Влияние IGF-связывающих белков и микроокружения опухоли на прогрессию гепатоцеллюлярной карциномы мыши in vivo и in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Дашенкова, Наталия Олеговна

• Дашенкова, Наталия Олеговна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Дашенкова, Наталия Олеговна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Гепатоцеллюлярная карцинома

1.2 Клеточное строение печени в норме и при развитии ГЦК

1.3 Гетерогенность опухолевой ткани

1.4 Эпителио-мезенхимный переход в процессе канцерогенеза

1.5 Влияние микроокружения на рост опухоли

1.6 Изменение внеклеточного матрикса при канцерогенезе

1.7 Молекулярные пути канцерогенеза

1.8 Сигнальный путь инсулиноподобных факторов роста

1.9 ЮБ-1 и ЮБ-связывающие белки при канцерогенезе

1.10 Моделирование гепатоцеллюлярной карциномы у мышей

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Моделирование химически индуцированной гепатоцеллюлярной

карциномы у мышей

2.2 Стратегия отбора экспериментального материала

2.3 Гистологический анализ

2.4 Получение первичных клеточных культур гепатоцеллюлярной карциномы

мыши

2.5 Выделение тотальной РНК из ткани печени и клеточных

культур ГЦК

2.6 Синтез кДНК библиотек

2.7 Полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ПЦР в реальном времени

2.8 Статистическая обработка результатов, полученных методом ПЦР в

реальном времени

2.9 Выявление белков методом Вестерн-блот

2.10 Иммуноцитохимическое окрашивание клеточных культур ГЦК

47

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Модель гепатоцеллюлярной карциномы мыши

3.2 Гистологический анализ ткани при развитии гепатоцеллюлярной

карциномы мыши

3.3 Экспрессия мРНК гена ^-Ш в динамике развития гепатоцеллюлярной

карциномы мыши

3.4 Экспрессии мРНК генов Igfbp1 - Igfbp-7 в динамике развития

гепатоцеллюлярной карциномы мыши

3.5 Получение первичных клеточных культур из опухолевой ткани

гепатоцеллюлярной карциномы

3.6 Экспрессия генов Vimentin и CD44 в первичных культурах ГЦК

3.7 Паттерн экспрессии 1, ^-Ш, Igfbp-1 - Igfbp-7 в первичных культурах

гепатоцеллюлярной карциномы мыши

3.8 Анализ первичных культур ГЦК на маркеры эпителио-мезенхимного

перехода

3.9 Анализ экспрессии транскрипционных факторов, участвующих в эпителио-

мезенхимном переходе в первичных культурах ГЦК

3.10 Паттерн экспрессии генов, регулирующих синтез, связывание и деградацию гиалуроновой кислоты в первичных культурах ГЦК

3.11 Выявление белков-маркеров ГЦК методом вестерн-блот на первичных культурах ГЦК

3.12 Выявление белков СЭ44 и Иав2 методом иммуноцитохимии

3.13 Экспрессия Tgf-P1 и Tgf-P1R в первичных культурах ГЦК под воздействием факторов TGF-P и ГЬ-6

3.14 Изменение экспрессии маркеров эпителио-мезенхимного перехода в первичных культурах ГЦК под воздействием факторов TGF-P и ГЬ-6

3.15 Выявление белка CD44 в первичной культуре ГЦК под воздействием смеси факторов TGF-P и ГЬ-6

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1 Связь лиганд ^-1 - рецептор ^-Ж в динамике развития

гепатоцеллюлярной карциномы

4.2 Паттерн экспрессии мРНК генов 1^р1 - 1^р-7 в динамике развития

гепатоцеллюлярной карциномы мыши

4.3 Молекулярная характеристика первичных клеточных культур

гепатоцеллюлярной карциномы мыши

4.4 Паттерн экспрессии ^-1, 1§Шр-1 - 1§Шр-7 в первичных культурах

гепатоцеллюлярной карциномы мыши

4.5 Паттерн экспрессии генов, регулирующих синтез, связывание и деградацию

гиалуроновой кислоты

4.6 Анализ первичных культур ГЦК на экспрессию генов, участвующих в

процессе эпителио-мезенхимного перехода

4.7 Смена клеточного фенотипа первичных культур ГЦК под воздействием

TGF-p и ГЬ-6

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ И ТЕЗИСОВ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЦК - гепатоцеллюлярная карцинома IGF - инсулиноподобный фактор роста

IGFBP - белок, связывающий инсулиноподобный фактор роста

мРНК - матричная РНК

тотРНК - тотальная РНК

кДНК - комплементарная ДНК

ДЭНА - диэтилнитрозамин

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЦР-РВ - полимеразная цепная реакция в реальном времени HMW-HA - гиалуроновая кислота высокой молекулярной массы LMW-HA - гиалуроновая кислота низкой молекулярной массы ВКМ - внеклеточный матрикс ЭМП - эпителио-мезенхимный переход

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние IGF-связывающих белков и микроокружения опухоли на прогрессию гепатоцеллюлярной карциномы мыши in vivo и in vitro»

ВВЕДЕНИЕ

Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) занимает пятое место в списке онкологических заболеваний во всем мире и второе место - по смертности. Терапевтические подходы при лечении данного заболевания показывают низкую эффективность (Bruix J. et al., 2014).

Сложность в лечении ГЦК обусловлена гетерогенностью опухолевой ткани вследствие генетических изменений в клетках печени, глубокими изменениями в микроокружении опухоли и неполным пониманием биологии рака (Li L., Wang H., 2016).

Использование модельных животных ГЦК позволяет приблизить нас к пониманию о белковых взаимодействиях в канцерогенезе, а также о генетических и эпигенетических изменениях клеток печеночной ткани. Кроме того, мышиные модели ГЦК могут способствовать выяснению роли микроокружения опухоли и могут быть использованы для доклинических исследований.

Сигнальный путь инсулиноподобного фактора роста (IGF) играет важную роль в аутокринной, паракринной и эндокринной системах стимулирования роста организма. Изменения в каскаде взаимодействий IGF-1 наблюдается при патогенезе многих видов рака. Существенная роль IGF пути в гепатоцеллюлярной карциноме была проиллюстрирована многими исследователями на линиях клеток и моделях ксенотрансплантатов животных (Samani A. A. et al., 2007). Однако роль окружающей ткани опухоли недостаточно изучена. Микроокружение опухоли содержит иммунные клетки, стромальные и внеклеточные компоненты, различные белки и факторы роста, которые имеют взаимную сигнализацию и играют важную роль в обеспечении прогрессии рака и метастазировании (Whiteside T. L., 2008). Кроме того, локальный синтез многих факторов роста и белков, регулирующих их взаимодействие с рецепторами в опухолевой и окружающей опухоль ткани, мало изучены.

Опухолевые клетки способны изменять свой фенотип в процессе канцерогенеза под воздействием различных факторов. Меняя свой фенотип на мезенхимный, опухолевые клетки способны к миграции и инвазии, что способствует метастазированию рака (Zhai X. et al., 2014).

Локальное микроокружение, или ниша, раковой клетки играет важную роль в развитии рака. Основным компонентом ниши является внеклеточный матрикс (ВКМ) - сложная сеть макромолекул с характерными физическими, биохимическими и биомеханическими свойствами. При патологических процессах, таких как рак, происходит дерегуляция и дезорганизация ВКМ, что способствует прогрессированию рака путем стимуляции клеточной трансформации и метастазирования (Pickup M. W. et al., 2014).

Одним из основных компонентов не белкового внеклеточного матрикса является гиалуроновая кислота (гиалуронан). Роль гиалуроновой кислоты в канцерогенезе в последние годы активно изучается.

В нормальных физиологических условиях количество гиалуроновой кислоты контролируется балансом между ее синтезом и деградацией; однако было показано, что гиалуронан обильно накапливается в окружающей строме злокачественной опухоли. Увеличение количества гиалуронана обычно коррелирует с плохим прогнозом во многих типах рака, включая рак желудка, кишечника, груди, яичника, мочевого пузыря, поджелудочную железу и т.д. (Whatcott C.J. et al, 2011). Избыточное накопление компонентов внеклеточного матрикса, включая гиалуроновую кислоту, характерно для цирроза печени. Однако данных о гиалуронане и его роли в канцерогенезе печени недостаточно.

Возможно, изменение фенотипа клетки искусственно под воздействием различных факторов и/или изменение состава внеклеточного матрикса, поможет в дальнейшем управлять эпителио-мезенхимным переходом раковых клеток и откроет возможность предотвратить метастазирование гепатоцеллюлярной карциномы.

Цель исследования. Оценить влияние Igf-связывающих белков в опухоли и окружающей опухоль ткани, а также различных компонентов внеклеточного матрикса опухолевой ткани на рост и прогрессию экспериментально вызванной гепатоцеллюлярной карциномы мыши in vitro и in vivo.

Задачи исследования:

1. Проанализировать динамику развития гепатоцеллюлярной карциномы, экспериментально вызванной диэтилнитрозамином у мышей, на тканевом и клеточном уровне.

2. Определить уровни экспрессии компонентов Igf-зависимого пути (Igf-1R, Igfbp-1 - Igfbp-7) в опухолевой и окружающей ее ткани печени в динамике развития ГЦК.

3. Создать первичные клеточные культуры из опухоли ГЦК, необходимые для детального исследования популяционного состава опухолевой ткани, и охарактеризовать их на морфологическом и молекулярном уровне.

4. Провести анализ экспрессии генов, кодирующих белки синтеза, связывания и деградации гиалуроновой кислоты (Has2, Has3, CD44, Rhamm, Hyall, Hyal2) в первичных культурах ГЦК.

5. Определить паттерн экспрессии компонентов Igf-зависимого пути (Igf-1, Igf-1R, Igfbp-l - Igfbp-7) в выделенных из ГЦК первичных клеточных культурах.

6. Оценить способность к смене клеточного фенотипа первичных культур ГЦК под воздействием фактора индукции эпителио-мезенхимного перехода TGF-Р и провоспалительного цитокина IL-6.

Научная новизна. В динамике развития гепатоцеллюлярной карциномы мыши впервые показан паттерн экспрессии генов, кодирующих Igf-связывающие белки - внеклеточные регуляторы инсулиноподобных факторов роста. Впервые проведен сравнительный анализ паттерна экспрессии исследуемых генов в опухолевой и окружающей опухоль ткани печени. Выявленное повышение

экспрессии ¡^р-1, !^Ър-5, ¡^р-б, р-7 в окружающей ткани указывает на влияние микроокружения на прогрессию опухоли ГЦК. Отработана методика выделения первичных клеточных культур из опухолевой ткани ГЦК мыши. Выделенные культуры охарактеризованы и проанализированы на маркеры ГЦК, маркеры и регуляторы эпителио-мезенхимного перехода, что позволило доказать злокачественность первичных культур ГЦК. Анализ генов сигнального пути в первичных культурах ГЦК выявил аналогичную

опухолевой ткани динамику экспрессии ¡^-1Я и ¡^Ър-3 и отсутствие экспрессии 1. Эти данные можно отнести к общей характеристике ГЦК, а повышенный уровень ¡^р-3 может рассматриваться как маркер злокачественной стадии гепатоцеллюлярной карциномы.

Теоретическая и практическая значимость работы. Выявленное изменение экспрессии внеклеточных регуляторов сигнального пути 1^-1 существенно дополняет данные, полученные на клиническом материале, а также расширяет представление о молекулярных механизмах развития ГЦК под действием микроокружения. Мы показали, что 1§1Ър-3 и 1§£Ьр-1, синтезируемые опухолью, и 1§£Ър-1, 1§Шр-5, 1§АЪр-6, ]£АЪр-7, синтезируемые окружающей тканью, необходимы для связывания и доставки к рецептору лиганда 1^-1, который активно вырабатывается окружающей тканью опухоли. На основе полученных данных могут быть разработаны новые методы диагностики и лечения, направленного на модулирование различных компонентов системы 1^-1. В частности, регуляция активности ^ШрБ, возможно, позволит предотвращать не только прогрессирование и метастазирование ГЦК, но и рецидивы, вызванные резистентностью опухолевого микроокружения к терапии.

Полученные данные позволят углубить знания о взаимодействии гетерогенных популяций опухолевых клеток в пределах опухоли, об изменении фенотипа раковых клеток и состава внеклеточного матрикса, что даст возможность для воздействия на процесс метастазирования и прогрессии такого тяжелого заболевания как рак.

Степень достоверности результатов. Достоверность полученных данных определяется применением современных молекулярно-генетических методов. Для получения и обработки информации об исследуемых генах использованы высокотехнологичное оборудование и лицензионные интернет-ресурсы, включающие международные банки данных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Гепатоцеллюлярная карцинома

Гепатоцеллюлярная карцинома является одним из наиболее опасных видов рака. Хирургическое вмешательство для некоторых пациентов является практически единственным вариантом лечения, поскольку химио- и лучевая терапия являются малоэффективными способами борьбы с ГЦК.

По данным Всемирной Организации Здравоохранения на 2012 год количество инцидентов заболеваемости раком печени различной этиологии является самым высоким в странах Центральной Америки, западной и Центральной Африки, Восточной и Юго-Восточной Азии. Наибольший процент пациентов с новообразованиями в печени зарегистрирован в Китае. Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) встречается в 70%-90% случаев первичных злокачественных опухолей печени. ГЦК находится на пятом месте среди наиболее часто диагностируемых злокачественных новообразований у мужчин и на седьмом месте у женщин. Процент заболеваемости ГЦК у мужчин в 2 раза выше, чем у женщин. По смертности ГЦК занимает второе место у мужчин и шестое место у женщин в списке всех злокачественных новообразований (Jemal A. et al., 2011). Эти показатели с каждым годом растут, как полагают ученые и врачи, в связи с увеличением хронического заболевания гепатитом С.

ГЦК представляет собой многоступенчатый процесс, который обычно сопровождается циррозом или хроническим воспалением печеночной ткани, возникающим за счет вирусов гепатита В или С, употребления алкоголя, генетического нарушения обмена веществ, гиперпролиферативного статуса гепатоцитов и других этиологических факторов, которые могут варьировать в зависимости от этнической или географической принадлежности пациента (Pivonello C. et al., 2014).

В странах с развитой системой здравоохранения при диагностике рака

печени на ранней стадии используют хирургическое методы для удаления

11

одной из долей печени, где обнаружено новообразование. В случае, когда все доли печени имеют опухоли, рекомендована пересадка печени. Для пациентов с более поздней стадией заболевания в большинстве случаев используют препарат сорафениб, снижающий пролиферацию опухолевых клеток за счет ингибирования активности киназ.

Прогностическое моделирования течения заболевания у пациентов с ГЦК осложнено тем, что у большинства людей в основе образования опухоли лежат различная этиологические факторы и сопутствующие хронические заболевания печени. При лечении ГЦК рекомендуется учитывать четыре взаимосвязанных аспекта: стадию опухоли, степень нарушения функции печени, общее состояние пациента и эффективность лекарственных средств. В настоящее время существует 8 различных идентификационных систем ГЦК, однако ни одна из них не является универсальной (Pons F. et al., 2005).

Наиболее точной с прогностической точки зрения считается классификация BCLC (Barcelona Clinic Liver Cancer Classification), которая позволяет связать стадию опухолевого роста с рекомендуемой стратегией лечения (Llovet J.M., 2007).

Идентифицировать стадию ГЦК можно с помощью традиционной системы TNM (tumor, nodus, metastasis), описывающую количество и размер первичных опухолей, распространение опухолевых клеток в лимфатические узлы, наличие метастаз в отдаленных органах. Данная система одобрена Американским объединенным комитетом по борьбе с раком (AJCC), однако никак не связана с выбором стратегии лечения (Vauthey J.N. et al., 2002).

Классификации ГЦК с точки зрения изменений на молекулярном уровне, затрагивающих сигнальные пути в ткани печени, не существует. Однако именно экспрессия генов, участвующих в инициации, развитии ГЦК и прогрессии опухоли, может быть наиболее подходящим методом при лечении заболевания сложного патогенеза.

Поскольку лечение ГЦК имеет ограничения терапевтического вмешательства, исследования молекулярных путей, задействованных в процессе индукции и прогрессии ГЦК, очень важны для поиска новых возможностей для лечения.

В экспериментальных исследованиях по изучению заболеваний печени широко востребованы мышиные модели, у которых клеточное строение печени схоже с другими млекопитающими и человеком (Baratta J. et al., 2009).

Моделирование гепатоканцерогенеза у мышей позволяет проследить все этапы заболевания от инициации до формирования ГЦК, изучить влияние различных этиологических факторов, приводящих к возникновению опухолей в печени, а также выявлять потенциальные молекулярные мишени, для лечения этого заболевания у человека.

1.2 Клеточное строение печени в норме и при развитии ГЦК.

Функциональной частью печени является шестигранная печеночная долька, состоящая из паренхимальных клеток - гепатоцитов, которые выстраиваются в ряд в виде балок. Гепатоциты - клетки полигональной формы с большим ядром, расположенном в центре. Большая часть цитоплазмы занята митохондиями, эндоплазматическим ретикулом, а также множественными гранулами гликогена. На границах печеночных долек расположены триады, состоящие из воротной вены печени, артерии, желчного протока (Рис.1).

В центре печеночной дольки располагается центральная вена, в которую поступает кровь из внутридольковых синусоидных капилляров, разделяющих балки гепатоцитов. Синусоиды не имеют базальной мембраны, они соприкасаются с каждым гепатоцитом стенками эндотелиальных клеток. Между гепатоцитами и эндотелием расположено пространство Диссе. Вдоль синусоидов расположены клетки Купфера - специализированные макрофаги

13

печени, составляющие ретикулоэндотелиальную систему. В норме тканевые макрофаги поддерживают свою популяцию за счет пролиферации, а не за счет поступления новых макрофагов из костного мозга. Кроме того, в перисинусоидальном пространстве находятся клетки Ито, или звездчатые клетки печени, способные запасать витамин А в виде жировых капель. Этот тип клеток составляет 5-8% численности всех клеток печени. В активированном состоянии клетки Ито играют важную роль в формировании рубцовой ткани, которую можно наблюдать при различных повреждениях печени.

Рис.1. Клеточная архитектура печени. (А) Схематическое изображение взрослой печени (красный цвет), с желчным пузырем и желчными протоками (зеленый цвет) по отношению к желудку и кишечнику (желтый цвет). Система печеночных протоков состоит из печеночных протоков паренхимы (hd), через которые стекает желчь из печени в общий печеночный канал (chd) и в желчный пузырь через кистозный канал (cd), далее - в двенадцатиперстную кишку через общий желчный проток (cbd). (Б) Схема клеточной архитектуры печени. Показаны гепатоциты (розовый цвет), расположенные в печеночных балках, разделенных синусоидальным пространством. Желчные канальцы на поверхности прилегающих гепатоцитов вырабатывают желчь, поступающую в желчные протоки (зеленый цвет), которые проходят параллельно портальным венам (синий цвет) и печеночным артериям (красный цвет), образуя «портальную триаду» (Bloom and Fawcett: A Text Book of Histology 10th Edition).

Гепатоциты

Желчный пузырь

А

Синусоид

Клетки Купфера, звездчатые клетки Ито, блуждающие лейкоциты, а также эндотелиальные клетки составляют строму печени, особенностью которой является образование соединительнотканного рубца на месте массовой гибели гепатоцитов при повреждении печени. В состав соединительной ткани печени также входят фибробласты и волокна соединительной ткани, образующие опорную сеть для гепатоцитов.

При развитии гепатоцеллюлярной карциномы происходит изменение архитектуры печени. Гепатоцеллюлярная карцинома, как и любой другой тип рака, возникает из-за накопления мутаций в клетках, что способствует увеличению скорости репликации и/или блокировке апоптоза клетки. Иммунная система организма начинает действовать не только на измененные, но и на здоровые клетки, что может вызвать новые ошибки в процессе репарации и усугубить процесс канцерогенеза.

Классическими гистопатологическими особенностями ГЦК человека являются хорошо выраженные васкуляризированные опухоли с сосудистой инвазией. На микроскопическом уровне клетки опухолевой ткани представляют собой компактно уложенные широкие трабекулы (более 3-х клеток в ширину). Опухолевые клетки обладают выраженной ацилярной картиной, цитологической атипией, митотической активностью. Кроме того, в опухолевой ткани ГЦК отсутствуют клетки Купфера (Shafizadeh N., Kakar S., 2011).

Гистопатоморфологическая структура может варьировать от пациента к пациенту и даже у одного пациента в процессе развития ГЦК. Некоторые авторы постулируют поэтапную дедифференцировку. При прогрессии заболевания ГЦК хорошо дифференцированные опухолевые клетки печени трансформируются в менее дифференцированные (Kojiro M., 1998; Oikawa T. et al., 2005; Sugihara S. et al., 1992; Sakamoto M. et al., 1991).

Для морфологической характеристики опухолевой ткани ГЦК широко используется система Эдмондсона и Штейнера (Paradis V., 1954). Так, в

15

данной системе к первому классу (01) относятся опухоли, состоящие из небольших дифференцированных опухолевых клеток с большой цитоплазмой и не измененным ядром. Такие клетки сложно отличить от гиперплазированных гепатоцитов, однако уже на этой стадии различимы трабекулы. Опухолевые клетки второго класса (011) обладают гетерохроматизмом и заметными ядрышками. В просвете ацинусов содержится желчь. К третьему классу (0111) относятся опухолевые клетки, обладающие плеоморфизмом, выраженном в изменении форм и размеров клеток, обладающих ангулярными ядрами. В цитоплазме таких клеток отсутствуют желчные пигменты. Кроме того, наблюдается рост клеток в сосудистых пространствах. Четвертая стадия (01У) характеризуется гигантскими анапластическими (недифференцированными) опухолевыми клетками. Чаще всего ГЦК обнаруживают на стадиях 01 и 011.

Важно отметить, что внутри опухолевой ткани может наблюдаться гетерогенность, которая затрудняет выполнение биопсии для точной оценки стадии ГЦК у пациентов. Однако в таком случае гистологи описывают более злокачественную область ткани опухоли. Гетерогенность клеточных популяций ГЦК, обладающих различными молекулярными и морфологическими характеристиками, затрудняет эффект лечения ГЦК.

1.3 Гетерогенность опухолевой ткани

При некоторых раковых заболеваниях, таких как острая миелоидная лейкемия, хронический миелоидный лейкоз, рак молочной железы, глиобластома, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак яичников, наблюдается иерархия клеток, при которой онкогенные раковые стволовые клетки дифференцируются в не-онкогенные дочерние клетки. Секвенирование и подробное исследование клонов раковых клеток может выявить степень прогрессирования заболевания и резистентности к терапии. Многи исследователи используют модель стволовых клеток рака. Центральное место в таких работах занимает гипотеза о том, что рост и прогрессия опухоли обусловлены малой популяцией онкогенных стволовых клеток, а большинство не-онкогенных раковых клеток не вносят вклад в рост опухоли. Это свидетельствует о том, что терапевтические стратегии должны уделять большее значение именно стволовым клеткам рака. Данная гипотеза была протестирована при помощи трансплантаций, чтобы проверить потенциал раковых клеток к созданию вторичной опухоли, однако клеток, образующих вторичную опухоль, было мало (Meacham С., Morrison S., 2013).

Солидные опухоли, в том числе гепатоцеллюлярная карцинома, обладают выраженной гетерогенностью и могут состоять из нескольких клональных субпопуляций раковых клеток, обладающих различными потенциями к метастазированию, скоростью роста, экспрессией маркеров и т.п. (Romano M. et al., 2015).

Анализ клинических данных показал, что 30%-60% метастатических опухолей, способных к рецидивам, содержат клоны раковых клеток, отличные от первичной опухоли. Функциональная гетерогенность опухолевых субпопуляций может быть следствием генетической изменчивости, воздействия экологии и обратимых изменений в свойствах клеток и является серьезной проблемой для разработки и применения системной таргетной терапии (Lu L. et al., 2017).

17

После хирургической резекции локализованной опухоли ГЦК у 70% пациентов происходит рецидив заболевания. Считается, что повторное развитие ГЦК может возникнуть в результате внутрипеченочного метастазирования первичной опухоли, либо может быть связан с возникновением вторичной опухоли de novo (Forner A., Llovet J., Bruix J., 2012; Wu J. et al., 2009).

Клеточные популяции в составе опухоли могут паракринно влиять друг на друга и на окружающую опухоль ткань, таким образом, повышая выживаемость клонов, формируя определенный клеточный фенотип, который противостоит иммунной системе организма, что в совокупности способствует прогрессии и росту опухоли, а также ее инвазии и метастазированию. В настоящее время проводится поиск систематического исследования опухоли для выявления гетерогенности. Одни исследования посвящены выявлению степени дифференцировки раковых клеток гистологическими меотдами, а также методом иммунохимического окрашивания на белки Р-катенина, глутаминсинтетазы, цитокератина CK7, CD44, AFP, EpCAM (An F. et al., 2001). Другие исследования показали гетерогенность опухолевой ткани путем определения мутации некоторых генов, например, TP53 и CTNNB1 (Friemel J. et al., 2015).

До сих пор генетическая гетерогенность и различия в экспрессии биомаркеров в образцах ГЦК, исследуемых после хирургической резекции, не подвергались систематическому анализу. Однако для совершенствования клинико-патологической классификации, а также для улучшения таргетной терапии ГЦК, необходимо всесторонне охарактеризовать внутриопухолевую гетерогенность (Friemel J. et al., 2015).

Исследование взаимодействия раковых клонов и вклада каждого из них в прогрессию опухоли позволит понять причину развития, степень прогрессирования ГЦК, резистентности раковых клеток к терапии, что даст

возможность разработать новые методы терапии.

18

1.4 Эпителио-мезенхимный переход в процессе канцерогенеза

Недавние исследования показали, что прогрессированию рака способствует процесс эпителио-мезенхимного перехода (ЭМП). Опухолевые клетки эпителиального происхождения способны менять свой фенотип на более примитивный мезенхимный, что облегчает подвижность и инвазию (Boyer B., Valles A., Edme N., 2000). Существуют данные о том, что у пациентов с ГЦК способность раковых клеток к ЭМП коррелирует с низкой выживаемостью (van Zijl F. et al., 2011; Kim J. et al., 2010; Zhai X. et al., 2014).

В процессе ЭМП эпителиальные клетки меняют свою полярность, происходит понижение экспрессии эпителиальных маркеров, например, Е-кадгерина (Tashiro E. et al., 2016) и муцина (Zhai X. et al., 2014), и повышение экспрессии мезенхимальных маркеров, таких как виментин, N-кадгерин, коллаген, фибронектин (Karihtala P. et al., 2013; Nakajima S. et al., 2004; Zhang X. et al., 2013; Hosper N. et al., 2013; Kaufhold S., Bonavida B., 2014).

Виментин - основной белок промежуточных филаментов, который экспрессируется в мезенхимных клетках, поддерживает клеточную целостность и был признан маркером ЭМП. При канцерогенезе экспрессия виментина повышается, что коррелирует с ростом опухоли и метастазированием. Поэтому виментин может стать привлекательной мишенью для таргетной терапии рака. Повышенная экспрессия виментина показана при таких заболеваниях как рак предстательной железы, желудочно-кишечные опухоли, рак молочной железы, злокачественной меланомы и рака легких. Кроме того, повышенная экспрессия виментина связана с высоким уровнем альфафетопротеина (AFP) - маркером ГЦК - в сыворотке крови пациентов с ГЦК (Satelli A., Li S., 2011).

Взаимодействие клеток осуществляется за счет трансмембранных гликопротеинов, ответственных за кальций зависимую адгезию клеток. К адгезионным белкам относятся кадгерины Е и N. Снижение уровня экспрессии кадгерина Е часто ассоциируется с дедифференцировкой и

19

инвазией раковых клеток злокачественных новообразований у человека, в том числе при ГЦК (Liu Y.A. et al., 2015). В животных моделях пониженая экспрессия Е-кадгерина коррелирует со стадией перехода от аденомы к карциноме (Thiery J.P., 2002). У человека пониженный уровень Е-кадгерина наблюдается при карциноме желудка, молочной железы, поджелудочной железы и печени, сопровождающейся метастазированием и инвазией. Пониженная экспрессия Е-кадгерина индуцирует подвижность опухолевых клеток и способствует их инвазии посредством сигнального пути Wnt и/или передачи сигнала путем высвобождения ß-катенина, который перемещается в ядро и активирует транскрипционные факторы, такие как c-Myc, циклин D1, фибронектин и др. (Quan H. et al., 2014). Таким образом, роль кадгерина Е при ГЦК установлена (Osada T. et al., 1996; Panebianco C., Saracino C., Pazienza V., 2014).

Цитоплазматическая часть Е-кадгерина содержит сайт связывания с ß-катенином. Связь Е-кадгерин - ß-катенин является основой образования эпителиального пласта клеток. Накопление ß-катенина в ядре часто связано с пониженной экспрессией Е-кадгерина и приобретением клетками инвазивного фенотипа. Таким образом, клетки, которые теряют Е-кадгерин с клеточной поверхности, более восприимчивы к индукции ЭМП различными факторами (Kim K., Lu Z., Hay E.D., 2002; Thiery J., 2002).

Функция N-кадгерина в процессе опухолевого патогенеза и

метастазирования остается спорным. Повышенная экспрессия N-кадгерина

показана при раке молочной железы, предстательной железы, а также при

меланоме (Tanaka H. et al., 2010; Nagi C. et al., 2005). С другой стороны, было

показано подавление экспрессии N-кадгерина при остеосаркоме, карциноме

яичников, глиобластоме и почечно-клеточной карциноме. В этих случаях N-

кадгерин, возможно, выступает в роли опухолевого супрессора. (Kashima T.

et al., 1999; Derycke L.D., Bracke M.E., 2004). При ГЦК показано повышение

экспрессии N-кадгерина в опухолевой ткани по сравнению с окружающей

20

тканью, что коррелировало с рецидивами ГЦК после резекции опухоли (Seo D.D. et al., 2008). Используя метод РНК интерференции, было показано, что подавление N-кадгерина в опухолевых клетках печени человека приводит к развитию метастатического потенциала ГЦК и коррелирует с плохим прогнозом заболевания (Zhan D. et al., 2011). Некоторые исследования показали, что экспрессия N-кадгерина коррелирует с морфологическими изменениями опухолевых клеток в сторону фибробластоподобного фенотипа (Kalluri R. and Weinberg R., 2009).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Дашенкова, Наталия Олеговна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Зиневич Л.С., Микаелян А.С. Экспрессия гена инсулиноподобного фактора роста 1 при канцерогенезе печени у мышей // Доклады академии наук. - 2012. -Т.442 - №1 - 121-123.

2. Adamek A., Kasprzak A., Mikos H., Przybyszewska W., Seraszek-Jaros A., Czajka A., Sterzynska K., Mozer-Lisewska I. The insulin-like growth factor-1 and expression of its binding protein- 3 in chronic hepatitis C and hepatocellular carcinoma // Oncol. Rep. - 2013. - Т. 30 - № 3 - 1337-1345с.

3. Aishima S., Basaki Y., Oda Y., Kuroda Y., Nishihara Y., Taguchi K., Taketomi A., Maehara Y., Hosoi F., Maruyama Y., Fotovati A., Oie S., Ono M., Ueno T., Sata M., Yano H., Kojiro M., Kuwano M., Tsuneyoshi M. High expression of insulin-like growth factor binding protein-3 is correlated with lower portal invasion and better prognosis in human hepatocellular carcinoma // Cancer Sci. - 2006. - Т. 97 - № 11 -1182-1190с.

4. Aleem E., Elshayeb A., Elhabachi N., Mansour A. R., Gowily A., Hela A. Serum IGFBP-3 is a more effective predictor than IGF-1 and IGF-2 for the development of hepatocellular carcinoma in patients with chronic HCV infection // Oncol Lett - 2012. -Т. 3 - № 3 - 704-712с.

5. An F.Q., Matsuda M., Fujii H., Tang R., Amemiya H., Dai Y., Matsumoto Y. Tumor heterogeneity in small hepatocellular carcinoma: analysis of tumor cell proliferation, expression and mutation of p53 AND beta-catenin // Int. J. Cancer - 2001.

89

- T. 93 - № 4 - 468-474C.

6. Animal Research Advisiry Committe Guidelines, URL: http: //oacu.od.nih.gov/ARAC/

7. Asakawa K., Hizuka N., Takano K., Horikawa R., Sukegawa I., Toyoda C., Shizume K. Human growth hormone stimulates liver regeneration in rats // J. Endocrinol. Invest. - 1989. - T. 12 - № 5 - 343-347c.

8. Azar W. J., Zivkovic S., Werther G. A., Russo V. C. IGFBP-2 nuclear translocation is mediated by a functional NLS sequence and is essential for its pro-tumorigenic actions in cancer cells. // Oncogene - 2014. - T. 33 - № 5 - 578-588c.

9. Bach L.A. Recent insights into the actions of IGFBP-6 // J Cell Commun Signal -2015. - T. 9 - № 2 - 189-200c.

10. Bai X.L. Myocyte enhancer factor 2C regulation of hepatocellular carcinoma via vascular endothelial growth factor and Wnt/p-catenin signaling // Oncogene - 2015. -T. 34 - № 31 - 4089-4097c.

11. Bartling B., Koch A., Simm A., Scheubel R., Silber R.-E., Santos A. N. Insulinlike growth factor binding proteins-2 and -4 enhance the migration of human CD34-/CD133+ hematopoietic stem and progenitor cells // Int. J. Mol. Med. - 2010. - T. 25 -№ 1 - 89-96c.

12. Bartosiewicz M.J, Jenkins D., Penn S., Emery J., Buckpitt A. Unique gene expression patterns in liver and kidney associated with exposure to chemical toxicants // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2001. - T. 297 - № 3 - 895-905c.

13. Baserga R. The insulin-like growth factor I receptor: a key to tumor growth? // Cancer Res. - 1995. - T. 55 - № 2 - 249-252c.

14. Bedard P.L., Hansen A. R., Ratain M. J., Siu L. L. Tumour heterogeneity in the clinic // Nature - 2013. - T. 501 - № 7467 - 355-364c.

15. Ben-Shmuel A., Shvab A., Gavert N., Brabletz T., Ben-Ze'ev A. Global analysis of L1-transcriptomes identified IGFBP-2 as a target of ezrin and NF-kB signaling that promotes colon cancer progression // Oncogene - 2013. - T. 32 - № 27 - 3220-3230c.

16. Birchmeier W., Behrens J. Cadherin expression in carcinomas: role in the

90

formation of cell junctions and the prevention of invasiveness // Biochim. Biophys. Acta - 1994. - T. 1198 - № 1 - 11-26c.

17. Boyer B. Induction and regulation of epithelial-mesenchymal transitions // Biochem. Pharmacol. - 2000. - T. 60 - № 8 - 1091-1099c.

18. Bruix J., Gores G. J., Mazzaferro V. Hepatocellular carcinoma: clinical frontiers and perspectives // Gut - 2014. - T. 63 - № 5 - 844-855c.

19. Buckbinder L., Talbott R., Velasco-Miguel S., Takenaka I., Faha B., Seizinger B. R., Kley N.. Induction of the growth inhibitor IGF-binding protein 3 by p53 // Nature -1995. - T. 377 - № 6550 - 646-649c.

20. Bugianesi E. Review article: steatosis, the metabolic syndrome and cancer // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2005. - T. 22 Suppl 2 - 40-43c.

21. Butt A.J., Butt A. J., Dickson K. A., McDougall F., Baxter R. C. Insulin-like growth factor-binding protein-5 inhibits the growth of human breast cancer cells in vitro and in vivo // J. Biol. Chem. - 2003. - T. 278 - № 32 - 29676-29685c.

22. Calle E.E., Kaaks R. Overweight, obesity and cancer: epidemiological evidence and proposed mechanisms // Nat. Rev. Cancer - 2004. - T. 4 - № 8 - 579-591c.

23. Carracedo A., Ma L., Teruya-Feldstein J., Rojo F., Salmena L., Alimonti A., Egia A., Sasaki A. T., Thomas G., Kozma S. C., Papa A., Nardella C., Cantley L. C., Baselga J., Pandolfi P. P. Inhibition of mTORC1 leads to MAPK pathway activation through a PI3K-dependent feedback loop in human cancer // J. Clin. Invest. - 2008. - T. 118 - № 9 - 3065-3074c.

24. Chen D., Siddiq A., Emdad L., Rajasekaran D., Gredler R., Shen X.-N., Santhekadur P.K., Srivastava J., Robertson C.L., Dmitriev I., Kashentseva E.A., Curiel D.T., Fisher P.B., Sarkar D. Insulin-like growth factor-binding protein-7 (IGFBP7): a promising gene therapeutic for hepatocellular carcinoma (HCC) // Mol. Ther. - 2013. -T. 21 - № 4 - 758-766c.

25. Chun Y.S., Huang M., Rink L., Von Mehren M. Expression levels of insulin-like growth factors and receptors in hepatocellular carcinoma: a retrospective study // World J Surg Oncol - 2014. - T. 12 - 231c.

26. Cochran D.G. Excreta analysis on additional cockroach species and the house cricket // Comp Biochem Physiol A Comp Physiol - 1976. - T. 53 - № 1 - 79-81 c.

27. Collett-Solberg P.F., Cohen P. Genetics, chemistry, and function of the IGF/IGFBP system // Endocrine - 2000. - T. 12 - № 2 - 121-136c.

28. Crossey P.A., Jones J.S., Miell J.P. Dysregulation of the insulin/IGF binding protein-1 axis in transgenic mice is associated with hyperinsulinemia and glucose intolerance // Diabetes - 2000. - T. 49 - № 3 - 457-465c.

29. Davies S.C., Wass J.A., Ross R.J., Cotterill A.M., Buchanan C.R., Coulson V.J., Holly J.M. The induction of a specific protease for insulin-like growth factor binding protein-3 in the circulation during severe illness // J. Endocrinol. - 1991. - T. 130 - № 3 - 469-473c.

30. Denduluri S.K., Idowu O., Wang Z., Liao Z., Yan Z., Mohammed M.K., Ye J., Wei Q., Wang J., Zhao L., Luu H.H. Insulin-like growth factor (IGF) signaling in tumorigenesis and the development of cancer drug resistance // Genes Dis - 2015. - T. 2 - № 1 - 13-25c.

31. Dennis P.A., Rifkin D.B. Cellular activation of latent transforming growth factor beta requires binding to the cation-independent mannose 6-phosphate/insulin-like growth factor type II receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 1991. - T. 88 - № 2 -580-584c.

32. Derycke L., Bracke M. N-cadherin in the spotlight of cell-cell adhesion, differentiation, embryogenesis, invasion and signaling // The International Journal of Developmental Biology - 2004. - T. 48 - № 5-6 - 463-476c.

33. Desbois-Mouthon C., Baron A., Blivet-Van Eggelpoel M.-J., Fartoux L., Venot C., Bladt F., Housset C., Rosmorduc O. Insulin-like growth factor-1 receptor inhibition induces a resistance mechanism via the epidermal growth factor receptor/HER3/AKT signaling pathway: rational basis for cotargeting insulin-like growth factor-1 receptor and epidermal growth factor receptor in hepatocellular carcinoma // Clin. Cancer Res. -2009. - T. 15 - № 17 - 5445-5456c.

34. Duan C., Xu Q. Roles of insulin-like growth factor (IGF) binding proteins in

92

regulating IGF actions // Gen. Comp. Endocrinol. - 2005. - T. 142 - № 1-2 - 44-52c.

35. Durai R., Davies M., Yang W., Yang S.Y., Seifalian A., Goldspink G., Winslet M. Biology of insulin-like growth factor binding protein-4 and its role in cancer (review) // Int. J. Oncol. - 2006. - T. 28 - № 6 - 1317-1325c.

36. Enguita-German M., Fortes P. Targeting the insulin-like growth factor pathway in hepatocellular carcinoma // World J Hepatol - 2014. - T. 6 - № 10 - 716-737c.

37. Fan Z.-C., Yan J., Liu G., Tan X., Weng X., Wu W., Zhou J., Wei X. Real-time monitoring of rare circulating hepatocellular carcinoma cells in an orthotopic model by in vivo flow cytometry assesses resection on metastasis // Cancer Res. - 2012. - T. 72 -№ 10 - 2683-2691 c.

38. Ferry R.J., Katz L.E., Grimberg A., Cohen P., Weinzimer S.A. Cellular actions of insulin-like growth factor binding proteins // Horm. Metab. Res. - 1999. - T. 31 - № 23 - 192-202c.

39. Forbes B.E., McCarthy P., Norton R.S. Insulin-like growth factor binding proteins: a structural perspective // Front Endocrinol (Lausanne) - 2012. - T. 3 - 38c.

40. Forner A., Llovet J., Bruix J. Hepatocellular carcinoma // Lancet - 2012. - T. 379 - № 9822 - 1245-1255c.

41. Friemel J., Rechsteiner M., Frick L., Böhm F., Struckmann K., Egger M., Moch H., Heikenwalder M., Weber A. Intratumor heterogeneity in hepatocellular carcinoma // Clin. Cancer Res. - 2015. - T. 21 - № 8 - 1951-1961c.

42. Froesch E.R., Schmid C., Schwander J., Zapf J. Actions of insulin-like growth factors // Annu. Rev. Physiol. - 1985. - T. 47 - 443-467c.

43. Frommer K.W., Reichenmiller K., Schutt B.S., Hoeflich A., Ranke M.B., Dodt G., Elmlinger M.W. IGF-independent effects of IGFBP-2 on the human breast cancer cell line Hs578T // J. Mol. Endocrinol. - 2006. - T. 37 - № 1 - 13-23c.

44. Fürstenberger G., Senn H.-J. Insulin-like growth factors and cancer // Lancet Oncol. - 2002. - T. 3 - № 5 - 298-302c.

45. Gao J.-J. Sorafenib-based combined molecule targeting in treatment of hepatocellular carcinoma // World Journal of Gastroenterology - 2015. - T. 21 - № 42

93

- 12059c.

46. GarcA-a de Herreros A. Epithelial to mesenchymal transition in tumor cells as consequence of phenotypic instability // Frontiers in Cell and Developmental Biology -2014. - T. 2.

47. Giovannucci E. Insulin-like growth factor-I and binding protein-3 and risk of cancer // Horm. Res. - 1999. - T. 51 Suppl 3 - 34-41 c.

48. Gong Y., Cui L., Minuk G.Y. The expression of insulin-like growth factor binding proteins in human hepatocellular carcinoma // Mol. Cell. Biochem. - 2000. - T. 207 - № 1-2 - 101-104c.

49. Hanafusa T., Yumoto Y., Nouso K., Nakatsukasa H., Onishi T., Fujikawa T., Taniyama M., Nakamura S., Uemura M., Takuma Y., Yumoto E., Higashi T., Tsuji T. Reduced expression of insulin-like growth factor binding protein-3 and its promoter hypermethylation in human hepatocellular carcinoma // Cancer Lett. - 2002. - T. 176 -№ 2 - 149-158c.

50. He L., Tian D., Li P., He X. Mouse models of liver cancer: Progress and recommendations // Oncotarget - 2015. - T. 6 - № 27 - 23306-23322c.

51. He X., Chang Y., Meng F., Wang M., Xie Q., Tang F., Li P., Song Y., Lin J. MicroRNA-375 targets AEG-1 in hepatocellular carcinoma and suppresses liver cancer cell growth in vitro and in vivo // Oncogene - 2012. - T. 31 - № 28 - 3357-3369c.

52. Hernandez-Gea V., Toffanin S., Friedman S.L., Llovet J.M. Role of the microenvironment in the pathogenesis and treatment of hepatocellular carcinoma // Gastroenterology - 2013. - T. 144 - № 3 - 512-527c.

53. Holzenberger M., Dupont J., Ducos B., Leneuve P., Geloen A., Even P.C., Cervera P., Le Bouc Y. IGF-1 receptor regulates lifespan and resistance to oxidative stress in mice // Nature - 2003. - T. 421 - № 6919 - 182-187c.

54. Horiike K., Nishina Y., Miyake Y., Yamano T. Affinity labeling of D-amino acid oxidase with an acetylenic substrate // J. Biochem. - 1975. - T. 78 - № 1 - 57-63c.

55. Hosper N.A., van den Berg P., de Rond S., Popa E. R., Wilmer M. J., Masereeuw R., Bank R. A. Epithelial-to-mesenchymal transition in fibrosis: collagen type I

94

expression is highly upregulated after EMT, but does not contribute to collagen deposition // Exp. Cell Res. - 2013. - T. 319 - № 19 - 3000-3009c.

56. Hu H., Qiu Y., Guo M., Huang Y., Fang L., Peng Z., Ji W., Xu Y., Shen S., Yan Y., Huang X., Zheng J., Su C. Targeted Hsp70 expression combined with CIK-activated immune reconstruction synergistically exerts antitumor efficacy in patient-derived hepatocellular carcinoma xenograft mouse models // Oncotarget - 2015. - T. 6 - № 2 -1079-1089c.

57. Huynh H., Nguyen T., Chow K., Tan P., Soo K., Tran E. Over-expression of the mitogen-activated protein kinase (MAPK) kinase (MEK)-MAPK in hepatocellular carcinoma: its role in tumor progression and apoptosis // BMC Gastroenterol - 2003. -T. 3 - 19c.

58. Janku F., Kaseb A., Tsimberidou A. M., Wolff R. A., Kurzrock R. Identification of novel therapeutic targets in the PI3K/AKT/mTOR pathway in hepatocellular carcinoma using targeted next generation sequencing // Oncotarget - 2014. - T. 5 - № 10 - 3012-3022c.

59. Jemal A., Bray F., Center M.M., Ferlay J., Ward E., Forman D. Global cancer statistics // CA Cancer J Clin - 2011. - T. 61 - № 2 - 69-90c.

60. Jones J.I., D'Ercole A.J., Camacho-Hubner C., Clemmons D.R. Phosphorylation of insulin-like growth factor (IGF)-binding protein 1 in cell culture and in vivo: effects on affinity for IGF-I // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 1991. - T. 88 - № 17 - 7481-7485c.

61. Kahn T., Bosch J., Levitt M.F., Goldstein M.H. Effect of sodium nitrate loading on electrolyte transport by the renal tubule // Am. J. Physiol. - 1975. - T. 229 - № 3 -746-753c.

62. Kalluri R., Weinberg R. A. The basics of epithelial-mesenchymal transition // Journal of Clinical Investigation - 2009. - T. 119 - № 6 - 1420-1428c.

63. Karihtala P., Auvinen P., Kauppila S., Haapasaari K.-M., Jukkola-Vuorinen A., Soini Y.. Vimentin, zeb1 and Sip1 are up-regulated in triple-negative and basal-like breast cancers: association with an aggressive tumour phenotype // Breast Cancer Res.

95

Treat. - 2013. - T. 138 - № 1 - 81-90c.

64. Karna E., Surazynski A., Orlowski K., Laszkiewicz J., Puchalski Z., Nawrat P., Palka J. Serum and tissue level of insulin-like growth factor-I (IGF-I) and IGF-I binding proteins as an index of pancreatitis and pancreatic cancer // Int J Exp Pathol - 2002. - T. 83 - № 5 - 239-245c.

65. Kashima T., Kawaguchi J., Takeshita S., Kuroda M., Takanashi M., Horiuchi H., Imamura T., Ishikawa Y., Ishida T., Mori S., Machinami R., Kudo A. Anomalous Cadherin Expression in Osteosarcoma // The American Journal of Pathology - 1999. -T. 155 - № 5 - 1549-1555c.

66. Kaufhold S., Bonavida B. Central role of Snail1 in the regulation of EMT and resistance in cancer: a target for therapeutic intervention // J. Exp. Clin. Cancer Res. -2014. - T. 33 - 62c.

67. Kew M. Hepatocellular carcinoma: epidemiology and risk factors // Journal of Hepatocellular Carcinoma - 2014. - 115c.

68. Khandwala H.M., McCutcheon I.E., Flyvbjerg A., Friend K.E. The effects of insulin-like growth factors on tumorigenesis and neoplastic growth // Endocr. Rev. -2000. - T. 21 - № 3 - 215-244c.

69. Kiener H.P., Brenner M.B. Building the synovium: cadherin-11 mediates fibroblast-like synoviocyte cell-to-cell adhesion // Arthritis Res. Ther. - 2005. - T. 7 -№ 2 - 49-54c.

70. Killion J., Radinsky R., Fidler I. Orthotopic models are necessary to predict therapy of transplantable tumors in mice // Cancer Metastasis Rev. - 1998. - T. 17 - № 3 - 279-284c.

71. Kim D.G., Lee D.Y., Cho B.H., You K.R., Kim M.Y., Ahn D.S. Down-regulation of insulin-like growth factor binding proteins and growth modulation in hepatoma cells by retinoic acid // Hepatology - 1999. - T. 29 - № 4 - 1091-1098c.

72. Kim J., Hong J., Park J. Y., Park J. H., Yu Y.-S., Park S. Y., Lim E. K., Choi K. Y., Lee E. K., Paik S. S., Lee K. G., Wang H. J., Do I.-G., Joh J.-W., Kim D. S. Epithelial-mesenchymal transition gene signature to predict clinical outcome of

96

hepatocellular carcinoma // Cancer Sci. - 2010. - T. 101 - № 6 - 1521-1528c.

73. Kim K., Lu Z., Hay E. Direct evidence for a role of beta-catenin/LEF-1 signaling pathway in induction of EMT // Cell Biol. Int. - 2002. - T. 26 - № 5 - 463-476c.

74. Koike K. Hepatocarcinogenesis in hepatitis viral infection: lessons from transgenic mouse studies // J. Gastroenterol. - 2002. - T. 37 Suppl 13 - 55-64c.

75. Kokudo T., Suzuki Y., Yoshimatsu Y., Yamazaki T., Watabe T., Miyazono K. Snail is required for TGFbeta-induced endothelial-mesenchymal transition of embryonic stem cell-derived endothelial cells // J. Cell. Sci. - 2008. - T. 121 - № Pt 20 - 3317-3324c.

76. Kourtidis A., Ngok S.P. p120 catenin: an essential regulator of cadherin stability, adhesion-induced signaling, and cancer progression // Prog Mol Biol Transl Sci - 2013.

- T. 116 - 409-432c.

77. Lachenmayer A., Alsinet C., Savic R., Cabellos L., Toffanin S., Hoshida Y., Villanueva A., Minguez B., Newell P., Tsai H.-W., Barretina J., Thung S., Ward S. C., Bruix J., Mazzaferro V., Schwartz M., Friedman S. L., Llovet J. M. Wnt-Pathway Activation in Two Molecular Classes of Hepatocellular Carcinoma and Experimental Modulation by Sorafenib // Clinical Cancer Research - 2012. - T. 18 - № 18 - 4997-5007c.

78. Lanaya H., Natarajan A., Komposch K., Li L., Amberg N., Chen L., Wculek S. K., Hammer M., Zenz R., Peck-Radosavljevic M., Sieghart W., Trauner M., Wang H., Sibilia M. EGFR has a tumour-promoting role in liver macrophages during hepatocellular carcinoma formation // Nat. Cell Biol. - 2014. - T. 16 - № 10 - 972-977c.

79. Laurila P, Leivo I. Basement membrane and interstitial matrix components form separate matrices in heterokaryons of PYS-2 cells and fibroblasts // J. Cell Sci. - 1993.

- T.104 - 59-68c.

80. Lee J.-S., Chu I.-S., Mikaelyan A., Calvisi D.F., Heo J., Reddy J.K., Thorgeirsson S.S. Application of comparative functional genomics to identify best-fit mouse models to study human cancer // Nat. Genet. - 2004. - T. 36 - № 12 - 1306-1311c.

97

81. LeRoith D., Roberts C.T. The insulin-like growth factor system and cancer // Cancer Lett. - 2003. - T. 195 - № 2 - 127-137c.

82. Leu J.I., Crissey M.A.S., Taub R. Massive hepatic apoptosis associated with TGF-beta1 activation after Fas ligand treatment of IGF binding protein-1-deficient mice // J. Clin. Invest. - 2003. - T. 111 - № 1 - 129-139c.

83. Lewitt M.S., Denyer G.S., Cooney G.J., Baxter R.C. Insulin-like growth factor-binding protein-1 modulates blood glucose levels // Endocrinology - 1991. - T. 129 -№ 4 - 2254-2256c.

84. Li H., Batth I.S., Qu X., Xu L., Song N., Wang R., Liu Y. IGF-IR signaling in epithelial to mesenchymal transition and targeting IGF-IR therapy: overview and new insights // Mol. Cancer - 2017. - T. 16 - № 1 - 6c.

85. Li L., Wang H. Heterogeneity of liver cancer and personalized therapy // Cancer Lett. - 2016. - T. 379 - № 2 - 191-197c.

86. Li P., Cao Y., Li Y., Zhou L., Liu X., Geng M. Expression of Wnt-5a and P-catenin in primary hepatocellular carcinoma // Int J Clin Exp Pathol - 2014. - T. 7 - № 6 - 3190-3195c.

87. Li Y., Tang Z.-Y., Hou J.-X. Hepatocellular carcinoma: insight from animal models // Nat Rev Gastroenterol Hepatol - 2011. - T. 9 - № 1 - 32-43c.

88. Liang W., Wang D., Ling X., Kao A. A., Kong Y., Shang Y., Guo Z., He X. Sirolimus-based immunosuppression in liver transplantation for hepatocellular carcinoma: a meta-analysis // Liver Transpl. - 2012. - T. 18 - № 1 - 62-69c.

89. Lilien J., Balsamo J. The regulation of cadherin-mediated adhesion by tyrosine phosphorylation/dephosphorylation of beta-catenin // Curr. Opin. Cell Biol. - 2005. - T. 17 - № 5 - 459-465c.

90. Liu Y., Liang B., Guan Y., You J., Zhu L., Chen X., Huang Z. Loss of N-cadherin is associated with loss of E-cadherin expression and poor outcomes of liver resection in hepatocellular carcinoma // J. Surg. Res. - 2015. - T. 194 - № 1 - 167-176c.

91. Llovet J.M. Clinical and molecular classification of hepatocellular carcinoma //

98

Liver Transplantation - 2007. - T. 13 - № S2 - S13-S16c.

92. Lu L.-C., Hsu C.-H., Hsu C., Cheng A.-L. Tumor Heterogeneity in Hepatocellular Carcinoma: Facing the Challenges // Liver Cancer - 2016. - T. 5 - № 2

- 128-138c.

93. Lund P., Schubert D., Niketeghad F., Schirmacher P. Autocrine inhibition of chemotherapy response in human liver tumor cells by insulin-like growth factor-II // Cancer Lett. - 2004. - T. 206 - № 1 - 85-96c.

94. Luo S.-M., Tan W.-M., Deng W.-X., Zhuang S.-M., Luo J.-W. Expression of albumin, IGF-1, IGFBP-3 in tumor tissues and adjacent non-tumor tissues of hepatocellular carcinoma patients with cirrhosis // World J. Gastroenterol. - 2005. - T. 11 - № 27 - 4272-4276c.

95. Lu P, Weaver V., Werb Z. The extracellular matrix: a dynamic niche in cancer progression // J. Cell Biol. - 2012. - T.196 - 395-406c.

96. Macaulay V.M. Insulin-like growth factors and cancer // Br. J. Cancer - 1992. -T. 65 - № 3 - 311-320c.

97. Maharjan A., Pilling D., Gomer R. High and Low Molecular Weight Hyaluronic Acid Differentially Regulate Human Fibrocyte Differentiation // PLoS One.

- 2011. - Vol.6.

98. Maronpot R.R. Biological Basis of Differential Susceptibility to Hepatocarcinogenesis among Mouse Strains // J Toxicol Pathol - 2009. - T. 22 - № 1 -11-33c.

99. Meacham C.E., Morrison S.J. Tumour heterogeneity and cancer cell plasticity // Nature - 2013. - T. 501 - № 7467 - 328-337c.

100. Medici D., Hay E. D., Olsen B. R. Snail and Slug promote epithelial-mesenchymal transition through beta-catenin-T-cell factor-4-dependent expression of transforming growth factor-beta3 // Mol. Biol. Cell - 2008. - T. 19 - № 11 - 4875-4887c.

101. Mehrian-Shai R., Chen C.D., Shi T., Horvath S., Nelson S.F., Reichardt J.K.V., Sawyers C.L. Insulin growth factor-binding protein 2 is a candidate biomarker

99

for PTEN status and PI3K/Akt pathway activation in glioblastoma and prostate cancer // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2007. - T. 104 - № 13 - 5563-5568c.

102. Mehta H.H., Gao Q., Galet C., Paharkova V., Wan J., Said J., Sohn J.J., Lawson G., Cohen P., Cobb L.J., Lee K.-W. IGFBP-3 is a metastasis suppression gene in prostate cancer // Cancer Res. - 2011. - T. 71 - № 15 - 5154-5163c.

103. Nagi C., Guttman M., Jaffer S., Qiao R., Keren R., Triana A., Li M., Godbold J., Bleiweiss I. J., Hazan R. B. N-cadherin Expression in Breast Cancer: Correlation with an Aggressive Histologic Variant - Invasive Micropapillary Carcinoma // Breast Cancer Research and Treatment - 2005. - T. 94 - № 3 - 225-235c.

104. Nakajima S., Doi R., Toyoda E., Tsuji S., Wada M., Koizumi M., Tulachan S. S., Ito D., Kami K., Mori T., Kawaguchi Y., Fujimoto K., Hosotani R., Imamura M. N-cadherin expression and epithelial-mesenchymal transition in pancreatic carcinoma // Clin. Cancer Res. - 2004. - T. 10 - № 12 Pt 1 - 4125-4133c.

105. Nakatani T., Roy G., Fujimoto N., Asahara T., Ito A. Sex hormone dependency of diethylnitrosamine-induced liver tumors in mice and chemoprevention by leuprorelin // Jpn. J. Cancer Res. - 2001. - T. 92 - № 3 - 249-256c.

106. Nawshad A., Lagamba D., Polad A., Hay E. D. Transforming growth factor-beta signaling during epithelial-mesenchymal transformation: implications for embryogenesis and tumor metastasis // Cells Tissues Organs (Print) - 2005. - T. 179 -№ 1-2 - 11-23c.

107. Nejak-Bowen K.N., Monga S.P.S. Beta-catenin signaling, liver regeneration and hepatocellular cancer: sorting the good from the bad // Semin. Cancer Biol. - 2011. - T. 21 - № 1 - 44-58c.

108. Oh S.-H., Kim W.-Y., Lee O.-H., Kang J.-H., Woo J.-K., Kim J.-H., Glisson B., Lee H.-Y. Insulin-like growth factor binding protein-3 suppresses vascular endothelial growth factor expression and tumor angiogenesis in head and neck squamous cell carcinoma // Cancer Sci. - 2012. - T. 103 - № 7 - 1259-1266c.

109. Osada T., Sakamoto M., Ino Y., Iwamatsu A., Matsuno Y., Muto T.,

Hirohashi S. E-cadherin is involved in the intrahepatic metastasis of hepatocellular

100

carcinoma // Hepatology - 1996. - T. 24 - № 6 - 1460-1467c.

110. Panebianco C., Saracino C., Pazienza V. Epithelial-mesenchymal transition: molecular pathways of hepatitis viruses-induced hepatocellular carcinoma progression // Tumor Biology - 2014. - T. 35 - № 8 - 7307-7315c.

111. Pecchi A., Besutti G., De Santis M., Del Giovane C., Nosseir S., Tarantino G., Di Benedetto F., Torricelli P. Post-transplantation hepatocellular carcinoma recurrence: Patterns and relation between vascularity and differentiation degree // World J Hepatol - 2015. - T. 7 - № 2 - 276-284c.

112. Peinado H., Olmeda D., Cano A. Snail, Zeb and bHLH factors in tumour progression: an alliance against the epithelial phenotype? // Nat. Rev. Cancer - 2007. -T. 7 - № 6 - 415-428c.

113. Pez F., Lopez A., Kim M., Wands J. R., Caron de Fromentel C., Merle P. Wnt signaling and hepatocarcinogenesis: molecular targets for the development of innovative anticancer drugs // J. Hepatol. - 2013. - T. 59 - № 5 - 1107-1117c.

114. Philipps G.R., Chiemprasert T. Limited hydrolysis of tRNA by phosphodiesterase // Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. - 1975. - T. 356 - № 7 - 1097-1104c.

115. Pickup M.W., Mouw J.K., Weaver V.M. The extracellular matrix modulates the hallmarks of cancer // EMBO Rep. - 2014. - T. 15 - № 12 - 1243-1253c.

116. Pitot H.C., Dragan Y. P. Facts and theories concerning the mechanisms of carcinogenesis // FASEB J. - 1991. - T. 5 - № 9 - 2280-2286c.

117. Pivonello C., De Martino M.C., Negri M., Cuomo G., Cariati F., Izzo F., Colao A., Pivonello R. The GH-IGF-SST system in hepatocellular carcinoma: biological and molecular pathogenetic mechanisms and therapeutic targets // Infect. Agents Cancer - 2014. - T. 9 - 27c.

118. Pollak M. The insulin and insulin-like growth factor receptor family in neoplasia: an update // Nat. Rev. Cancer - 2012. - T. 12 - № 3 - 159-169c.

119. Pons F., Varela M., Llovet J.M. Staging systems in hepatocellular

101

carcinoma // HPB (Oxford) - 2005. - T. 7 - № 1 - 35-41c.

120. Qu B., Liu B.-R., Du Y.-J., Chen J., Cheng Y.-Q., Xu W., Wang X.-H. Wnt/ß-catenin signaling pathway may regulate the expression of angiogenic growth factors in hepatocellular carcinoma // Oncol Lett - 2014. - T. 7 - № 4 - 1175-1178c.

121. Quan H., Zhou F., Nie D., Chen Q., Cai X., Shan X., Zhou Z., Chen K., Huang A., Li S., Tang N. Hepatitis C virus core protein epigenetically silences SFRP1 and enhances HCC aggressiveness by inducing epithelial-mesenchymal transition // Oncogene - 2014. - T. 33 - № 22 - 2826-2835c.

122. Ranke M.B., Maier K.-P., Schweizer R., Stadler B., Schleicher S., Elmlinger M.W., Flehmig B. Pilot study of elevated levels of insulin-like growth factor-binding protein-2 as indicators of hepatocellular carcinoma // Horm. Res. - 2003. - T. 60 - № 4 - 174-180c.

123. Rao K.V., Vesselinovitch S.D. Age- and sex-associated diethylnitrosamine dealkylation activity of the mouse liver and hepatocarcinogenesis // Cancer Res. - 1973.

- T. 33 - № 7 - 1625-1627c.

124. Rehem R.N., El-Shikh W.M. Serum IGF-1, IGF-2 and IGFBP-3 as parameters in the assessment of liver dysfunction in patients with hepatic cirrhosis and in the diagnosis of hepatocellular carcinoma // Hepatogastroenterology - 2011. - T. 58

- № 107-108 - 949-954c.

125. Rodriguez-Tarduchy G., Collins M.K., Garcia I., Lopez-Rivas A. Insulinlike growth factor-I inhibits apoptosis in IL-3-dependent hemopoietic cells // J. Immunol. - 1992. - T. 149 - № 2 - 535-540c.

126. Romano M., De Francesco F., Pirozzi G., Gringeri E., Boetto R., Di Domenico M., Zavan B., Ferraro G.A., Cillo U. Expression of cancer stem cell biomarkers as a tool for a correct therapeutic approach to hepatocellular carcinoma // Oncoscience - 2015. - T. 2 - № 5 - 443-456c.

127. Rosenfeld R.G., Hwa V., Wilson L., Lopez-Bermejo A., Buckway C.,

Burren C., Choi W.K., Devi G., Ingermann A., Graham D., Minniti G., Spagnoli A., Oh

Y. The insulin-like growth factor binding protein superfamily: new perspectives //

102

Pediatrics - 1999. - T. 104 - № 4 Pt 2 - 1018-1021 c.

128. Rutanen E.M., Wahlstrom T., Koistinen R., Sipponen P., Jalanko H., Seppala M. Placental protein 12 (PP12) in primary liver cancer and cirrhosis / E. M. Rutanen, T. Wahlstrom, R. Koistinen, P. Sipponen, H. Jalanko, M. Seppala // Tumour Biol. - 1984. - T. 5 - № 2 - 95-102c.

129. Rygaard J., Povlsen C. Heterotransplantation of a human malignant tumour to "Nude" mice // Acta Pathol Microbiol Scand - 1969. - T. 77 - № 4 - 758-760c.

130. Samani A.A., Yakar S., LeRoith D., Brodt P. The role of the IGF system in cancer growth and metastasis: overview and recent insights // Endocr. Rev. - 2007. - T. 28 - № 1 - 20-47c.

131. Satelli A., Li S. Vimentin in cancer and its potential as a molecular target for cancer therapy // Cell. Mol. Life Sci. - 2011. - T. 68 - № 18 - 3033-3046c.

132. Scaggiante B., Kazemi M., Pozzato G., Dapas B., Farra R., Grassi M., Zanconati F., Grassi G. Novel hepatocellular carcinoma molecules with prognostic and therapeutic potentials // World J. Gastroenterol. - 2014. - T. 20 - № 5 - 1268-1288c.

133. Scharf J.-G., Braulke T. The role of the IGF axis in hepatocarcinogenesis // Horm. Metab. Res. - 2003. - T. 35 - № 11-12 - 685-693c.

134. Scharf J.G., Dombrowski F., Ramadori G. The IGF axis and hepatocarcinogenesis // MP, Mol. Pathol. - 2001. - T. 54 - № 3 - 138-144c.

135. Scharf J.G., Schmidt-Sandte W., Pahernik S.A., Ramadori G., Braulke T., Hartmann H. Characterization of the insulin-like growth factor axis in a human hepatoma cell line (PLC) // Carcinogenesis - 1998. - T. 19 - № 12 - 2121-2128c.

136. Schedlich L.J., Le Page S.L., Firth S.M., Briggs L.J., Jans D.A., Baxter R.C. Nuclear import of insulin-like growth factor-binding protein-3 and -5 is mediated by the importin beta subunit // J. Biol. Chem. - 2000. - T. 275 - № 31 - 23462-23470c.

137. Schirmacher P., Held W.A., Yang D., Chisari F.V., Rustum Y., Rogler C.E. Reactivation of insulin-like growth factor II during hepatocarcinogenesis in transgenic mice suggests a role in malignant growth // Cancer Res. - 1992. - T. 52 - № 9 - 2549-2556c.

138. Schmalhofer O., Brabletz S., Brabletz T. E-cadherin, beta-catenin, and ZEB1 in malignant progression of cancer // Cancer Metastasis Rev. - 2009. - T. 28 -151-166c.

139. Schwertfeger K.L., Cowman M.K., Telmer P.G., Turley E.A., McCarthy J.B. Hyaluronan, Inflammation, and Breast Cancer Progression // Front Immunol -2015. - T. 6 - 236c.

140. Seo D.D., Lee H. C., Kim H. J., Min H. J., Kim K. M., Lim Y. S., Chung Y.-H., Lee Y. S., Suh D. J., Yu E., Chun S. Y. Neural cadherin overexpression is a predictive marker for early postoperative recurrence in hepatocellular carcinoma patients // Journal of Gastroenterology and Hepatology - 2008. - T. 23 - № 7pt1 -1112-1118c.

141. Severino V., Alessio N., Farina A., Sandomenico A., Cipollaro M., Peluso G., Galderisi U., Chambery A. Insulin-like growth factor binding proteins 4 and 7 released by senescent cells promote premature senescence in mesenchymal stem cells // Cell Death and Disease - 2013. - T. 4 - № 11 - e911c.

142. Share J.B. Review of drug treatment for Down's syndrome persons // Am J Ment Defic - 1976. - T. 80 - № 4 - 388-393c.

143. Shen G., Rong X., Zhao J., Yang X., Li H., Jiang H., Zhou Q., Ji T., Huang S., Zhang J., Jia H. MicroRNA-105 suppresses cell proliferation and inhibits PI3K/AKT signaling in human hepatocellular carcinoma // Carcinogenesis - 2014. - T. 35 - № 12 - 2748-2755c.

144. Shi Y., Massague J. Mechanisms of TGF-beta signaling from cell membrane to the nucleus // Cell - 2003. - T. 113 - № 6 - 685-700c.

145. Shiota G., Harada K., Ishida M., Tomie Y., Okubo M., Katayama S., Ito H., Kawasaki H. Inhibition of hepatocellular carcinoma by glycyrrhizin in diethylnitrosamine-treated mice // Carcinogenesis - 1999. - T. 20 - № 1 - 59-63c.

146. Soga M., Kishimoto Y., Kawamura Y., Inagaki S., Makino S., Saibara T. Spontaneous development of hepatocellular carcinomas in the FLS mice with hereditary fatty liver // Cancer Lett. - 2003. - T. 196 - № 1 - 43-48c.

104

147. Soini Y., Tuhkanen H., Sironen R., Virtanen I., Kataja V., Auvinen P., Mannermaa A., Kosma V.-M. ranscription factors zeb1, twist and snai1 in breast carcinoma // BMC Cancer - 2011. - T. 11 - 73c.

148. Sporn M.B., Todaro G.J. Autocrine secretion and malignant transformation of cells // N. Engl. J. Med. - 1980. - T. 303 - № 15 - 878-880c.

149. Storesund A., Helle K.B. Practolol, caffeine and calcium in the regulation of mechanical activity of the cardiac ventricle in Myxine glutinosa (L.) // Comp. Biochem. Physiol. C, Comp. Pharmacol. - 1975. - T. 52 - № 1 - 17-22c.

150. Su T.S., Liu W.Y., Han S.H., Jansen M., Yang-Fen T.L., P'eng F.K., Chou C.K. Transcripts of the insulin-like growth factors I and II in human hepatoma // Cancer Res. - 1989. - T. 49 - № 7 - 1773-1777c.

151. Sun H., Zhu M.-S., Wu W.-R., Shi X.-D., Xu L.-B. Role of anti-angiogenesis therapy in the management of hepatocellular carcinoma: The jury is still out // World J Hepatol - 2014. - T. 6 - № 12 - 830-835c.

152. Tanaka H., Kono E., Tran C. P., Miyazaki H., Yamashiro J., Shimomura T., Fazli L., Wada R., Huang J., Vessella R. L., An J., Horvath S., Gleave M., Rettig M. B., Wainberg Z. A., Reiter R. E. Monoclonal antibody targeting of N-cadherin inhibits prostate cancer growth, metastasis and castration resistance // Nature Medicine - 2010. - T. 16 - № 12 - 1414-1420c.

153. Tashiro E., Henmi S., Odake H., Ino S., Imoto M. Involvement of the MEK/ERK pathway in EGF-induced E-cadherin down-regulation // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2016. - T. 477 - № 4 - 801-806c.

154. Thiery J.P. Epithelial-mesenchymal transitions in tumour progression // Nat. Rev. Cancer - 2002. - T. 2 - № 6 - 442-454c.

155. Thompson M.D., Monga S.P.S. WNT/beta-catenin signaling in liver health and disease // Hepatology - 2007. - T. 45 - № 5 - 1298-1305c.

156. Tripathi G., Salih D.A.M., Drozd A.C., Cosgrove R.A., Cobb L.J., Pell J.M. IGF-independent effects of insulin-like growth factor binding protein-5 (Igfbp5) in vivo // FASEB J. - 2009. - T. 23 - № 8 - 2616-2626c.

105

157. Umemura A., Itoh Y., Itoh K., Yamaguchi K., Nakajima T., Higashitsuji H., Onoue H., Fukumoto M., Okanoue T., Fujita J. Association of gankyrin protein expression with early clinical stages and insulin-like growth factor-binding protein 5 expression in human hepatocellular carcinoma // Hepatology - 2008. - T. 47 - № 2 -493-502c.

158. Valentinis B., Baserga R. IGF-I receptor signalling in transformation and differentiation // MP, Mol. Pathol. - 2001. - T. 54 - № 3 - 133-137c.

159. Vauthey J.-N., Lauwers G.Y., Esnaola N.F., Do K.-A., Belghiti J., Mirza N., Curley S.A., Ellis L.M., Regimbeau J.-M., Rashid A., Cleary K.R., Nagorney D.M. Simplified staging for hepatocellular carcinoma // J. Clin. Oncol. - 2002. - T. 20 - № 6

- 1527-1536c.

160. Veraldi K.L., Feghali-Bostwick C.A. Insulin-like growth factor binding proteins-3 and -5: central mediators of fibrosis and promising new therapeutic targets // Open Rheumatol J - 2012. - T. 6 - 140-145c.

161. Vesselinovitch S.D., Mihailovich N. Kinetics of diethylnitrosamine hepatocarcinogenesis in the infant mouse // Cancer Res. - 1983. - T. 43 - № 9 - 4253-4259c.

162. Vesselinovitch S.D., Mihailovich N., Rao K.V. Morphology and metastatic nature of induced hepatic nodular lesions in C57BL x C3H F1 mice // Cancer Res. -1978. - T. 38 - № 7 - 2003-2010c.

163. Villanueva A., Chiang D. Y., Newell P., Peix J., Thung S., Alsinet C., Tovar V., Roayaie S., Minguez B., Sole M., Battiston C., Van Laarhoven S., Fiel M. I., Di Feo A., Hoshida Y., Yea S., Toffanin S., Ramos A., Martignetti J. A., Mazzaferro V., Bruix J., Waxman S., Schwartz M., Meyerson M., Friedman S. L., Llovet J. M. Pivotal role of mTOR signaling in hepatocellular carcinoma // Gastroenterology - 2008.

- T. 135 - № 6 - 1972-1983, 1983.e1-11c.

164. Villanueva A., Newell P., Chiang D. Y., Friedman S. L., Llovet J. M. Genomics and signaling pathways in hepatocellular carcinoma // Semin. Liver Dis. -2007. - T. 27 - № 1 - 55-76c.

165. Waisberg J. Wnt-/-P-catenin pathway signaling in human hepatocellular carcinoma // World Journal of Hepatology - 2015. - T. 7 - № 26 - 2631c.

166. Wands J.R., Kim M. WNT/p-catenin signaling and hepatocellular carcinoma // Hepatology - 2014. - T. 60 - № 2 - 452-454c.

167. Wang D., Han S., Peng R., Jiao C., Wang X., Han Z., Li X. DUSP28 contributes to human hepatocellular carcinoma via regulation of the p38 MAPK signaling // Int. J. Oncol. - 2014. - T. 45 - № 6 - 2596-2604c.

168. Waxman D.J., Azaroff L. Phenobarbital induction of cytochrome P-450 gene expression // Biochem. J. - 1992. - T. 281 ( Pt 3) - 577-592c.

169. Werner H, Maor S. The insulin-like growth factor-I receptor gene: a downstream target for oncogene and tumor suppressor action // Trends Endocrinol Metab. 2006 17(6):236-42.

170. Whatcott C.J., Han H., Posner R.G., Hostetter G., Von Hoff D.D. Targeting the tumor microenvironment in cancer: why hyaluronidase deserves a second look // Cancer Discov - 2011. - T. 1 - № 4 - 291-296c.

171. Whittaker S., Marais R., Zhu A.X. The role of signaling pathways in the development and treatment of hepatocellular carcinoma // Oncogene - 2010. - T. 29 -№ 36 - 4989-5005c.

172. Williams G.M., Iatropoulos M.J., Jeffrey A.M. Mechanistic basis for nonlinearities and thresholds in rat liver carcinogenesis by the DNA-reactive carcinogens 2-acetylaminofluorene and diethylnitrosamine // Toxicol Pathol - 2000. -T. 28 - № 3 - 388-395c.

173. Woo H.Y., Heo J. Sorafenib in liver cancer // Expert Opin Pharmacother -2012. - T. 13 - № 7 - 1059-1067c.

174. Wu M., Cao M., He Y., Liu Y., Yang C., Du Y., Wang W., Gao F. A. novel role of low molecular weight hyaluronan in breast cancer metastasis // FASEB J. -2015. - T. 29 - № 4 - 1290-1298c.

175. Wu X.-Z., Xie G.-R., Chen D. Hypoxia and hepatocellular carcinoma: The therapeutic target for hepatocellular carcinoma // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - T.

107

22 - № 8 - 1178-1182c.

176. Wu J.-C., Huang Y.-H., Chau G.-Y., Su C.-W., Lai C.-R., Lee P.-C., Huo T.-I., Sheen I.-J., Lee S.-D., Lui W.-Y. Risk factors for early and late recurrence in hepatitis B-related hepatocellular carcinoma // J. Hepatol. - 2009. - T. 51 - № 5 - 890-897c.

177. Xiao Z.-D., Jiao C.-Y., Huang H.-T., He L.-J., Zhao J.-J., Lu Z.-Y., Liu L.-X. miR-218 modulate hepatocellular carcinoma cell proliferation through PTEN/AKT/PI3K pathway and HoxA10 // Int J Clin Exp Pathol - 2014. - T. 7 - № 7 -4039-4044c.

178. Xiong G., Xu R. Function of cancer cell-derived extracellular matrix in tumor progression // Journal of Cancer Metastasis and Treatment - 2016. - T.2 - 357-64c.

179. Yan J., Yang X., Li L., Liu P., Wu H., Liu Z., Li Q., Liao G., Wang X. Low expression levels of insulin-like growth factor binding protein-3 are correlated with poor prognosis for patients with hepatocellular carcinoma // Oncol Lett - 2017. -T. 13 - № 5 - 3395-3402c.

180. Yang J.D., Nakamura I., Roberts L.R. The tumor microenvironment in hepatocellular carcinoma: current status and therapeutic targets // Semin. Cancer Biol. -2011. - T. 21 - № 1 - 35-43c.

181. Yao X., Hu J.-F., Daniels M., Shiran H., Zhou X., Yan H., Lu H., Zeng Z., Wang Q., Li T., Hoffman A.R. A methylated oligonucleotide inhibits IGF2 expression and enhances survival in a model of hepatocellular carcinoma // J. Clin. Invest. - 2003. - T. 111 - № 2 - 265-273c.

182. Yin X.-B., Wu L.-Q., Fu H.-Q., Huang M.-W., Wang K., Zhou F., Yu X., Wang Inhibitory effect of humanized anti-VEGFR-2 ScFv-As2O3-stealth nanoparticles conjugate on growth of human hepatocellular carcinoma: in vitro and in vivo studies // Asian Pac J Trop Med - 2014. - T. 7 - № 5 - 337-343c.

183. Yu D.-C., Chen, J., Ding Y.-T. Hypoxic and highly angiogenic non-tumor

tissues surrounding hepatocellular carcinoma: the "niche" of endothelial progenitor cells

108

// Int J Mol Sci - 2010. - T. 11 - № 8 - 2901-2909c.

184. Zhai X., Zhu H., Wang W., Zhang S., Zhang Y., Mao G. Abnormal expression of EMT-related proteins, S100A4, vimentin and E-cadherin, is correlated with clinicopathological features and prognosis in HCC // Medical Oncology - 2014. -T. 31 - № 6.

185. Zhan D., Wei S., Liu C., Liang B., Ji G., Chen X., Xiong M., Huang Z. Reduced N-cadherin expression is associated with metastatic potential and poor surgical outcomes of hepatocellular carcinoma: Reduced N-cadherin expression // Journal of Gastroenterology and Hepatology - 2012. - T. 27 - № 1 - 173-180c.

186. Zhang X., Liu G., Kang Y., Dong Z., Qian Q., Ma X. N-cadherin expression is associated with acquisition of EMT phenotype and with enhanced invasion in erlotinib-resistant lung cancer cell lines // PLoS ONE - 2013. - T. 8 - № 3 -e57692c.

187. Zhang Y.-W., Yan D.-L., Wang W., Zhao H.-W., Lu X., Wu J.-Z., Zhou J.-R. Knockdown of insulin-like growth factor I receptor inhibits the growth and enhances chemo-sensitivity of liver cancer cells // Curr Cancer Drug Targets - 2012. - T. 12 - № 1 - 74-84c.

188. Zhuang P.-Y., Shen J., Zhu X.-D., Lu L., Wang L., Tang Z.-Y., Sun H.-C. Prognostic roles of cross-talk between peritumoral hepatocytes and stromal cells in hepatocellular carcinoma involving peritumoral VEGF-C, VEGFR-1 and VEGFR-3 // PLoS ONE - 2013. - T. 8 - № 5 - e64598c.

189. Zijl F., Mall S., Machat G., Pirker C., Zeillinger R., Weinhaeusel A., Bilban M., Berger W., Mikulits W. A human model of epithelial to mesenchymal transition to monitor drug efficacy in hepatocellular carcinoma progression // Mol. Cancer Ther. - 2011. - T. 10 - № 5 - 850-860c.

190. Zimmers T.A., Jin X., Gutierrez J.C., Acosta C., McKillop I.H., Pierce R.H., Koniaris L.G. Effect of in vivo loss of GDF-15 on hepatocellular carcinogenesis // J. Cancer Res. Clin. Oncol. - 2008. - T. 134 - № 7 - 753-759c.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ И ТЕЗИСОВ

1. Зиневич Л.С., Гончарова Н. О., Урываева И. В., Делоне Г. В., Микаелян А. С. Экспрессия Igf-1 и его изоформы в гепатоклеточных опухолях и окружающей их ткани при канцерогенезе печени мышей, индуцированном диэтилнитрозамином // 2013. Известия РАН. Серия биологическая, № 6, С. 673681.

2. Дашенкова Н. О., Цитрина А. А., Микаелян А. С. Исследование экспрессии генов-регуляторов гиалуронана в клональных клеточных культурах опухоли гепатоцеллюлярной карциномы // 2016. Медицинский академический журнал, официальное издание северо-западного отделения медицинских наук, том 16 №3, ISSN 1608-4101, С. 124-125.

3. Дашенкова Н.О., Петракова О.А., Цитрина А.А., Микаелян А.С. Характеристика первичных культур гепатоцеллюлярной карциномы мыши и оценка их потенциала к эпителиально-мезенхимальному переходу // 2017. Клиническая и экспериментальная морфология №3 (23), С. 44-49.

4. Гончарова Н.О. Экспрессия гена FoxO3 - участника каскада IGF-1 зависимого пути в химически индуцированной гепатоцеллюлярной карциноме у мышей // 2012. Издательство Политехнического университета, «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине», С. 33-34.

5. Гончарова Н.О., Зиневич Л.С. Изоформы гена Igf-1 в гепатоцеллюлярной карциноме у мышей // 2013. М: МАКС Пресс, XX Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов», С.11-12.

6. Гончарова Н.О., Зиневич Л.С. Микаелян А.С. IGF-1 регуляторный путь в органогенезе печени мыши и канцерогенезе // 2013. Тезисы докладов 16 школы -конференции "Актуальные проблемы биологии развития" и IX конференции молодых ученых Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, С. 16-18.

7. Гончарова Н.О. Локальная экспрессия ^-связывающих белков в процессе развития химически индуцированной гепатоцеллюлярной карциномы мыши // 2014. М.: МАКС Пресс, Материалы Международного молодежного научного форума «ЛОМОНОСОВ-2014», С. 342-343.

8. Дашенкова Н.О. Экспрессия внеклеточных регуляторов инсулиноподобного фактора роста (^-1) при развитии гепатоцеллюлярной карциномы мыши // 2014. Тезисы докладов X школы-конференции молодых ученых Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, С. 19-20.

9. Дашенкова Н.О. Воздействие генов регуляторного пути на рост и прогрессию химически индуцированной гепатоцеллюлярной карциномы у мышей // 2015. М: МАКС Пресс, XXII Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов», С.14-15.

10. Н.О. Дашенкова, А.С. Микаелян. Распределение экспрессии генов-участников сигнального пути при развитии химически индуцированной гепатоцеллюлярной карциномы у мыши // 2015. Материалы II Международной научной конференции «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы», г. Минск, Беларусь, С. 29.

11. Дашенкова Н.О. Молекулярно-морфологическая характеристика клональных клеточных культур гепатоцеллюлярной карциномы мыши // 2016. Москва: Товарищество научных изданий КМК, XXIII Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов», тезисы докладов, С.36-37.

12. Дашенкова Н.О. Исследование вклада отдельных клонов гепатоцеллюлярной карциномы в прогрессию опухоли // 2016. Тезисы докладов XVII школы-конференции с международным участием «Актуальные проблемы биологии развития», С. 16-17.

13. Дашенкова Н.О., Микаелян А.С. Исследование клональных клеточных культур, выделенных из опухолевой ткани ГЦК мыши, на маркеры эпителио-

мезенхимного перехода // 2016. III Международная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы», С. 23.

14. N. Dashenkova., A. Mikaelyan. Analys of Igf axis in development of HCC // 2015. European Journal of Cancer Supplements, Volume 13, Issue 1, P. 11-12.