Сравнительное исследование эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов мельдония и триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат медицинских наук Артюшкова, Екатерина Вячеславовна

• Артюшкова, Екатерина Вячеславовна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Артюшкова, Екатерина Вячеславовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эндотелиальная дисфункция и ее роль в развитии 16 кардиоваскулярного континуума

1.2. Влияние оксидативного стресса на функцию эндотелия при 21 сердечно-сосудистых заболеваниях

1.3. Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной 28 дисфункции и потенциальные эндотелиопротекторы

1.3.1. Эндотелиопротективные свойства цитопротектора 29 метаболического действия мельдония (3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропи'оната дигидрат)

1.3.2. Эндотелиопротективные свойства цитопротектора 35 метаболического действия триметазидина

1.3.3. Эндотелиопротективные свойства Ь-аргинина

2.1. Моделирование Ь-КАМЕ-индуцированного дефицита оксида 44 азота и оценка эндотелийзависимых и эндотелийнезависимых сосудистых реакций

2.2. Исследование функционального состояния миокарда на 45 наркотизированных крысах

2.3. Биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции

2.4. Морфологические методы оценки сердечно-сосудистых 47 - изменений при моделировании Б-КАМЕ-индуцированной ЭД

2.5. Исследуемые химические соединения и дизайн эксперимента

2.6. Интегральный анализ функциональных, биохимических и 53 морфологических показателей при оценке эндотелио- и кардиопротективной активности исследуемых препаратов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.7. Статистическая обработка результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Разработка комплекса методических подходов для 56 количественной оценки развития эндотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований

3.2. Исследование эндотелио- и кардиопротективной активности 84 цитопротектора метаболического действия мельдония при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований

3.3. Исследование эндотелио- и кардиопротективной активности 97 цитопротектора метаболического действия триметазидина при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований

3.4. Исследование эндотелио- и кардиопротективной активности 111 L-аргинина при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований

3.5. Исследование эндотелио- и кардиопротективной активности 123 комбинированного применения цитопротектора метаболического действия мельдония с L-аргинином при L-NAME-индуцированной модели" дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований

3.6. Исследование эндотелио- и кардиопротективной активности 138 комбинированного применения цитопротектора метаболического действия триметазидина с Ь-аргинином при Ь-ЫАМЕ-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительное исследование эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов мельдония и триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте»

Результаты экспериментальных и клинических исследований последних лет подтвердили концепцию о важной причинно-следственной взаимосвязи между эндотелиальной дисфункцией и прогрессированием и/или развитием артериальной гипертонии, атеросклероза, хронической сердечной недостаточности, сахарного диабета, метаболического синдрома, хронической почечной недостаточности и их осложнений.

Коррекция эндотелиальной дисфункции при сердечно-сосудистой патологии сегодня является одним из наиболее перспективных направлений, определяющих вероятность развития сосудистых осложнений и способствующих улучшению прогноза в целом [56, 57, 91, 95, 144, 150, 230].

Эндотелиальная дисфункция - системная патология, сопряженная с нарушением микроструктуры и секреторной функции эндотелиальных клеток, приводящая к снижению эндотелийзависимой вазодилатации, гиперкоагуляции, повышенному тромбообразованию, увеличению сосудистой проницаемости и миграции липопротеидов в интиму сосудов, пролиферации гладкомышечных клеток и ремоделированию сосудов [10, 13, 25, 40, 63].

Основным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, является снижение образования и биодоступности оксида азота (N0) на фоне повышения продукции мощных вазоконстрикторов [34, 47, 81]. При этом основными причинами дефицита N0 в эндотелиальных клетках могут быть: сниженное содержание предшественника оксида азота — Ь-аргинина, снижение экспрессии или активности еЖ)8, недостаток кофакторов синтеза N0 (особенно тетрагидробиоптерина), повышение уровня эндогенных ингибиторов еЖ)8 асимметричного диметиларгинина (АДМА) и монометил-Ь-аргинина (ЫММА), повышенное образование реактивных форм кислорода (в частности, супероксид-аниона), а также липопротеидов низкой плотности (особенно их окисленных форм) [9, 45, 58, 150].

Молекулярные основы дисфункции сосудистого эндотелия — сложная и не до конца изученная проблема. В этой связи система: «эндотелиальная МЭ-синтаза-Ь-аргинин-ЫО» может, безусловно, претендовать в ближайшем будущем на роль ведущего звена фармакологической коррекции эндотелиальной<дисфункции [28, 49, 88].

В настоящее время известно, что многие лекарственные препараты с различным механизмом действия обладают выраженным в той или иной степени влиянием на функцию сосудистого эндотелия. Так, нитраты восстанавливают дефицит эндогенного N0, ингибиторы АПФ помимо снижения синтеза АТ II препятствуют разрушению кининов, статины улучшают барьерную функцию эндотелиоцитов в отношении окисленных ЛПНП, антагонисты кальция тормозят активность АТ II и эндотелина в гладких мышцах сосудов, усиливая вазодилататорный эффект N0, блокаторы ангиотензиновых рецепторов блокируют АТ]-рецепторы, способствуют накоплению N0, ингибиторы эндотелин-превращающего фермента и антагонисты рецепторов эндотелина-1 тормозят активность пептида [9, 12, 43, 62,91,96, 205].

Особого внимания заслуживает «специфическое» воздействие, направленное на улучшение синтеза N0, как например, заместительная терапия Ь-аргинином - субстратом еЫОЗ, а также тетрагидробиоптерином — кофактором еМОБ, определяющим активность данного фермента [10, 45].

Кроме того, известны научные факты, подтверждающие, что используемые в настоящее время цитопротекторы метаболического действия (триметазидин, мельдоний) не только блокируют бета-окисление жирных кислот в митохондриях и на альтернативной основе стимулируют окисление глюкозы, но и оказывают влияние на индукцию биосинтеза оксида азота за счет увеличения "количества гамма-бутиробетаина, а также способности противостоять окислительному стрессу [145, 224].

Таким образом, актуальными задачами современной экспериментальной фармакологии являются разработка новой технологии доклинической оценки эндотелиотропной активности лекарственных препаратов и поиск потенциальных эндотелиопротекторов, поскольку именно эндотелию сосудов отводится ведущая роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний.

Однако в настоящее время не существует препаратов для специфической коррекции эндотелиальной дисфункции, поэтому большую ценность представляют данные о влиянии сердечно-сосудистых лекарственных средств различных фармакологических групп на функциональные характеристики эндотелия. Большой практический интерес может представлять комплексное лечение эндотелиальной дисфункции при артериальной гипертензии, когда антигипертензивная терапия будет сочетаться с применением препаратов, которые оптимизируют клеточный энергообмен, уменьшают негативное воздействие оксидативного стресса на эндотелий сосудистой стенки и индуцируют образование оксида азота.

В связи с вышеизложенным явилось актуальным изучение эндотелиопротективных свойств цитопротекторов метаболического действия мельдония и триметазидина на модели Ь-ИАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте.

Диссертация выполнена по инициативному плану, номер государственной регистрации темы диссертации 01 2009 61 097. Работа включена в программы «Изучение патологических состояний сердечнососудистой системы. Разработка современных медицинских технологий профилактики, диагностики и лечения болезней системы кровообращения» на 2006-2010 гг. (номер государственной регистрации темы - 01.2.006-04734) и «Разработка и совершенствование методов ранней диагностики, лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний с целью увеличения продолжительности и качества жизни» на 2008-2010 гг. (номер государственной" рёгистрацйитемы - 01.2.007-10379)!

Цель исследования: провести комплексное сравнительное изучение эндотелио- и кардиопротективного действия мельдония и триметазидина при Ь-ЫАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи исследования:

1. Провести количественную оценку развития эндотелиальной дисфункции при Ь-ЫАМЕ-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

2. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность мельдония при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

3. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

4. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность комбинированного применения мельдония с донатором оксида азота Ь-аргинином при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

5. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность комбинированного применения триметазидина с донатором оксида азота Ь-аргинином при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

6. Провести интегральный векторный анализ для комплексной оценки функциональных характеристик сосудистой реактивности нитроксйдергической системы, показателей сократимости и морфометрии миокарда с последующим расчетом вероятностного процента эндотелиопротекции на модели Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита N0.

Научная новизна исследования. В работе решена актуальная задача фармакологии по доклинической оценке эндотелиотропной активности цитопротекторов метаболического действия с использованием коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), проведения функциональных проб, определения биохимических маркеров и результатов морфологических исследований./

Для оценки плеотропных эндотелиопротективных свойств мельдония и триметазидина у экспериментальных животных моделировался Ь-ЫАМЕ-индуцированный дефицит оксида азота, сопряженный с развитием эндотелиальной дисфункции (ЭД). В результате настоящего исследования продемонстрировано, что эндотелиальная дисфункция характеризуется изменениями соотношений сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилитация) с увеличением КЭД в 4,5 раза, снижением концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота и экспрессии МО-синтазы, а также развитием структурных изменений в сердце и почках, выявляющихся »при морфологическом анализе (мембранозная гломерулопатия, гипертрофия миокарда и стенок внутриорганных артерий почек и сердца, отек эндотелия и его пикноз, некроз кардиомиоцитов).

В качестве потенциального эндотелиопротектора экспериментально обосновано использование цитопротектора метаболического действия мельдония, ингибирующего гамма-бутиробетаин гидроксилазу и вызывающего индукцию биосинтеза оксида азота. Мельдоний 80 мг/кг способствовал преобладанию эндотелийзависимого расслабления сосудов; снижению КЭД до значений 1,3±0,1 усл. ед. и полному предупреждению? снижения концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота (ИОх). Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной 'глЬмёрулопатйиГ'гипсртрофии кардиомиоцитов и их некроз, а также деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

В ходе проведенного исследования на модели Ь-ЫАМЕ-индуцировагшого дефицита оксида азота выявлена, эндотелиопротективная активность цитопротектора метаболического действия - триметазидина, который в дозе 6 мг/кг снижал КЭД до значений 4,2±0,6 усл. ед., но при этом не увеличивал ЫО-продуцирующую функцию эндотелия. Морфологические исследования выявили благоприятное влияние на капилляры клубочков почек, а также отсутствие некротических изменений в миокарде.

Впервые установлено выраженное эндотелиопротективное действие комбинированного применения мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с природным донатором оксида азота - Ь-аргинином 200 мг/кг при проведении интегрального векторного анализа по совокупности функциональных, биохимических и морфологических показателей. Комбинация мельдония с Ь-аргинином приводила к уменьшению КЭД до уровня интактных животных, не менее важным результатом явилось снижение данного показателя при использовании комбинации триметазидина с Ь-аргинином по сравнению с монотерапией триметазидином. Биохимические исследования выявили предотвращение снижения концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота в обеих группах комбинаций цитопротекторов с Ь-аргинином. Подтверждением функционально-биохимических показателей, отражающих развитие Ь-МАМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции, явились результаты морфологического анализа: предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов и их некроза, а также деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

Практическая значимость. В работе обоснована эффективность фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции цитопротекторами метаболического действия при Ь-МАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте. Показано, что их использование позволяет нормализовать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация), что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции.

Одновременно результаты нагрузочных проб, биохимических и морфологических исследований свидетельствовали о положительной динамике морфофункциональных показателей сердечно-сосудистой системы (снижение адренореактивности, предотвращение исчерпания миокардиального резерва, нормализация структуры гломерулярных капилляров, отсутствие деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок, отсутствие гипертрофических изменений кардиомиоцитов) и о восстановлении активности ЫО-продуцирующей функции эндотелия (повышение концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота).

Полученные данные позволяют рекомендовать целенаправленные доклинические и клинические испытания исследуемых препаратов и их комбинаций с Ь-аргинином в качестве эндотелиотропных аддитивов при лечении патологических состояний, связанных с развитием эндотелиальной дисфункции.

Внедрение результатов научных исследований. Материалы 4 диссертационного исследования, касающиеся эндотелиопротективной активности препарата мельдоний производства ОАО «Фармстандарт-УфаВИТА» (РУ ЛСР-006481/08) включены в состав документов, поданных на регистрацию в МЗ РФ.

Материалы диссертационного исследования, касающиеся эндотелиопротективной активности биологически-активной добавки Ь-аргинин (свидетельство о государственной регистрации № 77.99.23.3.У.2795.3.05 от 18.03.05), включены в состав документов, поданных на регистрацию в ГУ НИИ питания РАМН. Результаты работы используются в работе кардиологического отделения МУЗ «Городская больница скорой медицинской помощи», кардиологического отделения МУЗ «Городская больница № 1» г. Курска и в лекционных курсах кафедры фармакологии, клинической фармакологии КГМУ, кафедры фармакологии Орловского государственного университета и кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Белгородского государственного университета.

Связь с планом НИР. Диссертация выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России. Номер государственной регистрации темы - 01200961097.

Апробация работы. Материалы работы доложены на итоговых научных сессиях и конференциях молодых ученых КГМУ в 2007, 2008, 2009, 2010 гг., 75-й Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность», Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Высокотехнологичные методы диагностики и лечения заболеваний сердца, крови и эндокринных органов», XVII Национальном конгрессе "Человек и лекарство", V Национальном конгрессе терапевтов.

Апробация диссертации проведена на межкафедральной научной конференции кафедр фармакологии; клинической фармакологии; внутренних болезней №2; инфекционных болезней и эпидемиологии; биоорганической химии, фармакогнозии и ботаники; анатомии человека; общей химии; фармацевтической, токсикологической и аналитической химии; управления и экономики фармации; фармации ФПО; травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии; мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф; НИИ экологической медицины КГМУ (Курск, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 печатных работ, 5 из них - в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Мельдоний проявляет более выраженное эндотелиопротективное и кардиопротективное действие по сравнению с триметазидином на модели Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита N0.

2. Комбинированное применение мельдония с Ь-аргинином и триметазидина с Ь-аргинином оказывает сопоставимое эндотелиопротективное и кардиопротективное действие на модели Ь-КАМЕ-индуцированного дефицита N0.

3. Интегральный анализ совокупности гемодинамических, биохимических и морфологических показателей представляет эффективность фармакологического действия мельдония и триметазидина, а также их комбинаций с Ь-аргинином на фоне моделирования Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0 в следующей последовательности: мельдоний + Ь-аргинин > мельдоний > Ь-аргинин > триметазидин + Ь-аргинин > триметазидин.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментальных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего 235 источников, из них 97 отечественных и 138 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 197 страницах машинописи, содержит таблиц - 22, рисунков - 93, формул - 5.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Артюшкова, Екатерина Вячеславовна

170 ВЫВОДЫ

1. Эндотелиальная дисфункция, вызванная введением И-нитро-Ь-аргинин метилового эфира (Ь-ИАМЕ) в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 суток лабораторным животным, характеризуется развитием артериальной гипертензии (169/131 мм рт. ст.), увеличением КЭД в 4,5 раза по сравнению с группой интактных животных, повышением адренореактивности, снижением сократимости миокарда до 66,0±2,5%, уменьшением в 3,4 раза концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота 1чЮх и снижением в 1,9 раза экспрессии еЫОЭ, а также развитием мембранозной гломерулопатии, гипертрофии миокарда и стенок внутриорганных артерий почек и сердца, отеком эндотелия и его пикнозом, некрозом кардиомиоцитов в 40% случаев.

2. Мельдоний 80 мг/кг проявляет выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 1,3±0,1 усл.ед., полном предупреждении снижения концентрации >Юх, предотвращении развития гиперадренореактивности, а также в повышении сократимости миокарда до 79,6±3,4% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов и их некроза, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

3. Триметазидин 6 мг/кг проявляет менее выраженное эндотелиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0 по сравнению с мельдонием 80 мг/кг, что выражается в снижении КЭД до 4,2±0,6 усл.ед. и отсутствии влияния на ЬЮ-продуцирующую функцию эндотелия. Одновременно обнаружено значительное кардиопротективное действие препарата, проявляющееся в повышении сократимости миокарда до 94,0±4,2% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили снижение утолщения базальных мембран клубочков и отсутствие некротических изменений в миокарде.

4. Комбинированное применение мельдония 80 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг оказывает выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 1,4+0,1 усл.ед., предотвращении снижения концентрации ЫОх, а также в повышении сократимости миокарда до 75,4±3,8% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

5. Комбинированное применение триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг оказывает выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 2,5±0,2 усл.ед., предотвращении снижения концентрации 1чГОх, а также в повышении сократимости миокарда до 84,2±6,4% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

6. Интегральный анализ эффективности фармакологического действия мельдония и триметазидина показал, что наиболее выраженную эндотелио- и кардиопротективную активность оказывает мельдоний 80 мг/кг по сравнению с триметазидином 6 мг/кг. Комбинированное применение мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг проявляет положительное фармакодинамическое взаимодействие, что позволяет расположить исследуемые препараты в следующей последовательности: мельдоний 80 мг/кг + Ь-аргинин 200 мг/кг > мельдоний 80 мг/кг > Ь-аргинин 200 мг/кг > триметазидин 6 мг/кг + Ь-аргинин 200 мг/кг > триметазидин 6 мг/кг.

172

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В свете учения о сердечно-сосудистом континууме эндотелиальная дисфункция играет ключевую роль в развитии атеросклероза, формировании ишемической болезни сердца и артериальной гипертензии. При этом результаты экспериментальных и клинических исследований открывают перспективу более широкого применения цитопротекторов, метаболизм которых связан с блокадой транспорта и окисления жирных кислот в митохондриях и стимуляцией процессов гликолиза, снижением активности процессов свободнорадикального окисления, индукцией высвобождения оксида азота и восстановлением нормальной функции эндотелия сосудистой стенки.

Сегодня параметры эндотелиальной дисфункции рассматриваются не только как чувствительный критерий выраженности эндотелиальных нарушений, но и как важный предиктор интенсивности прогрессирования сердечно-сосудистых заболеваний, эффективности терапии и вторичной профилактики [20, 26].

Таким образом, большой практический интерес представляют исследования, направленные на поиск наиболее оптимальных фармакологических агентов в качестве потенциальных эндотелиотропных аддитивов, способных уменьшать выраженность и, по возможности, приводить к обратному развитию эндотелиальной дисфункции.

В связи с вышеизложенным, сравнительное исследование эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов мельдония и триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте явилось целью нашего исследования.

Для реализации указанной цели был разработан комплекс методических подходов для оценки степени выраженности эндотелиальной дисфункции при моделировании дефицита оксида азота с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

Моделирование ЭД проводилось на белых крысах-самцах линии Wistar путем введения неселективного блокатора Ж)-синтазы - И-нитро-Ь-аргинин метилового эфира (Ь-ИАМЕ) ежедневно один раз в сутки, внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг. Механизм ингибирования выработки N0 в случае введения Ь-ИАМЕ заключался в конкурентном ингибировании фермента еЖ)8*аналогом Ь-аргинина - Ь->ЛМА. Дефицит сосудистого N0 вызывал снижение эффектов эндотелийзависимых вазодилататоров и повышение вазоконстрикторных влияний, рост АД, пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток с образованием неоинтимы, синтез внеклеточного матрикса, нарушения системной и региональной гемодинамики, функций сердца, снижение коронарного кровотока и сужение эпикардиальных коронарных артерий, увеличение экспрессии адгезивных молекул эндотелия, агрегации тромбоцитов; прилипание их и лейкоцитов к сосудистой стенке и др. [28, 233].

Подтверждением данных результатов явились наши исследования на наркотизированных животных. Установлено, что внутрибрюшинное введение в течение 7 дней крысам-самцам блокатора Ж)-синтазы - Ь-ИАМЕ приводит к выраженной АГ и эндотелиальной дисфункции. Так значения АД у интактных животных составляли соответственно САД - 137,7+3,7 мм рт. ст., ДАД -101,9+4,3 мм рт. ст., тогда как у животных с патологией САД -169,4±6,3 мм рт. ст., ДАД - 131,4±5,0 мм рт. ст.

Для оценки степени развития эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных и ее коррекции исследуемыми препаратами производили расчет коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), показателя объективно учитывающего с одной стороны снижение вазодилатационного ответа на ацетилхолин, а с другой увеличение вазодилатационного ответа на нитропруссид на фоне высоких значений артериального давления. Моделирование эндотелиальной дисфункции приводило к достоверному снижению площади над реакцией восстановления АД при проведении ЭЗВД до 984±78,0 мм рт. ст. х сек. по сравнению с интактной группой" животных 1268,0±74,8 мм рт. ст. х сек. Напротив, ЭНВД увеличивалась у животных с блокадой NO-синтазы до 4801,2±278,1 мм рт. ст. х сек. по сравнению с интактной группой 1375,3±93,7 мм рт. ст. х сек.

Степень развития эндотелиальной дисфункции, выявленная с помощью КЭД, показала увеличение данного показателя у животных с L-NAME-индуцированной артериальной гипертензией - 4,9±0,6 усл. ед., по сравнению с интактными животными - 1,1 ±0,1 усл. ед.

Для оценки функциональных возможностей миокарда во всех экспериментальных сериях животных проводились нагрузочные пробы. L-NAME-индуцированный дефицит оксида азота характеризовался гипердинамическими сдвигами кардиогемодинамики. Значения ЛЖД, +dp.dt, -dp/dt были достоверно выше соответствующих значений интактной группы, так как вероятно обусловлены развившейся гипертрофией миокарда левого желудочка. Кроме того наши исследования показали, что дефицит оксида азота способствовал проявлению и гиперреактивности в ответ на адреналовую пробу, а также приводил к снижению миокардиального резерва при проведении пробы на нагрузку сопротивлением, что также согласуется с результатами сосудистых функциональных проб у животных с моделированием артериальной гипертензии.

Характерная динамика биохимических маркеров L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота подтвердила результаты физиологических методов исследования. Так NO-продуцирующая функция эндотелия, исследованная на основании данных увеличения экспрессии eNOS (в процентах от контроля) и концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота (NOx) продемонстрировала резкое снижение биохимических показателей, на фоне развившейся патологии.

Результаты морфологических исследований показали, что L-NAME-индуцированный дефицит оксида азота приводил к гипертрофии кардиомиоцитов (12,0±0,6 мкм против 8,3±0,4 мкм у интактных животных), утолщению базальных мембран капилляров клубочков почек, гипертрофии стенок внутриорганных артерий почек и сердца (27,5±2,3 мкм против

10,0±0,8 мкм в интактной группе), отеку эндотелия и его пикнозу. Также были выявлены субэндокардиальные некротические изменения и очаги формирующегося склероза на месте погибших кардиомиоцитов.

Таким образом, комплекс методических подходов, использованный нами с применением функциональных, биохимических и морфологических методов, позволил объективно оценить состояние функции эндотелия и кардиогемодинамики при моделировании Ь-КАМЕ-индуцированной артериальной гипертензии с последующей ее коррекцией в эксперименте.

Сравнительное комплексное изучение потенциальных эндотелиотропных аддитивов: мельдония и триметазидина, а также их комбинаций с Ь-аргинином выявило в разной степени эндотелио- и кардиопротективные эффекты данных исследованных препаратов.

Мельдоний 80 мг/кг, комбинация мельдония 80 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг проявляли выраженное эндотелиопротективное действие на модели Ь-КАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота, что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции до уровня 1,3±0,1 усл. ед. и 1,4±0,1 усл. ед., соответственно, тогда как в группе животных, получавших Ь-ИАМЕ, он составлял 4,9±0,6 усл. ед. Снижение КЭД на фоне введения триметазидина 6 мг/кг было выражено в меньшей степени 4,2±0,6 усл. ед. по сравнению с другими исследуемыми группами животных, при этом обращает на себя внимание восстановление данного показателя на фоне комбинированной терапии с Ь-аргинином 200 мг/кг до значения 2,5±0,2 усл. ед.

ИО-продуцирующая активность эндотелия также подтверждалась данными наших исследований, проведенных на экспериментальных животных с моделированием дефицита оксида азота, где было показано, что концентрация конечных стабильных метаболитов N0 заметно увеличивалась при введении мельдония (105,4±8,9 мкМоль), комбинаций мельдония и триметазидина с Ь-аргинином (118,5±9,1 мкМоль и 110,9±11,2 мкМоль, соответственно) по сравнению с группой животных, не получавших лечения (61,2±3,6 мкМоль).

Достоверных отличий в повышении суммарной концентрации нитрат и нитрит-ионов на фоне лечения триметазидином не наблюдалось (67,3±7,8 мкМоль).

Таким образом, монотерапия мельдонием 80 мг/кг и комбинированная терапия триметазидином 6 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг оказывала выраженное эндотелиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте, что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов, снижении КЭД и предупреждении снижения концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота.

Одновременно результаты нагрузочных проб выявили предотвращение повышения адренореактивности при введении мельдония 80 мг/кг и Ь-аргинина 200 мг/кг, а также развития скрытой сердечной недостаточности на фоне повышения реакции на реоксигенацию во всех исследуемых группах. Проведение пробы с нагрузкой сопротивлением показала, что все изучаемые препараты и их комбинации с Ь-аргинином предотвращали исчерпание миокардиального резерва по сравнению с контрольной группой (66,0±2,5%), при этом триметазидин 6 мг/кг (94,0±4,2%) и его комбинация с Ь-аргинином 200 мг/кг (84,2±6,4%) демонстрировали наилучшие значения.

Учитывая, что проба на нагрузку сопротивлением направлена на выявление инотропного резерва, анализ полученных результатов проводился в сопоставлении с данными морфологических исследований. На фоне введения триметазидина 6 мг/кг в почках почти полностью исчезли признаки мембранозной гломерулопатии и капилляры клубочков выглядели в большинстве случаев также, как и у интактных крыс. Однако стенки мелких артерий, как правило, оказывались гипертрофированными (толщина стенок 21,5±1,9 мкм), а их эндотелий нередко был пикнотизирован и частично слущивался. Диаметр кардиомиоцитов левого желудочка был близок к таковому у крыс с артериальной гипертензией и составлял 11,1±0,5 мкм, что свидетельствует о сохранении гипертрофических изменений миокарда. Важно отметить, что некротические изменения миокарда были выявлены лишь у одной крысы из 10, при этом они выражались в наличии единичных и очень небольших очажках репарируемого некроза.

В то же время проведенные морфологические исследования показали, что мельдоний 80 мг/кг оказывал более широкий спектр протективных эффектов, а именно нормализацию структуры гломерулярных капилляров, отсутствие деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок (11,0±1,0 мкм), отсутствие гипертрофических изменений кардиомиоцитов (9,4±0,3 мкм).

Дальнейшие исследования также продемонстрировали преимущества комбинаций мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином 200 мг/кг при моделировании дефицита оксида азота по сравнению с контрольной группой животных, что выражалось в предотвращении развития мембранозной гломерулопатии, отсутствии негативных изменений эндотелия внутриорганных артерий в виде отека и пикноза эндотелиоцитов. Одновременно под влиянием комбинированного лечения обнаруживалось уменьшение гипертрофических изменений стенок сосудов (10,0±1,0 мкм на фоне лечения комбинацией мельдония с Ь-аргинином, 13,0±1,2 мкм — комбинацией триметазидина с Ь-аргинином) и уменьшения диаметра кардиомиоцитов (9,0±0,4 мкм и 10,3±0,4 мкм, соответственно).

Таким образом, при морфологической оценке изменений, вызванных моделированием эндотелиальной дисфункции, было установлено благоприятное влияние на структурные изменения в сердце и почках экспериментальных животных во всех группах фармакологической коррекции.

Механизм реализации фармакологических эффектов мельдония и триметазидина при сердечно-сосудистой патологии связан с оптимизацией энергетического обмена клеток, в том числе клеток эндотелия сосудистой стенки, за счет блокады р-окисления жирных кислот в митохондриях, что способствует индукции гликолиза и уменьшению потребности клетки в кислороде (рис. 4.1).

ЛАКТАТ

ГЛЮКОЗА

ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ

Ацетм-Каривтич

Ация-КрА

Карниш Пцруват" ^ АцатилКоА | Пкруваг)

Карнигин

Ацетил Карнитии Ацил-Кариитн ^

-окисление

ЛАКТАТ

ГЛЮКОЗА

ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ

Рисунок 4.1. Влияние цитопротекторов метаболического действия на основные пути энергетического обмена в клетках (Асташкин Е.И., Глезер М.Г., 2006 [6])

В ходе опытов на изолированных органах и экспериментов, имеющих целью уменьшить размеры инфаркта миокарда и развившуюся в результате этого сердечную недостаточность, была подтверждена гипотеза о том, что можно, тормозя транспорт жирных кислот и, следовательно, их окисление, адаптировать клетки сердечной мышцы и мозга к кислородной недостаточности [33]. Было показано, что Милдронат уже после 10-дневного приема эффективно защищает ишемизированную зону миокарда от гибели как в условиях острой ишемии, так и после восстановления кровообращения, то есть обладает цитопротективным действием в случае вызванных адреналином и норадреналином поражений миокарда [162]. Последнее казалось невозможным: ведь коронарный кровоток под влиянием Милдроната повышается только незначительно, а сердечная мышца для производства энергии использует преимущественно жирные кислоты, транспорт которых Милдронат ограничивает. Однако в результате исследования феномена прекондиционирования установлено, что стресс в небольших дозах тренирует те ферментные системы клетки, которые для выработки энергии используют сахара. Это связано с тем, что окисление глюкозы, по сравнению со сжиганием жирных кислот, позволяет сэкономить около 12% кислорода, то есть сердечная мышца всю дополнительную энергию получает от окисления Сахаров. Таким образом, те, у кого эти ферментные системы более тренированы, переносят, соответственно, и более высокие нагрузки [33]. Возможно, именно этим можно объяснить результаты экспериментальных наблюдений, полученные электронно-микроскопическим методом, свидетельствующие о том, что в миокарде в результате фармакологических тренировочных нагрузок под влиянием Милдроната увеличивается количество функционирующих капилляров (в 2-3 раза), количество и размеры митохондрий (гиперплазия и гипертрофия), число крист в них (на 180%), а также количество рибосом и полисом, что указывает на способность Милдроната активировать синтез белков (ферментов), а также повышать дыхательную емкость миокарда. Последующие исследования показали, что Милдронат индуцирует биосинтез и активность Са -АТФазы, гексокиназы и пируватдегидрогеназы саркоплазматического ретикулума [33, 180].

Вышеизложенное объясняет, почему цитопротекторы метаболического действия эффективны в лечении ишемических состояний: они вызывают в клетках эффект прекондиционирования, стимулируя экспрессию необходимых для окисления Сахаров ферментов и их активность, то есть помогают клеткам подготовиться к ишемии [7, 33, 121, 193].

Триметазидин тормозит в митохондриях бета-окисление всех жирных кислот — и длинноцепочечных, и короткоцепочечных, блокируя последнюю реакцию 4-стадийного процесса окисления жирных кислот (3-кетоацил-КоА-тиолазу), что не мешает накоплению активированных жирных кислот в митохондриях [6, 17]. Милдронат действует иначе — ограничивает транспорт через мембраны митохондрий только длинноцепочечных жирных кислот, в то время как короткоцепочечные могут свободно проникать в митохондрии и окисляться там. Кроме того, Милдронат, уменьшая проникновение жирных кислот в митохондрии, восстанавливает транспорт АТФ (не только в миокарде, но и в мышечной ткани и других клетках) и помогает клеткам выжить, а ведь именно активированные жирные кислоты, накапливаясь в митохондриях, блокируют транспорт АТФ и одновременно действуют как поверхностно-активные вещества, травмирующие клеточные мембраны и вызывающие их разрушение [6, 33] (рис. 4.1).

В то же время триметазидин не способен задержать поток жирных кислот в митохондрии и, следовательно, не может предотвратить накопления в митохондриях их активированных форм — ацил-КоА и ацилкарнитина, а также вредного влияния этих метаболитов на транспорт АТФ и клеточные мембраны. Но уменьшение скорости окисления жирных кислот положительно влияет на обмен веществ в ишемизированном миокарде, так как включается альтернативная система производства энергии — окисление глюкозы, что определяет цитопротективное действие триметазидина на ишемизированные клетки [33] (рис. 4.1).

В настоящее время можно считать установленным фактом участие процессов свободнорадикального окисления липидов в ишемическом повреждении миокарда. При многих сердечно-сосудистых заболеваниях, связанных с повышением активности перекисного окисления липидов, первопричиной возникающих нарушений является гипоксия [80]. Известно, что некоторые продукты перекисного окисления липидов вызывают сокращение гладкой мускулатуры, нарушение проницаемости сосудов и способны провоцировать спазм коронарных сосудов [60]. Реактивные формы кислорода (РФК) могут повреждать эндотелий сосудов и снижать секрецию оксида азота, что ведет к усугублению дисфункции эндотелия, проявляющейся усиленной вазоконстрикцией, гиперкоагуляцией и пролиферацией гладких мышечных клеток. Кроме того, свободные радикалы повреждают кардиомиоциты и способствуют структурной модификации их липидного бислоя с последующим ремоделированием миокарда, что приводит к ухудшению его сократительной функции [59, 141].

Исследования клинической эффективности цитопротекторов метаболического действия показали, что оба препарата обладают умеренными антиоксидантными свойствами, позволяющими использовать их для улучшения энергетического метаболизма в клетках эндотелия и коррекции последствий оксидативного стресса, ведущего к ускоренному распаду оксида азота [33, 73, 86].

По данным Гордеева И.Г. и соавт. (2005), у пациентов со стабильной стенокардией и высоким риском развития ишемических осложнений, получавших в дополнение к стандартной терапии ИБС Милдронат или триметазидин, происходило достоверное снижение в крови продуктов ПОЛ (МДА) за счет активации защитных антиоксидантных ферментов, так как в обеих группах происходило достоверное повышение уровня супероксиддисмутазы (СОД) и глутатионпероксидазы (ГП) [60]. Однако в группе, получавшей триметазидин, активность ГП была наиболее высока по сравнению с группой пациентов, получавших Милдронат, а так как ГП относится к ферментам, обладающим более выраженной антиоксидантной активностью, то можно говорить о том, что антиоксидантное действие наиболее выражено у триметазидина [60]. Известно, что глутатионпероксидаза является наиболее эффективным природным антиоксидантом плазмы крови, участвующим в защите ЛПНП от атерогенной окислительной модификации [30]. Поэтому можно предположить, что данный фермент оказывает именно непрямой антиоксидантный эффект, воздействуя на активность защитных ферментов. Триметазидин не является прямым антиоксидантом, так как не взаимодействует напрямую со свободными радикалами, он действует опосредованно, за счет активации антиоксидантных ферментов наибольшей степени - повышения уровня глутатионпероксидазы [30, 60] (рис. 4.2).

Рисунок 4.2. Механизмы действия цитопротекторов метаболического действия на эндотелий сосудов

В другом исследовании, проведенном ЫароН и соавт. (2007), на изолированных сердцах крыс, подвергшихся ишемии-реперфузионному повреждению, было продемонстрировано, что применение триметазидина способствует значительному усилению экспрессии гена е>Ю8 и увеличению уровней белков еИ08 по сравнению с контролем. Для подтверждения вовлеченности именно оксида азота в кардиопротективные эффекты триметазидина использовался специфический ингибитор ЫО-синтазы -М-нитро-Ь-аргинин метиловый эфир, который значительно снижал влияние триметазидина на сократительную способность, продукцию креатинкиназы и проницаемость микрососудов. Таким образом, в изолированных сердцах крыс триметазидин проявлял значимую, ЫО-зависимую, кардиопротекцию против повреждения, вызванного ишемией-реперфузией, и защищал эндотелиальный барьер коронарного кровообращения [225] (рис. 4.2).

Han W. и соавт. (2008) исследовали влияние триметазидина на нарушенный энергетический метаболизм кардиомиоцитов, вызванный постоянной формой фибрилляции предсердий, у собак. Было установлено, что в результате длительного (6 недель) лечения триметазидином, значительно усиливалась экспрессия eNOS в предсердиях, увеличивалась концентрация нитрат- и нитрит-ионов (NOx) в плазме и снижался плазменный уровень фактора фон Виллебранда, что благоприятно влияло на энергетический метаболизм клеток и улучшение эндотелиальной функции за счет NO-зависимого механизма [132] (рис. 4.2).

Положительное влияние триметазидина на эндотелиальную функцию у больных ИБС с дисфункцией левого желудочка было продемонстрировано в исследовании Belardinelli R. (2008). Триметазидин сокращал инактивацию NO через снижение перекисного окисления липидов (снижение LOONO-) и образования РФК, что подтверждалось сниженными уровнями эндотелина-1 и системных маркеров оксидативного стресса в плазме, таких как малоновый диальдегид и гидропероксиды. Непрямой эффект триметазидина на эндотелиальную функцию зависит от его антиишемических свойств: в условиях дисфункционального, но жизнеспособного миокарда, триметазидин, как регулятор метаболизма, улучшал сократительную функцию левого желудочка и эффективность работы сердечно-сосудистой системы за счет переключения баланса между эндотелийзависимой вазодилатацией и содержанием вазоконстрикторных веществ в пользу первого [108].

Еще один механизм улучшения эндотелиальной функции был описан Tselepis А. и соавт. (2001) в исследовании, посвященном триметазидину и его способности предупреждать окисление ЛПНП и повреждение ДНК культуральных клеток, подвергшихся перекисному окислению Н2Ог. Предполагается, что триметазидин может оказывать прямое действие на эндотелиальные клетки, выполняя роль хелатора переходных металлов, которые способны проникать через липидный барьер клеток, и, таким образом, защищать эндотелий от воздействия свободных радикалов [227] (рис. 4.2).

В опытах in vitro и у больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга также продемонстрировано наличие антиоксидантной активности у другого цитопротектора метаболического действия - Милдроната, которое выражалось в повышении резистентности липопротеидов к ПОЛ, вызванному ионами двухвалентного железа [2].

Особый интерес представляют данные о том, что Милдронат, сам не обладающий свойствами антиоксиданта, повышает в организме концентрацию гамма-бутиробетаина (ГББ), так как под влиянием Милдроната он медленнее окисляется до карнитина. В свою очередь, ГББ способен индуцировать образование NO, который действует как один из наиболее эффективных природных агентов, связывающих свободные радикалы в организме, что обусловливает такие эффекты Милдроната, как снижение периферического сопротивления сосудов, уменьшение вызванных норадреналином или ангиотензином спазмов кровеносных сосудов, торможение агрегации тромбоцитов и увеличение эластичности мембран эритроцитов. Таким образом, Милдронат, повышая концентрацию ГББ, защищает клетки и от влияния свободных радикалов, но механизм его действия полностью отличается от такового для триметазидина, ибо реализуется через индукцию биосинтеза NO. В результате этого Милдронат оказывает селективное действие именно на ишемизированную зону различных тканей, в том числе и миокарда, практически не влияя на незатронутые ишемией участки (противодействие эффекту обкрадывания) [33, 109] (рис. 4.2).

Милдронат, являющийся конкурентным ингибитором гамма-бутиробетаин гидроксилазы, при комбинированной терапии с эналаприлом способствует более быстрой и выраженной коррекции показателей ПОЛ, нормализации функций эндотелия сосудистой стенки, следствием чего явилось эффективное снижение показателей суточного профиля АД, улучшение систолической и диастолической функциям миокарда левого желудочка и его деремоделирование. При этом Милдронат реализует свои эффекты путем изменения жирового баланса клетки, что может повлиять на уровень недоокисленных жирных кислот, являющихся субстратом свободнорадикального окисления [86].

В открытом контролируемом исследовании изучалось влияние цитопротектора Милдроната (Гриндекс, Латвия) на окислительные процессы и эндотелиальную функцию у пожилых больных ишемической болезнью сердца [18]. Были выявлены благоприятные изменения в виде снижения уровня продуктов ПОЛ (малонового диальдегида) в ЛПНП, повышении устойчивости ЛПНП к окислению и повышение в крови метаболитов N0. Такой потенциально антиатерогенный эффект препарата на окислительную модификацию ЛПНП теоретически можно объяснить двумя причинами, в частности, способностью Милдроната потенцировать: а) ингибирование процесса окисления ненасыщенных жирных кислот в ЛПНП и/или б) снижать в ЛПНП уровень ненасыщенных жирных кислот — основных субстратов процесса ПОЛ. Ассоциированый с торможением окислительных процессов в ЛПНП, потенциально антиатерогенный эффект Милдроната в виде нормализации функции эндотелия за счет повышения образования/секреции N0 также положительно характеризует этот препарат и является основанием для дополнительных рекомендаций к его назначению [18].

Способность контролировать скорость окисления жирных кислот "в ишемизированном миокарде имеет и Милдронат, и триметазидин. Доказано, что оба препарата хорошо комбинируются с различными антиангинальными средствами, при этом доза последних может быть уменьшена. Однако вследствие блокирующего влияния триметазидина на окисление всех жирных кислот, его следует применять в меньших дозах, чаще и дольше (3 таблетки по 20 мг/сут, минимум в течение 6 месяцев), чем Милдронат, терапевтический эффект которого из-за большей допустимой дозы (2-4 капсулы по 250 мг/сут) проявляется быстрее, и курс лечения обычно не превышает 6 недель. Благодаря своему физиологическому, регулирующему и тренирующему воздействию на организм Милдронат также разрешен для применения здоровыми людьми и спортсменами с целью повышения физической и умственной работоспособности [33].

Использование интегрального анализа по совокупности гемодинамических, биохимических и морфологических показателей позволило дать комплексную визуальную характеристику функции эндотелия и сократимости миокарда, а также представить эффективность действия исследуемых препаратов мельдония, триметазидина и их комбинаций с Ь-аргинином в интегральном контексте на фоне моделирования Ь-ИАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота.

Так, анализируя площади векторных диаграмм, характеризующих морфофункциональное состояние сердечно-сосудистой системы, исследуемые препараты можно расположить в порядке возрастания активности фармакологической коррекции метаболического пути Ь-аргинин/Г\Ю в следующей последовательности (табл. 4.1).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Артюшкова, Екатерина Вячеславовна, 2011 год

1. Антиоксидантное действие милдроната и L-карнитина при лечении больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова, Е.К. Ким // Эксперим. и клинич. фармакология. 2003. - Т.66, №3. - С. 32-35.

2. Антиоксиданты в терапии острого инфаркта миокарда и гипертонического криза / А.П. Голиков, В.Ю. Полумисков, С.А. Бойцов и др. // ЦЭМПИНФОРМ. 2002. - № 6(54). - С. 14-23.

3. Антиоксиданты-цитопротекторы в кардиологии / А.П. Голиков, В.Ю. Полумисков, В.П. Михин и др. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2004. - № 6, Ч. 2. - С. 66-74.

4. Аронов, Д.М. Место ПРЕДУКТАЛА MB в кардиореабилитации больных после инфаркта миокарда / Д.М. Аронов, М.Г. Бубнова. М.: ООО «Компания Медиком», 2009. - 13 с.

5. Асташкин, Е.И. Фармакологическая регуляция обмена энергетических субстратов в кардиомиоцитах при патологических состояниях, связанных с ишемией / Е.И. Асташкин, М.Г. Глезер // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2006. - №5(7). - С. 112-123.

6. Атрощенко, Е.С. «Новые ишемические синдромы» и возможности эндогенной цитопротекции / Е.С. Атрощенко // Мед. новости. 2003. — №1.— С. 17-20.

7. Беленков, Ю.Н. Сердечно-сосудистый континуум / Ю.Н. Беленков, В.Ю. Мареев // Журн. Сердечная Недостаточность. 2002. - Т. 3, № 1. - С. 7-11.

8. Белоусов, Ю.Б. Эндотелиальная дисфункция как причина атеросклеротического поражения артерий при артериальной гипертензии:методы- коррекции / Ю.Б. Белоусов, Ж.Н. Намсараев // Фарматека.-2004.-№6.- С.62-72.

9. Бувальцев, В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний / В.И. Бувальцев // Междунар. мед. журн. 2001. - №3. - С. 9-14.

10. Бэр, Ф.М. Клиническое значение эндотелиальной дисфункции // Ф.М.'Бэр // Топ Медицина. 2000. - №3. - С. 34-36.

11. Вазопротективная эффективность статинов у больных с каротидным атеросклерозом / Ю.Б. Белоусов, М.В. Леонова, Е.П. Смирнова // Рос. кардиолог, журн. 2007. - №5. - С. 51-56.

12. Визир, В. А. Роль эндотелиальной дисфункции в формировании и прогрессировании артериальной гипертензии. Прогностическое значение и перспективы лечения / В.А. Визир, А.Е. Березин // Украшський медичний часопис. 2000.- № 4(18). - С. 23-33.

13. Вишневская, В.Ю. Эндотелиальная дисфункция и возраст / В.Ю. Вишневская//Врачеб. практика. 2003. - № 4. - С. 5-10.

14. Влияние L-аргинина на агрегацию тромбоцитов, функцию эндотелия и толерантность к физической нагрузке у пациентов со стабильной стенокардией напряжения / A.B. Созыкин, Е.А. Ноева, Т.В. Балахонова и др. // Терапевт, арх. 2000. - №8. - С. 24-27.

15. Влияние милдроната на сократимость миокарда у больных с хронической сердечной недостаточностью: результаты клинического исследования / В. Дзерве, И. Кукулис, Д. Матисоне и др. // Мед. новости. 2007. - №6. -С. 80-84.

16. Влияние триметазидина на энергетическую активность митохондрий / C.B. Елисеева, C.B. Грачев, Н.Д. Егорова и др. // Эксперим. кардиология. 2008 — №7(8). - 72-77.

17. Влияние цитопротекции на окислительные процессы и эндотелиальную функцию у пожилых пациентов с ишемической болезнью сердца / A.B. Шабалин, Ю.И. Рагино, С.А. Любимцева и др. // Успехи геронтологии.2006.-Вып. 29.- С. 116-119.

18. Войцеховский, Д. Бета-адреноблокаторы в лечении артериальной гипертонии: акцент на небиволол / Д. Войцеховский, В. Пападеметрио // Кардиология. 2008. - № 4. - С. 43-52.

19. Галаган, М.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо-и эндогенных источников / М.Е. Галаган, A.B. Широколова, А.Ф. Ванин // Вопр. мед. химии.- 1991. Т. 37, № 1. - С. 67-70.

20. Галенко, A.C. Способы немедикаментозной и фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции / A.C. Галенко, С.Н. Шуленин // ФАРМиндекс-Практик. 2006. - Вып. 10. - С. 2-10.

21. Гомазков, O.A. Молекулярные и физиологические аспекты эндотелиальной дисфункции. Роль эндогенных химических регуляторов / O.A. Гомазков // Успехи физиолог, наук.- 2000.- Т.31, №4.- С.48-61.

22. Иванов, С.Г. Роль оксидативного стресса в развитии и прогрессировании хронической сердечной недостаточности: актуальность и возможность его коррекции / С.Г. Иванов, М.Ю. Ситникова, Е.В. Шляхто // Кардиология СНГ. 2006. - № 4. - С. 267—270.

23. Исследование антиоксидантных свойств цитопротекторного препарата триметазидина / В.З. Ланкин, А.К. Тихадзе, Е.А. Жарова, Ю.Н. Беленков // Кардиология. 2001. - Т.41, №3. - С. 21-28.

24. Калвинын, И.Я. Метаболизм миокарда и ишемия / И .Я. Калвиныи // Материалы I междунар. мед. науч.-практ. конф. «Метаболическая терапия и применение милдроната в клинической практике» (18—20 апреля 2003 г.). — Ялта: Grindex, 2003. — 16 с.

25. Калвинып, И.Я. Милдронат и механизмы оптимизации клеточного производства энергии в условиях кислородного голодания / И.Я. Калвинып // Цереброкардиальная патология — новое в диагностике и лечении: материалы III междунар. симп. Судак, 2001. - С. 3-16.

26. Калвинып, И.Я. Милдронат и триметазидин: сходство и различие в их действии / И.Я. Калвинып // Terra medica nova. — 2002. №3(27). - С. 3-5.

27. Кардиопротективное действие каптоприла и лозартана при инфаркте миокарда у гипертензивных крыс / М.П. Гладченко, М.П. Покровский, Е.Б. Артюшкова и др. // Человек и лекарство: тез. докл. VI Рос. нац. конгр. (1923 апр. 1999 г.). -М., 1999. С. 21.

28. Кардиопротекторы мексикор и эмоксипин при лечении ИБС и гипертонического криза / В.Ю. Полумисков, А.П. Голиков, В.П. Михин и др. // Рязан. мед. вестн. 2004. - №21(161). - С. 14-18.

29. Карпов, Ю.А. Лечение стабильной стенокардии: учет метаболических нарушений / Ю.А. Карпов // РМЖ. 2001. - Т.9, №2. - С. 62-70.

30. Клиническая эффективность и безопасность милдроната при лечении хронической сердечной недостаточности у больных ишемической болезнью сердца / P.C. Карпов, O.A. Кошельская, A.B. Врублевский и др. // Кардиология. 2000. - № 6. - С. 69-74.

31. Ковалева, О.Н. Состояние системы оксида азота при формировании гипертензивного сердца / О.Н. Ковалева, O.A. Нижегородцева // Укр. кардюл. журн. 2003. - № 3. - С. 71-75.

32. Кузьминова, Н.В. Функциональное состояние сосудистого эндотелия у больных гипертонической болезнью / Н.В. Кузьминова, В.К. Серкова // Укр. терапевт, журн. 2008. - № 2. - С. 21-27.

33. Малышев, И.Ю. Стресс, адаптация и оксид азота / И.Ю. Малышев, Е.Б. Манухина // Биохимия.- 1998.- Т.63, вып. 7. С. 992-1006.

34. Манухина, Е.Б. Роль оксида азота в сердечно-сосудистой патологии: взгляд патофизиолога / Е.Б. Манухина, И.Ю. Малышев // Рос. кардиол. журн. -2000.-№5.-С. 55-63.

35. Манухина, Е.Б. Эндотелиальная дисфункция и артериальная гипертензия: механизмы и пути коррекции / Е.Б. Манухина, И.Ю. Малышев, В.И. Бувальцев // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2003. - № 4. -С.26-30.

36. Марков, Х.М. L-аргинин-оксид азота в терапии болезней сердца и сосудов / Х.М. Марков // Кардиология. 2005. - № 6. - С. 87-95.

37. Марков, Х.М. Молекулярные механизмы дисфункции сосудистого эндотелия / Х.М. Марков // Кардиология.- 2005.- № 12.- С. 62-72.

38. Марков, Х.М. О регуляции деятельности сердца системой L-аргинин—оксидазота / Х.М. Марков, С.А. Надирашвили // Патолог, физиология. 2003. - № 4.-С. 9—12.

39. Марков, Х.М. Оксидантный стресс и дисфункция эндотелия / Х.М. Марков // Патолог, физиология и эксперим. терапия. 2005. - № 4.-С.5-9.

40. Марков, Х.М. Простациклин-тромбоксановый баланс и факторы риска ишемической болезни сердца / Х.М. Марков // Кардиология. — 1989. № 9. — С. 5—12.

41. Марков, Х.М. Сосудистые эффекты липопротеинов и оксид азота: клеточные и молекулярные механизмы / Х.М. Марков // Патологическая физиология и экспериментальная терапия .- 2006. № 3. - С. 2-8.

42. Меркулов, Г.А. Курс патогистологической техники / Г.А. Меркулов. Д.: Медицина, 1969. - 423 с.51 .Метельская, В.А. Возможности лабораторной оценки NO-продуцирующей функции эндотелия / В.А. Метельская // Клинич. и лаб. диагностика. 2004. - №9. - С. 86.

43. Михин, В.П. Роль кардиоцитопротекторов в терапии хронической сердечной недостаточности ишемического генеза / В.П. Михин, В.В. Савельева // Рос. кардиолог, журн. 2009. - №1. - С. 49-56.

44. Мкртчян, В.Р. Клиническая фармакология средств, улучшающих энергетический метаболизм миокарда: учеб. пособие / В.Р. Мкртчян. — М.: МЗ России, 2003. — 24 с.

45. Нарушение функции эндотелия у пациентов с ишемической болезнью сердца в сочетании с артериальной гипертензией / В.Н. Коваленко, Н.М. Гулая, Т.В. Семикопная и др. // Укр. кардюл. журн. 2002. - № 3. - С. 5-8.

46. Небиеридзе, Д.В. Клиническое значение дисфункции эндотелия при артериальной гипертонии / Д.В. Небиеридзе // CONSILIUM MEDICUM:

47. Пашин, E.H. Кардиопротективное действие эмоксипина на модели гипоксия-реоксигенация / E.H. Пашин // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации: материалы конф. / КГМУ. Курск, 1993.-С. 171.

48. Перспективы медикаментозного лечения эндотелиальной дисфункции / Г.А. Романовская, Е.В. Акатова, Г.Н. Гороховская и др. // Фарматека. 2005.- №9. -С. 31-37.

49. Петрищев, H.H. Дисфункция эндотелия. Причины, механизмы, фармакологическая коррекция / H.H. Петрищев; СПб. гос. мед. ун-т им. И.П. Павлова?-СПб.: Изд-во СПбГМУ^ 2003.- Í81c.

50. Петрищев, H.H. Функциональное состояние эндотелия при ишемии-реперфузии (обзор литературы) / H.H. Петрищев, Т.Д. Власов // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова.—2000.— № 2.— С. 148-163.

51. Пичугин, В.В. Биохимические и функциональные аспектыэкспериментальной терапии расстройств кровоснабжения и биоэнергетики миокарда в острой стадии регионарной ишемии сердца: автореф. дис. . д-ра мед. наук / В.В. Пичугин. М., 1979. - 25 с.

52. Покровская, Т.Г. Комбинированная фармакологическая коррекция метаболического пути L-аргинин/МО при моделировании дефицита оксида азота: автореф. дис. . д-ра мед. наук: (14.00.25) / Т.Г. Покровская; ГОУ ВПО КГМУ Росздрава. Курск, 2009. - 42 с.

53. Поливода, С. Н. Структурно-функциональная перестройка крупных артерий при гипертонической болезни: роль нарушений метаболизма соединительной ткани / С.Н. Поливода, A.A. Черепок, P.A. Сычев // Клинич. медицина 2004. - Т. 82, № 8. - С.30-33.

54. Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции / Т.Г. Покровская, В.И. Кочкаров, М.В. Покровский и др. // Кубанский науч. мед. вестн.- 2007.- №1-2.- С. 146-150.

55. Приходько, В.Ю. Метаболическая терапия при сердечно-сосудистых заболеваниях / В.Ю. Приходько // Лжи Украши. 2009. - № 4. - С. 61-64.

56. Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ: метод, рекомендации MP 2.3.1. 1915 04. - М., 2004. - 34 с.

57. Роль коррекции метаболизма оксида азота в организме при профилактике гипертонического ремоделирования сердечно-сосудистой системы / В.И. Бувальцев, С.Ю. Машина, Д.А. Покидышев и др. // Рос. кардиолог, журн. — 2002. № 5(37). - С. 74-81.

58. Роль оксида азота и его метаболитов в регуляции сосудистого тонуса при гипертонической болезни / О.М. Моисеева, Л.А. Александрова, И.В. Емельянов и др. // Consilium Medicum. 2003. - № 9(6). - С. 17-23.

59. Свободнорадикальное окисление и сердечно-сосудистая патология: коррекция антиоксидантами / А.П. Голиков, С.А. Бойцов, В.П. Михин и др. // Лечащий врач. 2003. - № 4. - С. 70-74.

60. Семидоцкая, Ж.Д. Эндотелиальная дисфункция у пациентов с хроническим гломерулонефритом / Ж.Д. Семидоцкая // Актуальные проблемы экстракорпорального очищения крови, нефрологии и гемафереза: сб. материалов первого объединенного конгр. М., 2002. - С. 37.

61. Серкова, В.К. Метаболическая кардиопротекция в терапии больных ишемической болезнью сердца: роль парциальных ингибиторов окисления жирных кислот / В.К. Серкова // Рациональная фармакотерапия. — 2008. № 1(6).-С. 48-52.

62. Сидоренко, Б.А. Блокаторы ATl-ангиотензиновых рецепторов / Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский. М.: Морион, 2001. - 200 с.

63. Современные представления о дисфункции эндотелия и методах ее коррекции при атеросклерозе / Е.В. Шляхто, O.A. Беркович, Л.Б. Беляева и др. // Междунар. невролог, журнал. 2002. - №3. - С.9-13.

64. Сравнительная оценка антиишемического действия верапамила на разных моделях ишемии миокарда / К.К. Гурбанов, Г.В. Ковалев, A.A. Паперно и др. // Фармакология и токсикология. 1991. - Т.54, №4. - С. 21-23.

65. Суслина, З.А. Нейропротекция при ишемическом инсульте: эффективность Милдроната / З.А. Суслина, М.Ю. Максимова // Фарматека. 2005. - №13. -С. 99-104.

66. Сыркин, А.Л. Антиишемические препараты метаболического действия / А.Л. Сыркин, A.B. Добровольский // Consilium Medicum. 2002. - Т.4, №11. -С.572-575.

67. Титов, В.Н. Анатомические и функциональные основы эндотелий-зависимой вазодилатации, оксид азота и эндотелии / В.Н. Титов // Рос. кардиолог, журн. 2008. - № 1.-С. 71-85.

68. Уланова, И.П. К вопросу об учете поверхности тела экспериментальных животных при токсикологическом исследовании / И.П. Уланова, К.К. Сидоров, А.И. Халепо; под ред. A.A. Летавета, И.В. Саноцкого. Л.: Медицина, 1968.-Вып. 10.-С. 18-25.

69. Характеристика биохимических маркеров функции сосудистого эндотелия: разработка модельной системы с применением клеточных культур / В .А. Метельская, Н.Г. Туманова, O.A. Литинская и др. // Вопр. биол. медицины ифарм. химии. 2004. - № 2. - С. 34-39.

70. Хлебодаров, ф.Е. Влияние кардиопротекторов мексикора и милдроната на гипотензивную эффективность метопролола у больных артериальной гипертензией / Ф.Е. Хлебодаров, В.П. Михин // Фарматека. 2009. - №15. -С. 95-99.

71. Хлебодаров, Ф.Е. Роль цитопротекторов в лечении больных артериальной гипертонией на фоне терапии эналаприлом / Ф.Е. Хлебодаров, В.П. Михин // Рос. кардиолог, журн. 2009. - №5(79). - С. 46-50.

72. Хлебодаров, Ф.Е. Сравнительная эффективность кардиоцитопротекторов в комплексном лечении гипертонической болезни / Ф.Е. Хлебодаров, В.П. Михин, А.В. Горлова // Рос. кардиолог, журн. 2009. - №4(78). - С. 37-42.

73. Цатурян, В.В. Дисфункция эндотелия и ее взаимосвязь с другими факторами риска сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом типа 2: автореф. дис. . канд. мед. наук /В.В. Цатурян. СПб, 2004. — 24 с.

74. Чернявская, Е.К. Современные проблемы диагностики и медикаментозной коррекции эндотелиальной дисфункции у пациентов с артериальной гипертонией / Е.К. Чернявская // Атмосфера. Кардиология.- 2005.- № 2.-С.21-28.

75. Шестакова, М.В. Дисфункция эндотелия — причина или следствие метаболического синдрома? / М.В. Шестаков // Рус. Мед. Журн. 2001. -№9(2). - С. 88.

76. Шишкин, А.Н. Современная стратегия терапии эндотелиальной дисфункции с позиций доказательной медицины / А.Н. Шишкин // Врачеб. ведомости. — 2008.-№ 3(45). С. 6-19.

77. Шулутко, Б.И. Артериальная гипертензия / Б.И. Шулутко, Ю.Л. Перов. -СПб.: Медицина, 1993.-302с.

78. Шумаков, В. А. Энергетический метаболизм миокарда в условиях коронарной недостаточности; возможности его фармакологической коррекции / В.А. Шумаков, Т.В. Талаева, В.В. Братусь // Укр. кард. журн. -2005. -№3.- С. 9-16.

79. Эндотелиальная дисфункция при заболеваниях сердечно-сосудистой системы и методы ее коррекции / Е.Н. Ющук, Ю.А. Васюк, А.Б. Хадзегова и др. // Клинич. фармакология и терапия. 2005. - №14(3). - С. 85-88.

80. A pilot study of L-arginine supplementation on functional capacity in peripheral arterial disease / R.K. Oka, A. Szuba, J.C. Giacomini, J.P. Cooke // Vase. Med. -2005. Vol. 10, N 4. - P. 265-274.

81. Adhesiveness of mononuclear cells in hypercholesterolemic humans is normalized by dietary L-arginine / G. Theilmeier, J.R. Chan, C. Zalpour et al. // Arterioscler. Thromb." Vase. Biol. 1997. - Vol. 17(12). - P. 3557-3564.

82. Alterations of nitric oxide synthase expression with aging and hypertension in rats / T.-C. Chou, M.-H. Yen, C.-Y. Li, Y.-A. Ding // Hypertension. 1998. -Vol. 31.-P. 643-648.

83. Angiotensin II stimulates NADH and NADPH oxidase activity in cultured vascular smooth muscle cells / K.K. Griendling, C.A. Minieri, J.D. Ollerenshaw, R.W. Alexander // Circ. Res. 1994. - Vol. 74. - P. 1141-1148.

84. Antioxidant activity of mildronate and L-carnitine in the treatment of patients with cerebrovascular diseases / Z.A. Suslina, T.N. Fedorova, M.I. Maksimova,

85. E.K. Kim // Eksp. Klin. Farmakol. 2003. - Vol. 66. - P. 32-35.

86. August, P. Hypertension in women / P. August, S. Oparil // J. Clin. End. Met. -1999. Vol. 84(6).-P. 1862-1866.

87. Bauersachs, J. Endothelial dysfunction in heart failure: mechanisms and therapeutic approaches / J. Bauersachs, A. Schafer // Current vascular pharmacology. 2004. - Vol. 2. - P. 115-124.

88. Beckman, J.S. OONO-: Rebounding from nitric oxide / J.S. Beckman // Circulat. Res. 2001. - Vol. 89. - P. 295-297.

89. Belardinelli, R. Benefits of metabolic approach in cardiac rehabilitation / R. Belardinelli // Heart and metabolism. 2008. - № 39. - P. 25-28.

90. Beneficial effect of MET-88, a y-butyrobetaine hydroxylase inhibitor, on energy metabolism in ischemic dog hearts / T. Kirimoto, N. Nobori, Y. Asaka etal. // Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 1996. - Vol. 331(2). - P. 163-178.

91. Beneficial effects of antioxidants and L-arginine on oxidation-sensitive gene expression and endothelial NO synthase activity at sites of disturbed shear stress /

92. F. de Nigris, L.O. Lerman, S.W. Ignarro et al. // PNAS. -2003. Vol. 100(3). -P. 1420- 1425.

93. Bioelectricar mechanism of the anti-arrhythmia effect of a synthetic acetylcholine analogue EDIHYP / F.Z. Meerson, N.A. Abdikaliev, I. Kalvinsh, V.I. Vovk // Kardiologiya. 1995. - Vol. 31. - P. 52-55.

94. Boger, R.H. The pharmacodynamics of L-arginine / R.H Boger // J. Nutr. -2007.-Vol. 137.-P. 1650S—1655S.

95. Brandes, R.P. And what about the endothelium?: On the predominance of cerebral superoxide formation for angiotensin II-induced systemic hypertension / R.P. Brandes // Circ. Res. 2004.- Vol. 95. - P. 122-124.

96. Brown, A.A. Dietary modulation of endothelial function: implications for cardiovascular disease / A.A. Brown, F.B. Hu // Am. J. Clin. Nutr. 2001. -Vol.73(4). - P. 673-686.

97. Cai, H. Endothelial dysfunction in cardiovascular diseases: The role of oxidant stress / H. Cai, D.G. Harrison // Circ. Res.- 2000. Vol. 87(10). - P. 840-844.

98. Caulin-Glaser, T. Primary prevention of hypertension in women / T. Caulin-Glaser // J. Clin. Hypertens. 2000. - Vol. 2(3). - P. 204-214.

99. Cerebral microvascular responses to hypercholesterolemia: roles of NADPH oxidase and P-selectin / M. Ishikawa, K. Stokes, J.H. Zhang et al. // Circ. Res. -2004. Vol. 94. - P. 239-244.

100. Chronic treatment with polyethylene-glycolated superoxide dismutase partially restores endothelium-dependent vascular relaxations in cholesterol-fed rabbits / A. Mugge, J.H. Elwell, T.E. Peterson et al. // Circ. Res. 1991. - Vol. 69. - P. 12931300.

101. Clinical and inflammatory effects of dietary L-arginine in patients with . intractable angina pectoris / A. Blum, R. Porat, U. Rosenschein et al. // Am. J.

102. Cardiol. 1999. - Vol. 83(10). - P. 1488-1490.

103. Cosentino, F. Role of superoxide anion in the mediation of endothelium-dependent contraction / F. Cosentino, J.C. Sill, Z.S. Kanusle // Hypertension. — 1994. Vol. 23. - P. 229-235.

104. Dambrova, M. Cardioprotective action through carnitine-lowering effect / M. Dambrova, E. Liepinsh, I. Kalvinsh // Trends. Cardiovasc. Med. 2002. - Vol. 12. -P. 275-279/ ~

105. Deng, L.Y. Effect of hypertension induced by nitric oxide synthase inhibition on . structure and function of resistance arteries in the rat / L.Y. Deng, G. Thibault ,

106. E.L. Schiffrin // Clin. Exp. Hypertens. 1993. - Vol. 15(3). - P. 527-37.

107. Development and characterization of an animal model of carnitine deficiency /

108. M. Spaniol, H. Brooks, L. Auer et al. // Eur. J. Biochem. 2001. - Vol. 268. -P.1876-1887.

109. Di Napoli, P. Anti-ischemic cardioprotection with trimetazidine / P. Di Napoli // Heart. Metab. 2008. - Vol. 41. - P. 25-29.

110. Dietary L-arginine supplementation normalizes platelet aggregation in hypercholesterolemic humans / A. Wolf, C. Zalpour, G. Theilmeier et al. // J. Am. Coll. Cardiol. 1997. - Vol. 29(3). - P. 479^185.

111. Dominiczak, A. Angiotensin II and superoxide formation in human arteries / A. Dominiczak, C. Berry, M. Brosnan // International Forum on Angiorensin II Receptor Antagonism. 2-nd. - Monte-Carlo, 2001.- Abstract Book. - P. 5-6.

112. Effect of ascorbic acid on endothelium-dependent vasodilatation of human arterial conduits for coronary artery bypass grafting / O. Mangoush, K. Nakamura, S. Al-Ruzzeh et al. // Eur. J. Cardiothorac. Surg 2003.- Vol. 24(4).-P. 541-546.

113. Effect of dietary antioxidants on postprandial endothelial dysfunction induced by a high-fat meal in healthy subjects / K. Esposito, F. Nappo, F. Giugliano et al. // Am. J. Clinical Nutrition. -2003. Vol. 77(1). - P. 139 - 143.

114. Effect of native and oxidized low-density lipoprotein on endothelial nitric oxide and superoxide production : key role of L-arginine availability / L. Vergnani, S. Hatrik, F. Ricci et al. // Circulation. -2000. Vol. 101(11).-P. 1261-1266.

115. Effects of angiotensin II infusion on the expression and function of NAD(P)H oxidase and components of nitric oxide/cGMP signaling / H. Mollnau, M. Wendt, K. Szocs et al. // Cire. Res.- 2002. Vol. 90 (4). - P. e58 - é65.

116. Effects of chronic trimetazidine treatment on atrial energy metabolism in a canine model of chronic atrial fibrillation / W. Han, S.S. Yang, N. Wei et al. // Zhonghua Xin Xue Guan Bing Za Zhi. 2008. - № 36(6). - P. 446-9.

117. Effects of gamma-butyrobetaine and mildronate on nitric oxide production inlipopolysaccharide-treated rats / N. Sjakste, L. Baumane, J.L. Boucher et al. // Basic. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2004. - Vol. 94. - P. 46-50.

118. Effects of MET-88, a gamma-butyrobetaine hydroxylase inhibitor, on tissue carnitine and lipid levels in rats / Y. Hayashi, Y. Muranaka, T. Kirimoto et al. // Biol. Pharm. Bull. 2000. - Vol. 236. - P. 770-773.

119. Effects of oral L-arginine supplementation on exerciseinduced QT dispersion and exercise tolerance in stable angina pectoris / B. Bednarz, R. Wölk, T. Chamiec et al. // Int. J. Cardiol. 2000. - Vol. 75(2-3). - P. 205-210.

120. El Bannani, H. Changes in intracellular sodium and pH during ischemia-reperfusion are attenuated by trimetazidine: comparison between low- and zero-flow ischemia / H. El Bannani, M. Bernard, D. Baertz // Cardiovasc. Res. 2000. -Vol. 47.-P. 688-696.

121. Endothelial dysfunction in hypercholesterolemia is improved by L-arginine administration: possible role of oxidative stress / H. Kawano, T. Motoyama, N. Hirai et al.//Atherosclerosis. -2002. Vol. 161(2).-P. 375-380.

122. Endothelial dysfunction in hypercholesterolemia is reversed by a nutritional product designed to enhance nitric oxide activity / A J. Maxwell, B. Anderson, M.P. Zapien, J.P. Cooke // Cardiovasc. Drugs Ther. 2000. - Vol. 14(3). -P.309-316.

123. Endothelial dysfunction, oxidative stress, and risk of cardiovascular events in patients with coronary artery disease / T. Heitzer, T. Schlinzig, K. Krohn et al. // Circulation. 2001. - Vol. 104. - P. 2673-2678.

124. Endothelial function and oxidative stress in cardiovascular diseases / Y. Higashi, K. Noma, M. Yoshizumi et al. // Circ. J. 2009. - Vol. 73(3). - P. 411-8.

125. Endothelium- and nitric oxide-dependent vasorelaxing activities of gamma-butyrobetaine esters: possible link to the antiischemic activities of mildronate / N. Sjakste, A.L. Kleschyov, J.L. Boucher et al. // Eur. J. Pharmacol. 2004. -Vol.495.-P. 67-73.

126. Enhanced endothelial adhesiveness in hypercholesterolemia is attenuated by L-arginine / P.S. Tsao, L.M. McEvoy, H. Drexler et al. // Circulation. 1994. -Vol.89.-P. 2176-2182.

127. Evidence for enhanced vascular superoxide anion production in nitrate tolerance. A novel mechanism underlying tolerance and cross-tolerance / T. Munzel, H. Sayegh, B.A. Freeman et al. // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 187-194.

128. Extracellular superoxide dismutase is a major determinant of nitric oxide bioavailability: in vivo and ex vivo evidence from ecSOD-deficient mice / O. Jung, S.L. Marklund, H. Geiger et al. // Circ. Res. 2003. - Vol. 93. - P. 622-629.

129. Fatty acid oxidation and related gene expression in heart depleted of carnitine by mildronate treatment in the rat / P. Degrace, L. Demizieux, J. Gresti et al. // Mol.- Cell.Biochem.-2004.-Vol." 258.-P. 171-182.

130. Feletou, M. Endothelial dysfunction: a multifaceted disorder / M. Feletou, P.M. Vanhoutte // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2006. -Vol.21. - P. 377-385.

131. Ferdinandy, P. Nitric oxide, superoxide and peroxinitrite in myocardial ischemia-reperfusion injury and preconditioning / P. Ferdinandy, R. Schulz // Br.

132. J. Pharmacol. 2003. - Vol. 138. - P. 532-542.

133. Ferro, C.J. Endothelial dysfunction and hypertension / C.J. Ferro, D.J. Webb Drugs. 1997. - Vol. 53(Suppl. 1). - P. 30-41.

134. Forstermann, U. Endothelial nitric oxide synthase in vascular disease: from marvel to menace / U. Forstermann, T. Munzel // Circulation. 2006. - Vol. 113-P. 1708—1714.

135. Gamma-butyrobetaine esterase activity in rat blood serum / O. Orbidane, D. Meirena, O. Pugovics et al. // Proc. Latv. Acad. Sci. B. 2004. - Vol. 58. -P. 98-102.

136. Ganz, P. Testing endothelial vasomotor function: nitric oxide, a multipotent molecule / P. Ganz, J.A.Vita // Circulation. 2003. - Vol. 108. - P. 2049-2053.

137. Griendling, K.K. NADH/NADPH oxidase and vascular function / K.K. Griendling, M. Ushio-Fukai // Trends. Cardiovasc. Med. 1997. - Vol. 7. - P. 301-307.

138. Griendling, K.K. NAD(P)H oxidase. Role in cardiovascular biology and disease / K.K. Griendling, D. Sorescu, M. Ushio-Fukai // Circ. Res. 2000. - Vol. 86. -P.494-501.

139. Griendling, K.K. Oxidative stress and cardiovascular injury, Part I: basic mechanisms and in vivo monitoring of ROS / K.K. Griendling, G.A. FitzGerald // Circulation. -2003. Vol. 108.-P. 1912—1916.

140. Gokce, N. L-arginine and hypertension / N. Gokce // J. Nutr. 2004. -Vol. 134(10 Suppl). - P. 2807S-281 IS.

141. Gornik, H.L. Arginine and endothelial and vascular health / H.L. Gornik, M.A. Creager // J. Nutr. 2004. - Vol. 134(Suppl. 10). - P. 2880S-2887S.

142. Guarnieri, C. Effect of trimetazidine on mitochondrial function and oxidative damage during reperfusion of ischemic hypertrophied rat myocardium / C. Guarnieri, C. Muscari // Pharmacology. 1993. - Vol. 46. - P. 324-331.

143. Hanaki, Y. Effect of 3-(2,2,2-trimethylhydrazinium) propionate, gamma-butyrobetaine hydroxylase inhibitor, on isoproterenol-induced mitochondrialdysfunction / Y. Hanaki, S. Sugiyama, T. Ozawa // Res Commun Chem Pathol

144. Pharmacol. 1989. - Vol. 64(1). - P. 157-60.

145. Hosein, E.A. Acetylcholine-like activity in subcellular particles isolated from rat brain / E.A. Hosein, P. Proulx // Arch. Bio. chem. Biophys. 1964. - Vol. 106. -P. 267-274.

146. Important role of Rho-kinase in the pathogenesis of cardiovascular inflammation and remodeling induced by long-term blockade of nitric oxide synthesis in rats / C. Kataoka, K. Egashira, S. Inoue et al. // Hypertension. 2002. - Vol. 39, N2,-P. 245-250.

147. Irani, K. Oxidant signaling in vascular cell growth, death and survival / K. Irani // Circulat. Res. -2000. Vol. 87. - P. 179-190.

148. Kalvinsh, I. Synthesis and pharmacological activity of a new bioregulator mildronate / I. Kalvinsh // Eksp. Klin. Farmakoter (Riga). 1991. - Vol. 19. -P.7-14.

149. Kojda, T. Interaction between NO and reactive oxigen species: pathophysiological importance in atherosclerosis, hypertension, diabetes and heart Failure / T. Kojda, D. Harrison // Cardiovasc. Res. 1999. - Vol. 43.- P.562-571.

150. L-Arginine enhances the triglyceride-lowering effect of simvastatin in patients with elevated plasma triglycerides / F. Schulze, S. Glos, D. Petruschka et al. // Nutr. Res. 2009. - Vol. 29(5). - P. 291-297.

151. Lassegue, B. Vascular NAD(P)H oxidases: specific features, expression, and regulation / B. Lassegue, R.E. Clempus // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2003. - Vol. 285. - P. 277-297.

152. Laursen, J.B. Role of superoxide in angiotensin II-induced but not catecholamine-induced hypertension / J.B. Laursen, S. Rajagopalan, Z. Galis // Circulation. 1997. - Vol. 95. - P. 588-593.

153. Mak, S. The oxidative stress hypothesis of congestive heart failure: radical thoughts / S. Mak, G.E. Newton // Chest. 2001. - Vol. 120. - P. 2035—2046.

154. Maridonneau-Paini, I. Trimetazidine protects the human red blood cell against oxygen free radical damage / I. Maridonneau-Paini, C. Harpey // Cardiovasc. Drugs. Ther. 1990. - Vol. 4. - P. 818-819.

155. Marzilli, M. Cardioprotective effects of trimetazidine: a review / M. Marzilli // Curr. Med. Res. Opin. 2003. - Vol. 19(7). - P. 661-672.

156. Medicinal effects and indications to mildronate application in neuroangiologic practice / G. Enina, T. Timofeeva, D. Egere, I. Majore // Eksp. Klin. Farmakoter (Riga).-1991.- Vol. 19.-P. 164-171.

157. Mildronate: mechanisms of action, perspective for pathology correction / Zh.V. Shutenko, D.V. Meirena, T.I. Kagan et al. // Khim-Pharm. Zh. 1995.1. Vol. 29. P.13-17.

158. Moncada, S. Molecular mechanisms and therapeutic strategies related to nitric oxide / S. Moncada, E.A. Higgs // FASEB. J. 1995. - Vol. 9. - P. 1319-1330.

159. Nitric oxide inhibition of lipid peroxidation: kinetics of reaction with lipid peroxyl radicals and comparison with alpha-tocopherol / V.B. O'Donnell, P.H. Chumley, N. Hogg et al. // Biochemistry. 1997. - Vol. 36. - P. 15216-15223.

160. Oral L-arginine improves endothelial dysfunction in patients with essential hypertension / J.P. Lekakis, S. Papathanassiou, T.G. Papaioannou et al. // Int. J. Cardiol. 2002. - Vol. 86(2-3). - P. 317-332.

161. Oral L-arginine improves endothelial function in healthy individuals older than 70 years / S.M. Bode-Boger, J. Muke, A. Surdacki et al. // Vase. Med. 2003. -Vol. 8(2).-P. 77-81.

162. Oral L-arginine improves endothelium-dependent dilation in hypercholesterolemic young adults / P. Clarkson, M.R. Adams, A,J. Powe et al. // J. Clin. Invest. 1996. - Vol. 97(8). - P. 1989-1994.

163. Oral L-arginine improves hemodynamic responses to stress and reduces plasma homocysteine in hypercholesterolemic men / S.G. West, A. Likos-Krick, P. Brown, F. Mariotti // J. Nutr. 2005. - Vol. 135(2). - P. 212-217.

164. Oscillatory and steady laminar shear stress differentially affect human endothelial redox state: role of a superoxide-producing NADH oxidase / G.W. De Keulenaer, D.C. Chappell, N. Ishizaka et al. // Circ. Res. 1998. - Vol. 82. -P.1094-1101.

165. Oxidized low-density lipoprotein increases the production of intracellular reactive oxygen species in endothelial cells: inhibitory effect of lacidipine / L.

166. Cominacini, U. Garbin, A.F. Pasini //J. Hypertens.- 1998.- Vol.l6.-P.1913-1919.

167. Palmer, R.M. Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginine / R.M. Palmer, D.S. Ashton, S. Moncada // Nature.- 1988-Vol. 333. P. 664-666.

168. Pieper, G.M. Diabetic-induced endothelial dysfunction in rat aorta: role of hydroxyl radicals / G.M. Pieper, P. Langenstroer, W. Siebeneich // Cardiovasc. Res. -1997. -Vol. 34.-P. 145-156.

169. Prevention of heart failure in rats by trimetazidine treatment: a consequence of accelerated phospholipid turnover? / I. Tabbi-Anneni, C. Helies-Toussaint, D. Morin et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003. - Vol. 304. - P. 1003-1009.

170. Prognostic significance of endothelial dysfunction in hypertensive patients / F. Perticone, R. Ceravolo, A. Pujia et al. //Circulation.- 2001.- Vol. 104.-P.191-196.

171. Regionalhaemodynamic changes during oral ingestion of NG-monomethyl-L-arginine or NG-nitro-L-arginine methyl ester in conscious Brattleboro rats / S.M. Gardiner, A.M. Compton, T. Bennett et al. // Br. J. Pharmacol. 1990. - Vol. 101, № l.-P. 10-12.

172. Relative importance of enhanced glucose uptake versus attenuation of longchain acyl carnitines in protecting ischemic myocardium / Y.C. Hwang, S. Bakr, R. Ramasamy, S.R. Bergmann // Coronary. Artery. Dis. 2002. - Vol. 136. -. P.313-318.

173. Renaud, J.F. Internal pH, Na+, and Ca2+ regulation by trimetazidine during cardiac cell acidosis / J.F. Renaud. Cardiovasc Drugs. Ther. 1988. - Vol. 1(6). -P. 677-686.

174. Ritz, E. Angiotensin II and oxidative stress: an unholy alliance / E. Ritz, V. Haxsen // J. Am. Soc. Nephrol. 2003. - Vol. 14(11). - P. 2985 - 2987.

175. Role of superoxide in angiotensin II-induced but not catecholamine-induced hypertension / L. J0rn Bech, S. Rajagopalan, Z. Galis et al. // Circulation. 1997. -Vol. 95.-P. 588-593.

176. Role of superoxide in the depressed nitric oxide production by the endothelium of genetically hypertensive rats / S. Grunfeld, C.A. Hamilton, S. Mesaros et al. // Hypertension. 1995. - Vol. 26. - P. 854-857.

177. Rupp, H. The use of partial fatty acid oxidation inhibitors for metabolic therapy of angina pectoris and heart failure / H. Rupp, A. Zarain-Herzberg, B. Maisch // Herz. -2002. Vol. 27. - P. 621-636.

178. Schachinger, V. Prognostic impact of coronary vasodilator dysfunction on adverse long-term outcome of coronary heart disease / V. Schachinger, M.B. Britten, A.M. Zeiher // Circulation. 2000. - Vol. 101. - P. 1899-906.

179. Sjakste, N. An antiischemic drug for neurological indications / N. Sjakste, A. Gutcaits, I. Kalvinsh // CNS Drug. Reviews Neva Press, Branford, Connecticut.-2005.-Vol. 11, №2.-P. 151-168.

180. Some biochemical aspects of the protective effect of trimetazidine on rat cardiomyocytes during hypoxia and reoxygenation / E. Fantini, L. Demaison, E. Sentex et al. // J. Mol. Cell. Cardiol. 1994. - Vol. 26. - P. 949-958.

181. Somers, M.J. Reactive oxigen species and the control of vasomotor tone / M.J. Somers, D.J. Harrison // Curr. Hypertens. Rep. 1999. - Vol. 1. - P. 102-108.

182. Sowers, J.R. Hypertension, angiotensin II and oxidative stress / J.R. Sowers // N. Engl. J. Med. -2002. Vol. 346. - P. 1999-2001.

183. Stanley, W.C. Partial fatty acid oxidation inhibitors for stable angina / W.C. Stanley // Expert Opin Investig Drugs. 2002. - Vol.11(5). - P. 615-29.

184. Superoxide anion production is increased in a model of genetic hypertension : role of the endothelium / S. Kerr, M.J. Brosnan, M. Mclntyre et al. // Hypertension. 1999. - Vol. 33(6). - P. 1353 - 1358.

185. Superoxide generation by endothelial nitric oxide synthase: The influence of cofactors / J. Vasquez-Vivar, B. Kalyanaraman, P. Martasek et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95. - P. 9220-9225.

186. Tabbi-Anneni, I. Trimetazidine effect on phospholipid synthesis in ventricular myocytes: consequences in a-adrenergic signaling / I. Tabbi-Anneni, A. Lucien, A. Grynberg // Fundam. Clin. Pharmacol. 2003. - Vol. 17. - P. 51-59.

187. Taniyama, Y. Reactive oxygen species in the vasculature: molecular and cellular mechanisms / Y. Taniyama, K.K. Griendling // Hypertension. 2003. - Vol. 42. -P. 1075-1081.

188. The identification of acetyl-L-carnitylcholine in rat brain extracts and the comparison of its cholinomimetic properties with acetylcholine / E.A. Hosein, A. Kato, E. Vine, A.M. Hill // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1970. - Vol. 48. -P.709-722.

189. The impact of oral L-arginine supplementation on acute smoking-induced endothelial injury and arterial performance / G. Siasos, D. Tousoulis, C. Vlachopoulos et al. // Am. J. Hypertens. 2009. - Vol. 22(6). - P. 586-592.

190. The role of oxidative stress in the genesis of heart disease / P.K. Singal, N. Khaper, V. Palace et al. // Cardiovasc. Res. 1998. - Vol. 40. - P. 426-^32.

191. Thrombin stimulated reactive oxygen species production in cultured human endothelial cells / J.A. Holland, J.W. Meyer, M.M. Chang et al. // Endothelium. -1998. Vol. 6.-P. 113-121.

192. Touys, R.M. Oxidative stress and vascular damage in hypertension / R.M. Touys // Curr. Hypertens. Rep. 2000. - Vol. 2. - P. 98-105.

193. Trimetazidine improves endothelial dysfunction in chronic heart failure: an antioxidant effect / R. Belardinelli, M. Solenghi, L. Volpe, A. Purcaro // Europ. Heart J. 2007. - Vol. 28(9). - P. 1102-1108.

194. Trimetazidine improves post-ischemic recovery by preserving endothelial nitric oxide synthase expression in isolated working rat hearts / P. Di Napoli, S. Chierchia, A.A. Taccardi et al. // Nitric Oxide. 2007. - №16(2). - P. 228-36.

195. Trimetazidine increases phospholipid turnover in ventricular myocyte /' E. Sentex, J.P. Sergiel, A. Lucien, A. Grynberg // Mol. Cell. Biochem. 1997. -Vol.175.-P. 153-162.

196. Tselepis, A. Trimetazidine protects low-density lipoproteins from oxidation and cultured cells exposed to H202 from DNA damage / A. Tselepis, P.T. Doulias, E. Lourida//Free. Radic. Biol. Med. -2001. Vol. 30. - P. 1357-1364.

197. Vanhoutte, P.M. Endothelial dysfunction: the first step towards coronaiyarteriosclerosis // Cire J. 2009. - Vol. 73(4). - P. 495-601.

198. Vascular NADH/NADPH oxidase is involved in enhanced superoxide production in spontaneously hypertensive rats / G. Zalba, F.J. Beaumont, G. San José et al. // Hypertension. 2000. - Vol. 35. - P. 1055-1061.

199. Vascular superoxide production by NAD(P)H oxidase: association with endothelial dysfunction and clinical risk factors / T.J. Guzik, N.E. West, E. Black et al. // Cire. Res. 2000. - Vol. 86. - P. 85-90.

200. Vasoactive systems in L-NAME hypertension: the role of inducible nitric oxide synthase / O. Pechânovâ, Z. Dobesovâ, J. Cejka et al. // J. Hypertens. 2004. — Vol. 22, N 1. - P. 167-173.

201. Visek, W.J. Arginine needs, physiological state and usual diets. A réévaluation / W.J. Visek // J. Nutr. 1986. - Vol. 116. - P. 36-46.

202. Wu, G. Arginine metabolism: nitric oxide and beyond / G. Wu, S.M. Morris Jr. // Biochem. J. 1998. - Vol. 336. - P. 1-17.1. БЛАГОДАРНОСТИ

203. В заключении хочу выразить сердечную благодарность моему глубокоуважаемому научному руководителю доктору медицинских наук, профессору Покровскому Михаилу Владимировичу за внимание и постоянную помощь в работе над диссертацией.