Усовершенствование методов ретроспективной диагностики и оценки поствакцинального иммунитета ньюкаслской болезни птиц тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Манин, Тимофей Борисович

• Манин, Тимофей Борисович
• кандидат ветеринарных наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Манин, Тимофей Борисович

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1.Общая характеристика ньюкаслской болезни.

2.1.1. Клинические признаки и формы проявления.

2.1.2. Патологоанатомические изменения.

2.2. Классификация и строение птичьих парамиксовирусов.

2.3. Морфология и химический состав вируса ньюкаслской болезни. Устойчивость к физическим воздействиям.

2.4. Гемагглютинирующая активность вируса НБ.

2.5. Антигенная активность вируса НБ.

2.6. Иммунитет и специфическая профилактика.

2.7. Диагностика ньюкаслской болезни кур.

2.7.1. Выделение вируса.

2.7.2. Серологическая диагностика.

2.7.3. Реакция торможения гемагглютинации.

2.7.4. Реакция нейтрализации.

2.7.5. Реакция связывания комплемента.

2.7.6. Реакция диффузной преципитации.

2.8. Иммуноферментный анализ.

2.9. Применение ИФА в диагностике ньюкаслской болезни.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Материалы и методы.

3.2. Результаты собственных исследований.

3.2.1. Разработка набора для определения уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в РТГА.

3.2.2. Разработка метода выявления и определения активности антигена вируса НБ в непрямом сэндвич-варианте ИФА.

3.2.3. Очистка и концентрирование вируса НБ.

3.2.4. Разработка иммуноферментной тест системы для выявления антител к вирусу НБ при тестировании сывороток в одном разведении.

3.2.5. Практическое применение разработанной тест-системы ИФА.

4. ОБСУЖДЕНИЕ.

5. ВЫВОДЫ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Усовершенствование методов ретроспективной диагностики и оценки поствакцинального иммунитета ньюкаслской болезни птиц»

Актуальность темы. Ньюкаслская болезнь - высококонтагиозная вирусная инфекция птиц, главным образом куриных, характеризующаяся пневмонией, энцефалитом, множественными точечными кровоизлияниями и поражениями внутренних органов. Гибель птиц, особенно молодых, может достигать 100%. По классификации Международного Эпизоотического Бюро НБ считается особо опасным заболеванием и отнесено в список «А».

Впервые зарегистрированная в 1926 году в Англии (Doyle Т.М.) ньюкаслская болезнь в течение XX столетия нанесла громадный экономический ущерб птицеводству всего мира (36,46,81). В настоящее время, несмотря на внушительные затраты на изучение молекулярных основ патогенности возбудителя, диагностику и специфическую профилактику НБ, вспышки заболевания регистрируются почти во всех странах мира. По данным МЭБ в 1999 году официально зарегистрировано 2709 вспышек ньюкаслской болезни более чем в 100 странах мира. В Российской федерации в 2000 году было зарегистрировано 3 вспышки заболевания (147,148).

Основополагающую роль в борьбе с инфекцией играет своевременная диагностика и последующие меры профилактики. Принятая в мире схема ретроспективной диагностики предусматривает выявление специфических антител с помощью традиционного серологического теста -реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и иммуноферментного анализа (ИФА). В Российской Федерации предусмотрено применение РТГА, причём в настоящее время актуальным вопросом является повышение воспроизводимости результатов теста, путём создания стандартных у диагностических наборов на базе данной реакции.

Анализируя состояние ретроспективной диагностики НБ в мире, нельзя не отметить внедрение в ветеринарную практику современных серологических методов, в частности ИФА. Основываясь на использовании антител, конъюгированных с различными ферментами, иммуноферментный анализ не уступает, а часто и превосходит стандартные методы диагностики по чувствительности и специфичности. Быстрота получения, 6 воспроизводимость и автоматизированный учёт результатов реакции, возможность стандартизации условий постановки анализа делают ИФА наиболее эффективным, удобным, экономичным и выгодным методом для массовых серологических исследований. В зарубежной ветеринарной практике широко используются коммерческие иммуноферментные тест-системы, предусматривающие исследование сывороток в одном разведении, позволяющие определять уровень материнских антител, напряжённость поствакцинального иммунитета, корректировать кратность повторных иммунизаций, а также определить возможный контакт с «полевым» вирусом. Существующие диагностические наборы обладают различной интерпретацией качественной оценки напряжённости иммунитета (61,109,125).

В научной литературе имеются данные о возможности использования ИФА для определения уровня антител, обеспечивающих 100% защиту от заболевания при контрольном заражении (193). Указанные выше преимущества создали предпосылку для разработки и использования диагностической тест-системы ИФА, с помощью которой возможно выявление и количественное определение уровня антител к вирусу НБ при ретроспективной диагностике, обеспечивающих защиту при контрольном заражении.

Современное производство вакцин требует разработки специфичных и точных методов оценки качества вирусного сырья. По данным литературы для этой цели возможно использование сэндвич-варианта ИФА для прямого обнаружения и определения активности различных вирусов, вызывающих болезни птиц. Реакция гемагглютинации, применяемая в настоящее время для контроля качества антигенного сырья при производстве вакцин и диагностических наборов, при высокой чувствительности не обладает специфичностью по отношению к гемагглютинирующим вирусам.

Цели и задачи исследования. Целью нашей работы явилась разработка диагностических наборов ИФА и РТГА для выявления и количественной оценки специфических антител в сыворотках крови кур, позволяющих проводить массовые исследования птицепоголовья при 7 ретроспективной диагностике НБ, оценивать состояние гуморального иммунитета и способных измерить уровень антител, обеспечивающих защиту птицы от заболевания при контрольном заражении.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи: -разработать методику очистки и концентрации вируса ньюкаслской болезни;

-разработать диагностический набор для определения уровня антител к вирусу НБ в РТГА;

-разработать иммуноферментную тест-систему для определения активности вируса НБ в аллантоисной жидкости, используемой для производства вакцин и диагностикумов, и провести сравнительный анализ данных, полученных с помощью ИФА и базовой реакции РГА;

-разработать иммуноферментную тест-систему для выявления и количественного определения антител к вирусу НБ в сыворотках крови кур при их тестировании в одном разведении и провести сравнительный анализ данных разработанных тест-систем ИФА и РТГА с коммерческим набором КР1 (США), сертифицированным на территории РФ;

-изучить корреляционную зависимость результатов разработанных тест-систем РТГА и ИФА при изучении динамики накопления антител, вследствие применения живых и инактивированных вакцин против НБ;

-определить уровень антител в ИФА, обеспечивающий 100% защиту птицы от заболевания при контрольном заражении.

Научная новизна. Впервые в России разработана иммуноферментная тест-система для выявления специфических антител к вирусу НБ в сыворотках крови кур при тестировании их в одном разведении. Данная тест-система предусматривает количественное определение антител по уравнению регрессионной зависимости, осуществляемое автоматически с использованием компьютерной программы для регистрации, обработки, хранения результатов иммуноферментного анализа в ветеринарии "СИНКО-ИФА", разработанной во ВНИИЗЖ.

Разработана тест-система на основе непрямого сэндвич-варианта ИФА для определения активности вируса НБ в вируссодержащем сырье при 8 производстве диагностикумов и вакцин против НБ. Высокая специфичность ИФА по сравнению с РГА позволяет выявлять и определять концентрацию вируса НБ в смеси с гетерологичными вирусами, используемой при производстве ассоциированных вакцин.

Разработан набор для определения уровня антител к вирусу НБ в РТГА. Высокая специфичность, активность и стабильность при хранении компонентов разработанного набора позволила повысить воспроизводимость результатов реакции.

Изучена диагностическая ценность ИФА по отношению к РТГА.

Определён уровень антител в ИФА, обеспечивающих 100% защиту птицы от заболевания при контрольном заражении.

Практическая значимость. Утверждены Департаментом ветеринарии нормативно-технические документы на "Набор препаратов для определения уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации" и "Набор для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни иммуноферментным методом при тестировании сывороток в одном разведении". Подготовлены технические условия и временные наставления по применению разработанных наборов. Данные тест-системы успешно прошли широкие производственные испытания и применяются для ретроспективной диагностики НБ и контроля напряжённости поствакцинального иммунитета в ветеринарии.

Разработаны и утверждены директором института "Методические указания по выявлению и определению активности антигена вируса ньюкаслской болезни в непрямом сэндвич-варианте иммуноферментного о анализа" и «Инструкция по изготовлению и контролю диагнюстщ/мов и наборов для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни кур иммуноферментным методом».

Апробация работы. Результаты исследований по теме диссертации доложены и обсуждены на заседаниях Учёного Совета ВНИИЗЖ в 19972000 годах, на научной конференции молодых учёных (Владимир, 2000г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ. 9

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах, иллюстрирована 19 таблицами и 22 рисунками. Список использованной литературы включает 196 источников, из них 163 иностранных.

Основные положения, выносимые на защиту:

- набор для определения уровня антител к вирусу НБ в РТГА;

- иммуноферментная тест-система для выявления и определения активности антигена вируса НБ в вируссодержащем сырье;

- иммуноферментная тест-система для выявления и количественного определения антител к вирусу НБ при тестировании сывороток в одном разведении с использованием компьютерной программы учёта и хранения результатов "СИНКО-ИФА", разработанной во ВНИИЗЖ;

-результаты сравнения ИФА и РТГА при ретроспективной диагностике НБ, вследствие применения живых и инактивированных вакцин

Исследования по диссертационной работе выполнены в 1997-2000гг. во Всероссийском научно-исследовательском институте защиты животных (ВНИИЗЖ, г.Владимир).

Автор выражает искреннюю благодарность к.б.н. Мудрак Н.С., к.б.н. Волковой М.А., к.б.н. Оковытой Т.В., к.б.н. Фалиной Г.М., к.б.н. Кожаевой Г.И., к.б.н. Сарбасову А.Б., д.б.н. Пономарёву А.П., Зинковскому Ю.В., Ирзе В.Н. - за практическую помощь в выполнении отдельных этапов работы и их обсуждение.

10

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Манин, Тимофей Борисович

5. ВЫВОДЫ

1. Разработан диагностический набор препаратов для определения уровня антител к вирусу НБ в РТГА, в состав которого, помимо специфических, вошли неспецифические компоненты, позволяющий получать воспроизводимые результаты независимо от времени и условий постановки реакции.

101

2. Разработана тест-система на основе непрямого сэндвич-варианта ИФА для выявления и определения активности препаратов антигена вируса НБ, используемых для производства вакцин и диагностических наборов. Показана его специфичность по сравнению с РГА, что позволяло выявить антиген вируса НБ в смеси с другими гемагглютинирующими вирусами.

3. В результате разработки тест-системы на основе непрямого варианта ИФА для выявления и количественного определения антител к вирусу НБ при тестировании сывороток в одном разведении были определены рабочее разведение, оптимальные значения оптической плотности контрольных сывороток, вычислен позитивно-негативный порог для качественной оценки результатов реакции. Параметры тест-системы были введены в программу учёта, хранения и обработки результатов «СИНКО-ИФА», разработанную во ВНИИЗЖ.

4. Разработанная методика очистки и концентрирования вируса ньюкаслской болезни, позволила получать препарат антигена с активностью в РГА 131од2, в ИФА 1:25600 и концентрацией белка 3-5 мкг/мл.

5. Установлено, что коэффициент парной корреляции между результатами, полученными с помощью разработанных тест-систем ИФА и РТГА равен 0.80, а между коммерческим набором фирмы КР1 (США) и набором РТГА - 0.77. Предлагаемая отечественная иммуноферментная тест-система не уступала по чувствительности и специфичности сертифицированному на территории РФ коммерческому набору фирмы КР1.

6. Изучена динамика выработки антител после применения вакцин из штамма Ла-Сота с использованием тест-систем ИФА и РТГА. Установлено, что однократная иммунизация живыми и инактивированными вакцинами обеспечивала цыплятам на 52 день 100% защиту от заболевания при контрольном заражении.

7. С помощью разработанной иммуноферментной тест-системы определен защитный уровень гуморальных антител на ранних сроках после иммунизации живой вакциной, который составил 1:540 на 7 день после вакцинации.

102

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для практического использования предлагается нормативно-техническая документация:

- на «Набор препаратов для определения уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации» Технические условия 9388-046-00008064-99 и Временное наставление по применению, которые утверждены Департаментом ветеринарии РФ в 1999г.;

- на «Набор для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни иммуноферментным методом при тестировании сывороток в одном разведении» Технические условия 9338-023-00495527-00 и Временное наставление по применению, которые утверждены Департаментом ветеринарии РФ в 2000г.

Разработаны и утверждены директором ВНИИЗЖ:

- «Инструкция по изготовлению и контролю диагностикумов и наборов для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни кур иммуноферментным методом»;

- «Методические указания по выявлению и определению активности антигена вируса ньюкаслской болезни в непрямом сэндвич-варианте иммуноферментного анализа».

103

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Манин, Тимофей Борисович, 2000 год

1. Антитела: Методы Т.2: Пер. с англ./Под ред. Д. Кэтти.-М.:Мир,1991.-382 с.

2. Бакулов И.А., Буткин Е.И., Ведерников В.А., Юрков Г.Г. Эпизоотология с микробиологией.-М.: Колос, 1981.-С.330-335.

3. Бочков Ю.А., Дрыгин В.В., Хлыбова Т.В. и др. Очистка и концентрирование вируса инфекционного бронхита кур//Пробл. инф. патологии с.-х. ж-ных: Тез. докл. конф.- Владимир, 1997.-С.152-153.

4. Букринская А.Г., Зайдес В.М. Молекулярная биология парамиксовирусов,- М.: Медицина, 1978.-184 с.

5. Букринская А.Г., Жданов В.М. Молекулярные основы патогенности вирусов,- М.: Медицина, 1991.-256 с.

6. Вирусология: Т.2: Пер. с англ./Под ред. Б. Филдса, Д. Найпа.-М.: Мир, 1989.-496 с.

7. Виттиг К. Разработка вакцин с исторической точки зрения.Пер. с нем.: Дис. докт.вет.наук.-Гисен, 1996.-274 с.

8. Волкова М.А. Разработка и применение иммуноферментных тест-систем для определения антител к вирусу ССЯ-76 и оценке качества вируссодержащего сырья: Дис. . канд.биол.наук.-Владимир,2000.-135с.

9. Грибанов О.Г., Старов С.К., Дрыгин В.В. и др. Изучение возможного использования полимеразной цепной реакции для штаммовой дифференциации вируса ньюкаслской болезни//Сб. науч. тр. ВГНКИ,-М.1996.-Т.29.-С.63-69.

10. Грибанов О.Г., Курман И.Я., Дрягалин H.H. и др. Методика очистки и концентрации вируса ньюкаслской болезни из аллантоисной жидкости куриных эмбрионов.-Владимир: ВНИИЗЖ, 1996.

11. Грибанов О.Г., Колосов С.Н., Ломакин А.И. и др. Оптимизация условий штаммовой дифференциации вируса болезни Ньюкасла// Пробл. инф. патологии с.-х. ж-ных: Тез. докл. конф.- Владимир, 1997.-С. 156-157.

12. Грибанов О.Г., Курман И .Я., Дрягалин H.H., Мудрак Н.С. Оптимизация метода выделения и очистки вируса болезни104

13. Ньюкасла//Пробл. инф. патологии с.-х. ж-ных: Тез. докл. конф.- Владимир, 1997.-С.164.

14. Грибанов О.Г., Старое С.К., Ломакин А.И. и др. Нуклеотидные последовательности гена HN и фрагмента гена F штаммов Бор 77 и Бор 82 вируса ньюкаслской болезни//Мол. генетика, микробиол. и вирусол.-1999.-№3.-С.29-33.

15. Дунаев Г.В., Назаренко E.H. Изучение переносчиков вируса болезни Ньюкасла//Вопр. вет. вирусол.-М.,1966.-С.637-638.

16. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа.-М.:Высш. школа, 1991.-288 с.

17. Иммуноферментный анализ: Пер с англ./Под ред. Т.Т.Нго, Г.Ленхоффа.-М.:Мир,1988.-444с.

18. Киур-Муратов А.П. О чуме птиц//Ветеринария.-1944.-№11-12,-С.28-31.

19. Лярски 3. Диагностика вирусных болезней животных.-М.:Колос,1980.-С.289-298.

20. Парфёнова С.М., Скотникова Т.А., Иванова H.A., Люлькова Л.С. Концентрирование и очистка вируса ньюкаслской болезни методом микрофильтрации//Науч. основы пр-ва вет. биол. преп-ов: Тез. докл. 5 Всерос. конф.-Щелково, 1996-С.22-23.

21. Резвых А.Г., Киреленко А.Н., Слабоденюк М.И. РЗГА в диагностике ньюкаслской болезни//Птицеводство.-1988.-№5.-С.26.

22. Родин Ю.В., Руденко Т.В., Смоленский В.И. и др. Оценка эпизоотологической ситуации и особенности специфической профилактики при ньюкаслской болезни//Вестн. ветеринарии.-1998.-№2.-С.66-75.

23. Руденко Т.В. Вакцина против ньюкаслской болезни из штамма «ГАМ-61»: Дис. .канд.биол. наук.-М.,2000.-198 с.

24. Свинцов П.М., Фомина А.Я., Очкина И.И. Инфекционные болезни птиц//Ветеринария.-1947.-№3.-С.7.

25. Сюрин В.Н., Белоусова, Р.В. Фомина Н.В. Ветеринарная вирусология.-М.:Колос, 1984.-376 с.

26. Сюрин В.Н. Псевдочума птиц (ньюкаслская болезнь).-М.: Сельхозиздат, 1963.-304 с.

27. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьёв Б.В., Фомина Н.В. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных: Справочник,-М.:Агропромиздат, 1986.-351 с.

28. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Ветеринарная вирусология.-М.: Агропромиздат, 1991 .-431 с.

29. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Диагностика вирусных болезней животных.-М.: Агропромиздат, 1991.-237 с.

30. Сюрин В.Н., Фомина Н.В. Частная ветеринарная вирусология.-М.: Колос, 1991.-472 с.

31. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьёв Б.В. Фомина Н.В. Вирусные болезни животных.- М.: ВНИИТиБП,1998,- С.233-238.

32. Троценко Н.И., Белоусова Р.В., Преображенская Э.А. Практикум по ветеринарной вирусологии.-М.: Колос,1999.-С.209-217.

33. Феннер Ф., Мак Ослен Б., Милее С. и др. Биология вирусов животных: Пер. сангл.-М., 1977.-Т.2.-С.5-78.

34. Abenes G.B., Kida Н., Yanagawa R. Avian paramyxoviruses possessing antigenically related HN but distinct M proteins//Arch. Virol.-1983.-V.77.-P.71-76.

35. Alexander D.J. Newcastle disease and other paramyxoviruses. Chapter 30.-1991.-P. 156-163.

36. Alexander D.J. Newcastle disease and other paramyxoviridae infections//Diseases of Poultry .-Ames, Iowa, 1997.-P.541-569.

37. Alexander D.J. Avian paramyxoviruses//Proc 34th West. Poultry Dis. Conf.-1985.-P. 121-125.

38. Alexander D.J. Newcastle disease.-Boston: Kluwer Acad. Publ., 1988,-P.1-10.106

39. Alexander D.J. Newcastle disease//State Vet. J.-1995.-V5,№3.-P.2124.

40. Alexander D.J., Allan W.H. Newcastle disease virus pathotypes//Avian Pathol.-1974.-№3.-P.269-278.

41. Alexander D.J., Parsons G. Pathogenicity for chickens of avian paramyxovirus type I isolates obtained from pigeons in Great Britain during 1983-1985//Avian Pathol.-1986.- V.15.-P.487-493.

42. Alexander D.J., Parsons G., Marshall R. Infection of fowls with Newcastle disease virus by food contaminated with pigeon faeces/A/et. Rec.-1984.-V.115.-P.601-602.

43. Alexander D.J., Wilson G.W.C., Russell P.H. e.a.Newcastle disease outbreaks in fowl in Great Britain during 1984/A/et. Rec.-1985.-V.117.-P.429-434.

44. Alexander D.J. Historical aspects of Newcastle disease.-Dordrecht: Martinus Nijhoff Publ., 1987.-P.1-10.

45. Alexander D.J. Newcastle disease and other paramyxoviridae infections//Rev.Sci.tech.Off.lnt.Epiz.-2000.-V19,№2.-P.443-456.

46. Alexander D.J., Manvell R.J., Kemp P.A. e.a. Use of monoclonal antibodies in the characterisation of avian paramyxovirus type I (Newcastle disease virus) isolates submitted to an International Reference Laboratory//Avian Pathol.-1987.-V.16.-P.553-565.

47. Allan W.H., Gough R.E. A comparison between the haemagglutination inhibition and complement fixation tests for Newcastle disease//Res. Vet. Sci.-1976.-V.20.-P. 101-103.

48. Allan W.H., Lancaster J.E., Toth B. Newcastle disease vaccines-their production and use//FAO. Anim. Prod, and Health. Series No.10.-Rome: FAO, 1978.107

49. Bahl A.K., Vickers M.L. Egg drop syndrome in breeder turkeys associated with turkey para-influenza virus-3 (TPIV-3)//Proc. 31st West. Poultry Dis. Conf., 1982.-P.113.

50. Bankowski R.A. Cytopatogenicity of Newcastle disease virus//Newcastle disease virus: an evolving pathogen.-Madison, 1964.-P.231-246.

51. Beach J.R. Avian pneumoencephalitis//Proc. Annu. Mtg US Livestock Sanit. Assoc., 1942.-V.46.-P.203-223.

52. Beach J.R. The application of the hemagglutination inhibition test in diagnosis of avian pneumoencepchalitis (ND)//J. Am. Med. Assoc.-1948.-V.112.-P.85.

53. Beard C.W., Easterday B.C. The influence of route of administration of Newcastle disease virus on host response//J. Infect. Dis.-1967.-V.117.-P.55-70.

54. Beard C.W., Hanson R.P. Newcastle disease//Diseases of Poultry.-8th ed. Iowa State University Press, Ames, Iowa, 1984.-P. 452-470.

55. Beard C.W., Wilkes W.C. A comparison of Newcastle disease hemagglutination-inhibition test result from diagnostic laboratories in Southeastern Unated States//Avian Dis.-1985.-V29,№5.-P. 1048-1056.

56. Beaudette F.R., Black J.J. Newcastle disease in New Jersey//Proc. Annu. Mtg. US Livestock Sanit. Assoc., 1946.-V.49.-P.49-58.

57. Beaudette F.R., Bivins J.A., Miller B.R. Newcastle disease immunization with live virus//Cornel Vet.-1949.-V.39.-P.302-334.

58. Beer J.V. Newcastle disease in the pheasant Phasianus colchicus, in Britain/A/Vildlife Disease.- N.Y., 1976.-P.423-430.

59. Biancifiori F., Fioroni A. An occurence of Newcastle disease in pigeons: Virological and serological studies on the isolates//Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis.-1983.-№6.-P.247-252.

60. BioChek. Newcastle disease antibody test kit: Catalog Code CK113.-Gouda E.r..

61. Borland L.J., Allan W.H. Laboratory tests for comparing live lentogenic Newcastle disease vaccine//Avian Pathol.-1980.-V.9,№1.-P.45-59.108

62. Box P.G., Halliwell B.I., Halliwell P.H. Newcastle disease in turkeys/A/et. Rec.-1970.-V.86.-P.524-527.

63. Box P.G., Furminger I.G.S., Robertson W.W., Warden D. The effect of Marek's disease vaccination on the immunisation of day-old chicks against Newcastle disease, using Bl and oil emulsion vaccine//Avian Pathol.-1976.-V.5.-P.299-305.

64. Boyd R.J., Hanson R.P. Survival of Newcastle disease in nature//Avian Dis.-1958.-V.2.-P.82-93.

65. Brown J., Resurriccion R.S., Dickson T.G. The relatioship between the hemagglutination-inhibition test and ELISA for detection of antibody to Newcastle disease//Avian Dis.-1990.-V.34.-P.585-587.

66. Brumrield H., Pomeroy B. Newcastle disease//Soc. Exp. Biol. Med.-1957.-V.94.-P.146.

67. Brugh M., Beard C.W., Wilkes W.C. The influence of test conditions on Newcastle disease hemagglutination-inhibition titers//Avian Dis.-1978.-V.22,-P.320-328.

68. Burnet F.M. The affinity of Newcastle disease virus to the influenza virus group//Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci.-1942.-V.20.-P.81-88.

69. Cadman H., Kelly P., Angelis N. e.a. Comparision of enzyme- linked immunosorbent assay and haemagglutination inhibition test for the detection of antibodies against Newcastle disease virus in ostriches//Avian Pathol.-1997.-V.26.-P.357-363.

70. Capua I., Scacchia M., Toscani T., Caporale V. Unexpected isolation of virulent Newcastle disease virus from commercial embryonated fowls eggs//J. Vet. Med.-1993.-V.40.-P.609-612.

71. Collins M.S., Gough R.E. Characterisation of a virus associated with turkey rhinotracheitis//J. Gen. Virol.-1988.-V.69.-P.909-916.

72. Collins M.S., Alexander D.J., Brockman S., e.a. Evaluation of mouse monoclonal antibodies raised against an isolate of the variant avian paramyxovirus type I responsible for the current panzootic in pigeons//Arch. Virol.-1989.-V104.-P.53-61.109

73. Coman I. Possibility of the elimination of strain F virus of Asplin (1949) in the eggs of inoculated hens//Lucr. Inst. Past. Higiena Anim. Bucaresti., 1963.-№12.-P.337-344.

74. Cross G.M. Newcastle disease vaccine production// Newcastle Disease.-Boston, 1988.-P.333-346.

75. Cunningham C.H. A laboratory guide in virology. 4th ed.-Minneapolis.Minn.: Burgess Publishing Co., 1960.

76. Doyle T.M. A hitherto unrecorded disease of fowls due to a filter-passing virus//J. Comp. Pathol. Therap.-1927.-V.40.-P. 144-169.

77. Doyle T.M. Newcastle disease of fowls//J. Comp. Pathol. Therap.-1935.-V.48.-P.1-20.

78. Fabricant J. Studies of the diagnosis of Newcastle disease and infectious bronchitis of fowls//Cornell Vet.-1949.-V.39.-P.202-220.

79. Folitse R., Halvorson D.A., Sivanandan V. A dot immunoblotting assay (Dot Blot ELISA) for early detection of Newcastle disease antibodies in chicken//Avian Dis.-1998.-V.42.-P. 14-19.

80. Foreign Animal Disease.-Richmond,1998.-P.396-405.

81. Francis D.W. Newcastle and psittacines, 1970-71//Poultry Dig.-1973.-V.32.-P.16-19.

82. French E.L., George T.D., Percy J.J. Infection of chicks with recently isolated Newcastle disease viruses of low virulence//Austral. Vet. J.-1967.-V.43.-P.404-409.

83. Ghuman, J.S., Bancovski R.A. In vitro DNA synthesis in lymphfocytes from turkey vaccinated with LaSota, TC and inactivated Newcastle disease vaccines//Avian Dis.-1975.-V.20.-P. 18-31.

84. Giraud P., Le Gros F.X., Toquin D. e.a. Turkey rhinotracheitis: Viral identification of the causal agent//Proc. 37th West. Poultry Dis. Conf., 1988.-P.61-62.

85. Goldhaft T.M. Historical note on the origin of the La Sota strain of Newcastle disease virus//Avian Dis.-1980.-V.24.-P.297-301.

86. Gough R.E., Alexander D.J. The speed of resistance to challenge induced in chickens vaccinated by different routes with a Bl strain of live NDV/A/et. Rec.-1973.-V.92.-P.563-564.

87. Gratzl E., Köhler. Newcastle Krankheit/Specielle Pathologie und Therapie der Geflügelkrankheiten.-Stuttgart,1968.-P.202-255.

88. Grausgruber W. Nachweis von Newcastle disease-Virus in importiertem Gefriergeflügel//Wiener tierärztl. Monatsschr.-1973.-Bd.60.-S.371-373.

89. Gribanov O.G., Kolosov S.N., Lomakin A.I. e.a. Optimisation of conditions of differentiation of Newcastle disease virus with the of reverse transcriptase//Xlth Int. Congr. World Vet. Poultry Ass.: Abstr.-Budapest,1997.-P.264.

90. Gribanov O.G., Starov S.K., Smolenscy V.l. e.a. The study of Russian strains of Newcastle disease virus//10th Europ. Poulty Conf.: Abstr.-lsrael,1998.-P.78.

91. Guittet M., Le Coq H., Morin M. e.a. Proceedings of the Xth World Vet. Poultry Ass. Cong.-Sydney, 1993.-P.179.

92. Haddow J.G., Idnani J.A. Vaccination against Newcastle (Raninkhet) disease// Indian J. Vet. Sci.-1946.-V.16.-P.45-53.

93. Halasz F. Contributions of the knowledge of fowlpest: Doct. Diss.-Budapest, 1912.-P.1-36.

94. Hallauer C. Die Hämagglutination durch Virusarten, Handburg der Virusforschung/Hrsg. R. Doer, C. Hallauer. II. Erg.Bd.-Wien: Springer, 1950.

95. Hamid H., Campbell R.S.F., Lamochhane C. The pathology of infection of chicken with lentogenic V4 strain of Newcastle disease virus//Avian Pathol.-1990.-V. 19.-P.687-696.

96. Hanson L.E., Winslow N.S., Brandly C.A., Upton E. The antiviral activity of Newcastle disease immune sera//J. Bact.-1950.-V.60.-P.557-560.

97. Hanson R.P. Newcastle disease. Isolation and Identification of Avian Pathogens.-Kennett Square, PA, 1980.-P.63-66.1.l

98. Hanson R.P., Spalatin J., Jacobson G.S. The viscerotropic pathotype of Newcastle disease virus//Avian Dis.-1973.-V.17.-P.354-361.

99. Hanson R.P., Spalatin J. Thermostability of the hemagglutinin of Newcastle disease virus as a strain marker in epizootiologic//Avian Dis.-1978.-V.22, №4.-P.659-665.

100. Heller E.D., Nathan D.B., Perek M. The transfer of Newcastle serum antibody from the laying hen to the egg and chick//Res. Vet. Sci.-1977.-V.22.-P.376-379.

101. Higgins D.A. Nine disease outbreaks associated with myxoviruses among ducks in Hong Kong//Trop. Anim. Health Prod.-1971.-№3.-P.232-240.

102. Hofstad M.S. Immunization of chickens against Newcastle disease by formalin-inactivated vaccine//Am. J. Vet. Res.-1953.-V.14.-P.586-589.

103. Holmes H.C. Resistance of the respiratory tract of the chicken to Newcastle disease virus infection following vaccination: The effect of passively acquired antibody on its development/^. Comp. Pathol.-1979.-V.89.-P.11-20.

104. Horvath E., Czifra G., Nagy E. e.a. Potency test of inactivated Newcastle disease vaccines by monoclonal antibody blocking ELISA//Vaccine.-1999.-V.6, №17.-P.23-24.

105. IDEXX. Newcastle disease Antibody Test Kit: Cataloge №. 06-01129-02,-Westbrook E.r..

106. Ishida M., Herome K., Matsumoto M. e.a. Characterization of reference strain of Newcastle disease virus (NDV) and NDV-like isolates by monoclonal antibodies to HN subunits//Arch. Virol.-1985.-V.85.-P.109-121.

107. James N. Logistics of dealing with a comfirmed outbreak of Newcastle disease in commercial turkeys//State Vet. J.-1999.-V9,№1 .-P.14-17.112

108. Kaleta E.F. Methoden für die Isolierung aviärer Paramyxoviren sowie Virustupisierung mit konventionellen Technicen. Seminar über Isolerung und Characterisiezurung von aviären Paramyxoviren.-Gießen, 1989.-S.8-25.

109. Kaleta E.F. Aviären Paramyxoviren: Typen und Subtypen. Seminar über Isolerung und Characterisiezurung von aviären Paramyxoviren.-Gießen, 1989.-S.57-70.

110. Kaleta E.F. Paramyxovirusinfektionen//Krankheiten des Wirtschaftsgeflügels.-Jena, 1992.-Bd. 1 .-P.587-661.

111. Kaleta E.F., Heffels-Redmann U. (eds.). Proceedings of the CEC Workshop on Avian Paramyxoviruses, Rauischholzhausen, Germany, 1992.

112. Kaleta E.F., Alexander D.J., Russell P.H. The first isolation of the PMV-I virus responsible for the current panzootic in pigeons?//Avian Pathol.-1985.-V. 14.-P.553-557.

113. Kaleta E.F., Siegmann O. Vergleichend^ Untersuchungen über den Naschweis hämagglutinations-hemmender und virusneutralisierender Antikörper nach Vaccination gegen die Newcastle disease//Arch. Geflügelkunde.-1971.-V.35.-S.79-83.

114. Kardi V., Szegletes, Forgach K., Toth B. Use of ELISA methods for determination of IBD (Gumboro) virus antigen and antibody//11th Int. Cong. World Vet. Poultry Ass.: Abstr.-Budapest, Hungary, 1997.-P. 269.

115. Kessler N., Aymard M., Calvet A. Study of a new strain of paramyxoviruses isolated from wild ducks: Antigenic and biological properties//J. Gen. Virol.-1979.-V.43.-P.273-282.

116. Kida H., Yanagawa R. Classification of avian paramyxoviruses by immunodiffusion on the basis the antigenic specificity of their M protein antigens//J. Gen. Virol.-1981.-V.52.-P. 103-111.113

117. Kim S.J., Spradrow P.B., Chung Y.S. The serological response of chicken to Avstralian lentogenic strain of Newcastle disease V-4 vaccine//Austral. Vet. J.-1978.-№50.-P.29-33.

118. King D.J., Seal B. Biological and molecular characterization of Newcastle disease virus (NDV) field isolates with comparisons to reference NDV strains//Avian Dis.-1998.-V.42.-P.507-516.

119. Kolakofsky D., Boy de la Tour E., Delius H. Molecular weight determination of Sendai and Newcastle disease virus RNA//J. Virol.-1974.-V.13.-261-268.

120. KPL. Newcastle disease Antibody Test Kit: Cataloge №. 54-93-91 -Westbrook.-1995.

121. Kraneveld F.C. A poultry disease in the Dutch East lndies//Ned. Indisch Bl Diergeneeskd.-1926.-V.38.-P.448-450.

122. Lancaster. J.E. Newcastle disease a review 1926-1964. Monograph No 3. Canadian Department of Agriculture.-Ottawa, 1966.

123. Lancaster J.E., Alexander D.J. Newcastle disease: Virus and spread. Monograph No. 11., Canadian Department of Agriculture.-Ottawa, 1975.

124. Levine P.P. World dissemination of Newcastle disease//Newcastle Disease.-Madison, 1964.-P.65-69.

125. Ling, R., Pringle C.R. Turkey rhinotracheitis virus: In vivo and in vitro polypeptide synthesis//J. Gen. Virol.-1988.-V.69.-P.917-923.

126. Lipkind M., Shihmanter E. Antigenic relationships between avian paramyxoviruses. I. Quantitative characteristics based on hemagglutination and neuraminidase inhibition tests//Arch. Virol.-1986.-V.89.-P.89-111.

127. Lipkind M., Shoham D., Shihmanter E. Isolation of a paramyxovirus from pigs in Israel and its antigenic relationships with avian paramyxoviruses//J. Gen. Virol.-1986.-V.67.-P.427-439.

128. Lomniczi B. Termostability of Newcastle disease virus strains of different virulence//Arch. Virol.-1975.-V.47.-P.249-255.

129. Maas R.A., Oei H.L., Venema-Kemper S. e.a. Dose-response effect of inactivated Newcastle disease vaccine: Influence of serologic assay, time after vaccination, and type of chickens//Avian Dis.- 1999.-V.43.-P.670-677.114

130. Makkay A.M., Krell P.J., Nagy E. Antibody detection-based differential ELISA for NDV-infected or vaccinated chickens versus NDV HN-subunit vaccinated chickens/A/et. Microbiol.- 1999.-V.66,№3.-P.209-212.

131. Maldonado A., Arenas A., Tarrados M.C. Prevalence of anribodies of avian paramyxoviruses 1,2,3 in wild and domestic birds in Southern Spain//Avian Pathol.- 1994.-V.23.-P. 145-152.

132. Malkinson. M., Small P.A. Local immunity against Newcastle disease virus in the newly hatched chicken's respiratory tract//lnfect. Immun.-1977.-V.-16.-P.587-592.

133. Mayr A., EiBner G., Mayr-Bibrac B. Newcastle disease//Handbuch der Schutzimpfungen in der Tiermedizin.-Berlin, 1984.-S.520-536.

134. McFerran J.B., McCracken R.M. Newcastle disease//Newcastle Disease.- Boston, 1988.-P.161-183.

135. Melnick J.L. Taxonomy and nomenclature of viruses, 1982//Prog. Med. Virol.-1982.-V.28.-P.208-221.

136. Meulemans G., Gonze M., Carlier M.C. Protective effects of NH and F glycoprotein-specific monoclonal anribodies on experimental Newcastle disease//Avian Pathol.-1986.-V.15,№4.-P.761-768.

137. Meulemans G., Gonze M., Letellier C. e.a. Newcastle disease virus F glycoprotein exspressed from recombinant vaccinia virus vector protects chickens against live virus challenge//Avian Pathol.-1988.-V.17,№4.-P.821-827.

138. Minard E.L., Jungherr E. Neutralisation test with avian pneumoencephalitis virus//Am. J. Vet. Res.-1944.-V.5.-P. 154-157.

139. Mori H., Tawara H., Nakazawa H. e.a. Expression of the Newcastle disease virus (NDV) fusion glycoprotein and vaccination against NDV challenge with recombinant baculovirus//Avian Dis.-1994.-V.38,№4.-P.772-777.

140. Nagi S.A., Karaca K., Bauman B. A monoclonal antibody-based antigen capture ELISA for identification of infectious bronchitis virus serotypes//Avian Pathol.-1993.-V.22.-P.555-564.

141. Nerome K., Nakayama M., Ishida M. e.a. Isolation of new avian paramyxovirus from a budgerigar//J. Gen. Virol.-1978.V.38.-P.293-301.

142. Newcastle disease//B.O.I.E.-1999.-V.111,№1-6.115

143. Newcastle disease//B.C>.I.E.-2000.-V.112,№1-3.

144. Parede L., Young P.L. The pathogenesis of velogenic Newcastle disease virus infection of chickens of different ages and different levels of immunity//Avian Dis.-1990.-V.34.-P.803-808.

145. Parry S.H., Aitken I.D. Local immunity in the respiratory tract of the chicken. 2 The secretory immune response to Newcastle disease virus and the role of IgA/A/et. Microbiol.-1977.-V.2.-P. 143-165.

146. Pearson J.E. Newcastle disease// Russian Poultry Seminar, August 19-22, 1996.

147. Pearson J.E., Senne D.A., Alexander D.J. e.a. Characterization of Newcastle disease virus (avian paramyxovirus-1) isolated from pigeons//Avian Dis.-1987.-V.31.-P.105-111.

148. Polten B.M. Beitrag zur Immunoprofilaxe der Paramyxovirus-1-Infektion derTaube: Veterinarmedizinishe Diss.-Hannover, 1986.

149. Pospisil Z., Zendulkova D., Smid B. Unexpected emergence of Newcastle disease virus in very young chicks//Acta Vet. Brno.-1991.-V.60,-P.263-270.

150. Pringle C.R. Virus Taxonomy-1999//Arch Virol.-1999.-V.144,№2.-P.421-429.

151. Raj G., Thangvrlu A., Govindarajan R. Precipitation reaction with Newcastle disease virus//Trop. Anim. Health Prod.-1995.-V.27,№2.-P.71-75.

152. Raszewska H. Occurence of the La Sota strain NDV in the reproductive tract of laying hens//Bull. Vet. Inst. Pulawy.-1964.-№8.-P. 130-136.

153. Reynolds D.L., Maraqa A.D. Protective immunity against Newcastle disease. The role of antibodies specific to Newcastle disease virus polypeptides//Avian Dis.-2000.-V.44.-P. 138-144.

154. Reynolds D.L., Maraqa A.D. Protective immunity against Newcastle disease. The role of cell-mediated immunity//Avian Dis.-2000.-V.44.-P.145-154.

155. Rice C.E. Studies of pullorun disease. 12. Tehnique of the indirect complement-fixation systems//Canad. J. Com. Med.-1948.-V.12.-P.69-75.116

156. Rice C.E. The use complement-fixation test in the study and diagnosis of viral disease in man and animal- a review. 8. The myxoviruses//Canad. J. Comp. Med.-1961.-V.25.-P.151-156.

157. Rott R. In vitro Differenzierung von genen und apathogenen aviaren Influenzaviren// Berl. Munch, tieraerztl. Wochenschr.-1985.-Bd.98.-S.37-39.

158. Rott R. Molecular aspects of Newcastle disease virus patogenicity// Proc. Workshop on Avian Paramyxoviruses.-Rauischholzhausen, 1992.-P.139-144.

159. Roy P. Venugopalan A.T. Dot-enzime linked immunosorbent assay for demonstration of Newcastle disease virus infection//Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis.- 1999.-V.22,№1.-P.27-31.

160. Russell P.H. Monoclonal antibodies in research, diagnosis and epizootiology of Newcastle disease//Newcastle Disease.-Boston, 1988.-P.131-146.

161. Russell P.H. Newcastle disease virus: Virus replication in the Harderian gland stimulates lacrimal IgA; the yolk sac provides early lacrimal IgG/A/et. Immunol. lmmunopathol.-1993.-V.37.-P.151-163.

162. Russell P.H., Ezeifeka G.O. The Hitchner B1 strain of Newcastle disease virus induces high levels IgA, IgG and IgM in newly hatched chicks/A/accine.-1995.-V. 113.-P.61 -66.

163. Russell P.H., Koch G. Local antibody forming cell responses to the Hitchner Bl and Ulstef strains of Newcastle disease virus/A/et Immunol lmmunopathol.-1993.-V.37.-P.165-180.

164. Samberg Y., Nadash D.U., Perelman B., Meroz M. Newcastle disease in ostriches (Struthio camelus): field case and experimental infection//Avian Pathol.-1989.-V.18.-P.221-226.

165. Samson A.C.R. Virus structure//Newcastle Disease.-Dordrecht, 1987.-P.23-44.

166. Schmidt U. Die Geflugelpest//Handburg der Virusinfektionen bei Tieren. Hrsg. H. Rohrer.-Jena, 1968.-Bd.lll/1.-P.283-437.117

167. Schmidt U., Bindrich H. Zur Frage der Ausscheidung und vermrhrung des virus des atypischen Geflugelpest nach Inrektion immuner Huhner//Arch. exp. Vet. Med.-1956.-Bd. 10.-S.649-660.

168. Sever J.L. Application of a microtechnique to viral serological investigation//! lmmun.-1962.-V.88.-P.320-329.

169. Smit T., Rondhuis P.R. Studies on a virus isolated from the brain of a parakeet (Neophema sp)//Avian Pathol.-1976.-V.5.-P.21-30.

170. Snyder D.B., Marguardt W.W. Laboratory manual for isolation and identification of avian pathogens/Am. Ass. of Avian Pathol.-1989.-P. 161-170.

171. Spradbrow P.B. Geographical distribution//Newcastle Disease.-Boston, 1988.-P.247-255.

172. Stegny B.T., Nalivaiko L.I., Shomin A.A., Yu I. Studing of epizootic situation on egg-drop-syndrome (EDS-76) in Ukraine//11th Int. Congr. World Vet. Poultry Ass.: Abstr. -Budapest, Hungary, 1997.-P.248.

173. Stones P.B. Self injection of veterinary oil-emulsion vaccines//Brit. Med. J.-1979.-№1 .-P.1627.

174. Timms L., Alexander D.J. Cell-mediated immune response of chickens to Newcastle disease vaccines//Avian Pathol.- 1977.-№6.-P.51-59.

175. Tisdall D.J. Newcastle disease//Surveillance.-1992.-V.15.-P.26-27.

176. Tumova B., Robinson J.H., Easterday B.S. A hitherto unreported paramyxovirus of turkeys//Res. Vet. Sci.-1979.-V.27.-P. 135-140.118

177. Tumova B., Stumpa A., Janout V. e.a. A further memeber of the Yucaipa group isolated from the common wren (Troglodytes trog!odytes)//Acta Virol.-1979.-V.23.-P.504-507.

178. Utterback W.W., Schwartz J.H. Epizootology of velogenic viscerotropic Newcastle disease in southern California, 1971-1973//J. Am. Vet. Med. Ass.-1973.-V.163.-P.1080-1090.

179. Villegares P. Avian virus disease. Laboratory Manual//College of Veterinary Medicine, Athens, Georgia, 1995.-P.89.

180. Wachendörfler G. Präzipitinogen und präzipitierende Anticörper bei der Newcastle-Krankheit//Deutsche tierärztliche Wochenschrift.-1965.-Bd.72.-S.176-180.

181. Walker J.W., Heron B.R., Mixson M.A. Exotic Newcastle disease eradication program in the United States of America//Avian Dis.- 1973.-V.17,-P.486-503.

182. Wilcox G.E., Consigli R.A. Complement-fixation test for detection of viral antibodies in chicken serum. I. Standartization of the test for Newcastle disease virus and polyoma virus//Avian Dis.-1972.-V16,№5.-P. 1011-1018.

183. Wilcox G.E., Consigli R.A. Complement-fixation test for detection of viral antibodies in chicken serum. 2. Immunologic response in chicken following experimental infection with Newcastle disease virus //Avian Dis.-1972.-V16,№5,-P.1019-1028.

184. Williams J.E., Dillard L.H. Penetration patterns of Mycoplasma gallisepticum and Newcastle disease virus through the outer structures of chicken eggs//Avian Dis.-1968.-V.12.-P.650-657.

185. Williams R., Boshoff Ch.H., Verwoerd D. e.a., Detection of antibodies to Newcastle disease virus in ostriches by an indirect ELISA//Avian Dis.-1997.-V.41 ,№4.-P.864-869.

186. Wilson R.A., Perrotta J., Eckroade R.J. An ELISA that measures protective antibody levels to Newcastle disease virus in chicken//Avian Dis.-1984.-V.28,№4-P. 1079-1085.119

187. Winslow N.S., Hanson R.P., Upton E., Brandly C.A. Agglutination of mammalian erythrocytes by Newcastle disease virus//Proc. Soc. Exp. Biol.-1950.-V.74.-P. 174-178.

188. Uslanoglu B. Comparison of the antibody titres obtained by different serological methods (HI, gel precipitation, ELISA) in hens vaccinated against egg drop syndrome -1976 (EDS-76)//Turk Vet. Hayvanci. Dergisi.-1990.-V.14,№1.-P. 112-125.

189. Zeydanli M.M., Redmann T., Kaleta E.F., Alexander D.J. Isolierung und Charakterisierung von Paramyxoviren aus Puten//Seminar über Isolierung und Characterisiezurung von aviären Paramyxoviren.-Gießen, 1989.-S.26-33.1. КОПИЯ

190. На №-------------------------------------------1. ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕпо применению набора для выявления антител к возбудителю ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации

191. РТГА) (в порядке широких производственных испытаний в 1999-2000 гг.)1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

192. Набор предназначен для определения специфических антител к вирусу ньюкаслской болезни (НБ) в сыворотках крови кур в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) в микроварианте.

193. Сущность метода основана на способности сывороток крови кур, содержащих специфические антитела, тормозить гемагглютинирующую активность антигена (вируса) НБ.

194. Для исследования в лабораторию доставляют из птицехозяйств сыворотки кур от 20-25 голов (по 0,2-0,3 см3). Пробы сывороток хранят при температуре минус 20 0 С в течении 50-60 дней, при температуре 4 0 С - не более 4-х дней.

195. Компоненты набора расфасованы во флаконы, которые закрыты резиновыми пробками и обкатаны алюминиевыми колпачками.

196. На флаконе должна быть этикетка с обозначением названия препарата, объема, номера серии и контроля, условий хранения, даты изготовления (месяц, год), срока годности, обозначения ТУ.

197. Флаконы без этикеток, с нарушенной укупоркой, содержащие посторонную примесь, плесень, не разбивающиеся при встряхивании хлопья обеззараживают кипячением в течение 30 мин и утилизируют.

198. МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (Минсельхозпрод России)

199. ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ 107139, Москва, Орликов пер., 1/11 " " 199 г.1. Телетайп: Телефонна №417738 ЛЕН 207 86 55-7-2/1940еливерстов ООО г.от

200. ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ по применению набора для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни иммуноферментным методом при тестировании сывороток в одном разведении (в порядке широких производственных испытаний в 2000-2002 г.г.)1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

201. Набор предназначен для определения специфических гуморальных антител против вируса ньюкаслской болезни (НБ) в сыворотках крови кур иммуноферментным методом (ИФА) при исследовании в одном разведении.

202. Набор включает следующие компоненты.

203. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

204. Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных10 от И- 0.9 2000г.

205. О проведении опыта по комиссионной проверке методических указаний по выявлению и определению активности антигена вируса НБ в непрямом сэндвич-варианте иммуноферментного анализа

206. Основание: приказ директора института от 14.09.00 №150.

207. Составлен комиссией в составе:

208. Кожаева Г.И.- председатель комиссии, старший научный сотрудник, кандидат биологических наук,

209. Евсеев A.M.- старший научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук,

210. Мудрак Н.С.- ведущий научный сотрудник, кандидат биологических наук,

211. Прунтова О.В.- старший научный сотрудник, кандидат биологических наук,1. Манин Т.Б.-аспирант.