Влияние абсцизовой кислоты на функционирование кальциевой и аденилатциклазной сигнальных систем тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.12, кандидат биологических наук Ягушева, Мадина Рашитовна

• Ягушева, Мадина Рашитовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ягушева, Мадина Рашитовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Фитогормон - абсцизовая кислота

1.2. Аденилатциклазная сигнальная система 16 1.2.1. Аденилатциклазная система в растениях

1.3. Са -сигнальная система 21 1.3.1. Механизмы поддержания Са2+-гомеостаза в клетках

1.3.1.1. Са2+-каналы

1.3.1.2. Ыа+/Са2+-обменник

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Определение содержания цАМФ

2.3. Определение цАМФ-зависимой протеинкиназной активности

2.4. Фосфорилирование белков in vivo

2.5. Определение транспорта Са2+ в клетках водорослей

2.5.1. Поглощение Са клетками водорослей

2.5.2. Активность Na/Са -обменника

2.6. Определение содержания Na+ в клетках водорослей

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Влияние АБК на аденилатциклазную сигнальную систему

3.1.1. АБК-индуцированные изменения содержания цАМФ в клетках растений и его секреции

3.2. Влияние АБК на протеинкиназную активность и фосфорилирование белков

3.2.1. Влияние АБК на протеинкиназную активность in vitro и фосфорилирование белков in vivo

3.2.2. Влияние АБК на фосфорилирование полипептидов in vivo

3.3. Влияние АБК на кальциевую сигнальную систему

3.3.1. АБК-индуцированный транспорт Са2+ в клетках, вклад Са2+-каналов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние абсцизовой кислоты на функционирование кальциевой и аденилатциклазной сигнальных систем»

Актуальность проблемы. Абсцизовая кислота (АБК) играет важную роль в регуляции роста растений и ответной реакции на различные биогенные и абиогенные стрессоры. АБК индуцирует репрограмирование экспрессии генов и синтеза «защитных» белков, что определяет повышение устойчивости растений к различного рода стрессорам. Существующие данные предполагают участие сигнальных систем клеток в ответе на действие АБК. В плазмалемме обнаружен белок (рецептор), характеризующийся высокой степенью сродства к АБК. К возможным медиаторам осуществления ответной реакции на АБК относят Са2+, К+, Н+ и циклическую АДФ-рибозу (Owen, 1988; Quatrano et al, 1994; Heimovaara-Dijkstra et al, 1994). Показано, что в механизм действия АБК включен МАР-киназный сигнальный каскад (Knetch et al., 1996).

Существенным этапом передачи сигнала по системе вторичных посредников является фосфорилирование белков, которое играет кардинальную роль в регуляции многих клеточных процессов эукариот. В настоящий момент доказана роль процессов фосфорилирования-дефосфорилирования белков в клетках прокариот и всех эукариот, включая дрожжи, животные и растения (MacKintosh et al, 1990; Kauss et al, 1991; Cohen, 1992; Cohen et al,1995; Hunter, 1995; Каримова, 1994; Тарчевский, 2000; и др.). Сведения об АБК-индуцированном фосфорилировании белков немногочисленны и получены с помощью ингибиторного анализа. Несмотря на доказательство участия Са2+ в механизмах действия АБК, измеренные изменения поглощения Са2+ при действии АБК в различных растениях были неоднозначны, а в некоторых случаях показано отсутствие действия АБК. Сведения о влиянии АБК на цАМФ-систему в растениях к началу нашего исследования отсутствовали.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы было выяснение участия цАМФ- и Са2+- сигнальных систем в АБК-индуцированном ответе клеток растений. В задачи исследования входило: 1) определить влияние АБК на содержание цАМФ в тканях растений, а также на протеинкиназную активность и фосфорилирование белков; 2) выявить вклад различных механизмов изменения и поддержания Са гомеостаза в цитозоле клеток

9-4растении при действии на них

АБК: Са -каналов (с помощью блокаторов), Ма+/Са2+-обменника при наличии градиента Na+ между клеткой и средой.

Научная новизна работы: Впервые показано АБК-индуцированное снижение содержания цАМФ в клетках растений и интенсивности секреции цАМФ в среду; а также изменения цАМФ-зависимой протеинкиназной активности, зависящие от времени воздействия АБК. Впервые показаны АБК-индуцированные изменения профиля фосфорилированных полипептидов, которые были различными при оптимальной температуре и при гипотермии. Впервые показано беспрецедентно сильное АБК-индуцированное повышение относительного уровня фосфорилированности полипептида (ОУФП) 10 кД при гипотермии. цАМФ также повышал за 2 часа действия гипотермии in vivo ОУФП 10 кД. АБК вызывала кратковременное повышение поглощения Са клетками, сменяющееся понижением или отсутствием изменения транспорта Са . Показано АБК-индуцированное изменение соотношения активностей Са2+-транспортирующих систем клеток растений во времени: Са2+-каналов, Ка+/Са2+-обменника.

Практическая значимость работы: Полученные результаты вносят вклад в понимание физиолого-биохимических механизмов, лежащих в основе регуляции клеточной активности растений и могут использоваться для разработки приемов повышения устойчивости растений с помощью препаратов, содержащих АБК и соли кальция. Полученные результаты можно использовать при чтении лекций в учебном процессе.

Апробация работы: Материалы диссертации доложены на 10 конгрессе федерации европейских физиологов растений FESPP, Florence, Italy, 1996; на Российско-Германской школе молодых ученых, Пущино, 1997; на П(Х) Съезде Русского Ботанического Общества, С.-Петербург, 1998; на Международной конференции «Рецепция и внутриклеточная сигнализация», Пущино, 1998; на VI Съезде общества физиологов растений России (международная конференция), Москва, 1999; на международном конгрессе нейрохимиков ISN/ESN-Meeting, Берлин, Германия, 1999; на итоговых конференциях КИББ КНЦ РАН (1998, 1999). 7

Благодарности, Приношу свою благодарность коллегам, работавшим со мной в группе: Мухаметчиной Н.У., Ванюшиной С.А., Крутиковой Т.И., Гайнутдиновой А.Х. Глубокую признательность выражаю за плодотворное обсуждение полученных данных и неоценимую дружескую поддержку Каримовой Ф.Г., Гордону JI.X.; за помощь в освоении компьютерных программ и дружескую помощь Колесникову О.В. Особую благодарность выражаю моим научным руководителям И.А. Тарчевскому и H.H. Максютовой за всестороннюю поддержку, терпение и веру в успех нашей работы. Благодарна своей семье за поддержку и понимание.

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Ягушева, Мадина Рашитовна

ВЫВОДЫ

1. Впервые показано, что экзогенная АБК понижала содержание цАМФ в клетках растений и его секрецию в среду, а также изменяла протеинкиназную активность в присутствии цАМФ.

2. АБК индуцировала изменение профилей радиоактивности 32Р -фосфорилированных полипептидов листьев гороха in vivo, которое было различным при оптимальной температуре и при гипотермии.

3. Экзогенные АБК и цАМФ в условиях гипотермии резко повысили относительный уровень фосфорилированности полипептида 10 кД. По данным литературы это может быть белковый активатор ФДЭ цАМФ.

92

4. АБК индуцировала кратковременное повышение содержания Са2+ в клетках D.maritima, сменяющееся ингибированием и отсутствием изменения.

5. АБК индуцировала изменение соотношения активностей Са2+-транспортирующих механизмов плазмалеммы клеток Dunaliella maritima (Са2+-каналы, Nа7Са2+-обменник) во времени.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выявление участия ряда сигнальных систем: кальциевой (Trewavas, Malho, 1997), МАР-киназной (Knetsch et al, 1996), NO-синтазной (Wu et al, 1997), аденилатциклазной (Каримова и др., 1998; Тарчевский и др., 1999), липоксигеназной (Гречкин, Тарчевский, 1999) в АБК-индуцированных реакциях растений определяет необходимость дальнейших детальных исследований участия сигнальных систем в ответе клеток растений на действие стрессовых фитогормонов, в том числе АБК.

На основании полученных нами результатов мы делаем вывод об участии в механизмах действия АБК аденилатциклазной сигнальной системы, так как гормон уменьшал содержание эндогенного цАМФ в клетках растений и его секрецию при оптимальной температуре (табл. 1, 2; рис. 7). АБК и цАМФ индуцировали повышение при гипотермии фосфорилирования полипептида 10 кД (рис. 11-13), по данным литературы - активатора ФДЭ цАМФ (Junker, 1977). Зарегистированное нами повышение протеинкиназной активности абсцизовой кислотой в присутствии экзогенного цАМФ (1мкМ) свидетельствует о возможности прямого действия этого фитогормона на цАМФ-зависимые протеинкиназы in vitro (рис. 8). In vivo действие АБК на протеинкиназную активность зависело от времени воздействия гормона (2 и 12 часов) (табл. 3, 4). К настоящему времени найдено, что повышение концентрации ионов кальция в цитозоле клеток растений опосредовано вторичными мессенджерами ИТФ3, цАДФР, цАМФ. Полученные нами результаты (табл. 5) по влиянию на транспорт Са2+ из клеток цАМФ и блокатора фосфорилированных Са2+-каналов верапамила свидетельствуют о возможности цАМФ-зависимого фосфорилирования белков Са2+-каналов и Ыа+/Са2+-обменника.

Согласно нашим результатам, данные исследователей о неоднозначности л | действия АБК на поглощение Ca клетками растений (Clarkson et al, 1988;

Felle, 1988; MacRobbie, 1992) объясняются АБК-индуцированным изменением

•ji соотношения активностей различных Ca -транспортеров в плазмалемме. Изучение временной зависимости действия АБК на содержание Са2+ в клетках D.maritima выявило гормон-индуцированное кратковременное повышение содержания Са2+ в клетках, обусловленное входом Са2+ по Са2+-каналам, которое сменялось его падением, затем отсутствием изменения (рис. 16). Последнее было обусловлено активированием механизмов удаления Са2+ из клеток, в частности На+/Са2+-обменника, активность переноса Са2+ которым повышалась АБК на 92% (табл. 5). Регуляция АБК переноса Са2+ Na7Ca2+-обменником осуществлялась в разных режимах работы обменника: прямом (табл. 5) и обращенном (данные не приведены); соответственно, направление

04

Ca переноса было из клетки и в клетку.

В наших экспериментах получено доказательство взаимовлияния Са2+- и цАМФ-сигнальных систем: вторичный мессенджер аденилатциклазной системы цАМФ стимулировал АБК-индуцированный транспорт Са2+ (табл. 5); Са2+ участвовал в АБК-индуцированном уменьшении содержания цАМФ (рис. 8). Обнаруженное нами действие верапамила - блокатора фосфорилированных потенциалзависимых Са2+-каналов на транспорт Са2 (табл. 5) - свидетельствует о роли цАМФ-зависимого фосфорилирования белков Са2+-каналов в усилении транспорта Са2+ в клетки циклонуклеотидом. Последнее свидетельствует о том, что цАМФ может не только, связываясь с белками Са2+-каналов, прямо открывать их без фосфорилирования, но и, фосфорилируя белки Са2+-каналов дАМФ-зависимым способом, увеличивать время их открытости и, соответственно, увеличивать вход Са2+ в клетки (табл. 5, рис. 18).

Итак, полученные в наших экспериментах результаты свидетельствуют об АБК-индуцированной активации аденилатциклазной и кальциевой сигнальных систем, входящих в состав сети клеточных сигнальных систем, осуществляющих регуляцию каскада приспособительных реакций клеток растений к изменившимся условиям среды обитания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ягушева, Мадина Рашитовна, 2000 год

1. Абдулаев A.A., Семененко В.Е. Интенсивная культура Dunaliella salina Teod. и некоторые ее физиологические характеристики. // Физиол. раст. 1974. Т. 21. N6. С. 1145-1153.

2. Авдонин П.В., Ткачук В. А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М.:Наука. 1994.

3. Антипенко А.Е. Вторичные посредники в клетках сердца и тладких мышц сосудов. //Биохимия. 1991. Т.56, N4. С.589.

4. Бабаков A.B., Абрамычева Н.Ю.ОТР-связывающие белки в плазматических мембранах высших растений. //Биол Мембраны. 1989. Т. 6. № 3. С. 262-266.

5. Балнокин Ю.В. Ионный гомеостаз у галотолерантных водорослей. Автореф.дисс. докт.биол. наук. М.: ИФР им.К.А.Тимирязева. 1995. С. 51.

6. Берридж М.Д. Молекулярные основы внутриклеточной коммуникации. // В мире науки. 1985, № 12. С.98-109.

7. Гордон JI.X. Дыхание и водносолевой обмен растительных тканей. // Наука. 1976. С. 119.

8. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Липоксигеназная сигнальная система. // Физиол. раст. 1999. Т.46, № 1. С.132-142.

9. Гриф В.Г., Александров Т.В., Валович Е.М. Действие низких температур на хроматин интерфазного ядра клеток корневой меристемы у Tritium. // Цитология. 1987. Т. 29. №. 3. С.295-302.

10. Ю.Жерелова О.М., Гршценко В.М. Регуляция потенциалзависимых кальциевых каналов плазмалеммы клеток харовой водоросли. // Внутриклеточная сигнализация. М.: Наука. 1988. С. 71-76.

11. И.Каримова Ф.Г. цАМФ-мессенджерная система клеток растений и ее роль в регуляции транспорта воды и Са2+: Автореф. . дис. д.б.н. С.-Пет.: ВНИИ растениеводства им.Вавилова. 1994. С. 39.

12. Каримова Ф.Г., Бунтукова Е.К., Клочкова Е.Е. Поглощение Са2+ клетками ратений. //Цитология. 1991. Т. 33. N. 11. С. 180-183.

13. З.Каримова Ф.Г., Бунтукова Е.К., Тарчевская О.И. "Са2+-парадокс" в растительных тканях. //Физиол. раст. 1989. Т. 36. N. 6. С. 1178-1183.

14. Каримова Ф.Г., Леонова С.А., Гордон Л.Х., Фильченкова В.И. Секреция цАМФ клетками растений. // Физиол. и Биохим. Культ. Раст. 1993. Т. 25. N. 4. С. 362-367.

15. Каримова Ф.Г., Тарчевский И.А., Мурсалимова Н.У., Гречкин А.Н. Влияние продукта липоксигеназного метаболизма- 12-гидроскидодеценовой кислоты на фосфорилирование белков растений. // Физиол. Раст. 1999. Т. 46. N. 1. С. 148-152.

16. Корчуганова Е.Е., Каримова Ф.Г., Бунтукова Е.К. Противоположно направленный трансмембранный перенос Са2+ и Na+ в клетках Dunaliella maritima. //Цитология. 1997. Т. 39. N. 6. С. 409-419.

17. Костюк П.Г. Кальций и клеточная возбудимость. М.: Наука. 1986. С. 256.

18. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны М.: Высшая школа. 1990. С. 8-17.

19. Медведев С.С. Физиологические основы полярности растений. Труды: СПб.: о-ва естествоиспытателей: СПб.: Кольна. 1996. С. 159.

20. Медведев С.С. Электрофизиология растений. Изд-во С.-П. Универститета. 1998.

21. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и роль в нем стресс-реакции, основные стадии процесса адаптации: физиология адаптивных процессов. М. Наука. 1986. С. 77-123.

22. Новикова Г.В. Гормональная регуляция фосфорилирования ядерных белков : Автореф. дис. . канд. биол.наук М.: ИФР. 1989. 42 С.

23. Палладина Т.А. Транспортные Н+-АТФазы несопрягающих мембран. // Успехи совр. биологии. 1983. Т. 96. N. 3. С. 394-408.

24. Петров-Спиридонов А.Е., Ионева Ж.З. Ионный обмен у растений в условиях хлоридного засоления. // Известия Тимирязев, с.-х. акад. 1987. 2. С. 86-95.

25. Полевой В.В. Физиология растений. //Москва «Высшая школа» 1989.

26. Романко Е.Г., Селиванкина С.Ю., Воскресенская Н.П. Действие фитогормонов in vitro на активность протеинкиназ, связанных с мембранами тилакоидов. //Докл. АН СССР. 1990. Т. 313. N. 4. С. 1021-1023.

27. Селиванкина С.Ю., Муромцева Д.Г., Новикова Г.В., Кулаева О.Н. Регуляция фузикокцином и РНК-полимеразой-I. //Докл. ВАСХНИЛ. 1989. N. 3. С. 2-4.

28. Таланова В.П., Титов А.Ф., Боева Н.П. Изменение уровня эндогенной абсцизовой кислоты в листьях растений под влиянием холодовой и тепловой закалки. // Физиология Растений. 1991. Т. 38. С. 991-997.

29. Тарчевская О.И. Влияние фитогормонов на содержание цАМФ и цАМФ-зависимое фосфорилирование белков в тканях растений: Автореф. дис. .канд. биол. наук Минск. Институт Экспериментальной Ботаники. 1989. С. 17.

30. Тарчевский И. А. Элиситор-индуцируемые сигнальные системы и их взаимодействие. // Физиол. Раст. 2000. Т. 47. С. 321-331.

31. Тихая Н.И., Селиванкина С.Ю., Новикова Г.В. Действие фитогормонов на протеинкиназную активность плазматических мембран корней клеток ячменя. // Физиол. Раст. 1989. Т. 35. N. 5. С. 1003-1011.

32. Феденко Е.П. Фоторегуляция ферментов обмена цАМФ у фототрофных организмов: Автореф. дис. канд. биол. наук. Институт Биохимии им. Баха. Москва. 1993.

33. Феденко Е.П., Иванова М.А., Доман Н.Г. Аденилатциклаза и фитохром. // Докл. АН СССР. 1983. Т. 269. N. 5. С. 1267-1268.

34. Федоров Н.А., Радуловацкий М.Г., Чехович Г.Е. Циклические нуклеотиды и их аналоги в медицине. // М. Медицина. 1990. С. 192.

35. Черницкий М.Ю., Паничкин JI.A., Купленский О.Ю. Роль Са2+ вформировании биоэлектрической реакции листьев огурца. // Физиол. Раст. 1993. Т. 40. N. 2. С. 246-249.

36. Яворская В.К. Физиологическая роль циклического 3', 5'-аденозинмонофосфа-та в растительных клетках: Автореф. дис. докт. биол. наук. Киев. 1990.С. 35.

37. Alexandre L., Lassalles J.P., Kado R.T. Opening of Ca2+channels in isolated red beet root vacuole membrane by inositol 1,4,5-trisphoshate. // Nature. V. 1990. N. 343. P. 567-570.

38. Allan A.C., Fricker M.D., Ward J.L., Beale M.H., Trewavas A.J. Two transduction pathways mediate rapid effects of abscisic acid in Commelina guard cells. //Plant Cell. 1994. V. 6. P. 1319-1328.

39. Anderson M.D., Prasad T.K., Martin B.A., Stewart C.D. Differential gene expression in chilling acclimated maize seedling and evidence for the involvement of ABA in chilling tolerance. //Plant Physiol. 1994. V. 105. P. 331-339.

40. Ashton A.R., Polya G.M. Adenosine 3'5'-cyclic monophosphate in higher plants. Isolation and characterization of 3'5'-cAMP from Kalanchoe and Agave. // Biochem. J. 1977. V. 165. N. 1. P. 27-32.

41. Askman P., Abromeit M., Sarnighausen E., Dorffling K. Formation of polypeptides related to frost tolerance in responce to cold hardering and abscisic acid treatment in winter wheat. // Physiol. Plantarum. 1990. V. 79. P. 105.

42. Assman S.M. Cyclic AMP as a second messenger in higher plants. // Plant Physiol. 1995. V. 108. P. 885-889.

43. Baker P.F., Blaustein M.P. Sodium dependent uptake of calcium by crab nerve. // Biochim. Biophis. Acta. 1968. V. 150. P. 167-170.

44. Baker P.F., Hodgkin A.L., Ridgway E.B. Depolarization and calcium entry in squid giant axons. //J.Physiol. (Gr.Brit). 1971. V. 218. P. 709-755.

45. Baroni M.D., Monti P., Alberghina L. Repression of growth-regulated G1 cyclin expression by cyclic AMP in budding yeast. //Nature. 1994. V. 371. P. 339-345.

46. Barry W.H., Smith T. W. Mechanism of transmembrane calcium movement in cultured chick embryo ventricular cells. // J. Physiol. (Lond). 1982. V. 325. P. 243-260.

47. Behl R., Harting W. Transport and compartmentation of abscisic acid in roots of Hordeum distichou unde osmotic stress. //1, Exp. Bot. 1984. V. 35. N. 159. P. 1433-1440.

48. Bental M., Degani H., Avron M. 23Na NMR studies of the intracellular sodium ion concentration in the halotolerant alga Dunaliella salina. // Plant Physiol. 1988. V. 87. P. 813-817.

49. Bolwell G.P. Cyclic AMP, the reguctant messenger in plants. // TIBS. 1995. 20. December. P. 492-493.

50. Brosnan J.M., Sanders D. Inositol triphosphate-mediated Ca2+ release in beet microsomes is inhibited by heparin. // FEBS Lett. 1990. V. 260. P. 70-72.

51. Caroni P., Carafoli E. The regulation of the Na+/Ca2+-exchange of heart sarcolemma. //Europe. J. Biochem. 1983. V. 132. P. 451-460.

52. Carvajal M., Cooke D.T., Clarkson D.T. Responses of wheat plants to nutrient deprivation may involve the regulation of water channel function. // Planta. 1996. V. 1999. P. 372-381.

53. Chapman K.S.R., Trewavas A., Van Loon L.C. Regulation of the phosphorylation of cromatin-associated proteins in Lemna and Hordenium. // Plant Physiol. 1975. V. 55. P. 293-296.

54. Chen H.H., Li P.H., Brennen M.L. Involvement of abscisic acid in potato cold acclimation. //Plant.Physiol. 1983. V. 71. P.362-365.

55. Clapham D.E. Calcium signaling. // Cell. 1995. V. 80. P. 259-268.

56. Clarkson D.T., Brownlee C., Ayling S.M. // J. Cell Sci. 1988. V. 91. P.71-80.

57. Cohen G.B., Ren R., Baltimore D. Modular binding domains in signal transduction proteins. //Cell. 1995. V. 80. P. 237-248.

58. Cohen P. Signal interaction at the level of proteinkinases, proteinphosphatases and their substrates. // Trends. Biochem. Sci. 1992. V. 12. P. 408-413.

59. Cosgrove D.J., Hendrich R. Stretch activated chloride, potassium, and calcium channels coexisting in plasma membranes of guard cells of Vicia faba L. // Planta.1986. P. 143-153.

60. Cramer G.R., LauchliA., Polito V.S. Displacement of Ca2+by Na+from the plasmalemma of root cells. A primary response to salt stress. // Plant. Physiol. 1985. V. 79. l.P. 207-211.

61. Creelman R.A., Tierney M.L., Mullet J.E. Jasmonic acid/methyl jasmonate accumulate in wounded soybean hypocotyls and modulate wound gene expression. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. V.89, № 11. P.4938-4941.

62. Daie J., Campell W.F. Responce of tomato plants to stessfull temperatures. // Plant.Physiol. 1981. V. 61. P. 26-29.

63. Dallaire S.M., Houde Y., Gagne H.S. et al. ABA and low temperature induced freezing tolerance via distinct regulation pathways in wheat. // Plant Cell Physiol. 1994. V. 35. P. 1-4.

64. De Silva D.L.R., Hetherington A.M., Mansfield T.A. Synergism between calcium ions and abscisic acid in preventing stomatal opening. // New Phytol. 1985. V. 100. P. 473-482.

65. DiPolo R., Beauge L. In squid axons ATP modeulates Na+/Ca2+-exchange by a Ca2+rdependent phosphorylation. // Biochim. Biophis. Acta: Biomembranes.1987. V. 897 (M 146). 3. P. 347-354.

66. Du Pont F.M., Bush D.S., Windle J.J., Jones R.L. Calcium and proton transport in membrane vesicules from barley roots. // Plant Physiol. 1990. V.94. P. 179-188.

67. Evans D.E., Briars S.A., Williams L.E. Active calcium transport by plant cell membranes. //J. Exp. Bot. 1991. V. 42. P. 285-303.

68. Fehr T.F., Dickinson E.S., Goldman S.J., Slakey L.L. Cyclic AMP efflux is regulated by occupancy of the adenosine receptor in pig aortic smooth muscle cells. //J. Biol. Chem. 1990. V. 265. N. 19. P. 10974-10980.

69. Felle H. Auxin causes oscillations of cytosolic free calcium and pH in Zea mays coleoptiles. //Planta. 1988. V. 174. P. 495-499.

70. Franco D.A. Cyclic AMP in photosintetic organisms: recent development. // Avd. Cyclic. Nucleotide Res. 1983. V. 15. P. 97-117.

71. Gilman A.G. A protein binding assay for adenosine -3', 5'-cyclic monophosphate. //Proc. Nat. Acad. Sci. 1970. V.67. P.305-312.

72. Gilman A.G. G-protein: transdusers of receptor generated signals. // Ann.Rev. Biochem. 1987. V. 56. P. 615-645.

73. Gilroy S. Signal transduction in barley aleurone protoplasts is calcium dependent and independent. // The Plant Cell. 1996. V. 8. P. 2193-2209.

74. Gilroy S., Read N.D., Trewavas A.J. Elevation of citoplasmic calcium by caged calcium or caged inositol trisphosphater initiates stomatal closure. // Nature. 1990. V. 346. P. 769-771.

75. Gilroy S., Jones R. Perception of gibberellin and abscisic acid at the external face of the plasma membrane barley (hordeum vulgare 1.) aleurone protoplasts. // Plant Physiol. 1994. V. 104. P. 1185-1192.

76. Gilroy S., Jones R.L. Gibberelic acid and abscisic acid coordinately regulate cytoploasmic calcium and secretory activity in barley aleurone protoplasts. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1992. V. 89. P. 3591-3595.

77. Greengard P., Rudolph S.A., Sturtevaut Y.M. Enthalpy of hydrolysis of the 3'bound of adenozine-3', 5' -monophosphate and guanosine-3',5'-monophosphate. //J. Biol. Chem. 1969. P. 18-25.

78. Harting W., Kaiser W.M., Burska C. Release of abscisic acid from leaf strips under osmotic stress. //Z. Pflansen. Phytol. 1983. V. 2. P. 131-138.

79. Heimovaara-Dijkstra S., Hiestek J.C., Wang M. Counteractive effects of ABA and GA3 on extracellular pH and malate in barley aleurone. // Plant Physiol. 1994. V. 106. P. 194-195.

80. Hepler P.K., Wayne R.O. Calcium and plant development. // Ann. Rev. Plant. Physiol. 1985. V. 36. Palo Alto, Calif. P. 397-439.

81. Hetherington A.M., Quatarano R.S. Mechanism of action of abscisic acid at the cellular level. //New Phytol. 1991. V. 119. P. 9-32.

82. Hocking T.J., Claplan J., Cattel K.J. Abscisic acid binding to subcellular fractions from leaves of vicia faba. //Planta. 1978. V. 138. N. 2. P. 303-307.

83. HolappaL.D., Walker-Simmons M.K. The wheat abscisic acid-responsive proteinkinase mRNA, PKABA1, is up-regulated by dehydration, cold, temperature, and osmotic stress. //Plant Physiol. 1995. V. 108. P. 1203-1210.

84. Hong S.W., Jon J.H., Kwak J.M., Nam H.G. Identification of a receptor-like proteinkinase gene rapidly induced by abscisic acid, dehydration, high salt, andcold treatments in Arabidopsis thaliana. // Plant Physiol. 1997. V. 113. P. 12031212.

85. Hunter T. Proteinkinases and phosphatases: The Yin and Yang of protein phosphorylation and signaling. // Cell. 1995. V. 80. P. 225-236.

86. Ingram J., Battels D. The molecular basis of dehydration tolerance in plants. // Annu. Rev. Plant.Physiol. Plant Mol. Biol. 1996. V. 47. P. 377-403.

87. Janowiak F., Dorffling K. Chilling of maize seedlings: changes in water status and abscisic acid content in ten types differing in chilling tolerance. // Plant Physiol. 1996. V. 147. P. 582-588.

88. Johannes E., Brosnan J.M., Sanders D. Parallel pathways for intracellular Ca2+ release from the vacuole of higher plants. // Plant J. 1992. V. 2. P. 97-102.

89. Johnson KD., Chrispeels M.J. Tonoplast-bound protein kinase phosphorylates tonoplast intrinsic protein. //Plant Physiol. 1992. V. 100. P. 1787-1795.

90. Jundt H., Porzig H., Reuter H., Stucki J.W. The effect of substances releasing intracellular calcium ions on sodium-dependent calcium efflux from guinea pig auricles. //J. Physiol. (Lond). 1975. V. 246. P. 229-253.

91. Junker S. Verbeek-Wyndaele R., Truelsen T. A., Characterization of cyclic nucleotide phosphodiesterase activity in sunflower callus. // Physiol. Plant. 1977. V. 39. P.45-50.

92. Kang E.S., Gates R.E., Chiang T.M., Kang A.H. Ectoprotein kinase activity of the isolated rat adipocytes. //Biochem. Biophys. Res. Comm. 1979. V. 86. P. 769774.

93. Karimova F.G., Kortchuganova E.E., Tarchevsky I.A., Iagoucheva M.R. The opposite by directed Ca2+ and Na+ transmembrane transport in alga cells. // Protoplasma. 2000. In press.

94. Kauss H. Some aspects of calcium-dependent regulation in plant metabolism. // Ann. Rev. Plant Physiol. 1987. V. 38. P. 47-72.

95. Kauss H., Jeblik V. Indused Ca2+ uptake and callose synthesis in suspension-cultured cells of catharanthus roseus are decreased by the protein phosphatase in hibitor okadaic acide. //Physiol. Plantarum. 1991. V. 81. N. 3. P. 309-312.

96. Kawabe K., Kodaki T., Katayama K. Identification of lipid Inhibitor of MammalianPhospholipaseD. //J. Biochem. 1998. V. 123. P. 870-875.

97. Kikkawa U., Minakuchi R., Takoi Y., Nishizuka Y. Calcium activated phospholipid dependent protein kinase (Protein kinase C) from rat brain. // Methods Enzymology. 1983. V. 99. P. 288-289.

98. Knetsch M.Z.W., Wang M., Snaaz-Jagalska B.E., Heimovaara-Dijkstra. Abscisic acid induces mitogen-activated protein kinase activation in Barley aleurone protoplasts. // The Plant Cell. 1996. V. 8. P. 1061-1067.

99. Knight C.D.,Sehgal A., Kamaljit A., Wallace J.C., Cove D.J., Coates D., Quatrano R.S., Bahadur S., Stockley P.G., Cuming A. Molecular responses toabscisic acid and stress are conserved between Moss and Cereals. I I Plant Cell. 1993. V. 7. P. 499-506.

100. La Rosa P.C., Handa A.K., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Abscisic acid accelerates adaptation of cultured tobacco cells to salt. // Plant Physiol. 1985. V. 79. P. 138-142.

101. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the nead of bacteriophag T4. //Nature. 1970. V. 227. N. 5259. P. 680-685.

102. Lang V., Heino P., Palva E.T. Low temperature accimilation and treatment with exogenous abscisic acid induse common polipeptides in Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. // Theor Appl. Genet. 1989. V. 77. P. 729-734.

103. Leckie C.P., Mc Ainsh M.R., Allen G.J., Sanders D., Hetherington A.M. Abscisic acid-induced stomatam closure mediated by cyclic ADP-ribose. // Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 1998. V. 95. P. 15837-15842.

104. Lee Y., Choi Y.B., Suh S., Lee J., Assmann S.M., Joe C.O., Kelleher J.F., Crain R.C. Abscisic acid-induced phosphoinositide turnover in guard cell protoplasts of Vicia Faba. //Plant Physiol. 1996. V. 110. P. 987-996.

105. Leung J., Bouvier-Durand M., Morris P.Ch., Guerrier D., Chefdor F., Giraudat J. Arabidopsis ABA response gene AJBI1: features of a calcium-modulated protein phosphatase. //Science. 1994. V. 264. P. 1448-1452.

106. Leung J., Merlot S., Giraudat J. The Arabidopsis abscisic acid insensitiver (ABI 2) and ABI 1 genes encode homologous protein phosphatases 2C involved in abscisic acid signal transduction. // Plant Cell. 1997. V. 9. in press.

107. Lowry C.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. // J. Biol. Chem. 1951. V. 193. N. 1. P. 265-275.

108. Maathnis F.J.M., Sanders D. Plant membrane transport. // Curr. Opin. Cell Biol. 1992. V. 4. P. 661-669.

109. Mac Robbie E.A.C. Calcium and ABA-induced stomatal closure. // Proc. R. Soc. London. 1992. Ser. B. V. 338. P. 5-18.

110. Mac Robbie E.A.C. Calcium influx at the plasmalemma of isolated guard cells of Commelina communis. Effects of abscisic acid. //Planta. 1989. V. 178. P. 231241.

111. MacKintosh S.G., Sitt C.M. Sucrose-phosphate sysnphase in dephosphorylated by protein phosphatases 2A in spinach leaves. Evidence from the effects of okadaic acid and microcyctin. // FEBS Lett. 1990. V. 270. P. 198-202.

112. Matoh T., Ohta D., Takahaski E. Effect of sodium application on growth of Amaranthus tricolor L. //Plant Cell Physiol. 1986. V. 27. N. 2. P. 187-192.

113. Melan M.A., Dong X., Endara M.E., Davis K.P., Ausubel F.M., Peterman T.K. An arabidopsis thaliana lopixygenase gene can be induced by pathogens, abscisic acid, and methyl jasmonate. //Plant Physiol. 1993.V. 101. P. 441-450.

114. Miller A.S., Vogg G., Sanders D. Cytosolic calcium homeostasis in fungi: roles of plasma membrane transport and intracellular sequestration of calcium. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. V.87. P. 9348-9352.

115. Minorsky P.V. An heuzistic hypotheses of chilling injuri in plants: a role for calcium as the primary physiological trundsduces of injuri. // Plant Cell Envirop. 1985. V. 8. N. 2. P. 75-94.

116. Munnik T., Irvine R.F., Musgrave A. Phospholipid signaling in plants. // Biochimica et Biophysica Actal389. 1998. P. 222-272.

117. Munnik T., Steven A.A., Vrige T., Musgrave A. G-protein activation stimulates phospholipase D signaling in plants. // The Plant Cell. 1995. V. 7. P. 2197-2210.

118. Neuhaus G., Bowler C., Kern R., Chua N.-H. Calcium/Calmodulin-dependent and -independent phytochrome signal transduction pathways. // Cell. 1993. V. 73. P. 937-952.

119. Owen J.H. Role of abscisic acid in Ca2+ second messenger system. // Physiol. Plant. 1988. V. 72. P.637-641.

120. Pantoja O., Gelly A., Blumwald E. Voltage dependent calcium channels in plant vacuoles. //Science. 1992. V. 255. P. 1567-1570.

121. Pei Z.-M., Kuchitsu K., Ward J.M., Schwarz M., Schroeder J.I. Differential abscisic acid regulation of guard cell slow anion channels in Arabidopsis wildtype and abil and abi2 mutants. // Plant Cell. 1997. V. 9. P. 409-423.

122. Pick V., Ben-Amotz A., Kami L., Seebergts C.J. Partial characterization of K+ and Ca2+ uptake systems in the halotolerant alga Dunaliella salina. // Plant Physiol. 1986. V. 81. P. 875-881.

123. Pierson E.S., Miller D.D., Callaham D.A., Van Aken J., Hackett G., Hepler P.K. Tip localised calcium entry fluctuates during pollen tube growth. // Dev. Biol. 1996. V. 174. P. 160-173.

124. Ping Z., Yabe I., Muto S. Identification of K+, CI" and Ca2+ channels in the vacuolar membrane of tobacco cell suspension cultures. // Protoplasma. 1992. V. 171. P. 7-18.

125. Quatrano R.S., Battels D., Ho T.-H.D., Pages M. Meeting report. New Insights into ABA-MediatedProcesses. //Plant Cell. 1997. april. P. 470-475.

126. Ralph R.K., Mc Combl P.J.A., Tenner G., Wojcic S.J. Evidence for the modification of proteine phosphorylation by citokinines. // Biochem. J. 1972. V. 130. P. 901-911.

127. Rasmussen H. Calcium as intracellular messenger in hormone action. Regulation phosphate and mineral. // Metabolism. N.-Y., London. 1982. P. 473491.

128. Rasmussen H., Barret P.Q. Calcium messenger system: an integrated view. // Physiol. Rev. 1984. V. 64. N 3. P. 938-984.

129. Reuter H., Seitg N. The dependence of calcium efflux from cardiac muscle on temperature and external ion composition. // J. Physiol. (Lond) 1968. V. 195. P. 451-470.

130. Ritche S., Gilroy S. Abscisic acid signal transduction in the barley aleurone is mediated by phospholipase D activity. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. V. 95. P. 2697-2702.

131. Schmidt C., Schelle I., Liao Y., Schroeder J.I. Strong regulation of slow anion chanels and abscisic acid signaling in guard cells by phosphorylation and dephosphorylationevents. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. V. 92. P. 95359539.

132. Segaloff D.L., Ascoli M. Internalisation of peptide hormobes and hormone receptors. //Hormones and their actions. Amsterdam, A.O.: Elsevier, 1988. Pt. 1. P. 133-149.

133. Sing N.K., La Rosa P.C., Handa A.K., Hasegawa P.M. Hormonal regulation of protein synthesis associated with salt tolerance in plant cells. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1987. V. 84. P. 739-743.

134. Spiteri A., Viratelle O.M., Raymond P., Rancillac M., Labouesse J., Pradet A. Artefactual origins of cyclic AMP in higher plant tissues. // Plant Physiol. 1989. Y. 91. P. 624-628.

135. Sutherland E.W., Rail T.W., Mennon T. Adenyl cyclase distribution, preparation and properties. //J. Biol.Chem. 1962. V. 247. P. 1220-1227.

136. Taussing R., Gilman A.G. Mammalian Membrane Bound Adenylyl Cyclases. // The J. BioLChem. 1995. V. 270. P. 1-4.

137. Tazawa M., Kishimoto U., Kikuyama M. Potassium, sodium and chloride in the protoplasm of characeae.//Plant Cell Physiol. 1974. V. 15. N. l.P. 103-110.

138. Trewavas A.J., Malho R. Signal Perception and Transduction: the origin of the phenotype. // The Plant Cell. 1997. V. 9. P. 1181-1195.

139. Ueda T. Na+-Ca2+ exchange activity in rabbit Cymphocyte plasma membranes. //Biochim. Biophys. Acta. 1983. V. 734. P. 342-346.

140. Van Breemen C., Hwang O., Siegel B. Excitation-contraction coupling in smooth muscle. Elsevier: North-Holland Biomed. Press. 1977. P. 243-252.

141. Volotovsky I.D., Sokolovsky S.G., Molchan O.V., Knight M.R. Second messengers mediate increases in cytosolic calcium in tobacco protoplasts. // Plant Physiol. 1988. V. 117. P. 1023-1030.

142. Wakabayashi S., GoshimaK. Kinetic studies on sodium-dependent calcium uptake by myocardial cells and neuroblastoma cells in culture. // Biochim. Biophys. Acta. 1981. V. 642. P. 158-172.

143. White A.A., Zenser T.V. Separation of cyclic 3'5'-nucleoside monophosphates from other nucleotides on aluminium oxide columns. // Anal. Biochem. 1971. V. 41. N. 41. P. 372-396.112

144. Williamson R.E., Ashley C.C. Free Ca2+ and cytoplasmic streaning in the alga Chara.//Nature. 1982. V. 296. N58. P. 647-651.

145. Wu Y., Kuzma J., Marechal E„ Graeff R., Lee H.G., Foster R., Chua N.-H. Abcisic Acid Signaling Trough Cyclic ADF-Ribose In Plants. // Science. 1997. V. 278. P. 2126-2130.