Сывороточные маркеры фиброзирования при хронических болезнях печени у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, кандидат медицинских наук Сурков, Андрей Николаевич

• Сурков, Андрей Николаевич
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Сурков, Андрей Николаевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Основные звенья патогенеза фиброзирования печени.

1.2. Современные методы оценки степени фиброзирования печени у детей.

1.3. Серологическая диагностика стадии фиброзирования печени.

ГЛАВА 2. ОБЪЕМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫХ, ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫХ И МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ БОЛЕЗНЯХ ПЕЧЕНИ У ДЕТЕЙ.

3.1. Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей при аутоиммунном гепатите у детей.

3.2. Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей при болезни Вильсона у детей.

3.3. Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей при гликогеновой болезни у детей.

3.4. Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей при хронических вирусных гепатитах у детей.

3.5. Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей при первичном склерозирующем холангите у детей.

3.6. Характеристика клинико-лабораторных, • инструментальных и морфологических показателей при криптогенном гепатите у детей.

3.7 Характеристика клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических показателей в зависимости от выраженности фибротических изменений при хронических болезнях печени у детей.

ГЛАВА 4. СОДЕРЖАНИЕ МАРКЕРОВ ФИБРОЗИРОВАНИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ БОЛЕЗНЯМИ

ПЕЧЕНИ.

4.1. Уровни маркеров фиброзирования в сыворотке крови у детей с хроническими болезнями печени в зависимости от выраженности фибротических изменений в печени.

4.2 Уровни сывороточных маркеров фиброзирования у детей с хроническими болезнями печени в зависимости от степени воспалительной активности патологического процесса в печени.•.

4.3. Содержание маркеров фиброзирования в сыворотке крови у детей с хроническими болезнями печени разной этиологии.

4.4 Корреляционный анализ клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических изменений с уровнями сывороточных маркеров фиброзирования у детей с хроническими болезнями печени.

4.5 Анализ чувствительности и специфичности сывороточных маркеров фиброзирования в диагностике стадии фиброза печени.

4.6. Клинические примеры.

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сывороточные маркеры фиброзирования при хронических болезнях печени у детей»

Хронические болезни печени (ХБП) относятся к одному из наиболее сложных разделов гастроэнтерологии, что связано с разнообразием этиологических факторов, тяжелой клинической симптоматикой, прогрессирующим течением и возможным формированием выраженных фибротических изменений в печени с исходом в цирроз [9, 10, 16, 18]. При декомпенсации цирроз печени (ЦП) является показанием к трансплантации органа. В связи с этим чрезвычайно важна своевременная диагностика стадии фиброзирования, что особенно актуально в педиатрической практике. В настоящее время пункционная биопсия печени (ПБП) с морфологическим исследованием биоптата, позволяющим с помощью различных полу количественных индексов (Knodell, Ishak, METAVIR, Desmet) установить степень воспалительной активности и стадию фиброзирования, остается основным методом определения выраженности склеротических изменений печеночной паренхимы [33, 51, 82, 90]. Однако при биопсии не всегда удается получить истинное представление о морфологических изменениях в печени, что в первую очередь может быть связано с получением малоипформативпого материала. Кроме того, возможны так называемые «ошибки попадания», когда биопсийная игла проходит через участки ткани с менее или, наоборот, более выраженными изменениями, чем в целом в печени [9, 10, 18, 19]. Кроме того, ПБП является инвазивным методом и не всегда безопасна для пациента, в связи с чем проводится только в специализированных учреждениях, требует специальной подготовки медицинского персонала и имеет ряд противопоказаний [7]. Следует учитывать, что в педиатрической практике ПБП проводится, как правило, однократно с целыо первичной диагностики заболевания, и оценка динамики фиброзирования в дальнейшем вызывает затруднения. Широкодоступное в клинической практике определение уровней сывоторочпых трапсаминаз не отражает тяжесть гисгопатологических изменений в печени [16, 33, 96]. Разработанная классификационная счетная шкала Bonacini, учитывающая количество тромбоцитов, международное нормализованное отклонение и соотношение АЛТ/АСТ, позволяет оцепить выраженность печеночного фиброза лишь весьма ориентировочно [38J. С помощью неинвазивных методов визуализации (ультразвуковое исследование, компьютерная и магниторезопансная томография) невозможно различить промежуточные стадии фиброза, а также не всегда удается выявить начальные признаки ЦП [14, 28]. Поэтому в настоящее время с целью усовершенствования методов диагностики активно ведется поиск неинвазивных маркеров печеночного фиброза. В последние годы у взрослых больных в основном с хроническими вирусными гепатитами интенсивно исследуются измеиения концентраций различных серологических показателей в зависимости от стадии фиброзирования печени [62, 113, 118, 145, 150]. Среди них наиболее изученными являются компоненты экстрацеллюлярного матрикса (ЭЦМ): гиалуроповая кислота (ГК) и коллаген IV типа (К IV); ферменты, участвующие в ремоделировании соединительной ткани: матриксные металлопротсипазы-2 и -9 (ММП-2, -9) и их тканевой ингибитор (ТИМП-1), а также трансформирующий фактор роста-pl (ТФР-(31) - ключевой медиатор фиброгенеза [37, 48, 49, 52, 63, 64, 71, 75, 98, 121, 123, 127, 1461. Однако в отечественной и зарубежной педиатрической практике такие исследования остаются единичными, а при некоторых нозологических формах полностью отсутствуют. Нами не было найдено публикаций по исследованию уровней серологических маркеров фиброзирования при болезни Вильсона, аутоиммунном гепатите, гликогеновой болезни, первичном склерозирующем холангите. Практически отсутствуют литературные данные об исследовании взаимосвязей между сывороточными маркерами и клинико-лабораторпыми, инструментальными и морфологическими признаками фиброзирования печени у детей.

Цель иследования: определить диагностическую значимость сывороточных маркеров фиброзирования при хронических болезнях печени у детей.

Задачи исследования:

1. Определить частоту и темпы развития цирроза печени у детей с различными хроническими формами се патологии на основе комплексного клинико-лабораторного, инструментального и морфологического обследования.

2. Выявить характер изменений клинико-лабораторных и инструментальных показателей в зависимости от морфологической стадии фиброзирования печени у детей с хроническими формами ее патологии.

3. Определить уровни сывороточных маркеров фиброзирования и выявить особенности их изменений в зависимости от стадии фиброза и степени гистологической активности у детей при хронических болезнях печени различной этиологии.

4. Установить особенности изменений сывороточных маркеров фиброзирования при различных нозологических формах хронической патологии печени у детей.

5. Разработать балльную систему оценки стадии фиброзирования с применением сывороточных маркеров при хронических болезнях печени у детей.

Научная новизна

Впервые у детей с различными, в том числе редкими, нозологическими формами хронических болезней печени показана возможность применения сывороточных маркеров (гиалуроновая кислота, коллаген IV типа, матрикспая металлопротеиназа-2, матриксная металлопротеиназа-9, тканевой ингибитор матриксных металлопротеиназ-1 и трансформирующий фактор роста-(31) для оценки динамики процессов фиброзирования печени.

Выявлены различия уровней сывороточных маркеров в зависимости от стадии фиброзирования паренхимы печени, степени гистологической активности и нозологической формы ХБП у детей.

Установлено, что при хронических болезнях у детей уже на ранних этапах повреждения происходит нарушение аптифибротической активности матриксной металлопротеиназы-2 и матриксной металлопротеиназы-9 за счет гиперэкспрессии трансформирующего фактора роста-|31 и тканевого ингибитора матриксных металл опротеиназ-1, способствующее усилению синтеза гиалуроновой кислоты и коллагена IV типа на далеко зашедших стадиях болезни.

Установлено, что связь противофибротических маркеров с клипико-лабораторными, инструментальными и морфологическими признаками фиброзирования печени у детей с хроническими болезнями печени была минимальной.

Доказано, что наиболее информативными серологическими маркерами фиброзирования являются гиалуроновая кислота, коллаген IV типа, матриксная металлопротеиназа-2 и трансформирующий фактор роста-(31.

Разработана балльная шкала оценки вероятной стадии фиброзирования, учитывающая такие показатели, как сывороточные концентрации гиалуроновой кислоты, коллагена IV типа, матриксной металлопротеииазы-2, количество тромбоцитов и значение международного нормализованного отношения, и позволяющая диагностировать цирроз печени с вероятностью до 95,5%, а его отсутствие - с вероятностью до 97,6%.

Практическая значимость

Сравнительное изучение спектра сывороточных маркеров может быть использовано для оценки динамики процессов фиброзирования у детей с хроническими болезнями печени.

Содержание гиалуроновой кислоты и коллагена IV типа в сыворотке крови возрастает по мере прогрессирования фибротических изменений и достигает максимума при циррозе печени, что позволяет рекомендовать эти показатели для диагностики тяжелого фиброза и цирроза печени.

На ранних этапах повреждения печеночной паренхимы происходит гиперэкспрессия трансформирующего фактора роста-(31 и в то же время значимое снижение содержания матриксной металлопротеиназы-2, что позволяет рекомендовать их комплексное определение в сыворотке крови у детей с хроническими болезнями печени для выявления минимальных признаков фиброза.

Сывороточные уровни матриксной металлопротсипазы-9 и тканевого ингибитора матриксных металлопротеипаз-1 не могут быть рекомендованы в качестве неипвазивных маркеров фиброзирования печени у детей с хроническими болезнями печени.

Для улучшения качества диагностики целесообразно применение разработанной балльной шкалы оценки вероятной стадии фиброзирования, которая может применяться у детей с хроническими болезнями печени при невозможности проведения пупкционпой биопсии, а также с целыо оценки динамики склеротических процессов, позволяя выявить цирроз печени с вероятностью до 95,5%, а его отсутствие - с вероятностью до 97,6%.

Апробация и внедрение результатов работы в практику

Материалы диссертации доложены и обсуждены на Научно-практической конференции и школе по инфекционной патологии (Москва, 2007), Всероссийской конференции студентов и молодых ученых «Пироговские чтения» (Москва, 2007), Четырнадцатой Российской Гастроэнтерологической Неделе, (Москва, 2008), XVI съезде Союза педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии» (Москва, 2009), IX съезде Научного общества гастроэнтерологов России (Москва, 2009), XXXV сессии ЦНИИГ (Москва,

2009), XVI Конгресса детских гастроэнтерологов России и стран СНГ «Актуальные проблемы абдоминальной патологии у детей» (Москва, 2009), Четырнадцатой Российской конференции «Гепатология сегодня» (Москва, 2009), 11-м Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург-Гастро-2009» (Санкт-Петербург, 2009), Восьмой конференции гастроэнтерологов Южного федерального округа (Ростов-на-Дону, 2009), IV конгрессе «Europaediatrics» (Москва, 2009).

Результаты работы внедрены в клиническую практику гастроэнтерологического отделения с гепатологической группой, лаборатории патофизиологии с блоком радионуклидных исследований НИИ Педиатрии Учреждения Российской академии медицинских наук Научный центр здоровья детей РАМН, отделения восстановительного лечения детей с болезнями органов пищеварительной системы Научно-исследовательского института профилактической педиатрии и восстановительного лечения Учреждения Российской академии медицинских наук Научный центр здоровья детей РАМН.

По теме диссертации опубликовано 23 научных работы, в том числе 3 статьи в журналах, рецензируемых ВАК.

Объем и струюура диссертации

Общий объем работы составляет 180 страниц машинописного текста. Диссертация состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа иллюстрирована 54 таблицами, 21 рисунком и 2 клиническими примерами. Библиографический указатель содержит 160 источников, включающих 18 отечественных и 142 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Сурков, Андрей Николаевич

выводы

1. Частота и темпы развития цирроза печени у детей зависят от нозологической формы хронической болезни печени. Наиболее часто цирроз развивается у больных с аутоиммунным гепатитом (57,9%) и болезнью Вильсона (50,0%). Темпы прогрессирования фибротических изменений паренхимы печени также наиболее высоки при аутоиммунном гепатите и у детей с болезнью Вильсона после появления клинической манифестации.

2. На основании клинической картины, показателей общего, биохимического и иммунологического анализов крови, коагулограммы и ультразвуковых изменений органов гепато-билиарпой системы не представляется возможным диагностировать промежуточные стадии фиброза печени, а также выявить минимальные фибротические изменения по сравнению с нормой.

3. Гиалуроповая кислота и коллаген IV типа являются основными маркерами процессов фиброзирования печени у детей с хроническими болезнями печени. Доказано достоверное повышение их уровней в сыворотке крови по мере прогрессирования склеротических изменений с достижением максимальных значений на стадии цирроза печени и установлена их связь со степенью гистологического индекса склероза.

4. Процессы фиброзирования у детей с хроническими болезнями печени характеризуются превалированием профибротических механизмов в виде увеличения содержания трансформирующего фактора роста-pi и тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 в сыворотке крови и снижением активности антифибротических эффектов за счет уменьшения концентрации матриксной металлопротеипазы-2 и недостаточного повышения уровня матриксной мегаллопротеиназы-9, что приводит к избыточному отложению соединительной ткани в печени с формированием цирроза.

5. Увеличение уровней гиалуроновой кислоты и коллагена IV типа в сыворотке крови при усилении воспалительной активности в печени и их связь со степенью индекса гистологической активности указывают на значение пекрозо-воспалительного процесса в выраженности фиброзирования печеночной паренхимы у детей с хроническими болезнями печени.

6. Особенности спектра серологических маркеров фиброзирования могут свидетельствовать о различных механизмах, приводящих к развитию фиброза при болезнях печени разной этиологии у детей. Для аутоиммунного гепатита характерно значительное повышение в сыворотке крови уровней основных маркеров склероза (гиалуроновой кислоты и коллагена IV типа), а при болезни Вильсона отмечаются наименьшие значения этих показателей; при гликогеновой болезни наиболее выражен просклсротический эффект тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1; при первичном склерозирующем холангите высокие значения гиалуроновой кислоты сочетаются с минимальными показателями коллагена IV типа в сыворотке крови.

7. Разработанная балльная система оценки стадии фиброзирования печени, включающая определение сывороточных концентраций гиалуроновой кислоты, коллагена IV типа, матриксной металлопротеиназы-2, количество тромбоцитов и значение международного нормализованного отношения, позволяет диагностировать цирроз печени с вероятностью до 95,5%, а его отсутствие с вероятностью до 96,7%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

У детей с хроническими болезнями печени различной этиологии при невозможности проведения пункционной биопсии печени и для оценки динамики склерозирования печеночной паренхимы целесообразно определение уровней гиалуроповой кислоты, коллагена IV типа, матриксной металлопротеииазы-2 и трансформирующего фактора роста-(31 в сыворотке крови.

Для диагностики выраженного фиброза и цирроза печени могут быть использованы сывороточные уровни гиалуроновой кислоты и коллагена IV типа. При концентрации гиалуроновой кислоты > 32,0 иг/мл, а коллагена IV типа > 249,1 нг/мл в сыворотке крови можно выявить цирроз печени с чувствительностью 100% и 77,4%, а специфичностью 100%) и 100%, соответственно. Уровни гиалуроновой кислоты > 60,6 нг/мл, а коллагена IV типа > 259,4 нг/мл позволяют разграничить выраженный фиброз и цирроз печени с чувствительностью 96,8% и 77,4%), а специфичностью 100% и 61,8%, соответственно.

Для диагностики начальных фибротических изменений в печени могут быть использованы уровни матриксной мсталлопротеиназы-2 и трансформирующего фактора роста-(31 в сыворотке крови. При концентрации матриксной металлопротсиназы-2 в сыворотке крови < 301,0 нг/mji, а трансформирующего фактора роста-|31 > 9,5 нг/мл возможно диагностировать слабый фиброз с чувствительностью 74,1% и 100%, а специфичностью 100% и 62,5%, соответственно.

Сывороточные уровни тканевого ингибитора матриксных металлопротеипаз-1 и матриксной металл опротеиназы-9 у детей с хроническими болезнями печени не могут быть рекомендованы для применения в качестве неинвазивных маркеров фиброзирования печени.

Разработанная балльная система оценки стадии фиброзирования может быть использована у детей при невозможности проведения пункционной биопсии печени, а также для оценки динамики течения фибротических процессов и позволяет диагностировать цирроз печени с дос товерностью до 95,5%, а его отсутствие — с достоверностью до 96,7%).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Сурков, Андрей Николаевич, 2009 год

1. Батурина Т. В. Цитокины и адгезивные молекулы в патогенезе первичного хронического гломерулонефрита у детей: Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. М., 2001, 27 с.

2. Зубков И. В. Морфофункциональная характеристика соединительной ткани печени в норме, патологии и в условиях регенерации // Вятский медицинский вестник. 2003. № 2 (14). С. 62-65

3. Ивкова А. Н., Федоров И. Г., Сторожаков Г. И. Роль цитокинов в развитии фиброза печени // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2006. № 1. С. 2—9

4. Кузнецова А. В., Жердева А. И., Горовенко Н. А. и др. Место и роль серологических маркеров фиброза в диагностике и лечении хронический HCV-инфекции // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2007. № 3. С. 35-39.

5. Кучеренко А.Г., Паунова С.С., Смирнов И.Е. и др. Цитокины при некоторых формах обструктивных уропатий у детей // Вопросы современной педиатрии. 2004. Т. 3. № 2. С. 82-83.

6. Логинов А.С., Аруин Л.И. Клиническая морфология печени- М.: Медицина, 1985. 240 с.

7. Маев И. В., Чарный А. М., Выочнова Е. С. и др. Биопсия печени / Под ред. И. В. Маева. М., 2002. 28 с.

8. Молдогазиева Н. Т., Терентьев А. А. Альфа-фетопротеин и факторы роста. Структурно-функциональные взаимоотношения и аналоги // Успехи биологической химии. 2006. Т. 46. С. 127-147

9. Павлов Ч. С., Золотаревский В. Б., Томкевич М. С. и др. Возможность обратимости цирроза печени (клинические и патогенетические предпосылки) // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2006. Т. 16. № 1. С. 20-29.

10. Ю.Павлов Ч.С., Золотаревский В.Б., Шульпекова Ю.О. и др. Современные методы ранней диагностики фиброза печени // Клиническая медицина: Научно-практический журнал. 2005. Т. 83. № 12. С. 58-60.

11. П.Пинцани М. Эволюция фиброза печени: от гепатита к циррозу // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2002. Т. 12. № 5. С. 4-9.

12. Сафиуллина Н.Х. Диагностическая роль коллагена IV типа и гиалуроновой кислоты в оценке степени воспаления и стадии фиброза печени у больных хроническим гепатитом С: Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. М., 2004, 23 с.

13. И.Серов В. В., Лапиш К. Морфологическая диагностика заболеваний печени. М.: Медицина, 1989. 336 с.

14. Ультразвуковая диагностика болезней печени у детей / Под ред. И. В. Дворяковского, Б. С. Каганова. М.: Династия, 2008. 96 с.

15. Чуелов С. Б., Россина А. Л., Чередниченко Т. В. и др. Сывороточные маркеры фиброза печени у детей: диагностическое и прогностическое значение // Педиатрия. 2008. Т. 87. № 6. С. 67-73

16. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей: Практич. рук.: Пер. с англ. / Под ред. 3. Г. Апросиной, Н. А. Мухина. М.: Гэотар Медицина, 1999. 864 с.

17. Эволюция представлений о фиброзе и циррозе печени (сообщение второе). Редакционная // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2005. № 2. С. 2-10.

18. Ющук Н. Д., Знойко О. О., Сафиуллина Н. X. и др. Пункционная биопсия печени и возможности неинвазивного мониторинга фиброза при хроническом вирусном гепатите С // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2002. № 1. С. 9-16.

19. Abdi W, Millan JC, Mezey E. Sampling variability on percutaneous liver biopsy. Arch Intern Med. 1979 Jun;139(6):667-9.

20. Afdhal N.H., Nunes D. Evaluation of liver fibrosis: a concise review Am J Gastroenterol. 2004 Jun;99(6): 1160-74.

21. Albini A, Melchiori A, Santi L. et al. Tumor cell invasion inhibited by TIMP-2. J Natl Cancer Inst. 1991 Jun 5;83(11):775-9.

22. Alcolado R, Arthur MJ, Iredale JP. Pathogenesis of liver fibrosis. Clin Sci (Lond). 1997 Feb;92(2):103-12.

23. Altaian DG. Practical Statistics for Medical Research. Lond.: Chapman and Hall, 1991.610 р.

24. Anthony PP, Ishak KG, Nayak NC. et al. The morphology of cirrhosis. Recommendations on definition, nomenclature, and classification by a working group sponsored by the World Health Organization. J Clin Pathol. 1978; 31: 395-414.

25. Arias M, Sauer-Lehnen S, Treptau J. et al. Adenoviral expression of a transforming growth factor-pl antisense mRNA is effective in preventing liver fibrosis in bile-duct ligated rats. BMC Gastroenterology 2003; 3: 29.

26. Armitage P, Berry G., Matthews J.N.S. Statistical Methods in Medical Research. 4th ed. Oxford: Blackwell Publishers, 2001. 817 p.

27. Aterman K. The parasinusoidal cells of the liver: a historical account. Histochem J. 1986; 18: 279-305.

28. Aube C, Oberti F, Korali N. et al. Ultrasonographic diagnosis of hepatic fibrosis or cirrhosis. J Hepatol. 1999 Mar;30(3):472-8.

29. Bataller R, Brenner DA. Liver fibrosis. J Clin Invest. 2005; 115: 209-18.

30. Bedossa P, Poynard T. An algorithm for the grading of activity in chronic hepatitis C. The METAVIR Cooperative Study Group. Hepatology. 1996 Aug;24(2):289-93.

31. Benyon RC, Arthur MJ. Extracellular matrix degradation and the role of hepatic stellate cells. Semin Liver Dis. 2001 Aug;21(3):373-84.

32. Biagini G, Ballardini G. Liver fibrosis and extracellular matrix. J Hepatol. 1989 Jan;8(l): 115-24.

33. Воекег КН, Haberkorn CI, Michels D. et al. Diagnostic potential of circulating TIMP-1 and MMP-2 as markers of liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C. Clin Chim Acta. 2002 Feb;316(1 -2):71-81.

34. Bolarin DM, Azinge EC. Biochemical markers, extracellular components in liver fibrosis and cirrhosis. Nig Q J Hosp Med. 2007 Jan-Mar; 17(1 ):42-52.

35. Bonacini M, Hadi G, Govindarajan S. et al. Utility of a discriminant score for diagnosing advanced fibrosis or cirrhosis in patients with chronic hepatitis С virus infection. Am J Gastroenterol. 1997 Aug;92(8): 1302-4.

36. Bonner JC. Regulation of PDGF and its receptors in fibrotic diseases. Cytokine Growth Factor Rev. 2004; 15: 255-73.

37. Brenner DA, Waterboer T, Choi SK. et al. New aspects of hepatic fibrosis. J Hepatol. 2000;32(1 Suppl):32-8.

38. Cadranel JF, Mathurin P. Prothrombin index decrease: a useful and reliable marker of extensive fibrosis? Eur J Gastroenterol Hepatol. 2000; 32(3): 477481.

39. Campbell JS, Hughes SD, Gilbertson DG. et al. Platelet-derived growth factor С induces liver fibrosis, steatosis, and hepatocellular carcinoma. Proc Natl Acad Sci USA. 2005; 102: 3389-94.

40. Cassiman D, Roskams T. Beauty is in the eye of the beholder: emerging concepts and pitfalls in hepatic stellate cell research. J Hepatol. 2002; 37:527-35.

41. Chen YP, Feng XR, Dai L. et al. Screening and evaluation of non-invasive diagnosis markers for compensated liver cirrhosis in patients with chronic hepatitis B. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2003 Apr;l l(4):225-7.

42. Chen YP, Feng XR, Dai L. et al. Non-invasive diagnostic screening of hepatic fibrosis in patients with chronic hepatitis B. Chin Med J (Engl). 2004 Jul;117(7):l 109-12.

43. Colloredo G, Guido M, Sonzogni A. et al. Impact of liver biopsy size on histological evaluation of chronic viral hepatitis: the smaller the sample, the milder disease. J Hepatol. 2003;39:239-244.

44. Consolo M, Amoroso A, Spandidos DA, Mazzarino MC. Matrix metalloproteinases and their inhibitors as markers of inflammation andfibrosis in chronic liver disease (Review). Int J Mol Med. 2009 Aug;24(2): 143-52.

45. Desmet VJ, Gerber M, Hoofnagle JH. et al. Classification of chronic hepatitis: diagnosis, grading and staging. Hepatology. 1994 Jun; 19(6): 151320.

46. Ding H, Chen Y, Feng X. et al. Correlation between liver fibrosis stage and serum liver fibrosis markers in patients with chronic hepatitis B. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2001 Apr;9(2):78-80.

47. Dubuisson L, Boussarie L, Bedin CA. et al. Transformation of sinusoids into capillaries in a rat model of selenium-induced nodular regenerative hyperplasia: an immunolight and immunoelectron microscopic study. Hepatology 1995; 21: 805-14.

48. Eisenberg RL. Gastrointestinal radiology: a pattern aproach. Source: Lippincott Williams & Wilkins, 2002, 1193 p.

49. Feng XH, Derynck R. Specificity and versatility in TGF-(3 signalling through Smads. Annu Rev Cell Dev Biol. 2005; 21: 659-93.

50. Friedman SL. Molecular regulation of hepatic fibrosis, an integrated cellular response to tissue injury. J Biol Chem . 2000; 275: 2247-50.

51. Friedman SL, Rockey DC, McGuire RF. et al. Isolated hepatic lipocytes and Kupffer cells from normal human liver: morphological and functional characteristics in primary culture. Hepatology 1992; 15: 234-43.

52. Friedman SL, Roll FJ. Isolation and culture of hepatic lipocytes, Kupffer cells, and sinusoidal endothelial cells by density gradient centrifiigation with Stractan. Anal Biochem. 1987; 161: 207-18.

53. Fukuzaki T, Kawata S, Imai Y. et al. Changes in serum hepatic fibrosis markers in biochemical responders to interferon therapy for chronic hepatitis C. Hepatol Res. 2000 May; 17(2): 156-166.

54. Gabrielli GB, Corrocher R. Hepatic fibrosis and its serum markers: a review. DigDis. 1991;9(5):303-16.

55. Gao CF, Gressner AM, Chen C. Potential novel biomarkers for monitoring the fibrogenic process in livers. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2008 Mar; 16(3): 173-4.

56. Garcia-Trevijano ER, Iraburu MJ, Fontana L. et al. Transforming growth factor betal induces the expression of alphal(I) procollagen mRNA by a hydrogen peroxide-C/EBPbeta-dependent mechanism in rat hepatic stellate cells. Hepatology 1999; 29: 960-70.

57. George J, Roulot D, Koteliansky VE, Bissell DM. In vivo inhibition of rat stellate cell activation by soluble transforming growth factor (3type II receptor: A potential new therapy for hepatic fibrosis. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 12719-24.

58. Geramizadeh B, Janfeshan K, Saberflroozi M. Serum hyaluronic Acid as a noninvasive marker of hepatic fibrosis in chronic hepatitis B. Saudi J Gastroenterol. 2008 Oct; 14(4): 174-7.

59. Giannini E.G, Fasoli A, Borro P. et al. Применение экспираторных проб с С-галактозой и С-аминопирином для оценки функции печени при хронических заболеваниях печени // Клиническая гастроэнтерология и гепатология. 2008. Т. 1. № 2. С. 110-116.

60. Grenard Р, Blanquier В, Richard-Blum SR. Urinary excretion of the collagen cross-link pyridinoline increases during liver fibrogenesisio J. Hepatol. 1997;26:1356-1362.

61. Gressner AM. Perisinusoidal lipocytes and fibrogenesis. Gut 1994; 35: 1331-3.

62. Gressner AM, Gao CF, Gressner OA. Non-invasive biomarkcrs for monitoring the fibrogenic process in liver: a short survey. World J Gastroenterol. 2009 May 28;15(20):2433-40.

63. Gressner AM, Weiskirchen R. Modern parthogenetic concepts of liver fibrosis suggest stellate cells and TGF-(3 as major players and therapeutic targets. J Cell Mol Med. 2006;10(l):76-99.

64. Gressner AM, Weiskirchen R, Breitkopf K, Dooley S. Roles of TGF-p in hepatic fibrosis. Front Biosci. 2002; 7: d793-807.

65. Gressner OA, Gressner AM. Connective tissue growth factor: a fibrogenic master switch in fibrotic liver diseases. Liver Int. 2008 Sep;28(8): 1065-79. Review.

66. Gressner OA, Weiskirchen R, Gressner AM. Biomarkers of liver fibrosis: clinical translation of molecular pathogenesis or based on liver-dependent malfunction tests. Clin Chim Acta. 2007 Jun;381(2): 107-13.

67. Guha IN, Rosenberg WM. Noninvasive assessment of liver fibrosis: serum markers, imaging, and other modalities. Clin. Liver Dis. 2008 Nov; 12(4):883-900.

68. Hartroft WS, Ridout JH. Pathogenesis of the cirrhosis produced by choline deficiency; escape of lipid from fatty hepatic cysts into the biliary and vascular systems.Am J Pathol. 1951; 27: 951-89.

69. Hazelbag S, Gorter A, Kenter GG. et al. Transforming growth factor-betal induces tumor stroma and reduces tumor infiltrate in cervical cancer. Iium Pathol. 2002 Dec;33(12):l 193-9.

70. Jayant A, Talwarkar, David M. et al. Непрямая эластография печени с помощью ультразвука в диагностике фиброза: систематический обзор и метаанализ // Клиническая гастроэнтерология и гепатология. 2008. Т. 1. № 2. С. 76-83.

71. Junker U, Haufe CC, Nuslce K. et al. Elevated plasma TGF-betal in renal diseases: cause or consequence? Cytokine. 2000 Jul; 12(7): 1084-91.

72. Kanzler S, Baumann M, Schirmacher P. et al. Prediction of progressive liver fibrosis in hepatitis С infection by serum and tissue levels of transforming growth factor-beta. J Viral Hepat. 2001 Nov;8(6):430-7.

73. Kleiner DE, Stetler-Stevenson WG. Matrix metalloproteinases and metastasis. Cancer Chemother Pharmacol. 1999;43 Suppl:S42-51.

74. Knittel T, Kobold D, Saile B. et al. Rat liver myofibroblasts and hepatic stellate cells: different cell populations of the fibroblast lineage with fibrogenic potential. Gastoenterology 1999; 117: 1205-21.

75. Knodell RG, Ishak KG, Black WC. et al. Formulation and application of a numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis. Hepatology. 1981 Sep-Oct;l(5):431-5.

76. Kugler A. Matrix metalloproteinases and their inhibitors. Anticancer Res. 1999 Mar-Apr; 19(2C): 1589-92.

77. Lebensztejn DM., Skiba E, Sobaniec-Lotowska ME. et al. Matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in children with chronic hepatitis В treated with lamivudine. Adv Med Sci. 2007;52:114-9.

78. Lebensztejn DM., Sobaniec-Lotowska ME., Kaczmarski M. et al. Serum concentration of transforming growth factor (TGF)-beta 1 does not predictadvanced liver fibrosis in children with chronic hepatitis B. Hepatogastroenterology. 2004;51(55): 229-233.

79. Lebrin F, Deckers M, Bertolino P, ten Dijke P. TGF-(3 receptor function in the endothelium. Cardiovasc Res. 2005; 65: 599-608.

80. Lee JKT., Sagel SS., Stanley RJ. et al. Computed body tomography with MRI correlation. Source: Lippincott Williams & Wilkins, 2005, 2050 p.

81. Li ZX, He Y, Wu J. et al. Noninvasive evaluation of hepatic fibrosis in children with infant hepatitis syndrome. World J Gastroenterol. 2006 Nov 28;12(44):7155-60.

82. Lieber CS, Weiss DG, Paronetto F. Value of fibrosis markers for staging liver fibrosis in patients with precirrhotic alcoholic liver disease. Alcohol Clin Exp Res. 2008 Jun;32(6):1031-9.

83. Liotta LA, Tryggvason K, Garbisa S. et al. Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen. Nature. 1980 Mar 6;284(5751):67-8.

84. Liu C, Hsu S, Lin J. et al. Р1еинвазивпая диагностика фиброза печени при хроническом гепатите С с помощью допплерографии по индексу пульсации селезеночной артерии // Клиническая гастроэнтерология и гепатология. 2008. Т. 1. № 2. С. 101-109.

85. Liu J, Wang JY, Lu Y. Serum fibrosis markers in diagnosing liver fibrosis. Zhonghua Nei Ke Za Zhi. 2006 Jun;45(6):475-7.

86. Lu LG, Zeng MD. Evaluation of noninvasive diagnoses of hepatic fibrosis. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2008 Mar; 16(3): 165-8.

87. Magness ST, Bataller R, Yang L, Brenner DA. A dual reporter gene transgenic mouse demonstrates heterogeneity in hepatic fibrogenic cell populations. Hepatology 2004; 40: 1151-9.

88. Maharaj B, Bhoora IG. Complications associated with percutaneous needle biopsy of the liver when one, two, three specimens are taken. Postgrad Med J. 1992 Dec;68(806):964-7.

89. Marelc B, Kajdaniuk D, Janczewska-Kazek E. et al. Serum aminoterminal peptide of type III procollagen (PIIINP) and transforming growth factor-beta 1 (TGF-betal) levels in patients with chronic hepatitis В and C. Pol Arch Med Wewn. 2003;109(6):603-608.

90. Mastroianni CM, Liuzzi GM, D'Ettorre G. et al. Matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1 in plasma of patients co-infected with IiCV and HIV. HIV Clin Trials. 2002 Jul-Aug;3(4):310-5.

91. McDougal WS, Kerr WS Jr. Obstructive uropathy. Curr Opin Urol. 1999 Mar;9(2): 107-9;

92. McHutchison JG, Blatt LM., de Medina M. et al. Measurment of serum hyaluronic acid in patients with chronic hepatitis С and its relationship to liver histology. Consensus Interferon Study Group. J. Gastroenterol. Hepatol. 2000; 15: 945-951.

93. Mergo PJ., Ros PR. Imaging of diffuse liver disease. Radiol. Clin. North. Am. 1998 Mar; 36(2): 365-75.

94. Mervis В, Kottler RE. Computed tomography of fatty infiltration of the liver. S AfrMed J. 1983 Aug 20; 64(8): 279-81.

95. Montazeri G, Estakhri A, Mohamadnejad M. et al. Serum hyaluronate as a non-invasive marker of hepatic fibrosis and inflammation in HBeAg-negative chronic hepatitis В. BMC Gastroenterol. 2005 Oct 12;5:32.

96. Murawald Y, Ikuta Y, Okamoto K. et al. Diagnostic value of serum markers of connective tissue turnover for predicting histological staging and grading in patients with chronic hepatitis C. J Gastroenterol. 2001 Jun;36(6):399-406.

97. Murawaki Y, Nishimura Y, Ikuta Y. et al. Plasma transforming growth factor-beta 1 concentrations in patients with chronic viral hepatitis. J Gastroenterol Hepatol. 1998 Jul;13(7):680-4.

98. Nakamura T, Sakata R, Ueno T. et al. Inhibition of transforming growth factor beta, prevents progression of liver fibrosis and enhances hepatocyte regeneration in dimethylnitrosamine-treated rats. Hepatology 2000;32:247-55.

99. Naveau S, Gaude G, Asnacios A. et al. Diagnostic and prognostic values of noninvasive biomarkers of fibrosis in patients with alcoholic liver disease. Hepatology. 2009 Jan;49(l):97-105.

100. Neuman MG, Benhamou JP, Malkiewicz IM. et al. Kinetics of serum cytokines reflect changes in the severity of chronic hepatitis С presenting minimal fibrosis. J Viral Hepat. 2002 Mar;9(2): 134-40.

101. Nobili V, Parkes J, Bottazzo G. et al. Performance of ELF Serum Markers in Predicting Fibrosis Stage in Pediatric Non-Alcoholic Fatty Liver Disease. Gastroenterology. 2009 Jan;136(l):160-7.

102. Oberti F, Valsesia E, Pilette C. et al. Noninvasive diagnosis of hepatic fibrosis or cirrhosis. Gastroenterology. 1997 Nov;l 13(5):1609-16.

103. Oh S, Afdhal NH. Hepatic fibrosis: are any of the serum markers useful? Cuit Gastroenterol Rep. 2001 Feb;3(l):12-8.

104. Okuda K, Musha II, Nakaijma Y., et al. Frequency of intrahepatic arteriovenous fistula as a sequelae to percutaneous needle puncture of the liver. Gastroenterology. 1978;74: 1204-1207.

105. Olga OZ, Nikolai DY. Invasive and non-invasive monitoring of hepatitis С virus-induced liver fibrosis: alternatives or complements? Curr Pharm Biotechnol. 2003 Jun;4(3): 195-209.

106. Parola M, Robino G. Oxidative stress-related molecules and liver fibrosis. J Hepatol. 2001; 35: 297-306.

107. Perrault J, McGill DB., Ott BJ. et al. Liver biopsy: complications in 1000 inpatients and outpatients. Gastroenterology. 1978 Jan;74(l): 103-6

108. Piccininio F, Sagnelli E, Pasquale G. et al. Complications following percutaneous liver biopsy. J Hepatol. 1986;2:165-173.

109. Plebani M, Burlina A. Biochemical markers of hepatic fibrosis. Clin Biochem. 1991 Jun;24(3):219-39.

110. Pocock SJ. Clinical Trials: A Practical Approach. Chichester: Wiley, 1983.266 p.

111. Poli G. Pathogenesis of liver fibrosis: role of oxidative stress. Mol Aspects Med. 2000; 21: 49-98.

112. Poynard T, Morra R, Ingiliz P. et al. Biomarkers of liver fibrosis. Adv ClinChem. 2008;46(1): 131-160.

113. Prokop M, Galanski M, van der Molen A. J. et al. Spiral and multislice computed tomography of the body. Source: Thieme, 2003, 1090 p.

114. Qi Z, Atsuchi N, Ooshima A. et al. Blockade of type beta transforming growth factor signaling prevents liver fibrosis and dysfunction in the rat. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 2345-9.

115. Reeves HL, Friedman SL. Activation of hepatic stellate cells a key issue in liver fibrosis. Front Biosci. 2002; 7: d808-26.

116. Regev A, Berho M, Jeffers LJ. et al. Sampling error and intraobserver variation in liver biopsy in patients with chronic HCV infection. A m J Gastroenterol. 2002 Oct;97(10):2614-8.

117. Reif S, Somech R, Brazovski E, Reich R. et al. Matrix metalloproteinases 2 and 9 are markers of inflammation but not of the degree of fibrosis in chronic hepatitis C. Digestion. 2005;71(2): 124-30. Epub 2005 Mar 21.

118. Rockey DC. Hepatic blood flow regulation by stellate cells in normal and injured liver. Semin Liver Dis. 2001; 21: 337-49.

119. Rockey D. The cellular pathogenesis of portal hypertension: stellate cell contractility, endothelin, and nitric oxide. Hcpatology 1997; 25: 2-5.

120. Roderfeld M, Weiskirchen R, Wagner S. et al. Inhibition of hepatic fibrogenesis by matrix metalloproteinase-9 mutants in mice. FASEB J. 2006 Mar;20(3):444-54.

121. Salo T, Liotta LA, Tryggvason K. Purification and characterization of a murine basement membrane collagen-degrading enzyme secreted by metastatic tumor cells. J Biol Chem. 1983 Mar 10;258(5):3058-63.

122. Sanderson N, Factor V, Nagy P. et al. Hepatic expression of mature transforming growth factor betal in transgenic mice results in multiple tissue lesions. Proc Natl Acad Sci USA. 1995; 92: 2572-6.

123. Shek FW, Benyon RC. How can transforming growth factor beta be targeted usefully to combat liver fibrosis? Eur J Gastroenterol Hepatol. 2004 Feb; 16(2): 123-6.

124. Sheriff S, Cammel G, Carey WD. et al. The role of liver biopsy in chronic hepatitis C. Hepatology. 2001;33(1):196-200.

125. Siegel MJ, Babyn PS. Pediatric body CT. Source: Lippincott Williams & Wilkins, 2007, 480 p.

126. Stauber RE, Lackner C. Noninvasive diagnosis of hepatic fibrosis in chronic hepatitis C. World J Gastroenterol. 2007 Aug 28;13(32):4287-94.

127. Tatsumi C, Kudo M, Ueshima K. et al. Noninvasive evaluation of hepatic fibrosis using serum fibrotic markers, transient cystography (FibroScan) and real-time tissue elastography. Intervirology. 2008;51 Suppl 1:27-33. Epub 2008 Jun 10.

128. Uemura M, Swenson ES, Ga9a MDA. et al. Smad2 and Smad3 play different roles in rat hepatic stellate cell function and alpha-smooth muscle actin organization. Mol Biol Cell 2005; 16: 4214-24.

129. Verbaan H, Bondeson L, Eriksson S. Non-invasive assessment of inflammatory activity and fibrosis (grade and stage) in chronic hepatitis С infection. Scand J Gastroenterol. 1997 May;32(5):494-9.

130. Walsh KM, Fletcher A, MacSween RN, Morris AJ. Basement membrane peptides as markers of liver disease in chronic hepatitis C. J Hepatol. 2000 Feb;32(2):325-30.

131. Wang T, Wang B, Liu X. Correlation of serum markers with fibrosis staging in chronic viral hepatitis. Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi. 1998 Jun;27(3): 185-90.

132. Werb Z. ECM and cell surface proteolysis: regulating cellular ecology. Cell. 1997 Nov 14;91(4):439-42.

133. Whitman M, Raftery L. TGFbeta signaling at the summit. Development. 2005 0ct;132(19):4205-10.

134. Xu HG, Fang JP, Huang SL et al. Diagnostic values of serum levels of HA, PC III, С IV and LN to the liver fibrosis in children with beta-thalassemia major. Zhonghua Er Ke Za Zhi. 2003 Aug;41(8):603-6.

135. Yang С, Zeisberg M, Mosterman В. et al. Liver fibrosis: insights into migration of hepatic stellate cells in response to extracellular matrix and growth factors. Gastroenterology. 2003 Jan;124(l): 147-59.

136. Yin M, Talwalkar JA, Glaser KJ. et al. Оценка выраженности фиброза печепи с помощью магнитно-резонансной эластографии // Клин, гастроэнтерол. и гепатол 2008. - Т. 1, № 2. - С. 92-100.

137. Zeisberg М, Maeshima Y, Mosterman В, Kalluri R. Renal fibrosis. Extracellular matrix microenvironment regulates migratory behavior of activated tubular epithelial cells. Am J Pathol. 2002 Jun;160(6):2001-8.

138. Zhang YX, Wu WJ, Zhang YZ. et al. Noninvasive assessment of liver fibrosis with combined serum aminotransferase/platelet ratio index and hyaluronic acid in patients with chronic hepatitis B. World J Gastroenterol. 2008 Dec 14;14(46):7117-21.

139. Zheng M, Cai WM, Weng HL, Liu RH. ROC curves in evaluation of serum fibrosis indices for hepatic fibrosis. World J Gastroenterol. 2002 Dec;8(6): 1073-6.

140. Zhou X, Hovell CJ, Pawley S. et al. Expression of matrix metalloproteinase-2 and -14 persists during early resolution of experimental liver fibrosis and might contribute to fibrolysis. Liver Int. 2004 0ct;24(5):492-501.