Создание новых высокоспецифичных сорбентов мочевой кислоты методом молекулярного импринтинга тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат технических наук Лещинская, Анастасия Петровна

• Лещинская, Анастасия Петровна
• кандидат технических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат технических наук Лещинская, Анастасия Петровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Роль мочевой кислоты в пуриновом обмене.

1.1.1. Методы лечения гиперурикемии и подагры.

1.2. Эфферентные методы детоксикации организма.'.

1.3. Структу ра и свойства полимерных сорбентов для гемосорбции.

1.3.1. Неспецифические сорбенты.

1.3.2. Пути получения гемосовместимых сорбентов.

1.3.2.1. Модификация полимерной поверхности белками и антикоагулянтами.

1.3.2.2. Получение сорбентов полиамфолигной структуры.

1.3.2.3. Капсулирование.

1.3.3. Специфические сорбенты.

1.3.4. Иммуносорбенты.

1.4. Сорбенты с молекулярными отпечатками.

1.4.1. Синтез молекулярно импринтированных полимеров (МИПов).

1.4.2. Нековалентный молекулярный импринтинг.:.

1.4.3. Ковалентный молекулярный импринтинг.

1.4.4. Применение молекулярно импринтированных полимеров.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Материалы.

2.1.1. Структура и свойства мочевой кислоты.

2.1.2. Структура и свойства ксантина.

2.1.3. Сорбенты, используемые в работе.

2.2. Методы.

2.2.1. Методика проведения экспериментов по равновесию сорбции мочевой кислоты.

2.2.2. Методика проведения экспериментов по равновесию сорбции ксантина.

2.2.3. Подбор модельных растворов мочевой кислоты, наиболее адекватных плазме крови и позволяющих осуществлять работу в безопасных лабораторных условиях.

2.2.4. Методика проведения экспериментов по равновесию сорбции мочевой кислоты из перитонеалыюй жидкости.

2.2.5. Исследование зависимости равновесных параметров сорбции от начальной концентрации и от ионной силы.

2.2.6. Определение коэффициента распределения мочевой кислоты между подвижной и неподвижной фазами сорбента.

2.2.7. Подбор условий для синтеза сшитого полимера.

2.2.8. Синтез сетчатых полимеров в присутствии мочевой кислоты.

2.2.9.1 ^следование физико-химических свойств синтезированных сетчатых полимеров.

2.2.10. Методика проведения экспериментов по кинетике сорбции мочевой кислоты.

2.2.10.1. Модель Бойда.

2.2.10.2. Модель «оболочка - ядро».

2.2.11 Методика проведения экспериментов по сорбции мочевой кислоты в динамических условиях.

2.2.12 Расчет основных термодинамических функций для мочевой кислоты и ксантина.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование межмолекулярных взаимодействий мочевой кислоты с сорбентами природного и синтетического происхождения.

3.1.1. Исследование равновесной сорбции мочевой кислоты на природных и синтетических сорбентах из перитонеальной жидкости.

3.1.2. Изучение изотерм сорбции мочевой кислоты из водных растворов.

3.1.3. Равновесие сорбции мочевой кислоты на синтетических анионигах.

3.2. Синтез и исследование основных физико-химических и сорбционных свойств нового сшитого полимерного сорбента, импринтированного молекулами мочевой кислоты.

3.2.1. Подбор условий для синтеза сшитого полимера.

3.2.2. Синтез полимеров на основе диметиламиноэтилметакрилата и диметакрилата этилен гликоля.

3.2.3. Введение мочевой кислоты в полимеризационную среду.

3.2.4. Исследование изотерм сорбции мочевой кислоты на сорбентах на основе диметиламиноэтилметакрилата и диметакрилата этиленгликоля.

3.2.5. Оптимизация введения мочевой кислоты в полимеризационную среду.

3.2.5.1. Введение мочевой кислоты в виде функционального комплекса с дпаллпл амином.

3.2.5.2. Введение глицерина в качестве растворителя в полимеризационную среду.

3.2.5.3. Введение мочевой кислоты в виде солевых комплексов с низкомолекулярными органическими основаниями. Исключение диметпламиноэтилметакрилага из полимеризационной смеси.

3.3. Изучение специфичности сорбции мочевой кислоты на импринтированном сорбенте МК-МИП-7-16.

3.3.1. Изучение изотерм сорбции мочевой кислоты на импринтированном сорбенте МК-МИП-7-16.

3.3.2. Изучение изотерм сорбции ксантина на МК-МИП-7-16 и соответствующем контрольном полимере.

3.3.3. Исследование термодинамических функций сорбции мочевой кислоты и ксантина.

3.4. Исследование кинетических параметров взаимодействия мочевой кислоты с молекулярно импринтированным сорбентом МК-МИП-7-16.

3.4.1. Влияние размера частиц на кинетику сорбции мочевой кислоты сорбентом МК-МИП-7-16. Выбор математической модели для интерпретации экспериментальных данных.

3.4.2. Расчет основных кинетических параметров взаимодействия мочевой кислоты с сорбентом МК-МИП-7-16 с использованием модели Бойда.

3.4.3. Расчет основных кинетических параметров взаимодействия мочевой кислоты с сорбентом МК-МИП-7-16 с использованием модели «оболочка-ядро».

3.5. Исследование сорбции мочевой кислоты с МК-МИП-7-16 в динамических условиях из модельных растворов.

3.6. Исследование сорбции мочевой кислоты с импринтированным сорбентом МК-МИП-7-16 в динамических условиях из сыворотки крови.

4. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание новых высокоспецифичных сорбентов мочевой кислоты методом молекулярного импринтинга»

Мочевая кислота - конечный продукт пуринового метаболизма в организме человека. Мочевая кислота (МК) находится в ионизированной форме, главным образом, в виде уратов в плазме крови, межклеточной и синовиальной жидкостях. При высокой концентрации МК (свыше 420 мкмоль/л) наблюдается гиперурикемия. При этом ряд локальных физико-химических условий, таких как избыток катионов, повышение температуры, приводит к кристаллизации уратов. Это способствует их накоплению в различных тканях организма (суставах, почках, мочевых путях и даже в клапанах сердца) и часто приводит к подагре. Но и при отсутствии кристаллизации повышенные концентрации МК могут вызывать значительные дисфункции организма, такие как артериальная гипертензия, атеросклероз и их осложнения (инфаркт, инсульт, сердечная и почечная недостаточность).

В настоящее время в основном используются два подхода для коррекции гиперурикемии и подагры. Во-первых, специальная диета (прежде всего, ограничивается употреблением богатой пуринами пищи). К сожалению, это трудно реализуемое и малоэффективное лечение. Во-вторых, используются лекарства двоякой направленности: ограничивающие образование МК или способствующие выведению ее почками. Эффективность такой фармакотерапии умеренная, существуют ограничения, поскольку возможны побочные эффекты.

Все большее внимание уделяется развитию и внедрению в клиники современных эфферентных методов лечения с использованием экстракорпоральных устройств. Эфферентные методы моделируют естественные механизмы детоксикации организма, в основе которых лежат сорбционные механизмы связывания токсинов. С этой точки зрения, сорбционные методы удаления МК непосредственно из крови больных представляются перспективными. В настоящее время в качестве гемосорбентов как в отечественной практике, так и зарубежной, применяются соединения на основе углей. В ряде опубликованных работ, посвященных гемосорбционным процессам, отмечается снижение уровня МК в крови как эффекта, сопутствующего лечебным процедурам с применением разного рода сорбентов, чаще на основе активированных углей, не являющихся высокоселективными, и способных поглощать наряду с токсическими веществами широкий спектр физиологически активных веществ, необходимых для нормальной жизнедеятельности организма человека.

Цель работы - получение и исследование физико-химических и сорбционньтх свойств новых полимерных сорбентов, молекулярно импринтированных МК и способных селективно извлекать ее из перитонеальной жидкости и плазмы крови.

Для достижения поставленной цели были решены следующие задачи:

1. Изучены равновесные параметры селективной сорбции МК из растворов, моделирующих плазму или сыворотку крови. С целью анализа специфических взаимодействий сорбент-сорбат проведено исследование механизмов межмолекулярного связывания МК с известными синтетическими и природными сорбентами различной молекулярной структуры.

2. Выявлены сорбенты, наиболее селективно сорбирующие МК из многокомпонентной перитонеальной жидкости. На основе исследования механизма межмолекулярных взаимодействий МК с полимерными сорбентами проведен выбор сомономеров и физико-химических условий для синтеза новых сорбентов, импринтированных молекулами уремического' токсина (МК).

3. Получены полимерные сорбенты, «настроенные» на молекулу МК. Изучены физико-химические свойства полученных сорбентов. Проведены модификация и оптимизация синтеза сорбента, молекулярно импринтированного МК.

4. Исследованы специфичность сорбции и распределение полостей, комплементарных молекуле МК в структуре оптимизированного сорбента. Исследованы равновесно-кинетические и динамические параметры сорбции МК на импринтированном оптимизированном сорбенте.

5. Осуществлены клинические эксперименты по динамике сорбции МК из плазмы крови больных гиперурикемией и подагрой с повышенным содержанием МК.

Данная диссертационная работа состоит из введения, трех глав, выводов и списка использованных литературных источников. Глава I представляет собой литературный обзор, в котором дано краткое описание роли МК в метаболизме пуринов, основных современных методов эфферентной терапии, а также различных видов сорбентов, используемых в установках для гемосорбции, и методов их модификации и синтеза. Кроме того, литературный обзор включает рассмотрение методов синтеза а также описание сорбентов, молекулярно «настроенных» на целевые вещества. Глава II представляет собой экспериментальную часть, в которой дано описание материалов и методов, использованных при проведении диссертационной работы. Глава III описывает результаты, полученные при исследовании межмолекулярных взаимодействий МК с известными сорбентами различной структуры. В данный раздел также входит описание синтеза и физико-химических свойств новых селективных сорбентов с молекулярными отпечатками МК. Выводы являются изложением основных полученных результатов, представляющих интерес как для области синтеза сорбентов с молекулярными отпечатками, так и для области эфферентных методов лечения. Список литературы представлен перечнем источников отечественных и зарубежных авторов, к которым обращался автор при проведении экспериментов и написании диссертационной работы.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Лещинская, Анастасия Петровна

4. ВЫВОДЫ.

1. Исследование сорбции МК на известных природных и синтетических полимерных сорбентах позволило интерпретировать природу межмолекулярных взаимодействий уремического токсина с полимерными сорбентами. Показано, что межмолекулярное взаимодействие МК с матрицами сетчатых полимеров носит полифункциональный характер, при этом МК проявляет свойства органического аниона, а также способна образовывать водородные связи с полимерными сорбентами.

2. Получены молекулярно импринтированные сорбенты на основе ДМАЭМ и ДМЭГ. Проведена модификация и оптимизация получения молекулярного сорбента на основе ДМЭГ, импринтированного МК (МК-МИП-7-16).

3. Сравнительный анализ равновесия и термодинамических функций сорбции МК и ксантина на МК-МИП-7-16 и КП показал преобладание вклада специфичного связывания сорбата в импринтированной матрице.

4. Исследование кинетики сорбции МК показало, что в результате синтеза МК-МИП-7-16 было достигнуто узкое распределение комплементарных к молекулам МК полостей в импринтированной сетке. Это способствовало росту вклада специфичного межмолекулярного взаимодействия МК с оптимизированным сорбентом.

5. Исследование динамики сорбции МК из сыворотки крови в клинических условиях показало высокую специфичность сорбции МК МК-МИП-7-16, причем сорбция МК из сыворотки на импринтированной матрице превышала более чем в 2 раза сорбцию на КП. Полученные в работе экспериментальные данные являются основой для разработки плазмосорбционного метода лечения гиперурикемии и подагры.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Лещинская, Анастасия Петровна, 2011 год

1. Robert L. Wortmann. Gout and other disorders of purine metabolism. Harrison's Principles of Internal Medicine. // Eds. A.S. Fauci et al. Mc. Graw Hill Health Professions Division, N.Y. - Toronto, 14th edit. 1996. p. 2158 - 2165.

2. Feig D.I., Nakagawa Т., Karuinanchi S.A. et al. Uric acid, nephron number, and the pathogenesis of essential hypertension. // Kiedny Int. 2004. № 66. P.281 287.

3. H. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор. Биология: В 3-х т. Т.З: Пер. с англ. / Под ред. Р. Сопера. 2-е изд., стереотипное. - М.: Мир, 1996. - 376 е., ил. ISBN 5-03-0016023.

4. Nakagawa Т, Kang D.-H., Feig D., et al. Unearthing uric acid: An ancient factor with recently found significance in renal and cardiovascular disease. // Kidney Int. 2006. № 69. P. 1722 1725.

5. Balis M.E., Krakoff I.H., Berman P.H., Dancis J. .Urinary Metabolites in Congenital Hyperuricosuria. //.Science. .1967. .T. 156. № 3778. C. 1122-1123.

6. Pui C.H., Malimoud H.H., Wily J.M. et al. Recombinant urate oxidase for the prophylaxis or treatment of hyperuricemia in patients with leukemia or lymphoma. // J. Clin. Oncol. 2001. № 19. P. 697 704.

7. Langlois M., De Bacquer D., Duprez D., De Buyzere M., Delanghe J., Blaton V. Serum uric acid in hypertensive patients with and without peripheral arterial disease. // Atherosclerosis. 2000. Vol. 168. P. 163-168.

8. Coiffier В., Mounier N., Bologna S. Et al. Results in the GRAAL1 (Trial on Rasburicase Activity in Adult) study. // J. Clin. Oncol. 2003. №21. P. 4402 4406.

9. Nieto F.J., Iribarren С., Gross M. D., Comstock G.W., Cutler. R. G. Uric acid and; serum antioxidant capacity: a reaction to atherosclerosis. // Atherosclerosis. 2000. Vol. 148. P. 131-139.

10. Nagababu E., Lakshmaiah N. Inhibition of xanthine oxidase xanthine - iron mediated lipid peroxidation* by eugenol in liposomes. // Molecular and Cellular. Biochemistry. .1997. .T. 166. № 1-2. C. 65-71.

11. Матилус А.А., Барейкене И.П., Веналис А.И. Сорбционные методы коррекции гииерурикемии в комплексном лечении подагры. // Терапевт. Архив. 1987. №12. G.17-19.

12. Ryabov S.I., Shostka G.D., Lukichev B.G., Strelko V.V., Spiridonov V.N:, Kartel N.T., Scherbitsky A.B. Haemoperfusion in the Treatment of Cronic Renal Failure in Patients on Haemodialysis. // International Urology and nephrology. №16, v.4., P. 345360.

13. Anker S.D., Leyva F., Poole-Wilson P.A., Coats A.J.S. Uric Acid as Independent Predictor of Impaired Prognosis in Patients With Chronic Heart Failure. // Journal of the American College of Cardiology. .1998. .Т. 31. № 21001. С. 154A-155A.

14. Ariel J. Reyes. Cardiovascular Drugs and Serum Uric Acid // Cardiovascular Drugs and Therapy. Vol.17. 2003. P. 397-414.

15. MaIinow M.R., Levenson J., Giral P:, Nieto F.J., Razavian M.,Segond P., Simon A. Role of blood pressure, uric acid, and hemorheological parameters on plasma homocysteine concentranion. //Atherosclerosis. 1995. Vol. 114. P. 175-183.

16. Максудова A. H., Салихов И.Г., Хабиров P.A. // Подагра, M.: МЕД-пресс-информ, 2008. 96 с.

17. Fields M., Lewis C.G., Lure M.D. Allopurinol, an inhibitor of xanthine oxidase, reduces uric acid levels and modifies the sings associated with copper deficiency in rats fed fructose. // Free radical biology & medicine. 1996. Vol. 20. №4. P. 595-600.

18. Sherman M.R., Saifer M.G.P., Perez-Ruiz F. PEG-uricase in the management of treatment-resistant gout and hyperuricemia. // Advanced Drug Delivery Reviews. 2008LT. 60. № l.C. 59-68.

19. Горчаков В.Д., Сергиеико В.И., Владимиров В.Г. // Селективные гемосорбенты, Медицина, Москва, 1989. 224 с.28:Деденко И.К., Стариков А.В., Литвинюк В.А., Торбин В.Ф. Эфферентные методы лечения острых отравлений. // Киев, «нора-принт», 1997.-336 с.

20. Gong W.-K., Tan Т.-Н., Foong Р.-Р., Mugurasy В., Yap Н.-К. Eighteen years experience in pediatric acute dialysis: analysis of predictors of outcome. // Pediatr Nephrol. 2001. Vol:16. P. 212-215.

21. Костгоченко A. JI. Эфферентная терапия. Санкт-Петрбург. «Фолиант». 2003. 432с.

22. Лопухин Ю.М., Молоденков М.Н. Гемосорбция. 2-е изд. —// М.: Медицина,1985. 287с.

23. Кабаков А.Е., Кусельман А.И., Фисун Е.В. Эфферентная терапия' и экстракорпоральная гемокоррекция в педиатрии: Руководсво для врачей. // М.: МИА.2005. 208 с.

24. Неймарк А.И., Неймарк Б.А. Эфферентная и квантовая терапия в урологии. // М.: МИА.2003. 228 с.

25. Дерябина Н.В., Айламазян Э.К., Воинов В.А. Холестатический гепатоз беременных: патогенез, клиника, лечение. // Журнал акушерства и женских болезней. Т.52., №1., 2003. С. 13-19.

26. Монкрайф Д.У., Попович Р.П. Перитонеальный диализ: Пер. с англ. // Москва, 1984. С. 190-197.

27. Дерябин И.И., Лизанец М.Н. Перитонеальный диализ. // Медицина. Москва, 1977. 178с.

28. Воинов В.А. Эфферентная терапия. Мембранный плазмаферез. // М.: 2002, 270 с.

29. Скачилова Н.М., Умнова М.А., Морозова А.Д. Гравитационная хирургия крови. // Москва, 1983. С.84-86.

30. Лопаткин Н.А., Лопухин Ю.М. Эфферентные методы в медицине. // Медицина. Москва, 1989. 352 с.

31. Стрелко В.В., Плаченов Т.Г., Картель Н.Г. Углеродные адсорбенты. М., Наука, 1983,-170 с.

32. Б.Н. Кузнецов. Синтез и применение углеродных сорбентов. // Соросовский образовательный журнал. 1999. №12. С. 29-34.

33. Горчаков В.Д., Ленкин Ю.А. Применение ионитов для гемосорбции. // Итоги науки и техники. Сер. Химия высокомолекулярных соединений. M., 1981.-Т.16 -С. 212-253.

34. Туркова Я. Аффинная хроматография. // М.: Мир. 1980. 472 с.

35. Чучалин А.Г., Горчаков В.Д., Лебедин Ю.С., Авдюшкина Т.В., Сакодынский К.И. Клинические иммуносорбенты на основе полимерных матриц. // Биоорганическая химия 1988, том 14, №11. С. 1524-1529.

36. Руослахти Э. М. Иммуносорбенты в очистке белков. // М: Медицина, 1979. 127с.

37. Asahi T., Yamamoto T., Kutsuki H. Blood purification therapies using dexstran sulsate cellulose columns Liposorber and Selesorb // Ther. Apher. Dial. 2003 Feb. Vol. 7. № l.P. 73-77.

38. Braun N., et al. Dextran sulfate (Selesorb) plasma apheresis improves vascular, changes in systemic lupus erythematosus. // Ther. Apher. 2002. Vol. 6. № 6. P. 471477.

39. Braun N., Erley C., Klein R., Kotter I., Saal J., Rister T. Immunoadsorption onto protein A induces remission in severe lupus erythematosus. // Nefrol. Dial. Transporant 2000. Vol. 15. P. 1367-1372.

40. Matic G., Bosch Т., Wamlow W. Backgraund and indications for protein A based exstracorporeal immunoadsorption. //Ther. Apher. 2001. Vol. 5. P. 394-403.

41. Gaubitz M., Schneider K.M. Immunoadsorbtion in systemic lupus erythematosus: different techniques and their current role in medical therapy. // Ther. Apher. And Dial. 2003. Vol. 7. №2. P. 183-188.

42. Ronspeck W., Brinckmann R., Egner R., Gebauer F., Winkler D. Peptide based absorbers for therapeutic immunoadsorption. // Ther. Apher. Dial. 2003 Feb. Vol. 7.l.P. 91-97.

43. T.T. Березов, Б.Ф. Коровкин. Биологическая химия. Москва, «Медицина», 1998г.-704с.

44. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. Т. 1. Пер. с англ. М.: Мир, 1985. -367 е., ил.

45. Волькенштейн М.В. Биофизика: Учеб. руководство, 2-е изд., перерабш доп. -М.: Наука. Гл. ред. физ.-мат. Лит., 1988. 592 е., ил. ISBN 5-02-013835-5.

46. Д. Гендриксон, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев. Молекулярно импринтированные полимеры и их применение в биохимическом анализе. // Успехи биологической химии 2006, т.46, с. 149-192.

47. Reddy P., Kobayashi Т., Fujii N. Recognition characteristics of dibenzofuran by molecularly imprinted polymers made of common polymers Sreenivasulu. // European Polymer Journal. 2002. T. 38. № 4. C. 779-785.

48. Г.В. Лисичкин, Ю.А. Крутиков. Материалы с молекулярными отпечатками: синтез, свойства, применение. // Успехи химии. 2006. т. 75, с. 998-1017.

49. Martin-Esteban A. Molecularly imprinted polymers: new molecular recognitionimaterials for selective solid-phase extraction of organic compounds. // Fresenius' Journal of Analytical Chemistry. 2001. T. 370. № 7. C. 795-802.

50. David A. Spivak. Optimization, evaluation, and characterization of moleculary imprinted polymers. 2005. // Advanced Drug Relivery Reviews. 2005. Vol.57. №4. P.1779 1794.

51. Briigemann O., Haupt K., Lei Ye, Yilmaz E., Mosbach K. New configurations and applications of molecularly imprinted polymers. // J. Chromatogr. A. 2000. Vol.889. №4. P.15-24.

52. Haupt K. Molecularly imprinted polymers in analytical chemistry. // The Analyst. 2001. T. 126. № 6. C. 747-756.

53. Lu Y., Li C., Liu X., Huang W. Molecular recognition through the exact placement of functional groups on non-covalent molecularly imprinted polymers. // Journal of Chromatography A. 2002. T. 950. № 1-2. C. 89-97.

54. Syu M.-J., Nian Y.-M., Chang Y.-Slv., Lin Xi-Z., Shiesh S.-C., Chou T.-C. Ionic effect on the binding of bilirubin to the imprinted poly(methacrilie acid-co-ethylene glycol dimethacrilate) // J. Chromatogr. A. 2006. Vol. 1122. №1. P.54 52.

55. Prasad B. B., Sharina P.S., Lakshmi D. Molecularly imprinted polymer-based solidphase extraction combined with molecularly imprinted polymer-based sensor for detection of uric acid // J. Chromatogr. A. 2007. Vol. 1173. №1. P. 18 26.

56. Syu M.-J., Deng J.-H., Nian Y.-M. Toward bilirubin imprinted poly(methacrylic acid-co-ethylene glycol dimetacrilate) for the specific binding of a-bilirubin. // Analytica Chimica Acta 2004. Vol. 504. №1. P. 167 177.

57. Pap T., Horvai G. Characterization of the selectivity of a phenytoin imprinted polymer. // J. Chromatogr. A. 2004. Vol.1034. P.99 107.

58. Piletsky S.A., Karim K., Piletska E.V., Day C.J., Freebairn K.W., Legge C., Turner A.P.F. Recognition of ephedrine enantiomers by molecularly imprinted polymers designed using a computational approach. // The Analyst. 2001. .T. 126. № 10. C. 1826-1830.

59. Skudar К., Bruggemann О., Wittelsberger A., Ramstrom O. Selective recognition and separation of p-lactam antibiotics using molecularly imprinted polymers. // Analytical Communications. .1999. .T. 36. № 9. C. 327-331.

60. Zhou J., He X., Li Y. An acrylamide-based molecularly imprinted polymer for the efficient recognition of optical amino acid hydantoins. // Analytical Communications. .1999. ,T. 36. № 6. C. 243-246.

61. Shukla M.K., Mishra P.C. // Electronic structures and spectra of two antioxidants: uric acid and ascorbic acid. Journal of Molecular Structure. V. 377. 1996. P. 247-259.

62. Wanga Z., Seidel J., Wolf G., KÔnigsberger E. // Dissolution enthalpies of uric acid and uric acid dehydrate. Thermochimica Acta. 2000. Vol. 354. P.7-13.

63. Органическая химия: Учебник / А.П. Лузин, С.Э. Зурабян, Н.А. Тшкавкина и др. / Под ред. Н.А. Тюкавкиной. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1998. -496 с.:ил. - ISBN 5-225-04527-8.

64. Lubczak J., Cisek-Cicirko I., Mysliwiec B. // Preparation and applications of the products of reaction of uric acid with formaldehyde. Reactive & Functional Polymers. 2002. Vol.53. P. 113-124.

65. Гетероциклические соединения, под ред. Р. Эльдерфильда, пер. с англ. т. 8, М. 1969. 364с.

66. Лурье А.А. //Сорбенты и хроматографические носители, Химия, Москва, 1972. 320 с.

67. Мархол М. Ионообменники в аналитической химии: В 2-х частях. Ч. 1. Пер. с англ. -М.: Мир, 1985.- 264 е., ил.

68. Лнбинсон Г.С. // Сорбция органических соединений ионитами. // М.: Медицина. 1979. 182 с.

69. Полянский Н.Г., Горбунов Г.В., Полянская Н.Л. // Методы исследования ионитов. // М.: «Химия», 1976. 208 с.

70. SoIdatov V.S., Sosinovich Z.I.', Mironova- T.V. Acid-base properties of ion exchangers. II. Determination of the acidity parameters of ion exchangers with arbitrary functionality. // Reactive «Afunctional polymers. 2004. Vol.58. P.' 13-26.

71. Кокотов Ю.А., Золотарев П.П., Елькин Е.Г. // Теоретические основы ионного обмена. JI: Химия, 1986. - 280с.

72. Красиков В1Д. Основы планарной хроматографии. СПб, Химиздат, 2005. 232 с.

73. Боллигер»Х.Р^ Бреннер 1VL, Генширт X. и др. Хроматография*в .тонких слоях // Под ред. Э. Шталя, перевод с нем.яз. М.И. Яновского, М.: «Мир», 1965. 508с.

74. Ганин П.Г. Физико-химические основы культивирования микроорганизмов < и выделения целевых продуктов, биосинтеза: учеб. пособие* / П.Г. Ганин, О.А. Писарев: СПб.: Изд-во Политехи, ун-та, 2010. - 140 с.

75. Polyakova I. V., Kolikov V. М., Pisarev О.А. Mass Transfer Effects in Preparative Chromatography of Antibacterial Antibiotic Eremomicin on Polymeric Sorbents. J.of Chromatogr.2003.V. 1006. № 1-2. P.251-260.

76. Справочник по физико-химическим методам исследования- объектов окружающей среды // под ред. Г.И. Аграновича, Ю.Н. Коршунова, Ю.С. Ляликова. Л.: Судостроение, 1979. 648 с.

77. Л'. Гаммет. Основы, физической органической химии. Скорости, равновесия и механизмы реакций. М., «МИР» 1972г, 534с.

78. Полякова И.В., Лещинская А.П., Писарев О.А., Хирманов В.Н., Шостка Г.Д.

79. Писарев O.A., Кручина-Богданов И.В. Кинетически селективное разделение веществ новое развитие хроматографического метода. // ДАН. 1998. Т.362. №1. С.365-367.

80. Писарев О.А. Применение разделительных методов в биотехнологии. Сб. статей Межд. Конференции. «Медбиотек», 2006, Москва, с.32-35.

81. Полякова И.В., Лещинская А.П., Писарев О.А., В.Н. Хирманов, Г.Д. Шостка

82. Роль сорбентов в удалении уремических токсинов. // Сб. статей "Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья". Белгород, 2006. С.199-203.

83. Лещинская А.П., Писарев О.А Специфика межмолекулярных взаимодействий мочевой кислоты с селективными хроматографическиминосителями. // Материалы Всероссийской Межвузовской научно-технической конференции. СПбГПУ.С.-Петербург.2007. С. 252.

84. Лещинская А.П., Полякова И.В., Писарев О.А Сорбция мочевой кислоты природными и синтетическими сорбентами. // Сорбционные и хроматографические процессы. 2007. Т.7. №6. С.654-659.

85. Полякова И.В., Лещинская А.П., Писарев О.А. Сорбция мочевой кислоты природными и полимерными сорбентами" // Материалы Симпозиума по нанобиотехнологии. Новоросийск. 2007. С.34.

86. Polyakova I. V., Pisarev О. A. The Influence of the Polyfunctional Interactions between Organic Zwitter-ion Eremomycin and Carboxylic Cationits on Forming Concentration Front. J.of Chromatogr. 2005. V.1092. № 1. P. 135-141.

87. Лещинская А.П., Писарев O.A. Равновесие сорбции мочевой кислоты полимерными и природными сорбентами. // 37 неделя науки СПбГПУ. Материалы Всероссийской Межвузовской научно-технической конференции. СПбГПУ.С.-Петербург. 2008. С. 214.

88. Лещинская А.П., Грошикова А.Р., Полякова И.В., Писарев О.А., Панарин

89. Е.Ф. Синтез и изучение свойств полимерных сорбентов, селективно сорбирующих мочевую кислоту. 38 неделя науки СПбГПУ. Материалы Всероссийской Межвузовской научно-технической конференции. СПбГПУ. С.-Петербург.2008. С. 61-63.

90. N. M. Ezhova, I. V. Polyakova, O. A. Pisarev. Sorption of Lysine by Molecularly Imprinted Carboxyl Sorbents. Applied Biochemistry and Microbiology. 2009. V. 45. № 2, p. 243-245.

91. Лещинская А.П., Грошикова A.P., Полякова И.В., Писарев О.А., Панарин

92. Е.Ф. Селективная сорбция мочевой кислоты молекулярно импринтированным сорбентом. // Сб. «Фундаментальные исследования и инновации в технических университетах». 2009. С. 109.

93. Лещинская А.П., Грошикова А.Р., Полякова И.В., Писарев О.А., Панарин Е.Ф. Исследование механизмов распределения мочевой кислоты в полимерной импринтированной матрице. // Материалы международной научно-практической конференции. 2009. С. 48.

94. A. Ben-Nairn. // Hydrophobic hydrophilic phenomena in biochemical processes. Biophysical Chemistry. 2003. T. 105. P. 183-193.

95. В. В. Москва. // Водородная связь в органической химии. Соросовский образовательный журнал. 1999. №2. с. 52-64.

96. Лещинская А.П., Полякова И.В., Грошикова А.Р., Писарев О.А., Панарин

97. Писарев О.А., Кручина-Богданов И.В., Глазова Н.В., Быченкова О.В. // Кинетическое регулирование селективности, сорбции в жидкостной хроматографии низкого давления. //ДАН. 1998. Т.362. №3. С.362-365.

98. Писарев О.А., Самсонов Г.В., Сучкова Г.С. Селективная сорбция и обратимая десорбция органического аниона сетчатыми- карбоксильными катионитами. //Прикл. биохим. микробиол. 1997. Т.ЗЗ. №3. С.257-261.

99. Писарев СКА., Кручина-Богданов И.В., Глазова Н.В. Эффект кинетической селективности и инверсия выхода хроматографических зон. // Ж. физ. хим. 1999. Т.73. №3. С.364-367.

100. Писарев О.А., Кручина-Богданов И.В., Глазова Н.В., Быченкова О.В.

101. Хроматографическое разделение биологически активных веществ в кинетически селективных режимах динамики сорбции. // Ж. физ. хим. 1999. Т.73.№ 9.С.1634-1637.

102. Писарев О.А., Кручина-Богданов И.В., Глазова Н.В., Быченкова О.В. Pisarev О. A., Glasova N. V. Choice of Procedures for Preparative Chromatography. J. of Chromatogr.2003.V.1018. № 2. P. 127-136.