Сравнительный анализ функциональных свойств нейтрофильных гранулоцитов периферической крови и мукозальных секретов у здоровых мужчин и женщин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Маркова, Виталия Александровна

• Маркова, Виталия Александровна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Маркова, Виталия Александровна

СОДЕРЖАНИЕ

Введение

Глава 1 Нейтрофильные гранулоциты - клетки врояеденного иммунитета (обзор литературы)

1.1 Нейтрофильные гранулоциты и гетерогенность их популяции

1.2 Современные методы оценки функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов

1.2.1 Внеклеточные ловушки как новый механизм внеклеточной бактерицидности нейтрофильных гранулоцитов

1.2.2 Проточная цитофлюориметрия как современный метод

иммунодиагностики

Глава 2 Материалы и методы исследования

2.1 Характеристика обследуемых лиц

2.2 Материал для исследования

2.3 Получение лейкоцитарной взвеси

2.4 Выделение нейтрофилов из периферической венозной крови

2.5 Метод забора материала из вагинального и цервикального секрета репродуктивного тракта женщин

2.6 Метод забора слюны

2.7 Активация нейтрофильных гранулоцитов иммуностимуляторами

2.8 Методы обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек

2.8.1 Метод обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в фиксированных препаратах цельной крови

2.8.2 Метод обнаружения внеклеточных ловушек, образованных нейтрофильными гранулоцитами, выделенными из периферической крови

2.8.3 Метод обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в мукозальных секретах

2.9 Исследование функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов

2.9.1 Метод определения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов с помощью световой микроскопии

2.9.2 Определение фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови методом проточной цитофлюориметрии

2.9.3 Метод оценки внутриклеточного кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов с помощью НСТ-теста

2.9.4 Определение внутриклеточного кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов периферической крови методом проточной цитофлюориметрии

2.9.5 Метод определения лизосомальной активности нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов

2.10 Определение рецепторов СБ11Ь и СБ95 на нейтрофильных гранулоцитах методом проточной цитофлюориметрии

2.11 Методы статистической обработки материала

Глава 3 Особенности функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов слюны, вагинального и цервикалыюго секретов

3.1 Оценка соотношения морфологических форм интактных нейтрофильных гранулоцитов и количества нейтрофильных внеклеточных ловушек в слюне, вагинальном и цервикальном секретах

3.2 Оценка лизосомальной активности интактных нейтрофильных гранулоцитов в различных мукозальных секретах

3.3 Оценка фагоцитарной функции интактных нейтрофильных гранулоцитов в различных мукозальных секретах

3.4 Оценка внутриклеточного кислородзависимого метаболизма интактных нейтрофильных гранулоцитов в различных мукозальных секретах

Глава 4 Функциональный ответ нейтрофильных гранулоцитов слюны, вагинального и цервикалыюго секретов на стимуляцию пирогеналом и форбол-12-мирнстат-13-ацетатом

4.1 Влияние пирогенала и ФМА на соотношение морфологических форм нейтрофильных гранулоцитов и количества нейтрофильных внеклеточных ловушек в слюне, вагинальном и цервикальном секретах

4.2 Оценка лизосомальной активности нейтрофилов мукозальных секретов после активации пирогеналом и ФМА

4.3 Оценка фагоцитарной функции нейтрофильных гранулоцитов различных мукозальных секретов в ответ на стимуляцию пирогеналом и ФМА

4.4 Оценка показателей НСТ-теста нейтрофилов слюны, вагинального и

цервикального секретов в ответ на стимуляцию пирогеналом и ФМА

Глава 5 Особенности функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов цельной крови, лейкоцитарной взвеси и чистой фракции до и после активации у здоровых женщин и мужчин

5.1 Оценка количества внеклеточных ловушек, присутствующих в цельной крови, лейкоцитарной взвеси и чистой фракции нейтрофилов, до

и после активации пирогеналом и ФМА

5.2 Оценка функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов методом проточной цитофлюориметрии

5.3 Изменение экспрессии рецепторов CDllb и CD95 на нейтрофильных

гранулоцитов периферичемкой крови до и после активации ФМА

Заключение

Выводы

Список наиболее часто используемых сокращений

Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительный анализ функциональных свойств нейтрофильных гранулоцитов периферической крови и мукозальных секретов у здоровых мужчин и женщин»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработаностн

Нейтрофильные гранулоциты являются ключевыми клетками врожденной иммунной системы и выполняют основные функции -уничтожение патогенных микроорганизмов, таких как бактерии, грибы и паразиты, а так же предотвращение их распространения в организме [163, 169]. Это профессиональные охотники за микробами, обладающие самой высокой подвижностью среди всех клеток организма [85].

Более века исследователи всего мира изучают строение и физиологию нейтрофильных гранулоцитов, биохимический состав их гранул, структуру синтезируемых ими метаболитов и роль этих клеток в регуляции иммунного ответа [41, 76, 70, 73].

Нейтрофил оснащен богатым набором рецепторов, которые позволяют чутко и дифференцированно реагировать на малейшие изменения окружающей среды [28, 63, 137]. Они первыми приходят в очаг воспаления, где проявляют разнообразные виды активности [85]. Подготовленный нейтрофил может оказывать свое действие на объект, вызвавший его активацию, различными способами: фагоцитировать и уничтожать его в фаголизосомах или выделять наружу бактерицидные продукты, которые представляют собой содержимое гранул [15].

Нейтрофильные гранулоциты являются самыми многочисленными из лейкоцитов. Их количество в периферической крови поддерживается на постоянном уровне благодаря притоку из костного мозга [163]. Основная часть морфологически зрелых нейтрофилов остается в костном мозге, лишь небольшая доля поступает в кровоток [27, 41, 85, 92]. Большая часть нейтрофильных гранулоцитов функционируют в тканевых депо и в секретах

слизистых оболочек: цервикальной и вагинальной слизи, бронхо-альвеолярном секрете, слюне, слизи, покрывающей кишечный эпителий [17, 93]. При этом на поверхности слизистых оболочек встречается большое количество жизнеспособных и функционально активных нейтрофильных гранулоцитов [18, 67, 60].

Именно слизистые оболочки в силу своего топографического положения первыми подвергаются атаке патогенов. Они обладают комплексом факторов иммунной защиты, являясь надежным барьером на пути проникновения патогенов. В составе секретов нейтрофилы продуцируют различные биологически активные вещества (цитокины, ферменты, свободные радикалы и др.) и осуществляют неспецифическуго защиту слизистых оболочек [56].

Открытие нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) и установление их антимикробного эффекта, как важнейшего звена врожденного иммунитета, безусловно, явилось началом нового этапа в понимании жизненного цикла и функции нейтрофильных гранулоцитов [106, 62].

Нейтрофильные внеклеточные ловушки связывают микроорганизмы, предотвращая их распространение, при этом они создают высокую локальную концентрацию антимикробных веществ, что позволяет уничтожить патогенны [106].

Формирование внеклеточных ловушек может осуществляться только активированными нейтрофилами. Эффект антимикробных веществ во внеклеточном пространстве усиливается в структурах внеклеточных ловушек [107].

Несмотря на многочисленные исследования нейтрофильных гранулоцитов и нейтрофильных внеклеточных ловушек, многие вопросы остаются не раскрытыми и по сегодняшний день. До конца не исследована способность нейтрофилов, присутствующих в различных мукозальных секретах, цельной крови и лейкоцитарной взвеси, к экструзии ДНК, неясно,

как изменится морфологический состав и функциональная активность популяции нейтрофилов слизистых оболочек после воздействия экзогенных факторов микробной и немикробной природы. Остается также открытым вопрос о гетерогенности популяции нейтрофильных гранулоцитов цельной крови и распределении рецепторов в субпопуляциях нейтрофилов в зависимости от содержания в них гранул.

Цель исследования

Изучить показатели функциональной активности интактных и активированных нейтрофильных гранулоцитов цельной периферической крови и мукозальных секретов у здоровых мужчин и женщин.

Задачи исследования

1. Определить соотношение морфологических форм нейтрофильных гранулоцитов и количество внеклеточных ловушек, входящих в состав слюны, цервикального и вагинального секретов.

2. Оценить функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов слюны, цервикального и вагинального секретов.

3. Изучить влияние экзогенных факторов микробной и немикробной природы на соотношение морфологических форм и функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов слюны, цервикального и вагинального секретов.

4. Определить количество внеклеточных ловушек, содержащихся в цельной крови, лейкоцитарной взвеси и чистой фракции нейтрофилов, у здоровых мужчин и женщин до и после воздействия активаторов микробной и немикробной природы.

5. Исследовать экспрессию рецепторов CDllb и CD95 в различных субпопуляциях нейтрофильных гранулоцитов цельной периферической крови у здоровых мужчин и женщин.

Методология и методы исследования

В исследовании принимали участие 30 практически здоровых мужчин и 30 практически здоровых небеременных женщин в первую и вторую фазы менструального цикла, чей возраст варьировался от 18 до 35 года. У всех обследуемых забиралась периферическая венозная кровь и слюна, у женщин дополнительно происходил забор цервикального и вагинального секретов на 7-10 и 21-23 дни менструального цикла.

Для определения количества внеклеточных ловушек до и после активации применялся метод обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в фиксированных препаратах цельной крови при окрашивании по Романовскому-Гимзе, при окрашивании акридиновым оранжевым, а также метод обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в мукозальных секретах с использованием красителей синьки Эванса и Sytox Green. Для определения функциональной активности активированных и неактивированных нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов оценивали фагоцитарную активность, внутриклеточный

кислородзависимый метаболизм и лизосомальную активность.

С помощью метода проточной цитофлюориметрии в цельной гепаринизированной венозной крови были определены фагоцитарная активность и внутриклеточный кислородзависимый метаболизм нейтрофильных гранулоцитов. По показателям прямого и бокового светорассеивания вся популяция нейтрофилов была разделена на две субпопуляции, в каждой из которой была посчитана экспрессия рецепторов CDllb и CD95.

Степень достоверности, апробация результатов, личное участие

автора

Объем фактического материала, арсенал использованных методов исследования, статистическая обработка полученных результатов адекватны поставленной цели и решаемым задачам. Исследования выполнены на сертифицированном лабораторном оборудовании, а обработка данных проведена с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows (v. 8.0; Statsoft Inc.), что подтверждает достоверность полученных результатов.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на II международной (IX итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2011); IX Российской конференции иммунологов Урала, посвященной памяти профессора Л.Я. Эберта (Челябинск, 2011); на I Всероссийской с международным участием школы-конференции молодых ученых «Современные проблемы микробиологии, иммунологии и биотехнологии» (Пермь, 2011); на VII Международной Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых ученых (Москва, 2012); на III международной (X итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2012); на X Российской конференции иммунологов Урала (Тюмень, 2012); на Региональной научно-технической конференции «Молодежь. Наука. Инновации - 2012» (Челябинск, 2012); на Всероссийской научно-практической конференции «Разработки Российской Федерации по приоритетным направлениям развития науки, технологий и техники» (Челябинск, 2013).

Личный вклад автора состоит в участии на всех этапах выполнения работы: в планировании исследования, самостоятельном проведении всех лабораторных исследований, статистической обработке и анализе полученных данных, их систематизации и интерпретации, подготовке публикаций и докладов, подготовке работы к защите.

Положения, выносимые на защиту

1. Соотношение морфологических форм нейтрофильных гранулоцитов слюны зависит от пола донора. Жизнеспособные нейтрофильные гранулоциты слюны, цервикального и вагинального секретов обладают способностью образовывать внеклеточные ловушки. У женщин в мукозальных секретах наблюдается рост количества внеклеточных ловушек во вторую фазу менструального цикла. Активация нейтрофилов мукозальных секретов пирогеналом и форбол-миристат-ацетатом приводит к увеличению количества нейтрофильных внеклеточных ловушек.

2. Нейтрофилы цервикального секрета активнее, чем нейтрофилы слюны и вагинального секрета, проявляют свою лизосомальную активность, в большем количестве и интенсивнее участвуют в процессе фагоцитоза, а также имеют более высокий кислородзависимый потенциал. Пирогенал и форбол-миристат-ацетат усиливают фагоцитарную, лизосомальную и внутриклеточную кислородзависимую бактерицидную активность нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов.

3. В популяции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови можно выделить две субпопуляции клеток с высокими и низкими показателями прямого светорассеивания. Данные субпопуляции нейтрофилов различаются по экспрессии на своей поверхности рецепторов СБ11Ь и С095.

Научная новизна

В работе впервые определено количество внеклеточных ловушек, присутствующее у здоровых мужчин и женщин в составе слюны, а также у женщин в первую и вторую фазы менструального цикла в вагинальном и цервикальном секретах. Установлено, что при сравнении мукозальных

секретов между собой наибольшее количество внеклеточных ловушек содержится в слюне у женщин во вторую фазу менструального цикла. Количество внеклеточных ловушек в мукозальных секретах репродуктивного тракта у женщин зависит от фазы менструального цикла. Показано, что пирогенал и форбол-миристат-ацетат индуцируют образование нейтрофильных внеклеточных ловушек в слюне, цервикальном секрете, вагинальном секрете и у нейтрофилов, выделенных из периферической крови на двойном градиенте фиколл-верографина. Установлено, что нейтрофилы цельной крови и лейкоцитарной взвеси не формируют внеклеточные ловушки даже после воздействия экзогенных факторов микробной и немикробной природы.

В работе показано, что факторы микробной и немикробной природы влияют на морфологический состав популяции нейтрофильных гранулоцитов мукозальных секретов, а так же увеличивают функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов слизистых оболочек независимо от пола обследуемых лиц и фазы менструального цикла у женщин.

Показано, что с помощью метода проточной цитофлюориметрии возможно определение фагоцитарной активности и внутриклеточного кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов периферической крови.

Впервые проведено разделение популяции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови на субпопуляции по показателям объема и массы, а так же определена экспрессия рецепторов СЭ11Ь и СБ95 на нейтрофилах в различных субпопуляциях.

Теоретическая и практическая значимость работы

Проведенные исследования позволяют расширить представление о роли нейтрофильных гранулоцитов в антимикробной защите слизистых оболочек, в частности их способности к фагоцитозу и образованию

внеклеточных ловушек. Результаты исследования расширяют знание о физиологии нейтрофилов, их функциональных возможностях, рецепторном аппарате и гетерогенности популяции.

Полученные данные вносят существенный вклад в понимание роли внеклеточных ловушек в реализации врожденного иммунитета.

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования внедрены в лабораторную диагностику НИИ иммунологии ГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации и используются в учебном процессе на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «ЮжноУральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 33 печатные работы, в том числе 22 в изданиях, входящих в рекомендованный ВАК РФ перечень.

Конкурсная поддержка исследования

В 2012 году научно-исследовательская работа по теме диссертационного исследования победила на областном конкурсе научно-исследовательских работ студентов, аспирантов и молодых ученых высших учебных заведений, расположенных на территории Челябинской области.

Диссертант является одним из соисполнителей гранта Президента Российской Федерации МД-2246.2012.7 «Разработка и внедрение методов

обнаружения нейтрофильных ловушек и определение биологической роли внеклеточной ДНК гранулоцитов» (грантополучатель - Шишкова Ю.С.).

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 136 страницах машинописного текста, иллюстрирована 24 таблицами, 6 рисунками и содержит введение, обзор литературы, главу с описанием материалов и методов исследования, три главы собственных исследований, заключение, выводы, список литературы. Указатель литературы включает 88 отечественных и 115 зарубежных источников.

Глава 1 Нейтрофильные гранулоциты — клетки врожденного иммунитета (обзор литературы)

1.1 Нейтрофильные гранулоциты и гетерогенность их популяции

Нейтрофильные гранулоциты являются первой линией клеточной защиты. Это профессиональные охотники за микробами, обладающие самой высокой подвижностью среди всех клеток организма [85]. Нейтрофильные гранулоциты являются самыми многочисленными из лейкоцитов. Они имеют короткую продолжительность жизни, их количество в периферической крови поддерживается на постоянном уровне. Нейтрофилы играют важную роль в антимикробных реакциях врожденного иммунитета [163]. Нейтрофильные гранулоциты, выходящие в кровоток, полностью дифференцированы, обладают широким спектром противомикробных факторов и готовы быстро реагировать на внедрение патогенного агента [15].

Нейтрофил оснащен богатым набором рецепторов, которые позволяют чутко и дифференцированно реагировать на малейшие изменения окружающей среды [28, 63, 137]. Они первыми приходят в очаг воспаления, где проявляют разнообразные виды активности [85]. Подготовленный нейтрофил может оказывать свое действие на объект, вызвавший его активацию, различными способами: фагоцитировать и уничтожать его в фаголизосомах или выделять наружу бактерицидные продукты, которые представляют собой содержимое гранул [15].

Жизненный цикл нейтрофила составляет приблизительно две недели [85] и последовательно протекает в костном мозге, крови, тканях и на поверхности слизистых оболочек [15]. Образование нейтрофилов начинается с дифференцировки стволовых клеток в миелобласт. Уже на следующей стадии (промиелоцит) происходит процесс формирования первичных

(аурофильных) гранул [85]. Эти гранулы содержат бактерицидные ферменты (лизоцим, миелопероксидазу, эласстазу), антибактериальные катионные протеины (БПИ, дефенсины), богатый набор кислых гидролаз (Ы-ацетилглюкуронидазу, катепсин В и Ц). Эти вещества обладают выраженной антимикробной активностью, участвуют в кислороднезависимом и кислородзависимом иммунном ответе [197, 73]. Позднее, на стадии миелоцита, появляются специфические гранулы, несущие лактоферрин, лизоцим, гистаминазу, активаторы комплемента ингибитор протеинкиназы С. Они получили название вторичные [1, 17, 85]. Мембрана специфических гранул нейтрофилов является источником протеинов, которые включаются в плазматическую мембрану клетки при ее стимуляции, вследствие чего увеличивается число рецепторов и различных белков. Эти элементы вовлечены в процесс адгезии нейтрофилов [1, 44, 114]. Третичные (желатинозные) гранулы содержат запас желатиназы, цитохром Ь, пул рецепторов к 1§0 и щелочную фосфотазу [41, 54, 103, 202], которая участвует в разрушении убитых бактерицидными веществами микроорганизмов [15].

Активированный нейтрофил частично или полностью утрачивает свои гранулы, подвергаясь дегрануляции. Дегрануляция, при которой гранулы целиком выталкиваются из клетки, называется экзоцитозом. Также выделяют секреторную (внутрифагосомную или экстрацеллюлярную) дегрануляцию, при которой содержимое гранул выливается либо в фагосому, либо в околоклеточное пространство [15]. Секреторная дегрануляция сопутствует практически всем формам реактивности нейтрофильных гранулоцитов, таких как: респираторному взрыву, адгезии, миграции и фагоцитозу [41, 15, 142]. Эти процессы значительно усиливаются в результате стимуляции нейтрофилов объектами фагоцитоза, хемотаксическими пептидами, медиаторами иммунной системы (ИЛ-1, ИЛ-8, ИФ-у и др.) [5, 72, 183, 184, 105]. Быстрее всех высвобождаются третичные, затем специфические и последними подключаются азурофильные гранулы [15].

Основная часть морфологически зрелых нейтрофилов остается в костном мозге, лишь небольшая доля (приблизительно 3%) поступает в кровоток, эти клетки обладают многократно большим фагоцитарным потенциалом. Часть нейтрофилов, циркулирующих в кровотоке, прилипает к эндотелию сосудов и составляет маргинальный пул [27, 41, 85, 92]. В крови содержится малое количество всех нейтрофилов, большая часть функционируют в тканевых депо и на слизистых оболочках: цервикальной и вагинальной слизи, слюне, слизи, покрывающей кишечный эпителий [17, 92]. Причем на поверхности слизистых оболочек встречается большое количество жизнеспособных и функционально активных нейтрофильных гранулоцитов [18, 67, 62].

Именно слизистые оболочки, в силу своего топографического положения, первыми подвергаются атаке патогенов и взаимодействуют с антигеном. Слизистые оболочки обладают комплексом факторов неспецифической и специфической иммунной защиты, обеспечивающих в большинстве случаев надежный барьер на пути проникновения патогенов. Между местными и системными иммунными факторами организма существуют постоянное равновесие и циркуляция растворимых гуморальных факторов и клеточных элементов (нейтрофильные гранулоциты, макрофаги и др.). В секретах полиморфноядерные нейтрофилы осуществляют неспецифическую реакцию врожденного иммунитета и продуцируют различные биологически активные вещества (цитокины, ферменты, свободные радикалы и др.). Нейтрофильные гранулоциты входят в первую линию защиты слизистых оболочек [56].

Нейтрофильные гранулоциты являются ключевыми клетками врожденной иммунной системы и выполняют основную функцию -уничтожение патогенных микроорганизмов, таких как бактерии, грибы и паразиты, а так же предотвращение их распространения в организме [169, 163]. Реализация функций фагоцитирующих клеток заключается в способности к хемотаксису, адгезии, фагоцитозу, киллингу и перевариванию

поглощенных агентов, при этом происходит генерация активных форм кислорода [76, 70, 15, 69, 107].

Известно, что выполняющие одинаковые функции клетки одной популяции могут различаться по степени проявления неспецифической активности, т. е. являются функционально неравнозначными притом, что они морфологически неразличимы [13, 65]. Кроме того, морфологически однородные клетки одной популяции могут проявлять различную специфическую функциональную активность, т.е. быть функционально неоднородными [48, 89]. Например, нейтрофилы поглощают разное количество частиц в фагоцитозе или количественно по-разному восстанавливают нитросиний тетразолий [65, 97].

Нейтрофилы до недавнего времени считались относительно однородной клеточной популяцией. Одним из главных факторов этого заблуждения являлось то, что, условно, нейтрофилы были рассмотрены в качестве коротко живущих клеток, которые быстро прибывают в места инфекции или травмы, активируются и умирают в течение короткого времени [98]. Эта догма была оспорена, и было высказано предположение, что нейтрофилы могут иметь более долгий срок жизни, чем считалось ранее - 4-5 дней в организме человека [171]. Нейтрофильные гранулоциты периферической крови не являются однородными и показывают значительные различия в составе мембран, экспрессии рецепторов для активаторов, стимулировании респираторного взрыва, и некоторых других функций и метаболических возможностей [95].

Недавно все нейтрофилы по способности генерировать активные формы кислорода, взаимодействовать с субстратом и инактивироваться в результате этих событий были разделены на два класса: потенциальные фагоциты - «камикадзе» (убей и погибни), и «самураи» (защити себя сам) [12]. «Камикадзе» активно продуцируют АФК, тогда как «самураи» поглощают инородные частицы с целью доставки их в компетентные органы, менее активно продуцируют АФК, а их мембраны более проницаемы [14].

Нейтрофилы приблизительно в равном соотношении распределены на циркулирующий и маргинальный пул. Клетки первого - свободно переносятся кровью, в то время как второго - прикреплены к сосудистому эндотелию [13]. Часть циркулирующих нейтрофилов, например, вследствие активации компонентами комплемента, может переходить в маргинальный пул и усиливать продукцию АФК [110], которая коррелирует с количеством клеток маргинального пула [198] и с их адгезивной способностью [90]. Следовательно, клетки маргинального пула, а также часть клеток циркулирующего пула могут быть потенциальными фагоцитами, контакт которых с субстратом является необходимым условием осуществления функции фагоцитоза [13].

Существенно, что фагоцитами могут быть исключительно зрелые гранулоциты [182].

Очевидно, функциональная неоднородность нейтрофилов определяется разной степенью экспрессии одинаковых рецепторов или наличием у клеток разных рецепторов [89]. Активность нейтрофилов определяется рецепторами, число которых изменяется при патологии и коррелирует со способностью клеток к взаимодействию, восстановлению НСТ и фагоцитарной активности [162].

С учетом функциональной неоднородности нейтрофилов, возникает вопрос об их созревании в процессе кроветворения. Теоретически «камикадзе», и «самураи» могут дифференцироваться по альтернативному пути, либо взаимно превращаться. Исходя из положения о том, что чем более дифференцирована клетка, тем сильнее выражены у нее адгезивные свойства [80], то скорее «камикадзе» могут дифференцироваться из «самураев», чем наоборот, так как клетки могут исключительно утрачивать способность к контакту, а не приобретать его [12, 167, 200].

Из функциональной неоднородности нейтрофилов следует еще одно предположение, основанное на том, что нейтрофилы подвергаются апоптозу (физиологическая, генетически запрограммированная гибель клеток),

вследствие лишения их контакта с субстратом [88]. Поскольку этим требованиям могут отвечать только «камикадзе», а не «самураи», которые вообще не прикрепляются, то, вероятно, из нейтрофилов лишь «камикадзе» погибают путем апоптоза. Следовательно, «камикадзе» могут быть теми нейтрофилами, которые только и способны в обычных условиях к апоптозу. Поскольку «камикадзе» имеют больший филогенетический возраст по сравнению с «самураями», и апоптоз, очевидно, более молодой путь гибели клеток по сравнению с некрозом, то представляется вероятным, что созревание «самураев» происходит на более поздней стадии, чем «камикадзе» [13]. «Самураи» могут вступить на путь апоптоза при изменении условий среды. При стимуляции нейтрофильных гранулоцитов антибиотиками или бактериями доля апоптозных клеток увеличивается [176]. Возможно, что одна из функций «самураев» - предоставление потенциальным фагоцитам медиаторов и компонентов системы комплемента, без которых невозможны необходимые для фагоцитоза прикрепление и активация нейтрофилов [14].

Увеличения числа нейтрофилов, погибающих путем апоптоза при стимуляции, указывает на то, что стимуляторы либо индуцируют апоптоз «самураев», либо приводят к увеличению доли «камикадзе» за счет их перехода из маргинального пула в циркулирующий. Однако ни в одной из работ не найдено близкого к 100 % числа апоптозных нейтрофилов, т.е. стимулировать все нейтрофилы к апоптозу достаточно трудно [181].

Функциями нейтрофилов являются хемотаксис, адгезия и агрегация, образование гранул и дегрануляция, активация продукции АФК, фагоцитоз и уничтожение бактерий [101]. Собственно, фагоцитоз включает в себя все перечисленные явления. Уже адгезия нейтрофилов сопровождается выделением ферментов из лизосом и усилением продукции АФК [195, 196]. Активация и выделение внеклеточных медиаторов, вследствие взаимодействия с субстратом, могут модулировать структуру, функцию и выживание нейтрофилов [140], что и наблюдается при восстановлении ими

НСТ или апоптозе. Однако, способность к фагоцитозу, с одной стороны, и адгезия или продукция АФК, с другой, не обязательно коррелируют между собой [13], что объясняется функциональной неоднородностью нейтрофилов.

Можно учесть, что нейтрофилы среди маргинального («камикадзе») и циркулирующего пулов («камикадзе»+ «самураи») распределены примерно поровну и что доля «камикадзе» в циркулирующем пуле около 65 % [14]. Тогда доля «камикадзе» среди всех нейтрофилов оказывается примерно 80%. Соответственно, в нормальных условиях, процент нейтрофилов, предположительно осуществляющих транспортную функцию («самураи»), не превышает 20. Не исключено, что помимо «камикадзе» (киллеров) и «самураев» (кейджеров), в организме могут иметь место и функционально другие нейтрофилы, а внутри обеих субпопуляций, несомненно, существует функциональная неравнозначность [12].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Маркова, Виталия Александровна, 2014 год

Список литературы

1. Алексеев, H.A. Клинические аспекты лейкопении, нейтропении и функциональных нарушений нейтрофилов / H.A. Алексеев. - Санкт-Петербург : Фолиант, 2002. - 416 с.

2. Анкирская, A.C. Видовой состав и некоторые биологические свойствалактобацилл при различных состояниях микроэкологии влагалища / A.C. Анкирская, В.В. Муравьева // Акушерство и гинекология. - 2000. - № 3. - С. 26-28.

3. Бахов, Н.И. Концепция апоптоза / Н.И. Бахов, Ю.Ф. Майчук, A.B. Корнев // Иммунология. - 1997. - № 3. - С. 62-64.

4. Белушкина, H.H. Молекулярные основы патологии апоптоза / H.H. Белушкина, С.Е. Северин // Архив патологии. - 2001. - № 1. - С. 51-60.

5. Бережная, Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз / Н.М. Бережная. - Киев : Наук, думка, 1988. - 189 с.

6. Боровиков, В.П. STATISTICA : искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов (+CD). / В.П. Боровиков. - Санкт-Петербург : Питер, 2003. - 688 с.

7. Боровский, Е.В. Биология полости рта / Е.В. Боровский, В.К. Леонтьев - Нижний Новгород : Изд-во НГМА, 2001.-304 с.

8. Валышев, A.B. Анаэробная микрофлора женского репродуктивного тракта / A.B. Валышев, H.H. Елагина, О.В. Бухарин // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - № 4. - С. 78-84.

9. Винокуров, М.Г. Исследование механизмов действия липополисахарида Rhodobacter capsulatus на функциональные ответы и апоптоз фагоцитов крови человека при активации эндотоксинами : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / М.Г. Винокуров. - Москва, 2007. - 50 с.

Ю.Войткова, B.B. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуориметрии / В.В. Войткова // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. - 2010. -№ 6 (76). - С. 220-225.

П.Воробьев, A.A. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции / A.A. Воробьев, Е.А. Лыкова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1999. - № 6. - С. 102-105.

12.Герасимов, И.Г. Функциональная неравнозначность нейтрофилов крови человека: генерация активных форм кислорода / И.Г. Герасимов, Д.Ю. Игнатов // Цитология. - 2001. - Т. 43, № 5. - С. 432-436.

13.Герасимов И. Г. Неоднородность нейтрофилов в фагоцитозе и респираторном взрыве // Клин. лаб. диагн. - 2004. - № 6. - С. 34-36.

14.Герасимов, И.Г. Особенности активации нейтрофилов in vitro / И.Г. Герасимов, Д.Ю. Игнатов // Цитология. - 2004. - Т. 46, № 2. - С. 155158.

15.Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин. - Екатеринбург : Изд-во УрОРАН, 2001. - 256 с.

16.Долгушин, И.И. Методы обнаружения нейтрофильных ловушек / И.И. Долгушин, Ю.С. Шишкова, А.Ю. Савочкина // Аллергология и иммунология. - 2009. - Т. 10, № 4. - С. 458-462.

17.Долгушин, И.И. Нейтрофильные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов / И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю. Савочкина. - Москва : Изд-во РАМН, 2009. - 208 с.

18.Долгушина В.Ф. Диагностика, лечение воспалительных заболеваний нижнего отдела половых органов, прогнозирование и профилактика их осложнений у беременных (клинико-иммунологическое исследование : дис. ... д-ра мед. наук / В.Ф. Долгушина. - Харьков, 1991. - 439 с.

19.Ермоленко, Д.К. Урогенитальный трихомониаз: пособие для врачей / Д.К. Ермоленко, В.А. Исаков, С.Б. Рыбалкин [и др.]. - Санкт-Петербург ; Великий Новгород : Б.и., 2007. - 96 с.

20.Жижина, Г.П. Роль апоптоза в нормальном онтогенезе, патогенезе и старении / Г.П. Жижина // Клинич. геронтология. - 2002. - Т. 8, № 4. -С. 310.

21.Зеленин, A.B. Взаимодействие аминопроизводных акридина с клеткой / A.B. Зеленин. - Москва : Наука, 1971.-231 с.

22.3урочка, A.B. Изменение представлений об оценке иммунного статуса человека, новые проблемы и подходы к их решению / A.B. Зурочка, C.B. Хайдуков // Мед. иммунология. - 2007. - Т. 9, № 2-3. - С. 339-340.

23.3яблицев, C.B. Гормонодиагностика патологии репродуктивной системы / C.B. Зяблицев, О.В. Синяченко, Е.А. Бочарова, П.А. Чернобровцев. - Д. : Каштан, 2009. - 375 с.

24.Исачкова, JI.M. К развитию представлений об антиинфекционной резистентности / JIM. Исачкова, Н.Г. Плехова // Эпидемиология и инфекционные болезни. -2002. -№1. - С. 11-15.

25.Карпищенко, А.И. Медицинские и лабораторные технологии / А.И. Карпищенко. - Санкт -Петербург : Интермедика, 1998. - 350 с.

26.Кафарская, Л.И. Микробная экология влагалища / Л.И. Кафарская, О.В. Коршунова, Б.А. Ефимов [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002. - № 6. - С. 91-99.

27.Кислюк, Н.С. клетки крови у детей в норме и патологии / Н.С. Кислюк, Р.В. Ленская. - Москва : Медицина, 1978. - 256 с.

28.Ковальчук, Л.В. Врожденные компоненты иммунитета: То11-подобные рецепторы в норме и при иммунопатологии / Л.В. Ковальчук, М.В. Хорева, A.C. Варивода // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2005. - № 4. - С. 96-104.

29.Козлов, И.Г. Рецепторы контактного взаимодействия / И.Г. Козлов, Н.К. Горлина, А.Н. Чередеев // Иммунология. - 1995. - № 4. - С. 14-24.

30.Коршунов, В.М. Изучение бифидофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста / В.М. Коршунов, З.А. Гудиева, Б.А. Ефимов [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1999.-№4.-С. 74-78.

31.Костюк, О.П. Физиологические и терапевтические свойства лактобактерий / О.П. Костюк, Л.И. Чернышова, А.П. Волохова // Педиатрия. - 1998. - № 1. - С. 71-76.

32.Кравцов, А. Л. Проточно-цитофлуориметрический мониторинг за развитием азурофильной дегрануляции нейтрофилов в цельной крови человека в ответ на эндотоксин Yersinia pestis / А.Л. Кравцов, Т.П. Гребенюкова, Т.М. Тараненко, О.С. Кузнецов // Пробл. особо опасных инфекций. - 1999. - № 79. - С. 81-89.

33.Кравцов, А.Л. Секреторная дегрануляция нейтрофилов как триггер воспаления и регулятор иммунного ответа : роль сериновых лейкоцитарных протеаз и протеолитически активируемых рецепторов / А.Л. Кравцов, Т.П. Шмелькова // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. - 2011. - № 1. - С. 79-87.

34.Кравцов, А.Л. Формирование внеклеточных ловушек - эффективный механизм защиты организма от патогена / А.Л. Кравцов // Пробл. особо опасных инфекций. - 2012. - Вып. 112. - С. 69-74.

35.Луговская, С. А. Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь, H.H. Тупицын. -Москва ; Тверь : Триада, 2005. - 168 с.

36.Мазуров, Д.В. Оценка внутриклеточного килинга стафилококка фагоцитами периферической крови с помощью проточной цитометрии / Д.В. Мазуров, C.B. Дамбаева, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 2000. -№2.-С. 57-59.

37.Мазуров, Д.В. Применение проточной цитометрии в иммунодиагностике / Д.В. Мазуров, C.B. Дамбаева, C.B. Климова [и др.] // Мед. иммунология. - 2002. - Т. 4, № 4-5. - С. 507-514.

38.Махрова, T.B. Факторы и условия, влияющие на фагоцитарную адгезивную активность Candida albicans в системах с букальными эпителиоцитами : дис. ... канд. мед. наук / Т.В. Махрова. - Нижний Новгород, 2004. - 132 с.

39.Маянский, А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетрозолия : метод, рекомендации / А.Н. Маянский, М.К. Виксман. -Казань, 1979.- 11 с.

40.Маянский, А.Н. Реактивность нейтрофила / А.Н. Маянский, А.Н. Галиуллин. - Казань : Изд-во Казан, ун-та, 1984. - 158 с.

41.Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. - Новосибирск : Наука, 1989. - 254 с.

42.Маянский, А.Н. Апоптоз: начало будущего / А.Н. Маянский, H.A. Маянский, М.А. Абаджидия [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1997. - № 2. - С. 88 -94.

43.Маянский, А.Н. НАДФН оксидаза нейтрофилов: активация и регуляция / А.Н. Маянский // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т. 6, № 3. - С. 3-13.

44.Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / В.З. Ланкин, Н.К. Зенков, И.А. Бондарь, Н.Ф. Круговых, В.А. Труфакин - Москва : Слово, 2006. - 556 с.

45.Нестеров, И.М. Иммунокорригирующая терапия инфекционно-воспалительных заболеваний женской половой сферы / И.М.Нестеров, А.А.Тотолян ; под ред. Э.К. Айламазяна. - Санкт- Петербург, 2007. - 56 с.

46.Нестерова, И.В. Современные представления о роли системы нейтрофильных грагулоцитов / И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова // Russ. J. Immunol. - 1999. - Vol. 4, № 1. - P. 22-28. - Тезисы 11 съезда иммунологов России.

47.Нестерова, И.В. Иммуномодулирующая терапия Вифероном в коррекции нарушений мембранного потенциала нейтрофильных

гранулоцитов при осложненной язвенной болезни двенадцатиперстной кишки / И.В. Нестерова, В.А. Роменская, Н.П. Капранова [и др.] // Цитокины и воспаление. - 2005. - Т. 4, № 1. - С. 47-51. 48.Новицкий, В.В. Гемопоэз, гормоны, эволюция / В.В. Новицкий, Ю.А.

Козлов, B.C. Лаврова [и др.]. - Новосибирск : Наука, 1997. - 432 с 49<Олиферук, Н.С. Нормативные параметры фагоцитарной системы человека, определенные с помощью проточной цитофлуориметрии : пособие для врачей клинической лабораторной диагностики / Н.С. Олиферук, С.С. Аршинова, А.И. Мартынов, Б.В. Пинегин - Москва, 2008. - 44 с.

50.Оценка функциональной активности фагоцитарной системы человека в норме и при патологии : пособие для врачей клинич. лаб. диагностики. - Москва, 2008 - 56 с.

51.Пат. № 2384844 Рос. Федерации Способ обнаружения нейтрофильных ловушек / И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева (Российская Федерация). -заявл. 01.04.2008; опубл. 20.03.2010, Бюл. №8.-7 с.

52.Пат. № 2463349 Способ обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в мукозальных секретах / И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю. Савочкина (Российская Федерация). - заявл. 26.01.2009; опубл. 10.10.2012, Бюл. №28.-6 с.

53.Перова, М.Д. открытие нейтрофильных внеклеточных ловушек -новый этап в изучении морфогенеза и функций нейтрофилов / М.Д. Перова, М.Г. Шубич // Морфология.. - 2011. - Т. 139, № 3. - С. 89-96.

54.Пигаревский, В.Е. О секреторной активности полиморфноядерных лейкоцитов / В.Е. Пигаревский // Арх. патологии. - 1982. - Т. 44, № 5. -С. 3-12.

55.Пинегин, Б.В. Нейтрофилы: структура и функция / Б.В. Пинегин, А.Н. Маянский // Иммунология. - 2007. - Т. 28, № 6. - С. 374-382.

56.Плужников, М.С. Иммунология хронического тонзиллита / М.С. Плужников, Г.В. Лавренова. - Санкт-Петербург : Диалог, 2004. - 59 с.

57.Полетаев, А.И. Проточная цитометрия и сортировка в цитологии, молекулярной биологии, биотехнологии и медицине / А.И. Полетаев . -Москва, 1989. - Т. 12. - 88 с. - Серия «Общие проблемы физикохимической биологии».

58.Ройт, А. Иммунология : пер. с англ. / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. -Москва : Мир, 2000. - 581 с.

59.Рыжкова, А.И. Влияние микробных и немикробных факторов на формирование внеклеточных ловушек нейтрофилами периферической крови : дис. ... канд. мед. наук / А.И. Рыжкова. - Челябинск, 2010. -143 с.

60.Савочкина, А.Ю. Иммунологические показатели в диагностике хронического цервицита и при его сочетании с хроническим эндометритом : дис. ... канд. мед. наук / А.Ю. Савочкина. - Челябинск, 2006. - 148 с.

61.Савочкина, А.Ю. Нейтрофильные внеклеточные ловушки : механизмы образования, методы обнаружения, биологическая роль: автореф. дис. ... д-ра мед. наук / А.Ю. Савочкина. - Челябинск, 2012. -42 с.

62.Савочкина, А.Ю. Нейтрофильные внеклеточные ловушки: механизмы образования, методы обнаружения, биологическая роль : дис. ... д-ра мед. наук / А.Ю. Савочкина. - Челябинск, 2012. - 221 с.

63.Семенов, Б.Ф. Концепция создания быстрой иммунологической защиты от патогенов / Б.Ф. Семенов, В.В. Зверев // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2007. - № 4. - С. 93-100.

64.Смирнова, Т.Г. Влияние женских половых стероидных гормонов на механизм внутри- и внеклеточной бактерицидности фагоцитирующих клеток : автореф. дис. ... канд. биол. наук / Т.Г. Смирнова. -Челябинск, 2013. - 22 с.

65.Стасенко, A.A. Особенности функциональной активности нейтрофилов крови и желчи у больных гнойным холангитом / А.А Стасенко, В.П. Чернышов // Клин. лаб. диагн. - 1997. - № 12. - С. 22-33.

66.Телешева, Л.Ф. Иммунологические факторы секретов репродуктивного тракта женщин : дис. ... д-ра мед. наук / Л.Ф. Телешева. - Челябинск, 2000. - 324 с.

67.Телешева, Л.Ф. Иммунологические факторы секретов репродуктивного тракта женщин : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Л.Ф. Телешева. -Челябинск, 2000.-41 с.

68.Теплова, С.Н. Новые технологии исследования фагоцитирующих клеток / С.Н. Теплова, Е.А. Чухарева, Л.И. Крюкова [и др.] // Новые технологии в медицине : труды науч. конф. - Трехгорный, 1996. - С. 8486.

69.Теплова, С.Н. Секреторный иммунитет / С.Н. Теплова, Д.А. Алексеев. -Челябинск, 2002. - 200 с.

70.Тотолян, A.A. Клетки иммунной системы / A.A. Тотолян, И.С. Фрейдлин. - Москва : Наука, 2000. -231 с.

71.Тотолян A.A. Молекулярно-генетические технологии в диагностике социально значимых заболеваний / A.A. Тотолян, А.Б. Чухловин, H.A. Яицкий // Мед. академический журн. - 2006. - Т. 6, № 1. - С. 39-46.

72.Третьякова, И.Е. Регуляторная функция нейтрофилов в норме и в условиях механической травмы : дис. ... канд. мед. наук / И.Е. Третьякова. - Челябинск, 1991. - 147 с.

73.Федотова, Г.Г. Морфофункциональное исследование нейтрофилов в условиях эндотоксикоза : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / Г.Г. Федотова. - Саранск, 2007. - 39 с.

74. Фрейдлин, И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейдлин. -Москва : Медицина, 1984.-271 с.

75.Фрейдлин, И.С. Иммунная система и ее дефекты: руководство для врачей / И.С.Фрейдлин. - Санкт-Петербург : Полисан, 1998. - 113 с.

76.Хаитов, P.M. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. -1995.-№4.-С. 3-8.

77.Хайдуков, C.B. Проточная цитометрия как современный метод анализа в биологии и медицине / C.B. Хайдуков, A.B. Зурочка // Мед. иммунология. - 2007. - Т. 9, № 4-5. - С. 373-378.

78.Хайдуков, C.B. Вопросы современной проточной цитометрии. Клиническое применение / C.B. Хайдуков, A.B. Зурочка. - Челябинск, 2008.- 195 с.

79.Чередеев, А.Н. Развитие патогенетического принципа оценки иммунной системы человека / А.Н. Чередеев, JI.B. Ковальчук // Журн. микробиологии. - 1997. - Ks 6,- С. 89-92.

80.Чертков, И.Л. Клеточные основы кроветворения / И.Л. Чертков, А .Я. Фриденштейн. - Москва, 1977. -272 с.

81.Ширшев, C.B. Механизмы иммунноэндокринного контроля процессов репродукции / C.B. Ширшев. - Екатеринбург : УрО РАН, 2002. - Т. 2. -557 с.

82.Шиффман, Ф.Дж. Патофизиология крови / Ф.Дж. Шиффман. - Санкт-Петербург : Невский диалект, 2000. - 448 с.

83.Шишкова, Ю.С. Влияние перпарата «Пирогенал» на образование нейтрофильных внеклеточных ловушек / Ю.С. Шишкова, А.Ю. Савочкина, А.И. Рыжкова, Е.А. Мезенцева // Мед. наука и образование Урала. - 2009. - Т. 10. № 3. - С. 23-24;

84.Шишкова, Ю.С. Роль нейтрофилов в формировании колонизационной резистентности слизистых оболочек : дис. ... д-ра мед. наук / Ю.С. Шишкова. - Челябинск, 2010. - 265 с.

85.Шмагель, К.В. Клетки врожденного иммунитета / К.В. Шмагель, В.А. Черешнев. - Пермь, 2011. - 241 с.

86.Шмаров, Д.А. Лабораторно клиническое значение проточноцитометрического анализа крови / Д.А. Шмаров, Г.И. Козинец. - Москва : МИА, 2004. - 128 с.

87.Ярилин, А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. - 1996. - № 6. - С. 10-23.

88.Ярилин, А.А. Симбиотические взаимоотношения клеток иммунной системы / А.А. Ярилин // Иммунология. - 2001. - № 4. - С. 16-20.

89.Abramson, J.S. The natural immune system : the neutrophil / J.S. Abramson, J.G. Wheeler. - Oxford, 1993. -P. 109-137.

90.Anderson, D.P. Neutrophil, glass-adherent, nitroblue tetrazolium assay gives early indication of immunization effectiveness in rainbow trout / D.P. Anderson, T. Moritomo, R. de Grooth // Vet. Immunol. Immunopathol. -1992. - Vol. 30, № 4. - P. 419-429.

91.Arends, M.J. Apoptosis: Mechanisms and roles in patology / M.J. Arends, A.H. Wyllie // Int. Arch. Patol. - 1992. - Vol. 32. - P. 223-226.

92.Bainton, D.F. Morphology of neutrophils, eosinophils and basophils / D.F. Bainton // Williams Hematology. - 5th ed. - 1995. - P. 753-765.

93 .Baker, V.S. Cytokine-associated neutrophil extracellular traps and antinuclear antibodies in Plasmodium falciparum infected children under six years of age / V.S. Baker, G.E. Imade, N.B. Molta [et al.] // Malar. J. - 2008. -P. 41.

94.Banker, D.E. Measurement of spontaneous and therapeutic agent-induced apoptosis with BCL-2 protein expression in acute myeloid leukemia / D.E. Banker, M. Groudine, T. Norwood [et al.] // Blood. - 1997. - Vol. 89, № 1. -P. 243-255.

95.Bao, Y. Revisiting the protective and pathogenic roles of neutrophils: Ly-6G is key! / Y. Bao, X. Cao // Eur. J. Immunol. - 2011. - Vol. 41. - P. 25352538.

96.Beiter, K. An endonuclease allows Streptococcus pneumoniae to escape from neutrophil extracellular traps / K. Beiter, F. Wartha, B. Albiger [et al.] // Curr. Biol. - 2006. - Vol. 16. - P. 401-407.

97.Bellingan, G. Inflammatory cell activation in sepsis / G. Bellingan // Br. Med Bull.- 1999.- Vol. 55.-P. 18-23.

98.Beyrau, M. Neutrophil heterogeneity in health and disease: a revitalized avenue in inflammation and immunity / M. Beyrau, J.V. Bodkin, S. Nourshargh//Open Biol. -2012. - Vol. 2, № 11. - P. 120-134.

99.Bianchi, M. Restoration of NET formation by gene therapy in CGD controls aspergillosis / M. Bianchi, A. Hakkim, V. Brinkmann [et al.] // Blood. -2009.-P. 2619-2622.

100. Bianchi, M. Restoration of NET formation by gene therapy in CGD controls aspergillosis / M. Bianchi, A. Hakkim, V. Brinkmann [et al.] // Blood. - 2009. - Vol. 114, № 13. - P. 2619-2622.

101. Bogomolski-Yahalom V. Disorders of neutrophil function / V. Bogomolski-Yahalom, Y. Matzner // Blood Rev. - 1995. - Vol. 9, № 3. - P. 183-190.

102. Bohnsack, J.F. Human neutrophil adherence to laminin in vitro. Evidence for a distinct neutrophil integrin receptor for laminin / J.F. Bohnsack, S.K. Akiyama, C.H. Damsky [et al.] // J. Exp. Med. - 1990. -Vol. 171.-P. 1221-1237.

103. Borregaard, N. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte / N. Borregaard, J. Cowland // Blood. - 1997. -Vol. 89, №10.-P. 3503-3521.

104. Bossuyt, X. Comparative analysis of whole blood lysis methods for flow cytometry / X. Bossuyt, G.E. Marti, T.A. Fleisher // Cytometry. - 1997. -Vol. 30.-P. 124-133.

105. Botha, A.J. Postinjury neutrophil priming and activation: an early vulnerable window / A.J. Botha, F.A. Moore, E.E. Moore [et al.] // Surgery. - 1995. - Vol. 118, № 2. - P. 358-364.

106. Brinkmann, V. Neutrophil extracelllulartraps kill bacteria / V. Brinkmann, U. Rechard, C. Goosmann [et al.] // Science. - 2004. - Vol. 303. -P. 1532-1535.

107. Brinkmann, V. Beneficial suicide: why neutrophils die to, make NETs / V. Brinkmann, A. Zychlinsky // Nature Rev. - 2007. - Vol. 5. - P. 577-582.

108. Buchanan, J.T. Dnase expression allows the pathogen group A Streptococcus to escape killing in neutrophil extracellular traps / J.T. Buchanan, A.J. Simpson, R.K. Aziz [et al.] // Curr. Biol. - 2006. - P. 396400.

109. Byrd, A.S. An extracellular matrix-based mechanism of rapid neutrophil extracellular trap formation in response to Candida albicans / A.S. Byrd, X.M. O'Brien, C.M. Johnson [et al.] // J. Immunol. - 2013. -Vol. 190, №8.-P. 4136-4148.

110. Chello, M. Complement and neutrophil activation during cardiopulmonary bypass: a randomized comparison of hypothermic and normothermic circulation / M. Chello, P. Mastroroberto, R. Romano [et al.] // Eur. J. Cardiothorac. Surg. - 1997. - Vol. 11, № 1. - P. 162-168.

111. Ciocca, D.R. Estrogen receptors in human nontarget tissues: biological and clinical implications / D.R. Ciocca, L.M. Roig // Endocr Rev. - 1995.-Vol. 16.-P. 35-62.

112. Clark, S.R. Platelet TLR4 activates neutrophil extracellular traps to ensnare bacteria in septic blood / S.R. Clark, A.C. Ma, S.A. Tavener [et al.] // Nature Medicine. - 2007. - Vol. 13, № 4. - P. 463-469.

113. Claude, L. Enumeration of peripheral lymphocytes subsets using 6 vs. 4 color staining: a clinical evaluation of a new flowcytometer / L. Claude, L. Lobagiu, C. Genin // Cytometry Part B. - 2005. - Vol. 130, № 3. - P. 388393.

114. Cohen, M.S. Fagocytes, 02 reduction and hydroxyl radical / M.S. Cohen, B.E. Britigan, D.J. Hasselt [et al.] // Rev. Infect. Dis. - 1988. - Vol. 10.-P. 1088.

115. Cole, A.M. Inhibition of neutrophil elastase prevents cathelicidin activation and impairs clearance of bacteria from wounds / A.M. Cole, J. Shi, A. Ceccarelli [et al.] //Blood. -2001. - Vol. 97, № 1. - P. 297-304.

116. Condensate // Cytometry. - 2006. - Vol. 69, Iss. 3. - P. 169-172.

117. Corver, W.E. Software compensation improves the analysis of heterogeneous tumor samples stained for multiparameter DNA flow cytometry / W.E. Corver, G.J. Fleuren, C.J.Cornelisse // J Immunol Methods. - 2002. - P. 97-107.

118. Darzynkiewicz, Z. Assays of cell viability: discrimination of cells dying by apoptosis / Z. Darzynkiewicz, X. Li, J. Gong // Methods Cell Biol.

- 1994.-Vol. 41.-P. 15-38.

119. Di Nicola, M. Quantization of CD34+ peripheral blood hematopoietic progenitors for autografting in cancer patients / M. Di Nicola, S. Siena, M. Bregni [et al.] // Int. J. Artif. Organs. - 1993. - Vol. 5. - P. 8082. - Suppl.

120. Ding, Z.M. Relative contribution of LFA-1 and Mac-1 to neutrophil adhesion and migration / Z.M. Ding, J.E. Babensee, S.I. Simon [et al.] // J. Immunol. - 1999. - Vol 163. - P. 5029-5038.

121. Eeden, S.F. The use of flow cytometry to measure neutrophil function / S.F. Eeden, M.E. Klüt, В. A. Walker [et al.] // J. of Immun. Meth. - 1999. -Vol. 232.-P. 23-43.

122. Eggers, C.T. The periplasmic serine protease inhibitor ecotin protects bacteria against neutrophil elastase / C.T. Eggers, I.A. Murray, V.A. Delmar [et al.] // Biochem. J. - 2004. - Vol. 379, Pt. 1. - P. 107-118.

123. Ermert, D. Mouse neutrophil extracellular traps in microbial infections / D. Ermert, C.F. Urban, B. Laube [et al.] // J. Innate Immun. - 2009. - № 1. -P.181-193.

124. Fadeel, B. Involvement of caspases in neutrophil apoptosis: regulation by reactive oxygen species / B. Fadeel, A. Ahlin, J.I. Henter [et al. ]// Blood.

- 1998. - Vol. 92. - P. 4808-4818.

125. Fadeel, B. Babies born without safety NET / B. Fadeel // Blood. -2009. - Vol. 13. - P. 6270-6271.

126. Fang, F.C. Antimicrobial reactive oxygen and nitrogen species: concepts and controversies / F.C. Fang // Nat. Rev. Microbiol. - 2004. - Vol. 2, № 10.-P. 820-832.

127. Fuchs, T. Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps / T. Fuchs, U. Abed, C. Goosmann [et al.] // J. of Cell Biology. -2007. - Vol. 176, № 2. - P. 231-241.

128. Fuchs, T.A. Extracellular DNA traps promote trombosis / T.A. Fuchs, A. Brill, D. Duerschmied, D. Schatzberg, M. Monestier, D.D. Myers Jr, S.K. Wrobleski, T.W. Wakefield, J.H. Hartwig, D.D. Wagner // Proc. Natl Acad. Sei. USA.-2010.-Vol. 107, №36.-P. 15880-15885.

129. Guimaraes-Costa, A.B. Leishmania amazonensis promastigotes induce and are killed by neutrophil extracellular traps / A.B. Guimaraes-Costa, M.T. Nascimento, G.S. Froment, R.P. Soares, F.N. Morgado, F. Concei9äo-Silva, E.M. Saraiva // Proc. Natl Acad. Sei. USA. - 2009. - P. 6748-6753.

130. Hakkim, A. Impairment of neutrophil extracellular trap degradation is associated with lupus nephritis / A. Hakkim, B.G. Furnrohr, K. Amann, B. Laube, U.A. Abed, V. Brinkmann, M. Herrmann, R.E. Voll, A. Zychlinsky // Proc. Natl Acad. Sei. USA. - 2010. - P. 9813-9818.

131. Hamaguchi, S. Identification of neutrophil extracellular traps in the blood of patients with systemic inflammatory response syndrome / S. Hamaguchi, T. Hirose, Y. Akeda [et al.] // J. Int Med Res. - 2013. - Vol. 41, № l._p. 162-168.

132. Hampton, M.B. Oxidant-mediated phosphatidylserine exposure and macrophage uptake of activated neutrophils: possible impairment in chronic granulomatous disease / M.B. Hampton, M.C. Vissers, J.I. Keenan [et al.] // J. Leukoc. Biol.-2002-Vol. 71, №5.-P. 775-781.

133. Handbook of fluorescent probes and research chemicals. - 6-th ed. / ed. by R.P. Haugland. - London, 1996.

134. Hickey, M.J. Intravascular immunity: the hostpathogen encounter in blood vessels / M.J. Hickey, P. Kubes // Nature Rev. Immunology. - 2009. -P. 364-375.

135. Hirche, T.O. Netrophil elastase mediates innate host protection against Pseudomonas aeruginosa / T.O. Hirche, R. Benabid, G. Delslee [et al.] // J. Immunology. -2008. - Vol. 181. - P. 4945-4954.

136. Hoffmann, J.A. Phylogenetic perspectives in innate immunity / J.A. Hoffmann, F.C. Kafatos, C.A. Janeway [et al.] // Science. - 1999. - Vol. 284.-P. 1313-1318.

137. Hoffmann, J.A. The immune response of Drosophila / J.A. Hoffmann //Nature. - 2003. - Vol. 426. - P. 33-38.

138. Hong, W. Survival bacterial biofilms within neutrophil extracellular traps promotes nontypeable Haemophilus influenzae persistence in the chinchilla model otitis media / W. Hong, R.A. Juneau, B. Pang [et al.] // J. Innate Immun. - 2009. - P. 215-224.

139. Itoh, N. The polypeptide encoded by the cDNA for human cell surface antigen Fas can mediate apoptosis / N. Itoh, S. Yonehara, A. Ishii [et al.] // Cell. - 1991. - Vol. 66. - P. 233-243.

140. Jaber, B.L. Modulation of neutrophil apoptosis by uremic plasma during hemodialysis / B.L. Jaber, V.S. Balakrishnan, M.N. Cendoroglo [et al.] // Blood Purif. - 1998. - Vol. 16, № 6. - P. 325-335.

141. Jann, N.J. Neutrophil antimicrobial defense against Staphylococcus aureus is mediated by phagolysosomal but not extracellular trap-associated cathelicidin / N.J. Jann, M. Schmaler, S.A. Kristian, K.A. Radek, R.L. Gallo, V. Nizet, A. Peschel, R. Landmann // J. Leukoc Biol. - 2009. - Vol. 86, №5.-P. 1159-1169.

142. Johansson, A. Different subcellular localization of cytochrome band the dormant NADPH-oxidase in neutrophils and macrophages: effect on the

production of reactive oxygen during phagocytosis / A. Johansson, A.J. Jesaitis, H. Lundqvist [et al.] // Cellular Immunol. - 1995. - Vol. 161, № 1. -P. 61-71.

143. Kabelitz, D. Rapid modulation of T lymphocyte surface antigens induced by Fas (CD95, APO-1) ligation / D. Kabelitz, S. Marx, M.J. Robertson [et al.]//Cell. Immunol. - 1996.-Vol. 1, № 173.-P. 108-115.

144. Kanthack, A. The morphology and distribution of the wandering cells of mammalian / A. Kanthack, W.B. Hardy // J. Physiol. - 1995. - Vol. 17, № 80.-P. 1-119.

145. Kerr, J. Schrinkage necrosis: A distinct mode of cellular death/ J. Kerr //J. Pathol. - 1971. -Vol. 105.-P. 13-18.

146. Klas, C. Activation interferes with the APO-1 pathway in mature human T cells / C. Klas, K.M. Debatin, R.R. Jonker [et al.] // Int Immunol. - 1993. - Vol. 5. - P. 625-630.

147. Lauth, X. Ml protein allows group A streptococcal survival in phagocyte extracellular traps through cathelicidin inhibition / X. Lauth, M. von Kockritz-Blickwede, C.W. McNamara, S. Myskowski, A.S. Zinkernagel, B. Beall, P. Ghosh, R.L. Gallo, V. Nizet // J. Innate Immun. -2009.-Vol.3.-P. 202-214.

148. Lee, W.L. The tangled webs that neutrophils weave / W.L. Lee, S. Grinstain // Science. - 2004. - Vol. 303. - P. 1477-1478.

149. Logters, T. The clinical value of neutrophil extracellular traps / T. Logters, S. Margraf, J. Altrichter [et al.] // Med Microbiol Immunol. -2009.-Vol. 198.-P. 211-219.

150. Look, A.T. Oncogenic transcription factors in the human acute leukemias / A.T. Look // Science. - 1997. - Vol. 278, № 5340. - P. 10591064.

151. Lopez-Boado, Y.S. Neutrophil serine proteinases cleave bacterial flagellin, abrogating its host response-inducing activity / Y.S. Lopez-Boado,

M. Espinola, S. Bahr [et al.] // J. Immunol. - 2004. - Vol. 172. - P. 509515.

152. Luger, T.A. Role of epidermal cell-derived alpha-melanocyte stimulating hormone in ultraviolet light mediated local immunosuppression / T.A. Luger, T. Schwarz, H. Kalden // Ann N Y Acad Sci. - 1999. - Vol. 885.-P. 209-216.

153. Luider, J. Impact of the new Beckman Coulter Cytomics FC 500 5color flow cytometer on a regional flow cytometry clinical laboratory servise / J. Luider, M. Cyfra, P. Johnson [et al.] // Lab. Hematol. - 2004. -Vol. 10.-P. 102-108.

154. Lundqvist-Gustafsson, H. Activation of the granule pool of the NADPH oxidase accelerates apoptosis in human neutrophils / H. Lundqvist-Gustafsson, T. Bengtsson // J. Leukoc. Biol. - 1999. - Vol. 65. - P. 196-204.

155. Ma, A.C. Platelets, neutrophils and neutrophil extracellular traps in sepsis / A.C. Ma, P. Kubes // J. Thromb. Haemost. - 2008. - Vol. 6, № 3. -P. 415-420.

156. Martinelli, S. Induction of genes mediating interferon-dependent extracelular trap formation during neutrophil differentiation / S. Martinelli, M. Urosevis, A. Daryadel [et al.] // J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279, № 42. -P. 44123-44132.

157. Medina, E. Neutrophil Extracellular Traps: A Strategic Tactic to Defeat Pathogens with Potential Consequences for the Host / E. Medina // J. Innate Immun. - 2009. - № 1. - P. 176-180.

158. Miyawaki, T. Differential expression of apoptosis-related Fas antigen on lymphocyte subpopulations in human peripheral blood / T. Miyawaki, T. Uehara, R. Nibu [et al.] // J. Immunol. - 1992. - Vol. 149. - P. 3753-3758.

159. Mizgerd, J.P. Mechanisms of disease acute lower respiratory tract infection / J.P. Mizgerd // N. Engl. J. Med. - 2008. - Vol. 358, № 7. - P. 716-727.

160. Model, M.A. A sensitive flow cytometryc method for measuring the oxidative burst / M.A. Model, M.A. Kukuruga // J. of Immunol. Meth. -1997.-Vol. 202.-P. 105-111.

161. Munafo, D.B. DNase I inhibits a late phase of reactive oxygen species production in neutrophils / D.B. Munafo, J.L. Johnson, A.A. Brzezinska [et al.] // J. Innate Immun. - 2009. - Vol. 1, № 6. - P. 527-542.

162. Nagahata, H. Enhanced expression of Fc receptors on neutrophils from calves with leukocyte adhesion deficiency / H. Nagahata, H. Higuchi, H. Nochi [et al.] // Microbiol. Immunol. - 1995. - Vol. 39, № 9. - P. 703708.

163. Nathan, C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities / C. Nathan // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - № 6. - P. 173-182.

164. Nauta, A.J. Recognition and clearance of apoptotic cells: a role for complement and pentraxins / A.J. Nauta, M.R. Daha, C. van Kooten [et al.] //Trends Immunol. -2003. - Vol. 24, № 3. - P. 148-154.

165. O'Connor, B.H. A color Atlas and Instruction Manual of Peripheral Blood cell. Morphology / B.H. O'Connor. - Baltimore, 1984. - 428 p.

166. Oehmske, S. Activation of the human contact system on neutrophil extracellular traps / S. Oehmske, M. Morgelin, H. Hervald // J. Innate Immun. -2009. - Vol., № 3. - P. 225-230.

167. Oez, S. Clonal growth of functionally normal and deficient neutrophils from the bone marrow of a patient with variant chronic granulomatous disease. Lack of reconstitution of oxidative burst defect by G-CSF, GM-CSF, and IFN-gamma in vitro / S. Oez, J. Birkmann, J. Kalden //Ann. Hematol.- 1993.-Vol. 66, № 1.-P. 21-25.

168. Papayannopoulos, V. Neutrophil elastase and myeloperoxidase regulate the formation of neutrophil extracellular traps / V. Papayannopoulos, K.D. Metzler, A. Hakkim [et al.] // J. Cell Biol. - 2010. -Vol. 191.-P. 677-691.

169. Papayannopoulos, V. Neutrophil elastase enhances sputum solubilization in cystic fibrosis patients receiving DNase therapy / V. Papayannopoulos, D. Staab, A. Zychlinsky // PLoS One. - 2011. - Vol. 6, № 12.-P. 125-131.

170. Patarroyo, M. Adhesion molecules mediating recruitment of monocytes to inflamed tissue / M. Patarroyo // Immunobiology/ - 1994. -Vol. 191.-P. 474-477.

171. Pillay, J. In vivo labeling with 2H20 reveals a human neutrophil lifespan of 5.4 days / J. Pillay, I. den Braber, N. Vrisekoop [et al.] // Blood. -2010. - Vol. 116. -P. 625-627.

172. Puyet, A. Genetic and structural characterization of endA. A membrane-bound nuclease required for transformation of Streptococcus pneumoniae / A. Puyet, B. Greenberg, S.A. Lacks // J. Mol Biol. - 1990. -Vol. 213, №4.-P. 727-738.

173. Remijsen, Q. Neutrophil extracellular trap cell death requires both autophagy and superoxide generation / Q. Remijsen, T. Vanden Berghe, E. Wirawan [et al.] // Cell Research. - 2011. - Vol. 21, № 2. - P. 290-304.

174. Romagnani, S. Human TH1 and TH2 in human diseases / S. Romagnani // Clin. Immunol. Immunopath. - 1996. - Vol. 80. - P. 225-235.

175. Rothe, G. Flow Cytometric Analysis of Respiratory Burst Activity in Phagocytes With Hydroethidine and 2',7'-Dichlorofluorescin / G. Rothe, G. Valet// J. of Leukocyte Biology. - 1990. - Vol. 47. - P. 440-448.

176. Rotstein, D. Phagocytosis of Candida albicans induces apoptosis of human neutrophils / D. Rotstein, J. Parodo, R. Taneja [et al.] // Shock. -2000. - Vol. 14, № 3. - P. 278-283.

177. Sack, U. Multiplex analysis of cytokines in exhaled breath condensate / U.Sack, R. Scheibe, M.Wotzel [et al.] // Cytometry A. - 2006. - Vol. 69, № 3. - P. 169-172.

178. Saresella, M. A flow cytometric method for the analysis of phagocytosis and killing by polymorphonuclear leukocytes / M. Saresella, Roda, K. Speciale, L. Taramelli [et al.]. - New York : Acad Sei, 1997. - P. 53-61.

179. Saresella, M. A rapid evaluation of phagocytosis and killing of Candida albicans by CD 13+ leukocytes.Saresella / M. Saresella, M. Roda, K. Speciale, L. Taramelli [et al.] // J Immunol Methods. - 1997. - Vol . 210, №2.-P. 227-234.

180. Shapiro H.M. Practical flow cytometry. - New York : WILEY-LISS, Inc., Toronto & Singapore, 1995. - 542 p.

181. Sheth, K. Heat shock protein 27 inhibits apoptosis in human neutrophils / K. Sheth, A. De, B. Nolan [et al.] // J. Surg. Res. - 2001. - Vol. 99, № l.-P. 129-133.

182. Silva, I.D. Phagocytic and nitroblue tetrazolium reductive properties of mature and immature neutrophils and eosinophils from blood and bone marrow from cows / I.D. Silva, N.C. Jain, L.W. George // Am. J. Vet. Res. -1989. - Vol. 50, № 5. - P. 778-781.

183. Smith, R.J. Properties of interleukin-1 as a complete secretagogue for human neutrophils / R.J. Smith, S.C. Speziale, B.J. Bowman // Biochem Biophys Res Commun. - 1985. - Vol. 130, № 3. - P. 1233-1240.

184. Smith, R.J. Human polymorphonuclear neutrophil activation with arachidonic acid / R.J. Smith, L.M. Sam, J.M. Justen [et al.] // Br J Pharmacol. - 1987. - Vol. 91, № 3. - P. 351-359.

185. Springer, T.A. Adhesion receptors of the immune system / T.A. Springer//Nature. - 1990. - Vol. 346. - P. 425-434.

186. Sumby, P. Extracellular deoxyribonuclease made by group A Streptococcus assists pathogenesis by enhancing evasion of the innate immune response / P. Sumby, K.D. Barbian, D J. Gardner [et al.] // Proc Natl Acad Sei USA. - 2005. - Vol. 102. - P. 1679-1684.

187. Szekeres-Bartho, J. The suppressive eff ect of progesterone on lymphocyte cytotoxicity: unique progesterone sensitivity of pregnancy lymphocytes / J. Szekeres-Bartho, J. Hadnagy, A.S. Pacsa // J. Reprod Immunol.-1985.-Vol. 7.-P. 121-128.

188. Urban, C.F. How do microbes evade neutrophil killing? / C.F. Urban, S. Lourido, A. Zychlinsky // Cell Microbiol. - 2006. - № 8. - P. 1687-1696.

189. Urban, C.F. Neutrophil extracellular traps capture and kill Candida albicans yeast and hyphal forms / C.F. Urban, U. Reichard, V. Brinkmann [et al.] // Cell. Microbiol. - 2006. - Vol. 8. - P. 668-676.

190. Van Parijs, L. Role of Fas-mediated cell death in the regulation of immune responses / L. Van Parijs, A.K. Abbas // Curr Opin Immunol. -1996.-Vol. 8.-P. 355-361.

191. von Köckritz-Blickwede, M. Phagocytosis-independent antimicrobial activity of mast cells by means of extracellular traps formation / M. von Köckritz-Blickwede, O. Goldmann, P. Thulin [et al.] // Blood. - 2008. -Vol. 111.-P. 3070-3080.

192. von Köckritz-Blickwede, M. Innate immunity turned inside-out: antimicrobial defense by phagocyte extracelular traps / M. von Köckritz-Blickwede, V. Nizet // J. Mol. Med. - 2009. - Vol. 87, № 8. - P. 775-783.

193. Wartha, F. Capsule and D-alanylated lipoteichoic acids protect Streptococcus pneumoniae against neutrophil extracellular traps / F. Wartha, K. Beiter, B. Albiger [et al.] // Cell Microbiol. - 2007. - Vol. 9, № 5. - P. 1162-1171.

194. Wartha, F.A Novel Cell Death Pathway / F. Wartha, B. Henriques-Normark, E. Tosis // Sei. Signal. - 2008. - № 1. - P. 25.

195. Wautier, J. L Release of prostacyclin after erythrocyte adhesion to cultured vascular endothelium / J.L. Wautier, D. Pintigny, J. Maclouf, M.P. Wautier, E. Corvazier, J. Caen // J Lab Clin Med. - 1986. - Vol. 107, № 3. -P. 210-215.

J

C -

196. Wautier, J.L. Factors involved in cell adhesion to vascular endothelium / J.L. Wautier, M.P. Wautier, D. Pintigny [et al.] // Blood Cells. - 1983. - Vol. 9, № 2. - P. 221-234.

197. Weinrauch, Y. Neutrophil elastase targets virulence factors of enterobacteria / Y. Weinrauch, D. Drujan, S.D. Shapiro [et al.] // Nature. -2002.-Vol. 417.-P. 91-94.

198. Wikstrom, T. NBT reactivity correlates to the distribution of PMNs between rat pulmonary and systemic circulation / T. Wikstrom, M. Braide, U. Bagge [et al.] // Am. J. Physiol. - 1995. - Vol. 269, № 4. - P. 1195-1201.

199. Wong M. The identification of Fc and C3 receptors on human neutrophils / M. Wong, R.D. Wilson // J. Immunol. Method. - 1975. - Vol. 7. - P. 69-76.

200. Wray, D. Polymorphonuclear neutrophil function in recurrent aphthous stomatitis / D. Wray, J.J. Charon // Oral. Pathol. Med. - 1991. -Vol. 20, № 8. - P. 392-394.

201. Xu, L. Preparation and characterization of HLA-A* 0201 tetramer loaded with IE-1316-324 antigenic peptide of human cytomegalovirus / L. Xu, Q. Zha, H. Sun [et al.] // Cell Mol. Immunol. - 2006. - Vol. 3, № 5. - P. 367-371.

202. Yang, D. The role of mammalian antimicrobial peptides and proteins in awakening of innate host defenses and adaptive immunity / D. Yang, O. Chertov, J.J. Oppenheim // Cell. Mol. Life Sci. - 2001. - Vol. 58, № 7. - P. 978-989.

203. Yost, C.C. Impaired neutrophil extracellular trap (NET) formation: a novel innate immune deficiency of human neonates / C.C. Yost, M J. Cody, E.S. Harris [et al.] // Blood. - 2009. - Vol.113, № 25. - P. 6419-6427.