Свойства и регуляция активности аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы в условиях интенсификации свободнорадикального окисления в печени крыс при токсическом гепатите тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Андреещева, Екатерина Михайловна

• Андреещева, Екатерина Михайловна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Андреещева, Екатерина Михайловна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 16 1.1 Токсическое поражение печени, патогенез и клиническая картина

1.1.1 Общая характеристика гепатитов

1.1.1.1 Токсические гепатиты и вызывающие их факторы

1.1.1.2. Морфологическая картина печени при ее токсических поражениях

1.1.1.3. Патобиохимия изменений печени при токсических гепатитах

1.1.1.4. Создание модели токсического гепатита при помощи СС1|

1.1.2. Защита печени от ксенобиотиков

1.1.3. Биохимические аспекты влияния ацетилсалициловой кислоты

1.2.Свободнорадикальное окисление

1.2.1. Роль свободнорадикального окисления в развитии патологических состояний

1.2.2. Пероксидное окисление липидов

1.2.3. Механизмы образования активных форм кислорода

1.2.4. Роль и функции активных форм кислорода

1.2.5.Системы защиты организма от действия активных форм кислорода 36 1.2.5.1 .Ферментативные антиоксидантные системы 38 1.2.5.2. Неферментативные антиоксидантные системы

1.3. Функционирование аконитатгидратазы 47 1.3.1. Распространение и функции аконитатгидратазы 47 1.3.1.1. Катализируемая реакция

1.3.1.2. Распространение аконитатгидратазы и ее участие в метаболических процессах

1.3.2. Изоформы и внутриклеточная локализация аконитатгидратазы

1.3.3. Очистка и структура аконитатгидратазы

1.3.3.1. Очистка и стабильность аконитатгидратазы из различных источников

1.3.3.2. Молекулярная масса и структура аконитатгидратазы

1.3.4. Кинетическое поведение и регуляция активности аконитатгидратазы

1.3.4.1. Зависимость активности аконитатгидратазы от концентрации субстратов, рН и температуры

1.3.4.2. Регуляция активности аконитатгидратазы

1.3.4.2.1. Активаторы

1.3.4.2.2. Ингибиторы 58 1.4. Распространение и функции изоцитратдегидрогеназы

1.4.1. Катализируемая реакция

1.4.2. Участие изоцитратдегидрогеназы в метаболических процессах

1.4.3. Распространение и внутриклеточная локализация НАДФ -изоцитратдегидрогеназы

1.4.4. Очистка и структура НАДФ - зависимой изоцитратдегидрогеназы

1.4.4.1. Очистка

1.4.4.2. Молекулярная масса и структура НАДФ-изоцитратдегидрогеназы

1.4.5. Кинетические параметры и регуляция активности

НАДФ — изоцитратдегидрогеназы

1.4.5.1. Зависимость активности изоцитратдегидрогеназы от концентрации субстрата и коферментов

1.4.5.2. Влияние температуры и рН на скорость ферментативной реакции, катализируемой НАДФ-изоцитратдегидрогеназой

1.4.6. Регуляция активности НАДФ - зависимой изоцитратдегидрогеназы

1.4.6.1. Активаторы

1.4.6.2. Ингибиторы

1.4.7. Механизмы регуляции активности НАДФ -изоцитратдегидрогеназы

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1.Получение сыворотки крови и тканевого гомогената

2.2.2. Создание модели экспериментального токсического гепатита у крыс

2.2.3. Введение ацетилсалициловой кислоты

2.2.4. Оценка оксидативного статуса

2.2.4.1. Определение содержания диеновых конъюгатов

2.2.4.2. Определение содержания малонового диальдегида 79 2.2.4.3 Определение интенсивности биохемилюминесценции

2.2.5. Определение содержания железа

2.2.6. Определение содержания кальция

2.2.7. Определение активности ферментов

2.2.8. Выделение клеточных органелл

2.2.9. Определение содержания белка

2.2.10. Выделение и очистка ферментов

2.2.10.1. Фракционирование белков при помощи сульфата аммония

2.2.10.2. Гель-фильтрация

2.2.10.3. Ионообменная хроматография

2.2.11. Исследование кинетических характеристик и регуляции активности ферментов

2.2.12. Аналитический электрофорез

2.2.13. Определение молекулярной массы

2.2.14. Статистическая обработка экспериментальных данных

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ОКСИДАТИВНОГО СТАТУСА И СОДЕРЖАНИЯ ЖЕЛЕЗА И КАЛЬЦИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ТКАНИ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

3.1. Интенсивность свободнорадикального окисления в сыворотке крови и субклеточных фракциях печени крыс

3.2. Содержание железа и кальция в сыворотке крови и печени контрольных и подвергнутых токсическому гепатиту крыс

ГЛАВА 4. СУБКЛЕТОЧНАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ, РАЗДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА РАЗЛИЧНЫХ ИЗОФОРМ АКОНИТАТГИДРАТАЗЫ И НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ НОРМАЛЬНОЙ И ПОРАЖЕННОЙ ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ ПЕЧЕНИ КРЫС

4.1. Распределение активностей аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы в субклеточных фракциях печени крыс

4.2. Очистка различно локализованных форм аконитатгидратазы из печени контрольных и подвергнутых экспериментальному токсическому гепатиту крыс

4.3. Очистка цитоплазматической и митохондриапьной НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крысы

4.4. Изоферментные спектры аконитатгидратазы и НАДФ-изо-цитратдегидрогеназы из печени крыс в норме и при патологии

ГЛАВА 5. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И КИНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АКОНИТАТГИДРАТАЗЫ И НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КОНТРОЛЬНЫХ И ПОДВЕРГНУТЫХ ТОКСИЧЕСКОМУ ГЕПАТИТУ КРЫС

5.1. Молекулярная масса и субъединичный состав различных изоформ аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из нормальной и пораженной токсическим гепатитом печени крыс

5.2. Кинетические параметры каталитического действия аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крыс 1!

5.3. Термостабильность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крыс в норме и при патологии 1!

5.4. Влияние температуры на активность различных изоформ аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитразы из печени крыс

5.5. Влияние рН на активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крыс в норме и при токсическом гепатите

ГЛАВА 6. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ АКОНИТАТГИДРАТАЗЫ И НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ

6.1. Исследование влияния компонентов реакции Фентона на активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крыс

6.1.1. Влияние ионов Ре2+ на активность ферментов

6.1.2. Влияние пероксида водорода на активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы

6.2. Исследование влияния компонентов глутатионпероксидазной / глутатионредуктазной системы на активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы

6.3. Исследование влияния ряда ионов металлов на активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы

6.4. Регуляция активности аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы с помощью ряда интермедиатов клеточного метаболизма

6.4.1. Участие метаболитов цикла Кребса в регуляции активности аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы

6.4.2. Участие нуклеотидфосфатов в регуляции активности ферментов

ГЛАВА 7. ВЛИЯНИЕ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ НА ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ, СОДЕРЖАНИЕ ЖЕЛЕЗА, КАЛЬЦИЯ И АКТИВНОСТИ АКОНИТИТГИДРАТАЗЫ И НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ В ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

7.1. Изменение интенсивности процессов свободнорадикального окисления при введении ацетилсалициловой кислоты крысам при патологии печени

7.2. Содержание железа и кальция в печени крыс при использовании ацетилсалициловой кислоты

7.3. Активность аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы в печени крыс при применении ацетилсалициловой кислоты

ГЛАВА 8. ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ И АКТИВНОСТИ НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ И АМИНОТРАНСФЕРАЗ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ С ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ

8.1. Интенсивность свободнорадикального окисления в сыворотке крови больных с токсическим гепатитом

8.2. Активность НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аминотрансфераз в сыворотке крови больных с токсическим гепатитом и здоровых доноров

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Свойства и регуляция активности аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы в условиях интенсификации свободнорадикального окисления в печени крыс при токсическом гепатите»

Актуальность проблемы. Важнейшим направлением современной биохимии является изучение функционирования отдельных звеньев клеточного метаболизма в условиях патологии, что способствует выяснению молекулярных основ патогенеза многих болезней.

В настоящее время считают, что ведущим патогенетическим фактором при развитии ряда заболеваний печени является дисбаланс между интенсивностью процессов свободнорадикального окисления (СРО) и функциональной активностью антиоксидантных систем (АОС) организма (Пескин, 1999). Как известно, основными механизмами активации СРО служат, с одной стороны, значительное увеличение выработки активных форм кислорода (АФК), а с другой стороны - высвобождение каталитически активных ионов Бе из вне- и внутриклеточных депо (Осипов, 1990; Владимиров, 2000). Увеличение внутриклеточного содержания кальция также способствует возрастанию темпов СРО путем воздействия на функционирование ряда ферментов, в частности, НАДФН-оксидазу, индуцирующую образование супероксидного радикала (Гусев, 1998; Ткачук, 1998). АФК могут образовываться в клетках в ходе нормальных метаболических реакций, однако, их содержание значительно повышается вследствие недостаточности снабжения тканей кислородом (Скулачев, 1996). Чрезмерное накопление АФК и связанное с этим усиление процессов СРО сопровождается нарушениями в свойствах биомембран и функционировании клеток, что приводит к окислительному стрессу (Кулинский, 1999; Владимиров, 2000).

Интенсивность СРО поддерживается на стационарном уровне сложной системой антиоксидантной защиты (АОЗ) (Владимиров, 1972; Кузьменко, 1997; Шишкина, 2000), важнейшим компонентом которой является глутатионредуктазная / глутатионпероксидазная (ГР/ГП) система (Владимиров, 1972). Благодаря функционированию ГР/ГП системы в клетках млекопитающих обеспечивается детоксикация Н2О2, являющегося основным источником гидроксильного радикала, образующегося в реакции Фентона в присутствии ионов Fe2+ (Осипов, 1990; Skulachev, 1997). Активность ГР/ГП системы в основном зависит от уровня НАДФН в клетке, который является одним из продуктов реакции, катализируемой НАДФ-изоцитратдегидрогеназой (КФ 1.1.1.42; НАДФ-ИДГ), обеспечивающей окислительное декарбоксилирование изоцитрата до 2-оксоглутарата. Однако в настоящее время мало что известно об участии НАДФ-ИДГ в генерировании НАДФН для ГР/ ГП системы. Предполагают возможность сопряжения функционирования НАДФ-ИДГ и ГР/ГП АОС в условиях ишемического повреждения миокарда крыс (Медведева, 2002). Об этом же свидетельствуют данные об активации НАДФ-ИДГ в тканях млекопитающих при ишемии и гипоксии различного генеза (Gromek, 1977; Jonadet, 1976; Penny, 1975). Существуют данные по взаимосвязи между степенью стимуляции функционирования НАДФ-ИДГ и глубиной и длительностью ишемического воздействия (Falholt, 1974). Предполагается, что важное значение для антиоксидантного потенциала имеет уровень цитрата, от содержания которого зависит интенсивность образования гидроксильного радикала в реакции Фентона. Цитрат обладает хелатирующими свойствами по отношению к Fe'T (Skulachev, 1997). В этой связи значительный интерес представляет функционирование аконитатгидратазы (КФ 4.2.1.3; АГ), катализирующей превращение цитрата в изоцитрат. Однако^/ данные об особенностях функционирования и возможном участии АГ в лимитировании уровня АФК фрагментарны, а её роль в повышении АО потенциала при патологии печени печени путём регуляции уровня цитрата в клетке практически не изучена.

Таким образом, нельзя исключить, что в гепатоцитах НАДФ-ИДГ может быть альтернативным источником восстановительных эквивалентов для ГР/ГП ферментной системы, дополняющим уровень НАДФН, обеспечиваемый пентозофосфатным путем и, возможно, также другими ферментативными системами. АГ, по-видимому, может выступать в качестве регулятора уровня цитрата, выступающего в роли хелатора ионов Ре2+.

Исследования, посвященные функционированию АГ и НАДФ-ИДГ в условиях интенсификации СРО, могли бы способствовать созданию фундаментальных представлений о молекулярных механизмах лимитирования образования АФК в патологическом состоянии. Вместе с тем, практическим аспектом данной проблемы является поиск доступных и достаточно эффективных лекарственных препаратов для лечения данного заболевания. В этой связи, следует отметить, что наряду с тем, что ацетилсалициловая кислота (АСК) широко используется при лихорадочных состояниях, головной боли, невралгии, для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения по ишемическому типу, тромбозов и инфаркта миокарда (Машковский, 1998; Алехин, 1999; Исаков, 2000), имеются данные о гепатопротекторном действии АСК при повреждении печени ССЦ (Щекина, 2003). Поэтому исследования особенностей протекания СРО и функционирования АГ и НАДФ-ИДГ в печени крыс в условиях токсического гепатита, а также при использовании АСК в качестве гепатопротектора могут способствовать решению актуальной проблемы регуляции образования АФК в патологическом состоянии.

Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось исследование интенсивности процессов СРО, содержания железа и кальция, свойств и регуляции активности различно локализованных форм АГ и НАДФ-ИДГ в печени крыс ЯаМт гаМш Ь. в норме, при экспериментальном токсическом гепатите и гепатопротекторном действии АСК.

В связи с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Определение интенсивности процессов СРО в субклеточных фракциях печени и сыворотке крови крыс в норме и при экспериментальном токсическом гепатите.

2. Оценка уровня железа и кальция в субклеточных фракциях печени и сыворотке крови крыс контрольной группы и животных, подвергнутых токсическому гепатиту.

3. Определение активностей, субклеточного распределения АГ и НАДФ-ИДГ, получение высокоочищенных ферментных препаратов различно локализованных форм ферментов из печени крыс в норме и при патологии.

4. Сравнительная характеристика кинетических параметров каталитического действия различных изоформ АГ и НАДФ-ИДГ из печени контрольных крыс и животных с токсическим гепатитом.

5. Изучение регуляции активностей цитоплазматических и митохондриальных форм АГ и НАДФ-ИДГ из печени крыс в норме и в патологическом состоянии.

6. Исследование влияния АСК на процессы СРО и активности АГ и НАДФ-ИДГ при развитии токсического гепатита у крыс.

7. Оценка интенсивности СРО, активностей АГ и НАДФ-ИДГ в сыворотке крови больных с токсическим гепатитом.

8. Создание гипотетической модели возможного участия АГ и НАДФ-ИДГ в лимитировании образования АФК при оксидативном стрессе, вызванном токсическим гепатитом с учетом особенностей функционирования данных ферментов.

Научная новизна. Впервые проведены комплексные исследования интенсивности процессов СРО, изменения содержания железа и кальция и функционирования различных изоформ АГ и НАДФ-ИДГ в условиях нормы и патологии печени, вызванной гепатотропным токсином. Показано, что при токсическом гепатите наряду с увеличением интенсивности процессов СРО, уровня железа и кальция в субклеточных фракциях гепатоцитов и сыворотке крови крыс происходит снижение активности цитоплазматической и митохондриальной форм АГ и возрастание активности этих форм НАДФ-ИДГ. Разработаны эффективные способы выделения и получены гомогенные препараты различно локализованных изоформ АГ и НАДФ-ИДГ из печени крыс с токсическим гепатитом. Впервые дана сравнительная характеристика каталитических свойств и регуляции активности данных ферментов в норме и при экспериментальном токсическом гепатите. Обосновывается положение об их участии в лимитировании образования АФК в условиях окислительного стресса. Показано, что контроль выработки АФК может достигаться за счет модификации активностей данных ферментов путем изменения регуляции их активности под действием субстратов, компонентов реакции Фентона, ионов Са , окисленного и восстановленного глутатиона. Участие данных ферментов в лимитировании СРО, подтверждается исследованиями гепатопротекторного действия АСК и ее влиянием не только на темпы СРО, но и на активности АГ и НАДФ-ИДГ. Полученные данные расширяют и углубляют фундаментальные представления об организации, регуляции и механизмах сопряжения образования АФК с функционированием ключевых ферментов метаболизма в условиях нормы и патологии печени. Показано возрастание изменение активности НАДФ-ИДГ и интенсивности СРО в сыворотке крови больных с токсическими гепатитами различной этиологии. Выявлено, что НАДФ-ИДГ-тест является более чувствительным в сравнении с традиционными аминотрансферазными тестами, применяемыми при диагностике заболеваний печени.

Практическая значимость. Полученные данные позволяют расширить фундаментальные представления о функционировании ключевых ферментов центрального метаболизма в условиях патологии. Изучение особенностей каталитического действия АГ и НАДФ-ИДГ при токсическом гепатите, способствует выяснению механизмов лимитирования образования АФК, что имеет значение для понимания развития патологического состояния и путей его коррекции в медицинской практике.

Разработанные способы получения высокоочищенных препаратов АГ и НАДФ-ИДГ из печени крысы могут быть использованы для получения ферментных препаратов в производственных и лабораторных условиях. Полученные данные могут служить основой для рекомендаций о введении дополнительных лабораторных тестов в клинико-диагностических лабораториях для выявления и оценки тяжести патологий печени разной этиологии - как по изменению активности НАДФ-ИДГ, так и интенсивности процессов СРО. Материалы работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного университета при чтении лекций по биохимии, а также в спецкурсах по энзимологии и аналитической биохимии. Кроме того, они используются при проведении практикумов и выполнении курсовых и дипломных работ.

Апробация работы. Материалы, полученные в ходе выполнения диссертационной работы представлены на Всероссийской конференции молодых ученых "Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины" (Воронеж, 2000), Всероссийской конференции "Клеточная биология на пороге XXI века" (Санкт-Петербург, 2000), Второй Всероссийской конференции "Физика в биологии и медицине" (Екатеринбург, 2001), 5ой, 6ой и 7ой Пущинских школах-конференциях молодых ученых "Биология - наука 21го века" (Пущино, 2001, 2002, 2003), 34-м Интернациональном конгрессе физиологических наук (Новая Зеландия, 2001), II Международном симпозиуме "Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии" (Москва, 2001), 27 Конференции Федерации Европейских биохимических обществ (Лиссабон, Португалия, 2001), III съезда Биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), Всероссийской конференции "Проблемы медицинской энзимологии" (Москва, 2002), Межрегиональной Научно-методической конференции "Фармобразование-2003" (Воронеж, 2003), Конференции "Перспективы развития теоретической и практической медицины" (Воронеж, 2003), ежегодной научной отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского государственного университета (2003).

Публикации. Основные результаты настоящей диссертационной работы изложены в 20 публикациях - в 7 статьях и 13 тезисах.

На защиту выносятся следующие положения:

1. При токсическом гепатите в условиях интенсификации СРО и увеличения содержания железа и кальция, происходит снижение активности АГ и возрастание активности НАДФ-ИДГ в цитоплазматической и митохондриальной фракциях печени крыс. С использованием гомогенных ферментных препаратов различно локализованных форм АГ и НАДФ-ИДГ показано, что в патологическом состоянии изменяется ряд кинетических параметров и регуляции активности ферментов под действием компонентов реакции Фентона, ГР/ГП системы, ионов Са2+, метаболитов цикла Кребса и некоторых неклеотидфосфатов.

2. Ряд модификаций регуляторных механизмов цитоплазматической и митохондриальной АГ, возникающих при токсическом гепатите: возрастание степени торможения Н2О2, восстановленным глутатионом могут способствовать подавлению активности и накоплению цитрата, обеспечивающего антиоксидантный эффект за счет хелатирования Ре .

3. Для регуляции активности НАДФ-ИДГ из пораженной токсическим гепатитом печени крыс характерно возникновение изменений (снижение

2+ чувствительности к ингибирующему действию Н2О2, ионов Са , стимуляция активности окисленным глутатионом), способствующих активации фермента и, как следствие, усилению генерирования НАДФН, необходимого для ГР/ГП АОС.

4. Показано, что использование АСК в качестве гепатопротектора при токсическом гепатите приводит к снижению интенсивности СРО, уровня железа и кальция, и изменению активностей АГ и НАДФ-ИДГ в сторону их величин в норме.

5. С учетом особенностей функционирования АГ и НАДФ-ИДГ при токсическом гепатите предложена гипотетическая схема, отражающая их участие в регуляции лимитирования образования АФК

Структура и объем работы. Диссертация представлена на 273 страницах текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения полученных результатов (8 глав), заключения, выводов, списка литературы (352 источника) и приложения. Иллюстрационный материал включает 34 рисунка и 19 таблиц; приложение включает 44 рисунка и 5 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Андреещева, Екатерина Михайловна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что экспериментальный токсический гепатит сопровождается интенсификацией СРО, возрастанием содержания железа и кальция и мобилизацией АОС организма как в сыворотке крови, так и в цитоплазматической и митохондриальной фракциях печени крыс. При этом в цитоплазме и митохондриях происходит снижение активности АГ в 2,0 и 2,2 раза и увеличение активности НАДФ-ИДГ в 1,6 и 1,4 раза соответственно.

2. Исследования, проведенные с использованием гомогенных ферментных препаратов различно локализованных форм АГ и НАДФ-ИДГ, показали, что наряду со сходными свойствами (молекулярные массы, электрофоретические подвижности и др.), имеют место и различия в кинетических параметрах и регуляторных свойствах ферментов в норме и патологическом состоянии, вызванном ССЦ.

3. При токсическом гепатите происходит изменение сродства ферментов к субстратам, рН- и температурных оптимумов. АГ из печени контрольных крыс была более термостабильна, а НАДФ-ИДГ менее термостабильна по сравнению с ферментами из пораженной печени.

4. Компоненты реакции Фентона: Ре2+ и Н2О2, могут участвовать в регуляции активностей АГ и НАДФ-ИДГ. Активирующий эффект ионов Ре на цито плазматическую и митохондриальную АГ характеризуется более высокими значениями Ка в патологическом состоянии по сравнению с нормой. Как на цито плазматическую, так и митохондриальную НАДФ-ИДГ ионы Ре2+ оказывают ингибирующий эффект. Тормозящий эффект Н2О2 на АГ в большей степени выражен при патологии, а на НАДФ-ИДГ в норме.

5. Ионы Са оказывают более сильный ингибирующий эффект на цитоплазматическую и митохондриальную формы АГ из пораженной токсическим гепатитом печени крыс по сравнению с нормой. Ингибирующее действие ионов Са на цитоплазматическую и митохондриальную НАДФ-ИДГ менее выраженное в патологическом состоянии (К1=0,25 и 0,36 для цитоплазматической и 0,17 и 0,46 для митохондриальной НАДФ-ИДГв норме и при токсическом гепатите соответственно).

6. Для регуляции активностей АГ и НАДФ-ИДГ из печени контрольных и подвергнутых токсическому гепатиту животных под действием Г-SH и Г-SS-T характерны отличия. Так, Г-SH ингибировал цитоплазматические формы АГ и НАДФ-ИДГ, причем, при патологии данный эффект был выражен сильнее. Г-SS-Г активировал цитоплазматические формы ферментов в патологическом состоянии.

7. В норме и при токсическом гепатите ряд метаболитов ЦТК: 2-оксоглутарат, сукцинат, малат, оксалоацетат, цитрат, оказывают разное влияние на активности АГ и НАДФ-ИДГ. Различия характерны также для действия нуклеотидфосфатов. АТФ, АДФ, АМФ более значительно активируют АГ из нормальной печени крыс. Ингибирующий эффект АТФ и АДФ на НАДФ-ИДГ в большей степени выражен при патологии.

8. Установлено, что при применении АСК в качестве гепатопротектора при токсическом поражении печени ССЦ, происходит снижение интенсивности СРО, уровня железа и кальция и изменение активностей АГ и НАДФ-ИДГ в сторону их значений в норме.

9. Показано, что в сыворотке крови больных с токсическими гепатитами различной этиологии наряду с возрастанием активностей аминотрансфераз происходило увеличение активности НАДФ-ИДГ и интенсивности СРО. Определение активности НАДФ-ИДГ характеризовалось большей диагностической чувствительностью, специфичностью и эффективностью.

10. С учетом особенностей каталитического действия АГ и НАДФ-ИДГ при токсическом поражении печени ССЦ предложена гипотетическая модель участия данных ферментов в лимитировании образования АФК путем изменений концентраций цитрата и Г-SH в клетке.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные нами данные свидетельствуют об интенсификации процессов СРО в ткани печени и крови при токсическом гепатите. В патологическом состоянии происходило увеличение содержания первичных и вторичных продуктов ПОЛ как в субклеточных фракциях печени, так и в сыворотке крови экспериментальных животных. Параметры биохемилюминесценции, отражающие степень изменения СРО: светосумма и интенсивность максимальной вспышки также возрастали. Вместе с тем, при патологии печени происходила интенсификация работы АОС. Наряду с этим, наблюдалось увеличение содержания железа и кальция, что, в свою очередь, способствовало нарастанию темпов СРО путем "запуска" реакции Фентона ионами двухвалентного железа, с одной стороны, и активации с помощью Са2+-зависимых протеинкиназ НАДФН-оксидазы, способствующей образованию супероксидных радикалов, с другой стороны. Супероксидные радикалы, как известно, в свою очередь, дают начало образованию Н202, индуцирующему образование самой опасной АФК - ОН*, в фентоновской реакции.

В то же время, при патологии происходило уменьшение активности АГ в цитоплазматической и митохондриальной фракциях в 2,0 и 2,2 раза соответственно, в сравнении с активностью фермента из печени контрольных крыс. Снижение активности АГ было также выявлено при гипероксии легких (Manjula, 1993), инфаркте миокарда (Gardner, 1994) и при экспериментальной ишемии миокарда у крыс (Медведева, 2002). Это, по-видимому, могло способствовать накоплению цитрата в клетках печени и, как следствие, хелатированию ионов Fe2+, способствующих образованию ОН* в реакции Фентона. Накопление цитрата могло также способствовать торможению образования АФК в ходе неполного восстановления кислорода в дыхательной цепи за счет блокировки начальных этапов цикла Кребса (Скулачев, 1998). Наряду с этими изменениями, происходила активации НАДФ-ИДГ в цитоплазматической и митохондриальной фракциях печени крыс: в 1,6 и 1,4 раз соответственно, что согласуется с данными об активации данного фермента при гипоксии и ишемии в гомогенатах печени, мозга, плазме крови крыс (Jonadet, 1976; Weber, 1977). Возможно, это способствовало генерированию НАДФН в клетках печени, требующегося для поддержания субстрата ГП/ГР АОС — глутатиона, в восстановленной форме.

Установлено, что при токсическом гепатите ряд физико-химических свойств АГ и НАДФ-ИДГ не изменялся. Так, значения молекулярных масс, электрофоретической подвижности для ферментов из нормальной и патологически измененной печени совпадали. Полученные данные позволяют предполагать, что изменения активностей ферментов при патологии не сопряжены с реализацией ассоциативно-диссоциативного механизма регуляции активности, связанного с изменениями субъединичного состава АГ и НАДФ-ИДГ. В то же время, с использованием гомогенных ферментных препаратов было показано, что при экспериментальном токсическом гепатите происходили изменения как кинетических параметров действия различных изоформ АГ и НАДФ-ИДГ, так и их регуляторных свойств. При токсическом гепатите наблюдали увеличение сродства цитоплазматической АГ к цитрату и изоцитрату в 2,3 и 2,8 раз. Сродство митохондриальной АГ возрастало к цитрату в 1,4 раза; вместе с тем, значительного изменения сродства к изоцитрату не происходило. При патологии изменялось также сродство НАДФ-ИДГ к субстратам. Сродство цитоплазматической НАДФ-ИДГ к НАДФ в 2,5 раза ниже в норме по сравнению с ферментом из пораженной токсическим гепатитом печени. Для митохондриального фермента происходило увеличение сродства к изоцитрату при патологии в 1,4 раз и возрастание сродства к НАДФ в 1,8 раз, что, вероятно, связано с изменением НАДФ-ИДГ-активности в патологическом состоянии. Наблюдались также изменения в воздействии температуры и pH на активность ферментов, выделенных из печени животных с токсическим гепатитом по сравнению с нормой. Показано, что цитоплазматическая и митохондриальная АГ из печени контрольных крыс более устойчива, а НАДФ-ИДГ менее устойчива к воздействию температурного фактора по сравнению с ферментами из печени пораженной токсическим гепатитом. рН-Оптимумы сдвигались в кислую сторону, что может быть сопряжено с физиологическими изменениями в клетке, связанными с ацидозом, развивающимся при патологии.

Изменения регуляторных свойств различных изоформ АГ и НАДФ-ИДГ по отношению к компонентам реакции Фентона, ГП/ГР АОС, ионам ряда металлов, интермедиатам цикла Кребса, нуклеотидфосфатам могли свидетельствовать о модификациях основных механизмов регуляции исследованных ферментов в условиях токсического гепатита. Происходящие изменения функционирования АГ и НАДФ-ИДГ, по-видимому, имели существенное значение, так как цитрат, являясь хелатором ионов каталитически активного железа, препятствует образованию гидроксильного радикала в реакции Фентона (БкиксЬеу, 1997), а НАДФН необходим для поддержания субстрата ГП/ГР системы в восстановленной форме (Владимиров, 1972; Осипов, 1990). Следует также подчеркнуть, что образующийся в ГП-реакции Г-БН обладает также независимой АОА, являясь акцептором ОН"-радикала, восстановителем Н202 и гидропероксидов и ингибитором процессов ПОЛ на стадии разветвления цепи (Лукьянова, 1982).

На основании имеющихся данных можно предположить возможное участие АГ и НАДФ-ИДГ в лимитировании уровня АФК в условиях интенсификации процессов СРО при патологии печени, вызванной гепатотропным токсином ССЦ.

Гипотетическая модель, отражающая участие различно локализованных форм АГ и НАДФ-ИДГ в регуляции образования АФК при их чрезмерном накоплении в патологическом состоянии, представлена на рис. 34.

С"> оо

НАДФН+Н"

НЛДФ f О 111

НАДФН+Н r-SS-Г нл;№ r-sH© И

2-ОГ

НЛДФ ичоцитрат

Whaj Л t;

I я

Peamfus

Фглддяд m -г ^, 3 w цитрат А аспартат ■►оксалоадетат малат

II цитоплазма

Внутренняя мембрана митохондрия иируват

Рис. 34. Гипотетическая модель участия аконитатгидратазы и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы в лимитировании уровня активных форм кислорода: 1 этап - интенсификация процессов СРО, возрастание содержания железа и кальция и повреждение клеточных структур печени крыс при токсическом гепатите; II - накопление цитрата, выступающего в роли хелатора ионов железа, при снижении активности аконитатгидратазы и возрастание количества восстановленного глутатиона в результате активации НАДФ-изоцигратдегидрогеназы и усиления генерирования НАДФН для ГР/ГП системы; III - снижение темпов СРО за счет хелатирования Fe" цитратом и стимуляции ГР/ГП системы. Обозначения регуляторных эффектов: действие на аконитатгидратазу - 0 и на НАДФ-изоцитратдегидрогеназу ; а - активирующий эффект, и - ингибирующий эффект, выраженные в большей степени в норме: и при патологии печени [a]Q

Согласно данной схеме, при патологии, наряду с интенсификацией СРО в различных клеточных компартментах, имеет место увеличение концентрации цитрата и Г-БН. Процессы СРО индуцируются прежде всего увеличением содержания ионов Ре2+ (Козлов, 1985) и ионов Са2+ (Владимиров, 1999). Ионы Ре2+ выполняют роль прооксидантов, способствуя запуску цепных свободнорадикальных реакций, приводящих к ПОЛ биомембран и повреждению белков и нуклеиновых кислот (Долгов, 2002), а ионы Са выступают в роли активаторов НАДФН-оксидазы, обеспечивающей образование супероксидного радикала (Гусев, 1998; Ткачук, 1998). Ионы Бе , высвобождающиеся в результате разрушения специфических Ре-содержащих белков и пептидов (ферритина, трансферина, церулоплазмина и др.)» выполняют роль "пусковых" механизмов СРО, особенно ПОЛ на стадиях инициации, продолжения и разветвления цепи, образуя различные радикалы длинноцепочечных жирных кислот (Я, 110*, ЯОг*), способствующих окислению 8Н-групп мембранных белков. В то же время, увеличение концентрации ионов Ре2+ вызывает накопление железа в виде ферритина и гемосидерина, которые, в свою очередь, повреждают лизосомы, способствуя выходу активных лизосомальных ферментов и повреждению клеточных структур. В ходе такого повреждения мембран в патологическом состоянии, очевидно, происходило увеличение содержания Ре2+ и Са2+, провоцирующих образование новых и новых АФК. При этом важна роль перехватчиков ионов Ре - убихинона, токоферола и ряда других соединений (Долгов, 2002). Вместе с тем, существенная роль в процессе снижения концентрации ионов каталитически активного железа отводится цитрату, обладающему хелатирующим эффектом. При торможении скорости АГ-реакции происходит накопление цитрата, и, как следствие, связывание ионов Ре2+. Нами также установлено, что при использовании АСК в качестве гепатопротектора происходило снижение содержания железа и кальция, что, по-видимому, способствовало торможению выработки чрезмерного количества АФК при патологии.

Как показано в наших исследованиях, ионы Са вызывали ингибирование обеих форм АГ, причем, ингибирующее действие данных ионов на активность фермента при патологии выражено в большей степени, что, очевидно, также может способствовать накоплению цитрата как в митохондриях, так и в цитоплазме клетки. Интересно, что ингибирующий эффект ионов Са был выражен в меньшей степени для НАДФ-ИДГ из пораженной токсическим гепатитом печени в сравнении с нормой. Уменьшение эффекта торможения активности могло иметь значение для усиления генерирования НАДФН для ГП/ГР АОС. Ионы Fe2+ активировали цитоплазматическую и митохондриальную АГ. Причем, необходимо отметить, что при токсическом гепатите для активации АГ необходима большая концентрация ионов железа по сравнению с нормой.

Н2О2 оказывал ингибирущее действие на АГ, причем, более выраженное при патологии, что могло способствовать накоплению цитрата в клетке. Ингибирующее действие Н202 на НАДФ-ИДГ, наоборот, менее выражено в патологическом состоянии, что также может способствовать образованию дополнительного количества НАДФН, и, как следствие, нарастанию содержания Г-SH.

Изменение регуляции активностей АГ и НАДФ-ИДГ по отношению к компонентам ГП/ГР АОС, по-видимому, может иметь значение для снабжения НАДФН ГР/ГП АОС при окислительном стрессе. Очевидно, при достаточно высоком уровне Г-SH в клетке происходит подавление окислительного декарбоксилирования изоцитрата, сопровождающегося образованием НАДФН. В то же время, при относительном возрастании содержания Г-SS-T могло иметь место усиление генерирования НАДФН в ходе НАДФ-ИДГ-реакции, что существенно для активации ГР/ГП - системы в условиях усиления СРО. Цитрат, являясь активатором НАДФ-ИДГ также мог способствовать образованию НАДФН, и, как следствие, восстановлению глутатиона.

С одной стороны, блокирование ЦТК на уровне АГ-реакции приостанавливало поступление электронов на конечный акцептор — кислород в электрон-транспортной цепи, а с другой стороны, снижение интенсивности функционирования цитоплазматической АГ способствовало накоплению цитрата внутри клетки, что вело к снижению образования ОН* в реакции Фентона посредством хелатирования ионов Ре2+.

Таким образом, согласно представленной схеме, участие АГ и НАДФ-ИДГ в лимитировании уровня АФК может осуществляться за счет изменений концентраций цитрата и Г-8Н, определяющих интенсивность процессов СРО в различных клеточных компартментах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Андреещева, Екатерина Михайловна, 2003 год

1. Абдулаев Н.Х. Печень при интоксикациях гепатотропными ядами / Н.Х.Абдулаев, Х.Я.Каримов. Ташкент: Медицина УзССР, 1989. - 25с.

2. Абросов А.Н. Справочник практического врача по физиотерапии / А.Н. Абросов. Москва: Изд-во Медицина, 1978. - 312с.

3. Азизова O.A. Хемилюминесцентная оценка антиоксидантного статуса больных атеросклерозом / O.A. Азизова, А.П. Пирязев, М.П. Шерстнев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - Т. 131. -С.524-526.

4. Алехин Е.К. Аспирин: новая жизнь старого лекарства / Е.К. Алехин // Соросовский образовательный журнал. 1999. - №7. - С.85-90.

5. Аликина H.A. Чем мы лечимся / H.A. Аликина, С.А. Шеленкова; Под ред. H.A. Аликина. Пермь: Изд-во Урал-пресс, 1994. - 510с.

6. Бабижаев М.А. Передача клеточного сигнала и модуляция свободно радикального окисления новым пептидомиметиком у глутамил -гистамином / М.А. Бабижаев, Ю.А. Семилетов, Ю.А. Люлькин и др. // Биохимия. - 1999. - Т64, №5. - С.612-627.

7. Баранников В.Л. Способ получения биологически активных веществ, обладающих гепатозащитным действием / В.Л.Баранников, В.Н.Буркова, А.И.Венгеровский. Пат. РФ 2120288. - 1998, кл. 61К30/00.

8. Березов Т.Г. Биологическая химия. 3-е изд. / Т.Г. Березов, Б.Ф. Коровкин. -М.: Медицина, 1998.-704с.

9. Бернхард С. Структура и функция ферментов / С. Бернхард. — М: Мир, 1971 .-334с.

10. Болдырев A.A. Дискриминация между апоптозом и некрозом нейронов под влиянием окислительного стресса / A.A. Болдырев // Биохимия. 2000. -Т.65, №7. - С.981-990.

11. Болдырев A.A. Окислительный стресс и мозг / A.A. Болдырев // Соросовский Образовательный Журнал. 2001. - Т.7, №4. - С.21-28.

12. Болдырев A.A. Проблемы и перспективы исследования биологической роли карнозина / A.A. Болдырев // Биохимия. 2000.-Т.65, №7. - С.884-890.

13. Болдырев A.A. Антиоксидантные системы в тканях мышей линии SAM (Senescence Accelerated Mice), характеризующейся ускоренным процессом старения / A.A. Болдырев, М.О. Юнева, Е.В. Сорокина и др. // Биохимия. -2001.-Т.66, №10. С.1430-1437.

14. Бондаренко Ю.И. Антиоксиданты в защите слизистой оболочки желудка от повреждений при стрессе / Ю.И. Бондаренко // III Всесоюзная конференция "Биоантиоксиданты". 1989. - Т.2. - С.46.

15. Брусков В.И. Образование активных форм кислорода под действием тепла при восстановлении растворённого кислорода воздуха / В.И. Брусков, Ж.К. Масолимов, A.B. Черников // Доклады Академии Наук. 2001. - Т.381, №2. -С.262-264.

16. Бузлама B.C. Методическое пособие по изучению процессов перекисного окисления липидов и систем антиоксидантной защиты организма животных / B.C. Бузлама, М.И. Рецкий, Н.П. Мещеряков и др. Воронеж, 1997.-36с.

17. Буренина Э.А. Изоцитратдегидрогеназы трематод, паразитирующих у крупного рогатого скота, и возможность ингибирования их некоторыми антгельминтными препаратами / Э.А. Буренина // Паразитология. 1998. -Т.32, №5. - С.450-456.

18. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. / Е.Б. Бурлакова, A.B. Алексеенко, Е.М. Молочкина и др. -М.: Наука, 1975.-С.7-100.

19. Бушаев C.B. Исследование некоторых каталитических свойств NADP-специфичной изоцитратдегидрогеназы из ряски Spirodela polyrhiza (L.) / C.B.

20. Бушаев, Т.Н. Попова // Тр. биол. учеб.-науч. базы Воронеж, гос. ун-та "Веневитиново". 1998, №10. - С. 138-143.

21. Бышевский А.Ш. Биохимия для врача / А.Ш. Бышевский, O.A. Терсенов.- Екатеринбург: Уральский рабочий, 1994.-384с.

22. Вартанян JI.C. Образование супероксидных радикалов в мембранах субклеточных органелл регенерирующей печени / JI.C. Вартанян // Биохимия. 1992. - Т.57, №5. - С. 671-675.

23. Вартанян JI.C. Индукция активности СОД в печени мышей / JI.C. Вартанян, С.М Гуревич // Тезисы II Всесоюзной конференции "Биоантиоксиданты". 1986. - Т.2. - С.203-204.

24. Васильева В.О. Роль активных форм кислорода в повреждении / В.О Васильева, В.М. Коробов, М.М. Великий // Украинский биохимический журнал, 1996. Т.68. - С.45-55.

25. BipcTioK Н. Г. Обгрунтування корекщг антралем комплексних виразково-гепатитних сташв / Н. Г. BipcTioK та muii // Матер1али наук.-практ. конф., присвячен. 75-pi44K> УкрФА.- Харюв, 1996. С.265.

26. Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и ^запрограммированная смерть клетки / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный Журнал.- 2000.-Т.6, №9.- С.2-9.

27. Владимиров Ю.А. Кальциевые насосы живой клетки / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный журнал. 1998, №3.-С.20-27.

28. Владимиров Ю.А. Лазерная терапия: настоящее и будущее / Ю.А. Владимиров // Соросовский образовательный журнал. 1999, №12.-С.2-9.

29. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1987.-Т.32, №5.-С.830-844.

30. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный Журнал. 2000. - Т.6, №12. -С.13-19.

31. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, O.A. Азизова, А.И. Деев и др. // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1991. - Т.29.

32. Владимиров Ю.А., Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252с.

33. Гааль Э. Электрофорез в разделении биохимических макромолекул / Э. Гааль. М: Мир, 1982. - 283с.

34. Гавриленко В.Ф. Большой практикум по физиологии растений / В.Ф. Гавриленко, М.Е. Ладыгина, Л.М. Хандобина. М.: Высш. шк., 1975. - 392с.

35. Гамалей И. А. Пострецепторное образование активных форм кислорода в клетках, не являющихся профессиональными фагоцитами / И. А. Гамалей, И.

36. B. Клюбин, И. П. Арнаутова и др. // Цитология. 1999. - Т. 41, № 5. - С.394-399.

37. Гацура В.В. Фармакологическа коррекция энергетического обмена ишемизированного миокарда / В.В. Гацура. М.: Антекс, 1993. — 254с.

38. Говорова Н. Ю. Окислительное повреждение эритроцитов миелопероксидазой, защитное действие сывороточных белков / Н. Ю. Говорова, Б. П. Шаронов, С. Н. Лызлова // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1989. Т. 108, № 4. - С.428-430.

39. Григорьев П.Я. Диагностика и лечение болезней органов пищеварения / П.Я. Григорьев, Э.П. Яковенко. М.: Медицина, 1996.-515с.

40. Грин Н. Биология / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор. М.: Мир, 1993. - Т.2.1. C.24-25.

41. Гродзинский A.M. Краткий справочник по физиологии растений / A.M. Гродзинский, Д.М. Гродзинский. Киев: Наукова думка, 1973. - 273с.

42. Губский Ю.И. Коррекция химических поражений печени / Ю.И.Губский.-Киев: Здоровье, 1989. 156с.

43. Гусев Н.Б. Внутриклеточные Са-связывающие белки. 4.1. Классификация и структура. 4.2. Структура и механизм функционирования / Н.Б. Гусев // Соросовский образовательный журнал. — 1998. №5. — С.2-16.

44. Гуткин В. С. Бактерицидная активность и хемилюминесценция мононуклеарных фагоцитов животных (Обзор) / В. С. Гуткин, В. А. Горбатов, А. П. Востряков и др. // Сельскохозяйственная биология. 1986., № 6. - С.78-86.

45. Деккер Э.А. Переоценка антиоксидантной активности очищенного карнозина / Э.А. Деккер, С.А. Лайвси, Ш. Жу // Биохимия. 2000.-Т.65, №7.-С.901-906.

46. Детерман Г. Гель-хроматография / Г. Детерман. М.: Мир, 1970. - 252с.

47. Диксон Э. Ферменты / Э. Диксон, М. Уэбб. М.: Мир, 1982. - 1117с.

48. Довганский А.П. Печень при экстремальных состояниях / А.П. Довганский, Б.М. Курцер, Т.А. Зорькина. — Кишинев: Штиинца, 1989. 135с.

49. Долгов В.В. Лабораторная диагностика нарушений обмена железа / В.В. Долгов, С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. СПб.: Витал Диагностике СПб, 2002. - 52с.

50. Дубинина Е. Е. Антиоксидантная система плазмы крови / Е. Е. Дубинина // Укр. биохим. Журн. 1992. - Т. 64, № 2. - С.3-15.

51. Дубинина Е.Е. Биологическая роль супероксидного анион-радикала и супероксиддисмутазы в тканях организма / Е. Е. Дубинина // Успехи соврем. Биологии. 1989. - Т.108, №1(4). - С.3-12.

52. Дубинина Е.Е. Использование природного биоантиоксиданта витамина Е при гипоксии новорожденных / Е. Е. Дубинина, Л.Н. Сафронова, Н.П.

53. Раменская и др. //III Всесоюзная конференция "Биоантиоксиданты". 1989. -Т.2. - С.227-228.

54. Епринцев А.Т. Молодые ученые-биологи XIX съезду комсомола / А.Т Епринцев, jt.a. Землянухин, А.У. Игамбердиев // Материалы 5 научно-практической конференции молодых ученых. Воронеж, 1982.-С.42-43.

55. Еремин А.Н. Влияние полидисульфида галловой кислоты на активность и стабильность каталазы в разных средах / А.Н. Еремин, Ю.П. Лосев, Д.И. Метелица // Биохимия. 2000. - Т.65, №2.-С.298-308.

56. Ефремов В.В. Аконитаза новый перспективный маркер для популяционно-генетических исследований минтая Theragra chalcogramma / B.B. Ефремов, E.B. Михайлова, В.Б. Молоканов // Генетика. - 1989. - Т.25, № 12.-С.2263-2265.

57. Жданов В.М. Вирусные гепатиты / В.М. Жданов, В.А. Ананьев, В.М. Стаханова. М.: Медицина, 1986.-256с.

58. Жеребцов H.A. Биохимия / H.A. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. -Воронеж: ВГУ, 2002. 696с.

59. Журавлев А.И. Биохемилюминесценция / А.И. Журавлев. М.: Наука, 1983. -С.222-240.

60. Журавлев А. И. Развитие идей Б. Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии / А. И. Журавлев // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и при патологии: Труды МОИП. М., 1982. - T.LVII. - С.3-36.

61. Землянухин A.A. Изоформы НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы листьев гороха и их свойства / A.A. Землянухин, Т.Н. Попова, А.Т. Епринцев и др. // Физиология растений. 1987. - Т.34, №3. - С.499-507.

62. Землянухин A.A. Очистка и некоторые каталитические свойства НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы из подсолнечника / A.A. Землянухин, Т.Н. Попова, В.А. Курипченко//Биохимия. 1987. - Т.52, №6. - С.1201-1208.

63. Землянухин A.A. Роль изоцитратдегидрогеназ в регуляции метаболических процессов в высших растениях / A.A. Землянухин, Т.Н. Попова // Физиология растений. 1989. - Т.36, №4. - С.753-761.,

64. Землянухин A.A. Регуляция активности и каталитических свойств гомогенной изоцитратдегидрогеназы (НАДФ) / A.A. Землянухин, Т.Н. Попова, А.Т. Епринцев и др. // Биохимия. 1986. - Т.51, №6. - С.952-957.

65. Иванов А.Ю. Сравнительная эффективность антиоксидантов при защите бактериальной плазматической мембраны от активных форм кислорода / А.Ю. Иванов, В.И. Новосёлов, A.B. Гаврюшкин и др. // Биофизика. 2000. -Т.45, №4. - С.660-665.

66. Исаков Ю.Ф. Лекарственные препараты в России / Ю.Ф.Исаков. -Астрахань: Астрафармсервис, 2000. 488с.

67. Каган В. Е. Об участии свободных активных форм кислорода в ферментативном перекисном окислении липидов в биомембранах / В. Е. Каган, Л. Л. Прилипко, В. М. Саввов и др. // Биофизика. 1979. - Т.44, №3. -С.482-489.

68. Каган В. Е. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов / В. Е. Каган, О. Н. Орлов, Л. Л. Прилипко // Итоги науки и техники. Серия "Биофизика". ВИНИТИ АН СССР. - М., 1986. - Т. 18. -136с.

69. Каган В.Е. Об участии свободных активных форм кислорода в ферментативном перекисном окислении липидов в биомембранах / В.Е. Каган, Л.Л. Прилипко, В.М. Саввов и др. // Биофизика. 1979. - Т.44, №3. -С.482-489.

70. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии / Под ред. Проф А.И. Карпищенко. — Санкт-Петербург: Интермедика., 1999. 656с.

71. Кауров Я.В. Способ создания модели гепатита и цирроза печени млекопитающих / Я.В. Кауров, Г.А.Бояринов, В.П.Смирнов. Пат. РФ 94026117, 1996, кл. G09B23/28.

72. Кахговер Н. Б. Глутатион-8-трансферазы ферменты детоксикации / Н. Б. Кахговер, Ю. В. Хмелевский // Укр. биохим. журн. - 1983. - Т. 55 ,№ 1. - С. 86-92.

73. Клинический диагноз лабораторные основы / Под ред. проф. В.В.Меньшикова. - М.: Лабинформ, 1997.-320с.

74. Коваленко Е. И. Влияние гранулоцит-колониестимулирующего фактора "Granocyte" на генерацию активных форм кислорода нейтрофилами in vitro / Е. И. Коваленко, Г. Н. Семенкова, Е. Н. Смирнова и др. // Биополимеры и клетка. 1998. - Т. 14, №6. - С.544-548.

75. Козлов A.B. Роль эндогенного свободного железа в активации перекисного окисления липидов при ишемии / A.B. Козлов, Л.И. Шинкаренко, Ю.А. Владимиров // Бюлл. экспер. биол. — 1985. — Т.1. С.38-40.

76. Кондрашова М.Н. Отрицательные аэроионы и активные формы кислорода / М.Н. Кондрашова // Биохимия. 1999. - Т.64, №3. - С.430-432.

77. Конь И.А. Витамин А и НАДФ-зависимая изоцитратдегидрогеназа: различие в действии на митохондриальную и цитоплазматическую изоферментные фракции / И.А. Конь, А.И. Ширина // Биохимия. 1981. -V.46, №5. -Р.789-796.

78. Косолапов В.А. Хемилюминесцентные методы в оченке свободнорадикальных реакций / В.А. Косолапов, О.В. Островский, A.A. Спасов // Клиническая и лабораторная диагностика. — 1999. — Т.9. — С.41.

79. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии / Г.А. Кочетов. -М.: Высшая школа, 1980. 272с.

80. Крутикова Г. О. Глутатионпероксидазная и глутатионредуктазная активность печени крыс после введения селенита натрия / Г. О. Крутикова, И. М. Штутман // Укр. Биохим. журнал. 1976. - Т.48, №2. - С.223-227.

81. Кузьменко А.И. Влияние витамина D3 и экдистерона на свободно -радикальное окисления липидов. / А.И. Кузьменко, Р.П. Морозова, И.А. Николенко и др. //Биохимия. 1997. - Т.62, вып.6. - С.712-715.

82. Кулинский В. И. Структура, свойства, биологическая регуляция глутатионпероксидазы / В. И. Кулинский, JI. С. Колиснеченко // Усп. Совр. Биол.-1993. Т.113, №1. - С.107-122.

83. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский Образовательный Журнал. 1999. -Т.38, №1. - С.2-7.

84. Кулинский В.И. Лекционные таблицы по биохимии: биохимия регуляций / В.И. Кулинский. Иркутск: Иркут. Мед. Ин-т, 1994. - 94с.

85. Кулинский В.И. Биологическая роль глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко // Успехи современной биологии, 1990. Т.110, №1(4). - С.20-33.

86. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты / Б.И. Курганов. -М.: Наука, 1978. 248с.

87. Курганов Б.И. Физико химические механизмы регуляции активности ферментов / Б.И. Курганов. - М.: Наука, 1992. - 60с.

88. Кухтина E.H. Влияние железа, цинка, меди на процессы перекисного окисления липидов / E.H. Кухтина, H.H. Глущенко // Биохимия. 1996. -Т.61, №.6. - С.993-997.

89. Левитан Б.Н. Способ лечения острых отравлений / Б.Н.Левитан, Н.Н.Евлашева, А.Э.Васильев. Пат. РФ 2144817. - 2000, кл. А61К9/107, А61К31/02, А61Р7/00.

90. Ленинджер А. Основы биохимии./ А. Ленинджер. — М.: Мир, 1985. Т.2. -376с.

91. Лившиц В.М. Биохимические анализы в клинике: / В.М. Лившиц, В.И. Сидельникова. Справочник. Воронеж: ВГУ, 1995. - С.65.

92. Ллойд Э. Справочник по прикладной статистике / Э. Ллойд, У. Ледерман. М.: Финансы и статистика, 1990. - С.493-513.

93. Лобзин Ю.В. Руководство по инфекционным болезням / Под ред. проф. Ю.В.Лобзина, проф. А.П. Казанцева. Ростов-на Дону: Феникс, 1997. - 736с.

94. Ломоносова Е.Е. Активность антиоксидантной системы печени крыс при бензидиновой интоксикации и введении эномеланина / Е.Е. Ломоносова, А.Т. Пикулев, В.П. Курченков // Биохимия. 1993. - Т.58, №4. - С.580-583.

95. Лужников Е.А. Клиническая токсикология / Е.А.Лужников.- М.: Медицина, 1982. 368с.

96. Лущак В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него у бактерий / В.И. Лущак // Биохимия. 2001. - Т.66, №5. - С.592-609.

97. Лыскова Т.И. Влияние факторов ишемического повреждения на перекисное окисление липидов в синаптосомах мозга крыс / Т.И. Лыскова, С.Л. Аксенцев, C.B. Федорович и др. // Биофизика. 1997. - Т.42, №2. -С.408-411.

98. Любицкий О.Б. Определение антиоксидантной активности биохемилюминесцентным методом: Антореф. Дис. Канд. Биол. наук / О.Б. Любицкий. Воронеж, 1996. - 25с.

99. Мартынова Е.А. Влияние сфинголипидов на активацию Т лимфоцитов / Е.А. Мартынова//Биохимия. 1998. - Т.63, №1. - С. 122-132.

100. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. -Харьков, 1998. Т.1. - 506с.

101. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца/ Ф.Д. Меерсон, 1984. М.: Медицина, 268с.

102. Медведев А.Е. Исследование механизма активации НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы при остром охлаждении / А.Е. Медведев и др. // Биохимия. 1981. - Т.52, №3. - С.460-468.

103. Меньшикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1993. - Т.113, №4. - С.442-453.

104. Мерзляк М.Н. Активный кислород и жизнедеятельность растений / М.Н. Мерзляк // Соросовский Образовательный Журнал. 1999. - №9. - С.20-26.

105. Мешкова Н.П. Практикум по биохимии / Н.П. Мешкова, С.Е. Северин. -М.: Мир, 1979.-430с.

106. Музыка В.И. Препарат, обладающий гепатозащитным действием / В.И. Музыка, И.В. Колонина. Пат. РФ 2186577. - 2002, кл. А61К35/78.

107. Мышкин В.А. Способ моделирования цирроза печени / В.А. Мышкин, Р.Б. Ибатуллина, А.И. Савлуков и др. Пат. РФ 2197018. - 2003, кл. G09B23/28.

108. Норман Г.Э. Активные формы кислорода и люстра Чижевского / Г.Э. Норман // Биохимия. 2001. - Т.66, №1. - С. 123-126.

109. Осипов А.Н. Активные формы кислорода и их роль в организме / А.Н. Осипов, Ю.А. Азизова, Ю.А. Владимиров // Успехи биологической химии. -1990. Т.31, №2. - С. 180-208.

110. Осипов А.Н. Образование гидроксильных радикалов при взаимодействии гипохлорита с ионами железа. / А.Н. Осипов, Э.Ш. Якутова, Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1993. - Т.38, №3. - С.390-396.

111. Переслегина И.А. Антиоксидантные свойства пищеварительных секретов / И.А. Переслегина // III Всесоюзная конференция "Биоантиоксиданты". -1989. Т.2. - С. 188. •

112. Пескин A.B. Свободнорадикальные процессы / A.B. Пескин // Русский медицинский журнал. 1999, №5. - С. 13-15.

113. Петрович Ю. А. Селеноэнзимы и другие селенопротеиды, их биологическое значение / Ю. А. Петрович, Р. П. Подорожная // Усп. совр. биологии. 1981. - Т.91, № 1. - С. 127-144.

114. Петровский В.Д. Большая медицинская энциклопедия / Под ред. Б.В. Петровского 3-е изд., дораб. Т.5. М.: Советская энциклопедия, 1977. -568с.

115. Подобед O.B. / О.В. Подобед, JI.M. Федорова, И.В. Якушева // Вопросы мед. Химии. 1995. -№41.- С.13-16.

116. Полторак О.М. Физико-химические основы ферментативного катализа / О.М. Полторак, Е.С. Чухрай. М.: Наука, 1971. - С.130-140.

117. Полторак О.М. Физико-химические основы ферментативного катализа / О.М. Полторак, Е.С. Чухрай. М.: Высшая школа, 1971. - 311с.

118. Попова Т.Н. Выделение, очистка и исследование физико-химических свойств НАДФ-специфичной изоцитратдегидрогеназы из сахарной свеклы / Т.Н. Попова, A.A. Землянухин // Физиология и биохимия культурных растений. 1990. - Т.22, №3. - С.305-310.

119. Попова Т.Н. Изоцитратдегидрогеназы: формы, локализация, свойства и регуляция / Т.Н. Попова//Биохимия. 1993. - Т.58, №126. - С. 1861-1879.

120. Попова Т.Н. Исследование НАДФ-специфической ИДГ в высших растениях / Т.Н. Попова. Дис. докт. биол. наук. М. 1994. - С. 17-20.

121. Попова Т.Н. Регуляция активности и каталитические свойства гомогенной изоцитратдегидрогеназы (NADP) из гороха / Т.Н. Попова, JI.A. Землянухин, А.Т. Епринцев и др. // Биохимия. 1986. - Т.51, №6. - С.952-957.

122. Попова Т.Н. Регуляция активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы щитка кукурузы клеточными метаболитами / Т.Н. Попова, A.B. Казначеев, И.В. Демченко // Физиология растений. 1998. - Т.45, №1. - С.37-42.

123. Прохорова М.И. Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен) / Под ред. М.И. Прохоровой. JL: Ленинградский университет, 1982. - 272с.

124. Рат Макгрэгор. 300 советов семейного врача / Р. Макгрегор. Изд-во Интер-Дайджест, 1997. - 347с.

125. Рашба Ю.З Нескомпенсированное изменение в системе О2' СОД как возможный источник активности ПОЛ при ишемии печени / Ю.З. Рашба,

126. JI.C. Вартанян, Л.А. Серегина и др. // Тезисы II Всесоюзной конференции "Биоантиоксиданты". 1986. - Т.2. - С.235-236.

127. Реброва Т.Ю. Стимуляция а- и р- опиатных рецепторов и устойчивость изолированного сердца к окислительному стрессу: роль NO синтазы / Т.Ю. Реброва, Л.Н. Маслов, А.Ю Лишманов и др. // Биохимия. - 2001. - Т.66, №4. -С.520-528.

128. Розанов А.Я. Механизмы регуляции биокатализа / А.Я. Розанов. Одесса: ОГУ, 1980.-65с.

129. Рукшин М.П. Особенности функционирования цикла трикарбоновых кислот у Brevibacterium flavum и Micrococcus glutamicus / М.П. Рукшин, М.Э. Дунце, В.А. Леване и др. // Микробиология. 1987.-Т.56, №5.-С.759-763.

130. Сальникова С. И. Оптимизация поиска и создание синтетических гепатопротекторов в ряду производных триазола, вензоксазола, глюкозамина и антрахинонсукцинамовых кислот / С.И. Сальникова. Автореф. дис. докт. биолог, наук. Киев: Купава, 1993. - 46с.

131. Сальникова С. И. Сравнительное изучение гепатозащитных средств холосаса, фламина, силибора / С. И. Сальникова, В. В. Слышков // Фарм. и токсик.: Республ. межвед. сб. Киев, 1990.- С.60-63.

132. Самуйлов В.Д. Н2О2 ингибирует рост цианобактерий / В.Д. Самуйлов, Д.В. Безряднов, М.В. Гусев и др. // Биохимия. 1999. - Т.64, №1. - С.60-67.

133. Сахарова Т. С. Поиск и фармакологическое изучение гепатозащитных средств в ряду металлокомплексов производных п- фенилантраниловых кислот. / Т.С. Сахарова. Автореф. дис. к. ф. н. - Москва, 1989. - 27с.

134. Северин С.Е. Практикум по биохимии / С.Е. Северин, Г.А. Соловьева. -М.: Изд-во МГУ, 1989. 509с.

135. Сидорова В.Ф. Регенерация печени у млекопитающих. / В.Ф. Сидорова, З.А. Рябинина, Е.М. Лейкина. М.: Медицина, 1966. - 240с.

136. Сильченко Н.А. Влияние витаминов антиоксидантного действия на активность глутатионпероксидазы печени при токсическом гепатите /

137. Н.А.Сильченко, А.К.Селезнева, Л.Н.Строевая и др. // Тезисы II Всесоюзной конференции "Биоантиоксиданты". 1986. - Т.1. - С.76.

138. Симонян P.A. Изоферментный спектр ИДГ в субклеточных фракциях мозга и печени кур в онтогенезе / Р.А.Симонян, Л.А.Арутюнян, Н.О.Мовсесян и др. // Биол. ж. Армении. 1984.-V.97, №1.-С.28-36.

139. Скулачев В.П. Снижение внутриклеточной концентрации О2 как особая функция дыхательных систем клетки / В.П. Скулачев // Биохимия. 1994. -Т.59, №12.-С.1910-1912.

140. Скулачев В.П. Возможная роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций / В.П. Скулачев // Биохимия. 1998. - Т.63, №12. -С.1691-1694.

141. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло / В.П. Скулачев // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. - №3. - С.4-16.

142. Скулачев В.П. Кислород и явления запрограммированной смерти / В.П. Скулачев. М.: ИБМХ РАМН, 2000. - 47с.

143. Скулачев В.П. Н2О2 сенсоры лёгких и кровеносных сосудов и их роль в антиоксидантной защите организма / В.П. Скулачев // Биохимия. - 2001. -Т.66, №10. - С. 1425-1429.

144. Скулачев В.П. Старение организма особая биологическая функция /

145. B.П. Скулачев//Биохимия. 1997. -.Т.62, №11.- С. 1394-1399.

146. Сливкин А.И. Синтез и фармакологическая активность полимерной формы кислоты ацетилсалициловой / А.И.Сливкин, И.А.Щекина // Вопросы биологической медицинской и фармацефтической химии. 2003. - №1.1. C.46-50.

147. Слободская В.В. Влияние супероксидисмутазы на некоторые показатели адреналинового миокардита у крыс / В.В. Слободская, В.М. Прокопенко, В.В. Елисеев и др. // III Всесоюзная конференция "Биоантиоксиданты". -1989.-Т.2.-С.129.

148. Соколовский В. В. Тиловые аниоксидаиты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальные воздействия (обзор) / В. В. Соколовский // Вопр. мед. химии. 1988. - Т.34, №6. - С.2-11.

149. Справочник VIDAL / Сост. Ю.Ф.Исаков и др. Астрахань: Астрафармсервис, 2002. - 142с.

150. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник. -М., 1999.- 1520с.

151. Стальная И.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот / И.Д. Стальная // Орехович В.Н.: Современные методы в биохимии / В.Н. Орехович. М., 1977. - С.63-64.

152. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью 2-тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Орехович В.Н.: Современные методы в биохимии / В.Н. Орехович. М., 1997. - С.66-68.

153. Степанов А.Е. Физиологически активные липиды / А.Е. Степанов, Ю.М. Краснопольский и др. М.: Наука, 1991. - 136с.

154. Строев Е.А. Биологическая химия / Е.А. Строев. М.: Высшая школа, 1986.-479с.

155. Струмило С.А. Очистка и некоторые свойства гиалоплазматической НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы из надпочечников кролика / С.А. Струмило, М.М. Викторович, В.В. Виноградов // Биохимия. 1984. -Т.43, №2. - С.240-245.

156. Струмило С.А. Особенности кинетических свойств высокоочищенной НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы из надпочечников кролика / С.А. Струмило, Н.М. Викторович, В.В. Виноградов // Докл. АНБ ССР. 1984. -Т. 28, №3.-С. 268-271.

157. Таранда Н.И. Очистка и свойства NADP-зависимой изоцитратдегидрогеназы из коры надпочечников быка / Н.И. Таранда, В.В. Виноградов, С.А. Струмило // Укр. биохим. ж. 1987. - Т.59, №1. - С.24-29.

158. Тарчевский И.А. Янтарная кислота миметик салициловой кислоты / И.А. Тарчевский, H.H. Максютова // Физиология растений. - 1999.-Т.46, №1. - С.23-28.

159. Тихазе А.К. Антиоксидантные системы при атеросклерозе и гиперхолестеринемии / А.К. Тихазе, С.М. Сагоян, Т.Н. Бондарь и др. // III Всесоюзная конференция "Биоантиоксиданты", 1989. Т.2. - С. 108-109.

160. Тиц Н. Энциклопедия клинических лабораторных тестов / Н. Тиц. М.: Лабинформ, 1997. - 960с.

161. Ткачук В.А. Молекулярные механизмы ендогенной регуляции / В.А. Ткачук // Соросовский образовательный журнал. 1998, №6. - С. 16-20.

162. Ткачук В.А. Фосфоинозитидный обмен и осцилляция ионов1. Ca / В.А.

163. Ткачук // Биохимия. 1998. - Т.63, №1. - С.47-56.

164. Тринус Ф.П. Фармакологический справочник.-4-e изд., перераб. и доп./ Ф.П.Тринус. Киев: Здоровье, 1979. - 608с.

165. Турков М.И. Супероксиддисмутаза: свойства и функции / М.И. Турков // Успехи соврем, биологии. 1976. - Т.81, №3. - С.341-354.

166. Федорова Н.Ю. Состояние системы глутатионпероксида'зы-глутатионредуктазы в стимулированном к регенерации органе и ее роль в клеточной пролиферации: Дис. канд. биол. наук / Н.Ю. Федорова. ВГУ, Воронеж, 1999. - 186с.

167. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов / Э. Фершт. М.: Мир, 1980. - 432с.

168. Филиппов П.П. Как внешние сигналы передаются внутрь клетки / П.П. Филиппов // Соросовский образовательный журнал. 1998, №5. — С.29-34.

169. Харькевич Д.А. Фармакология / Д.А. Харькевич. Москва: Медицина, 1993.-543с.

170. Хочачка П. Биохимическая адаптация / П. Хочачка, Дж. Сомеро. М.: Мир, 1988. - 568с.

171. Храпова Н. Г. О взаимозаменяемости природных и синтетических антиоксидантов / Н. Г. Храпова // Биоантиокислители в регуляцииметаболизма в норме и патологии: Труды MOPffl. M., 1982. - T.LMVII. -С.59-73.

172. Храпова Н.Г. Перекисное окисление липидов и системы, регулирующие его интенсивность / Н.Г. Храпова// Биохимия липидов и их роль в обмене веществ, 1981. С.147-155.

173. Черницкий Е.А. Исследование конформационных переходов в уреазе / Е.А. Черницкий, В.М. Мажуль, C.B. Конев // Биофизика. 1968. - Т. 14, №3. -С.414-420.

174. Шаронов Б.П. Окисление церулоплазмина гипохлоритом, потеря голубой окраски и сохранение оксидазной активности / Б. П. Шаронов, Н. Ю. Говорова//Биохимия. 1990. - Т.55, №6. - С. 1145-1148.

175. Шафран М. Г. Миелопероксидаза непрофильных лейкоцитов / М. Г. Шафран // Успех совр. биологии. 1981. - Т.92, №3. - С.365-379.

176. Шевченко М.И. Роль Мп2+ в равновесии NADP-зависимой изоцитратдегидрогеназы / М.И. Шевченко, М.Ф. Гулий // Украинский биохимический журнал. 1973. - Т.45, №6. - С.718-723.

177. Щекина И.А. Способ защиты печени от ксенобиотиков / И.А.Щекина, Б.А.Гладков, В.А.Николаевский и др.- Пат. РФ 2195936, 2003, кл. А61КЗ1/616, А61Р1/16.

178. Щекина И.А. Биохимические аспекты и экспериментальная оценка фармакологической активности полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой. / И.А. Щекина. Дисс. канд. биол. наук. Воронеж: ВГМА, 2002. - С.81-95.

179. Шишкина JI.H. Связь повреждения мембраны с процессом перекисного окисления липидов при слабых воздействиях / JI.H. Шишкина, М.А. Смотряева // Биохимия. 2000. - Т.45, №5. - С.844-852.

180. Штюренбург X. Дж. Роль карнозина в процессе старения скелетной мускулатуры и при нейро-мышечных заболеваниях / X. Дж. Штюренбург // Биохимия. 2000. - Т.65, №7. - С. 1013-1017.

181. Adinolfi A. Inhibition by Oxalomalate of rat liver mitochondrial aconitate hydratase / A. Adinolfi, Guarriera-Bolyleva, S. Olezza et.al. // Biochem J. 1971.-V. 125, №2.-P. 557-562.

182. Akhmedkhanow A. Aspirin and lung cancer in women / A. Akhmedkhanow, P. Toniolo, A. Zeliniuch-Jacquotte et al. // Brit. J. Cancer. 2002. V.87. - P.43-49.

183. Ames B.N. / B.N. Ames M.K. Shigenaga and T.M. Hagen // Biochim. Biophys. Acta. 1995. - №1271. - P. 165-170.

184. Barnes S.J. Organization of citric acid cycle enzymes into a multienzyme cluster / Sarah J. Barnes, P.D.J Weitzman // FEBS Lett. 1986. - V.201, №2. -P.267-270.

185. Bednar R.A. Chemical modification aprobe of the structure and function of the subunits of DPN-dependent isocitrate dehydrogenase / R.A. Bednar, R.F. Colman // J. Biol. Chem. 1982. -V.257, № 19. - P. 11734-11739.

186. Beinert H. Iron-sulfur clusters: agents of electron transfer and storage, and direct participants in enzymic reactions / Helmut Beinert // Biochem. Soc. Trans. -1986. -V. 14, №3. P.527-533.

187. Belikova J.O. Identification of the high-molecular mass mitochondrial oxaloacetate keto-enoltautomerase as inactive aconitase / Ju.O Belikova, A.B.Kotlyar, A.D. Vinogradov // FEBS Lett. 1989. - V.246, №1-2. - P. 17-20.

188. Bell J.L. Subcellular distribution of the isoenzymes of NADP isocitrate dehydrogenase in rat liver and heart / J.L. Bell, D.N. Baron // Enzymol. biol. et clin. 1968. - V.9, №5. - P.393-399.

189. Belomo G. Cell damage by oxygen free radicals / G. Belomo et al. // Cytotechnology. 1991. - V.5, №1. - P.571-573.

190. Bilrie G.G.T.A., Identification of an essential residual of pig heart akonitase / G.G.T.A. Bilrie, C.D. Stout // Biochem and Biophys. Ris Communs. 1994.-V.74, №2. - P.384-389.

191. Boquist L. Inhibition by alloxan of mitochondrial aconitase and other enzymes associated with the citric acid cycle / L. Boquist, I. Trissan // FEBS Lett., 1984. -V.I78, №2. P.245-248.

192. Brouguisse R. Characterization of a citosolic aconitase in higher plant cells / Renaud Brouguisse, Roland Douch // Plant Physiol. 1987. - V.84, №4. - P. 14021407.

193. Carlier M.F. NADP linked isocitrate dehydrogenase from beef liver. Purification, guatermary structure and catalytic activity / M.F. Carlier, D. Pantaloni // Eur.J.Bio-chem. - 1973. - V.37, №4. - P.341-354.

194. Carlier M.F. Slow association dissociation eguilibrium of NADP - linked isocitrate dehydrogenase from beef liver in relation to catalytic activity / M.F. Carlier, D. Pantaloni // Eur.J.Biochem. - 1978. - V.89. - №2. - P.511-516.

195. Cawood P. The nature of diene conjugation in biological fluids / P. Cawood, A. Iversen, T. Dormandy // Oxygen Radicals Chem. And Biol. Proc. 3 Int. Conf., New York, 1984. P. 355-358.

196. Chance B. Hydroperoxyde metabolism in mammalian organs / B. Chance, A. Boveris // Physiol.Revs. 1979. - V.59, №3. - P.527-605.

197. Checma-Dhadli S. Effect of palmitoil-CoA and (3-oxydation of fatty acids on the cinetics of mitichondrial citrate transporter / S. Checma-Dhadli, M.L. Halperin // Can. J. Biochem. 1976. - V.54, №2. - P. 171-177.

198. Chen Q. Interelation between active oxygen and activity H-ATP-ase of a tonoplast in leaves of barley at a saline stress / Qin Chen, Youliang Liu, Yahua Chen // J. Nanjing Agr. Univ. 1998. - V.21, №3. - P.21-25.

199. Chen R.-D. Chromatographic and immynological evidence thet chloroplastic and cytosolic pea NADP-IDHs are distinct isoenzymes / R.-D. Chen, E. Bismuth // Planta. 1989. - V.17, №8. - P. 157-163.

200. Chen R.-D. Do the mitochondria provide the 2-oxoglutarate needed for glutemete synthesis in higher plant chloroplasts? / R.-D. Chen, P. Gadal // Plant Physiol Biochem. 1990. - V.28. - P. 141-145.

201. Chen R.-D. Purification and comparation properties of the cytosolic isocitrate dehydrogenase (NADP) from pea (Pisum sativum) roots and green leaves / R.-D. Chen, P. Marchal, J. Vidal et.al. // Eur. J. Biochem. 1988. - V.175, №3. - P.565-572.

202. Colman R.F. Binding of substrates by native and chemically modified isocitrate dehydrogenase / R.F. Colman // Biochem et. biophys. acta. 1969. -V.191, №2. - P.469-472.

203. Cooper T.G. Mitochondria and glyoxysomes from castor been endosperm / T.G. Cooper, H. Beevers // J. Biol. Chem. 1969. - V.244. - P.3507-3513.

204. Corpas F.J. Peroxisomal NADP-dependent isocitrate dehydrogenase. Characterization and activity regulation during natural senescence / F.J. Corpas, J.B. Barroso, L.M. Sandalio et al. // Plant Physiol. 1999. - V.121, №3. - P.921-928.

205. Cortes E. Citrate determination with aconitase immobilized on solid support / E. Cortes, S. Viniegra, M.S. Aquilar et al. // Int. J. Biochem. 1985. - V.17, №1.-P.131-134.

206. Cots J. Germination, senescence and pathogenic attack in soybean (Glycine max. L.); identification of the cytosolic aconitase participating in the glyoxylate cycle / Joaquim Cots, Francois Widmer // Plant Sci. 1999. - V.149, №2. - P.95-104.

207. Czerwinski E.W. Apreliminary cristallografic study of isocitrate dehydrogenase from Azotobacter vinelanii / E.W. Czerwinski, P.M. Bethge, F.S. Mathens et. al. //J.Mol.Biol. 1977. - V. 166, №1. - P.l81-187.

208. Davis B.J. Disk electrophoresis. II. Method and application to human serum proteins / B.J. Davis//N. Y. Acad. Sci. 1964. - V. 121. - P.404-407.I

209. Dixon C. J. Evidence for two Ca mobilizing purinoreceptors on rat hepatocytes / C.J. Dixon // Biochem. J.-1990. V.269, №2.-P.499-502.

210. Dummer R.J. Studies wish specific enzyme inhibititors. Resolution of D(-erytrofluocitric acid info opticaly actyve isomers / R.J. Dummer, J. Matysiak // J. Biol. Chem. 1969.-V.244, №1 l-P.2966-2969.

211. Eans R. L. Ingibition of liver aconitase isoenzymes by (-) erytroftorcitrate / R. L. Eans, E. Kun // Mol. Pharmacol. 1974. - V.10,№1. - P. 130-139.

212. Eguchi H. Highly stable of NADP+ specific isocitrate dehydrogenase from Thermus thermophilus HB 8: purification and general propeties / H. Eguchi, T.Wakagi, T. A. Oshima // Biochim. Biophys. Acta. - 1989. - V.990, №5. - P.133-137.

213. Elias B.A. Alpha-ketoglutarate supply for amino acid syntesis in higher plant chloroplast. Intrachloroplastic localization of NADP-specific isocitrate dehydrogenase / B.A. Elias, G.V. Givan // Plant Physiol. 1977. - V.59, №4. -P.73 8-740.

214. Emptage M.H. Inactivation of aconitase and similar Fe-S containing enzymes by divalent metals / M.H. Emptage // J. Inorg. Biochem. 1991. V.43, №2-3. -P.255.

215. Falholt K. Enzyme pattern in hypoxic sceletal muscule / K. Falholt, K. John, B. Lund et al. // J. Mol. Cell. Cardiol. 1974. - V.6, №4. - P.349-359.

216. Fatania H.R. Intracellular distribution of NADP-linker isocitrate dehydrogenase, fumarase and citrate synthase in bovine heart muscle / H.R. Fatania, K. Dalziel // Biochim. et biophys. acta. 1980. - V.631, №1. - P. 11-19.

217. Faure P. An insulin sensitizer improves the free radical defense system potential and insulin sensitive in high fructose fed rats / P. Faure, E. Rossini, N. Wiernsperger et al. // Diabetes. 1999. - V.48, №2. - P.353-357.

218. Freminet A. Carbohydrate and acid metabolism during acute hypoxia in rats blood and heart metabolites / A. Freminet // Comp. Biochem. And Physiol. — 1981. V.70, №3. -P.427-430.

219. Fridovich I. Superoxide radical and superoxide dismutase / I. Fridovich // Annu. Rev. Biochem. 1995. - V.64. - P.97-112.

220. Gardner P.R. Aconitase is a sensitive and critical target of oxygen poisoning in cultured mammalian cells and rat lungs / Paul R. Gardner, D.M. Nguyen, C.W. White // Proc. Nat. Acad. Sci. 1994. - V91, №25. - P. 12248-12252.

221. Gardner P.R. Inactivation-reactivation of aconitase in Escherichia coli / Paul R. Gardner, Irwin Fridovich // J. Biol. Chem. 1992. - V.267, №13. - P.8757-8763.

222. Gardner P.R. Superoxide sensivity of Escherichia coli aconitase / Paul R. Gardner, Irwin Fridovich // J. Biol. Chem. 1991. - V.226, №29. - P.19328-19333.

223. Gardner P.R. Superoxide radical and iron modulated aconitase achtivity in mammalian cells / P.R. Gardner, J. Raineri // J. Biol. chem. 1995. - V.270, №22. -P.l 1399-13405.

224. Gawron O. S. Properties of pig heart aconitase / O. S. Gawron, M. C. Kennedy et. al. // Biochem. J. 1974. - V. 143, № 3. - P. 717-722.

225. Gawron O. Structural basic for aconitase activity inactivation by butanedione and binding of substrates and inhibitors / O. Gawron, Laudie Jones // Biochem. and Biophis. acta. 1977. - V.484, №2. - P.454-464.

226. Gitlin J. D. Mechanisms of caemloplasmin biosynthesis in normal and cooperdeficient rats / J. D. Gitlin, J. J. Schroeder, L. M. Lee-Ambrose, et al. // Biochem. J. 1992. - V.282, №23. - P.835-839.

227. Glusker J.P. Crystallographic studies of the structures of compounds of biological interest / J.P. Glusker, K-Rau // Inst. Cancer Res. Sci Rept. 19721973. - V.518, №18. - P.100-104.

228. Glusker J.P. Mechanism of aconitase action deduced from cristallographic studies of its substrates / J.P. Glusker // J. Molec. Biol. 1968. - V.38, №2. -P. 149-162.

229. Goldstein S. A critical revaluation of some assay methods for superoxide dismutase activity / S. Goldstein, C. Michel, W. Bros et al. // Free Radic. Biol. AndMed. 1988. - V.4, №5. - P.295-303.

230. Gong H.B. Shengli Xuebao / H.B. Gong, Q.D. Han // Acta Physiol. Sin.1996. V. 118, №1. - P.48-52.

231. Gray G. R. The role of mitichondrial NADP-isocitrate dehydrogenase in alternative pathway respiration / R. Gray Gordon, Mcintosh Lee // Plant Physiol.1997. V.l 14, №3. - P.203-204.

232. Gray N.K. Translational regulation of mammalian and Drosophila citric acid cycle enzymes via iron-responsive elements / N.K. Gray, K. Pantopoulos, T. Dandeckar // Proc. Nat. Acad. Sci. 1996. - V.93, №19. - P. 4925-4930.

233. Gromek A. Localization of mitochondrial NADP-dependent Isocitrate Dehydrogenase at norm and ishemia/ A. Gromek, A. Pastuszko // J. Neurochem. -1977.-V.28, P.429-433.

234. Gruer M.J., Construction and properties of aconitase mutants of Escherichia coli / M.J. Gruer, A.J. Bradbury // Microbiology. 1997. - V.143, №6. - 18371846.

235. Gruer M.J. The aconitase family: Three structural variations on a common theme / Megan J. Gruer, Peter J. Artymiuk, John R. Guest // Trends Biochem. -1997.- V.22,№l.-P.3-6.

236. Guarnero-Bobyleva V. The mechanism of aconitase action / V. Guarnero-Bobyleva // Europ. J. Biochem. 1973. - V.8, №2. - P.287-291.

237. Guarriero-Bobyleva V. Parallel partial aconitate hydratates from rat liver / Valentina Guarriero-Bobyleva // Europ. J. Biochem. 1973. - V.34, №3. - P.455-458.

238. Guilbault G.G. Handbook of enzymatic methods of analysis / G.G. Guilbault. -New-York, 1976.-300p.

239. Gutteridge J.M.C. Lipid peroxidation and antioxidants as biomarkers of tissue damage / John M.C. Gutteridge // Clin. Chem. 1995. - T.41, №12b. - P.1819-1828.

240. Hackert M.L. Purification and crystallization of NADF+ specific isocitrate dehydrogenase from Escherichia coli using polyethylene glycol / M.L. Hackert, B.A.

241. Halliwel B. // Free Radicals in Biology and Medicine / B. Halliwel, J.M.C. Gutteridge. Clarendon Prees, Oxford, 1989. - P.8445-8449.

242. Hanson E.S. Hypoxia post-translationally activates iron-regulatory protein / E.S. Hanson, L.M. Foot // J. Biol. Chem. 1999. - V.274, №2. - P.5947-5052.

243. Hanson E.S. Regulation of iron regulatory protein during hypoxia and hypoxia/reoxygenation / E. S. Hanson, E.A. Leibold // J. Biol. Chem. 1998. -V.273, №1. — P.7588-7593.

244. Harris L.L. The mechanism of enzyme action / L.L. Harris // Biochim. Biophys. Acta. 1977. - V.481, №3. - P.340-347.

245. Hashemi A. Inheritance of aconitase, shikimate dehydrogenase, and phosphoglucose isomerase in.guayube / A. Hashemi, A. Estilai, B. Endaie // J. Amer. Soc. Hort. Sci. 1991. - V.l 16, №4. - P.737-739.

246. Henson C.P. Purification and kinetic studies of beef liver cytoplasmic aconitase / C.P. Henson, W.W. Cleland // J. Biol. Chem. 1967. - V.242, №17. -P.3833-3838.

247. Higashi I. Studies on the isocitrate dehydrogenase. Some properties of isocitrate dehydrogenase of beef heart muscle / I. Higashi, E. Maruyama, I. Otani et al. // Biochem. 1965. - V.57, №6. - P.793-798.

248. Hochiko T. The effect of sulphydril compounds on the catalitic activity of superoxide dismutase purificed from rat liver / T. Hochiko, V. Ohta, J. Ishigo // Experimentia. 1985. - V.41, №11.- P.1416-1419.

249. Hogg N. Nitric oxide and lipid peroxidation / Neil Hogg, B. Kalyanaraman // Biochim. et biophys. acta. Bioeneng. incl. Rev. Bioenerg. 1999. - V.1411, №2-3. - P.378-384.

250. Ingebretsen O.S. Properties of the nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-specific isocitrate dehydrogenase from Blastocladiella emersoni / O.S. Ingebretsen // J. Bacterial. 1975. - V.l24, №1. - P.65-72.

251. Irvin S.P.E. Simultaheous purification of aconitase hidratase and isocitrate degydrogenase from mitochondria / Steren P.E. Irvin, Remigio Moratti // Att. Acad. naz. Lincei., Rend Cl. Schi. fis. Mat. 1998. - V.69, №1-2. - P.87-94.

252. Jennigs G.T. Purification and properties of NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from the corpus lureum / G.T. Jennigs, J.W. Sadleir, P.M. Stevenson // Biochem. et biophys. acta. Gen. Subj. 1990. - V. 1034, № 2. - P. 219-227.

253. Johnson P.G. Identification of an essential residual of pig heart aconitase / P.G. Johnson, A.S. Waheed // Biochem. and Biophys. Ris. Communs. 1997. - V.74, №2. - P.384-389.

254. Jonadet M. Change of some enzyme activity during the experimental ishemia at rat the effect of ATP / M. Jonadet, J. Turchini, F. Villie // Circ. Soc. Biol. -1976. -V.170, №2. P.375-382.

255. Kelley E.E. Nitric oxide inhibits phtofrin(R)-induced lipid peroxidation in murine leukemia cells / Eric E. Kelley, Brett A. Wagner, Garry R. Buettner et al. // Photochem. and Photobiol. 1999. - V.69. - P10.

256. Kelly J.H. Physical evidence for the dimerization of the triphosphopyridine -specific isocitrate dehydrogenase from pig heart / J.H. Kelly, G.W.E. Plaut // J.Biol.Chem. 1981. - V.256, №1. - P.330-334.

257. Kennedy M.C. Evidence for the formation of a linear 3Fe-3S. cluster in partially unfolded aconitase / Mary Claire Kennedy, Thomas A.Kent, Mark Emptage et al. //J Biol. Chem. 1984.-V.259, №23. - P. 14463-14471.

258. Kennedy M.C. Identification of high molecular mass mitochondrial oxaloacetate kenoenoltautomerase as inactive aconitase / M.C. Kennedy, L. Mende-Muller, G.A. Blondin et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1992. - V.89, №24.-P.l 1730-11734.

259. Kennedy M.C. Studies on aconitase by spectroscopy, crystallography and mutagenesis / M.C. Kennedy, H. Beinert, Lauble H. et al. // J. Inorg. Biochem. -1991.-V.43, №2-3.-P.234.

260. Kent T.A. Iron-sulfur proteins: ipin-conpling modil for three-iron clusters / T.A. Kent, B.H. Huynh // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. Biol. 1980. - V.77, №11.-P.6574-6576.

261. Kleber M.P. Control of NADP-specific isocitrate dehydrogenase from Acinetobacter calcoaceticus durch nukkodide / M.P. Kleber, H. Aurick // Eryeb. exp. und. 1977. - №24. - P.107-109.

262. Koller L. D. Comparison of selenium levels and glutation peroxidase activity in bovine wohlo blood / L. D. Koller, P. J. South, J. H. Exon et al. // Canad. J. Сотр. Med. 1994. - V.58, №4. - P.431-433.

263. Kruse A. Antisence inhibition of cytosolic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase in transgenic potato plants / A. Kruse, S. Fieuw // Planta. 1998. -V.205, №1. - P.82-94.

264. Kukumus J.R. / J.R. Kukumus, J.H. Tyrer and M.J. Eadic // J. Neurol. Sei. -1975.-26, P. 187-192.

265. Kulkarni A.P. Estimation of molecular parameters of proteins by gel chromatography on Sephadex G-150 / A.P. Kulkarni, K.N. Mehrotra // Anal. Biochem. 1970. - V.38, №1. - P.285-288.

266. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. 1970. - V.227. - P.680-685.

267. Lauble H. Crystal structures of aconitase with isocitrate and nitroisocitrate bound / H. Lauble, M.C. Kennedy, H. Beinert, C.D. Stout // Biochemistry. 1992. - V.31, №10. - P.2735-2748.

268. Lee Su Min. Radiation sensitivity of an Escherichia coli mutant lacking NADP-dependent isocitrate dehydrogenase / Su Min Lee, Ho-Jin Koh, Tae-Lin Huh et al. // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1999. - V.254, №3. - P.647-650.

269. Lichochev S.I. How does superoxide dismutase protect against tumor necrosis factor: A hypothesis informed by affect of superoxide on "free"-ion / S.I. Lichochev I. Fridovich // Free Radical Biol. Med. 1997. - V.23, №4. - P.668-671.

270. Lieberman M. Respiratory electron trasport / M. Lieberman, J.E. Bacer // Annual Rev.Plant Physiol. 1965. - №16. - P.343-365.

271. Loftus T.M. Isolation, characterization, and disruption of the yeast gene encoding cytosolic NADP-specific isocitrate dehydrogenase / T.M. Loftus, L.V. Hall, S.L. Anderson et al. // Biochemistry. 1994. - V.33, №32. - P.9661-9667.

272. Loikkanen J. Modification of glutamate induced oxidative stress by lead. The role of extracellular calcium / J. Loikkanen, J. Naarala, K.M. Savdainen // Fice Radie Biol. and. Med. 1998. - V.24, №2. - P.377-384.

273. Lowry O. Protein measurement with the Folin-phenol reagent / O. Lowry, N. Rosebrough, A. Farr et al. // J. Biol. Chem. 1951. - V. 194. - P.265-275.

274. Lu G. Reactive oxygen species are critical in the oleic acid-mediated mitogenic signaling pathway in vascular smooth muscle cells / G. Lu, E.L. Greene, T. Nagai et al. //Hypertension. 1998. - T.32, №6. - P. 1003-1010.

275. Magar E. The subunits of porcine heart DPN-linked isocitrate dehydrogenase / E. Magar, J.E. Robbins // Biochem. et Biophys. Acta. 1969. - V. 191, №1. -P. 173-176.

276. Malshet V. G. Fluorescent Products of Lipid Peroxidation. I. Structural Requirement for Fluorescence in Conjugated Schiff Bases / V. G. Malshet, A. L. Tappel //Lipids. 1973. - V.8, №4. - P. 194-198.

277. Manjula T.S. Effect of aspirin on heart mitochondrial enzymes in experimental myocardial infarction in rats / T.S. Manjula, D.S. Shyamala // Biochem. Arch. — 1993. -V.9, №2. -P.101-109.

278. Manoli L. Effects of chronic variable stress on oxidative stress in rat cerebral cortex / L. Manoli, I.L.S. Torres, A.P. Vasconcellos et al. // Rev. Farm, e bioquim. Univ. Sao Paulo. 1998. - №34. - P. 188.

279. Masini A. Developmental changes of rat liver cytoplasmic and mitochondrial aconitate hydratases / A. Masini, V. Guarriero-Bobileva, A. Pincelli-Gatti, C. Gennamo // Hal. J. Biochem, 1978.- V. 27, №5-P.300-304.

280. Melefors O. Translational regulation in vivo of the Drosophila melanogaster mRNA encoding succinate dehydrogenase iron protein via iron responsive elements / O. Melefors // Biochem. Biophys. Res. Commun. 19996. - V.221, №2. -P.437-441.

281. Miake F. Hayashi Isolation and characterization of NADF-spesific isocitrate dehydrogenase from the pupa of Bombyx mori / F. Miake, T. Torikata, K. Koga // J. Biochim. 1977. - V.82. - №.2. - P.449-454.

282. Minotti G. Superoxide-dependent redox cyching of citrate-Fe3+: Evidence for a superoxide Dismutaselike Activity / Giorgio Minotti, Steven D. Anst // Arch. Biochem. and Biophys. 1987. - V.253, №1. -P.257-267.

283. Murakami K. Inactivation of aconitase in yeast exposed to oxidative stress / K. Murakami, M. Yoshino // Biochem. Mol. Biol. Int. 1997. - V.41, №3. - P.481-486.

284. Munilla-Moran R. Biochemical studies in marine species II. NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from turbot (Scophthalmus maximus L.) larvae / R. Munilla-Moran // Compar. Biochem. And Physiol. B. - 1994. - V. 107, № 1. - P. 61-68.

285. Nohl H. Generation of activated oxygen spicies as side products of cell respiration / H. Nohl // Free Radie. Biol. And Med. 1990. - Suppl. - № 1. - P. 141.

286. Ogata H. Purification of aconitase / Hatanori Ogata, Shojiro Nakamura // Bull. Ianiaguchi Med. Sci. 1975. - V.22,№ 2. - P.239-252.

287. Panfili E., Distribution of glutatione reductase on rat brain mitochondria / E. Panfili, G. Sandri, L. Ernster // FEBS Lett. 1991. - V.290, №1-2. - P.35-37.

288. Pardo M. Purification, properties and enhanced expression under nitrogen starvation of the NADP-isocitrate dehydrogenase from the cyanobacterium

289. Phormidium laminosum / M. Pardo, M. Llama, J. Serra // Biochim. Et. Biophys. Acta. Protein Struct, and Mol. Enzymol. 1999. - V. 1431, №1. - P.87-96.

290. Penny J.E. Quantitative oxidative enzyme histochemistry of the spinal cord / J.E. Penny, J.R. Kukumus, J.H. Tyrer and M.J. Eadic // J. Neurol. Sci. 1975. -V.26.-P.187-192

291. Pfeifer R. Does the pentose cycle plays a major role for NADPH supplay in the heart? / R. Pfeifer, G. Rarl, R. Scholz // Biol. Chem. 1986. - V.367. - P. 1061 -1068.

292. Pilzkiewiez P. Analysis of she ironsulfur Cluster of aconitase by natural and magnetic circular dichroism / P.Pilzkiewiez, O.Gawion, J.C.Sunherland // Biochemistry. 1981. - V.20, №2. - P.363-366.

293. Pingman D.W. Purification of aconitase from Bacillus subtilis and correlation of its N-terminal amino acid sequence with the sequence of the cit B gene / Douglas W. Pingman, Abraham L. Soreshein // J. Bacteriol. 1987. - V.169, №7. - P.3062-3067.

294. Plank D.W. Cysteine labeling studies of beef heart aconitase containing a 4Fe, a cubane 3Fe, or a linear 3Fe cluster / David W. Plank, Mary Claire Kennedy, Helmut Beinert et al. // J. Biol. Chem. 1989. - V.264, №2. - P.20385-20393.

295. Plaut G.W.E. Substrate activity of structural analogs of isocitrate for isocitrate dehydrogenases from bovine heart / G.W.E. Plaut, R.L. Beach, J. Aogaichi // Biochemistry. 1975. - V.14, №12. - P.2581-2588.

296. Popova T.N. Citrate and isocitrate in plant metabolism / T.N. Popova, M.A.A. Pinheiro de Carvalho // Biochim. et Biophys. Acta. 1998. - V.1364. - P.307-325.

297. Popova T.N. Activity regulation of NAD- and NADP-specific isocitrate dehydrogenases from maize by some organic and amino acids / T.N. Popova, E.C.V. Kakanaku // Annu. Symp. Phys.-Chem. Basis Plant Physiol. 1996. -P.35.

298. Popova T.N. Cytosolic and chloroplastic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase in Spirodela polyrhiza. Regulation of activity by metabolites invitro / T.N. Popova, T.I. Rakchmanova, K.-J. Appenroth // J. Plant Physiology. -2002.-V.159.-P. 231-237.

299. Prodromou C. The aconitase of Escherichia coli: purification of the enzyme and molecular cloning and map location of the gene (acn) / Chrisostomos Prodromou, Megan J. Haynes, John R. Guest // J. Gen. Microbiol. 1991. - V.137, №11.- P.2505-2515.

300. Rafalowska U. Charakterystyka niektorych wlasnosci izocytrynianowej dehydrogenazy NADP zaleznej w morgu szezure / U. Rafalowska, A. Pastuszko, A. Gromek // Neurol, i neurochir. pol. 1974. - V.8, №5. - P.673-676.

301. Rafalowska U. NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from rat brain cytosole / U. Rafalowska, A. Pastuszko, A. Gromek // Bull. Acad. pol. sci. Ser. sci. biol. 1974. - V.22, №7-8. - P.453-459.

302. Rafalowska U. The effect of aspartate on citrate metabolism in the cytosolic fraction of brain under conditions of normoxia, hypoxia and anesthesia / U. Rafalowska, M. Erecinska, B. Chance // J. Neurochem. 1975. - V.25, №4. -P.497-501.

303. Ramsay R.R. Molecular forms of aconitase and their interconversions / R.R. Ramsay, N.P. Signer// Biochem. J. 1984. - V.221, №2. - P.489-497.

304. Reters R.A. Concerted ingibition of aconitase and She implications for metabolic regulation / R.A. Reters, M. Shothouse //Nature. 1969. - V.221, №5. -P.774-775.

305. Robbins A. H. Iron-sulfer cluster in aconitase. Crystalografic evidence for a three-iron center // Arthur H. Robbins, Charles David Stout // J. Biol. Chem. -1985. V.260, №4. - P.2328-2333.

306. Robbins A.H. Structure of activated aconitase: formation of the 4-Fe-4S. cluster in the crystal / A.H. Robbins, C.D. Stout // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. -1989. V.86, №10. - P.3639-3643.

307. Porter D.J. CCVadducts as reactive analogues of carboxylate substrates for aconitase and other enzymes of carbohydrate metabolism / D.J. Porter, T.A. Alston, H.J. Bright//J. Biochem. 1987. - V.262, №14. -P.6552-6563.

308. Rost M. Luminol and lucigenin amplified chemiluminescence and lipid-peroxidation with brain microsomes from rats during ontogenic development / M. Rost, E. Karge, W. Klinger // Experimental and Toxicol. Pathol. 1998. - T.50, №3. - P.253-255.

309. Rounault T. A. Structural relationship between an ironregulated RNA-binding protein (IRE-BP) and aconitase: functional implications / T. A. Rounault, C. D. Stout et al. // Cell. -1991. V.64, №5. - P.881-883.

310. Sanwal B.D. Allosteric activation of nicotinamide-adenine dinucleotide specific isocitrate dehydrogenase of Neurospora crassa / B.D. Sanwal, C.S. Stachow// Biochim. et Biophis. Acta. 1965. - V.96. - №.1. - P.28-44.

311. Sawada M. Intracellular regulation of progesterone secretion by the superoxide radical in the rat corpus luteum / M. Sawada, J. C. Carlson // Endocrinology. -1996. T.137, №5. - P. 1580-1584.

312. Schloss J.V. Nitro analogues of citrate and isocitrate as transition state analogues for aconitase / J.V. Schloss, H.J. Bright, W.W. Cleland // Biochemistry.- 1980. V.19, №4- P.2358-2362.

313. Schneider. S. Salisylic acid as an endogenous signal of resistance induction in plants / S. Schneider, F. Kurovaki // Brighten crop Protection Conference. 1992.- P.320-328.

314. Scholze H. Jsolierung und charakteriscerung von aconitase aus. Schwiinehezz Rinderherz und Hete, strukturienter, suchungen und citratsyntathase ans Schevcineherz / Henning Scholze // Diss.Dokt. Fachberlich Gev. Biol. und Glawiss.- 1979. -P. 109.

315. Sharma S. P. Existence of bluish-with fluorescing agepidment-prlipofuscin / S. P. Sharma, T. J. James // Free Radic. Biol. And Med. 1991. - V. 10, №6.-P.443-444.

316. Shimeno S. Enzymatic properties of NADP-dependent isocitrate dehydrogenases from liver of Septola qutnomezadiata / S. Shimeno, T. Gotoh, Y. Kimura // Bull. Mar.Sci. and Fish. 1995. - №15. - P.59-65.

317. Skulachev V.P. Membrane-linked systems preventing superoxide formation / V.P. Skulachev // Bioscience Reports. 1997. - V.17. - P.347-366.

318. Slaughter C.A. The distribution and properties of aconitase isozymes in man / C.A. Slaughter, O.A. Hopkinson, Harry Harris // Ann. Hum. Genet. 1977. -V.40, №4.-P.3 85-401.

319. Smith C.M. Activities of NAD- and NADP-specific isocitrate degidrogenase in rat liver mitochondria / C.M. Smith, G.W.E. Plaut // Eur. J. Biochem. 1979. -V.97, №1. - P.283-295.

320. Spoto G. Purification and some properties of beef liver cytoplasmic aconitase / G.Spoto, M.H. Emptage // Ital. J. Biochem. 1984. - V.33, №5. - P.362-363.

321. Srigiridal K. Protective effects of antioxidant enzymes and GSH in vivo onmediated lipid peroxidation in gastrointestinal tract of rat / K. Srigiridal, K. Nair // Indial J. Biochem and Biophys. 1997. - V.34, №4. - P.402-405.

322. Steen I.H. Biochemical and phylkogenetic characterization of isocitrate dehydrogenase from a Hyperthermophilic archaeon, Archaeoglobus fulgidus / I.H. Steen, T. Lien, N.-L. Berkeland // Arch. Microbiol. 1997. - V.168, №5. - P.412-420.

323. Stone W. L. Selenium and non-selenium-glutathione peroxidase activity in selected ocular and nOn-ocular rat tissues / W. L. Stone, E. A. Drats // Exp. Clm.Res. 1992. - V.35, №5. - P.405-412.

324. Suttle N. F. Cooper diflciency in ruminants; recent developments / N. F. Suttle // Vet. Res. 1986. - V. 119, №21. - P.519-522.

325. Suzuki YJ. Free Radical / Y.J. Suzuki, H.J. Forman, A. Sevanian // Biol. Med.- 1996. V.22, №1/2. - P.269-285.

326. Thomson J.F. The time cares of aconitate formation from isocitrate in H2O and D20 / J.F. Thomson, S.L. Nauce // Arch. Biochem. and Biophys. 1969. - V.135, №1-2. - P.10-13.

327. Thomson N. H. Tran section of the aesophagus for bleeding aesophagea / N. H. Thomson, L. M. Myrrey, H. L. Pawson et al. // Brit. Surg. 1969. - V.60. - P.646-649.

328. Tietz N.W. Fundamentals of Clinical Chemistry / N.W. Tietz. Philadelphia: W.B. Saunders Co, 1976. - P.235.

329. Uhr M.L. The kinetics of pig heart triphosphopyridine nucleotide-isocitrate, end product inhibition, and isotope exchange studies / M.L. Uhr, V.W. Thompson, W.W. Cleland//J. Biol. Chem. 1974. - V.249, №9. - P.2920-2927.

330. Vercesi A. E. The role of reactive oxygen species in mitochondrial permeability transition / Anibal E. Vercesi, A. J. Kowaltowski, M. T. Grijalba et al. // Biosci. Repts. 1997. - V. 17, №1. - P.43-52.

331. Villafranca J.J. The mechanism of aconitase action 2. Magnésie resonance shedies of the complexes of enzyme, magnese (2), iron (2), and substrates / J.J. Villafranca, A.S. Mildvan//J. Biol. Chem. 1971. - V.246, №18. - P.5791-5798.

332. Villafranca J.V. Fluorocitrate inhibition of aconitase. Reversibility of she inactivation / J.V. Villafranca, Eugene Platus // Biochem and Biophys. Res. Communs,-1973. V.55, №4. - P.l 197-1207.

333. Wang Y. Human erythrocytic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase / Y. Wang, E.J. Van // Internal. Biochem. 1977. - V.8, №11. - P.795-799.

334. Weber K. / Zur Beeinflossung dis Enzymmusters sowie hamatologischerund biochemister parameter in serum durchkontrollierte normotherme and hypotherme ischaemie der Leber /K. Weber, D.W. Scheuch, H. Wolf // J. Med. Laborat. Diagn.- 1977.- 18. P.285-299.

335. Yadav R.N. Brain isocitrate dehydrogenase and regulation by estradiol in femate rats of varios ages / R.N. Yadav, S.N. Singh // Biochem. Med. 1981. -V.26, №2. - P.258-263.

336. Zhao Wen-Ning. Expression and gene disruption analysis of the isocitrate dehydrogenase family in yeast / Wen-Ning Zhao, Lee McAIister-Henn // Biochemistry. 1996. - V.35, №24. - P.7873-7878.

337. Zheng L. Binding of Cytosolic Aconitase to the Iron Responsive Element of Porcine Mitochondrial Aconitase mRNA / L. Zheng, M.C. Kennedy, G.A. Blondin // Arch. Biochem. Biophys. 1992. - V.299. - P.356-360.