Усовершенствование промышленных технологий производства бруцеллезной вакцины и диагностикумов из штамма Brucella abortus 19 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Лузан, Надежда Степановна

• Лузан, Надежда Степановна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Лузан, Надежда Степановна

Введение

1. Обзор литературы

2. Собственные исследования

Материалы и методы Результаты исследований

2.1. Технология изготовления бруцеллезной вакцины и диагностикумов

2.2. Единая гибкая блочно-модульная линия промышленного производства вакцины живой сухой против бруцеллеза из штамма Brucella abortus 19 и диагностикумов

2.3. Осаждение бруцеллезной культуры

2.3.1. Кинетика образования осадка при флокуляции

2.3.2. Определение количества живых бруцелл по их дегидрогеназной активности

2.3.3. Исследование и подбор флокулянтов

2.3.4. Зависимость между степенью осветления и плотностью осадка

2.3.5. Обсуждение результатов

2.3.6. Выводы

2.4. Инактивакция бруцеллезной культуры

2.4.1. Кинетика инактивации

2.4.2. Исследование и подбор инактивантов 74 2.4.2.1. Инактивация культуры штамма Brucella abortus 19 р -пропиолактоном

2.4.2.2. Инактивация культуры штамма Brucella abortus димер этиленимином

2.4.2.3. Термоинактивация культуры штамма Brucella abortus 19 (контроль)

2.4.2.4. Выводы

3. Обсуждение результатов

4. Выводы

5. Практические предложения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Усовершенствование промышленных технологий производства бруцеллезной вакцины и диагностикумов из штамма Brucella abortus 19»

Бруцеллёз, как инфекционное хроническое заболевание, наносит значительный экономический ущерб животноводству и представляет серьезную угрозу здоровью людей.

Основу борьбы с бруцеллёзом животных составляет система ветери-нарно-санитарных мероприятий, заключающихся в предупреждении заноса инфекции в хозяйство, современной диагностике и выделении больных животных, наряду с общими мероприятиями по диагностике бруцеллёза с использованием антигенных диагностикумов. Решающее значение в предупреждении и ликвидации бруцеллёза имеет специфическая профилактика с использованием вакцин.

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ. Важнейшим условием успешного и надёжного ведения промышленного животноводства является благополучие животных по инфекционным заболеваниям, в частности бруцеллёзу. Cotton W.E., Buck J.M., Smith в 1934 году отобрали из популяции колоний штамма В.abortus 19, наиболее иммуногенную и стабильную культуру, которую впоследствии стали называть Brucella abortus В-19. Вакцине из этого штамма до настоящего времени во всём мире отдаётся предпочтение благодаря её стабильности, слабой вирулентности, высокой иммуногенно-сти и агглютиногенности.

Для диагностики бруцеллёза сельскохозяйственных животных биологическая промышленность России выпускает следующие препараты: антиген бруцеллёзный единый для РА, РСК и РДСК, антиген бруцеллёзный для кольцевой реакции с молоком и антиген бруцеллёзный для роз бенгал пробы (пластинчатая реакция агглютинации с роз бенгал антигеном или РБП).

С 1978 г. для серологической диагностики бруцеллёза всех видов сельскохозяйственных животных в нашей стране применяют единый бруцеллёзный антиген для РА, РСК и РДСК, приготовляемый в виде взвеси инактивированных нагреванием бруцелл в фенолизированном физиологическом растворе.

Для проверки благополучных по бруцеллёзу молочных стад и контроля молока с 1956 г. по методике ВИЭВ готовят бруцеллёзный антиген для кольцевой реакции с молоком, который представляет собой взвесь инактивированных нагреванием бруцелл, окрашенных гематоксилином в синий цвет.

Для постановки пластинчатой реакции агглютинации с сывороткой крови (роз бенгал проба) при диагностике бруцеллёза используется антиген бруцеллёзный цветной в виде взвеси в буферном растворе клеток Вг. abortus 19, инактивированных нагреванием и фенолом и окрашиваемых бенгальской розовой в малиново-розовый цвет. Чернышева М.И., Вашке-вич (1975), Иванов М.М. с соавт. (1976), Бельченко В.Б. и Сайдашева (1977) изучили активность роз бенгал пробы при диагностике бруцеллёза у сельскохозяйственных животных и подтвердили её высокую диагностическую способность.

Наряду со стадией культивирования Brucella abortus шт. 19, важными этапами технологии, влияющими на качество вакцины и диагностикумов, являются концентрирование биомассы при производстве вакцины и её инактивация при производстве диагностикумов. Метод осаждения биомассы с использованием натрийкарбоксиметилцеллюлозы (Na-КМЦ) является хотя и эффективным, но требует использования дорогого импортного препарата.

Использование для инактивации теплового воздействия в сочетании с фенолизированным физраствором снижает антигенную активность диагностикумов из-за частичной денатурации белков (температура) и представляет опасность для человека из-за влияния фенола на слизистые оболочки дыхательных путей, глаза и кожу (допустимое ПДК 5 мг/м3).

В связи с вышеизложенным актуальным является изучение и усовершенствование производственных стадий концентрирования биомассы при производстве вакцины против бруцеллёза из штамма 19 и её инактивации при производстве бруцеллёзных диагностикумов с использованием единой гибкой блочно-модульной линии промышленного производства вакцины и диагностикумов.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ. Цель работы - разработать методы осаждения бруцеллёзной биомассы при производстве вакцины из штамма Brucella abortus 19 с использованием современных материалов и методов инактивации бруцеллёзной биомассы при производстве диагностикумов с использованием современных экологически безопасных высокоэффективных инактивантов и провести их лабораторные и производственные испытания.

В соответствии с целью работы поставлены следующие задачи:

- разработать единую гибкую блочно-модульную линию промышленного производства вакцины и диагностикумов;

- выбрать и провести сравнительные испытания современных флокулянтов с Na-КМЦ в качестве контроля;

- отработать эффективный метод концентрирования биомассы шт. Brucella abortus 19;

- изготовить и испытать опытные серии вакцины против бруцеллёза из шт.19;

- выбрать и провести сравнительные испытания современных инактивантов;

- изучить выживаемость бруцеллёзной культуры в зависимости от вида инактиванта, дозы, времени инактивации, температуры и рН;

- отработать режимы инактивации биомассы при производстве бруцеллёзных диагностикумов;

- изготовить и испытать опытные серии бруцеллёзных диагности-кумов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Проведены сравнительные испытания современных нетоксичных и биосовместимых флокулянтов для концентрирования биомассы шт.Вгисе11а abortus 19.

Разработан эффективный метод концентрирования биомассы iirr.Brucella abortus 19 - метод осаждения с использованием в качестве фло-кулянта хитозана и его производных.

Изготовлены и испытаны опытные серии живой вакцины против бруцеллёза из шт. 19 с использованием в качестве флокулянта хитозана, которые сохранили все свои биологические свойства согласно ТУ на вакцину.

Выбраны и испытаны инактиванты p-пропиолактон и этиленимин для инактивации бруцеллёзных диагностикумов. Изучена выживаемость бруцеллёзной культуры в зависимости от вида инактиванта, дозы, времени инактивации, температуры и рН и показана высокая эффективность (3-пропиолактона при комнатной (+22°С) температуре и минимальной концентрации (0,1%).

Изготовлены опытные серии диагностикумов - единого бруцеллёзного антигена для РА, РСК и РСДК, бруцеллёзного антигена для кольцевой реакции с молоком и бруцеллёзного антигена для роз бенгал пробы и показана их более высокая антигенная активность по сравнению с тепловой и фенолизированной инактивацией.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ. Полученные результаты явились основой для разработки нормативной документации на промышленное производство, контроль и применение живой вакцины против бруцеллёза из шт. 19, бруцеллёзных диагностикумов и получения патента.

Разработаны и утверждены департаментом ветеринарии МСХ РФ:

- технические условия ТУ ОСТ 08064-19-41-95. «Вакцина против бруцеллёза сельскохозяйственных животных из шт. 19» от 29.06.1995г.

- технические условия ТУ 9384-017-00482915-01. «Антиген бруцеллёзный единый для РА, РСК и РСДК» от 5.02.2001г.;

- технические условия ТУ 9384-019-00482915-01 «Антиген бруцеллезный для кольцевой реакции (КР) с молоком» от 5.02.2001г.;

- технические условия ТУ 9384-018-00482915-01 «Антиген бруцеллёзный для роз бенгал пробы (РБП)» от 5.02.2001;.

- патент РФ № 208521 от 27.06.1997 на «Способ изготовления единого бруцеллёзного антигена для РА, РСК и РДСК».

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации были доложены :

- на Международной конференции, посвящённой 30-летию ПЗБ «Производство и контроль медицинских, ветеринарных препаратов, опыт применения и реализации их в странах СНГ», п. Вольгинский, 1999 г.;

- на V Международной конференции «Новые перспективы и исследования хитина и хитозана», Щёлково, 1999 г.;

- на Международной конференции молодых учёных «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щёлково, 2001 г.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертация изложена на 111 страницах машинописного текста, включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практические предложения и приложение. В списке литературы 235 источников, из них 89 иностранных. Работа иллюстрирована 12 таблицами, 2 ри-i

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Лузан, Надежда Степановна

4. ВЫВОДЫ

В результате проведенной работы по исследованию и усовершенствованию промышленных технологий производства вакцины живой сухой против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, единого бруцеллезного антигена для РА, РСК и РДСК, антигенов бруцеллезных РБП, КР:

1.Разработана единая гибкая блочно-модульная линия промышленного производства вакцины и диагностикумов из штамма Brucella abortus 19, позволившая оптимизировать технологический процесс в целом.

2.Изучена кинетика осаждения (концентрирования) бруцеллезной культуры при флокуляции, что позволило выбрать наиболее эффективные флокулянты и установить зависимость между скоростью осаждения и концентрацией флокулянта.

3.Предложен экспресс-метод определения жизнеспособных бруцелл по их дегидрогеназной активности, что позволило сократить количество экспериментов (до 2-х) и время проведения измерений.

4. Определена зависимость между степенью осветления и плотностью осадка при флокуляции, позволившая определять плотность осадка по степени осветления надосадочной жидкости.

5.Проведены сравнительные исследования семи флокулянтов при использовании в качестве контроля Na-КМЦ.

6.Показана возможность использования для осаждения бруцеллезной культуры из шт. 19 хитозана и его производных.

7.Рассмотрена кинетика химической инактивации бруцелл и показано, что она подчиняется классической экспоненциальной функции. Это позволило установить зависимость между концентрацией кти&анта, временем инактивации, температурой и рН.

8. Проведены сравнительные исследования химических инактивантов p-пропиолактона и димер этиленимина при термоинактивации в качестве контроля.

9. Показана высокая эффективность использования р-пропиолактона для инактивации культуры Brucella abortus шт.19 при использовании минимальных концентраций инактиванта (0,1; 0,2%) при комнатной

91 температуре (20-25° С) по сравнению с термоинактивацией, как с технической, так и биологической точек зрения.

5. Практические предложения

В результате проведенной работы разработаны и утверждены:

- технические условия - ТУ ОСТ 08064-19-41-95. «Вакцина против бруцеллёза сельскохозяйственных животных из шт. 19» от 29.06.1995г.

- технические условия - ТУ 9384-017-00482915-01 «Антиген бруцеллёзный единый для РА, РСК и РСДК» от 5.02.2001г.;

- технические условия - ТУ 9384-019-00482915-01 «Антиген бруцеллезный для кольцевой реакции (КР) с молоком» от 5.02.2001г.; технические условия - ТУ 9384-018-00482915-01 «Антиген бру целлёзный для роз бенгал пробы (РБП)» от 5.02.2001г.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Как видно из обзора литературы, бруцеллез является широко распространенным хроническим инфекционным заболеванием как животных, так и людей и наносит значительный ущерб.

Наряду с общими профилактическими мерами по выявлению заболевания с использованием диагностикумов, огромное значение в предупреждении и ликвидации бруцеллеза имеет специфическая профилактика, проводимая с использованием живых или инактивированных вакцин. До настоящего времени во всем мире предпочтение отдается вакцинам и диагностикумам из штамма Brucella abortus 19.

Важным этапом при приготовлении вакцины является концентрирование (осаждение) биомассы после глубинного культивирования в биореакторах. Наиболее перспективным и экономически целесообразным является метод флокуляции с выбором в зависимости от вида культуры флокулянта.

При приготовлении бруцеллезных диагностикумов существенное значение имеет выбор метода и средств инактивации бруцеллезной культуры. Наиболее перспективными при инактивации больших объемов биомассы являются химические методы инактивации, при подборе наименее канцерогенных инактивантов, с использованием их минимальных концентраций и инактивации при комнатной температуре (20-25° С).

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена в 1995-2000 г. на Федеральном Государственном унитарном предприятии «Щелковский биокомбинат» совместно с Всероссийским научно-исследовательским и технологическим институтом биологической промышленности. Российской академии сельскохозяйственных наук.

Материалы и методы.

Штамм. Вакцину против бруцеллеза сельскохозяйственных животных и бруцеллезные диагностикумы изготавливали из эталона культуры производственного штамма Brucella abortus 19, поставляемого Всероссийским государственным научно-исследовательским институтом контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) согласно техническим условиям и ОСТ 08064-19-41-95.

Экспериментальные животные. Агглютиногенность определяли на морских свинках массой 350-400 г.

Определение остаточной вирулентности проводили на морских свинках массой 350-400 г.

Контроль реактогенности проводили на телках 4-6 месячного возраста.

Безвредность и иммуногенность контролировали на морских свинках и белых мышах.

Методы контроля брупеллезных дигностикумов. Специфичность антигена бруцелезного единого проверяли в РА и РСК с использованием физиологического раствора и негативной сыворотки, которую в РА применяли в разведениях 1:25, 1:50, в РСК - 1:5, 1:10. Антиген в РА и РСК давал отрицательные реакции с физиологическим раствором и негативной сывороткой крупного рогатого скота. Активность антигена в РА определяли при его титровании со стандартным образцом сыворотки против бруцелла аборту с.

Определение специфичности и активности антигена бруцеллезного для кольцевой реакции (КР) с молоком. Антиген считали активным и специфичным, если в кольцевой реакции с образцами молока, содержащими бруцеллезные антитела, он давал реакции, аналогичные стандартному образцу препарата, а со всеми пробами молока без добавления сыворотки - отрицательные реакции. Антиген не давал видимого осадка как при положительных, так и отрицательных реакциях.

Определения активности и специфичности антигена бруцеллезного для роз бенгал пробы (РБП). Антиген считали активным, если в роз бенгал пробе он давал агглютинацию интенсивностью в два или один крест со стандартной сывороткой, содержащей 50 ME антител в 1 см3 (разведение 1:20), и не агглютинировался сывороткой в разведении 1:35 (28, 5МЕ). Специфичность антигена соответствовала условиям, когда он давал отрицательные реакции с физиологическим раствором и сыворотками крови здоровых животных.

Определение концентрации бруцелл. Общую концентрацию бруцелл определяли оптическим методом. Количество живых бруцелл - жизнеспособных клеток - определяли двумя методами: культуральным и биохимическим.

Культуральный метод основан на получении изолированных колоний с целью определения количества живых бруцелл, содержащихся в культураль-ной жидкости. Количество живых бруцелл определяли путем посева культу-ральной жидкости, разведенной стерильным физраствором в соотношении 1:10. Затем последовательно десятикратно разводили до 10"8 - 10"9. Из 2-х последних разведений проводили высевы по 0,1 мл в чашки Петри с печеночно-мартеновским или кровяным агаром. Посевы инкубировали при 37°С 4-5 суток. Подсчитывали количество колоний в чашках Петри для каждого разведения, полученные числа суммировали и делили на количество чашек (выводили среднее число колоний каждого разведения, содержащихся в 0,1 мл). К полученному числу добавляли количество нулей, равнозначное показателю степени взятого разведения. Полученное среднее составляло количество живых бруцелл в 1 мл.

Биохимический метод основан на различной дегидрогеназной активности живых бруцелл в зависимости от их концентрации. Эту активность определяли, учитывая время обесцвечивания живыми бруцеллами метиленового синего. Для определения количества живых бруцелл в культуральной жидкости, последнюю разводили стерильным физраствором в соотношении 1:10 и выдерживали 30 минут при 4°. Пробирки с приготовленными разведениями бруцеллезной культуры 1:10, 1:15, 1:20 помещали на 30-40 минут в водяную баню при 37-38°С. Одновременно с испытуемой культурой в пробирках в водяную баню помещали в аналогичных пробирках раствор 1:5000 метиленового синего в дистиллированной воде, вазелиновое масло и две пипетки, градуированные на 1 и 2 см3. После прогрева пробирок с тремя разведениями культуры в каждую из них вносили по 0,1 см3 раствора метиленового синего и 0,5 см3 вазелинового масла. Содержимое пробирок одновременно энергично встряхивали до равномерного распределения краски в суспензии и тотчас помещали в водяную баню. С этого момента вели отсчет времени по секундомеру, фиксируя полное обесцвечивание метиленового синего, содержащегося в каждом из трех разведений. Чем меньше время обесцвечивания, тем больше концентрация живых бруцелл. Чем больше время редукции метиленового синего, тем меньше количество живых бруцелл в суспензии.

Методы концентрирования бруцеллезной культуры. За основной метод концентрирования бруцеллезной культуры приняли метод флокуляции с использованием следующих флокулирующих добавок:

- проэстол;

- полиоксиэтилен;

- амкэ-ииевая соль ВПК - 402;

- хитозан;

- производные хитозана;

- бентонит Na;

- желатина;

- Na- карбоксиметилцеллюлоза (Na - КМЦ) - контроль.

Методы инактивации бруцеллезной культуры при приготовлении диагностикумов. В качестве метода инактивации культуры шт.ВшсеИа abortus 19 нами был принят химический метод инактивации и были испытаны следующие инактиванты:

- (5-пропиолактон;

- димер этиленимина; а в качестве контроля - тепловой метод.

Питательная среда. Для производственного культивирования использовали жидкую питательную среду на основе перевара Хоттингера - 25%, глицерина - 1%, глюкозы - 1%, натрия хлористого - 0,5%, дрожжевого экстракта сухого - 0,5%, нативной сыворотки КРС - 1%. При производстве бруцеллезных антигенов: единого, КР с молоком и РБП, нативную сыворотку КРС в состав питательной среды не вводили.

Стерилизация питательных сред. Для стерилизации питательной среды был применен метод фильтрующей (холодной) стерилизации с использованием стерилизующих пластин СФ и ЕКС.

Культивирование, концентрирование, ресуспеизирование и инактивация. Культивирование штаммов бактерий осуществляли глубинным периодическим методом в биореакторах.

Концентрирование и очистку бактериальной суспензии при производстве бруцеллезных антигенов проводили методом ультрафильтрации на модифицированных установках УПВ-6 и центрифуге ОТР-102К-01.

Ресуспендирование бактериальной суспензии проводили в стерильной деминерализованной воде или 0,5 -1% фенолизированном физрастворе.

Инактивацию бактериальной массы осуществляли в биореакторах.

Среда высушивания. При изготовлении живых сухих вакцин из штамма Brucella abortus 19 использовали сахарозо-желатиновую среду высушивания: желатин - 5-6%, сахароза - 40%.

Оборудование. Для производства бруцеллезных вакцин и антигенов была предложена единая гибкая блочно-модульная технологическая линия, в которую входило следующее технологическое оборудование и приборы:

1) рамный фильтр «РФ-39» с пластинами СФ или ЕКС;

2) биореакторы рабочим объемом 200, 300 и 500 литров, фирмы «Elek-trolux», Швеция;

3) биореакторы с рабочим объемом 100 и 200 литров;

4) центрифуга ОТР-102К-01 с максимальным количеством оборотов -15 тыс/мин, г.Сумы, Украина;

5) ультрафильтрационная установка УПВ-6 (модифицированная);

6) автоклавы ГПС-750 иГПСД;

7) фотоэлектрокалориметр ФЭК-56;

8) микроскопы МБИ-1, Микромед-1 (JIOMO);

9) ионометр универсальный ЭВ-74;

10) линия расфасовки «Штрунк», фирмы БОШ, Германия;

11) сублимационная установка: морозильная камера НС-700/50, сублиматор ТГ-50.

Обработка результатов исследований. Обработку результатов исследования проводили современными методами математической статистики; корреляционным и регрессионным анализом, планированием экспериментов по методу латинских квадратов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Лузан, Надежда Степановна, 2001 год

1. Абдумаликов А.Х., Еременко В.В. Методы разрушения микробных клеток. // Прикладная биохимия и микробиология, 1976, т.З, № 3, -с.347-351.

2. Авторское свидетельство СССР № 203897,1967.

3. Авторское свидетельство СССР № 199391,1966

4. Аиба Ш, Хемфри А, Миллис Н. Биохимическая технология и аппаратура. М.: Пищевая промышленность, 1975. 287 с.

5. Аксельруд Г.А., Лысянский В.М. Экстрагирование. Система твердое тело жидкость. - Л., 1974. -180 с.

6. Альбертсон П. О. Разделение клеточных частиц и макромолекул. -М.:Мир, 1974.-221 с.

7. Басканьян И.А. Культивирование микроорганизмов с заданными свойствами. М.: Медицина, 1992 190 с.

8. Басканьян И.А. Оптимизация культивирования микроорганизмов в иммунобиологии // Журн. Микробиология, 1989, № 5, с. 28-37.

9. Баран А.А., Платонов Б.Э. // Успехи химии, 1981, т.50, с. 137-191.

10. Баран А.А. Полимеросодержащие дисперсные системы. Киев: Нау-кова думка, 1986, 204 с.

11. Баран А.А., Тесленко А.Я. Флокулянты в биотехнологии Л., Химия, 1990,142 е.

12. Барков A.M., Евтеева Е.В., Липницкий А.В Выделение и антигенная характеристика компонентов культурального фильтрата Bacillus anthracis // Биотехнология, •№ 6, 2000, с. 27-33.

13. Бейли Дж., Д.Оллис. Основы биохимической инженерии, т.1//, М.: мир, 1989, с. 692 .

14. Бейли Дж., Оллис Д. Основы биохимической инженерии., т.2. ML: Мир, 1989, 590 с.

15. Белозеров Е.С. Бруцеллёз М.: Медицина, 1985, 184 е.

16. Биотехнология клеток животных // Под редакцией Спиера Р.Е. и Гриффитса Дж.Б. М.: ВО Агропромиздат, 1989, т. 2, 520 с.

17. Брейд Д, Уаитк., Кинетика и термодинамика биохимических процес-сов.М.: 4л, 1959, 250 с.

18. Брок Г.Д. Мембранная фильтрация М., Мир, 1987, 464 е.

19. Бруцеллёз // под редакцией П.А. Вершиловой М.: Медицина, 1972, 439 с.

20. Бруцеллёз // под редакцией П.А. Вершиловой М.: Медицина, 1968, 240 е.

21. Будовский Э.И. В кн.: Итоги науки и техники. Серия "Микробиология". М., 1974, т. 3, с. 5-72.

22. Бушуева Н.Б. Блехерман Б.Е., Галибина Н.В., Поверенный A.M. Влияние режима инактивации на морфологию и ультраструктуру микробных клеток. // Экспресс-информация "Передовой научнопроизводственный опыт в биологической промышленности", М: 1985, с. 1-3.

23. Варфоломеев С.Д., Калюжный С.В. Биотехнология. Кинетические основы микробиологических процессов. М.: Высшая школа, 1990, с.296.

24. Васильева Т.Г. В кн.: Прикладная иммунология. J1., 1971,с. 54-62.

25. Васильева Т.Г., Шапиро Н.И., Сазонец Г.И. Ж. Микробиология, 1975, №4, с. 29-34.

26. Вашков В. И. Средства и методы стерилизации, применяемые в медицине. «Медицина» М, 1973, с. 175-203.

27. Вершилова П.А., Чернышёва М.И., Князева Э.Н. Патогенез и иммунология бруцеллёза М.: Медицина, 1974, 272 е.

28. Ветеринарное законодательство / Под общ. ред. Третьякова А.Д. -М., Колос, 1972, т. 1.

29. Ветеринарные препараты. Справочник / Сост.: Ю.Ф. Борисович, JI.B. Кириллов; под ред. Д.Ф Осидзе М.: Колос. 1981, - 448 е.

30. Виестур У.Е., Шмите И.А., Жилевич А.В. Биотехнология. Биотехнологические агенты, технология, аппаратура. Рига.:3инатне, 1987,283 с.

31. Владимиров Ю.А., Арнаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., 1972.

32. Вольф J1.A., Меос А.И. Волокна специального назначения. М.: Химия, 1971.-223 с.

33. Гаспаров B.C. Выделение рекомбинантного человеческого лейкоцитарного интерферона L-A методом фильтрации в тангенциальном потоке // Биотехнология, № 3, 1993. с. 34-37.

34. Гейл Э. и др. Молекулярные основы действия антибиотиков. М.,1975.

35. Головчаиская О.В., КуницинаЗ.Б., Сосунов А.А., Спирина О.Ю., Си-ницин А.В. Выделение биомассы метанокисляющих бактерий кати-онными флокулянтами // Биотехнология, № 1 1990, ж с. 49 - 51.

36. Григорьева Г.И., Сочнев В.В., Бацанов Н.П., Филиппов Н.В. Н. Новгород: Из-во НГСХА, 1998, 245 с.

37. Даванков А.Б., Зубакова Л.Б. // Высокомолекулярные соединения, т.2, № 6, 1960. с.884-889.

38. Даванков А.Б., Лауфер В.М. // ЖПХ, 1956, т.29, с. 1029.

39. Дальвадянц В.Г., Лямкин Г.И., Таран И.Ф., Ляпустина Л.В., Соколова И. А., Панченко В.Н. Штамм бактерий Brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в R-форме. Пат. 459808 Россия.

40. Дерягин Б.В. Теория устойчивости коллоидов и тонких плёнок М.: Наука, 1986,206 с.

41. Дсрягин Б.В., Чураев Н.В., Муллер В.М. Поверхностные силы М.: Наука, !985, 400 е.

42. Дерягин Б. В. // Успехи химии, 1979, т.48. № 4, с. 675-721.

43. Джупина С.И. Рациональная эпизоотологическая классификация инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. // Вестник Академии сельскохозяйственных наук, № 4,2000, с. 21-24

44. Досанов К.Ш. Докл. ВАСХНИЛ, 1979, № 3, с. 42-45.

45. Дружинина Г.В., Конкин А.Ю. // Химические волокна, № 6, 1968. -с.46-48.

46. Дытнерский Ю.И. Баромембранные процессы. М.: Химия, 1986. -271 с.

47. Егоров Н.С., Олескин А.В., Самуилов В.Д. Биотехнология ,т. 1. Проблемы и перспективы. М.: Высшая школа, 1987, 159 с.

48. Жужиков В.А. Фильтрование. Теория и практика разделения суспензий. М.: Химия, 1980, 400 с.

49. Жукова Н.Н. Научные труды Моск. НИИ вакцин и сывороток, 1977, вып. 26, с. 100-103.

50. Журнал ВХО им. Менделеева. // М.: 1987, т.32, № 6, с.27-30.

51. Зверев М П. и др. // Международный симпозиум по химическим волокнам, т.4. Калинин, 1974. - с.118-121.

52. Иванов ММ, Коломакин Г.А. К вопросу о миграции бруцелл // Труды ГИКИ, 1959, т. VIII, с. 46 50.

53. Информационный лист ОКБ тонкого биологического машиностроения, г. Кириши, Ленинградской области, 1988.

54. Ионитные мембраны. Гранулы. Порошки. // Каталог. М.: НИИТЭ-ХИМ, НИИПМ, 1977.-31с.

55. Кестинг Р. Е. Синтетические полимерные мембраны. Структурный аспект. М: Химия, 1998, 336 с.

56. Колунянц К.А., Голчер ЛИ., Балашов В.Е. Оборудование микробиологических производств -М., Агропромиздат, 1987, 398 е.

57. Кропт Г.В. Наука о коллоидах М.: И.Л., 1955, т. 1, 538 с.

58. Крылов Н.А., Красноштанова А.А., Манаков М.Н. Кинетика экстракции белковых веществ из клеток дрожжей и бактерий протосубтили-ном. // Биотехнология, 1998, № 6, с.75-81.

59. Кузьменко И.М. Применение бета-пропилактона для стерилизации костных трансплантатов, М.: Медицина, 1968, 120 е.

60. Куликовский А. В. Труды ВНИИ ветеринарной санитарии, 1978, вып.61, с.105-155.

61. Липатов В.Н., Новиков О.П. Саморазгружающиеся сепараторы. М.: Машиностроение, 1975. - 247 с.

62. Лихачева А.А., Лукьянов А.А., Зенова Г.М., Тамбиев А.Х. Влияние СВЧ-излучения на физиологические характеристики культур акти-номицетов и бактерий // Биотехнология, 2000, № 5, с. 31-35

63. Лукьяненко В.М., Таранец А.В. Промышленные центрифуги. М.: Химия, 1974. - 376 с.

64. Мазрухо Б.Л., Поляков И.И. Ж. «Микробиология» 1976, № 1, с. 2630.

65. Матвеев В.Е., Вадимов В.М. Воробьев А.А. Научные основы получения чистых культур микроорганизмов в технологии вакцин. М. Медицина, 1980, 256 с.

66. Медведева Н.Г., Сухаревич М.Э., Гриднева Ю.А. Механизм регуля-торного действия формальдегида на микроорганизмы // Биотехнология, 1999, № 2, с. 53-58

67. Мельник Н.В., Скичко Н.Д., Зенов Н.И., Ерохин В.И., Чукаева Е.Н., Спицина Г.А., Орлов Е.А. Применение модуля с керамическими фильтрующими элементами для концентрирования баксуспензии. //

68. Тезисы докладов V Всероссийской конференции «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов». Щелково-1996, с. 201.

69. Месробяну Л. Пэунеску Э. Физиология бактерий. Бухарест, 1963.

70. Месробяну JI., Пэунеску Э. В кн.: Иммунобиология. Иммунохимия. Иммунопатология. Бухарест, 1977, с. 65-100.

71. Мецлер Д. Биохимия 1, 1980, с. 408

72. Михайлов JI.M., Титенко A.M. Получение и характеристики моно-клональных антител к антигенам Brucella abortus 19 ВА // Биотехнология, № 1, 2001, с. 38 43.

73. Мулер В.Н. Теория агрегативных изменений и устойчивости гидрофобных золей. Автореферат докторской диссертации, Л., Изд-воЛГУ, 1983.

74. Мусил Я., Новакова О., Куцн К. Современная биохимия в схемах. -М : Мир, 1981, с. 216.

75. Научные труды Казанского ветеринарного института // Под редакцией Хазикова Н.З. Казань, 1980, 162 с.

76. Начинкин О.И. Полимерные микрофильтры М.: Химия, 1985, 216 с.

77. Никулин А.Н., Бакулов И.А., Селяиииов Ю.О. Создание ассоциированных вакцин против инфекционных болезней овец // Вестник академии сельскохозяйственных наук № 4, 2001 с. 21-24.

78. Орлов Е.С. Новый этап в мероприятиях по борьбе с бруцеллёзом животных И Ветеринария, 1968, № 1, с. 38.

79. Патент ФРГ № 250436 от 14.10.1987 Способ концентрирования микроорганизмов.

80. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978, с. 332

81. Под редакцией Баева А.А. Биотехнология М.: Наука, 1984, с.310.

82. Позмогова И.Н. Культивирование микроорганизмов в переменных условиях. М.: Наука, 1983 - 102 с.

83. Позмогова И.Н. В кн.Современные представления о термофилии микроорганизмов. М.: Наука, 1973 214 с.

84. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология (с вирусологией и иммунологией), 4-изд.-М.: Медицина, 1980, 512 с.

85. Рогачев В.И. Исследования по технологии консервирования пищевых продуктов. Доклад по опубликованным работам, представленным на соискание ученой степени доктора техн. наук. М.:, 1968, с.71.

86. Роговин З.А. Химия целлюлозы М.: Химия, 1972, 520 с.

87. Рубан Е.А., Самуйленко А.Я. Использование ультразвука для получения биологически активных веществ. // Тезисы международной конференции «Ультразвуковые технологические процессы-98». М.:1998, с. 12-14.

88. Рубан Е.А., Самуйленко А.Я. Использование ультразвука для получения биологически активных веществ. // Тезисы конференции «Ультразвуковые технологические процессы 98. М.:, 1998, с. 4.

89. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А. Основы биотехнологии производства биологических препаратов (Теоретические основы, оборудование, технологические линии). М.: Изд-во РАСХН,2000, т.1, 376 с.

90. Самуйленко А.Я. Научное обеспечение высокоэффективных производств ветеринарных биологических препаратов. // Ветеринария, № 8, 1996, с. 26-29.

91. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А. Основы биотехнологии препаратов //т.2, М.: Из-во РАСХН, 2000, с. 282 .

92. Скворцова Е.К. Труды ЦНИДИ, 1965, т. 17, с.7.

93. Скичко Н.Д., Зенов Н.И., Мельник Н.В. и др. Биологическая активность и эффективность вакцины против бруцеллёза из штамма 19 //Ветеринария, № 10, 1989, с. 26 27.

94. Соколов В.И. Современные промышленные центрифуги. М.: Машиностроение, 1967. - 523 с.

95. Соколов В.И. Центрифугирование. М.: Химия, 1976. - 407 с.

96. Стейнер Р., Эдельберг Э., Ингрем Дж. Мир микробов, т. 1, М.: Мир, 1979, с.320.

97. Стейнер Р., Эдельберг Э., Ингрем Дж. Мир микробов, т.2, М.: Мир, с.334.

98. Стейнер Р., Эдельберг Э., Ингрем Дж. Мир микробов, т.З,М.: Мир, с.486.

99. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов. -М.: Высшая школа, 1978, 190с.

100. Тагер А.А. Физикохимия полимеров. -М.: Химия, 1978, 528 с.

101. Тамбиев А.Х. Влияние СВЧ-излучения на физиологические характе ристики культур актиномицетов и бактерий. // Биотехнология,2000, № 5, с.31-35.

102. Тесленко А.Я., Попов В.Х. Хитин и его производные в биотехнологии М.: Химия, 1982, 40 с.

103. Тесленко А.Я., Гирфанова Т.Ф., Медведев Ю.В. Концентрация суспензий микроорганизмов с помощью флокулянтов. Обзор.-ВНИИсэнти, М., 1984, 48 е.

104. Трилеико И.А. Бруцеллёз сельскохозяйственных животных. Л., Ко лос, 1976, 250 с.

105. Уотсон Дж. Молекулярная биология гена-М.: Мир, 1978, с.720.

106. Уонг Д., Косней Ч., Демаин А., Даннел П., Хемфри А., Лилли М. Ферментация и технология ферментов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983, с. 336.

107. Файнерман И.А., Минакер В.Е. Оборудование для разделения жидких неоднородных систем и очистки жидких смесей. // Труды НИИхиммаш, 70, М., 1975.-с. 202-210.

108. Фильтровальное оборудование в США. // Обзорная информация ЦИН-ТИхимпефгемаш, М.: 1991. 56 с.

109. Фильтры для жидкостей микробиологической промышленности. // Обзорная информация, ВНИИсэнти, М.:, 1985. 55 с.

110. Фихман В.Д., Аш Н.А., Воробьев Е.А., Пакшвер А.В. // Химические волокна- 1966, №1, с. 11-14

111. Фролов Ю.Г. Курс коллоидной химии. -М.: Химия, 1982. 315 с.

112. Фунтиков Б.А., Цыпленкова Л.Е., Сергеев С.М. Чувствительность различных фаз онтогенеза Aspergillus Flavus Link к малым дозам гамма-излучения. // Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Онтогенез микроорганизмов. Пущино, 1978, с. 121-123.

113. Хусаинова Г.И. Определение высокоспецифичных антигенных фракций бруцелл методом иммуноблоттинга // Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвящённой 30-летию института

114. Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». Щёлково- 2000, с. 250 251.

115. Черкасов А.Н., Коркош С.С., Меркулов Г.А., Полоцкий А.Е., Потокин И.А. Основные закономерности безосадочно-центробежного фильтрования // Биотехнология, № 1,1990, с.43-45.

116. Чернышева М.И., Орлов Е.С. //Труды ВИЭВ, 1952, т. 19, в. 1

117. Шапиро Н.И., ДудкинаМ.И. -//Ж. Микробиология, 1976, с.34-38.

118. Шапиро Н.И., Васильева Т.Г., Москвичева И.В. и др. В кн.: Прикладная иммунология. JI.,1971,c.32-41.

119. Шсвелуха B.C. Проблемы, приоритеты и масштабы сельскохозяйственной биотехнологии в XXI веке. // Вестник российской академии сельскохозяйственных наук, № 4, 2000, с.27-31.

120. Шумилов К.В., Альбертян М.П., Клочков А.А., Ромахов В.А. Вакцины против бруцеллёза крупного рогатого скота // Ветеринария, 1984, № 12, с. 26-28.

121. Юсковец М.К. Бруцеллёз сельскохозяйственных животных М., Сель-хозгиз, 1960.

122. Якубов М.С. Основы создания гибких автоматизированных систем многостадийных процессов. Ташкент.: «Фон», 1991, 250 с.

123. Ярышев Н.А. Теоретические основы измерения нестационарных температур. -Л. Энергия, 1967- 229 с.

124. Aiba S., Nagata М. Separation of cell from Culture Media // Adv. Biochem. Eng, v. 1, № 3, 1971, p. 223-231.

125. Aiba S, Okabe M.A. A complementary approoch to Scale up Sumulation and Optimization microbial Processes // In book advancesin Biochemical Engineering. Berlin, N.Y. Springer Verlag, 1977, v.6, p. 111-130.

126. Aiba S., Nagatini M. Separation of cells from Culture Media. // Adv. Bio-chem. Eng., 1, 3, 1971.

127. Alton G.G. Standartization of agglutinating antigens for the diagnosis of Brucellosis // Res. vet. Sci., 1971, 12, p. 330.

128. AMF/Cuno Division Bulletin, 1996

129. Atkinson В., Mavitina F. Biochemical, Engineering and Biotechnology Handbook. // Macmillan Publishers Ltd., Surrey, England, 1983. p. 127.

130. Atkinson В., Daoung I.S. //Adv. Biochem. Ing, 1976, v.4, p. 41-124.

131. Atkinson В., Racham F.U. // Biotechnol and Bioeng, 1979, v.21, p. 211251.

132. Atkinson В., Mavitina F. Biochemical Engineering and Biotechnology Handbook. // Mcmillan Publishers Ltd, Surrey, England, 1983, p. 127.

133. Ball C.O., Olsun F.C.W. Sterilization in food technology // MC Graw-Hill, N.Y. 1957, 202 p.

134. Berlin D.L., Herson D.S, Hicks D.T, Hoove or D.G. //Appl. and Environ Microbiol. 65, № 6, 1999, p. 2776-2780.

135. Betty A., Flatten, Richard D. Brouder Brucella abortus. Soluble antigens of virulent and attenuated biotypes of Brucella abortus // Infection and immunity, 1978, 22, 3, p. 956-962.

136. Better P. Recovery Processer: Past, Present, Future, 184th. // Amer. Chem. Soc. Mtd., September, 1982. p. 211.

137. Bowden C.P. // The World Biotechnological Report, Washington, 1984, v. 2, p. 139- 173.

138. Catasimpolas N. Methods in cell separation/ New York, London. Plenum Press, 1980, p. 203.

139. Cherkin A. Immunochemistry, 1975, v. 12, p. 625-627.

140. Cohen S.M.A., Fleer G.J. // J.Colloid and Interf.Sci, 1982, v.90, № 2, p.321-334.

141. Commagar H., Judis J. J.Pharm, 1965, v.54, p. 1436-1439.

142. Denyer S.P., Hugo W.B. J.Pharm. Pharmacol., 1977, v.29, p. 66 P.

143. Derbyshev V.V., Klykov S.P., Glukhov N.N., Sacherbakov G.J. The Devel-opmeyt of a Population under the Limitation by the Energy Supply // Биотехнология, № 2, 2001, с. 89-96.

144. Dunnill P.J., Currie A., Lilly M.D. Continuous enzyme processing. The isolation of prolyl-tRNA synthetase from Phaseolus aureus. //Biotechnol. Bioeng. 12, 1970.-p. 63.

145. Edwards V. Recovery and Purification of Biologocals. //Adv. Appi. Microbiol., 11, 1969.-p. 159.

146. Eggest G, et. al. //J. Gen.Microbiol, 1983, v. 129, № 12, p. 3611-3617.

147. Endo Т., Tacahashi H. // Agrical. Biol. Chem., 1981, v. 45, № 2, p.379- 383.

148. Ericsson M., Ebbinghaus Z. et. al. // J. Chem. Technol. Biotechnol, 1981, v. 31, № 1,p. 33 -43.

149. Ericsson Z.В., Hardin // Flocculation in Biotechnology and Separation Systems / Ed. Y. A. Atta, N.Y., Elsevier Sci. Publ., 1987, p. 441 455.

150. Esser K., Kues V. // Proc. Biochem, 1983, v. 18, № 16, p. 21-23

151. Foster P.R., Dunnill P., Lilly M.D. The presipitation of enzymes from cell extracts of Saccharomyces cerevisial by polyethylene glycol. // Biochim. Bio-phys. Acta, 317, 1973.-p. 505.

152. Foster P.R., Dunnill P., Lilly M.D. // Biochem. Bioeng., 13,1971. p 7-13.

153. Foster P.R., Dunnill P., Lilly M.D. The kinetic of protein salting-out: precipitation of yeast enzymes by ammonium sulphate. // Biotechnol. Bioeng., 18, 1976.-p. 545.

154. Franz G. // Adv. Polym. Sci., 1986, v. 76, p. 3 36.

155. Fraenkel-Conrat H. In: Amino Acids and Proteins,. Ed.D.M.Greenberg. Springfield, 1951, p.532-585.

156. French D., Edsall C. In: Advinses in Protein Chemistry. New York, 1945, v.2, p. 278-335.

157. Gaden E.Z., Humphrey A.E. Fibrous filtere for air sterilization, design procedure // lnd.Eng.Chem, 1956, v.48, p. 2172.

158. Gabler R., Ryan M., Practical Aspects of Tangential Flow Filtation in Purification of Fermentation Products //Amer. Chem. Soc. Symposium. Ser, 1985, v.51,p. 1-10.

159. Gasner L.L. Wang D.I. Microbial cell recovery enhancement through floculation. // Biotechn.Bioeng., 1970, № 12, p. 873-892.

160. Gehle R.D. //Appl.Mirabial.a.Biotechnol, 1984, v.20,p,133-138.

161. Gerke J. R.,Nelson J. S. In vest. Opthal. Visual Sci.,1977, v. 16, p.76-80.

162. Gibbons R.J., Fitzgerald R.J. // J. Bacteriol, 1969, v. 98, « 2, p. 551 -558.

163. Gorman S.P.,Scott E.M. Microbios, 1977, v. 19, p. 205-212.

164. Haller W., Yost F. et.al. // Colloid and Polymes Sci, 1983, v.261, № 2, p. 176-182.

165. Hampson J.W., Ashby R.D // J.Amer. Oil Chem.Soc, 76, № 1, 1999, p.1371-1374.

166. Heggins J.J., Lewis D.J., Aaly W.H., Mosqueira F.G., Dunnill P., Lilly M.D. An investigation of the unit operations involved in the continuous flow isolation of b-galactosidase from E. coli. // Biotechnol. Bioeng., 20,1978, -p. 159.

167. Helmcke J.G. // Kolloid Z, 135, 1954. p. 29.

168. Hopwood D. Histochem. J., 1975, v.7, p. 267-276.

169. Horowiz., Williams V., Margolis Nunno H., Chin S.N.:, Prosess for sterilization of biological compositions usig irradiation and guenchers of type .//Photodynamic reactions: Пат.США 598163.

170. Horn M.P. Polymeric Amines and Ammonium Salts // Ed.J.Gathals N.Y.: Pergamon Press, 1980, p. 333-335.

171. Hugo W.B. J.Pharm. Pharmacol., 1957, v.9, p. 145-161.

172. Hugo W.B. In: The Survival of Vegetative Microbes. Ed. T.R.G.Gray. J.R.Postgate. Cambridge, 1976, p. 383-413.

173. Hwang S.T., Kammermeyer K. Membranes in separation A Wiley-intenscience Publication, New York, London, Sydney, Toronto, 1975, 464 p.

174. Inman F.H. // Filtration a. Separat, 1984, v.21,№ 5/6, p.165-170.

175. Kleinhofs A.M., Smith J.A. -Mutat.Res., 1976, v.41, p. 233-240.

176. Land E.J., Prutz W.A. IntJ.Radiat.Biol., 1979, v.36, p. 75-83.

177. Lambert P.A., Smith J.A. Microbios, 1977, v. 17, p. 35-49.

178. Lamikaura A., Allwood M.C. J.appl. Bact., 1977, v.42, p.379-385.

179. La Mer V.K. Healy N.W. // Discuss Farod Sci.1966, v.42, p.248-255

180. Lancaster J.E. Newcaste Disease, a Review Ottawa, 1966, p. 212.

181. Malek B. et. «al. // J. Amer. Water Works Assos., 1981, v. 73, № 3, p. 164-168.

182. Meyer M.E. Evolution and taxonomy in the genus Brucella: Concepts on the origins of the contemporary species // American Journal of Veterinary Research, 1976, 37, 2, p. 199 202.

183. Meyer M.E. Brucella abortus evolution and taxonomy in the genus Brucella: Contemporary evolutionary status of the species Brucella abortus // American Journal of Veterinary Research, 1976, 37, 2, p. 203 205.

184. Micchielli A., Saint-Lebe L. C.R.Acad.Sci. (Paris), 1976, V.D.-283, p. 435-438.

185. Mishrc M.K., Srivastava S.K. Effect of glucose and type of inoculum on biodegradation of phenol // Indian J.Chem. Technol. 1998, 5, № 4, p. 195-198.

186. Mirl B.Z., Pool N.H. // J. Bacterol, 1982, v. 150, № 2, pp. 878 889.

187. Muzzarelli A.A. Chitin Oxford: Pergamon Press, 1977, 209 p.

188. I.Nagano Hideo, Fujimoto Takashi, Yakugaku Zasshi J.pharm.Soc.Jap., 1975, v.95, p. 1108-1113.

189. Nazar R.N, Wong J.F. F.-J.Dact, 1969, v. 100, p.956-961.

190. Nyizi L. Manufacture of pectinases Process. // Biochem, 4, (8), 1969. -p.27.

191. Ostermaer K, Dolias B. // Colloid Surf, 1985, v. 14, № 3/4, pp. 199 -208.

192. Patel P.N. et. al. //J. Biotechnol, 1987, v/ 5,№ 1, pp. 1 16.

193. Poison A. Atheory for displasement of problems and viruses with polyethylene glicol // Preparative Biochimistrey, 1981, p. 129-159.

194. Poverenny A.M., Siomin Yu.A, Saenko A.S. et al. Mutat.Res, 1975, v.27, p. 123-126.

195. Pullman J.E, Reynolds B.L. Aust.J.Pharm, 1965, v.46, p.580-584.

196. Pyina A.V, Tikhonov V.E, Albulov A.l, Varlamov V.P. Enzymic preparation of acid-free-water-soluble chitosan // Process Biochemistry, 1999, v 35, № 6, pp. 563 568'.

197. Reyveld E. -H.-C.R.Acad.Sci. (Paris), 1973, v. D-277, p. 613-616.

198. Rose A.H. // In.Biology and activity of Yeast. New York, Academic Press, 1980, p. 103-121.

199. Sagripanti J-L, Borifacino A. Bacterial Spores Survive treatment with commercial sterilants and disinfectants // Appl. and Environ Microbiol. 65, № 9, 1999, p.4255-4260.

200. Schlimme W, Marchiani M, Hanselmann K, Jenni B. // Appl. and Environ Microbial 65, № 6, 1999, p.2754-2757.1.l

201. Sherbet G.V. The biophyscal characterisation of cell surfase. New York, Academic Press, 1978, 298 p.

202. Szwacka M., Ciesla Z., Klopotowski T. -Mutat.Res., 1979, v.62, p.221226.

203. Traweek G.P. Morgan J.Y. et. al. // J.Water Polut Control. Feder, 1979., v.51, № 7, p.1859-1877.

204. Traub F,B., Friedemann U, Brascha, Huber W. High intensity eletrons as a tool for preparation of vaccines // J.Immunol, 67, p.951, p.379-384.

205. Van Gelder B.F., Wever R., Muijsers A.O. In: Mechanisms in Bio-enegetics. New York, 1973, p. 571-577.

206. Wang L.IC, Cooney C.Z., Demain A.Z., Dunnel P, Humphrey A.E., Lilli M.D. Fermentation and Enzyme technoloj. A.Wiley interscience publication, New York, Chichester, Brisbanne, Toronto, 1983, p. 336.

207. Weissman B.J.,Elsken I.C. // Chem.Eng.Progr.,vol.63, № 9,1967. -p.28-33.

208. Wu Yi-Zhe, Zim Ke- Xin //In: Bio Energ. Goteborg, 1984, p. 147. .

209. Yost F.J., Fridovich I. Arch.Biocyem., 1976, v. 175. p. 514-519.

210. Zahka J., Leahy T.J. Practical Aspects of Tangential Flow Filtation in Cell Separations, Purification of Fermentation Products // Amer., Chem. Soc. Symposium Ser. 1985, v.51 p. 271-285.

211. Zamola В., Walles P., Meli G. et. al. // Biotechnol. and Bioeng., 1981, v. 23, №5, p. 1079-1086.112