Трансформация углеводородного загрязнения в почве под действием биодеструкторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Матвеева, Ольга Николаевна

• Матвеева, Ольга Николаевна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Матвеева, Ольга Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. Биологические методы восстановления нефтезагрязнённых почвенных экосистем. (Литературный обзор).

1.1. Влияние нефтепродуктов на почвенные экосистемы.

1-2. Методы очистки и рекультивации нефтезагрязненных почв.

1.2.1. Основные подходы и роль процессов биоремедиации в восстановлении нефтезагрязненных почв.

1.2.2. Биотрансформация нефти и нефтепродуктов.

1.2.3. Биотрансформация углеводородов различных классов.

1.2.3.1. Алифатические углеводороды.

1.2.3.2. Алициклические углеводороды.

1.2.3.3. Ароматические углеводороды. ч 1.3 Определение качественного и количественного состава нефтяного ч загрязнения почв.

2. Объекты, материалы и методы исследований, методика постановки эксперимента. 2.1. Используемые биологические объекты.

2.2. Методика постановки эксперимента.

2.3. Методы исследования.

3. Трансформация углеводородов в почве под действием биодеструкторов.

3.1. Токсичность углеводородов и нефтепродуктов для дождевых червей.

3.2. Трансформация алифатических углеводородов.

3.2.1. Количественные характеристики процесса биотрансформации гексадекана красным калифорнийским гибридом и биопрепаратом

3.2.2. Качественные характеристики, идентификация и выявление структурных особенностей продуктов трансформации гексадекана

3.3. Биотрансформация циклических углеводородов.

3.3.1. Количественные характеристики процесса биотрансформации нафтеновых углеводородов биопрепаратом «Деворойл».

3.3.2. Количественные характеристики процесса биотрансформации нафтеново-ароматических углеводородов биопрепаратом

- «Деворойл».

3.3.3. Качественные характеристики трансформации циклических соединений.

3.4. Биотрансформация нефти

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Трансформация углеводородного загрязнения в почве под действием биодеструкторов»

Нефть и продукты её переработки - основные источники загрязнения окружающей среды. Попадая в почву, нефтепродукты ухудшают общую экологическую обстановку, существенно изменяя агрофизические и агрохимические совйства почв [1]. В связи с этим, разработка способов очистки почвы от загрязнения углеводородами нефти - одна из важнейших задач при решении проблемы снижения антропогенного воздействия на окружающую среду [2].

В настоящее время наиболее перспективным методом для очистки нефтезагрязненных почв как в экономическом, так и в экологическом плане является биотехнологический подход, основанный на использовании различных групп микроорганизмов, обладающих повышенной способностью к биодеградации нефтей и продуктов её переработки [2, 3].

Изучение процессов биологической трансформации углеводородов нефти является фундаментальной основой для разработки теоретических основ и осуществления процессов биоремедиации нефтезагрязненных территорий. Биологическую трансформацию органических соединений можно рассматривать как ряд сложных химических реакций, общих для животного и растительного мира. Известно большое количество работ, посвященных трансформации углеводородов микроорганизмами, однако, результаты, полученные различными авторами, противоречивы и неоднозначны. Поэтому установление путей превращения доминирующих соединений при биологическом воздействии является весьма актуальным и представляет несомненный практический интерес.

Трансформация любых органических загрязнений в почве в природных условиях происходит под действием комплекса организмов, включающего представителей разных трофических уровней. Дождевые черви являются одним из важнейших компонентов агроценозов различных почвенных зон и важнейшим фактором, определяющим плодородие почв и формирование её агрофизических характеристик [5]. На основании известной высокой эффективности использования дождевых червей для переработки различных сельскохозяйственных и бытовых отходов целесообразно было изучить эффективность биотрансформации нефтепродуктов, восстановления плодородия почв и, прежде всего её агрофизических свойств, при совместном применении для биоремедиации нефтеразрушающих микробиологических препаратов и дождевых червей.

Цель работы: Изучение основных закономерностей процесса биотрансформации углеводородов, моделирующих отдельные классы соединений и нефть в целом, под действием микробиологических препаратов и дождевых червей.

Для достижения поставленной цели решались следующие основные задачи:

- определить токсичность углеводородов различных классов и товарных нефтепродуктов для олигохет;

- установить основные закономерности и возможные пути трансформации алифатических углеводородов в почве под воздействием дождевого червя и микробиологического препарата «Деворойл» при раздельном и совместном внесении;

- проанализировать динамику и установить возможные пути трансформации нафтеновых и нафтеново-ароматических углеводородов под воздействием коммерческого микробиологического препарата «Деворойл»;

- охарактеризовать количественные изменения содержания нефти, происходящие в процессе ее трансформации под воздействием дождевого червя и коммерческого микробиологического препарата «Дестройл» при раздельном и совместном внесении, и оценить происходящие при этом изменения токсичности и агрофизических свойств почв;

- оптимизировать условия проведения процесса комплексной биодеградации как отдельных углеводородов, так и нефти в целом под воздействием нефтеокисляющих микроорганизмов и дождевых червей;

- оценить перспективы применения и возможную роль дождевых червей для трансформации углеводородного и нефтяного загрязнения и рекультивации почв, а также совместного использования коммерческих нефтеокисляющих препаратов и дождевых червей.

Научная новизна. Впервые показано, что при совместном использовании микробиологических препаратов («Деворойл», «Дестройл») и дождевых червей происходит существенная интенсификация процессов биодеградации нефти и углеводородов в почве. Комплексное использование

1 1Ч методов спектроскопии ЯМР на ядрах Ни С, ИК- и УФ- спектроскопии, ГЖХ позволило установить изменения качественного и количественного состава доминирующих классов углеводородов нефти, происходящие в процессе их биотрансформации и установить структуры некоторых промежуточных продуктов.

На основании результатов спектроскопии ЯМР 'Н и ,3С экстрактов почв, загрязнённых алифатическим углеводородом и обработанных нефтеокисляющим препаратом «Деворойл» (раздельно и совместно с червями), доказано образование ненасыщенных триглицеридов, определены некоторые детальные особенности их строения (длина углеродной цепи кислотных остатков и местоположение двойных связей).

Установлены динамика количественных и качественных изменений, происходящих при трансформации циклических углеводородов под воздействием микробиологического препарата «Деворойл». Впервые экспериментально установлена структура промежуточных продуктов биотрансформации декалина и тетралина, на основании чего была предложена обобщённая схема их биотрансформации.

Практическая значимость работы. На основе проведённых исследований разработаны теоретические основы и показана перспективность нового биотехнологического высокоэкологичного метода очистки и рекультивации углеводород- и нефтезагрязнённых почв с использованием бинарной системы биодеструкторов (дождевые черви -нефтеокисляющие микробиологические препараты) и определены возможности его практического использования. Диссертационная работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (Гранты № 99-04-49612, № 0204-49976, № 05-04-97237 и Научно-технической программы Минобразования России — проект 477).

Работа изложена на 110 страницах машинописного текста включая 20 таблиц, 13 рисунков и списка цитируемой литературы из 183 источников. Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов и библиографии. Первая глава посвящена обзору литературных данных, где основное внимание уделено проблеме нефтяного загрязнения, а также известным способам очистки почв от нефтепродуктов; рассмотрены процессы, происходящие в почве при попадании нефти и нефтепродуктов, основные пути трансформации нефтяных углеводородов и роль различных представителей экосистем в процессах биодеструкции. Глава 2 содержит экспериментальную часть. Основные результаты работы представлены в 3 главе, посвященной изучению токсичности углеводородов и товарных нефтепродуктов для дождевых червей, изучению процесса биотрансформации углеводородов: алифатического, нафтенового и нафтеново-ароматического ряда, а также нефти Марковского месторождения.

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Матвеева, Ольга Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Трансформация нефти и индивидуальных углеводородов (гексадекана) нефтеокисляющими микробиологическими препаратами существенно интенсифицируется под воздействием дождевых червей.

2. Трансформация гексадекана под воздействием микробиологического препарата «Деворойл» сопряжена с образованием ненасыщенных триглицеридов переменного строения. Длина цепи кислотного остатка триглицеридов варьирует в пределах Сц-С22 атомов углерода, при этом количественно преобладают кислотные остатки с числом атомов углерода в цепи Ci6. Положение двойных связей носит стохастический характер, но все они удалены от карбоксильной группы более чем на 4 атома углерода.

3. Образующиеся под воздействием микробиологического препарата продукты трансформации нафтенового углеводорода- декалина и нафтеново-ароматического углеводорода- тетралина экспериментально зарегистрированы и охарактеризованы методами ЯМР !Н и ГЖХ. Предложена схема трансформации декалина и тетралина под действием нефтеокисляющего микробиологического препарата «Деворойл».

4. Установлены оптимальные параметры процесса биотрансформации гексадекана под действием системы «Деворойл» и дождевых червей. Увеличение количества вносимого биопрепарата «Деворойл» при комплексном воздействии приводит к нивелированию стимулирующего действия дождевых червей на процессы трансформации углеводородов и снижению фитотоксичности исследуемых образцов.

5. Деградация нефти, снижение фитотоксичности и улучшение агрофизических свойств почв (содержание агрономически ценных фракций почвы, значение фактора структурности) в системе

Дестройл» - дождевые черви происходили более эффективно, по сравнению с внесением только нефтеокисляющего препарата или дождевых червей.

6. По токсичности для дождевых червей испытанные углеводороды образуют следующий ряд (в порядке возрастания): нафталин > тетралин > мета-ксилол > орто-ксилол > толуол > стирол > антрацен > мезитилен > псевдокумол > декалин > циклогексан > бензол > гептан > пара-ксилол > октан > гексан > пентан > изооктан > гексадекан > додекан > ундекан > декан> нонан.

7. Предложен принципиально новый экономичный и экологичный биотехнологический метод биоремедиации нефтезагрязнённых субстратов с помощью комплекса, состоящего из нефтеокисляющих микроорганизмов и дождевых червей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Матвеева, Ольга Николаевна, 2006 год

1. Орлов Д.С., Бочарникова Е.А., Амосова Я.М. Изменение физико-химических свойств почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами // Экотоксикология и охрана природы: Тез. докл. республиканского семинара. Рига, 1988. С. 128-130.

2. Киреева Н.А. Использование биогумуса для ускорения деструкции нефти в почве // Биотехнология. 1995. № 5-6. С. 32-35.

3. Лысак Л.В., Лапыгина Е.В. Деструкция нефти монокультурами и природными ассоциациями почвенных бактерий // Вест. Моск. Ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 1994. №1. С.58-62.

4. Суржко Л.Ф., Финкельштейн З.И., Баскунов Б.П., Янкевич М.И., Яковлев

5. B.И., Головлева Л.А. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками // Микробиология. 1995. Т.64, №3. С.393-398.

6. Халимов Э.М., Левин С.В., Гузев B.C. Экологические и микробиологические аспекты повреждающего действия нефти на свойства почвы // Вестн. Моск. ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 1996. № 2. С. 59-64

7. Солнцева Н.П., Гусева О.А., Горячкин С.В. Моделирование процессов миграции нефти и нефтепродуктов в почвах тундры // Вестн. Моск. Ун-та, сер. 17. Почвоведение. 1996. №2. С. 10-17.

8. Глазковская М.А., Пиковский Ю.И. Скорость самоочищения почв от нефти в различных природных зонах // Природа. 1980. № 5. С. 118-119.

9. Хазиев Ф.Х., Тишкина Е.И., Киреева Н.А. Влияние нефтепродуктов на биологическую активность почвы // Биологические науки. 1988. №2.1. C.93-99

10. Ю.Левин С.В., Халимов Э.М., Гузев B.C. Эколого-микробиологическое нормирование содержания нефти в почве // Токсикол. Вестник. 1995. №1. С. 11-15.

11. Гузев B.C., Левин С.В., Селецкий Г.И. и др. Роль почвенной микробиоты в рекультивации нефтезагрязнённых почв // В кн.: Микроорганизмы и охрана почвы / Под ред. Д.Г. Звягинцева, М.: «Наука», С. 129 -150.

12. Восстановление нефтезагрязнённых почвенных экосистем / Под ред. М.А. Глазковской, М., 1988. 264 с.

13. Хазиев Ф.Х, Тишкина Е.И., Киреева Н.А., Кузяхметов Г.Г. Влияние нефтяного загрязнения на некоторые компоненты агроэкосистемы // Агрохимия. 1988. № 2. С.56-61.

14. Гриценко А.И., Акопова Г.С., Максимов В.М. Экология. Нефть и газ. М.: Наука, 1997. 557 с.

15. Рэуце К., Кырстя С. Борьба с загрязнением почвы. М.: ВО Агропромиздат.: 1986. 221 с.

16. Арене В.Ж., Гридин О.М., Яншин А.Л. Нефтяные загрязнения: как решить проблему // Экология и промышленность России. 1999.№9. С. 33-36.

17. Вельков В.В. Биоремедиация; принципы, проблемы, подходы // Биотехнология. 1995. № 3-4. С. 20-27.

18. Янкевич М.И., Квитко К.В. Биоремедиация нефтезагрязненных водоемов // Экология и промышленность России. 1998. №10. С.21-26.

19. Бояндин А.Н., Печуркин Н.С., Попова Л.Ю. Концепции развития и методологии биоремедиации: выбор методов и объектов. // Проблемы биоремедиации в XXI веке: Материалы межрегионального рабочего совещания. Красноярск, 2002. С. 94-98.

20. Коронелли Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде (обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. т. 32, № 6. С.579-585.

21. Method effective purification of soils contaminated with petroleum products // Japan Chemical Marketing. 1995. 36. N. 1822. p.l 1.

22. Алёхин В.Г., Фахрутдинов А.И., Малышкина JI.А., Ситников А.В., Емцев

23. B.Т., Хотянович А.В. Сравнительная эффективность деструкции нефтепродуктов разными биопрепаратами при разных уровняхзагрязнения торфогрунтов // Биологические ресурсы иприродопользование: Сб. научных трудов. Нижневартовск. 1999. № 3.1. C. 96-106.

24. Ермоленко З.М., Чугунов В.А., Герасименко В.Н. Влияние некоторых факторов окружающей среды на выживаемость внесённых бактерий, разрушающих нефтяные углеводороды // Биотехнология. 1997. № 5.

25. Шарубин С.А. Биоремедиация нефтезагрязнённых сайтов. Практический опыт работы // Проблемы биоремедиации в XXI веке: Материалы межрегионального рабочего совещания. Красноярск, 2002. С. 55-57.

26. Преобразование нефтей микроорганизмами / ред. Б.Г. Хотимский, А.И. Акопиан. //Труды Всесоюзного нефтяного НИ Геологоразведочного института, вып. 281. Ленинград. 1970. 220 с.

27. Сваровская Л.И., Алтунина Л.К., Туров Ю.П., Гузняева М.Ю. Микробная деструкция углеводородов нефти // В кн.: Теоретические и практические основы физико-химического регулирования свойств нефтяных дисперсных систем. 4.II. Томск, 1999. С. 16-22.

28. Квасников Е.И., Клюшникова Т.М. Микроорганизмы деструкторы нефти в водных бассейнах. Киев: Наукова Думка, 1981. 132 с.

29. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Микробиологическое разрушение нефтяного загрязнения // Изв. АН СССР. Сер. Биол. 1981, №6. с. 835-844.

30. Билай В.И., Коваль Э.З. Рост грибов на углеводородных субстратах нефти. Киев: Наук. Думка. 1980. 340 с.

31. Халимов Э.М. Эколого-микробиологические основы рекультивации почв, загрязнённых нефтью и нефтепродуктами: Дисс. канд. биол. наук. МГУ, 1996.

32. Floodgate G. The fate of petroleum in marine ecosystems // Petroleum microbiology / Ed. Atlas R.M. N.Y.: Macmillan Publishing Co. 1984. P.355-398.

33. Bossert I., Rartha R. The fate petroleum in soil ecosystems // Petroleum microbiology / Ed. Atlas R.M. N.Y.: Macmillan Publishing Co., 1984. p.434-476.

34. Киреева H.A. Микроскопические грибы биодеструкторы нефтяных углеводородов в почве // Ботанические исследования на Урале: Информационные материалы. Свердловск, 1990. С. 41.

35. Киреева Н.А., Галимзянова Н.Ф. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на численность и видовой состав микромицетов //

36. Почвоведение. 1995. №2. с.211-216.

37. Биотехнология / ред Егорова Н.С., Самуилова В.Д. М.: Высшая школа. 1987. 270 с.

38. Сассон А. Биотехнология: свершения и надежды. М.: Мир, 1987, 411 с.

39. Coty V.F., Leavitt R.I. Microbial protein from hydrocarbons // Journal of industrial microbiology & biotechnology . 1999. №22 . P. 259-269.

40. Куличевская И.С., Гузев B.C., Паников H.C. Популяционная динамика углеводородокисляющих дрожжей, интродуцированных в нефтезагрязнённую почву // Микробиология. 1995. т. 64, №5. С. 668-673.

41. Гусев М.В., Коронелли Т.В., Максимов В.Н., Ильинский В.В., Захаров В.Т. Изучение микробиологического окисления дизельного топлива методом полного факторного эксперимента // Микробиология. 1980 б. т. 49, № 1.С. 25-28.

42. Химия нефти /Ред.Сюняев З.И.Л.:Химия. 1984.358 с.

43. Leachy J.G, Colwell R.R. Microbial degradation of hydrocarbon in the environment//Microbiol. Rev. 1990. №54. P. 305-315.

44. Prince R.C. Petroleum spill bioremediation in marine environments // Crit. Rev. Microbiology. 1993. №19. P.217-242.

45. Вассоевич Н.Б. Источник нефти- биогенное углеродистое вещество // Природа. 1971. №3. С. 58.

46. Ellis В., Balba M.T., Theile P. Bioremediation of Oil Contaminated Land // Environm. Technol. 1990. V. 11, № 5. P. 443-455.

47. Wang X., Bartha R. Effects of bioremediation on residues, activity and toxicityin soil contaminated by fuel spills // Soil. Bio. Biochem. 1990. V. 22, №4. P. 501-506.

48. Пиковский Ю. И. // Восстановление нефтезагрязнённых почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. С. 7-12.

49. Uraizee F.A., Venosa A.D., Suidan М.Т. A model for diffusion controlled bioavailability of crude oil components // Biodegradation. 1998. № 8. P. 287296.

50. Vinas M., Grifoll M., Sabate J., Solanas A.M. Biodegradation of a crude oil by three microbial consortia of different origins and metabolic capabilities // Journal of industrial microbiology & biotechnology. 2002. №28. P. 252-260.

51. Davis J.B., Raymond R.L. Oxidation of alkyl substituted cyclic hydrocarbons by a Nocardia during growth on n-alkanes // Appl. Microbiol. 1961. № 9. P. 383-388.

52. Komukai-Nakamura S, К Sugiura, TH Yamauchi Inomata Y, К Venkateswaran, TH Yamamoto S and S Harayama. Construction of bacterial consortia that degrade Arabian light crude oil // J. Ferment. Bioeng. 1996. №82. P. 570-574.

53. Sugiura К, M Ishihara, and HS Shimauchi T. Physicochemical properties and biodegradability of crude oil // Environ. Sci. Technol. 1997. №31. P.45- 51.

54. Venkateswaran K, Hoaki KMR, Maruyama T. Microbial degradation of resins fractionated from Arabian light crude oil // Can J. Microbiol. 1995. №41. P. 418-424.

55. Leahy J.G., Colwell R.R. Microbial degradation of hydrocarbons in the environment//Microbiol Rev. 1990. № 54. P. 305-315.

56. Foght J.M., Fedorak P.M., Westlake D.W.S. Mineralization of ,4C. hexadecane and [I4C]phenanthrene in crude oil: specificity among bacterial isolates // Can. J. Microbiol. 1990. №36. P. 169- 175.

57. Churchill S.A., Harper J.P., Churchill P.F. Isolation and characterization of a Mycobacterium species capable of degrading three and four - ring aromatic and aliphatic hydrocarbons // Appl Environ Microbiol. 1999.№ 65. P. 549552.

58. Gibson D.T. and V Subramanian. Microbial degradation of aromatic compounds. In: Microbial Degradation of Organic Compounds. 1984. Marcel Dekker, New York.

59. Gilewicz M, Ni'matuzahroh N.T., Budzinski H., Doumenq P., Michotey V., Bertrand J.C. Isolation and characterization of a marine bacterium capable of utilizing 2 — methylphenanthrene// Appl Microbiol Biotechnol. 1997. No. 48. P. 528-533.

60. Sabate' J., Grifoll M., Vin~as M. and Solanas A.M. Isolation and characterization of a 2 methylphenanthrene utilizing bacterium: identification of ring cleavage metabolites// Appl Microbiol Biotechnol. 1999. No. 52. P. 704-712.

61. Casellas M, Grifoll M., Sabate' J., Solanas AM. Isolation and characterization of a 9- fluorenoned degrading bacterial strain and its role in synergistic degradation of fluorene by a consortium // Can J Microbiol. 1998. No. 44. P. 734- 742.

62. Walker J.D., Petrakis L. & Colwell R.R. Comparison of biodegradability of crude and fuel oils // Can. J. of Microbiol. 1976. No. 22. P. 598- 602

63. MulkinsPhillips G.J., Stewart J.E. Effect of four dispersants on biodegradation and growth of bacteria on crude oil //App. Microbiol. 1974 b. No. 28. P. 547552

64. WestlakeDWS, Jobson A, PhillippeR&CookFD Biodegradability and crude oil composition. //Can. J. of Microbiol. 1974. No. 20. P. 915-928.

65. Коваль Э.З. Микрофлора почв, заливаемых нефтепродуктами / В кн.: Систематика, экология и физиология почвенных грибов. Киев: Наук. Думка, 1975. С. 64-65.

66. Loveley D.R., Chappelle F.H. Deep subsurfase microbial process // Rev. Geophys. 1995. No. 33. P. 365-381.

67. Финкелыитейн З.И., Баскунов Б.П., Алиева P.M., Головлев Е.Л., Головлева Л.А. Микробная деградация нефти и нефтепродуктов // Биотехнол. защиты окруж. среды.: тез. докл. конф. Пущино. 1994. С.5-6.

68. Marques-Rocha F.J., Hernandes-Rodrigues V., Lamela Ма.Т. Biodegradation of diesel oil in soil by a microbial consortium // Water, Air and soil pollution. 2001. No. 128. P. 313-320.

69. Mohn W.W. Indirect bioremediation: biodegradation of hydrocarbons on a commercial sorbent//Biodegradation. 1997. No. 8. P. 15-19.

70. Alexander M. Biodegradation and bioremediation, Academic Press, San Diego, 1994.

71. Goswami P., Singh H.D. Different modes of hydrocarbon uptake by two Pseudomonas species // Biotechnol. Bioeng. 1991. No. 37. P. 1-11.

72. Bouchez M., Blanchet D., Vandecasteele J.P. Substrate availability in phenanthrene biodegradation: transfer mechanism and influence on metabolism //Appl. Microbiol. Biotech. 1995. No. 43. P. 952-960.

73. Grimberg S.J., Stringellow W.T., Aitken M.D. Quantifying the biodegradation of phenantrene by Pseudomonas stuzeri P16 in the presence of a nonionic surfactant // Appl. Environ. Microbiol., 1996, 62,2387-2392.

74. Mulder H., Breure A.M., Andel J.G.V., Grotenhuis J.T.S., Rulkens W.H. Influence of hydrodynamic conditions on naphthalene dissolution and subsequent biodegradation // Biotechnol. Bioeng. 1998. No. 57. P. 145-154.

75. Bouchez M., Rakatozafy H., Marchal R., Leveau J.Y, Vandecasteele J.P. Diversity of bacterial strains degrading hexadecane in relation to the mode of substrate uptake // J. Appl. Microbiol. 1999. No. 86. P. 421-428.

76. Choi D.H., Hori K., Tanji Y., Unno H. Microbial degradation kinetics of solid alkane dissolved in nondegradable oil phase // Biochem. Eng. J. 1999. No. 3. P. 71-78.

77. Efroymson R.A., Alexander M. Biodegradation by an Arthrobacter species of hydrocarbons partitioned into an organic solvent // Appl. Environ. Microbiol. 1991. No. 57. P. 1441-1447.

78. Goma G. Hydrocarbon fermentation: kinetics of microbial cell growth // Biotech. Bioeng. 1978. No. 20. P. 1723-1734.

79. Erikson L.E., Humphrey A.E., Prokop A. Growth models of cultures with two liquid phases. I. Substrate dissolved in dispersed phase // Biotechnol. Bioeng. 1969. No. 11. P. 449-466.

80. Wang D.I.C., Ochoa A. Measurements on the interfacial areas of hydrocarbon in yeast fermentations and relationships to specific growth rates // Biotechnol. Bioeng. 1972. No. 14. P. 345-360.

81. Moo-Young M., Shimizu T. Hydrocarbon fermentation using Candida lipolytica. II: A model for cell growth kinetics // Biotechnol. Bioeng. 1971. No. 13. P. 761-778.

82. Roy P.K., Singh H.D., Bhagat S.D., Baruah J.N. Characterization of hydrocarbon emulsification and solubilization occurring during the growth of Endomycopsis lipolytica in hydrocarbons // Biotechnol. Bioeng. 1979. No. 21. P. 955-974.

83. Shreve G.S., Inguva S., Gunnam S. Rhamnolipid biosurfactant enhancement of hexadecane biodegradation by Pseudomonas aeruginosa // Mol. Mar. Biol. Biotechnol., 1995, 4,331-337.

84. Yoshida F., Yamane T. Hydrocarbon uptake by microorganisms a supplementary study//Biotechnol. Bioeng. 1971. No. 13. P. 691-695.

85. Liu D., Maguire R.J, Pacepavicius G.J, Nagy E. Microbial degradation of polycyclic aromatichydrocarbons and polycyclic aromatic nitrogen heterocyclics // Envir. Toxicol. Water Qual. 1992. No. 7(4). P. 355-372.

86. Middaugh D.P., Pesnick S.M., Lantz S.E., Heard C.S., Mueller J.G. Toxicological assessment of biodegraded phentachlorphenil: MicrotoxTM and fish embryos // Arch. Environ. Contam. Toxicol. 1993. No. 24. P. 165-172.

87. Burback B.L., Perry J.J Biodegradation and biotransformation of groundwater pollutant mixtures by Mycobacterium vaccae // Appl. Environ. Microbiol. 1993. No. 59(4). P. 1025-1029.

88. Beam H.W., Perry J.J Microbial degradation of cicloparaffinic hydrocarbons via co-metabolism and commensalisms // J. Gen. Micro. 1974. No. 82, P. 163169.

89. Рачинский B.B., Давидова Е.Г., Лапотышкина А.И. Механизм транспорта н-парафинов в клетки дрожжей // Доклады АН СССР. 1971. № 201. С. 717.

90. Klug M.J., Markovetz A.J. Utilization of aliphatic hydrocarbons by microorganisms// Adv. Microbial. Physiol. 1971. No. 5. P. 1.

91. Auliffe Mc. Solubility in water of normal C9 and Cj0 alkane hydrocarbons // Science. 1969. No. 163. P. 478.

92. Mc Lee A.G., Davies S.L. Linear growth of a Torulopsis sp. on n-alkanes // Canad. J. Microbiol. 1972. No. 18. P. 315.

93. Charkavarty M., Amin P.M., Singh H.D., Baruach J.N., Ijengar M.S. A kinetic model for microbial growth on solid hydrocarbons // Biotechnol. and bioengng. 1972. No. 14. P. 61.

94. Корчемная Ц.Б., Беликов В.М., Федосова А.В. Потенциометрическое определение растворимых жирных кислот при микробиологическом окислении углеводородов // Прикладная биохимия и микробиология. 1966. Том. 2, Вып. 2. С. 213-215.

95. Warhurst AM & Fewson СА. Biotransformations catalyzed by the genus Rhodococcus // Crit. Rev. Biotechnol. 1994. No. 14. P. 29- 73.

96. Broadway N.M., Dickinson FM & Ratledge C. The enzymology of dicarboxylic acid formation by Corynebacterium sp. strain 7E1C grown on n-alkanes//J. Gen. Microbiol. 1993.No. 139. P. 1337-1344.

97. Ludwig B, Akundi, A & Kendall K. A long-chain secondary alcohol dehydrogenase from Rhodococcus erythropolis ATCC 4277 // Appl. Environ. Microbiol. 1995. No. 61. P. 3729-3733.

98. Woods NR & Murrell JC. The metabolism of propane in Rhodococcus rhodochrous PNKbl //J. Gen. Microbiol. 1989. No. 135. P. 2335-2344.

99. Klug M.J., Markovetz A.J. Utilization of aliphatic hydrocarbons by microorganisms// Adv. Microbial. Physiol., 1971, 5, p. 1.

100. Lebeault J.M., Azolay E. Metabolism of alkane by yeast // Lipids. 1971. No. 6. p. 441-444.

101. Iizuka H., Iida M., Unami Y., Hoshio Y. n-Decan dehydrogenation by a cell-freee extract of Candida rugosa// Z. Allgem. Microbial. 1968. No. 8. P. 145.

102. Leadbetter E.R., Foster J. M. Bacterial oxidation of gaseous alkanes // Arch. Microbiol. 1960. No. 35. P. 92.

103. Фонкен Г., Джонсон P. Микробиологическое окисление. М.: Мир, 1976. 240 с.

104. Литвиненко С.Н. Защита нефтепродуктов от действия микроорганизмов. М.: Химия, 1977. 143 с.

105. May S.W., Abbot B.J. Enzymic epoxidation. II. Comparison between the epoxidation and hydroxylation reactions, catalized by the to-hydroxylation system of Pseudomonas oleovorans // J. Biol. Chem. 1973. No. 248. P. 1725.

106. Benton, P.M.C., Christiansen, J., Dean, D.R., Seefeldt, L.C. Stereospeci.city of acetylene reduction catalyzed by nitrogenase // J. Am. Chem. Soc. 2001. No. 123. P. 1822-1827.

107. Rosner, B.M., Rainey, F.A., Kroppenstedt, R.M., Schink, B. Acetylene degradation by new isolates of aerobic bacteria and comparison of acetylene hydratase enzymes //FEMS Microbiol. Lett. 1997. No. 148. P. 175-180.

108. Marcotte, P., Walsh, C. Sequence of reactions which follow enzymic oxidation of propargylglycine // Biochemistry. 1978. No. 17. P.5613-5619.

109. Miesowicz, F.M. & Bloch, K. Puri.cation of hog liver isomerase. Mechanism of isomerization of 3-alkenyl and 3-alkynyl thioesters // J. Biol. Chem. 1979. No. 254. P.5868-5877.

110. Yamada, E.W. & Jakoby, W.B. Enzymatic utilization of acetylenic compounds-I. An enzyme converting acetylenedicarboxylic acid to pyruvate // J. Biol. Chem. 1958. No. 233. P. 706-711.

111. Yamada, E.W. & Jakoby, W.B. Enzymatic utilization of acetylenic compounds II. Acetylenemonocarboxylic acid hydrase // J. Biol. Chem. 1958. No. 233. P. 941-945.

112. Ooyama J., Foster J.W. Bacterial oxidation of cycloparaffinic hydrocarbons //Antonie van Leeuwenhoek. J. Microbiol, and Serol. 1965. No. 31. P. 45.

113. Norris D.B., Trudgill P.W. The purification and properties of cyclohexanone oxygenase from Nocardia globerula // Biochem. J. 1972. No. 130. P. 30.

114. Griffin M., Trudgill P.W. The metabolism of cyclopentanol by Pseudomonas NCIB 9872 // Biochem. J. 1972. No. 129. P. 595.

115. Shumacher J.D., Fakoussa R.M. Degradation of alicyclic molecules by Rhodococcus rubber CD4 // Applied microbiology & biotechnology. 1999. No. 52. P. 85-90.

116. Shaw R. Microbiological oxidation of cyclic ketones // Nature. 1966. No. 5030. P. 1369.

117. Hasegawa Y, Segawa T, Obata H, Tokuyama T (1983) Metabolism of cycloheptanone by Nocardia sp.// Nippon Nogeikagaku Kaishi. 1983. No. 57. P. 129-134

118. Gibson D.T., Wood J.M., Chapmann P.J., Dagley S. Bacteriial degradation of aromatic compounds // Biotechnol. and bioeng. 1967. No. 9. P. 33.

119. Catteral F.A., Williams P.A., Some properties of naphthalene-oxygenase from Pseudomonas sp. NCIB 9816.- J. Can. Microbiol., 1971, 67, p. 117.

120. Griffits E., Evans W.C. A cell-free perhydroxylase system from soil pseudomonas, with activity on aromatic hydrocarbons // Biochem. J. 1965. No. 95.P.51.

121. Adachi K., Iwayama Y., Tanioka H., Takeda Y. Purification and properties of homogentisate oxygenase from Pseudomonas fluorescens // Biochim. Et biophys . acta. 1966. No. 118. P. 88.

122. Розанова Е.П., Кузнецов С.И. Микрофлора нефтяных месторождений. М.: Наука, 1974. 197 с.

123. Энциклопедия экометрия. Серия «Экометрия»/ под ред. Исаева. С.-Пб.: Крисмас+, 1998. 896 с.

124. Современные методы мсследования нефтей / ред. Богомолов А.И. М.: Недра, 1984. 431 с.

125. Карякин А.В., Грибовская И.Ф. Методы оптической спектроскопии и люминисценции в анализе природных и сточных вод. М.: Химия. 1987. 304 с.

126. Лурье Ю.Ю. Аналитическая химия промышленных сточных вод. М.: Химия, 1984. 302 с.

127. Дмитриев М.Т., Кознина Н.И., Пинигина Н.А. Санитарно-химический анализ загрязняющих веществ в окружающей среде. М.: Химия, 1989. 287с.

128. Петров С.И., Тюлягина Т.Н., Василенко П.А. Определение нефтепродуктов в объектах окружающей среды // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 1999. том. 65, №9. С. 3-19.

129. Бродский Е.С., Савчук С.А. Определение нефтепродуктов в объектах окружающей среды // Ж. Аналитической химии. 1998. том 53, №12. С. 1238-1251.

130. Инструкция по идентификации источника загрязнения водного объекта нефтью. 1994. Утверждено приказом №241 от 24.08.94 (Министерство охраны окружающей среды и природных ресурсов РФ)

131. Проскуряков В.А. Химия нефти и газа. С-Пб.: Химия. 1995. 448 с.

132. Люминесцентные методы анализа следовых количеств загрязнителей / Сб. материалов НПФ АП «Люмэкс». С-Пб.: Люмэкс. 1996.

133. Другов Ю.С., Роднин А.А. Газохроматографическая идентификация загрязнений воздуха, воды и почвы. Практическое руководство. С-Пб.: Теза. 1999. 622 с.

134. Орлова Д.С., Васильевская В.Д. Почвенно-экологический мониторинг и охрана почв. М.: МГУ, 1994. 272 с.

135. Герасимов И.П., Глазковская М.А. Основы почвоведения и географии почв. М.: Географгиз, 1960. 485 с.

136. ГОСТ 7.1.4.01-80. Общие требования к определению нефтепродуктов в природных и сточных водах. М.: Госстандарт, 1983. 8 с.

137. Серёгина И.Ф., Окина О.И., Кистанов А.А. Спектрофотометрическое определение нефтепродуктов в почвах // Ж. Аналитической химии. 1999. том 54, №4. С. 434-440.

138. Эрнестова Л.С., Тарасова Л.А. // Труды Института экспериментальной метеорологии. Моск. Отд. Гидрометеоиздата. 1980. Вып. 10(86). 98 с.

139. Аммосова Я.М., Бочарникова Е.А. Физические и химические методы исследования почв // В кн.: Сб. ст. МГУ им М.В. Ломоносова. Фак. Почвоведения. М.: Ид. МГУ, 1994. 69 с.

140. Справочник. Технологии восстановления почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами. -М.: РЭФИА, НИА-Природа, 2001. 185 с.

141. Buzov В.А., Poljanskaja L.M, Thanh Vu Nguyen // Acta. Zool. Fenn. 1995. № 196. p. 376 - 379. Роль дрожжей как стимуляторов роста для Eisenia foetida в системах вермикомпостирования.

142. Binet F., Fayolle L., Pussard M. Significance of earthworms in similating soil microbial activity // Biol. Fertil. Soil. 1998. № 27. P. 79 84.

143. Тиунов А.В. Вермикомпост, вермикомпостирование и компостные черви: направление научных исследований в последнее десятилетие / Дождевые черви и плодородие почв. Тез. 2-ой Международной научно-практической конференции. Владимир. 2004 г. С. 3.

144. Калабин Г.А., Каницкая JI.B., Кушнарев Д.Ф. Количественная спектроскопия ЯМР природного органического сырья и продуктов его переработки. М.: Химия, 2000. 407 с.

145. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам / Под ред. О. Микеша. М.: Мир, 1982. Ч. II. 381 с.

146. Наканси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений, практическое руководство. М.: Мир. 1965. 209 с.

147. Стом Д.И., Саксонов М.Н., Балаян А.Э., Потапов Д.С., Лозовой Д.В., Бархатова О.А., Горбунов В.В., Агапова А.В. Разработка новых методов биотестирования нефтепродуктов // Тез. Доклада на 1 съезд токсикологов России. Москва. 1998. С.320.

148. Stom D.I. Effect of polyphenols on shoot and root growth and on seed germination//Biologia Plantarum. 1982. vol.24. N. l.P. 1-6.

149. Практикум по почвоведению /под ред. Кауричева И.С. М.: Агропроиздат, 1986. 336 с.

150. Вадюнина А.Ф., Корчагина З.А. Методы исследования физических свойств почв. М.: Агропромиздат, 1986. 416 с.

151. Артемьева Т.И., Жеребцов А.К., Борисович Т.М. Влияние загрязнения нефтью и нефтепромысловыми сточными водами на комплекс почвенных животных / В кн. Восстановление нефтезагрязнённых экосистем. М.: Наука, 1988. с. 82-99.

152. Артемьева Т. И. Комплексы почвенных животных и вопросы рекультивации техногенных территорий. М.: Наука, 1989. 109 с.

153. Гузев B.C., Левин С.В., Селецкий Г.И. и др. Роль почвенной микробиоты в рекультивации нефтезагрязнённых почв // В кн.: Микроорганизмы и охрана почв. Гл. 4. М.: Наука, 1989. .С.129-150.

154. Чекановская О.В. Дождевые черви и почвообразование. М.: Академия наук СССР, 1960.-205 с.

155. Edwards С.A., Bater J.E. The use of earthworms in environmental management//Soil Biol. Biochem. 1992. Vol. 24: No. 12. P. 1638-1689.

156. Соромотин А.В. Влияние нефтяного загрязнения на почвенных беспозвоночных (мезофауну) в таёжных лесах Среднего Приобъя // Сибирский экологический журнал. 1995. № 6. С.549-552.

157. Shin К.Н., Kim K.W. Ecotoxicity monitoring of hydrocarbon-contaminated soil using earthworm (Eisenia foetida) // Environmental monitoring and assessment. 2001. No. 70. P. 93-103.

158. RistorA. I, Dagaut P., Cathonnet M. The oxidation of n-hexadecane: experimental and detailed kinetic modeling // Combustion and flame. 2001. No. 125. P.l 128-1137.

159. Atlas, R. M. Microbial Degradation of Petroleum Hydrocarbons: An Environmental Perspective// Microbiology Review. 1981. Vol 45. P. 180-209.

160. Bus J., Sies I., Marsel S.F., Lie Ken Jie ,3C-NMR of Double and triple bond carbon atoms of unsaturated fatty acid methyl esters // Chemistry and Physics of Lipids.1977. №18. P. 130-144.

161. Мерзлая Г.Е., Лежнина A.A., Зябкина Г.А., Нестерович И.А. Агроэкологическая оценка биогумуса // Химия в сельском хозяйстве. 1994. №4. С. 12.

162. Городний Н.М. Биоконверсия органических отходов и применение биогумуса в сельском хозяйстве // Международный агропромышленный журнал. 1991. №5. С. 98-100.