L. and Chang T.W. Regulation and significance of amino acid metabolism in skeletal muscle // Fed Proc. 1978. — Vol. 37. — N9.— P. 2301-7.

67. Gontzea I., Sutzesco P. and Dumitrache S. Reasearch on the influence of muscular activity on nitrogen metabolism and on the protein requirement of man. // Ann Nutr Aliment. 1968. - Vol. 22. - N4.- P. 183-236.

68. Gonzalez В., Hernando R. and Manso R. Stress proteins of 70 kDa in chronically exercised skeletal muscle // Pflugers Arch. — 2000. — Vol. 440. — Nl.-P. 42-9.

69. Gonzalez B. and Manso R. Induction, modification and accumulation of HSP70s in the rat liver after acute exercise: early and late responses // J Physiol. 2004. - Vol. 556. - NPt 2.- P. 369-85.

70. Gosslau A., Ruoff P., Mohsenzadeh S. et al. Heat shock and oxidative stress-induced exposure of hydrophobic protein domains as common signal in the induction of hsp68 // J Biol Chem. 2001. - Vol. 276. - N3.- P. 1814-21.

71. Granger D.N. and Korthuis R.J. Physiologic mechanisms of postischemic tissue injury // Annu Rev Physiol. 1995. - Vol. 57. P. 311-32.

72. Grisham M.B., Hernandez L.A. and Granger D.N. Adenosine inhibits ischemia-reperfusion-induced leukocyte adherence and extravasation // Am J Physiol. 1989. - Vol. 257. - N5 Pt 2,- P. H1334-9.

73. Guidon P.T., Jr. and Hightower L.E. Purification and initial characterization of the 71-kilodalton rat heat-shock protein and its cognate as fatty acid binding proteins // Biochemistry. 1986. - Vol. 25. - N11.- P. 3231-9.

74. Gurbuxani S., Bruey J.M., Fromentin A. et al. Selective depletion of inducible HSP70 enhances immunogenicity of rat colon cancer cells // Oncogene.-2001.-Vol. 20.-N51.-P. 7478-85.

75. Gusev N.B., Bogatcheva N.V. and Marston S.B. Structure and properties of small heat shock proteins (sHsp) and their interaction with cyto skeleton proteins // Biochemistry (Mosc). 2002. - Vol. 67. - N5.- P. 511-9.

76. Guzhova I.V., Arnholdt A.C., Darieva Z.A. et al. Effects of exogenous stress protein 70 on the functional properties of human promonocytes through binding to cell surface and internalization // Cell Stress Chaperones. 1998. -Vol. 3.-N1.-P. 67-77.

77. Hikida R.S., Staron R.S., Hagerman F.C. et al. Muscle fiber necrosis associated with human marathon runners // J Neurol Sci. — 1983. — Vol. 59. -N2.-P. 185-203.

78. Hoppeler H. and Desplanches D. Muscle structural modifications in hypoxia // Int J Sports Med. 1992. - Vol. 13 Suppl 1. P. SI66-8.

79. Iiboshi A., Tokuda S., Nishimura T. et al. Biphasic changes of blood myoglobin level in weight training // J Sports Med Phys Fitness. 1982. — Vol. 22.-N3.-P. 284-94.

80. Jakob U. and Buchner J. Assisting spontaneity: the role of Hsp90 and small Hsps as molecular chaperones // Trends Biochem Sci. 1994. — Vol. 19. -N5.-P. 205-11.

81. Jerome S.N., Akimitsu Т., Gute D.C. et al. Ischemic preconditioning attenuates capillary no-reflow induced by prolonged ischemia and reperfusion // Am J Physiol. 1995. - Vol. 268. - N5 Pt 2.- P. H2063-7.

82. Kaman R.L., Goheen В., Patton R. et al. The effects of near maximum exercise of serum enzymes: the exercise profile versus the cardiac profile // Clin Chim Acta. 1977. - Vol. 81. -N2.-P. 145-52.

83. Kanter M.M., Lesmes G.R., Kaminsky L.A. et al. Serum creatine kinase and lactate dehydrogenase changes following an eighty kilometer race. Relationship to lipid peroxidation // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. -1988. Vol. 57. - N1.- P. 60-3.

84. Khassaf M., Child R.B., McArdle A. et al. Time course of responses of human skeletal muscle to oxidative stress induced by nondamaging exercise // J Appl Physiol. 2001. - Vol. 90. -N3.- P. 1031-5.

85. Korthuis R.J., Smith J.K. and Carden D.L. Hypoxic reperfusion attenuates postischemic microvascular injury // Am J Physiol. 1989. — Vol. 256. - N1 Pt 2 — P. H315-9.

86. Kuhl N.M. and Rensing L. Heat shock effects on cell cycle progression // Cell Mol Life Sci. 2000. - Vol. 57. - N3.- P. 450-63.

87. Lindquist S. The heat-shock response // Annu Rev Biochem. 1986. — Vol. 55. P. 1151-91.

88. Lippi G., Franchini M., Guidi G.C. et al. Non-steroidal anti-inflammatory drugs in athletes // Br J Sports Med. 2006. - Vol. 40. - N8.- P. 661-2; discussion 662—3.

89. Liu Y., Mayr S., Opitz-Gress A. et al. Human skeletal muscle HSP70 response to training in highly trained rowers // J Appl Physiol. — 1999. — Vol. 86. — N1- P. 101-4.

90. Mackinnon L.T., Hooper S.L., Jones S. et al. Hormonal, immunological, and hematological responses to intensified training in elite swimmers // Med Sci Sports Exerc. 1997. - Vol. 29. - N12.- P. 1637-45.

91. MacRae Т.Н. Structure and function of small heat shock/alpha-crystallin proteins: established concepts and emerging ideas // Cell Mol Life Sci.-2000.-Vol. 57.-N6.-P. 899-913.

92. Maestu J., Jurimae J. and Jurimae T. Hormonal response to maximal rowing before and after heavy increase in training volume in highly trained male rowers // J Sports Med Phys Fitness. 2005a. - Vol. 45. - N1- P. 121-6.

93. Maestu J., Jurimae J. and Jurimae T. Monitoring of performance and training in rowing // Sports Med. 2005b. - Vol. 35. - N7.- P. 597-617.

94. Maloyan A. and Horowitz M. beta-Adrenergic signaling and thyroid hormones affect HSP72 expression during heat acclimation // J Appl Physiol. 2002. - Vol. 93. - N1.- P. 107-15.

95. Mesches M.H., Fleshner M., Heman K.L. et al. Exposing rats to a predator blocks primed burst potentiation in the hippocampus in vitro // J Neurosci. 1999. - Vol. 19. -N14,- P. RC18.

96. Miyazaki M., Nakatsura Т., Yokomine K. et al. DNA vaccination of HSP105 leads to tumor rejection of colorectal cancer and melanoma in mice through activation of both CD4 T cells and CD8 T cells // Cancer Sci. -2005. Vol. 96. - N10,- P. 695-705.

97. Moraska A. and Fleshner M. Voluntary physical activity prevents stress-induced behavioral depression and anti-KLH antibody suppression //

98. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2001. - Vol. 281. - N2 - P. R484-9.

99. Morimoto R.I. Regulation of the heat shock transcriptional response: cross talk between a family of heat shock factors, molecular chaperones, and negative regulators // Genes Dev. 1998. - Vol. 12. -N24,- P. 3788-96.

100. Morozov V.I., Pryatkin S.A., Kalinski M.I. et al. Effect of exercise to exhaustion on myeloperoxidase and lysozyme release from blood neutrophils // Eur J Appl Physiol. 2003. - Vol. 89. - N3-4.- P. 257-62.

101. Morozov V.I., Tsyplenkov P.V., Golberg N.D. et al. The effects of high-intensity exercise on skeletal muscle neutrophil myeloperoxidase in untrained and trained rats // Eur J Appl Physiol. 2006. — Vol. 97. - N6.- P. 716-22.

102. Morozov V.I., Usenko T.N. and Rogozkin V.A. Neutrophil antiserum response to decrease in proteolytic activity in loaded rat muscle // Eur J Appl Physiol.-2001.-Vol. 84.-N3.-P. 195-200.

103. Morshauser R.C., Wang H., Flynn G.C. et al. The peptide-binding domain of the chaperone protein Hsc70 has an unusual secondary structure topology //Biochemistry. 1995. - Vol. 34. -N19-P. 6261-6.

104. Narasimhan P., Swanson R.A., Sagar S.M. et al. Astrocyte survival and HSP70 heat shock protein induction following heat shock and acidosis // Glia.- 1996,-Vol. 17.-N2,-P. 147-59.

105. Palmer G., Louvion J.F., Tibbetts R.S. et al. Trypanosoma cruzi heat-shock protein 90 can functionally complement yeast // Mol Biochem Parasitol. 1995. - Vol. 70. - N1-2.- P. 199-202.

106. Parcellier A., Schmitt E., Gurbuxani S. et al. HSP27 is a ubiquitin-binding protein involved in I-kappaBalpha proteasomal degradation // Mol Cell Biol. 2003. - Vol. 23. - N16,- P. 5790-802.

107. Parks D.A. and Granger D.N. Xanthine oxidase: biochemistry, distribution and physiology // Acta Physiol Scand Suppl. 1986. - Vol. 548. P. 87-99.

108. Pelham H.R. Speculations on the functions of the major heat shock and glucose-regulated proteins // Cell. 1986. - Vol. 46. - N7 - P. 959-61.

109. Pirkkala L., Nykanen P. and Sistonen L. Roles of the heat shock transcription factors in regulation of the heat shock response and beyond // FASEB J.-2001.-Vol. 15,-N7,-P. 1118-31.

110. Puntschart A., Vogt M., Widmer H.R. et al. Hsp70 expression in human skeletal muscle after exercise // Acta Physiol Scand. 1996. — Vol. 157,-N4.-P. 411-7.

111. Rico-Sanz J., Frontera W.R., Mole P.A. et al. Dietary and performance assessment of elite soccer players during a period of intense training // Int J Sport Nutr. 1998. - Vol. 8. - N3,- P. 230-40.

112. Roti S., Iori E., Guiducci U. et al. Serum concentrations of myoglobin, creatine phosphokinase and lactic dehydrogenase after exercise in trained and untrained athletes // J Sports Med Phys Fitness. 1981. — Vol. 21. — N2,-P. 113-8.

113. Ryan A.J., Gisolfi C.V. and Moseley P.L. Synthesis of 70K stress protein by human leukocytes: effect of exercise in the heat // J Appl Physiol. 1991.-Vol. 70.-N1.-P. 466-71.

114. Salo D.C., Donovan C.M. and Davies K.J. HSP70 and other possible heat shock or oxidative stress proteins are induced in skeletal muscle, heart, and liver during exercise // Free Radic Biol Med. — 1991. — Vol. 11. N3,-P. 239-46.

115. Schlesinger M.J. Heat shock proteins: the search for functions // J Cell Biol. 1986.-Vol. 103,-N2,-P. 321-5.

116. Sharp F.R., Massa S.M. and Swanson R.A. Heat-shock protein protection // Trends Neurosci. 1999. - Vol. 22. - N3.- P. 97-9.

117. Shastry S., Toft D.O. and Joyner M.J. HSP70 and HSP90 expression in leucocytes after exercise in moderately trained humans // Acta Physiol Scand. 2002. - Vol. 175. - N2.- P. 139^6.

118. Shi Y., Mosser D.D. and Morimoto R.I. Molecular chaperones as HSFl-specific transcriptional repressors // Genes Dev. 1998. - Vol. 12. -N5.-P. 654-66.

119. Skidmore R, Gutierrez J.A., Guerriero V., Jr. et al. HSP70 induction during exercise and heat stress in rats: role of internal temperature // Am J Physiol. 1995. - Vol. 268. - N1 Pt 2,- P. R92-7.

120. Smith L.L. Acute inflammation: the underlying mechanism in delayed onset muscle soreness? // Med Sci Sports Exerc. — 1991. — Vol. 23. — N5.— P. 542-51.

121. Sondermann H., Becker Т., Mayhew M. et al. Characterization of a receptor for heat shock protein 70 on macrophages and monocytes // Biol Chem. 2000. - Vol. 381. - N12,- P. 1165-74.

122. Sonna L.A., Fujita J., Gaffin S.L. et al. Invited review: Effects of heat and cold stress on mammalian gene expression // J Appl Physiol. 2002. — Vol. 92.-N4.-P. 1725—42.

123. Sorichter S., Puschendorf B. and Mair J. .Skeletal muscle injury induced by eccentric muscle action: muscle proteins as markers of muscle fiber injury // Exerc Immunol Rev. — 1999. — Vol. 5. P. 5—21.

124. Sotiriadou S., Kyparos A., Mougios V. et al. Estrogen effect on some enzymes in female rats after downhill running // Physiol Res. 2003. — Vol. 52.-N6.-P. 743-8.

125. Srivastava P.K., Menoret A., Basu S. et al. Heat shock proteins come of age: primitive functions acquire new roles in an adaptive world // Immunity. 1998. - Vol. 8. - N6.- P. 657-65.

126. Struder H.K. and Weicker H. Physiology and pathophysiology of the serotonergic system and its implications on mental and physical performance. Part I // Int J Sports Med. 2001a. - Vol. 22. - N7.- P. 46781.

127. Struder H.K. and Weicker H. Physiology and pathophysiology of the serotonergic system and its implications on mental and physical performance. Part II // Int J Sports Med. 2001b. - Vol. 22. - N7.- P. 48297.

128. Sudhakar H.H. and Venkatesh D. Predator induced stress and its analgesic potential on estrous and anestrus albino rats // Indian J Physiol Pharmacol. 2001. - Vol. 45. - N2,- P. 227-32.

129. Tissieres A., Mitchell H.K. and Tracy U.M. Protein synthesis in salivary glands of Drosophila melanogaster: relation to chromosome puffs // J Mol Biol. 1974. - Vol. 84. - N3.- P. 389-98.

130. Tremblay M.S., Copeland J.L. and Van Helder W. Effect of training status and exercise mode on endogenous steroid hormones in men // J Appl Physiol. 2004. - Vol. 96. - N2,- P. 531-9.

131. Tsivitse S.K., McLoughlin T.J., Peterson J.M. et al. Downhill running in rats: influence on neutrophils, macrophages, and MyoD+ cells in skeletal muscle // Eur J Appl Physiol. 2003. - Vol. 90. - N5-6.- P. 633-8.

132. Udelsman R., Blake M.J., Stagg C.A. et al. Endocrine control of stress-induced heat shock protein 70 expression in vivo // Surgery. 1994. — Vol. 115.-N5.-P. 611-6.

133. Van Montfort R., Slingsby C. and Vierling E. Structure and function of the small heat shock protein/alpha-crystallin family of molecular chaperones // Adv Protein Chem. 2001. - Vol. 59. P. 105-56.

134. Varnier M., Sarto P., Martines D. et al. Effect of infusing branched-chain amino acid during incremental,exercise with reduced muscle glycogen content // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1994. - Vol. 69. - N1- P. 26-31.

135. Venetianer A., Pirity M. and Hever-Szabo A. The function of heat-shock proteins in stress tolerance // Cell Biol Int. — 1994. — Vol. 18. N6.-P. 605-15.

136. Walsh R.C., Koukoulas I., Garnham A. et al. Exercise increases serum Hsp72 in humans // Cell Stress Chaperones. 2001. - Vol. 6. - N4.- P. 386-93.

137. Walters T.J., Ryan K.L., Tehrany M.R. et al. HSP70 expression in the CNS in response to exercise and heat stress in rats // J Appl Physiol. — 1998. -Vol. 84.-N4.-P. 1269-77.

138. Warden S.J. Prophylactic abuse and recommended use of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) by athletes // Br J Sports Med.- 2009. Vol. -.

139. Wegele H., Muller L. and Buchner J. Hsp70 and Hsp90—a relay team for protein folding // Rev Physiol Biochem Pharmacol. 2004. — Vol. 151. P. 1—44.

140. Wegele H., Wandinger S.K., Schmid A.B. et al. Substrate transfer from the chaperone Hsp70 to Hsp90 // J Mol Biol. 2006. - Vol. 356. -N3.-P. 802-11.

141. Weiss S.J. Tissue destruction by neutrophils // N Engl J Med. 1989.- Vol. 320. N6.- P. 365-76.

142. Welch W.J. and Feramisco J.R. Purification of the major mammalian heat shock proteins // J Biol Chem. 1982. - Vol. 257. - N24.- P. 1494959.

143. Welsh F.A., Moyer D.J. and Harris V.A. Regional expression of heat shock protein-70 mRNA and c-fos mRNA following focal ischemia in rat brain// J Cereb Blood Flow Metab. 1992. - Vol. 12. -N2.-P. 204-12.

144. White C.N., Hightower L.E. and Schultz R.J. Variation in heat-shock proteins among species of desert fishes (Poeciliidae, Poeciliopsis) // Mol Biol Evol.- 1994. -Vol. 11.-N1.-P. 106-19.

145. Whitham M., Laing S.J., Jackson A. et al. Effect of exercise with and without a thermal clamp on the plasma heat shock protein 72 response // J Appl Physiol.-2007.-Vol. 103,-N4,-P. 1251-6.

146. Wolfe R.R., Wolfe M.H., Nadel E.R. et al. Isotopic determination of amino acid-urea interactions in exercise in humans // J Appl Physiol. — 1984.-Vol. 56.-N1.-P. 221-9.

147. Woodson J.C., Macintosh D., Fleshner M. et al. Emotion-induced amnesia in rats: working memory—specific impairment, corticosterone— memory correlation, and fear versus arousal effects on memory // Learn Mem. 2003. - Vol. 10. -N5.-P. 326-36.

148. Wright J.G., Fox D., Kerr J.C. et al. Rate of reperfusion blood flow modulates reperfusion injury in skeletal muscle // J Surg Res. 1988. — Vol. 44.-N6,-P. 754-63.

149. Xu Y. and Lindquist S. Heat-shock protein hsp90 governs the activity of pp60v-src kinase // Proc Natl Acad Sci USA.- 1993. Vol. 90. -N15,-P. 7074-8.

150. Yasuda K., Nakai A., Hatayama T. et al. Cloning and expression of murine high molecular mass heat shock proteins, HSP105 // J Biol Chem. — 1995. Vol. 270. - N50,- P. 29718-23.

151. Zhang X.S., Lue Y.H., Guo S.H. et al. Expression of HSP105 and HSP60 during germ cell apoptosis in the heat-treated testes of adult cynomolgus monkeys (macaca fascicularis) // Front Biosci. 2005. — Vol. 10. P. 3110-21.

152. Zou J., Salminen W.F., Roberts S.M. et al. Correlation between glutathione oxidation and trimerization of heat shock factor 1, an early step in stress induction of the Hsp response // Cell Stress Chaperones. 1998. — Vol.3.-N2.-P. 130-41.1.s1. Акт

153. Внедрения результатов научно-исследовательской работы» 200 £ г.

154. Внедрение результатов данной диссертационной работы позволило более точно оценить переносимость нагрузок средней интенсивности учащимися кафедры.

155. Зам. Заведующего кафедрой физического воспитания и спорта МГУ

156. Преподаватель кафедры физического воспитания и спорта МГУ1. Акт

157. Внедрения результатов научно-исследовательской работы2. ,г » A-o^S Cyajb200 g г.

158. Результаты данной работы позволили точнее оценить влияние нагрузок на антиоксидантную систему митохондрий.

159. Зав. кафедрой физиологии РГУФКСиТ доктор биологических наук, профессор1. Сонькин В.Д.y^f/^-c^S 0Ш