Транспозонный мутагенез и характеристика гена арабидопсиса, контролирующего срастание органов, их опушение и состав жирных кислот тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат биологических наук Ефремов, Александр Алексеевич

• Ефремов, Александр Алексеевич
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ефремов, Александр Алексеевич

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Функции покровных клеток растительных меристем и органов

1.2. Структура меристем побега двудольных растений, дифференциация клеток и морфогенез

1.3. Дифференциация клеток эпидермиса при формировании женских органов цветка

1.4. Мутанты растений, имеющие сращивание и слипание органов

1.5. Инсерционный мутагенез при изучении развития растений

1.6. Транспозонное мечение генов и методы клонирования

2. УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Растительный материал и условия проведения опытов

2.2. Лабораторные материалы

2.3. Методы исследований

2.4. Меры безопасности

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Разработка метода демонстрации инсерций транспозонов (ДИТ)

3.2. Клонирование гена РЮОЬЕНЕАО {РОН) арабидопсиса

3.3. Молекулярная характеристика аминокислотной последовательности белка БОН

3.4. Анализ экспрессии гена

3.5. Супрессия дифференциации трихом у мутанта/¿//г

3.6. Характеристика и практическое использование промотора гена ГОН арабидопсиса

3.7. Экспрессия гена ¥ОН в семенах трансгенных растений арабидопсиса

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Транспозонный мутагенез и характеристика гена арабидопсиса, контролирующего срастание органов, их опушение и состав жирных кислот»

Актуальность темы. Организмы, состоящие из множества клеток, начинают своё развитие от одной клетки при половом размножении. Во многих случаях за счёт соматической регенерации они способны к восстановлению утраченных тканей и органов, увеличивая шансы на выживание и производя вегетативное потомство. Каким образом популяция клеток достигает самоорганизации в пространстве и создаёт формы? Как объяснить морфогенез на уровне молекулярной биологии? Как поддерживается морфологическое постоянство видов и возникает многообразие форм высших организнов в эволюции? Из одних этих вопросов видно, что изучение процесса развития находится в центре биологии. Понимание законов развития многоклеточных организмов открывает широкие возможности для практической селекции, например, путём получения трансгенных линий и сортов растений, обладающих новыми ценными признаками.

Тематика по развитию растений не привлекала должного внимания до тех пор, пока не была обнаружена молекулярная природа гомеотических цветковых мутаций сначала у львиного зева (Antirrhinum majus) /135/ и позже у других растений НА,161. Библиография сегодня только по MADS-бокс генам, кодирующим факторы транскрипции, мутации которых приводят к гомеотическим замещениям органов цветка, насчитывает около 150 статей. Наряду с работами по другим различным группам факторов транскрипции у растений эти работы привели к пониманию большой роли регуляторных белков в установлении и поддержании типов органов и тканей.

Каждая клетка организма координирует процессы роста и дифференциации в зависимости от окружающих клеток. Исследования, проведенные на химерах, показали, что судьба растительной клетки в меристеме при дифференциации преимущественно определяется её положением, а не клональным происхождением от родительской клетки /107,125/. Это означает, что клетки обладают позиционной информацией, 4 которую они способны читать и передавать. От ответа на вопрос, как растительные клетки это делают, во многом зависит понимание основ морфогенеза и дифференциации клеток.

Очевидно, что в меристемах существует постоянный обмен информацией между клетками, регулирующий их дифференциацию, однако природа молекул-медиаторов не известна. Часть функций могли бы выполнять секретируемые белки и ферменты по аналогии с клетками животных. Вероятными кандидатами для коммуникации считаются относительно низкомолекулярные ростовые вещества - гормоны. Наконец, молекулы РНК и белков способны переходить в соседние клетки через цитоплазматические каналы, называемые плазмодесмами /98/.

Сложность изучения ранних стадий развития в меристемах состоит в необходимости работы с небольшим числом клеток, которые не могут быть механически отделены друг от друга. Поэтому основным методом анализа в биологии развития растений можно считать мутагенез. Нарушение функций соответствующих генов в результате мутаций приводит к отклонениям в развитии и биохимическим различиям, которые составляют предмет исследований. Большинство мутаций рецессивны, что позволяет получить двойные мутанты при помощи скрещиваний. Исследование молекулярных основ развития сегодня невозможно представить без клонирования контролирующих его генов. В этом отношении инсерционный мутагенез даёт преимущества, поскольку позволяет идентифицировать ген в результате молекулярного косегрегационного анализа. Разработка соответствующих эффективных методов анализа и клонирования является актуальной.

Наличие генов, позволяет получать трансгенные растения, которые служат хорошим материалом для изучения молекулярных основ развития. Кроме этого, могут быть получены трансгенные растения, обладающие улучшенными хозяйственными признаками.

Одними из важных событий в жизни растения являются переход к цветению и формирование генеративных органов побега. При формировании пестика у покрытосеменных растений клетки эпидермиса внутренних стенок плодолистиков сращиваются и редифференциируются в паренхимные клетки в соответствии с их новым положением. Это явление взаимодействия клеток 5 эпидермиса известно как постгенитальное сращивание /48/. Благодаря работам на цветке барвинка (Catharantus roseus) оно, наряду с прорастанием пыльцы и ростом пыльцевой трубки, служит наиболее известным примером коммуникации клеток у растений /150/. В результате постгенитального сращивания стенок плодолистиков образована центральная часть многих плодов, в том числе перегородки стручков у растений из семейства капустных (Brassicaceae). Способность клеток эпидермиса, покрывающих внутреннюю часть плодолистиков, к сращиванию является уникальной. Эпидермис остальных органов неспособен к сращиванию, в том числе и при прививках /155/. Механизм, контролирующий компетентность клеток эпидермиса при сращивании, неизвестен.

Мутантные растения, у которых полное постгенитальное сращивание плодолистиков не происходит, найдены у арабидопсиса (Arabidopsis thaliana) /13/. Однако при этом у мутантов происходит скорее смена типа органов цветка, чем нарушения в сращивании плодолистиков как таковом. В то же время у растений описаны мутанты, у которых все вегетативные и генеративные органы побега сращиваются по постгенитальному типу. Предположив, что механизм взаимодействия клеток в обоих случаях имеет сходные черты, мы попытались установить, нарушение каких генов приводит к сращиванию органов у мутантов арабидопсиса. В нашем проекте использовались инсерционные мутанты арабидопсиса, полученные с помощью транспозона En/Spm кукурузы (Zea mays) /156/. Такие мутанты имеют преимущество, состоящее в том, что соответствующие мутантные аллели генов несут изменения в последовательности ДНК, которые могут быть сравнительно легко обнаружены. Инсерция транспозона в гене может быть использована в качестве молекулярной метки при анализе расщепления по фенотипу и молекулярном клонировании генов (прил. 1), в связи с чем такой метод называется транспозонным мечением /153/.

Идентификация генов, ответственных за формирование признаков, и их молекулярное клонирование необходимы для того, чтобы перейти к целенаправленному изменению наследственности и созданию сортов растений, обладающих новыми признаками. 6

Цель и задачи исследований. Целью работы было клонировать и молекулярно охарактеризовать ген FIDDLEHEAD (FDH) арабидопсиса, мутация которого вызывает поверхностное срастание генеративных и вегетативных органов в побеге. В задачи исследований входило:

- разработать метод анализа и выделения последовательностей ДНК, фланкирующих инсерции транспозонов En/Spm; используя транспозонный мутант fdh арабидопсиса, выделить ДНК-последовательность, фланкирующую инсерцию транспозона En/Spm в гене FDH арабидопсиса;

- клонировать кодирующую ДНК (кДНК) гена FDH и определить её последовательность (секвенировать);

- клонировать и секвенировать геномный фрагмент гена FDH;

- определить экзон-интронную структуру гена FDH и аминокислотную последовательность его белка;

- определить гомологию гена FDH к известным последовательностям в базах данных;

- изучить экспрессию мРНК FDH в органах и тканях арабидопсиса;

- клонировать и секвенировать промотор (прил. 1) гена FDH;

- сконструировать бинарные векторы (прил. 1) для трансформации растений, несущие ген BAR для устойчивости к фосфинотрицину и маркерные гены GFP и GUS-INT;

- сконструировать бинарные векторы для трансформации растений, несущие ген устойчивости BAR и экспрессирующие гены GFP и GUS-INT под контролем промотора гена FDH;

- получить трансгенные растения арабидопсиса и изучить характер экспрессии маркерных генов под контролем промотора гена FDH;

- сконструировать бинарные векторы для трансформации, несущие ген FDH под контролем конститутивного промотора 35S вируса мозаики цветной капусты (ВМЦК);

- получить трансгенные растения арабидопсиса, экспрессирующие ген FDH 7 под контролем конститутивного промотора 35S ВМЦК и изучить их фенотип;

- изучить эффект мутации fdh на дифференциацию клеток слоя L1 меристем;

- клонировать промотор гена FATTY ACID ELONGATION1 (FAE1) арабидопсиса;

- сконструировать бинарные векторы для трансформации, несущие ген BAR для устойчивости к фосфинотрицину и промотор гена FAE1;

- получить трансгенные растения арабидопсиса, экспрессирующие ген FDH в семенах под контролем промотора FAE1 и изучить их фенотип, в частности изменения жирнокислотного состава масла;

Научная новизна работы. В ходе работы был разработан новый метод демонстрации инсерций транспозонов (ДИТ, от англ. Transposon Insertion Display, TID). Он был использован для амплификации последовательностей ДНК (прил. 1), фланкирующих инсерции транспозонов En/Spm. Метод ДИТ облегчает анализ и клонирование генов, у которых имеются инсерционные транспозонные аллели.

С помощью метода ДИТ был впервые клонирован ген арабидопсиса FIDDLEHEAD (FDH), мутации которого приводят к сращиванию органов побега.

Обнаружено, что мутация fiddlehead затрагивает дифференциацию клеток эпидермиса так, что число трихом на розеточных листьях уменьшается почти в два раза по сравнению с растениями дикого типа. Эта особенность фенотипа мутанта не была известна ранее.

Было установлено, что промотор гена FDH активен только в эпидермальных клетках развивающихся органов побега и семяпочек и практически не активен в перегородке пестика и пыльце.

Было показано, что экспрессия гена FDH в семенах арабидопсиса приводит к изменению спектра жирных кислот.

Изучение гена FDH указало на новую роль метаболизма липидов в 8 развитии растений, в частности в дифференциаци клеток эпидермиса.

Практическая значимость работы. Метод ДИТ для транспозонов En/Spm, разработанный нами, нашел применение в Центре инсерционного мутагенеза и идентификации функций генов арабидопсиса и лабораториях Макс-Планк института селекции растений (г. Кёльн, Германия), Исследовательском центре селекции и репродукции растений (г. Вагенинген, Нидерланды) и Утрехтском университете (г. Утрехт, Нидерланды). С его помощью были клонированы несколько генов арабидопсиса, мутанты которых возникли вследствие инсерций транспозонов En/Spm /61,161/. Кроме применения при транспозонном мечении генов, метод ДИТ стал использоваться для определения числа транспозонов в высококопийных линиях арабидопсиса, для хромосомного картирования инсерций и для идентификации инсерций в новых генах методом гибридизации /161/. В последнем случае метод ДИТ применяется для амплификации граничащих с транспозонами фрагментов ДНК, которые затем гибридизуются с фрагментами ДНК генов на фильтрах. Наличие сигнала свидетельствует об инсерции транспозона в соответствующем гене у данного растения. Одной из задач при этом является максимальная автоматизация, при которой становится возможным анализ тысяч растений и генов.

Полученные в ходе работы бинарные векторы и промотор гена FDH используются в лабораториях Макс-Планк института селекции растений (г. Кёльн, Германия) для экспрессии генов в эпидермисе и других целей. Экспериментально установлено, что кроме арабидопсиса, промотор гена FDH активен в эпидермисе львиного зева и табака 121. Экспрессия генов в поверхностном слое клеток меристем в трансгенных растениях имитирует периклинальные химеры у тех видов растений, у которых они не были получены. Такие трансгенные растения служат ценным материалом для изучения передачи сигналов между клетками в процессе развития. В частности гомеотические гены арабидопсиса APETALAS и PIST1LLAТА, контролирующие тип органов цветка, были экспрессированы с этой целью с использованием промотора FDH (Ж. Шварц-Зоммер, личное сообщение). 9

Нами были получены трансгенные растения FDH-PIN1 арабидопсиса. Ген PIN1 кодирует белок, участвующий в транспорте ауксина в клетках проводящей ткани /61/. Гены FATTY ACID ELONGATION1 (FAE1) /77/ и ANTIRRHINUM FIDDLEHEAD HOMOLOG (AFI) /164,165/, гомологичные FDH, нами были экспрессированы в эпидермисе арабидопсиса с промотора FDH с целью дальнейшего изучения роли липидов в дифференциации клеток. Часть результатов этой работы, в частности, относящаяся к практическому использованию в селекции на опушение органов, защищаются европейским патентом "Молекулярные средства для эпидермис-специфичной экспрессии и модификации поверхности органов растений" /165/. Благодаря тому, что промотор FDH не экспрессируется в эпидермисе перегородки завязи и клетках пыльцы в отличие от других эпидермис-специфичных промоторов, трансгенные растения, полученные с его использованием, обладают нормальной фертильностью и могут служить в качестве исходного материала для селекции. Среди селекционно-ценных признаков, связанных с эпидермисом, находятся также окраска и аромат цветков и плодов, устойчивость к болезням и абиотическим факторам. Экспрессия соответствующих генов в эпидермисе позволит улучшить эти признаки и создать новые сорта растений.

Фенотипы мутанта fiddlehead и трансгенных растений, полученных нами, свидетельствуют о том, что среди гомологичных генов, кодирующих элонгазы жирных кислот, ген FDH выделяется по ряду особенностей. Его экспрессия в семенах арабидопсиса приводит к увеличению содержания линоленовой (С 18:3) и гадолеиновой (С20:1) кислот за счёт более эффективной элонгации пальмитиновой (С 16:0) и стеариновой (С 18:0) кислот, содержание которых снижается. В связи с этим, ген FDH может быть использован в сочетании с другими генами в селекции рапса путём получения трансгенных растений, имеющих повышенное содержание линоленовой (С 18:3) и доказеновой кислоты (С22:1). Такие масла могут служить для технических целей и как сырьё для химической промышленности.

Основываясь на опубликованных результатах экспрессии элонгаз жирных кислот в трансгенных растениях /111/, можно предполагать, что ген FDH сохранит свою активность во многих видах растений, которые используются для производства масла, а не только в рапсе {Brassica napus), который близок к арабидопсису. В то же время, при необходимости гены, соответствующие FDH в растениях других видов, могут быть клонированы на основе гомологии последовательностей ДНК. Таким образом, например, нами был клонирован ген AFI львиного зева /164,165/.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены на 37-й ежегодной конференции по генетике кукурузы (г. Азиломар, Калифорния, США, 1995), 7-й международной конференции по арабидопсису (г. Норвич, Англия, 1996), 8-й международной конференции по арабидопсису (г. Мэдисон, Висконсин, США, 1997), на конференциях Макс-Планк института селекции растений (г. Кёльн, Германия) в 1996-1999 годах, ежегодно на семинарах отдела молекулярной генетики растений Макс-Планк института селекции растений и на заседаниях кафедры генетики, селекции и семеноводства Кубанского государственного аграрного университета по аттестации аспирантов и соискателей (г. Краснодар, Россия).

Кроме публикаций в материалах конференций, основные результаты работы опубликованы в статьях в международных журналах Plant Cell, Plant Journal и Science и ряде сообщений в трудах Макс-Планк института селекции растений (г. Кёльн, Германия).

11

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Ефремов, Александр Алексеевич

ВЫВОДЫ

1. Транспозонный мутагенез и транспозонное мечеиие генов являются эффективными методами при клонирования генов, контролирующих процессы развития у растений.

2. Разработанный нами метод демонстрации инсерций транспозонов (ДИТ) является эффективным для клонирования генов, у которых найдены транспозонные мутации. Он упрощает процедуру клонирования и сокращает затрачиваемое время.

3. Молекулярное клонирование и секвенирование гена FIDDLEHEAD арабидопсиса показало, что он кодирует белок, гомологичный элонгазам жирных кислот семейства генов FATTY ACID ELONGATION 1 (FAEI).

4. Ген FDH арабидопсиса экспрессируется в поверхностном слое LI меристем и эпидермисе растущих органов надземного побега. Сравнительно более сильная экспрессия FDH обнаруживается в более молодых клетках.

5. Мутация в гене FDH, кроме постгенитального сращивания органов надземного побега, приводит к снижению числа трихом в эпидермисе на розеточных листьях. Ген FDH, таким образом, вовлечён в дифференциацию клеток в слое LI меристем.

6. Основные последовательности ДНК, контролирующие транскрипцию гена FDH в эпидермисе, находятся в его промоторе, длиной не более 1122 п.н. на 5'-конце гена.

7. Судя по имеющимся данным, характер экспрессии гена FDH в эпидермисе и транскрипционная активность его промотора в трансгенных растениях одинаковы.

122

8. Среди органов цветка наибольшая активность промотора FDH обнаружена в пестике. Единственными эпидермальными клетками, ,в которых промотор гена FDH не активен, являются клетки эпидермиса перегородки пестика, образующейся за счёт сращивания. Таким образом, ген FDH, вероятно, контролирует посгенитальное сращивание плодолистиков.

9. Промотор гена FDH позволяет получить экспрессию интересующих генов в эпидермисе. Поскольку промотор гена FDH не активен в пыльцевых клетках, полученные трансгенные растения обладают нормальной фертильностью и могут использоваться в селекции.

10. Повышенная экспрессия гена FDH в растениях арабидопсиса приводит к их отставанию в росте и развитии, похожему на наблюдаемое у ряда гормональных мутантов. Это предполагает существование связи между геном FDH и гормональным контролем указанных процессов у растений.

11. Клонированный нами промотор гена FATTY ACID ELONGATION I (.FAE1) обеспечивает экспрессию генов в семенах и может использоваться в селекции масличных культур с помощью получения трансгенных растений.

12. Анализ состава масла семян трансгенных растений арабидопсиса, экспрессирующих ген FDH, позволил установить биохимическую функцию его белка как ß-кетоацил КоА-синтазы, элонгазы жирных кислот.

В отличие от известных элонгаз, FIDDLEHEAD специфически удлиняет относительно более короткие жирные кислоты ряда С16-С18.

13. Ген FDH, может использоваться в селекции масличных культур на состав масла путём получения трансгенных растений. В сочетании с другими генами ген FDH может обеспечить изменения качества масла, недостижимые с помощью мутагенеза.

123

14. Биосинтез длинных жирных кислот в клетках слоя LI меристем связан с их способностью к дифференциации и адгезии, что предполагает существование липидных сигнальных молекул, регулирующих процессы развития у растений.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКИ

1. Промотор FDH рекомендуется для получения трансгенных растений двудольных культур с изменёнными свойствами эпидермиса, например, с целью изменения окраски плодов и органов и их опушения при экспрессии соответствующих генов.

2. Промотор FAE1 рекомендуется для получения трансгенных растений с изменённым составом масла семян в селекции масличных культур.

3. Мы рекомендуем получение трансгенных растений рапса, экспрессирующих FDH в семенах под контролем FAE1 или другого специфичного промотора, и проведение анализа состава жирных кислот в масле семян этих растений. Такой материал рекомендуется использовать для скрещиваний с другими трансгенными растениями и мутантами в селекции рапса на состав масел, обладающих повышенным содержанием линоленовой (С18:3) кислоты и жирных кислот С22, для технических целей.

124

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ефремов, Александр Алексеевич, 1999 год

1. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство // Под ред. Дж.

2. Дрейпера, Р. Скотта, Ф. Армитиджа, Р. Уолдена. М.: Мир, 1991. - 408 с

3. Ефремова Н. Н. Экспрессия генов в эпидерме для исследования развитияцветка и выведения сортов львиного зева методом трансформации // Автореферат диссертации. Краснодар: Кубанский аграрный университет. 1999,-32 е.

4. Ефремова Н. Н., Ефремов А. А. Создание и использование супервирулентного штамма агробактерии для повышения эффективности трансформации львиного зева и табака // Тр. КГАУ.- Вып.372 (400). -Краснодар, 1999,- с.158-164.

5. Левенко Б. А. Перенос генов и проблемы трансгенных растений // Физиология и биохимия культурных растений. 1987,- Т.30, N4. - с.79-85.

6. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы гентической инженерии. Молекулярное клонирование. М.: Мир, 1984. - 447 > с.

7. Новое в клонировании ДНК. Методы.// Пер.с англ. Под ред. Д. Гловера -М.: Мир, 1989.-367 .с.

8. Тахтаджян А. Л. Основы эволюционной морфологии покрытосеменных. М-Л.: Наука, 1964.-236 с.

9. Хесин Р. Б. Нестабильность генома. М.: Наука, 1987. - 547 с.

10. Шабарова 3. А., Богданов А. А., Золотухин А. С. Химические основыгенетической инженерии. М.: Издательство Московского университета. 1994.-267 с.

11. Шарова Е. И. Роль эпидермы в росте сегментов колеоптилей кукурузы, индуцированном кислотой и ауксином // Биологические науки. 1987.-N4, - с.79-85.

12. Aarts М. G. М., Corzaan P., Stiekema W. J. and Pereira A. A two-element enhancer-inhibitor transposon system in Arabidopsis thaliana //Molecular & General Genetics.- 1995,- V.247, N.5.-P.555-564.125

13. Akama K., Puchta H. and Hohn B. Efficient Agrobacterium-mediated transformation of Arabidopsis thaliana using the BAR gene as selectable marker //Plant Cell Reports.- 1995.- V.14, N.7.-P.450-454.

14. Alvarez J. and Smyth D. R. Genetic pathways controlling carpel development in Arabidopsis thaliana //Journal of Plant Research.- 1998.-V.lll, N.1102.-P.295-298.

15. Angenent G. C., Busscher M., Franken J., Mol J. N. M. and Van Tunen A.J. Differential expression of two MADS box genes in wild-type and mutant petunia flowers //Plant Cell.- 1992,- V.4, N.8.-P.983-993.

16. Arnold C. and Hodgson I. J. Vectorette PCR: a novel approach to genomic walking //Genome Research.- 1991.- Y.l, N.1.-P.39-42.

17. Baldwin D., Crane V. and Rice D. A comparison of gel-based, nylon filter and microarray techniques to detect differential RNA expression in plants //Current Opinion in Plant Biology.- 1999,- V.2, N.2.-P.96-103.

18. Baulcombe D. C. RNA as a target and an initiator of post-transcriptional gene silencing in transgenic plants //Plant Molecular Biology.- 1996.- Y.32, N.1-2.-P.79-88.

19. Baum H. Postgenitale Verwachsung in und zwischen Karpell- und Staubblattkreisen //Sitzungs ber. Oesterr. Akad. Wiss. Math.-Naturwiss., Abt.l.- 1948.- V.157.-P.17-38.

20. Baum H. Über die postgenitale Verwachsung in Karpellen //Österr. Bot. Z.-1948,- V.95.-P.86-94.

21. Baum H. Zur Frage des schrittweisen Überganges vom apokarpen zum coenokarpen Gynözeum //Österr. Bot. Z.- 1949,- V.95.-P.470-474.

22. Beare-Rogers J. Influences of findings in nutrition on the fats and oils industry //In Seed oil for the future.- S. L. MacKenzie and D. C. Taylor, eds.- Champaign: American Oil Chemists' Society.- 1993. -P.9-13.

23. Bechtold N., Ellis J. and Pelletier G. In planta Agrobacterium gene transfer by infiltration of adult Arabidopsis thaliana plants //C. R. Acad. Sei. Paris, Life Sciences.- 1993.- V.316.-P.1194-1199.126

24. Becker D., Kemper E., Schell J. and Masterson R. New plant binary vectors with selectable markers located proximal to the left T-DNA border //Plant Molecular Biology.- 1992,- V.20, N.6.-P.1195-1197.

25. Becraft P. W., Stinard P. S. and McCarty D. R. CRINKLY4 a TNFR-like receptor kinase involved in maize epidermal differentiation //Science.1996.- V.273, N.5280.-P. 1406-1409.

26. Benfey P. N. and Chua N. H. The cauliflower mosaic virus 35S promoter: Combinatorial regulation of transcription in plants //Science.- 1990,- V.250, N.4983.-P.959-966.

27. Bennetzen J. L. The structure and evolution of angiosperm nuclear genomes //Current Opinion in Plant Biology.- 1998,- V.l, N.2.-P.103-108.

28. Berger F., Haseloff J., Schiefelbein J. and Dolan L. Positional information in root epidermis is defined during embryogenesis and acts in domains with strict boundaries //Current Biology.- 1998.- V.8, N.8.-P.421-430.

29. Berger S. L. Expanding the potential of restriction endonucleases: Use of hapaxoterministic enzymes //Analytical Biochemistry.- 1994.- V.222, N.I.-P.l-8.

30. Bhatt A. M., Page T., Lawson E. J. R., Lister C. and Dean C. Use of Ac as an insertional mutagen in Arabidopsis //Plant Journal.- 1996.- V.9, N.6.-P.935-945.

31. Biomagnetic techniques in molecular biology. Technical handbook //2nd Edition.- Oslo: Dynal.- 1995.-160 pp.

32. Bouchez D. and Hoefte H. Functional genomics in plants //Plant Physiology.- 1998.- V.l 18, N.3.-P.725-732.

33. Bradley D., Ratcliffe O., Vincent C., Carpenter R. and Coen E. Inflorescence commitment and architecture in Arabidopsis //Science.1997,- V.275, N.5296.-P.80-83.

34. Broun P. and Somerville C. Accumulation of ricinoleic, lesquerolic, and densipolic acids in seeds of transgenic arabidopsis plants that express a fatty acyl hydroxylase cDNA from castor bean //Plant Physiology.- 1997.-V.113, N.3.-P.933-942.

35. Browse J., McCourt P. J. and Somerville C. R. Fatty acid composition of leaf lipids determined after combined digestion and fatty acid methyl ester formation from fresh tissue //Analytical Biochemistry.- 1986.- V.152, N.I.-P.141-145.

36. Bruck D. K., Alvarez R. J. and Walker D. B. Leaf grafting and its prevention by the intact and abraded epidermis //Canadian Journal of Botany.- 1989.- V.67, N.2.-P.303-312.

37. Budziszewski G. J., Croft K. P. C. and Hildebrand D. F. Uses of biotechnology in modifying plant lipids //Lipids.- 1996.- V.31, N.6.-P.557-569.

38. Cardon G. H., Frey M., Saedler H. and Gierl A. Definition and characterization of an artificial En/Spm-based transposon tagging system in transgenic tobacco //Plant Molecular Biology.- 1993,- V.23, N.1.-P.157-178.

39. Cardon G. H., Frey M., Saedler H. and Gierl A. Mobility of the maize transposable element En/Spm in Arabidopsis thaliana //Plant Journal.f 1993,- Y.3, N.6.-P.773-784.

40. Carpenter R. and Coen E. S. Transposon induced chimeras show that floricaula, a meristem identity gene, acts non-autonomously between cell layers //Development.- 1995.- V. 121, N.1.-P.19-26.

41. Chien J. C. and Sussex I. M. Differential regulation of trichome formation on the adaxial and abaxial leaf surfaces by gibberellins and photoperiod in Arabidopsis thaliana (L.) Henh //Plant Physiology.- 1996,- V.lll, N.4.-P.1321-1328.

42. Chomczynski P. Solubilization in formamide protects RNA from degradation //Nucleic Acids Research.- 1992.- V.20, N.14.-P.3791-3792. '

43. Clark A. M., Verbeke J. A. and Bohnert H. J. Epidermis-specific gene expression in Pachyphytum //Plant Cell.- 1992,- V.4, N.10.-P.1189-1198.128

44. Cone K. C., Schmidt R. J., Burr B. and Burr F. A. Advantages and limitations of using Spm as a transposon tag //Plant transposable elements.-O. Nelson, ed.- New York : Plenum Press, Basic Life Sciences.- 1988.-P.149-159.

45. Cusick F. On phylogenetic and ontogenetic fusions //In Trends in Plant Morphogenesis.- E. G. Cutter, ed.- London: Longmans.- 1966.-P.170-183.

46. Dale P. J., and Irwin J. A. Transformation of oil crops //In Designer oil clops: breeding, processing and biotechnology.- J. Murphy, ed.- Weinheim: VCH.- 1993.-P.195-218.

47. Dash S. and Peterson P. Chromosome constructs for transposon tagging of desirable genes in different parts of the maize genome. //Maydica.- 1989.-V.34, N.3.-P.247-261.

48. Dean C. Advantages of arabidopsis for cloning plant genes //Philosophical Transactions of the Royal Society of London B Biological Sciences.- 1993.-V.342, N.1301.-P.189-195.

49. Depicker A. and Van Montagu M. Post-transcriptional gene silencing in plants //Current Opinion in Cell Biology.- 1997.- V.9, N.3.-P.373-382.

50. Devon R. S., Porteous D. J. and Brookes A. J. Splinkerettes improved vectorettes for greater efficiency in PGR walking //Nucleic Acids Research.- 1995.- V.23, N.9.-P.1644-1645.

51. Dorit R. L., Ohara O. and Gilbert W. One-sided anchored polymerase chain reaction for amplification and sequencing of complementary DNA //Methods in Enzymology.- 1993.- V.218.-P.36-47.

52. Edwards K., Johnstone C. and Thompson C. A simple and rapid method for the preparation of plant genomic DNA for PCR analysis //Nucleic Acids Research.- 1991,- Y.19, N.6.-P.1349.

53. Eggert H., Bergemann K. and Saumweber H. Molecular screening for P-element insertions in a large genomic region of Drosophila melanogaster using polymerase chain reaction mediated by the vectorette //Genetics.-1998,- V.149, N.3.-P. 1427-1434.129

54. Endress P. K. Evolution and floral diversity: The phylogenetic surroundings of Arabidopsis and Antirrhinum //International Journal of Plant Sciences.- 1992,- V.153, N.3.-P.106-122.

55. Fedoroff N. V. Maize transposable elements //In Mobile DNA. B. D. E. and M. M. Howe, eds.- Washington, DC: Am. Soc. Microbiol.- 1989. -P.375-411.

56. Frey M., Tavantzis S. M. and Saedler H. The maize En-l/Spm element transposes in potato //Molecular & General Genetics.- 1989.- V.217, N.I.-P.172-177.

57. Furner I. J., Ainscough J. F. X., Pumfrey J. A. and Petty L. M. Clonal analysis of the later flowering fca mutant Arabidopsis thaliana: Cell fate and cell autonomy //Development.- 1996.- V.122, N.3.-P.1041-1050.

58. Gaelweiler L., Guan C., Mueller A., Wisman E., Mendgen K., Yephremov A. and Palme K. Regulation of polar auxin transport by AtPINl in Arabidopsis vascular tissue //Science.- 1998.- V.282, N.5397.-P.2226-2230.

59. Gierl A. The En/Spm transposable element of maize //In Transposable elements. H. Saedler and A. Gierl, eds.- Berlin, Heidelberg: Springer.-1996. -P.145-159.

60. Gierl A., and Saedler H. Plant-transposable elements and gene tagging //Plant molecular biology : an international journal on molecular biology, biochemistry and genetic engineering.- 1992.- V.19, N.1.-P.39-49.

61. Goffreda J. C., Symkowiak E. J., Sussex I. M., and Mutschler M. A. Chimeric tomato plants show that aphid resistance and triacylglucose production are epidermal autonomous characters //Plant Cell.- 1990.- V.2, N.7.-P.643-650.

62. Grossniklaus U. and Schneitz K. The molecular and genetic basis of ovule and megagametophyte development //Seminars in Cell & Developmental Biology.- 1998.- V.9, N.2.-P.227-238.

63. Hake S. and Sinha N. The use of clonal sector for lineage and mutant analysis //In The maize handbook.- M. Freeling and V. Walbot, eds.- New York: Springer-Verlag.- 1994. -P.262-270.130

64. Haseloff J., and Siemering K. R. The uses of green fluorescent protein in plants //In Green fluorescent protein: Properties, applications, and protocols.- M. Chalfie and S. Kain, eds.- Chichester, England: John Wiley and Sons Ltd.- 1998. -P. 191-220.

65. Hassel M., Leitz T. and Muller W. A. Signals and signal-transduction systems in the control of development in Hydra and Hydractinia //International Journal of Developmental Biology.- 1996.- V.40, N.I.-P.323-30.

66. Hill J. P. and Lord E. M. Floral development in Arabidopsis thaliana. a comparison of the wild type and the homeotic pistillata mutant //Canadian Journal of Botany.- 1989,- V.67, N.10.-P.2922-2936.

67. Huelskamp M., Misea S. and Juergens G. Genetic dissection of trichome cell development in Arabidopsis //Cell.- 1994.- V.76, N.3.-P.555-566.

68. Huelskamp M. and Schnittger A. Spatial regulation of trichome formation in Arabidopsis thaliana //Seminars in Cell & Developmental Biology.-1998,- V.9, N.2.-P.213-220.

69. Huijser P., Klein J., Loennig W. E., Meijer H., Saedler H. and Sommer H. Bracteomania: an inflorescence anomaly is caused by the loss of function of the MADS-box gene SQUAMOSA in Antirrhinum majus //EMBO.- 1992,-V.ll, N.4.-P. 1239-1249.

70. Ishiguro S. and Okada K. Molecular cloning and characterization of DAD1, a gene involved in anther dehiscence and pollen maturation //In 8th International Conference on Arabidopsis research.- Madison, USA: University of Wisconsin.- 1997.- P.32.

71. Jack T., Brockman L. L. and Meyerowitz E. M. The homeotic gene APETALA3 of Arabidopsis thaliana encodes a MADS box and is expressed in petals and stamens //Cell.- 1992.- V.68, N.4.-P.683-697.

72. James D. W., Jr., Lim E., Keller J., Plooy I., Ralston E. and Dooner H. K. Directed tagging of the Arabidopsis FATTY ACID ELONGATION1 (FAE1)131gene with the maize transposon Activator //Plant Cell.- 1995.- V.7, N.3.-P.309-319.

73. Jenks M. A., Rashotte A. M., Tuttle H. A. and Feldmann K. A. Mutants in Arabidopsis thaliana altered in epicuticular wax and leaf morphology //Plant Physiology.- 1996,- V.110, N.2.-P.377-385.

74. Koncz C. and Schell J. The promoter of Tl-DNA gene 5 controls the tissue specific expression of chimeric genes carried by a novel type of Agrobacterium binary vector //Molecular & General Genetics.- 1986.-Y.204, N.3.-P.383-396.

75. Kridl J. C. and Knauf V. C. Seed-specific transcriptional regulation USA.-1995,- P.1-40.

76. Kunst L., Reed D. and MacKenzie S. L. Fatty acid elongation in seeds of Arabidopsis thaliana //In Seed oil for the future.- S. L. MacKenzie and D. C. Taylor, eds.- Champaign: American Oil Chemists' Society.- 1993. -P. 70-76

77. Kutschera U. The role of the epidermis in the control of elongation growth in stems and coleoptiles //Botanica Acta.- 1992,- V.105, N.4.-P.246-252.

78. Larkin J. C., Marks M. D., Nadeau J. and Sack F. Epidermal cell fate and patterning in leaves //Plant Cell.- 1997.- V.9, N.7.-P. 1109-1120.

79. Larkin J. C., Young N., Prigge M. and Marks M. D. The control of trichome spacing and number in Arabidopsis //Development.- 1996.- V.122, N.3.-P.997-1005.

80. Larsson A. S., Landberg K. and Meeks-Wagner D. R. The TERMINAL FLOWER2 (TFL2) gene controls the reproductive transition and meristem identity in Arabidopsis thaliana //Genetics.- 1998,- V.149, N.2.-P.597-605.

81. Lassner M. W., Lardizabal K. and Metz J. G. A jojoba beta-ketoacyl-CoA synthase cDNA complements the canola fatty acid elongation mutation in transgenic plants //Plant Cell.- 1996,- Y.8, N.2.-P.281-292.132

82. Laufs P., Grandjean O., Jonak C., Kieu K. and Traas J. Cellular parameters of the shoot apical meristem in Arabidopsis //Plant Cell.- 1998.- V.10, N.8.-P.1375-1389.

83. Laufs P., Jonak C. and Traas J. Cells and domains: Two views of the shoot meristem in Arabidopsis //Plant Physiology & Biochemistry.- 1998.- V.36, N.1-2.-P.33-45.

84. Laux T., Mayer K. F. X., Berger J. and Juergen G. The WUSCHEL gene is required for shoot and floral meristem integrity in Arabidopsis //Development.- 1996.- V.122, N.1.-P.87-96.

85. Liu Y. G. and Whittier R. F. Thermal asymmetric interlaced PCR: Automatable amplification and sequencing of insert end fragments from PI and YAC clones to chromosome walking //Genomics.- 1995.- V.25, N.3.-P.674-681.

86. Logemann J., Schell J. and Willmitzer L. Improved method for the isolation of RNA from plant tissues //Analytical Biochemistry.- 1987.- V.163, N.I.-P.16-20.

87. Lolle S. J. and Cheung A. Y. Promiscuous germination and growth of wildtype pollen from Arabidopsis and related species on the shoot of the Arabidopsis mutant fiddlehead //Developmental Biology.- 1993.- V.155, N.l.-P.250-258.

88. Lolle S. J., Cheung A. Y. and Sussex I. M. Fiddlehead: an Arabidopsis mutant constitutively expressing an organ fusion program that involves interactions between epidermal cells //Developmental Biology.- 1992.-V.152, N.2.-P.383-392.

89. Lolle S. J., Hsu W. and Pruitt R. E. Genetic analysis of organ fusion in Arabidopsis thaliana //Genetics.- 1998.- V.149.-P.607-619.

90. Lorow D. and Jessee J. Max Efficiency DH10B: A host for cloning methylated DNA //FOCUS.- 1990.- V.12, N.19.-P.28-29.

91. Lucas W. J. Plasmodesmata: Intercellular channels for macromolecular transport in plants //Current Opinion in Cell Biology.- 1995,- V.7, N.5.-P.673-680.133

92. Lühs W. and Friedt W. The major oil crops //In Designer oil clops: breeding, processing and biotechnology.- J. Murphy, ed.- Weinheim: VCH.-1993. -P.5-71.

93. Macdougald O. A. and Lane M. D. When precursors are also regulators //Current Biology.- 1995.- V.5, N.6.-P.618-621.

94. Mandaci S., Thum K„ Maiti D., Pak J. H. and Dobres M. S. An RNA marker for epidermal cell type and differentiation //Plant Science.- 1994.-V.101, N.1.-P.75-82.

95. Martienssen R. A. Functional genomics: Probing plant gene function and expression with transposons //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1998.- V.95, N.5.- P.2021-2026.

96. Masucci J. D. and Schiefelbein J. W. Hormones act downstream of TTG and GL2 to promote root "hair outgrowth during epidermis development in the Arabidopsis root //Plant Cell.- 1996,- V.8, N.9.-P. 1505-1517.

97. McClintock B. Mutations in maize and chromosomal aberrations in Neurospora //Carnegie Inst. Washington Year Book.- 1954,- V.53.-P.254-260.

98. McPherson M. J., Hames B. D. and Taylor G. PCR 2: A practical approach //In The Practical Approach (No. 150).- Oxford, England: I R L Press.- 1995,- 336pp.

99. Meinhardt H., Koch A. J. and Bernasconi G. Models of pattern formation and their application to plant development //In Symmetry in Plants.- D. Barabe and R. V. Jean, eds.- Singapore: World Scientific Publishing.- 1997. -P.l-31.

100. Meinke D. and Koornneef M. Community standards for Arabidopsis genetics //Plant Journal- 1997.- V.12, N.2.-P.247-253.

101. Meyerowitz E. M. Genetic control of cell division patterns in developing plants //Cell.- 1997,- V.88, N.3.-P.299-308.

102. Millar A. A. and Kunst L. Very-long-chain fatty acid biosynthesis is controlled through the expression and specificity of the condensing enzyme //Plant Journal.- 1997,- V.12, N.1.-P.121-131.

103. Mueller P. R. and Wold B. In vivo footprinting of a muscle specific enhancer by ligation mediated PCR //Science.- 1989,- V.246, N.4931.-P.780-6.

104. Murashige T. and Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio-assay with tobacco tissue cultures //Physiologia Plantarum.- 1962.- V.15.-P.473-497.

105. Neuffer M. G. Chimeras for genetic analysis //In The maize handbook.-M. Freeling and V. Walbot, eds.- New York: Springer-Verlag.- 1994. -P.258-262.

106. Ochman H., Ayala F. J. and Hartl D. L. Use of polymerase chain reaction to amplify segments outside boundaries of known sequences //In Methods in Enzymology.- R. Wu, ed.- San Diego, California, USA; London, UK-Academic Press, Inc.- 1993. -P.309-321.

107. Ohlrogge J. and Browse J. Lipid biosynthesis //Plant Cell.- 1995.- V.7, N.7.-P.957-970.

108. Ohshima S., Murata M., Sakamoto W., Ogura Y. and Motoyoshi F. Cloning and molecular analysis of the Arabidopsis gene TERMINAL FLOWERI //Molecular & General Genetics.- 1997,- V.254, N.2.-P.186-194.

109. Okada K., Komaki M. K. and Shimura Y. Mutational analysis of pistil structure and development of Arabidopsis thaliana //Cell Differentiation & Development.- 1989,- V.28, N.1.-P.27-37.

110. Osborne B. I. and Baker B. Movers and shakers: Maize transposons as tools for analyzing other plant genomes //Current Opinion in Cell Biology.-1995,- V.7, N.3.-P.406-413.

111. Pang P. P. and Meyerowitz E. M. Arabidopsis thaliana: a model for plant molecular biology //Biotechnology.- 1987.- V.5, N.ll.

112. Perazza D., Vachon G. and Herzog M. Gibberellins promote trichome formation by up-regulating GLABROUS I in Arabidopsis //Plant Physiology.- 1998,- V.117, N.2.-P.375-383.135

113. Pereira A., and Aarts M. G. M. Transposon tagging with the En-I system //In Arabidopsis protocols.- J. M. Martinez Zapater and J. Salinas, eds.-Totowa, USA: Humana Press Inc.- 1998. -P.329-338.

114. Peterson P. A mutable pale green locus in maize //Genetics.- 1953.- V.38.-P.682-683.

115. Poethig S. Genetic mosaics and cell lineage analysis in plants //Trends in Genetics.- 1989.- V.5.-P.273-277.

116. Preuss D., Lemieux B., Yen G., and Davis R. W. A conditional sterile mutation eliminates surface components from Arabidopsis pollen and disrupts cell signaling during fertilization //Genes & Development.- 1993.-V.7, N.6.-P.974-85.

117. Promega. fmol DNA Sequencing System Technical Manual.- Madison: Promega- 1995.- 21pp.

118. Roscoe T. J., Domergue F., Lessire R. and Delseny M. Brassica napus fatty acid elongase (FAE1) homolog mRNA, complete cds //In GenBank.-ACCESSION U50771.- 1996.

119. Sambrook J., Fritsch E. F. and Maniatis, T. Molecular Cloning: A Laboratory Mannual, 3 Volumes NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press.- 1989.

120. Satina S. and Blakeslee A. F. Periclinal chimeras in Datura in relation to the development of the carpel //American Journal of Botany.- 1943.- V.30, N.7.-P.453-462.

121. Satina S., Blakeslee A. F. and Avery A. G. Demonstration of the three germ layers in the shoot apex of of Datura by means of induced polyploidy in periclinal chimeras //American Journal of Botany.- 1940.- V.27.-P.895-905.

122. Scarth R. Breeding for special oil quality in canola/rapeseed //In Seed ojl for the future.- S. L. MacKenzie and D. C. Taylor, eds.- Champaign: American Oil Chemists' Society.- 1993. -P. 171-176

123. Schoot van der C., Dietrich M. A., Storms M., Verbeke J. A. and Lucas W. J. Establishment of a cell-to-cell communication pathway between separate carpels during gynoecium development //Planta.- 1995.- V.195, N.3.-P.450-455.

124. Searles L. L., Jokerst R. S., Bingham P. M., Voelker R. A., and Greenleaf A. L. Molecular cloning of sequences from a Drosophila RNA polymerase II locus by P element transposon tagging //Cell.- 1982,- V.31, N.3.-P.585-592.

125. Sessions R. A. and Zambryski P. C. Arabidopsis gynoecium structure in the wild type and in ettin mutants //Development.- 1995.- V.121, N.5.-P.1519-1532.

126. Siegel B. A. and Verbeke J. A. Diffusible factors essential for epidermal cell redifferentiation in Catharanthus roseus //Science.- 1989,- V.244, N.4904.-P.580-582.

127. Sinha N. and Lynch M. Fused organs in the adherent 1 mutation in maize show altered epidermal walls with no perturbations in tissue identities //Planta.- 1998,- V.206, N.2.-P.184-195.

128. Somerville C. and Somerville S. Plant functional genomics //Science.-1999,- V.285, N.5426.-P.380-383.

129. Speulman E., Metz P. L. J. van Arkel G., Hekkert B. L., Stiekema W. J., and Pereira A. A two-component Enhancer-Inhibitor transposon mutagenesis system for functional analysis of the Arabidopsis genome //Plant Cell.- 1999,- V.ll, N. 10.-P.853-1866.

130. Steeves T. A. and Sussex I. M. Patterns in plant development.- New York, USA: Cambridge University Press.- 1989.-388pp.137

131. Stewart R. N. and Burk L. G. Independence of tissues derived from apical layers in ontogeny of the tobacco leaf and ovary //Am. J. Bot.- 1970.-V.57.-P.1010-1016.

132. Thoma S., Hecht U., Kippers A., Botella J., De V. S. and Somerville C. Tissue-specific expression of a gene encoding a cell wall-localized lipid transfer protein from Arabidopsis //Plant Physiology.- 1994.- V.105, N.I.-P.35-45.

133. Tilney-Bassett R. A. E. Plant Chimeras London: Edward Arnold Ltd.-1986,- 199pp.

134. Van den Heuvel J. P. Peroxisome proliferator activated receptors: A critical link among fatty acids, gene expression and carcinogenesis //Journal of Nutrition.- 1999,- V.129, N.2 SUPPL.-P.575S-580S.

135. Vaucheret H., Beclin C., Elmayan T., Feuerbach F., Godon C., Morel J.B., Mourrain P., Palauqui J.-C. and Vernhettes S. Transgene-induced gene silencing in plants //Plant Journal.- 1998,- V.16, N.6.-P.651-659.

136. Verbeke J. A. Fusion events during floral morphogenesis //In Annual Rev. Plant Phisiol. and Plant Molecular Biol. W. R. Briggs, ed.- Palo Alto, USA: Annual Reviews Inc.- 1992. -P.583 - 598.

137. Voelker T. A., Hayes T. R., Cranmer A. M., Turner J. C. and Davies H. M. Genetic engineering of a quantitative trait: Metabolic and genetic parameters influencing the accumulation of laurate in rapeseed //Plant Journal.- 1996.- V.9, N.2.-P.229-241.

138. Vos P., Hogers R., Bleeker M., Reijans M., Van De Lee T., Homes M., Frijters A., Pot J., Peleman J., Kuiper M. and Zabeau M. AFLP: A new technique for DNA fingerprinting //Nucleic Acids Research.- 1995.- V.23, N.21.-P.4407-4414.138

139. Walbot V. Strategies for mutagenesis and gene cloning using transposon tagging and T-DNA insertional mutagenesis //In Annual Rev. of Plant Physiology and Plant Molecular Biol.- W. R. Briggs, ed.- Palo Alto, USA: Annual Reviews Inc.- 1992. -P.49-82.

140. Walker D. B. Postgenital carpel fusion in Catharanthus roseus (Apocynaceae). I. Light and scanning electron microscopic study of gynoecial ontogeny // American Journal of Botany.- 1975.- V.62, N.5.-P.457-467.

141. Walker D. B. and Bruck D. K. Incompetence of stem epidermal cells to dedifferentiate and graft // Canadian Journal of Botany.- 1985.- V.63, N.12.-P.2129-2132.

142. Wisman E., Cardon G. H., Fransz P. and Saedler H. The behaviour of the autonomous maize transposable element En/Spm in Arabidopsis thaliana allows efficient mutagenesis //Plant Molecular Biology.- 1998.- V.37, N.6.-P.989-999.

143. Wisman E., Yephremov A. and Cardon G. The bechavior of the autonomous transposable element En/Spm from maize in Arabidopsis thaliana //Report to the Scientific Advisory Board. Max-Planck-Institut für Züchtungsforschung.- Köln, 1995.- P. 159-160.

144. Yephremov A., Huijser P., Saedler H. and Wisman E. Cloning of the FIDDLEHEAD1 gene by transposon tagging in Arabidopsis thaliana //In 7th International Conference on Arabidopsis Research.-Norwich, U.K.: University of East Anglia, U.K.- 1996,- P.89.

145. Yephremov A. and Saedler H. Display and isolation of transposon flanking sequences starting from genomic DNA and RNA //Plant Journal.- 2000.- (in press).139

146. Yephremov A. and Saedler H. A PCR based Transposon Insertion Display (TID) for gene tagging and evolutionary studies //In 37th Annual Maize Genetics Conference.- B. Sheridan, ed. Asilomar, USA: Univ.North Dakota.- 1995.- P.69.

147. Yephremov A., Schölisch K., Huijser P. and Saedler H. Expression analysis of FIDDLEHEAD gene required for separate growth of meristems //In 8th International Conference on Arabidopsis research.- Madison, USA: University of Wisconsin.- 1997.- P.35.

148. Yephremov A., Schölisch K. and Wisman E. Molecular mechanism of postgenital fusion and de-differentiation of carpel epidermis //Report to the Scientific Advisory Board. Max-Planck-Institut für Züchtungsforschung.-Köln, 1997,- P.114-116.

149. Yephremov A., Wisman E., Huijser P., Huijser C., Wellesen K. and Saedler H. Characterization of the FIDDLEHEAD gene reveals a link between adhesion response and cell differentiation in the epidermis //Plant Cell.- 1999,- V.ll, N.11.-P.2187-2201.

150. Zhou M. Y., Clark S. E. and Gomez-Sanchez C. E. Universal cloning method by TA strategy //Biotechniques.- 1995,- V.19, N.1.-P.34-35.141