Влияние малоамплитудных физических полей на миграцию анионов антибиотиков через биологические барьеры мышечных тканей in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.05, кандидат химических наук Варакин, Антон Игоревич

• Варакин, Антон Игоревич
• кандидат химических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат химических наук Варакин, Антон Игоревич

ВВЕДЕНИЕ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Механизмы влияния физических полей на живые организмы и перенос молекул и анионов в биологических тканевых структурах.

1.2. Общая характеристика мембран.

1.2.1 Классификация мембран и мембранных процессов.

1.2.2 Стадии трансмембранного переноса.

1.3 Модели трансмембранного переноса в биологических тканевых структурах.

1.3.1 Классическая модель переноса ионов в липидных мембранах.

1.3.2 Строение липидно-белковых биологических мембран.

1.3.3 Модель «рыхлого квазикристалла».

1.3.4 Строение мышечной ткани.

1.4 Методы исследования переноса молекул и ионов в биологических мембранах.

1.5 Квантово-химическое моделирование как метод тонкого исследования сложных химических реакций и их механизмов.

1.5.1 Электростатический потенциал молекулярных систем как индекс реакционной способности в химии.

1.5.2 Оценка сродства к протону как способ решения некоторых химических задач.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние малоамплитудных физических полей на миграцию анионов антибиотиков через биологические барьеры мышечных тканей in vitro»

Физиотерапевтические методы лечения пользуются все большей популярностью последние несколько лет. Это объясняется тем, что использование современных мощных лекарственных препаратов, направленных на борьбу с локальным заболеванием, часто приводит к подавлению общего иммунитета организма и аллергизации. Кроме того, с помощью препаратов вводимых не только перорально, но и парэнтерально не всегда можно достичь достаточной терапевтической концентрации в органах и тканях [1]. Попытки преодоления этого барьера путем назначения повышенных доз антибиотика приводит к дисбактериозу. В связи с этим, проблема оптимизации методов лечения, использующих физические факторы и способствующих более глубокому и быстрому проникновению лекарственных препаратов в органы и ткани пациента, является очень актуальной.

В современной физиотерапии используются в основном четыре вида полей: электрическое, магнитное, электромагнитное и акустическое. Согласно [2,3], можно различать тепловое, силовое, «информационное», сепараторное и санирующее действие физических полей на ткани организма. В нашей работе мы коснемся проблемы воздействия этих полей на транспорт антибиотиков в мышечных тканях, т.е. их форетических свойств.

Ранее, в период с 1993 по 1999 год проводились комплексные исследования воздействия различных малоамплитудных физических полей и их комбинаций на процесс диффузии антибиотиков через модифицированные плацентарные мембраны [4]. Результатом исследований, кроме практического применения, выраженного в оптимизации процессов лекарственного фонофореза, явилось построение теории трансмембранной диффузии анионов антибиотиков через липидные мембраны на основании модели «рыхлого квазикристалла» [4]. Также в работе была проведена количественная оценка воздействия физических полей на перенос антибиотиков в модифицированных плацентарных мембранах.

Из коэффициентов диффузии, полученных в данной работе, можно сделать вывод об очень низкой скорости движения антибиотиков в тканях организма, подобных плаценте. В реальных клинических условиях согласно фармакокинетическим исследованиям перенос лекарственных препаратов в мышечных тканях идет значительно быстрее. Кроме того, особенностью плацентарных мембран, используемых в данной работе в качестве модели липидно-белкового барьера, является их высокая селективность по отношению к молекулам искусственно вводимых в организм веществ, которая выражается в их непосредственной физиологической функции - защите плода [5]. Совокупность перечисленных факторов ограничивает применимость результатов данной работы областью лекарственного физиофореза, связанного с лечением внутриполостных или осумкованных очагов воспаления, защищенных белково-липидными биологическими барьерами.

Все сказанное выше определяет актуальность темы диссертации и ее практическую значимость.

Научная новизна проводимых исследований заключается в использовании в качестве объекта мышечной ткани. Подобных исследований с использованием непосредственно мышечных тканей ранее не проводилось как в российских, так и в и зарубежных работах.

Нами впервые были получены следующие результаты:

• выяснена применимость модели «рыхлого квазикристалла» к объяснению закономерностей миграции анионов через биологические барьеры мышечных тканей in vitro с формулированием математических моделей ускоряющего влияния малоамплитудных физических полей (электрического, магнитного и виброакустического);

• показано, что проницаемость мышечных тканей по анионам левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина обусловлена их миграцией через межфибриллярные каналы с отрицательной энергией активации диффузии, объясняемой набуханием мышечных волокон и затратами тепловой энергии на вытеснение СГ из стенок каналов; произведен адекватный экспериментальному теоретический расчет потенциала электрической асимметрии мышечных барьеров, основанный на модифицированном приближении Гольдмана-Ходжкина-Катца; определено, что выпукло-вогнутые ВАХ биобарьеров мышечных тканей в изотоническом NaCl электролите с добавками левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина отвечают немодифицированному приближению Гольдмана при коэффициентах электроускорения миграции анионов антибиотиков линейно нарастающих с модулем приложенного электрического напряжения; установлено, что коэффициент магнитного ускорения миграции анионов левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина линейно увеличивается с ростом амплитуды магнитной индукции синусоидального переменного магнитного поля частотой 50 Гц, причем стимулирующий эффект «омагничивания» рабочих электролитов мышечном барьере составляет примерно 30 %, а остальные 70 % обеспечивает эффект магнитодинамической фарадеевской индукции; исследовано ускоряющее влияние виброакустических режимов работы аппарата «ВИТАФОН» на миграцию анионов левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина через барьеры мышечных тканей и выяснено, что режим №3 обеспечивает наибольший эффект ускорения при амплитудах вибраций 2,8-5,5 мкм; построена двухбарьерная математическая модель ускорения миграции антибиотиков, стимулированной смешанными синергетическими воздействиями малоамплитудных физических полей и показано, что значения оптимального числа сочетания полей близко к 2 для осумкованных липидно-белковыми тканями органов-мишеней и может достигать 4-5 для промежуточных мышечных барьеров, причем при часто встречающейся скрытой дислокации этих органов лимитирующим фармакокинетическим фактором становится протяженный мышечный барьер.

При выполнении диссертационной работы были использованы модифицированные методы определения концентраций антибиотиков предложенные в работе [4]. Была разработана новая методика проведения эксперимента и использованы новые варианты конструкций ячеек. В качестве источника форетического акустического поля впервые использовался прибор для виброакустической терапии «ВИТАФОН» [6]. Для получения дополнительной информации о механизмах влияния физических полей на перенос антибиотиков в мышечных тканях и влияния их строения на скорость переноса было впервые реализовано квантово-химическое моделирование их молекул и анионов. На основании полученных расчетных величин распределения электростатического потенциала, протонного сродства, дипольных моментов анионов и молекул антибиотиков сходного структурного строения был проведен анализ свойств, влияющих на трансмембранный перенос [7].

Цель работы заключалась в исследовании влияния малоамплитудных физических полей (постоянного электрического, переменного магнитного, виброакустического) на транспорт анионов антибиотиков левомицетина, оксациллина и бензилпенициллина в мышечных тканях in vitro.

Для реализации целей работы были поставлены следующие задачи:

• Разработка методик и изготовление ячеек специальной конструкции для исследования влияния физических полей на перенос антибиотиков в мышечных тканях.

• Исследование кинетики и механизма переноса антибиотиков в мышечных тканях.

• Исследование кинетики и механизма переноса антибиотиков в мышечных тканях при воздействии различной температуры, электрического, переменного магнитного и переменного акустического поля.

• Квантово-химическое моделирование молекул и анионов антибиотиков сходного строение для получения дополнительной информации о механизме влияния физических полей и строения анионов антибиотиков на перенос антибиотиков в мышечных тканях.

На защиту выносятся:

1. Результаты исследования кинетики переноса антибиотиков в мышечных тканях при различной температуре, установившие снижение скорости процесса переноса антибиотиков в интервале температур 31-42°С. Зависимости скорости протекания процессов переноса от строения молекул антибиотиков.

2. Результаты исследования вольт-амперных характеристик срезов мышечных тканей в модельном физиологическом растворе в присутствии левомицетина, оксациллина и бензипенициллина.

3. Результаты исследования кинетики переноса антибиотиков в мышечных тканях в постоянном электрическом поле в интервале напряжений на электродах-500/+500 мВ.

4. Результаты исследования кинетики переноса антибиотиков в мышечных тканях в переменном магнитном поле с индуктивностью 0-35мТл.

5. Результаты исследования кинетики переноса антибиотиков в мышечных тканях под действием переменного акустического поля, создаваемого прибором «ВИТАФОН».

6. Теоретические модели влияния постоянного электрического, переменного магнитного и переменного акустического поля на перенос анионов антибиотиков в мышечных тканях.

Автор выражает глубокую признательность за помощь в выполнении работы и моральную поддержку Серянову Юрию Владимировичу, Лясникову Владимиру Николаевичу, Мазур Вадиму Владимировичу, Панкратову Алексею Николаевичу, Дубовицкой Елене Григорьевне и всем сотрудникам лаборатории аналитической химии Троицкого филиала ОКБ ФИАН, а также ООО «Гарант-С» в лице Архиповой Татьяны Викторовны.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Электрохимия», Варакин, Антон Игоревич

124 ВЫВОДЫ

1. Выяснена применимость модифицированной модели «рыхлого квазикристалла» к интерпретации экспериментальных закономерностей миграции анионов левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина через биологические барьеры мышечных тканей, стимулированной малоамплитудными воздейсвиями электрических, магнитных и виброакустических полей in vitro.

2. Показано, что проницаемость мышечных тканей по анионам левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина обусловлена их миграцией через заряженные • межфибриллярные каналы с отрицательной энергией активации диффузии, объясняемой набуханием мышечных волокон и затратами тепловой энергии на вытеснение СГ из стенок каналов.

3. Проведен адекватный эксприментальному теоретический расчет потенциала электрической асимметрии мышечных барьеров, основанный на модифицированном приближении Гольдмана-Ходжкина-Катца.

4. Определено, что выпукло-вогнутые ВАХ биобарьеров мышечных тканей в изотоническом NaCI электролите с добавками левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина отвечают немодифицированному приближению Гольдмана при коэффициентах электроускорения миграции анионов антибиотиков линейно нарастающих с модулем приложенного электрического напряжения.

5. Установлено, что коэффициент магнитного ускорения миграции анионов левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина линейно увеличивается с ростом амплитуды магнитной индукции синусоидального переменного магнитного поля частотой 50 Гц, причем стимулирующий эффект «омагничивания» рабочих электролитов мышечном барьере составляет примерно 30 %, а остальные 70 % обеспечивает эффект магнитодинамической фарадеевской индукции.

6. Исследовано ускоряющее влияние виброакустических режимов работы аппарата «ВИТАФОН» на миграцию анионов левомицетина, бензилпенициллина и оксациллина через барьеры мышечных тканей и выяснено, что режим №3 обеспечивает наибольшие ускорения при амплитудах вибраций 2,8-5,5 мкм.

7. На основе проведенных теоретических и экспериментальных исследований впервые построена двухбарьерная математическая модель ускорения миграции антибиотиков, стимулированной смешанными синергетическими воздействиями малоамплитудных физических полей и показано, что значения оптимального числа сочетания полей близко к 2 для осумкованных липидно-белковыми тканями органов-мишеней и может достигать 4-5 для промежуточных мышечных барьеров, причем при часто встречающейся скрытой дислокации этих органов лимитирующим фармакокинетическим фактором становится протяженный мышечный барьер.

8. Анализ большого числа литературных источников по клинической практике использования аппаратов антибиотической физиотерапии в урологии, стоматологии и офтальмологии показал корректность определения оптимальных чисел смешения малоамплитудных физических полей (от2 до 5) по отчетливой корреляции между компромисным индексом оптимизации и относительной терапевтической эффективностью с преимуществами синергетических приборов по результирующему коэффициенту форетического ускорения, суммарной биопараметричности и сенситивности.

9. Полученные результаты воплощены в конструкциях аппаратов антибиотиковой физиотерапии «Интрамаг», «Интратерм», «Ласт», «Атос», выпускаемых ООО «ТРИМА» (г. Саратов) и представляю интерес для разработчиков приборов серии «ВИТАФОН» (г. Санкт-Петербург).

10. Методом РМЗ проведено квантово-химическое моделирование влияния химического строения левомицетина и некоторых антибиотиков пенициллинового ряда на их перенос в биологических барьерах, с оптимизацией пространственного строения, расчетом дипольных моментов, распределения электростатического потенциала, сродства к протону и энергий гидратаций, позволившие обосновать найденные экспериментально корреляции между трансбарьерной проницаемостью и плотностью эффективного отрицательного заряда, геометрией строения, размерами и гидрофобностью анионов антибиотиков.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Как видно из обзора литературы, в огромной информационной сфере, посвященной изучению молекулярного и ионного транспорта в биологических барьерах и влиянию различных физических полей на живой организм, существует большое количество пробелов, обусловленных сложностью в получении наиболее приближенных к реальности искусственных мембран и неоднозначности физического механизма полевого воздейстия, вызванного сложным и многообразным строением биологических объектов.

Мы считаем, что применение многоуровнего подхода к исследованию локального переноса антибиотиков в тканях организма под действием малоамплитудных физических полей позволит серьезно расширить информационную базу для понимания механизмов данных процессов. Применение в качестве объекта исследования не искусственных, а натуральных мышечных тканей позволит получить наиболее приближенные к реальным экспериментальные данные. КвантОво-химическое моделирование позволит получить более подробную информацию о механизме взаимодействия анионов антибиотиков с физическими полями и структурными элементами биологических мембран.

Отсутствие на данный момент других адекватных объекту теоретических моделей, кроме модели «рыхлого квазикристалла», требует рассмотрения ее применимости к такой же неоднородной биологической структуре, какой является мышечная ткань.

Именно указанные обстоятельства определили экспертное решение по постановке задач нашей работы, а именно, теоретическому исследованию молекул и анионов антибиотиков; разработке и реализации методик по изучению транспорта анионов антибиотиков в мышечных тканях; исследованию влияния температуры, постоянного электрического, переменного магнитного и акустического полей на перенос анионов антибиотиков и выяснении применимости «модели рыхлого квазикристалла» к переносу анионов в мышечных тканях.

2. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДИКИ

2.1 Предварительные исследования - оптимизация эксперимента

2.1.1 Оборудование и реактивы Оборудование

1. Спектрофотометр однолучевой биохимический GENESYS 2 Gamry Instruments (USA) 2001 г. выпуска.

2. Термостат MLW-5 (GDR) на 16 литров со снабжением внешнего контура.

3. Ячейка 1 из плексигласа с внешней рубашкой для исследования электростимулированной диффузии антибиотиков.

4. Ячейка 2 из плексигласа с внешней рубашкой для исследования воздействия магнитного и акустического поля на диффузию антибиотиков.

5. Весы аналитические чашечные «ВАР 200» с точностью до 0.00005 г 2000 г. выпуска.

6. Весы аналитические электронные с точностью до 0,005 г OHAUS CORPORATION (USA) 2000 г. выпуска. Магнитная мешалка.

7. Вольтамперметр комбинированный цифровой Щ300 с точностью до 10 пА.

8. Источник постоянного тока Б5-47.

9. Источник магнитного поля.

10. Аппарат для виброакустической терапии «ВИТАФОН».

11. ЛатрЛ-1.

12. Устройство для нарезки образцов мембран.

13. Пипетки поршневого типа емкостью на 5,10, 25 мл.

14. Набор кварцевых кювет с толщиной поглощающего слоя 1 см.

15. Колбы емкостью на 25, 50, 100, 200 мл, 1 л.

16. Колбонагреватель.

17. Штативы.

18. Термометр до 100°С.

19. Шприц медицинский на 1 мл (диабетический).

Реактивы

1. Левомицетин (хлоромицетин, хлорамфеникол), ФС42-27680-91, очищенный путем перекристаллизации из ацетона (ч.д.а.), затем из воды и высушенный до постоянной массы в сушильном шкафу при 40° С.

2. Оксациллин (мед.), ФС 42-2590-88.

3. Бензилпенициллин (мед.), ГФ X, СТ. 95.

4. Хлорид натрия (х.ч.), ГОСТ 4233.

5. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709.

6. Ацетон (ч.д.а.), ГОСТ 2603-79.

7. Образцы мышечных тканей, приготовленные согласно разработанной методике.

2.1.2 Выбор оптимальных условий проведения измерений концентраций антибиотиков при изучении их диффузии

Для реализации оптимальных условий проведения измерений концентраций антибиотиков и достижения правильности проведения эксперимента при изучении их диффузии в мышечных тканях был выполнен ряд предварительных работ.

Были получены спектры антибиотиков бензилпенициллина, оксациллина и левомицетина в водном растворе и в растворе 0,9% хлорида натрия, имитирующем физиологический раствор, в интервале длин волн от 200 до 700 нм. Для этого использовался однолучевой спектрометр GENESYS-2 компании «Gamry Instruments» (USA), адаптированный для биохимических целей. Для получения спектров применялись кюветы из кварцевого стекла L=1 см. Растворы антибиотиков содержали левомицетина и бензилпенициллина 0,01 %, оксациллина 0,004%. Использование столь низких концентраций растворов связано с очень высокой чувствительностью спектрометра GENESYS 2. Присутствие в растворе хлорид ионов и ионов натрия не изменило спектры растворов антибиотиков в данной области.

Затем были получены спектры таких же растворов, но в присутствии 1 грамма измельченной мышечной ткани конечностей свиньи и коровы. Изменения в спектре, вызванные присутствием взвешенных частиц мышечных тканей удалось нейтрализовать фильтрованием через бумажный фильтр.

2.1.3 Методика исследования мешающего влияния биологических жидкостей и частиц тканей на величину измеряемой оптической плотности растворов исследуемых антибиотиков

В колбы на 50 мл с раствором антибиотика 0,2% помещалась навеска измельченной мышечной ткани. Колбы термостатировались в течении двух часов при температуре 37°С. Затем пипеткой на 5 мл из каждой колбы отбирались пробы для левомицетина и бензилпенициллина объемом 5 мл, для оксациллина - 2мл. Отобранные объемы растворов помещались в колбы на 100 мл, доводились до метки соответственно дистиллятом или раствором 0,9% NaCl и тщательно перемешивались. Извлекался небольшой объем раствора из каждой колбы и фильтровался через двойной фильтр в кварцевую кювету для измерений.

На графических интерпретациях спектров были получены очень четкие и острые пики для всех трех антибиотиков: для левомицетина при 280 нм, для бензилпенициллина при 215 нм, для оксациллина 205 нм, что свидетельствует о высокой чистоте исходных веществ. Наличие в растворе хлорид ионов, катионов натрия и продуктов экстракции из мышечных тканей не влияло на форму и четкость пиков. Таким образом, на основании проведенных экспериментов были выбраны длины волн для измерения оптической плотности растворов антибиотиков для количественного определения последних.

2.2 Техника проведении эксперимента по изучению диффузии антибиотиков через биологические тканевые барьеры 2.2.1 Описание ячейки № 1 для исследования диффузии антибиотиков через срезы мышечных тканей при различной температуре и под действием электрических и звуковых полей

Рис.2.1. Общий вид ячейки для исследования переноса антибиотиков в мышечной ткани.

Ячейка для исследования переноса антибиотиков через тканевые барьеры (рис.2.3) представляет собой параллелепипед 1 с внешней водяной рубашкой 2. Вся конструкция изготовлена из плексигласовых пластин, соединенных водостойким, прозрачным клеем «Момент-кристалл». Через штуцеры 3 и 4 внешняя рубашка ячейки соединяется с помпой термостата. Ячейка снабжена магнитной мешалкой 12 и термометром 10 в верхней крышке 9 имеются кронштейны для крепления графитовых электродов. Две камеры ячейки 5 и 6 разделяются мембраной В, края которой зажимаются между двух плексигласовых рамок 7, что создает возможность поддерживать герметичность между камерами и постоянную величину поверхности мембраны.

Метод закрепления среза мышечной ткани подробно представлен на рис. 2.2. На внешней поверхности одной из рамок 4 для большей герметичности приклеена прокладка из вакуумной резины 5. Мембрана, зажатая между рамками 3 и 4 на вакуумной смазке, плотно с усилием вставляется по принципу пенала в специальный зажим, состоящий из двух П-образных пластин 1 и 2, расположенный на границе двух камер ячейки объемом по 12,5 см2. Конструкция позволяет реализовать диффузию ионов исключительно только сквозь поверхность мембраны и исключает их проникновение через соединительные швы.

Рис. 2.2. Метод закрепления среза мышечной ткани в ячейке.

Установка для проведения исследований состоит из измерительной ячейки, термостата с питанием внешнего водяного контура, магнитной мешалки штатива, на котором крепится ячейка. В случае исследования воздействия внешнего электрического поля ячейка снабжается крышкой с креплениями для инертных графитовых электродов, расположенных симметрично на максимальных расстояниях от мембраны, а также источником постоянного тока. В случае исследования воздействия акустического поля используется дополнительный кронштейн с закрепленными на нем излучателями прибора «ВИТАФОН».

Рис. 2.3. Общий вид установки для исследования переноса антибиотиков через тканевые биологические барьеры.

2.2.2 Методика количественного определения антибиотиков в водном и модельном физиологическом растворах Построение калибровочной характеристики для определения концентрации антибиотиков

В колбу на 200 мл помещают навеску антибиотика массой 400 мг (150 из них используется для заполнения одной из камер ячейки) и доводят до метки 0,9% раствором NaCl, таким образом, получается 0,2% раствор. Затем из этой колбы пипеткой отбирается 5 мл (бензилпенициллин, левомицетин) 2,5 мл (оксациллин) раствора и переносится в колбу на 100 мл, она доводится до метки 0,9% NaCl. После перемешивания получается раствор антибиотиков соответственно 0,01% и 0,005%. Путем последовательного разбавления в 2, 4, ., п раз получаются две серии растворов с массовыми концентрациями 0,01; 0,005; 0,0025; 0,00125; 0,000625 % и 0,004; 0,002; 0,001; 0,0005; 0,00025%. Растворы левомицетина хранятся в холодильнике без изменения в течение двух недель. Приготовление калибровочных растворов бензил пенициллина и оксациллина производится каждый день, вследствие их неустойчивости-замутнения, вызванного процессом гидролиза. Далее на спектрофотометре измеряется оптическая плотность всех растворов для левомицетина при 280 нм, для оксациллина при 205 им, для бензилпенициллина при 215 нм в соответствии с положением максимумов спектров их индивидуальных растворов. Строится график зависимости оптическая плотность (А) -концентрация (С, %).

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Варакин, Антон Игоревич, 2004 год

1. Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Диебактериозы и эубиотики. // Тезисы докл. Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского. М., 1996; С. 42.

2. Шило М.А. О биотропных параметрах магнитных полей // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечебной физкультуры. 1981.- №3. - С. 61-63.

3. Райгородский Ю.М., Семячкин Г.П., Татаренко Д.А. Комплексный подход к разработке магнитотерапевтической техники на примере аппарата «Атос» // Медицинская техника. 1995. - №4. - С. 32-35.

4. Райгородский Ю.М., Серянов Ю.В., Лепилин А.В. Форетические свойства физических полей и приборы для оптимальной физиотерапии в урологии, стоматологии и офтальмологии. Саратов: Изд-во саратовского университета, 2000.-С. 11-103.

5. Федорова Калашникова Е.П. Плацента и ее роль при беременности. М.: Медицина, 1986. - 252 с.

6. Федоров В. А. Витафон. Лечение и профилактика заболеваний. СПб: Вита Нова, 2001. -256 с.

7. Улащик B.C. Теория и практика лекарственного электрофореза. Минск, 1976.-137 с.

8. Улащик В. С. Внутритканевый лекарственный электрофорез: обоснование, особенности и опыт клинического применения // Здравоохранение. 1996. - № 7. - С. 54-56.

9. Binhi V.N. An analytical survey of theoretical studies in the area ofmagnetoreception. // Electromagnetic Fields: Biological Effects and Hygienic

10. Standardizatm, Geneva: .World Health Organization, - 1999. - P. 155-170. /

11. Lerchl, K.O. Nonaka and Reiter R.J. Pineal gland "magnetosensitivity" is a consequence of induced electric eddy currents // J. Pineal Res. 1990. - № 10. - P. 109-116.

12. Schimmelpfeng J. H. Dertinger. Action of a 50 Hz magnetic field on proliferation of cells in culture // Bioelectromagnetics. 1997. - №18. - P. 177-183.

13. Frohlich H. Kremer F. Coherent Excitations in Biological Systems. New York: Springer-Verlag, - 1983.

14. Fruhlich H. Theoretical Physics and Biology // Biological Coherence and Response to External Stimuli / Ed. by Fruhlich H. New York: Springer-Verlag, 1988.

15. Синицин Н.И., Петросян В.И., Елкин B.A. Девятков Н.Д., Белецкая О.В. Специфическая роль системы "ММ-волны вода" в природе // Биомедицинская радиоэлектроника. - 1998, - Т.1, - С. 5-23.

16. Хургин Ю.И. Чернавский Д.С., Хургин Ю.И. Физические механизмы взаимодействия белковых макромолекул с КВЧ излучением // Миллиметровые волны в медицине и биологии/ Под реакцией акад, Девяткова Н.Д. М.: Издательство ИРЭ АН СССР, 1989.

17. Хургин Ю.И. Миллиметровые волны нетепловой интенсивности в медицине. М., 1991. -Ч. 3. - С. 545-547.

18. Bresler S.E., Bresler V.M, Kazbekov E.N. The influence of the magnetic ffld on the active transport of organic acids in the choroid plexus of the rabbit // Biophys. Biochcm. Acta. 1979. - Vol. 550, - P. 10.

19. Бобрешова O.B., Голицин В.Ю., Тимашев С.Ф. Влияние неоднородного магнтного поля на интенсивность электромиграционного транспорта // Электрохимия. 1990. - Т.26, №1. - С. 58-61.

20. Бреслер С.Е., Казбеков Э.Н., Сумбаев И.О. Влияние сильных магнитных полей на жидкокристаллическую структуру бислойных липидных мембран // В сб. «Биологическое действие электромагнитных полей». Пущино, 1982. - С. 187.

21. Дубров А.П. Влияние природных электрических и магнитных полей на проницаемость биологических мембран // Материалы II Всесоюзного симпозиума по изучению влияния магнитных полей на биологические объекты. -М.: Наука, 1969.-С. 79-81.

22. Данилов В.И. О возможном механизме влияния электромагнитного поля Земли на биологические объекты мира // Конференция "Экология и геофизика", посвященная памяти члена-корреспондента РАН Каруса Е.В. Тезисы докладов. -Дубна, 1995.-С. 125.

23. Дернов А.И. и др. О биологическом действии магнитных полей // Военно-медицинский журнал. 1968. - N.3. - С. 43-48.

24. Дорфман Я.Г. Физические явления, происходящие в живых объектах под действием постоянных магнитных полей // Влияние магнитных полей на биологические объекты. -М.: Наука, 1971. С. 15-23.

25. Друзь В.А. Общие закономерности реакции живой системы на магнитное поле как фактор внешней среды // Реакции биологических систем на слабые магнитные поля. М.: Наука, 1971. - С. 26-29.

26. Девятков Н.Д., Бецкий О.В. Особенности взаимодействия миллиметрового излучения низкой интенсивности с биологическими объектами // Применение миллиметрового излучения низкой интенсивности в биологии и медицине. М.: ИРЭ, 1985.-С. 6-20.

27. Девятков Н.Д., Голант М.Б., Тагер А.С. Роль синхронизации в воздействии слабых электромагнитных сигналов миллиметрового диапазона волн на живые организмы // Биофизика. 1983. - Т.28. Вып.5. - С. 895-896.

28. Применение ультразвука в медицине. Физические основы / Под ред. К.Хилла; Пер. с англ. М.: Мир, 1989. - 567 с.

29. Gotovski Y.V. et al. Electropunctural diagnostics and therapy with vegetative resonance test "IMEDIS-TEST" M.: "IMEDIS", 2000. 350 c.

30. Adair R.K Constraints on biological effects of weak extremely-low-frequency electromagnetic fields, Phys. Rev. -1991. №43. - P.1039-1048.

31. Самохин В., Готовский Ю.В. Электропунктурная диагностика и терапия по методу Р. Фолля. М.: "ИМЕДИС", 1995. - 447 с.

32. Готовский Ю.В., Косарева Л.Б., Блинков И.Л., Самохин А.В. Экзогенная биорезонансная терапия фиксированными частотами. Методические рекомендации. М.: "ИМЕДИС", 2000. - 96 с.

33. Cyclotron resonance in membrane transport/in Interactions Between Electromagnetic Fields and Cells / H.P. Schwan A. Chiabrera, C. Nicolini and, Eds., Plenum, 1985, New York, P. 281-295.

34. P. Schwan and L. D. Sher, 'Electrostatic Field Induced Forces and their Biological Implication, In Dielectrophoretic and Electrophoretic Deposition // The Electrochem. Soc, Inc., 1969, - P. 107.

35. K. R. Foster, Mechanisms of Interaction of ELF Fields and Biological Systems // Radiat. Prot. Dosim. 2003.- Vol.106, №4, - P. 301-310.

36. K. R. Foster, J. A. D'Andrea, S. Chalfm, D.J. Hatcher. Thermal modeling of millimeter wave damage to the primate cornea at 35 GHz and 94 GHz // Health Physics. 2003. - Vol. 84, № 6. - P. 764-769.

37. Виброакустика в медицине. Материалы I Всероссийской научно-практической конференции. СПб, Россия, 8-9 июня 2000. - 250 с.

38. Эммануэль Н.М., Кнорре Д.Г. Курс химической кинетики. М.: Химия, 1974.-400 с.

39. Якубке Х.Д., Ешкайт X. Аминокслоты, пептиды, белки / Пер. с нем.; Под. ред. Ю.В. Митина. М., 1985. 455 с.

40. Агеев Е.П. Мембранные процессы разделения // Крит, технол. мембраны. -2001.-№9. -С. 42-56.

41. Владимиров Ю.А. Лекции по биологической и медицинской физике, from http://ns.fbm.msu.ru/Academics/Manuals/BioPhys/index-r.html.

42. Биологические мембраны. Двенадцать очерков о структуре, свойствах и функциях мембран /Под ред. Д. Парсона/ М.: Атомиздат, 1978.

43. Антонов В.Ф. Липидные поры: Стабильность и проницаемость мембран // Сорос, образ, ж. 1998. - № 10. - С. 10-17.

44. Фидлей Дж. С., Эванс В.Х. Биологические мебраны. М., 1990. 560 с.

45. Берестовский Г.Н. Динамическая структура липидного бислоя. М., 1981. -187 с.

46. Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. М., 1982. -252 с.

47. Николаев Н.И. Диффузия в мембранах. М., 1980. 232 с.

48. Ротинян А .Л., Тихонов К.И., Шошина И. А. Теоретическая электрохимия. Л., 1981.-423 с.

49. Бирке Н., Майер Дж. Введение в высокотемературное окисление металлов / Пер. с англ.; под ред. Е.А. Ульянина. М., 1987. 187 с.

50. Феттер К. Электрохимическая кинетика / Пер. с нем.; Под. Ред. Я.М. Колотыркина. М., 1967. 856 с.

51. Варакин А.И., Лясников В.Н. Исследование проницаемости мышечных тканей по отношению к анионам оксациллина, бензилпенициллина и левомицетина при различной температуре // Изв. ВУЗов. Сер. Химия и химическая технология.- 2003. т.46. вып.8, - С. 130-134.

52. Варакин А.И. Исследование проницаемости срезов мышечных тканей по отношению к анионам бензилпенициллина, оксациллина и левомицетина в постоянном электрическом поле // Изв. ВУЗов. Сер. Химия и химическая технология. 2004. - т.47. вып. 1, -С. 72-77.

53. Варакин А.И. Серянов Ю.В. Исследование проницаемости срезов мышечных тканей по отношению к анионам оксациллина и левомицетина в переменном магнитном поле // Изв. ВУЗов. Сер. Химия и химическая технология. 2004. - т.47. вып.1, - С. 150-154.

54. Гусев Н.Б. Молекулярные механизмы мышечного сокращения //Сорос, образ, ж. 2000 - Т.6, №8. - С. 24-29.

55. Бакеева Л.Е., Ченцов Ю.С. Митохондриальный ретикулум: Строение и некоторые функции // Итоги науки. Общие проблемы биологии. 1989. 60 с.

56. Ходжкин А. Нервный импульс / Пер.с англ. Л.М. Цофиной; Под ред. и с предисл. д-ра биол. наук. Е.А. Либермана. М., 1965. 125 с.

57. Катц Б. Нерв, мышца и синапс / Пер. с англ. Ю.И. Дашкевича; Под ред. И с предис. Д-ра биол. Наук B.C. Гурфинкеля. М., 1968. 220 с.

58. Регистрация одиночных каналов / Под ред. Б. Сакмана, Э. Неера. М.: Мир, 1987.-448 с.

59. Liebovitch L.S. Krekora P. The physical basis of channel kinetics: the importance of dynamics, Proceedings of the Institute for Mathematics and its Applications (IMA) at the University of Minnesota, in press, 2002.

60. Чизмаджев Ю.А. Мембранная биология:от липидных бислоев до молекулярных машин. // Сорос, образ, ж. 2000.- т.6, N.8. - С. 12-17.

61. Шемякин М.М. и др. Химия антибиотиков, т.1. 3 изд., М., 1961, 950 с.

62. Gribov L.A., Sawin S.B. The Mechanism of the Distant Substutuent Effect on Molecule Reactivity // J. Mol. Struct. 1981.-Vol.71, № 2. P. 263-278.

63. Gribov L.A., Sawin S.B., Reichstat M.M., Orlov M.Yu. The Mechanism of the Remote Polar Substituents Effect on Formation of Ion-Molecular Complexes // J. Mol. Struct. 1982.-Vol. 88,№1.-P. 171-182.

64. Соколов Н.Д. Электрические силы и межмолекулярное взаимодействие // III Всесоюзн. конф. по электрич. свойствам молекул. Казань, 18-20 мая 1982г. Тез. докл.- Казань: АН СССР, 1982, С. 17.

65. Catalan J., Perez P., Yanez M.A. Teoretical Study of the Protonation of Metylindole Derivatives // Tetrahedron, -1982.- Vol. 38, №24. P. 3693-3699.

66. Ghio C., Tomasi J. The Protonation of Three- membered Ring Molecules: The Ab Initio SCF Versus the Electrostatic Picture оf the Proton Approach //Theoret. Chim. Acta.- 1973. Vol.30, №2, - P. 151-158.

67. Пантелеев Й.А., Крашенинников А.А. О возможности описания кислотно-основных свойств молекул пиридина и его производных с помощью карт электростатического потенциала // Теорет. и эксперим. химия. 1978. - Т. 14, № 6. - С. 779-804.

68. Соколова И.В., Лобода Л.И. Изучение структуры протониро—ванных форм кумарина и его оксизамещенных // Ж. структур, химии. 1982. - Т.23, №6. - С. 35-41.

69. Болотин А.Б., Болотин В.А., Грибов Л.А., Тищенко Ю.А. Влияние внутренних вращений в молекулах дипиридилов на их способность к протонированию.-Лит. физ. сб., 1982, Т.22, № 4, С. 83-84.

70. De К ock R., Jasperse С. S tudies of Р roton A ffinity a s а Р robe of Е lectronic Structure. General Overview // Inorg. Chem. 1983. - Vol. 22, № 26. - P. 3839-3843.

71. Olivella S., Urpi F., Vilarrasa J. Evaluation of MNDO Calculated Proton Affinities // J. Comput. Chem. 1984. - Vol. 5, №3. - P. 230-236.

72. Ozment J.L., Schmiedekamp A.M. Proton Affinities of Molecules Containing Nitrogen and Oxygen: Comparing Ab Initio and Semiempirical Results to Experiments // Int. J.Quant. Chem. 1992. - Vol.43. - P. 783-800.

73. Учаева И.М. Реакционная способность диарильных гетероциклических аминосоединений в окислительно-восстановительных процессах: Дис. . канд. хим. наук. Саратов: СГУ, 1997. - 204 с.

74. Pankratov A.N., Shchavlev А.Е. Semiempirical Quantum Chemical РМЗ Computations and Evaluations of Redox Potentials, Basicities and Dipole Moments of the Diphenylamine Series As Analytical Reagents // Canad. J. Chem. 1999. - Vol. 77,№ 12.-P. 2053-2058.

75. Панкратов A.H., Щавлев А.Е. Протолитические, окислительно-восстановительные и полярные свойства реагентов ряда дифениламина: квантовохимическая оценка // Журн. аналит. химии. 2001. - Т. 56, № 2. - С. 143-150.

76. Pankratov A.N., Uchaeva I.M. A Semiempirical Quantum Chemical Testing of Thermodynamic and Molecular Properties of Arsenic Compounds // J. Mol. Struct. Theochem. 2000. - Vol. 498, № 1-3. - P. 247-254.

77. Корыта И., Дворжак И., Богачкова В. Электрохимия, М., Мир,1977. 472 с.

78. Добош Д. Электрохимические константы / Пер. с англ.; Под ред. Я.М. Колотыркина. М., 1980. 365 с.

79. Измайлов Н.А. Электрохимия растворов. Изд.З-е, испр., М.: Химия, 1976. 490 с.

80. Кантор Ч., Шиммел П. Биофизическая химия. В 3-х томах. М., Мир, 1985.

81. Hummel Z. The effect of different alkali metal ions on the release of muscle potassium during glycerol treatment // Physiol. Chem. Phys. Med NMR. 1983. -Vol. 15,№2-P. 177-180

82. Negendank W. and Shaller C. Simultaneous net accumulation of both K+ and Na+ by lymphocytes at 0° С // Bioc. Biop. Acta. 1981. - Vol. 640. - P. 368-373.

83. Ling, G.N. A Revolution in the Physiology of the Living Cell, Malabar, Florida: Krieger Publishing Company, -1992. 404 p.

84. Elliott G.F. Donnan and osmotic effects in muscle fibres without membranes // J. Mechanochem. Cell Motil. 1973. - №2. - P. 83-89.

85. Фролов Ю.Г. Курс коллоидной химии (Поверхностные явления и дисперсные системы).- М.: Химия, 1982. 400 с.

86. Джанколи Д. Физика / Пер.с англ.; Под. ред. Е.М. Лейкина. М., 1989. -667 с.

87. Кокшаров С. А. Развитие метода магнитно-химической активации процессов красильно-отделочного производства // Ж.тех.хим. 1998. - №1 - с. 16-18.

88. Лоран О.Б., Гумин Л.М., Суворов А.П. и др. Паспорт и инструкция по применению аппарата «Интрамаг». КСТЯ. 941519.004 ТУ. Саратов, 1998.- 32 с.

89. Лоран О.Б., Гумин Л.М., Гольбрайх Е.Б., Райгородский Ю.М. Паспорт и инструкция по применению приставки «Интратерм» к аппарату «Интрамаг»: Техническое описание и инструкция по эксплуатации. Саратов, 1997. 15 с.

90. Райгородский Ю.М. Аппарат для лазеротерпии в урологии гинекологии «Ласт-2»: Техническое описание и инструкция по эксплуатации. Саратов, 1997. 15 с.

91. Паспорт и инструкция по применению аппарата «Атос» / А.П. Нестеров, П.И. Сапрыкин, А.В. Лепилин и др. Саратов, 1998. 12 с.

92. Аппарат для лазеростимуляции в офтальмологии «Ласт-1» / А.П. Нестеров, В.В. Бакуткин, Ю.М. Райгородский и др. Паспорт, техническое описание и инструкция по эксплуатации. Саратов, 1998. 12 с.

93. Патогенетическая электролазерная терапия хронического простатитфа аппарате «Ярило» / Калинина С.Н., Тиктинский О.Л., Мишанин Е.А. и др. // Материалы IX Всероссийского съезда урологов. М., 1997. С. 227-228.

94. Электролазерная терапия на аппарате «Ярило» у больных хроническим хламидийным простатитом / Калинина С.Н., Тиктинский О.Л., Новикова Л.И. и др. // Урология и нефрология. 1997. - №4. - С. 25-27.

95. Шильман А.И., Блюмберг Б.И., Райгородский Ю.М. Аппарат «Интрамаг» в терапия урогенитального микоплазмоза // Андрология и генитальная хирургия. 2000. - №1. - С. 29.

96. А.С. 1362482 СССР VRB А 61№1/30. Устройство для фонофореза / Ю.М. Райгородский, С.Н. Мангушев. М.Ю. Максимов и др. (СССР) №3793067/28-14; Заявл. 21.09.84. Опубл . 30. 12. 87 // Открытия. Изобретения. 1987.- №48. - С. 92.

97. Чеботарев В.В., Беляева Н.В., Гоннова Н.Л. Лечение больных осложненными формами заболеваний мочеполовых органов с использованием аппарата «Интрамаг» с приставкой «Интратерм». Метод. Указ. Ставрополь. 12 с.

98. Суворов А.П., Гольбрах Е.Б., Райгородский Ю.М. Использование аппарата «Интрамаг» при лечении больных хроническим уретритом // Вестн. Дерматовенерологии. 1994. - №3. - С.45.

99. Магнитофорез в комплексной терапии заболеваний пародонта / Р.И. Михайлова, А.И. Грудянов, А.Г. Колесник и др. // Стоматология. 1986. - №1 -С. 17-18.

100. Применение бегущего магнитного поля при использовании титановых имплантатов / А.В. Лепилин,, В.А. Булкин,.В.Б. Рыжков и др. // Тезисы докладов конф. « Новые концепции и технологии в производстве и применении имплантатов». Саратов, 1993. С. 17-19.

101. Применение электромагнитного поля для лечения парадонтоза / Л.Н. Челидзе, Т.Г. Шгенти, Э.С. Девдариани и др. // Стоматология. 1986. №2 - С. 91-92.

102. Магнитотерапия при переломах нижней челюсти / Р.И. Михайлова, З.А. Комарова, В.А. Семкин и др. // Стоматология.-1982. №2 - С.41-42.

103. Использование бегущего реверсивного магнитного поля для лечения переломов нижней челюсти / А.В. Лепилин, Ю.М. Райгородский, А.А. Рябов идр.: Тезисы докладов 28 науч. практ. конф. врачей Ульяновской области. Ульяновск, 1993. 156 с.

104. Лазерная стимуляция и магнитотерапия переменным бегущим магнитным полем в лечении внутриглазных кровоизлияний при афакции и артифакции / П.И. Сапрыкин, Е.С. Сумаркова, Д.Л. Басков и др. // Офтальмологический журн. 1991. - №6. - С. 332-334.

105. Бакуткин В.В., Каменских Т.Г. О сочетанных методах физиотерапевтического лечения частичной атрофии зрительных нервов // Материалы научн. практ. конф. офтальмологов «Актуальные проблемы современной офтальмологии». Саратов, 1996. С. 213- 214.