Сравнительное кариологическое исследование бобовых растений на примере родов - Vicia L., Cicer L., Faba Mill., Pisum L., Lathyrus L., Phaseolus L., Vigna Savi., Medicago L., Psophocarpus GC тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Лиянараччи, Сусил Хирантака

• Лиянараччи, Сусил Хирантака
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Лиянараччи, Сусил Хирантака

ВВЕДЕНИЕ

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. II

Глава I. БОТАНИЧЕСКАЯ И КАРИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДОВ

Vicia L., Cicer L., Paba Miller, Pisum L., Lathyrus L., Phaseolus L., Vigna Savi., Medicago L.,

Psophocarpus Gc.

Глава П. КАРИОТИП КАК ГЕНЕТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА.

1. Митоз и мейоз - механизмы, обеспечивающие преемственность клеток и организмов в ряду поколений.

2. Элементы структурной организации хромосом, определяющие их морфологию.

3. Дифференциальное окрашивание хромосом

4. Гетеро- и эухроматические районы хромосом.

5. Эволюция кариотипа - изменение структуры, числа хромосом и целых геномов.

6. Принципы и методы хромосомного анализа

- з

Часть П. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

Глава I. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава П. ОБЩАЯ КАРИОТИПИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ВИДОВ ВИКИ

Глава Ш. МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ХРОМОСОМ

Глава ЗУ. ПОЛИКАРИОГРАММНЫЙ АНАЛИЗ КАРИОТИПОВ

Глава У. МОРФОЛОГИЯ СПУТНИЧНЫХ ХРОМОСОМ НЕКОТОРЫХ

ВИДОВ ВИКИ

Глава Л. ОБЩАЯ КАРИОТИПИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГОРОХА,

ЧИНЫ, БОБОВ И ЛЮЦЕРНЫ.

Глава УЛ. ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЕ ОКРАШИВАНИЕ ХРОМОСОМ

БОБОВЫХ РАСТЕНИЙ. НО

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительное кариологическое исследование бобовых растений на примере родов - Vicia L., Cicer L., Faba Mill., Pisum L., Lathyrus L., Phaseolus L., Vigna Savi., Medicago L., Psophocarpus GC»

Кариологические исследования стали в настоящее время одним из важнейших направлений изучения строения и функционирования наследственного аппарата. Эти исследования важны для понимания теоретических основ генетики, изменчивости геномов живых организмов в условиях изменяющейся окружающей среды, для выяснения путей эволюции в пределах различных таксономических единиц,вы -явления степени родства между представителями разных родов и семейств, для изучения геномного состава видов, популяций и для решения многих других существенных теоретических и црактических вопросов.

Эти исследования несут важную информацию для целенаправ -ленной селекции на качество, повышенную устойчивость к болез -ням и вредителям. Они позволяют ускорить получение гибридных сортов, что важно для селекции на гетерозис и т.д. Так, кариология способствует выяснению таких проблем, как расширение, спектра видов диких и культурных растений, включаемых в скрещивание и способных облегчить проблему интрогрессии нужных генов: путем изучения процессов синапсиса хромосом в мейозе межвидовых гибридов от сщзещивания разных видов удается контролировать возможные комбинации хромосомных фрагментов.

С другой стороны, исследования эллиминации отдельных хромосом позволяет заранее обнаружить, какая из хромосом будет утеряна из генома гибрида, а какая зацепится в нем.

Естественно, что такая целенаправленная работа возможна только в тех случаях, когда исследователям известна детальная к ар ио логическая характеристика данного вида, разновидности или сорта, когда все хромосомы набора индивидуализированы с помощью цитологических маркеров.

Таким образом, криологические и генетические исследования групп сцепления и тонкой структуры индивидуальных хромосом и изучение геномного состава данного организма особенностей мейо-за и митоза дают возможность интенсифицировать процесс селекции.

Однако реальность такого црогресса стала очевидной лишь недавно, после того как цроводившиеся параллельно исследования цитологов, генетиков и эволюционистов позволили резко увеличить разрешающую способность методов идентификации индивидуальных хромосом,изучение их продольной дифференцированности с одновременным анализом геномного состава и предположительных путей эволюции в цределах изучаемой систематической группы.

Решающим моментом в обеспечении этого прогресса стало от -крытие "бэндинга" - индивидуальной дифференцированности хромо -сом на участке с эухроматическим и гетерохроматическим материалом ( Heitz 1935), впервые продемонстрировавшего их еще в трид-цатых-сороковых годах ( Kostoff 1938; Darlington and La Cour 1940), а затем использованного для целей дифференциального анализа хромосом Касперсоном и соавторами в 1968 г. ( Casperson et ai., 1968). Усовершенствование способов дифференциальной окраски, в особенности разработка методик, основанных на частич -ной денатурации определенных последовательностей ДНК (в частности, ГЦ-повторяющихся последовательностей) и окраски ДИК в этих условиях ПО Гимза ( Arrighi and Hsu 1971; Graig-Holmes and Shaw 1971; Sumner 1972), расширило сферу применимости методов индивидуальной кариологической характеристики и указало генетикам и цитологам новый путь исследования.

Что касается высших растений, то такие сведения были получены ДЛЯ Весьма УЗКОГО Набора РОДОВ И ВИДОВ: Scilla sibirica ( Vosa and Marchi 1972; Vosa 1973), Triticum ( Gill and Kimber 1974; Зурабшвили И др., 1974), Seeale ( Sarraa and NatarayanI973; Mettin 1973; Zeller et al. 1973; Verraa and Rees 1974; Weimarck 1974, 1975 и др.), Oryza ( Mucker;)ее and Muckerjее 1979) , тритикале ( Weimarck 1974; Иорданский, 1976) и ряда других (см. недавний обзор Свешникова и Грифа, 1981). Для большинства высших растений эта работа, несмотря на ее очевидную актуальность, еще не начата.

Актуальность темы. Все вышесказанное определяет интерес , который проявляют специалисты разных научных направлений к де -тальному кариологическому анализу неизученных ввдов высших ра -стений, в особенности тех из них, которые широко используются в качестве сельскохозяйственных культур.

Так весьма актуальна работа в отношении разных видов бобовых растений. Изучение кариологии культурных и дикорастущих видов рода Vicia обусловлено црежде всего необходимостью получения новых данных для целенаправленной селекционной работы с этой культурой. За истекшее десятилетие установлено, что многие дикорастущие виды вики и других видов бобовых могут служить донорами ряда ценных признаков: устойчивость к заболеваниям, повышенное содержание белка и устойчивость растений к пониженным тем -пературам и засухе и др.

Однако попытки простого использования дикорастущих видов для скрещивания с культивхфуемыми формами вики не дали пока существенных результатов. Недаром в литературе отмечалось, что становится все труднее и труднее получать улучшенные агрономически ценные сорта с использованием классических методов улучшения растений (Kammacher 1966, С. 336).

Следует признать, что без детального изучения кариологии этих видов, их геномного состава, характера конъюгации хромосом осуществить современные селекционные программы с целью интро -грессии желательных генов не удасться. Особое значение в этом отношении могли бы иметь исследования линейной цитологической характеристики и характера элиминации тех или иных сегментов и целых хромосом в клетках гибридов. К сожалению, такие сведения в отношении бобовых в литературе к моменту начала данной работы отсутствовали. Одна из основных трудностей в изучении хромосом бобовых обусловлена для большинства видов их малыми размерами.

Изучение кариологии бобовых имеет также важное теоретиче -ское значение, так как способствует выяснению таксономии родов и путей эволюции в пределах различных таксономических единиц,а также выявлению степени родства между цредставителями разных видов.

Настоящая работа цроведена в соответствии с плановой те -мой по Институту общей генетики АН* СССР.

Цель работы заключалась в том, чтобы используя модифици -рованную методику дифференциального окрашивания хромосом про -вести идентификацию индивидуальных хромосом различных родов и видов бобовых растений. На основании морфометрических характеристик хромосом провести сравнительное кариологшеское исследование различных видов бобовых растений.

Основные задачи исследования:

1. Описать хромосомные наборы диких и культурных видов Vicia , а также культурные виды Cicer,Faba,Pisum,Lathyrus, Phaseolus,Vigna,Medicago,Psophocarpus.

2. Провести морфометрическое изучение хромосом 33 видов

ВИКИ ( V.amphicarpa, V.lathyroides, V.cordata, V.hajastana, V.hybrida, V.japónica, V.megalotropis, V.baicalensis, V.uni-juga, V.nana, Vhyrcanica, V.macrocarpa, V.sativa, V.pannonica, V.neglecta, V.amoena, V.sylvatica, V.peregrina, V.benghalensis, V.serratifolia, V.andicola, V.atropurpúrea, V.hirsuta, V.lutea, V.villosa, V.michauxii, Vmonanthos, V.bithynica, V.varia, V.dasycarpa, V.tetrasperma, V.calcarata, V.articulata, V.megalotropis • )

3. Изучить хромосомный полиморфизм В роде Vicia на МО -дели митотических хромосом.

4. Использовать модификацию метода дифференциального oiqpa-ШИВанйЯ ХрОМОСОМ Phaseolus,Vigna,Cicer,Psophocarpus,Faba ,

Vicia , путем блокирования митоза пониженной температурой.

5. Идентифицировать индивидуальные хромосомы видов вики с помощью методов дифференциального и монохромного окрашивания и выявить маркерные жромосомы в наборах этих видов.

6. С помощью специально составленной программы для ЭШ на языке "фортран" провести статистическую обработку полученных данных.

Научная новизна полученных результатов. Впервые проведено детальное наркологическое исследование более 40 видов бобовых растений методом монохромного и дифференциального окрашивания хромосом, представителей различных таксономических единиц и дана сравнительная характеристика кариотипов этих видов.

Проведено морфометрическое изучение отдельных хромосом в наборах каждого из указанных видов Vicia , установлен размах колебаний у самых больших и самых малых хромосом набора, выяв -лены различия между ними по размеру хрсмосом и по суммарной длине хромосомных наборов.

Изучен зфомосомный полиморфизм в пределах каждого вида Vicia , определены колебания в величине центромерного индекса и относительной длине у каждой пары хромосом диплоидных видов вики. С использованием ЭВМ получены данные о статистически достоверных различиях и сходстве между предположительно гомоло -гичными и негомологичными хромосомами наборов эволюционно близких и различающихся видов.

На основании данных хромосомного анализа составлены идио-граммы и поликариограммы для всех изученных представителей рода Vicia и выявлены маркерные хромосомы. На примере отдельных видов на основании дифференциального окрашивания составлены их кариотипы с полной идентификацией всех хромосом набора.

Исследован полиморфизм спутничных хромосом пятнадцати видов рода Vicia

Практическая ценность. Полученные данные могут? быть использованы в работе по таксономии бобовых в качестве одного из 1фи -териев видовой характеристики. Они найдут применение в работе по генетике и селекции сортов вики, фасоли,нута, чины, люцерны, вигны, и других видов бобовых, создании коллекции гаплоидных, анеуплоидных линий, для анализа продуктов гибридизации и вняв -ления вклада разных геномов в полученные гибриды.

Ацробация работы и публикации. Материалы работы доложены на конференции молодых ученых Института общей генетики АН СССР в 1984 г., а также на семинарах лаборатории цитогенетики растений ВНИИ ШБиГ ВАСХНИЛ 1983-1984 гг.

Результаты работы опубликованы в Докладах ВАСХНИЛ 1983 г. и журнале "Селекция и семеноводство", 1983 г. Соавтор учебного пособия "Атлас хромосом растений" (в печати).

Часть I

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Генетика», Лиянараччи, Сусил Хирантака

ВЫВОДЫ

1. Методом количественного анализа морфометрических показателей хромосом дана кариотипическая характеристика более 40 видов бобовых растений:Vicia , Faba ,Cicer ,Pisum , Pha-seolus , bathyrus , Medicago , Vigna , Psophocarpus »включая культивируемые и дикорастущие виды. Построены идиограммы и поликариограммы.

2. Получены данные о линейных размерах всех хромосом изученных видов, установлены различия между кариотипами по размерам максимальной и минимальной длины хромосом. С использованием данных относительной длины хромосом и центромерного индекса идентифицированы отдельные гомологичные пары хромосом в ка-риотипах Vicia L.

3. Графиками варьтрования центромерного индекса и относительной длины доказана достоверность отбора метафазных пластинок, взятых для кариологических исследований,

4. Использованный экспресс-метод дифференциальной окраски хромосом, заключающийся в охлаждении корешков проростков в водном насыщенном растворе монобромнафталина, позволил идентифицировать каждую пару гомологичных хромосом в кариотипах: v.,

Cicer , Vigna » Vicia » Phaseolus , Psophocarpus.

5. Исследован полиморфизм спутничных хромосом различных видов вики по размеру и морфологии.

6. Полученные данные могут быть использованы в работе по таксономии бобовых растений в качестве одного из критериев видовой характеристики.

7. Использованные методы дифференциального окрашивания хромосом могут найти наиболее важное применение при идентификации хромосом, в установлении геномного состава гибридов

- 124 при отдаленной гибридизации. Методы монохромного окрашивания с успехом можно применять в различных селекционно-генетических работах по выявлению анеуплоидных, гаплоидных, полиплоидных форм, контролировании спонтанного и индуцированного мутагенеза, кариосистематике, генетическом мониторинге и др.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные криологические исследования показали широкую наследственную вариабельность хромосом культиввдвмых и дико -растущих видов вики и других бобовых растений по абсолютным размерам хромосом и суммарной длине хромосомных наборов, а также по морфологии зфомосом и другим цитологическим маркерам. Для многих видов такие исследования были осуществлены впервые. До -статочно широкий набор изученных видов позволил дать сравнение криологических свойств у представителей различных таксонов .

Существенным результатом настоящей работы стало обнадже -ние совпадений в ряде признаков (как качественных, так и коли -чественных у отдельных видов.

Это касается црежде всего такового признака, как наличие одинаковых типов хромосом, а также совпадение абсолютных длин хромосом и суммарной длины хромосом в наборе видов из разных мест цроисхождения. В таком совпадении можно усмотреть парал -лелизм в эволюционном развитии представителей определенных таксонов.

Для любой сравнительной работы по кариологии и кариоло-гической номенклатуре весьма важно иметь более точные данные о линейных размерах хромосом. Исходя из этого, нами было уделено большое внимание морфометрическим исследованиям хромосом бобо -вых растений. Важнейшим моментом в этой работе было получение цитологических препаратов с высокой повторяемостью, а также разработка методов, позволяющих иметь стабильно восщюизво дящиеся результаты и снизить компоненту вариабельности, обус -ловленную систематическими ошибками. Представленные в цриложе-нии микрофотографии демонстрируют высокое качество цитологических препаратов и полученной с них информации.

Результаты статистической обработки данных морфометриче -ского анализа, представленные в главе Ш показывают, что эта задача была решена. Об удовлетворительной воспроизводимости результатов (морфометрические характеристики) говорят и другие критерии статистической оценки, которые использованы в настоя -щей работе - графики варьщювания.

Хорошая воспроизводимость результатов позволила успешно решить и другую задачу - идентификации индивидуальных хромосом. Был использован ряд методов для такой идентификации, что позволило последовательно увеличивать число охарактеризуемых хромо -сом.

На первом этапе были выявлены хромосомы, имеющие какие-либо видимые морфологические отличия - цитологические маркеры (например, спутничные хромосомы, хромосомы имеющие вторичные перетяж -ки и др.).

На следующем этапе потребовалось применить методы измере -ния {пдин хромосом с тем, чтобы выявить отличающиеся своими ли -нейными параметрами. Это были, как правило, первые и последние хромосомы в нормированном по величине ряду хромосом в наборах каждого вида.

Чтобы снизить вариабельность, обусловленную разной степенью спирализации хромосом из разных метафазных пластинок, был применен такой, известный в криологии прием, как расчет относи тельных длин хромосом. Данные относительных размеров хромосом позволили еще более повысить разрешающую способность методов идентификации и добавить к числу идентифицированных хромосом новые.

Одним из методов, использованных для отнесения хромосом вики к определенным типам, был поликариограммный анализ. Преимуществом метода перед любыми другими было то, что он позволял оперщювать не только с заранее усредненными данными, но и со всей совокупностью данных, полученных цри измерении каждой хромосомы набора. Получаемые при нанесении на график цифр скопле -ния точек центромерного индекса и относительной длины хромосом для каждой индивидуальной хромосомы дают возможность обозреть весь спектр изменчивости, обнаруживаемой в опытах в целом. Тем самым задача распределения хромосом по типам метацентрических , субметацентрических, субакроцентрических и акроцентрических решается наиболее точно при наличии вариабельности гомологичных хромосом в кариотипе, что можно наблюдать на примере поликарио-Грамм ( V.nana f V.hajastana f V.articulata f. V.disperma f

V.andícola ^ *

Достоверность такого метода цри условии достаточно точного оцределения центромерных индексов и относительной длины хромосом нами доказана и не может подвергаться сомнению.

Наконец, наиболее чувствительным методом для идентификации хромосом оказался метод дифференциальной окраски, позволяющий выделять зоны конденсации и деконденоации хромосомы по ее длине. С помощью метода дифференциальной окраски удалось завершить работу по идентификации хромосом в наборах таких видов, как вика посевная, фасоль обыкновенная, вигна китайская, нут (бараний горох), псофокарпус четырехугольный.

Данные о распределении конденсированных и деконденсиро-ванных районов в хромосомах изученных видов показывают, что отдельные хромосомы имеют свою специфику в распределении конденсированных - деконденсированных районов как в цределах вида, так и между хромосомами различных видов. Несомненно, что полу -ченные нами данные окажутся полезными для последующей работы с бобовыми растениями цри решении теоретических вопросов и практических задач, особенно в селекционной работе с этими важнейшими сельскохозяйственными культурами.

Большое внимание нами было уделено систематическому опи -санию спутничных хромосом у разных видов вики. Выявленный полиморфизм спутничных хромосом цродемонстрщювал их важную роль для целей кариосистематики. Даже в тех случаях, когда внешняя форма спутников была сходной, спутничные хромосомы в целом можно было идентифицировать друг от друга на основании учета мор -фометрических данных или других характеристик. Конечно, эта работа находится на начальном этапе, но уже первые данные по анализу спутничных хромосом дают основание надеяться, что в ближайшем будущем удастся применить сравнительные данные о спутничных хромосомах для углубления кариосистематического анализа.

В целом проведенная работа позволила широко использовать различные подходы к исследованию соматических зфомосом бобовых растений для выявления различий и сходств между видами по такому консервативному признаку, как строение хромосом на стадии метафазы митоза. Использованные методы дали возмож -ность идентифицировать многие из хромосом на примере отдельных видов и благодаря этому завершить работу по кариологиче-ской характеристике ряда таксонов бобовых растений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Лиянараччи, Сусил Хирантака, 1984 год

1. Волховских З.В., Гриф В.Г., Захарьева О.И., Матвеева Т.С., 1969. "Хромосомные числа цветковых растений". Л., "Наука".

2. Гиндилис В.М. 1966. Митотическая спирализация хромосом и кариог-раммный анализ у человека. Цитология, 8 (12) : 144-157

3. Гиндилис В.М. 1967. Принципы идентификации хромосом человека. Ав-тореф, канд. дисс., М., ИОГен.

4. Гриф В.Г. i960. О применении оксихинолина для изучения хромосом. Цитология, 2 (I) : 88-89.

5. Дерягин Г.В., Перельцвайг Ю.М. 1979. Поликариограммный анализ хромосом. Изв. АН СССР, сер. биол., $1 : 46-52.

6. Дерягин Г.В., Малыгина H.A. 1979. О внутривидном разнообразиинормального кариотипа человека. Цитол. Генет., 13 (4) : 267-271.

7. Доспехов Б.А. 1979. Методика полевого опыта. М., "Колос".

8. Жуковский П.М. 1970. Мировой генофонд растений для селекции. Л., "Наука"2£уковский П.М. 1971. Культурные растения и их сородичи. "Колос".

9. Зурабишвили Т.Г., Иорданский А.Б., Бадаев Н.С. 1974. Поликариограммный анализ и исследование дифференциальной окраски хромосом Triticum aestivum L. Докл. АН СССР, 218 (I) : 207-210.

10. Иорданский А.Б. 1965. Применение цитазы из улиток для радиоавтографии. Цитология, 7 (I) : 120-122.

11. Иорданский А.Б., Круминь А.Р., Павулсоне C.Á., Бадаев Н.С.,

12. Дерягин Г.В. 1971. Влияние дифференциальной спирали-зации на линейные и относительные параметры хромосом. Докл. АН СССР, 201 (2) : 469^472

13. Иорданский А.Б., Круминь А.Р., Павулсоне С.А., Бадаев Н.С., Дерягин Г.В. 1974 а. Дифференциальная спирализация и и хромосомный анализ. Цитология, 16 (3) : 287-297.

14. Иорданский А.Б., Павулсоне С.А.,Бадаев Н.С., Дерягин Г.В.,

15. Каждан М.Я. 1974 б. Колличественный анализ динамики спирализации хромосом Allium сера и Allium festilosum L. Цитология, 16 (4) : 513-515.

16. Кайседо П.Д., Турков В.Д., Шалумашвили М.А., Шелепина Г.А. 1982. Хромосомный анализ растений. М., УДН.

17. Оразова Д.А. 1970. 0 кариологии культурного нута Cicer arieti-num L. Тр. Туркм. сельскохозяйственного ин-та, 16 (I) : 49-52.

18. Павулсоне С.А., Иорданский А.Б., Гиндилис В.М. 1970. Сравнительный морфометрич еский анализ хромосом Allium sepa L.и Allium fistulosum L. Генетика, 6 (2) : 40-56.

19. Примак H.H. 1974. Сравнительное кариолоиическое исследование однолетних видов гороха. Селекция и семеноводство, вып. 28, 85-94.

20. Прокофьева-Бельговская A.A. 1946. Гетероцикличность системы клеточного ядра. : . , Докл. АН СССР, 53 (8) : 745-748.

21. Прокофьева-Бельговская A.A. 1947. Гетероцикличность системы клеточного ядра (гипотеза и её обоснование), 1£рн. общ. биол., 8 (4) : 247-280.

22. Прокофьева-Бельговская A.A., Гиндилис В.М. 1965. Идентификация хромосом человека. Изв. АН СССР, сер. биол., 2 : 188.

23. Савченко Е.К., Бадаева Е.Д., Кунах В.А., Бадаев Н.С. 1982.

24. Кариотипический полиморфизм родственных линий кукурузы. Докл. АН УССР, сер. Б. геол., хим. и биол. науки, 7 : 69-72.

25. Свешникове И.Н. 1979. Цитогенетика рода Vicia . M., "Наука".

26. Семенов В.Й., Семенова E.B. 1982. Полиморфизм ржаных хромосом по гетерохромативным блокам у некоторых сортов ржи и форм тритикале. Генетика, 18 (П) : 1856-1857.

27. Турков В.Д., Шелепина Г.А. 1975. Цитогенетичесное исследование рада Citruiius schrad. . Генет. селекц., 8 0Ю:46-45.

28. Турков В.Д. 1976. Хромосомный анализ культурных растений. Вестник с/х науки, 9.

29. Турков В.Д., Романченко А.И. 1976. Дифференциальное окрашивание хромосом томата. Докл. ВАСХНИЛ, 5.

30. Турков В.Д., Рашкован Е.А. 1976. Дифференциальное окрашивание митотических хромосом растений и генетические методы селекции. Тезисы докладов. П Советско-индицск. симп, по генетике., Баку.

31. Турков В.Д., Казакова A.A. 1979. Кариотипический полиморфизм лука и чеснока. Вестник с/х науки.

32. Турков В.Д., Боос Г.В. 1980. Кариотипическая характеристика некоторых видов рода Brassica L. . Бюллетень ВИРа, 101.

33. Турков В.Д., Пименов М.Г. 1980. Интегральный индекс для сравнения кариотипов. ДАН СССР, 254, I.

34. Ямполь Г.П. 1977. Наследование разных типов морфологии спутничных хромосом и активности ядрышковых организаторов у лука Ailium вера L. . Генетика, 13, 12, 272.- 129

35. Ahloowolia B.S. 1965 Aroot tip squash technique for screeningchromosome number in Lolium. Euphytica, 14 (2); 170-172. Ahuja M.R. 1958» The nucleolar chromosomes of Allium cepa.

36. Blanco A. 1978. Ulterore contributo alia cariologia del genera

37. Vicia. Ann.Pac.Agrar., Univ.Bari., 30; 553-562. Blixt S. 1958. Cytology of Pisum. II.The normal karyotype.

38. Agri.Hert.Genet., 16 (3-4); 221-237. Bhattacharjec S.K. 1954. Cytogenetics of Lathyrus sativus I».

39. Buss G.R.»Cleweland R.W. 1968. Karyotype of a diploid Medicago sativa. analysed from sprophytic and gametophytic mitoses. Crop. Sei., 8 (6); 713-716.- 130

40. Cartier D. 1981, Contribution a 1*etude caryologique du1.thyrus pratensis L. Bull.Soc.Botan. Prance, Lett.Botan., 128 (4/5); 239-247.

41. Caspersson T.,Parber S.,Foley G.E.»Kudynowski J.,Modest E.J.,

42. Simonsson E.,Wagh ü.,Zech L. 1968. Chemical differetiationalong metaphase chromosome®. Exper.Cell Res., 49 (1); 219-222.

43. Caspersson Т., Zech L., Johanson C.»Modest E.J. 1970.1.intification of human chromosomes Ъу DNA-binding fluorescent agents. Chromosoma, 30 (2); 215-227.

44. Chambers T.S. 1955. Use of snail cytase in plant cytology. Nature, 175 (4448); 215.

45. Cincura P. 1962a. Poznamky kcytologii druhov rodu Vicia Ъ. zo slovenskych nalezisk. Acta.Рас.Rer.Nat.Univ.Comen., 7, 6-7; 349-388.

46. Cincura P. 1962. Poznamky к cytologii druhu Vicia cassubica L. zo slovenskych lokalit. Biologia, 17 (4); 300-302.

47. Cincura P. 1970. Bemerkungen zur zytotaxonomic einiger fremdländischer arten der gattung Vicia L. (Wicke). Acta Рас. Rerum Nat.Univ.Comen., Bot., 18; 17-35.

48. Clement W.M. 1962. Chromosome numbers and taxonomic relationships in Medicago L. Crop Sei., 2 (1); 25-28.

49. Coutinho L.A. 1940. Racas carologicas na V.sativa L. Agron.Lusit., 2(4); 379-403.

50. Darlington C.D.,La Cour L. 1938. Differential reactivity of the chromosomes. Ann.Bot., New ser., 2(7); 615-625.

51. Darlington C.D.,La Cour L. 1940. Nucleic acid starvation of chromosomes in Trilium. J.Genet., 40 (1-2); 185-213.- 131

52. Deromedis R. ,Ochoa B. 1974". Determinasion del numero cromosoraico en lineas seleccionadas de garbanso Cicer arietinum. Rev.Indust.Agric.Tucuman, 51 (1); 11-14«

53. Disteche C.,Bontemps J. 1974« Chromosome regions containing DNAs of known base composition, specialy evidenced by 2,7-di-t-butyl proflavine. Comparison with the q-banding and relation to dye-DHA interactions. Chromosoma, 47 (3)* 263-281.

54. Dobel P.,Rieger R.,Michaelis A. 1973. Hie giemsa banding pattern of the standerd and four reconstructed karyotypes of Vicia faba. Chromosoma, 43 (4); 409-422.

55. Dyer A.P. 1963« Allocyclic segments of chromosomes and the structural heterozygosity that thay reveal. Chromosoma, 13 (5); 545-576.

56. Ellison J.R.,Barr H.J. 1972. Quinacrine fluorescence of specific chromosome regions. Late replication and high AsT content in Samoaia leonensis. Chromosoma, 36 (4); 375-390.

57. Fiskesjo G. 1974. Two types of constitutive heterochromatin made visible in Allium by a rapid C-banding method. Heriditas, 78 (1); 153-156.

58. Fouzdar A., Tandon S.L. 1976. Cytogenetical evolution in the genus Pisum. Cytologia, 41 (1); 91-104.

59. Frahm-Leliveld J.A. 1965. Cytological data on some wild tropical Vigna species and cultivars from cowpea and Asparagus bean. Euphytica, 14 (3); 251-270.

60. Fryer J.R. 1930. Cytological studies in Medicago, Melilotus and Trigonella. Canad. J. Res., 3 (l)i 3-50.

61. Gadella T.W.J.»Kliphuis E. 1966. Chromosome numbers of flowering plants in the Netherlands. 11-K.Akad.Wetenschap. Amsterdam Proc., Ser.c, 69, 5; 541-556.

62. Gill J.J.B.,Hornby C. 1973. The use of snail gut cytase in fluorescent banding studies of plant chromosomes. Stain Technol., 48(5); 251-253.

63. Gill B.S.,Kimber G. 1974a. The giemsa C-banded karyotype of rye. Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 71 (4); 1247-1249.

64. Gill B.S.,Kimber G. 1974b. Giemsa C-banding and the evolution of wheat. Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 71(10); 4086-4090.

65. Gill D.,Nadjar G. 1977. Daunomycin-bands are similar to

66. Q-bands on chromosomes of Vicia faba. Experientia, 33 (6); 756-757.

67. Gillies C.B. 1968. The pachytene chromosomes of a diploid Medicago sativa. Canad.J.Genet.Cytol., 10 (4); 788-793.

68. Gillies C.B. 1970. Alfalfa chromosomes. I. Pachytane karyotype of a diploid Medicago falcata L. and its relationship to M.sativa.L. Crop sci., 10(2); 169-171.

69. Gillies C.B. 1970B. Pachytane chromosomes. Pachytane karyotype of atetraploid Medicago sativa. L. Crop sci., 10 (2); 172-175.

70. Gillies C.B., Lesins K. 1971. Pachytene chromosomes morphology at different ploidy levels in Medicago. Heridity, 26 (3); 486-490.

71. Gillies C.B. 1971b. Pachytane studies in 2n=14 species of Medicago. Genetica, 42 (3); 278-298.

72. Goswami L.C. 1979. Karyological study of thirty two varieties of black gram (Phaseolus mungo). Cytologia, 44(3); 549-556.- 133

73. Greilhuber J. 1973a» Différentielle heterochromatinfarbung und dastelung von schraubenbau sowie subchromatided anpflanzlichen somatischen Chromosomen in der meta und anaphase. öster.Botan.Zeitschr., 121 (1-2); 1-11.

74. Greilhuber J. 1977. Why plant chromosomes do not have G-bands? Theoret.Appl.Genet., 50 (3); 121-124.

75. Hanelt P.,Mettin D. 1962. Die tipisierung von Vicia biennis L. Sovie systematische von cytologische beobachtungen an Vicia neglecta spec, nov.- Kulturpflanze, 10; 46-64.

76. Hanelt P. Mettin D. 1966. Cytosystematische Untersuchungen in der artengruppe um Vicia sativa. II. Kulturpflanze, 14; 137-161.

77. Hanelt P. Mettin D. 1970. Zur systematischen Stellung von Vicia oroboides Wulf. Kulturpflanze, 18; 179-188.

78. Heitz E. 1931a. Die Ursache der gesetzmabign zahl,läge,form und grobe pflanzlicher nukleolen-planta. 12, 4; 775-844.

79. Heitz E. 1931b. Uukleon und chrosomen in der gattung Vicia-Planta, 15, 3î 495-505.

80. Husiwara Y.,Kondo S. 1963. Studies on the karyotypes of Vicia. Botan. Mag., 76 (903); 324-331.

81. Joseph L.S.,Bouwkamp J.C. 1978. Karyomorphology of several species of Phaseolus and Vigna. Cytologia, 43 (3-4); 595-600.

82. Kawana S. 1965. Application of pectinase and cellulase in an orcein squash method. Botan. Mag., 78 (919); 36-42.

83. Kayano H. 1972. Crossing-over as a case of diversification of patterns of H-segments in Trillium kamtachaticum. Japan.J.Genet., 47 (3); 219-221.

84. Kodama A. 1967a. Cytological studies on root nodules of some species in Leguminose.II-Bot.Mag.(Tokyo), 80, 944; 92-99.

85. Current Sci, 28, 9; 378-379. Kurnit D.M. 1979. Satellite DliA and heterochromatin variants; the case for unequal mitotic crossing over. Uman Genet., 47,(2); 169-186. Kuta E. 1980. Karyological studies on the genus Vicia L.

86. Acta Biol.Cracov., SER.BOT., 22 (1).; 81-99.

87. Cour L.P. 1951» Heterochromatin and the organisation ofnucleoli in plants. Heridity, 5 (1); 37-50. Lamm R. 1976. Technical hints for chromosome studies in

88. Martin P.G.,Shanks R. 1966." Does Vicia faba have multi-stranded chromosomes? Nature(London), 211, 5049; 650-651.

89. Mettin D. 1961. Die Chromosomenzahlen eniger bisher nicht untersuchter Vicia-Arten. Kulturpflanze, 9; 37-44.

90. Mettin D.,Hanelt P. 1968. Bemerkungen zur karyologie undsystematik einiger Sippen der gattung Vicia L. Feddes Report., 77 (1); 11-30.

91. Mettin D.,Hanelt P. 1964» Cytosystematische Untersuchungen in der artengruppe um Vicia sativa L. I.Kulturpflanze, 12; 163-225.

92. Metin D.,Hanelt P. 1967« Bemerkungen zur karyologie und systematik einiger Sippen der gattung Vicia L. Peddes Report., 77 (1); 11-30.

93. Metin D.,Hanelt P. 1973. Über speziationsvorgänge in der gattung Vicia L. Kulturpflaze, 21; 25-54.

94. Metin D. 1953. Zur morphologie der Chromosomen von Vicia sativa L. Kulturpflanze, 6; 116-122.

95. Mercy S.T.,Kakar S.N.,Chowdhury B. 1974. Cytological studies in three species of the genus Gicer. Cytologia, 39 (3); 383-390.

96. Mather K. 1945» The genetical activity of heterochromatin. Proc.Roy.Soc., 132 (868); 301-332.

97. Mather K. ,$ariani A. 1963. Determinazione del numero cromosomico di alcune specie di Medicago con particolare riguardo alia Medicago tuberculat* Willd. Cariologia, 16 (1); 139-142.

98. Natarajan A.ü.»Ahnström G. 1969. Heterochromatin and chromosome aberations. Ghromosoma, 28 (1); 42-61.- 137

99. Natarajan A.Т.,Sarma N.P. 4974. Chromosome banding patterns and the origin of the В genome in wheat. Genet.Res., 24 (1); 103-108.

100. Nicoloff N.»Georgiev S. 1970. Heterochromatic segments in barley chromosomes revealed by treatment with HCL-acetic acid. Compt.Rend.Acad.Sci. Agric.Bulg., 3 (3); 247-251.

101. Pardue M.L.,Gall J.G. 1970. Chromosomal localisation of mouse satellite DNA. Science, 168 (3937); 1356-1358.

102. Patau K. 1960. The identification of individual chromosomes, especially in man. Amer.J.Human Genet., 12 (3); 250-276.

103. Perino P.,Pignone D. 1981. Contribution to the taxonomy of

104. Vicia species belonging to the section Faba. Kulturpflanze, 29; 311-319.

105. Pontecovo G. 1944. Structure of heterochromatin. Nature. 153 (3888); 365-367.

106. Prantera G., Bonaccorsi S.,Pimpinelli S. 1979. Simultaneous producing of Q and R bands after staining with chromomy-cin A^ or olivomycin. Science, 204 (4388); 79-80.

107. Pushpa G.»Mahishi D.M.,Satyan B.A.,Kulkarni R.N. 1979.

108. Karyomorphology of three species of Phaseolus. Mysore J. Agric.Sci., 13 (2); 147-151.

109. Rajan S.S. 1952. A note on the chromosome number of some plants. Indian Jour.Genetics and plant breeding, 12, 2; 93.

110. Raybum A.L.,Gold J.R. 1982. A procedure for obtaining mitotic chromosomes from maize. Maydica, 27 (2); 113-121.

111. Rodman T.C. 1974. Human chromosome banding by Fulgen stain aids in localizing classes of chromatin. Science, 184 (4133); 171-173.

112. Rowland R.E. 1981. Chromosome "banding and heterochromatin in Vicia faba. Theoret.Appl.Genet., 60 (5); 275-280.

113. Sachan J.K.S.,Tanaka R. 1977« Variation and pattern of

114. C-banding in Zea chromosomes. Nucleus, 20 (1-2); 61-64*

115. Sahai S., Rana R.S. 1980. Homology and differentiation in Phaseolus. Indian J.Genet.Plant Breed., 40 (2); 311-315.

116. Sarbhoy R.K. 1978. Gytogenetical studies in genus Phaseolus L. I and II. Somatic and meioytic studies in fifteen species of Phaseolus. (Part one). Cytologia, 43 (1); 161-170.

117. Sarbhoy R.K. 1978b. Cytogenetical studies in genus Phaseolus L. I and II. Somatic and meiotic studies in fifteen species of Phaseolus (Part two). Cytologia, 43 (1); 171-180.

118. Sarma K.P.,Natarajan,A.T. 1973. Identification of heterochrom-atic regions in the chromosomes of rye. Heriditas, 74 (2); 233-238.

119. Scheid W., Traut H. 1973« Banding of trypsin-treated chromosomes of Vicia faba. Z.Naturforsch.,28c (5/6); 357.

120. Schnedl W. 1971. Analysis of the human karyotype using a reassociation technique. Chromosoma, 34 (i>4); 448-454.

121. Schultz J. 1947. Nature of heterochromatin. Cold spring harbor symp.quant.Biol., 12; 179-191.

122. Schweizer D. 1973. Differential staining of plant chromosomes with Giemsa. Chromosoma, 40 (3); 307-320.

123. Schweizer D. 1976. Reverse fluorescent chromosome banding with chromomycin and DAPI. chromosoma, 58 (4); 307-324.

124. Seabright M. 1971* A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet, II (7731); 971-972.

125. Seth P.K.,Gropp A. 1973. Study of constitutive hetrochro-matin with a new and simplified fluorescence staining technique. Genetica, 44 (3); 485-495.

126. Sharma A.K., Bhattacharjee D. 1952. Permenent mounts of chromosomes after 8-oxyquinoline and squashing. Stain Technol., 27 (4); 201-203.

127. Shiraishi Y.,Yosida T.H. 1971. Differential staining of human chromosomes by treatment whith urea. Proc.Japan. Acad., 47 (9); 729-731.

128. Sinha S.S.U.,Roy H. 1979. Cytological studies in the genus Phaseolus. I. Mitotic analysis in fourteen species. Cytologia, 44 (1); 191-199.

129. Srivastava L.M. 1963. Cytogenetical studies in certain species of Vicia. Cytologia, 28 (2); 154-169.

130. Takehisa S.,Utsumi S. 1973. Visualization of metaphase hete-rochromatin in Vicia faba by the denaturation-renaturation Giemsa staining method. Experientia, 29 (1); 120-121.

131. Takehisa S.,ßobel P.,Rieger R.,Michealis A. 1976. Differential response to cold and HCL-acetic acid treatment of heterochromatin in reconstructed Vicia faba karyotypes. Chromosoma, 54 (2); 165-173.

132. Tatuno S.,Kodama A. 1965. Cytological studies on root nodules of some species in Leguminosae. I. Botan.Mag., 78 (930); 503-509.

133. Tischler G. 1934. Die beteutungen der polyploidie fur die

134. Angiospermen,erlatert an den arten schlewig-holstens,mit ausb ausbicken auf andere floregebiete. Bot.Jahrb., 67; 1-36.

135. Verma S.C.,0hri D. 1979. Chromosome and nuclear phenotype in the legume Lathyrus sativus L. Cytologia, 44 (1); 77-90.

136. Verma S.G. 1979. Chromosome and the nuclear phenotype in the legumes Cytologia, 44 (1); 94-121.

137. Vosa C.G. 1970a. Heterochromatin recognition with fluoro-chromes. Chromosoma. 30 (3); 366-372.

138. Vosa C.G.,Marchi P. 1972a. On the quinacrine fluorescence and Giemsa staining patterns of the chromosomes of Vicia faba. Botan.Ital., 106 (3); 151-159.

139. Vosa C.G. 1973« Heterochromatin recognition and analysis of chromosome variation of Scilla sibirica. Chromosoma, 43 (3); 269-278.

140. Vosa C.G. 1974. The basic karyotype of rye (Secale cereale) analysed with Giemsa and fluorescence methods. Heredity, 33 (3); 403-408.

141. Vosa C.G. 1974-1976. Heterochromatin classification in Vicia faba and Scilla sibirica. Inj Chromosomes Today, vol.5 (Pearson P.L.,Lewis K.R. eds.), New York-Toronto-Jerusalem; 185-192.

142. Weisblum B.,Haseth P.L.de 1972. Quinacrine, a chromosomestain specific for deozyadenylate-deoxythymidylate rich regions in DNA. Proc.Nat.Acad.Sci. USA. 69 (3); 629-632.

143. Yamamoto K. 1973. Karyotaxonomical studies on Vicia. I.

144. On the karyotype and character of some annual species of Vicia. Japan.J.Gent., 48 (5); 315-327.

145. Yen S.T.»Filion W.G. 1977. Differtial Giemsa staning in plants. Two types of constitutive heterochromatin in species of Avena. Canad.J.Gent.Cytol. 19 (4); 739-743.- 141

146. Yoshida T.,Sagai T. 1971-1972. Anew differential staining technique using sodium dodecyl sulfate and banding pattern analysis of blach rat chromosomes. Ann.REp.Hat.Inst. Genet., 22; 37-38.

147. Yunis J.J.»Yasmineh W.G. 1971. Heterochromatin, satellite DHA and cell function. Science, 174 (4015); 1200-1209.

148. Yunis J.J.»Yasmineh W.G. 1972. Model for mammlian constitutive heterochromatin. Adv.Cell Molec.Biol., 2; 1-46.

149. Zertova A. 1963. Prispevek k cytologii druhu Vicia incana Gouan.Biologia, 18 (9); 697-700.

150. Zohary D.,Plitman U. 1979« Chromosome polymorphism,hybridization and colonization in the Vicia sativa. Plant SYst.Evol., 131 (1-2); 143-156.npoßojDseHne craiCKa JinTepaTypa

151. Becak M.l., Becak W. 1973. Chromosome secondary construction in different stages of development. Experientia,29,359.

152. Casperson T.,Farbers S.,Foley G.E.,Kudynowski J.,Modest E.J. 1968. Chemical differentiation along metaphase chromosomes. Exp.Cell Res., 49,1,214-232.

153. Heitz E. 1929. Heterochromatin,chromocentren,chromomeren (Vorläufige Mitteilung). Ber Deutschen Botan.Ges.,47,4» 274-284.

154. Kmmacher P. 1966. Etude des relations genetiques et caryological entre genomes voisins du genera Gossypium. Cot.Fibr.Trop., 21,3,307-338.

155. Mariani A., 1963. Determinazione del numero cromosomico di alcune specie di Medicago con particolare riguardo alia Medicago tuberculate Willd. Caryologia,16,1,139-142.

156. Mukerjee P., Mukerjee S. 1975. Karyomorphological studuies of ten strains of Indian mustard (Brassica Juncea Coss.) Euphytica, 24,2,483-486.

157. Mukhergee P.»Mukhergee D.K. 1979. A simple propiono-orcein squash technique for karyomorphological studies in rice. Curr.Sci.,48,11,496-497.

158. Sahai S.,Rao R.S. 1980. Homology and differentiation in Phaseolus. Indian J.Genet.Plant Breed., 40,2,311-315.

159. Sarbhoy R.K. 1975. Cytogenetical studies in genus Phaseolus

160. Sarbhoy R.K.1975. Cytogenetical studies in genus Phaseolus Linn. I and II. Somatic and meiotic studies in fifteen species of Phaseolus (Part 2). Cytologia,43,1,171-180.

161. Sumner A.T. 1972. A simple technique for demonstratingcentromeric heterochromatin. Exp.Cell Res. 75,304-306.

162. Verma S.C.,Rees H. 1974. Giemsa staining and the distribi-ution of heterochromatin in rye chromosomes. Heredity,32,1,118-122.

163. Weimarck A. 1974. Elimination of Wheat and rye chromosomes in a stain of octoploid Triticale as reveld by Giemsa banding technique, Heriditas,77,281-288.

164. Weimarck A. 1975. Heterochromatin polymorphism in the rye karyotypes as detected by Giemsa C-banding. Heriditas,79,293-300.