Усовершенствование метода культуры пыльников для использования в селекционном процессе капусты (Brassica oleracea L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Давыдова, Наталья Николаевна

• Давыдова, Наталья Николаевна
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Давыдова, Наталья Николаевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.:.

1. ГАПЛОИДИЯ. КУЛЬТУРА ПЫЛЬНИКОВ КАК ОДИН ИЗ СПОСОБОВ ПОЛУЧЕНИЯ ГАПЛОИДНЫХ РАСТЕНИЙ.

1.1. Гаплоидия, ее значение для селекции. Получение гаплоидных растении in vitro.

1.2. Культура пыльников капусты Brassica oleraceae

1.3. Строение пыльника in vivo у капусты. Стадия развития мужского гаметофита. ^

1.4. Влияние различных факторов на морфогенез капусты {Brassica oleraceae L) в культуре пыльников. ^

1.4.1. Влияние вида, разновидности, сорта донорного растения на выход андроклинных структур в культуре пыльников.

1.4.2. Условия выращивания донорных растений капусты.

1.4.3. Влияние стадии развития микроспоры капусты на андроклинную активность в культуре пыльников.

1.4.4. Влияние различных условий предобработки эксплантов на морфогенез в культуре in vitro.

1.4.5. Влияние минерального состава питательной среды на морфогенез капусты в культуре пыльников.

1.4.6. Роль регуляторов роста в индукции морфогенеза в культуре пыльников капусты.

1.4.7. Культивирование пыльников в культуре in vitro.

2 УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, СХЕМЫ И

МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ОПЫТОВ.

2.1. Цель, задачи и схема исследований.

2.2. Условия проведения исследований.

2.3. Материал и методика проведения исследований.

2.3.1. Исходный материал.

2.3.2. Методика лабораторных опытов.

2.3.3. Проведение оценки исходного и полученного в ходе исследова- 50 ний материала.

2.3.4. Методы выращивания донорных растений.

3.УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА КУЛЬТУРЫ ПЫЛЬНИКОВ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОМ ПРОЦЕССЕ КАПУСТЫ (Brassica oleracea L).

3.1. Оптимизация режимов стерелизации исходного материала капусты.

3.2. Изучение влияния стадии развития микроспор капусты на индукцию каллу со- и эмбриогенеза в культуре in ^ vitro.

3.2.1. Определение зависимости стадии развития микроспор от длины бутона.

3.2.2. Влияние стадии развития микроспор на индукцию каллу со- и эмбриогенеза в культуре пыльников капусты белокочанной. ^

3.3. Особенности культуры пыльников капусты в зависимости от состава питательной среды.

3.4. Выявление эффективной питательной среды для культивирования капусты в культуре пыльников. ^g

3.5. Зависимость каллусо- и геммогенеза капусты в культуре пыльников от содержания регуляторов роста в питательной среде.

3.6. Особенности каллусо- и геммо-, ризогенеза в культуре пыльников капусты в зависимости от концентрации сахарозы в питательной среде.

3.7. Влияние обработки бутонов капусты на каллусо- и геммогенез в культуре пыльникрв.

3.8. Влияние наночастиц серебра в питательной среде на каллусо- и геммогенез капусты в условиях in vitro.

3.9. Совместное влияние наночастиц серебра и аскорбиновой кислоты на каллусо- и геммогенез капусты в культуре пыльников.

3.10. Получение растений-регенерантов капусты в культуре пыльни

3.11. Оценка растений-регенерантов Ro капусты белокочанной, полученных в культуре пыльников.

3.11.1. Изучение растений-регенерантов Ro, полученных в культуре пыльников с помощью RAPD -анализа.

3.11.2. Оценка растений - регенерантов Ro капусты белокочанной по количеству хлоропластов в замыкающих клетках устьиц.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Усовершенствование метода культуры пыльников для использования в селекционном процессе капусты (Brassica oleracea L.)»

Одна из основных задач сельскохозяйственного производства — обеспечение населения свежей овощной продукцией в течение года. Важная роль в выполнении этой задачи отводится одной из главных возделываемых в Р.Ф. овощной культуре - капусте. Капуста — универсальная культура, широкому распространению которой способствовали ее ценные хозяйственные свойства: высокая урожайность, наличие большого сортового разнообразия различной скороспелости, а также лежкоспособность используемых органов, что позволяет иметь свежую продукцию в течение почти круглого года. Биологические особенности капусты обуславливают возделывание ее на всей территории страны. Капуста имеет ценный химический состав, является источником минеральных элементов, аскорбиновой кислоты и ряда других витаминов, а также значительного количества азотистых и биологически активных веществ (Лизгунова Т.В., 1984).

В настоящее время актуальным стало использование технологий, сортов и гибридов, приводящих к получению высокой выровненности, товарности, урожайности. В этом отношении гетерозисные гибриды выгодно отличаются по сравнению с сортами, поэтому создание гетерозисных гибридов является приоритетным направлением (Литвинов С.С., 2003). Селекционный процесс при выведении гетерозисных гибридов отличается большой сложностью получения исходных самонесовместимых линий и включает 2 этапа:

1 - выделение самонесовместимых растений, их самоопыление и оценку уровня самонесовместимости, идентификация аллелей с выделением гомозиготных растений;

2 - определение комбинационной способности путем скрещиваний линий между собой.

В связи с тем, что процесс производства константных линий основан на гибридизации с последующим многократным отбором, использование ин-фекционно-провокационных фонов, для оценки материала на устойчивость к стрессовым факторам среды, вследствии этого он достаточно трудоемок и занимает длительное время.

Для сокращения периода создания генетически константного селекционного материала (линий) используют гаплоиды. На основе гаплоидов путем удвоения числа хромосом можно за 1-2 поколения создать гомозиготные линии, в то время как при традиционных способах селекции у капусты на это затрачивается до 10 и более лет.

Одним из перспективных методов получения гаплоидов является культура пыльников (Хотылева JT.B., Ермишин А.П., 1988). В настоящее время разработаны способы получения гаплоидных растений моркови (Тюкавин Г.Б., 2007), томата (Кучковская Е.В, 2003), лука (Шмыкова Н.Н., 2006), льна (Поляков А.В., 2000) и других культур.

Исследования по получению гаплоидных растений у представителей рода Brassica ведутся в Японии (Kuginyki Y.,1997), Польше (Гурецка К., 1998), России (Семова Н.Ю., 1992; Домблидес Е.А., 2001; Шмыкова Н.А., 2006). Однако факторы, от которых зависит эффективность пыльцевого эмбриогенеза, еще недостаточно изучены. В связи с этим актуальными проблемами повышения эффективности метода культуры пыльников являются выявление сортов, гибридов, линий, обладающих повышенной андроклинной способностью, определение длины бутона на момент изоляции пыльников при которой микроспоры являются морфогенными, режим их стерилизации и состав питательной среды для их культивирования.

Объект исследований - метод культуры пыльников капусты белокочанной, цветной и брокколи.

Предмет исследований — бутоны и пыльники, капуста белокочанная, цветная и брокколи.

Научная новизна работы. В результате проведенных исследований усовершенствован метод культуры пыльников, заключающийся в установлении оптимальной длины бутона капусты белокочанной — 5-6 мм, капусты цветной и брокколи - 4-5 мм, при которой микроспоры обладают морфогенетической активностью, выявлена оптимальная питательная среда MS, содержащая 6-БАП в концентрации 1 мг/л, а- НУК 1 мг/л, сахарозу 140 г/л для эффективного культивирования пыльников капусты белокочанной, цветной в условиях in vitro. Впервые показана высокая эффективность использования предобработки бутонов капусты белокочанной и цветной 1%-ным раствором аскорбиновой кислоты, уточнен режим стерилизации бутонов капусты белокочанной с использованием гипохлорита Na в концентрации 1,0% и экспозиции 10 минут. Проведена оценка с помощью RAPD-анализа растений - регенерантов, при которой установлена их генетическая неоднородность. Практическая ценность работы состоит в том, что выделены линии капусты белокочанной - 222, цветной - сорт Дачница, брокколи - сорта Амбро 12, Амбро 34, характеризующиеся повышенной способностью к андроклинии. Установлена питательная среда MS, содержащая 6-БАП в концентрации 1 мг/л, а - НУК 1 мг/л, сахарозу 140 г/л для культивирования пыльников капусты белокочанной, цветной в условиях in vitro, уточнен режим стерилизации бутонов, разработан способ предобработки бутонов капусты белокочанной и цветной, позволяющий получить в зависимости от вида капусты от 13,3% до 23,3% геммогенных эксплантов, получены растения-регенеранты в культуре пыльников капусты.

Обоснование и достоверность научных положений. Исследования выполнены по методикам, рекомендованным научными учреждениями нашей страны. Все выводы и предложения подтверждены экспериментальными исследованиями, статистической обработкой полученных данных.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на Международной научно - практической конференции "Биотехнология овощных, цветочных и малораспространенных культур" (Москва, 2004), III Московском международном конгрессе "Биотехнология: состояние и перспективы развития" (Москва, 2005), III Российской научно-практической конференции "Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов" (Москва, 2005). Научнопрактической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов РГАУ им. П.А. Костычева (Рязань, 2007).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

-усовершенствованный метод культуры пыльников капусты {Brassica olerasea L.), включающий:

• режим стерилизации бутонов;

• оптимальную длину бутона для введения пыльников in vitro',

• линии, сорта капусты, характеризующиеся высокой андроклинной способностью;

• предобработку бутонов аскорбиновой кислотой и наночастицами;

• модифицированную питательную среду для культивирования пыльников в условиях in vitro',

- растения-регенеранты, полученные в культуре пыльников.

Публикации результатов исследований

По результатам исследований по теме диссертации опубликовано 5 работы, в т.ч. одна в журнале «Картофель и овощи», рекомендованном ВАК РФ.

1. Ананьина, Н.Н. Культура пыльников капусты белокочанной {Brassica oleraceae L.): обзор. /Н.Н. Ананьина, А.В. Поляков //Сб. науч. трудов международной научно-практической конференции "Биотехнология овощных, цветочных и малораспространенных культур" (22-25 марта 2004 г.). - М.: ГНУ ВНИИО, 2004.- С. 122-127.

2. Ананьина, Н.Н. Получение регенерантов сельдерейных (Apiaceae), тыквенных {Cucurbitaceae), капустных (Brassicaceae) и ряда цветочных культур in vitro /А.В. Поляков, И.И. Тарасенков, О.И. Федоришина, А.А. Ткачева, О.В. Ильченко, Н.Н. Ананьина, Н.Н. Лебедева, М.И. Иванова, Т.В. Ларионова, И.Н. Боровикова /ЯП Московский международный конгресс

Биотехнология: состояние и перспективы развития". - Москва (14 - 18 марта 2005 г.), 2005. - С. 286-287.

Ananina, N.N. Obtaining regenerants of Apiaceae, Cucurbitaceae, Brassicaceae and some flower crops in vitro /A.V. Poliakov, I.I. Tarasenkov, O.I. Fedorishyna, A.A. Tkacheva, O.V. Ilchenko, N.N. Ananina, N.N. Lebedeva, M.I. Ivanova, T.V. Larionova, I.N. Borovikova /ЯП Moscow International Congress "Biotechnology: state of the art and'prospects of development".- Moscow (March, 14-18, 2005), 2005. - P. 286-287.

3. Ананьина, H.H. Влияние размера бутонов и питательных сред на морфогенез капусты белокочанной в культуре пыльников. /Н!Н. Ананьина,

А.В. Поляков, И.И. Тарасенков, И.Н. Боровикова /ЯП Российская научно

1 / практическая конференция «Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания, функциональных продуктов». -Москва: РАЕН, (6-7 июня 2005 г.), 2005. - С. 58-59.

4. Давыдова, Н.Н. Аскорбиновая кислота повышает регенерацион-ную активность пыльцы. /Н.Н. Давыдова // Картофель и овощи. - 2007. - № 6.-С.31.

5. Ананьина, Н.Н. Изучение влияния сочетаний регуляторовфоста на каллусогенез и регенерационную способность капусты белокочанной (Brassica oleraceae L) в культуре пыльников. /Н.Н. Ананьина, А.В. Поляков, Г.А. Костенко, И:А. Стажарова //Сб. науч. трудов профессорско-преподовательского состава и аспирантов РГАУ им. П.А. Костычева. - Рязань, 2008 - С. 25-30

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованой литературы, содержащего 169 наименований, в том числе 88 иностранных авторов, и 81 отечественных авторов. Диссертационная'работа изложена на 124 страницах, иллюстрирована 15 таблицами, 22 рисунками и 7 приложениями.

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Давыдова, Наталья Николаевна

выводы

1. Выявлены линии и сорта капусты, характеризующиеся наибольшим андроклинным потенциалом: у капусты белокочанной - линия 222, у цветной - сорт Дачница, у брокколи - Амбро 12, Амбро 34, у которых доля геммогенных пыльников соответственно составляет: 5,2 %, 13,3%, 8,9 %.

2. Длина бутона, при которой микроспоры преимущественно находятся на поздней одноядерной стадии развития у капусты белокочанной составляет от 5 до 6 мм, цветной и брокколи - от 4 до 5 мм.

3. Стерилизация бутонов капусты белокочанной, цветной и брокколи гипохлоритом натрия в концентрации 1,0 % и экспозиции 10 мин. позволяет получить 62,8% стерильных морфогенных эксплантов капусты белокочанной, 64,4% капусты цветной и 66,6 % брокколи.

4. Культивирование пыльников на среде MS, содержащей 6-БАП в концентрации 1 мг/л, а-НУК - 1 мг/л и 140 г/л сахарозы сопровождается индуцированием геммогенеза у 5,0 - 6,0 % эксплантов капусты белокочанной и 10,0 % - 11,7 % капусты цветной.

5. Предобработка бутонов аскорбиновой кислотой в концентрации 1 % и последующее культивирование пыльников на среде MS, содержащей наночастицы серебра в концентрации 0,4 мМ сопровождается индуцированием геммогенеза у капусты белокочанной (до 10,0 %) и цветной (до 20,0 %).

6. Предобработка бутонов аскорбиновой кислотой в концентрации 1 % позволяет получать до 13,3 % геммогенных пыльников капусты белокочанной. Обработка бутонов аскорбиновой кислотой в концентрации 1% и наночастицами серебра в концентрации 0,4 мМ позволяет получать до 23,3 % геммогенных пыльников капусты цветной.

7. Культивирование почек и побегов капусты белокочанной на среде MS, содержащей 60 г/л сахарозы, 3 мг/л 6-БАП 2 мг/л а-НУК сопровождается дальнейшим их ростом и образованием полноценных растений-регенерантов.

8. Использование праймера Paw S5 при проведении RAPD-анализа позволяет выявить гетерогенность в спектрах ДНК андроклинных растений. Обнаруженное снижение полиморфизма в ДНК-профилях у некоторых растений-регенерантов свидетельствует о их большей генетической однородности по сравнению с исходным образцом.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ

ПРАКТИКЕ

С целью получения андроклинных растений капусты рекомендуется:

1. Использовать линию 222 капусты белокочанной, сорт Дачница капусты цветной и Амбро 34, Амбро 12 брокколи, характеризующихся в культуре пыльников повышенной морфогенетической активностью;

2. Для введения пыльников в культуру in vitro:

• стерилизацию необходимо осуществлять гипохлоритом натрия в концентрации 1,0% и экспозиции 10 минут;

• использовать бутоны длиной 5-6 мм у капусты белокочанной и 4-5 мм у цветной и брокколи;

• проводить предобработку пыльников аскорбиновой кислотой в концентрации 1%;

3. Для культивирования пыльников капусты белокочанной и цветной использовать питательную среду MS, содержащую 6-БАП в концентрации 1 мг/л и а-НУК - 1 мг/л, сахарозу - 140 г/л и агар - 7 г/л, с добавлением 0,4 .i/Af-ного раствора наночастиц серебра;

4. Для клонального микроразмножения полученных почек в культуре пыльников использовать питательную среду MS, содержащую 6-БАП в концентрации 3 мг/л и а-НУК - 2 мг/л, сахарозу 60 г/л и агар - 7 г/л.

5. Для оценки полученных растений — регенерантов в культуре пыльников использовать ПНР - анализ (праймер Paw S5) и подсчет числа хлоропластов в замыкающих клетках устьиц.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время при выращивании капусты наиболее актуальным стало использование гетерозисных гибридов, в сравнении с сортами применение которых увеличивает урожайность, обеспечивает выравненность кочанов, устойчивость к стрессовым условиям среды и т.д. Вследствие этого, одной из важнейших задач селекционной работы является получение генетически стабильных линий в качестве исходного материала для получения гетерозисных гибридов. Вовлечение в селекционную работу биотехнологических приемов, в частности метода культуры пыльников, позволяет сокращать сроки получения константных гомозиготных линий и, тем самым, облегчает и ускоряет селекционный процесс.

В результате проведенных исследований по изучению различных факторов, влияющих на выход андроклинных растений в культуре пыльников: капусты белокочанной, цветной и брокколи:

• выявлены линии, и сорта обладающие наибольшей способностью к андроклинии в культуре пыльников у капусты белокочанной - линия 222, у капусты цветной - сорт Дачница, у брокколи сорт - Амбро 34, Амбро 12;

• определен оптимальный режим стерилизации растительного материала гипохлоритом натрия (концентрация 1,0% и экспозиция 10 минут);

• определена оптимальная длина (4-5 мм) бутона для введения пыльников капусты цветной, брокколи и капусты белокочанной 5-6 мм в культуру in vitro;

• предложена предобработка бутонов 1%-ным раствором аскорбиновой кислоты для введения эксплантов в культуру пыльников;

• оптимизирована питательная среда для культивирования эксплантов (MS, содержащей 140 г/л сахарозы, 1 мг/л 6-БАП 1 мг/л а-НУК) и трансплантов капусты - (MS, содержащей 60 г/л сахарозы, 3 мг/л 6-БАП, 2 мг/л а-НУК).

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Давыдова, Наталья Николаевна, 2008 год

1. Анапияев, Б. Б. Гаплоидная биотехнология и перспективы её использования в генетической инженерии растений /Б.Б. Анапияев //Изучение генома и генетической трансформации растений.- Новосибирск, 2001-С. 174-184.

2. Атанасов, А. Биотехнология в растениеводстве /А. Атанасов Новосибирск: Институт цитологии и генетики СО РАН, 1993.- 241с.

3. Батыгина, Т.Б. Проблемы морфогенеза in vivo и in vitro. Эмбриогенез у покрытосеменных растений. /Т.Б. Батыгина, В.А. Васильева, Т.Б. Маметьева. //Бот. Журн.69, №1, 1978. С.- 32-34.

4. Бельская, Г.Б. Получение гаплоидов белокочанной капусты с помощью культуры пыльников для создания гетерозисных гибридов интенсивного типа /Г.Б. Бельская, Т.В. Семашко //Проблемы селекции овощных культур, Минск. 1997. С. 17-20.

5. Бобков, С.В. Влияние температурного стресса на эффективность кал-лусогенеза в культуре пыльников проса и гороха /С.В. Бобков //III Московском международном конгрессе "Биотехнология: состояние и перспективы развития". Москва, 2005. - С.231.

6. Бунин, М.С. Методы репродуктивной биологии в селекции овощных культур рода Brassica L /М.С. Бунин. М.- 2003. 28с.

7. Бунин, М.С. Использование биотехнологических методов для получения исходного селекционного материала капусты. /М.С. Бунин, Н.А. Шмыкова. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2004. - 44с.

8. Бутенко, Р.Г. Культура изолированных тканей как метод изучения процессов роста и морфогенеза растений. М.: Наука. - 1964. - С.256

9. Внучкова, В.А. Оптимизация условий получения гаплоидов пшеницы при посадке пыльников /В.А. Внучкова, Т.М. Чеботарева // Докл. ВАСХНИЛ. 1990. - №5.-С.6-9

10. Высоцкий, В.А. Клональное микроразмножение растений / В.А. Вы-соцский // Культура клеток растений и биотехнология. — М.: Наука, 1986.- С. 91-102.

11. Гамбург, К.З. Ауксины в культурах тканей и клеток растений. /К.З. Гамборг, Н.И. Рекославская, С.Г. Швецов Новосибирск, 1990.- 243с.

12. Гуляев, Г.В. Словарь терминов по генетике, цитологии, селекции, семеноводству и семеноведению. /Г.В. Гуляев, В.В. Мальченко. — М.: Россельхозиздат, 1975.-С. 184.

13. Гурецка, К. Получение гомозиготных линий капусты белокочанной (Brasica oleracea L, var capitata L.) через культуру пыльников /К. Гурецка, Скерневицы, 1998. - 71с.

14. Данвелл, Д.М. Культура гаплоидных клеток /Пер. с анг. под ред. Р.Г. Бутенко //Биотехнология растений: культура клеток.- М.: Агропром-издат, 1989. С.33-51.

15. Дворядкина, А.Г. Гаплоидия у клещевины как метод создания гомозиготных форм в целях селекции: Автореф. дис .канд биол. наук. -/ВНИИМК.-Краснодар, 1972.-25 с.

16. Домблидес, Е. А. Разработка методов индукции андрогенеза у различных видов капуст: Автореф. дис. канд. с.-х. н. /ВНИИССОК1. М., 2001.-18с.

17. Домблидес, Е.А. Развитие пыльников капусты брокколи in vivo и при культивировании in vitro. /Е.А. Домблидес, Н.А. Шмыкова. //Сб. науч. труд. Всероссийский НИИ селекции и семеноводства овощных культур.- 2002 г.- Выпуск 37.- С. 82-92.

18. Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта / под ред. Б.А. Доспехова -М.: Агропромиздат, 1985.

19. Ермаков, А.И. Биохимия льна. В кн.: Биохимия культурных растений./А.И Ермаков. - Сельхозгиз, 1972. - Т. 3. - С. 67-132.

20. Жамбакин, К.Ж. Гаплоидная биотехнология растений. /К.Ж Жамба-кин -Алматы, 2004.-186с.

21. Жуковский, П.М. Ботаника / П.М.Жуковский. Москва. - «Советская наука», 1949. - 552с.

22. Заячковская, Т.В. Оценка исходного материала вида Raphanus sativus L. с использованием методов репродуктивной биологии для селекции на гетерозис: автореферат на соискание к.с.-х.н. М. 2005. 26с.

23. Калинин, Ф.П. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений /Ф.П. Калинин, В.В. Сарнацкая, В.Е. Полищук. Киев. -Наук, думка, 1980. - 488с.

24. Киселев, Н.С., Шелухин, Н.В. Атлас по анатомии растений, /под ред. С.В. Калишевича.- Минск: Вышэйшая школа, 1969.- 288с.

25. Круглова, Н.Н. Эмбриологические основы метода культуры пыльников пшеницы, как биотехнологического приема. /Н.Н. Круглова //В кн.: II съезд ВОГИС (1-5 февраля 2000 г.). Тез. докл. С.-П., 2000,т.1, c.151

26. Круглова, Н.Н. Пыльник in vitro как модель для изучения путей морфогенеза растений in vivo /Н.Н Круглова //The Biology of Plant Cells in vitro and Biotechnology- Саратов.: Сарат. губерн. торгово-промыш. Палаты, 2003. 160с.

27. Кучковская, Е.В. Влияние уровня плоидности на морфометрические показатели вегетативной и генеративной сфер томата. — Автореф. дисс.канд. биолог, наук, 2003. 20с.

28. Лаврова, Н.В. Технологические аспекты создания андрогенных гаплоидов озимой мягкой пшеницы /Н.В.Лаврова: М., ФГОУ ВПО РГАУ -МСХА им. К.А. Тимирязева, 2006. 124с.

29. Лизгунова, Т.В. Культурная флора СССР. /Т.В. Лизгунова. Т.П. Капуста. — Л.: Колос. Ленингр. Отд. 1984. С.5

30. Литвинов, С.С. Овощеводство России и его научное обеспечение (состояние, приоритеты, перспективы). М.: ВНИИО, 2003. - 35с.

31. Лутова, Л.А. Биотехнология высших растений: Учебник /Л.А. Лутова. Из-во: С-Петербург, 2003. 228с.

32. Маруненко, И.М. Каллусогенез и эмбриогенез в культуре пыльников картофеля /И.М. Маруненко, А.А. Кучко //Цитолог, и генет. 1989 -Т.23 №3. С. 48-51.

33. Методы культуры тканей и органов в селекции растений (Методические рекомендации). Одесса: ВСГИ, 1980. -21с.

34. Методические указания по цитологической и цитоэмбриологической технике (для исследования культурных растений). JL: ВИР, 1981. -28 с.

35. Методика опытного дела в овощеводстве и бахчеводстве /под ред. В.Ф. Велика. М.: Агропромиздат, 1992. - 319с.

36. Методика полевых и вегетационных опытов с гербицидами и удобрениями. М.: Наука, 1967. - С. 125-139.

37. Методические рекомендации: Получение растений огурца с повышенной устойчивостью к фузариозному увяданию методами in vitro /А.В. Поляков, А.А. Ткачева, И.И. Тарасенков, Н.К. Бирюкова. ГНУ ВНИИО Россельхозакадемии, М. 2006. 28с.

38. Муромцев, Г.С. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. /Г.С. Муромцев, Р.Г. Бутенко, Т.И. Тихоненко. М.: Наука, 1990.- 176с.

39. Ницше, В. Гаплоиды в селекции растений. /В. Ницше, Г. Венцель -М.: Колос, 1980.- 128с.

40. Павлов, А.В. Влияние различных концентраций серебра на микроразмножение земляники in vitro /А.В. Павлов, В.М. Плащев //The Biology of Plant Cells in vitro and Biotechnology Саратов.: Сарат. гу-берн. торгово-промыш. Палаты, 2003. С.243.

41. Подвигина, О.А. Теоретическое обоснование и приемы использования методов биотехнологии в селекции сахарной свеклы: Автореф. дис. доктр. с.-х. н. /Воронеж. 2003. 44с.

42. Полевой, В.В. Физиология растений: Учебник для биологических специальностей вузов./В.В. Полевой М.: Высш. шк., 1989. - С. 244379.

43. Половые клетки и оплодотворение у покрытосеменных и водорослей. /В.П. Банникова, О.А. Хведынич, С.П. Шпилевская и др. Киев: Наук. Думка, 1985. - С.6 - 54.

44. Попов, Ю.Г. Способ размножения древесных растений / Ю.Г. Попов, В.Г. Трушечкин, В.А. Высоцкий //Автор, свид-во №626728 БИ -1978.

45. Поляков, А.В. Усовершенствование селекционного процесса льна-долгунца (Linum usitatissimum L.) на основе использования биотехнологических методов: Автореф. дисс. д-ра биол. Наук / РАСХН, 1998. 50 с.

46. Поляков, А.В. Биотехнология в селекции льна. /А.В. Поляков Тверь, 2000 - С.78-95.

47. Поляков, А.В. Получение регенерантов овощных культур и их размножение in vitro /А.В. Поляков //Методические рекомендации: ГНУ ВНИИО Россельхозакадемия, 2005. 35с.

48. Попадьин, П.В. Применение агробактериальной трансформации в селекции белокочанной капусты на устойчивость к болезням: Автореф. дис. канд. биолог. Наук //М.: МСХА, 2002. 24с.

49. Приходько, Н.И. Влияние условий выращивания донорных растений на андрогенез в культуре пыльников пшеницы {Triticum acstivum L.) /Н.И. Приходько //Сб. Науч. по прикл. бот., генет. и селекции (ВНИИ растениеводства). 1989. -Вып 128. - С. 86-89.

50. Пухальский, В.А. Цитология и цитогенетика растений /В.А. Пухаль-ский, А.А. Соловьев, В.Н. Юрцев. М.: Издат-во МСХА, 2004. 118с.

51. Рахинбаев, И.Р. Биотехнология зерновых культур. /И.Р. Рахинбаев, Ж. Тивари, Н.К. Бишимбаева, С.В. Кушнаренко, Е.Д. Азимов. Алма-ата: Гылым, -1992. С.- 40.

52. Ревина, А.А. Синтез и свойства стабильных наночастиц металлов /А.А. Ревина //Наночастицы в природе. Нанотехнологии их создание в приложение к биологическим системам: Материалы 1-ого научно-методологического семинара. -М.: РАЕН-МААНОИ, 2003. С.61-68.

53. Резникова, С.А. Цитология и физиология развивающегося пыльника. /С.А. Резникова. М.: Наука, 1984.- 272с.

54. Резникова, С.А. Мейоз в культуре изолированных пыльников /С. А. Резникова, Ю.Ф.Богданов//Генетика. 1972.- 8 №9. С.30-41.

55. Ригер, Р. Генетический и цитогенетический словарь. /Р. Ригер, А. Михаэлис. Москва, 1967. - С. 219.

56. Романов, И.Д. Особенности развития пыльцы злаков и значение их для некоторых генетических исследований /И.Д. Романов //Генетика. 1970. Т.6.- №10.- С.11-25.

57. Селиванов, А.С. Гаплоидия и селекция. /А.С. Селиванов, B.C. Тыр-нов. М.: Наука, 1976. С.77-87.

58. Сельскохозяйственная биотехнология: Учеб. /B.C. Шевелуха, Е.А. Калашникова, С.В. Дягтерев и др.: под ред. B.C. Шевелухи //М.: Высшая Школа, 1998. С.69-70.

59. Семова, Н.Ю. Разработка лабораторной технологии получения андрогенных растений белокочанной капусты с использованием культуры пыльников: Автореф. дис. канд. с.-х. н. /ВНИИССОК.1. М.: 1992 -20с.

60. Семова, Н.Ю. Андрогенез in vitro и получение гаплоидных растений белокочанной капусты с помощью культуры пыльников /Н.Ю. Семова, Л.А. Ушакова //Докл. ВАСХНИЛ. -1993 С. 168.

61. Справочник по климату СССР. 1964. - Вып.8. - 4.2.

62. Таганов, Б.О. Разработка лабораторной технологии получения андро-генных растений моркови in vitro.: Автореф. дис. к. с.-х. н. /ВНИИС-СОК.- М.:1991. 10с.

63. Тюкавин, Г.Б. Биотехнологические основы селекционной технологии моркови (Daucus carota L.)\ Автореф. дис. докт. биолог, наук. / М., 2007.-27с.

64. Шамина, З.Б. Андрогенез и получение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор. //В кн.: Культура клеток растений. /З.Б. Шамина. -М.: Наука. 1981.- С. 124-136.

65. Шевченко, С.В. Спорогенная ткань. В кн.: Эмбриология цветковых растений. Терминология и концепция под ред. Батыгиной Т.Б. /С.В. Шевченко //СПБ.: «Мир и семья». 1994. T.l. С.69.

66. Шеррер, Н.В. Влияние условий выращивания донорных растений пшеницы на эффективность пыльниковой гаплопродукции /Н.В. Шеррер //Материалы научной конференции. По с.-х. биотехнологии. Целиноград. 1991. С.57.

67. Шмыкова, Н.А. Диморфизм пыльцы и оценка эмбриогенной способности микроспор различных генотипов моркови /Н.А. Шмыкова, Г.Б. Тюкавин //Сельскохозяйственная биотехнология. №5. 2001. — С.53-60.

68. Шмыкова, Н.А. Разработка системы биотехнологических методов, направленных на укоренение селекционного процесса овощных культур: Автореф. дис. докт. с.-х. наук. /ВНИИССОК М., 2006. - 20 с.

69. Хохлов, С.С. Гаплоидия и селекция. /С.С. Хохлов, B.C. Тырнов. М.: Наука, 1976.- С. 99- 105.

70. Цыренов, В.Ж. Основы биотехнологии: Культивирование изолированных клеток и тканей растений /В.Ж Цыренов //Учебно-методическое пособие. Улан-Удэ: ВСГТУ, 2003 С. 21-24.

71. Arnison, P.F. Genotype specific response of cultured broccoli anther to cytokinins /P.F.Arnison, P. Donaldson, A. Jackson, C. Sempel, W. Keller // Plant Gell, Tissue and Organ Culture, 1990. №3 P. 217-222.

72. Bajaj, Y.P.S. In vitro production of haploids /Y.P.S. Bajaj //Handbook of plant cell culture: Techniques for propagation and breeding (Eds D.A. Evans) New York, London: Macmillam,1983. V. 1. - P.228-287.

73. Bedinger, P.A. The remarkable biology of pollen. /Р.А. Bedinger //Plant Cell, 1992. V.4. - P.879-887.

74. Berhards, S. Improvement of haploids production through in vitro anther curture in hexaploid triticale /S. Berhards, G. Charmet //Genet and breed. Triticale. Proc. 3rd EUCARPIA Meet Gereal See. Triticale, Clermont

75. Ferrand 2-5 Juill 1984-Paris, 1985. P.305-316.

76. Biddington, N.L. Variation in response to high temperature treatmens in anther culture of Brussels sprouts. /N.L. Biddington, H.T. Robinson. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture 22, 1990. P.48-54.

77. Brooks, J. Chemical structure of the exine of pollen walls and a new function for carotenoids in nature /J. Brooks, G. Shaw //Nature, 1978. V. 219. -P.532-533.

78. Bhattacharya, N.M. Production of plantlets through somatic embryo-genesis in Brassica campestris. //N.M. Bhattacharya, S.K. Sen //Zeitschrift fur Pflanzenphysiologie, 1980. -V. 99.-P. 357-361.

79. Buiatti, M. Genetics of growth and differentiation in vitro of Brassica oleracea var. botrytis. /М. Buiatti, S. Baroncelli, A. Bennici. //IV. Genotype-hormone interactions. Z. Pflanzenzuchtg, 1974. V. 73. -P.298-302.

80. Bullock, P. Anther culture of wheat (Triticum aestivum L.) F-ls and their reciprocal crosses /Р. Bullock// Theor. Appl. Genet, 1982. V. 62.-P. 155159

81. Cao, M.Q. Embryogenese et regeneration de plantes de choucroute /Brassica oleracea L. ssp. Capitata) par culture in vitro de microspores isolees. /М. Q. Cao, F. Chariot, C.C. Dore. //R. Acad. Sci. Paris t. 310. serie З.Д990. P. 203-209.

82. Chase, S.S. Monoploid frequencies in a commercial double crass hybrid maize and its components single cross hybrids and inbred lines /S.S. Chase //Genetics., 1949. Vol.34 P.328-332.

83. Chu, C.C. The N6 Medium and its Applications for Anther Culture of Cereal Crops /С.С. Chu //Proc. Plant. Tissue culture bening Geience Press., 1978. P. 43-50.

84. Chuang, C.C. A set of Potato medium for wheat anther culture /С.С. Chuang, J.W. Ouyang //Proc. Symp. Plant Tissue Culture. Science Press: Peking., 1978.-P.51-56.

85. Constantin, M.J. Propagation of Higher Plants througt Tissue Culture: Emerging Technique and Strategies /M.J. Constantin, R.R. Henke, K.W. Hughes, B.V. Conger Envir. and Exper Botany. Special issue., 1981. - P. 452.

86. Devreux, M Reflexions sur nos cultures d anthers de plantes cultivees / M Devreux, U. Laneri, P. Martinis //G. bot. ital., 1975. V. 109. №6 P. 335349.

87. Dunwell, J.M. Anther culture of Solarium tuberosum L / J.M Dunwell, N. Sunderland//Euphytica, 1973 V.22 P. 317-323.

88. Dunwell, J.M. Embriogenesis from pollen in vitro. Biotechnology in plant science. Relevance to agriculture in the eighties. /J.M. Dunwell. //Acad. Press., 1985.-P.44-49.

89. Dunwell, J.M. Pollen, ovule and embryo culture as a tool in plant breeding /J.M. Dunwell //Whither L.A. Anderson P.G. (eds) Plant. Tissue culture and its Agricultural Applications Buttervvorths. London. - 1986. - P.375-404.

90. Duijs, J.G. Highly regenerative cultivars in microspore culture in Brassica oleraseae L. var. Capitata. / J.G. Duijs, R.E. Voorrips. // Euphytica 60., 1992.- P. 45-55.

91. Durr, A. Production of haploid plants of Nicotiana langsdorfill /А. Durr, J. Fleek //Plant Sci Lett. ,1980. V. 18. №1. P. 75-79.

92. Dieu, P. Further studies of androgenic embryo production and plant regeneration from in vitro cultured anthers in maize (Zea mays L.) /Р. Dieu, M. Beckert //Macdica,1986. V.31 №3. P. 245-259.

93. Dietert, M.F. Effects of genotypes on in vitro culture in the genus Brassica / M.F4 Dietert, S.A. Barron, O.C. Yoder. //Plant. Sci. Lett., 1982. V. 26.-P. 233-240.

94. Finnie, S.J. The effect of carbohydrate composition and concentration on anther culture response in barley (Hordeum vulgare L.) /S .J. Finnie, W. Powell, A.F. Dyer//Plant Breed., 1989.V. 10.-P. 110-118.

95. Foroughi-Wehr, B. In vitro responce of Hordeum vulgare L. Anthers culturd from plants grown under different environments. /В. Foroughi-Wehr, G. Mix //Environ. And Exp. Bot., 1979. V. 19. №4 p.303-309.

96. Gamborg, O.L. Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells /O.L. Gamborg, R.A. Miller, K. Ojima //Exp. Cell. Res. 21. 1968.-P. 359-368.

97. Green, C.E. Prospects for crop improvement in the field of cell culture. /С.Е. Green.//Hort. Sci., 1977.V. 12.-P. 131-134.

98. Gunter, W. Ein neues Verfahren fur die pflanzliche in vitro kultur /W.

99. Gunter, F. Gunter. //Biochem und Physiol. Pflandz., 1985, 1.- P. 79-83.

100. Guha, S. In vitro production of embryos from anthers of Datura. /S. Guha, S.C Maheshwari. //Nature, 204, 1964. P. 497.

101. Guo, J.D. Maintenance of male sterile germ-plasm in Brassica rapa by in vitro propagation. /J.D. Guo, T. Niemela, U. Talisalo, S. Pulli. //Agr, And Food Scince in Finland, 2000. V. 9. -P. 231-238.

102. Engvild, K.C. Plantlet ploidy and flower bud size in tobacco anther cultures /К.С. Engvild //Hereditas,1974. V.76. - P. 320 - 322.

103. Engvild, K.C. Anther cultures of Datura innoxia: Flower bud stage and embryoid level of ploidy. /К.С. Engvild, I. Linde -Laursen, A. Lundquist. //Hereditas, 1972. V.72. P. 331 - 332.

104. Evans D.A. Somaclonal and gametoclonal variation / D.A. Evans, W.R. Sharp, M.P. Medina-Filho American Journal of Botany, 1984, V.71, N 6, - P.759-774.

105. He, D.G. Somatic embryogenesis and morphogenesis in callus derived from the epiblast of immature embryos of wheat (Triticum aestivum L.) /D.G. He, G. Tanner, K.J. Scott //Plant Sci., 1986. V.45. P. 119-124.

106. Hu, Han. Wheat: improvement through anther culture /Ни Han //Biotechnology in agriculture and forestry. (Ed. By Y.P.S. Bajaj) Springer-Velag: Berlin Heidelber., 1986. V. 2.-P.55-71.

107. Hunter, C.R. The effect of anther orientation on the production of microspore derived embryoids and plants of Hordeus Vulgarie Salarlis. /C.R. Hunter. //Plant Cell, 1985, 4. - P.267-268.

108. Qin, X. Chloroplast namber in Guard cells as ploidy indicator of in vitro grown androgenic peper plantlets /X. Qin, G.L. Rotino //Plant Cell, Tissue Organ Cult., 1995. V. 41. P. 153-160.

109. Kameya, T. Induction of haploid from plants Grains of Brassica. /Т. Kameya, K. Hinata. //Jpn Breed 20, 1970. P.82- 87.

110. Kao K.N. Induction of pollen plant formation in barley anther culture /K.N Kao, D.C. Horn //Int. Symp. On genetic manipulation in crops. Abstracts. Beijing. China, 1984. -P.64.

111. Keller, W. A. In vitro production of plants from pollen in Brassica camprestris. /W.A. Keller, R. Rajhathy, J. Lacapra. //Can. Genet Cytol 17, 1975-P. 655- 666.

112. Klimaszewska, K. High frequency plant regeneration from thin cell layer explants of Brassica napus. /К. Klimaszewska, W.A. Keller. //Plant Cell, Tissue and Organ culture, 1985. V. 4. P. 183-197.

113. Kozai, T. Photoautotrophic micropropagation in vitro. /Т Kozai. //Cellular and Developmental Biology Plant, 1991. V. 27. -P. 47-51.

114. Kuginuki, Y. Varietal differences in embryogenic and regenerativ ability' in microspore culture of Chinese cabbage (Br. Camperstris spp. Rekinesis). /Y. Kuginuki, K. Nacamura, K-I. Hida, H. Yosicawa. //Breeding Scince, 1997- 47 P.341-346.

115. Lazar, M.D. Combining abilities and heritability of callus formation and plantley regeneration in wheat (Triticum aestivum) anther culture /M.D. Lazar //Theor. Appl. Genet., 1984a. V.68. P.131-134.

116. Lazzeri, P.A. In vitro shoot regeneration from seedling root segments of Brassica napus cultivars. /Р.А. Lazzeri, J.M. Dunwell. //Ann. Bot., 1984. V. 54. №3.-P. 341 -350.

117. Mercy, S.T. Chromosomal behavior of anther culture derived plants of rice / S.T. Mercy, F J. Zapata //Plant Cell Repts 1986. V. 5 №3 P.215-218.

118. Mii, M. Effects of pollen degeneration on the pollen embryogenesis inanther culture of Nicotiana Tabacum L. /М. Mii. //Z. Pflanzenphusiol, 1980-99. -P.349-355.

119. Mukherjee, S.K. Low sugar and osmotic requirements for shoot regeneration from leaf pieces of Solarium melongena L. /S.K. Mukherjee, B. Rathinasabapathi, N, Gupta. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture,1991. V. 25. P. 13-16.

120. Murakami, T. Effect of genotype on shoot regeneration from cotyledonary explants of rapeseed {Brassica napus L.). /Т. Murakami, Y. Ono, Y. Takahata, N. Kaizuma. //Plant Cell Rep., 1994.V. 14.-P. 1317.

121. Murashige T. A. Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures /Т. Murashige, F. Skoog //Physiologia Plantarum, 1962. V. 15.-P.473-497.

122. Narasimhulu S.B. Somatic embryogenesis in Brassica nigra (Koch) /S.B. Narasimhulu, P.B. Kirti, V.L. Chopra //Journal of Experimental Botany,1992. V. 43.-P. 1203-1207.

123. Nichterlein, K. Genotypic and exogenous factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed {Linnum usitatissimum L.). /К. Nichterlein, H. Umbach, W. Friedt //Institute of Agronomy and Plant Breeding, Giessen, 1991 P. 125-128.

124. Nitsch, J.P. Experemental Androgenesis in Nicotiana /J.P. Nitsch //Phytomorphology, 1969. Vol. 19. P. 389-404.

125. Nitsch, P.C. Effect dun choc termigue sur lepouvoir embryogenis pollen de Duture in noxia culture dans lanthereon isole de lantoure /Р.С. Nitsch, B. Noreel //C.R. Acad. Sci., 1973, 276ДЗ -P.305-306.

126. Nitsch, P.C. Proceedings of the 18th International Horticulture Congress /Р.С. Nitsch//Tel Ariv., 1972. V.2-P. 19-58.

127. Ockendon, D.J. Utilization of anther culture in Breeding Brussels sprouts.

128. D J. Ockendon. //Genetic Manipulation in plant Plant Breeding. Walter & Gruyter CO. Berlin New York Printed in Germany, 1986. - P. 256-271.

129. Oono, K. Production of haploid plantlets of rice (Oryza sativa) by anther culture and their use for breeding. /К. Oono. //Bull. Nat. Inst. Agric. Sci., 1975 Series D.- 26- P. 139-222.

130. Ouyang, J.W. The response of anther culture to culture temperature in Triticum aestivum /J.W. Ouyang, S.M. Zhou, S.E. Jia //Theor. and App. Genet., 1983., V66, №2. -P.101-109.

131. Peeters, A.J.M. In vitro flower bud formation in tobacco: interaction of hormones /A.J.M. Peeters, W. Gerads, G.W.M. Barendse, G.J. Wullems //Plant Physiol., 1991. V.97. -P.402-408.

132. Pechan, P.M. Identification of potentially embrvogenic in Brassica napus /Р.М Pechan, W.A. Keller //Physiologia Plantamm., 1988. V.74. -P.377-384.

133. Phippen, C. Genotype plant, bud size and media factors affecting anther culture of califlowers (В. Oleraceae var. botrytis). /С. Phippen, D.J. Ockendon//Theor. Appi. Genet., 1990.-79.№l.-P.33-38.

134. Purahauser L. Stimulation of shoot regeneration in Triticum aestivum and Nicotiana plumbaginifo-lia in tissue culture using the ethylene inhibitor AgN03 /L. Purahauser, M. Medgyesy, P.J. Czenko, L. Marton //Plant Cell Reports, 1987. Vol. 6. P. 1 - 4.

135. Reinert, J. Anther culture: haploid production and its significance (Applied and Fundamental Aspects of plant cell, tissue and organ cultyre /J. Reinert //Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1977. P.251-267/

136. Rogowsky, P.M. Polymerase chain reaction based mapping of rye involving repeated DNA sequences /P.M. Rogowsky, K.W. Shepherd, P. Langridge//Genome. 1992. V.35 (4). P.621-626.

137. Roulund, N. Optimal consentration of sucrose for head cabbage (Brassicaoleracea L. covarr capitata L) anther culture. /N. Roulund, S.B. Andersen, B. Ferestveit. //Alef Euphytica 52, 1991- P.125 129.

138. Sangwan-Norreei, S. Androgenic stimulating factors in the anther and isolated pollen grain culture of Datura innoxia Mill /S. Sangwan-Norreei. //J. Exp. Bot., 1987, 28.- P. 843-852.

139. Shu, W. Secondary embryogenesis from thin cell layers of Brassica napus ssp. oleifera /W. Shu, C.S. Loh //New Phytologist., 1991. V. 119. P. 427-432.

140. Singh, B. Heterosis in radish {Raphanus sativus L.). / B. Singh, V.P. Gupta, P.K. Gupta. //Indian J. Hort., 1986. V. 43. -№ 3-4. -P. 242-247.

141. Somgstad D.D. Effect of 1 aminocy-clopropane, carboxylic acid, silver nitrate and norboriodiene on plant regeneration from maiz callus cultures / D.D. Somgstad, D.R. Duncan, J.M. Whdholm // Plant Cell Reports, 1988. vol. 7.-P. 262-265.

142. Sopory, S.K. Induction of haploids: achievements problems and possibilities / S.K. Sopoiy //Сип Sci (India), 1983. V.52 №23 -P. 1112 -1113

143. Sopory, S.K. Development of pollen embryoids in anther cultures of Datura innoxia. General observations and effects of physical factors / S.K. Sopory, S. C. Maheshwari. //Exp. Bot. 27, 1987 P.49-57.

144. Sorvari, S. Influence of sucrose and milibiose on barley anther culture in starch media. // S. Sorvari, O. Schieder // Plant Breeding., 1982, 99.- P.l-24.

145. Sunderland, N. The consept of morfogenic competence with reference toanther and pollen culture. / N. Sunderland. // Plant Cell Culture Crop. Proc. Int. Symp., Calcutta., 6-10 Dec.,1981. N.Y.; L.P., 1983.-P. 125-139.

146. Telmer, T. A. Cellular changes During heat shock induction and embiyo development of cultured microspores of Brassica napus sv. Topas / T. A. Telmer, W. Newcomb, D.H. Simmonds //Protoplasma, 1995. V.185. -P.106- 112

147. Thomas, E. Embryogenesis from microspores of Brassica napus. / E. Thomas, G. Wenzel. //Z. Planzenzucht 74, 1975 p77 -81.

148. Thurling, N. The influence of donor plant genotype and environment on production of multicellular microspores in cultured anther of Brassica napus ssp oleifera / N. Thurling, P.M. Chay //Ann. Bot., 1984. V/54 №5. -P.681-693

149. Vagera, T. Regulation of in vitro androgenesis of tobacco: relationship between concertration of iron ions and kinetin. // T. Vagera, T. Havranek, Z. Opatrny. //Biohem U. Physiol. Pflanzen, 1979 -P.759-760.

150. Yang, O. A study of factors affecting anther culture of cauliflower Brassica oleracea var. botrytis. II O. Yang, J. E. Chauvin, Y. Herve.

151. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 28, 1992. 289-296

152. Zaki M.A.M. Microspore derived embryos in Brassica: the significanceof division symmetry in pollen mitosis I to embryogenic development / M.A.M. Zaki, H.G. Dickenson //Sexual Plant Reproduction., 1991. V.4. -P.48-55

153. Месяц Декада Осадки, мм. Среднесуточная температура воздуха, °С Среднесуточная относительная влажность воздуха, %среднемногол етние метеоплощадка ВНИИО, 2004 г. среднемно-голетняя 2004 г. среднемно-голетняя 2004 г.

154. Май 1 14,0 0,2 9,6 15,4 63,5 54,011 17,0 18,5 11,5 9,5 62,0 65,0111 19,0 28,5 14,1 12,8 62,5 68,0за месяц 50,0 47,2 11,8 9,5 62,0 65,0

155. Июнь 1 20,0 14,5 14,4 14,8 59,5 62,0

156. И 21,0 38,5 15,4 14,6 60,0 69,0111 24,0 9,5 16,4 20,1 61,5 70,0за месяц 65,0 62,5 15,4 16,5 60,3 67,0

157. Июль 1 26,0 21,0 17,4 18,8 64,0 71,011 27,0 33,5 17,8 19,7 65,5 71,0111 27,0 30,5 17,7 21,8 67,0 75,0за месяц 80,0 85,0 17,6 20,1 65.5 72,0

158. Август 1 25,0 3,0 17,1 21,5 69,0 67,0

159. И 23,0 22,0 15,9 17,3 70,5 73,0111 22,0 4,0 14.4 20,0 72,5 69,0за месяц 70,0 29,0 15,8 19,7 70,0 70,0

160. Сентябрь 1 20,0 9,0 12,5 14,0 74,0 73,0

161. И 18,0 0,0 10,8 14,0 78,0 71,0111 17,0 10,0 8,1 11,1 78,0 79,0за месяц 55,0 19,0 10,5 13,0 76,5 74,0

162. Октябрь 1 15,0 11,5 6,0 9,0 79,0 • 74,0и 15,0 13,4 4,0 4,8 80,0 75,1111 16,0 40,4 3,5 4,5 80,0 80,2за месяц 46,0 65,3 4,5 6,6 79,7 76.6за вегетацию 366,0 308,0 12,6 14,7 69,2 70,3

163. Месяц Декада Осадки, мм. Среднесуточная температура воздуха, °С Среднесуточная относительная влажность воздуха, %среднемногол етние метеоплощадка ВНИИО, 2005 г. среднемноголетняя 2005 г. среднемноголетняя 2005 г.

164. Май 1 14,0 13,3 9,6 11,9 63,5 54,0

165. И 17,0 38 11,5 13,5 62,0 65,0111 19,0 13 14,1 19,3 62,5 68,0за месяц 50,0 64,3 11,8 14.9 62,0 65,0

166. Июнь 1 20,0 15 14,4 15,7 59,5 62,011 21,0 21,2 15,4 17,7 60,0 69,0111 24,0 77,7 16,4 17,4 • 61,5 70,0за месяц 65,0 113,9 15,4 16.9 60,3 67,0

167. Июль 1 26,0 12,5 17,4 16,6 64,0 71,0

168. И 27,0 17,6 17,8 20,8 65,5 71,0111 27,0 23 17,7 22,0 67,0 75,0за месяц 80,0 53,1 17,6 19.8 65.5 72,0

169. Август 1 25,0 2 17,1 19,8 69,0 67,011 23,0 6,9 15,9 16,7 70,5 73,0111 22,0 4,7 14.4 11,9 72,5 69,0за месяц 70,0 13,6 15,8 16.1 70,0 70,0

170. Сентябрь 1 20,0 8 12,5 15,1 74,0 73,011 18,0 11 10,8 11,7 78,0 71,0111 17,0 0,4 8,1 12,1 78,0 79,0за месяц 55,0 19,4 10,5 13.0 76,5 74,0

171. Октябрь 1 15,0 11,5 6,0 9,0 79,0 74,011 15,0 13,4 4,0 4,8 80,0 75,1111 16,0 40,4 3,5 4,5 80,0 80,2за месяц 46,0 65,3 4,5 6,1 79,7 76.6за вегетацию 366,0 310,2 12,6 40,2 69,2 70,3

172. Месяц Декада Осадки, мм. Среднесуточная температура воздуха, °С Среднесуточная относительная влажность воздуха, %среднемногол етние метеоплощадка ВНИИО, 2006 г. среднемногол етняя 2006 г. средне-многолетняя 2006

173. Май 1 14,0 1,9 9,6 13,8 63,5 52,411 17,0 7,3 11,5 12,7 62,0 64,0111 19,0 19,3 14,1 14,3 62,5 66,9за месяц 50,0 28,5 11,8 13,6 62,0 61,3

174. Июнь 1 20,0 10,8 14,4 15,7 59,5 67,311 21,0 12,6 15,4 18,7 60,0 68,0111 24,0 14,6 16,4 23,8 61,5 67,8за месяц 65,0 38,0 15,4 19,4 60,3 • 67,7

175. Июль 1 * 26,0 12,6 17,4 19,2 64,0 67,311 27,0 50,1 17,8 21.2 65,5 70,6111 27,0 7,4 17,7 16,9 67,0 68,5за месяц 80,0 70,1 17,6 19,0 65.5 68,8

176. Август 1 25,0 24,7 17,1 17,0 69,0 77,2

177. И 23,0 15,0 15,9 19,8 70,5 77,0111 22,0 19,1 14.4 18,2 72,5 78,2за месяц 70,0 58,8 15,8 18,3 70,0 77,5

178. Сентябрь 1 20,0 56,6, 12,5 15,6 74,0 84,411 18,0 0,0 10,8 13,2 78,0 70,6111 17,0 0,0 8,1 13,9 78,0 77,1за месяц 55,0 5 6,6 10,5 14,2 76,5 77,4

179. Октябрь 1 15,0 34,6 6,0 11.7 79,0 85,811 15,0 6,0 4,0 3,9 80,0 75,7111 16,0 14,7 3,5 6,3 80,0 77,2за месяц 46,0 55,3 4,5 7,3 79,7 79,5за вегетацию 366,0 307,3 12,6 15,3 69,2 72,0