Стандартизация лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов на содержание антиоксидантов амперометрическим методом. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Демченкова, Елена Юрьевна

• Демченкова, Елена Юрьевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Демченкова, Елена Юрьевна

14.04.02. - фармацевтическая химия, фармакогнозия

ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Доктор медицинских наук, А.Н. Миронов Кандидат фармацевтических наук,

O.A. Горошко

Москва

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Антиоксиданты: термины и определения.

1.2. Основные типы свободных радикалов.

1.3. Классификация веществ, обладающих антиоксидантной активностью.

1.4. Антиоксиданты в системе защиты организма.

1.5. Роль антиоксидантных лекарственных средств и природных соединений в профилактике и лечении окислительных повреждений.

1.6. Методы измерения антиоксидантной активности.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика объектов исследования.

2.2. Методы исследования.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 3. Определение содержания основных антиоксидантов в лекарственном растительном сырье.

3.1 .Определение содержания суммы флавоноидов.

3.2.Определение содержания окисляемых веществ.

3.3.Определение содержания органических кислот.

Глава 4. Определение суммарного содержания антиоксидантов.

4.1. Определение содержания антиоксидантов в индивидуальных веществах.

4.1.1. Оптимизация методики определения антиоксидантов в индивидуальных веществах.

4.1.2. Валидация методики.

4.2. Определение суммарного содержания антиоксидантов в лекарственном растительном сырье.

4.2.1. Оптимизация методики определения содержания суммы антиоксидантов в лекарственном растительном сырье.

4.2.2.Валидация методики.

4.2.3. Сравнительные исследования зависимости содержания суммы антиоксидантов в JIPC от содержания суммы биологически активных веществ.

4.3. Определение содержания суммы антиоксидантов в фитопрепаратах.

4.3.1. Определение содержания суммы антиоксидантов в настоях из исследуемого сырья.

4.3.1.1. Изменение содержания суммы антиоксидантов при хранении настоев.

4.3.2. Содержание суммы антиоксидантов в гепатопротекторных фитопрепаратах.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Стандартизация лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов на содержание антиоксидантов амперометрическим методом.»

Актуальность темы.

Под влиянием на организм человека неблагоприятных экологических факторов, повышенных физических и эмоциональных нагрузок, а также при длительных заболеваниях и в процессе старения свободнорадикальное окисление в организме активизируется - развивается, так называемый, синдром переоксидации или окислительный стресс [1].

При этом свободные радикалы оказывают повреждающее воздействие на мембраны клеток, в организме нарушаются процессы обмена веществ, накапливаются различные продукты промежуточного обмена. Такие сдвиги нарушают работу центральной нервной системы, иммунной системы, усугубляют воспалительные процессы в организме, способствуют образованию атеросклеротических бляшек в коронарных и мозговых сосудах и ускоряют старение организма [2]. Для замедления этих процессов целесообразно использовать лекарственные средства, обладающие антиоксидантными свойствами. Однако необходимо контролируемое потребление антиоксидантов. Рекомендуемые уровни потребления антиоксидантов приняты в РФ в 2004 году и составляют 350-1300мг/сутки. У различных лекарственных средств и лекарственного растительного сырья существует большая вариабельность антиоксидантной активности (АОА), а, следовательно, необходимо определять АОА каждого испытуемого лекарственного средства.

Антиоксиданты нашли широкое применение в фармацевтической промышленности и медицине в последнее время в составе биологически -активных добавок, косметических и лекарственных средств. Сейчас большое внимание уделяется средствам природного происхождения, таким как лекарственные растения и фитопрепараты, в которых содержатся такие известные антиоксиданты как флавоноиды, оксикоричные и фенолкарбоновые кислоты, кумарины и другие. Рост подобной продукции на рынке предъявляет все более серьезные требования к сертификации товара. В настоящее время в нормативных документах РФ не существует единого показателя антиоксидантной активности подобных препаратов. Для проверки их качества используются длительные, трудоемкие, не всегда сопоставимые и неточные исследования, опирающиеся иногда на неаттестованные методики. Расчет содержания антиоксидантов проводится по разным стандартам.

Необходимость введения новых методик, обеспечивающих надежные результаты по определению суммарной антиоксидантной активности или суммарного содержания антиоксидантов (ССА) подобных препаратов и создание нормативной документации на данный метод, является актуальной задачей, от решения которой зависит качество, эффективность и безопасность предлагаемых на рынке продуктов. Также актуальным представляется проведение исследований по содержанию антиоксидантов относительно стандартов-антиоксидантов.

Одним из перспективных методов определения активности антиоксидантов являются электрохимические методы, обладающие высокой чувствительностью, возможностью анализировать как водные, так и неводные среды [3]. В настоящей работе для решения вопросов по определению количественной оценке антиоксидантов предложен амперометрический метод, как весьма чувствительный к наличию в среде кислорода и его активных радикалов.

Цель исследования.

Оптимизировать методику амперометрического определения содержания антиоксидантов для оценки качества и стандартизации лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов.

Задачи исследования.

1. Оптимизировать и валидировать методику амперометрического определения содержания антиоксидантов в лекарственном растительном сырье и в фитопрепаратах.

2. Провести изучение по корреляции содержащихся антиоксидантов (флавоноидов, органических кислот, окисляемых веществ) и суммарного содержания антиоксидантов в исследуемом лекарственном растительном сырье (JIPC).

3. Изучить сроки годности настоев из исследуемого JIPC амперометрическим методом на суммарное содержание антиоксидантов.

4. Провести определения суммарного содержания антиоксидантов в гепатопротекторных фитопрепаратах.

5. Разработать проект ОФС на амперометрический метод определения антиоксидантов в JIPC и в фитопрепаратах.

Научная новизна.

Предложена усовершенствованная методика определения содержания суммы антиоксидантов в JIPC и фитопрепаратах.

Впервые проведена валидация методики ампером етрического определения содержания суммы антиоксидантов в JIPC, которая может быть использована для оценки качества лекарственного растительного сырья. Предложенный метод дополнит арсенал in vitro исследований на содержание антиоксидантов в объектах фармацевтической промышленности;

Дана оценка антиоксидантной активности ряда веществ природного происхождения. Установлено, что содержание антиоксидантов в исследуемых объектах уменьшается в ряду: фенилантраниловая кислота - кофейная кислота - галловая кислота - кверцетин - аскорбиновая кислота.

Впервые определено содержание суммы антиоксидантов амперометрическим методом в водных извлечениях JIPC - лист мяты, трава репешка, цветки пижмы, цветки бессмертника, плоды расторопши, корневище аира, трава полыни горькой, столбики с рыльцами кукурузы. Выявлено наличие корреляции между содержанием суммы антиоксидантов в водных извлечениях и содержанием в них основных групп веществ обладающих антиоксидантной активностью (флавоноидов и окисляемых веществ).

Впервые установлено ССА в настоях из исследуемого сырья и гепатопротекторных фитопрепаратах амперометрическим методом, а также влияние времени хранения настоев на суммарное содержание антиоксидантов.

Показана перспективность метода определения ССА для стандартизации лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов.

Практическое применение и внедрение результатов в практику. На основании проведенных исследований разработаны:

• методическое пособие для студентов фармацевтических факультетов медицинских вузов и фармацевтов по оценке результатов применения препаратов с антиоксидантным действием - «Исследование антиоксидантных свойств лекарственных препаратов» (Москва, 2009);

• впервые методика определения содержания суммы антиоксидантов в JIPC апробирована в лаборатории химико-фармацевтических препаратов №2 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ НЦЭСМП и предложена для внедрения в производственный процесс как критерий контроля сырья (Акт апробации методики от 29.09.11.).

• предложенная методика может быть использована при скрининговых исследованиях для выявления перспективных групп JIPC для разработки новых лекарственных средств.

• показана возможность назначения настоев мяты листьев и репешка травы в качестве дополнительного источника антиоксидантов (о чем даны рекомендации в дополнение к инструкции по применению).

• разработан проект ОФС на амперометрический метод определения антиоксидантов в субстанциях, JIPC и лекарственных средствах. Положения, выносимые на защиту.

1. Использование валидированой методики для определения качества и стандартизации растительного сырья и фитопрепаратов на суммарное содержание антиоксидантов.

2. Результаты изучения количественного содержания основных антиоксидантов (флавоноидов, органических кислот, окисляемых веществ) в исследуемом J1PC в сравнении с суммарным содержанием антиоксидантов ЛРС - лист мяты, трава репешка, цветки пижмы, цветки бессмертника, плоды расторопши, корневище аира, трава полыни горькой, столбики с рыльцами кукурузы.

3. Результаты исследований ССА в настоях из исследуемого JIPC и изменение содержания ССА в процессе их хранения.

4. Результаты изучения содержания ССА в гепатопротекторных фитопрепаратах.

Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены на научно-практической конференции «Клинико-фармакологические подходы в оптимизации фармакотерапии» (Москва, 2006), XIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006), II конгрессе Международного общества клинических фармакологов и фармацевтов стран СНГ (Москва, 2010) и научно-практической конференции (on-line) "Актуальные вопросы клинической фармакологии и фармации" (Москва, 2011).

Связь задач исследования с проблемным планом. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой и планом НИР ФГУ НЦЭСМП на 2006-2010 г. «Разработка новых подходов для оценки антиоксидантной активности лекарственных средств». Публикации.

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 3 статьи в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, глав: «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты и их обсуждение», выводов, списка литературы из 139 источников, (47 из которых на иностранных языках) и приложений.

Результаты эксперимента обобщены в 26 таблицах, проиллюстрированы 11 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Демченкова, Елена Юрьевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Оптимизирована и валидирована методика амперометрического определения суммарного содержания антиоксидантов в субстанциях, лекарственном растительном сырье и фитопрепаратах, что позволяет проводить оценку их качества и стандартизацию по данному показателю. Для расчета содержания антиоксидантов предложен антиоксидант-стандарт - галловая кислота.

2. Наибольшее содержание суммы антиоксидантов, флавоноидов и окисляемых веществ отмечается у листьев мяты и травы репешка, поэтому их целесообразно включать в растительные сборы и БАДы антиоксидантного действия как дополнительные источники антиоксидантов.

3. Установлено, что суммарное содержание антиоксидантов у всех видов исследуемого сырья коррелирует с содержанием основных групп обладающих антиоксидантной активностью - суммой флавоноидов, окисляемыми веществами. Это дает возможность использовать показатель суммарного содержания антиоксидантов как экспрессный критерий оценки качества сырья.

4. Среди исследованных настоев ЛРС наибольшее суммарное содержание антиоксидантов обнаруживается в настоях мяты и репешка. Однако это содержание уменьшается вдвое по прохождении 24 ч в настоях всех видов исследуемого сырья, что дает возможность использовать этот метод для установления сроков хранения настоев из JIPC и фитопрепаратов.

5. Проведен анализ суммарного содержания антиоксидантов в некоторых фитопрепаратах гепатопротекторного действия. Наибольшее значение ССА наблюдается у препаратов расторопши «Силимар» и «Гепабене». Выявлена положительная корреляция между ССА и содержанием суммы флаволигнанов в препаратах расторопши.

6. Разработан проект ОФС «Определение содержания антиоксидантов амперометрическим методом».

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Демченкова, Елена Юрьевна, 2012 год

1. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.

2. Бурлакова Е.Б., Губарева А.Е., Архипова Г.В., Рогинский В.А. Модуляция перекисного окисления липидов биогенными аминами в модельных системах // Вопр. мед. химии. -1992.-№ 2.- С. 17-20.

3. Яшин А.Я. Новый прибор «ЦветЯуза-01-AA» для определения суммарного содержания антиоксидантов в пищевых продуктах, БАДах // Мир измерений. — 2008. — № 2, с. 45-48.

4. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные вещества. Ленинград: Наука, 1985. - 333 е., Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи соврем, биол. - 1990.-Т.110, вып. 1. - С. 20-33.

5. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии // Биоантиоксилители в регуляции метабошлизма в норме и патологии. -М.: Наука, 1982.- С. 3-37.

6. Мисин В.М., Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г., Завьялов А.Ю. Необходимость создания единых терминов и определений в области «Антиоксиданты» // Биоантиоксидант: Тез. докл. VIII Международной конф. Москва, 4-6 октября 2010 г. М.: РУДН, 2010.- 558 с.

7. Бурлакова Е.Б., Мисин В.М., Храпова Н.Г., Завьялов А.Ю. Антиоксиданты. Термины и определения. М.:РУДН, 2010. - 63 с.

8. O'Gara С. е.a., A sensitive electrochemical method for quantitative hydroperoxide determination, Chem. Res. Toxicol, 1989, v2, p295-300.

9. Яшин Я.И., Рыжнев В.Ю., Яшин А.Я., Черноусова Н.И. Природные антиоксиданты. Содержание в пищевых продуктах и их влияние на здоровье и старение человека. М.: Транслит. - 2009. - 186 с.

10. Burton G.W., Ingold К,U. Carotene is an unusual type of lipid antioxidant // Sci. Wash. DC. -1984. Vol. 224. - P. 569-573.

11. Bast A., Haenen G.R.M.M., Doelman C.J.A. Oxidants and antioxidants: State of the art // Amer. J. Med. 1991. - Vol. 91, Suppl 3C. -P. 2S-13S.

12. Jonas S.K., RileyP.A., Willson R.L. Hydrogen peroxide cytotoxicity: Low temperature enhancement by ascorbate or reduced lipoate // Biochem. J. 1989. -Vol. 264.-P. 651-655.

13. Wang X., Liu J., Yokoi I. et al. Direct detection of circulating free radicals in the rat using electron spin resonance spectrometry // Free Radical Biol, and Med. -1992. Vol. 12. -P. 121-126.

14. Niki E. Action of ascorbic acid as a scavenger of active and stable oxygen radicals // Amer Klin. Nutr. 1991. - Vol. 54. - P. SI 119-S1124.,

15. Кульберг А.Я., Оганян P.P., Шибнев В.А. Утилизация радикалов кислорода синтетическими пролин-богатыми олигопептидами// Биохимия. 1992. - № И. - С. 1744-1750.

16. Munday R., Winterboume С.С. Reduced glutathione in combination with superoxide dismutase as an important biological antioxidant defense mechanism // Biochem. Pharmacol. 1989. -Vol. 38. - P. 4349-4352.

17. Pryor W.A., Church D.F., Govindan C.K., Crank G. Oxidation of thiols by nitric oxide and nitrogen dioxide: synthetic utility and toxicological implications // J. Org. Chem. 1982. -Vol. 47.-P. 156-159.

18. Stamler J.S., Jaraki О., Osborne J. et al. Nitric oxide circulates in mammalian plasma primarily as an S-nitroso adduct of serum albumin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. - P. 7674-7677.

19. Feelisch M., NoackE. Nitric oxide (NO) formation from nitrovasodilators occurs independently of hemoglobin or non-heme iron // Eur. J. Pharmacol. 1987. -Vol. 142. - P. 465-469.

20. Сухарев A.E. Лактоферрин, его свойства и значение в патологии // Патол. Физиология и эксперим. терапия. 1992. -№3. - С. 55-58.

21. Balla G., Jacob H.S., Balla J. Et al. Ferritin a cytoprotective antioxidant stratagem of endothelium // J. Biol. Chem. - 1992. -Vol.267. - P. 18148-18153.

22. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И. и др. Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. М., 1991. - С. 1-249.

23. Копо Y., Kashine S., Yoneyama Т. et al. Iron chelation by chlorogenic acid as a natural antioxidant // Biosci. Biotechnol. and Biochem. 1998. - Vol. 62. -P.22-27.

24. Maples K.R., Mason R.P. Free radical metabolite of uric acid // J. Biol. Chem. -1988. -Vol. 263.-P. 1709-1712.

25. Sevanian A., Davies K.J.A., Hochstein P. Serum urate as an antioxidant for ascorbic acid // Amer. J. Klin. Nutr. 1991. - Vol. 54. - P. SI 129-S1134.

26. Yagi K. Female hormones act as natural antioxidants a survey of our research // Acta Biochim

27. Hardeland R., Reiter R.J., Poeggeler В., Tan D.-X. The significance of the metabolism of the neurohormone melatonin: antioxidative protection andformation of bioactive substances // Neurosci. Biobehav. Rev. 1993. - Vol. 17.- P.347-357.

28. Меныцикова Е.Б., Зенков H.K., Микичур Н.И., Сафронов И.Д. Активированные кислородные метаболиты (АКМ) в биологических окислительных реакциях: влияние фитопрепаратов // Бюл. СО РАМН. -1992.-№4.- С. 112-117.

29. Голиков C.H., Саноцкий И.В., Тиунов Jl.A. Общие механизмы токсического действия. Л., 1986. - С. 157 - 168.

30. Барабой В.А., Брехман И.И., Голотин В.Г., Кудряшов Ю.Б. / Перекисное окисление и стресс СПб.: Наука, 1992.

31. Сейфулла Р.Д., Борисова И.Г. Проблемы фармакологии антиоксидантов // Фармакология и токсикология. 1990. - Т. 53, N 6. - С. 3 - 10.

32. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М.: Изд-во МГУ, 1973.

33. Logani М.К., Davies R.E. Lipid Oxidation: Biologic Effects and Antioxidants -A Review. Lipids. - 1980. - Vol. 15, N 6. - P. 485 - 495.

34. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972

35. Ланкин В.З., Вихерт A.M., Тихадзе A.K. и др. / Роль перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза // Вопр. мед. химии. 1989. - N 3. -С. 18 - 23.

36. Carg G., Wilmott J., Znaiden A. Protective Role of Natural Antioxidants //Cosmetics & Toiletries. 1987. - Vol. 102, Febr. - P. 37 - 46.

37. Воскресенский O.H., Бобырев B.H., Павленко В.Ф., Жутаев И.А. / Хроническая полиантиоксидантная недостаточность как модель старения // Докл. АН СССР. -1983. Т. 268, N 2. - С. 470 - 473.

38. Обухова Л.К. Свободно-радикальные механизмы старения в биологической эволюции.// Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М., 1986. - Т. 5. - С. 36 - 68.

39. Воскресенский О.Н., Бобырев В.Н. Биоантиоксиданты облигатные факторы питания // Вопр. мед. химии. - 1992. - N 4. - С. 21 - 26.

40. Садовникова И.П. Влияние геропротекторов-антиоксидантов на иммунные реакции // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М.,1986. -С. 69- 109.

41. Акифьев А.П., Потапенко А.И. Этапность изменений ДНК и ее роль в процессах старения // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. -М., 1986 Т 5 - С. 7-35.

42. Воскресенский О.Н. Влияние природных антиоксидантов на патологические процессы, связанные со старением // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М., 1986. - Т. 5. - С. 163 -201.

43. Бурлакова Е.Б., Сторожок Н.М., Храпова Н.Г. и др. / Изучение аддитивного антиокислительного действия суммы природных антиоксидантов липидов // Вопр. мед. химии. 1990. - N 4. - С. 72 - 74.

44. Бушма М.И., Лукиненко П.И. Роль витаминов в функции монооксигеназ // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1994. - Т. 57, N 5. - С. 53 - 57.

45. Скакун Н.П. Использование антиоксидантов для лечения больных туберкулезом / Фармакология и токсикология. 1991. - Т. 54, N 1. - С. 80 -84.

46. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник.-М., 2010, 1250 с.

47. Дроговоз СМ., Слышков В.В., Сальникова СИ. Эффективность оксикоричных кислот при токсических поражениях печени // Науч. конф. мол. ученых России, поев. 50-летию АМН: Тез. докл. / РАМН. М.,. - 1993. -Т. 56,N2.-С 55 - 58.

48. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна, 1996.

49. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Чучалин B.C. / Эффективность гепатозащитных средств при экспериментальном хроничегким гепатите // Экспериментальная и клиническая фармакология.- 1996.-N1.-С. 24-26.

50. Саратиков A.C., Венгеровский А.И. Новые гепатопротекторы природного происхождения // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995.- N 1. С. 8 - 11.

51. Корсун В.Ф. Лекарственные растения в гепатологии. М.: Издательский дом «Русский врач», 2005. - 274 с.

52. Пастушенков Л.В., Лесиовская Е.Е. Растения-антигипоксанты (фитотерапия).- С.-Петербург:Химико-фармацевтический институт, 1991.96 С.

53. Государственная фармакопея СССР: Вып.1. Общие методы анализа. / МЗ СССР.-11-е изд., доп.-М.Медицина, 1987.-333 с.

54. Дубинин Н.П., Пашин Ю-В. Мутагенез и окружающая среда. М., 1978.

55. Золотая Р.Д., Бугримская И.А., Башкатова В. Г. и др. / О целесообразности антиоксидантной терапии больных наркоманиями и токсикоманиями // Науч. конф. мол. ученых России, поев. 50-летию АМН: Тез. докл. / РАМН. М.,. С. 62-63.

56. Золотая Р.Д., Миненкова Е.А., Евсеенко J1.E. Влияние водорастворимых антиоксидантов на течение острой алкогольной интоксикации // Тез. докл. III Всесоют. конф. "Биоантиоксидант", 27-29 июня 1989 г. Москва, 1989.-Т. 2.-С. 70.

57. Иванова A.C. Динамика антиокислительной активности липидов легких и крови при экспериментальном силикозе // Всесоюз. конф. "Биоантиоксидант", 16-18 мая, 1983 г. Черноголовка, 1983. - С. 136.

58. Каплан Э.Я., Гукасов В.М., Максимова И.А. и др. / Обоснование к использованию антиоксидантов при свинцовой интоксикации организма //

59. Тез. докл. I Всесоюз. конф. "Биоантиоксидант", 16-18 мая 1983 г. -Черноголовка, 1983. С. 130 - 131.

60. Кибардин С.А., Макаров К.А. Тонкослойная хроматография в органической химии. -М.: Химия, 1978. 128 с.

61. Кишкун A.A., Андреева -Л.И. Антиоксидантное действие церулоплазмина при интоксикации тетрахлорметаном И солянокислым гидразином // Тез. докл. Ill Всесоюз. конф. "Биоантиоксидант", 27-29 июня, 1989 г. М., 1989. -Т. 2. - С. 78 - 79.

62. Кожанова Л.А., Бараш Г.И., Федорова Г.А. Определение водо- и жирорастворимых витаминов в премиксах методом ВЭЖХ // Химический анализ веществ и материалов / Тез. докладов Всероссийской конференции.-М., 2000.-С.70.

63. Кукес В.Г., Свистунов A.A., Булаев В.М., Сычев Д.А., Ших Е.В. Лекарственные растения. Пособие для студентов медицинских институтов по курсу клинической фармакологии, М, 2011, 108 с.

64. Кьосев П.А. Полный справочник лекарственных растений. -М., 2000. -992с.

65. Лекарственное растительное сырье, применяемое в медицинской практике в СССР/ Под общ. ред. К.Ф.Блиновой.-Л., 1991.-53 с.

66. Лутцева А.И., Маслов Л.Г. Методы контроля и стандартизации лекарственных препаратов, содержащих водорастворимые витамины // Хим.- фарм. журнал.- 1999.-№9.-С.32-37.

67. Якушина Л.М., Исаева В.А., Бендер Е.Д. Определение некоторых жирорастворимых витаминов в сыворотке крови методомвысокоэффективной хроматографии // Хроматография в биологии и медицине. -М., 1986.-С.96.

68. Горошко О.А. Фармакогностическое исследование соплодий хмеля // Дисс. канд. фарм наук. -М. 2005. - 198 с.

69. Xia W., Zhang X. Isolation of P-carotene from discarded tobacco leaves // Chines J. Chromatogr. Vol.22 (l).-2004. P.54-56.

70. Mai G. , Biswas. Detection of organosulfur compounds on thin-layer using Dragendorffs reagent// J. Chromatogr. 387.- 1987.- P. 556-558.

71. Antolovich M., Prenzler P.D., Patsalides E. et. al. Methods for testing antioxidant activity // The Analist. 2002. - Vol. 127. - P. 183-198.

72. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ.-М.: ЗАО «ИИА «Ремедиум» -2000.-c.398.

73. Шкарина Е.И. Изучение антиоксидантных свойств препаратов на основе лекарственного растительного сырья, автореф. дисс. . канд. фарм. наук.-М.-2001.-28 с.

74. Абдуллин И.Ф., Турова Е.Н., Будников Г.К. Кулонометрическая оценка антиоксидантной способности экстрактов чая электрогенерированным бромом // Аналитическая химия. — 2001. — № 6. — Т. 56.

75. Брайнина Х.З., Иванова А.В., Шарафутдинова Е.Н. Оценка антиоксидантной активности пищевых продуктов методом потенциометрии // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. — 2004. — № 4.

76. Плотников Е.В., Короткова Е.И., Дорожко и др. // Заводская лаборатория, 2009, Т. 74, № 12, С. 12.

77. Короткова Е.И. Новый способ определения активности антиоксидантов // Физическая химия. — 2000. — № 9.

78. Bandoniene D., Murkovic М., Pfannhauser W., Venskutonis P.R., Gruzdiene D. Detection and activity evaluation of radical scavenging compounds by using DPPH free radical and on-line HPLC-DPPH methods. // Eur. Food Res. Technol, 2002, v.214. P. 143-147.

79. Mc Evan M.J, Senthilmohan S.T. A method of assaying the antioxidant activity of pure compounds, extracts and biological fluids.-US Patent № 2004/005911, 15.01.2004.

80. Максимова T.B., Никулина Н.И., Пахомов В.П., Шкарина Е.И., Чумакова З.В., Арзамасцев А.П. Способ определения антиокислительной активности. Патент РФ №2170930, 20.07.2001.

81. МВИ-001-44538054-07. Суммарная антиоксидантная активность // Методика выполнения измерений на кулонометрическом анализаторе. ООО Концерн «Отечественные инновационные технологии», г. Жердевка Тамбовской обл., 2007. С. 6.

82. Яшин Я.И., Яшин А.Я., Пахомов В.П. Установка для определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных соединений. Решение о выдаче патента на изобретение №2003123073/15 (024965). Дата подачи заявки 25.07.2003 г.

83. Яшин Я.И. Проточно-инжекционная система с амперометрическим детектором для селективного определения антиоксидантов в пищевых продуктах и напитках // Российский химический журнал.- 2008.- t.LII.- № 2, с.130-135.

84. Венгеровский А.И., Седых И.М., Саратиков А.С. Влияние полифенолов маакии амурской на антитоксическую функцию печени // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1993. - Т. 56, N 5. - С 47 - 49.

85. Qin Ch. X., Hughes R.A., Williams S. J., Woodman O. L. Understanding the cardioprotecyive effects of flavonoids discovery of relaxant flavonoids without antioxidant activity // J. Med. Chem.-2008.-V/51/-P. 1874-1884.

86. Головкин Б.И., Руденская P.H., Трофимова И.А., Шредер А.И. Биологически активные вещества растительного происхождения. М.: Наука, 2001.- Т.2.-762 с.

87. Глазунова Т.Ю., Березникова М.Б., Бунятян Н.Д. // IX конгресс «Человек и лекарство», М.-2002.-С. 600.lOO.Ow Y.Y., Stupans I. Gallic acid and gallic acid derivatives: effects on drug metabolizing enzymes // Curr. Drug Metab. -2003.-V. 4.-№ 3.-P 241-248.

88. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект ОФС) // Ведомости научного центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств.- МЗ РФ.-2001, № 1, с.28-29.

89. Руководство о валидации методик анализа лекарственных средств.-Минздравсоцразвития РФ. Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ от 2009 г.

90. Moatti R.,Fauron P. La phyto therapie: Therapeutique differente.-Paris. Libr. Malone, 1993.-P.245.

91. Макарова M.H. Антиоксидантная активность флавоноидов, их олигокомпонентных комбинаций и полифенолсодержащих препаратов в эксперименте.-Дисс. .канд. биол. наук, СПб.-2002, 178 с.

92. Рябинина Е.И., Зотова Е.Е., Ветрова Е.Н., Пономарева Н.И., Сравнение химико-аналитических методов определения танидов и антиокисдантной активности растительного сырья // Аналитика и контроль. 2011 г. Т. 15. № 2.-с. 194-202.

93. Ахрем А.А., Кузнецов А.И. Тонкослойная хроматография.-М., 1964-174с.

94. ПО.Мышкин В. А., Башкатов С. А., Николенко А., Вакарица А.Ф. / Антиоксидантная терапия в профилактике необратимых состояний при интоксикациях // Тез. докл. II Всесоюз. конф. "Биоантиоксидант", 14-16 мая 1986 г. Черноголовка, 1986. - Т. 1. С. 91 - 92.

95. Naguib Y.M.A. A fluorometric method for measurement of oxygen radical-scavenging activity of water-soluble antioxidants. // Anal. Biochem., 2000, v.284. P.93-98.

96. Davalos A., Gomez-Cordoves C., Bartolome B. Extending applicability of the oxygen radical absorbance capacity (ORAC-Fluorescein) assay. // J. Agric. Food Chem, 2004, v.52. P.48-54.

97. Pellegrini N.,Salvatore S., Valtuefia S. at. Al. Development and validation of a food frequency questionnaire for the assessment of dietary total antioxidant capacity // J. Nutr., 2007, V. 137, P.93-98.

98. Саприн А.Н. Детоксикация ксенобиотиков в организме // Итоги науки и техники. Общие проблемы физико-химической биологии. М., 1990. - Т. 22. -С31 115.

99. Bandoniene D., Murkovic М., Pfannhauser W., Venskutonis P.R., Gruzdiene D. Detection and activity evaluation of radical scavenging compounds by using DPPH free radical and on-line HPLC-DPPH methods. // Eur. Food Res. Technol., 2002, v.214. P. 143-147.

100. Николаев C.M. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобиллиарной системы. -Новосибирск, 1992. -155 с.

101. Valkonen М., Kuusi Т. Spectrophotometry assay for total peroxyl radical trapping antioxidant potential in human serum // J. Lipid Res., 1997.- V. 38.-P.823-833.

102. Goldberg D.M., Hoffman В., Yang J. Phenolic cjnstituents, furans and total antioxidant status of distilled spirits // J. Agric. Food Chem., 1999, V/ 47, P. 1978-1985.

103. Синявский Ю.А., Сатымбекова A.T. Влияние специализированного продукта на процессы перекисного окисления липидов в организме в условиях хромовой интоксикации // Всесоюз. конф. "Биоантиоксидант", 16-18 мая, 1983 г. Черноголовка, 1983. - С. 87 - 88.

104. Whitehead Т.Р., Thrope G.H.G., Maxwell S.R.J. Enhanced chemiluminescent assay for antioxidant capacity in biological fluids. // Anal. Chim. Acta., 1992, v.266. P.265-277.

105. Castanas E. A method for the determination of total antioxidant capacity (TAC) and corrected total antioxidant capacity in fluids.-WO Patent №2004/068140, 27.01.2003.

106. Antolovich M., Prenzler P.D., Patsalidest E., McDonald S. At/al/ Methods for testing antioxidant activity || Analyst, 2002, V. 27, P. 183-198.

107. Шаблинская A.B. Антиоксиданты как защитные средства при длительном воздействии пестицидов различной химической структуры // Науч. конф. мол. ученых России, поев. 50-летию АМН: Тез. докл. / РАМН. М., 1994. -С. 155 - 156.

108. Шаршунова А., Шварц 3., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии.- М.: Мир, 1980.- Т. 1,2.-291,619с.

109. Широколава А.В., Айзбалте И.В., Козлов А.В. и др. Влияние некоторых антиоксидантов сыворотки крови на люминол-зависимуюхемилюминисценцию при реакции Фентона // Биофизика.-1994.-Т.38, вып. 4.-С. 749-750.

110. Cervellati R., Renzulli С., Guerra М. С., Speroni Е. Evaluation of antioxidant activity of some natural polyphenolic compounds using the Briggs-Rauscher reaction method. // J. Agric. Food Chem., 2002, V.50. P.7504-7509.

111. Labuda J., Bukova M., Heilerova U., Silhar S., Stepanek I. Evaluation of the redox properties and anti/pro-oxidant effects of selected flavonoids by means of a DNA-based electrochemical biosensor. // Anal. Bioanal. Chem, 2003, v.376. P.168-173.

112. Alonso A.M., Guillen D.A., Barroso C.G. Development an electrochemical method for the determination of antioxidant activity. Application to grape-derived products. // Eur. Food Res. Technol., 2003, v.216. P.445-448.

113. Mannino S., Buratti S., Cosio M.S., Pellegrini N. Evaluation of the antioxidant power of olive oils based on a FIA system with amperometric detection. // Analyst, 1999, v. 154. P.l 115-1118.

114. Dianzani C., Parrini M., Ferrara C., Fantozzi R. Effect of 4-hydroxynonenal on superoxide anion production from primed human neutrophils // Cell Biochem. And Fanction. 1996. -Vol. 14. - P. 193-200.

115. Lichtenthaler R., Marx F., Kind O.M. Determination of antioxidative capacities using an enhanced total oxidant scavenging capacity (TOSC) assay. // Eur. Food Res. Technol., 2003, v.216. P. 166-173.

116. Клименко И.В., Бахтюрина A.B., Журавлева T.C., Мисин В.М. Исследования стабильности галловой кислоты // Биоантиоксидант: Тезисы докл. VIII Международной конференции. -М.: РУДН, 2010.-е. 43-44.