Влияние ионизирующих излучений на кальцийаккумулирующую способность мембран лимфоцитов (экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат медицинских наук Швыдюк, Олег Николаевич

• Швыдюк, Олег Николаевич
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Швыдюк, Олег Николаевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ О НАРУШЕНИИ ОБМЕНА ИОНОВ КАЛЬЦИЯ В МЕХАНИЗМАХ ЛИМФОПЕНИИ ПРИ РАДИАЦИОННОМ ПОРАЖЕНИИ ОРГАНИЗМА (обзор литературы).

1.1 Ранние пострадиационные изменения функционального состояния лимфоцитов.

1.2 Влияние ионизирующего излучения на структуру и функцию клеточных мембран.

1.3 Значение оксидативного стресса в пострадиационной клеточной гибели.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Общая характеристика экспериментального материала.

2.2 Экспериментальные модели.

2.2.1 Моделирование радиационных поражений от равномерного и неравномерного облучения.

2.2.2 Моделирование радиационных поражений от сочетанного и комбинированного облучения.

2.2.3 Моделирование воздействия факторов нерадиационной природы.

2.3 Методы прижизненной люминесцентной микроскопии.

2.3.1 Метод прижизненного анализа индуцированной флуоресценции лимфоцитов.

2.3.2 Метод прижизненного анализа активности дыхательной цепи митохондрий лимфоцитов, определяемой по собственной люминесценции.

2.4 Биохимические методы исследования.

2.5 Фармакологические средства, использованные в работе-—

2.6 Статистические методы обработки и анализа данных.

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ИОНИЗИРУЮЩИХ ИЗЛУЧЕНИЙ НА

ВНУТРИКЛЕТОЧНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ИОНОВ КАЛЬЦИЯ МЕМБРАН ЛИМФОЦИТОВ (результаты собственных исследований). . >>

3.1 Кальций - аккумулирующая способность мембран лимфоцитов при равномерном у - облучении.

3.2 Кальций - аккумулирующая способность мембран лимфоцитов при неравномерном у - облучении.,

3.3 Кальций - аккумулирующей способности мембран лимфоцитов при сочетанном радиационном поражении.

3.4 Кальций - аккумулирующая способность мембран лимфоцитов крыс при комбинированном радиационном поражении

3.5 Изучение радиационной специфичности изменений кальций - аккумулирующей способности мембран лимфоцитов.

3.6 Изменение кальций - аккумулирующей способности мембран лимфоцитов в облученной суспензии.

3.7 Влияние радиозащитных средств на кальций - аккумулирующую способность мембран лимфоцитов периферической крови крыс, подвергнутых равномерному у - облучению.

3.8 Влияние радиационного воздействия на митохондриальное дыхание лимфоцитов.

3.9 Состояние процессов свободнорадикального окисления и системы антиоксидантной защиты плазмы крови при лучевом поражении от общего равномерного у - облучения.

ГЛАВА 4. ИЗМЕНЕНИЕ КАЛЬЦИЙ АККУМУЛИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МЕМБРАН

ЛИМФОЦИТОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ у

ОБЛУЧЕНИЯ (обсуждение полученных результатов).

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние ионизирующих излучений на кальцийаккумулирующую способность мембран лимфоцитов (экспериментальное исследование)»

Актуальность проблемы. Лимфопения - одно из наиболее ранних гематологических проявлений лучевого поражения. Хотя патогенетическая значимость ранней лимфопении в развитии лучевого поражения менее очевидна в сравнении с миелодепрессией, тем не менее даже само наличие линейной зависимости между степенью уменьшения количества лимфоцитов и величиной поглощенной дозы в определенном диапазоне позволяет предполагать, что указанный гематологический феномен играет важную роль в дальнейшем течении патологического процесса, индуцированного воздействием ионизирующей радиации.

В последние годы убедительно показано, что некоторые цитокины, препятствующие гибели лимфоцитов после облучения, оказывают отчетливый противолучевой эффект [27].

В отличие от количественных закономерностей изменений числа лимфоцитов в зависимости от дозы радиационного воздействия, которые изучены довольно подробно, молекулярные механизмы, вызывающие гибель этих клеток, исследованы недостаточно. Между тем этот вопрос представляет не только теоретический интерес, но и имеет важное прикладное значение для целенаправленной разработки средств ранней патогенетической терапии острой лучевой болезни (ОЛБ).

Данные, раннее проведенных исследований, позволяют предполагать, что снижение количества лимфоцитов после облучения связано с нарушением структуры и функции клеточных мембран [26, 59, 63], причем важную роль в этих процессах играет оксидативный стресс, проявляющийся в резком усилении продукции активных кислородных метаболитов (АКМ) (супероксидный анион-радикал, гидроксильный радикал, синглетный кислород и др.), оксидов азота (монооксид азота, пероксинитрил), инициации процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) [1, 4, 26, 37, 59, 63,]. Действие активных форм кислорода (АФК) оказывает модифицирующий эффект на клеточные мембраны с нарушением синтеза АТФ и транспорта ионов, в частности, ионов кальция. Роль ионов кальция в регуляции внутриклеточных процессов показана многими авторами [44, 70].

Известно, что повышение концентрации цитозольного кальция приводит к образованию комплекса: кальций-хлортетрациклин-клеточная мембрана (Са -ХТЦ-КМ) с цитозольной стороны мембраны и увеличению количества связанной с ней флуоресцирующей формы [19, 31, 95]. В качестве депо для ионов кальция, помимо эндоплазматического ретикулума, выступают и митохондрии. Захват митохондриями кальция из цитоплазмы -такая же важная функция, как и окислительное фосфорилирование. Если захват ионов кальция митохондриями увеличивается, то уменьшается выход АТФ, а при снижении захвата кальция увеличивается выход АДФ, что свою очередь может быть причиной снижения кальций-аккумулирующей способности (КАС) мембран лимфоцитов [33, 43, 48, 86]. В то же время, данных об изменении кальций-аккумулирующей способности и активности дыхательной цепи митохондрий лимфоцитов прижизненными методами люминесцентного анализа у животных, подвергнутых гамма-облучению, в литературе обнаружить не удалось.

Недостаточная изученность этих вопросов и обусловила актуальность настоящей работы, посвященной исследованию механизмов повреждающего действия ионизирующих излучений на клетки лимфоидной ткани, в частности оценке влияния у-облучения на кальций-аккумулирующую способность мембран и клеточное дыхание лимфоцитов, что имеет важное теоретическое и практическое значение для радиобиологии и военной медицины.

Целью работы явилось экспериментальное изучение ранних пострадиационных изменений кальций-аккумулирующей способности, нарушений митоходриального дыхания лимфоцитов и роли оксидативного стресса в механизмах их возникновения.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить дозововременные закономерности пострадиационных изменений кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов при различных вариантах радиационного воздействия.

2. Оценить влияние радиозащитных средств на кальций-аккумулирующую способность мембран лимфоцитов.

3. Исследовать влияние радиационного воздействия на митохондриальное дыхание лимфоцитов.

4. Изучить состояние процессов свободнорадикального окисления в ранние сроки после гамма-облучения и их возможную роль в механизмах ранних постлучевых нарушений кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов.

Научная новизна и теоретическая значимость исследования.

Установлено, что в первые минуты после облучения крыс в дозах, вызывающих костномозговую форму ОЛБ, отмечается увеличение кальций-аккумулирующей способности лимфоцитов, сменяющееся ее нормализацией, либо снижением, наиболее выраженным при облучении в дозе, соответствующей СД90/30.

Впервые показано, что степень снижения кальций - аккумулирующей способности мембран лимфоцитов прямо пропорциональна тяжести лучевого поражения. В частности, при неравномерном облучении тяжесть лучевого поражения проявляется в меньшей степени, чем при равномерном облучении в той же дозе, а при комбинированном и сочетанном облучении - выше, чем при изолированном.

Показано, что снижение КАС мембран лимфоцитов происходит при воздействии на крыс стрессорных факторов нелучевой природы (депривация сна, истощающая физическая нагрузка, гипертермия, иммобилизационный стресс), однако эти изменения выражены значительно в меньшей степени, чем при воздействии летальных доз облучения.

Получены данные, свидетельствующие, что профилактическое введение крысам радиозащитных средств - цистамина и нафтизина способствует восстановлению КАС мембран лимфоцитов.

Новыми являются данные, указывающие, что облучение животных в дозах, вызывающих костномозговую форму острой лучевой болезни, сопровождается выходом ионов кальция из эндоплазматического ретикулума. Это свидетельствует о том, что причиной увеличения кальций-аккулирующей способности мембран лимфоцитов в первые минуты после облучения является повышение концентрации внутриклеточного кальция, связанное с нарушением функции Са - АТФазы эндоплазматического ретикулума.

Впервые получены данные, указывающие на то, что облучение животных в дозах, вызывающих костномозговую форму острой лучевой болезни, сопровождается ранней активацией клеточного дыхания лимфоцитов и проявляется снижением уровня собственной флуоресценции восстановленных пиридиннуклеотидов и окисленных флавопротеидов. Это обстоятельство позволяет полагать, что ионизирующее излучение изменяет окислительно-восстановительное состояние переносчиков электронов в дыхательной цепи митохондрий.

В работе показано, что уже в первые минуты после облучения в костномозговом диапазоне доз в плазме крови облученных крыс развиваются изменения процессов свободнорадикального окисления, характерные для окислительного стресса (возрастает содержание окисленного триптофана, уровень карбонильных производных, снижается количество а-токоферола и битирозина). Совпадение по времени этих изменений и нарушений КАС мембран лимфоцитов может указывать на один из возможных механизмов ранних пострадиационных изменений кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов.

Практическая значимость работы.

Разработаны экспериментальные модели для изучения ранних пострадиационных нарушений функции клеточных мембран на основе прижизненного флуоресцентного анализа их кальций-аккумулирующей способности. Уточнены количественные закономерности изменения этого показателя при различных вариантах радиационного воздействия у мелких лабораторных животных. Получены данные, свидетельствующие о целесообразности дальнейшего изучения указанного показателя для оценки эффективности средств профилактики и лечения лучевых поражений в эксперименте.

Положения, выносимые на защиту.

1. Облучение животных сопровождается ранним увеличением кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов. Этот эффект обусловлен выходом ионов кальция из эндоплазматического ретикулума.

2. Облучение животных в дозах, вызывающих костномозговую форму ОЛБ, сопровождается ранней активацией клеточного дыхания лимфоцитов.

3. Пострадиационное снижение кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов может быть связано с активацией процессов свободнорадикального окисления.

Апробация и внедрение результатов работы.

Исследования выполнены в соответствии с плановой тематикой научно-исследовательских работ НИИЦ (МБЗ) ГНИИИ ВМ МО РФ с января

2003 г. по декабрь 2005 г., их результаты реализованы в отчетах по теме НИР «Экспериментальное обоснование использования маркеров оксидативного стресса для ранней индикации радиационных поражений». Результаты исследований доложены на заседаниях секции № 1 НТС НИИЦ (МБЗ) ГНИИИ ВМ МО РФ (протокол № 2 от 16 февраля 2005 г.), на Российской научной конференции «Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты» (Санкт-Петербург, 2004 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 108 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы собственных результатов, обсуждения, выводов и списка литературы. В диссертации представлены 12 рисунков и 16 таблиц. Список литературы содержит 145 библиографических источников, из них 84 отечественных и 61 иностранных публикаций.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Швыдюк, Олег Николаевич

ВЫВОДЫ

1. В первые минуты после облучения крыс в дозах 0,5 - 7,5 Гр отмечается увеличение кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов (на 20-40 % по сравнению с контролем), что свидетельствует об увеличении концентрации ионов кальция в лимфоцитах. В последующие сроки наблюдения, отмечается либо нормализация (0,5 — 3,0 Гр), либо значительное снижение кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов, достигающее минимального значения при облучении в дозе 7,5 Гр (6 - 24 ч после радиационного воздействия).

2. При неравномерном кранио-каудальном гамма-облучении крыс в дозе 20 Гр в первые часы после воздействия отмечается увеличение концентрации ионов кальция в лимфоцитах в 2 раза и снижение количества лимфоцитов с «нормальной» флуоресценцией в 5 раз по сравнению с необлученным контролем.

3. В первые часы после сочетанного лучевого поражении, включающего рентгеновский ожог 10 % поверхности тела крыс и общее облучение в дозе 6,75 Гр, отмечается снижение количества лимфоцитов с «нормальной» флуоресценцией в 4 раза по сравнению с необлученным контролем и в 1,8 раза по сравнению с изолированным облучением в аналогичной дозе.

4. Комбинированное лучевое поражение крыс, включающее перелом бедренной кости и общее облучение в дозе 6,75 Гр, сопровождается уменьшением количества лимфоцитов с «нормальной» флуоресценцией в 4 раза по сравнению с необлученным контролем.

5. При воздействии на крыс факторов нелучевой природы (депривация сна, истощающая физическая нагрузка, гипертермия и иммобилизационный стресс) наблюдается снижение количества лимфоцитов с «нормальной» флуоресценцией на 20-35 % по сравнению с контролем. Эти сдвиги значительно менее выражены по сравнению с воздействием гамма-облучения в летальных дозах.

6. Профилактическое введение крысам радиозащитных средств цистамина и нафтизина способствует снижению повреждающего действия облучения в отношении кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов.

7. Облучение животных в дозах, вызывающих костно-мозговую форму острой лучевой болезни, сопровождается увеличением выхода ионов кальция из эндоплазматического ретикулума, что является, по-видимому, основной причиной увеличения содержания ионов кальция в лимфоцитах.

8. Облучение животных в дозах, вызывающих костно-мозговую форму острой лучевой болезни, сопровождается ранней активацией клетлчного дыхания лимфоцитов, что проявляется снижением уровня собственной люминесценции восстановленных пиридиннуклеотидов на 40 - 60 % и окисленных флавопротеидов на 40 - 50 % по отношению к контролю.

9. В первые минуты после облучения крыс в дозах от 0,5 Гр до 6,75 наблюдаются сдвиги процессов свободнорадикального окисления в плазме крови, которые характерны для окислительного стресса (возрастает содержание окисленного триптофана в 1,3 раза, уровень карбонильных производных в 2 раза, снижается количество а-токоферола на 30 % ). Эти нарушения могут явиться одним из возможных механизмов постлучевого снижения кальций — аккумулирующей способности мембран лимфоцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Показатель кальций-аккумулирующей способности мембран лимфоцитов может быть использован для оценки тяжести лучевых поражений в дозах, вызывающих костномозговую форму ОЛБ и эффективности средств их профилактики и лечения.

2. Определение собственной люминесценции восстановленных пиридиннуклеотидов и окисленных флавопротеидов в лимфоцитах можно применить для оценки функционального состояния лимфоидной ткани, при воздействии на организм различных экстремальных факторов внешней среды.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Швыдюк, Олег Николаевич, 2008 год

1. Алесенко, А.В. Роль липидов и продуктов перекисного окисления в биосинтезе и функциональной активности ДНК /

2. A.В. Алесенко // Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М.: Наука, 1981.-С. 3-16.

3. Арутюнян, А.В., Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма/ А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.Н. Зыбина // Методические рекомендации. — СПб .: ИКФ «Фолиант», 2000. 104 с.

4. Африканова, Л. А. Острая лучевая травма кожи / Л.А. Африканова//М.: Медицина, 1975. 193 с.

5. Барабой В.А. Стресс в развитии радиационного поражения. Роль регуляторных механизмов / В.А. Барабой, С.А. Олейник // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. - Т. 39, № 4. - С. 438 - 443.

6. Барабой, В.А. Перекисное окисление и радиация / В.А Барабой,

7. B.Э Орёл, И.М. Карнаух // Киев, 1991. - 256 с.

8. Блекмишев, И.Б. Радиационое повреждение эритроцитов и пути их репарации./ И.Б. Блекмишев, В.П. Шабаев, В.М. Инюшин. // Радиационно стимул, процессы. Алма-Ата, 1980. - С. 134 - 143.

9. Болдырев, А.А. Парадоксы окислительного метаболизма мозга / А.А. Болдырев // Биохимия. 1995. - Т. 60, № 9. - С. 1536 - 1542.

10. Бурмистров, С.О. Антиоксидантная активность сыворотки крови беременных и небеременных женщин: сравнение разных методовопределения / С.О. Бурмистров, Т.И. Опарина, В.М. Прокопенко // Клин, лаб. Диагностика. 1997, № 11. - С. 14 - 17.

11. Владимиров, Ю.А. Применение флуоресцентного зонда тетрациклина как метод оценки жизнеспособности органов / Ю.А. Владимиров, Э.М Коган, Л.Г Коркина, В.И. Сороковой // Актуальные проблемы пересадки органов. М. : Медицина, 1978.-С. 150-165.

12. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков // М.: Наука, 1972.-252 с.

13. Владимиров, Ю.А. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю.А. Владимиров, Г.Е. Добрецов // М.: Наука, 1980.-320 с.

14. Галактионова, А.В. Состояние перекисного окисления у больных с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки / А.В. Галактионова, А.В. Молчанов, С.А. Ельчанинова // Клин. лаб. Диагностика. 1998. - № 6. - С. 10 - 14.

15. Говорова, Л.М. Механизмы метаболической адаптации и окислительный стресс при вирусных и бактериальных инфекциях у детей: Автореф. дис. . д-ра биол. наук. / Л.М. Говорова СПб., 2002. - 48 с.

16. Голдобенко, Г.В. Рак предстательной железы. Лучевая терапия злокачественных опухолей / Г.В. Голдобенко, С.И. Ткачев // М.: Медицина, 1996. - С. 319 - 329.

17. Граевская, Б.М. О механизмах, определяющих течение и исход воздействия ионизирующей радиации на организм / Б.М. Граевская, Н.Н. Золотарева // Радиобиология. 1991. - № 5. - С. 747 - 753.

18. Граевский, Э.Я. Сульфгидрильные группы и радиочувствительность. / Э.Я. Граевский -М.: Атомиздат, 1968. 245 С.

19. Дубинина Е. Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А. // Вопросы мед. химии. 1995. - Т. 41, № 1. С. 24 - 26.

20. Закарян, А.Е., Кочур Н.А., Тарусов Б.Н. О сверхслабой хемилюминесценции сыворотки крови онкологических больных /

21. A.Е Закарян, Н.А. Кочур, Б.Н. Тарусов // Физико-химические механизмы злокачественного роста М.: Наука, 1970. - Т. 32. - С. 99 - 103.

22. Заярна, С.П. Возможности фармакологической регуляции ферментативного торможения перекисного окисления липидов в условиях лучевого поражения / С.П. Заярна, О.А. Ульянцева, В.К. Напханюк // Лжи. 1998, № 1.-С. 64-66.

23. Зенков, Н.К. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах / Н.К. Зенков, Е.Б. Меныцикова // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, вып. 3. - С. 286 - 296.

24. Зинченко, В.П. Изменение люминесценцииспиридиннуклеотидов мышечной клетки в ответ на кратковременную стимуляцию / Зинченко, В.П. // Биофизика живой клетки. Пущино, 1972. -Т.З.-С. 76-80.

25. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга / Ю.А. Зозуля,

26. B.А. Барабой, Д.А. Сутковой и др. // М.: Знание - М, 2000. - 344 с.

27. Иванов, И.И. Молекулярные механизмы действия токоферолов в биологических мембранах / И.И. Иванов, Б.Н. Тарусов // Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии М.: Наука, 1976. - С. 105 - 108.

28. Иммунология /под ред. У. Пола. М: Мир, Т. 1. 1987 - 1988.476 с.

29. Каган, Е.В. Кальций и перекисное окисление липидов в мембранах митохондрий и микросом сердца / Е.В Каган, В.И. Савов, В.В. Диденко, Ю.В. Архипенко, Ф.З. Меерсон // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1983. - Т. 95, № 4. - С. 46 - 48.

30. Карнаухов, В.Н. Действие функциональной нагрузки на энергоаппарат клетки / В.Н. Карнаухов // Проблемы дефицита возбуждения. Петрозаводск, 1971.-С. 34-35.

31. Карнаухов, В.Н. Люминесцентные исследования мышечных клеток / В.Н. Карнаухов // Молекулярная и клеточная биофизика. М.: Наука, 1977. - С. 247 - 258.

32. Кения, М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукаш, Е.Н. Гуськов // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, № 4. - С. 456 - 469.

33. Кинетические и термодинамические характеристики транспорта кальция в митохондриях // Евдотиенко Ю.В., Зинченко В.П., Кудзина Ю.Д. и др. / 1 Сов.- Швейц. симпоз. Биологическая мембрана: структура и функции. - М., 1979. - 90 с.

34. Крутецкая, З.И., Лебедев О.В. Роль тирозинового фосфорилирования в регуляции активности ионных каналов клеточных мембран / З.И. Крутецкая, О.В. Лебедев. СПб: «Айю», 1998. - 245 с.

35. Кудряшов, Ю.Б. Лучевое поражение "критических систем" / Лучевое поражение (острое лучевое поражение, полученное в эксперименте) // под ред. Ю.Б. Кудряшова. М.: МГУ, 1987. - С. 5-72.

36. Кудряшов, Ю.Б. Роль биологически активных веществ (радиотоксинов) в лучевом поражении /Ю.Б. Кудряшов, Е.Н. Гончаренко // Радиобиология. 1970. - Т. 10, вып. 2. - С. 212 - 229.

37. Кудряшов, Ю.Б. Современные проблемы противолучевой химической защиты организмов / Ю.Б Кудряшов, Е.Н. Гончаренко // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39, № 2 - 3. - С. 197 - 211.

38. Кудряшов, Ю.Б. Радиорезистентность и регуляция метаболизма нервной ткани / Ю.Б. Кудряшов, Н.Е. Кучеренко, А.Н. Васильев и др. Киев: Либщь, 1992. - 234 с.

39. Кузин, A.M. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии / под ред. Кузина A.M. М., 1986. - 283 с.

40. Левицкий Д.О. Количественная оценка кальций транспортирующей способности саркоплазматического ретикулума сердца / Д.О. Левицкий, Д.С. Беневоленский, Т.С. Левченко // Метаболизм миокарда. М.: Медгиз, 1981. - с. 35 - 47.

41. Лейкин, Ю.Н. Влияние аккумуляции кальция на окислительное фосфорилирование в митохондриях печени / Ю.Н Лейкин,

42. А.Д. Виноградов // Митохондрии. Молекулярные механизмы ферментативных реакций. М.: Наука, 1972. - С. 131 - 137.

43. Лейкин, Ю.Н. Окисление НАД-Н в митохондриях печени крыс / Ю.Н. Лейкин, А.Д. Виноградов // Митохондрии. Регуляция процессов окисления и сопряжения. М.: Наука, 1974. - С. 55-66.

44. Лисовский, В.А. Люминесцентный анализ в гастроэнтерологии./ В.А. Лисовский Л.: Наука, 1984. - 236 с.

45. Лукьянова, Л.Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Л.Д Лукьянова, Б.С. Балмуханова, А.Т. Уголев М.: Наука, 1982. - 301с.

46. Мазурик, В.К. Лучевое поражение / под ред. Ю.Б. Кудряшова -М.: Изд-во МГУ, 1987. С. 100 - 113.

47. Маянский, А.Н. Апоптоз нейтрофилов / А.Н. Маянский, Н.А Маянский, М.И. Заславская и др. // Иммунология.- 1999. № 6. - С. 11 -24.

48. Мелихов, О.Г. Состояние антиокислительной системы эритроцитов при у-облучении на фоне предшествующего длительного перегревания / О.Г. Мелихов, Н.Б. Козлов // Радиобиология. 1991. - Т. 31, вып. 6-С. 838-841.

49. Меныцикова, Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, вып. 4. - С. 442 - 455.

50. Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс при воспалении / Е.Б. Меныцикова., Н.К. Зенков // Успехи соврем, биологии. 1997. - Т. 117, №2.-С. 155-171.

51. Михаевич, О.Д. Егорова Н.И. Регуляция а-токоферолом активности каталазы у больных раком легкого / О.Д. Михаевич, Н.И. Егорова // Биохимия опухолевой клетки. Минск, 1990. - С. 68 - 69.

52. Морозкина, Т.С. Способны ли биоантиоксиданты эффективно увеличивать радиорезистентность организма? / Т.С. Морозкина, В.Н. Суколинский, И.Б. Сокольчик и др // Матер. IV конф. "Биоантиоксидант," 2-4 июня 1992 г. М. Т. 1. - С. 89 - 90.

53. Москалев, Ю.И. Отдаленные последствия воздействия ионизирующих излучений. / Ю.И. Москалев М.: Медицина, 1991. - 464 с.

54. Наумова, Г.М., Влияние комплексных препаратов витаминов С и Р на энергетический обмен в митохондриях печени облученных крыс / Наумова Г.М., Рудаков Н.П. // Радиобиология. 1974. - Т. 14, вып. 4. - С. 586 - 589.

55. Новечно, А. Промышленные аварии с серьезными последствиями / А. Новечно, Аскулай Э. // Бюлл. МАГАТЭ, 1987. Т. 29, № 2. - С. 39 - 45.

56. Новоженов, В.Г. Изменения перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных острой лучевой болезнью / В.Г. Новоженов, А.Е. Лысенко, А.В. Подвигин и др. // Воен.-мед. журн. -1993.-№4.-С. 38-40.

57. Окислительный стресс: Диагностика, терапия, профилактика / Н.К. Зенков, Е.Б. Менщикова, С.М. Шергин; РАМН, Сибирское отделение. -Новосибирск, 1993. 181 с.

58. Орлов, С.Н. Кальций аккумулирующая способность клеточных мембран миокарда и гладкой мускулатуры крыс со спонтанной генетической гипертензии / С.Н. Орлов, Н.И. Покудин, Ю.В. Постнов // Кардиология. - 1980. - Т. 20, № 2. - С. 94 - 99.

59. Пермяков, Е.А. Кальцийсвязывающие белки / под ред. Е.А. Пермякова-М.: Наука, 1993. -192 с.

60. Пескин, А.И. Взаимодействие активного кислорода с ДНК / А.И. Пескин // Биохимия. 1997. - Т. 62, вып. 12. - С. 1571 - 1578.

61. Поглазов, А.Ф. Флуориметрическое изучение вывода Са из липосом, индуцированного воздействием фосфолипазы / А.Ф. Поглазов, М.В. Шубин, Ю.Г. Скоцеляс и др. // Биофизика. 1975. - Т. 20, № 1. - С. 69-72.

62. Поляков, JI.E. Основы военно-медицинской статистики / JI.E. Поляков., Б.И. Игнатович, К.В. Ласиков. Л.: ВМедА, 1977. - 336 с.

63. Преображенский, С.Н. Изучение влияния эстрогенов на взаимодействие кальция с мембранами митохондрий / С.Н. Преображенский, Ю.П. Денисов // Биофизика. 1977. - Т. 22, вып. 3. -с. 452 - 455.

64. Программированная клеточная гибель / под ред. проф. B.C. Новикова. СПб.: Наука, 1996,- 276 с.

65. Пяткин, Е. К. Зависимость выхода аберраций хромосом от дозы при облучении лимфоцитов человека in vivo / Пяткин Е. К. // Мед. радиология. 1986 - Т. 31, № 9. - С. 30 - 35.

66. Ритов, В.Б. Транспорт кальция через мембраны саркоплазматического ретикулума / В.Б. Ритов // Биохимия животных и человека. — Киев: Наукова думка, 1977. Т 1. — 53 - 83.

67. Самойлов, В.О. Гетерогенность хемосенсорных систем / под ред. В.О. Самойлова. Л.: Наука, 1983. - 224 с.

68. Самойлов, В.О. О значении метаболических реакций вкусовых рецепторов в восприятии химических стимулов / В.О. Самойлов, В.Н Соловьев, Н.Г Гурская, А.С. Гурченок // Сенсорные системы. Обоняние и вкус. Л. : Наука, 1980. - С. 107 - 109.

69. Тарусов, Б.Н. Первичные процессы лучевого поражения /под ред. Б.Н. Тарусова. М.: Под. ред. Госатомиздат, 1962. - 96 с.

70. Фаршатов, М.Н., Бритун А.И. Комбинированные радиационные поражения: патогенез, клиника, лечение / М.Н. Фаршатов, А.И. Бритун. М.: Медицина, 1993 - С. 87 - 184.

71. Федотова, Т.А. Нуклеиновые кислоты и белки в организме при лучевом поражении / Т.А. Федотова, О.Л. Терещенко, В.К. Мазурик. М.: Медицина, 1972.-408 с.

72. Форсеберг, А.В. Ионизирующее излучение и клеточный метаболизм / под ред. А.В. Форсеберга М.: Изд - во иностр. лит., 1958. — 261 С.

73. Хансон, К.П. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток / К.П. Хансон, В.Е. Комар. М., 1985. - 152 с.

74. Ходоров, Б.И. Роль медленных натрий-кальциевых каналов, саркоплазматического ретикулума и системы натрий-кальциевого обмена в регуляции сократительной активности миокардиальных клеток теплокровных (фармакологический анализ) / Б.И. Ходоров,

75. Е.Г. Ворновицкий, В.Б. Игнатьева // Проблемы общей и клинический физиологии сердечно — сосудистой системы. — Киев: Наукова думка, 1976. -С.180- 195.

76. Штреффер, К. Радиационная биохимия / К. Штреффер; перевод с нем.; под. ред. Е.Ф. Романцева. М., Атомиздат, 1972 - 200 с.

77. Шубин, М.В. Изучение влияния перекисного окисления липидов на проницаемость мембран липосом для ионов кальция / М.В. Шубин, А.Ф. Поглазов, Ю.Г. Скоцеляс, Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1975. - Т. 20 - С. 161 - 163.

78. Эйдус, JI.X. Физико-химические основы радиобиологических процессов и защиты от излучений / JI.X. Эйдус М.: Атомиздат, 1972. -240 с.

79. Ярилин, А.А. / Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. 1996. № 6. С. 10 - 22.

80. Ярмоненко, С.П. Радиобиология человека и животных: учеб. пособие / под ред. С.П. Ярмоненко, А.А. Вайнсон // М.: Высш. шк., 2004. — 549 с.

81. Aruoma Okezie, I. Free radicals, oxidative stress and antioxidants in human health and didease / I. Aruoma Okezie // J. Amer. Oil Chem. Soc. -1998. Vol. 75, № 2. - P. 199 - 212.

82. Azuma, Y. Molecular mechanisms of apoptosis in the immune system / Y. Azuma, H. Kizaki // Nippon. Rinsho. 1995. - Vol. 53, - № 3. P. 753 - 760.

83. Avi-Dor, J., Olson J.M., Dohersy M.D. Fluorescence of pyridine nucleotides in mitochondria / J. Avi-Dor, J.M. Olson, M.D. Dohersy. // J. Biol. Chem. 1962. - Vol. 237, N 7. - P. 2377 - 2383.

84. Besch Henry, R. Jr.,. Ca " uptake by cardiac Ca - uptvesicles: modulation by monovalent cations / R. Jr. Besch Henry, R. Jones Larry, M. Watanable August // Circulation. - 1976. - Vol. 54. - № 4. - suppl. № 2. - P. 163.

85. Blakely, W.F. Overview of low-level radiation exposure assessment: biodosimetry / W.F., Blakely, A.L. Brooks, R.S. Lofts // Ibid. -2003.-P. 20-24.

86. Carvalho, C.A.M. Chlorotetracyclic as an indicator of the interaction of calcium with brain membrane fractions / Carvalho, C.A.M. // J. Neurochem. 1978. - Vol. 30, N 5. - P. 1149 - 1155.

87. Cavaggiony, A. Some aspects of calcium regulation in cell biology / A. Cavaggiony // Biocsience, Reports. 1989. - Vol. 9, N 4. - P. 421 - 436.

88. Chance, В. A method for the estimation of the increase in concentration of adenosine diphosphate in muscle sarcosomes following a contraction / B. Chance, C.M. Conndly // Nature. 1957. - Vol. 179. - P. 1235 - 1237.

89. Chance, B. Fluorometric studies of flavin component of the respiratory chain. Flavins and flavoproteins. E.C. Slator (Editor). Elsevier Publishing Company. Amsterdam, 1966. Printed in the Neherlands, 1966. - P. 510-528.

90. Chance, B. Kinetics of fluoroscence and metabolite changes in rat liver during a cycle of ischemia / B. Chance, B. Schoener, R. Krejci // Biochem. Ztschr.-1965.-Vol 341.-P. 325-333.

91. Chance, B. Fluorometric studies of flavin component of the respiratory chain / B. Chance, M. Schoener // Flavins and flavoproteins. -Amsterdam, 1966.-P. 510-528.

92. Couldwel, W. T. Proteinkinase С inhibitors induce apoptosis in human malignant glioma cell lines / W. T. Couldwel, D. R. Hinton, S. He // FEBS Lett. 1994. Vol. 345, N 1. - P. 67 - 68.

93. Drummond, R.M. Mitochondrial Ca homeostasis during Ca influx and Ca release in gastric myocytes from Bufo marinus / R.M. Drummond, T.C.H. Mix, R.A. Tuft, et al. // J. Physiol. 2000. - Vol. 522, N 3. - P. 375 -390.

94. Epperlein, M.M. Nitric oxide in cigarette smoke as a mediator of oxidative damage / M.M. Epperlein, J. Nourooz-Zadeh, A.A. Noronha-Dutra et al. // Int. J. Exp. Pathol. 1996. - Vol. 77, № 5. - P. 197 - 200.

95. Fatome, M. Biological dozimetry after a criticality accident / M. Fatome Agey D, S. Martyn et al. / Radiat. prot. dosim. 1997. - Vol. 70. № 1 -4. - C. 455-459.

96. Frank George, B. Roles of extracellular and trigger calcium ions in excitation contraction coupling in sceletal vuscle / Frank George, B. // Can. J. Physiol, and Pharmacol. - 1982. - Vol. 60, N 10. - P. 505 - 512.

97. Giacobini, E. Varuiation of glucolitic intrmediates phosphate compounds and puridine of an isolated crustacean neurons / E. Giacobini, A. Grasso // Acta Physiol. Scand. 1966. - Vol. 66, N 1 - 2. - P. 49 - 57.

98. Giacobini, E., Handelman E., Terzulo C.A. Isolated neurone preparation for studies of metabolic events at rest and during impuls activity / E. Giacobini, E. Handelman, C.A. Terzulo // Science. 1963. - Vol. 140, N 3562.-P. 74-75.

99. Goodman, D.B.R. Rapid assay for cellular deocsiribonuclec acid. / D.B.R. Goodman, J.F. Puzaz // Analyt. Bichem. 1978. - Vol. 86. № 1. - P. 50 -56.

100. Grace, M.B. Real-time quantitative RT-PCR assay of GADD45 gene expression changes as a biomarker for radiation biodosimetry / M.B. Grace, C.B. McLeland, W.F. Blakely // Intern. J. Radiat. Biol. 2002. -Vol.78,№ 11.-P.1011 - 1021.

101. Green D. R. Mitochondria and apoptosis / D. R. Green, J. C. Reed // Science 1998.-Vol. 281. P. 1305-1312.

102. Hajnoczky, G. Decoding of cytosolic calcium oacillations in the mitochondria // G. Hajnoczky, L.D., M.B. Robb-Gaspers Seitz, et al. // Cell. -1995. Vol. 82. - P. 415 - 424.

103. Hall, A. G. The role of glutathione in the regulation of apoptosis / A. G. Hall // Eur. J. Clin. Invest. 1999 Vol. 29, P. 238 - 245.

104. Halestarp, A P. Translocation of Bax to mitochondria during apoptosis measured by laser scanning cytometry / A P. Halestarp, E. Bedner, Li. Xun, J. Kunicki et al. // Cytometry. 2000. - Vol. 41, N 1. - P. 83 - 88.

105. Halliwell, B.O. Antioxidants and human disease: A general introduction / B.O. Halliwell // Nutr. Rews. 1997. - Vol. 55, № 1 (p. II). - P. S44 - S45.

106. Hug, H. Rhodamine 110-linked amino acid and peptides as substrates to measure caspase activity upon apoptosis induction in intact cell / H. Hug, M. Los, W. Hirt, K.M. Debatin // J. Biochemistry 1999. Vol. 38. P. 13906 - 1399.

107. Ioshida, H. Apaf 1 is required for mitochondrial pathway of apoptosis and Brain development / H. Ioshida, Y — Y. Kong, R. Yoshida et al. // Cell. 1998. - Vol. 94. - P. 739 - 750.1. O.i.

108. Javors, M.A. Kinetic characterization of Ca transport in synaptic membranes / M.A. Javors, C.L. Bowden, D.H. Ross // J. Neurochem.- 1981. — Vol. 37, №2.-P. 381-387.

109. Jayadev, S. Role for ceramide in cell cycle arrest / S. Jayadev, B. Liu, A. E Bielawsca // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, N 5. - P. 2047 -2052.

110. Jobsis, F.F. Oxidative and glycolitic recovery metabolism in muscle. Fluorimetric observations on their relative contributions / F.F. Jobsis, J.C. Duffield // J. Gen. Physiol. 1967. - Vol. 50. - P. 1009 - 1047.

111. Katz, A.M. Control of calcium permeability in the sarcoplasmic reticulum / A.M. Katz, J. Dunnett, D.I. Repke, W. Hasselbach // FEBS Let. -1976. Vol. № 2. - P. 207-208.

112. Klouwen, H.M. In The Cell Nucleus Metabolism and Radiosensitivity / Klouwen H. M. et. al. 1966. - P. 295.

113. Kroemer, G. The protoocoge Bel 2 and its role in regulating apoptosis / G. Kroemer // Nature Med. - 1997. - Vol. 3. - P. 614 - 620.

114. Kuida, K. Caspase 9 Inter. J. / K. Kuida // Biochem. - 2000. - Vol. 32,N2.-P. 121-124.

115. Maisin, J.R. Influence of mixture of chemical protectors on the lymphopoietic fiand hematopoietic system of mice irradiated with a dose 2000 rad of X-rays / J.R. Maisin // Experientia. 1968. - Vol. 24, № 3. - P. 230 - 231.

116. Marnett, L.J. Oxyradicals and DNA damage / L.J. Marnett // Carcinogenesis: Oxford, 2000. Vol. XXI, № 3. - P. 361 - 370.

117. McGroww, C. F. Localization of calcium in presyneptic nerve terminals: an ultrastructural and electron microprobe analisis / C. F. McGroww, A.V. Somlyo, M.P. Blaumstein // J. Cell. Biol. 1980. - Vol. 85, № 2. - P. 228 -241.

118. Menini, A. Calcium signalling and regulation in olfactory neurons / Menini A. // Curr. Opin. Neurobiol. 1999. - Vol. 9. - P. 419 - 426.

119. Mignotte, B. Mitochondria and apoptosis / B. Mignotte, J.-L. Vayssiere //EuropJ. Biochem. 1998. Vol. 252. - P. 1 - 15.

120. Molday, R.S. Calmodulin regulation of cyclic-nucleotide-gated channels / Molday R.S. // Curr. Opin. Neurobiol. 1996. - Vol. 6. - P. 445 -452.

121. Moller, J.V. The sarcoplasmic reticulum Ca 2+ ATPase / J.V. Moller, J.R. Anderson, M. Maire // Mol. and Cell. Biochem. - 1981. - Vol. 43, №2.-P. 83 -107

122. Muller, W.U. Biological indicators for radiation damage / W.U. Muller, C. Stranfer // Intern. J. Radiat. boil. 1991. - Vol.59, № 4. - p. 863-873.

123. Orrenius, S., McCabe M.S., Nicotera P. Ca (2+)-depended mechanisms of citotoxicity and programmed cell death / S. Orrenius, M.S. McCabe, P. Nicotera // Toxicol. Lett. 1992. Vol. 64. - P 357 - 364.

124. Pellmar, T.C. Priority list of research areas for radiological nuclear threat countermeasures / T.C. Pellmar, S. Rockwell et al. // Radiat. Res. 2005. -Vol. 163, № l.-P. 115-123.

125. Qin, Z. H. Pro caspase - 8 is pre - dominantly localized in mitochondria and released into cytoplasm upon apoptotic stimulation / Z.H. Qin, Y. Wang, К. K. Kikly et al. // J. Biol. Chem. - 2001 - Vol. 276, № 11. - P. 8079 - 8086.

126. Racker, E. (Рэкер) Биоэнергетические механизмы: новые взгяды: пер. с англ. Е. Racker (Рэкер) М.: Мир, 1979. - 21 с.

127. Rizutto, R. Microdomains with high Ca close to IP3-sensitive channels that are sensed by neighboring mitochondria / Rizutto R., Brini M., Murgia M.et al. // Science. 1993. - Vol. 262. - P. 744 - 747.

128. Roads, D.E. Ca-ATP-ase activity of ciliary membranes from olfactory receptor cells / Roads D.E., Lo Y.H., Li W. et al. // J. Cell Biol. -1989. Vol. 109, N 4. - (Part 2). - P. 254a.

129. Scholz, P. Flavin and pyridine nucleotide oxidation-reduction changes in perfused rat liver / P. Scholz, R.G. Thurman, J.T Williamson // J. Biol. Chem. 1969. - Vol. 244. - P. 2317-2324.

130. Sham, J.S.K. Ca-release-induced inactivation of Ca current in rat ventricular myocytes : evidence for local Ca signalling / J.S.K. Sham // J. Physiol. 1997. - Vol. 500, N 2. - P. 285 - 295.

131. Shepherd, G.M. Information flow in the olfactory sensory neuron / G.M. Shepherd // J. Physiol. 1991. - Vol. 98, N 6. - P. 2a.

132. Skulachev, V. P. Cytochrome in the apoptotic and antioxidant cascades / Skulachev V. P. // FEBS Lett. 1998. Vol. 423, N. 3. P. 275 - 280.

133. Thorell, B. Absorbancy measurements on lever and kidney cells / B. Thorell, B. Chance // J. Biol. Chem. 1959. - Vol. 184. - P. 934 - 935,

134. Van Winkle, W. Ions and inotropy / W. Van Winkle., Arnold. Barry Schwtz // Anny. Rev. Physiol. Palo Alto, Calif. - 1976. - Vol. 38. - 247-272.

135. Vintermyr, О. K. Microinjected catalic subunit of cAMP -dependent protein kinase induces apoptosis in myeloid leukemia (IPC 81) cell / О. K. Vintermyr, В. T. Gjertsen, M. Lanotte et al. // Exp. Cell Res. 1993. - Vol. 206, N1.-P. 157-161.