Уровень цитокинов и субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови в сопоставлении с морфологическими изменениями печени у больных хроническими вирусными гепатитами В и С тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.10, кандидат медицинских наук Лазарева, Анна Светославовна

• Лазарева, Анна Светославовна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Лазарева, Анна Светославовна

Список сокращений.

Введение.

Актуальность темы.

Цель работы.

Научная новизна.

Апробация работы и внедрение в практику.

Практическая значимость.

Часть 1 .Обзор литературы.

Глава 1. Роль цитокинового каскада в регуляции иммунного ответа при вирусных гепатитах В и С.

Глава 2. Характеристика иммунного ответа при хронических вирусных гепатитах В и С.

Глава 3. Характер морфологических изменений и роль иммунных клеток печени у больных хроническими вирусными гепатитами В и С.

Часть 2. Собственные наблюдения.

Глава 1. Материал и методы исследования.

Глава 2. Общая клиническая характеристика больных хроническим вирусным гепатитом В и С.

Глава 3. Сопоставление цитокинового профиля с уровнем гистологической активности и с отдельными параметрами, характеризующими гистологическую активность при хронических вирусных гепатитах В и С.

Глава 4. Сопоставление показателей иммунного статуса с уровнем гистологической активности и с отдельными параметрами, характеризующими гистологическую активность при хронических вирусных гепатитах В и С.

Глава 5. Особенности лейкоцитарной инфильтрации ткани печени у больных с хроническими вирусными гепатитами В и С.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Уровень цитокинов и субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови в сопоставлении с морфологическими изменениями печени у больных хроническими вирусными гепатитами В и С»

Парентеральные вирусные гепатиты, среди которых доминирующее I место занимают гепатиты В и С, - одна из наиболее серьезных и актуальных проблем здравоохранения во всем мире. Заболевания распространены повсеместно и по данным ВОЗ в мире насчитывается около 400 млн. и 170 млн. инфицированных вирусом гепатита В и С соответственно. Прогрессирование в хронический гепатит может наблюдаться более чем у 60% больных острым гепатитом Сиу 10% больных острым гепатитом В. Эти инфекции являются доминирующими в развитии хронических заболеваний печени, включая цирроз и гепатокарциному[1,14,25,29,35,112].

Ключевую роль в патогенезе нарушения элиминации вируса и хронизации при вирусных гепатитах играют изменение состава и нарушение функции иммунокомпетентных клеток, что приводит к развитию иммуносупрессорных и иммунопатологических реакций. Основой развития иммунокомплексных реакций являются нарушения цитокинового статуса, поскольку именно цитокины принимают непосредственное участие в развитии воспаления, иммунного ответа и регенерации печени [17,20,28,59,92,132]. Известно, что цитокины осуществляют регуляцию межклеточных взаимодействий, но в ряде случаев выходят за рамки чисто медиаторных функций и, приобретая системный характер, запускают каскад патологических реакций [17, 23,145,148]. Таким образом, дефекты цитокиновой сети отражаются на эффективности противоинфекционного иммунитета. Нарушение баланса Thl/Th2 цитокиновой продукции и является одним из механизмов неадекватного иммунного ответа, играющего ключевую роль в развитии и прогрессировании заболевания [37,47,61,67,78,96]. Нарушения продукции медиаторов ведут к дефектам Т- лимфоцитов, фагоцитирующих клеток и NK, которые отвечают за гибель вирусинфицированных гепатоцитов при хронических вирусных гепатитах В и С.

Напряжение местных реакций иммунной системы проявляется в виде гиперплазии лимфоидной ткани в ткани печени. Показана четкая корреляция между тяжестью течения процесса и выраженностью лимфоцитарной инфильтрации. Вслед за развитием воспалительного процесса в печени наблюдаются дистрофические и дегенеративные процессы, некроз гепатоцитов, а затем коллагенизация стромы на месте гибели участков паренхимы и в стенках сосудов [2,14,19,25,35,49].

Иммунная система печени включает в себя большинство компонентов врожденной иммунной системы (натуральные киллеры (NK), натуральные киллеры-Т-клетки (NKT-клетки), дендритные клетки, макрофаги и др.) и эффекторы специфического иммунитета (Т-клетки) [35,42,56,]. Взаимодействие Купферовских (или дендритных) клеток, NK, NKT, CD8 Т- клеток между собой обеспечивают развитие адекватного иммунного ответа на вирусную инфекцию [39,55,84,90].

В экспериментальных работах по изучению противоопухолевого иммунитета получены новые сведения о субпопуляционном составе иммунных клеток в печени. Была выявлена особая субпопуляция Т-клеток - Т-регуляторные клетки CD4+CD25+ (Т per.), которые проявляют гипопролиферативную способность, обладают способностью угнетать активацию и ингибировать секрецию цитокинов CD4+CD25~ Т-хелперами и CD8+, таким образом препятствуя развитию реакций, направленных на элиминацию чужеродного антигена [45,64,146]. Данные о роли Т per. лимфоцитов печени при хронических вирусных гепатитах весьма малочисленны.

В связи с этим, актуальным представляется поиск механизмов, способствующих развитию и поддержанию длительной персистенции и хронизации при вирусных гепатитах. Представляет интерес провести комплексное обследование больных хроническим вирусным гепатитом В и С с определением цитокинового профиля не только в сыворотке крови, но и изучить спонтанную и индуцированную продукцию цитокинов МНПК, изучить показатели иммунного статуса в сопоставлении с выраженностью показателей гистологической активности и фиброза, а также установить фенотип иммунных клеток печени для определения роли этих показателей в хронизации вирусных гепатитов и возможности коррекции их нарушений.

Цель работы.

Изучить особенности цитокинового профиля, субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови и лейкоцитарной инфильтрации печени в сопоставлении с морфологическими изменениями в печени у больных хроническими вирусными гепатитами В и С.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

Задачи исследования.

1. Изучить концентрацию цитокинов IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-1(3, IL-4, IL-6 в сыворотке крови у больных хроническими вирусными гепатитами В и С в сопоставлении с показателями гистологической активности и фиброза.

2. Изучить спонтанную продукцию цитокинов IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-ip, IL-4, IL-6 МНПК у больных ХГВ и ХГС с различными показателями гистологической активности и фиброза.

3. Изучить индуцированную NDV и ФГА продукцию цитокинов IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-1J3, IL-4, IL-6 МНПК у больных ХГВ и ХГС с различной активностью гепатита и выраженностью фиброза.

4. Определить субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови в сопоставлении с уровнем гистологической активности и фиброза у больных хроническими вирусными гепатитами В и С.

5. Оценить морфологические изменения с определением гистологической активности и фиброза в ткани печени у больных ХГВ и ХГС по данным пункционной биопсии печени.

6. Исследовать особенности лейкоцитарной инфильтрации печени у больных хроническими вирусными гепатитами В и С в сопоставлении с активностью гепатита и выраженностью фиброза.

7. Определить фенотип печень-ассоциированных лимфоцитов иммуногистохимическим и иммуноцитохимическим методом у больных ХГВ и ХГС.

Научная новизна.

У больных хроническими вирусными гепатитами В и С получены новые данные о стимулированной NDV и ФГА продукции цитокинов МНПК при различной активности гепатита и выраженности фиброза. В группе больных с выраженными морфологическими изменениями в печени определено достоверное угнетение способности МНПК продуцировать ряд цитокинов (IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-6) при стимуляции их NDV и ФГА.

Установлено отсутствие статистически значимых отличий концентрации цитокинов IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-lp, IL-4, IL-6 в сыворотке крови у больных хроническими вирусными гепатитами по сравнению со здоровыми донорами, что подтверждает необходимость изучения стимулированной продукции цитокинов для оценки цитокинового профиля.

Выявлено статистически значимое снижение иммунорегуляторного индекса у больных с высокой гистологической активностью и выраженными морфологическими изменениями в печени.

Установлено отсутствие статистически значимых отличий содержания субпопуляций CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25, HLADR, CD20, CD38 лимфоцитов периферической крови у больных хроническими вирусными гепатитами по сравнению со здоровыми донорами.

У больных хроническими вирусными гепатитами В и С сопоставлен характер и интенсивность лейкоцитарной инфильтрации с активностью патологического процесса в печени. Установлено, что у больных хроническим вирусным гепатитом С лейкоцитарная инфильтрация выражена больше и распространяется внутрь долек уже на ранних этапах развития инфекционного процесса по сравнению с больными-хроническим вирусным гепатитом В.

Впервые расшифрован фенотип иммунных клеток лейкоцитарных инфильтратов паренхимы печени у больных ХГВ и ХГС, выявлены популяции Т- лимфоцитов CD3+, цитоксических лимфоцитов CD8+, Т per. лимфоцитов CD4+CD25+, NK- клеток CD16+CD56+, NKT-клеток CD3+CD16+CD56+.

Апробация работы и внедрение в практику.

Работа выполнена на кафедре инфекционных болезней Московской медицинской академии имени И.М. Сеченова (зав. кафедрой, член-корр. РАМН, профессор С.Г. Пак).

Тема диссертационной работы является фрагментом комплексной темы кафедры «Интоксикация при бактериальных и вирусных инфекциях: патогенез и механизмы адаптации» № 01200110439. Рекомендации, полученные в результате исследования, внедрены в практику на кафедре инфекционных болезней ММА имени И.М. Сеченова и 2-й клинической инфекционной больницы г. Москвы.

Все основные положения диссертации опубликованы в открытой печати. Работа апробирована на заседании кафедры инфекционных болезней ММА имени И.М. Сеченова, лаборатории по изучению токсических и септических состояний кафедры инфекционных болезней 22 ноября 2007г.

Практическая значимость.

Для адекватной оценки активности инфекционного процесса необходимо проводить комплексное обследование больных хроническими вирусными гепатитами В и С, включающее в себя определение концентрации цитокинов не только в сыворотке крови, но и изучение стимулированной NDV и ФГА продукции цитокинов МНПК, а также вычисление показателей иммунорегуляторного индекса.

При морфологическом исследовании гепатобиоптатов у больных хроническими вирусными гепатитами В и С необходимо определять не только гистологическую активность и выраженность фиброза, но и оценивать выраженность, распространенность и субпопуляционный состав лейкоцитарных инфильтратов печени.

Только совокупность полученных данных позволяет выбрать правильную тактику и провести адекватную терапию у больных ХГВ и ХГС.

Заключение диссертации по теме «Инфекционные болезни», Лазарева, Анна Светославовна

Выводы.

1. Установлено отсутствие статистически значимых отличий концентрации IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-ip, IL-4, IL-6 в сыворотке крови у больных хроническими вирусными гепатитами В и С по сравнению со здоровыми донорами, т.к. методом ИФА определяют только уровень свободных цитокинов, не соответствующий их реальной концентрации в сыворотке крови.

2. Установлено достоверное снижение стимулированной NDV и ФГА продукции ряда цитокинов (IFN-a, IFN-y, TNF-a, IL-6) МНПК у больных как с минимальной активностью гепатита, так и с высокой степенью гистологической активности, что отражает состояние иммунодефицита при ХГВ и ХГС.

3. Изучение субпопуляций лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25, HLADR, CD20, CD38 периферической крови у больных хроническими вирусными гепатитами В и С не выявило статистически значимых отличий от здоровых доноров.

4. У больных хроническими вирусными гепатитами В и С с выраженными морфологическими изменениями в печени определено статистически значимое снижение иммунорегуляторного индекса по сравнению с группой контроля.

5. Выраженность и распространенность лейкоцитарной инфильтрации печени при хронических вирусных гепатитах более выражена при высокой гистологической активности.

6. У больных хроническим вирусным гепатитом С лейкоцитарная инфильтрация более выражена и раньше распространяется внутрь печеночной дольки, чем при хроническом вирусном гепатите В.

7. Расположение участков соединительной ткани совпадает с конфигурацией области лейкоцитарной инфильтрации в печени у больных хроническими вирусными гепатитами.

8. Лейкоцитарные инфильтраты в основном состоят из активированных лимфоцитов, субпопуляционный состав которых представлен Т-лимфоцитами, цитотоксическими лимфоцитами, Т per. лимфоцитами, NK-клетками, NKT-клетками.

9. Для оценки активности инфекционного процесса и назначения адекватной терапии необходимо комплексное обследование больных ХГВ и ХГС с определением стимулированной NDV и ФГА продукции цитокинов МНПК, иммунорегуляторного индекса и характера лейкоцитарной инфильтрации печени с определением фенотипа клеток, составляющих инфильтрацию.

Практические рекомендации.

Выявленные изменения цитокинового профиля и иммунного статуса, а также изучение лимфоидной инфильтрации печени позволяет рекомендовать комплексное обследование больных хроническими вирусными гепатитами В и С с определением стимулированной NDV и ФГА продукции цитокинов МНПК, вычисление показателей иммунорегуляторного индекса, а также морфологическое исследование гепатобиоптатов с определением выраженности, распространенности лейкоцитарных инфильтратов и установлением их субпопуляционного состава для оценки активности патологического процесса и проведения адекватной терапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Лазарева, Анна Светославовна, 2008 год

1. Апросина 3.F. Хронический активный гепатит как системноезаболевание. М., 1981.

2. Апросина З.Г., Серов В.В. Хронические вирусные заболевания печени; пато- и морфогенез, клиническая характеристика. //Тер. Архив. 1995 - № 5. - с. 77-80.

3. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М: Практика, 1998;

4. Грязин А.Е., Буеверов А.О., Ивашкин В.Т. Апоптоз МНПК при XFC и вирусно-алкогольном гепатите. // РЖГГК 4.- 2005.-Оригинальные достижения.

5. Дмитреева Е.В., Москалева* Е.Ю., Северин Е.С. Роль апоптоза в патогенезе хронических вирусных гепатитов В и С.//РЖГГН 5.-2003.

6. Жданов К.В., Лобзин Ю.В., Гусев Д.А. Значение морфологических исследований в диагностике и лечении парентеральных вирусных гепатитов. // Информационный бюллетень №2.- 2003. Вирусные гепатиты, Достижения и перспективы.

7. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология. // Спб, Питер, 2001.

8. Ивашкин В.Г. Клеточная и молекулярная биология воспаления печени. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. 1998 - Т.УПГ-№ 5. - с. 7-13::

9. Игнатова Т.М. Хронический гепатит С: клинико-морфологическая характеристика, течение и лечение: Дисс. д-ра мед. наук. М.; 2000г.

10. Комарова^ Д.В., Цинзерлинг В.А. Морфологическая диагностика инфекционных поражений печени. // Сотис, Спб, 1999г.

11. Курамшин Д.Х., Толоконская Н.П., Кожевникова B.C., Мальтиинский M.JI. Субпопуляции лимфоцитов и уровень провоспалительных цитокинов в крови больных вирусным гепатитом С и сочетанным вариантом С + В.//Журн. микробиол.- 2002- №1.- С. 4248.

12. Лесняк О.М. Аутоиммунные и ревматические аспекты инфицированности вирусом гепатита С // Клин, медицина.- 1999.- № 12.-С. 14-19.

13. Майер К.-П. Гепатит и последствия гепатита // Перевод с немецкого. М.: Гэотар Медицина, 1999. - с.432.

14. Наследникова И.О., Белобородова Е.В., Рязанцев Н.В., Белобородова Э.И., Новицкий В.В. Иммунорегуляторные цитокины и хронизация вирусного гепатита- С: клинико-иммунологические параллели. // Клиническая медицина.- 2005.- № 9.

15. Никитин В.Ю., Жданов К.В., Гусев Д.А., СухинаИ.А., Цыган В.Н. Изучение показателей Т-клеточного и В-клеточного звеньев иммунитета у больных с хроническим гепатитом С. // Terra Medica nova.- 2004.- №1.

16. Носик Н.Н. Цитокины при вирусных инфекциях. // Вопросы иммунологии. 2000 - № 1. - с. 4-10.

17. Пигузова Е.А. Система фактора некроза опухоли альфа и его рецепторов в иммунопатогенезе персистентных вирсуных инфекций. Дисс. кан-та мед. наук. Иркутск.; 2006 г.

18. Покровский В.И., Непомнящих Г.И., Толоконская Н.П. Хронический гепатит С: Современные представления о пато- и морфогенезе. Концепция антивирусной стратегии гепатоцитов. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,- 2003.- Том 135.-№4.

19. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. Пер. с англ. М.;Мир. 2000.

20. Рязанцева Н. В., Наследникова И. О., Зима А. П. Молекулярные механизмы изменения продукции TNF-a мононуклеарами крови при хроническом вирусном гепатите С. // Бюллетень экспериментальной биологии,и медицины. 2005. - Т. 139, № 2. - С. 191-195:

21. Свиридова М.Б. Роль регуляторных цитокинов IL-1(3, IL-6 и TNF-a в патогенезе острых вирусных гепатитов различной этиологии. Дисс. кан-та мед. наук. М.; 2003г.

22. Семененко Т.А. Клеточный иммунитет при гепатите С. // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Информационный бюллетень. 2002.- № 1. - с. 3-10.

23. Сепиашвили Р.И, Шубич М:Г., Колесникова Н.В., Славянская Т.А., Ломтатидзе JI.B. Апоптоз в иммунологических процессах. // Аллергология и иммунология.- 2000, Том № 1.- С. 15-23.ч

24. Серов В.В., Апросина З.Г. Хронический вирусный гепатит.-М.: Медицина, 2002.

25. Скляр Л.Ф., Никифоров Н.Д., Маркелова Е.В., Попов А.Ф. Цитокиновый профиль при хроническом- гепатите С. // Клиническая медицина.- 2005.- № 10.

26. Собчак Д.М., Монакова Э.А. Показатели иммунитета у больных хроническим гепатитом С при различной гистологической активности. // Клиническая медицина.- 2004.- № 4.

27. Соколов Е.И. Клиническая иммунология. Руководство для врачей. М.: Медицина, 1998.

28. Соринсон С.Н. Вирусный гепатит. М, 1998.

29. Соринсон С.Н. Латентная фаза хронического гепатита С: критерии диагностики и терапевтической тактики. // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Информационный бюллетень. 1999.1(5).- С.17-21.

30. Тугуз А.Р., Громова Е.Г., Малахова Н.В. и др. Динамика цитокинов у онкологических больных при применении экстракорпоральных методов детоксикации в раннем послеоперационном периоде.// Иммунология.-2001.- №5.

31. Тугуз А.Р., Данилина Д.В., Громова Е.Г. и др. Спонтанная и стимулированная продукция цитокинов нейтрофильными гранулоцитами здоровых доноров. // Иммунология.- 2002.- Т. 25. № 3.

32. Царегородцева Т.М., Серова Т.И. Цитокины в гастроэнтерологии. Москва, 2003

33. Шахгильдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. Парентерральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностики,профилактика). // Москва, ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2003.

34. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей. Москва, Гоэтар-Мед, 2002г.

35. Ющук Н.Д., Дудина К.Р., Знойко О.О., Мальков И.Г., Кузина JI.E. Иммунный статус больных с различными исходами острого гепатита С. // Терапевтичесакий архив.- 2005.- № 11.- С. 32-37.

36. Abayli В, Canataroglu A, Akkiz Н Serum profile of Т helper 1 and T helper 2 cytokines in patients with chronic hepatitis С virus infection. // The Turkish Journal of Gastroenterology.- 2003.- V 14, No 1.- P. 7-11.

37. Abo Т., Kawamura Т., Watanabe H. Phisiological responses of extrathimic T cells in the liver. // Immunology Review.- 2000, April.-V. 174.-p. 135-149.

38. Amaraa R, Mareckova H, Urbanek P, Fucikova T T helper, cytotoxic T lymphocyte, NK cell and NK-T cell subpopulations in patients with chronic hepatitis C. // Folia Microbiol (Praha).- 2002.- 47(6).- p. 717-22.

39. Ataseven H., Bahcecioglu I.H., Kuzu N., Yalniz M. The levels of Ghrelin, Leptin, TNF-a, and IL-6 in liver cirrhosis and hepatocellularcarcinoma due to HBV HDV infection. // Mediators inflamm.- 2006(4).-78380.

40. Bettegay M., Fikes J.,Di Bisceglie A.M. et al. Patients with chronic hepatitis С have circulating cytotoxic T cells which recognize hepatitis С virus encoded peptides binding to HLA - A2.1 molecules. // J.Virol, 1995.-69.-p. 2462-2470.

41. Biron C. A., L. Brossay. 2001. NK cells and NKT cells in- innate defense against viral1 infections. // Curr. Opin. Immunol. 13:458.

42. Biron C., Brossay L. NK cells and NKT cells in innate defense against viral infections. // Current Opinion in Immunology.- 2001.- V 13, Issue 4.-P. 458-464.

43. Biron C.A., Nguyen K.B., Pien G.C., Cousens L.P., Salazar-Mather T.P. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines. // Annu. Rev. Immunol.- 1999.- 17.- p. 189-220.

44. Brady MT, MacDonald A J, Rowan AG, Mills KH. Hepatitis С virus non-structural protein 4 suppresses Thl responses by stimulating IL-10 production from monocytes. // Eur J Immunol.- 2003 Dec.- 33(12).- p. 344857.

45. Cacciarelli TV, Martinez OM, Gish RG, et al. Immunoregulatory cytokines in chronic hepatitis С virus infection: pre-and posttreatment with interferon alfa. // Hepatology.- 1996.- 24,- p. 6-9.

46. Carnaud C., Lee D., Donnars O., Park S.H., Beavis A., Koezuka Y., and Bendelac, A. 1999. Cutting edge: Cross-talk between cells of the innate immune system: NKT cells rapidly activate NK cells. // J. Immunol.- 163.- p.4647-4650.

47. Cecere A, Marotta F, Vangieri В, Tancredi L, Gattoni A. Progressive liver injury in chronic hepatitis С infection is related to altered cellular immune response and to different citokine profile. // Panminerva Med.- 2004 Sep.- 46(3).- p. 171-87.

48. Chang K.M., Thimme R., Melpolder J.J., et al. Differential CD4 and CD8 T-cell responsiveness in hepatitis С virus infection. // Ibid.- 2001.- 33.-p. 267-276.

49. Cribier B, Schmitt C, Rey D, et al. Production of cytokines in patients infected by hepatitis С virus. // J Med Virol.- 1998.- 55.- p. 89-91.

50. Dong Y, Zhang HF, Chen H, Yang XJ, Li J, Shu CL, Cheng Y The cytokine secretion of peripheral blood mononucleocytes from patients infected with HCV Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi.- 2004 May.-20(3).- p. 331-3.

51. Eberl G., and MacDonald H.R. 2000. Selective induction of NK cell proliferation and cytotoxicity by activated NKT cells. // Eur. J. Immunol.-30.- p. 985-992.

52. Emoto M., Kaufmann S.H. Liver NKT cells: an account of heterogeneity. // Trends Immunology.- 2003, July.- V. 24, № 7.- p. 364-369.

53. Esteban J.G. and Harvey J. Hepatitis C: molecular biology,pathogenesis, epidemiology, clinical features, and prevention. // Vrogress in Liver dises. 1992. - Juan 1. - vol. 1. - p. 253-282.

54. Exley M.A., Koziel M.J. To be or not to be NKT: natural killer T cells in the liver. // Hepatology.- 2004.- V. 40.- №5.- p. 1033-1038.

55. Fan X, Liu W, Li С Determination of serum cytokines in individuals with HCV infection Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. 2000 Jun.-14(2).- p. 145-7.

56. Fan X.G., Liu W.E., Li С Z et al. Cirulating Thl and Th2 cytokiines in patients with hepatitic virus infection. // Mediator Inflammation. -1998.-7.-p.295-297.

57. Ferrari C., Penna A., Bertoletti A. et al. Antiviral cell-mediated immune responses during hepatitis В and hepatitis С virus infections. // Resent Results. Cancert Res. 1998. - 154. - p.330-336.

58. Ferrari C., Urbani S., Penna A., et al. Immunopathogenesis of hepatitis С virus infection//J.Hepatol.-1999.-Vol.31 (Suppl.).- p .31-38.

59. Fu JL, Xu, DP, Shi M, Zhang H; Jin L, Tang ZR, Wang FS. The phenotype and function of CD4+ CD25+ regulatory T cells in hepatitis В patients. // Zhonghua Nei Ke Za Zhi.- 2006 Aug.- 45(8).- p. 642-5.

60. Fuji N., Ueda Y., Fujiwara H. et al. Antitumor effect of a-galactosylceramide (KRN7000) on spontaneous hepatic metastases requires endogenous interleukin 12 in the liver. // Clinical Cancer Research.- 2000.- V. 6.- № 8.- p. 3380-3387.

61. Gerlach J.T., Diepolder H.M., Jung M.K, et al. Reccurence of hepatitis С virus after lose of virus specific CD4 + T-cell response in acute hepatitis C. // Gsatroenterology. - 1999. - 117. - p. 933-941.

62. Godfrey D.I., Hammond K.J., Poulton L.D. et al. NKT cells: facts, functions and fallacies. // Immunology Today.- 2000.- № 21.- p. 573-583.

63. Guida M, Casamassima A, Monticelli G, Quaranta M, Colucci G. Basal cytokines profile in metastatic renal cell carcinoma patients treated with subcutaneous IL-2-based therapy compared with that of healthy donors. // J Transl Med.- 2007. 5: 51.

64. Guidotti L.G., Ishikawa Т., Hobbs M.V., Matzke В., Schreiber R., and Chisari F.V. Intracellular inactivation of the hepatitis В virus by cytotoxic T lymphocytes. // Immunity.- 1996.- 4.- p. 25-36.

65. Guidotti L.G., Rochford R., Chung J., Shapiro M., Purcell R., and Chisari F.V. Viral clearance without destruction of infected cells during acute HBV infection. // Science.- 1999.- 284.- p. 825-829.

66. Hempel G., Galle P.R., Lohr H.F. Chracterization of HCV-specific cellular and humoral immune responses referred to virus elimination. // J. Hepatology. 2000. - vol 32. - suppl № 2. - 172.

67. Hsu HY, Chang MH, Ni YH, Lee PI. Cytokine release of peripheralblood mononuclear cells in.children with chronic hepatitis В virus infection. I I J Pediatr Gastroenterol Nutr.- 1999 Nov.- 29(5).- p. 540-5.

68. Huang YS, Hwang SJ, Chan CY, Wu JC, Chao Y, Chang FY, Lee SD. Serum levels of cytokines in hepatitis C-related liver disease: a longitudinal study. // Zhonghua Yi Xue Za Zhi (Taipei).- 1999 Jun.- 62(6).- p. 327-33.

69. Jacobson Brown P.M., Neuman M.G. Immunopathogenesis of hepatitis С viral infection: Thl/Th2 responses and the role of cytokines. // Clin. Biochem.- 2001.- 34(3).- p.167-171.

70. Ji W, Wang HF, Feng CQ. Activation-induced cell death in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with chronic hepatitis В may be related to abnormal production of interleukin 12 and 10. // J Viral Hepat. -2001 Jan.- 8(1).- p. 30-3.

71. Jia H, Du J, Zhu S, Ma Y, Cai H. Clinical observation of serum IL-18, IL-10 and sIL-2R levels in patients with chronic hepatitis С pre- and post antiviral treatment. // Chin Med J (Engl).- 2003 Apr.- 116(4).- p. 605-8.

72. Jia HY, Du J, Zhu SH, Ma YJ, Chen HY, Yang BS, Cai HF. The roles of serum IL-18, IL-10, TNF-alpha and sIL-2R in patients with chronic hepatitis C. // Hepatobiliary Pancreat Dis Int. -2002 Aug.- 1(3).- 378-82.

73. Jiang R, Feng X, Guo Y, Lu Q, Hou J, Luo K, Fu N. T helper cells in patients with chronic hepatitis В virus infection. // Chin Med J (Engl).- 2002 Mar.-115(3).- p. 422-4.

74. Kakim K., G. Guidotti L., Koezuka Y., and V. Chisari F. Natural Killer T Cell Activation Inhibits Hepatitis В Virus Replication In Vivo. // The Journal of Experimental Medicine.- 2000.- V 192.- N 7,- p. 921-930.

75. Kakumu S, Okumura A, Ishikawa T, Iwata K, Yano M, Yoshioka К Production of interleukins 10 and' 12 by peripheral* blood mononuclear cells (PBMC) in chronic hepatitis С virus (HCV) infection. // Clin Exp Immunol. -1997 Apr.-108(1).- p. 138-43.

76. Kawakami Y, Nabeshima S, Furusyo N, Sawayama Y, Hayashi J, Kashiwagi S. Increased frequency of interferon-gamma-producing peripheral blood CD4+ T cells in- chronic hepatitis С virus infection. // Am J Gastroenterol.- 2000 Jan.- 95(1).- p. 227-32.

77. Kenna<T., Mason L.G., Porcelli S.A. et al. NKT cells from normal and tumor-bearing human liver are phenotypically and functionally distinct from murine NKT cells. // Journal of Immunology.- 2003.- V. 166.- № 11.- p. 6578-6584.

78. Kitaoka S, Shiota G, Kawasaki H. Serum levels of interleukin-10, interleukin-12 and soluble interleukin-2 receptor in chronic liver disease type C. // Hepatogastroenterology.- 2003 Sep-Oct.- 50(53).- p. 1569-74.

79. Klein C, Wustefeld T, Assmus U, Roskams T, Rose-John S, Muller M, Manns MP, Ernst M, Trautwein C. The IL-6-gpl30-STAT3 pathway in hepatocytes triggers liver protection in T cell-mediated liver injury. // J Clin Invest. 2005 Apr.- 115(4).- p. 860-9.

80. Kmiec Z. Cooperation of liver cells in health and disease. // Adv Anat Embryol Cell Biol. -2001.- 161.- Ш-ХШ, 1-151.

81. Koulentaki M, Notas G, Petinaki E, Valatas V, Mouzas IA, Castanas E, Kouroumalis EA. Nitric oxide and pro-inflammatory cytokines in acute hepatitis B. // Eur J Intern Med.- 2004 Feb.- 15(1).- p. 35-38.

82. Koziel M J. The role of immune responses in patogenesis of hepatitis С virus infection. //J.Viral.Hepat. 1997. - Vol.4 (Suppl.2). -p.31-41.

83. Lau J.Y, Mizokami M, Ohno T, Diamond DA, Kniffen J, Davis G.L. Discrepancy between biochemical and virological responses to interferon-alpha in chronic hepatitis CM Lancet.- 1993.- V.13.-N 342.- p.1208-1209.

84. Lin SY, Wang YY, Sheu WH. Increased serum leptin concentrations correlate with soluble tumour necrosis factor receptor levels in patients with cirrhosis.// Clin Endocrinol (Oxf).- 2002 Dec.- 57(6).- p. 805-11.

85. Lucas M., Gadola S., Meier U. et al. Frequency and phenotype of Circulating Va24/Vpil double-positive natural killer Y cells during hepatitis С infection. // Journal of Virology.- 2003.- V. 77.- № 3.- p: 2251-2257.

86. Lucey DR, Clerici M, Shearer GM. Type 1 and type 2 cytokine dysregulation in human infectious, neoplastic, and inflammatory diseases. // Clin Microbiol Rev.- 1996.- 9.- p. 532-62.

87. Malaguarnera M, Di Fazio I, Laurino A, et al. Decrease of interferon gamma serum levels in patients with chronic hepatitis C. // Biomed Pharmacother.- 1997.-51.-p. 391-6.

88. McClary H., Koch R., V. Chisari F. and G. Guidotti L. Relative Sensitivity of Hepatitis В Virus and Other Hepatotropic Viruses to the Antiviral Effects of Cytokines. // Journal of Virology.- March 2000.- Vol. 74.- No. 5.- p. 2255-2264.

89. Mosnier JF, Degott C, Marcellin P, et al. The intraportal lymphoid nodule and its environment in chronic active hepatitis C: Animmunohistochemical study. // Hepatology.- 1993.- 17.-p. 360-71.

90. Murali-Krishna, K. et al. 1998. Counting antigen-specific CD8 T cells: a reevaluation of bystander activation during viral infection. //Immunity.-1998.- 8.- p. 177-187.

91. Nakagawa R., Nagafune I., Tazunoki Y. et al. Mechanisms of the antimetastatic effect in the liver and of the hepatocyte injury induced by a-galactosylceramide in mice. // The Journal of Immunology.- 2001.- V. 166.-№ 11.- p. 6578-6584.

92. Napoli J., Bishop G.A., McGuinness P.H. et al.// Progressive liver injury in chronic hepatitis С infection correlates with increased intrahepatic expression of Thl associated cytokines. // Hepatology. -1996. -24.-p.759-767.

93. Nelson D.R., Lau J.Y. Host immune response in hepatitis С virus infection. // Viral Hepat. 1996. - 2. - p.37-48.

94. Osna N, Silonova G, Vilgert N, et al. Chronic hepatitis C: T-helperl/T-helper2 imbalance could cause virus persistence in peripheral blood. // Scand J Clin Lab Invest.- 1997.- 57.- p. 703-10.

95. Park S.H., Kyin Т., Bendelas A., Carnaud C. The contribution of NKT cells, NK cells, and other gamma-chain-dependent non-T non-B cells to IL-12-mediated rejection of tumors. // The Journal of Immunology.- 2003.- V. 170.-№3.-p. 1197-1201.

96. Paul S, Tabassum S, Islam MN Interferon-gamma (IFN-gamma) response to different hepatitis В virus antigens in hepatitis В virus infection. // Bangladesh Med Res Counc Bull.- 2004 Aug.- 30(2).- p. 71-7.

97. Pawlotsky JM. Hepatitis С virus infection: virus/host interactions. // J Viral Hepatitis.- 1998.- suppl 5.- p. 3-8.

98. Peng G, Li S, Wu W, Sun Z, Chen Y, Chen Z. Circulating CD4+ CD25+ regulatory T cells correlate with chronic hepatitis В infection. // Immunology.- 2008 Jan.- 123(1).- p. 57-65.

99. Peters M. Actions of cytokines on the immune response and viral interactions: an overview. //Hepatology.- 1996.-23.-p. 909-16.

100. Priimiagi LS, Tefanova VT, Tallo TG, Shmidt EV, Solomonova OV, Tuisk TP Immune-regulating Thl- and Th2-cytokines in chronic infections caused by hepatitis В and С viruses. // Vopr Virusol. -2003 Jul-Aug.- 48(4).-p. 37-40.

101. Priimiagi LS, Tefanova VT, Tallo TG, Shmidt EV, Solomonova OV, Tuisk TP, Kikosh GV, Krupskaia LM, Lisitsyna SA. Thl-cytokines in chronic hepatitis В and C. // Vopr Virusol.- 2002 May-Jun.- 47(3).- p. 23-7.

102. Rehermann B. et al. Cell mediated immune response to the hepatitis С virus. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2000 - 242. - p.299-325.

103. Sarih M, Bouchrit N, Benslimane A Different cytokine profiles of peripheral blood mononuclear cells from patients with persistent and self-limited hepatitis С virus infection. // Immunol Lett.- 2000 Oct 3.- 74(2).- p. 117-20.

104. Sass G, Shembade ND, Tiegs G. Tumour necrosis factor alpha (TNF)-TNF receptor 1-inducible cytoprotective proteins in the mouse liver: relevance of suppressors of cytokine signalling. // Biochem J.- 2005 Jan.-15.- 385(Pt 2).- p. 537-44.

105. Schmitt C; Rey D et.al. Production of cytokines in patients infected by hepatitis С virus. // J Med Virol.- 1998.- v.55.- №2.- p. 89-91.

106. Shapiro S, Gershtein V, Elias N, et al. mRNA cytokine profile in peripheral blood cells from chronic hepatitis С virus (HCV)-infected patients: effects of interferon-alpha (IFN-alpha) treatment. // Clin Exp Immunol.-1998.- 114.-p. 55-60.

107. Spanakis NE, Garinis GA, Alexopoulos EC, Patrinos GP, Menounos PG, Sklavounou A, Manolis EN, Gorgoulis VG, Valis D. Cytokine serumlevels in patients with hronic HCV infection. // J Clin Lab Anal. -2002.-16(1).-p. 40-6.

108. Stober D., Jomantaite L, Schirmbeck R., Peimann J. NKT cells provide help for dendritic cell-dependent priming of MHC class I-restricted CD8+ T cells in vivo. // The Journal of Immunology.- 2003;- V. 170.- № 5.- p. 25402548.

109. Stoop JN, van der Molen RG, Baan CC, van der Laan LJ, Kuipers EJ, Kusters JG, Janssen HL. Regulatory T cells contribute to the impaired immune response in patients with chronic hepatitis В virus infection. // Hcpatology. -2005 Apr.- 41(4).- p. 771-8.

110. Streetz KL, Lucdde T, Manns MP, Trautwein C. Interleukin 6 and liver regeneration.// Gut.-2000 Aug.-47(2).-p. 309-12.

111. Streetz KL, Wustefeld T, Klein C, Manns MP, Trautwein C. Mediators of inflammation and acute phase response in the liver. // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand).- 2001 Jun.- 47(4).- p. 661-73.

112. Suzuki K, Nakaji S, Yamada M, Totsuka M, Sato K, Sugawara K. Systemic inflammatory response to exhaustive exercise. Cytokine kinetics. // Excrc Immunol Rev.- 2002.- 8.- p: 6-48.

113. Szkaradkiewicz A, Jopek A, Wysocki J, Grzymislawski M, Malecka I, Wozniak A. HBcAg-specific cytokine production by CD4 T lymphocytes of children with acute and chronic hepatitis В; // Virus Res.- 2003 Nov.- 97(2).-p. 127-33.

114. Tajimi M, Ugajin T, Ota M, Hiroishi K, Nakamura I, Imawari M. Immune responses of liver-infiltrating lymphocytes and peripheral bloodmononuclear cells to hepatitis С virus core and NS3 antigens. // Hepatol Res.-2006 Aug.- 35(4).- 250-5.

115. Tang JT, Fang JY, Gu WQ, Li EL. T cell immune response is correlated with fibrosis and inflammatory activity in hepatitis В cirrhotics. // World J Gastroenterol: -2006 May.- 21.- 12(19).- p. 3015-9.

116. Trobonjaca Z., Kroger A., Stober D. et al. Activating immunity in the liver. П. IFN-p attenuates NK cell-dependent liver injury triggered by liver NKT cell activation. // The Journal of Immunology. -2002,- V. 168.- № 8.-p. 3763-3770.

117. Varma Т.К., Lin C.Y., Toliver-Kinsky Т.Е. et al. Endotoxin-induced gamma interferon production: contributing cell types and> key regulatory factors. // Clinical and:Diagnostic Laboratory Immunology. -2002, May.- V. 9.- № 3.- p. 530-543. .

118. Xing L, Remick DG. Relative cytokine and cytokine inhibitor production by mononuclear cells and neutrophils. // Shock. -2003 Jul.- 20(1).-p. 10-6.

119. Yang JH, Zhang YX, Yu RB, Su C, Sun NX. CD4+ CD25+ regulatory T cells suppress CD4+ T cell responses in patients with persistent hepatitis С virus infection.// Zhonghua Nei Ke Za Zhi. -2006 Jan.- 45(1).- p. 29-33.

120. Yaqoob P, Calder PC. Cytokine production by human peripheral blood mononuclear cells: differential senstivity to glutamine availability. // Cytokine.- 1998 Oct.-10(10).- p. 790-4.

121. Zekri AR, Ashour MS, Hassan A, Alam El-Din HM, El-Shehaby AM, Abu-Shady MA. Cytokine profile in Egyptian hepatitis С vims genotype-4 in relation to liver disease progression. // World J Gastroenterol.- 2005 Nov.-14.- 11(42).-p. 6624-30.

122. Zhang P, Chen Z, Chen F, Li MW, Fan J, Zhou HM, Liu JH, Huang Z. Expression of IFN-gamma and its receptor alpha in the peripheral blood of patients with chronic hepatitis C. // Chin Med J (Engl).- 2004 Jan.- 117(1).- p. 79-82.