Влияние экспрессии гена мембранной H+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum на уровень солеустойчивости растений табака тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат биологических наук Дьякова, Елена Владимировна

• Дьякова, Елена Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Дьякова, Елена Владимировна

Оглавление

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Солевой стресс как фактор среды

1.2 Повреждающее действие солей

1.2.1 Повреждение ультраструктуры растительных клеток

1.2.2 Изменение биохимических процессов

1.2.3 Изменения динамики транспорта и накопления ионов

1.2.4 Влияние засоления на физиологические процессы и морфологию растений

1.3 Механизмы адаптации растений к солевому стрессу

1.3.1 Синтез осмопротекторов как стратегия избегания осмотического эффекта соли

1.3.2 Ионное гомеостатирование цитоплазмы клетки

1.4 Пирофосфатазы

1.4.1 Растворимые пирофосфатазы

1.4.2 Мембранные пирофосфатазы

1.5 Генетическая трансформация как один из способов повышения солеустойчивости растений

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы и методы, использованные в работе по конструированию бинарного вектора

2.2 Методы ведения культуры in vitro

2.3 Методика получение трансгенных растений табака

2.4 Молекулярно-биологический анализ растений

2.4.1 Методика выделение ДНК из листьев растений

2.4.2 Методика проведения ПЦР-анализа растительного материала

2.4.3 Методика проведения Вестерн-блот анализа

2.5 Определение всхожести семенного материала растений табака на средах с различным содержанием хлорида натрия

2.6 Определение влияния различных концентраций хлорида натрия на рост и развитие растений

2.7 Определение уровня накопления натрия и калия в тканях растений

2.8 Определение влияния экспрессии гена RPP на рост и развитие растений условиях in vivo

2.9 Определение содержания хлорофилла в листьях растений

2.10 Статистическая обработка данных

III РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Конструирование бинарного вектора, обеспечивающего экспрессию гена Н -пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum

3.2 Получение и анализ трансгенных растений табака, экспрессирующих ген мембранной Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum

3.2.1 Молекулярно-биологический анализ полученных первичных трансформантов. Выявление наличия гена RPP в геноме полученных первичных трансформантов

по

табака

3.2.2 Адаптация растений к условиям in vivo и получение семенного материала

3.2.3 Определение всхожести семян контрольных и трансгенных растений, экспрессирующих ген Н+-пирофосфатазы R rubrum на средах с различным содержанием хлорида натрия

3.2.4 Определение влияния различных концентраций хлорида натрия на рост и развитие контрольных и трансгенных растений в условиях in vitro

3.2.5 Определения уровня накопления натрия и калия в тканях контрольных и трансгенных растений табака, экспрессирующих ген Н+-пирофосфатазы R. rubrum

3.2.6 Изучение влияния экспрессии гена мембранной Н+-пирофосфатазы R. rubrum на рост

и развитие растений в грунте

3.2.7 Содержание суммарного хлорофилла в контрольных и трансгенных растениях

IV ЗАКЛЮЧЕНИЕ

V ВЫВОДЫ

VI СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

VII СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

RPP ген, кодирующий мембранную Н+-пирофосфатазу

R. rubrum

Bar ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансфе-

разу и обеспечивающий устойчивость к гербициду L-фосфинотрицину

СЬ - карбенициллин

Cf - цефотаксим

Km - канамицин

Rf - рифампицин

ppt - фосфинотрицин

БАП (ВАР) - 6-бензиламинопурин

НУК (NAA) - нафтилуксусная кислота

ИУК (IAA) - индолил-3-уксусная кислота

ПЦР - полимеразная цепная реакция

Н+ - протон (ион водорода)

АТФ - аденозинтрифосфат

АДФ - аденозиндифосфат

АФК - активные формы кислорода

НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат

УДф - уридиндифосфат

ПФ (РР) - пирофосфат

НСР - наименьшая существенная разность

рфакт - фактическое значение критерия (F) Фишера

Fxeop - теоретическое значение критерия (F) Фишера

MS - среда Мурасиге и Скуга (Murashige and Skoog)

pH - водородный показатель

кДа - киллодальтон (атомная единица массы)

Дц - градиент электрохимического потенциала

OD - оптическая плотность

мкл - микролитр

л - литр

мл - миллилитр

М - моль

мМ - миллимоль

°С - градусы по Цельсию

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние экспрессии гена мембранной H+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum на уровень солеустойчивости растений табака»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Большинство сельскохозяйственных растений чрезвычайно чувствительны к засолению и засухе, что вызывает существенные потери урожая вследствие действия этих факторов. По данным программы ООН «По защите окружающей среды» приблизительно 70% земель сельскохозяйственного назначения в мире подвержены засолению. [Flowers and Yeo, 1995]. На территории Российской Федерации общая площадь засоленных земель составляет 38,4 млн. га (19,9 % площади сельхозугодий), в том числе 25,6 млн. га почв солонцовых комплексов, площадь пахотных засоленных земель 12,9 млн. га. Наибольшее распространение засоленные почвы получили в Поволжье и Западной Сибири, где их площади составляют 11,6 и 10,2 млн. га, соответственно. В отдельные годы из-за засоления почв и неравномерного распределения осадков, особенно в период формирования генеративных органов, урожайность сельскохозяйственных культур снижается до 30%-60%. В условиях солевого стресса растения, во-первых, испытывают недостаток воды вследствие осмотического шока, и, во-вторых, наблюдаются биохимические изменения в клетках вследствие повышенной аккумуляции ионов (например, Na+) в

цитоплазме (токсический эффект).

Долгое время одним из основных направлений повышения устойчивости культурных растений к засолению являлось использование природных генетических механизмов, а именно отбор и дальнейшая селекция наиболее соле-устойчивых видов растений. Так, например, известна стратегия отбора соле-устойчивых растений путем повторной селекции у перекрестно-опыляемых видов [Dewey, 1962], для самоопыляемых видов предлагается использование линий с мужской стерильностью [Ramage, 1980]; селекция in vitro, широко распространенная в 1980-х годах, однако, не дала каких-либо значимых результатов [Yamaguchi et al., 2005]. Также были предприняты попытки

межви-

довой гибридизации некоторых важных сельскохозяйственных культур (томат, картофель, пшеница, голубиный горох и т.д.) с дикими солеустойчивы-ми видами [Yoshida, 2002]. Однако работы в данном направлении не позволили стабильно получать сорта культурных растений, обладающих повышенным уровнем солеустойчивости, которые нашли бы достаточно широкое применение в современном сельскохозяйственном производстве.

Для направленной модификации свойств растений на ряду с традиционными методами селекции используются и методы генетической инженерии. В ряде работ было продемонстрировано повышение солеустойчивости растений за счет повышенной экспрессии ключевых ферментов биосинтеза осмо-литов [Blumwald et al.,2000; Tarczynski et al., 1993; Kishor et al., 1995; Lilius 1996; Hayashi et al., 1997; Veena et al., 1999]; ферментов, нейтрализующих активные формы кислорода [Oberschall et al., 2000]. Другой подход основан на стимуляции выведения ионов натрия из цитоплазмы. Активный транспорт ионов определяется градиентом концентрации Н+, создаваемым протонными «насосами» и осуществляется за счет последующего обмена ионов (например, по механизму Ыа+/Н+-антипортера).

В ряде работ было показано, что повышенная экспрессия различных протонных насосов, создающих электрохимический градиент на мембранах, увеличивает доступность протонов для Ма+/Н+-антипортера и усиливает процесс активного выведения токсичных ионов Na+ из цитоплазмы тем самым, повышая солеустойчивости растений [Sze et al., 1999; Zhang et al., 2001; Apse et al., 1999; Gaxiola et al., 2001; Silva and Geros, 2010; Gaxiola et al., 2007]. Так, суперпродукция гена AVP1, кодирующего вакуолярную пирофосфатазу Arabidopsis thaliana, приводила к повышению засухо- и солеустойчивости трансгенных растений арабидопсиса за счет повышенной аккумуляции ионов Na+ в вакуолях.

Однако следует отметить, что исследования, проводимые в этом направлении, предполагали экспрессию в трансгенном растении либо его собственного гена, либо гена с той же функцией из другого растения.

Альтернативой является использование для конструирования трансгенных растений, обладающих повышенной солеустойчивостью, фунцио-нально аналогичных бактериальных мембранных Н+-пирофосфатаз, примером которой является пирофосфатаза из фотосинтезирующей бактерии Rhodospirillum rubrum.

Цель работы

Целью работы являлось изучение влияния экспрессии гена мембранной Н+-пирофосфатазы из бактерии Rhodospirillum rubrum на уровень солеустой-чивости трансгенных растений табака. Задачи:

• конструирование бинарного вектора, обеспечивающего экспрессию гена мембранной Н+-пирофосфотазы R.rubrum в растениях;

• получение и молекулярно-биологический анализ трансгенных растений Nicotiana tabacum, экспрессирующих ген Н+-пирофосфотазы R.rubrum;

• исследование уровня солеустойчивости полученных трансгенных растении, экспрессирующих ген Н+-пирофосфотазы R.rubrum;

• изучение влияния экспрессии гена Н+-пирофосфотазы R.rubrum на морфофизиологические характеристики растений табака.

Научная новизна

В настоящей работе впервые предложен способ повышения солеустойчивости и улучшения некоторых хозяйственно-ценных признаков растений, путем включения в геном растения гена мембранной Н+-пирофосфатазы про-кариотического происхождения из бактерии Rhodospirillum rubrum.

Результатом работы стало получение трансгенных растений, экспрес-сирующих ген мембранной Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum, которые обладают повышенной солеустойчивостью. При этом показано, что у полученных трансгенных растений наблюдаются и другие позитивные изменения хозяйственно-ценных признаков, а именно: ускорение роста растений, увеличение длины и массы корневой системы и массы листьев, а также повышение уровня хлорофилла в листьях и биологической продуктивности растений.

В отличие от описанных в других работах способов повышения соле-устойчивости, основанных на экспрессии генов вакуолярных пирофосфатаз растений, предложенный нами способ позволяет не просто обратимо локализовать ионы натрия в вакуолях, но понизить общее содержания натрия в растении за счет его выведения из клетки наружу.

Практическая значимость

Предложенный способ может быть использован для получения соле-устойчивых сортов культурных растений обладающих улучшенными хозяйственно-ценными признаками, такими как ускорение роста, увеличение длины и массы корневой системы и массы листьев, а также повышенной биологической продуктивностью и более высоким уровнем содержания хлорофилла в листьях. Такие культурные растения могут широко применяться в сельскохозяйственном производстве для выращивания на почвах, в настоящее время непригодных из-за засоления.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Дьякова, Елена Владимировна

V выводы

Получены трансгенные растения табака, экспрессирующие ген мембранной Н+-пирофосфатазы из бактерии Rhodospirillum rubrum.

Всхожесть семян трансгенных растений выше всхожести семян контрольных растений табака при проращивании на среде, содержащей NaCl в концентрациях от 125мМ до 250мМ, причем всхожесть положительно коррелирует с уровнем экспрессии гена Н+-пирофосфатазы.

Экспрессия гена Н+-пирофосфатазы R. rubrum повышает уровень соле-устойчивости растений табака. Трансгенные растения табака обгоняют в росте контрольные растения при выращивании in vitro на среде с содержанием NaCl от 125мМ и выше. Трансгенные растения могут расти на среде с содержанием 250мМ NaCl, тогда как у контрольных растений наблюдается полное угнетение роста.

Экспрессия гена Н+- пирофосфатазы R. rubrum ускоряет рост растений табака при выращивании в грунте в отсутствие засоления. Трансгенные растения, экспрессирующие ген Н+-пирофосфатазы R. rubrum, превышают контрольные по длине корневой системы в 2 раза, по массе корневой системы в 2,9 раза и по массе листьев в 2 раза. Количество и масса семенного материала, собранная с трансгенных растений, в 1,5 раз превышает количество и массу семенного материала, собранного с контрольных растений табака. Уровень хлорофилла в листьях трансгенных растений табака в 1,77 раза выше, чем в листьях контрольных растений.

VI СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л., Камионская A.M., Байков A.A., Lahti R., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Изучение влияния экспрессии гена мембранной Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum на уровень солеустойчивости трансгенных растений табака. Доклады Академии Наук, 2006. Т. 409, №6, с.844-846.

2. Патент на изобретение №2378379 «Использование гена мембранной Н+-пирофосфатазы бактерии Rhodospirillum rubrum для изменения свойств растений» Дьякова Е.В., Ракиин А.Л., Байков A.A., Камионская A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г., дата выдачи 10.01.2010.

3. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л., Стародубцева A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Получение трансгенных растений табака, экспрессирующих ген Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum. Материалы II Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». Москва, 2003. 4.1. С. 193.

4. Ракитин А.Л, Дьякова Е.В., Стародубцева A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Повышение засухо- и солеустойчивости картофеля за счет экспресси гена Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum. Материалы конгресса «Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития». Москва, 2004. Т. 1. С.479.

5. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л., Камионская A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Изучение влияния экспрессии гена Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum на уровень солеустойчивости трансгенных растений табака. Материалы 9 Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». Москва, 2005. 4.1. С.245.

6. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л., Камионская A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Получение трансгенных солеустойчивых растений за счет введения и экспрессии в них гена Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum. Сборник тезисов 9-ой Международной Пущинекой школы - конференции молодых ученых. Пущино, 2005. С.345.

7. Rakitin A.L., Dyakova E.V., Kamionskaya A.M., Ravin N.V., Skryabin K.G. Drought and salt- tolerant plants result from expression of H+-pyrophosphatase gene from Rhodospirillum rubrum. Abstract book The 2nd International conference on integrated approaches to sustain and improve plant production under drought stress «InterDrought-П». Italy, Rome, 2005. P. 8.38.

8. Зорина A.B., Дьякова E.B. Определение всхожести трансгенных линий табака, экспрессирующих ген Н+-пирофосфатазы R. rubrum на различных концентрациях хлорида натрия. Материалы международной школы - конференции молодых ученых «Системная биология и Биоинженерия». Москва, 2005. С.178.

9. Rakitin A.L., Dyakova E.V., Kamionskaya A.M., Ravin N.V., Skryabin K.G. Expression of H+-pyrophosphatase from Rhodospirillum rubrum increases the salt tolerance of Nicotiana tabacum plants. Abstract book The First international conference on the theory and practices in biological water saving. Beijing, China, 2006. 5-37. C.38.

10. Дьякова E.B., Ракитин А.Д., Камионская A.M., Равин H.B. Экспрессия гена мембранной пйрофосфатазы бактерии Rhodospirillum rubrum повышает уровень солеустойчивости и ускоряет рост растений. Материалы IV Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». Москва, 2007. 4.1. С.232.

11. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л., Камионская A.M., Равин Н.В., Скрябин К.Г. Повышение устойчивости растений к засолению путем направленной регуляции процессов внутриклеточного транспорта ионов натрия. Материалы Всероссийской научной конференции «Устойчивость растений к неблагоприятным факторам внешней среды», Иркутск, 2007. С.78-81.

12. Дьякова Е.В., Ракитин А.Л. Влияние экспрессии гена мембранной Н+-пирофосфатазы Rhodospirillum rubrum на устойчивость растений к солевому стрессу и их биологическую продуктивность. Материалы IX Международной конференции «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». Звенигород, 2008. С.116.

IV ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проделанной работы нами был сконструирован бинарный вектор, обеспечивающий экспрессию гена мембранной Н+-пирофосфатазы R. rubrum (RPP). Получены трансгенные растения, экспрес-сирующие ген RPP, которые обладают повышенным уровнем солеустойчиво-сти по сравнению с ^модифицированными растениями вследствии выведения токсичных ионов из клетки в апопласт, а не накапливания их в вакуолях. При этом у полученных нами трансгенных растений наблюдаются и другие, позитивные изменения хозяйственно-ценных признаков, а именно более ранние сроки образования семенного материала, повышенная биологическая продуктивность, увеличение длины и массы корневой системы, массы листьев, а также более высокий уровень хлорофилла. Это может являться результатом усиления транспорта ауксина через растительную клетку, вследствии повышения АцН+ на цитоплазматической мембране генерируемого Н+-пирофосфатазой R. rubrum.

Кроме того, нами не было отмечено случаев получения аномальных результатов (торможение ростовых процессов, снижение биопродуктивности и солеустойчивости на фоне экспрессии включившегося гена) вследствие активации посттрансляционного ген-сайленсинга, что также свидетельствует о эффективности предложенного нами к изучению способа улучшения свойств растений. Очевидно, что указанные преимущества достигаются за счет использования гена мембранной пирофосфатазы бактериального, а не растительного происхождения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Дьякова, Елена Владимировна, 2012 год

VII СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аббасова З.И., Алиахвердиев С.Р., Зейналов Э.М., Гучейнова Н.Б. Конформационные изменения митохондрий при солевом стрессе // Третий съезд Всероссийского общества физиологов растений: тезисы докладов. Санкт-Петербург. 1993. 464 с.

2. Асалиев А.И., Куприченков М.Т., Беловолова A.A. Сельскохозяйственные культуры на солонцеватых слитых черноземах Центрального Предкавказья: Монография. Ставрополь. Изд-во СтГАУ «Агрус». 2004. 176 с.

3. Бабаков A.B. Идентификация гомолога К+/Н+-антипортера в ячмене: экспрессия в сортах, отличающихся по устойчивости к NaCl // Физиология растений. 2007. Т.54. С.22-30.

4. Бабурина O.K., Шевякова Н.И. Солеустойчивость дикорастущих видов люцерны и содержание четвертичных соединений аммония // Физиология растений. 1987. Т. 34. Вып. 5. С. 887-893.

5. Балнокин Ю.В., Строгонов Б.П. Солевой обмен и проблема солеустой-чивости растений // Новые направления в физиологии растений. М.: Изд-во «Наука». 1985. С. 199-213.

6. Балнокин Ю.В. Растения в условиях стресса // Физиология растений. Учебник для студентов вузов, Ермаков И.П. (ред.). М.: Изд. центр «Академия». 2005. С. 510-587.

7. Белецкий Ю.Д., Шевякова Н.И., Карнаухова Т.Б. Пластиды и адаптация растений к засолению. Ростов-на-Дону. Изд-во Ростовского ун-та. 1990. 48 с.

8. Ганжара Н.Ф. Почвоведение. М.: Изд-во «Агроконсалт». 2001. 392 с.

9. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология: принципы и применение. М.: Изд-во «Мир». 2002. 590 с.

10. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. М.: Изд-во «Мир». 1966. 816 с.

11. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки исследований). М.: Изд-во «Агропромиздат». 1985. 351 с.

12. Дрейпер Д., Скотт Р., Уолден Р. // В сб.: Генетическая инженерия растений. М.: Изд-во «Мир». 1991. С. 119-130.

13. Косулина Л.Г., Луценко Э.К., Аксенова В.А. Физиология устойчивости растений к неблагоприятным факторам среды. Ростов-на-Дону. Изд-во Ростовского ун-та. 1993. 240 с.

14. Костюк А.Н., Остапюк А.Н., Левенко Б.А. Ответная реакция растений на солевой стресс // Физиология и биохимия культурных растений. 1994. Вып. 12. №6. С. 525-545.

15. Кузнецов Вл.В., Шевякова Н.И. Пролин при стрессе: биологическая роль метаболизм, регуляция // Физиология растений. 1999. Т. 46. № 2. С. 321-336.

16. Лосева А.С., Петров-Спиридонов А.Е. Устойчивость растений к неблагоприятным факторам среды. М.: Изд-во МСХА. 1993. 48 с.

17. Матухин Г.Р. Физиология приспособления культурных растений к засолению почв. Ростов-на-Дону. Изд-во Ростовского ун-та. 1963. 203 с.

18. Медведев С.С. Электрофизиология растений. Санкт-Петербург. Изд-во С.-Петербургского ун-та. 1998. 184 с.

19. Медведев С.С. Физиология растений. Санкт-Петербург. Изд-во С.-Петербургского ун-та. 2004. 336 с.

20. Падегимас, Л., Шульга О., Скрябин К. Создание трансгенных растений Nicotiana tabacum и Solanum tuberosum, устойчивых к гербициду фос-финотрицина//Молекулярная биология. 1993. Т. 27. С. 947-951.

21. Панкова Е.И., Новикова А.Ф. Засоленные почвы России (Диагностика, география, площади) //Почвоведение. 1995. № 1. С. 73-83.

22. Полевой В.В. Физиология растений. М.: Изд-во «Высшая школа». 1989. 464 с.

23. Попова Л.Г., Корнилова А.Г., Шумкова Г.А., Андреев И.М., Балнокин Ю.В. Ка+-транспортирующая АТФаза в плазматической мембране га-лотолерантной микроводоросли Dunaliella maritima катализирует Na+-унипорт // Физиология растений. 2006. Т. 53. С. 530-537.

24. Посевной и посадочный материал сельскохозяйственных культур (в двух книгах) / Под общей редакцией доктора с.-х. наук, профессора Д. Шпаара. Книга 1. Берлин. 2001. 312 с.

25. Постановление Правительства РФ от 8 ноября 2001 г. N 780 «О федеральной целевой программе "Повышение плодородия почв России на 2002-2005 годы"».

26. Пронина Н.Б. Экологические стрессы (Причины, классификация, тестирование, физиолого-биохимические механизмы). М.: Изд-во МСХА. 2000. 313 с.

27. Рослякова Т.В., Лазарева Е.М., Кононенко Н.В., Бабаков A.B. Новая изоформа (HvNHX3) вакуолярного №+/Н+-антипортера в ячмене: экспрессия и иммун о локализация // Биохимия. 2009. Т.74. С.675-684.

28. Скулачев В.П. Энергетика биологических мембран. М.: «Наука». 1989. 564 с.

29. Смирнов И.А. Солевыносливость древесных растений. Красноярск. Изд-во Красноярского университета. 1986. 216 с.

30. Физиология растений / Алехина Н.Д., Балнокин Ю.В., Гавриленко В.Ф. и др. Под ред. Ермакова И.П.. М.: Изд. центр «Академия». 2005. 640 с.

31. Хасанова З.М., Хасанова Л.А. Рост, развитие и устойчивость растений. Уфа. 2002. 129 с.

32. Шахов A.A. Солеустойчивость растений. М.: Изд-во АН СССР. 1956. 552 с.

33. Abbas М.А., Goinis М.Е., Snurky W.M. Plant growth, metabolism and adaptation in relation to stress condition. Effect of salinity on the internal so-

lute concentration in Phaseolus vulgaris II Plant Physiol. 1991. V. 138(6). P. 722-727.

34. Alamillo J., Almoguera C., Bartels D., Jordano J. Constitutive expression of small heat shock proteins in vegetative tissues of the resurrection plant Cra-terostigmaplantagineum II Plant Mol. Biol. 1995. V. 29. P. 1093-1099.

35. Apse M.P., Aharon G.S., Sneddon W.A., Blumwald E. Salt tolerance conferred by overexpression of a vacuolar Na+/H+-antiport in Arabidopsis II Science. 1999. V. 285. P. 1256-1258.

36. Arnon D.I. Cooper enzymes in isolated chloroplasts. Polyphenoloxidase in Beta vulgaris II Plant Physiol. 1949. V. 24. P. 1-6.

37. Au K.M., Barabote R.D., Hu K.Y., Milton H., Saier Jr. Evolutional appearance of H+-translocating pyrophosphatase // Microbiol. Comments. 2006. P. 1243-1247.

38. Balnokin Yu.V., Popova L.G. The ATP-driven Na+-pump in the plasma membrane of the marine unicellular alga Platymonas viridis II FEBS Lett. 1994. V. 342. P. 61-64.

39. Balnokin Y.V., Popova L.G., Pagis L.Y., Andreev I.M. The Na+-translocating ATPase in the plasma membrane of the marine microalga Te-traselmis viridis catalyzes a Na+/H+ exchange // Planta. 2004. V. 219. P. 332-337.

40. Baltscheffsky H., Stedingk L-V., Heldt H-W., Klingenberg M. Inorganic pyrophosphate: formation in bacterial photophosphorylation // Science. 1966. Y. 153. P.1120-1122.

41. Baltscheffsky M., Schultz A., Baltscheffsky H. H+-proton-pumping inorganic pyrophosphatase: a tightly membrane-bound family // FEBS Letters. 1999. №452. P.121-127.

42. Bassham D., Raikhel N. Transport proteins in the plasma membrane and secretory system // Trends in Plant Sci. 1996. P. 15-20.

43. Baulcombe D. RNA silencing // Curr. Biol. 2002. V. 12. P. 82-84.

44. Belogurov G. A., Turkina M.V., Penttinen A., Huopalahti S., Baykov A.A., Lahti R. H+-pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum II J. Biol. Chem. 2002. V. 277. № 25. P. 22209-22212.

45. Benito B., Garciadeblas, B. and Rodriguez-Navarro, A. Potassium-or sodium-efflux ATPase, a key enzyme in the evolution of fungi // Microbiology. 2002. V. 148. P. 933-941.

46. Binzel M.L., Hasegavva P.M., Pliodcs D. Solute accumulation in tobacco cells adapted to NaCl//Plant Physiol. 1988. V. 87. P. 1408-1415.

47. Binzel M.L., Reuveni M. Cellular mechanisms of salt tolerance in plant cells // Horticul. Rev. 1994. V. 16. P. 33-69.

48. Blumwald E., Gelli A. Secondary inorganic ion transport at the tonoplast // Advan. Botan. Res. 1997. V. 25. P. 401-417.

49. Blumwald E., Poole R. Salt tolerance in suspension cultures of sugar beet— induction of Na+/H+-antiport activity at the tonoplast by growth in salt // Plant Physiol. 1987. V. 83. P. 884-887.

50. Bordas M., Montesinos C., Debauza M., Salvador A., Roig L., Serrano R., Moreno V. Transfer of the yeast salt tolerance gene HAL1 to Cucumis melo L. cultivars and in vitro evaluation of salt tolerance // Transgenic Res. 1997. V. 6. P. 41-50.

51. Borochov-Neori H., Borochov A. Response of melon plants to salt. 1. Growth, morphology and roots membrane properties // Plant Physiol. 1991. V. 139. P. 100-105.

52. Brini F., Gaxiola R., Berkowitz G. Cloning and characterization of a wheat vacuolar cation/proton antiporter and pyrophosphatase proton pump // Plant Phisiol. and Biochem. 2005. № 43. P. 347-354.

53. Bruns S., Hecht-Buchholz C. Light and electron-microscope studies on the leaves of several potato cultivars after application of salt at various developmental stages // Potato Res. 1990. P. 33-41.

54. Chauhan S., Forsthoefel N., Ran Y., Quigley F., Nelson D., Bohnert H. Na+/myo-inositol symporters and Na+/H+-antiport in Mesembryanthemum crystallinum II Plant J. 2000. V. 24. P. 511E-522.

55. Cheeseman J. Mechanisms of salinity tolerance in plants // Plant Physiol. 1988. V. 87. №3. P. 547-550.

56. Chen T., Murata N. Enhancement of tolerance of abiotic stress by metabolic engineering of betaines and other compatible solutes // Cur. Opin. Plant Biol. 2002. V. 5. P. 250-257.

57. Clarkson D., Hanson J. The mineral nutrition of higher plants // Annual Rev. Plant Physiol. 1980. Y. 31. P. 239.

58. Davenport R., Tester M. A weakly voltage-dependent, nonselective cation channel mediates toxic sodium influx in wheat // Plant Physiol. 2000. V. 122. P. 823-834.

59. Demidchik V., Davenport R., Tester M. Nonselective cation channels in plants // Annual Rev. Plant Biol. 2002. V. 53. P. 67-107.

60. Dewey P. Breeding crested wheatgrass for salt tolerance // Crop Sc. 1962. V. 2. P. 403-407.

61. Downie J., Gibson F., Cox O. Membrane adenosine triphosphatases of pro-karyotic cells //Ann. Rev. Biochem. 1979. V. 48. P. 103-131.

62. Ferjani A., Segami S., Horiguchi G., Muto Y., Maeshima M., Tsukaya H. Keep an Eye on PPi: The Vacuolar-Type H+-Pyrophosphatase Regulates Postgerminative Development in Arabidopsis 11 Plant Cell. 2011. V.23. P.2895-2908.

63. Flowers T.J., Colmer T.D. Salinity tolerance in halophytes // New Phytol. 2008. V.179.P.945-63.

64. Flowers T., Duque E., Hajibagheri H. The effects of salinity on leaf ultrastructure and net photosynthesis of two varieties of rice: further evidence for a cellular component of a salt-resistance // New Phytol. 1985. V. 100. № 1. P. 37-43.

65. Flowers T., Yeo A. Ion relations of plants under drought and salinity // Aust. J. Plant Physiol. 1986. V. 13. P. 75-91.

66. Flowers T., Yeo A. Breeding for salinity resistance in crop plants: where next? // Aust. J. Plant Physiol. 1995. V. 22. P. 875-884.

67. Francois L.E., Maas E.V., Donovan T.J., Youngs V.L. Effect of salinity on grain and quality, vegetative growth and germination of semi-dwarf and durum wheat//Agron J. 1986. V. 78. P. 1053-1058.

68. Fukuda A., Chiba K., Maeda M. Effects of salt and osmotic stresses on the expression of genes for the vacuolar H+-pyrophosphatase, H+-ATPase subunit A, and Na+/H+-antiporter from barley // J. Exp. Bot. 2004. V. 55. № 397. P. 585-594.

69. Gao F., Gao Q., Duan X., Yue G., Yang A., Zhang J. Cloning of an H+-PPase gene from Thellungiella halophila and its heterogous expression to improve tobacco salt tolerance // J. Exp. Bot. 2006. V. 57. № 12. P. 32593270.

70. Gaxiola R., Larrinoa I., Villalba J., Serrano R. A novel and conserved salt-induced protein is an important of salt tolerance in yeast // EMBO J. 1992. V. 11. №9. P. 3157-3164.

71. Gaxiola R., Li J., Undurraga S. Drought- and salt-tolerant plants result from overexpression of the AVP1 H+-pump // Proc. Nalt. Acad. Sci. USA. 2001. V. 98. №20. P. 11444-11449.

72. Gaxiola R.A., Palmgren M.G., Schumacher K. Plant proton pumps // FEBS Lett. 2007. V.581. P.2204-14.

73. Gaxiola R., Rao R., Sherman A. The Arabidopsis thaliana proton transporters, AtNhxl and Avpl, can function in cation detoxification in yeast // Proc. Nalt. Acad. Sci. USA. 1999. V. 96. P. 1480-1485.

74. Gill P., Sharma A., Singh P., Bhuiiar S. Osmotic stress-induced changes in germination, growth and soluble sugar content of Sorghum bicolor L. Moench seeds // Bulg. J. Plant Physiol. 2002. V. 28(3-4). P. 1225.

75. Gilmour S., Sebolt A., Salazar M., Everard J., Thomashow M. Overexpression of the arabidopsis CBF3 transcriptional activator mimics multiple biochemical changes associated with cold acclimation / Plant Physiol. 2000. V. 124. P.1854-1865.

76. Gisbert C., Rus A., Bolari'n M., Lo'pez-Coronado J., Arrillaga I., Montesinos C., Caro M., Serrano R., Moreno V. The yeast HAL1 gene improves salt tolerance of transgenic tomato // Plant Physiol. 2000. V. 123. P. 393-402.

77. Gorham J., Wyn Jones R., McDonnell E. Some mechanisms of salt tolerance in crop plants // Plant and Soil. 1985. V. 89. № 1-3. P. 15-40.

78. Green way H., Munns R. Mechanisms of salt tolerance in nonhalophytes // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1980. V. 31. P. 149-190.

79. Gregorio G., Senadhira D. Genetic analysis of salinity tolerance in rice 0Oryza sativa L.) II Theor. Appl. Genet. 1993. V. 86. P. 333-338.

80. Guo S., Yin H., Znang X., Zhao F., Li P., Chen S., Znao Y., Zhang H. Molecular cloning and characterization of a vacuolar H+-PPasa gene, SsYP, from the halophyte Suaeda salsa and its overexpression increases salt and drought tolerance of Arabidopsis // Plant Mol. Biol. 2006. № 60. P. 41-50.

81. Griiber G, Svergun DI, Coskun U, Lemker T, Koch MH, Schagger H&Muller V. Structural insights into the A1 ATPase from the archaeon, Me-thanosarcina mazei Gol // Biochemistry. 2001. V. 40. P. 1890-1896.

82. Hamada A., Shono M., Xia T., Ohta M., Hayashi Y., Tanaka A., Hayakawa T. Isolation and characterization of a Na+/H+-antiporter gene from the halophyte Atriplex gmelini II Plant Mol. Biol. 2001. V. 46. P.35-42.

83. Hamilton E., Heckathorn S. Mitochondrial adaptations to NaCl. Complex I is protected by anti-oxidants and small heat shock proteins, whereas complex II is protected by proline and betaine // Plant Physiol. 2001. V. 126. P. 1266-1274.

84. Harndahl U., Hall R., Osteryoung K., Vierling E., Bornman J., Sundby C. The chloroplast small heat shock protein undergoes oxidation-dependent

conformational changes and may protect plants from oxidative stress // Cell Stress Chaperones. 1999. V. 4. P. 129-138.

85. Hayashi H., Mustardy L., Deshnium P., Ida M., Murata N. Transformation of Arabidopsis thaliana with the codA gene for choline oxidase: accumulation of glycinebetaine and enhanced tolerance to salt and cold stress // Plant J. 1997. V. 12. P. 133-142.

86. Hedlund J., Cantony R., Baltscheffsky M. Analysis of ancient sequence motifs in the H+-PPase family // FEBS J. 2006. № 273. P. 5183-5193.

87. Hernandez J., Campillo A., Jimenes A., Alarcon J., Sevilla F. Response of antioxidant systems and leaf water relations to NaCl stress in pea // New Phytol. 1999. V. 141. P. 241—251.

88. Hong Z., Lakkineni K., Zhang K., Verma D. Removal of feedback inhibition of D l-pyrroline-5-carboxylate synthetase results in increased proline accumulation and protection of plants from osmotic stress // Plant Physiol. 2000. V. 122. P. 1129-1136.

89. Horie T., Hauser F., Schroeder J.I. HKT transporter-mediated salinity resistance mechanisms in Arabidopsis and monocot crop plants // Trends Plant Sci. 2009. V.14. P.660-668.

90. Hsieh T., Lee J., Yang P., Chiu L., Charng Y., Wang Y., Chan M. Heterology expression of the Arabidopsis C-repeat/dehydration response element binding factor 1 gene confers elevated tolerance to chilling and oxidative stresses in transgenic tomato // Plant Physiol. 2002. V. 129. P. 1086-1094.

91. Hu Y., Schnyder H., Schmidhalter U. Carbohydrate deposition and partitioning in elongating leaves of wheat under saline soil conditions. Aust. J. Plant Physiol. 2000. V. 27. P. 363-370.

92. Jaglo K., Kleff S., Amundsen K., Zhang X., Haake V., Zhang J., Deits T., Thomashow M. Components of the Arabidopsis C-repeat/dehydration-responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in

Brassica napus and other plant species // Plant Physiol. 2001. V. 127. P. 910-917.

93. Jaglo-Ottosen K., Gilmour S., Zarka D., Schabenberger O., Thomashow M. Arabidopsis CBF1 overexpression induces COR genes and enhances freezing tolerance // Science. 1998. V. 280. P. 104-106.

94. Jeschke W. Roots: cation selectivity and compartmentation, involvement of protons and regulation. In Plant Membran Transport: Current Conceptual Issue // Hoi. Biochem. Press. Amesterdam. 1980. P. 17-28.

95. Jiang X., Leidi E.O., Pardo J.M. How do vacuolar NHX exchangers function in plant salt tolerance? // Plant Signal. Behav. 2010. V.5. P.792-795.

96. Jisheng Li J., Yang H., Peer W., Richter G., Blakeslee J., Bandyopadhyay A., Titapiwantakun B., Undurraga S., Khodakovskaya M., Richards E., Kri-zek B., Murphy A., Gilroy S., Gaxiola R. Arabidopsis H+-PPase AVP1 regulates auxin-mediated organ development // Science. 2005.V. 310. P. 121125.

97. Kasuga M., Liu G., Miura S., Yamaguchi-Shinozaki K., Shinozaki K. Improving plant drought, salt, and freezing tolerance by gene transfer of a single stress-inducible transcription factor //Nat. Biotech. 1999. V. 17. P. 287291.

98. Khavarinejad R., Mostofi Y. Effects of NaCl on photosynthetic pigments, saccharides, and chloroplast ultra structure in leaves of tomato cultivars // Photosyn. 1998. V. 35. P. 151-154.

99. Kim E., Zhen R-G., Rea P. Site-directed mutagenesis of vacuolar H+-pyrophosphatase // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. № 6. P. 2630-2635.

100. Kishor K., Hong Z., Miao G., Hu C., Yerma D. Overexpression of D 1-pyrroline-5-carboxylate synthetase increase proline production and confers osmotolerance in transgenic plants // Plant Physiol. 1995. V. 108. P. 13871394.

101. Klemme J.-H., Klemme B., Gest H. Catalytic properties and regulatory diversity of inorganic pyrophosphatases from photosynthetic bacteria // J. Bac-teriol. 1971. P. 1122-1128.

102. Konstantinova T., Parvanova D., Atanassov A., Djilianov D. Freezing tolerant tobacco, transformed to accumulate osmoprotectants // Plant Sci. 2002. V. 163. P. 157-164.

103. Krebs M., Beyhl D., Gorlich E., Khaled A.S. Al-Rasheid, Marten I., Stierhof Y., Hedrich R., Schumacher K. Arabidopsis V-ATPase activity at the tonop-last is required for efficient nutrient storage but not for sodium accumulation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010. V.107. P.3251-3256.

104. Krulwich T.A. Na+/H+-antiporters // Biochim. Biophys. Acta. 1983. V. 726. P. 245-264.

105. Leach R., Wheeler K., Flowers T., Yeo A. Molecular markers for ion com-partmentation in cells of higher plants. I. Isolation of vacuoles of high purity //J. Exp. Bot. 1980. V. 41. P. 1079-1087.

106. Leonova T., Ovchinnykova V., Souer E., Albert de Boer, Kharchenko P., Babakov A. Isolated Thellungiella shoots do not require roots to survive NaCl and Na2S04 salt stresses // Plant Signal Behav. 2009.V. 4(11). P. 10591062.

107. Lerner H. Adaptation to salinity at the plant cell level // Plant and Soil. 1985. V. 89. № 1-3. P. 3-14.

108. Lilius G., Holmberg N., Bulow L. Enhanced NaCl stress tolerance in transgenic tobacco expressing bacterial choline dehydrogenase // Bio-Technol. 1996. V. 14. P. 177-180.

109. Liittge U. Plant cell membranes and salinity: structural, biochemical and biophysical changes // Rev. Brasil. Fisiol. Veget. 1993. V. 85. № 2. P. 217224.

110. Maeshima M. Vacuolar ^-pyrophosphatase // Biochim. Biophys. Acta. 2000. V. 1465. № l.P. 37-51.

111. Martin P., Koebner R. Sodium and chloride ions contribute synergistically to salt toxicity in wheat // Biol. Plant. 1995. V. 37. № 2. P. 265-271.

112. Matzke M., Matzke A., Kooter J. RNA: Guiding gene silencing // Science. 2001. V. 293. P. 1080-1083.

113. Mitchell P. Chemiosmotic coupling in oxidative and photosynthetic phos-phorilation. Bodmin Glynn Res. 1966.

114. Miteva T., Zhelev N., Popova L. Effect of salinity on the synthesis of ribu-lose-l,5-bisphosphatecarboxulase/oxygenase in barley leaves // Plant Physiol. 1992. V. 140. № l.P. 46-51.

115. Munns R., Passioura J. Na, K and CI in xylem sap flowing to shoots of NaCI treated barley // J. Exp. Bot. 1986. V. 168. P. 1032-1042.

116. Nakayama N., Han C.Y., Cam L., Lee J., Pretorius J., Fisher S., Rosenfeld R., Scully S., Nishinakamura R., Duryea D., Van G., Bolon B., Yokota T., Zhang K. A novel chordin-like BMP inhibitor, CHL2, expressed preferentially in chondrocytes of developing cartilage and osteoarthritic joint cartilage // Development. 2004. V. 131. P. 229-240.

117. Nanjo T, Kobayashia M, Yoshibab Y, Kakubaric Y, Yamaguchi-Shinozaki K, Shinozaki K. Antisense suppression of proline degradation improves tolerance to freezing and salinity in Arabidopsis thaliana II FEBS Lett. 1999. V. 461. P. 205-210.

118. Nieves M., Cerda A., Botclla M. Salt tolerance of two lemon accessions measured by leaf chloride and sodium accumulation // J. Plant Nutr. 1999. V. 14. P. 623-630.

119. Novillo F., Alonso J.M., Ecker J.R., Salinas J. CBF2/DREB1C is a negative regulator of CBF1/DREB1B and CBF3/DREB1A expression and plays a central role in stress tolerance in Arabidopsis II Proc Natl Acad Sci USA. 2004. V. 101. P.3985-3990.

120. Oberschall A., Deak M., Torok K., Sass L., Vass I., Kovacs I., Feher A., Dudits D., Horvath G. A novel aldose/aldehyde reductase protects transgenic

plants against lipid peroxidation under chemical and drought stresses // Plant J. 2000. V. 24. P. 437-446.

121. Olías R., Eljakaoui Z., Pardo J.M., Belver A. The Na+/H+ exchanger SOS1 controls extrusion and distribution of Na+ in tomato plants under salinity conditions // Plant Signal Behav. 2009. V.4. P.973-976.

122. Park S., Li J., Pittman J. Up-regulation of a H+-pyrophosphatase (H+-PPase) as a strategy to engineer drought-resistant crop plants // PNAS. 2005. V. 102. №52. P. 18830-18835.

123. Pérez-Castineira J., López-Marqués R., Villalba J. Function complementation of yeast cytosolic pyrophosphatase by bacterial and plant H+-translocating pyrophosphatases // PNAS. 2002. V. 99. № 25. P. 1591415919.

124. Popova L.G., Shumkova G.A., Andreev I.M., Balnokin Y.V. Functional identification of electrogenic Na+-translocating ATPase in the plasma membrane of the halotolerant microalga Dunaliella marítima II FEBS Lett. 2005. V. 579. P. 5002-5006.

125. Ramage R. Genetic methods to breed salt tolerance in crops. In: Rains D., Valentine R., Hollaender A. (Eds.) Genetic engineering of osmoregulation. New York. Plenum Press. 1980. P. 311 -318.

126. Rana R. Genetic diversity for salt-stress resistance of wheat in India // Ra-chis. 1986. V. 5. P. 32-37.

127. Randahl H. Characterization of the membrane-bound inorganic pyrophosh-patase in Rhodospirillum rubrum II Eur. J. Biochem. 1979. № 102. P. 251256.

128. Ratner A., Jacoby B. Effects of K+, its counter anion, and pH on sodium efflux from barley root tips // J. Exp. Bot. 1976. V. 27. P. 843E-852.

129. Rodríguez-Rosales M.P., Gálvez F.J., Huertas R., Aranda M.N., Baghour M., Cagnac O., Venema K. Plant NHX cation/proton antiporters // Plant Signal Behav. 2009. V.4. P.265-276.

130. Rus A., Yokoi S., Sharkhuu A., Reddy M., Lee B., Matsumoto T., Kolwa H., Zhu J., Bressan R., Hasegawa P. AtHKTl is a salt tolerance determinant that controls Na+ entry into plant roots. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001. V. 98. P. 14150-14155.

131. Sabehat A., Lurie S., Weiss D. Expression of small heat-shock proteins at low temperatures // Plant Physiol. 1998. V. 117. P. 651-658.

132. Sambrook J., Fritsch E., Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. 1989.

133. Saranga Y., Cahaner A., Zamir D., Marani A., Rudich J. Breeding tomatoes for salt tolerance dinheritance of salt tolerance and related traits in interspe-ciec populations // Theor. Appl. Gen. 1992. Y. 84. P. 390-396.

134. Schachtman D., Weihong L. Molecular pieces to the puzzle of the interaction between potassium and sodium uptake in plants // Trends Plant Sci. 1999. V. 4. №7. P. 281-287.

135. Serrano R. Plasma membrane ATPase of fungi and plants as a novel type of proton pump // Curr. Top. Cell Regul. 1984. V. 23. P. 87-126, 199.

136. Shen Y., Li Y., Yan S. Effects of salinity on germination of six salt-tolerant forage species and their recovery from saline conditions // New Zeal. J. Ag. Res. 2003. V. 46. P. 263-269.

137. Sheveleva E., Chmara W., Bohnert H., Jensen R. Increased salt and drought tolerance by D-ononitol production in transgenic Nicotiana tabacum L II Plant Physiol. 1997. V. 115. P. 1211-1219.

138. Shi H., Ishitani M., Kim C., Zhu J. The Arabidopsis thaliana salt tolerance gene SOS1 encodes a putative Na+/H+-antiporter // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. V. 97. P. 6896-6901.

139. Shi H., Quintero F., Pardo J., Zhu J-K. The putative plasma membrane Na+/H+-antiporter SOS1 controls long-distance Na+ transport in plant // Plant Cell. 2002. V. 14. P. 465-477.

140. Shono M., Hara Y, Wada M, Fujii T. A sodium pump in the plasma membrane of the marine alga Heterosigma akashiwo II Plant & Cell Physiology. 1996. V. 37(3). P. 385-388.

141. Silva P., Geros H. Regulation by salt of vacuolar H+-ATPase and H+-pyrophosphatase activities and Na+/H+ exchange // Plant Signa.l Behav. 2009. V.4. P.718-726.

142. Smirnoff N. Plant resistance to environmental stress // Curr. Opin. Biotech.

1998. V. 9. P. 214-219.

143. Sottosanto J.B., Saranga Y., Blumwald E. Impact of AtNHXl, a vacuolar Na+/H+ antiporter, upon gene expression during short- and long-term salt stress in Arabidopsis thaliana II BMC Plant Biol. 2007. V.7. P. 18.

144. Stiborova M., Ksinska S., Brezinova A. Effect of NaCl on the growth and biochemical characteristics of photosynthesis of barley and maize // Photo-synthetica. 1987. V. 21. № 3. P. 320-328.

145. Sugino M., Hibino T., Tanaka Y., Nii N., Takabe T. Overexpression of DnaK from a halotolerant cyanobacterium Aphanothece halophytica acquires resistance to salt stress in transgenic tobacco plants // Plant Science.

1999. V. 146. P. 81-88.

146. Sun W., Bernard C., Van de Cotte B., Van Montagu M., Verbruggen N. At-HSP17.6A, encoding a small heat-shock protein in Arabidopsis, can enhance osmotolerance upon overexpression // Plant J. 2001. V. 27. P. 407-415.

147. Sze H., Li X., Palmgren M. Energization of plant cell membranes by H+-pumping ATPases: regulation and biosynthesis // Plant Cell. 1999. V. 11. P. 677-689.

148. Tarczynski M., Jensen R., Bohnert H. Stress protection of transgenic tobacco by production of the osmolyte mannitol // Science. 1993. V. 259. P. 508510.

149. Teplyakov A., Obmolova G., Wilson K., Ishii K., Kaji H., Samejima T., Ku-ranova I. Crystal structure of inorganic pyrophasphatase from Thermus thermophilus II Protein Sci. 1994. № 3. P. 1098-1107.

150. Tester M., Davenport R. Na+ tolerance and Na+ transport in higher plants // An. Bot. 2003. № 91. P. 503-527.

151. Van Haute E., Joos H., Maes M., Warren G., Van Montagu M., Schell J. In-tergenic transfer and exchange recombination of restriction fragments cloned in pBR322: A novel strategy for reversed genetics of Ti plasmids of Agro-bacterium tumefaciens IIEMBO J. 1983. V. 2. P. 411-418.

152. Vance V., Vaucheret H. RNA silencing in plants — defense and counterde-fense // Science. 2001. V. 292. P. 2277-2280.

153. Veena R., Sopory S. Glyoxalase I from Brassica júncea: molecular cloning, regulation and its over-expression confer tolerance in transgenic tobacco under stress // Plant J. 1999. V. 17. P. 385-395.

154. Vera-Estrella R., Barkla B.J., García-Ramírez L., Pantoja O.. Salt stress in Thellungiella halophila activates Na+ transport mechanisms required for salinity tolerance//Plant Physiol. 2005. V.139. P.1507-1517.

155. Vianello A., Macri F. Proton pumping pyrophosphatase from higher plant mitochondria // Physiol. Plantarum. 1999. № 105. P. 763-768.

156. Vianello A., Zancani M., Casolo V., Macri F. Orientation of pea stem mitochondrial ^-pyrophosphatase and its different characteristics from tonoplast counterpart // Plant Cell Physiol. 1997. № 38 (1). P. 87-90.

157. Voinnet O. RNA silencing as a plant immune system against viruses // Trends Genet. 2001. V. 17. P. 449-459.

158. Waterhouse P., Wang M., Lough T. Gene silencing as an adaptive defence against viruses // Nature. 2001. V. 411. P. 834-842.

159. Waters E., Lee G., Vierling E. Evolution, structure and function of the small heat shock proteins in plants // J. Exp. Bot. 1996. V. 47. P. 325-338.

160. Xu D., Duan X., Wang B., Hong B., Ho T., Wu R. Expression of a late embryogenesis abundant protein gene, HVA1, from barley conferred tolerance to water deficit and salt stress in transgenic rice // Plant Physiol. 1996. V. 110. P. 249-257.

161. XuK, Zhang H., Blumwald E., Xia T. A Novel Plant Vacuolar Na+/H+ Antiporter gene evolved by DNA shuffling confers improved salt tolerance in yeast // J. Biol. Chem. 2010. V.285. P.22999-23006.

162. Yamaguchi T., Blumwald E. Developing salt-tolerant crop plants: challenges and opportunities // Rev. Trends Plant Sci. 2005. V. 10. № 12. P. 615-620.

163. Yan X. NaCl-induced amoeboid plastids and mitochondria in meristematic cells of barley roots // Biology Plantarum. 1995. V. 37. № 3. P. 363-369.

164. Yang Q., Chen Z., Zhou H., Yin H., Li X., Xin X., Hong H., Zhu J., Gong Z. Overexpression of SOS (Salt Overly Sensitive) genes increases salt tolerance in transgenic Arabidopsis II Mol Plant. 2009. V.2. P.22-31.

165. Yokoi S., Bressan R., Hasegava P. Salt stress tolerance of plants // JIRCAS Working Rep. 2002. P. 25-33.

166. Yoshida K. Plant biotechnology - genetic engineering to enhance plant salt tolerance // J. Biosci. Bioeng. 2002. V. 94. № 6. P. 585-590.

167. Zhang H-X., Blumwald E. Transgenic salt-tolerant tomato plants accumulate salt in foliage but not in fruit //Nat. Biotech. 2001. V. 19. P. 765-768.

168. Zhang H-X., Hodson J., Williams J., Blumwald E. Engineering salt-tolerant Brassica plants: Characterization of yield and seed oil quality in transgenic plants with increased vacuolar sodium accumulation // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001. V. 98. P. 12832-12836.

169. Zhang H., Shen G., Kuppu S., Gaxiola R., Payton P. Creating drought- and salt-tolerant cotton by overexpressing a vacuolar pyrophosphatase gene // Plant Signal Behav. 2011. V.6. P.861-863.

170. Zhao F., Wang Z., Zhang Q., Zhao Y., Zhang H. Analysis of the physiological mechanism of salt-tolerant transgenic rice carrying a vacuolar Na+/H+-antiporter gene from Suaeda salsa IIJ Plant Res. 2006. № 119. P. 95-104.

171. Zhu В., Chen Т., Li P. Activation of two osmotin-like protein genes by abiotic stimuli and fungal pathogen in transgenic potato plants // Plant Phyiol. 1995. V. 108. №3. P. 929-937.

172. Zhu J-K. Plant salt tolerance // Trends Plant Sci. 2001. V. 6. P. 66-71.

173. Zyryanov A., Shestakov A., Lanti R., Baykov A. Mechanism by which metal cofactors control substrate specifity in pyrophosphatase // Biochem. 2002. №367. P. 901-906.

174. ГОСТ 12038-84. Библиотека гостов. http://libgost.ru/gost/6926-GOST_12038_84.html