Цитогенетические эффекты нейтронной терапии у больных злокачественными новообразованиями тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат наук Мельников, Александр Александрович

• Мельников, Александр Александрович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Мельников, Александр Александрович

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Радиационно-индуцированный хромосомный дисбаланс и методы его регистрации

1.1.1. Общие представления о закономерностях и механизмах возникновения радиационно-индуцированных хромосомных мутаций

1.1.2. Методы регистрации радиационно-индуцированных хромосомных аномалий

1.2. Особенности цитогенетических эффектов лучевой терапии у больных злокачественными новообразованиями

1.2.1. Уровень хромосомных мутаций в лимфоцитах периферической крови онкологических больных

1.2.2. Частота и спектр цитогенетических аномалий у больных злокачественными новообразованиями при различных видах лучевой терапии

1.2.3. Факторы, модифицирующие цитогенетические эффекты лучевой терапии у онкологических больных

1.3. Дистанционная нейтронная терапия

1.3.1. Радиобиологическое обоснование применения нейтронного излучения в онкологии

1.3.2. Лучевые повреждения нормальных тканей больных злокачественными новообразованиями при нейтронной терапии

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объем и структура материала

2.2. Нейтронная терапия местных рецидивов рака молочной железы и опухолей головы и шеи

2.3. Методы цитогенетического анализа

2.3.1. Культивирование клеток и приготовление препаратов для цитогенетического анализа

2.3.2. Цитогенетический анализ хромосомных аберраций

2.4. Методы молекулярно-цитогенетического анализа

2.4.1. Приготовление препаратов двухъядерных цитокинез-блокированных лимфоцитов периферической крови человека

2.4.2. Получение центромеро-специфичных ДНК-зондов

2.4.3. Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH)

2.4.4. Оценка частоты кластогенных и анеугенных нарушений

2.5. Метод детекции флуоресцентных фокусов белков репарации ДНК

2.5.1. Выделение лимфоцитов периферической крови и приготовление препаратов

2.5.2. Иммуноокрашивание препаратов лимфоцитов

2.5.3. Получение изображений и оценка фокусов белков

репарации ДНК

2.6. Статистические методы

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Динамика хромосомных мутаций у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных новообразованиями головы и шеи при нейтронной терапии

3.1.1. Аберрации хромосомного и хроматидного типа в лимфоцитах больных до лечения быстрыми нейтронами

3.1.2. Частота и спектр хромосомных аберраций при нейтронной терапии

3.2. Изучение кластогенных и анеугенных нарушений хромосом у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных новообразованиями головы и шеи при нейтронной терапии

3

3.2.1. Оценка частоты и спектра микроядер в лимфоцитах больных

злокачественными новообразованиями до лечения быстрыми нейтронами

3.2.2. Частота кластогенных и анеугенных событий в лимфоцитах онкологических больных при нейтронной терапии

3.3. Межгрупповой анализ цитогенетических эффектов в лимфоцитах больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи

3.4. Оценка связи активности репарационной системы и радиационно-индуцированного хромосомного дисбаланса в лимфоцитах больных

злокачественными новообразованиями после нейтронной терапии

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АФ - ацентрические фрагменты АХ - адъювантная химиотерапия Гр - Грей

ДЛТ - дистанционная лучевая терапия ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДЦ - дицентрическая хромосома ЗНО - злокачественные новообразования ИР - изохроматидный разрыв КХ - кольцевая хромосома ЛПЭ - линейная передача энергии МР - местные рецидивы МЯ - микроядра

НМ - нуклеоплазматические мосты

НХТ - неоадъювантная химиотерапия

ОБЭ - относительная биологическая эффективность

ОГШ - опухоли головы и шеи

ОСЖ - околоушная слюнная железа

ПФ - парный фрагмент

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РМЖ - рак молочной железы

РМЭ - радикальная мастэктомия

СХО - сестринские хроматидные обмены

ФГА - фитогемагглютинин

ХР - хроматидный разрыв ХрО - хроматидный обмен XT - химиотерапия

CBMN (от англ. Cytokinesis Blocked Micronucleus) - микроядерный тест цитокинез блокированных лимфоцитов

CMF (от англ. Cyclophosphamide, Methotrexate and Fluorouracil) - комбинация химиопрепаратов: циклофосфамид, метотрексат, фторурацил

Cyt-B (от англ. Cytochalasin В) - цитохалазин В

DABCO (от англ. 1,4-diazabicyclo-2,2,2-octane) - диазобицикло-2,2,2-октан

DAPI (от англ. 6-Diamidino-2-Phenylindole, Dilactate) - 4,6-диамидино-2-фенилиндол

FAC (от англ. fluorouracil, doxorubicin, cyclophosphamide) - комбинация химиопрепаратов: фторурацил, адриабластин, циклофосфан

FISH (от англ. Fluorescence in situ Hybridization) - флюоресцентная in situ гибридизация

SKY (от англ. Spectral Karyotyping) - спектральное кариотипирование

WCP (от англ. Whole Chromosome Painting) - флюоресцентная in situ гибридизация с набором цельнохромосомных ДНК-проб

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Цитогенетические эффекты нейтронной терапии у больных злокачественными новообразованиями»

ВВЕДЕНИЕ

Проблема радиационного воздействия на организм человека была и остается наиболее актуальной и находится в центре внимания Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), Международной комиссии по радиологической защите (МКРЗ), Научного комитета по действию атомной радиации (НКДАР), Международного агентства по атомной энергетике (МАГАТЭ). Исследования эффектов терапевтического излучения на организм больных злокачественными новообразованиями вызывают вполне закономерный интерес. В индустриально развитых странах более 70 % онкологических больных получают лучевую терапию в виде основного, адъювантного, неоадъювантного и паллиативного лечения (Jeremic et al.s 2011). Тенденция к возрастанию роли ионизирующих излучений в лечении злокачественных новообразований обусловлена высокой эффективностью и органосохраняющей направленностью их воздействия на пораженный орган, позволяющей добиться выздоровления на фоне хорошей социальной и семейной реабилитации (Важенин, 2003; Цыб, Гулидов, 2010). Между тем анализ клинических данных показывает, что у части больных после лучевой терапии развиваются лучевые изменения нормальных тканей и критических органов. Накопленные радиобиологические сведения дают основание считать, что повреждениям хромосомного аппарата принадлежит ведущая роль в развитии постлучевых нарушений и лучевой гибели клеток (Бочков, Чеботарев, 1989; Аклеев, 1995; Obe et al., 2002; Nöda et al., 2012). В этой связи объективная оценка лучевого повреждения организма пр и действии терапевтического излучения требует детального исследования его мутагенных эффектов на клеточном уровне.

Лучевые повреждения молекул ДНК и гистоновых белков проявляются в виде хромосомных перестроек, которые отражают кластогенный эффект ионизирующего излучения. Индукция хромосомных мутаций сопровождается задержкой деления, кроме того структурные повреждения

хромосом, в частности асимметричные обмены, являются причиной нарушения процессов цитотомии и клеточного деления, которые в дальнейшем приводят клетку к необратимой гибели (Pobiega, Marcand, 2010). Формирование специфических цитогенетических аномалий в различных тканях на сегодняшний день рассматривается как этиологический фактор канцерогенеза (Shah et al., 2012). Наличие хромосомных мутаций, в число которых входят как структурные повреждения (транслокации, инверсии, инсерции, кольцевые хромосомы), так и числовые нарушения — неотъемлемое свойство всех клеток злокачественных новообразований (Duesberg, 2004). В мировой литературе начинают накапливаться данные, указывающие на возникновение числовых нарушений хромосом при воздействии ионизирующего излучения (Назаренко, Тимошевский, 2005; Васильев, 2010; Uchida et al., 1975; Natarajan et al., 1991; Kirsch-Volders et al., 1996). Доминирующей гипотезой возникновения анеуплоидных клеток является представление о действии свободных радикалов на структуры, обеспечивающие клеточное деление. Таким образом, достоверная оценка цитогенетических эффектов ионизирующей радиации требует учета не только кластогенных, но и анеугенных событий.

На сегодняшний день накоплено достаточное количество информации о цитогенетических эффектах редкоионизирующего терапевтического излучения (Tawn et al., 2000; Bilban-Jakopin, Bilban, 2001; Pouzoulet et al., 2003; Kumari et al., 2005; Kinashi et al., 2007; Gamulin et al., 2008; Hartel et al., 2010), тогда как воздействие плотноионизирующих видов терапевтического излучения на хромосомы человека остается наименее изученным. Учитывая увеличивающийся потенциал плотноионизирующих излучений в радиационной онкологии, особое значение приобретает вопрос о мутагенном эффекте терапевтического нейтронного излучения, использование которого представляется перспективным в лечении радиорезистентных опухолей (Мусабаева, Лисин., 2008; Мусабаева и др., 2013). На сегодняшний день основной массив данных по исследованию мутагенного потенциала

нейтронного излучения представлен результатами in vitro. Недостаточность информации о действии терапевтического нейтронного излучения на генетический аппарат в условиях in vivo обусловливает актуальность исследований, направленных на оценку влияния нейтронной терапии на возникновение структурных и числовых хромосомных мутаций в соматических клетках больных злокачественными новообразованиями.

Цель работы:

Определить цитогенетические эффекты нейтронной терапии у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных злокачественными новообразованиями головы и шеи.

Задачи исследования:

1. Установить фоновый уровень хромосомных аберраций и микроядер у онкологических больных до начала нейтронной терапии в сравнении со значениями в контрольной группе индивидов.

2. Проанализировать частоту и спектр структурных хромосомных мутаций в лимфоцитах периферической крови больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных злокачественными новообразованиями головы и шеи в динамике курса нейтронной терапии.

3. Оценить анеугенный эффект нейтронного излучения в лимфоцитах периферической крови больных злокачественными новообразованиями изучаемых локализаций.

4. Провести сравнительный анализ цитогенетических эффектов нейтронной терапии у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи.

5. Оценить связь активности репарационной системы и радиационно-индуцированного хромосомного дисбаланса в лимфоцитах больных злокачественными новообразованиями при нейтронной терапии.

Научная новизна:

Впервые с помощью цитогенетического и молекулярно-

i

цитогенетического анализа хромосомных аберраций и микроядер показано наличие мутагенного эффекта нейтронной терапии у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи. Определена положительная динамика выхода хромосомных аберраций в лимфоцитах больных ЗНО в ходе лечения быстрыми нейтронами. Показано, что основным типом радиационно-индуцированных хромосомных мутаций у онкологических больных являются аберрации хромосомного типа и центромеро-негативные микроядра. Обнаружено повышение частоты центромеро-позитивных микроядер в конце лечения быстрыми нейтронами, что отражает анеугенный эффект нейтронного облучения. Не показано различий в цитогенетических эффектах, вызванных воздействием терапевтического нейтронного излучения у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи. Установлено наличие обратной связи между активностью репарационной системы и индуцированными терапевтическим нейтронным излучением хромосомными мутациями в лимфоцитах больных злокачественными новообразованиями.

Теоретическая н практическая значимость результатов:

Полученные результаты расширяют фундаментальные представления о структурной и числовой изменчивости хромосомного материала соматических клеток человека in vivo при воздействии терапевтического нейтронного излучения и могут быть использованы в дальнейших исследованиях мутагенного потенциала плотноионизирующей радиации. Использование методов цитогенетического и молекулярно-цитогенетического анализа хромосомных аберраций и микроядер может быть применено при комплексных исследованиях воздействия лучевой терапии на нормальные ткани и критические органы больных злокачественными новообразованиями. Осуществлен анализ влияния терапевтического нейтронного излучения на хромосомный аппарат соматических клеток

больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи в клинических условиях. Определена частота и спектр аберраций хромосом и микроядер при воздействии нейтронного излучения на соматические клетки больных ЗНО. Показана обратная зависимость частоты радиационно-индуцированных аберраций хромосомного типа от уровня фокусов белка репарации уН2АХ до нейтронной терапии, что может быть использовано для индивидуализации схем лучевой терапии. Материалы работы могут быть использованы в учебно-методическом процессе на медицинских и биологических факультетах ВУЗов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Терапевтическое нейтронное излучение оказывает кластогенное и анеугенное действие на хромосомный аппарат лимфоцитов больных злокачественными новообразованиями.

2. Кластогенный эффект терапевтического нейтронного излучения возникает за счет повышения частоты стабильных и нестабильных аберраций хромосомного типа, а также центромеро-негативных микроядер, тогда как анеугенный эффект формируется за счет повышения частоты центромеро-позитивных микроядер.

3. Спонтанный уровень фокусов белка уН2АХ определяет активность репарационной системы лимфоцитов больных злокачественными новообразованиями при терапевтическом нейтронном облучении.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, в том числе 4 статьи в журналах перечня ВАК РФ (одна в зарубежной печати). Получено положительное решение о проведении формальной экспертизы по заявке на патент № 2012148102, приоритет от 12.11.2012, «Способ прогнозирования индивидуальной радиочувствительности больных злокачественными новообразованиями при лучевой терапии».

Структура диссертации:

Диссертационная работа изложена на 158 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы и приложений. Данные проиллюстрированы 12 таблицами, 18 рисунками и 5 приложениями. Библиографический указатель включает 223 источника, из них 45 отечественных и 178 зарубежных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Радиационно-индуцированный хромосомный дисбаланс

и методы его регистрации

1.1.1. Общие представления о закономерностях и механизмах возникновения радиационно-индуцированных хромосомных мутаций

Исследования биологического действия ионизирующего излучения сыграли важную роль в развитии представлений о структурной и функциональной организации хромосомного аппарата. Эти исследования внесли значительный вклад в разработку ряда теоретических вопросов - о механизмах формирования изменений хромосом, о роли этих изменений в жизнедеятельности клетки и эволюции организма (Дубинин, Хвостова, 1935; Прокофьева-Бельговская и др., 1969; Бочков, 1971, 1978; Графодатский, 2001; Auerbach, Kilbey, 1971).

Начиная с 30-х годов и по настоящее время предлагаются различные гипотезы образования радиационно-индуцированных хромосомных аберраций. Так в 1929 году выдающимся российским генетиком A.C. Серебровским была сформулирована теория «предшествующего контакта», в основе которой лежит представление о том, что аберрантная структура является следствием контакта двух и более хромосом в момент облучения (Serebrovski, 1929). Уже в 1931 году L.J. Stadler выдвинул альтернативную гипотезу, согласно которой под действием радиации образуются разрывы хромосом, и при дальнейшем взаимодействии между собой эти разрывы формируют видимый спектр цитогенетических нарушений (Stadler, 1931).

Представления о механизмах индукции хромосомных мутаций в 40-х годах базировались на модели «разрывов и воссоединений» (Sax, 1938, 1940, 1941). Согласно этой модели, разрывы распределены случайно по длине хромосомы, а взаимодействие любых двух свободных концов равновероятно и не зависит от расстояния между ними в момент их образования. В середине 50-х годов была предложена «обменная» гипотеза образования хромосомных

аберраций (Revell, 1955). В ее основе лежит представление о том, что первичным звеном радиационного мутагенеза является не разрыв хроматиды, а некое нестабильное повреждение, природа которого в то время еще не была выяснена. Автор гипотезы предполагает, что инициация хромосомного обмена - это взаимодействие двух и более первичных нарушений.

Идея о том, что видимые изменения хромосом представляют собой результат их первичного повреждения, нашла также отражение в «матричной» гипотезе Н.В. Лучника, согласно которой возникновение хромосомных аберраций приурочено к определенному периоду клеточного цикла и связано с повреждением матричной структуры ДНК и нарушением процессов репликации (Лучник, 1959). В дальнейшем были выдвинуты гипотезы, связывающие образование перестроек хромосом с неправильным осуществлением процессов репарации (Evans, 1962). В значительной мере возникновение репарационных гипотез обусловлено бурным развитием молекулярной биологии в начале 60-х годов XX века и углубленным пониманием механизмов структурной и функциональной организации генома клетки. Таким образом, уже в середине XX века было экспериментально показано, что формирование радиационно-индуцированных хромосомных аберраций представляет собой сложный многоступенчатый процесс и является результатом взаимодействия множества событий в облученной клетке.

На сегодняшний день установлено, что мутагенный эффект ионизирующих излучений на хромосомный аппарат возникает вследствие адсорбции энергии внутри или вблизи молекулы ДНК (Nodaetal., 2012; Schanz et al., 2012; Byrne et al., 2013). Биологическое действие ионизирующего излучения можно разделить на первичные физико-химические процессы, возникающие в молекулах ДНК и окружающем их субстрате (прямое действие), и вторичные, являющиеся следствием влияния активных форм кислорода и продуктов радиолиза воды (косвенное действие) (рис. 1).

Ионизирующее излучение

Н- ОН" Н30+ ч, ОН- Hj н2о2

Продукты радиолиза воды ]

Нарушения структуры ДНК

Разрывы ДНК

Изменение конформации ДНК

Структурные нарушения хромосом

Нарушения структуры белков

Сшивки белок-белок

Сшивки ДНК-белок

Хромосомное нерасхождение и отставание

Хромосомные мутации

Геномные мутации

L

J

Радиационно-индуцированный хромосомный дисбаланс

Рис. 1. Механизмы действия ионизирующей радиации на хромосомный аппарат клеток (по Ма1еиса е1 а1., 2006 с модификациями).

Значимыми биологическими эффектами прямого воздействия радиации на клетки являются, прежде всего, нарушение целостности мембран и повреждение молекул ДНК, что рассматривается в качестве одной из главных причин клеточной гибели (Бочков, 1971; Бочков, Чеботарев, 1989; Nöda et al., 2012). Радиационно-зависимое образование и накопление свободных радикалов, являющихся сильными генотоксикантами, отражает косвенное действие радиации (DeFedericis et al., 2006; Dizdaroglu, 2012). Установлен широкий спектр первичных радиационно-индуцированных повреждений ДНК, приводящих к появлению аберраций хромосом: повреждения оснований, сшивки ДНК-ДНК и ДНК-белок, алкилирование

оснований или фосфатных групп, интеркаляции, тиминовые димеры, апуриновые или апиримидиновые сайты (Mateuca et al., 2006).

В результате как прямого, так и косвенного действия ионизирующего излучения происходит повреждение молекул ДНК, а 'также белков, принимающих участие в процессах формирования аппарата сегрегации хромосом. При этом наиболее значимым событием является возникновение числовых нарушений хромосом (Tanaka, Hirota, 2009). Особое значение числовых нарушений объясняется тем, что в результате аномального распределения или потери отдельных хромосом в дочерних клетках возникает дисбаланс по большому числу генов, что может быть причиной клеточной гибели либо злокачественной трансформации (Duesberg et al., 2000, 2004; Deng, Disteche, 2010). Факт анеугенных эффектов радиации подтвержден работами отечественных и зарубежных исследователей (Назаренко, Тимошевский, 2005; Васильев, 2010; Uchida et al., 1975; Natarajan et al., 1991; Kirsch-Volders et al., 1996). Доминирующей гипотезой возникновения анеуплоидных клеток является представление о действии продуктов радиолиза на структуры, обеспечивающие клеточное деление. Принимая во внимание комплексный характер действия ионизирующего излучения и наличие в нем химической составляющей в виде свободных радикалов, исследования анеугенного эффекта ионизирующего излучения приобретают особую значимость и требуют дальнейших экспериментальных подтверждений (Назаренко, Тимошевский, 2005).

Однако следует отметить, что числовые нарушения хромосом на сегодняшний день не являются общепризнанным маркером радиации, в отличие от структурных перестроек хромосом. Рассмотрим основные формы структурных нарушений применительно к воздействию ионизирующей радиации.

Основным и наиболее значимым повреждением при действии радиации являются двухцепочечные разрывы молекул ДНК (Haber, 2000; Karran, 2000). Возникая в пресинтетической фазе, двухцепочечный разрыв ДНК в

отсутствии репарации приводит к дефекту в обеих хроматидах (Bender et al., 1988; Cornforth, 2001). Таким образом, спектр радиационно-индуцированных цитогенетических нарушений в митозе представлен аберрациями хромосомного типа.

По своей морфологии аберрации хромосомного типа разделены на две группы - внутрихромосомные и межхромосомные (Захаров и др., 1982; Бочков, Чеботарев, 1989). Внутрихромосомные перестройки подразделяются на внутри- и межплечевые нарушения. В обоих случаях они являются следствием отделившихся участков хромосом - фрагментов, которые расположены свободно (рис. 2 б, г, д, е), либо в результате воссоединения находятся в составе аберрантной структуры (рис. 2 в). В случае свободного расположения возникает два типа фрагментов: центрические и ацентрические (участок хромосомы, не имеющий центромеры). Центрические фрагменты, по существу, являются делетированной хромосомой. Размер фрагмента может варьировать в широком диапазоне и зависит от локализации разрыва/разрывов ДНК. Большой по величине ацентрический фрагмент будет наблюдаться в случае локализации разрыва в околоцентромерной области хромосомы (рис. 2, б). При расположении разрыва вблизи теломерной области хромосомы, а также при небольших интерстициальных делециях формируются фрагменты малой величины (рис. 2, г). Крупные по размерам интерстициальные делеции могут привести к появлению ацентрических колец, которые являются следствием замыкания делетированного фрагмента с обоих концов (рис. 2, д). Ацентрические кольца, как и парные фрагменты, являются участком хромосомы из одного плеча и относятся к группе внутриплечевых перестроек. Ацентрические кольца встречаются с частотой 1 на 300 клеток у здоровых людей (Шевченко и др., 1995). Ацентрические фрагменты относятся к нестабильным аберрациям и их уровень постепенно снижается в ходе клеточных делений

Go фаза 1 j 1 1Ь 1 j 1 J 1 • J w

М фаза J 8 i 1 • • 1 а» О

Рис. 2. Схема образования внутрихромосомных аберраций (внутри- и межплечевые).

Примечание: а - хромосома без повреждений; б - крупный ацентрический фрагмент; в - перицентрическая инверсия; г - интерстициальная делеция; д - ацентрические кольцевые хромосомы; е - центрическая кольцевая хромосома и ацентрический фрагмент.

(Ривклид и др., 1996; Lloyd et al., 1980). Как правило, наличие ацентрических фрагментов (ацентрических колец) не сказывается на жизнеспособности клеток, поскольку данный хромосомный материал может беспрепятственно остаться в одной из дочерних клеток, сформировать вокруг себя ядерную мембрану (образование микроядра), либо лизироваться нуклеазами в цитоплазме (Mateuca et al., 2006).

Группа внутрихромосомных межплечевых перестроек представлена центрическими кольцами и перицентрическими инверсиями (рис. 2, в, е). Для образования центрической кольцевой хромосомы необходимо два разрыва в дистальных отделах плеч хромосом с последующим замыканием центрического фрагмента в кольцо (рис. 2, е). Данные аберрации имеют низкую спонтанную частоту возникновения в лимфоцитах, которая

составляет, по мнению ряда авторов, порядка 0,001 % (Ivanov, Praskova, 1978; Gundy, Varga, 1983). Перицентрические инверсии являются результатом двух разрывов и аберрантного воссоединения, развернутого на 180 ° интерстициального участка хромосомы (рис. 2, в). При перицентрической инверсии интерстициальный участок обязательно несет в себе центромерную область хромосомы. Стоит обратить внимание на различную жизнеспособность клеток с внутрихромосомными межплечевыми нарушениями. Центрические кольца подвергаются отрицательной селекции в ходе клеточных делений и, таким образом, быстро элиминируются. Как правило, центрические кольца приводят к гибели клетки, так как формируют анафазные мосты и нарушают процесс цитотомии (Lloyd et al., 1980). Напротив, перицентрические инверсии беспрепятственно проходят этап клеточного деления и сохраняются длительное время в ряду клеточных поколений, так как являются моноцентрическими хромосомами и, таким образом, представляют собой сбалансированный генетический материал (Nakano et al., 2001).

В результате перераспределения материала между несколькими хромосомами возникают межхромосомные перестройки, представленные симметричными и асимметричными обменами (рис. 3). Хромосомы, имеющие более одной центромеры (дицентрические, трицентрические, тетрацентрические), являются результатом межхромосомных асимметричных обменов центрического типа (рис. 3, б). Дицентрические хромосомы формируются при образовании разрывов в двух хромосомах с последующим слиянием образованных центрических фрагментов. Кроме того, возможно теломерное слияние двух гомологов с укороченными или поврежденными теломерами (Pampalona et al., 2010). Как правило, при формировании дицентрической хромосомы образуются ацентрические фрагменты, число которых может варьировать (Захаров и др., 1982; Бочков, Чеботарев, 1989). Спонтанная частота возникновения дицентрических

во фаза 1 и [

М фаза / Л а 1 ! ] 6 л 1 1 1

Рис. 3. Схема образования межхромосомных аберраций (симметричные и асимметричные обмены).

Примечание: а - хромосома без повреждений; б - дицентрическая хромосома (асимметричный обмен); в - транслокация (симметричный обмен).

хромосом очень низка и составляет, по данным разных авторов, от 1 до 10 на 10000 клеток (Нугис, Чирков, 1990).

Транслокации являются результатом симметричного обмена, который приводит к образованию моноцентрических хромосом (рис. 3, в). При симметричном обмене измененными будут две хромосомы, в одной из которых будет избыток материала, а в другой - недостаток такой же величины. Если это правило не соблюдается, то, видимо, имеется более сложная перестройка с вовлечением в нее нескольких хромосом (№капо е1 а1., 2001).

Согласно «эффекту близости», описанному в 90-х годах XX века, межхромосомные симметричные обмены являются следствием взаимодействия расположенных вблизи повреждений участков хромосом, что может быть обусловлено территориальными особенностями их расположения (Сгешег, 1996). О важной роли локализации хромосом в пространстве интерфазного ядра свидетельствует ряд исследований. В

частности, было показано, что вовлеченность хромосомы 1 в обменные перестройки в 7 раз выше, чем предполагается на основе равновероятного вовлечения хромосомного материала (Savage et al., 1996). Таким образом, роль структурной организации хромосом в образовании радиационно-индуцированных обменных аберраций требует дальнейшего изучения.

Жизнеспособность клеток с симметричными и асимметричными хромосомными обменами различная. Являясь генетически сбалансированными, транслокации не имеют ограничений при прохождении через митоз, в то время как полицентрические хромосомы подвергаются отрицательной селекции (Fuchs, Molls, 2000; Bauchinger et al., 2001; Durante et al., 2001). Было показано, что в 50 % случаях дицентрические хромосомы формируют анафазный мост, который разрывается, приводя клетку к гибели (Lucas, 1998). В остальных случаях обе активные центромеры отходят к одному полюсу, что приводит к успешному прохождению деления и сохранению дицентрической хромосомы в одной из дочерних клеток (Higgins et al., 1999; Ma et al., 2007; Pobiega, Marcand, 2010). Стоит отметить, что дицентрические и кольцевые хромосомы являются общепризнанными и достоверными цитогенетическими маркерами радиационного воздействия (Biological Dosimetry, 1986; Awa, 1988; Bender et al., 1988).

Отступая от описательных аспектов структурной изменчивости хромосом, необходимо, в первую очередь, рассмотреть закономерности выхода хромосомных мутаций в зависимости от вида и физических характеристик ионизирующего излучения.

Действие ионизирующей радиации на хромосомный аппарат зависит, прежде всего, от физических характеристик самого излучения (Цыб, Будагов, 2005). Различают редко и плотно ионизирующее излучение, проводя между ними границу на основе величины средней энергии, передающейся на единицу длины трека - линейной передачи энергии (ЛПЭ).

При действии плотно ионизирующего излучения (нейтронов, протонов, пи-мезонов) образуется сравнительно мало отдельных треков с высокой

степенью ионизации. Плотноионизирующее излучение с высокими значениями ЛПЭ индуцирует появление не одного, а двух (или более) повреждений хромосомы (Du et al., 2011). Такие поврежденные районы взаимодействуют с образованием обменов. Дозозависимый цитогенетический эффект плотноионизирующего излучения описывают линейной моделью (Biological Dosimetry, 1986; George et al., 2002):

Y= aD+ p, где D — доза, a, /? - коэффициенты (параметры) модели, Y— уровень обменных нарушений хромосомного типа — дицентрических и кольцевых хромосом на 100 клеток.

Рентгеновские и гамма-лучи отличаются от плотноионизирующей радиации редкими актами ионизации вдоль трека. Одного эффективного акта ионизации достаточно, чтобы возникло повреждение хромосомы, которое в последующем приведет к ее разрыву. Исторически первым изученным является цитогенетический эффект рентгеновского излучения, которое используется в лечебно-диагностических целях с начала XX века. Для обменных аберраций обычно описывают двухударную (многоударную) компоненту дозовых зависимостей редкоионизирующих излучений, которая представляет собой линейно-квадратичную модель (Biological Dosimetry, 1986; Lloyd et al., 1988, Muhlmann-Diaz, Bedford, 1997):

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мельников, Александр Александрович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аклеев A.B. Иммунологические и цитогенетические последствия хронического радиационного воздействия на организм человека: Автореф. дис. доктора мед. наук. - М., 1995. - 48 с.

2. Аклеев A.B., Ава А., Акияма М. и др. Биологическая индикация хронического облучения в отдаленные сроки // Мед. Радиология. -1996.-Т. 1.- С. 7-9.

3. Баранов B.C., Кузнецова Т.В. Цитогенетика эмбрионального развития человека // Санкт-Петербург: Издательство H-JI, 2007. 639 с.

4. Бочков Н.П. Хромосомы человека и облучение. - М.: Атомиздат, -1971.- 270 с.

5. Бочков Н.П. Генетика человека: наследственность и патология - М.: Медицина., 1978. - 384 с.

6. Бочков Н.П., Захаров А.Ф., Иванов В.И. Медицинская генетика: Руководство для врачей - М.: Медицина., 1984. - 386 с.

7. Бочков Н. П., Чеботарев А.Н. Наследственность человека и мутагены внешней среды. - М.: Медицина, - 1989. - 270 с.

8. Бочков Н.П. Анализ типов аберрантных клеток - необходимый элемент биологической индикации облучения // Медицинская радиология. - 1993а. - № 2. - С. 32-35.

9. Бочков Н.П. Аналитический обзор цитогенетических исследований после Чернобыльской аварии // Вестник РАМН. - 19936. - № 6. -С. 51-56.

10. Бочков Н.П., Бочарова O.A., Аксенов A.A. и др. Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы // Медицинская генетика. -2005. - Т. 4. -№ 1. - С. 15-19.

11. Важенин A.B. Радиационная онкология: организация, тактика, пути развития // М.: Издательство РАМН. 2003. - 236 с.

12. Васильев С.А. Действие малых доз инкорпорированного плутония-239 на частоту анеуплоидии в соматических клетках человека// Автореф. дис. ... кандидата биол. наук. - Томск.: НИИ медицинской генетики СО РАМН. -2010.-22 с.

13. Возилова A.B., Аклеев A.B., Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Отдаленные цитогенетические эффекты хронического облучения населения Южного Урала // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1998.-Т. 38.-Вып. 4.- С. 586-591.

14. Воробцова И.Е., Тимофеева Н.М., Богомазова А.Н. Возрастная зависимость частоты стабильных хромосомных аберраций, определяемых методом FISH, в лимфоцитах здоровых доноров и лиц, подвергшихся неконтролируемому облучению в малых дозах // Успехи геронтологии. - 1999. - Т. 3. - С. 88-93.

15. Воробцова И.Е., Такер Дж.Д., Тимофеева Н.М. и др. Влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом FISH в лимфоцитах человека // Радиационная биология, радиоэкология. - 2000. - Т. 40. - № 2. - С. 142-148.

16. Графодатский A.C. "Хромосомная живопись" в сравнительной цитогенетике // Биологические мембраны. 2001. -Т. 18. - № 1. - С. 173-179.

17. Гулидов И. А. Сочетанная гамма-терапия больных злокачественными новообразованиями с использованием быстрых нейтронов реактора: Автореф. дис. ... докт. мед. наук. - Обнинск, 1998.-32 с.

18. Дистанционная нейтронная терапия / Б.Н. Зырянов, Л.И. Мусабаева, В.Н. Летов, В.А. Лисин. - Томск: Изд-во ТГУ, 1991. - 300 с.

19. Дубинин Н.П., Хвостова B.B. Механизм образования сложных хромосомных реорганизаций // Биол. журнал. - 1935. - Т. 4. - № 6. -С. 935-975.

20. Дубинина Л.Г. Лейкоциты крови человека — тест-система для оценки мутагенов среды. - М.: Наука, - 1977. - 151 с.

21. Зайцева Е.М., Говорун Р. Д., Мицын Г.В. и др. Оценка цитогенетическими методами эффективности облучения клеток человека протонами терапевтического пучка фазотрона ОИЯИ // Письма в ЭЧАЯ. - 2011. - Т. 8. - № 6 (169). - С. 996-1006.

22. Захаров А.Ф., Бенюш В.А., Кулешов Н.П., Барановская Л.И. Хромосомы человека. Атлас. - М.: Медицина, 1982. - 264 с.

23. Кудряшов Ю.Б. Радиационная биофизика. - М.: ФИЗМАТ ЛИТ, 2008. - 448 с.

24. Лисин В.А., Модель ВДФ для дистанционной терапии злокачественных новообразований быстрыми нейтронами // Мед.радиология. - 1988. - №9. - С.9 - 12.

25. Ллойд Д.К., Эдварде A.A. Хромосомные повреждения в лимфоцитах человека, вызванные низкими дозами облучения // Гематология и трансфузиология. - 1993. - Т.38, № 1. - С. 3 - 7.

26. Лучник Н.В. Природа первичных цитогенетических лучевых повреждений и каталитическая активность хромосом // Докл. АН СССР. - 1959. - Т. 129, № 5, - С. 1168 - 1171.

27. Мазурик В.К. Биохимическая индикация лучевого поражения // Под редакцией Кудряшова Ю.Б. / Москва: Изд-во МГУ, 1987. - С. 100103.

28. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. - М.: Мир, 1984. - 480 с.

29. Мусабаева Л.И. Лучевая терапия быстрыми нейтронами средней энергией 6,0 МэВ радиорезистентных злокачественных новообразований. - Дис.... докт. мед. наук. - Томск, 1991.- 265 с.

30. Мусабаева Л.И., Слонимская Е.М., Шагиахметова P.A. Нейтронная терапия в комплексном лечении местно-распространенного рака молочной железы // Мед. радиол, и радиоц. безопасность.- 1998. -Т.43. - № 2. - С.49-54.

31. Мусабаева Л.И., Жогина Ж.А., Слонимская Е.М., Лисин В.А. Современные методы лучевой терапии рака молочной железы. -Томск: Изд-во НТЛ, 2003. - 200 с.

32. Мусабаева Л.И. и соавт. Быстрые нейтроны в онкологии. - Томск, 2000.-188 с.

33. Назаренко С.А., Тимошевский В.А. Сравнительный анализ частоты анеуплоидии в покоящихся и делящихся клетках человека при воздействии вредных внешнесредовых факторов // Генетика. - 2005. -Т. 41, № 3. - С. 391-395.

34. Нейтронная терапия злокачественных новообразований / Под редакцией проф. Л.И. Мусабаевой, д.т.н. В.А. Лисина. - Изд-во НТЛ, Томск. - 2008. - 288 с.:ил.

35. Нугис В.Ю., Чирков A.A. Сопоставление числа хроматидных аберраций с дозой, оцененной по частоте дицентриков, при цитогенетическом исследовании лимфоцитов у лиц, пострадавших при аварии на Чернобыльской АЭС // Радиобиология. - 1990. -Т. 30.-Вып. 5.-С. 585-587.

36. Особенности механизмов действия плотноионизирующих излучений / Под. ред. A.B. Савича, В.Н. Мазурика. - М.: Медицина, 1985.-232 с.

37. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Бондарь А.Ю., Дыбский С.С. Цитогенетический анализ в соматических клетках лиц, подвергшихся радиационному воздействию в связи с аварией на Чернобыльской АЭС // Вестн. АМН СССР. - 1991. -№ 8. - С. 40 -45.

38. Прокофьева-Бельговская А.А., Бочков Н.П., Гринберг К.Н. и др. Основы цитогенетики человека. - М.: Медицина, 1969. - 544 с.

39. Ривклид Н.Б., Штырева Н.А., Старицына Н.П., Павлова Т.В. Исследование нестабильных хромосомных аберраций у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Проблемы гематологии. - 1996. - № 2. - С. 16 - 18.

40. Снигирева Г.П., Хаймович Т.И., Шевченко В.А. Использование цитогенетических методов для биологической дозиметрии. Методические рекомендации // Саров. - 2003. - 46с.

41. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая Н.Н., Хазинс Е.Д., Рубанович А.В. «Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов». Медицинская технология. / Москва. -

2007. — Регистрационное удостоверение №ФС-2007/015-У. - 29с.

42. Сосюкин А.Е. Клиническая радиология. - М.: ГЭОТАР-Медиа,

2008. - 224 с.

43. Федоров Н.А. Нормальное кровообращение и его регуляция / Москва: Медицина, 1966. - 467с.

44. Цыб А.Ф., Мардынский Ю.С. Терапевтическая радиология: Руководство для врачей / Под ред. А.Ф. Цыба, Ю.С. Мардынского. -М.: ООО «МК», 2010. - 552 е., ил., табл.

45. Цыб А.Ф., Будагов Р.С., Замулаева И.А. Радиация и патология: Учебное пособие / М.: Высш. шк., - 2005. - 341 е., ил.

46. Aristei С., Stracci F., Guerrieri P. Frequency of sister chromatid exchanges and micronuclei monitored over time in patients with early-stage breast cancer: results of an observational study // Cancer Genetics and Cytogenetics. - 2009. - Vol. 192. - P. 24 - 29.

47. Auerbach C., Kilbey B. Mutation in eukaryotes // Annual Review of Genetics.- 1971.-Vol. 5.-P. 163-218.

48. Awa A. Chromosomal aberrations in atomic bomb survivors // Japan Scientific Societies. - 1988. - №35. - P.175 - 181.

49. Banerjee B., Sharma S., Hegde S. et al. Analysis of telomere damage by fluorescence in situ hybridization on micronuclei in lymphocytes of breast carcinoma patients after radiotherapy // Breast Cancer Res. - 2008. -Vol. 107. -P. 25-31.

50. Balsara B.R., Varughese T., Bhat A.V. Cytogenetic studies on a patient with prepubertal breast cancer: a case report // Breast Cancer Res Treat. -1996. - Vol. 39, № 3. - P. 343 - 347.

51. Bauchinger M., Braselmann H., Savage J. R., Natarajan A. T. et al. Collaborative exercise on the use of FISH chromosome painting for retrospective biodosimetry of Mayak nuclear-industrial personnel // Int J Radiat Biol. - 2001. - Vol. 77, № 3. - P. 259 - 267.

52. Bonassi S., Abbondandolo A., Camurri L. et al. Are chromosome aberrations in circulating lymphocytes predictive of future cancer onset in humans? Preliminary results of an Italian cohort study // Cancer Genet. Cytogenet. - 1995. - Vol. 79. - P. 133 - 135.

53. Bender M.A., Awa A., Brooks A.L. et al. Current status of cytogenetic procedures to detect and quantify previous exposures to radiation // Mutation Research. - 1988.-Vol. 196. - P. 103 -159.

54. Bilban-Jakopin C., Bilban M. Genotoxic effects of radiotherapy and chemotherapy on circulating lymphocytes in patients with Hodgkin's disease // Mutation Research. - 2001. - Vol. 497. - P. 81-88.

55. Bilban-Jakopin C., Bilban M. Persistent chromosomal aberrations in somatic cells in testicular cancer patients after different therapies // Radiol. Oncol. - 2001. - Vol. 35, № 4. - P. 293-301.

56. Bigatti M.P., Corona D., Munizza C. Increased sister chromatid exchange and chromosomal aberration frequencies in psychiatric patients receiving psychopharmacological therapy // Mutat Res. - 1998. - Vol. 413, № 2. -P. 169-175.

57. Bogen K.T. Reassessment of human peripheral T-lymphocyte lifespan deduced from cytogenetic and cytotoxic effects of radiation // Int J Radiat Biol. - 1993. - Vol. 64, № 2. - P. 195 - 204.

58. Borska L., Andrys C., Krejsek J. et al. Genotoxic and apoptotic effects of Goeckerman therapy for psoriasis // Int. J. Dermatol. - 2010. - Vol. 43, № 3. - P. 289-294.

59. Bonassi S., Hagmar L., Stromberg U. Chromosomal aberrations in lymphocytes predict human cancer independently of exposure to carcinogens // Cancer Res. - 2000. - Vol. 60. - P. 1619 - 1625.

60. Braselmann H., Kulka U., Baumgartner A. SKY and FISH analysis of radiation-induced chromosome aberrations: A comparison of whole and partial genome analysis // Mutation Research. - 2005. - Vol. 578. - P. 124-133.

61. Burgaz S, Coskun E, Demircigil C. Micronucleus frequencies in lymphocytes and buccal epithelial cells from patients having head and neck cancerand their first-degree relatives // Mutagenesis. - 2011. - Vol. 26.-P. 351-356.

62. Byrne H.L., McNamara A.L., Domanova W. et al. Radiation damage on sub-cellular scales: beyond DNA // Phys Med Biol. - 2013. - Vol. 5. - P. 1251- 1267.

63. Cai L. Research of the adaptive response induced by low-dose radiation: where have we been and where should we go? // Hum Exp Toxicol. -1999.- Vol. 18.-P. 419-425.

64. Cai L., Liu S.Z. Induction of cytogenetic adaptive response of somatic and germ cells in vivo and in vitro by low-dose X-irradiation // Int J Radiat Biol. - 1990.-Vol. 58.-P. 187-194.

65. Cao J., Liu Y., Sun H. et al. Chromosomal aberrations, DNA strand breaks and gene mutations in nasopharyngeal cancer patients undergoing radiation therapy // Mutation Research. - 2002. - Vol. 504. - P. 85 - 90.

66. Caspersson T., Farber S., Foley G.E. et al. Chemical differentiation along mctaphase chromosomes // Exptl. Cell Res. - 1968. - V. 49. - P.219 -222.

67. Catterall M., Bewley D.K. Fast neutrons in the treament of cancer // London, Academic Press, New York, Grene and Stratto, 1979. - 394 p.

68. Chang W.P., Hsieh W.A., Chen D.P. et al. Change in centromeric and acentromeric micronucleus frequencies in human populations after chronic radiation exposure // Mutagenesis. - 1999. - Vol. 14, № 4. - P. 427 - 432.

69. Chromosomal Alterations. Methods, Results and Importance in Human Health. Editors Obe G. and Vijayalaxmi. - Springer, 2007. - 515 p.

70. Chua M.L., Somaiah N., A'Hern R., et al. Residual DNA and chromosomal damage in ex vivo irradiated blood lymphocytes correlated with late normal tissue response to breast radiotherapy // Cancer Res. -2011. - Vol. 99, №3. - P. 362 - 366.

71. Coleman M.A., Yin E., Peterson L.E., Nelson D. Low-dose irradiation alters the transcript profiles of human lymphoblastoid cells including genes associated with cytogenetic radioadaptive response // Radiat Res. -2005.-Vol. 164.-P. 369-382.

72. Collins A.R. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications, and limitations // Mol Biotechnol. - 2004. - Vol. 26, № 3. -P. 249-261.

73. Cornforth M.N. Analyzing radiation-induced complex chromosome rearrangements by combinatorial painting // Radiat. Res. - 2001. - Vol. 155.-P. 643-639.

74. Cremer C. Nuclear architecture and the induction of chromosomal aberrations // Mutat. Res. - 1996. - Vol. 366. - P. 97 - 116.

75. DeFedericis H.C., Patrzyc H.B., Rajecki M.J. et al. Singlet oxygen-induced DNA damage // Radiat. Res. - 2006. - Vol. 165, № 4. - P. 445451.

76. Deng X., Disteche C.M. Genomic responses to abnormal gene dosage: the X chromosome improved on a common strategy // PLoS Biol. - 2010. -Vol. 8(2): el000318.

77. DeyP., Samanta S., Susheilia S. Micronucleus assay in buccal smears of breast carcinoma patients // Diagn Cytopathol. - 2012. - Vol. 40, № 8. -P. 664-666.

78. Dhillon V.S., Kler R.S., Dhillon I.K. Chromosome instability and sister chromatid exchange (SCE) studies in patients with carcinoma of cervix uteri // Cancer Genet. Cytogenet. - 1996. - Vol. 86, № 1. - P. 54 - 57.

79. Dizdaroglu M. Oxidatively induced DNA damage: mechanisms, repair and disease // Cancer Lett. - 2012. - Vol. 1. - P. 26 - 47.

80. DiTullio R.A., Jr., Mochan T.A., Venere M., Bartkova J., Sehested M., Bartek J., Halazonetis T.D. 53BP1 functions in an ATM-dependent checkpoint pathway that is constitutively activated in human cancer // Nat Cell Biol. - 2002. - Vol. 4. - P. 998 - 1002.

81. Douglas J.G, Goodkin R., Laramore G.E. Gamma knife stereotactic radiosurgery for salivary gland neoplasms with base of skull invasion following neutron radiotherapy // Mutagenesis. - 2008. - Vol. 30, № 4. -P. 492 - 496.

82. Druzhinin V.G., Akhmat'ianova V.R., Golovina T.A. Genome sensitivity and genotoxic effects features in children-teenagers affected by radonradiation in living and educational environment // Radiats. Biol. Radioecol. - 2009. - Vol. 49, № 5. - P. 568 - 573.

83. Duesberg P., Fabarius A., Hehlmann R. Aneuploidy, the primary cause of the multilateral genomic instability of neoplastic and preneoplastic cells // IUBMB Life. - 2004. - Vol. 56, № 2. - P. 65-81.

84. Duesberg P., Li R., Rasnick D. et al. Aneuploidy precedes and segregates with chemical carcinogenesis // Cancer Genet. Cytogenet. - 2000. - Vol. 119,

85. Durante M., Bonassi S., George K. Risk estimation based on chromosomal aberrations induced by radiation // Radiat. Res. - 2001. -Vol. 156.-P. 2622-2627.

86. Du G., Drexler G.A, Friedland W. Spatial dynamics of DNA damage response protein foci along the ion trajectory of high-LET particles // Japan Radiat Res. - 2011. - Vol. 23. - P. 706 - 715.

87. Gamulin M., Kopjar N., Grgic M., et al. Genome Damage in Oropharyngeal Cancer Patients Treated by Radiotherapy // Croat Med. J. -2008.-Vol. 49.-P. 515-527.

88. Evans, H.J. Chromosome aberrations induced by ionizing radiations // Int. Rev. Cytol. - 1962. - Vol. 13. - P. 221 -321.

89. Fenech M. Cytokinesis-block micronucleus assay evolves into a "cytome" assay of chromosomal instability, mitotic dysfunction and cell death // Mutat. Res. - 2006. - Vol. 600, № 1-2. - P. 58 - 66.

90. Fenech M. Important variables that influence base-line micronucleus frequency in cytokinesis-blocked lymphocytes-a biomarker for DNA damage in human populations // Mutat. Res. - 1998. - Vol. 404, № 1-2. -P. 155-165.

91. Fenech M. The advantages and disadvantages of the cytokinesis-block micronucleus method // Mutat. Res. - 1997. - Vol. 392, № 1-2. — P. 1118.

92. Fenech M. The cytokinesis-block micronucleus technique: a detailed description of the method and its application to genotoxicity studies in human populations // Mutat. Res. - 1993. - Vol. 285, № 1. - P. 35 - 44.

93. Falck G.C., Catalan J., Norppa H. Nature of anaphase laggards and micronuclei in female cytokinesis-blocked lymphocytes // Mutagenesis. -2002.-Vol. 17, №2.-P. 111-117.

94. Fenech M. Cytokinesis-block micronucleus cytome assay // Nat. Protoc. - 2007. - Vol. 2, № 5. - p. 1084 - 1104.

95. Fenech M., Morley A.A. Cytokinesis-block micronucleus method in human lymphocytes: effect of in vivo ageing and low dose X-irradiation //Mutat. Res.- 1986. -Vol. 161, №2.-P. 193 - 198.

96. Fernandez-Capetillo O., Chen H.T., Celeste A., Ward I., Romanienko P J., Morales J.C., Naka K., Xia Z., Camerini-Otero R.D., Motoyama N., Carpenter P.B., Bonner W.M., Chen J., Nussenzweig A. DNA damage-induced G2-M checkpoint activation by histone H2AX and 53BP1 // Nat Cell Biol. - 2002. - Vol. 4. - P. 993 - 997.

97. Fuchs P., Molls M. Rapid detection of radiation-induced chromosomal aberrations in lymphocytes and hematopoietic progenitor cells by M-FISH // Mutat. Res. - 2000. - Vol. 452. - P. 73 - 81.

98. Gao C., Xia F. Study on the chromosome aberration of peripheral blood lymphocytes in patients with nasopharyngeal carcinoma // Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. - 2003. - Vol. 34, № 3. - P. 489 - 490.

99. George K., Willingham V., Wu H. Chromosome aberrations in human lymphocytes induced by 250 MeV protons: effects of dose, dose rate and shielding // Adv Space Res. - 2002. - Vol. 30. - P. 891 - 899.

100. GilO.M., Oliveira N.G., Rodrigues A.S. No evidence of increased chromosomal aberrations and micronuclei in lymphocytes from nonfamilial thyroid cancer patients prior to radiotherapy // Cancer Genet Cytogenet. - 2000. - Vol. 123, № l.-P. 55-60.

101. Gocke E., Muller L., Guzzie P.J, et al. Considerations on photochemical genotoxicity: Report of the International Workshop on Genotoxicity // Env Mol Mutagenesis. - 2000. - Vol. 35, № 3. - P. 173 - 184.

102. Gooch P. C., Bender M. A., Randolph M. L. Biological Effects of Neutron and Proton Irradiations // International Atomic Energy Agency. -1964.-Vol.1.-P. 325-342.

103. Gundy S., Varga L. Chromosomal aberrations in healthy persons./ZMutat. Res. - 1983. - V.120. - №2-3. - P. 187-191.

104. Haber J.E. Partners and pathways repairing a double-strand break // Trends Genet. - 2000. - Vol. 16. - P. 259 - 264.

105. Hada M., Gersey B., Saganti P.B. mBAND analysis of chromosome aberrations in human epithelial cells induced by gamma-rays and secondary neutrons of low dose rate // Mutat Res. - 2010. - Vol. 701, № l.-P. 67-74.

106. Hahn S. Cytogenetic studes of peripheral leukocytes following surgery and radiotherapy in patients with breast carcinoma // Yonsei Medical Journal. - 1977. - Vol. 18, № 2 - P. 23 - 32.

107. Halliwell B., Gutteridge J.M. Oxygen free radicals and iron in relation to biology and medicine: some problems and concepts // Arch Biochem Biophys. - 1986. - Vol. 246. - P. 501 - 514.

108. Halpern J., Maor M.H., Hussey D.H., et al. Locally advanced breast cancer treated with neutron deams: long-term follow up in 28 patients // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. - 1990. - Apr. 18 (4). - P. 825 - 831.

109. HarsimranK., Kaur M.G., Nitika S. Chromosomal instability in the lymphocytes of breast cancer patients // Mutagenesis. - 2009. - Vol. 15, № l.-P. 13-18.

110. Hartel C., Nikoghosyan A., Durante M. et al. Chromosomal aberrations in peripheral blood lymphocytes of prostate cancer patients treated with IMRT and carbon ions // Radiotherapy and Oncology. - 2010. - Vol. 95. -P. 73 -78.

111. Higgins A.W., Schueler M.G., Willard H.F. Chromosome engineering generation of mono- and dicentric isochromosomes in a somatic cell hybrid system // Chromosoma. - 1999. - Vol. 108. - P. 256 - 265.

112. IAEA: Technical Report series №260, «Biological dosimetry: chromosomal aberration analysis for dose assessment». IAEA, Vienna -1986.-69 p.

113. IAEA: Cytogenetic analysis for radiation dose assessment. Technical Report series №405. International Atomic Energy Agency. Vienna -2001.- 127 p.

114. Iarmarcovai G., Botta A., Orsiere T. Number of centromeric signals in micronuclei and mechanisms of aneuploidy // Toxicol. Lett. - 2006. -Vol. 166, № l.-P. 1-10.

115. Iarmarcovai G., Ceppi M., Botta A. Micronuclei frequency in peripheral blood lymphocytes of cancer patients: A meta-analysis // Mutation Research. - 2008. - Vol. 659. - P. 274 - 283.

116. Ikushima T. Chromosomal responses to ionizing radiation reminiscent of an adaptive response in cultured Chinese hamster cells // Mutat Res. -1987.-Vol. 180.-P. 215-221.

117. International Journal of Radiation Biology. - 2001. - V.77. - N3. -P.259 - 267.

118. Ishidate M., Miura K.F., Sofuni T., Chromosome aberration assays in genetic toxicology testing in vitro // Mutat. Res. - 1998. - Vol. 404. - P. 167-172.

119. Ismail S.R., Kholeif S.F., Mokhtar M.M. Chromosome damage in passive smoker females / J. Iyer R., Lehnert B.E. Alpha-particle-induced increases in the radioresistance of normal human bystander cells // Egypt Public Health Assoc. - 1998. - Vol. 73. - P. 111 - 123.

120. Ivanov B., Praskova L. Spontaneous chromosomal aberrations levels in human peripheral lymphocytes.// Mutat. Res. - 1978. - V.52. - №3. -P.421-426.

121. Jackson, S. Sensing and repairing DNA double strand breaks // Carcinogenesis. - 2002. - Vol. 23. - P. 687 - 696.

122. Jeggo P.A. DNA breakage and repair // Advances in Genetics. - 1998. -Vol. 38.-P. 185-211.

123. Jeremic B., Luther W. Advances in Radiation Oncology in Lung Cancer // J Radiation Oncology. - 2011. - Vol.10. - P. 843 - 850.

124. Jimenez-Zepeda V.H., Neme-Yunes Y., Braggio E. Chromosome abnormalities defined by conventional cytogenetics in plasma cell leukemia: what have we learned about its biology? // Mutat Res.-2011.-Vol. 87, № l.-P. 20-27.

125. Jones B., Underwood T.S., Carabe-Fernandez A. Fast neutron relative biological effects and implications for charged particle therapy // Br J Radiol. - 2011. - Vol. 84, № 1. - P. 11 - 18.

126. Kallioniemi A., Kallioniemi O.P., Sudar D. et al. Comparative genomic hybridization for molecular cytogenetics analysis of solid tumor // Science. - 1992. - Vol. 258. - P. 818-821.

127. Karaman A., Dogan N.B., Mehmet E.K. et al. Micronucleus analysis in patients with colorectal adenocarcinoma and colorectal polyps // World Gastroenterol. -2008. - Vol.14. - P. 6835-6839.

128. Karran P. DNA double strand break repair in mammalian cells // Curr. Opin. Genet.-2000.-Vol. 10.-P. 144-150.

129. Kinashi Y., Sakurai Y., Masunaga S. et al. Evolution of micronucleus induction in lymphocytes of patients following boron-neutron-capture-therapy: a comparison with thyroid cancer patients treated with radioiodine // J. Radiat. Res. - 2007. - Vol. 48. - P. 197 - 204.

130. Kirsch-Volders M., Talion I., Tanzarella C. et al. Mitotic nondisjunction as a mechanism for in vitro aneuploidy induction by X-rays in primary human cells // Mutagenesis. - 1996. - Vol. 11, № 4. - P. 307313.

131. Kumari R., Chaugule A, Goyal P. Karyoanomalic frequency during radiation therapy // Cancer Res. Ther. - 2005. - Vol. 1, № 3. - P. 187 -190.

132. Lalic H., Volavsek C., Radosevic-Stasic B. Chromosomal instability and double minute chromosomes in a breast cancer patient // Acta Med Okayama. - 2004. - Vol. 58, № 1. - P. 51 - 58.

133. Lindholm C., Norppa H., Hayashi M. et al. Induction of micronuclei and anaphase aberrations by cytochalasin B in human lymphocyte cultures // Mutat. Res. - 1991. - Vol. 260, № 4. - P. 369 - 375.

134. Lloyd D.C., Purrott R.J., Reeder E.J. The incidence of unstable chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from unirradiated and occupationally exposed people // Mutation Research. -1980. - V.72. - №3. - P.523-532.

135. Lloyd D. C., Edvards A. A., Leonard A. et al. Frequencies of chromosomal aberrations induced in human blood lymphocytes by low doses of X- rays // Int. J. Radiat. Biol. - 1988. - V.53. - № 1. - P.49-55.

136. Lorge E., Thybaud V., Aardema M.J. et al. SFTG international collaborative study on in vitro micronucleus test I. General conditions and overall conclusions of the study // Mutat. Res. - 2006. - Vol. 607, № l.-P. 13-36.

137. Lou J., He J., Zheng W. et al. Investigating the genetic instability in the peripheral lymphocytes of 36 untreated lung cancer patients with comet assay and micronucleus assay // Mutation Research. - 2007. - Vol. 617. -P. 104-110.

138. Lucas J.N., Tenjin T., Straume T. et al. Rapid human chromosome aberration analysis using fluorescence in situ hybridization // International Journal of Radiation Biology. - 1989. - V. 56. - №1. - P.35 -44.

139. Lucas J.N., Awa A., Straume T. et al. Rapid translocation frequency analysis in humans decades after exposure to ionizing radiation // International Journal of Radiation Biology. - 1992. - V. 62. - №1. - P.53 -63.

140. Lucas N. Cytogenetic signature for ionizing radiation // Radiat. Res. -1998.-Vol. 73.-P. 15-20.

141. Lucas J.N., Deng W. Views on issues in radiation biodosimetry based on chromosome translocations measured by FISH // Radiation Protection Dosimetry. - 2000. - V.88. - P.77 - 86.

142. Lukina E.L., Vazhenin A.V., Kuznetsova A.I. Role of fast neutrons in the treatment of soft tissue sarcoma // Vopr Onkol.J. - 2010. - Vol. 56, № 4. -P. 408-412.

143. Ma J., Wing R.A., Bennetzen J.L. Plant centromere organization: a dynamic structure with conserved functions // Trends Genet. - 2007. -Vol. 23.-P. 134-139.

144. Maffei F., Fimognari C., Castelli E. Increased cytogenetic damage detected by FISH analysis on micronuclei in peripheral lymphocytes from alcoholics // Mutagenesis. - 2000. - Vol.15, № 6. - P. 517 - 523.

145. Maznik N.A., Vinnikov V.A. Retrospective cytogenetic biodosimetry using fluorescence in situ hybridization (FISH) technique in persons exposed to radiation due to the Chernobyl accident // Украшський Радюлогичнш Журнал. - 2005. - T. 13. - С.66 - 72.

146. Mateuca R., Lombaert N., Aka P.V. et al. Chromosomal changes: induction, detection methods and applicability in human biomonitoring // Biochimie. - 2006. - Vol. 88, № 11. - P. 1515-1531.

147. Markova E., Torudd J., Belyaev I. Long time persistence of residual 53BPl/gamma-H2AX foci in human lymphocytes in relationship to apoptosis, chromatin condensation and biological dosimetry // International Journal of Radiation Biology. - 2011. - Vol. 87. - P. 736 -745.

148. Maor M.H., Errington R.D., Caplan R.J., et al. Fast-neutron therapy in advanced head and neck cancer: a collaborative international randomized trial (see comments) // Int. J. Radiat. Onkol. Biol. Phys. - 1995. - Vol. 32. -№ 3. - P. 599-604.

149. Mazumdar M., Giri S., Giri A. Role of quercetin on mitomycin C induced genotoxicity: analysis of micronucleus and chromosome aberrations in vivo // Cancer Genet Cytogenet. - 2010. - Vol. 201, № 2. - P. 88-93.

150. Milosevic-Djordjevic O, Grujicic D, Vaskovic Z. et al. High micronucleus frequency in peripheral blood lymphocytes of untreated cancer patients irrespective of gender, smoking and cancer sites // Exp. Med.-2010.-Vol. 220.-P. 115-120.

151. Minicucci E.M., Kowalski L.P., Maia M.A. Cytogenetic damage in circulating lymphocytes and buccal mucosa cells of head-and-neck cancer patients undergoing radiotherapy // J Radiat Res. - 2005. - Vol. 46, №2.-P. 135-142.

152. Mitelman F., Mertens F., Johansson B. A breakpoint map of recurrent chromosomal rearrngements in human neoplasia // Nat. Genet. - 1997. -Spec. No.-P. 415-474.

153. Mitchell A. R., Gosden J. R., Miller D. A. A cloned sequence, p82H, of the alphoid repeated DNA family found at the centromeres of all human chromosomes // Chromosoma. - 1985. - Vol. 92, № 5. - P. 369 - 377.

154. Muhlmann-Diaz M.C., Bedford J.S. Comparison of gamma-ray induced chromosome ring and inversion frequencies // Mutat. Res. - 1997. -V.244. - №3. - P.233 - 238.

155. Nakano M., Kodama Y., Ohtaki K. Detection of stable chromosome aberration by FISH in A-bomb survivors: Comparison with previous solid Giemsa staining data on the same 230 individuals // International Journal of Radiation Biology. - 2001. - V.77. - №9. - P.971 - 977.

156. Natarajan A.T., Vyas R.C., Wiegant J. et al. A cytogenetic follow-up study of the victims of a radiation accident in Goiania (Brazil) // Mutat. Res. - 1991. - Vol. 247, № 1. - P. 103 - 111.

157. Noda A, Hirai Y, Hamasaki K et al. Unrepairable DNA double-strand breaks that are generated by ionizing radiation determine the fate of normal human cells // J Cell Sci. - 2012. - Vol.125. - P. 5280 - 5287.

158. Ohtaki K., Sposto R., Kodama Y. et al. Aneuploidy in somatic cells of in utero exposed A-bomb survivors in Hiroshima // Mutat. Res. - 1994. -Vol.316,№ l.-P. 49-58.

159. Olive P.L. DNA damage and repair in individual cells: applications of the comet assay in radiobiology // Int J Radiat Biol. - 1999. - Vol. 75. - P. 395-405.

160. Olivieri G., Bodycote J., Wolff S. Adaptive response of human lymphocytes to low concentrations of radioactive thymidine // Science. -1984. - Vol. 223. - P. 594 - 597.

161. Oliviera E., Suzuki M.F., Nascimento P. A., et al. Evaluation of the effect of 90 Sr beta-radiation on human blood cells by chromosome aberration and single cell gel electrophoresis (comet assay) analysis // Mut Res. -2001. - Vol. 476. - P. 109 - 121.

162. Okumura K., Kinashi Y., Kubota Y. Relative biological effects of neutron mixed-beam irradiation for boron neutron capture therapy on cell survival and DNA double-strand breaks in cultured mammalian cells // J Radiat Res. -2013.-Vol. 54, № l.-P. 70-74.

163. Ostling O., Johanson K.J. Microelectrophoretic study of radiation-induced DNA damage in individual mammalian cells // Biochem Biophys Res. - 1984. - Vol. 123. - P. 291 - 298.

164. Pampalona J., Soler D., Genesca A. et al. Telomere dysfunction and chromosome structure modulate the contribution of individual chromosomes in abnormal nuclear morphologies // Mutat. Res. - 2010. -Vol. 683.-P. 16-22.

165. Pathak S., Hsu T.C., Samaan N. Cytogenetic abnormalities in a patient with hypercalcemia and papillary thyroid carcinoma // Hum Genet. -1982. - Vol. 60, № 3. - P. 291 - 293.Pouzoulet F., Roch-Lefevre S., Giraudet A.L. et al. Monitoring translocations by M-FISH and three-color FISH painting techniques: a study of two radiotherapy patients // Radiat. Res. - 2003. - Vol. 48, № 5. - P. 425 - 434.

166. Perona M., Pontiggia O., Carpano M. et al. In vitro studies of cellular response to DNA damage induced by boron neutron capture therapy // J Appl Radiatlsot.-2011.-Vol. 69, № 12.-P. 1732-1736.

167. Pobiega S, Marcand S. Dicentric breakage at telomere fusions // Genes. -2010. - Vol.24. - P. 720 - 733.

168. Polishchuk L.Z.,Nesina I.P. Structural chromosome aberrations in the peripheral blood lymphocytes in patients with precancer and endometrial cancer // Tsitol. Genet. - 1995. - Vol. 29. № 3. - P. 17 - 24.

169. Pouzoulet F., Roch-Lefèvre S., Giraudet A.L. et al. Monitoring translocations by M-FISH and three-color FISH painting techniques: a study of two radiotherapy patients // Radiat. Res. - 2003. - Vol. 48, № 5. -P. 425-434.

170. Prosser J.S., Moquet J.E., Lloyd D.C. et al. Radiation induction of micronuclei in human lymphocytes // Mutat. Res. - 1988. - Vol. 199, № l.-P. 37-45.

171. Ramalho A.T., Curado M.P., Natarajan A.T. Lifespan of human lymphocytes estimated during a six year cytogenetic follow-up of individuals accidentally exposed in the 1987 radiological accident in Brazil // Mutational Research. - 1995. - V.331. - №1. -P.47-54.

172. Raquel A., Teixeira A., Mayorano M. et al. Basal levels of DNA damage detected by micronuclei and comet assays in untreated breast cancer patients and healthy women // Clin. Exp. Med. - 2010. - Vol.10. - P. 87 -92.

173. Rigaud O., Moustacchi E. Radioadaptation for gene mutation and the possible molecular mechanisms of the adaptive response // Mutat Res. -1996. - Vol. 358. - P. 127 - 134.

174. Revell S.H. A new hypothesis for the interpretation of chromatid aberrations and its relevance to theories for the mode of action of chemical agents // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1955. - Vol.68. - P. 802 - 807.

175. Robson T., Price M.E., Moore M.L., et al. Increased repair and cell survival in cells treated with DIR1 antisense oligonucleotides: implications for induced radioresistance // Int J Radiat Biol. - 2000. -Vol. 76.-P. 617-623.

176. Rodier F., Munoz D.P., Teachenor R. DNA-SCARS: distinct nuclear structures that sustain damage-induced senescence growth arrest and inflammatory cytokine secretion // J Cell Sci. - 2011. - Vol. 124. - P. 68 -81.

177. Rogakou, E.P., Boon, C., Redon, C. Megabase chromatin domains involved in DNA double-strand breaks in vivo // J Cell Biol. - 1999. -Vol. 146.-P. 905-916.

178. Rosefort C., Fauth E., Zankl H. Micronuclei induced by aneugens and clastogens in mononucleate and binucleate cells using the cytokinesis block assay // Mutagenesis. - 2004. - Vol. 19, №4. - P. 277 - 284.

179. Roy S.K., Trivedi A.H., Bakshi S.R. Spontaneous chromosomal instability in breast cancer families // Cancer Genet Cytogenet. - 2004. -Vol. 118,№ 1.-P. 52-56.

180. Sachs R.K., Chen A.M., Simpson P.J. Clustering of radiation-produced breaks along chromosomes: modelling the effects on chromosome aberrations // J. Radiat. Biol. - 1999. - Vol. 75. - P. 657 - 672.

181. Sanderson B.J., Morley A.A. Exposure of human lymphocytes to ionizing radiation reduces mutagenesis by subsequent ionizing radiation // Mutat Res. - 1986. - Vol. 164. - P. 347 -351.

182. Sasaki M.S., Ejima Y., Tachibana A., et al. DNA damage response pathway in radioadaptive response // Mutat Res. - 2002. - Vol. 504. - P. 101-118.

183. Savage J.R. Insight into sights // Mutat. Res. - 1996. - Vol. 366. - P. 81 -95.

185. Sax K. An analysis of X-ray induced chromosomal aberrations in Trades-cantia // Genetics. - 1940. - Vol. 25. - P. 41 - 68.

186. Sax K. Chromosome aberrations induced by X-rays // Genetics. - 1938. -Vol. 23.-P. 494-516.

187. Sari-Minodier I., Orsiere T., Bellon L. et al. Cytogenetic monitoring of industrial radiographers using the micronucleus assay // Mutat. Res. -2002. - Vol. 521, № 1-2. - P. 37 - 46.

188. Serebrovski A.S. A general scheme for the origin of mutations // Am. Nat. J - 1929. - Vol. 53. - P. 374 - 378.

189. Schanz S, Schuler N, Lorat Y, et al. Accumulation of DNA damage in complex normal tissues after protracted low-dose radiation // DNA Repair. - 2012. - Vol. 10. - P. 823 - 832.

190. Sigurdson A.J, Stovall M., Kleinerman R.A. Feasibility of assessing the carcinogenicity of neutrons among neutron therapy patients // Radiat Res. - 2002. - Vol. 157. - P. 483 - 489.

191. Silkworth W.T., Nardi I.K., Scholl L.M. et al. Multipolar spindle pole coalescence is a major source of kinetochore mis-attachment and chromosome mis-segregation in cancer cells // PLOS ONE. - 2009. -Vol. 4, № 8. - e6564.

192. Singh S.K., Wu W., Stuschke M. Reduced contribution of thermally-labile sugar lesions to DNA double-strand break formation after exposure to neutrons // Radiat Res. - 2012. - Vol. 178, № 6. - P. 581 - 590.

193. Shah D.J., Sachs R.K., Wilson D.J. Radiation-induced cancer: a modern view // Br J Radiol. - 2012. - Vol.85. - P. 1166 - 1173.

194. Sreedevi B., Rao B.S., Bhatt B. Radiation inducted chromosome aberration yields following an accidental non-uniform exposure // Rad. Prot. Dosimetry. - 1993. - Vol. 50. - P. 45 - 49.

195. Staaf E., Brehwens K., Haghdoost S. Micronuclei in human peripheral blood lymphocytes exposed to mixed beams of X-rays and alpha particles // Radiat Environ Biophys. - 2012. - Vol. 51, № 3. - P. 283 - 293.

196. Stadler LJ. The experimental modifications of heredity in crop plants // J Sci. Agric. - 1931. - Vol. 11. - P. 557 - 572.

197. Suzuki K., Kodama S., Watanabe M. Effect of low-dose preirradiation on induction of the HSP70B-LacZ fusion gene in human cells treated with heat shock//Radiat Res.- 1998.-Vol. 149.-P. 195-201.

198. Tanaka K., Hirota T. Chromosome segregation machinery and cancer // Cancer Sci. - 2009. - Vol. 100, № 7. - P. 1158-1165.

199. Takahashi A., Asakawa I., Yuki K. Radiation-induced apoptosis in the scid mouse spleen after low dose-rate irradiation // Int J Radiat Biol. -2002. - Vol. 78. - P. 689-693.

200. Tawn E., Caroline A., Fiona A. Sequential chromosome aberration analysis following radiotherapy - no evidence for enhanced genomic instability // Mutation Research. - 2000. - Vol. 465. - P. 45 - 51.

201. Thierens H., Vral A., Morthier R. et al. Cytogenetic monitoring of hospital workers occupationally exposed to ionizing radiation using the micronucleus centromere assay // Mutagenesis. - 2000. - Vol. 15, № 3. -P. 245-249.

202. Thierens H., Vral A., Barbe M. et al. A cytogenetic study of nuclear power plant workers using the micronucleus-centromere assay // Mutat. Res.- 1999.-Vol. 445, № l.-P. 105-111.

203. Torres E.M., Williams B.R., Amon A. Aneuploidy: cells losing their balance // Genetics. - 2008. - Vol. 179. - P.737 - 746.

204. Torudd J., Protopopova M., Sarimov R., Nygren J., Eriksson S., Markova E., Chovanec M., Selivanova G., Belyaev I.Y. Dose-response for radiation-induced apoptosis, residual 53BP1 foci and DNA-loop relaxation in human lymphocytes // Int J Radiat Biol. - 2005. - Vol. 81. -P. 125-138.

205. Tucker J.D., Cofield J., Matsumoto K. Persistence of chromosome aberrations following acute radiation: PAINT translocations, dicentrics,

rings, fragments, and insertions // Environ Mol Mutagen. - 2005. - Vol. 45.-P. 229-248.

206. Uchida I.A., Lee C.P., Byrnes E.M. Chromosome aberrations induced in vitro by low doses of radiation: nondisjunction in lymphocytes of young adults // Am. J. Hum. Genet. - 1975. - Vol. 27, № 3. - P. 419 - 429.

207. Udayakumar A.M, Bhargava M.K. Chromosomal abnormalities in the lymphocytes of a male patient with breast cancer // Cancer Genet Cytogenet. - 1994. - Vol. 78, № 1. - P. 99 - 101.

208. UNSCEAR, 2000 Report to the General Assembly. Annex J. Exposure and effects of the Chernobyl accident // International Journal Radiation Medicine. - 2000. - Special issue 2-4 (6-8). - P. 3-109.

209. Vinnikov V.A., Mikhanovskiy A.A., Maznik N.A. Cytogenetic abnormalities in peripheral lymphocytes of patients with uterine carcinoma treated with radiation therapy: effects of pre-irradiation tumor cryodestruction // Exp. Oncol. - 2003. - Vol. 25, № 4. - P. 279 - 284.

210. Vodicka P., Polivkova Z., Sytarova S. Chromosomal damage in peripheral blood lymphocytes of newly diagnosed cancer patients and healthy controls // Carcinogenesis. - 2010. - Vol. 31. № 7. - P. 1238 -1241.

211. Wang B., Matsuoka S., Carpenter P.B., Elledge S.J. 53BP1, a mediator of the DNA damage checkpoint // Science. - 2002. - Vol. 298. - P. 1435 -1438.

212. WHO. Method of human chromosome aberrations analysis. / Eds. K.Buckton. - Geneva, 1976. - 64p.

213. Wiencke J.K., Afzal V., Olivieri G., Wolff S. Evidence that the [3H]thymidine-induced adaptive response of human lymphocytes to subsequent doses of X-rays involves the induction of a chromosomal repair mechanism // Mutagenesis. - 1986. - Vol. 1. - P. 375 - 380.

214. Woloschak G.E., Chang-Liu C.M., Jones P.S. Modulation of gene expression in Syrian hamster embryo cells following ionizing radiation // Cancer Res. - 1990. - Vol. 50. - P. 339 - 344.

215. Wolff S. Failla Memorial Lecture. Is radiation all bad? The search for adaptation //Radiat Res.- 1992. -Vol. 131.-P. 117-123.

216. Wolff S. The adaptive response in radiobiology: evolving insights and implications // Environ Health Perspect. - 1998. - Vol. 106 Suppl 1. - P. 277-283.

217. Wojcik A., Obe G., Lisowska H. Chromosomal aberrations in peripheral blood lymphocytes exposed to a mixed beam of low energy neutrons and gamma radiation // Radiol Prot. - 2012. - Vol. 32, № 3. - P. 261 - 275.

218. Xiao L., Zhou H., Liu Y. Relationship between SCE points and G-banding location in patients with nasopharyngeal carcinoma // Hua Xi Yi Ke Da Xue Xue Bao. - 1996. - Vol. 27, № 1. - P. 31 - 35.

219. Xu C.F. The frequencies of sister chromatid exchanges and chromosomal aberrations in the peripheral lymphocytes in patients with cervical carcinoma // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. - 1993. - Vol. 28, .№8.-P. 496-497.

220. Yamaguchi H., Waker A.J. A model for the induction of DNA damages by fast neutrons and their evolution into cell clonogenic inactivation // J Radiat Res. - 2007. - Vol. 48, № 4. - P. 289 - 303.

221. Yonezawa M., Misonoh J., Hosokawa Y. Two types of X-ray-induced radioresistance in mice: presence of 4 dose ranges with distinct biological effects // Mutat Res. - 1996. - Vol. 358. - P. 237 - 243.

222. Zgheib O., Huyen Y., DiTullio R.A., Jr., Snyder A., Venere M., Stavridi E.S., Halazonetis T.D. ATM signaling and 53BP1 // Radiother Oncol. -2005.-Vol. 76.-P. 119-122.

223. Zolzer F., Streffer C. Relative biological effectiveness of 6 MeV neutrons with respect to cell inactivation and disturbances of the G1 phase // Radiat Res. - 2008. - Vol. 169, № 2. - P. 207 - 213.

Больные с местными рецидивами РМЖ

№ Возраст Диагноз (сторона) Классификация Морфологическая верификация Перенесенное лечение (время, прошедшее с момента химиотерапии или лучевой терапии до настоящего исследования)

1 40 МРРМЖ (слева) ' T2N1M0 Железистый рак Предоперационная ДГТ, РМЭ, 5 курсов ПХТ (5 лет)

2 57 МРРМЖ (слева) T2N2M0 Железистый рак РМЭ, 5 курсов ПХТ (3 года)

3 64 МРРМЖ (слева) T2N0M0 Инфильтративно-протоковый рак РМЭ, гормонотерапия

4 65 МРРМЖ (справа) T2N0M0 Инфильтративно-протоковый рак КЭ, ДГТ, 5 курсов ПХТ (20 лет)

5 72 МРРМЖ (слева) T3N2M0 Инфильтративно-протоковый рак РМЭ, 2 курса AXT по схеме FAC, ДЛТ на зоны регионарного лимфооттока (5 лет)

6 47 МРРМЖ (слева) T3N2M0 Инфильтративно-протоковый рак 3 курса НХТ, РМЭ, ДЛТ на зоны регионарного лимфооттока (4 года)

7 70 МРРМЖ (слева) T3N1M0 Инфильтративно-протоковый рак 3 курса предоперационной ХТ по схеме CMF, РМЭ, ХТ по схеме CAF (10 лет)

8 51 МРРМЖ (слева) T2N1M0 Инфильтративно-протоковый рак 2 курса НХТ по схеме FAC, РМЭ (блет). 2 курса AXT по схеме FAC (3 года)

9 51 МРРМЖ (слева) T2N2M0 Инфильтративно-протоковый рак 2 курса НХТ по схеме FAC, РМЭ, 3 курса AXT по схеме FAC (6 лет)