Сравнительный анализ структурно-функциональных особенностей глюкоамилаз из Saccharomyces cerevisiae и Aspergillus awamori тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Кожокина, Оксана Михайловна

  • Кожокина, Оксана Михайловна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2003, Воронеж
  • Специальность ВАК РФ03.00.02
  • Количество страниц 178
Кожокина, Оксана Михайловна. Сравнительный анализ структурно-функциональных особенностей глюкоамилаз из Saccharomyces cerevisiae и Aspergillus awamori: дис. кандидат биологических наук: 03.00.02 - Биофизика. Воронеж. 2003. 178 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кожокина, Оксана Михайловна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. Современные представления о механизме действия ферментов.

ГЛАВА 2. Структурно-функциональные свойства амилолитических ферментов.

2.1. Основные представления о структурных особенностях амилаз.

2.2. Физико-химические свойства и механизм действия амилолитических ферментов.

2.3. Применение амилолитических ферментов.

2.4. Особенности структуры и функции глюкоамилазы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 3. Объекты и методы исследований.

3.1. Объекты исследований.

3.2. Методы исследований.

3.2.1. Глюкозооксидазный метод определения каталитической активности глюкоамилазы.

3.2.2. Очистка и определение молекулярной массы ферментов методом гель-хроматографии.

3.2.3. Подготовка образцов для анализа методом инфракрасной спектрофотометрии (ИКС).

3.2.4. Аналитический электрофорез белков по модифицированному методу Дэвиса.

3.2.5. Цифровая методика дифференциально-термического анализа (ДТА) для исследования процесса термической инактивации белков.

3.2.6. Метод получения компьютерных моделей пространственной структуры белковых молекул на базе программы MolScript.

3.2.7. Фотоокисление белков в присутствии метиленового голубого.

3.2.8. Статистическая обработка результатов экспериментов.

ГЛАВА 4. Выделение, очистка и исследование некоторых физико-химических свойств глюкоамилаз из Saccharomyces cerevisiae JTB-7 и

Aspergillus awamori.

ГЛАВА 5. Кинетико-термодинамические аспекты процесса термической инактивации глюкоамилаз.

ГЛАВА 6. Сравнительный анализ аминокислотных последовательностей и особенностей вторичной структуры глюкоамилаз различного происхождения.

ГЛАВА 7. Особенности строения активного центра глюкоамилазы.

Молекулярный механизм катализа реакции гидролиза крахмала.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биофизика», 03.00.02 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительный анализ структурно-функциональных особенностей глюкоамилаз из Saccharomyces cerevisiae и Aspergillus awamori»

Актуальность проблемы. В последние десятилетия при совершенствовании многих биотехнологических процессов широко используются амилазы микроорганизмов, которые заменяют и вытесняют энзимы растительного и животного происхождения. Исследование структурно-функциональных свойств амилолитических ферментов приобретает особую значимость в связи с применением их в различных отраслях промышленности в роли биокатализаторов, а также в медицине в качестве лекарственных препаратов. Особый теоретический и практический интерес представляют исследования по выявлению оптимальных режимов функционирования ферментных препаратов глюкоамилазы (а-1,4:1,6-глюкан-4,6-глюкогидролазы, КФ 3.2.1.3), осуществляющих гидролиз гликозидных связей в молекулах крахмала. Использование глюкоамилазы в биотехнологии в роли катализатора связано с подбором эффективных продуцентов данного энзима, в качестве которых в нашей работе предложены микромицеты Aspergillus awamori и дрожжи Saccharomyces cerevisiae J1B-7. Поиск путей регулирования биокаталитической активности фермента неразрывно связан с расшифровкой закономерностей и молекулярного механизма катализа реакции гидролиза субстрата. Для решения поставленной задачи необходимо осуществить детальное исследование физико-химических, кинетико-термодинамических свойств глюкоамилазы, особенностей первичной, вторичной, третичной структуры этого энзима, провести идентификацию функциональных групп его активного центра.

Выполненная нами работа проведена в соответствии с тематикой научных исследований кафедры биофизики и биотехнологии Воронежского госуниверситета, входящей в координационный план научно-исследовательских работ РАН.

Цели и задачи исследования. Целью данной работы является проведение сравнительного анализа структурно-функциональных особенностей глюкоамилаз из Saccharomyces cerevisiae и Aspergillus awamori.

Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач:

• разработка эффективной методики выделения и очистки препарата глюкоамилазы из дрожжей S. cerevisiae JIB-7;

• исследование некоторых физико-химических свойств ферментов из S. cerevisiae и Asp. awamori;

• изучение кинетико-термодинамических аспектов реакции гидролиза крахмала глюкоамилазами плесневого и дрожжевого происхождения;

• создание модели перехода типа «упорядоченная , глобула -хаотический клубок» в процессе денатурации белковых макромолекул объектов исследования;

• анализ аминокислотных последовательностей изучаемых ферментов для выявления гомологичных фрагментов их полипептидных цепей;

• определение соотношения типов вторичной структуры и их топографии в пространственной модели молекул глюкоамилазы из S. cerevisiae и Asp. awamori;

• идентификация и установление местоположения функционально-значимых групп в активном центре ферментов плесневого и дрожжевого происхождения.

Научная новизна.

- впервые в качестве источника глюкоамилазы предложен штамм хлебопекарных дрожжей S. cerevisiae JIB-7; разработаны эффективные методы выделения и очистки данного фермента;

- выявлены оптимальные режимы функционирования ферментных препаратов глюкоамилазы из S. cerevisiae и Asp. awamori;

- рассмотрены основные этапы процесса термической инактивации глюкоамилаз, выделенных из S. cerevisiae и Asp. awamori;

- предложена модель перехода глобула-клубок, включающая промежуточные стадии процесса разворачивания белковой молекулы глюкоамилазы;

- осуществлен анализ первичных структур глюкоамилаз рода Saccharomyces и Aspergillus; выявлены гомологичные фрагменты их полипептидных цепей;

- с помощью методов ИК-спектрофотометрии и компьютерного моделирования осуществлено изучение особенностей вторичной структуры глюкоамилаз плесневого и дрожжевого происхождения; выявлена топология всех составляющих элементов в третичной структуре молекул этих ферментов;

- осуществлена идентификация функциональных групп активных центров глюкоамилаз из S. cerevisiae и Asp. awamori;

- с привлечением экспериментальных данных и результатов компьютерного моделирования предложен молекулярный механизм катализа реакции гидролиза гликозидных связей в молекуле крахмала с помощью глюкоамилазы.

Практическая значимость. Результаты исследований дают дополнительную информацию о процессах термической инактивации белковых молекул, позволяют расширить представления о молекулярных механизмах ферментативного расщепления полисахаридов. Подобранные рациональные условия функционирования глюкоамилаз, выделенных из различных источников, могут применяться для оптимизации режимов реакций катализа в биотехнологическом производстве. Полученные данные могут быть использованы при чтении студентам биологических факультетов ВУЗов курсов «Химическая энзимология», «Физико-химическая биология», «Молекулярная биология и биофизика», «Биофизика».

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы были представлены на VI Международной конференции «Экология и здоровье человека. Экологическое образование. Математические модели и информационные технологии» (Криница, 2001), Научной сессии сотрудников Воронежского государственного университета (Воронеж, 2001), II

Международном симпозиуме «Фракталы и прикладная синергетика» (Москва, 2001), IX Международной конференции «Математика. Компьютер. Образование» (Дубна, 2002), 6-й Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2002), Международной школе-семинаре «Нелинейные процессы в дизайне материалов» (Воронеж, 2002), II Научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (Хургада (Египет), 2003).

Публикации. По теме диссертационной работы имеется 10 публикаций: из них 3 статьи и 7 тезисов.

На защиту выносятся следующие положения:.

1. Эволюционная близость молекул глюкоамилаз плесневого и дрожжевого происхождения, характеризующихся низкой степенью гомологичности полипептидных цепей, проявляется на более высоких уровнях иерархии белковых глобул.

2. Делеции и замены остатков в полипептидных цепях глюкоамилаз рода Aspergillus не затрагивают функционально значимых групп их активных центров, располагающихся в консервативных областях аминокислотных последовательностей белковых молекул.

3. Высокая степень подобия пространственной организации белковых молекул глюкоамилазы из S. cerevisiae и Asp. awamori определяет идентичность механизмов катализа гидролиза крахмала, осуществляемого данными ферментами.

4. Разворачивание белковой глобулы глюкоамилазы вследствие термической денатурации не является кооперативным процессом, а включает ряд промежуточных состояний.

5. Схема процессов гипотетического механизма катализа гидролиза а-1,4-гликозидных связей в молекуле крахмала.

Структура и объем работы.

Диссертационная работа включает 177 страниц машиннописного текста; состоит из Введения, 7 Глав, Заключения, Выводов, Списка литературы (220

Похожие диссертационные работы по специальности «Биофизика», 03.00.02 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Кожокина, Оксана Михайловна

выводы

1. Разработанная методика очистки, включающая стадии ультрафильтрации на мембране УФМ-50, осаждения изопропиловым спиртом и гель-хроматографии на сефадексах G-25 и G-100, позволила получить гомогенный препарат глюкоамилазы из культуральной жидкости дрожжей S. cerevisiae JIB-7 с 70-кратной степенью чистоты.

2. Оптимальными условиями функционирования фермента плесневого происхождения являются: t° = 40°С, рН = 4,7, [S] = 1,16 ' 10"6 моль/л; для энзима из дрожжей данные параметры составляют: t° = 37°С, рН = 4,7, [S] = 1,17 ' 10"6 моль/л.

3. Препарат глюкоамилазы из дрожжей S. cerevisiae является менее термостабильным, чем фермент плесневого происхождения. Действие температур 80-82°С приводит к необратимой денатурации молекул этих ферментов.

4. Процесс термической инактивации глюкоамилаз как переход между макроскопическими состояниями «упорядоченная глобула - хаотический клубок» характеризуется сменой трех промежуточных стадий.

5. Аминокислотные последовательности глюкоамилаз из Asp. awamori и S. cerevisiae гомологичны на -13%.

6. Функционально- важные группы всегда локализованы в консервативных областях первичных структур ферментов, эволюционно близких друг другу. Делеции и вставки отдельных аминокислотных остатков и их цепочек не затрагивают каталитический домен молекулы глюкоамилазы.

7. В образовании упорядоченных элементов вторичной структуры задействованы -66% всех аминокислотных остатков полипептидных цепей глюкоамилаз из Asp. awamori и S. cerevisiae. а-Спирали и Р-слои не имеют четко выраженной тенденции располагаться в каких-либо определенных местах третичной структуры (внутри или на поверхности глобулы, в области N- или С-конца).

8. На основании результатов определения величин рК диссоциирующих групп, фотоокисления белков в присутствии метиленового голубого и компьютерного моделирования выявлено, что в состав активного центра молекул глюкоамилаз из Asp. awamori и S. cerevisiae входят индольное кольцо остатка триптофана и три карбоксильные группы аспарагиновой и глутаминовой кислот.

9. За образование фермент-субстратного комплекса ответственными являются О-гликозилированные участки крахмалсвязывающего домена молекулы глюкоамилазы и Тгр-120. Гидролиз а-1,4-гликозидных связей в молекуле крахмала осуществляется карбоксильными группами пары Asp-Glu, обладающими протон-акцепторными и протон-донорными свойствами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для исследования структурно-функциональных свойств нами были получены гомогенные препараты глюкоамилазы из Aspergillus awamori и Saccharomyces cerevisiae JIB-7.

Оптимальными режимами функционирования энзима плесневого происхождения являются: t = 40°С, рН = 4,7, [S] = 1,16 " 10'6 моль/л; для фермента из дрожжей данные параметры составляют: t = 37°С, рН = 4,7, [S] = 1,17' 10"6 моль/л.

Изучение физико-химических свойств глюкоамилаз позволило выявить узкий диапазон значений температур проявления каталитической активности фермента из S. cerevisiae, в связи с чем был проведен ряд экспериментов, позволивший изучить процесс термической инактивации энзимов, относящихся к различным систематическим группам. Исследование термостабильности препаратов глюкоамилаз, кинетико-термодинамических параметров термоинактивации, а также дифференциально-термический анализ конформационных переходов в белковой глобуле указывают на однотипность протекания механизма термической инактивации для ферментов как дрожжевого, так и плесневого происхождения. На основе полученных результатов нами предложена схема процесса перехода типа «упорядоченная глобула - хаотичный клубок» для молекулы глюкоамилазы, включающая ряд промежуточных стадий.

Для проведения корректного исследования механизмов действия глюкоамилаз, выделенных из различных источников, был осуществлен сравнительный анализ структур их белковых макромолекул.

В итоге выполненных исследований установлена гомологичность первичных структур глюкоамилаз из Asp. awamori и Saccharomyces cerevisiae на -13%. Обнаружена высокая степень корреляции одиночных аминокислотных остатков; встречаемость дуплетов и триплетов наблюдается гораздо реже. Выявлено, что основное количество гомологичных звеньев представлено остатками Ser и Thr, обеспечивающих хорошую гидратацию ферментов и служащих местами присоединения углеводных компонентов в гликопротеидах. Высокое содержание остатков с алкильными боковыми цепями (Ala, Val, Leu, lie, Met) в молекуле глюкоамилазы из Asp. awamori указывает на устойчивость этого энзима к действию органических растворителей.

Для выявления константных областей аминокислотных последовательностей ферментов узкой группы был осуществлен сравнительный анализ сиквенсов субъединиц глюкоамилаз из микромицетов рода Aspergillus: Asp. niger, Asp. awamori XI00, Asp. awamori var. kawachi, Asp. shirousami, Asp. oryzae. Обнаружено, что первичные структуры рассматриваемых белковых молекул гомологичны друг другу на -86%.

Выявлено, что в состав константных областей полипептидных цепей глюкоамилаз плесневого происхождения входят остатки Asp, Glu и Тгр, что позволяет предположить их участие в осуществлении катализа реакции гидролиза гликозидных связей в молекуле крахмала.

Сопоставление первичных структур глюкоамилаз Asp. specias показало, что частота замен остатков на протяжении полипептидных цепей отличается высокой вариабельностью. Установлено, что делеции аминокислот затрагивают только О-гликозилированный домен белковой глобулы и не отражаются на функциональных свойствах фермента. Анализ топологии остатков Cys в полипептидной цепи исследуемых глюкоамилаз показал, что данные аминокислоты занимают жестко фиксированные позиции и входят в состав абсолютно идентичных участков первичной структуры, обусловливая существование системы дисульфидных связей. Итог сравнения аминокислотных последовательностей субъединиц глюкоамилаз из микромицетов рода Aspergillus представлен в виде схемы. Высокая степень гомологичности показана для ферментов из Asp. awamori XI00 и Asp. shirousami; самые существенные различия обнаружены между глюкоамилазми из Asp. awamori XI00 и Asp. oryzae.

Для выявления особенностей вторичной структуры были зарегистрированы ИК-спектры препаратов глюкоамилазы из Asp. awamori и S. cerevisiae. Установлено, что соотношение упорядоченных структур и нерегулярных участков в молекулах изучаемых ферментов статистически не отличаются друг от друга. Для уточнения информации о вторичной структуре глюкоамилаз различного происхождения, полученной методом ИК-спектрофотометрии, были построены трехмерные изображения всех ее элементов с помощью программы моделирования протеиновых и протеидовых структур MolScript. Анализ топологии и соотношения различных типов вторичной структуры показал, что для фрагмента субъединицы молекулы глюкоамилазы из Aspergillus awamori характерна плотная упаковка ядра в виде 13 ос-спиралей, 11 Р-слоев и 19 неупорядоченных участков; для фермента из Saccharomycopsis fibuligera, взятого в качестве представителя энзима дрожжевого происхождения, свойственно наличие 13 ос-спиралей, 13 Р-слоев и 23 аморфных участков. Выявлено, что Р-структура изучаемых энзимов имеет антипараллельные цепи. Показано, что -66% аминокислотных остатков полипептидных цепей глюкоамилаз из Asp. awamori и S. fibuligera задействованы в образовании упорядоченных элементов вторичной структуры. Топология ос-спиралей, Р-структур и неупорядоченных участков в молекулах анализируемых белков свидетельствует об их эволюционной близости.

С привлечением методов графического определения величин констант ионизации (рК), фотоокисления белков в присутствии метиленового голубого и компьютерного моделирования установлены функционально значимые группы активного центра глюкоамилаз. Найденное значение рК| =3,8 соответствует величине рК карбоксильных групп Asp и Glu; значение рК2 =5,2 не имеет однозначной трактовки. Фотоокисление ферментных препаратов в п присутствии метиленового голубого (10" моль/л) позволило исключить участие остатка гистидина в акте катализа реакции гидролиза крахмала и отнести рК2 =5,2 к отклонению значения рК карбоксильной группы Asp или Glu от ожидаемой величины, обусловленному влиянием микроокружения данных остатков. Метод компьютерного моделирования дал возможность установить порядковый номер и положение каталитически активных групп в полости активного центра молекулы глюкоамилазы из Asp. awamori: Asp-55, Glu-179 и Glu-400, а также Тгр-120, выполняющего субстратсвязывающую функцию, фотоокисление которого в присутствии метиленового голубого мы, очевидно, и наблюдали. Топология His-254, находящегося вблизи активного центра фермента, на стыке а-спирального и аморфного участков указывает на высокую мобильность данного остатка при изменении физико-химических условий, а также факторов микроокружения, и подтверждает нашу гипотезу о его пассивном отношении к акту катализа.

Анализ пространственных моделей субъединиц молекул глюкоамилазы из Asp. awamori и S. fibuligera позволил выявить следующие черты сходства третичной структуры этих ферментов: 1) аналогичную плотную упаковку гидрофобного ядра; 2) положение активного центра в полости (щели), наличие в нем молекул Н20; 3) участие в каталитическом акте карбоксильной группы Glu.

На основе экспериментальных данных и результатов компьютерного моделирования нами предложена схема гипотетического механизма гидролиза а-1,4-гликозидных связей в молекуле крахмала. Показано, что ответственными за связывание субстрата являются О-гликозилированные участки крахмалсвязывающего домена молекулы глюкоамилазы и Тгр-120; расщепление гликозидных связей осуществляет пара Asp-55 - Glu-X, обладающая выраженными донорно-акцепторными свойствами. Установлено, что именно суммарный электрический заряд полости активного центра фермента, различный на каждой стадии процесса катализа, обеспечивает внедрение молекулы крахмала в «активную полость», ее фиксацию и протягивание через щель в процессе гидролиза до глюкозы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кожокина, Оксана Михайловна, 2003 год

1. Диксон М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб: В 3 т./ Пер. с англ. Л.М. Гинодмана, М.И. Левянт; Под ред. В.К. Антонова, А.Е. Браунштейна. М.: Мир.-Т. 1,- 1982.-392 с.

2. Цыперович А.С. Ферменты / А.С. Цыперович. Киев: "Техшка", 1971. -360 с.

3. Березин И.В. Практический курс ферментативной кинетики / И.В. Березин, А.А. Клесов. М.: Изд-во МГУ, 1976. - 320 с.

4. Попов Е.М. Структурная организация белков / Е.М. Попов. М.: Наука, 1989.-361 с.

5. Попов Е.М. Структурно-функциональная организация белков / Е.М. Попов. -М.: Наука, 1992.-358 с.

6. Волькенштейн М.В. Молекулярная биофизика / М.В. Волькенштейн. М.: Наука, 1975.-503 с.

7. Блюменфельд Л.А. Проблемы биологической физики / Л. А. Блюменфельд. -М.: Наука, 1974.-336 с.

8. Ленинджер А. Биохимия / А. Ленинджер. М.: Мир, 1976. - 957 с.

9. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия / Ю.А. Овчинников. М.: Просвещение, 1987. - 815 с.

10. Келети Т. Основы ферментативной кинетики / Т. Келети. М.: Мир, 1990. -352 с.

11. Березин И.В. Основы физической химии ферментативного катализа / И.В. Березин, К. Мартинек. М.: Высш. шк., 1977. - 280 с.

12. Кретович В.Л. Введение в энзимологию / В.Л. Кретович. М.: Наука, 1986. -336 с.

13. Чернавский Д.С. Концепция «белок-машина» и ее следствия / Д.С. Чернавский, Ю.И. Хургин, С.Э. Шноль // Биофизика. 1987. - Т. 32, вып. 5. -С. 775-781.

14. Кантор Ч. Биофизическая химия / Ч. Кантор, П. Шиммел: В 3 т./ Пер. с англ. А.А. Богданова, Ю.С. Лазуркина, М.Д. Франк-Каменецкого; Под ред. А.А. Богданова.- М.: Мир.-ТЛ 1984.-336 с.

15. Refined crystal structures of glucoamylase Aspergillus awamori Var. XI00 / A.E. Aleshin, C. Hoffmann, L.M. Firsov et. al. // J. Mol. Biol. 1994. - Vol. 238, №6.-P. 575-591.

16. Liljas A. X-Ray studies of protein interactions / A. Liljas, M. G. Rossmann // Ann. Rev. Biochem. 1974. - Vol. 43. - P. 475-507.

17. Structure-function relationships in glucoamylases encoded by variant Saccharomycopsis fibuligera genes / A. Solovicova, T. Christensen, E. Hostinova et. al. // Eur. J. Biochem. 1999. - Vol. 264, № 8. - P. 756-764.

18. Kendrew J.C. The three-dimensional structure of a protein molecule / J.C. Kendrew//Sci. Am. 1961. - Vol. 205.-P. 96-110.

19. Perutz M.F. Structure and mechanism of haemoglobin / M.F. Perutz // Brit. Med. Bull. 1976.-Vol. 32, №3,-P. 195-208.

20. Lysozyme / Eds. E.E. Osserman, R.E. Confield, S. Beychok. New York, 1974. -334 p.

21. Kraulis P. MOLSCRIPT: a program to produce both detailed and shematic plots of protein structures / P. Kraulis // J. Appl. Grystallogr. 1991. - Vol. 24. - P. 946-950.

22. Сюняев Ш.Р. Использование множественного структурного выравнивания для распознавания типа пространственной архитектуры белка / Ш.Р. Сюняев, Ф. Айзенхабер, В.Г. Туманян // Биофизика. 1999. - Т. 44, вып. 4. -С. 620-623.

23. Dynamical probe microscopy of lysozyme crystal growth / L.N. Rashkovich, N.V. Gvozdev, M.I. Sil'nicova et. al. // Scanning Probe Microscopy 2002: Proceedings of International Workshop, March 3-6 2002, N. Novgorod. - N. Novgorod, 2002.-P. 199.

24. Моделирование пространственной структуры белков с помощью метода тритиевой планиграфии / Е.Н. Богачева, А.П. Мороз, А.В. Шишков и др. //

25. Съезд биофизиков России, Москва, 23-27 авг. 1999 г.: Тез. докл. М., 1999.-Т. 1.-С. 14-15.

26. Карплус М. Динамика белковой структуры / М. Карплус, Дж.Э. Мак-Каммон // В мире науки. 1986. - № 6. - С. 4-15.

27. Мажуль В.М. Внутримолекулярная динамика и функциональная активность белков / В.М. Мажуль, Е.М. Зайцева, Д.Г. Щербин // Биофизика. 2000. - Т. 45, вып. 6. - С. 965-989.

28. Гольданский В.И. Роль конформационных подсостояний в реакционной способности белковых молекул / В.И. Гольданский, Ю.Ф. Крупянский, Е.Н. Фролов // Молекулярная биология. 1983. - Т. 17, № 3. - С. 532-542.

29. Исследование динамики белков методами мессбауэровской спектроскопии / Ю.Ф. Крупянский, К.В. Шайтан, В.И. Гольданский и др. // Биофизика. -1987. Т. 32, вып. 5. - С. 761-774.

30. Харакоз Д.П. Нелинейная упругость и динамика глобулярных белков / Д.П. Харакоз // Биофизика. 2000. - Т. 45, вып. 4. - С. 620-630.

31. Статистические распределения дипептидов в белковых структурах и динамические свойства некоторых белковых фрагментов / К.В. Шайтан, А .Я. Муковский, А.А. Беляков и др. // Биофизика. 2000. - Т. 45, вып. 3. -С. 399-406.

32. Структура и стабильность биологических макромолекул / Под. ред. М.В. Волькенштейна. М.: Мир, 1973. - 584 с.

33. Privalov P.L. Stability of proteins / P.L. Privalov // Adv. Protein. Chem. 1982. -Vol. 35.-P. 1-104.

34. Бирштейн T.M. Конформация макромолекул / T.M. Бирштейн, О.Б. Птицын. М.: Наука, 1964. - 391 с.

35. Richardson I.S. The anatomy and taxonomy of protein structure / I.S. Richardson // Adv. Prot. Chem. 1981. - Vol. 34. - P. 167-339.

36. Хорлин А.Я. Активные центры карбогидраз / А.Я. Хорлин // Структура и функции активных центров ферментов: Мат. симп. к 70-летию акад. Браунштейна. М., 1974. - С. 39-69.

37. Абатуров JI.В. Динамическая функциональная структура глобулярных белков / JI.B. Абатуров, Н.Г. Носова // II Съезд биофизиков России, Москва, 23-27 авг. 1999 г.: Тез. докл. -М., 1999.-Т. 1.-С. 7-8.

38. Аксенов С.И. Вода и ее роль в регуляции биологических процессов / С.И. Аксенов. -М.: Наука, 1990. 113 с.

39. Браунштейн А.Е. Процессы и ферменты клеточного метаболизма / А.Е. Браунштейн. М.: Наука, 1987. - 546 с.

40. Галич И.П. Амилазы микроорганизмов / И.П. Галич. Киев: Наук, думка, 1987.- 192 с.

41. Квеситадзе Г.И. Грибные и бактериальные амилазы / Г.И. Квеситадзе. -Тбилиси: Мецниереба, 1984. 154 с.

42. Takagi Т. Bacterial and mold amylases / Т. Takagi, H. Toda, Т. Isemura // Enzymes.- 1971.-№5.-P. 235-271.

43. Toda H. The complete aminoacid sequence Taka-amylase A / H. Toda, H. Kondo, K. Narita// Proc. Jap. Acad. 1982. - Vol. 588, № 2. - P. 208-212.

44. Seon B.K. Stepwise reduction of disulfide bonds in Taka- amylase A / B.K. Seon//Ibid. 1967.-Vol. 61, № 5.-P. 606-614.

45. Svensson B. The complete aminoacid sequence of the glycoprotein, glucoamylase GI, from Aspergillus niger / B. Svensson, K. Larsen, I. Svendsen // Ibid. 1983. - Vol. 48, № 4. - P. 529-544.

46. Anai M. The structure of glycopeptide obtain from Taka-amylase A / M. Anai, T. Ikenaka, Y. Matsushima // Ibid. 1966. - Vol. 59, № 1. - P. 57-62.

47. Pazur J.H. Comparison of the properties of glucoamylases from Rhizopus niveus and Aspergillus niger / J.H. Pazur, B. Lui, F. Mishel // Biotechnol. and Appl. Biochem. 1990.-Vol. 12, № l.-P. 63-78.

48. Substrate binding mechanism of Glu-180 ->Gln, Asp-176 -> Asn, and wild-type glucoamylases from Aspergillus niger / U. Christensen, K. Olsen, B. Stoffer et. al.//Biochemistry.- 1996.-Vol. 35, №47. -P. 15009-15010.

49. Степанов B.M. Молекулярная биология. Структура и функции белков: Учеб. для биол. спец. Вузов / В.М. Степанов; Под ред. А.С. Спирина. М.: Высш. шк., 1996.-335 с.

50. Шерман С.А. Конформационный анализ и установление пространственной структуры белковых молекул / С.А. Шерман, A.M. Андрианов, А.А. Ахрем. Минск: Наука и техника, 1989. - 240 с.

51. Шульц Г. Принципы структурной организации белков / Г. Шульц, Р. Ширмер /. Пер. с англ. В.Е. Шкловера; Под ред. Е.М. Попова. М.: Мир, 1982.-360 с.

52. Двойные и вилочковые водородные связи в а-спиралях глобулярных белков / А.В. Файн, И.Н. Березовский, В.О. Чехов и др. // Биофизика. -2001. Т. 46, вып. 6. - С. 273-278.

53. Yang A.-S. Free energy determinants of secondary structure formation. I. a -Helices / A.-S. Yang, B. Hang // J. Mol. Biol. 1995. - Vol. 252, № 3. - P. 351356.

54. Ефимов A.B. Стандартные структуры в белковых молекулах. I. а-(3-Шпильки / А.В. Ефимов // Молекулярная биология. 1986. - Т. 20, № 2. -С. 329-339.

55. Мурзин А.Г. Многогранники, описывающие укладку спиралей в белковой глобуле / А.Г. Мурзин, А.В. Финкельштейн // Биофизика. 1983. - Т. 28, № 5.-С. 905-911.

56. Crystal structure of the cell cycleregulatory protein sue 1 reveals a P-hinge conformational switch / Y. Bourne, A. Arvai, S. Bernstein et. al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92, № 22. - P. 10232-10236.

57. Janecek S. Sequence similarities in a/p-barrel enzymes revealed by conserved regions of ос-amylase / S. Janesek // FEBS Lett. 1993. - Vol. 316, № 1. - P. 2326.

58. Janecek S. Functionally essential, invariant glutamate near the C-terminus of strand P 5 in various a/p B.-barrel enzymes as a possible indicator of their evolutionary relatedness / S. Janecek, S. Balaz // Protein Eng. 1995. - Vol. 8, № 8.-P. 809-813.

59. Machius M. Three-dimensional structure of calcium depleted thermostable a-amylase from Bacillus licheniformis at 2,2 A° resolution / M. Machius, G. Wiegand, R. Huber // Protein Eng. 1995. - Vol. 8, № 1. - P. 21.

60. Бреслер C.E. Введение в молекулярную биологию / С.Е. Бреслер. M.-JI.: Наука, 1966.-516 с.

61. Башаров М.А. Концепция посттрансляционного сворачивания белков: насколько она реалистична? / М.А. Башаров // Биохимия. 2000. - Т. 65, вып. 10.-С. 1400-1408.

62. Machius М. Crystal structure of calcium depleted Bacillus licheniformis a-amylase at 2,2 A° resolution / M. Machius, G. Wiegand, R. Huber // J. Mol. Biol. 1995. - Vol. 264, № 4. - P. 545-559.

63. Nucleotide sequence and expression of the glucoamilase encoding gene gla A from Aspergillus oryzae // Y. Hata, K. Tsuchiya, K. Kitamoto et.al. // Gene. -1991.-Vol. 108. - P. 145-150.

64. Structure of glucoamylase from Saccharomycopsis fibuligera at 1,7 A° resolution / J. Sevcik, A. Solovicova, E. Hostinova et. al. // Acta Crystallogr. -1998. Vol. 54, № 5. p. 854-866.

65. Influence of the carbogydrate moiety on the stability of glycoproteins / C. Wang, M. Eufemi, C. Turano et. al. // Biochemistry. 1996. - Vol. 35, № 23. - P. 72997307.

66. Kusunoki M. X-Ray structure and catalytic mechanism of Taka-amylase A / M. Kusunoki, Y. Matsuura, H. Tanaka // J. Jap. Soc. Starch. Sci. 1983. - Vol. 30, N2.-P. 141-147.

67. Toda H. Replacement of the essential calcium in Taka-amylase A with other divalent cations / H. Toda, K. Narita // Ibid. 1967. - Vol. 62, № 6. - P. 767768.

68. Perutz M.F. Stereochemistry of cooperative effects in haemoglobin / M.F. Perutz // Nature. 1970. - Vol. 228, № 5237. - P. 726-734.

69. Артюхов В.Г. Гемопротеиды: Закономерности фотохимических превращений в условиях различного микроокружения / В.Г. Артюхов. -Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1995. 280 с.

70. Electron microscopy of negatively stained jackbean urease at three levels of quaternary structure, and comparison with hydrodynamic studies / W.N. Fishbein, W.F. Engler, J.L. Griffin et.al. // Eur. J. Biochem. 1977. - Vol. 73. -P. 185-190.

71. Rasched J.R. Studies of glutamate dehydrogenase. Analysis of quaternary structure and contract areas between the polipeptide chains / J.R. Rasched, A. Bohn, H. Sund // Eur. J. Biochem. 1977. - Vol. 74. - P. 365-377.

72. Tamaki N. Studies on the oligomeric structure of yeast aldehyde dehydrogenase by cross-linking with bifunctional reagents / N. Tamaki, K. Kimura, T. Hama // J. Biochem. 1978. - Vol. 83. - P. 821-825.

73. Bocker E.A. Arginine decarboxylase from Escherichia coli B: Mechanism of dissociation from the decamer to dimmer / E.A. Bocker // Biochemistry. 1978. -Vol. 17.-P. 258-263.

74. Артюхов В.Г. Кинетические закономерности фотоинактивации лактатдегидрогеназы под воздействием УФ-излучения в условиях различного микроокружения / В.Г. Артюхов, Ю.А. Лысенко, М.А. Наквасина//Биофизика. 2000. - Т. 45, вып. З.-С. 427-431.

75. Изучение некоторых свойств глюкоамилазы сорбционными и спектральными методами / Т.А. Ковалева, В.Ф. Селеменев, A.M. Плохих и др. // Теория и практика сорбционных процессов. Воронеж, 1985. - Вып. 17.-С. 58-61.

76. Трикуленко А.В. Термодинамические и стереохимические критерии оценки стабильности гидрофобных ядер глобулярных белков / А.В. Трикуленко // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 11. - С. 1518-1522.

77. Лим В.И. Принципы формирования пространственной структуры белков и нуклеиновых кислот. Стереохимическое моделирование / В.И. Лим, Г.В. Аглямова // Молекулярная биология. 1999. - Т. 33, № 6. - С. 1027-1034.

78. Скугарев А.В. Поиск ядер сворачивания в пространственных структурах белков / А.В. Скугарев, О.В. Галзитская, А.В. Финкелылтейн // Молекулярная биология. 1999.-Т. 33, №6.-С. 1016-1026.

79. Птицын О.Б. Сворачивание белков: нуклеация и компактные интермедиаты / О.Б. Птицын // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 435443.

80. Птицын О.Б. Самоорганизация белковых структур мост между физикой и биологией / О.Б. Птицын, А.В. Финкельштейн, К.М. Добсон // Молекулярная биология. - 1999.-Т. 33, № 6.-С. 1012-1015.

81. Мартин И. Фолдинг белка, протекающий с участием шаперониновой системы GroEL/GroES / И. Мартин // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 444-452.

82. Фишер М.Т. Участие шаперонина GroE в фолдинге и сборке додекамерной глутаминсинтетазы / М.Т. Фишер // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 453-472.

83. Марусич Е.И. Шапероны в сборке бактериофага Т4 / Е.И. Марусич, Л.П. Курочкина, В.В. Месянжиков // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 473482.

84. Уонг Ч. Изомеразная и шаперонная активности протеиндисульфидизомеразы необходимы для ее функционирования как фолдазы / Ч. Уонг // Биохимия. 1998. - Т.63, вып. 4. - С. 483-490.

85. Курганов Б.И. Рефолдинг белков с участием искусственных шаперонов / Б.И. Курганов, И.Н. Топчиева // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 491499.

86. Логинова Л.Г. Новые формы термофильных бактерий / Л.Г. Логинова, Л.А. Егорова. М.: Наука, 1977. - 175 с.

87. Имшенецкий А.А. Микробиологические процессы при высоких температурах / А.А. Имшенецкий. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1944. - 164 с.

88. Campbell L.L. Thermostable a-amylase of Bacillus stearothermofilus / L.L. Campbell, G.B. Manning // J. Mol. Biol. 1961. - Vol. 236, № 11. - P. 29622965.

89. Heinen W. Variability of molecular size of extracellular amylase produced by intact cells and protoplasts of Вас. caldolyticus / W. Heinen, A.M. Lauwers // Arch. Microbiol. 1975. - Vol. 106, №3. - P. 201-205.

90. Pavlova I.N. Termostable starch degrading enzymes from a strain of thermophilic Bacillus licheniformis / I.N. Pavlova, N.A. Kichakova // Microbiol. 1994.-Vol. 56, № l.-P. 91.

91. Kuo M.J. Isolation of amylolytic strains of Thermoactinomyces vulgaris and production of thermophilic actinomycete amylases / M.J. Kuo, P. A. Hartman // J. Bacteriol. 1966. - Vol. 92, № 3. - P. 723-726.

92. Studies on the amylase from Streptomyces hydroscopicus SF-1084 / H. Hidaka, Y. Koaze, K. Yoshida et. al. // J. Jap. Soc. Starch. Sci. 1974. - Vol. 25, № 2. -P. 148-154.

93. Obi S.K. Some properties of a nighly thermostable a-amylase from a Thermoactinomyces sp. / S.K. Obi, F.J. Odibo // Can. J. Microbiol. 1984. -Vol. 30, №6. -P. 780-785.

94. Alkylation of glucoamylase with acrolein and properties of obtained conjugate / P. Moszczynski, E. Miller, P. Mallgorzata et. al. // Zesz. nauk. Bud. 1994. - № 48.-P. 5-13.

95. Jeang Ch.-L. Purification and characterization of a ran-starch digesting amylase from a soie bacterium Cytophaga sp. / Ch.-L. Jeang, Y.-H Lee, L.-W. Chang // Biochem. and Mol. Biol. Int. 1995. - Vol. 35, № 3. - P. 549-557.

96. Kabo К. Modulation of the behavior of a protein in polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of dodecyl sulfate by varying the cations / K. Kabo, T. Takagi // Anal. Biochem. 1995. - Vol. 224, № 2. - P. 572-579.

97. Shi Y.-C. Влияние различных факторов на конформацию и активность а-амилазы из Bacillus subtilis 86315 / Y.-C. Shi, Y.-M. Jiang, Y. Wu // Chin. Biochem. J. 1995.-Vol. 11, №2.-P. 205-209.

98. Шевелькова A.H. Изучение ингибирующего действия диметиламинометилферроцена на амилазы / А.Н. Шевелькова, А.Д. Рябов,

99. A.П. Синицын // Биохимия. 1993. - Т. 58, вып. 6. - С. 928-937.

100. Влияние ферментативного и химического дегликозилирования на физико-химические свойства глюкоамилазы из Asp. awamori X100/D27 / К.И. Неустроев, A.M. Голубев, A.M. Фирсов и др. // Биохимия. 1993. - Т. 58, №4.-С. 100-103.

101. Гвоздева Е.А. Характеристика центров связывания бифункционального белка-ингибитора протеиназ и а-амилазы / Е.А. Гвоздева, Л.Г. Мацкевич,

102. B.В. Мосолов // Биохимия. 1994. - Т. 59, N 9. - С. 1200-1204.

103. Жеребцов Н.А. Амилолитические ферменты в пищевой промышленности / Н.А. Жеребцов. М.: Лег. и пищ. пром-сть, 1984. - 160 с.

104. Ферменты / Под ред. А.Е. Браунштейна. М.: Мир, 1964.-312 с.

105. Ikenaka Т. Chemical modification on Taka-amylase A . I. Dinitrophenylation of Taka-amylase A / T. Ikenaka // J. Biochem. 1959. - Vol. 46, № 2. - P. 177183.

106. Hoschke A. A study of the role of amylolytic enzymes / A. Hoschke, E. Laszlo, Y. Hollo//Carbohydr. Res. 1980. - Vol. 81, № 1. - P. 145-156.

107. Ковалева Т.А. Кинетико-термодинамические аспекты катализа полисахаридов свободными и иммобилизованными амилазами / Т.А. Ковалева // Биофизика. 2000. - Т. 45, № 3. - С. 439-444.

108. Жеребцов Н.А. Механизм расщепления 2,1-фруктозидных связей инулина инулазой / Н.А. Жеребцов, О.С. Корнеева, Т.Н. Тертычная // Биохимия. 1995. - Т. 60. - С. 80-95.

109. Actions of a- and P-amylase to tri- and tetra-saccharides containing xylose / Y. Nitta, A. Suzuki, K. Takeo et. al. // J. Appl. Glycosci. 1996. - Vol. 43, № 2. -P. 167-172.

110. Takase K. Interaction of catalytic-site mutants of Bacillus subtilis a-amylase with substrates and acarbose / K. Takase // Biochim. et biophys. acta. 1992. -Vol. 1112, № 3. - P. 278-282.

111. Ферментные препараты в пищевой промышленности / Под ред. В.Л. Кретовича, В.Л. Яровенко. -М.: Пищ. пром-сть, 1975. 535 с.

112. Действие иммобилизованных препаратов амилаз и протеаз на измельченный ячмень / Д.Б. Лифшиц, Т.А. Доморникова, Е.С. Паценкер и др. // Пищ. пром-сть. 1981. - Т. 109, № 3. - С. 45-46.

113. Klyosov A.A. The thermostability of glucoamylase immobilized in different ways has a certain limit / A.A. Klyosov, V.B. Gerasimas // Biochim. et biophys. acta. -1979.-Vol. 571,№ l.-P. 162-165.

114. ИЗ. Ладур Т.А. Производство сахаристых продуктов из крахмалсодержащего сырья с применением ферментов / Т.А. Ладур. М.: ЦНИИТЭпищепром,1978.-472 с.

115. Ферментний лкарський препарат "амшаза медична" / 1.П. Галич, О.С. Циперович, Г.Г. Артюх и др. // Фармац. журн. 1973. - № 5. - С. 56-60.

116. Кабанова B.C. Совещание по применению ферментных препаратов / B.C. Кабанова // Фермент, и спиртовая пром-сть. 1983. - № 7. - С.41-43.

117. Макаров К.А. Иммобилизованные препараты в медицине / К.А. Макаров, С.А. Кибардин. М.: Медицина, 1980. - 124 с.

118. Ферменты медицинского назначения / Под ред. Н.М. Терещина. Л.: Медицина, 1975. - 111 с.

119. Номенклатура ферментов / Под ред. А.Е. Браунштейна. М.: ВИНИТИ,1979.-320 с.

120. Рыжакова В.Г. Выделение и очистка препаратов глюкоамилазы / В.Г. Рыжакова, Р.Ф. Фениксова // Прикл. биохим. и микробиол. 1967. - Т. 4, вып. 1.-С. 5-12.

121. Котова Г.А. Глюкоамилаза микроорганизмов / Г.А. Котова, В.Б. Котов, А.С. Сорокина. М.: Пищепромиздат, 1975.-41 с.

122. Савельев А.Н. Углеводный состав и некоторые свойства глюкоамилазы из Aspergillus awamori / А.Н. Савельев, М.Ф. Яковлева, JI.M. Фирсов // Биохимия. 1984. - Т. 49, вып. 11. - С. 1754-1765.

123. Coutinho P.M. Structure-function relationships in the catalytic and starchbinding domains of glucoamylase / P.M. Coutinho, P.I. Reilly // Protein Eng. 1994. - Vol. 7, № 3. - P. 393-400.

124. Савельев А.Н. Об отсутствии множественной атаки олигомерного субстрата глюкоамилазой из Aspergillus awamori / А.Н. Савельев, M.JI. Цендина, JI.M. Фирсов //Биохимия. 1985. - Т. 50, вып. 10. - С. 1653-1660.

125. Ковалева Т.А. Физико-химические и кинетико-термодинамические аспекты катализа свободными и иммобилизованными амилазами: Автореф. дис. . докт. биол. наук / Т.А. Ковалева. Воронеж, 1998. - 48 с.

126. Tanaka A. Randon attack as the hydrolytic reaction mode of disaccharides by Rhizopus glucoamylase / A. Tanaka, S. Takeda // Biosci., Biotechnol., and Biochem. 1995. - Vol. 59, №7. - P. 1372-1373.

127. Synthesis of 2-deoxy-glucooligosaccharides through condensation of 2-deoxy D-glucose by glucoamylase and a-glucosidase / H. Nakano, K. Hamayasu, K. Fujita et. al. // Biosci., Biotechnol. and Biochem. 1995. - Vol. 59, № 9. - P. 1732-1736.

128. Zhang Y. Secondary structure of holo-enzyme and apo-enzyme of aminoacylase unsing CD and FTJR spectroscopy / Y. Zhang, P.R. Chen, H. Biao // Sci. in China. Ser. B. 1994. - Vol. 37, № 12.-P. 1471-1478.

129. Диань И. Определение нуклеотидной последовательности и локализация гена глюкоамилазы гриба Aspergillus awamori XI00. Создание электрофоретического кариотипа / И. Диань, J1.M. Фирсов // Биотехнология. 1995. -№9-10.-С. 14-21.

130. Глюкоамилаза микромицета Aspergillus awamori 466. Препаративное получение / B.C. Григоров, И.Д. Руадзе, Ю.И. Слепокурова и др. // Биотехнология. 1999. - № 4. - С. 45-48.

131. Фениксова Р.В. Выделение и очистка препаратов глюкоамилазы Aspergillus awamori / Р.В. Фениксова, В.Г. Рыжакова // Прикл. биохим. и микробиол. 1968. - Т. 4, вып. 3. - С. 270-276.

132. Новые ферментные препараты из актиномицетных культур, вызывающих протопластирование и лизис аскомицетных дрожжей / Н.Г. Старостина, С.В. Кононова, Е.Н. Ратнер и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1999. - Т. 35, № 2. - С. 141-145.

133. Оптимизация процесса гидролиза белковых субстратов дрожжевыми протеазами Saccharomyces carlsbergensis / А.Д. Неклюдов, А.Н. Иванкин, Г.И. Мосина и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1998. - Т. 34, № 4. - С. 394-397.

134. Штамм дрожжей Saccharomyces vini М-1 для производства розовых игристых вин / Ш.А. Абрамов, С.Ц. Котенко, O.K. Власова и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1995. - Т. 31, № 6. - С. 657-660.

135. Лисюк Г.М. Стеринообразование у дрожжей Saccharomyces carlsbergensis в зависимости от условий аэрации / Г.М. Лисюк, Л.В. Пермякова // Прикл. биохим. и микробиол. 1988. - Т. 24, вып. 5. - С. 660664.

136. Родопуло А.К. Липиды и жирные кислоты у винных дрожжей / А.К. Родопуло, И.А. Егоров, Р.Х. Егофарова // Прикл. биохим. и микробиол. -1988.-Т. 24, вып.1.-С. 94-97.

137. Абдуразакова С.Х. Изучение ферментативной активности дрожжей при разных условиях культивирования / С.Х. Абдуразакова, И.Г. Арсланбекова, Е.А. Ежова // Прикл. биохим. и микробиол. 1985. - Т. 21, вып. 6. - С. 729731.

138. Разделение дрожжевых клеток различных видов с помощью флотации / В.Н. Иванов, А.А. Пиндрус, Е.В. Стабникова и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1987. - Т. 23, вып. 5. - С. 706-713.

139. Биосорбция тяжелых металлов дрожжами Saccharomyces vini / Н.Г. Сариневили, A.JI. Панасюк, Е.И. Столярова и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1992. - Т. 28, вып. 3. - С. 402-408.

140. Влияние иммобилизации на метаболизм дрожжей / И.В. Кузьмичева, В.В. Плотникова, Н.В. Гриц и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1998. -Т. 34, №3.-С. 251-255.

141. Structure of Saccharomyces cerevisiae a agglutinin / M.-H. Chen, Zh.-M. Shen, S. Robin et. al. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, № 44. - P. 2616826177.

142. Науменко Н.И. Изучение автолиза дрожжей Saccharomyces serevisiae, выращенных на этаноле / Н.И. Науменко, С.В. Гордиенко // Прикл. биохим. и микробиол. 1985. - Т. 21, вып. 6. - С. 719-722.

143. Clatrin-dependent localization of a-l,3-mannosyltransferase to the golgi complex of Saccharomyces serevisiae / T.R. Graham, M. Seeger, G.S. Payne et. al. // J. Cell Biol. 1994. - Vol. 127, №3. - P. 667-678.

144. Vukovic R. Structure of the Saccharomyces serevisiae cell wall / R. Vukovic, V. Mrsa // Croat, chem. acta. 1995. - Vol. 68, № 3. - P. 597-605.

145. Краллиш И.JI. Влияние ингибиторов белкового синтеза на активность митохондриальных ферментов дрожжей Saccharomyces serevisiae приобезвоживании / И. Краллиш, Б.Э. Дамберг // Прикл. биохим. и микробиол. 1987.-Т. 23, вып. 5.-С. 613-616.

146. Изменение состава летучих азотсодержащих оснований при длительном хранении автолизата пекарских дрожжей Saccharomyces serevisiae / Н.И. Светлова, И.Л. Журавлева, Р.В. Головня и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1987.-Т. 23, вып. 1.-С. 93-99.

147. Крылова Н.И. Влияние соотношения этанола и глюкозы в среде на бродильную активность и состав хлебопекарных дрожжей / Н.И. Крылова,

148. B.К. Ерошин // Прикл. биохим. и микробиол. 1990. - Т. 26, вып. 6. - С. 812-818.

149. Новая питательная среда для выращивания дрожжей / Ш.А. Абрамов,

150. C.Ц. Котенко, Д.Л. Эфендиева и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1995. -Т. 31, №5.-С. 232-233.

151. Влияние РНКазы Bacillus intermedius на рост культуры дрожжей Saccharomyces serevisiae / Ф.Г. Куприянова-Ашина, А.Ю. Луцкая, А.И. Колпаков и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1996. - Т. 32, № 2. - С. 254-259.

152. Применение панкреатической РНКазы в производстве хлебопекарных дрожжей / А.Ю. Луцкая, А.И. Колпаков, P.M. Кепечева и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1998.-Т. 34, № 5.-С. 588-591.

153. Андреищева Е.Н. Адаптация дрожжей к солевому стрессу / Е.Н. Андреищева, Р.А. Звягильская // Прикл. биохим. и микробиол. 1999. - Т. 35, №3.-С. 243-256.

154. Геотермальная вода в составе питательной среды и морфофизиологические свойства дрожжей Saccharomyces serevisiae / Ш.А. Абрамов, С.Ц. Котенко, Э.А. Халилова и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1999. - Т. 35, № 3. - С. 349-352.

155. John A.Y. Pulsed field gel electrophoresis labeling method to study the pattern of Saccharomyces serevisiae chromosomal DNA synthesis during the

156. Gl/S phase of the cell cycle / A.Y. John, B. Wang, S.Q. Zhang // Anal. Biochem. 1995.-Vol. 227, №1.-P. 32-39.

157. Secondary structure conservation of the U3 small nucleolar RNA introns in Saccharomyces / F. Brule, A. Gregoire, V. Segauet et. al. // C. r. Acad. sci. Ser. 3,- 1995.-Vol. 318, № 12.-P. 1197-1206.

158. Structure-function analysis of the DNA binding domain of Saccharomyces serevisiae ABF1 / G. Cho, J. Kim, H.M. Rho et. al. // Nucl. Acids. Res. 1995. - Vol. 23, № 15. - P. 2980-2987.

159. Chae H.Z. Dimerisation of thiol-specific antiozidant and the essential role of cystein 47 / H.Z. Chae, T.B. Uhm, S.G. Rhee // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1994.-Vol. 91, № 15.-P. 7022-7026.

160. Primary structure and function of a second essential member of the heterooligomeric TCP 1 chaperonin complex of yeast TCP 1 (3 / D. Miklos, Sh. Caplan, D. Mertens et. al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1994. - Vol. 91, № 7. -P. 2743-2747.

161. Абрамов Ш.А. Морфофизиологические и биохимические свойства нового штамма Saccharomyces cerevisiae Y-503 / Ш.А. Абрамов, С.Ц. Котенко, Д.А. Аливердиева // Прикл. биохим. и микробиол. 1997. - Т. 33, № 3. - С. 325-328.

162. Preferential transfer of truncated oligosaccharides to the first sequon of yeast exoglucanase in Saccharomyces serevisiae alg 3 cells / R. Cueva, M.D. Munoz, E. Andaluz et. al // Biochim. et biophys. acta. 1996. - Vol. 1289, № 3. - P. 336-342.

163. Крахмалсодержащая среда для нового штамма пекарских дрожжей со встроенным геном глюкоамилазы / М.Г. Алексеева, В.М. Кантере, В.Н.

164. Талантов и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1993. - Т. 29, вып. 2. - С. 253-258.

165. Клонирование гена а-амилазы дрожжей Saccharomycopsis fibuligera и его экспрессия в Saccharomyces cerevisiae / Л.Ф. Баева, Д.Г. Козлов, Е.Э. Бревнова и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1996. - Т. 32, № 3. - С. 311-314.

166. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии: Учеб. пособие / Г.А. Кочетов; Под ред. С.Е. Северина. М.: Высш. шк., 1980. - 272 с.

167. Северин С.Е. Практикум по биохимии / С.Е. Северин. М.: Изд-во МГУ, 1979.-430 с.

168. Детерман Г. Гель-хроматография / Г. Детерман М.: Мир, 1970. - 252с.

169. Артюхов В.Г. Оптические методы анализа интактных и модифицированных биологических систем / В.Г. Артюхов, О.В. Путинцева. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1996. - 240 с.

170. Землянухин А.А. Большой практикум по физиологии и биохимии растений: Учеб. пособие / А.А. Землянухин, Л.А. Землянухин. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1996. - 188 с.

171. Nesterenko M.V. A symple modification of Blum's silver stain method allows for 30 minite detection of proteins in polyacrylamide gels / M.V. Nesterenko, M. Tilley, S.J. Upton // J. Biochem. Biol. 1994. - Vol. 28. - P. 239-242.

172. Автоматизированная система дифференциально-термического анализа / Л.А. Битюцкая, Д.В. Китин, М.Ю. Хухрянский и др. // Заводская лаборатория. 1990. - № 4. - С. 53-56.

173. Bityutskya L.A. System of kinetic parameters of the transition prosseses under melting of crystalline substances / L. A. Bityutskya, E.S. Mashkina // Phase Transition. 2000. - Vol. 71.-P. 317-330.

174. Влияние удаления протеолитических ферментов на очистку амилазы / Ш.С. Ташмухамедова, Х.Т. Хасанов, М.М. Рахимов и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1995. - Т. 31, № 3. - С. 272-274.

175. Коршунов В.В. Синтез глюкоамилазы и а-амилазы термотолерантным грибом Aspergillus awamori ИНМИ / В.В. Коршунов, Л.Г. Логинова // Прикл. биохим. и микробиол. 1988. - Т. 24, вып. 1. - С. 80-86.

176. Выделение и характеристика внеклеточных а-глюкозидазы, инвертазы и глюкоамилазы из Aspergillus awamori / Й. А. Сарейкайте, Г.Б. Герасимене, Г.Й. Денис и др. // Прикл. биохим. и микробиол. 1989. - Т. 25, вып. 4. - С. 458-466.

177. Кичакова Н.А. Очистка и идентификация амилолитических ферментов Bacillus licheniformis / Н.А. Кичакова, И.Н. Павлова, И.Я. Захарова // Прикл. биохим. и микробиол. 1998. - Т. 34, № 5. - С. 503-507.

178. Нестеренко М.В. Выделение различных форм а-амилаз из пшеницы / М.В. Нестеренко, В.А. Кузовлев, В.В. Мосолов // Прикл. биохим. и микробиол. 1990.-Т. 26, вып. 5.-С. 598-601.

179. Слепокурова Ю.И. Глюкоамилаза Aspergillus awamori 466: выделение, иммобилизация и свойства: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Ю.И. Слепокурова. Воронеж, 2000. - 18 с.

180. Калашников Е.Я. Производство амилолитических и протеолитических ферментов и применение их в пивоваренной промышленности / Е.Я. Калашников М.: ГосИНТИ, 1959. - 24 с.

181. Fogarty W.M. Production and purification of a maltose-producing amylase from Bacillus subtilis IMD198 / W.M. Fogarty, E.J. Bourke // J. Chem. Tech. and Biotechnol. 1983.-Vol. 338.-P. 145-154.

182. Гунькина Н.И. Исследование амилаз гибридного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-717 с целью интенсификации производства этанола: Автореф. дисс. . канд. техн. наук / Н.И. Гунькина. Воронеж, 1997.- 16 с.

183. Яровенко В.В. Концентрирование ферментных растворов методом ультрафильтрации / В.В. Яровенко М.: ОНТИТЭИ Микробиопром, 1978. -36 с.

184. Manjunath P. Fungal glucoamylases / P. Manjunath, B.C. Shenoy, M.R. Raghavendra Rao // J. Appl. Biochem. 1983. - Vol. 5, № 4-5. - P. 235-260.

185. Characterization of the two forms glucoamylase from Asp. niger / B. Svensson, T.Y. Pedersen, J. Svendsen et. al. // Carlsberg Res. Commun. 1982. -Vol. 47, № l.-P. 55-69.

186. Yamashita I. Nucleotide sequence of the extracellular glucoamilase gene STAI in the yeast Saccharomyces diastaticus / I. Yamashita, K. Suzuki, S. Fukui //J. Bacterid. 1985.-Vol. 161, №2.-P. 567-573.

187. Rhizopus raw-starch-degrading glucoamylase: Its cloning and expression in yeast / T. Aschikari, N. Nakamura, Y. Tanaka et.al. // Agr. Biol. Chem. 1986. -Vol. 50, №4.-P. 957-964.

188. Solution structure of the granular starch binging domain of glucoamilase from Aspergillus niger by nuclear magnetic resonance spectroscopy / K. Sorimachi, A.I. Jacks, M.-F. Le Gal-Coeffet et.al. // J. Mol. Biol. 1996. - Vol. 259, № 5. -P. 970-987.

189. Williamson G. O-glycosylation in Aspergillus glucoamilase. Conformation and role in binding / G. Williamson, N.J. Belshaw, M.P. Williamson // Biochem. J. 1992. - Vol. 282, № 2. - P. 423-428.

190. Yould G.W. Facilitative glucose transporters: an expression family / G.W. Yould, G.I. Bell//Trends Biochem. Sci. 1990. - Vol. 15.-P. 18-23.

191. Кушнер В.П. Конформационная изменчивость и денатурация биополимеров / В.П. Кушнер. JI.: Наука, 1977. - 275 с.

192. Березин И.В. Структура и функции активных центров ферментов / И.В. Березин, К. Мартинек. М.: Наука, 1974. - 238 с.

193. Варфоломеев С.Д. Кинетические методы в биохимических исследованиях / С.Д. Варфоломеев, С.В. Зайцев. М.: Изд-во МГУ, 1982. -343 с.

194. Уэндлант У. Термические методы анализа / У. Уэндлант. М.: Мир, 1978.-528 с.

195. Использование метода термоденатурации для изучения аддуктов а-химотрипсина с полиалкиленоксидами / Н.В. Ефремова, Е.М. Сорокина, Б.И. Курганов и др. // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4. - С. 524-531.

196. Уверский В.Н. Равновесное разворачивание частично свернутых форм А2 и Аз стафилококковой нуклеазы сопровождается формированием промежуточного состояния / В.Н. Уверский // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 4.-С. 557-562.

197. Изучение активационного барьера тепловой денатурации белков методом сканирующей микрокалориметрии / С.А. Потехин, Е.И. Тиктопуло, О.И. Лосева и др. // II Съезд биофизиков России, Москва, 23-27 авг. 1999 г.: Тез. докл.-М., 1999. Т.1. - С. 72-73.

198. Мецлер Д. Биохимия: Химические реакции в живой клетке / Д. Мецлер: В 3 т./ Пер. с англ.; Под ред. А.Е. Браунштейна. М.: Мир. - Т.1. -1980. -407 с.

199. Основы биохимии / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит и др.: В 3 т./ Пер. с англ. В.П. Скулачева; Под ред. Ю.А. Овчинникова-М.: Мир. -Т.1.- 1981. 532 с.

200. Characteristic and function of rawstarch affinity site on Aspergillus awamori var. kawachi glucoamylase I molecule / S. Hayachida, K. Nakamura, W. Kanlayakrit et.al. // Agr. Biol. Chem. -1989. - Vol. 53. - P. 143-149.

201. Chemical mappinieq of the active site of the glucoamylase of Aspergillus niger / R.I. Lemieux, V. Spohv, M. Boeh et.al. // Can. J. Chem. 1996. - Vol. 74, №3.-P. 319-335.

202. Structure of the raw starch affinity site on the Aspergillus awamori var. kawachi glucoamilase / S. Hayashida, K. Nakahara, K. Kuroda et.al. // Agr. Biol. Chem. - 1989. - Vol. 53. - P. 135-141.

203. Смит А. Прикладная ИК-спектроскопия: Основы, техника, аналитическое применение / А. Смит / Пер. с англ. Б.Н. Тарасевича; Под ред. А.А. Мальцева. М.: Мир, 1982. - 328 с.

204. Чанг Р. Физическая химия с приближениями к биологическим системам / Р. Чанг / Пер. с англ. М.Г. Гольдфельда; Под ред. Ю.Ш. Мошковского. -М.: Мир, 1980.-662 с.

205. Чиргадзе Ю.Н. Инфракрасные спектры и структура полипептидов и белков / Ю.Н. Чиргадзе. М.: Наука, 1965. - 136 с.

206. Виноградова Р.П. Физико-химические методы в биологии / Р.П. Виноградова, В.А. Цудзевич, С.Н. Храпунов. Киев: Вища шк., 1983. - 287 с.

207. Advances in microbial amylases / A. Pandey, P. Nigam, C.R. Soccol et. al. // Biotechnol. Appl. Biochem. 2000. - Vol. 31.-P. 135-152.

208. Goto M. Expression and functional analysis of a hyperglycosylated glucoamylase in a parential host, Aspergillus awamori var. kawachi / M. Goto, K. Ekino, K. Furukawa // Appl. Environ. Microbiol. 1997. - Vol. 63, № 7. - P. 2940-2943.

209. Авнерс В.Я. Секреция глюкоамилазы и инвертазы при непрерывном культивировании дрожжей Saccharomyces cerevisiae в режиме оксистата /

210. B.Я. Авнерс, А.В. Глазунов, В.Э. Стерхин // Биотехнология. 1993. - № 6.1. C. 24-26.

211. Неустроев К.Н. Кислая протеиназа и множественность форм глюкоамилазы из Aspergillus awamori / К.Н. Неустроев, JI.M. Фирсов // Биохимия. Т. 55, № 5. - С. 776-785.

212. Wang B.-D. Inoluction of a mitosis delay and cell lysis by high-level secretion of mouse a-amylase from Saccharomyces cerevisiae / B.-D. Wang, T.-T. Kuo // Appl. Environ. Microbiol. 2001. - Vol. 67, № 8. - P. 3693-3701.

213. Красновский А.А. Фосфоресцентный анализ синглетного молекулярного кислорода в фотобиохимических системах / А.А. Красновский // Биологические мембраны. 1998. - Т. 15, № 5. - С. 530-547.

214. Ковалева С.В. Фотоокисление и модификация диэтилпирокарбонатом «биосинтетической» L-треониндегидратазы из пивных дрожжей Saccharomyces carlsbergensis / С.В. Ковалева, А.И. Дорожко, З.С. Каган // Биохимия, 1984.-Т. 49, вып. 8.-С. 1253-1261.

215. Модификация функциональных групп молекулы стрептокиназы при фотоокислении / О.А. Казючиц, В.Н. Никандров, Г.С. Янковская и др. // Биохимия. 1990.-Т. 55, № 10.-С. 1847-1859.

216. Прайор У. Свободные радикалы в биологии / У. Прайор: В 2 т./ Пер. с англ. М.Г. Гольдфельда, JI.A. Сибельдиной; Под ред. Н.М. Эммануэля. -М.: Мир. Т. 2. - 1979. - 328 с.

217. Артюхов В.Г. Биофизика: Учеб. пособие / В.Г. Артюхов, Т.А. Ковалева, В.П. Шмелев. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1994. - 336 с.

218. Лосева Л.П. Роль остатков гистидина в конструктивной NAD(P)-глутаматдегидрогеназе Chlorella pyrenoidosa 82Т / Л.П. Лосева, М.В. Бендианишвили, В.Р. Шатилов // Биохимия. 1986. - Т. 51, № 5. - С. 840849.

219. Варфоломеев С.Д. Биокинетика: Практич. курс / С.Д. Варфоломеев М.: ФАИР-ПРЕСС, 1999. - 720 с.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.