Создание новых систем доставки противоопухолевых препаратов и исследование их эффективности in vitro и in vivo тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Никольская, Елена Дмитриевна

• Никольская, Елена Дмитриевна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Никольская, Елена Дмитриевна

Оглавление

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Оценка уровня роста рынка противоопухолевых препаратов

1.2. Классификация противоопухолевых препаратов

1.2.1. Алкилирующие препараты

1.2.1.1. Другие алкилирующие препараты

1.2.2. Антиметаболиты

1.2.3. Алкалоиды растительного происхождения и другие препараты

природного происхождения

1.2.3.1. Таксаны

1.2.4. Другие противоопухолевые препараты

1.2.4.1. Соединения платины

1.2.5. Противоопухолевые антибиотики

1.2.5.1. Актиномицины

1.2.5.2. Антрациклины и родственные соединения

1.3. Механизмы устойчивости клеток к противоопухолевым препаратам

1.4. Основные способы повышения эффективности противоопухолевых препаратов

1.5. Частицы на основе PLGA как средства лекарственной доставки

1.6. Анализ физико-химических свойств полимерных частиц

1.6.1. Изучение кинетики высвобождения препарата из полимерных частиц

1.6.2. Исследование взаимодействий между полимером и веществом

в полимерных частицах

1.6.3. Специфические взаимодействия биополимеров с лигандами

1.6.4. Анализ размера и морфологии поверхности полимерных частиц

1.7. Механизмы доставки противоопухолевых препаратов в составе субмикронных

полимерных частиц в опухолевые клетки и ткани

1.8. Альфа-фетопротеин человека и его функциональные фрагменты как векторы

для направленной доставки лекарственных средств в опухолевые клетки

2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.1. Получение рекомбинантного AFP (rAFP) и его С-концевого домена (rAFP3D)

2.1.1. Получение rAFP

2.1.2. Получение rAFP3D

2.1.3 Анализ rAFP и rAFP3D

2.1.3.1. Подтверждение идентичности рекомбинантных белков методом

масс-спектрометрического анализа

2.1.3.2. Исследование вторичной структуры белков с использованием

спектроскопии кругового дихроизма

2.1.3.3. Иммуно-ферментный анализ rAFP и rAFP3D

2.1.3.4. Анализ биологической активности rAFP и rAFP3D in vitro

2.2. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих противоопухолевые

препараты, обладающих гидрофобными свойствами

2.2.1. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих темозоломид, и исследование их

противоопухолевой активности

2.2.1.1. Разработка метода получения частиц PLGA, содержащих темозоломид,

и исследование их физико-химических характристик

2.2.1.2. Исследование частиц PLGA, содержащих темозоломид, методом ИК-спектроскопии

2.2.1.3. Исследование кинетики высвобождения темозоломида из частиц PLGA

2.2.1.4. Исследование цитотоксической активности частиц PLGA,

содержащих темозоломид

2.2.1.5. Исследование противоопухолевой эффективности частиц PLGA,

содержащих темозоломид, на моделях in vivo

2.2.2. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих доцетаксел, и исследование их

противоопухолевой активности

2.2.2.1. Разработка метода получения частиц PLGA, содержащих доцетаксел, и

исследование их физико-химических характристик

2.2.2.2. Исследование частиц PLGA, содержащих доцетаксел, и методами ИК-спектроскопии и дифференциальной сканирующей калориметрии

2.2.2.3. Исследование кинетики высвобождения доцетаксела из частиц PLGA

2.2.2.4. Исследование цитотоксической активности полимерных частиц PLGA,

содержащих доцетаксел

2.2.2.5. Исследование противоопухолевой эффективности полимерных частиц PLGA,

содержащих доцетаксел, на моделях in vivo

2.2.3. Получение частиц PLGA, содержащих карбоплатин, и исследование их

противоопухолевой активности

2.2.3.1. Разработка метода получения частиц PLGA, содержащих карбоплатин,

и исследование их физико-химических характристик

2.2.3.2. Исследование кинетики высвобождения карбоплатина из частиц PLGA

2.2.3.3. Исследование цитотоксической активности частиц PLGA,

содержащих карбоплатин

2.2.3.4. Исследование противоопухолевой эффективности частиц PLGA,

содержащих карбоплатин на моделях in vivo

2.3. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих противоопухолевые

препараты, обладающими гидрофильными свойствами

2.3.1. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих даунорубицин, и исследование

их противоопухолевой активности

2.3.1.1. Разработка метода получения частиц PLGA, содержащих даунорубицин, и

исследование их физико-химических характристик

2.3.1.2. Исследование влияния типа PLGA на физико-химические характеристики

частиц, содержащих даунорубицин

2.3.1.3. Опеределение константы диссоциации комплексов типа «полимер-даунорубицин»

2.3.1.3. Исследование частиц PLGA, содержащих даунорубицин, и методами ИК-спектроскопии и дифференциальной сканирующей калориметрии

2.3.1.4. Исследование кинетики высвобождения даунорубицина из частиц PLGA

2.3.1.5. Исследование цитотоксической активности полимерных частиц PLGA,

содержащих даунорубицин

2.3.1.6. Исследование противоопухолевой активности полимерных частиц PLGA,

содержащих даунорубицин, на моделях in vivo

2.3.2. Получение полимерных частиц PLGA, содержащих дактиномицин,

и исследование их противоопухолевой активности

2.3.2.1. Исследование чистоты субстанций дактиномицина

2.3.2.2. Разработка метода получения частиц PLGA, содержащих дактиномицин, и

исследование их физико-химических характристик

2.3.2.3. Исследование частиц PLGA, содержащих дактиномицин, и методами ИК-спектроскопии и дифференциальной сканирующей калориметрии

2.3.2.4. Исследование кинетики высвобождения дактиномицина из частиц PLGA

2.3.2.5. Исследование цитотоксической активности PLGA, содержащих дактиномицин

2.3.3. Получение конъюгатов векторных белковых молекул с частицами PLGA,

содержащими противоопухолевые препараты

2.3.3.1. Разработка метода получения конъюгатов векторных белковых молекул с

частицами PLGA, содержащими противоопухолевые препараты

2.3.3.2. Синтез конъюгатов частиц PLGA, содержащих противоопухолевые препараты, с белковыми векторными молекулами и исследование их физико-химических свойств

2.3.3.3. Исследование уровней связывания и эндоцитоза, а также цитотоксической

активности конъюгатов частиц PLGA, содержащих противоопухолевый препарат, с белковыми векторными молекулами

2.3.4. Исследование противоопухолевой активности конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP

2.3.4.1. Изучение уровня накопления конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP в опухолевых клетках in vivo

2.3.4.2. Изучение острой токсичности конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP

2.3.4.3. Изучение противоопухолевой активности конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP на модели лимфолейкоза мыши линии Р388

2.3.4.4. Изучение противоопухолевой активности конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP на модели аденокарциномы Эрлиха

2.3.4.5. Изучение противоопухолевой активности конъюгата частиц PLGA, содержащих

дактиномицин, с rAFP на модели солидного колоректального рака человека

линии HCT116

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Приборы

3.2. Материалы

3.3. Методы

3.3.1. Получение rAFP

3.3.2. Получение rAFP3D

3.3.3. Анализ rAFP3D и rAFP

3.3.3.1. Определение концентрации rAFP3D и rAFP

3.3.3.2. Определение концентрации тиольных групп rAFP3D

3.3.3.3. Получение FITC-меченных rAFP3D и rAFP

3.3.3.4. Исследование вторичной структуры rAFP3D и rAFP методом кругового дихроизма

3.3.3.5. Масс-спектрометрический анализ белков

3.3.3.6. Анализ чистоты rAFP3D и rAFP методом ВЭЖХ

3.3.3.6.1. ВЭЖХ анализ rAFP3D

3.3.3.6.2. ВЭЖХ анализ rAFP

3.3.3.7. Проведение дот-блота

3.3.3.8. Проведение иммуноблоттинга

3.3.3.9. Проведение непрямого ИФА

3.3.3.10. Проведение сэндвич ИФА

3.3.4. Анализ чистоты субстанций дактиномицина

3.3.4.1. Масс-спектральный анализ субстанции дактиномицина

3.3.4.2. Анализ чистоты субстанции дактиномицина методом HSQC ЯМР

3.3.4.3. Анализ чистоты субстанции дактиномицина методом ВЭЖХ

3.3.5. Получение полимерных частиц

3.3.5.1. Получение полимерных частиц, содержащих темозоломид

3.3.5.2. Получение полимерных частиц, содержащих доцетаксел

3.3.5.3. Получение полимерных частиц, содержащих карбоплатин

3.3.5.4. Получение полимерных частиц, содержащих даунорубицин

3.3.5.5. Получение полимерных частиц, содержащих дактиномицин или

7-аминодактиномицин

3.3.5.6. Получение пустых полимерных частиц

3.3.5.7. Получение полимерных частиц с включением кумарина-6

3.3.6. Анализ физико-химических характеристик полимерных частиц

3.3.6.1. Определение содержания кумарина-6 в полимерных частицах

3.3.6.2. Анализ общего содержания и степени включения противоопухолевых

препаратов в частицы

3.3.6.2.1. Определение общего содержания и степени включения темозоломида в частицы методом ВЭЖХ

3.3.6.2.2. Определение общего содержания и степени включения доцетаксела в частицы

методом ВЭЖХ

3.3.6.2.3. Определение общего содержания и степени включения противо опухолевых препаратов с помощью спектрофотометрического метода

3.3.6.2.4. Определение общего содержания карбоплатина в полимерных

частицах методом атомно-эмиссионной спектрометрии

3.3.6.3. Определение размера, дзета-потенциала и индекса полидисперсности полученных частиц

3.3.6.4. Анализ морфологии частиц методами микроскопии

3.3.6.4.1. Анализ морфологии полимерных частиц методом сканирующей электронной микроскопии

3.3.6.4.2. Анализ морфологии полимерных частиц методом

атомно-силовой микроскопии

3.3.6.4.3. Анализ морфологии полимерных частиц методом просвечивающей электронной микроскопии

3.3.6.5. Дифференциальная сканирующая калориметрия

3.3.6.6. ИК-спектроскопия

3.3.6.7. Изучение кинетики высвобождения противоопухолевых препаратов

из полимерных частиц

3.3.6.8. Математическое моделирование кинетики высвобождения

противоопухолевых препаратов из полимерных частиц

3.3.7. Культивирование эукариотических клеток

3.3.8. Проточный цитофлуориметрический анализ

3.3.9. Флуоресцентная микроскопия клеток

3.3.10. Исследование внутриклеточной локализации полимерных частиц с помощью лазерной конфокальной микроскопии

3.3.11. Исследование цитотоксической активности препаратов in vitro

3.3.12. Изучение острого токсического действия препаратов in vivo

3.3.13. Исследование противоопухолевой активности препаратов in vivo

3.3.14. Статистическая обработка результатов

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание новых систем доставки противоопухолевых препаратов и исследование их эффективности in vitro и in vivo»

Введение

Актуальность проблемы. Онкологические заболевания являются одним из основных видов риска, которым может подвергаться здоровье человека, и занимают второе место по числу смертности после сердечнососудистых заболеваний. В Российской Федерации (РФ), как и в большинстве стран мира, отмечается неуклонный рост случаев диагностирования злокачественных новообразований. Среди наиболее распространенных типов злокачественных новообразований, диагностируемых в РФ, можно выделить новообразования легкого, трахеи, бронхов (16.8%), желудка (13.0%), кожи (10.8%) и молочной железы (9.0%) [1].

На сегодняшний день лечение опухолевых заболеваний осуществляется по утвержденным протоколам, учитывающим тип новообразования, локализацию и стадию заболевания. Наряду с хирургическими методами и лучевой терапией, основную составляющую лечения представляет химиотерапия [2]. Для химиотерапии широко используются более 50 противоопухолевых лекарственных препаратов (ПП), причем с каждым годом регистрируют новые аналоги и представители различных классов ПП. Среди ПП, широко применяемых в терапии злокачественных новообразований, можно выделить соединения платины (цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин и др.), антиметаболиты (метотрексат, 5-фторурацил, цитарабин и др.), алкилирующие агенты (темозоломид, циклофосфан, асалин, сарколизин и др.), антибиотики с противоопухолевой активностью (доксорубицин, даунорубицин, дактиномицин, адриамицин, блеомицин и др.), природные алкалоиды (доцетаксел, паклитаксел, винбластин, винкристин и пр.), а также гормональные препараты (эстрамустин, тамоксифен, преднизолон и пр.) [3]. С вышеперечисленными препаратами проводят большое количество исследований по разработке новых систем доставки (СД) для достижения максимального противоопухолевого эффекта. Однако ни один из данных ПП на данный момент так и не стал «волшебной пулей», эффективной при многих видах онкологических заболеваний.

В медицинской практике известно более 200 типов злокачественных новообразований человека, при этом опухоль, поражающая один орган, может иметь несколько подтипов, отличающихся гистологическим строением, а также особенностями роста и взаимодействием с организмом. Таким образом, определенная группа лекарственных соединений действует зачастую на один тип опухоли или её морфологический вариант, что подчеркивает значимость ПП каждой подгруппы, а соответственно и их незаменимость между собой.

Стоит отметить, что одним из существенных недостатков лечения онкологических больных с помощью химиотерапии является высокая токсичность ПП по отношению к нормально-функционирующим клеткам и тканям организма, особенно имеющих высокую пролиферативную активность: ткани костного мозга, ткани репродуктивных органов,

желудочно-кишечного тракта и лимфатической системы. При этом к большинству 1111 со временем вырабатывается лекарственная устойчивость, в большей мере основанная на активности ABC транспортеров [4, 5].

Данным проблемам уделяют большое внимание во всем мире. Наиболее распространенные пути их решения заключаются в разработке комбинаций 1111 для комплексного применения (полихимиотерапия), оптимизации протоколов применения 1111, создании новых препаратов избирательного действия, позволяющих преодолеть возникающую резистентность. Изучение механизмов действия Ю, исследование их фармакокинетики и фармакодинамики позволит создать новые лекарственные препараты или новые СД известных 11, обладающих большей активностью. Использование новых СД 11 позволит добиться снижения неспецифической токсичности, а также, частично или полностью, преодолеть лекарственную устойчивость.

В последние годы доставка лекарств в опухолевые клетки с использованием нанотехнологий стала эффективной стратегией в лечении различных онкологических заболеваний. Все более популярными СД 11 становятся природные и синтетические полимеры. Среди них наиболее широко используемым полимером для доставки лекарственных препаратов, одобренных управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (Food and Drug Administration, FDA), является сополимер молочной и гликолевой кислот (PLGA). Известно большое количество фармацевтических субстанций, инкапсулированных в PLGA. Терапевтический эффект таких препаратов доказан in vivo [6]. Наиболее распространёнными СД лекарственных веществ на основе PLGA являются частицы нано-, субмикронного и микронного размеров. Главными преимуществами частиц PLGA как СД является возможность контроля размеров частиц, поверхностных свойств и скорости высвобождения действующего вещества из полимерной матрицы, что позволяет достичь сайт-специфичного действия препарата при оптимальном режиме дозирования. Лролонгированная, контролируемая и направленная доставка химиотерапевтических препаратов увеличивает их терапевтическую эффективность, снижая при этом риск возникновения побочных эффектов, связанных с токсичностью лекарственного препарата [7].

Одним из наиболее часто применяемых подходов повышения селективности действия 11 в составе СД является модификация их поверхности. Наиболее перспективным способом может быть создание систем направленной доставки лекарственных средств, включающих в свой состав векторные молекулы, такие как моноклональные антитела (МАт), аптамеры, белки и пептиды, взаимодействующие с рецепторами или другими молекулами на поверхности опухолевых клеток [8-10]. Ломимо увеличения селективности действия таких адресных систем,

использование векторных молекул позволяет частично преодолеть множественную лекарственную устойчивость (МЛУ) клеток, поскольку интернализация СД опухолевыми клетками зачастую происходит за счет рецептор-опосредованного эндоцитоза [5].

На сегодняшний день активно развиваются направления исследований, в которых рассматриваются опухолево-специфичные антигены в качестве мишеней для создания направленных систем доставки лекарственных средств. В качестве одного из таких лигандов может выступать альфа-фетопротеин (AFP) - гликопротеин человека, участвующий в транспорте жирных кислот и эстрогена в фетальном периоде, а также его С-концевой (3-й) домен (AFP3D), способный связываться с рецепторами AFP. Рецепторы AFP (AFPR) экспрессируются в значительных количествах на поверхности 90% линий опухолевых клеток [9-11]. С развитием технологий рекомбинантных ДНК стало возможным получение промышленных количеств широкого спектра белков, в том числе AFP и его С-концевого домена. Ранее проводились исследования, посвященные изучению некоторых СД ПП, имеющих в своем составе AFP3D [12-14].

Создание новых СД ПП, в том числе, обладающих адресным действием, может способствовать повышению биодоступности, селективности действия, снижению общей токсичности, а также увеличению противоопухолевого эффекта используемых в настоящее время в клинике лекарственных препаратов.

Цель исследования. Создание новых систем доставки противоопухолевых препаратов и исследование их эффективности in vitro и in vivo.

Задачи исследования.

1. Разработать методы получения субмикронных частиц PLGA, содержащих противоопухолевые препараты (темозоломид, доцетаксел, карбоплатин, даунорубицин и дактиномицин).

2. Провести анализ физико-химических характеристик полученных субмикронных частиц, содержащих темозоломид, доцетаксел, карбоплатин, даунорубицин и дактиномицин, на основе PLGA.

3. Исследовать эффективность in vitro и in vivo полученных субмикронных частиц PLGA в качестве систем доставки противоопухолевых препаратов (темозоломида, доцетаксела, карбоплатина, даунорубицина и дактиномицина).

4. Разработать и оптимизировать биотехнологический метод получения рекомбинантного альфа-фетопротеина (rAFP) и его функционального фрагмента (rAFP3D).

5. Разработать метод получения адресных систем доставки на основе частиц PLGA и белковых векторных молекул. Провести анализ полученных адресных систем доставки.

6. Исследовать эффективность полученных адресных систем доставки, содержащих противоопухолевые препараты, in vitro и in vivo.

Научная новизна работы.

Были разработаны и оптимизированы методы получения полимерных частиц, содержащих доцетаксел, темозоломид, даунорубицин, дактиномицин и карбоплатин, позволяющие получать частицы размером менее 300 нм, состав полимерной композиции является уникальным и не встречающимся в литературных источниках. Был разработан способ очистки полимерных частиц с использованием гель-эксклюзионной хроматографии. Исследовано влияние типа сополимера молочной и гликолевой кислот на общее содержание препарата и его степень сорбции, обнаружена корреляция величины константы связывания и образование комплекса полимер-вещество со скоростью высвобождения субстанций из состава частиц.

Была разработана схема получения конъюгата полимерных частиц с белковыми векторными молекулами, позволяющие сократить время реакции без снижения эффективности и уменьшения выхода целевого продукта. Применение rAFP и rAFP3D позволяет получать высокоэффективные системы доставки противоопухолевых препаратов непосредственно в опухолевые клетки и ткани с минимальным токсическим действием на нормальные клетки. Данный способ конъюгации является новым, а полученные конъюгаты уникальными. Данный метод позволяет получать адресные системы доставки различных противоопухолевых препаратов для лечения большого количества злокачественных новообразований, поскольку эффективность и избирательность их действия была доказана в различных экспериментах in vitro и in vivo.

Практическая значимость работы.

Были оптимизированы методы получения рекомбинантных белков. В результате был увеличен выход rAFP3D до 80 мг с 1 литра культуры, упрощен метод рефолдинга и концентрирования белка. Были подобраны условия проведения очистки и выделения rAFP, позволяющие проводить процесс в одну стадию, достигая при этом чистоты конечного продукта не менее 95%.

Разработанные методы получения полимерных частиц, содержащих доцетаксел, темозоломид, даунорубицин, дактиномицин и карбоплатин, позволяют получать до 500 мг лиофилизата частиц за 1 лабораторно-технологический цикл с сохранением всех физико-химических характеристик полученных частиц.

Был получен патент на изобретение, содержащий способ получения и состав полимерной композиции для частиц, содержащих доцетаксел.

Разработанную технологию синтеза конъюгата полимерных частиц и белковых векторных молекул, в частности rAFP и rAFP3D, можно полностью автоматизировать и легко масштабировать. Были подобраны условия по сокращению времени реакции до 1 ч. Была показана противоопухолевая эффективность полученных конъюгатов и селективность их действия в отношении опухолевых клеток.

Был получен патент на изобретение, содержащий технологию получения конъюгата полимерных частиц с белковыми векторными молекулами.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Разработаны эффективные технологические методы получения субмикронных частиц PLGA, содержащих противоопухолевые препараты (темозоломид, доцетаксел, карбоплатин, даунорубицин и дактиномицин).

2. Проведен анализ физико-химических характеристик полученных субмикронных частиц PLGA, содержащих темозоломид, доцетаксел, карбоплатин, даунорубицин и дактиномицин.

3. Биологические исследования продемонстрировали увеличение эффективности темозоломида, доцетаксела, карбоплатина, даунорубицина и дактиномицина, входящих в состав субмикронных систем доставки в виде частиц PLGA.

4. Разработан и оптимизирован биотехнологический метод получения rAFP и rAFP3D.

5. Разработан метод получения адресных систем доставки на основе частиц PLGA и белковых векторных молекул. Проведен анализ их физико-химических свойств.

6. Доказано избирательное действие полученных адресных систем доставки, содержащих противоопухолевые препараты, на опухолевые клетки и увеличение эффективности в сравнении с немодифицированными препаратами in vitro и in vivo.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на XX Курчатовской молодежной научной школе (Россия, Москва, 2012), Первой Всероссийской научной конференции молодых ученых-медиков «Инновационные технологии в медицине XXI века» (Россия, Москва, 2012), Международной конференции «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Россия, Москва, 2013), Всероссийской научной конференции молодых ученых «Медико-биологические аспекты химической безопасности» (Россия, Санкт-Петербург, 2015), X Международной конференции молодых учёных по химии "Менделеев-2017" (Россия, Санкт-Петербург, 2017), 21-й Международной Пущинской Школе-конференции Молодых Учёных "Биология - наука 21 века" (Россия, Пущино, 2017).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 печатных работ, в том числе, 8 статей в реферируемых научных журналах, 9 тезисов докладов на российских и международных конференциях, получено 2 патента.

Личный вклад автора. Постановка цели и задач исследования, обобщение литературных данных, проведение научных экспериментов и оценка полученных результатов, подготовка и написание научных статей в соавторстве выполнены лично автором.

Структура и объём диссертации. Работа изложена на 169 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, изложения результатов и их обсуждения, описания методов исследования, заключения, выводов и списка литературы, который включает 171 источник. Диссертация содержит 87 рисунка и 24 таблицы.

1. Обзор литературы 1.1. Оценка уровня роста рынка противоопухолевых препаратов

На сегодняшний день онкологические заболевания являются одной из основных причин смертности. Согласно данным международного агентства по изучению рака (МАИР, англ. International Agency for Research on Cancer (IARC)), злокачественные новообразования диагностируется каждый год более чем у 12 млн. человек во всем мире, при этом, смертность от данного заболевания насчитывает более 8 млн. человек в год. Если оценивать статистические данные по всему миру, то можно отметить достаточно высокие показатели возникновения новых инцидентов в европейских странах, в том числе и в России, которая находится на 18 месте в мире: показатель заболеваемости составляет 364 на 100 тыс. населения [15]. В связи с высоким уровнем заболеваемости онкологией, глобальный рынок 1111 составляет более 10% от объема всего фармацевтического рынка. Однако при этом в последние годы наблюдается уменьшение темпов роста рынка 11, который связан с уменьшением сроков действия патентов, меньшим использованием паллиативной терапии, отсутствием эффективных средств лечения некоторых видов рака [16]. Также, причиной может служить снижение доли биопрепаратов, т.е. снижение уровня поддерживающего лечения, вследствие выпуска на рынок новых лекарственных средств, новых эффективных форм уже известных препаратов и лекарств, и препаратов адресного действия для проведения основного лечения. В таблице 1 представлены новые препараты кода L01 «Противоопухолевые препараты» по международной анатомо-терапевтическо-химической классификации (рус. АТХ, англ. ATC), зарегистрированные в 2013 году.

Таблица 1. Новые противоопухолевые препараты АТХ-группы кода Ь01, зарегистрированные в 2013 году [17].

Фармакологическая группа Международное непатентованное наименование Торговое название Владелец регистрационного удостоверения

Алкалоиды (L01C) Доцетаксел Новотакс® ЗАО «Биокад»

Онкодоцел® Tolmar Corp.

Алкилирующие соединения ^01А) Карбоплатин Карбоплатин-РОНЦ® ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Наукопрофи, филиал ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН

Антибиотики (L01D) Дактиномицин Акномид Д® ООО «Адиком»

Антиметаболиты (L01B) Гемцитабин Гемцитабин-Рус ООО «Манас Мед»

Гемцитабин-Эбеве EBEWE Pharma Ges.m.b.H.Nfg.KG

Флударабин Флударабин-Актавис Actavis Group PIT ehf

Антитела моноклональные (L01XC) Пертузумаб Перьета™ Roche

Протеинтирозинкиназы ингибиторы (L01XE) Акситиниб Инлита® Pfizer Inc.

Руксолитиниб Джакави Novartis Pharma AG

Иматиниб Иматиб ЗАО «Фарм-Синтез»

Иматиниб ЗАО «Биокад»

Неопакс® ООО «КРКА-РУС»

Гистамель ОАО «Верофарм»

Снижение российского рынка ПП и уменьшение государственных закупок ПП можно связать с уменьшением средств, направленных на приобретение оригинальных импортных препаратов в связи с появлением на рынке дженериков отечественного производства в рамках государственной программы по импортозамещению. Например, в 2013 году было зарегистрировано в России 14 новых препаратов, при этом, 8 из них принадлежат российским компаниям-производителям (табл. 2).

Таблица 2. Российский рынок отечественных препаратов, применяемых в терапии онкологических заболеваний [16].

№ Препарат Компания Объем продаж, тыс. руб.

1 Флугарда ЗАО «Биокад» 262,8

2 Альфа-фетопротеин Институт новых медицинских технологий 147,9

3 Веро-аспарагиназа «ЛЭНС-фарм» 118,1

4 Доксорубицин-ЛЭНС «ЛЭНС-фарм» 74,0

5 Ароместон ОАО «Верофарм» 26,2

6 Билумид ОАО «Верофарм» 21,2

7 Веро -Метотрексат ОАО «Верофарм» 17,9

8 Этопозид-ЛЭНС «ЛЭНС-фарм» 12,8

9 Экстраза ОАО «Верофарм» 11,3

10 Веро-Анастразол ОАО «Верофарм» 5,8

11 Веро-Винкристин «ЛЭНС-фарм» 5,2

12 Реаферон-ЕС ГНЦ ВБ «Вектор» 1,2

13 Метилурацил ЗАО «Центрально-Европейская Фармацевтическая Компания» 0,8

В настоящий момент использование в терапии таких препаратов как доцетаксел (Б1х), карбоплатин (СР1;), дактиномицин (БМ) и пр. является актуальным, поскольку востребованность импортозамещения и производства российскими компаниями

препаратов (табл. 1) на их основе свидетельствует о наличии стабильного и растущего рынка сбыта. Однако при анализе данных госзакупок на приобретение таких 1111 как CPt, DM, даунорубицин ^КК), темозоломид (TMZ) и Dtx наблюдается тенденция в снижении суммы госзакупок для некоторых препаратов (Рис. 1) [18]. Данное наблюдение можно объяснить расширением компаний-производителей отечественного производства, а также выпуском новых перспективных форм или препаратов, обладающих адресным действием.

Рис. 1. Сумма государственных закупок в 2016 и 2017 гг. на приобретение противоопухолевых препаратов [18].

Так, в 2016 и 2017 гг. список препаратов, одобренных FDA, состоит в большей степени

моноклональные антитела:

из препаратов, относящихся к подгруппе L01XC Keytruda® (пембролизумаб), Opdivo® (ниволумаб), Tecentriq® (атезолизумаб), Imfinzi®

(дурвалумаб) и пр., а также L01XE

ингибиторы протеинтирозинкиназы:

Cabometyx® (кабозантиниб), Ьеиу1ша® (ленватиниб), Rydapt® (мидостаурин), К1вдаН® (рибоциклиб) и др. [19].

Исходя из представленных аналитических данных, можно сделать вывод о востребованности известных и успешно применяемых в терапии 11, в связи с чем, связан рост отечественного производства данных препаратов. Также наблюдается тенденция в регистрации новых лекарственных форм таких 11, что может иметь положительный противоопухолевый эффект в терапии благодаря увеличению биодоступности и сниженной общей токсичности таких средств. Однако в последнее время в терапию внедряют новые 11, обладающие адресным действием, что подтверждает перспективность разработки новых препаратов для направленной терапии и их востребованность на рынке. Таким образом, оптимальный лекарственный препарат представляет собой новую лекарственную форму известного 11, имеющий в своем составе адресную составляющую для адресной терапии.

1.2. Классификация противоопухолевых препаратов

Важно отметить, что все зарегистрированные препараты, представленные в таблице 1 и входящие в список разрешенных FDA, относятся к коду L01, но к разным классам, отличаясь по механизму действия и свойствам. Причем, практически половина из них, является частичными или полными аналогами известных препаратов с высокими показателями неспецифической токсичности, вследствие чего возникает необходимость разработки новых форм ПП, обладающих более высоким уровнем специфической активности [17, 19].

Все антинеопластические лекарственные средства кода L01 «Противоопухолевые препараты» по международной системе АТХ разделяют на пять основных групп, отличающихся химической структурой и механизмом действия на опухолевые клетки [20].

1.2.1. Алкилирующие препараты

Алкилирующие препараты (L01A) - это химиотерапевтические противоопухолевые цитостатические лекарственные препараты, чей механизм действия основан на образовании связи между алкильной группой препарата и гуаниновым нуклеотидным основанием ДНК у 7-го атома азота пуринового кольца (Рис. 2), что приводит к нарушению биосинтеза ДНК, что в свою очередь, запускает механизм апоптоза [21].

Рис. 2. Два азотистых основания ДНК, поперечно сшитые по 7-му атому азота пуринового кольца с образованием азотисто-ипритового производного урацила с различными химическими группами (К) [21].

Алкилирующие агенты могут проявлять активность на любом этапе клеточного цикла. По этой причине, эффект, который эти препараты оказывают на клетки, зависит от дозы: наблюдается пропорциональная зависимость между дозой препарата и долей погибших клеток [22].

1.2.1.1. Другие алкилирующие препараты

К данной группе (Ь01ЛХ) относится такой препарат как темозоломид (Ь01АХ03) (Рис. 3). При физиологических условиях ТМZ подвергается химической модификации с образованием активного метаболита - монометилтриазеноимидазолкарбоксамида (МТИК). Цитотоксическое действие МТИК обусловлено алкилированием гуанина в положении О6 и N7 (дополнительно) с последующим запуском механизма аберрантного восстановления метилового остатка [23, 24].

Рис. 3. Структурная формула темозолимида (ТМZ) [23].

Клинические исследования показали, что ТМZ обладает выраженной противоопухолевой активностью в отношении злокачественной глиомы, а также метастазирующей злокачественной меланомы [25, 26]. Однако при терапии TMZ происходит быстрое снижение концентрации препарата в плазме. Это приводит к необходимости многократного введения TMZ для поддержания эффективной дозы, что ограничивает его применение. Кроме того, TMZ, как и большинство противоопухолевых препаратов, обладает рядом побочных действий на системы жизнеобеспечения человека (пищеварительную, дыхательную, кроветворную и центральную нервную систему) [27].

Данная группа соединений (Ь01Б) оказывают свое действие либо путем блокирования ферментов, необходимых для синтеза ДНК, либо образованием связи с молекулами ДНК или РНК. Антиметаболиты напоминают по своей структуре либо нуклеотидные основания, либо нуклеозиды, но с отличием в химических группах (Рис. 4). Ингибируя ферменты, участвующие в синтезе ДНК, они нарушают процесс митоза и индуцируют апоптоз. В отличие от алкилирующих агентов, эффект антиметаболитов зависит от клеточного цикла и проявляется только в Б-фазе. По этой причине, при увеличении дозы будет наблюдаться эффект плато и отсутствие пропорционального увеличения гибели опухолевых клеток [28, 29].

О

1.2.2. Антиметаболиты

Гемцитабин Децитабин

Рис. 4. Деоксицитидин и два антиметаболита: гемцитабин и децитабин. Можно отметить схожесть в структуре, но отличие в некоторых химических группах [29].

1.2.3. Алкалоиды растительного происхождения и другие препараты

природного происхождения

Препараты данной группы (L01C) можно описать как соединения универсального механизма действия (антимикротрубочковые агенты), в состав которых входят как синтетические, так и химические вещества растительного происхождения, которые блокируют деление клеток, нарушая функциональную активность цитоскелета (в т.ч. процессы деления клеток), путем вмешательства в процессы полимеризации/деполимеризации а- и Р-тубулина (микротрубочек) [30]. Алкалоиды барвинка и таксаны - это две основные группы данного класса соединений, хотя механизмы их действия полностью противоположны. Алкалоиды барвинка предотвращают образование микротрубочек, в то время как таксаны ингибируют процесс деполимеризации микротрубочек (Рис. 5). Таким образом, они нарушают нормальный процесс митоза в опухолевых клетках [31].

Рис. 5. Алкалоиды барвинка предотвращают образование микротрубочек, таксаны ингибируют процесс деполимеризации микротрубочек. Оба механизма вызывают нарушение митоза [31].

1.2.3.1. Таксаны

Среди таксанов (Ь01СБ) встречаются соединения как природного, так и полусинтетического происхождения. Доцетаксел (Ь01СБ02) (Рис. 6) получают полусинтетически из химического вещества, содержащегося в коре тиса ягодного. активен

в отношении некоторых клеток, продуцирующих в избыточном количестве Р-гликопротеин, который кодируется геном множественной лекарственной устойчивости. Данный препарат применяют при терапии рака молочной железы, немелкоклеточного рака легких, рака яичников, опухоли области головы и шеи, гормонорезистентного рака предстательной железы [31].

Рис. 6. Структурная формула доцетаксела (Б1х) [32].

Использование Б1х сопряжено с многочисленными побочными эффектами, такими как обратимая нейтропения, аллергические реакции, развитие периферических отеков и пр., представляющими в ряде случаев опасность для жизни пациентов [32]. Использование таксанов в терапии имеет ряд трудностей ввиду их низкой растворимости в водных растворах, что, является основанием для получения новых лекарственных форм для повышения их биодоступности.

Подгруппой класса соединенений «другие противоопухолевые препараты» (Ь01Х) является «соединения платины» (Ь01ХЛ). Одним из представителей данной подгруппы является карбоплатин (Ь01ХЛ02) (Рис. 7), внедренный в клиническую практику с 2004 г. [33].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Никольская, Елена Дмитриевна, 2018 год

Список литературы

1) Черенков, В. Г. Клиническая онкология / В.Г. Черенков // М.: Медицинская книга. -2010. - 434 с.

2) Вершинина, С. Ф. Психосоциальные проблемы современных методов лечения злокачественных опухолей / С.Ф. Вершинина, Е.В. Потявина, А.Н. Стуков // Психофармакология и биологическая наркология. - 2006. - Т. 6. -№ 3. - C. 1312-1314.

3) Krinsky, N. I. Interaction of Oxygen and Oxy-Radicals with Arotenoids / N.I. Krinsky, S.M. Deneke // Journal of the National Cancer Institute. - 1982. - V. 69. - P. 205-210.

4) Reversal of Multidrug Resistance by Stimuli-Responsive Drug Delivery Systems For Therapy of Tumor / Q. Yin, J. Shen, Z. Zhang et al. // Drug Delivery Reviews. - 2013. - V. 65. -№ 13-14. - P. 1699-1715.

5) Higgins, C. F. ABC Transporters: Physiology, Structure and Mechanism - an Overview / C.F. Higgins // Research in Microbiology. - 2001. - V. 152. - № 3-4. - P. 205-210.

6) Kerimoglu, O. Poly(Lactic-co-Glycolic Acid) Based Drug Delivery Devices for Tissue Engineering and Regenerative Medicine / O. Kerimoglu, E. Alar^n // Ankem Dernegi. - 2012. -V. 26. - № 2. - P. 86-98.

7) Drake, C. Metastatic Castration-Resistant Prostate Cancer: New Therapies, Novel Combination Strategies and Implications for Immunotherapy / C. Drake, P. Sharma, W. Gerritsen // Oncogene. - 2014. - V. 33. - № 43. - P. 5053-5064.

8) Alley, S. C. Antibody-Drug Conjugates: Targeted Drug Delivery for Cancer / S.C. Alley, N.M. Okeley, P.D. Senter // Current Opinion in Chemical Biology. - 2010. - V. 14. - № 4. - P. 529537.

9) Mizejewski, G. Alpha-fetoprotein Structure and Function: Relevance to Isoforms, Epitopes, and Conformational Variants / G. Mizejewski // Experimental Biology and Medicine. -2001. - V. 226. - № 5. - P. 377-408.

10) Alpha-Fetoprotein-Mediated Targeting of Anti-Cancer Drugs to Tumor Cells In Vitro / S.E. Severin, E.Y. Moskaleva, I.I. Shmyrev et al. // Biochemistry and Molecular Biology International. - 1995. - V. 37. - № 2. - P. 385-392.

11) Festin, S. M. The Recombinant Third Domain of Human Alpha-Fetoprotein Retains the Antiestrotrophic Activity Found in the Full-Length Molecule / S.M. Festin, J.A. Bennett, P.W. Fletcher et al. // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects. - 1999. - V. 1427. -№ 2. - P. 307-314.

12) Recombinant alpha-Fetoprotein C-Terminal Fragment: The New Recombinant Vector For Targeted Delivery / G.A. Posypanova, N.V. Gorokhovets, V.A. Makarov et al. // Journal of Drug Targeting. - 2008. - V. 16. - № 4. - P. 321-328.

13) Posypanova, G. A. The Receptor Binding Fragment of Alpha-Fetoprotein is a Promising New Vector for the Selective Delivery of Antineoplastic Agents / G.A. Posypanova, V.A. Makarov, M.V. Savvateeva et al. // Journal of Drug Targeting. - 2013. - V. 21. -№ 5. - P. 458-465.

14) Яббаров, Н. Г. Использование С-концевого домена альфа-фетопротеина для направленной доставки метотрексата в опухолевые клетки / Н.Г. Яббаров, Н.В. Позднякова, Е.А. Василенко // Сибирский онкологический журнал. - 2011. - № S1. - С. 131.

15) Cancer Incidence and Mortality Patterns in Europe: Estimates for 40 Countries in 2012 / J. Ferlay, E. Steliarova-Foucher, J. Lortet-Tieulent et al. // European Journal of Cancer. - 2013. - V. 49. - № 6. - P. 1374-1403.

16) Широкова, И. Рынок онкологических препаратов: точки роста и перспективы развития / И. Широкова // Ремедиум. Журнал о российском рынке лекарств и медицинской технике. - 2014. - № 6. - С. 24-31.

17) Клифар: госреестр [Электронный ресурс] // Клифар - базы данных: [сайт]: -http://www.cliphar.ru/products/cliphar-gosreestr. Дата обращения: 20.09.2017.

18) Единая информационной система в сфере закупок [Электронный ресурс] // © 2017, Федеральное Казначейство: [сайт]: - http://zakupki.gov.ru/epz/main/public/home.html Дата обращения: 20.09.2017.

19) FDA Approved Drugs for Oncology [Электронный ресурс] // CenterWatch: [сайт]: -https://www.centerwatch.com/drug-information/fda-approved-drugs/therapeutic-area/12/oncology. Дата обращения: 20.09.2017.

20) Государственный реестр лекарственных средств [Электронный ресурс] // Министерство здравоохранения Российской Федерации: [сайт]: http://www.grls.rosminzdrav.ru/GRLS.aspx. Дата обращения: 20.09.2017.

21) Siddik, Z. H. Mechanisms of Action of Cancer Chemotherapeutic Agents: DNA-Interactive Alkylating Agents and Antitumour Platinum-Based Drugs. В Кн: The Cancer Handbook / Z.H. Siddik // John Wiley & Sons, Ltd. - 2005. - P. 1295-1311.

22) Malhotra, V. Classical Chemotherapy: Mechanisms, Toxicities and the Therapeutic Window / V. Malhotra, M.C. Perry // Cancer Biology & Therapy. - 2003. - V. 2. - S. 1. - P. 1-3.

23) Темозоломид (Temozolomide): инструкция, применение и формула [Электронный ресурс] // Регистр лекарственных средств России: [сайт]: http://www.rlsnet.ru/mnn_index-id_3000.htm. Дата обращения: 20.09.2017.

24) High-Performance Liquid Chromatographic Analysis and Stability of Antitumor Agent Temozolomide in Human Plasma / H. Kim, P. Likhari, D. Parker et al. // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2001. - V. 24. - № 3. - P. 461-468.

25) Sawyer, A. J. New Methods for Direct Delivery of Chemotherapy for Treating Brain Tumors / A.J. Sawyer, J.M. Piepmeier, W.M. Saltzman // Yale Journal of Biology and Medicine. -2006. - V. 79. - № 3-4. - P. 141-152.

26) Antitumor Activity and Pharmacokinetics in Mice of 8-Carbamoyl-3-Methyl-Imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-Tetrazin-4(3H)-One (CCRG 81045; M & B 39831), a Novel Drug with Potential as an Alternative to Dacarbazine / M.F.G. Stevens, J.A. Hickman, S.P. Langdon et al. // Cancer Research. - 1987. - V. 47. - № 22. - P. 5846-5852.

27) Борисов, К. Е. Темозоломид при злокачественных астроцитарных глиомах / К.Е. Борисов, Д.Д. Сакаева // Российский онкологический журнал. - 2012. - Т. 1. - С. 41-48.

28) Lind, M. J. Principles of cytotoxic chemotherapy / M.J. Lind // Medicine. - 2008. - V. 36 - № 1. - P. 19-23.

29) Parker, W. B. Enzymology of Purine and Pyrimidine Antimetabolites Used in the Treatment of Cancer / W.B. Parker // Chemical Reviews. - 2009. - V. 109. - № 7. - P. 2880-2893.

30) Rowinsky, E. K. The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics / E.K. Rowinsky, R.C. Donehower // Pharmacology & Therapeutics. -1991. - V. 52, - № 1, P. 35-84.

31) Yue, Q. X. Microtubule-Binding Natural Products for Cancer Therapy / Q.X. Yue, X. Liu, D A. Guo// Planta Medica. - 2010. - V. 76. - № 11. - P. 1037-1043.

32) Новые цитостатики в лечении злокачественных опухолей / М.Б. Бычков, Э.К. Возный, А.М. Гарин и др. // Москва: РОНЦ им. Н.Н. Блохина. - 1998. - 128 с.

33) Паклитаксел и карбоплатин в лечении распространенного немелкоклеточного рака легкого: предварительные результаты открытого проспективного клинического исследования /

B.А. Горбунова, А.Ф. Маренич, Е.В. Реутова и др. // Фарматека. - 2010. - № 6. - С. 62-69.

34) Carboplatin Delays Mammary Cancer 4T1 Growth in Mice / C.M. de Souza,

C. de Olivera Gamba, C.B. de Campos et al. // Pathology - Research and Practice. - 2013. - V. 209. -№ 1. - P. 24-29.

35) Cisplatin vs. Carboplatin-Based Chemoradiotherapy in Patients >65 Years of Age with Stage III non-Small Cell Lung Cancer / N. Ezer, C.B. Smith, M.D. Galsky et al. // Radiotherapy and Oncology. - 2014. -V. 112. - № 2. - P. 272-278.

36) Offermanns, S. Encyclopedia of Molecular Pharmacology / S. Offermanns, W. Rosenthal // Springer. - 2008. - P. 1505.

37) Sobell, H. M. Actinomycin and DNA Transcription / H.M. Sobell // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 1985. - V. 82. -№ 16. - P. 5328-5331.

38) Anthracyclines: Molecular Advances and Pharmacologic Developments in Antitumor Activity and Cardiotoxicity / G. Minotti, P. Menna, E. Salvatorelli et al. // Pharmacological Reviews. -2004. - V. 56. - № 2. - P. 185-229.

39) Ford, J. M. Pharmacology of Drugs that Alter Multidrug Resistance in Cancer / J.M. Ford, W.N. Hait // Pharmacological Reviews. - 1990. - V. 42. - № 3. - P. 155-199.

40) Expression of a Human Multidrug Resistance cDNA (MDR1) in the Bone Marrow of Transgenic Mice: Resistance to Daunomycin-Induced Leukopenia / H. Galski, M. Sullivan, M.C. Willingham et al. // Molecular and Cellular Biology. - 1989. - V. 9. - № 10. - P. 4357-4363.

41) Lopez, D. Marine Natural Products with P-Glycoprotein Inhibitor Properties / D. Lopez, S. Martinez-Luis // Marine Drugs. - 2014. - V. 12. - № 1. - P. 525-546.

42) Choi, C. H. ABC Transporters as Multidrug Resistance Mechanisms and the Development of Chemosensitizers for Their Reversal / C.H. Choi // Cancer Cell International. - 2005. - V. 5. - №. 30. - P. 1-13.

43) Tew, K. D. Glutathione-Associated Enzymes in Anticancer Drug Resistance / K.D. Tew // Cancer Research. - 1994. - V. 54. - № 16. - P. 4313-4320.

44) Nielsen, D. Kinetics of Daunorubicin Transport in Ehrlich Ascites Tumor Cells with Different Expression of P-Glycoprotein: Influence of Verapamil / D. Nielsen, C. Maare, T. Skovsgaard // Biochemical Pharmacology. - 1994. - V. 47. - № 12. - P. 2125-2135.

45) Adriamycin-Induced DNA Damage Mediated by Mammalian DNA Topoisomerase II / K M. Tewey, T.C. Rowe, L. Yang et al. // Science. - 1984. - V. 226. -№ 4673. - P. 466-468.

46) Инге-Вечтомов, С. Г. Генетика с основами селекции / С.Г. Инге-Вечтомов // Москва: Высшая школа. - 1989. - 592 с.

47) Relationship Between Cytotoxicity, Drug Accumulation, DNA Damage and Repair of Human Ovarian Cancer Cells Treated with Doxorubicin: Modulation by the Tiapamil Analog RO11-

2933 / M.A.A. Jamali, M. Yin, A. Mazzoni et al. // Cancer Chemoteraphy and Pharmacology. - 1989. - V. 25. - № 2. - P. 77-83.

48) Использование культур опухолевых клеток ЦНС для изучения механизмов противоопухолевой активности темозоломида, иммобилизованного на высокозамещенном фосфате декстрана (доклиническое исследование) / И.И. Сакович, А.С. Федулов, З.Б. Квачева и др. // Медицинский журнал. - 2007. - Т. 3. - № 21. - С. 79-82.

49) Zhang, H. Temozolomide/PLGA Microparticles and Antitumor Activity Against Glioma C6 Cancer Cells In Vitro / H. Zhang, S. Gao // International Journal of Pharmaceutics. - 2007. -V. 329. - № 1-2. - P. 122-128.

50) Система контролируемого высвобождения, содержащая темозоломид : пат. 2322979 Рос. Федерация : МПК51 A 61 K 31/4188, A 61 K 47/30, A 61 K 9/22, A 61 P 35/00 / Й. Ванг, Д. Фэй; заявитель и патентообладатель ТИАНЦЗИН ТЕЙСЛИ ГРУП КО., ЛТД. -№ 2005113282/15 ; заявл. 29.03.2003 ; опубл. 27.04.2008, Бюл. № 12. - 37 c.

51) Delivery of Temozolomide to the Tumor Bed via Biodegradable Gel Matrices in a Novel Model of Intracranial Glioma with Resection / U. Akbar, T. Jones, J. Winestone et al. // Journal of Neuro-Oncology. - 2009. - V. 94. - № 2. - P. 203-212.

52) The Effect of Temozolomide/Poly(lactide-co-glycolide) (PLGA)/Nano-Hydroxyapatite Microspheres on Glioma U87 Cells Behavior / D. Zhang, A. Tian, X. Xue et al. // International Journal of Molecular Sciences. - 2012. - V. 13. - № 1. - P. 1109-1125.

53) Nano/Micro Technologies for Delivering Macromolecular Therapeutics Using Poly(D,L-Lactide-co-Glycolide) and its Derivatives / R.C. Mundargi, V.R. Babu, V. Rangaswamy et al. // Journal of Controlled Release. - 2008. - V. 125. - № 3. - P. 193-209.

54) Unraveling the Cytotoxic Potential of Temozolomide Loaded into PLGA Nanoparticles / D.S. Jain, R.B. Athawale, A.N. Bajaj et al. // DARU Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2014. -V. 22. - № 18. - P. 1-9.

55) Стабильная эмульсия для парентерального введения плохо растворимых в воде соединений, обладающих противоопухолевой активностью, и способ ее получения : пат. 2370261 Рос. Федерация : МПК51 A 61 K 31/337, A 61 K 47/20, A 61 K 47/34, A 61 K 9/107, A 61 P 35/00 / Н.Л. Клячко, Р.А. Иванов, А Н. Махсон, С.Д. Варфоломеев, С.В. Угланова, Д.Л. Строяковский, Ю.Е. Абрикосова, Д.В. Морозов; заявитель и патентообладатель Закрытое акционерное общество "БИОКАД" - № 2007129680/15 ; заявл. 03.08.2007 ; опубл. 20.10.2009, Бюл. № 29. - 22 c.

56) Preparation, Characterization, Cytotoxicity and Pharmacokinetics of Liposomes Containing Docetaxel / M.L. Immordino, P. Brusa, S. Arpicco et al. // Journal of Controlled Release. -

2003. - V. 91. - № 3. - P. 417-429.

57) Plasma, Tumor and Tissue Pharmacokinetics of Docetaxel Delivered via Nanoparticles of Different Sizes and Shapes in Mice Bearing SKOV-3 Human Ovarian Carcinoma Xenograft / K.S. Chu, W. Hasan, S. Rawal et al. // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. -2013. - V. 9. - № 5. - P. 686-693.

58) Docetaxel-Loaded Polylactic Acid-co-Glycolic Acid Nanoparticles: Formulation, Physicochemical Characterization and Cytotoxicity Studies / R. Pradhan, B.K. Poudel, T. Ramasamy et al. // Journal of Nanoscience and Nanotechnology. - 2013. - V. 13. - № 8. - P. 5948-5956.

59) Novel Docetaxel-Loaded Nanoparticles Based on Poly(Lactide-co-Caprolactone) and Poly(Lactide-co-Glycolide-co-Caprolactone) for Prostate Cancer Treatment: Formulation, Characterization, and Cytotoxicity Studies / V. Sanna, A.M. Roggio, A.M. Posadino et al. // Nanoscale Research Letters. - 2011. - V. 6. - № 1. - P. 260.

60) Compositions and methods for preparation of poorly water soluble drugs with increased stability : пат. 8034765 United States : МПК51 A 61 K 31/337, A 61 K 38/38 / T. De, N.P. Desai, A. Yang, Z. Yim, P. Soon-Shiong; заявитель и патентообладатель Abraxis Bioscience, Llc -№ US 11/513,756 ; заявл. 30.08.2006 ; опубл. 11.10.2011. - 36 c.

61) Preparation and In Vitro Evaluation of a Pegylated Nano-Liposomal Formulation Containing Docetaxel / A. Yousefi, F. Esmaeili, S. Rahimian et al. // Scientia Pharmaceutica. - 2009. -V. 77. - № 2. - P. 453-464.

62) Preparation, Characterization and Pharmacokinetics of Folate Receptor-Targeted Liposomes for Docetaxel Delivery / G. Zhai, J. Wu, G. Xiang et al. // Journal of Nanoscience and Nanotechnology. - 2009. - V. 9. - № 3. - P. 2155-2161.

63) Dextran-PLGA-Loaded Docetaxel Micelles with Enhanced Cytotoxicity and Better Pharmacokinetic Profile / R. Kaisar, K. Nitesh, M. Charu et al. // International Journal of Biological Macromolecules. - 2016. - V. 88. - P. 206-212.

64) Co-Delivery of Docetaxel and Poloxamer 235 by PLGA-TPGS Nanoparticles for Breast Cancer Treatment / T. Xiaolong, L. Yong, F. Xiaojun et al. // Materials Science and Engineering: C. -2015. - V. 49. - P. 348-355.

65) The Chemotherapeutic Potential of PEG-b-PLGA Copolymer Micelles That Combine Chloroquine as Autophagy Inhibitor and Docetaxel as an Anti-Cancer Drug / Zh. Xudong, Z. Xiaowei, L. Xin et al. // Biomaterials. - 2014. - V. 35. - № 33. - P. 9144-9154.

66) Aptamer-Mediated Delivery of Docetaxel to Prostate Cancer Through Polymeric Nanoparticles for Enhancement of Antitumor Efficacy / Ch. Zhongjian, T. Zongguang, G. Fenfen et al. // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2016. - V. 107. - P. 130-141.

67) Cholic Acid-Functionalized Nanoparticles of Star-Shaped PLGA-Vitamin E TPGS Copolymer for Docetaxel Delivery to Cervical Cancer / Z. Xiaowei, T. Wei, M. Lin et al. // Biomaterials. - 2013. - V. 34. - № 25. - P. 6058-6067.

68) Folic Acid Conjugated Nanoparticles of Mixed Lipid Monolayer Shell and Biodegradable Polymer Core for Targeted Delivery of Docetaxel / Y. Liu, K. Li, J. Pan et al. // Biomaterials. - 2010. - V. 31. - № 2. - P. 330-338.

69) Optimization of Parameters for Preparation of Docetaxel-Loaded PLGA Nanoparticles by Nanoprecipitation Method / W. Shi, Z.J. Zhang, Y. Yuan et al. // Journal of Huazhong University of Science and Technology [Medical Sciences]. - 2013. - V. 33. -№ 5. - P. 754-758.

70) Anti-Tumor Activity of Docetaxel PLGA-PEG Nanoparticles with a Novel Anti-HER2 scFv / D.T.T. Le, L.T.M. Dang, N.T.M. Hoang et al. // Journal of Nanomedicine & Nanotechnology. - 2015. - V. 6. - № 2. - P. 1-7.

71) Surface Modification of PLGA Nanoparticles via Human Serum Albumin Conjugation for Controlled Delivery of Docetaxel / S. Manoochehri, B. Darvishi, G. Kamalinia et al. // DARU Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2013. - V. 21. - № 1. - P. 58.

72) Lu, B. Lung-Targeting Microspheres of Carboplatin / B. Lu, J.Q. Zhang, H. Yang // International Journal of Pharmaceutics. - 2003. - V. 265. - № 1-2. - P. 1-11.

73) Ahmed, F. Carboplatin Loaded Protein Nanoparticles Exhibit Improve Antiproliferative Activity in Retinoblastoma Cells / F. Ahmed, M.J. Ali, A. Kondapi, // International Journal of Biological Macromolecules. - 2014. - V. 70. - P. 572-582.

74) Potentiation of Anticancer Effects of Microencapsulated Carboplatin by Hydroxypropyl a-Cyclodextrin / T. Utsuki, H. Brem, J. Pitha et al. // Journal of Controlled Release. - 1996. - V. 40. -№ 3. - P. 251-260.

75) Preparation and Characteristics of Carboplatin-Fe@C-loaded Chitosan Nanoparticles with Dual Physical Drug-Loaded Mechanisms / Y.H. Guo, F.R. Li, S.Y. Bao et al. // Current Applied Physics. - 2007. - V. 7. - S. 1. - P. 97-102.

76) Chen, W. Carboplatin-Loaded PLGA Microspheres for Intracerebral Injection: Formulation and Characterization / W. Chen, D.R. Lu // Journal of Microencapsulation. - 1999. -V. 16. - № 5. - P. 551-563.

77) Carboplatin-Loaded PLGA Microspheres for Intracerebral Implantation: In Vivo Characterization / W. Chen, J. He, J.J. Olson et al. // Drug Delivery. - 1997. - V. 4. -№ 4. - P. 301-311.

78) Direct Intracerebral Delivery of Carboplatin from PLGA Microspheres Against

Experimental Malignant Glioma in Rats / W. Chen, J. He, J.J. Olson et al. // Drug Delivery. - 1998. -V. 5. - № 2. - P. 101-110.

79) Carboplatin Loaded Surface Modified PLGA Nanoparticles: Optimization, Characterization, and In Vivo Brain Targeting Studies / S. Jose, B.C. Juna, T.A. Cinu et al. // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2016. - V. 142. - P. 307-314.

80) Convection-Enhanced Delivery of Carboplatin PLGA Nanoparticles for the Treatment of Glioblastoma / A. Arshad, B. Yang, A.S. Bienemann et al. [Электронный ресурс] // PLoS ONE: [сайт]: http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0132266. Дата обращения: 13.11.2017.

81) Gust, R. Investigations on the Stability of Carboplatin Infusion Solutions / R. Gust, B. Schnurr // Monatshefte für Chemie. - 1999. - V. 130. - № 5. - P. 637-644.

82) Xu, N. Studies on Preparation of Artesunate-Loaded mPEG-PLGA-Nanoparticles and Its Inhibition on K562 cells / N. Xu, Sh. Wang, Q. Du, L. Xu, J. Zhang, G. Li, X. Liu // China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy. - 2013. - V. 1. - P. 85-89.

83) Ma, P. Anthracycline Nano-Delivery Systems to Overcome Multiple Drug Resistance: A Comprehensive Review / P. Ma, R.J. Mumper // Nanotoday. - 2013. - V.8. - № 3. - P. 313-331.

84) Degradation of polymer loaded daunorubicin nanospheres and its preparation method : пат. 1973843 China : МПК51 A 61 K 47/34, A 61 P 35/00, A 61 P 35/02, A 61 K 9/14, A 61 K 31/704 / S.L. Zhang; заявитель и патентообладатель Huazhong University of Science & Technology -№ CN 200610125367 ; заявл. 08.12.2006 ; опубл. 06.06.2007. - 9 c.

85) A Modified Double-Emulsion Method for the Preparation of Daunorubicin-Loaded Polymeric Nanoparticle with Enhanced In Vitro Anti-Tumor Activity / J. Liu, Z. Qiu, S. Wang et al. [Электронный ресурс] // Biomedical Materials: [сайт]: http://iopscience.iop.org/article/10.1088/1748-6041/5/6/065002/pdf. Дата обращения: 16.11.2017.

86) Han, B. Layered Microcapsules for Daunorubicin Loading and Release as well as In Vitro and In Vivo Studies / B. Han, B. Shen, Z. Wang // Polymers for Advanced Technologies. - 2008. -V. 19. - № 1. - P. 36-46.

87) PLGA Nanofibers Improves the Antitumoral Effect of Daunorubicin / P.P.G. Guimaraes, M F. Oliveira, A.D.M. Gomes et al. // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2015. - V. 136. -P. 248-255.

88) Porous Silicon Oxide-PLGA Composite Microspheres for Sustained Ocular Delivery of Daunorubicin / K. Nan, F. Ma, H. Hou et al. // Acta Biomaterialia. - 2014. - V. 10. - № 8. - P.3505-3512.

89) Alexander, C.M. Investigation of the Drug Binding Properties and Cytotoxicity of DNA-

Capped Nanoparticles Designed as Delivery Vehicles for the Anticancer Agents Doxorubicin and Actinomycin D / C.M. Alexander, J.C. Dabrowiak, MM. Maye // Bioconjugate Chemistry. - 2012. -V. 23. - № 10. - P. 2061-2070.

90) Flow Cytometry Evaluation of In Vitro Cellular Necrosis and Apoptosis Induced by Silver Nanoparticles / G. Kumar, H. Degheidy, B.J. Casey et al. // Food and Chemical Toxicology. -2015. - V. 85. - P. 45-51.

91) Uptake of Nanoparticles by Rat Glomerular Mesangial Cells In Vivo and In Vitro / L. Manil, J.C. Davin, C. Duchenne et al. // Pharmaceutical Research. - 1994. - V. 11. -№ 8. - P. 1160-1165.

92) Antitumor Effects of Doxorubicin in Combination With Anti-Epidermal Growth Factor Receptor Monoclonal Antibodies / J. Baselga, L. Norton, H. Masui et al. // Journal of the National Cancer Institute. - 1993. - V. 85. - № 16. - P. 1327-1333.

93) Recombinant Humanized Anti-HER2 Antibody (Herceptin™) Enhances the Antitumor Activity of Paclitaxel and Doxorubicin against HER2/neu Overexpressing Human Breast Cancer Xenografts / J. Baselga, L. Norton, J. Albanell et al. // Cancer Research. - 1998. - V. 58. - № 13. -P. 2825-2831.

94) Yang, H. M. Doxorubicin Conjugated with a Monoclonal Antibody Directed to a Human Melanoma-Associated Proteoglycan Suppresses the Growth of Established Tumor Xenografts in Nude Mice / H.M. Yang, R.A. Reisfeld // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 1988. -V. 85. - № 4. - P. 1189-1193.

95) Cure of Xenografted Human Carcinomas by BR96-Doxorubicin Immunoconjugates / P.A. Trail, D. Willner, S.J. Lasch et al. // Science. - 1993. - V. 261. - № 5118. - P. 212-215.

96) Anti-CD74 Antibody-Doxorubicin Conjugate, IMMU-110, in a Human Multiple Myeloma Xenograft and in Monkeys / P. Sapra, R. Stein, J. Pickett et al. // Clinical Cancer Research. -2005. - V. 11. - № 14. - P. 5257-5264.

97) Importance of VEGF for Breast Cancer Angiogenesis In Vivo: Implications From Intravital Microscopy of Combination Treatments with an anti-VEGF Neutralizing Monoclonal Antibody and Doxorubicin / P. Borgström, D.P. Gold, K.J. Hillan et al. // Anticancer Research. - 1999. - V. 19. - № 5. - P. 4203-4214.

98) Synthesis and Characterization of Tumor-Targeted Copolymer Nanocarrier Modified by Transferring / R. Liu, Y. Wang, X. Li et al. // Drug Design, Development and Therapy. - 2015. -V. 9. - P. 2705-2719.

99) Genetically Designed Biomolecular Capping System for Mesoporous Silica Nanoparticles Enables Receptor-Mediated Cell Uptake and Controlled Drug Release / S. Datz, C. Argyo, M. Gattner et al. // Nanoscale. - 2016. - V. 8. - № 15. - P. 8101-8110.

100) Противоопухолевый препарат: пат. 2451509 Рос. Федерация: МПК51 A 61 K 31/337, A 61 K 9/19, A 61 K 45/08, A 61 K 47/30, A 61 K 47/48, A 61 P 35/00, B 82 B 1/00 / Е.С. Северин, Н.В. Гнучев, Е.А. Воронцов, Н.В. Позднякова, Н.В. Гукасова, С.Е. Северин, А.В. Годованный; заявитель и патентообладатель Автономная некоммерческая организация "Институт Молекулярной Диагностики" (АНО «ИнМоДи») - № 2011112210/15; заявл. 31.03.2011; опубл. 27.05.2012, Бюл. № 15. - 12 c.

101) Albumin Nanoparticles Targeted with Apo E Enter the CNS by Transcytosis and are Delivered to Neurons / A. Zensi, D. Begley, C. Pontikis et al. // Journal of Controlled Release. - 2009.

- V. 137. - № 1. - P. 78-86.

102) Biomaterials Dextran and Albumin Derivatised Iron Oxide Nanoparticles: Influence on Fibroblasts In Vitro / C.C. Berrya, S. Wells, S. Charles et al. // Biomaterials. - 2003. - V. 24. - № 25.

- P. 4551-4557.

103) Covalent Attachment of Apolipoprotein A-I and Apolipoprotein B-100 to Albumin Nanoparticles Enables Drug Transport into the Brain / J. Kreuter, T. Hekmatara, S. Dreis et al. // Journal of Controlled Release. - 2007. - V. 118. - № 1. - P. 54-58.

104) Transferrin-Conjugated Lipid-Coated PLGA Nanoparticles for Targeted Delivery of Aromatase Inhibitor 7a-APTADD to Breast Cancer Cells / Y. Zheng, B. Yu, W. Weecharangsan et al. // International Journal of Pharmaceutics. - 2010. - V. 390. -№ 2. - P. 234-241.

105) A New System for Targeted Delivery of Doxorubicin into Tumor Cells / N.G. Yabbarov, G.A. Posypanova, E.A. Vorontsov et al. // Journal of Controlled Release. - 2013. - V. 168. - № 2. -P.135-141.

106) Targeted delivery of doxorubicin: Drug delivery system based on PAMAM dendrimers / N.G. Yabbarov, G.A. Posypanova, E.A. Vorontsov et al. // Biochemistry. - 2013. - V. 78. - No 8. -P.1128-1140.

107) Разработка подхода избирательной доставки паклитаксела в составе наночастиц, связанных с рекомбинантным фрагментом альфа-фетопротеина человека, в опухолевые клетки / А.В. Годованный, Е.А. Воронцов, Н.В. Гукасова и др. // Доклады Академии Наук. - 2011. -Т. 439. - № 2. - С. 260-262.

108) Formulation of Functionalized PLGA-PEG Nanoparticles for In Vivo Targeted Drug Delivery / J. Chenga, B.A. Teplya, I. Sherifia et al. // Biomaterials. - 2007. - V. 28. -№ 5. - P. 869-876.

109) Targeted Nanoparticle-Aptamer Bioconjugates for Cancer Chemotherapy In Vivo / O.C. Farokhzad, J. Cheng, B.A. Teply et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2006. - V. 103. - № 16. - P. 6315-6320.

110) Molecularly Self-Assembled Nucleic Acid Nanoparticles for Targeted In Vivo siRNA Delivery / H. Lee, A.K.R. Lytton-Jean, Y. Chen et al. // Nature Nanotechnology. - 2012. -V. 7. - P. 389-393.

111) In Vivo Tumor Targeting and Spectroscopic Detection with Surface-Enhanced Raman Nanoparticle Tags / X. Qian, X.H. Peng, D.O. Ansari et al. // Nature Biotechnology. - 2008. - V. 26. -P. 83-90.

112) Panyama, J. Biodegradable Nanoparticles for Drug and Gene Delivery to Cells and Tissue / J. Panyama, V. Labhasetwar // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2003. - V. 55. - № 3. -P. 329-347.

113) Poly(Ethylene Oxide)-Modified Poly(P-Amino Ester) Nanoparticles as a pH-Sensitive System for Tumor-Targeted Delivery of Hydrophobic Drugs: Part 2. In Vivo Distribution and Tumor Localization Studies / D. Shenoy, S. Little, R. Langer et al. // Pharmaceutical Research. - 2005. -V. 22. - № 12. - P. 2107-2114.

114) U.S. National Library of Medicine [Электронный ресурс] // U.S. Department of Health and Human Services: [сайт]: - https://clinicaltrials.gov/ct2/home Дата обращения: 10.11.2017.

115) PLGA-Based Nanoparticles: an Overview of Biomedical Applications / F. Danhier, E. Ansorena, J.M. Silva et al. // Journal of Controlled Release. - 2012. - V. 161. -№ 2. - P. 505-522.

116) Bioresorbable Polymers Market Analysis By Product (Polylactic Acid (PLA), Polyglycolic Acid (PGA), Polycaprolactone, Polysaccharides, Proteins): отраслевой отчет / Application (Drug Delivery, Orthopedics), Competitive Landscape, And Segment Forecasts, 2014 - 2025 // Grand View Research, Inc. - 2016. - P. 105.

117) FDA's Regulatory Science Program for Generic PLA/ PLGA-Based Drug Products [Электронный ресурс] // American Pharmaceutical Review: [сайт]: -http://www.americanpharmaceuticalreview.com/Featured-Articles/188841-FDA-s-Regulatory-Science-Program-for-Generic-PLA-PLGA-Based-Drug-Products. Дата обращения: 08.11.2017.

118) Ganta, S. A Review of Stimuli-Responsive Nanocarriers for Drug and Gene Delivery / S. Ganta, H. Devalapally, A. Shahiwala // Journal of Controlled Release. - 2008. - V. 126.

- № 3. - P. 187-204.

119) Parveen, S. Potential Clinical Relevance Nanoparticles: a Boon to Drug Delivery, Therapeutics, Diagnostics and Imaging / S. Parveen, R. Misra, S.K. Sahoo // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. - 2012. - V. 8. - № 2. - P. 147-166.

120) Yoo, J. W. Adaptive Micro and Nanoparticles: Temporal Control Over Carrier Properties to Facilitate Drug Delivery / J.W. Yoo, N. Doshi, S. Mitragotri // Advanced Drug Delivery Reviews. -2011. - V. 63. - № 14-15. - P. 1247-1256.

121) Bala, I. PLGA Nanoparticles in Drug Delivery: The State of the Art / I. Bala, S. Hariharan, M.N. Kumar // Critical Review in Therapeutic Drug Carrier Systems. - 2004. - V. 21. -№ 5. - P. 387- 422.

122) Hines, D. J. Poly (Lactic-co-Glycolic) Acid - Controlled-Release Systems: Experimental and Modeling Insights / D.J. Hines, D.L. Kaplan // Critical Review in Therapeutic Drug Carrier Systems. - 2013. - V. 30. - № 3. - P. 257-276.

123) Rahimi, M. In ^itw-Forming PLGA Implants Loaded with Leuprolide Acetate/p-Cyclodextrin Complexes: Mathematical modelling and Degradation / M. Rahimi, H. Mobedi, A. Behnamghader // Journal of Microencapsulation. - 2016. -V. 33. -№ 4. - P. 355-364.

124) PLGA Nanoparticles Loaded with Etoposide and Quercetin Dihydrate Individually: In Vitro Cell Line Study to Ensure Advantage of Combination Therapy / S. Pimple, A.S. Manjappa, M. Ukawala et al. // Cancer Nanotechnology. - 2012. - V. 3. - P. 27.

125) Fu, Y. Drug Release Kinetics and Transport Mechanisms of non-Degradable and Degradable Polymeric Delivery Systems / Y. Fu, W.J. Kao // Expert Opinion on Drug Delivery. -2010. - V. 7. - № 4. - P. 429-444.

126) Houchin, M. L. Chemical Degradation of Peptides and Proteins in PLGA: a Review of Reactions and Mechanisms / M.L. Houchin, E.M. Topp // Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2008.

- V. 97. - № 7. - P. 2395-2404.

127) Mello, V. A. Encapsulation of Naproxen in Nanostructured System: Structural Characterization and In Vitro Release Studies / V.A. Mello, E. Ricci-Júnior // Química Nova. - 2011. -V. 34. - № 6. - P. 933-939.

128) Yin, H. Enhanced Permeability and Retention (EPR) Effect Based Tumor Targeting: the Concept, Application and Prospect / H. Yin, L. Liao, J. Fang // JSM Clinical Oncology and Research.

- 2014. - V. 2. - № 1. - P. 1010.

129) A Thermo-Sensitive PLGA-PEG-PLGA Hydrogel for Sustained Release of Docetaxel / Y. Gao, F. Ren, B. Ding et al. // Journal of Drug Targeting. - 2011. - V. 19. -№ 7. - P. 516-527.

130) Dewangan, A. K. Synthesis of Curcumin Loaded CMCAB Nanoparticles for Treatment of Rheumatoid Arthritis / A.K. Dewangan, S. Varkey, S. Mazumder // Сборник материалов научно-практических конференций : тез. конф., International Conference on Chemical, Environmental and Biological Sciences. - Dubai (UAE), 2015. - P. 25-30.

131) Development and Evaluation of co-Formulated Docetaxel and Curcumin Biodegradable Nanoparticles for Parenteral Administration / H. Pawar, S.R. Wankhade, D.K. Yadav et al. // Pharmaceutical Development and Technology. - 2016. - V. 21. -№ 6. - P. 725-736.

132) Drug-Polymer Interaction Between Glucosamine Sulfate and Alginate Nanoparticles: FTIR, DSC and Dielectric Spectroscopy Studies / A.S. El-Houssiny, A.A. Ward, D.M. Mostafa et al. [Электронный ресурс] // Advances in Natural Sciences: Nanoscience and Nanotechnology: [сайт]: http://iopscience.iop.org/article/10.1088/2043-6262/7/2/025014/pdf. Дата обращения: 24.11.2017.

133) Liu, J. Polymer-Drug Compatibility: a Guide to the Development of Delivery Systems for the Anticancer Agent, Ellipticine / J. Liu, Y. Xiao, C. Allen // Journal of Pharmaceutical Sciences. -2004. - V. 93. - № 1. - P. 132-143.

134) Лаврик О.И. Физическая химия полимеров // Учебно-методический комплекс. -Новосибирск, 2014.

135) Fortebio [Электронный ресурс] // Picomolar Solution Phase Affinity Measurement by BLI-ELISA: [сайт]: - URL: https://www.fortebio.com/interactions/Winter 2014/index6.html. Дата обращения: 11.10.2017.

136) Аликберова, Л. Ю. Комплексные соединения: учебно-методическое пособие / Л.Ю. Аликберова, Н.С. Рукк // Москва: МИТХТ. - 2012. - 70 с.

137) Mukerjee, P. Dilute Solutions of Amphipathic Ions. II. Transference of Lauryl Sulfate in Sodium Lauryl Sulfate / P. Mukerjee // Journal of Physical Chemistry. - 1958. - V. 62. -№ 11. - P. 1397-1400.

138) AFM/TEM Complementary Structural Analysis of Surface-Functionalized Nanoparticles / B. Ruozi, D. Belletti, M.A. Vandelli et al. // Journal of Physical Chemistry & Biophysics. - 2014. -V. 4. - № 4. - P. 100150.

139) Tantra, R. Nanomaterial Characterization: An Introduction / R. Tantra // John Wiley & Sons. - 2016. - P. 320.

140) Passive Targeting of Nanoparticles to Cancer: A Comprehensive Review of the Literature / R. Bazak, M. Houri, S. El Achy et al. // Molecular and Clinical Oncology. - 2014. - V. 2. - № 6. -P. 904-908.

141) The New Era of Nanotechnology, an Alternative to Change Cancer Treatment / A. Jurj, C. Braicu, L.A. Pop et al. // Drug Design, Development and Therapy. - 2017. -V. 11. - P. 2871-2890.

142) Sadat, S. M. A. Effects of Size and Surface Charge of Polymeric Nanoparticles on In Vitro and In Vivo Applications / S.M.A. Sadat, S.T. Jahan, A. Haddadi // Journal of Biomaterials and Nanobiotechnology. - 2016. - V. 7. - № 02. - ID:65756. - P. 18.

143) Mayor, S. Pathways of Clathrin-Independent Endocytosis / S. Mayor, R.E. Pagano // Nature Reviews Molecular cell biology. - 2007. - V. 8. - № 8. - P. 603-612.

144) Honary, S. Effect of zeta potential on the properties of nano-drug delivery systems-a review (Part 2) / S. Honary, F. Zahir // Tropical Journal of Pharmaceutical Research. - 2013. - V. 12. -№ 2. - P. 265-273.

145) Molecular biology of the cell / B. Alberts, A. Johnson, J. Lewis, et al. // Garland Science. - 2015. - P. 1465.

146) Wileman, T. Receptor-mediated endocytosis / T. Wileman, C. Harding, P. Stahl // Biochemical Journal. - 1985. - V. 232. - № 1. - P. 1-14.

147) Посыпанова Г.А. Использопание белковых и пептидных векторов для избирательной доставки противоопухолевых препаратов и терапевтических олигонуклеотидов в опухолевые клетки. : дис. ... докт. биол. наук : 03.01.04 : защищена 2013 / Посыпанова Галина Ароновна. - М., 2013. - 256 с. - 05201350882.

148) Antitumor Activity of Alpha-Fetoprotein Conjugate with Doxorubicin In Vitro and In Vivo / N.B. Feldman, S M. Kiselev, N.V. Gukasova et al. // Biochemistry. - 2000. - V. 65. -№ 8. - P. 967-971.

149) Conjugation of the Recombinant Third Domain of Human alpha-Fetoprotein with Doxorubicin Using PAMAM-Dendrimers and Study of its Cytotoxic Activity / S.I. Kisil, V.A. Chernikov, M.I. Danilevskiy et al. // Engineering. - 2012. - V. 4. - № 10. - P. 80-83.

150) Nakanishi, K. Circular Dichroism: Principles and Applications / K. Nakanishi, N.Berova, R.W. Woody // VCH. - 1994. - P. 570.

151) Северин, Е. С. Новые подходы к избирательной доставке лекарственных препаратов в опухолевые клетки / Е.С. Северин // Успехи химии. - 2015. - Т. 84. -№ 1. - С. 43-60.

152) Panyam, J. Rapid Endo-Lysosomal Escape of Poly(DL-Lactide-co-Glycolide) Nanoparticles: Implications for Drug and Gene Delivery / J. Panyam, W.Z. Zhou, S. Prabha et al. // The FASEB Journal. - 2002. - V. 16. - № 10. - P. 1217-1226.

153) Лупанова, Т. Н. Измерение размеров наночастиц методом динамического рассеяния света: Учебное пособие / Т.Н. Лупанова, П.Г. Георгиев // М.: ИБГ РАН. - 2013. - 13 с.

154) Gadhave, R. V. Stability Indicating RP-HPLC-PDA Method for Determination of Abiraterone Acetate and Characterization of its Base Catalyzed Degradation Product LC-MS / R.V. Gadhave, A.B. Tamnar, A.S. Bansode et al. // International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. - 2016. - V. 8. - № 2. - P. 76-81.

155) Государственная фармакопея Российской Федерации [Электронный ресурс] // Научный центр экспертизы средств медицинского применения: [сайт]: http://pharmacopoeia.ru/gosudarstvennaya-farmakopeya-xiii-online-gf-13-online. Дата обращения: 12.12.2017.

156) Sahoo, S. K. Enhanced Antiproliferative Activity of Transferrin-Conjugated Paclitaxel-Loaded Nanoparticles Is Mediated via Sustained Intracellular Drug Retention / S.K. Sahoo, V. Labhasetwar // Molecular Pharmaceutics. - 2005. - V. 2. - № 5. - P. 373-383.

157) Sun, S. B. Formulation and Evaluation of PLGA Nanoparticles Loaded Capecitabine for Prostate Cancer / S.B. Sun, P. Liu, F.M. Shao et al. // International Journal of Clinical and Experimental Medicine. - 2015. - V. 8. - № 10. - P. 19670-19681.

158) Nagda, S. Comparison of SUV-based Metabolic and CT Target Volumes in Esophageal Cancer Patients undergoing Radiation Therapy / S. Nagda, F. Vali, W. Hall et al. // International Journal of Radiation Oncology*Biology*Physics. - 2008. - V. 72. - № 1. - P. S262.

159) Urasaki, Y. Establishment of Daunorubicin-Resistant Cell Line Which Shows Multi-Drug Resistance by Multifactorial Mechanisms / Y. Urasaki, T. Ueda, A. Yoshida et al. // Anticancer Research. - 1996. - V. 16. - № 2. - P. 709-714.

160) Goldstein, M. N. In Vitro Studies with HeLa Cell Lines Sensitive and Resistant to Actinomycin D / M.N. Goldstein, I.J. Slotnick, L.J. Journey // Annals of the New York Academy of Sciences. - 1960. - V. 89. - № 2. - P. 474-483.

161) Amine Functionalized Superparamagnetic Nanoparticles for the Synthesis of Bioconjugates and Uses Therefor : пат. 0068115 United States : МПК51 A 61 R 49/18 / D A. Gaw, L. Josephson; заявитель и патентообладатель VisEn Medical, Inc. - № US 12/118,020 ; заявл. 09.05.2008 ; опубл. 12.03.2009. - 7 c.

162) Doxorubicin and TRAIL co-supported albumin nanoparticle targeting preparation and preparation method thereof : пат. 105012271 China: МПК51 A 61 K 9/51, A 61 K 38/17,

A 61 K 47/22, A 61 K 47/42, A 61 P 35/00, A 61 K 31/704 / Z. Yan, L. Hongren, L. Feng ; заявитель и патентообладатель Shenyang University. - № CN 201510385230; заявл. 06.07.2015 ; опубл. 04.11.2015. - 12 c.

163) Transferrin-conjugated nanoparticles for increasing efficacy of a therapeutic agent : пат. 2010015051 United States : МПК51 A 61 K 51/08, A 61 P 35/00 / V.D. Labhasetwar, S.K. Sahoo ; заявитель и патентообладатель University of Nebraska Medical Center - № US 11/124,934 ; заявл. 09.05.2005 ; опубл. 21.01.2010. - 10 c.

164) Ellman, G. L. Tissue sulfhydryl groups / G.L. Ellman // Archives of Biochemistry and Biophysics. - 1959. - V. 82. - № 1. - P. 70-77.

165) Kelly, S. M. How to Study Proteins by Circular Dichroism / S.M. Kelly, T.J. Jess, N.C. Price // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics. - 2005. - V. 1751. -№ 2. - P. 119-139.

166) Abdul-Gader, A. A Reference Dataset for the Analyses of Membrane Protein Secondary Structures and Transmembrane Residues Using Circular Dichroism Spectroscopy / A. Abdul-Gader, A.J. Miles, B.A. Wallace // Bioinformatics. - 2011. - V. 27. - № 12.

- P.1630-1636.

167) Tsedilin, A. M. How Sensitive and Accurate are Routine NMR and MS Measurements? / A.M. Tsedilin, A.N. Fakhrutdinov, D.B. Eremin // Mendeleev Communications. - 2015. - V. 25. -№ 6. - P. 454-456.

168) Korsmeyer, R. Mechanisms of Solute Release from Porous Hydrophilic Polymers / R. Korsmeyer, R. Gurny, E. Doelker // International Journal Of Pharmaceutics. - 1983. - V. 15. - № 1.

- P. 25-35.

169) Boyum, A. Isolation of Mononuclear Cells and Granulocytes from Human Blood / A. Boyum // Scandinavian Journal of Clinical & Laboratory Investigation. - 1968. -V. 21. - P. 77-89.

170) Mosmann, T. Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays / T. Mosmann // Journal of Immunological Methods. - 1983. -V. 65. - № 1-2. - P. 55-63.

171) Трещалина, Е. М. Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ. В Кн: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Е.М. Трещалина, О С. Жукова, Г.К. Герасимова и др. // М.: Медицина. - 2005. - С. 637-651.