Сравнительная характеристика гуминовых кислот и грибных меланинов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 04.00.03, кандидат биологических наук Завгородняя, Юлия Анатольевна

• Завгородняя, Юлия Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Завгородняя, Юлия Анатольевна

Введение.

Глава 1. Меланиновые пигменты, их строение и роль в гумусообразовании.

Глава 2. Сравнительная характеристика меланинов почвенных грибов.

2.1 Химические свойства меланинов.

2.2 Влияние процедуры экстракции на свойства меланинов.

Глава 3. Выделение препаратов грибных меланинов и гуминовых кислот.

3.1 Выделение меланинов.

3.2 Выделение гуминовых кислот.

Глава 4. Химические свойства грибных меланинов и гуминовых кислот

4.1 Элементный состав.

4.2 Спектры поглощения в ультрафиолетовой и видимой областях.

4.3 Инфракрасные спектры.

4.4 Молекулярно-массовые распределения.

4.5 Гидрофильно-гидрофобные свойства.

4.6 Кислотно-основные свойства и содержание функциональных групп.

4.7 Содержание углеводов.

Глава 5. Биодеградация грибных меланинов и гуминовых кислот в условиях модельного эксперимента

5.1 Схема эксперимента.

5.2 Скорость минерализации грибных меланинов и гуминовых кислот.

5.3 Изменения фракционных составов грибных меланинов и гуминовых кислот при биодеградации.

5.4 Изменение свойств грибных меланинов и гуминовых кислот при биодеградации.

Глава 6. Ферментативный гидролиз грибных меланинов и гуминовых кислот.

Глава 7. Устойчивость меланина и гуминовой кислоты к действию молекулярного кислорода.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная характеристика гуминовых кислот и грибных меланинов»

Существующие концепции гумификации предполагают два основных пути трансформации в гумусовые кислоты высокомолекулярных соединений растительного и микробного происхождения, поступающих в почву. С одной стороны предполагается практически полный распад до мономеров и последующая их конденсация («конденсационная» гипотеза, изложенная в трудах W.Flaig [Flaig, 1964, 1988] и М.М.Кононовой [1963, 1972]). С другой стороны -постепенная трансформация высокомолекулярных компонентов и их дериватов в гумусовые кислоты путем ароматизации и карбоксилирования (гипотеза деградации биополимеров [Hedges, 1988] или «окислительного кислотообразования» Л.Н.Александровой [1970,1980]).

И в той, и в другой концепции в качестве источников гумусовых кислот рассматриваются самые разнообразные вещества: крупные фрагменты лигнина, белков, полисахаридов, дубильных веществ, нуклеиновых кислот. Общее направление гумификации определяется отбором таких биотермодинамически устойчивых соединений, которые в условиях биосферы, главным образом в корнеобитаемых слоях почв, способны создать необходимые экологические условия для обитания микроорганизмов, растений и почвонаселяющих животных [Орлов, 1993].

Среди всех поступающих в почву веществ особое место занимают меланины - высокомолекулярные темноокрашенные пигменты, продуцируемые многими, в том числе и почвенными, грибами. Являясь продуктами внутриклеточного синтеза, меланины в то же время близки по многим физическим и химическим свойствам к гуминовым кислотам. Это послужило причиной возникновения гипотезы о том, что грибные пигменты могут в неизмененном виде 3 включаться в стабильные фракции органического вещества почвы, известные как гуминовые кислоты и гумин. До настоящего времени остается дискуссионным вопрос о том, являются ли меланины прямыми предшественниками гуминовых кислот или выступают только как один из источников конденсированных структур в почве. Основной причиной, затрудняющей решение этого вопроса является чрезвычайная сложность и изменчивость состава и строения молекул меланиновых пигментов различных грибов [Лях, 1981].

Сама по себе близость химического состава и свойств грибных меланинов и почвенных гуминовых кислот еще не говорит о структурном сходстве молекул этих групп веществ и не позволяет однозначно оценить роль пигментов в формировании гумуса. Одним из путей решения этого вопроса может стать определение биохимической устойчивости гуминовых кислот и меланинов и исследование процесса их биодеградации.

Цель представленной работы - дать сравнительную характеристику гуминовых кислот и грибных меланинов по их химическим свойствам и устойчивости к биодеградации.

В задачи работы входило:

1. Получить сравнительную характеристику химических свойств меланиновых пигментов и гуминовых кислот из дерново-подзолистой почвы, чернозема, бурого угля и торфа.

2. Определить скорость минерализации почвенными микроорганизмами грибных меланинов и гуминовых кислот.

3. Изучить изменения в химическом составе и молекулярно-массовых распределениях меланинов и гуминовых кислот в процессе их деградации почвенными микроорганизмами. 4

4. Определить степень устойчивости меланинов и гуминовых кислот к биотическому и абиотическому разрушению.

Научная новизна работы. Впервые исследованы свойства гуминовых кислот из дерново-подзолистой почвы, чернозема, торфа и угля и меланинов из мицелия грибов Aspergillus niger и Cladosporium cladosporiodes. Показано, что грибные меланины отличаются от гуминовых кислот более высокой молекулярной массой, повышенным содержанием кислых функциональных групп и низкой степенью окисленности.

Определена скорость минерализации гуминовых кислот и меланинов в условиях модельного эксперимента. Установлено, что при биодеградации гуминовых кислот снижается степень их полидисперсности и увеличивается их растворимость в воде. Получено, что при биодеградации грибных меланинов происходит сближение их элементного состава, молекулярных масс и оптических свойств со свойствами гуминовых веществ.

Показано, что скорость ферментного гидролиза протеазой близка для выделенных из почв гуминовых кислот, и резко различается для исследованных меланинов.

Практическая значимость работы. Результаты работы могут быть использованы при изучении химического строения почвенных гуминовых кислот, для оценки устойчивости гумусовых веществ к разложению и прогнозирования изменения запасов органического вещества почв. 5

Заключение диссертации по теме «Биогеохимия», Завгородняя, Юлия Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Темноцветные пигменты, выделенные из мицелия 15 различных штаммов почвенных грибов, сильно варьируют по оптическим свойствам и молекулярным массам. Общим для всех проанализированных пигментов является преобладание в их составе фракций с молекулярной массой больше 12 ООО.

2. Препараты меланинов грибов Aspergillus niger и Cladosporium cladosporiodes близки к препаратам гуминовых кислот из дерново-подзолистой почвы, чернозема, торфа и угля по элементному составу, содержанию углеводных компонентов и кислотно-основным свойствам, но отличаются от изученных ГК оптической плотностью, более высокой молекулярной массой и повышенным содержанием кислых функциональных групп.

3. За три месяца в условиях модельного эксперимента в результате микробной деятельности было минерализовано (по углероду) 12,1% ГК дерново-подзолистой почвы, 8,2% ГК чернозема, 4,5% ГК торфа, 3,0% ГК угля. Скорость минерализации меланинов в тех же условиях была в 2 раза выше, чем у почвенных ГК; было минерализовано 22,2% меланина Aspergillus niger и 24,7% меланина Cladosporium cladosporiodes.

4. Высокомолекулярные фракции гуминовых кислот менее устойчивы к микробному разложению по сравнению с низкомолекулярной фракцией. При биодеградации происходит отщепление от молекул ГК водорастворимых компонентов, и снижается степень полидисперсности гуминовых кислот.

5. В ходе инкубации меланины претерпевают разнонаправленные изменения в своем строении. Минерализация меланина Aspergillus niger сопровождается снижением его оптической плотности, что может быть связано с сокращением цепи сопряженных связей в молекуле пигмента. При минерализации меланина

94

Cladosporium cladosporiodes происходит разрушение его высокомолекулярных фракций, сопровождающееся появлением дополнительного количества кислородсодержащих хромофорных группировок, что ведет к резкому увеличению оптической плотности пигмента.

6. Глубина и скорость ферментативного гидролиза трипсином близки для почвенных гуминовых кислот, и резко различаются для меланинов. Наиболее устойчивым к действию трипсина оказался меланин Aspergillus niger, степень его устойчивости сходна с полученной для препаратов ГК из торфа и угля.

7. Являясь менее устойчивым, по сравнению с почвенными ГК, к микробному разложению, меланин Cladosporium cladosporiodes в то же время обладает высокой устойчивостью к абиотической деструкции под воздействием молекулярного кислорода.

95

Автор выражает искреннюю признательность своему научному руководителю профессору кафедры химии почв МГУ д.б.н. Орлову Дмитрию Сергеевичу за постоянное внимание, проявленное к работе, и старшему научному сотруднику Института Почвоведения МГУ-РАН к.б.н. Демину Владимиру Владимировичу за помощь при проведении экспериментов и ценные научные консультации.

Автор благодарит доцента кафедры биологии почв МГУ к.б.н. Куракова Александра Васильевича за предоставленные культуры грибов и методическое руководство при постановке инкубационных экспериментов и старшего научного сотрудника Института Биохимии им. А.Н.Баха к.б.н. Телегину Таисию Александровну за помощь в проведении экспериментов по фотодеструкции.

Работа выполнена при поддержке грантов ФЦНТП «Глобальные изменения природной среды и климата» проект 4.3.1. и РФФИ №99-04-48007.

96

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Завгородняя, Юлия Анатольевна, 2000 год

1. Абу Эль-Нага С.А., Паников Н.С., Звягинцев Д.Г. Кинетический анализ кривых дыхания почв, обогащенных глюкозой//Вестн. МГУ. Сер. 17, почвоведение, 1983, №4, с.40-48

2. Александрова И.В. Взаимодействие структурных единиц и прочность их закрепления в молекулах гуминоподобных веществ // Почвоведение, 1993, №12, с.47-51

3. Александрова JI.H. Процессы гумусообразования в почве // Гумусовые вещества почвы. Записки ЛСХИ, 1970, т. 142, с.26-82

4. Александрова Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. Л.: Наука, 1980, 288 с.

5. Александрова Л.Н., Люжин М.Ф. Влияние условий разложения на соотношение процессов минерализации и гумификации растительных остатков // Гумус и биологическая аккумуляция элементов в почве. Записки ЛСХИ, 1966, т. 105, с. 19-29

6. Аляутдинова Р.Х., Гагарин С.Г., Екатеринина Л.Н. Корреляция физиологической активности и физико-химических свойств гуминовых препаратов // Химия твердого топлива, 1991, №3, с. 16-21

7. Бамбалов H.H., Лукошко Е.С. Состав и свойства гуминовых кислот начального периода торфообразования//Химия твердого топлива, 1988, №5, с.3-7

8. Баталкин Г.А., Галушка А.М., Махно Л.Ю., Христева Л.А. О природе действующего начала физиологически активных гуминовых кислот // Тр. Межд. симп. IV и II комиссий МТО. Минск, 1982, с.115-119

9. БэйлиДж. Методы химии белков. М.: Мир, 1965, 284 с.

10. БриттонГ. Биохимия природных пигментов. М.: Мир, 1986,422 с.

11. Вильяме В.Р. Почвоведение. М., 1947

12. Вольнова А.И., Мирчинк Т.Г. Образование темноцветными грибами зеленого пигмента, сходного с фракцией Pg гуминовых кислот Р-типа // Почвоведение, 1972, №11, с. 140-145

13. Вольф Д.К., Легг Дж.О. Микробиология почвы // В кн.: Изотопы и радиация в сельском хозяйстве. Т.1. Почва-Растения-Влага. М.: Агропромиздат, 1989, с.120-15997

14. Горовая А.И., Орлов Д.С., Щербенко О.В. Гуминовые вещества. Киев.: Наукова думка, 1995, 304 с.

15. Григорьева К.В., Караваев Н.М. Влияние условий щелочной экстракции углей на состав гуминовых кислот//Доклады АН СССР, 1969, т. 188, №1, с. 160-169

16. ДетерманГ. Гель-хроматография. М.: Мир, 1970

17. Драгунов С.С. Образование гуминовых кислот в различных природных условиях//В кн.: Генезис твердых горючих ископаемых. М., 1959, с.5-15

18. Блинов Н.П., Юрлова H.A. Меланиновый пигмент Auerobasidium (Pullularia) pullulans // Биол. науки, 1976, №7, с. 108-112

19. Жданова H.H. К экологии некоторых почвенных грибов//В кн.: Метаболиты почвенных микромицетов. Киев: Наукова думка, 1971, с.202-212

20. Жданова H.H., Василевская А.И. Экстремальная экология грибов в природе и эксперименте. Киев: Наукова думка, 1982,220 с.

21. Жданова H.H., Походенко В.Д., Гаврюшина А.И., Василевская А.И. Сочетание методов природной и экспериментальной экологии в изучении грибов сем. Dematiaceae //В кн.: Систематика, экология и физиология почвенных грибов. Киев: Наукова думка, 1975, с.83-86

22. Жмакова H.A., Наумова Г.В., Косоногова Л.В. Влияние окисления на физико-химические свойства гуминовых кислот торфа//В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с.45-49

23. Запрометова K.M. О пигментах микроскопических темноокрашенных грибов // Вестник МГУ. Сер. биол., почвовед., 1971, №3, с.106-108

24. Запрометова K.M., Мирчинк Т.Г., Орлов Д.С., Юхнин A.A. Характеристика черных пигментов темноокрашенных почвенных грибов//Почвоведение, 1971, №7, с.22-30

25. Запрометова K.M., ЗеноваГ.М. К характеристике микрофлоры лесных подстилок и почв//В кн.: Закономерности развития почвенных микроорганизмов. Л., 1975, с.231-241

26. Запрометова K.M., Мирчинк Т.Г. Пигменты темноокрашенных грибов и их экологическая роль //В кн.: Микробные метаболиты. М.: МГУ, 1979, с. 193-209

27. Звягинцев Д.Г., Мирчинк Т.Г. О природе гуминовых кислот почв // Почвоведение, 1986, №5, с.68-75

28. Зенова Г.М., Лихачева A.A. О немеланоидных пигментах темноокрашенного пигментного комплекса хромогенных актиномицетов // Вестник МГУ. Сер. 17, почвоведение, 1980, № 1, с.60-6298

29. Иванникова Л.А. Применение абсорбционного метода для определения естественного потока С02 из почвы//Почвоведение, 1992, №6, с. 133-139

30. Измерение радиоактивности с помощью сцинтилляционных счетчиков. Техн. рук-во. Интертекник-Плезир, Франция

31. Ильин Н.П., Орлов Д.С. Фотохимическая деструкция гумусовых кислот // Почвоведение, 1973, №1, с.73-81

32. Кононова М.М. Органическое вещество почвы. М.: АН СССР, 1963, 314 с.

33. Кононова М.М. Проблема органического вещества почвы на современном этапе //В кн.: Органическое вещество целинных и освоенных почв. М.: Наука, 1972, с.7-29

34. Корнеева Г.А., Харченко C.B., Романкевич Е.А. Изучение ферментативного гидролиза казеина в морской воде //Изв. АН СССР. Сер. биол., 1990, №6, с.821-826

35. Корнеева Г.А., Романкевич Е.А. Активность гидролитических ферментов в морской экосистеме // В кн.: Биогеохимия пограничных зон Атлантического океана. М.: Наука, 1994,400 с.

36. Кузяков Я.В., Фокин А.Д., Князев Д.А. Участие нуклеиновых оснований и аминокислот в гумусообразовании // Известия ТСХА, 1989, вып.4, с.61-66

37. Кулеш Н.И., Красовская Н.П., Максимов О.Б. Генезис карбоксильных групп при гумификации лигнина // Почвоведение, 1983, №8, с.34-40

38. Кухаренко Т.А. Изменение структуры и свойств гуминовых кислот в углеобразовательном процессе //В кн.: Генезис твердых горючих ископаемых. М., 1959, с.319-337

39. Кухаренко Т.А., Екатеринина Л.Н. Сравнительное исследование растворимых и не растворимых в ацетоне фракций гуминовых кислот торфов, бурых и выветрившихся углей//Химия твердого топлива, 1968, №3, 12-18

40. Кухаренко Т.А., Екатеринина Л.Н. Биологическая активность и структура гуминовых кислот//Тр. Межд. симп. IV комиссии МТО. М., 1973, с.8-12

41. Кухаренко Т.А., Толчинская Р.Я., Чеснокова Т.В., Левина И.В. Особенности окисления бурых углей Канско-Ачинского бассейна в пласте // Химия твердого топлива, 1967, с.22-25

42. Л'Аннунциата М.Ф. Регистрация радионуклидов//В кн.: Изотопы и радиация в сельском хозяйстве. Т.1. Почва-Растения-Влага. М.: Агропромиздат, 1989, с. 160-24699

43. Лебедев К.К. О роли минеральных компонентов в формировании торфяных отложений//В кн.: Генезис твердых горючих ископаемых. М., 1959, с. 16-30

44. Лях С.П. Микробный меланиногенез и его функции. М.: Наука, 1981,275 с.

45. Лях С.П., Абызов С.С. Некоторые особенности микрофлоры Антарктики в связи со спецификой условий существования // Изв. АН СССР. Сер. биол., 1976, №2, с.252-262

46. Мажуль В.М., Прокопова Ж.В., Ивашкевич Л.С. Механизм действия гуминовых препаратов их торфа на структурное состояние мембран и функциональную активность дрожжевых клеток //В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с. 151-157

47. Малама А.А. Физиологическая активность меланиновых пигментов // В кн.: Материалы к микробиологической конференции. Вильнюс, Литовское микробиол. о-во, 1972, с.40-41

48. Малама А.А., Буланов П.А., Данильчик Н.И., Храменко Г.Б., Гребенко В.В. Изучение меланинов микробного происхождения. П. Ступенчатая экстракция меланиновых пигментов // Вестник БГУ, серия П, 1970, №2, с.53-56

49. Малама А.А., Храменко Г.Б., Орлов Д.С., Юхнин А.А. Элементный состав и инфракрасные спектры меланиновых пигментов некоторых микроорганизмов // Известия АН СССР. Сер. биол., 1975, №5, с.766-768

50. Марфенина О.Е., Мирчинк Т.Г. Состав темноокрашенных грибов лесной подстилки и количество образуемого ими пигмента//Вестник МГУ. Сер. биол., почвовед., 1973, №5, с.86-89

51. Масько А.А., Галушко Н.А., Потоцкая Л.А. Гумус как иммобилизатор почвенных ферментов // Почвоведение, 1992, №1, с.76-79

52. Масюков А.В., Даныпина Л.М. Выявление и изучение гуминообразующих штаммов Aspergillus niger // Кубанский с-х ин-т. Труды, 1977, вып. 140, с.4-19

53. Менцель Р.Дж., Смит С.Дж. Плодородие почвы и питание растений //В кн.: Изотопы и радиация в сельском хозяйстве. Т.1. Почва-Растения-Влага. М.: Агропромиздат, 1989, с.26-60

54. Методы почвенной микробиологии и биохимии. М.: МГУ, 1991, 304 с.

55. Мидгли Д., Торренс К. Потенциометрический анализ воды. М.: Мир, 1980, 512 с.

56. Милановский Е.Ю. Применение ионного детергента в гель-хроматографии гумусовых кислот почв//Почвоведение, 1984, №8, с. 142-146100

57. Милановский Е.Ю., Шеин Е.И., Степанов A.A. Лиофильно-лиофобные свойства органического вещества и структура почвы//Почвоведение, 1993, №6, с. 122-126

58. Мирчинк Т.Г. Почвенная микология. М.: МГУ, 1988, 220 с.

59. Мирчинк Т.Г., Степанова Л.Н., Демкина Т.С. Продуктивность грибной биомассы в лесных почвах Валдая//Вестник МГУ. Сер. биол., почвовед., 1976, №1, с.91-95

60. Мирчинк Т.Г., Демкина Т.С. Экология темноокрашенных грибов подстилки // Вестник МГУ. Сер. почвовед., 1977, №2, с.59-64

61. Мишустин E.H., Драгунов С.С., Пушкинская О.И. Роль микроорганизмов в синтезе перегнойных соединений почвы // Известия АН СССР. Сер. биол., 1956, №6, с. 83-94

62. Мишустин E.H., Никитин Д.И. Атакуемость гуминовых кислот почвенной микрофлорой // Микробиология, 1961, т.ЗО, вып.5, с.841-848

63. Мосолов В.В. Протеолитические ферменты. М.: Наука, 1971,404 с.

64. Мотовилова Л.В., Хренкова Г.М. Состав и свойства ГК, полученных при механодеструкции бурых углей //Химия твердого топлива, 1988, №2, с.36-41

65. Озерская С.М., Запрометова K.M., Мирчинк Т.Г. Характеристика состава комплексов микром и цехов лесных биогеоценозов Малинского стационара // Вестник МГУ. Сер. почвовед., 1977, №4, с.65-71

66. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв. М.: МГУ, 1974, 332 с.

67. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации. М.: МГУ, 1990, 325 с.

68. Орлов Д.С. Свойства и функции гуминовых веществ //В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с. 16-27

69. Орлов Д.С., Гришина Л.А. Практикум по химии гумуса. М.: МГУ, 1981,272 с.

70. Орлов Д.С., Осипова H.H. Инфракрасные спектры почв и почвенных компонентов. М.: МГУ, 1988, 89 с.

71. Орлов Д.С., Кулаков В.В., Никифоров В.Ю., Аммосова Я.М., Бирюкова О.Н., Осипова H.H. Гуминовые препараты из высокозольных бурых углей Подмосковного бассейна //В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с. 189-206

72. Орлов Д.С., Наумова Г.В., Аммосова Я.М., Лизунова А.Л., Осипова H.H. Сравнительная характеристика гуминовых препаратов опытно-промышленных производств//В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с.207-218101

73. Орлов Д.С., Демин В.В., Завгородняя Ю.А. Влияние молекулярных параметров гуминовых кислот на их физиологическую активность // Доклады Академии наук, 1997, т.354, №6, с.843-845

74. Паников Н.С., Абу Эль-Нага С.А., Звягинцев Д.Г. Кинетика разложения глюкозы в почве // Почвоведение, 1982, №8, с.70-77

75. Паников Н.С., Садовникова Л.К., Фридланд Е.В. Неспецифические соединения почвенного гумуса. М.: МГУ, 1984, 144 с.

76. Плохинский Н.А. Алгоритмы биометрии. M.: МГУ, 1980,150 с.

77. Покуль Т.В., Парамонова Т.Г., Крюкова В.Н., Мицук Г.Е. Гуминовые вещества бурых углей Хандинского месторождения //В кн.: Гуминовые вещества в биосфере. М.: Наука, 1993, с.54-57

78. Практическая химия белка. М.: Мир, 1989, 623 с.

79. Стригуцкий В.П., Навоша Ю.Ю., Бамбалов Н.Н., Лиогонький Б.И. О природе парамагнетизма гумусовых веществ и перспективах применения метода ЭПР в почвоведении // Почвоведение, 1989, №7, с.41-51

80. ТэйтР.Ш. Органическое вещество почвы. М.: Мир, 1991,400 с.

81. Тэнфорд Ч. Физическая химия полимеров. М.: Химия, 1965, 772 с.

82. Фокин А.Д. Исследование процессов трансформации, взаимодействия и переноса органических веществ, железа и фосфора в подзолистой почве // Дисс. на соиск. уч. ст. докт. биол. наук. М., 1975

83. Фокин А.Д., Карпухин А.И. Включение продуктов разложения растительных остатков (меченных 14С) в гумусовые вещества//Почвоведение, 1974, №11, с. 72-78

84. Химическая энциклопедия. М.: Советская энциклопедия, 1990, т.2

85. Химическая энциклопедия. М.: Большая Российская энциклопедия, 1992, т.З

86. Христева Л.А. Роль гуминовой кислоты в питании растений и гуминовые удобрения // Труды Почв, ин-та им. В.В.Докучаева. М.: АН СССР, 1951, т.38, с. 108184

87. Христева Л.А. Стимулирующее влияние гуминовой кислоты на рост высших растений и природа этого явления // В кн.: Гуминовые удобрения: теория и практика их применения. Харьков: Харьк. ун-т, 1957, с. 75-94

88. Христева Л.А. О природе действия физиологически активных гумусовых веществ на растения в экстремальных условиях//В кн.: Гуминовые удобрения: теория и практика их применения. Днепропетровск: ДСХИ, 1973, т.4, с.3-14102

89. Шарков Й.Н. Исследование параметров раствора щелочи как абсорбента СО2 при определении дыхания почвы//Почвоведение, 1983, №1, с.132-138

90. Шарков И.Н. Определение интенсивности продуцирования С02 почвой абсорбционным методом // Почвоведение, 1984, №7, с. 136-143

91. Шарков И.Н. Сравнительная характеристика двух модификаций абсорбционного метода определения дыхания почвы//Почвоведение, 1987, №10, с. 153-157

92. Щербакова Т.А. Ферментативная активность почв и трансформация органического вещества (в естественных и искусственных фитоценозах). Минск: Наука и техника, 1983,222 с.

93. Alexander M. Natural selection and the ecology of microbial adaptation in a biosphere // Extreme environments. Mechanisms of microbial adaptation. New York: Acad. Press, 1976, p.3-25

94. Amato M., Ladd J.N. Formation and distribution of isotope-labelled biomass during decomposition of 14C and 15N labelled plant material // Soil Biol. Biochem., 1980, V.12, p.405-411

95. Barbetta M., Casnati G., Ricca A. Aspergilline // Rend. 1st. Lomb. Acad. Sci. Lett., 1967, V.A101, N 1, p.75-99

96. Boudot J.-P., Bel Hadi Brahim A., Steiman R., Seigle-Murandi F. Biodégradation of synthetic organo-metallic complexes of iron and aluminium with selected metal to carbon ratios // Soil. Biol. Biochem., 1989, V.21, N 7, p.961-966

97. Bull A.T. Chemical composition of wild-type and mutant Aspergillus nidulans cell walls. The nature of polysaccharide and melanin constituents // J. Gen. Microbiol., 1970, V.63, N 1, p.75-94

98. Butler J.H.A., Ladd J.N. Effect of extractant and molecular size on the optical and chemical properties of soil humic acids // Aust. J. Soil Res., 1969, V.7, p.229-239

99. Butler J.H.A., Ladd J.N. Importance of the molecular weight of humic and fulvic acids in determining their effects on protease activity // Soil Biol. Biochem., 1971, V.3, N 3, p.249-257

100. Cerri C.C., Jenkinson D.S. Formation of microbial biomass during the decomposition of 14C labelled ryegrass in soil // Journal of Soil Science, 1981, N 32, p. 619-626

101. Chen Y., Senesi N, Schnitzer M. Information provided on humic substances by E4/E6 ratios // Soil Sci. Am. J., 1977, Y.41, p.352-358103

102. Cheshire M.V., Mundie C.M., Shepherd H. Transformation of 14C glucose and starch in soil // Soil Biol. Biochem., 1969, V. 1, p.l 17-130

103. Davis H., Mott C.J.B. Titrations of fulvic acid fractions. I: Interactions influencing the dissociation / reprotonation equilibria//Journal of Soil Science, 1981, N 32, p.379-391

104. Dormaar J.F. Susceptibility of organic matter of chernozemic Ah horizons to biological decomposition//Can. J. Soil Sci., 1975, V.55, p.473-480

105. Ellis D. H., Griffiths D. A. The location and analysis of melanins in the cell walls of some soil fungi//Canadian Journal of Microbiology, 1974, N 20, p. 1379-1386

106. Ellis M.B. Dematiaceous hyphomycetes, England: C.M.I. Kew: Surrey, 1971

107. Filip Z., Semotan J., Kutilek M. Thermal and spectrophotometric analysis of some fungal melanins and soil humic compounds//Geoderma, 1976, N 15, p. 131-142

108. Filip Z., Alberts J.J. Adsorption and transformation of salt marsh related humic acids by quartz and clay minerals // The Science of the Total Environment, 1994, V.153, p. 141-150

109. Flaig W. Effects of microorganisms on the transformation of lignin to humic substances // Geochim. Cosmochim. Acta, 1964, V.28, p. 1523-1531

110. Flaig W. Generation of model chemical precursors//Humic Substances and their Role in the Environment. Chichester e.a., 1988, p.75-90

111. Flaig W., Reimer H. Contribution to the mechanism of the influence of substances from soil organic matter on plant growth // Trans. Int. Symp. Studies about Humus 'Humus et Planta V', Prague, 1971, p.519-526

112. Geis P.A., Wheeler M.H., Szaniszlo P.J. Pentaketide metabolites of melanin synthesis in the dematiaceous fungus Wangiella dermatitidis // Arch. Microbiol, 1984, N 137, p.324-328

113. Gonzalez-Vila F.J., Saiz-Jimenez C., Lentz H., Ludemann H.D. 13C Nuclear magnetic resonance spectra of fungal melanins//Ztschr. Naturforsch., 1978, C33, p. 291-293

114. Griffin D.M. Ecology of soil fungi. London: Chapman and Hall, 1972

115. Gulyas F., Szegi J. Comparative investigations on the pigment production of Aspergillus niger and Stachybotrys atra // Studies about Humus: International Symposium 'Humus et Planta VT, Prague, 1975, p. 181-186

116. Haider K.M., Martin J.P. Humic acid-type phenolic polymers from Aspergillus sydowi culture medium, Stachybotrys spp. cells and autoxidized phenol mixtures // Soil Biol. Biochem., 1970, V.2, N 3, p.145-156104

117. Haider K.M., Martin J.P. Mineralization of 14C-labeiled humic acids and of humic-acid bound 14C-xenobiotics by Phanerochaete chrysosporum // Soil. Biol. Biochem, 1988, V.20, N 4, p.425-429

118. Haworth R.D. The chemical nature of humic acid//Soil Science, 1971, V.Ill, Nl,p.71-79

119. Hedges J.I. Polimerization of humic substances in natural environments//Humic Substances and their Role in the Environment. Chichester e.a., 1988, p.45-58

120. Hignett R.A., Kirkham D.S. The role of extracellular melanoproteins of Venturia inaequalis in host susceptibility//J. Gen. Microbiol., 1967, V.48,N 2, p.207-210

121. Hinds A.A., Lowe L.E. Distribution of carbon, nitrogen, sulphur and phosporus in particle-size separates from gleysolic soils//Canadian Journal Soil Science, 1980, V. 60, p.783-786

122. Ito Y., Nanba H., Kumoda H. Melanin produced by Cohiolobus miyabeanus. I.The physical and chemical properties // J. Pharm. Soc. Jap., 1979, V.99, N 10, p. 1027-1036

123. Ivery D., Lange C.F., Merdinger E. Comparative study of Auerobasidium (Pullularia) pullulans and Rhodotorula glutinis pigments // Trans. III. State. Acad. Sci., 1975, V.68, N4, p.3 89-402

124. Kang K.S., Felbeck G.T. A comparison of the alkaline extract of tissues of Aspergillus niger with humic acids from three soils//Soil Science, 1965, N 99, p. 175181

125. Kiss S., Dragan-Bularda M., Pasca D. Activity and stability of enzyme molecules following their contact with clay mineral surfaces // Studia Univ. Babes-Bolyai. Biologia, 1986, V.31, N 2, p.3-29

126. Kumada K., Hurst H.M. Green humic acid and its possible origin as a fungal metabolite //Nature, 1967, V.214, N 5088, May 6, p.631-633

127. Kumada K., Sato O. Studies on the chemical properties of P-type humic acid // International Symposium 'Humus et Planta VI', Prague, 1967, p. 131-133

128. Ladd J.N., Butler J.H.A. Inhibition and stimulation of proteolytic enzyme activities by soil humic acids//Aust. J. Soil Res., 1969, V.7, N 3, p.253-261

129. Ladd J.N., Butler J.H.A. Humus-enzyme systems and synthetic organic polymerenzyme analogs // In: Soil Biochemistry. New York: Marcel Dekker, 1975, V.4, p. 143-194

130. L'Annunziata M.F. Radiotracers in agricultural chemistry. London: Acad. Press, 1979, 536 p.105

131. Linhares I.F., Martin J.P. Decomposition in soil of the humic acid-type polymers (melanins) of Eurotium echinulatum, Aspergillus glaucus sp. and other fungi // Soil. Sci. Soc. Am. J., 1978, V.42, p.738-743

132. Martin J.P., Richards S.J., Haider K. Properties and decomposition and binding action in soil of 'humic acid' synthesized by Epicoccum nigrum // Soil Sci. Soc. Amer. Proc., 1967, V.31, p.657-662

133. Martin J.P., Haider K. Phenolic polymers of Stachybotrys atra, Stachybotiys chartarum and Epicoccum nigrum in relation to humic acid formation // Soil Science, 1969, N 107, p.260-270

134. Masini J.C. Evaluation of neglecting electrostatic interactions on the determination and characterisation of the ionizable sites in humic substances // Analytica Chimica Acta, 1993, V.283,p.803-810

135. Mason H.S. Structure of melanins // Pigment cell biology. New York: Acad. Press, 1959, p. 147-157

136. Mathur S.P. Characterization of soil humus through enzymatic degradation//Soil Science, 1971, V.11,N 3, p.147-157

137. Mato M.C., Olmedo M.G., Mendez J. Inhibition of indoleacetic acid-oxidase by soil humic acids fractionated on sephadex // Soil Biol. Biochem., 1972, V.4, p.469-473

138. McLaren A.D. The absorbtion and reactions of enzymes and proteins on kaolinite //J. Phys. Chem., 1954, V.58, p. 129-137

139. Meuzelaar H.L.C., Haider K., Nagar B.R., Marthin J.P. Comparative studies of pyrolysis-mass spectra of melanins, model phenolic polymers and humic acids // Geoderma, 1977, V.17, N 3, p.239-252

140. Nicolaus R.A. Melanins. Paris: Hermann, 1968, 310 p.

141. Paim S., Linhares L.F., Mangrich A.S., Martin J.P. Characterization of fungal melanins and soil humic acids by chemical analysis and infrared spectroscopy // Biology and Fertility of Soils, 1990, N 10, p. 72-76

142. Pridham J.B., Woodhead S. The biosynthesis of melanin in Alternaria // Phytochemistry, 1977, V.16, N 7, p.903-906

143. Reisinger O., Kilbertus G. Microorganismes intervenant dans la decomposition des cellules d'Auerobasidium pullulans (De Bary) Arnaud // Canad. J. Microbiol., 1974, V.20, N 3, p.299-306

144. Rice J.A., McCarthy P. Statistical evaluation of the elemental composition of humic substances // Org. Geochem., 1991, V.17, N 5, p.635-648106

145. Riffaldi R., Schnitzer M. Effects of diverse experimental conditions on ESR spectra of humic substances // Geoderma, 1972, V. 8, N 1, p. 1-10

146. Riffaldi R., Schnitzer M. Electron spin resonance spectrometry of humic substances // Soil. Sci. Soc. Amer. Proc., 1972, V.36, N 2, p.301-305

147. Rowley B.I., Pirt S.J. Melanin production by Aspergillus nidulans in batch and chemostat cultures // J. Gen. Microbiol., 1972, V.72, N 3, p.553-563

148. Saiz-Jimenez C., Martin F., Cert A. Low boiling-point compounds produced by pirolysis of fungal melanins and model phenolic polymers // Soil. Biol. Biochem., 1979, V.ll, N 3, p.305-309

149. Sankawa U., Shimada H., Sato T., Kinoshita T., Yamasaki K. Biosynthesis of scytalone // Tetrahedron Lett., 1977, N 5, p.483-486

150. Schnitzer M. Characterization of humic constituents by spectroscopy // Soil Biochemistry, 1971, V.2, p. 60-95

151. Schnitzer M. Humic substances: chemistry and reactions//In: Soil organic matter. Amsterdam: Elsevier, 1978, p. 1-64

152. Schnitzer M., Skinner S.I.M. Free radicals in soil humic compounds//Soil Science, 1969, V.108, N 6, p.383-390

153. Schnitzer M., Ortiz de Serra M.I., Ivarson K. The chemistry of fungal humic acidlike polymers and of soil humic acids // Soil Sci. Soc. Amer. Proc., 1973, V.37, N 2, p.229-236

154. Schnitzer M., Neyrod J.A. Further investigation on the chemistry of fungal humic acids // Soil Biol. Biochem, 1975, V.7, N 6, p.365-371

155. Senesi N., Sposito G., Martin J.P. Copper (II) and iron (III) complexation by humic acid-like polymers (melanins) from soil fungi // The Science of the Total Environment, 1987, V.62, p.241-252

156. Seto H., YoneharaH. Utilization of 13C-13C coupling in structural and biosynthetic studies. VIII. The cyclization pattern of a fungal metabolite, scytalone // Tetrahedron Lett., 1977, N5, p.487-488

157. Sowden F.J. Action of proteolytic enzymes on soil organic matter//Canad. J. Soil Sci., 1970, V.50, N 2, p.233-241

158. Steelink C., Tollin G. Free radicals in soil // Soil Biochemistry. New York: Marsel Dekker, 1967, p. 147-169

159. Stevenson F.J. Humus chemistry. Genesis, composition, reactions. New York: John Wiley and Sons, 1982107

160. Stipanovic R.D., Bell A.A. Pentaketide metabolites of Verticillium dahliae. 3. Identification of (-)-3,4-dihydro-3,8-dihydroxy-l(2H)-naphthalenone (-)-vermelone. as a precursor to melanin // J. Ogr. Chem., 1976, V.41, N 14, p.2468-2469

161. Stout J.D., Goh K.M., Rafter T.A. Chemistry and turnover of naturally occuring resistant organic compounds in soil//Soil Biochemistry, 1981, Y. 5, p. 1-73

162. Swifit R.S. Molecular weight, size, shape and charge characteristics of humic substances: some basic considerations // Humic substances II. In search of structure. New York: John Wiley and Sons, 1989, p.450-465

163. Takamatsu T., Yoshida T. Determination of stability constants of metal-humic acid complexes by potentiometric titration and ion-selective electrodes // Soil Science, 1978, V.125, N 6, p.377-386

164. TanK.H., SihanonthP., ToddR.L. Formation of humic acid like compounds by the ectomycorrizal fungus, Pisolithus tinctorius // Soil Sci. Soc. Am. J., 1978, V.42, p.906-908

165. TichyV. Biological activity of ultraviolet irradiated humic acids // Trans. Int. Symp. Studies about Humus'Humus et Planta V', Prague, 1971, p.553-556

166. Tokousbalides M.Ch., Sisler H.D. Effect of tricyclazole on growth and secondary metabolism in Pyricularia oryzae//Pestic. Biochem. Physiol., 1978, V.8, N l,p.26

167. Tokousbalides M.Ch., Sisler H.D. Site of inhibition by tricyclazole in the melanin biosynthetic pathway of Verticillium dahliae//Pestic. Biochem. Physiol., 1979, V.ll, N1, p. 64-73

168. ValmasedaM., Martinez A. T., Almendros G. Contribution by pigmented fungi to P-type humic acid formation in two forest soils // Soil Biology and Biochemistry, 1989, N 21, p.23-28

169. Webley D.M., Jones D. Biological transformation of microbial residues in soil //In: Soil Biochemistry. New York: Marcel Dekker, 1971, V.2, p.446-485

170. Wershaw R.L. A new model for humic materials and their interactions with hydrophobic organic chemicals in soil-water or sediment-water system // Journal of Contaminant Hydrology, 1986, N 1, p.29-45

171. Wheeler M.H., Tolmsoff W.J., Meola S. Ultrastructure of melanin formation in Verticillium dahliae with (+)-scytalone as a biosynthetic intermediate // Canad. J. Microbiol., 1976. V.22, N 5, p.702-711

172. Wheeler M.H., Stipanovic R.D. Melanin biosynthesis in Thielaviopsis basicola//Exp. Mycol., 1979, V.3, N 4, p.340-350108

173. White L.P. Melanin, a naturally occurring cation exchange material // Nature, 1958, V.182.N 1427, p.46-47

174. Wolf D.C., Martin J.P. Decomposition of fungal micelia and humic-type polymers containing 14carbon from ring and side-chain labeled 2,4-D and chlorpropham//Soil. Sci. Am. J., 1976, V.40, p.700-704

175. Zunino H, Borie F., Aguilera S., Martin J.P., Haider K. Decomposition of 14C-labelled glucose, plant and microbial products and phenols in volcanic ash-derived soils of Chile // Soil Biol. Biochem., 1982, V.14, p.37-43