Сравнительная характеристика эубиотиков на основе аэробных спорообразующих бактерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Васильев, Андрей Никифорович

• Васильев, Андрей Никифорович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Васильев, Андрей Никифорович

Список сокращений, условных обозначений, символов, единиц и терминов.

Введение.

Глава 1. Проблема эубиотиков на современном этапе обзор литературы).

1.1. Состав, назначение и классификация эубиотиков.

1.2. Основные аспекты применения эубиотиков в медицинской практике.

1.3. Требования, предъявляемые к эубиотикам.

Глава 2. Материалы и методы исследований.

2.1. Микроорганизмы и эубиотики.

2.2. Питательные среды, растворы, реактивы, оборудование и экспериментальные животные.

2.3. Выбор методов исследований.

2.4. Технология получения биоспорина.

Глава 3. Результаты исследований потребительских и биологических свойств препаратов.

3.1. Сравнительное изучение потребительских свойств эубиотиков.

3.2. Культурально - морфологические свойства штаммов -компонентов эубиотиков.

3.3. Антагонистическая активность культур.

3.4. Биохимическая активность микроорганизмов.

Глава 4. Доклиническая оценка токсичности и безопасности эубиотиков.

4.1. Острая и хроническая токсичность эубиотиков в эксперименте на животных.

4.2. Экспериментальная оценка показателей иммунитета после введения эубиотиков.

Глава 5. Сравнительное изучение фармакодинамики и фармакокинетики эубиотиков на лабораторных животных.

5.1. Изучение фармакодинамики эубиотиков.

5.2. Изучение эффективности эубиотиков на модели инфекционного процесса.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная характеристика эубиотиков на основе аэробных спорообразующих бактерий»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В последние годы в Российской Федерации наблюдается резкое ухудшение эпидемической ситуации, нарастание неблагоприятных изменений в экосфере, увеличение числа инфекционных, аллергических и других заболеваний в результате воздействия соответствующих факторов риска. За 1985 - 1999 г.г. отмечено повышение удельного веса дисбактериозов, причиной которых являются ухудшение экологической обстановки, неконтролируемое использование в медицине, ветеринарии и сельском хозяйстве антибиотиков, химиотерапевтических препаратов, удобрений, инсектицидов, гормонов, а также стрессовые факторы, снижение качества питьевой воды и продуктов питания. Широкое распространение дисбактериозов способствует развитию тяжелых рецидивирующих инфекционных заболеваний, иммунодефицитов, аллергопатий, анемий, гастроэнтерологических и других соматических болезней (Инф. заболеваемость., 1998; Бродов Л.Е. и др., 1997; Руководство по эпидемиологии., 1993; Инфекционная заболеваемость., 1997; Пинегин Б.В. и др., 1984; Наркевич М.И. и др., 1997).

В связи с изложенным, профилактика и лечение инфекционных заболеваний и дисбактериозов в настоящее время и на ближайшую перспективу являются приоритетными задачами общенационального значения. Решение этих задач возможно путем реализации комплекса соответствующих противоэпидемических, санитарно - гигиенических и других мероприятий, включая разработку, серийное производство и внедрение в практику новых медикаментозных средств для предупреждения и терапии инфекционных заболеваний и дисбактериозов, отвечающих современному мировому уровню по эффективности, срокам хранения и ассортименту выпускаемых лекарственных форм.

В настоящее время в числе высокоэффективных лечебно-профилактических медикаментозных средств специалистами рассматриваются эубиотики (пробиотики) - препараты из живых безвредных для организма человека и теплокровных животных антагонистически активных бактерий, подавляющих in vitro и in vivo рост и размножение патогенных и условно патогенных микроорганизмов, вызывающих острые кишечные заболевания и токсикоинфекции (Чупринина Р.П. и др., 1993; Смирнов В.В. и др., 1983; Смирнов В.В. и др., 1992; Воробьев A.A. и др., 1999; Златкина А.Р., 1999; Буланцев А.Л. и др., 1998; Бродов Л.Е. и др., 1997; Пикина А.П. и др., 1999). Эубиотики, в отличие от антибиотиков и химиопрепаратов, не оказывают негативного влияния на представителей нормомикрофлоры желудочно - кишечного тракта, наоборот, при дисбиотических изменениях способствуют ее качественному и количественному восстановлению до нормальных значений. В некоторых случаях возможно одновременное использование эубиотиков с другими средствами симптоматического лечения, в том числе с антибактериальными препаратами (Позняк А.Л. и др., 1997).

Результаты расширенного использования эубиотиков в медицинской практике стимулировали работы по их совершенствованию, поиску новых препаратов, разработке новых технологий их производства, а также позволили установить наличие у них, помимо антагонистической активности, ряда полезных ранее неизвестных свойств: иммуномодулирующих, антиаллергических, антирадиационных, антитоксических (Смирнов В.В. и др., 1996; Пирузян Л.Ф. и др., 1992; Мазанкова Л.Н. и др., 1996; Евсеев A.A. и др., 1996). Эти данные имеют принципиальное теоретическое и прикладное значение в плане конструирования и применения эубиотиков. Перечень конкретных препаратов, серийно производимых в настоящее время отечественной медицинской промышленностью, а также находящихся в стадии разработки и клинических испытаний в мировой практике, достаточно представителен и постоянно расширяется (Чупринина Р.П. и др., 1993; Смирнов В.В. и др., 1983; Белявская В.А. и др., 1996; Королюк A.M., 1996;

Булагов P.C. и др., 1996; Королюк A.M. и др., 1996; Никитиенко В.И. и др., 1996; Новокшонова В.А. и др., 1996; Смирнов В.В. и др., 1996; Изучение продуктов., 1998; Микроинкапсулированные лактобациллы., 1997; Саркисов С.Э. и др., 2000; Журило O.A. и др., 1998). Учитывая различия в степени выраженности тех или иных конкретных лечебно - профилактических свойств и их совокупности для отдельных препаратов, выбор и применение в лечебной практике наиболее эффективных эубиотиков предопределяет актуальность проведения их сравнительных исследований как в лабораторных, так и клинических условиях.

Среди большого числа используемых в настоящее время эубиотиков особое значение придается препаратам, приготовленным на основе спорообразующих бактерий. Наибольшее распространение среди них имеют бактисубтил, биоспорин, споробактерин, флонивин - БС, цереобиоген, энтерогермин. Из них бактисубтил и флонивин - БС являются импортными препаратами, поступающими из Франции (фирма Marion MerrelT) и Югославии (фирма Galenika), хотя основой этих препаратов является один и тот же штамм, но обозначаемый по - разному {Bacillus cereus IP 5832 или Bacillus species IP 5832) из коллекции Института Пастера (Париж). В состав цереобиогена (фирма Xing Jian, Китай) входит штамм В. cereus DM 423. В основе энтерогермина (фирма Sanofi Winthrop, Милан) заложена культура Bacillus subtilis. Наиболее известен практическим врачам и населению в результате широкомасштабной рекламной компании и часто применяем в практике бактисубтил. Вместе с тем результаты сравнительных испытаний указанных лекарственных средств в доступной литературе отсутствуют, поэтому представляется целесообразным дать сравнительную характеристику подобных эубиотиков. Указанная задача является особенно актуальной в связи с разработкой новых технологий производства подобных препаратов. Это позволило нам сформулировать цель и задачи исследования. цель и задачи исследования.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Выявить особенности фармакодинамики и фармакокинетики эубиотиков, изготовленных на основе аэробных спорообразующих бацилл на примере бактисубтила (В.Брешез) и биоспорина (В.БиЫШБ и В.НсЬешГогпш), а также оценить профилактическую и лечебную эффективность биоспорина в эксперименте на животных.

ЗАДАЧИ:

1. Изучить биохимическую и антагонистическую активность микроорганизмов, входящих в состав биоспорина и бактисубтила.

2. Оценить безвредность в опытах по изучению острой и хронической токсичности биоспорина и бактисубтила и их влияние на некоторые показатели иммунитета у животных.

3. Определить фармакокинетику исследуемых препаратов.

4. Показать эффективность биоспорина и бактисубтила на модели инфекционного процесса.

5. Усовершенствовать методы производственного биологического контроля биоспорина с целью включения этих методов в «Стандарты предприятия», «Фармакопейную статью» и «Инструкцию по медицинскому применению».

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

Все положительные биологические и лечебно-профилактические свойства биоспорина, при использованием технологии глубинного выращивания компонентов препарата, сохраняются.

Комплексный эубиотик биоспорин, приготовленный на основе двух штаммов аэробных спорообразующих бактерий (В.БиМШв и В.НсЬе^опшз) по совокупности положительных фармакодинамических и фармакокинетических свойств превосходит аналогичный зарубежный препарат бактисубтил.

10

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

В эксперименте на животных при сравнительной оценке фармакодинамических и фармакокинетических свойств биоспорина и бактисубтила выявлена более высокая эффективность биспорина.

В эксперименте на животных (изучена острая и хроническая токсичность) показана безопасность применения биоспорина и бактисубтила.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Разработаны и включены в «Стандарты предприятия» и «Фармакопейную статью» методы производственного биологического контроля биоспорина.

Результаты, полученные в процессе выполнения данной диссертационной работы, позволили реализовать преимущества биоспорина путем внесения изменений в «Инструкцию по медицинскому применению», обосновании необходимости более широкого его применения в медицинской практике с точки зрения профилактики и лечения ОКИ и дисбактериозов.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Васильев, Андрей Никифорович

ВЫВОДЫ

1. Выявлены выраженные отличия биоспорина от бактисубтила, по биохимическим признакам и антагонистической активности. Показано, что ферментативная активность в отношении углеводов, а также антагонистическая активность против возбудителей острых кишечных инфекций и дисбактериозов (сальмонеллы, шигеллы, стафилококки, стрептококки, протей, кандида) у биоспорина выше, чем у бактисубтила.

2. В опытах по изучению острой и хронической токсичности биоспорина и бактисубтила, а также по изучению показателей иммунитета у лабораторных животных установлен однотипный характер реакций макроорганизма на введение эубиотиков и выявлена полная безвредность и иммунологическая безопасность исследуемых препаратов.

3. Определена фармакокинетика бактерий - компонентов биоспорина и бактисубтила в органах лабораторных животных после внутрижелудочного введения препаратов. Обнаруженная диссеминация микроорганизмов в органах экспериментальных животных не влияет на показатели безопасности и безвредности препаратов.

4. На модели инфекционного процесса сальмонеллеза у экспериментальных животных установлена более высокая лечебная и профилактическая эффективность биоспорина по сравнению с бактисубтилом.

5. Результаты экспериментального исследования вошли в НТД предприятия по контролю качества изготавлеваемого препарата - биоспорина (СТП - ОБТК - 042 - 048 - 98 и ФС 42-3476-98), а также использованы в "Инструкции по медицинскому применению биоспорина", утвержденной МЗ РФ в 1998г.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проблема практического использования эубиотиков на сегодняшний день является весьма актуальной. Разностороннее их применение в медицинской практике имело место в 30 - 50-е годы в нашей стране и за рубежом, что объясняется тем обстоятельством, что химиотерапия острых кишечных и других инфекционных заболеваний еще была недостаточно разработана, а антибиотики не имели столь широкого распространения.

С внедрением в практику антибиотиков и химиопрепаратов широкого спектра действия значение эубиотиков как лечебно - профилактических препаратов для инфекционной клиники было почти полностью утрачено. Pix роль ограничивалась только коррекцией нарушений нормомикробиоценоза у детей и в меньшей мере - у взрослых. Примечательно, что формированию дисбактериозов в значительной степени способствовали именно антибиотики и химиопрепараты, а затем, как оказалось, и другие неблагоприятные факторы и условия экологии и социальной сферы.

Параллельно происходили и другие явления: появление и широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов патогенных и условно патогенных бактерий, утяжеление течения инфекционных заболеваний, нарушение нормальных функций гомеостаза человека и т. д. Конечные результаты этих и других неблагоприятных процессов еще далеко неясны, однако уже сейчас вполне очевидно, что использование все новых и новых антибиотиков и химиопрепаратов не способно решить все имеющиеся проблемы инфекционной заболеваемости.

На этом этапе развития медицинских знаний мы являемся свидетелями возраждения интереса ученых и врачей к эубиотикам, разработке теории и практики соответствующей проблематики. При этом успешно разрабатываются оригинальные композиции и лекарственные формы эубиотиков, расширяется их производство, исследуются новые, перспективные области применения данных препаратов. Не исключено, как полагают Л.А.Пирузян и Е.М.Михайловский (1992), что происходит формирование нового направления в фармакотерапии, обозначенного этими авторами как "микробная сапротрофная фармакотерапия".

Представленные данные позволили сформулировать цель исследований, которая заключалась в выявлении закономерностей и особенностей биологических свойств, биохимической и антагонистической активности, фармакокинетики и фармакодинамики эубиотиков, приготовленных на основе спорообразующих бацилл (на примере бактисубтила и биоспорина, приготовленного по новой технологии с использованием глубинного выращивания бактерий), а также в оценке профилактической и лечебной эффективности биоспорина.

На первом этапе исследований изучили культурально морфологические свойства, антагонистическую и биохимическую активность штаммов, входящих в состав биоспорина и бактисубтила. Установлено, что по основным свойствам использованные штаммы не отличались друг от друга. Вместе с тем штаммы - компоненты биоспорина обладали более выраженными биохимическими свойствами и антагонистической активностью по сравнению со штаммом, являющимся основой бактисубтила. Особые различия отмечаются при изучении антагонистической активности культур. В частности, биоспорин угнетает рост шигелл, сальмонелл, стафилококков, стрептококков, энтеропатогенной кишечной палочки, протея и кандиды. Бактисубтил не обладает указанными свойствами. Кроме того он имеет меньшую биохимическую активность, особенно в плане ферментации углеводов.

Доклиническая оценка токсичности, безопасности и фармакологической активности биоспорина и бактисубтила показала их безвредность для макроорганизма, в том числе на показатели иммунитета как в остром, так и хроническом эксперименте. Вместе с тем сравнительное изучение фармакодинамики и фармакокинетики эубиотиков на лабораторных животных позволило выявить более выраженную персистенцию клеток - компонентов биоспорина в органах и тканях макроорганизма по сравнению с бактериями, составляющими основу бактисубтила.

Полученные нами данные по диссеминации бацилл во внутренних органах экспериментальных животных можно трактовать с известной позиции В.В.Смирнова (1998) о возможности перманентной транслокации бацилл из просвета кишечника через его стенку в лимфоидные структуры, кровь, печень, селезенку, легкие и другие органы и ткани. Показано в эксперименте и на клиническом материале (Никитенко В.И., 1991) у больных с гнойными ранами и открытыми переломами при лечении споробактерином, что входящие в его состав бациллы как-бы "притягиваются" в район повреждений. Из желудочно - кишечного тракта и внутренних источников (лимфоидные фолликулы, лимфатические узлы, селезенка, печень) живые бактерии сенной палочки при различных повреждениях проникают с током крови и лимфы в воспалительные очаги различной локализации. Там они сохраняют жизнеспособность и не вызывают воспалительных или иных осложнений. Считается, что в соединительной ткани, окружающей рану или очаг повреждения, бактерии выделяют антибиотики, протеолитические ферменты, иммуномодуляторы и оказывают лечебное действие при гнойно -воспалительных процессах.

Выявленные положительные свойства биоспорина определяют и выраженную лечебно - профилактическую эффективность этого препарата по сравнению с бактисубтилом, что подтверждено в опытах на модели инфекционного процесса у лабораторных животных. При этом установлено, что биоспорин обладает иммуномодулирующим действием, оказывая положительное влияние на неспецифические факторы иммунитета. В связи с этим биоспорин может использоваться при многих заболеваниях, применение при которых не отражено в соответствующей Инструкции.

Таким образом, полученные результаты позволили выявить

97 особенности биологических свойств, антагонистической и биохимической активности, фармакокинетики и фармакодинамики эубиотиков на основе аэробных спорообразующих бактерий, что составляло цель настоящих исследований и определяло задачи, подлежащие решению.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Васильев, Андрей Никифорович, 2000 год

1. А. С. 1398868 СССР, МКИ 4А 61 К 35/74. Способ лечения гнойно -септических послеродовых заболеваний// В.В.Смирнов, С.Р.Резник, И.Б.Сорокулова и др. Опубл. 30.05.1988, Бюлл. №20.

2. А. С. 1722502 А 1 СССР, МКИ А 61 К 39/02, 35/74. Препарат биоспорин для профилактики и лечения желудочно кишечных заболеваний человека// В.В.Смирнов, С.Р.Резник, И.Б.Сорокулова и др. - Опубл. 30.03.1992, Бюлл. №12.

3. Абрамов H.A., Иванов Д.Г., Ланских А.Г. Перспективы создания промышленной технологии микрокапсулированных препаратов -эубиотиков. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 2.

4. Микробиоценоз кишечника детей с диарейными заболеваниями в процессе лечения лактоглобулином. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 1999. - №6. С. 92-93.

5. Алмагамбетов К.Х., Искаков С.С., Иманбаев Н.И. Дисбактериозы при терминальных состояниях и способы коррекции. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 2.

6. Ашмарин И.П., Воробьев A.B. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л. ¡Медицина. 1962. 180с.

7. Ю.Байрамова Г.Р. Обоснование целесообразности применения эубиотиков после этиотропного лечения бактериального вагиноза. Тез. докл.

8. Всероссийской научно практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 42.11 .Бациллы. Генетика и биотехнология / Пер. с англ. Под ред. А.А.Прозорова. М.: Медицина. 1992. 296 с.

9. Башмакова Н.В., Заварзина Л.П., Головко В.Д. Использование эубиотиков в системе коррекции микробиоценоза урогенитального тракта. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 7.

10. Беканов М.Х., Зелинская Е.П., Шортанова Т.Х., Ячная Е.В. Лечение дисбактериозов кишечника в условиях детского реабилитационного центра "Радуга." Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 42.

11. Белявская В.А., Сорокулова И.Б., Масычева В.А. Рекомбинантные пробиотики: проблемы и перспективы использования для медицины и ветеринарии. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 7.

12. Блохина И.Н., Дорофейчук В.В. Дисбактериозы. Л.:Медицина. 1969. 137 с.

13. Блюгер А.Ф., Векслер Х.М., Новицкий И.М. Клиническая иммунология кишечных инфекций. Рига: Звайгзие. 1980. 214 с.

14. Бондаренко A.B., Бондаренко В.М. Новые подходы к лечению дисбактериозов. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 8.

15. Бродов Л.Е., Ющук Н.Д., Малеев В.В. Диагностика и лечение острых кишечных инфекций.// Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. №4. С. 4 - 6.

16. Бродов Л.Е., Ющук Н.Д., Малеев В.В. Диагностика и лечение острых кишечных инфекций.// Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. № 4. С. 4 - 6.

17. Буланцев А.Л., Липницкий A.B., Тихонов Н.Г. Микробиоценоз кишечника человека и перспективы коррекции дисбиозов с помощью пробиотиков.// Поволж. экол. вестн. 1998. №5. С. 364 - 369.

18. Бухарин О.В. Техногенные факторы в инфекционной патологии.// Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. №4. С. 43 - 44.

19. Войчишина Л.Г., Чаплинский В.Я., Вьюницкая В.А. Применение спорообразующих бактерий в лечении больных дисбактериозом.// Врачебное дело. 1991. №6. С. 73-75.

20. Воробьев A.A., Абрамов H.A., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Дисбактериозы актуальная проблема медицины. - Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 42.

21. Воробьев A.A., Лыкова Е.А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1999. №6. С. 102 - 105.

22. Ганина В.И., Семенихина В.Ф., Иноземцева В.Ф. Бифацид новый отечественный биологический препарат. - Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 12.

23. Гапочко К.Г., Магазов Р.Ш., Мельников В.Н. и др. Система массовой комплексной и ассоциированной вакцинации для крупных эпидгеографических регионов мира. Уфа: Гилем. 1996. 280 с.

24. Гиль С.А., Колесинская Л.А. Бактерицидное влияние ацидофильного молока на микробы коли тифозной и дизентерийной групп.// Педиатрия. - 1936. №9. С. 55 - 57.

25. Горшевикова Э.В., Фурманова Ю.А., Слабоспицкая А.Т. и др. Применение биоспорина в лечении экспериментальной гнойной раны.// Клиническаяхирургия. 1992. №9 10. С. 30 - 32.

26. Государственные испытания и регистрация новых иммунобиологических препаратов: Санитарные правила. М.: Информационно-издательский центр МЗ России. 1998. 42 с.

27. Грачева Н.М., Щетинина И.Н. Клиническая химиотерапия при инфекционных болезнях. JL: Медицина. 1980. 120 с.

28. Григорьев A.B., Бондаренко В.М., Феклисова JI.B. и др. Разработка и клиническая оценка пробиотика "Бифидумбактерина форте." Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 11.

29. Доклинические испытания новых медицинских иммунобиологических препаратов. Основные положения. МЗ СССР. М.: 1989. 24 с.

30. Жакевич В.Д. "Bifî Life" - семейство целебных продуктов с комплексом человеческих бифидобактерий. - Тез. докл. Всероссийской научно -практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 14.

31. Иммунологические методы. Пер. с нем./ Под ред. Г.Фримоля. М.: Медицина. 1987. 472 с.

32. Инфекционная заболеваемость в Российской Федерации за январь -декабрь 1996 г.// Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. №4. С. 63 - 64.

33. Каркищенко H.H., Каркищенко В.Н., С.Ю. Пчелинцев Психотропное, антистрессорное и антиноцицептивное действие интерферона.-Вестник Российской академии медицинских наук.-1999.№10.с.18-19.

34. Клиническая иммунология и аллергология. В 3 х томах. Пер. с нем./ Под ред. Л.Негера. -2-е изд. - М.: Медицина. 1990. Т. 1. 528 с.

35. Козлов Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии. М.:1. Медицина. 1950. 64 с.

36. Козлова Н.В., Спирина Т.С., Жиленко М.И., Яковлева Н.И. Состояние кишечного микробиоценоза и его коррекция у беременных, проживающих в условиях повышенного радиационного загрязнения.// Антибиотики и химиотерапия. 1994. №6. С. 39-43.

37. Коноплева В.И. Особенности микробного биоценоза толстого кишечника детей дома ребенка, подходы к коррекции его нарушений. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 18.

38. V W .J 1 W U tt lililí, LJ I 1VÍ 1 VíillVJIVl llíl. J.V V Д. VJJ X Л X 1 11/1. 1—< 14 VI 1 VjJ lili W J A , 1 S S S ^ v. 1 V/103.

39. Коробкова E.H., Смирнов В.П. Об антагонистическом действии кишечной палочки на палочку чумы.// Вестник микробиол., эпидемиол. и паразитол. -1938. №3 4. Вып. 17. С. 21 - 25.

40. Королюк A.M., Петров JI.H., Вербицкая Н.В. и др. Разработка двухкомпонентного эубиотика для нормализации микрофлоры кишечника у детей. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 19.

41. Краморенко Ю.С., Урашева С.М., Байсалбаева В.К., Добрица Т.А. Микрометод комплексного определения Т- и B-лимфоцитов в капиллярной крови.// Лабораторное дело 1990. №5. С. 16-18.

42. Краткий определитель бактерий Берги. Под ред. Дж. Хоулта, Г.А.Заварзина. -М.: Медицина. 1980. 358 с.

43. Кудзин К.И. Ацидофильная палочка, ее природа и терапевтическое значение культур. Минск: 1940. 132 с.

44. Ладодо К.С., Щербакова Э.Г. Применение БАД в педиатрической практике. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 21.

45. Липатов H.H., Барышникова Е.П., Сажинов Г.Ю., Щербакова Э.Г. Биотехнологические подходы к совершенствованию качества кисломрлочных продуктов для специализированного питания.// Хранение и переработка сельхозсырья. 1998. №12. С. 9 - 11.

46. Литусов Н.В., Щелгачев В.В., Ларионов Л.П. Изучение возможности создания гелевой формы эубиотика биоспорина. Тез. докл. 3 Российско -итальянской конф. по инфекционным болезням, 3-6 июня 1998 г. - Санкт -Петербург, 1998, с. 35.

47. Мазанкова Л.Н., Бродинова И.С., Михайлова H.A. Опыт применения споробактерина при аллергодерматозах у детей раннего возраста. Тез. докл. Всероссийской научно — практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 25.

48. Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий рода Bacillus из организма человека и животных. МЗ УССР. АН УССР. Киев: 1983. 42 с.

49. Методические рекомендации по диагностике и лечению дисбактериоза. -М.: 1986. 76 с.

50. Методические рекомендации по оценке аллергенных свойств фармакологических средств. МЗ СССР, Ф.К, М.: 1988. 34 с.

51. Методические указания по экспериментальному обоснованию ПФК микроорганизмов-продуцентов и содержания их готовых форм препаратов в объектах производственной и окружающей среды. МЗ СССР, М.: 1991. 52 с.

52. Мирзабалаева А.К., Антонов Б.Б. Применение эубиотиков в терапии кандидоза гениталий у женщин. Тез. докл. Всероссийской научно -практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 25.

53. Морозова J1.B., Мельничук Г.М. Дисбаланс симбиотической микрофлоры при развитых формах пародонтита и лечебная эффективность ацилакта. -Тез. докл. Всероссийской научно практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 24.

54. Наркевич М.И., Тымчаковская И.М. Инфекционная заболеваемость в России.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1997. №3. С. 48 -52.

55. Никитенко В.И. Взаимоотношения макроорганизма и бактерий в ране и тканях человека и животных.// Хирургия. 1990. №9. С. 94 - 98.

56. Никитенко В.И. Вместо лекарств бактерии.// Наука в СССР. - 1991. №4. С. 116-121.

57. Никитенко В.И., Горбункова H.H., Жигайлов A.B. Споробактерин новый препарат для лечения дисбактериозов и гнойно - воспалительных процессов. - Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 26.

58. Пак С.Г., Турьянов М.Х., Пальцев М.А. Сальмонеллез. М.: Медицина. 1988.211 с.

59. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека. -М.: Медицина. 1955. 128 с.

60. Перетц Л.Г. Колитерапия и колипрофилактика дизентерии. Сб. Санитарная служба в дни Отечественной войны. - М.: 1945. №2. С. 21 - 23.

61. Перетц Л.Г. Роль кишечного дисбактериоза в возникновении, течении иисходе дизентерии и нормализации кишечной микрофлоры, как метод борьбы с дизентерией. В кн. Вопросы профилактики и лечения дизентерии. - М.: 1952. с. 27 - 29.

62. Перетц Л.Г., Невлер А.И., Калижникова А.И. и др. Антагонистическое влияние кишечных палочек на туберкулезную, дифтерийную и паракишечные палочки и на протей.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1936. №1. С. 31 - 34.

63. Пикина А.П., Смеянов В.В., Ефимов Б.А. и др. Первичный скрининг бифидобактерий и лактобактерий с целью разработки на их основе эффективных препаратов пробиотиков.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 1999. №6. С. 34 - 38.

64. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбактериозы кишечника. М.: Медицина. 1984. 127 с.

65. Пирузян Л.Ф., Михайловский Е.М. Сапрофитная микрофлора в качестве продуцента биологически активных веществ для целей микробной сапротрофной фармакотерапии.// Изв. Академии наук. Сер. Биол. 1992. №6. С. 860 - 869.

66. Полищук Е.И., Сельникова О.П. Возможности регуляции формирования микробиоценозов новорожденных. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 30.

67. Потапова С.Г., Хрустиков B.C., Демидова A.B. и др. Изучение поглотительной способности нейтрофилов крови с использованием инертных частиц латекса.// Пробл. гематологии и переливания крови. -1977. №9. С. 58-59.

68. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP). М.: МЗ СССР. 1992. 34 с.

69. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. М.: МЗ РСФСР. 1977. 12 с.

70. Прикладная иммунология./ Под ред. А.А.Сохина, Е.Ф.Чернушенко. Киев: Здоровье. 1984. 320 с.

71. Рогозин И.И., Косовая Е.И. Использование микробного антагонизма для обезвреживания бацилловыделителей на путях эвакуации.// Воен. мед. журн. 1933. Т. 4. Вып. 4. С. 24 - 27.

72. Руководство по инфекционным болезням. Санкт - Петербург: Медицина. 1996. 316 с.

73. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. М.: Медицина. 1973. 57 с.

74. Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней/ Под ред. В.И.Покровского. М.: Медицина. 1993. Т. 1 2.

75. Савичева A.M., Башмакова М.А. Микробиоценозы влагалища и их регуляция. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 33.

76. Саркисов С.Э., Крымшокалова З.С., Кафарская Л.И., Коршунов В.М. Применение биотерапевтического агента "Жлемик" для коррекции микрофлоры при бактериальных вагинозах.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2000. №1. С. 88 - 90.

77. Сборник инструкций по оценке качества готового препарата биоспорин в ампулированной (флаконированной) форме выпуска. СТП -ОБТК 042 - 048 - 98. - Инв. №Д - 106.

78. Селезнев Е.Ф. Оценка обоснованности применения лекарственных средств у стационарных больных с острыми кишечными заболеваниями.// Антибиотики и химиотерапия. 1993. Т. 38. №7. С. 44 - 47.

79. Слабоспицкая А.Т., Виноградов В.П., Крымовская С.С. и др.Новыйпрепарат биоспорин и его влияние на микрофлору кишечника при дисбактериозах новорожденных детей.// Микробиол. журн. 1995. Т. 57. №1. с. 71-76.

80. Смирнов А.О., Садовой Н.В., Литусов Н.В. и др. Выживаемость бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis при прессовании таблеток биоспорина.// Биотехнология. 1997. №4. С. 17-21.

81. Смирнов А.О., Харечко А.Т., Садовой Н.В. и др. Разработка технологии получения таблеточной формы препарата биоспорин.// Биотехнология. 1996. №11. С. 51 - 55.

82. Смирнов В.В. Антибиотики и /или пробиотики: размышления и факты.// Медицинская картотека мира. 1998. №8. С. 28 - 30.

83. Смирнов В.В., Резник С.Р., Василевская H.A. Спорообразующие аэробные бактерии продуценты биологически активных веществ. Киев: Наукова думка. 1983. 137 с.

84. Смирнов В.В., Резник С.Р., Вьюницкая В.А. и др. Современные представления о механизмах лечебно профилактического действия пробиотиков из бактерий рода Bacillus.II Микробиол. журн. - 1993. Т. 54. №6. С. 82-94.

85. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б., Вьюницкая В.А. Дискуссионные вопросы создания и применения бактериальных препаратов для коррекции микрофлоры теплокровных.// Микробиол. журн.- 1992. Т. 54. №6. С. 82-94.

86. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б., Вьюницкая В.А. О некоторых механизмах возникновения бессимптомной бактериемии.// Микробиол. журн. 1988. Т. 50. №6. С. 56 - 59.

87. Смирнов В.В., Сорокулова И.Б. Перспективы применения бактерий рода Bacillus в качестве основы новых биопрепаратов для медицины. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 33.

88. Смирнов В.В. Кудрявцев В.А., Осадчая А.И., Сафронова Л.А. Новый пробиотик эндоспорин для лечения и профилактики эндометритов животных. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 32.

89. Сорокулова И.Б. Сравнительное изучение биологических свойств биоспорина и других коммерческих препаратов на основе бацилл.// Мкробюл. Ж. 1997. Т. 59, №6. С. 43 - 49.

90. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. М.: 1998. 386 с.

91. Терентьев А.Н., Ломов Ю.М., Карбышев Г.Л. и др. Особенности распространения холеры и проведения противоэпидемических мероприятий в небольших населенных пунктах Дагестана.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1995. №2. С. 36 - 39.

92. Тремасов М.Я., Сергейчев А.И., Титова В.Ю., Зинатуллин P.P. Влияние пробиотика энтероспорина на течение микотоксикоза. -Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70 летию НИИ микробиологии МО РФ. - Киров, 1998, с. 235 - 236.

93. Учайкин В.Ф., Мурашова А.О., Абрамов H.A. Бифидокефир в лечении и профилактике дисбактериозов. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы иэубиотики." М., 1996, с. 36.

94. Фармакопейная статья: Биоспорин сухой. ФС 42-3476-98,1998 г.

95. Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук J1.B. и др. Руководство по иммунологическим методам в гигиенических исследованиях. М.: «Промедэк». 1993. 84 с.

96. Феклисова JI.B., Королева Н.С., Бавина H.A. Новый биологический препарат аципол для лечения и оздоровления детей. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 36.

97. Харечко А.Т., Ларионов Л.П., Литусов Н.В. и др. Эубиотики для профилактики, лечения и реабилитации больных при инфекционных заболеваниях и дисбактериозах (методические рекомендации). Екатеринбург: Министерство обороны РФ. 1998. 52 с.

98. Червякова В.И., Береза И.М., Селезнева С.И. и др Бактериологическая и иммунологическая эффективность биоспорина при неспецифическом язвенном колите.// Микробиол. журн. 1993. Т.55. №3. С. 63-67.

99. Червякова В.И., Береза И.М., Селезнева С.И. и др. Бактериологическая и иммунологическая эффективность биоспорина при неспецифическом язвенном колите.// Микробиол. журн. 1993. Т. 55. №3. С. 63 - 67.

100. Чешева В.В., Поспелова В.В., Манвелова М.А. Пробиотики из лактобацилл в арсенале средств бактериальнлй терапии. — Тез. докл. Всероссийской научно практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 39.

101. Чупринина Р.П., Скорикова И.Г., Евлашкина В.Ф. Препараты для профилактики и лечения дисбактериозов разной этиологии. М.: ГИСК им. Л.А.Тарасевича. 1993. 56 с.

102. Шувалова Е.И. Инфекционные болезни. М.: Медицина. 1982. 218 с.

103. Шувалова Е.П., Кроткова М.Р. Особенности современного течения дизентерии по материалам Санкт Петербурга и применение эубиотиков. -Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 39.

104. Щербаков П.Л. Значение бактисубтила в лечении диарей идисбактериозов.// Лечащ. Врач. 1998. №1. С. 20 - 22.

105. Щербакова Э.Г., Грачева Н.М., Растунова Г.А. и др. Новый препарат Бпфилиз (ВИГЭЛ) и опыт его применения. Тез. докл. Всероссийской научно - практической конференции "Дисбактериозы и эубиотики." М., 1996, с. 41.

106. Экспериментально производственный регламент №580 - 96. Биоспорин/ ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. - 1994. - Арх. ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ.-Инв. №Д-64.

107. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я., Садовой Н.В. и др. Клиническое изучение эффективности нового эубиотика биоспорина при лечении иерсиниозов. Тез. докл. 3 Российско - итальянской конф. по инфекционным болезням, 3-6 июня 1998 г. - Санкт - Петербург, 1998, с.

108. Изучение продуктов метаболизма и антагонистического действия комбинированных культур Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus/Aslim Belmaf/Turkhij. Deneysel biol.derg.- 1998. V. 55. №1. P. 17 -23.

109. Dityatkovskaja E.G., Chaplinsky V.Ya. Biosporin white allergietching dermatosis treatment// 1-st Int. Conf. Immunoreabilitation "Reabilitation oe Immune system". Dagomys, 1 5 Juli, 1992/ Tsk. 1992. - P. 97.

110. Priest F.G. DNA homology in the genus Bacillus. In: Aerobic Endospore- form. Bact.: CI. and Identif. Symp., Cambridqe, Apr., 1979. London e.a., 1981, p. 33-57.

111. Sears C.L., Kaper J.B. Enteric bacterial mechanisms of action and lineage to intestinal secretion/ Microbiological reviews. 1996. - V. 60, №1. - P. 167 -215.

112. Thach Pham Ngoc, Vu Thi Chin, Nguen Thi Hoi. Le Bacillus subtilis en therapeutique et dans la prophilaxie// Rev. Immunol. 1968. - Vol. 72, №1 - 2. -P. 53.

113. Tinole F. Fizioloski pomen bacteriemije z jejunalno mikrofloro// Zdrav. Vestn. -1981.- Vol.51. P. 3-5.