Связь рецепторного статуса клеток инфильтративной карциномы молочной железы с уровнем пролиферативной активности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Бриллиант, Александр Александрович

• Бриллиант, Александр Александрович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Бриллиант, Александр Александрович

ВВЕДЕНИЕ...................................................................................4

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ........................11

1.1. Состояние пролиферативных процессов в ткани опухоли при раке молочной железы.........................................................................................11

1.1.1. Ю-67 в нормальной молочной железе..........................................12

1.1.2. Ю-67 и другие биологические маркеры при раке молочной железы.... 12

1.2. Состояние рецепторного аппарата клеток эпителия молочной железы.................................................................................13

1.2.1. Изменение рецепторного аппарата клеток эпителия при развитии молочной железы...................................................................13

1.2.2. Изменение рецепторного аппарата клеток эпителия при развитии опухолей молочной железы.......................................................19

1.2.3. Гетерогенность рака молочной железы........................................23

1.3. Неоангиогенез при развитии опухолевых клеток карциномы.............28

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.....................31

2.1. Материалы исследования.........................................................31

2.2. Методы исследования.............................................................32

ГЛАВА 3. ХАРАКТЕРИСТИКА КЛЕТОК ИНФИЛЬТРАТИВНОЙ

КАРЦИНОМЫ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ.............................................38

3.1. Иммуногистохимическая характеристика клеток инфильтративной карциномы молочной железы...................................................38

3.1.1. Изучение уровня экспрессии рецепторов к эстрогену......................38

3.1.2. Изучение уровня экспрессии рецепторов к прогестерону.................44

3.1.3. Изучение уровня экспрессии рецепторов к НЕК-2/пеи.....................49

3.2. Изучение степени васкуляризации ткани карциномы молочной железы.................................................................................56

3.3. Состояние пролиферативных процессов в опухоли........................63

3.3.1. Исследование рецепторного статуса клеток опухоли с разным уровнем пролиферативной активности....................................................68

3.3.2. Исследование ангиогенных процессов в группах пролиферативной активности инфильтративной карциномы молочной железы............74

ЗАКЛЮЧЕНИЕ............................................................................77

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ................................................................88

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА................................112

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Связь рецепторного статуса клеток инфильтративной карциномы молочной железы с уровнем пролиферативной активности»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования

Рак молочной железы считается одной из наиболее распространенных опухолей, являющейся ведущей причиной смерти от рака среди женщин в экономически развитых странах (Семиглазов В.Ф. и соавт., 2003; Faria G. et al, 2012). В структуре онкологической заболеваемости отмечается тенденция к увеличению доли рака молочной железы. В России данная патология занимает I место среди всех онкологических заболеваний женского населения с выявлением около 45 тысяч новых случаев в год (Семиглазов В.Ф. и соавт., 2003; Gruver A.M. et al, 2011).

Инвазивный рак молочной железы представляет собой злокачественную опухоль, часть которой или вся прорастает базальную мембрану эпителиальной выстилки протока или дольки. Прогноз рака молочной железы зависит от двух групп параметров. Первые из них время зависимые показатели, определяющие стадию рака: размер опухоли, наличие регионарных или отдаленных метастазов. Вторая группа определяет «внутренние» биологические особенности опухоли: гистологический тип, степень злокачественности, экспрессию рецепторов гормонов, факторов роста (HER-2) и другие молекулярные характеристики опухоли (Бондарева В.А., Шпонька И.С., 2007; Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В., 2010; Невожай В.И., Мюллер Е.С., 2007).

Процессы клеточного деления, дифференцировки и апоптоза происходят как в нормальных, так и в опухолевых клетках. Последние отличаются от нормальных тем, что происходящие в них процессы являются неконтролируемыми. Опухолевые клетки содержат набор молекул, необходимых для выживания, пролиферации, дифференцировки, апоптоза и экспрессии специфических функций. Неспособность регулировать эти процессы приводит к изменению фенотипа клеток и развитию опухоли, при

этом изменяется структура рецепторного аппарата клеток (Andreeff М., Goodrich D.W., 2003).

Именно рецепторный аппарат клеток играет важную биологическую роль в происхождении опухолей. В большинстве опухолевых клеток экспрессируются рецепторы родительских клеточных линий, отвечающих за их физиологические функции (Riggs B.L., Hartmann L.C., 2003). Например, рецепторы эстрогена играют важную роль в функционировании молочных желез. Через соответствующие рецепторы, эстроген стимулирует рост органа, регуляцию физиологических функций клеток.

Многие рецепторы принимают участие в процессах канцерогенеза и роста опухоли. Считается, что экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона в клетках влияет на развитие карциномы молочной железы (Clemons М., Goss Р., 2001).

Во многих карциномах уровень экспрессии рецепторов сопоставим с таковым в нормальных (интактных) тканях. По всей вероятности, регуляция опухолевого роста в таких случаях происходит при участии других факторов, влияющих на клеточный рост и пролиферацию (Dickson R.B., Stancel G.M., 2000). Известно, что для некоторых опухолевых клеток характерным свойством является наличие гиперэкспрессии рецепторов HER-2, приводящей к стимуляции аберрантного сигнального пути, ответственного за пролиферацию клеток и развитие карциномы молочной железы (Baselga J., Cortes J., 2005).

В настоящее время используется ряд клеточных маркеров для определения терапии случаев карцином молочной железы положительных или отрицательных по Estrogen receptor и Progesterone receptor (Семиглазов В.Ф., 2003; Троценко И.Д. и соавт., 2012; Радюкова И.М. и соавт., 2012). Одним из таких маркеров является ядерный белок KI-67, отражающий клеточную пролиферацию. Белок был тщательно изучен и легко определяется в настоящее время. KI-67 впервые был обнаружен Гердесом и

соавторами в 1991г. как ядерный негистонный белок. В 1993г. была найдена последовательность генов, кодирующих данный белок. Было показано, что микроинъекции антител, направленных против мышиного KI-67 приводят к снижению скорости деления клеток (Blau Н.М., Banfi А., 2001). Аналогичные результаты были получены введением человеческих антител белка KI-67. Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что данный белок играет существенную роль в клеточной пролиферации (Scholzen T. et al, 1997).

Известно, что экспрессия KI-67 меняется в пределах всего клеточного цикла. Уровень белка считается низким в течении Gl и ранней S фазе, и возрастает до максимума к митозу. В анафазе и телофазе экспрессия KI-67 значительно снижается. Это доказывает тот факт, что белок является точным маркером роста клеточной фракции (Радюкова И.М. и соавт., 2012).

Считается, что степень пролиферации ткани карциномы молочной железы наряду с определением экспрессии стероидных рецепторов имеет как прогностическое, так и предсказывающее значение. Имеются данные, свидетельствующие о том, что высокие показатели различных маркеров опухолевой пролиферации (высокий пролиферативный индекс, III степень гистологической злокачественности, уровень экспрессии KI-67 равен 20%) ассоциируются с большей вероятностью полного регресса опухоли в ответ на химиотерапию (Ernster V.L. et al, 1996; Penault-Llorca F. et al, 2003). Во многих исследованиях высокая степень гистологической злокачественности ассоциировалась с большей частотой полных морфологических регрессов после различных режимов неоадъювантной химиотерапии (Amat S. et al, 2002; Penault-Llorca F. et al, 2003; Urruticoechea A. et al, 2005; Вторушин C.B. и соавт., 2007). Было выявлено, что случаи с высоким индексом KI-67 дают полный ответ на применение неадъювантной терапии (Lopez F., 1991).

Другие исследования показали, что существует корреляция между количеством клеток, экспрессирующих KI-67, и степенью злокачественности опухоли, а также митотическим индексом. Penault-Llorca установил, что

пациенты, опухоли которых экспрессируют KI-67 более чем в 50% клеток, имеют высокий риск развития рецидива заболевания (Penault-Llorca F. et al, 2003).

Несмотря на большое количество исследований, проведенных в области изучения KI-67, на сегодняшний день существует проблема стандартизации методик и методов оценки, необходимых для интеграции биомаркера в длительное прогнозирование исхода заболевания и эффективности химиотерапии.

Считается, что рецепторный аппарат опухолевых клеток состоит из нескольких частей: лиганда (небольшие молекулы, синтезируемые в тканях организма или пептиды, выделяемые эндокриноцитами) (Moran С.А., SusterS., 2007), и самих рецепторов, находящихся на мембране клеток (рецепторы HER-2/neu) либо в клеточном ядре (Estrogen receptor, Progesterone receptor, KI-67). На сегодняшний день механизмы взаимодействия лиганда и рецепторов мало изучены, также остаются не выясненными закономерности инициализации и воздействия на клетку сигнальных путей, образующихся в результате активации лигандами соответствующих клеточных рецепторов. Еще больше вопросов возникает при изучении связи рецепторного статуса опухоли с уровнем ее пролиферативной активности.

Цель исследования

Изучить особенности рецепторного статуса клеток инфильтративной карциномы молочной железы с разным уровнем пролиферативной активности.

Задачи исследования

1. Изучить рецепторный аппарат клеток инфильтративной карциномы молочной железы.

2. Дать характеристику состояния пролиферативных процессов в ткани инфильтративной карциномы молочной железы.

3. Изучить рецепторный статус клеток опухоли с разным уровнем пролиферативной активности.

4. Оценить степень васкуляризации ткани карциномы молочной железы.

5. Исследовать ангиогенные процессы в группах пролиферативной активности инфильтративной карциномы.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Состояние пролиферативных процессов в ткани инфильтративной карциномы молочной железы связано с особенностями рецепторного аппарата клеток опухоли.

2. При увеличении экспрессии Estrogen receptor, в клетках опухоли, экспрессирующих HER-2/neu обнаружен высокий уровень пролиферативной активности клеток, реализуемого посредством сигнального пути RAS-Raf-MAPK.

3. При отсутствии экспрессии рецепторов ER, PR и HER-2/neu на клетках карциномы молочной железы выяснилось, что большинство случаев относятся к группе с высокой степенью пролиферации.

4. В ткани инфильтративной карциномы молочной железы количество созревающих капилляров в 5 раз больше, чем в интактной ткани молочной железы, при этом их доля не меняется с ростом пролиферативных процессов в опухоли. Доля зрелых капилляров снижается при увеличении пролиферативной активности опухоли.

Научная новизна исследования

Впервые проведено исследование подтипов инфильтративных карцином молочной железы по группам пролиферации с наличием и отсутствием экспрессии стероидных рецепторов и HER-2 /пей.

На основании полученных данных, выяснилось, что в группе карцином с наличием экспрессии Estrogen receptor и отсутствием экспрессии Progesterone receptor и HER-2 /пей, при увеличении уровня экспрессии Estrogen receptor достоверно растет количество опухолей с высокой пролиферативной

активностью. Было показано, что большинство карцином молочной железы с наличием экспрессии стероидных и отсутствием экспрессии НЕИ-2 /пей относятся к группе с низкой степенью пролиферации.

При исследовании ангиогенных процессов в опухоли установлено, что на капиллярах исследуемой опухоли количество рецепторов к фактору роста эндотелия сосудов (УЕОРЯ-З) больше, чем белка фактора роста эндотелия сосудов УЕвЕ. Показано, что с увеличением пролиферативных процессов в опухоли уменьшается площадь зрелых форм капилляров.

Научно - практическая значимость работы

Полученные результаты существенно дополняют имеющиеся данные по характеристике пролиферативных процессов в инфильтративной карциноме молочной железы. Обнаружены не исследованные ранее особенности рецепторного аппарата клеток опухоли в группах пролиферативной активности. Исследованы рецепторы клеток эндотелия капилляров инфильтративной карциномы. Результаты исследований могут быть использованы для углубления понимания процессов, происходящих при развитии опухоли.

Апробация работы

Работа апробирована на заседаниях кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Екатеринбург, 2008, 2009); X Конгрессе Международной Ассоциации морфологов (Ярославль, 2010); V Ежегодной конференции патоморфологов по диагностике рака молочной железы (Каир, Египет, 2010), Всероссийской научной конференции «Регенеративная биология и медицина» (Москва,

2011), XI Конгрессе Международной Ассоциации морфологов (Самара,

2012), Всероссийской научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Морфология человека в норме и при патологии»

(Уфа, 2012), VII Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2013).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 41 научная работа, в том числе 15 публикаций в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Внедрение в практику Результаты диссертационной работы используются при научных исследованиях в лаборатории патоморфологии ГБУЗСО Институт медицинских клеточных технологий, г. Екатеринбург, в учебном процессе кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии, а также кафедры онкологии и медицинской радиологии ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, ГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, в работе патоморфологической и цитологической лабораторий ГБУЗСО «Свердловский областной онкологический диспансер». Получена приоритетная справка на патент «Схема связи рецепторного статуса клеток инфильтративной карциномы молочной железы и состояния пролиферативных процессов» №2013503298/49 от 28 августа 2013 года.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ 1.1. Состояние иролиферативных процессов в ткани опухоли при раке

молочной железы

Пролиферация клеток, утративших способность дифференцироваться в клетки того или иного органа, ведет к возникновению опухолей. Одни органы и ткани обладают очень высокой способностью к пролиферации клеток (соединительная, кроветворная, костная ткань, печень, эпидермис, эпителий слизистых оболочек), другие — более умеренной (скелетные мышцы, поджелудочная железа, слюнные железы и др.), третьи — совсем или почти лишены этой способности (центральная нервная система, миокард). В последних длительное функциональное напряжение, а также репарация повреждения после действия патогенных факторов обеспечивается пролиферацией внутриклеточных структур в сохранившихся клетках, которые при этом увеличиваются в объеме, подвергаются гипертрофии (Давыдовский И.В., 1969; Саркисов Д.С., 1987; Чеснокова Н.П. и соавт., 2008).

Пролиферация клеток играет важную роль при диагностике заболеваний молочной железы. Так, фиброзно-кистозная мастопатия в зависимости от уровня пролиферации может переходить в рак молочной железы. Проф. Слонимская Е.М. (НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, г.Томск) выделяет три уровня выраженности пролиферативных процессов в молочной железе при мастопатии (1-без пролиферации, 2-умеренная пролиферация, 3- выраженная пролиферация). По мнению ученой, при пролиферативной мастопатии в 20% случаев наблюдается опухолевая трансформация (Чеснокова Н.П. и соавт., 2012; Любченко Л.К. и соавт., 2007).

Степень злокачественности и дифференцировки рака молочной железы во многом определяется пролиферативной активностью опухолевых клеток, однако, традиционный подсчет митотической активности не отражает пролиферативный потенциал опухоли, так как собственно митоз занимает

несколько часов (что может визуализироваться при рутинном исследовании), а подготовка к нему - около 24 часов, в связи с чем изучение маркера пролиферации Ki-67, экспрессирующегося во всех клетках, вышедших из G0-фазы, представляется актуальным и позволяет определить именно "скрытый" пролиферативный потенциал данной опухоли и судить о степени злокачественности (Бондарева В.А., Шпонька И.С., 2007).

Многие исследования посвящались взаимосвязи между Ki-67 и другими известными маркерами пролиферации. В большинстве случаев была найдена положительная корреляционная связь, что делает KI-67 рекомендуемым маркером пролиферирующих клеток молочной железы.

1.1.1. Ki-67 в нормальной молочной железе

В здоровой ткани молочной железы, так же как и в нормальном эпителии клеток фиброаденомы значение индекса пролиферации крайне низкое (<3% клеток) (Clarke C.L., Sutherland R.L., 1990; Harari D., Yarden Y., 2000; (Costello P. et al, 1995). Одной из интересных особенностей также является отсутствие пролиферирующих клеток в тканях, экспрессирующих рецепторы эстрогена (Шашова Е.Е., Глущенко С.А., 2007). Эта особенность теряется при раке молочной железы, где маркеры KI-67 экспрессируют значительное число клеток. В опухолевой ткани часто можно наблюдать и переходные варианты, в которых встречается экспрессия стероидных рецепторов вместе с высоким индексом пролиферации (KI-67) (Clarke C.L., Sutherland R.L., 2000; Летягин В.П. и соавт., 2006; Должиков А.А.и соавт., 2008).

1.1.2. Ki-67 и другие биологические маркеры при раке молочной железы

Апоптоз, или запрограммированная смерть клетки, призван компенсировать рост и распространение опухоли. Этот процесс положительно коррелируют с экспрессией KI-67 (Kill I.R., 1996). Была

разработана теория, того что именно апоптоз и KI-67 могут отражать рост опухоли.

Несмотря на то, что определение корреляции не может точно отражать динамику роста опухоли, этот фактор может быть использован как ранний маркер ответа на лечение в первичной терапии рака молочной железы (Bruno S., Darzynkiewicz Z., 1992; Clarke R.B. et al, 1997; Harper-Wynne С., 2002).

Экспрессия супрессора апоптоза белка Вс1-2 имеет обратную корреляционную связь с уровнем Ki-67. Многие карциномы молочной железы несут на клетках гиперэкспрессированый мутированный онкоген р53. Этот признак также напрямую коррелирует с пролиферативной активностью таких карцином и соответственно с индексом KI-67 (Bosari S. et al, 1992; Середа E.H., 2009).

Из наиболее часто используемых патологических особенностей рака молочной железы, вероятно, наиболее значимой является связь гистологического класса опухоли с пролиферацией (Graham J.D., Clarke C.L., 1997; Lipponen P., 1999; Makris A. et al, 1997; Molino A. et al, 1997; Weikel W. et al, 1991). Известно, что существенным прогностическим фактором является состояние лимфатических узлов. Маркер Ki-67 активно изучается в последнее время, как показатель участия сторожевых узлов в процессе опухолевого генеза. В исследованиях с более чем 200 случаев, многие свидетельствуют о наличии такой связи (Lipponen Р., 1999; Makris A. et al, 1997).

1.2. Состояние рецепторного аппарата клеток эпителия молочной

железы

1.2.1. Изменение рецепторного аппарата клеток эпителия при развитии

молочной железы

Регуляция нормального роста и развития молочной железы происходит под влиянием комплексного взаимодействия между различными гормонами.

Тканевый гомеостаз в молочной железе обеспечивается в результате равновесия между пролиферацией, дифференциацией и апоптозом. Апоптоз, или спонтанная запрограммированная гибель клеток играет главную роль в росте и регуляции как нормальной, так и опухолевой ткани (Ellis Р.А., 1996). Регуляция апоптоза в молочной железе сложна и протекает при участии ряда различных белков, но известно, что фактор bcl-2 играет в этом особую роль. Было показано, что он предотвращает вход клеток в апоптоз и удлиняет время их выживания. При этом наблюдалось циклическое колебание экспрессии bcl-2 в клетках эпителия молочной железы, причем экспрессия достигала максимума в конце фолликулиновой фазы и уменьшалась в лютеиновой фазе. Это циклическое колебание экспрессии bcl-2, которое коррелирует с менструальным циклом, свидетельствует о ее гормональной регуляции (Russo J., Russo I.H., 1996).

Жизненный цикл клеток эпителия молочных желез до конца не уточнен. На фоне таких физиологических событий, как менструальный цикл, беременность, лактация и менопауза, молочные железы подвергаются влиянию половых гормонов с учетом вариации секреции. В репродуктивном возрасте у нерожавших женщин эпителий молочной железы подвергается циклической клеточной пролиферации и апоптозу, которые являются вторичными по отношению к циклической функции яичников. В фолликулиновой фазе менструального цикла происходит клеточная пролиферация в конечной протоково-дольчатой структуре. Эстроген играет основную роль в стимуляции дольчато-альвеолярного развития и дифференциации (Ефремов Г. Д., Франк Г. А., 2010).

На сегодняшний день известно три механизма пролиферативного действия эстрогенов на молочную железу. К ним относятся прямой механизм, в результате которого происходит стимуляция клеточной пролиферации за счет взаимодействия комплекса эстроген - эстрогеновый рецептор с ядерной ДНК; непрямой механизм, при котором эстроген

стимулирует синтез факторов роста, участвующих в сигнальных путях, ответственных за пролиферацию; а также механизм, обеспечивающий стимуляцию клеточного роста за счет отрицательной обратной связи, при которой эстроген блокирует эффекты ингибирующих факторов роста.

В реализации второго механизма (опосредованно, через активацию факторов роста), при котором происходит стимуляция пролиферации и дифференцировки эпителиальных клеток молочной железы, а также ингибирование апоптоза, принимают участие такие факторы роста и протоонкогены, как эпидермальный фактор роста (ЭФР), инсулинподобные факторы роста типов I и II (ИПФР-1 и ИПФР-П), а-трансформирующий фактор роста (ТФР-а) и протоонкогены: с-/оя, с-тус, с^ип (Сметник В.П., 2000).

Считается, что прогестерон поддерживает циклическую пролиферацию молочных желез в нормальном менструальном цикле и в течение беременности. Общепринятым является факт, что прогестерон ингибирует рост эндометрия, но стимулирует рост эпителия молочных желез (Б^-НПаке & а1, 2011).

Прогестерон способен оказывать регулирующее действие на молочную железу, потенциально видоизменяя ответ как нормальных, так и опухолевых клеток молочной железы на различных уровнях (Рапеу1е 1.Р. е1 а1, 2003; Сегёе8 I. & а1, 1991). Действие прогестерона опосредовано стимуляцией продукции 17Ь-гидроксистероидегидрогеназы и эстрон-сульфотрансферазы, которые быстро окисляют Е2аЕ1 и затем, связывая эстрон, превращают его в неактивный эстрона-сульфат; участием в созревании и дифференцировки эпителия альвеол, который подвергается дальнейшему клеточному делению; снижением экспрессии эстрогеновых рецепторов в эпителии молочной железы и обеспечение снижения пролиферации клеток, стимулированной эстрогенами; модуляция апоптоза клеток молочной железы посредством р53-

супрессора опухоли; модулированием митогенных протоонкогенов, таких как С-тус и C-foc (Семиглазов В.Ф. и соавт., 2003).

Число эстрогеновых рецепторов в эпителии молочных желез снижается в лютеиновой фазе цикла, в то время как число прогестероновых рецепторов остается высоким в течение всего цикла (Soderqvist G. et al, 1997). При иммуноцитохимическом исследовании аспирата, полученного из "нормальной" ткани молочной железы, также установлена более выраженная пролиферация в лютеиновой фазе цикла, чем в фолликулиновой (Shoker B.S. et al, 1999). При этом отмечена прямая корреляция активности пролиферации с уровнем прогестерона крови. Очевидность синергического влияния эстрогенов и прогестерона in vitro показана в исследованиях "нормальной" ткани молочной железы, полученной при биопсии, взятой с участка рядом с фиброаденомой или раком. У женщин с регулярным циклом установлен максимум пролиферации эпителиальных клеток молочной железы в лютеиновую фазу на фоне высокого уровня прогестерона (Clahsen Р.С. et al, 1999; Goulding Н. et al, 1995).

Некоторые авторы полагают, что эстроген-прогестероновая циклическая пролиферация может способствовать аккумуляции генетических ошибок, которые, возможно, ведут к развитию рака молочной железы (S.St-Hilaire et al, 2011).

Культура эпителиальных клеток молочной железы (in vitro) реагирует подобно эндометрию, а именно пролиферирует под влиянием эстрогенов, при добавлении прогестерона развитие прекращается (Going J.J. et al, 1988). В последние годы растет число данных о том, что вводимый в организм прогестерон может оказывать влияние на пролиферацию эпителия молочных желез, подобное таковому на эндометрий, а именно тормозит эстрогенный эффект. Проведенные исследования доказывают ингибирующий эффект прогестерона на пролиферацию клеток молочных желез. При воздействии прогестерона блокируются активаторы пролиферации Id-1 и с-тус, а также

усиливается экспрессия ингибитора пролиферативной активности р 21. (Chang J. et al, 1999; Nicholson R.I. et al, 1993)(рисунок 1) (Nicholson R.I. et al, 1993).

Рисунок 1. Внутриклеточная блокировка активаторов пролиферации прогестеронол4 (Nicholson R.I. et al, 1993).

Синтетические аналоги прогестерона могут давать проапоптотический эффект посредством воздействия на антиапоптотический белок bcl-2, снижая его экспрессию, даже в присутствии эстрадиола (Gombel A. et al, 1986).

Крайне важна длительность воздействия прогестерона на молочную железу. Так, назначение комбинации эстрогенов и прогестерона в течение 14 дней приводит к снижению пролиферации эпителия (Ferguson D.P., Anderson T.J., 1981). Однако со временем комбинированное лечение способствует снижению числа клеток с эстрогеновыми и прогестероновыми рецепторами. Клинические наблюдения показывают, что длительное назначение прогестерона обеспечивает его ингибирующее влияние на молочную железу (Сметник В.П., 2000).

В исследовании с участием 1150 женщин в пременопаузе с доброкачественными заболеваниями молочных желез, получавшим лечение производными 19-норстероидов, отмечено снижение риска рака молочных желез на 52% (относительный риск 0,40)(Pinder S.E., 1995).

Наряду с определением экспрессии рецепторов стероидных гормонов, для характеристики опухоли клетки карциномы исследуется наличие белка HER-2/neu (Лукашина М.И. и соавт., 2003).

Тирозинкиназный трансмембранный рецептор HER-2/neu из семейства ErbB, состоит из четырех функционально связанных рецепторных молекул, играющих важную роль в клеточной дифференцировке, пролиферации, апоптозе (рисунок 2)(Bundred N.J. et al, 2002; Петров C.B. и соавт., 2006)

Рисунок 2. HER-2/neu - тирозинкиназный трансмембранный рецептор из семейства ERBB состоит из трех доменов (Bundred N.J. et al, 2002)

Под действием лигандов HER-2/neu образует гетеродимеры с другими рецепторами данного семейства и регулирует работу соответствующих сигнальных каскадов (Graham J.D., Clarke C.L., 1997). HER-2/neu

экспрессируется в небольшом количестве в клетках нормальных тканей. Однако в процессе злокачественного роста происходит его гиперэкспрессия и/или амплификация кодирующего его гена, что доказывается только специальными методами исследования (in situ гибридизация) (Завалишина Л.Э.и соавт.,2011; Завалишина Л.Э.и соавт.,2008; Немцова М.В.и соавт., 2008).

Установлено, что онкопротеин СегЬВ-2 суперэкспрессирован в 20-30% случаев инвазивного рака молочной железы (Trihia Н. et al, 2003).

1.2.2. Изменение рецепторного аппарата клеток эпителия при развитии

опухолей молочной железы

Изложенные выше данные о влиянии половых гормонов не являются физиологическим обоснованием роли стероидных гормонов в патогенезе рака молочной железы исходя из их пролиферативной и митотической активности в лютеиновой фазе цикла. (Аникеева Н.В., 2006; Должиков А.А. и соавт., 2007). Тем не менее, принято считать, что эстрогены играют важную роль в развитии рака молочной железы (рисунок 3)(Mohibi S., et al, 2011).

Приблизительно 2/3 случаев рака молочной железы гормонально-зависимые. Поэтому определение рецепторов к половым гормонам в удаленной опухолевой ткани очень важно для выбора тактики лечения и суждения о прогнозе.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бриллиант, Александр Александрович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аникеева Н.В. Роль рецепторов эстрогенов, прогестерона, андрогенов, онкобелка HER-2, антигена KI-67 в прогнозе рака молочной железы/ Аникеева Н.В.// Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук/ Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины МЧС России.-Санкт-Петербург.-2006

2. Апанович Н.В. Современные молекулярно-генетические маркеры рака молочной железы/ Апанович Н.В., Шубин В.П., Коротаева A.A. [и соавт.]// Опухоли женской репродуктивной системы.-201l.-№ 1.-с.с. 19-29.

3. Байракова З.Г. Рецептор HER-2/NEU при раке молочной железы/ Байракова З.Г., Кузнецова О.М., Тулеуова A.A. [и соавт.]// Клиническая лабораторная диагностика.-2011.-№ 9.-с.с.19-20.

4. Бобров И.П. Ядрышковый аппарат и скорость клеточной пролиферации при предраковых заболеваниях и раке молочной железы. Бобров И.П., Долгатов А.Ю., Лазарев А.Ф. [и соавт.]// Сибирский онкологический журнал.-2008.-№82.-с.с.27-28.

5. Бондарева В.А. Значение прогностических маркеров опухолевой прогрессии KI-67 И Р53 в опухолях молочной железы/ Бондарева В.А., Шпонька И.С.// Морфология.-2007.-Т I.- №1.

6. Вторушин C.B. Клинико-морфологическая характеристика мультицентрического рака молочной железы и особенность экспрессии рецепторов половых гормонов/ Вторушин C.B., Завьялова М.В., Глущенко С.А. [и соавт.]// Сибирский онкологический журнал.-2007.-№82.-с.с.33-34.

7. Герштейн Е.С. Фактор роста эндотелия сосудов в опухолях и сыворотке больных раком молочной железы: связь с клинико-морфологическими факторами/ Герштейн Е.С., Щербаков A.M., Алиева С.К. [и соавт.]// Вестник РОНЦ им. H. Н. Блохина РАМН.-2005.-Т.16.-№ 1-2.-с.с.26-30.

8. Давыдовский И.В. Общая патология человека/ Давыдовский И.В.// Общая патология человека, под ред. А.И. Струкова.-М.-1982.-с.434.

9. Должиков A.A. Изучение экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона, HER2/NEU, маркера пролиферации KI-67 и их взаимосвязей в раке молочной железы/ Должиков A.A., Котляров A.A., Мухина Т.СЛ Курский научно-практический вестник Человек и его здоровье.-2007.-№ 4.-с.с.37-44.

10. Должиков A.A. Анализ экспрессии основных биологических маркеров рака молочной железы: рецепторов эстрогенов и прогестерона, HER2/NEU и К167/ Должиков A.A., Пасенов Н.З., Котляров A.A.// Научные ведомости Белгородского государственного университета.-Серия: Медицина.-Фармация.-2008.-Т.6.-№»5.-с.с.53-57.

11. Дружков О.Б. Динамика иммунофенотипа рака молочной железы/ Дружков О.Б., Гатауллин И.Г., Дружков М.О.// Казанский медицинский журнал.-2012.-Т.93.-№ 5.-с.с.731-734.

12. Ефремов Г.Д. Классификация протокового рака in-situ молочной железы/ Ефремов Г.Д., Франк T.A.II Российский онкологический журнал.-2010.-№ 3.-с.с.53-56.

13. Жабина A.C. Особенности экспрессии предиктивных маркеров у больных различными солидными опухолями/ Жабина A.C., Проценко С.А., Моисеенко В.М. [и соавт.]// Паллиативная медицина и реабилитация.-2011. -3.-с.с.27-30.

14. Завалишина Л.Э. Молекулярно-биологические факторы инвазивного роста и метастазирования рака при морфологическом исследовании/ Завалишина Л.Э.// Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук/ Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена.-Москва.-2006.

15. Завалишина Л.Э. Сравнительное иммуногистохимическое исследование HER-2 статуса рака молочной железы с помощью стандартного набора

"HERCEPTEST" и антител к С-ЕгЬВ-2/ Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю., Батева М.В. [и соавт.]// Архив патологии.-2008.-Т.70.-№ 2.-с.с.25-27.

16. Завалишина Л.Э. Исследование HER2 статуса рака молочной железы/ Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю., Рязанцева A.A. [и соавт.]// Методические аспекты.-Архив патологии.-2008.-Т.70.-№ 3.-с.с.9-11.

17. Завалишина Л.Э. HER-2 тестирование методами иммуногистохимии, флуоресцентной (FISH) и хромогенной (SISH) in situ гибридизации при раке желудка и пищеводно-желудочного перехода/ Завалишина Л.Э., Рязанцева A.A., Андреева Ю.Ю. [и соавт.]// Современная онкология.-2012.-№ 1.-с.с. 2731.

18. Завалишина Л.Э. Сравнительное исследование определения HER-2 статуса при раке молочной железы методами иммунофлюоресцентной и хромогенной in situ гибридизации/ Завалишина Л.Э., Рязанцева A.A., Батева М.В. [и соавт.]// Архив патологии.-2011.-Т.73.-№ 1.-с.с.51-54.

19. Завалишина Л.Э. Морфологическое исследование HER2 статуса/ Завалишина Л.Э., Франк ТЛЛ Методика и атлас.-M.-Media Medica-2006.-98с.

20. Зайратьянц О.В. Особенности экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и HER-2 клетками рака молочной железы/ Зайратьянц О.В., Колобов C.B., Акопян И.Г. [и соавт.]// Архив патологии.-2004.-Т.66.-№ 5.-с.с.9-12.

21. Калантарли С.С. К вопросу об определении KI-67 в биологических тканях, залитых в парафин (на примере рака молочной железы)/ Калантарли С.С., Мацко Д.Е.// Вестник Санкт-Петербургского университета.-Серия 11.-Медицина.-2012.-№ 1 .-с.с. 182-186.

22. Кочетова И.А. Биологически направленная (таргетная) терапия рака молочной железы, основанная на определении уровня экспрессии рецепторов стероидных гормонов и HER2/NEU/ Кочетова И.А.// Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук/

Научно-исследовательский институт онкологии им. H.H. Петрова Министерства здравоохранения Российской Федерации. Санкт-Петербург,-2009.

23. Летягин В.П. Факторы риска развития рака молочной железы/ Летягин В.П., Высоцкая И.В., Ким Е.А.// Опухоли женской репродуктивной системы.-2006.-№ 4,-с.с. 10-12.

24. Лукашина М.И. Экспрессия HER-2/NEU, KI-67 и плоидность при раке молочной железы/ Лукашина М.И., Глухова Е.И., Жукова Л.Г. [и соавт.]// Архив патологии.-2003.-Т.65.-№ 5.-с.с.25-29.

25. Любченко Л.К. Клинико-молекулярные аспекты наследственного рака молочной железы/ Любченко Л.К., Портной С.М., Брюзгин В.В. [и соавт.]// Молекулярная медицина.-2007.-№ 1.-с.с.8-15.

26. Невожай В.И. Иммуногистохимическое исследование рецепторов стероидных гормонов при раке молочной железы/ Невожай В.И., Мюллер Е.С.// Тихоокеанский медицинский журнал.-2007.-№ 4.-с.с.79-80.

27. Немцова М.В. Связь повреждений гена PL6/INK4A и экспрессии белка в опухолевой ткани спорадического рака молочной железы/ Немцова М.В., Землякова В.В., Кузнецова Е.В. [и соавт.]// Архив патологии.-2008.-Т.70.-№ 4.-C.C.6-9.

28. Пак Д.Д. Инвазивный дольковый рак молочной железы/ Пак Д.Д., Франк Г.А., Рябов И.И.// Российский онкологический журнал.-2006.-№ 2.-с.с.52-56.

29. Пак Д.Д. Прогностическое значение некоторых клинико-морфологических факторов при инвазивном дольковом раке молочной железы/ Пак Д.Д., Франк Г.А., Рябов И.И.// Российский онкологический журнал.-2006.-№ 1.-с.с. 17-21.

30. Петров C.B. Новая гиппотеза о роли онкогена CERbB2 в прогрессии рака молочной железы/ Петров C.B., Раскын Г.А., Хасанов Р.Ш.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-2006.-Т.142.-№ 7.-с.с.106-110.

31. Поддубная И.В. «Тройной негативный» рак молочной железы/ Поддубная И.В., Карселадзе Д.А.// Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН.-2009.-Т.20.-№3.-с.с. 12-20.

32. Радюкова И.М. Перспективы применения статинов при раке молочной железы/ Радюкова И.М., Друк И.В., Нечаева Г.И. [и соавт.]// Сибирский онкологический журнал.-2012.-№2.-с.с.73-78.

33. Семиглазов В.Ф. Новый взгляд на неоадъювантную химиотерапию рака молочной железы (роль навельбина)/ Семиглазов В.Ф., Арзуманов A.C., Божок A.A. [и др.]// Совр. онкол. 2003.-Т.5(3).-с.103-106.

34. Семиглазов В.Ф. Скрининг рака молочной железы/ Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В.// Практическая онкология.-T.l l.-№ 2010.-С.60-65.

35. Семиглазов В.Ф. Адъювантная терапия рака молочной железы, направленная против рецептора HER2/ Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В., Иванов В.Г. [и соавт.]// Фарматека.-2010.-№17.-с.с. 12-17.

36. Середа E.H. Особенности экспрессии белков KI-67 и Р53 в различных молекулярно-генетических подтипах рака молочной железы/ Середа E.H.// Сибирский онкологический журнал.-2009.-№ S1.-C.C.174-175.

37. Сметник В.П. Половые гормоны и молочная железа/ Сметник В.П.// Гинекология.-2000.-Т.2.-К 5.

38. Саркисов Д.С. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций /под ред. Д.С. Саркисова.-М.-1987.

39. Троценко И.Д. Оценка связи экспрессии рецепторов стероидных гормонов методом ОТ-ПЦР с уровнем пролиферации и апоптоза в такни рака молочной железы/ Троценко И.Д., Рожкова Н.И., Харченко Н.В. [и соавт.]// Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи.-2012.-Т.2.-№12.-с.17.

40. Чеснокова Н.П. Рак молочной железы: проблемы патогенеза/ Чеснокова Н.П., Барсуков В.Ю., Злобнова О.А.// Фундаментальные исследования.-2012.~ № 4-1.-с.с.146-151.

41. Чеснокова Н.П. Факторы риска развития рака молочной железы/ Чеснокова Н.П., Барсуков В.Ю., Плохов В.Н.// Успехи современного естествознания.-2008.-№1.-с.с. 18-24.

42. Чехонин В.П. Роль yEGF в развитии неопластического ангиогенеза/ Чехонин В.П., Шеин С.А., Корчагина А.А. [и соавт.]// Вестник Российской академии медицинских наук.-2012.-№ 2.-с.с.23-34.

43. Шайкина А.С. Иммуногистохимический анализ рецепторов эстрогенов и прогестерона, KI-67 в молочной железе в норме, при раке и доброкачественных опухолях/ Шайкина А.С., Рыжавский Б.Я., Беков С.В. [и соавт.]// Дальневосточный медицинский журнал.-20ll.-№ 1.-с.с.34-37.

44. Шашова Е.Е. Содержание рецепторов эстрогенов в тканях при раке молочной железы/ Шашова Е.Е., Глущенко С.А.// Сибирский онкологический журнал.-2007.-№S2.-c.c. 125-126.

45. Щепотин И.Б. Факторы риска развития местных рецедивов инвазивного ракамолочной железы/ Щепотин И.Б., Зотов А.С., Зайчук В.В. [и др.]// Онкология.-2010.-Т.12.-№ 4.

46. Allred D.C. The origins of estrogen receptor alpha-positive and estrogen receptor alpha-negative human breast cancer/ Allred D.C., Brown P., Medina D.// Breast Cancer Res.-2004.-6(6).-240-245.

47. Allred D.C. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis/ Allred D.C., Harvey J.M., Berardo M. [et al.] // Mod. Pathol.-1998.-89.-l 11.-7.

48. Almasri N.M. Immunohistochemical evaluation of human epidermal growth factor receptor 2 and estrogen and progesterone receptors in breast carcinoma in Jordan/ Almasri N.M., Al-Hamad MM Breast Cancer Res.-2005.-7(5).-p.598-604.

49. Alvarado M.V., Russo J., Russo I.H. Immunolocalization of inhibin in the mammary gland of rats treated with hCG/ Alvarado M.V., Russo J., Russo I.H.// Histochem And Cytochem.-1993.-41.-p.p.29-34.

50. Andreeff M. Cell proliferation and differentiation/ Andreeff M., Goodrich D.W.// Holland-Frei Cancer Medicine.-2003.-6.-vol.l&2.-Hamilton, London.-BC Decker Inc.-p.p.27-39.

51. Amat S. Scarff-Bloom-Richardson (SBR) grading: a pleiotropic marker of chemosensivity in invasive ductal breast carcinomas treated by neoadjuvant chemotherapy/ Amat S., Penault-Llorca F., Cure H. [et al.] // Int. J. Oncol. -2002/20 (4).-791-6.

52. Aranda F.I. Cellular proliferation in breast ductal infiltrating carcinoma: correlation with clinical and histopathological variables/ Aranda F.I., Laforga J.B. // Pathol Res Pract.-1997.-193.-683-688.

53. Ayadi L. Correlation of HER2 overexpression with clinicopathological parameters in Tunisian breast carcinoma/ Ayadi L., Khabir A., Amouri H. [et al.] // World J Surgical Oncol.-2008.-V.6.-P.l 12.

54. Barbareschi M. Quantitative growth fraction evaluation with MIB1 and Ki67 antibodies in breast carcinomas/ Barbareschi M., Girlando S., Mauri F.M. [et al.]// Am J ClinPathol.-1994.-102.-171-175.

55. Bardeesy N. RAS unplugged: negative feedback and oncogene-induced senescence/ Bardeesy N., Sharpless N.E.// Cancer Cell.-2006.-10(6).-p.p.451-453.

56. Baselga J. Epidermal growth factor receptor pathway inhibitors/ Baselga J., Cortes J.// Cancer Chemother Biol Response Modif.-2005.-22.-p.p.205-223.

57. Baselga J. A 32-Year-Old Woman with HER2-Positive Breast Cancer/ Baselga J., Smith B.L., Rafferty M.D. [et al.]// N.Engl.J.Med.-2012.-V.3660.-p.p.2018-2026.

58. Beck T. Usefulness of immunohistochemical staining for p53 in the prognosis of breast carcinomas: Correlations with established prognosis parameters and with

the proliferation marker, MIB-1/ Beck T., Weller E.E., Weikel W. [et al.]// Gynecol Oncol.-1995.-57.-p.96-104.

59. Bevilacqua P. Prognostic value of intratumoralmicrovessel density, a measure of tumour angiogenesis, in node negative breast carcinoma: results of a multiparametric study/ Bevilacqua P., Barbareschi M., Verderio P. [et al.] // Breast Cancer Res Treat.-1995.-36.-p.205-217.

60. Bharagva R. Ki-67 labeling index in breast carcinoma: Animmunohistochemical study with correlation to molecular subtypes/ Bharagva R., Striebel J., Onisko A., [et al.]// Clin.Oncol. -2008.-V.26.-abstr 22107.

61. Bilous M. Current perspectives on HER2 testing: a review of national testing guidelines/ Bilous M., Dowsett M., Isola J., [et al.]// MolPathol 2003.-V.-16.-p. 173-82.

62. Bland K.I. Menopausal status as a factor in the distribution of estrogen and progestin receptors in breast cancer/ Bland K.I., Fuchs A., Wittliss J.L.// 37th Annual Meeting of the Forum on Fundamental surgical Problems. Surg Forum.-1981.-V.32.- P.P. 410-412.

63. Blau H.M. The well-tempered vessel/ Blau H.M., Banfi A.// Nat Med.-2001.-7.-532-533.

64. Bergers G. Tumorigenesis and the angiogenic switch/ Bergers G., Benjamin L.E.// Nat Rev Cancer.-2003(3).-p.p.401-410.

65. Bosari S. Microvessel quantitation and prognosis in invasive breast carcinoma/ Lee A.K., DeLellis R.A., Wiley B.D., [et al.]// Hum. Pathol.-1992.-23.-755-761.

66. Bottini A. Relationship between tumor shrinkage and reduction in Ki67 expression after primary chemotherapy in human breast cancer/ Bottini A., Berruti A., Bersiga A. [et al.]//Br. J. Cancer.-2001.-85.-p.p.l 106-1112.

67. Bottini A. Single agent epirubicin versus the combination epirubicin plus tamoxifen as primary chemotherapy in breast cancer patients. A single institution phase III trial/ Bottini A., Berruti A., Brizzi M.P. [et al.] // Proc. Am. Soc. Clin. Oncol.-2003.-22.-abstract 80.

68. Bouzubar N. Ki67 immunostaining in primary breast cancer: Pathological and clinical associations/ Bouzubar N., Walker K.J., Griffiths K. [et al.]// Br J Cancer.-1989.-59.-p.p.943.-947.

69. Braun N. Cell cycle dependent distribution of the proliferation-associated Ki-67 antigen in human embryonic lung cells/ Braun N., Papadopoulos T., Muller-Hermelink H.K.// Cell Pathol Incl Mol Pathol.-1988.-56.-p.p.25-33.

70. Brown R.W. Prognostic value of Ki-67 compared to S-phase fraction in axillary node-negative breast cancer/ Brown R.W., Allred C.D., Clark G.M. [et al.]// Clin Cancer Res.-1996.-2.-p.p.585-592.

71. Bruno S. Cell cycle dependent expression and stability of the nuclear protein detected by Ki-67 antibody in HL-60 cells/ Bruno S., Darzynkiewicz Z.// Cell Prolif.-1992.-25.-p.p.31-40.

72. Bundred N.J. Fulvestrant, an estrogen receptor downregulator, reduces cell turnover index more effectively than tamoxifen/ Bundred N.J., Anderson E., Nicholson R.I. [et al.]// Anticancer Res.-2002.-22.-p.p.2317-2319.

73. Burgress A.W. An open-and-shut case? Recent insights into the activation of EGF/ErbB receptors/ Burgress A.W., Cho H.S., Eigenbrot C. [et al.]// Mol.Cell.-2003.-V.12.-p.p.541-542.

74. Chang J. Biologic markers as predictors of clinical outcome from systemic therapy for primary operable breast cancer/ Chang J., Powles T.J., Allred D.C. [et al.]// J Clin 0ncol.-1999.-17.-p.p.3058-3063.

75. Chang K.J. Influences of percutaneous administration of estradiol and progesterone on human breast epithelial cell cycle in vivo/ Chang K.J., Lee T.T., Linarez-Cruz G [et al.]// FertilSter.-1995.-63.-p.p.785-91.

76. Cintra J.R. Immunohistochemical profile and clinical-pathological variables inbreast cancer/ Cintra J.R., Teixeira M.T., Diniz R.W. [et al.]// Rev. Assoc. Med. Bras.-2012.-V.58(2).-p.p. 178-87.

77. Clahsen P.C. The utility of mitotic index, estrogen receptor and Ki-67 measurements in the creation of novel prognostic indices for node-negative breast

cancer/ Clahsen P.C., van de Velde C.J., Duval C. [et al.]// Eur J Surg Oncol.-1999.-25.-p.p.356-363.

78. Clarke C.L. Progestin regulation of cellular proliferation/ Clarke C.L., Sutherland R.L.// Endocr Rev.-1990.-11.-266.

79. Clarke R.B. Dissociation between steroid receptor expression and cell proliferation in the human breast/ Clarke R.B., Howell A., Potten C.S. [et al]// Cancer Res.-1997.-57.-p.p.4987-4991.

80. Cleator S. Biology of neoadjuvant chemotherapy for breast cancer/ Cleator S., Parton M., Dowsett MM Endocr Relat Cancer.-2002.-9.-p.p. 183-195.

81. Clemons M. Estrogen and the risk of breast cancer/Clemons M., Goss P.// N Engl J Med.-2001.- 7.-344(23).-1804.

82. Cline J.M. Effects of hormone replacement therapy on the mammary gland of surgically postmenopausal cynomolgus macaques/ Cline J.M., Soderqvist G., Von Schoultz E. [et al.]// Am J Obstet Gynecol.-1996.-174.-p.p.93-100.

83. Costello P. Prognostic significance of microvessel density in lymph node negative breast carcinoma/ Costello P., McCann A., Carney D.N. [et al.]// Hum. Pathol.- 1995.-26.-p.p. 1196-2000.

84. Creighton C.J. The molecular profile of luminal B breast cancer/ Creighton C.J.// Biologics.-2012.-6.-p.p.289-97.

85. De Lima G.R. Effects of low dose tamoxifen on normal breast tissue from premenopausal women/ De Lima G.R., Facina G., Shida J.Y., [et al.]// Eur J Cancer.-2003.-39.-p.p.891-898.

86. Dickson R.B. Estrogen receptor-mediated processes in normal and cancer cells/ Dickson R.B., Stancel G.M.// J Natl Cancer Inst Monogr.-2000.-27.-p.p. 135-145.

87. Dierendonck J.H. Nuclear distribution of the Ki-67 antigen during the cell cycle: Comparison with growth fraction in human breast cancer cells/ Dierendonck J.H., Keijzer R., van de Velde C.J., [et al.]// Cancer Res.-1989.- 49.-p.p.2999-3006.

88. Du Manoir S.Ki-67 labeling in postmitotic cells defines different Ki-67 pathways within the 2c compartment/ Du Manoir S., Guillaud P., Camus E., [et al.]// Cytometry.-1991.- 12.-p.p.455-463.

89. Dunnwald L.K. Hormone receptor status, tumor characteristics, and prognosis: a prospective cohort of breast cancer patients/ Dunnwald L.K., Rössing M.A., Li C.I.// Breast Cancer Research.-2007.-V.9(l).-P.6.

90. Dvorak H.F. Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor, microvascular hyperpermeability, and angiogenesis/ Dvorak H.F., Brown L.F., Detmar M., [et al.]//Am. J. Pathol.-1995.-V.146.-p.p. 1029-1039.

91. Dvorak H.F. Identification and characterization of the blood vessels of solid tumors that are leaky to circulating macromolecules/ Dvorak H.F., Nagy J.A., Dvorak J.T. [et al.]//Am. J. Pathol.-1988.-133.-p.p.95-109.

92. Elledge R.M. Estrogen receptor (ER) and Progesterone receptor (PgR), by ligand-binding assay compared with ER, PgR and pS2, by immunohistochemystry in predicting response to tamoxifen in metastatic breast cancer/ Elledge R.M., Green S., Pugh R., [et al.]// Int J Cancer.-2000.-89.-P.7-ll.

93. Ellis P.A. Comparison of MIB-1 proliferation index with S-phase fraction in human breast carcinomas/ Ellis P.A., Makris A., Burton S.A., [et al.]// Br J Cancer.-1996.-73.-p.p.640-643.

94. Ellis R.E. Mechanisms and functions of cell death/ Ellis R.E., Juan J., Horwits H.R.//Ann Rev Cell Biol.-1991.-7.-p.p.663-98.

95. Ernster V.L. Incidence of and treatment for ductal carcinoma in situ of the breast/ Ernster V.L., Barclay J., Kerlikowske K.// JAMA.-1996.-275.-p.p.913-918.

96. Faneyte J.F. Breast cancer response to neoadjuvant chemotherapy: predictive markers and relation with outcome/ Faneyte J.F., Schrama J.G., Peterse J.L. [et al.]// Br. J. Cancer.-2003.-l0.-88(3).-p.p.406-12.

97. Faria G. P-cadherin as prognostic factor for loco-regional relapse in breast cancer/ Faria G., Cardoso M.J., Martins D., [et al.]// Acta Med Port.-2012.-25(2).-p.p.97-105.

98. Ferguson D.P. Morphological evaluation of cell turnover in relation to the menstrual cycle in the "resting" human breast/ Ferguson DP, Anderson TJ.//Br J Cancer.-1981.-44.-177.

99. Foidart J.M. Estradiol and progesterone regulate the proliferation of human breast epithelial cells/ Foidart J.M., Colin C., Denoo X. [et al.]// Fertil Steril.-1998.-p.p.963-969.

100. Folkman J. In "The Molecular Basis of Cancer"/ Folkman J., Mendelsohn J., Howley P.M. [et al.]//W. B. Saunders.-p.p.206-232.

101. Folkman J. Tumor angiogenesis: therapeutic implications/ Folkman J.// New Eng. J. Med.-1971.-285.-p.p.l 182-1186.

102. O'Reilly M.S. Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma/ O'Reilly M.S., Holmgren L., Shing Y. [et al.]// Cell.-1994.-79.-p.p.315-328.

103. Fonatsch C. Assignment of the human Ki-67 gene (MK167) to 10q25-qter/ Fonatsch C., Duchrow M., Rieder H. [et al.]// Genomics.-1991.-1 l.-p.p.476-477.

104. Gasparini G. Value of epidermal growth factor receptor status compared with growth fraction and other factors for prognosis in early breast cancer/ Gasparini G., Bevilacqua P., Pozza F. [et al.]// Br J Cancer.-1992.-66.-p.p.970-976.

105. Gasparini G. Breast cancer cell kinetics: Immunocytochemical determination of growth fractions by monoclonal antibody Ki-67 and correlation with flow cytometric S-phase and with some features of tumor aggressiveness/ Gasparini G., Pozza F., Meli S. [et al.]// Anticancer Res.-1991.-ll.-p.p.2015-2021.

106. Gerdes J. Cell cycle analysis of a cell proliferation-associated human nuclear antigen defined by the monoclonal antibody Ki-67/ Gerdes J., Lemke H., Baisch H. [et al.]//J Immunol.-1984.-133.-p.p. 1710-1715.

107. Gerdes J. Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen associated with cell proliferation/ Gerdes J., Schwab U., Lemke H. [et al.]// Int J Cancer.-1983.-31.-p.p. 13-20.

108. Gerdes J. Immunobiochemical and molecular biologic characterization of the cell proliferation-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67/ Gerdes J., Li L., Schlueter C. [et al.]// Am. J. Pathol.-1991.-V.138.-p.p.867-873.

109. Going J.J. Proliferative and secretory activity in human breast during natural and artificial menstrual cycles/ Going J.J., Anderson T.J., Battersby S. [et al.]// Am J Pathol.-1988.-130.-p.193.

110. Gombel A. Progestin effect on cell proliferation and 17 beta-hydroxysteroid dehydrogenase activity in normal human breast cells in culture/ Gombel A., Malet

C., Spritzer P. [et al.]// J Clin Endocrinol Metab.-1986.-63.-l 174-1180.

111. Gompel A. Apoptosis and aging: breast cells and apoptosis/ Gompel A., Levy

D., Chaoudt M. [et al.] //Maturitas.-2000.-35(supp.l).-343.

112. Gonzalez M.A. Minichromosome maintenance protein 2 is a strong independent prognostic marker in breast cancer/ Gonzalez M.A., Pinder S.E., Callagy G. [et al.]// J Clin 0ncol.-2003.-21.-p.p.4306-4313.

113. Gonzalez-Vela M.C. MIB1 proliferation index in breast infiltrating carcinoma: comparison with other proliferative markers and association with new biological prognostic factors/ Gonzalez-Vela M.C., Garijo M.F., Fernandez F. [et al.]// Histol Histopathol.-2001.-16.-p.p.399-406.

114. Goulding H. Assessment of angiogenesis in breast carcinoma: an important factor in prognosis/ Goulding H., Abdul Rashid N.F., Robertson J.F., [et al.]// Hum. Pathol.-1995.-26.-p.p. 1196-1200.

115. Graham J.D. Physiological action of progesterone in target tissues/ Graham J.D., Clarke C.L.// Endocr Rev.-1997.-18.-p.p.502-519.

116. Graver A.M. Molecular pathology of breast cancer/ Graver A.M., Portier B.P., Tubbs R.R.// Arch Pathol Lab Med.-2011.-Vol.l35.-p.p.544-557.

117. Guttilla I.K. ERa, microRNAs, and the epithelial-mesenchymal transition in breast cancer/ Guttilla I.K., Adams B.D., White B.A.// Trends Endocrinol Metab.-2012.-V.23.-Issue 2.-p.p.73-82.

118. Haerslev T. Correlation of growth fraction by Ki-67 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunohistochemistry with histopathological parameters and prognosis in primary breast carcinomas/ Haerslev T., Jacobsen G.K., Zedeler KM Breast Cancer Res Treat.-1996.-37.-p.p. 101-113.

119. Hanahan D. Hallmarks of cancer: the next generation/ Hanahan D., Weinberg R.A./ Hanahan D., Weinberg R.AM Cell.-201 l.-144.-p.p.646-674.

120. Harari D. Molecular mechanism underlaying ErbB/HER2 action in breast cancer/ Harari D., Yarden YM C>ncogene.-2000.-V.19. -p.p.6102-6114.

121. Harper-Wynne C. Effects of the aromatase inhibitor letrozole on normal breast epithelial cell proliferation and metabolic indices in postmenopausal women: A pilot study for breast cancer prevention/ Harper-Wynne C., Ross G., Sacks N. [et al.]// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.-2002.-ll.-p.p.614-621.

122. Harper-Wynne C.L. Comparison of the systemic and intratumoral effects of tamoxifen and the aromatase inhibitor vorozole in postmenopausal patients with primary breast cancer/ Harper-Wynne C.L., Sacks N.P., Shenton K. [et al.]//J Clin 0ncol.-2002.-20.-p.p. 1026-1035.

123. Heidebrecht H.J. Monoclonal antibodies Ki-S3 and Ki-S5 yield new data on the 'Ki-67' proteins/ Heidebrecht H.J., Buck F., Haas K. [et al.]// Cell Prolif.-1996.-29.-p.p.413-425.

124. Hilaire S.S. Estrogen receptor positive breast cancers and their association with environmental factors/ Hilaire S.S., Mandal R., Commendador A. [et al.]// International Journal of Health Geographics.-2011.-V.10.-p.32.

125. Imamura H. Prognostic significance of MIB1-determined proliferative activities in intraductal components and invasive foci associated with invasive ductal breast carcinoma/ Imamura H., Haga S., Shimizu T. [et al.]// Br J. Cancer.-1999.-79.-p.p. 172-178.

126. Jacobs W. HER-2/neu Protein Expression in Breast Cancer/ Jacobs W., Allen M., Gown M.D.//Am J Clin Pathol.-2000.-V.113.p.p.251-258.

127. Jain R.K. Normalizing tumor vasculature with anti-angiogenic therapy: a new paradigm for combination therapy/ Jain R.K.// Nat Med.-2001.-7.-p.p.987-989.

128. Jalava P. Ki67 immunohistochemistry: a valuable marker in prognostication but with a risk of misclassification: proliferation subgroups formed based on Ki67 immunoreactivity and standardized mitotic index/ Jalava P., Kuopio T. [et al.]// Histopathology.-2006.- 48(6).-p.p.674-82.

129. Jansen R.L. MIB-1 labeling index is an independent prognostic marker in primary breast cancer/ Jansen R.L.// Br. J. Cancer.-1998.-78.-p.460.

130. Jones S. Low proliferative rate of invasive nodenegative breast cancer predicts for a favorable outcome: a prospective evaluation of 669 patients/ Jones S., Clark G., Koleszar S. [et al.]// Breast Cancer.-2001.-l.-p.p.310-314.

131. Kakolyris S. Relationship of vascular maturation in breast cancer blood vessels to vascular density and metastasis, assessed by expression of a novel basement membrane component, LH39/Kakolyris S., Fox S.B., Koukourakis M. [et al.]// Br. J. Cancer.-2000.-V.82(4).-p.p.844-851.

132. Key G. New Ki-67-equivalent murine monoclonal antibodies (MIB 1-3) generated against bacterially expressed parts of the Ki-67 cDNA containing three 62 base pair repetitive elements encoding for the Ki-67 epitope/ Key G., Becker M.H., Baron B. [et al]// Lab Invest.-1993.-68.-p.p.629-636.

133. Kill I.R. Localisation of the Ki-67 antigen within the nucleolus: Evidence for a fibrillarin-deficient region of the dense fibrillar component/ Kill I.R.//J Cell Sci.-1996.-109.-p.p. 1253-1263.

134. Kleinsmith L.J. Understanding Estrogen receptors/ Kleinsmith L.J., Kerrigan D., Kelly J.// Tamoxifen, and Raloxifene. Understanding cancer and related topics.-National Cancer Institute.-2010.

135. Konecny G. Quantitative association between HER-2/neu and steroid hormone receptors in hormone receptor-positive primary breast cancer/ Konecny G., Pauletti G., Pegram M. [et al.]// J Nat Cancer Inst.-2003.-95(2).-p.p. 142-153.

136. Leek R.D. The prognostic role of angiogenesis in breast cancer/ Leek R.D.// Anticancer Res.-2001 .-21 (6B).-p.p.4325-31.

137. Lichtenberger B.M. Autocrine VEGF signaling synergizes with EGFR in tumor cells to promote epithelial cancer development/ Lichtenberger B.M., Tan P.K., Niederleithner H. [et al.].-Cell.-2010.-22.-140(2).-p.p.268-79.

138. Linderholm B.K. Significantly higher levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) and shorter survival times for patients with primary operable triple-negative breast cancer/ Linderholm B.K., Hellborg H., Johansson U. [et al.]// Ann 0ncol.-2009.-20(10).-p.p. 1639-1646.

139. Linggi B. ErbB receptors: new insights on mechanisms and biology/ Linggi B., Carpenter G.// Trends Cell Biol.-2006.-16.-p.p.649-656.

140. Lipponen P. Apoptosis in breast cancer: Relationship with other pathological parameters/ Lipponen P.//EndocrRelat Cancer.-1999.-6.-p.p.l3-16.

141. Liu S. Measures of cell turnover (proliferation and apoptosis) and their association with survival in breast cancer/ Liu S., Edgerton S.M., Moore D.H. [et al.]// Clin Cancer Res.-2001.-7.-p.p.l716-1723.

142. Lopez F. Modalities of synthesis of Ki67 antigen during the stimulation of lymphocytes/ Lopez F., Belloc F., Lacombe F. [et al.]// Cytometry.-1991.-12.-p.p.42-49.

143. Luporsi E. Ki-67: level of evidence and methodological considerations for its role in the clinical management f breast cancer: analytical and critical review/ Luporsi E„ André F., Spyratos F. [et al.]// Breast Cancer Res. Treat.-2012.-V.132(3).- p.p.895-915.

144. Makris A. Prediction of response to neoadjuvantchemoendocrine therapy in primary breast carcinomas/ Makris A., Powles T.J., Dowsett M. [et al.]// Clin Cancer Res.- 1997.-3.-p.p.593-600.

145. McLendon R. Comprehensive genomic characterization defines human glioblastoma genes and core pathways/ McLendon R., Friedman A., Bigner D. [et al.]// Nature.-2008.-23.-455(7216).-p.p. 1061-1068.

146. Menard S. Role of HER2 gene overexpression in breast carcinoma/ Menard S., Tagliabue E., Campiglio M. [et al.]//J Cell Physiol.-2000.-281.-p.p.l50-162.

147. Mohibi S. Mouse models of estrogen receptor-positive breast cancer/ Mohibi S., Mirza S., Band H. [et al.]// J Carcinog.-2011.-10.-35.

148. Molino A. Ki-67 immunostaining in 322 primary breast cancers: Associations with clinical and pathological variables and prognosis/ Molino A., Micciolo R., Turazza M. [et al.]//Int J Cancer.- 1997.-74.-p.p.433-437.

149. Moran C.A. Neuroendocrine carcinomas (carcinoid, atypical carcinoid, small cell carcinoma, and large cell neuroendocrine carcinoma): current concepts/ Moran C.A., Suster S.// Hematol Oncol Clin North Am.-2007.-21(3).-p.p.395-407.

150. Moriki T. Proliferation marker MIB-1 correlates well with proliferative activity evaluated by BrdU in breast cancer: An immunohistochemical study including correlation with PCNA, p53, c-erbB-2 and estrogen receptor status/ Moriki T., Takahashi T„ Kataoka H. [et al.]//Pathol Int.-1996.-46.-p.p.953-961.

151. Nadji M. Immunohistochemistry of estrogen and progesterone receptors reconsidered: Experience with 5,993 breast cancers/ Nadji M., Gomez-Fernandez C., Ganjei-Azar P. [et al.]// Am. J. Clin Pathol.-2005.-123.-p.p.21-27.

152. Nguen B.L. Transformation of estrone and estradiol in hormone-dependent and hormone-independent human breast cancer cells. Effects of the antiestrogen ICI 164,384, danazol, and promegestone (R-5020)/ Nguen B.L., Chetrite G., Pasqualini J.R.// Breast Cancer res Treat.-1995.-34.-p.p.l39-146.

153. Nicholson R.I. Relationship between EGF-R, c-erbB-2 protein expression and Ki67 immunostaining in breast cancer and hormone sensitivity/ Nicholson R.I., McClelland R.A., Finlay P. [et al.]// Eur J Cancer.-1993.-29A.-p.p.l018-1023.

154. Murase R. Novel Therapeutic Strategies for Malignant Salivary Gland Tumors: Lessons Learned from Breast Cancer/ Murase R., Sumida T., Ishikawa A. [et al.]// Int J of Otolaryngology.-2011 .-V.9p.

155. Obermair A. Microvessel density and vessel invasion in lymph-node negative breast cancer: effect on recurrence free survival/ Obermair A., Kurtz C., Czerwenka K. [et al.]// Int J Cancer.-1995.-V.62.-p.p.l26-131.

156. Offersen B.V. Quantification of angiogenesis as a prognostic marker in human carcinomas: a critical evaluation of histopathological methods for estimation of vascular density/ Offersen B.V., Borre M., Overgaard J.// Eur. J. Cancer.-2003.-39.-p.p.881-890.

157. Ogawa Y. Microvessel quantitation in invasive breast cancer by staining for factor-VHI-related antigen/ Ogawa Y., Chung Y.S., Nakata S.T. [et al.]// Br. J. Cancer.-1995.-71 .-p.p. 1297-1301.

158. Owens M.A. HER2 amplification ratios by fluorescence in situ hybridization and correlation with immunohistochemistry in a cohort of 6556 breast cancer tissues/ Owens M.A., Horten B.C., DaSilva MM.// Clin Breast Cancer.-2004.-V.5.-p.p. 63-69.

159. Parise C. Variation among the ER, PR, and HER2 breast cancer subtypes in California/ Parise C., Brown M., Bauer K. [et al.]// Breast Cancer Symposium.-2007.-Abstract No. 132.

160. Parker J.S. Supervised risk predictor of breast cancerbased on intrisic subtypes/ Parker J.S., Prat A., Mullins M. [et al.]// J Clin Oncol.-2009.-27(8).-p.p.l 160-1167.

161. Pasqualini J.R. The anti-aromatase effect of progesterone and of its natural metabolites 20alpha- and 5alpha-dihydroprogesterone in the MCF-7aro breast cancer cell line/ Pasqualini J.R., Chetrite G.J.// Anticancer Res.-2008.-28(4B).-p.p.2129-33.

162. Pasqualini J.R. Estrone sulfate-sulfatase and 17 beta-hydroxysteroid dehydrogenase activities: a hypothesis for their role in the evolution of human breast cancer from hormone-dependence to hormone-independence/ Pasqualini J.R., Chetrite G., Nguyen B.L.[et al.]// J Steroid Biochem Molec Biol.-1995.-53.-p.p.407-412.

163. Pasqualini J.R. Recent data on estrogen sulfatases and sulfotransferases activities in human breast cancer/ Pasqualini J.R., Schatz B., Varin C. [et al.].// J Sterid Biochem Molec Biol.-1992.-4l.-p.p.323-329.

164. Penault-Llorca F. Induction chemotherapy for breast carcinoma: predictive markers and relation with outcome/ Penault-Llorca F., Cayre A., Bouchet Mishellany F. [et al.]// Int J Oncol.-2003.-22(6).-p.p.l319-1325.

165. Petit T. Comparative value of tumor grade, hormonal receptors, Ki-67, Her-2 and topoisomerase II alpha status as predictive markers in breast cancer patients treated with neoadjuvantanthracycline-based chemotherapy/ Petit T., Wilt M., Velten M. [et al.]// Eur. J. Cancer.-2004.-40(2).-p.p.205-211.

166. Pierga J.Y. Long term prognostic value of growth fraction determination by Ki-67 immunostaining in primary operable breast cancer/ Pierga J.Y., Leroyer A., Viehl P. [et al.]// Breast Cancer Res Treat.-1996.-37.-p.p.57-64.

167. Pietilainen T. The important prognostic value of Ki-67 expression as determined by image analysis in breast cancer/ Pietilainen T., Lipponen P., Aaltomaa S. [et al.]// J Cancer Res Clin Oncol.-1996.-122.-p.p.687-692.

168. Pinder S.E. Assessment of the new proliferation marker MIB1 in breast carcinoma using image analysis: Associations with other prognostic factors and survival/ Pinder S.E., Wencyk P., Sibbering D.M. [et al.]//Br J Cancer.-1995.-71.-p.p.146-149.

169. Plu-burean G. Cyclical mastalgia and breast cancer risk: results of a French cohort study/ Plu-burean G., Le M.G., Situk-Ware R. [et al.]// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.-2006.-15(6).-p.p. 1229-31.

170. Polyak K. Heterogeneity in breast cancer/ Polyak K.//J Clin Invest.-2011.-121(10).-p.p.3786-3788.

171. Prosperi E. Multiple roles of the proliferating cell nuclear antigen: DNA replication, repair and cell cycle control/Prosperi E.// Prog Cell Cycle Res.-1997.-3.-p.p.l93-210.

172. Raica M. Lymphatic micro vessel density, VEGF-C, and VEGFR-3 expression in different molecular types of breast cancer/ Raica M., Cimpean A.M., Ceausu R. [et al.]// Anticancer Res.-201 l.-31(5).-p.p.l757-1764.

173. Railo M. Ki-67, p53, Er-receptors, ploidy and S-phase as prognostic factors in T1 node negative breast cancer/ Railo M., Lundin J., Haglund C. [et al.]// Acta Oncol.-1997.-36.-p.p.369-374.

174. Ratnatunga N. Hormone receptor expression and HER/2 amplification in breast carcinoma in a cohort of SriLankans/ Ratnatunga N., Liyanapathirana L.V.//Papers.-2007.-52(4).-133-6.

175. Riggs B.L. Selective estrogen-receptor modulators -mechanisms of action and application to clinical practice/ Riggs B.L., Hartmann L.C.// N Engl J Med.-2003.-20.-348(12).-l 192.

176. Rudas M. Thymidine labeling index and Ki-67 growth fraction in breast cancer: Comparison and correlation with prognosis/ Rudas M., Gnant M.F., Mittlbock M. [et al.]// Breast Cancer Res Treat.-1994.-32.-p.p.l65-175.

177. Rudolph P. Correlation between p53, c-erbB-2, and topoisomerase II alpha expression, DNA ploidy, hormonal receptor status and proliferation in 356 node-negative breast carcinomas/ Rudolph P., Olsson H., Bonatz G. [et al.]// Prognostic implications/ J Pathol.-1999.-187.-p.p.207-216.

178. Russo I.H. Mammary gland neoplasia in long-term rodent studies/ Russo I.H., Russo J.// Environ.-Health Perpect.-1996.-104.-p.p.938-969.

179. Russo I.H. Pregnancy-induced changes in breast cancer risk/ Russo I.H., Russo J.// J Mammary Gland Biol Neoplasia.-201 l.-16(3).-p.p.221-233.

180. Russo J. Comparative study of human and rat mammary tumorigenesis/ Russo J., Gusterson B.A., Rogers A.E. [et al.]// Lab Invest.-1990.-62.-p.p.l-32.

181. Russo J, Russo IH. In the Progress in the management of the menopause, BG Wren (td-r), the Parthenon Publist 1996; 184-93.

182. Sabourin J.C., Martin A., Baruch J.B. [et al.] bcl-2 expression in normal breast tissue during the menstrual cycle/ Int J Cancer.-1994.-59.-p.p. 1-6.

183. Sahin A.A., Ro J., Ro J.Y. [et al.] Ki-67 immunostaining in node-negative stage I/II breast carcinoma: Significant correlation with prognosis/ Cancer.-1991.-68.-p.p.549-557.

184. Sasaki K. Measurement of bromodeoxyuridine labeling index, Ki-67 score and Ag-NOR count in breast carcinomas/ Sasaki K., Matsumura K., Murakami T. [et al.]// Comparison with DNA ploidy/ Oncology.-1992.-49.-p.p.l47-153.

185. Sasaki K. Relationship between labeling indices of Ki-67 and BrdUrd in human malignant tumors/ Sasaki K., Matsumura K., Tsuji T. [et al.]// Cancer.-1988.-62.-p.p.989-993.

186. Schlüter C. The cell proliferation-associated antigen of antibody Ki-67: A very large, ubiquitous nuclear protein with numerous repeated elements, representing a new kind of cell cycle-maintaining proteins/ Schlüter C., Duchrow M., Wohlenberg C. [et al.]// J Cell Biol.-1993.-123.-p.p.513-522.

187. Scholzen T. Novel splice forms of the Ki-67 mRNA/ Scholzen T., Dimmler C., Wohlenberg C. [et al.]// Eur J Cell Biol.-1997.-72.-p.p.40-44.

188. Scholzen T. The Ki-67 protein: from the known and the unknown/ Scholzen T., Gerdes J.// J. Cell. Physiol.-2000.-182.-311.

189. Semiglazov V.F. Preoperative hormonal therapy v chemotherapy in postmenopausal ER-positive breast cancer patients/ Semiglazov V.F., Zhiltsova E.K., Bozhok A.A. [et al.]// Eur. J .Cancer.-2004.-V.2.-p.p.356-359.

190. Shi S.R. Antigen retrieval in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues: An enhancement method for immunohistochemical staining based on microwave oven heating of tissue sections/ Shi S.R., Key M.E., Kalra K.L.//J Histochem Cytochem.-1991.- 39.-p.p.741-748.

191. Shoker B.S. Estrogen receptor-positive proliferating cells in the normal and precancerous breast/ Shoker B.S., Jarvis C., Clarke R.B. [et al.]// Am J Pathol.-1999.-155.-p.p. 1811-1815.

192. Slamon D.J. Studies of the HER2/neu proto-oncogene in human breast and ovarian cancer/ Slamon D.J., Godolphin W. [et al.]// Science.-1989.-244.-p.p.707-712.

193. Soderqvist G. Proliferation of breast epithelial cells in healthy women during the menstrual cycle/ Soderqvist G., Isaksson E., Schoultz B. [et al.]//Am J Obstet Gynecol.-1997.- 176.-p.p. 123-128.

194. Soderqvist G. Estrogen and progesterone receptor content in breast epithelial cells from healthy women during the menstrual cycle/ Soderqvist G., Von Schoultz B., Tani E. [et al.]//Am J Obstet Gynecol.-1993.-168.-p.p.874-879.

195. Spicer D.V. The endocrine prevention of breast cancer/ Spicer D.V., Krecker E.A., Pike M.//Cancer Invest.-1995.-13.-p.p.495-504.

196. Spyratos F. Correlation between MIB-1 and other proliferation markers: Clinical implications of the MIB-1 cutoff value/ Spyratos F., Ferrero-Pous M., Trassard M. [et al.]// Cancer.-2002.-94.-p.p.2151-2159.

197. Starborg M. The murine Ki-67 cell proliferation antigen accumulates in the nucleolar and heterochromatic regions of interphase cells and at the periphery of the mitotic chromosomes in a process essential for cell cycle progression/ Starborg M., Gell K., Brundell E. [et al.]// J Cell Sci.-1996.-109.-p.p.l43-153.

198. Stivastava P. Chorionic gonadotropin inhibits rat mammary carcinogenesis through activation of programmed cell death/ Stivastava P., Russo J., Russo I.H.// Carcinogenesis.-1997.-l 8.-p.p. 1799-808.

199. Tate C.R. Targeting triple-negative breast cancer cells with the histone deacetylase inhibitor panobinostat/ Tate C.R., Rhodes L.V., Segar H.C. [et al.]// Breast Cancer Research.-2012.-V.14.-R79.

200. Teo N.B. Vascular density and phenotype around ductal carcinoma in situ (DCIS) of the breast/ Teo N.B., Shoker B.S., Jarvis C. [et al.]// Br J Cancer. -2002.-86.-p.p.905-911.

201. Thor A.D. Comparison of mitotic index, in vitro bromodeoxyuridine labeling, and MIB-1 assays to quantitate proliferation in breast cancer/ Thor A.D., Liu S., Moore D.H. [et al.]//J Clin C)ncol.-1999.-17.-p.p.470-477.

202. Toi M. Tumor angiogenesis is an independent prognostic indicator in primary breast carcinoma/ Toi M., Kashitani J., Tominaga T.// Int. J. Cancer.-1993.-55.-p.p.371-374.

203. Torry R.J. Angiogenesis in the uterus: potential regulation and relation to tumor angiogenesis/ Torry R.J. and Rongish B.J.// Am. J. Reprod. Immunol.-1992.-27.-p.p. 171-179.

204. Trihia H. Ki-67 expression in breast carcinoma: Its association with grading systems, clinical parameters, and other prognostic factors-a surrogate marker?/ Trihia H., Murray S., Price K. [et al.]// Cancer.-2003.-97.-p.p. 1321-1331.

205. Untch M. Negative steroid receptors are a good predictor for response to preoperative chemotherapy in breast cancer (BC) - results of a randomized trial/ Untch M., Kahlert S., Moebus V. [et al.]// Proc. Am. Soc. Oncol.-2003.-22.-abstract 35.

206. Urruticoechea A. Proliferation Marker Ki-67 in Early Breast Cancer/Urruticoechea A., Smith I.E., Dowsett M.// J Clin C)ncol.-2005.-23(28).-p.p.7212-20.

207. Walker R.A. Immunohistochemistry and Breast Cancer. Diagnosis, Therapy and Prognosis/ Walker R.A., Harris A.L., Balslev E.// Corporate Headquartes Denmark.-2004.-p.23.

208. Weidner N. Tumor angiogenesis and metastasis: correlation in invasive breast carcinoma/ Weidner N., Semple J.P., Welch W.R. [et al.]// N. Engl. J. Med.-1991.-324.-p.p.l-8.

209. Wintzer H.O. Ki-67 immunostaining in human breast tumors and its relationship to prognosis/ Wintzer H.O., Zipfel I., Schulte-Monting J. [et al.]// Cancer.-1991 .-67.-p .p .421-428.

210. Wren B.G. The origin of breast cancer/ Wren B.G.// Menopause.-2007.-14(6).-p.p. 1060-1068.

211. Yamauchi H. When is a tumor marker ready for prime time? A case study of c-erbB-2 as a predictive factor in breast cancer/ Yamauchi H., Stearns V., Hayes D.F.// J. Clin. Oncol.-2001.-V.19.-p.p.2334-2356.

212. Zolota V. Micro vessel density, proliferation activity, p53 and bcl-2 expression in in situductal carcinoma of the breast/ Zolota V., Gerekosta A., Melachrinou M. [et al.]// Anticancer Res.-1999.-19.-p.p.3269-3274.

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

1. Рисунок 1. Внутриклеточная блокировка активаторов пролиферации прогестероном...........................................................................17

2. Рисунок 2.HER-2/neu - тирозинкиназный трансмембранный рецептор из семейства ERBB состоит из трех доменов...................................18

3. Рисунок 3. Механизм воздействия стероидных гормонов на развитие карциномы молочной железы.......................................................20

4. Рисунок 4. Схема активации пролиферации при воздействии молекул эстрогена..................................................................................21

5. Рисунок 5. Схема подтипов фенотипа карцином молочной железы по признаку экспрессии HER2/neu......................................................24

6. Рисунок 6. Схема прогрессии опухолевого подтипа путем

мутации....................................................................................28

7. Рисунок 7 А. Экспрессия KI-67 в инфильтративной карциноме молочной железы со степенью пролиферации 10% опухолевых

клеток.......................................................................................34

8. Рисунок 7 Б. Экспрессия KI-67 в инфильтративной карциноме молочной железы со степенью пролиферации 30% опухолевых

клеток.......................................................................................35

9. Рисунок 7 В. Экспрессия KI-67 в инфильтративной карциноме молочной железы со степенью пролиферации 50% опухолевых клеток.....36

10. Рисунок 8. Распределение пациентов с карциномой молочной железы в соответствии с уровнем экспрессии Estrogen receptor (в %)..................39

11. Рисунок 9 А. Инфильтративная карцинома молочной железы с минимальной степенью экспрессии Estrogen receptor на клетках опухоли....................................................................................4

12. Рисунок 9 Б. Инфильтративная карцинома молочной железы со средней степенью экспрессии Estrogen receptor на клетках опухоли...................41

13. Рисунок 9 В. Инфильтративная карцинома молочной железы с сильной

степенью экспрессии Estrogen receptor на клетках опухоли...................42

14. Рисунок 9 Г. Инфильтративная карцинома молочной железы с максимальной степенью экспрессии Estrogen receptor на клетках опухоли...................................................................................43

15. Рисунок 10. Распределение пациентов с карциномой молочной железы в соответствии с уровнем экспрессии Progesterone receptor (в %)...........44

16. Рисунок 11 А. Инфильтративная карцинома молочной железы с минимальной степенью экспрессии Progesterone receptor на клетках опухоли....................................................................................45

17. Рисунок 11 Б. Инфильтративная карцинома молочной железы с низкой степенью экспрессии Progesterone receptor на клетках опухоли..............46

18. Рисунок 11В. Инфильтративная карцинома молочной железы со средней степенью экспрессии Progesterone receptor на клетках опухоли...47

19. Рисунок 11 Г. Инфильтративная карцинома молочной железы с сильной степенью экспрессии Progesterone receptor на клетках опухоли ..48

20. Рисунок 12. Распределение пациентов с карциномой молочной железы

в соответствии с уровнем экспрессии Нег-2/пеи (в %).........................50

21. Рисунок 13 А. Инфильтративная карцинома молочной железы со слабой экспрессией НЕЯ-2/пеи на клетках опухоли..............................51

22. Рисунок 13 Б. Инфильтративная карцинома молочной железы со средней экспрессией НЕК-2/пеи на клетках опухоли............................52

23. Рисунок 13 В. Инфильтративная карцинома молочной железы с сильной (3+) экспрессией НЕК-2/пеи на клетках опухоли......................53

24. Рисунок 14 А. Карцинома молочной железы. Экспрессия эндотелиального фактора роста сосудов (УЕСЕ).................................58

25. Рисунок 14 Б. Карцинома молочной железы. Экспрессия рецептора к эндотелиальному фактору роста сосудов (УЕОЕЯ)..............................59

26. Рисунок 14 В. Карцинома молочной железы. Экспрессия СБЗ1.........60

27. Рисунок 14 Г. Карцинома молочной железы. Экспрессия CD34..........61

28. Рисунок 15. Распределение пациентов с карциномой молочной железы в соответствии с процентом клеток, экспрессирующих KI-67.................64

29. Рисунок 16 А. Карцинома молочной железы со степенью пролиферации 10% опухолевых клеток......................................................................65

30. Рисунок 16 Б. Карцинома молочной железы со степенью пролиферации 30% опухолевых клеток....................................................................66

31. Рисунок 16 В. Карцинома молочной железы со степенью пролиферации 50% опухолевых клеток................................................................67

32. Рисунок 17. Нарушение в опухолевых клетках отрицательной обратной связи онкогенных RAS сигналов приводящее к устойчивой пролиферации клеток.....................................................................................78

33. Рисунок 18. Димеризация HER-2 и EGFR рецепторов приводит к пролиферации клетки...................................................................80

34. Рисунок 19. Сигнальный путь ERa увеличивает пролиферацию.........82

35. Рисунок 20. Общая схема регуляции пролиферативных процессов в клетке карциномы молочной железы................................................84

36. Рисунок 21. Связь VEGFR с ангиогенезом и пролиферацией..............85

37. Таблица 1. Иммуногистохимические подтипы карциномы молочной железы.....................................................................................25

38. Таблица 2. Количественная характеристика исследуемых групп случаев карциномы молочной железы........................................................31

39. Таблица 3. Корреляция значений Estrogen и Progesterone receptor по группам экспрессии.....................................................................54

40. Таблица 4. Средние значения уровня экспрессии Estrogen в ткани карциномы молочной железы у пациентов разных групп........................55

41. Таблица 5. Средние значения уровня экспрессии Progesterone в ткани карциномы молочной железы у пациентов разных групп........................56

42. Таблица 6. Особенности васкуляризации в ткани инфильтративной карциномы молочной железы........................................................62

43. Таблица 7. Рецеиторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67...........................................................................................68

44. Таблица 8 . Рецепторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67 с экспрессией рецепторов и HER-2 /пей.........................................69

45. Таблица 9. Рецепторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67 с экспрессией Estrogen receptor.......................................................70

46. Таблица 10. Рецепторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67 с экспрессией Progesterone receptor..............................................71

47. Таблица 11. Рецепторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67 с экспрессией Estrogen receptor и Progesterone receptor......................72

48. Таблица 12.Рецепторный статус карциномы в группах экспрессии KI-67 с экспрессией рецепторов HER-2 /пей..........................................73

49. Таблица 13. Зависимость процессов ангиогенеза от пролиферативной активности инфильтративной карциномы молочной железы...................75