Сравнительная характеристика субпопуляций лимфоцитов костного мозга при различных вариантах острых лейкозов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Колбацкая, Ольга Павловна

• Колбацкая, Ольга Павловна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Колбацкая, Ольга Павловна

ВВЕДЕНИЕ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 2. СУБПОПУЛЯЦИИ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОМЛ.

ГЛАВА 3. СУБПОПУЛЯЦИИ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОЛЛ.

ГЛАВА 4. СРАВНЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОМЛ И ОЛЛ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная характеристика субпопуляций лимфоцитов костного мозга при различных вариантах острых лейкозов»

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ.

Костный мозг, как известно, является гемопоэтическим органом. Вместе с тем в пуле лимфоцитов костного мозга присутствуют зрелые эффекторные клетки иммунной системы, способные осуществлять гуморальный и клеточный иммунный ответ, в терминах онкологии — иммунный надзор за опухолевым процессом. Костномозговые клетки-предшественницы являются мишенью для развития острых лейкозов. Процесс изначально развивается в костном мозге, поэтому представляет большой интерес изучение иммунной системы костного мозга при диагностике острого лейкоза для оценки возможных иммунодефицитных состояний, в условиях которых пролиферирует лейкозный клон.

Существуют единичные публикации о том, что у больных OJI повышено содержание NK-клеток по сравнению со здоровыми донорами в костном мозге при диагностике [Vidríales М.В. et al., 1993] и в периферической крови при достижении полной ремиссии [Torelli G.F. et al., 2005], а также о функциональной анергии цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и Т-хелперов костного мозга в остром периоде [Yotnda Р. et al., 1999]. Но в литературных источниках нет систематизированных данных об изменении относительного и абсолютного содержания субпопуляций Т, В, NK-клеток и CD56+T-KneTOK костного мозга больных ОЛ по сравнению с нормой, экспрессии на них молекул активации, а также о зависимости количества лимфоцитов от нозологического варианта ОЛ и фенотипических особенностей бластных клеток (экспрессии на них линейно не рестриктированных антигенов).

Существуют две основные причины практически полного отсутствия данных по субпопуляционному составу лимфоцитов костного мозга у больных острым лейкозом при диагностике:

1) с внедрением иммунофенотипической диагностики острых лейкозов основным объектом исследования являлись бластные клетки и основное внимание было уделено выделению бластных клеток и установлению иммуноподварианта лейкоза;

2)сложности разделения лимфоцитов и бластов иммуноцитофлюориметрическими методами.

В последние годы появилась возможность точной идентификации популяции бластных клеток и отграничения ее от популяции лимфоцитов иммуноцитофлюориметрическими методами. Для этих целей, помимо характеристик светорассеяния бластных клеток, необходимо учитывать экспрессию на них общелейкоцитарного антигена СБ45. Бластные клетки отличаются слабой экспрессией СВ45, а зрелые лимфоциты (Т, В, №С, СБ56+Т) напротив - выраженной экспрессией СБ45. Проведение этих исследований открывает перспективу изучения, с одной стороны, субпопуляций лимфоцитов костного мозга, а, с другой стороны, оценки взаимосвязи и различий между иммунофенотипическими характеристиками бластной и лимфоцитарной популяций клеток костного мозга больных ОЛ.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Провести сравнительную характеристику субпопуляций лимфоцитов костного мозга при различных вариантах острых лейкозов.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1) Изучить относительное и абсолютное содержание Т-, В- и ЫК-клеток в костном мозге больных острым миелоидным лейкозом при диагностике,

2) Изучить относительное и абсолютное содержание Т-, В- и МК-клеток в костном мозге больных острым лимфобластным лейкозом при диагностике,

3) Сравнить относительное и абсолютное содержание субпопуляций лимфоцитов костного мозга больных острым миелоидным лейкозом и острым лимфобластным лейкозом,

4) Сравнить относительное и абсолютное содержание субпопуляций лимфоцитов костного мозга при иммуноподвариантах острого лимфобластного лейкоза и морфоцитохимических вариантах острого миелоидного лейкоза,

5) Оценить субпопуляционный состав лимфоцитов костного мозга при диагностике острых лейкозов в зависимости от иммунофенотипа бластных клеток.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

На основании проведенного комплексного морфоцитохимического и иммунологического (трехцветная проточная цитометрия) анализа клеток костного мозга 124 больных острыми лейкозами получены новые научные данные. Установлены существенные различия в субпопуляционном составе лимфоцитов костного мозга больных OMJI и OJIJI: при OJIJI достоверно более высокое количество Т-хелперов, а при OMJI - Т-цитотоксических клеток, что отражается на значимо более высоком иммунорегуляторном индексе у больных OJIJI (0,7 ± 0,04 против 1,3 ± 0,2 р=0,005). Помимо этого, в лимфоцитарной популяции костного мозга больных OJIJI по сравнению с больными OMJI выше относительное и абсолютное количества CD19+CD5+iaieTOK, а также лимфоцитов, коэкспрессирующих маркеры CD38 и HLA-DR (р<0,05).

Впервые установлены особенности субпопуляционного состава лимфоцитов костного мозга в зависимости от линейной принадлежности бластных клеток OMJI и иммуноподварианта OJIJI. При гранулоцитарных острых лейкозах повышено количество Т-хелперов (CD45+CD4+) в сравнении с лейкозами моноцитарной дифференцировки (М4 и М5 по FABклассификации, р=0,005). В пределах В-линейных ОЛЛ выявлено, что субпопуляционный состав лимфоцитов взаимосвязан со степенью дифференцировки лейкоза: процент С045+СБЗ+ Т-клеток выше у больных пре-пре-В-иммуноподвариантом по сравнению с больными пре-В-иммуноподвариантом (р=0,016). При В-линейных острых лимфобластных лейкозах отмечено существенное преобладание зрелых Т-лимфоцитов (СВ45+СЭЗ+) в сравнении с Т-линейными ОЛЛ (р=0,008).

Впервые нами было выявлено, что при диагностике острых лейкозов взрослых субпопуляционный состав лимфоцитов взаимосвязан с иммунофенотипическими особенностями бластов. Это обнаружено в результате сравнения количества лимфоцитарных популяций как в пределах каждого нозологического варианта ОЛ, так и между ОМЛ и ОЛЛ. Так, при НЬЛ-БЯ-негативных ОМЛ в костном мозге наблюдается достоверно более высокое содержание СБЗ+Т-клеток в сравнении с НЬЛ-БЯ-негативными ОЛЛ (р=0,016).

В случае С07-позитивных ОМЛ достоверно выше относительное содержание СЭ5+ и СБ8+ Т-клеток, а также активированных СБ38+ лимфоцитов (р<0,05) в сравнении с СВ7-негативными ОМЛ; при коэкспрессии на миелобластах ЛЬА-БЯ-антигена выше относительное количество активированных лимфоцитов (НЬА-Б11+ и С038+), при коэкспрессии СБ4-антигена выше относительное и абсолютное количества СБЗ8+лимфоцитов (р<0,05).

Относительное содержание СБЗ+ и СБ5+Т-клеток выше в случае НЬА-БК-позитивных ОЛЛ, чем в отсутствие экспрессии НЬЛ-БЯ-антигена, при коэкспрессии С056-антигена на лимфобластах выше абсолютное количество Т-хелперов (р=0,034), в отсутствие коэкспрессии миелоидного маркера СБ 13 выше абсолютные количества СБ5+, СБ4+ и СБ8+Т-клеток (р<0,05). Напротив, СЭЗ 3-позитивные ОЛЛ характеризовались более высоким относительным содержанием СЭ7+ Т-клеток и СБ 19+С05+лимфоцитов (р<0,05).

Это дает новые факты к пониманию патогенеза острых лейкозов с точки зрения взаимодействия бластных клеток с иммунной системой костного мозга.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Результаты научного исследования, проведенного в ходе выполнения данной диссертационной работы, позволяют более точно оценить состав субпопуляций лимфоцитов костного мозга у больных острыми лейкозами. Выявление качественных различий между субпопуляциями лимфоцитов при острых миелоидных лейкозах и острых лимфобластных лейкозах позволяет оценить особенности эффекторных субпопуляций лимфоцитов у этих больных. Это, в свою очередь, способствует более углубленному пониманию механизмов противоопухолевого иммунитета у больных ОЛ, что может способствовать разработке протоколов иммунотерапии и иммунокоррекции при лечении ОЛ.

Непосредственное практическое значение имеет доказанная возможность проточно-цитометрического определения процентного содержания лимфоцитов костного мозга для последующего их анализа в абсолютных цифрах. Изучены и количественно подтверждены возможности разграничения бластной и лимфоцитарной популяций клеток костного мозга иммуноцитофлюориметрически на основе характеристик рассеяния света лазерного луча клетками и уровней экспрессии ими общелейкоцитарного антигена СБ45. В ходе работы при цитометрическом анализе костного мозга выявлены случаи В-линейных и Т-линейных ОЛЛ, когда бластную и лимфоцитарную популяции было невозможно разграничить по уровню экспрессии СБ45, так как бласты экспрессировали этот антиген на высоком уровне. Этот результат свидетельствует о необходимости разработки новых методов гейтинга для анализа лимфоцитарной популяции подобных случаев.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследуемую группу составили 124 больных, из них 57 больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) и 67 больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ). У всех больных диагноз острого лейкоза был установлен впервые, без предшествующего химиолучевого лечения или наличия миелодиспластического синдрома. Диагноз всем больным был установлен в лаборатории иммунологии гемопоэза (руководитель - д.м.н. проф. Н.Н.Тупицын, морфоцитохимическая диагностика - д.м.н. проф. М.А.Френкель) РОНЦ имени Н.Н.Блохина РАМН (директор - академик РАН и РАМН М.И.Давыдов) за период с 2004 по 2010 годы.

Среди обследованных больных в группе ОМЛ было 26 (45,6%) женщин и 31 (54,4%) мужчина, средний возраст у больных ОМЛ - 46,7 года. В группе ОЛЛ также было больше мужчин - 42 (62,7%), чем женщин - 25 (37,3%), средний возраст больных ОЛЛ составляет 33,3 года.

Морфоцитохимическое и иммунофенотипическое исследование бластов проводились в пунктатах костного мозга. Взятие костного мозга в количестве 0,5мл осуществлялось в пробирки УасЩатег с сухим ЭДТА. Из доставленных пунктатов готовили мазки для морфологического и цитохимического исследований, производился подсчет миелокариоцитов и иммунофенотипирование. Окраска морфологических препаратов проводилась по методу Паппенгейма.

Оценка показателей количества миелокариоцитов (клеточности) костного мозга проводилась в соответствии с данными гематологических норм (А.И.Воробьев и соавт., 2003г., Луговская С.А.и соавт., 2007г.). Подсчет клеточности костного мозга проводился под микроскопом при использовании камеры Горяева, а также при использовании автоматического анализатора клеток крови ЬАВГХ. Содержание миелокариоцитов выражалось в количестве клеток х 109/л.

Подсчет миелограммы проводился двумя морфологами (по 250 клеток) при иммерсионной микроскопии препаратов костного мозга.

При цитохимическом исследовании определяли активность в бластных клетках следующих ферментов: миелопероксидазы (МПО), липидов в реакции с Суданом черным Б, а-нафтил-ацетат-эстеразы (НЭ) самостоятельно и в реакции с ингибированием фторидом натрия (NaF), PAS-положительнош вещества в диффузной/диффузно-гранулярной или гранулярной форме. Количество бластов с положительной цитохимической реакцией оценивалось в процентном количестве.

Диагноз OMJI у всех больных устанавливался на основании критериев ВОЗ-классификации (2001г.), число бластных клеток во всех случаях превышало 20%, таблица 1.

Иммунофенотипирование у всех больных проводилось методом прямой иммунофлюоресценции с использованием тройной флюоресцентной метки. Панель моноклональных антител (МКА) включала антитела к общелейкоцитарному антигену CD45, стволовоклеточному антигену CD34, линейно-нерестриктированным антигенам CD38 и HLA-DR, антигенам миелоидной линии дифференцировки CD13 и CD33, моноцитарной - CD14 и CD64, эритроидной - гликофорину A (GlyA), мегакариоцитарной - CD61, общему антигену острого лимфобластнош лейкоза CD10 (CALLA), В-линейным антигенам (CD19, CD20, CD22, CD23), Т-линейным антигенам (CD3, CD5, CD7, CD4, CD8) и NK-клеточному антигену CD56. Маркер расценивался как положительный при обнаружении его более чем на 10% бластов для CD34 и более чем на 20% бластов для остальных антигенов. Для установления варианта острого лейкоза (OMJI и OJIJI) использовалась одна и та же панель МКА, за исключением того, что для диагностики пре-Т варианта OJIJ1 использовался кортико-тимоцитарный маркер CDla. Панели MICA и количества обследованных больных OMJI и OJIJI представлены в таблицах 2 и 3.

Анализ данных иммунофенотипирования проводился методом проточной цитофлуориметрии на приборе FACScan (Becton Dickinson, США). Собиралось не менее 10 ООО событий.

Установление гейта бластных клеток проводилось на основании характеристик светорассеяния в метке с общелейкоцитарным антигеном CD45 (Иммунодиагностика лейкозов человека. Пособие для врачей. Н.Н.Тупицын и соавт., 2003г.). Бластные клетки характеризуются более слабой экспрессией CD45 по сравнению со зрелыми лимфоцитами и созревающими/зрелыми клетками миелопоэза.

Таблица 1. Распределение больных OMJI по FAB-вариантам.

Вариант Число больных

Абс. Отн. (%)

МО (миелобластный с минимальной дифференцировкой) 5 8,8

М1 (миелобластный без созревания) 21 36,8

М2 (миелобластный с созреванием) 7 12,3

МЗ (промиелоцитарный) 7 12,3

М4 (миеломонобластный) 8 14,0

М4эоз.(миеломонобластный с эозинофилией) 4 7,0

М5а (монобластный без созревания) 2 3,5

М5б (монобластный с созреванием) 0 0

Мб (эритробластный) 2 3,5

М7 (мегакариобластный) 1 1,8

Всего 57 100

Таблица 2. Панель МКА для диагностики ОМЛ и количества обследованных больных.

Антигены Число обследованных больных

Абс. Отн. (%)

Стволовоклеточный CD34 57 100

Общелейкоцитарный CD45 57 100

Линейно не рестриктированные CD38 56 98,2

HLA-DR 56 98,2

Миелоидные CD13 57 100

CD33 57 100

Моноцитарные CD14 13 23,4

CD64 55 96,4

Общий антиген ОЛЛ (CALLA) CD10 57 100

В-линейные CD19 57 100

CD20 57 100

CD22 37 64,9

CD23 49 85,9

Т-линейные CD3 56 98,2

CD5 57 100

CD7 57 100

CD4 57 100

CD8 57 100

NK-клеточный CD56 56 98,2

Диагноз ОЛЛ устанавливался на основании критериев, изложенных в главе "Иммунодиагностика лейкозов и лимфом" (Н.Н.Тупицын, глава в руководстве "Онкогематология", 2003г.).

Таблица 3. Панель МКА для диагностики ОЛЛ и количества обследованных больных.

Антигены Число обследованных больных

Абс. Отн. (%)

Стволовоклеточный CD34 67 100

Общелейкоцитарный CD45 67 100

Линейно не рестриктированные CD38 62 92,5

HLA-DR 67 100

Миелоидные CD13 66 98,5

CD33 66 98,5

Моноцитарные CD14 13 19,4

CD64 60 89,6

Общий антиген ОЛЛ (CALLA) CD10 67 100

В-линейные CD19 67 100

CD20 67 100

CD22 58 86,6

CD23 26 38,8

Т-линейные CD3 65 97,0

CD5 67 100

CD7 67 100

CD4 60 89,6

CD8 60 89,6

NK-клеточный CD56 56 83,6

Кортико-тимоцитарный CDla 32 48,0

Таблица 4. Распределение больных ОЛЛ по иммуноподвариантам.

Вариант Число эольных

Абсолютное Относительное (%)

Про-В 6 9

Пре-пре-В 28 42

Пре-В 1 1,5

Пре-Т 32 47,5

Всего 67 100

Проточно-цитометрическое определение содержания лимфоцитов в пунктатах костного мозга больных ОМЛ.

При морфологическом подсчете лимфоцитов в костном мозге больных ОМЛ при диагностике и часто тотальном бластозе достоверно установить их процентное содержание затруднительно. Это обусловлено тем, что обычно подсчитывается 500 миелокариоцитов (250+250). Для точного установления числа лимфоцитов в костном мозге в случае тотального бластного поражения возможно использование метода проточной цитометрии, позволяющего анализировать десятки тысяч миелокариоцитов. При морфологическом исследовании костного мозга обычно подсчитывается 500 клеток. В пунктатах больных острым лейкозом часто отмечается выраженное угнетение нормального гемопоэза, и количество лимфоцитов в миелограмме величиной в 0,1-0,2% математически соответствует 1-2 клеткам на 1000 подсчитанных клеток. При анализе пунктата проточно-цитометрический метод позволяет проанализировать до 10000 событий в целом, и количество лимфоцитов 0,1-0,2%, подсчитанное цитометрически, действительно соответствует 1-2 клеткам на 1000 проанализированных клеток и поэтому является более достоверным.

Цитометрический процент лимфоцитов в пунктатах больных ОМЛ был подсчитан следующим образом (рис.1):

Рис.1 .Иммунофенотипирование костного мозга больной П.Е, 23 лет, (диагноз: ОМЛ, МЗ-подвариант):

- гейт лейкоцитов, - гейт лимфоцитов, Ю - ядерные эритроидные клетки, эритроциты, тромбоциты, дебрис. По данным цитометрии лимфоцитов (в пределах лейкоцитов) - 3,2%, процент клеток в гейте КЗ -8,3% (по данным морфологии эритроидный росток - 8,0%). Процент лимфоцитов по данным морфологии -2,2%. Цитометрически определяемый процент лимфоцитов составил - 3,13% (пояснения в тексте).

При выделении лейкоцитарного гейта на основании экспрессии общелейкоцитарного антигена С045 (гейт ИЛ) дополнительно выделялся лимфоцитарный гейт (112). Далее проводилась коррекция с учетом выраженности эритроидного ростка (по данным миелограммы). Процентное количество лимфоцитов было подсчитано по формуле:

СО 45 РЕР? СР (5) УЭ БЭС-НеДО (2)

Ь=(Х:У)х100%, где Ь - процент лимфоцитов в лейкоцитарном гейте, X - число клеток в лимфоцитарном гейте, У - число клеток в лейкоцитарном гейте.

Затем по показателям миелограммы рассчитано процентное количество неэритроидной фракции: К = (100% клеток миелограммы - % эритроидного ростка): 100, и результат (А) получен по формуле: А = L х К.

Пример гейтинга по экспрессии CD45 на бластах и лимфоцитах.

Прежде всего следует отметить, что на основании гейтинга по экспрессии CD45 бластная и лимфоцитарная популяции четко разделялись во всех случаях OMJI (см.рис. 2). В таблице 5 приведено сравнение количества клеток с Т-лимфоцитарными маркерами в бластном и лимфоцитарном гейтах; на основании полученных данных можно утверждать, что в лимфоцитарном гейте не было примеси бластов.

Таблица 5. Сравнение количества клеток с Т-лимфоцитарными маркерами (CD5, CD7, CD4 и CD8) в бластном и лимфоцитарном гейтах (больной З.В., 60 лет, OMJI МО-вариант).

Маркер Властный гейт Лимфоцитарный гейт

CD7 1,2 69,4

CD5 1,2 67,2

CD4 2Д 34,0

CD8 1,2 40,6

СР45РегСР

Рис.2 Пример гейтинга по экспрессии антигена С045 на бластах и лимфоцитах костного мозга больного З.В., 60 лет, (ОМЛ, МО-вариант). Гейт Ш-лимфоциты, гейт Я2-бласты, гейт 1?3-гранулоциты.

Все цитометрические данные были проанализированы на персональном компьютере с использованием программы WinMDI 2.8. Статистическая обработка данных проведена с помощью пакета программ SPSS 15 и включала корреляционный анализ, сравнение средних. При определении достоверности параметрических признаков применялся критерий Стьюдента. Сравнительный анализ непараметрических данных производился при помощи построения таблиц сопряженности признаков (с использованием критерия %2).

Заключение диссертации по теме «Онкология», Колбацкая, Ольга Павловна

выводы

1) На основании проведенного комплексного морфоцитохимического и иммунологического (трехцветная проточная цитометрия) исследования у 124 больных установлено, что острые лейкозы взрослых характеризуются специфическими для каждой нозологической формы изменениями субпопуляционного состава лимфоцитов костного мозга при диагностике заболевания.

2) Субпопуляционный состав лимфоцитов костного мозга больных острым лимфобластным лейкозом характеризуется достоверно более высокими уровнями зрелых Т-хелперных клеток (СБ45+СБ4+) в сравнении с уровнями этих клеток у больных острым миелоидным лейкозом (р=0,011).

3) В костном мозге больных острым миелоидным лейкозом присутствуют зрелые цитотоксические клетки (СБ45+СБ8+) в значительно большем количестве по сравнению с числом этих клеток у больных острым лимфобластным лейкозом (р=0,01).

4) Иммунорегуляторный индекс (соотношение СЭ4/С08) лимфоцитов костного мозга значимо более высокий у больных острым лимфобластным лейкозом, чем у больных острым миелоидным лейкозом (1,3 ± 0,2 и 0,7 ± 0,1, р=0,005).

5) Выявлена взаимосвязь количества лимфоцитов-эффекторов костного мозга с линейной коммитированностью бластных клеток острых миелоидных лейкозов: содержание Т-хелперов и иммунорегуляторный индекс СБ4/СБ8 значимо более высокие при гранулоцитарных лейкозах в сравнении с лейкозами моноцитарной дифференцировки (р=0,005 и р=0,017 соответственно).

6) Степень активации лимфоцитов костного мозга взаимосвязана с линейной коммитированностью бластных клеток острых миелоидных лейкозов: процент лимфоцитов, коэкспрессирующих маркеры СБ38 и НЬА-ОЯ, достоверно выше при моноцитоидных ОМЛ, чем при гранулоцитарных (р=0,035).

7) Отмечается зависимость состава Т-лимфоцитов костного мозга от линейной принадлежности бластных клеток ОЛЛ: содержание зрелых Т-лимфоцитов (СБ45+СБЗ+) значимо выше при лейкозах из В-линейных предшественников в сравнении с лейкозами из Т-линейных предшественников (р=0,008).

8) Иммунофенотипические особенности бластных клеток взаимосвязаны с субпопуляционным составом лимфоцитов костного мозга больных острыми лейкозами: при ША-БЯ-негативных острых миелоидных лейкозах наблюдается достоверно более высокое содержание СБЗ+Т-клеток в сравнении с ША-БЯ-негативными острыми лимфобластными лейкозами — 75,6 ± 3,9% и 55,2 ± 7,7% (р=0,016).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Колбацкая, Ольга Павловна, 2011 год

1. Владимирская, Е.Б. Биологические основы лейкемогенеза // «Механизмы кроветворения и лейкемогенеза» — Издательство «Династия» 2007. — С.67-85.

2. Владимирская Е.Б. Кроветворение и его регуляция // «Механизмы кроветворения и лейкемогенеза». Издательство «Династия». - 2007. -С.34-59.

3. Грибова И.А., Воробьев П.А., Гематологическая норма. В руководстве по гематологии под ред.акад. А.И.Воробьева. Изд.4-е, С.61-63. Издательство «Ньюдиамед» М. 2007.

4. Дризе Н.И. «Различия между лейкозными и нормальными кроветворными стволовыми клетками» // Онкогематология. 2006. -№1-2. - С.5-9.

5. Купрышина H.A. Иммунофенотипическая и морфоцитохимическая характеристика острых миелоидных лейкозов с экспрессией антигена стволовых клеток CD34. // Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва. -2006.

6. Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е., Долгов В.В. Лабораторная гематология. // «Издательство Триада» 2006.

7. Савченко В.Г., Паровичникова E.H. Острые лейкозы // «Клиническая онкогематология». 2007.- Медицина. - С.409-501.

8. Тупицын H.H. Структура и функции иммунной системы человека // «Клиническая Онкогематология» 2007.- Медицина. - С. 46-65.

9. Френкель М.А., Чигринова Е.В., Купрышина H.A., Павловская А.И. Диагностическое значение исследования отпечатков трепанобиоптатов костного мозга больных неходжкинскими лимфомами. // Клин. Лаб. Диагност.- 2007. №11. - С.44-48.

10. Чертков И.Д., Дризе Н.И. Стволовые клетки в кроветворении // «Клиническая онкогематология» 2007,- Медицина. - С. 12-32.

11. Юрковский О.И., Грицюк A.M. «Общеклинические анализы в практике врача». М.1997.

12. Abbas А.К., Murphy К.М., Sher A. Functional diversity of helper T lymphocytes. // Nature. 1997. - V.383. - P.787.

13. Alderson M.R., Armitage R.J., Maraskovsky E., Tough T.W., Roux E., Schooley K., Ramsdell F., Lynch D.H. Fas transduces activation signals in normal human T lymphocytes. // J.Exp.Med. 1993. - V.178. - P.2231.

14. Andreoni C., Rigal D., Bonnard M. and Bernaud J. Phenotypic analysis of a large number of normal human bone marrow samples by flow cytometry. // Blut. 1990. - V.61. - P. 271-277.

15. Andersen M.H., Shrama D., thor Straten P. and Becker J.C. Cytotoxic T cells. // J.Invest.Dermatol. 2006. - V.126. - P.32-41.

16. Appelbaum F.R. New targets for therapy in acute myeloid leukemia. // Leukemia. 2003. - V.17. - P.492-495.

17. Bain В .J., Clark D.M., Lampert I. A., Wilkins B.S., Bone marrow pathology // Blackwell Science. Third edition. - 2001. - P. 1-50.

18. Bauer S., Groh V., Wu J.et.al. Activation of NK cells and T cells by NKG2D, a receptor for stress-inducible MICA. // Science. 1999. - V.285. - P.727-729.

19. Becker J.C., Czerny C., Brocker E.B. Maintenance of clonal anergy by endogenously produced IL-10. // Int.Immunol. 1994.- V.6. - P. 1605.

20. Bendall L.J., Kortlepel K., Bradstock K.F.,,Gottlieb D.J. Natural killer cells adhere to bone marrow fibroblasts and inhibit adhesion of acute myeloid leukemia cells. // Leukemia. 1995. - V.9- P.999-1005.

21. Biagi E., Marin V., Giordano Attianese G.M.P., Dander E., D'Amico G., Biondi A. Chimeric T-cell receptors: new challenges for targeted immunotherapy in hematologic malignancies. // Haematologica. 2007. -V.92(03).-P,381-388.

22. Blakely A., Gorman K., Ostergaard H., et.al. Resistance of cloned cytotoxic T lymphocytes to cell-mediated cytotoxicity. // J.Exp.Med. 1987. - V.166. -P. 1970.

23. Bonnet D., Dick J.E. Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell. // Nat. Med. -1997. V.3. - P.730-737.

24. Bottino C., Moretta L., Pende D., Vitale M., Moretta A. Learning how to discriminate between friends and enemies: a lesson from natural killer cells. // Mol.Immunol. 2004. - V.41. - P.569-575.

25. Bordignon C., Carlo-Stella C., Colombo M.P., De Vincentiis A., Lanata L., Lemoli R.M., Locatelli F., Olivieri A., Rondelli D., Zanon P., Tura S. Cell therapy: achievements and perspectives. // Haematologica. 1999. - V.84. -P. 1110-1149.

26. Brown V.I., Seif A.E., Reid G.S.D., Teachey D.T., Grupp S.A. Novel molecular and cellular therapeutic targets in acute lymphoblastic leukemia and lymphoproliferative disease. // Immunol. Res. 2008. - 42(1-3). - P.84-105.

27. Buggins A.G.S., Arno M.J., Milojkovic D.et.al. Characterization of an AML-derived immunomodulatory factor(s) that inhibit T cell activation and the signal transduction pathways involved. (Абстракт) // Blood. 2000. -V.96.-P.501a.

28. Buggins A.G.S., Lea N., Gaken J.et.al. Effect of costimulation and the microenvironment on antigen presentation by leukemic cells. // Blood. -1999. V.94. - P.3479-3490.

29. Caligiuri MA. Human natural killer cells. // Blood. 2008. - V.112. - №3. -P.461-469.

30. Caligiuri M.A., Velardi A., Scheinberg D.A., Borrello I.M. Immunotherapeutic approaches for hematologic malignancies. // Hematology. 2004. - P.337.

31. Cardoso A.A., Seamon M.J., Afonso H.M., Ghia P., Boussiotis V.A., Freeman G.J., Gribben J.G., Sallan S.E., Nadler L.M. Ex vivo generation of human anti-pre-B leukemia-specific autologous cytolytic T cells. // Blood. -1997. V.90. - №2. - P.549-561.

32. Cardoso A.A., Schultze J.L., Boussiotis V.A., Freeman G.J., Seamon M.J., LaszloS., Billet A., Sallan S.E., Gribben J.Gand Nadler L.M. Pre-B acute lymphoblastic leukemia cells may induce T-cell anergy to alloantigen. // Blood. 1996. - V.88. - P.41-48.

33. Chen L., Linsley P.S., Hellstrom K.E. Costimulation of T-cells for tumor immunity. // Immunol.Today. 1993. -V14. -P.483.

34. Clark P., Normansell D.E., Innes D.J. and Hess C.E. Lymphocyte subsets in normal bone marrow. //Blood. 1986. - V.67. P. 1600-1606.

35. Cooper M.A., Fehniger T.A., Caliguri M.A. The biology of human natural killer cell subsets. // Trends Immunol. 2001. - V.22. - P.633-640.

36. Crans H.N. and Sakamoto K.M. Transcription factors and translocations in lymphoid and myeloid leukemia. // Leukemia. 2001. - V.15. - P.313-331.

37. Dean M., Fojo T., Bates S. Tumor stem cells and drug resistance. // Nat.Rev.Cancer. 2005. - V.5. - P.275-284.

38. Delespesse G, Ohshima Y., Shu U., Yang L.-P., Demeure C., Wu C.-Y., Byun D.-G., Sarfati M. Differentiation of naive human CD4 T cells into Th2/Thl effectors. //Allergol.Int. 1996. - V.46. - P.63.

39. Demanet C., Mulder A., Deneys V., Worsham M.J., Maes P., Claas F.H., et.al. Down-regulation of HLA-A and HLA-Bw6, but not HLA-Bw4, allospecificities in leukemic cells: an escape mechanism from CTL and NK attack? // Blood. 2004. - V.103. - P.3122-3130.

40. Djeu J.Y., Jiang K. and Wei S. A view to a kill: signals triggering cytotoxicity. // Clin.Cancer Res. 2002. - V.8. - P.636-640.

41. Duval M., Yotnda P., Bensussan A., Oudhiri N., Guidal C., Rohrlich P., Boumsell L., Grandchamp В., Vilmer E. Potential antileukemic effect of gamma-delta T cells in acute lymphoblastic leukemia. // Leukemia. 1995. - V.9. -P.863-868. (абстракт).

42. Elisseeva O.A., Oka Y., Tsuboi A., Ogata K., Wu F., Kim E.H. et.al. Humoral immune responses against Wilms tumor gene WT1 product in patients with hematopoietic malignancies. //Blood. 2002. - V.99 - P. 3272-3279.

43. Elkins W.L., Pickard A., Pierson G.R. Deficient expression of class-I-HLA in some cases of acute leukemias. // Cancer Immunol.Immunother.- 1984. -V.18(2).- P.91-100.

44. Ensslin A.S., Formby B. Comparison of cytolytic and proliferative activities of human gamma-delta and alpha-beta T cells from peripheral blood against various human tumor cell lines. // F. Natl. Cancer Inst. -1991. V.83. -P. 1564-1569.

45. Exley M., Garcia J., Balk S.P., Porcelli S. Requirements for CDld recognition by human invariant Va24+CD4-CD8- T cells. // J.Exp.Med. -1997. V.186. - P.109-120.

46. Fukahori S. Quantification of WT1 mRNA by competitive NASBA in AML patients. // Kurume Med.J. 2001. - V.48. - P. 129-134.

47. Gaiger A., Carter L., Greinix H., Carter D., McNeill P.D., Houghton R.L.et.al. WT1-specific serum antibodies in patients with leukemia. // Clin.Cancer Res. 2001.- V7.(Suppl). - P.761-765.

48. Gaiger A., Reese V., Disis M.L., Cheever M.A. Immunity ti WT1 in the animal model and in patients with acute myeloid leukemia. // Blood. -2000. V.96. -P.1480-1489.

49. Galea-Lauri J. Immunological weapons against acute myeloid leukaemia. // Immunology. 2002. - V.107. - P.20-27.

50. Gansuvd B., Hagihara M., Yu Y., Inoue H., Ueda Y., Tsuchiya T.et.al.Human umbilical cord blood NKT cells kill tumors by multiple cytotoxic mechanisms.// Hum.Immunol. 2002. - V.63. - P.164-175.

51. Gao L., Bellantuono I., Elsasser A., Marley S.B., Gordon M.Y., Goldman J.M. and Stauss H.J. Selective elimination of leukemic CD34+ progenitor cells by cytotoxic T lymphocytes specific for WT1. // Blood. 2000. -V.95. - №7. - P.2198-2203.

52. Gimmi C.D., Freeman G.J., Gribben J.G., Gray G, Nadler L.M. Human T-cell clonal anergy is induced by antigen presentation in the absence of B7 costimulation. // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 1993. - V.90. - P.6586.

53. Girardi M., Oppenheim D.E., Steele C.R.et.al. Regulation of cutaneous malignancy by gamma-delta T cells. // Science. 2001. - V.294. - P.605-609.

54. Gorman K., Liu C.C., Blakely A., Young J.D., Torbett B.E., Clark W.T. Cloned cytotoxic T lymphocytes as target cells. I I. Polarity of lysis revisited. //J.Immunol. 1988. - V. 141. -P.2211.

55. Grimwade D.and Enver T. Acute promyelocytic leukemia: where does it stem from? // Leukemia. 2004. - V.18. - P.375-384.

56. Groh V., Rhinehart R., Secrist H., Bauer S., Grabstein K.H., Spies T. Broad tumor-associated expression and recognition by tumor-derived gamma-delta T cells of MICA and MICB. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - V.96. -P.6879-6884.

57. Groh V., Steinle A., Bauer S., Spies T. Recognition of stress-induced MHC molecules by intestinal epithelial gamma-delta T cells. // Science. 1998. -V.279- P.1737-1740.

58. Groh V., Wu J., Yee C., Spies T. Tumor-derived soluble MIC ligands impair expression of NKG2D and T-cell activation. // Nature. 2002. - V.419. -P.734-738.

59. Guan Y., Gerhard B., Hogge D.E. Detection, isolation and stimulation of quiescent primitive leukemic progenitor cells from patients with acute myeloid leukemia (AML). // Blood. 2003. - V.101. - P.3142-3149.

60. Guan Y., Hogge D.E. Proliferative status of primitive hematopoietic progenitors from patients with acute myelogenous leukemia (AML). // Leukemia. 2000. - V.14. - P.2135-2141.

61. Harding F.A., Arthur J.G.M., Gross J.A., Raulet D.H., A J.P. CD28-mediated signalling co-stimulates murine T-cells and prevents induction of anergy in T-cell clones. // Nature. 1992. - V356. - P.607.

62. Hayday A.C. yS Cells: a right time and a right place for a conserved third way of protection. //Annu. Rev. Immunol. 2000. - V. 18. - P.975-1026.

63. Henkart P.A. Lymphocyte-mediated cytotoxicity: two pathways and multiple effector molecules. // Immunity. 1994. - V.l. - P.343.

64. Heslop H.E., Stevenson F.K., Molldrem J.J. Immunotherapy of hematologic malignancy. // Hematology. 2003. - P.331-349.

65. Hoelzer D., Gokbuget N., Ottmann O., Pui C.-H., Relling M.V., Appelbaum F.R., van Dongen J.J.M., Szczepanski T. Acute Lymphoblastic Leukemia. // Hematology.-2002.-P.162-192.

66. Hope K.J., Jin L., Dick J.E., Acute myeloid leukemia originates from a hierarhy of leukemic stem cell classes that differ in self-renewal capacity. // Nat.Immunol.-2004.-V.5. P.738-743.

67. Hung K., Hayashi R., Lafond-Walker A., Lowenstein C., Pardoll D., Levitsky H. The central role of CD4+ T cells in the antitumor immune responce. // J.Exp.Med. 1998. - V.188. - №12. - P.2357-2368.

68. Igney F.H.and Krammer P.H. Immune escape of tumors: apoptosis resistance and tumor counterattack. // J.Leukoc.Biol. 2002. - V.71. - P.907-920.

69. Imai C., Iwamoto S., Campana D. Genetic modification of primary natural killer cells overcomes inhibitory signals and induces specific killing of leukemic cells. // Blood. 2005. - V.106. - №1. - P.376-383.

70. Janeway A.C., Travers P., Walport M., Capra J.D. Immunobiology. // Garland publishing. fourth edith. - 1999.

71. Jiang S.B., Ojcius D.M., Young J.D. Perforin binding to cells and lipid membranes determined by a simple competition assay. // J.Immunol.Methods. 1990. - V.126. - P.29.

72. Jiang S.B., Ojcius D.M., Persechini P.M., Young J.D., Resistance of lymphocytes to perforin-mediated killing: inhibition of perforin binding activity by surface membrane proteins. // J.Immunol. 1990. - V.144. -P.998.

73. Ju S-T., Cui H., Panka D.J., Ettinger R., Marshak-Rothstein A. Participation of target Fas protein in apoptosis pathway induced by CD4+ Thl and CD8+ cytotoxic T cells. // Proc Natl Acad Sci USA. 1994. -V.91. -P.4185.

74. Kagi D., Ledermann В., Burki K., Zinkernagel R.M., Hengartner H. Molecular mechanisms of lymphocyte-mediated cytotoxicity and their role in immunological protection and pathogenesis in vivo. // Annu Rev. Immunol. 1996. - V.14. - P.207.

75. Kennedy J.A.and Barabe F. Investigating human leukemogenesis: from cell lines to in vivo models of human leukemia.// Leukemia. 2008. - V.22. - Р.2029-2040.(абстракт).

76. Konopleva M., Zhao S., Hu W., et.al. The anti-apoptotic genes Bcl-X(L) and Bcl-2 are over-expressed and contribute to chemoresistance of non-proliferating leukaemic CD34+ cells. // Br.J.Hematol. 2002. - V.118. -P.521-534.

77. Lamb L.S.Jr., Lopez R.D. yS T cells: a new frontier for immunotherapy? // J.BBMT. -2005.- V. 11. P. 161 -168.

78. Lamb L.S.Jr., Musk P., Ye Z.et.al. Human gamma-delta (+) T lymphocytes have in vitro graft vs leukemia activity in the absence of an allogeneic response. // Bone Marrow Transplant. 2001. - V.27. - P.601-606.

79. Lehmann C., Zeis M., Schmitz N., and Uharek L. Impaired binding of perforin on the surface of tumor cells is a cause of target cell resistance against cytotoxic effector cells. // Blood. 2000. - V.96. - №2. - P.594-600.

80. Lee P.T., Benlagna K., Teyton L., Bendelac A. Distinct functional lineages of human V(a) 24 natural killer T cells. // J.Exp.Med. 2002. -V.195. - P.637-641.

81. Leung W. Immunotherapy in acute leukemia. // Semin. Hematol. 2009.- 46(1). P.89-99.

82. Linn Y.C., Lau L.C., Hui K.M. Generation of cytokine-induced killer cells from leukaemic samples with in vitro cytotoxicity against autologous and allogeneic leukaemic blasts. // Br.J.Hematol. 2002. - V.l 16. - P.78-86.

83. Lotzova E., Savary C.A., Herbermann R.B. Inhibition of clonogenic growth of fresh leukemia cells by unstimulated and IL-2-stimulated NK-cells of normal donors. // Leuk. Res. 1987. - V.ll. - P.1059-1066.

84. Lowdell M.W., Craston R., Samuel D., Wood M.E., O'Neill E. Evidence that continued remission in patients treated for acute leukaemia is dependent upon autologous natural killer cells. // Br.J.Immunol. 2002. -V.l 17. -P.821-827.

85. Lowdell M.W., Koh M.B.C. Immunotherapy of AML: future directions. // J.Clin.Pathol. 2000. - V.53. - P.49-54.

86. Lowin B., Hahne M., Mattmann C., Tschopp J. Cytolytic T-cell cytotoxicity is mediated through perforin and Fas lytic pathways.// Nature. -1994.-V.370.-P.650.

87. Lunberg A., Gribben J., Lazo S., Nadler L. Expression and induction of B7 on leukemic cells isolated from patients with hematologic malignancies. // Blood. 1994. - V.82. - P.123a.

88. Lynch D., Ramsdell F., Alderson M. Fas and FasL in the homeostatic regulation of immune responses. // Immunol.Today. 1995. - V.16. - P.569.

89. Maeda T., Yamada Y., Moriuchi R., Sugahara K., Tsuruda K., Joh T., Atogami S., Tsukasaki K., Tomonaga M., Kamihira S. Fas gene mutation in the progression of adult T cell leukemia. // J.Exp.Med. 1999. - V.l89. -P.1063-1071.

90. Mayers S., Tongio M.M., Falkenrodt A., Pfeiffer В., Bergerat J.P. Expression of HLA antigens on leukemic cells.// J.Immunogenet. 1982. -V.9(2).-P.l 11-120.

91. Mazza J.J. Manual of Clinical Hematology. 1994.-Sec edn. Little, Brown and Company, Boston, Massachusetts 8.

92. Meeh P.F., King M., O'Brien R.L., Muga S., Buckhalts P., Neuberg R., Lamb L.S.Jr. Characterization of the y5T cell responce to acute leukemia. // Cancer Immunol.Immunother. 2006. - V.55. - P. 1072-1080.

93. Metelitsa L.S., Weinberg K.I., Emanuel P.D.and Seeger R.C. Expression of CD Id by myelomonocytic leukemias provides a target for cytotoxic NKT cells. // Leukemia. 2003. - V.17. - P.1068-1077.

94. Milojkovic D., Buggins A.G.S., Lea N.C.et.al. Suppression of T cell proliferation by AML cells is an early event in GO to G1 transition involving inhibition of pRB phosphorylation by cyclin d-cdk6/4. (Абстракт) // Blood.- 2000. V.96. - P. 146a.

95. Molofsky A.V., Pardal R., Morrison S.J., Diverse mechanisms regulate stem cell self-reneval. // Curr. Opin. Biol. 2004. - V.l6. - P.700-707.

96. Moretta A., Biassoni R., Bottino C., Mingari M.C., Moretta L. Natural cytotoxicity receptors that trigger human NK-cell-mediated cytolysis. // Immunol.Today. 2000. - V.21. - P. 228-234.

97. Moretta A., Bottino C., Mingari M.C., Biassoni R.and Moretta L. What is a Natural Killer cell? // Nature Immunology. 2002.- V.3. - № 1. - P.6-8.

98. Moretta A., Marcenaro E., Parolini S., Ferlazzo G. and Moretta L. NK cells at the interface between innate and adaptive immunity.// Cell Death and Differentiation. 2008. - V.15. - P.226-233.

99. Moretta L. and Moretta A. Unravelling natural killer function: triggering and inhibitory human NK receptors. // The EMBO Journal. 2004. - V.23. -№2.- P.255- 259.

100. Mosmann T.R., Li L. Functions of CD8 T cell subsets secreting different cytokine patterns. // Semin. Immunol. 1997. - V.9. - P.87.

101. Munker R., Lubbert M., Yonehara S., Tuchnitz A., Mertelsmann R., Wilmanns W. Expression of the Fas antigen on primary human leukemia cells. //Ann.Hematol. 1995. - V.70. - P. 15.

102. Nagata S., Golstein P. The Fas death factor. // Science. 1995. - V.267. -P. 1449.

103. Nagorsen D., Scheibenbogen C., Marineóla F.M., Letsch A.and Keilholz U. Natural T cell immunity against cancer. // Clin.Cancer Res. 2003. - V.9. - P.4296-4303.

104. Nakamura M., Ross D.T., Briner T.J., Gefter M.L. Cytolytic activity of antigen-specific T cells with helper phenotype. // J. Immunol. 1986. -V.136. -P.44.

105. O'Connor GM., Hart O.M., Gardiner C.M. Putting the Natural Killer cells in its place.// Immunology. 2005. - V.117.- P. 1-10.

106. Ogawa T., Kitagawa M., Hirokawa K. Age-related changes of human bone marrow: a histometric estimation of proliferative cells, apoptotic cells, T cells, B cells and macrophages. //Mechanisms of Ageing and Development. 2000.- V.117.-P.57-68,

107. Ohminami H., Yasukawa M., Fujita S. HLA class I-restricted lysis of leukemia cells by a CD8+ cytotoxic T-lymphocyte clone specific for WT1 peptide. // Blood. 2000. - V.95. - №1. - P.286-293.

108. Ojcius D.M., Jiang S., Persechini P.M., Detmers P.A., Young J.D. Cytoplasts from cytotoxic T lymphocytes are resistant to perforin-mediated lysis. // Mol. Immunol. 1991. - V.28. - P. 1011.

109. Ozaki S., York-Jolly Y., Kawamura H., Berzofsky J.A. Cloned protein antigen-specific, la-restricted T cells with both helper and cytolyticactivities: Mechanisms of activation and killing. // Cell Immunol. 1987. -V.105.-P.301.

110. Patmasiriwat P., Fraizer G., Kantarjian H. and Saunders G.F. WT1 and GATA1 expression in myelodysplasia syndrome and acute leukemia // Leukemia. -1999.- V.13.- P.891-900.

111. Pende D., Parolini S., Pessino A. et.al. Identification and molecular characterization of NKp30, a novel triggering receptor involved in natural cytoxicity mediated by human natural killer cells. // J.Exp.Med.- 1999. -V.190. -P.1505-1516.

112. Pui C.-H., Relling M.V., Downing J.R. Acute Lymphoblastic Leukemia //New Engl.J. Med.-2004.-P. 1535-1548.

113. Purton L.E., Dworkin S., Olsen G.H. et.al. RARgamma is critical for maintaining a balance between hematopoietic stem cell self-renewal aqnd differentiation. // J.Exp.Med. 2006. - V.203. - P. 1283-1293.

114. Ranheim E.A., Kipps T.J. Activated T cells induce expression of B7/BB1 on normal or leukemic B cells through a CD40-dependent signal. // J.Exp.Med.- 1993.-V.177.-P.925.

115. Raulet D.H. Interplay of natural killer cells and their receptors with the adaptive immune response. // Nat.Immunol. 2004. - V.5. - P.633-640.

116. Rego E.D., Garcia A.B., Viana S.R.and Falcao R.P. Age-related changes of lymphocyte subsets in normal bone marrow biopsies //Cytometry. -1998. V.34. -P. 22-29.

117. Reya Т., Morrison S.J., Clarke M.F.et.al. Stem cells, cancer, and cancer stem cells. //Nature. -2001. V.414. -P.105-111.

118. Romagnani S. Lymphokine production by human T cells in disease states. // Annu.Rev. Immunol. 1994. - V.12. - P.227.

119. Romanski A., Bug G., Becker S., Kampfmann M., Seifried E., Hoelzer D., Ottmann O.G., Tonn T. Mechanisms of resistance to natural killer cellmediated cytotoxicity in acute lymphoblastic leukemia. // Exp.Hematol. -2005. V.33(3). - P.344-352. (абстракт).

120. Rosenfeld C., Cheever M.A. and Gaiger A. WT1 in acute leukemia, chronic myelogenous leukemia and myelodysplasia syndrome: therapeutic potential of WT1 targeted therapies. //Leukemia. 2003. - V.17. - P.1301-1312.

121. Rouvier E., Luciani M.F., Golstein P. Fas involvement in Ca2+ -independent T cell-mediated cytotoxicity. // J.Exp.Med. 1993. - V.177. -P. 195.

122. Ruggeri L., Capanni M., Urbani E. et.al. Effectiveness of donor natural killer cell alloreactivity in mismatched hematopoietic transplants. // Science. 2002. - V.295. - P.2097-2100.

123. Salih H.R., Rammensee H.G., Steinle A. Cutting edge: down-regulation of MICA on human tumors by proteolytic shedding. // J.Immunol. 2002. -V.169. -P.4098-4102.

124. Salih H.R., Antropius H., Gieseke F.et.al. Functional expression and release of ligands for the activating immunoreceptor NKG2D in leukemia. // Blood. 2003. - V. 102. - P. 1389-1396.

125. Seaman W.E., Natural killer cells and Natural killer T-cells // Arthritis & Rheumatism. 2000. - V.43. - №6. - P. 1204-1217.

126. Spada F.M., Koezuka Y., Porcelli S.A. CDld-restricted recognition of synthetic glycolipid antigens by human natural killer T cells. // J.Exp. Med. 1998. -V188. -P.1529-1534.

127. Tajima F., Kawatani T., Endo A., Kawasaki H. Natural killer cell activity and cytokine production as prognostic factors in adult acute leukemia. // Leukemia. 1996. - V.10. - P.478-482.

128. Takahashi Т., Haraguchi К., Chiba S., Yasukawa M., Shibata Y., Hirai H. Va24+ natural killer T-cell responses against T-acute lymphoblastic leukemia cells: implications for immunotherapy. // Br.J.Haematol. 2003. -V. 122. -P.231-239.

129. Terstappen L.W., Levin J. Bone marrow cell differential counts obtained by multidimensional flow cytometry. // Blood Cells. 1992. - 18(2) - P. 311-330 (абстракт).

130. Tite J.P., Janeway Jr.C.A. Cloned helper T cells can kill В lymphoma cells in the presence of specific antigen: la restriction and cognate vs. noncognate interactions in cytolysis. // Eur.J. Immunol. 1984. - V.14. -P.878.

131. Toes R.E.M., Ossendorp F., Offringa R.and Melief C.J.M. CD4 T cells and their role in antitumor immune responses. // J.Exp.Med. 1999. - V.189. - №5. - P.753-756.

132. Tratkiewicz J.A., Szer J. Loss of natural killer cell activity as an indicator of relapse in acute leukemia. // Clin.Exp.Immunol.- 1990. -V.80(2).- P.241-246.

133. Urlacher A., Falkenrodt A., Tongio M.M., Mayers S. HLA-class-I antigens on normal and leukemic cells (quantitative analysis). // Tissue Antigens. 1987. - V.29(5). - P.237-245.

134. Van Parijs, Abbas A. Homeostasis and self-tolerance in the immune system: Turning lymphocytes off. // Science. 1998. - V.280. - P.243.

135. Velders M.P., ter Horst S.A.J., and Kast W.M. Prospects for immunotherapy of acute lymphoblastic leukemia. // Leukemia. 2001. -V.15. -P.701-706.

136. Verheyden S., Bernier M. and Demanet C. Identification of natural killer cell receptor phenotypes associated with leukemia. // Leukemia. 2004. -V.18. - P.2002-2007.

137. Vivier E., Nunes J.A., Vely F. Nature Killer Cell Signaling Pathways. // Science. -2004. -V.306. №26. -P.1517-1519.

138. Vollmer M., Li L., Schmitt A., Greiner J., Reinhardt P., Ringhoffer M.et.al. Expression of human leukocyte antigens and co-stimulatory molecules on blasts of patients with acute myeloid leukaemia. // Br.J.Haematol. -2003. V. 120.-1000-1008.

139. Wendt K., Wilk E., Buyny S., Buer J., Schmidt R.E. and Jacobs R. Gene and protein characteristics reflect functional diversity of CD56dim and CD56bright NK ceUsjj j Leukoc>Biol 2006.- V.80. P.1529-1541.

140. Williams N.S., Engelhard V.H. Identification of a population of CD4+ CTL that utilizes a perforin- rather than a Fas ligand-dependent cytotoxic mechanism. // J.Immunol. 1996. - V.156. -P.153.

141. Wodnar-Filipowicz A., Kalberer C.P. Function of Natural Killer cells in immune defence against human leukemia. // Swiss. Med. Wkly.- 2006. -№.136. P.359-364.

142. Wu F., Oka Y., Tsuboi A., Elisseeva O.A., Ogata K., Nakajima H.et.al. Thl-based humoral immune responses against Wilms tumor gene WT1 product in the patients with hematologic malignancies. // Leukemia. 2005. -V.19. -P.268-274.

143. Yamada S., Komiyama A. Decrease in number of CD 16+ CD45RA+ cells and defective production of natural killer cytotoxic factor in childhood acute lymphoblastic leukemia. // Leuk. Res. -1991. V. 15. - P.785-790.

144. Yang L., Han Y., Saurez Saiz F. and Minden M.D. A tumor suppressor and oncogene: the WT1 story. // Leukemia.- 2007.- V.21. P.868-876.

145. Yan Y., Steinherz P., Klingemann H.-G., Dennig D., Childs В., McGuirk. and O'Reilly R.J. Antileukemia activity of a Natural Killer cell line against human leukemias. // Clin.Cancer Res. 1998. - V.4. - P.2859-2868.

146. Yasukawa M. Immunotherapy for leukemia targeting the Wilms' tumor gene. // Leuk.Lymphoma. 2001. - V.42. - №3. - P.267-273 (абстракт).

147. Yotnda P., Mintz P., Grigoriadou K., Lemonnier F., Vilmer E. and Langlade-Demoyen P. Analysis of T-cell defects in the specific immune response against acute lymphoblastic leukemia cells.// Exp.Hematol. -1999. V.27. - P.1375-1383.

148. Zhang X.L., Komada Y., Chipeta J., Li Q.-S., Inaba H., Azuma E., Yamamoto H., Sakurai M. Intracellular cytokine profile of T cells from children with acute lymphoblastic leukemia. // Cancer Immunol. Immunother. 2000. - V.49. - P. 165-172.

149. Zeytun A., Hassuneh M., Nagarkatti M., Nagarkatti P. Fas-Fas Ligand-based interactions between tumor cells and tumor specific cytotoxic T lymphocytes: A lethal two-way street. // Blood. 1997. - V.90. - P. 1952.

150. Zhu J. and Paul W.E. CD4 T cells: fates, functions and faults. // Blood. -2008. V.112. - №5.- P.1557-1569.