Структурированные гели поливинилового спирта, содержащие заряженные группы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Голунова, Анна Сергеевна

• Голунова, Анна Сергеевна
• кандидат химических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат химических наук Голунова, Анна Сергеевна

1 .Введение.

2.Обзор литературы.

2.1. Полимерные гидрогели - основные понятия.

2.2.1 Физические гидрогели.

2.2.2 Химические гидрогели.

2.2 Вода в гидрогелях.

2.3 Структура пористых полимерных материалов.

2.4 Процессы криоструктурирования.

2.5 Поливиниловый спирт.

2.5.1 Структурообразование в растворах поливинилового спирта.

2.5.2 Использование для создания полимерных гидрогелей химически модифицированного поливинилового спирта.

2.6 Применение макропористых гидрогелей.

2.6.1 Модели полимерных матриц.

2.6.2 Матрицы для доставки клеток и белков.

2.6.3 Факторы, влияющие на формирование матриксов для тканевой инженерии.

3 Обсуждение результатов.

3.1 Исследование закономерностей гелеобразования в криоусловиях.

3.1.1 Влияние концентрации сомономеров в реакционной системе.

3.1.2 Влияние концентрации инициатора в реакционной системе.

3.1.3 Влияние температуры.

3.1.4 Влияние соотношения сомономеров в реакционной системе.

3.2 Исследование набухания синтезированных полимерных макропористых гидрогелей.

3.2.1 Исследование зависимости набухания от рН.

3.2.1 Исследование зависимости набухания гидрогелей от концентрации ЫаС1 в растворе.

3.3 Исследование пористой структуры полимерных гидрогелей.

3.4 Исследование сорбции альбумина на поверхности гидрогелей.

3.5 Исследование биосовместимости.

3.5.1 Заряд (^-потенциал) на поверхности гидрогелей.

3.5.2 Исследование цитогоксичности гидрогелей.

3.5.3 Исследование 3D роста клеток различного типа на гидрогелях.

4 Экспериментальная часть.

4.1 Характеристика исходных веществ.

4.2 Исследование процесса гелеобразования.

4.2.1 Модификация поливинилового спирта.

4.2.2 Анализ состава модифицированного поливинилового спирта.

4.2.3 Синтез полимерных макропористых гидрогелей.

4.2.4 Анализ состава полимерных макропористых гидрогелей.

4.3 Определение равновесной степени набухания гидрогелей.

4.4 Исследование морфологии поверхности полимерных гидрогелей.

4.5 Исследование сорбции белка на поверхности макропористых гидрогелей.

4.6 Изучение биосовместимости полученных гидрогелей.

4.6.1. Измерение ^-потенциала.

4.6.2 Исследование гидрогелей in vitro на культурах клеток: цитотоксичность и 3D рост.

4.6.3 Изучение биодеградации гидрогелей in vivo.

5 Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Структурированные гели поливинилового спирта, содержащие заряженные группы»

Материалы на основе полимерных гидрогелей известны уже почти полвека и находят широкое применение в различных областях, в том числе, связанных с биотехнологией и медициной. На сегодняшний день получены гидрогели на основе множества полимеров и их композиций. Особое место среди них занимают трехмерные полимерные системы с порами размером в десятки и сотни микрометров, так называемые макро- и суперпористые полимерные гидрогели. Они используются в качестве компонентов систем с контролируемым выделением активного вещества, материалов для имплантатов, а также в качестве подложек для выращивания клеток и тканей в тканевой инженерии.

Так называемые криогели поливинилового спирта, которые являются широко известными представители такого рода материалов. Так, например, для их стабилизации необходимо вводить в гели вещества, фиксирующие структуру трехмерной сетки, которые зачастую являются токсичными. Таким образом снижается возможность использования такого рода систем.

Ранее методом химической сшивки были получены гидрогели поливинилового спирта, устойчивые к внешним факторам. Однако низкая клеточная адгезия, присущая этим гелям, не давала возможности использовать их в качестве подложек для выращивания клеток.

Введение заряженных групп на поверхность полученного гидрогеля, согласно литературным данным, повышает клеточную адгезию и, следовательно, дает возможность использования таких систем в клеточной инженерии, а также позволяет легче покрывать поверхность гелей различными белками, тем самым модифицируя их поверхность для различных биотехнологических целей.

В связи с вышеприведенными фактами исследование введения на поверхность макропористых полимерных гидрогелей заряженных групп представляет высокий практический интерес.

Таким образом, в данной работе были синтезированы макропористые полимерные гидрогели, дополнительно содержащие заряженные группы, и были изучены их свойства, а также они были использованы в качестве подложек для выращивания различных типов клеток.

2.Обзор литературы.

Материалы медико-биологического назначения предназначены для создания изделий, устройств и препаратов, и широко используются в различных областях: медицине, биотехнологии, сельском хозяйстве и многих других, а также применяются для обеспечения и оптимизации жизнедеятельности человека, животных, растений, микроорганизмов. Во многих случаях материалы медико-биологического назначения функционируют в непосредственном взаимодействии с живыми тканями и клеточными объектами [1].

В качестве биоматериалов используются полимеры, металлы, неорганические материалы, материалы на основе углерода и композиты на их основе. Следует отметить, что с точки зрения ассортимента и возможностей использования полимерные биоматериалы значительно превосходят другие виды биоматериалов.

Сшитые гидрогели являются предметом интенсивных научных исследований, поскольку обладают рядом уникальных свойств: они способны абсорбировать до тысячи грамм жидкости на один грамм сухого полимера, изменять свой объем и свойства в зависимости от состава окружающей среды и внешних условий (температуры, давления, рН и т.д.), а также показывают свойства, близкие к живым тканям. Гидрогели широко используются в различных областях промышленности, медицины и сельского хозяйства.

Работы в области полимерных биоматериалов являются частью чрезвычайно широкой и важной области - химии и технологии полимеров медико-биологического назначения.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Голунова, Анна Сергеевна

5 Выводы.

1. Путем реакции водорастворимого поливинилового спирта, модифицированного глицидилметакрилатом, и низкомолекулярных сомономеров - акриловой кислоты и 14,N - диэтиламиноэтилметакрилата, в условиях радикальной полимеризации в вводно-замороженных системах получены низкотоксичные пористые гидрогели, содержащие заряженные группы, пригодные для медико-биологического использования.

2. Установлен характер влияния на протекание процесса гелеобразования в вводнозамороженных системах и характер пористости получаемых гелей (средний размер пор и их распределение по размерам), концентрации и соотношения реагентов, а также температуры и времени проведения процесса.

3. Электронно-микроскопическими исследованиями установлено, что полученные гидрогели представляют собой системы с развитой пористой структурой и размером пор от единиц до сотен микрометров.

4. Показано, что синтезированные макропористые полимерные гидрогели характеризуются высоким значением равновесной набухаемости, зависящим от ионной силы и величины рН раствора.

5. Продемонстрирована возможность использования синтезированных гидрогелей в качестве подложек для культивирования различных типов клеток, а также установлено влияние состава полимера на рост клеток.

6. В опытах на животных продемонстрирована высокая степень биосовместимости синтезированных полимерных систем и их способность к биодеградации с замещением тканями организма

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Голунова, Анна Сергеевна, 2013 год

1. Shtilman МЛ. Immobilization on polymers. VSP: Utreht-Tokyo.- 1993. -P 479.

2. Hoffman A.S. Hydrogels for biomedical applications // Advanced Drug Delivery reviews. 2002. Vol.43, Issue 1. P. 3-12.

3. Drury J. L., Mooney D. J. Hydrogels for tissue engineering: scaffold design variables and applications // Biomaterials. 2003. Vol. 24, Issue 24. P. 4337-4351.

4. Galaev I.Yu., Mattiasson B. 'Smart' polymers and what they could do in biotechnology and medicine// Trends in Biotechnology. 1999. Vol.17, Issue 8. P. 335-340.

5. Ruel-Gariepy E., Leroux J. In situ-forming hydrogels—review of temperature-sensitive systems // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 2004. Vol. 58, Issue 2. P. 409-426.

6. Wichterle O., Lim D. Hydrophilic gels in biologic use // Nature. 1960. Vol. 185. P. 117-118.

7. Peppas N.A. Other Biomedical Applications of Hydrogels // Hydrogels in Medicine and Pharmacy. Vol. 3. Properties and Applications / N.A. Peppas, ed.-Boca Raton, FL: CRC Press, 1987.- P. 177-186

8. Janusz M Rosiak, Fumio Yoshii Hydrogels and their medical applications // Nuclear Instruments and Methods in Physics Research Section B: Beam Interactions with Materials and Atoms. 1999. Vol. 151, Issues 1^. P. 56-64.

9. Muhlebach A, Muller B, Pharisa C, Hofmann M, Seiferling B, Guerry D. New Water-Soluble Photo-Cross-Linkable Polymers Based on Modified Poly(Vinyl Alcohol) // Journal of Polymer Science A: Polymer Chemistry. 1997. Vol.35, Issue 16. P. 3603-3611.

10. Папков С.П. Студнеобразное состояние полимеров.- М.: Химия, 1974.-С. 256.

11. Hennink W.E., van Nostrum C.F. Novel crosslinking methods to design hydrogels // Advanced Drug Delivery Reviews. 2002. Vol. 54, Issuel. P. 13-36.

12. Hoare T.R., Kohane D.S. Hydrogels in drug delivery: progress and challenges // Polymer. 2008. Vol. 49, Issue 8. P. 1993-2007.

13. Hoffman A.S. Stimuli-responsive polymers: Biomedical applications and challenges for clinical translation // Advanced Drug Delivery Reviews. 2013. Vol. 65, Issue 1. P. 10-16.

14. Chunyu Chang, Lina Zhang Cellulose-based hydrogels: Present status and application prospects // Carbohydrate Polymers. 2011. Vol. 84, Issue 1. P. 40-53.

15. Eagland D., Crowther N.J., Butler C.J. Complexation between polyoxyethylene and polymethacrylic acid — The importance of the molar mass of polyethylene // European Polymer Journal. 1994. Vol. 30, Issue 7. P. 767-773.

16. Xiao C., Yang M. Controlled preparation of physical cross-linked starch-g-PVA hydrogel // Carbohydrate Polymers. 2006. Vol. 64, Issue 1. P. 37-40.

17. Goosen M.F.A., O'Shea G.M., Gharapetian H.M., Chou S., Sun A.M. Optimization of microencapsulation parameters: semipermeable microcapsules as a bioartificial pancreas // Biotechnology and Bioengineering. 1985. Vol.27, Issue 2. P. 146-150.

18. Gombotz W.R., Wee S.F. Protein release from alginate matrices // Advanced Drug Delivery Reviews. 1998. Vol. 31, Issue 3. P. 267-285.

19. Sandhya Nair, Remya N.S., Remya S., Prabha D. Nair. A biodegradable in situ injectable hydrogel based on chitosan and oxidized hyaluronic acid for tissue engineering applications // Carbohydrate Polymers. 2011. Vol. 85, Issue 4. P. 838

20. Kosmas Deligkaris, Tadele Shiferaw Tadele, Wouter Olthuis, Albert van den Berg Hydrogel-based devices for biomedical applications // Sensors and Actuators B: Chemical. 2010. Vol. 147, Issue 2. P. 765-774.

21. Congming Xiao, Gaoyan Zhou Synthesis and properties of degradable polyvinyl alcohol) hydrogel // Polymer Degradation and Stability. 2003. Vol. 81, Issue 2. P. 297-301

22. Drumheller P.D., Hubbell J.A. Densely crosslinked polymer networks of poly(ethylene glycol) in trimethylolpropane triacrylate for cell-adhesion-resistant surfaces // Journal of Biomedical Materials Research. 1995. Vol. 29, Issue 2. P. 207215.

23. Kuen Yong Lee, Soon Hong Yuk Polymeric protein delivery systems// Progress in Polymer Science. 2007. Vol. 32, Issue 7. P. 669-697.

24. Энциклопедия полимеров. T.2.-M.: Советская энциклопедия, 1974г. 1032 с.

25. Тагер А.А. Физикохимия полимеров. 4-е изд., перераб. и доп. Учеб. пособие для хим. фак. ун-тов / А. А. Тагер; под ред. А. А. Аскадского. М. : Научный мир, 2007. - 573с.

26. Chen J.,Park P., Park K. Synthesis of superporous hydrogels: Hydrogels with fast swelling and superabsorbent properties // Journal of Biomedical Materials Research. 1999. Vol. 44, Issue LP. 53-62.

27. Chen J, Blevins W.E, Park H, Park K. Gastric retention properties of superporous hydrogel composites // Journal of Controlled Release. 2000. Vol. 64, Issues 1-3. P. 39-51.

28. Ciara M. Murphy, Matthew G. Haugh, Fergal J. O'Brien The effect of mean pore size on cell attachment, proliferation and migration in collagen-glycosaminoglycan scaffolds for bone tissue engineering // Biomaterials. 2010. Vol. 31, Issue 3. P. 461-466.

29. Shapiro L., Cohen S. Novel alginate sponges for cell culture and transplantation // Biomaterials. 1997. Vol. 18, Issue 8. P. 583-590.

30. Horak D., Lednicky F., Bleha M. Effect of inert components on the porous structure of 2-hydroxyethyl methacrylate-ethylene dimethacrylate copolymers // Polymer. 1996. Vol. 37, Issue 19. P. 4243-4249.

31. Xue Bai, Zhengfang Ye, Yanfeng Li, Liuqing Yang, Yanzhi Qu, Xiaozhe Yang Preparation and characterization of a novel macroporous immobilized microorganism carrier // Biochemical Engineering Journal. 2010. Vol. 49, Issue 2. Pages 264-270.

32. Sannino A., Netti P.A., Mensitieri G., Nicolais L. Designing microporous macromolecular hydrogels for biomedical applications: a comparison between two techniques // Composites Science and Technology. 2003. Vol. 63, Issue 16. P. 24112416.

33. Oxley, Corkhill P.H., Fitton J.H., Tighe B.J. Macroporous hydrogels for biomedical applications: methodology and morphology // Biomaterials. 1993.

34. Vol. 14, Issue 14. P. 1064-1072.

35. Kara L. Spiller, Samuel J. Laurencin, Devon Charlton, Suzanne A. Maher, Anthony M. Lowman Superporous hydrogels for cartilage repair: Evaluationof the morphological and mechanical properties // Acta Biomaterialia. 2008. Vol. 4, Issue 1. P. 17-25.

36. Lozinsky V.I., Plieva F.M., Galaev I.Yu. The potential of polymeric cryogels in bioseparation //Bioseparation.-2001. Vol. 10, Issue 4-5. P. 163-188.

37. Штильман M.И., Артюхов А. А., Козлов B.C. , Тсатсакис A.M. Эпоксидсодержащие пористые гидрогели поли (2-гидроксиэтилметакрилата): исследование влияния условий синтеза // Пластические массы. 2002. № 7. С. 2428

38. Daniel Howard, Lee D. Buttery, Kevin M. Shakesheff and Scott J. Roberts Tissue engineering: strategies, stem cells and scaffolds // Journal of Anatomy. 2008.-Vol. 213, Issue 1. P. 66-72.

39. Daniel L. Coutu, Azizeh-Mitra Yousefi, Jacques Galipeau Three-dimensional porous scaffolds at the crossroads of tissue engineering and cell-based gene therapy // Journal of Cellular Biochemistry. 2009. Vol. 108, Issue 3. P. 537-546.

40. Thomas Billiet, Mieke Vandenhaute, Jorg Schelfhout, Sandra Van Vlierberghe, Peter Dubruel A review of trends and limitations in hydrogel-rapid prototyping for tissue engineering//Biomaterials. 2012. Vol. 33, Issue 26. P. 6020-6041.

41. Dietmar W. Hutmacher, Michael Sittinger, Makarand V. Risbud Scaffold-based tissue engineering: rationale for computer-aided design and solid free-form fabrication systems// Trends in Biotechnology. 2004. Vol. 22, Issue 7. P. 354-362.

42. Travis J. Sill, Horst A. von Recum Electrospinning: Applications in drug delivery and tissue engineering// Biomaterials. 2008. Vol. 29, Issue 13. P. 19892006.

43. Лозинский В.И. Криогели на основе природных и синтетических полимеров: получение, свойства и области применения // Успехи химии. 2002. Т. 71. №6. С. 559-585.

44. Рихтер М., Аугустат 3., Ширбаум Ф. Избранные методы исследования крахмала: переводе немецкого / под ред. Н. П. Козьмпной и В. С. Грю-нера. — М.: Пищевая промышленность, 1975.— 183 с.

45. Hsieh C.-Y., Tsai S.-P., Ho M.-H., Wang D.-M., Liu C.-E, Hsieh C.-H. Tseng R-C., Hsieh H.-J. Analysis of freeze-gelation and cross-linking processes for preparing porous chitosan scaffolds // Carbohydrate Polymers. 2007. Vol. 67, Issue 1. P. 124-132.

46. Сергеев Г. Б., Батюк Б. А. Криохимия. — М.: Химия, 1978. — 296 с

47. Г.Б. Сергеев, В. А. Батюк. Реакции в многокомпонентных замороженных системах // Успехи химии. 1976. Т. 45, № 5. С. 793-826.

48. Konstantinova N.R., Lozinsky V.I. Cryotropic gelation of ovalbumin solutions

49. Food Hydrocolloids. 1997. Vol. 11, Issue 2. P. 113-123.

50. Lozinsky V.I., Golovina Т.О., Gusev D.G. Study of cryostructuration of polymer systems:: XIII. Some characteristic features of the behaviour of macromolecular thiols in frozen aqueous solutions // Polymer. 2000. Vol. 41, Issue 1. P. 35-47.

51. Лозинский В.И. Криогели на основе природных и синтетических полимеров: получение, свойства и области применения // Успехи химии. 2002. Т. 71. №6. С. 559-585.

52. Hickey A.S., Peppas N.A. Mesh size and diffusive characteristics of semicrystalline poly(vinyl alcohol) membranes prepared by freezing/thawing techniques // Journal of Membrane Science. 1995. Vol. 107, Issue 3. P. 229-237.

53. Stammen J.A., Williams S., Ku D.N., Guldberg R.E. Mechanical properties of a novel PVA hydrogel in shear and unconfined compression // Biomaterials. 2001. Vol. 22, Issue 8. P. 799-806.

54. Hassan C.M., Ward J.H., Peppas N.A. Modeling of crystal dissolution of poly (vinyl alcohol) gels produced by freezing/thawing processes // Polymer. 2000. V. 41, Issue 18. P.6729-6739.

55. Hernández R., Sarafian A., López D., Mijangos C. A reappraisal of the 'thermoreversible' gelation of aqueous poly(vinyl alcohol) solutions through freezing-thawing cycles // Polymer. 2002. Vol. 43, Issue 21. P. 5661-5663.

56. Ijima H., Ohchi Т., Ono Т., Kawakami K. Hydroxyapatite for use as an animal cell culture substratum obtained by an alternate soaking process // Biochemical Engineering Journal. 2004. Vol. 20, Issues 2-3. P. 155-161.

57. Kim S.J., Park S. J., Kim Sun I. Syntesis and characteristics of inteipenetrating polymer network hydrogels composed of poly (vinyl alcohol) and poly (N-isopropylacrylamide) // Reactive and Functional Polymers. 2003. Volume 55, Issue 1. P. 61-67.

58. Kim S.J., Park S. J., Kim S. I. Swelling behavior of interpenetrating polymer network hydrogels composed of poly (vinyl alcohol) and chitosan // Reactive and Functional Polymers. 2003. Volume 55, Issue 1. P. 53-59.

59. Wu K.Y.A., Wisecarver K.D. Cell immobilization using PVA cross-linked with boric-acid // Biotechnology and Bioengineering. 1992. Vol. 39, Issue 4. P. 447449.

60. Chang C.C., Tseng S.K. Immobilization of Alcaligenes eutrophus using

61. PVA crosslinked with sodium nitrate // Biotechnology Techniques. 1998. Vol. 12, Issue 12. P. 865-868.

62. Takayuki Takei, Kaoru Ikeda, Hiroyuki Ijima, Koei Kawakami Fabrication of poly(vinyl alcohol) hydrogel beads crosslinked using sodium sulfate for microorganism immobilization // Process Biochemistry. 2011. Vol. 46, Issue 2 P. 566-571.

63. Hashimoto S., Furukawa K. Immobilization of activated-sludge by PVA boricacid method // Biotechnology and Bioengineering. 1987. Vol. 30, Issue 1. P. 5259.

64. Rosiak J.M., Ulanski P. Synthesis of hydrogels by irradiation of polymers in aqueous solution // Radiation Physics and Chemistry. 1999. Vol. 55, Issue 2. P. 139151.

65. David J.T. Hill, Andrew K. Whittaker, Zainuddin Water diffusion into radiation crosslinked PVA-PVP network hydrogels // Radiation Physics and Chemistry 2011. Vol. 80, Issue 2. P. 213-218.

66. Schmedlen R. H., Masters K. S., West J. L. Photocrosslinkable polyvinylalcohol hydrogels that can be modified with cell adhesion peptides for use in tissue engineering // Biomaterials. 2002. Vol. 23, Issue 22. P. 4325^1332.

67. Nuttelman C. R., Henry S. M., Anseth K. S. Synthesis and characterization of photocrosslinkable, degradable poly(vinyl alcohol)-based tissue engineering scaffolds. // Biomaterials. 2002. Vol. 23, Issue 17. P. 3617-3626.

68. Биосовместимые материалы / Под ред. В.И. Севастьянова, М.П. Кирпичникова. — М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2011. — 544 с.

69. Liu С., Xia Z., Czernuszka J. Т. Design and development of three-dimensional scaffolds for tissue engineering// Chemical Engineering Research and Design. 2007. Vol. 85, Issue 7. P. 1051-1064.

70. Lim F. Microencapsulation of living cells and tissues—theory and practice // Biomedical applications of microencapsulation / Lim F. Boca Raton.- FL: CRC Press; 1984. P. 137-154.

71. Uebersax. L., Hagenmuller, H., Hofmann S., Gruenblatt E., Muller, R., Vunjak-Novakovic G., Kaplan D.L., Merkle H.P., Meinel L. Effect of scaffold design on bone morphology in vitro // Tissue Engineering. 2006. Vol. 12, Issue 12. P. 34173429.

72. Roach P., Parker Т., Gadegaard N., Alexander M.R. Surface strategies for control of neuronal cell adhesion: A review // Surface Science Reports. 2010.

73. Vol. 65, Issue 6. P. 145-173.

74. Anthony D. Metcalfe, Mark W.J. Ferguson Bioengineering skin using mechanisms of regeneration and repair // Biomaterials. 2007. Vol. 28, Issue 34. P. 5100-5113.

75. Galen B. Schneider, Anthony English, Matthew Abraham, Rebecca Zaharias, Clark Stanford, John Keller The effect of hydrogel charge density on cell attachment // Biomaterials. 2004. Vol. 25, Issue 15. P. 3023-3028.

76. Mahrokh Dadsetan, Andrew M. Knight, Lichun Lu, Anthony J. Windebank, Michael J. Yaszemski Stimulation of neurite outgrowth using positively charged hydrogels // Biomaterials. 2009. Vol. 30, Issues 23-24. P. 3874-3881.

77. Altankov G., Richau K., Groth Th.The role of surface zeta potential and substratum chemistry for regulation of dermal fibroblasts interaction // Materialwissenschaft und Werkstofftechnik. 2003. Vol. 34, Issue 12. P. 1120-1128.

78. Штильман М.И., Артюхов A.A., Золотайкина T.C., Коршак А.Ю., Горчаков А.В., Тсатсакис A.M. Сшитые макропористые полимерные гидрогели поливинилового спирта: исследование влияния условий синтеза // Пластические массы. 2005. №12. С. 27-29.

79. Артюхов А.А., Штильман М.И., Чалых А.Е., Золотайкина Т.С., Тсатсакис A.M. Макропористые гидрогели поливинилового спирта: исследование формирования структуры // Пластические массы.- 2006.- JSb 1,- С. 27-31.

80. Сергеев Г.Б., Бытюк В.А., Степанов М.Б., Сергеев Б.М. Кинетическая модель химических реакций в замороженных растворах. // Докл. АН СССР. 1973. Т.213, №4. С.891-899.

81. ЮО.Штильман М.И., Остаева Г.Ю., Артюхов А.А., Тсатсакис А.А., Козлов B.C. Эпоксидсодержащие пористые гидрогели акриламида: исследование влияния условий синтеза. //Пластмассы. 2002. №.3. С.25-28.

82. Артюхов А.А., Штильман М.И., Чалых А.Е., Семенчук О.В., Тсатсакис A.M. Криогели ионогенных мономеров // Пластические массы. 2006. № 2. С. 2125

83. Bruice T.C., Butler A.R. Catalysis in Water and Ice. II. The Reaction of Thiolactones with Morpholine in Frozen Systems // Journal of the American Chemical Society. 1964. Vol. 86, Issue 19. P. 4104-4108.

84. Pincock R.E., Kiovsky Т.Е. Kinetics of reactions in frozen solutions // Journal of Chemical Education.- 1966.- Vol. 43, Issue 7.- P. 358.

85. Pincock R.E. Reactions in frozen systems // Accounts of Chemical Research.-1969.- Vol. 2, Issue4.- P. 97-109.

86. Артюхов А. А. Макропористые гидрогели на основе сшитого поливинилового спирта: дис. . канд. хим. наук. М., 2006. 152 с.

87. Елизаров Д.П., Елькин А.И., Даванков В.А., Решетников В.И.