Создание лекарственного препарата на основе гликозидного производного индолокарбазола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.01, кандидат наук Гулякин Илья Дмитриевич

• Гулякин Илья Дмитриевич
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Гулякин Илья Дмитриевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика группы производных индолокарбазолов

1.1.1. К-Гликозиды замещенных индоло[2,3-а]карбазолов

1.1.2. Производное индоло[2,3-а]карбазола ЛХС-1208

1.2. Применение методов повышения растворимости ЛП

1.2.1. Солюбилизация гидрофобных ЛВ

ПВП

ПЭГ

ДМСО

Растительные масла

Спирт этиловый

Глицерин

1.2.2. Получение ТДС

1.2.3. Комплексообразование с ЦД

1.2.4. Модификация структуры и изменение рН

36

1.2.5. Повышение растворимости за счет создания наноструктурированных

ЛФ

Липосомы

Мицеллы

1.3. Стерилизующая фильтрация ЛП

1.4. Лиофилизация ЛП

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Материалы и реактивы

2.2. Оборудование

2.3. Методы исследований

2.3.1. Метод получения ИЛФ ЛХС-1208

2.3.2. Стерилизация ИЛФ ЛХС-1208

2.3.3. Лиофилизация ИЛФ ЛХС-1208

2.3.4. Методы анализа ИЛФ-лио ЛХС-1208

Качественный хроматографический анализ ИЛФ-лио ЛХС-

1208

Количественный спектрофотометрический анализ ЛХС-1208 в ИЛФ и ИЛФ-

лио

Валидация методики спектрофотометрического анализа ЛХС-1208

Определение рН ИЛФ-лио ЛХС-1208

Методика определения значения рН ИЛФ-лио ЛХС-1208

Методика определения потери в массе при высушивании

2.3.5. Статистическая обработка данных

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 3. Разработка состава и технологии получения ИЛФ-лио ЛХС-

1208

3.1. Разработка состава ИЛФ ЛХС-1208

3.1.1. Определение максимальной концентрации ЛХС-1208 в ДМСО

3.1.2. Выбор состава модельной ЛФ ЛХС-1208 для внутривенного введения

Использование Cremophor ELP в качестве солюбилизатора

Использование Kolliphor HS 15 в качестве солюбилизатора

Использование Kollidon 17PF в качестве солюбилизатора

3.1.3. Оценка влияния стерилизующей фильтрации на содержание ЛХС-1208 в моделях ЛФ

3.1.4. Изучение стабильности моделей ЛФ ЛХС-1208 в процессе хранения

3.2. Разработка технологии получения ИЛФ ЛХС-1208

3.2.1. Оптимизация технологии получения раствора ЛХС-1208

3.2.2. Оценка качества раствора ЛХС-1208 в процессе хранения

3.3. Разработка технологии лиофилизации ИЛФ ЛХС-1208

3.3.1. Исследования по разработке методики лиофилизации ЛФ ЛХС-1208 с Kollidon 17PF

3.3.2. Усовершенствование режима лиофилизации ИЛФ ЛХС-1208

3.3.3. Изучение стабильности раствора, полученного после растворения ИЛФ-лио ЛХС-1208

3.4. Технологическая схема получения и состав ИЛФ-лио ЛХС-

1208

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ГЛАВА 4. Разработка методик контроля качества ИЛФ-лио ЛХС-

1208

4.1. Разработка методики ТСХ для качественного анализа ИЛФ-лио ЛХС-

1208

4.1.1. Методика ТСХ-анализа ЛХС-1208 и Kollidon 17 PF

4.1.2. Методика ТСХ-анализа Kollidon 17 PF

4.1.3. Выбор подвижных фаз для ТСХ ЛХС-1208 и Kollidon

PF

4.1.4. Оценка пригодности хроматографических систем

4.2. Разработка методики спектрофотометрического анализа ЛХС-1208 в ИЛФ-лио

4.2.1. Изучение спектральных характеристик ЛХС-1208 и его идентификация (определение подлинности) в ЛФ

4.2.2. Изучение влияния ВВ на спектрофотометрическое определение ЛХС-1208 в ЛФ (оценка специфичности)

4.2.3. Оценка соблюдения закона Бугера-Ламберта-Бера

4.2.4. Определение максимума поглощения для количественного спектрофотометрического анализа ЛХС-1208 в ЛФ

4.2.5. Количественное определение ЛХС-1208 в ИЛФ до и после

лиофилизации

А. Методика спектрофотометрического определения ЛХС-1208 в

ИЛФ

Б. Методика спектрофотометрического определения ЛХС-1208 в лиофилизате

4.2.6. Валидация методики спектрофотометрического анализа ЛХС-

1208

Специфичность

Линейность

Правильность (точность)

Прецизионность

А. Повторяемость (сходимость)

Б. Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Глава 5. Стандартизация и изучение стабильности в процессе хранения ИЛФ-лио

ЛХС-1208

5.1. Показатели качества для стандартизации ИЛФ-лио ЛХС-1208

5.2. Изучение стабильности ИЛФ-лио ЛХС-1208 при

хранении

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ИЛЛЮСТРАЦИОННОГО МАТЕРИАЛА

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение

Приложение

Приложение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание лекарственного препарата на основе гликозидного производного индолокарбазола»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Разработка и внедрение новых, высокотехнологических методов ранней диагностики и лечения рака является одной из важнейших задач современной науки. За последние десятилетия достигнуты значительные успехи в совершенствовании технологий выявления и лечения злокачественных новообразований, и в этом большая заслуга советской и российской онкологической школы, у истоков которой стоял академик Н.Н. Блохин. Основатель Института экспериментальной патологии и терапии рака Академии медицинских наук СССР (ныне Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина» Министерства здравоохранения Российской Федерации - ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России) уделял большое внимание развитию фундаментальных и прикладных направлений научных разработок, что способствовало становлению как теоретической, так и практической онкологии в нашей стране.

Борьба со злокачественными новообразованиями входит в число главных приоритетов Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), поскольку эта патология по многим показателям лидирует в списке сложных и неразрешенных проблем клинической медицины всех стран мира. По прогнозам ВОЗ заболеваемость и смертность от злокачественных заболеваний в мире за период 1999-2020 гг. возрастёт в 2 раза, а количество ежегодно диагностируемых случаев к 2030 г. увеличится на 69% и достигнет 21 млн. По подсчетам Международного агентства по изучению рака в абсолютных цифрах ежегодная онкологическая смертность вырастет до 13 млн. в год.

Основной задачей здравоохранения России является увеличение продолжительности жизни и снижение смертности населения от

злокачественных новообразований. Основными методами лечения в онкологии остаются хирургия, лучевая терапия и химиотерапия опухолей.

По-прежнему актуальным направлением научных исследований остается создание высокоэффективных оригинальных отечественных противоопухолевых препаратов. Одной из многообещающих групп лекарственных препаратов (ЛП) в этом отношении являются индолокарбазолы и их производные, способные инициировать различные пути гибели опухолевых клеток. В настоящее время работу по исследованию возможностей получения новых препаратов на основе производных индолокарбазолов проводит НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей (НИИ ЭДиТО) ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, создателем которого является академик Л.Ф. Ларионов -автор первого в мире учебника по химиотерапии опухолей и соратник Н.Н. Блохина.

В НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России создан метод получения производного индоло[2,3-а]карбазола - ЛХС-1208. Данная субстанция практически нерастворима в воде и большинстве органических растворителей, что является большой проблемой для разработки лекарственной формы (ЛФ).

Для улучшения растворимости гидрофобных лекарственных веществ (ЛВ) используют различные методы и подходы, среди которых выделяют: физические, химические и физико-химические методы, а также некоторые технологические приемы.

В связи с тем, что субстанция ЛХС-1208 нерастворима, предложено использование одного из подходов для улучшения биологической и фармацевтической доступности данной субстанции - введение вспомогательных веществ (ВВ), таких как солюбилизаторы (сорастворители).

Степень разработанности темы исследования

В НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России проводился скрининг среди производных индолокарбазола. Высокая противоопухолевая активность ЛХС-1208 перед другими производными индолокарбазола дала основание отобрать данное соединение для дальнейших исследований. Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования являлось создание лиофилизированной инъекционной ЛФ (ИЛФ-лио) гидрофобного противоопухолевого соединения ЛХС-1208.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

1. В результате технологических и химико-фармацевтических исследований установить оптимальный состав ИЛФ-лио ЛХС-1208 и разработать технологию получения ИЛФ-лио ЛХС-1208, стабильной при хранении.

2. Разработать методики химико-фармацевтического анализа для контроля качества ИЛФ-лио ЛХС-1208.

3. Выбрать показатели качества для стандартизации ИЛФ-лио ЛХС-1208, а также изучить стабильность ЛФ в процессе хранения.

4. Разработать лабораторный регламент на производство готовой ЛФ, проект НД и патент на ИЛФ-лио ЛХС-1208.

Научная новизна

В результате проведенных исследований впервые создана стабильная при хранении ИЛФ-лио оригинального противоопухолевого соединения из группы производных индолокарбазола ЛХС-1208. Установлен оптимальный состав и разработана технология получения ИЛФ-лио, имеющая ряд особенностей, связанных с наличием у ЛХС-1208 гидрофобных свойств. Предложены методики качественного и количественного анализа ИЛФ-лио ЛХС-1208. Определены показатели оценки качества и проведена стандартизация разработанной ИЛФ-лио ЛХС-1208. Разработаны проект НД

на «ЛХС-1208, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 9 мг» (прил. 1) и лабораторный регламент на производство готовой ЛФ (прил. 2), а также получен патент РФ на изобретение «Противоопухолевое средство» № Яи 2572691 С1 (прил. 3). Теоретическая значимость исследования

Теоретическая значимость работы заключается в обосновании выбора состава и технологии получения солюбилизированной ИЛФ-лио ЛХС-1208, являющегося гидрофобным соединением. Также доказано и экспериментально обосновано применение лиофилизации в технологии получения ИЛФ-лио ЛХС-1208 с целью повышения ее стабильности в процессе хранения. Представленный в работе экспериментально-практический материал может служить теоретической базой для создания солюбилизированных инъекционных ЛФ гидрофобных субстанций с последующей лиофилизацией для стабильности хранения. Практическая значимость работы

Выполнение настоящего исследования позволило создать стабильную и эффективную ИЛФ-лио ЛХС-1208, наработать экспериментальные серии и передать их на доклиническое изучение. Проведена стандартизация полученных серий ЛФ по выбранным параметрам. На основе выбранных показателей качества созданы и внедрены в практику лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России проект НД на «ЛХС-1208, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 9 мг» и лабораторный регламент на производство готовой ЛФ, а также получен патент РФ на изобретение «Противоопухолевое средство» № Яи 2572691 С1. Методология и методы исследования

Методологическую основу исследования составили труды российских ученых в области разработки технологии получения противоопухолевых препаратов на основе гидрофобных субстанций - П.В. Лопатина, Н.А. Оборотовой, З.С. Шпрах, Т.И. Клочковой, И.И. Краснюка и др.

В диссертационной работе применялись следующие методы исследований: технологические, химико-фармацевтические, математико-статистические. Публикации

Основное содержание, результаты работы и выводы отражены в 17 научных работах, из них: 8 в журналах, рекомендованных ВАК РФ и 1 патент на изобретение РФ.

Степень достоверности результатов

При проведении экспериментальной работы использовано сертифицированное современное оборудование, методами статистической обработки установлена прецизионность и правильность результатов исследований, что позволяет считать их достоверными. Апробация диссертации

Материалы научных исследований по теме диссертации были представлены на конференциях: Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Противоопухолевая терапия: от эксперимента к клинике» (20-21 марта 2014 г., Москва), I Международной научно-практической Интернет-конференции «Технологические и биофармацевтические аспекты растворения лекарственных препаратов разной направленности действия» (7-8 ноября 2014 г., Харьков), IV республиканской научной конференции по аналитической химии с международным участием «Аналитика РБ-2015» (15-16 мая 2015 г., Минск), XIII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты» памяти А.Ю. Барышникова (17-18 марта 2016 г., Москва). Апробация результатов диссертации проведена на межлабораторной конференции НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России - 16 февраля 2017 г.

Личный вклад автора

Автор принимал непосредственное участие в постановке целей и задач настоящего исследования, их экспериментальной реализации, анализе и обобщении данных, изложении полученных результатов в виде научных публикаций. В работах, выполненных в соавторстве, автором проведена аналитическая и статистическая обработка, научное обоснование и обобщение полученных результатов. Автором лично проанализирована научная литература по данной теме, выбран состав и разработана технология получения ИЛФ-лио ЛХС-1208, а также предложены методики качественного и количественного анализа разработанного препарата.

Внедрение результатов исследования

В практику лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России внедрены проект НД на «ЛХС-1208, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 9 мг» и лабораторный регламент на производство готовой ЛФ. Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.01 - технология получения лекарств. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 1, 3 и 4 паспорта специальности технология получения лекарств.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки

Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России по теме «Разработка лекарственных форм противоопухолевых препаратов с организацией лабораторного производства» (2014-2018 гг.) Гос. рег. 012013713444, шифр 245, (В/С, 1/11, 1), а также в рамках Государственного контракта №13411.1008799.13.20 от 24.06.13 г. «Доклинические исследования инновационного лекарственного

средства на основе производного индолокарбазола для лечения

онкологических заболеваний».

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты исследований по обоснованию и разработке состава и технологии получения ИЛФ-лио ЛХС-1208;

- результаты проведения комплексных исследований по разработке методик химико-фармацевтического анализа ИЛФ-лио ЛХС-1208: качественный хроматографический анализ компонентов ЛФ и количественное спектрофотометрическое определение ЛХС-1208 в ЛФ;

- результаты контроля качества экспериментальных серий ИЛФ-лио ЛХС-1208 и изучения их стабильности в процессе хранения.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 136 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, трех глав собственных исследований, общего заключения, общих выводов, списка литературы и приложений. Библиографический указатель содержит 132 наименования (из них 47 - на иностранном языке). Приведено 18 рисунков, 24 таблицы.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика группы производных индолокарбазола 1.1.1. ^гликозиды замещенных индоло^^^карбазолов

Создание новых отечественных противоопухолевых препаратов, избирательно разрушающих опухолевую ткань, является актуальной задачей современной российской науки. Среди широкого спектра химических соединений особый интерес представляют препараты из группы производных индолокарбазола. К-Гликозиды замещенных индоло[2,3-а]карбазолов и родственных соединений - это быстро увеличивающаяся группа синтетических соединений, обладающих противоопухолевой, антибактериальной и иммуномодулирующей активностью [75, 76].

Значительные успехи фундаментальной медицины в изучении механизма злокачественной трансформации клеток и процесса метастазирования новообразований позволили определить новые мишени воздействия потенциальных противоопухолевых средств. Способность взаимодействовать с несколькими мишенями и индуцировать различные пути гибели опухолевых клеток является отличительной особенностью механизма действия препаратов из группы производных индолокарбазола. Для этих соединений такими мишенями являются топоизомеразы, ДНК и протеинкиназы [12, 61, 77, 78].

Актуальность поиска ЛВ определяется отсутствием в клинической практике отечественных ингибиторов топоизомеразы I и/или II, в то время как в онкологический портфель прочно вошла линейка химиотерапевтических препаратов этого класса, разработанных за границей: иринотекан, топотекан, этопозид и тенипозид [13]. Ингибиторы топоизомераз - одни из наиболее эффективных индукторов апоптоза, т.е. самопрограммируемой гибели опухолевых клеток. Соединения этого класса обладают также активностью в отношении циклин-зависимых киназ. Эти особенности механизма действия определяют широкий спектр

цитотоксической и противоопухолевой активности N

гликозидов индоло[2,3-а]карбазолов [116].

Первым противоопухолевым соединением из класса индолокарбазолов был антибиотик ребеккамицин - ингибитор топоизмеразы I, активный в отношении клеток меланомы В-16 и лимфоцитарной лейкемии Р-388. В связи с плохой растворимостью ребеккамицина синтезировано его водорастворимое производное бекатекарин. Бекатекарин прошёл I—II фазу клинических исследований в монотерапии и при комбинированном лечении немелкоклеточного и мелкоклеточного рака легкого, рака молочной железы, рака почки, нейробластомы, колоректального рака, рака яичника, рака тонкой кишки, лейкозов, лимфом [123].

Бекатекарин вошел в Перечень редких («сиротских») медицинских технологий Евросоюза как препарат для лечения опухолей желчных протоков. Стоит пояснить, что данный Перечень был сгруппирован согласно фармакотерапевтической классификации, в него были внесены незначительные корректировки названий в соответствии с российской медицинской терминологией. Однако в связи с тем, что эксперты Формулярного комитета не проводили анализ доказательств эффективности медицинских технологий, включенных в Перечень, они не могут быть уверены в уровне доказанности их эффективности и жизненной необходимости [62].

Синтетическим путём также получено другое производное ребеккамицина, также обладающее плохой растворимостью — препарат эдотекарин. Клинические исследования эдотекарина проводились при лечении глиобластомы (в комбинации с темозоломидом или ломустином), при распространённом раке желудка, рецидивирующем после ранее проведенной химиотерапии [113].

Известным ингибитором PDK-1 (фермента активации киназы Akt, иначе называемая протеинкиназа В) является индолокарбазол стауроспорин, растворимый в спирте 95% и нерастворимый в воде [118]. Его 7-

гидроксипроизводное иЦЫ-01 проходило II фазу клинических

испытаний для лечения гемобластозов [124]. иЦЫ-01 является неселективным ингибитором многих протеинкиназ, в частности - семейства протеинкиназ С и циклинзависимых киназ [7]. Все вышеперечисленные препараты при проведении клинических исследований пациентам вводили внутривенно.

1.1.2. Производное индоло^^^карбазола ЛХС-1208

В НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России проводился скрининг соединений среди производных индолокарбазола [60]. В результате в качестве одного из перспективных производных выбран препарат ЛХС-1208 - 6-амино-12-(1-а-Ь-арабинопиранозил)индоло [2,3 а] -пирроло [3,4с]карбазол-5,7-дион (рис. 1), который не растворим в воде, мало растворим в спирте 95% и ацетоне, растворим в диметилсульфоксиде (ДМСО) и диметилформамиде (ДМФА) [30].

Y N

üiy г

Рис.1. Общая формула производного индолокарбазола ЛХС-1208, где y - NH2, x1 = x2 - H, z - H; Gly - арабиноза Высокая противоопухолевая активность ЛХС-1208 на лимфоцитарной лейкемии Р-388, эпидермоидной карциноме легких Льюиса (lung Lewis carcinoma, LLC) и его терапевтическое преимущество перед другими производными индолокарбазола в отношении меланомы В-16 дали основание отобрать данное соединение для доклинических исследований [30].

Ежедневное внутрибрюшинное введение ЛХС-1208 в течение 5 дней в дозе 100 мг/кг на Р-388 давало увеличение продолжительности жизни (УПЖ) опытных мышей по сравнению с контрольными животными на 119%. На

LLC ЛХС-1208 в дозе 100 мг/кг проявило высокий

противоопухолевый эффект непосредственно после окончания лечения, торможение роста опухоли (ТРО) составляло 90%. Терапевтический эффект ЛХС-1208 сохраняется на карциноме LLC в течение 15 дней, а на меланоме В-16 в течение 7 дней [73].

Для внутривенного введения ЛХС-1208 был разработан прототип ЛФ препарата. При оценке эффективности на Р-388 прототипа ЛФ для внутривенного введения в дозе 50 мг/кг выявлена противоопухолевая активность - 122% УПЖ, равная с эффективностью субстанции при внутрибрюшинном введении, но в дозе 100 мг/кг - 119% УПЖ. Таким образом, проведенные исследования показали, что по терапевтической эффективности прототип ЛФ для внутривенного введения соединения ЛХС-1208 не уступает субстанции, разведенной в 10% ДМСО при внутрибрюшинном введении, но терапевтическая доза прототипа в два раза меньше, чем субстанции [74].

1.2. Применение методов повышения растворимости ЛП

Разработка оптимальной ЛФ отобранного в экспериментальных исследованиях активного фармакологического вещества составляет основополагающее звено в алгоритме комплексных исследований по созданию терапевтического препарата. Для того чтобы получить требуемый фармакологический эффект, необходимо доставить ЛВ к пораженному органу. Задачей ЛФ является обеспечение оптимальных условий для максимальной биодоступности ЛВ. Всасыванию ЛВ в кровь предшествует его растворение в биологических жидкостях, после чего проникновение через физиологические мембраны проходит на уровне молекул активного вещества. Поэтому важным вопросом фармацевтической технологии является повышение растворимости гидрофобных и трудно растворимых ЛВ в воде и органических растворителях, поскольку их биологическая доступность в значительной степени зависит от растворимости и мембранной проницаемости [55].

Известно, что процесс растворения вещества связан с явлениями фазового перехода на границе твердое вещество - раствор. Интенсивность этого процесса зависит от площади поверхности раздела фаз. Однако микронизация (измельчение частиц) далеко не всегда приводит к увеличению скорости растворения и абсорбции ЛВ, что объясняется явлениями агломерации и агрегации. При микронизации происходит резкое увеличение удельной поверхности частиц и вместе с тем усиление сил ван-дер-ваальсова притяжения между неполярными молекулами, что и способствует процессам агломерации и агрегации [80].

Также при разных путях введения абсорбция ЛВ отличается за счёт взаимодействия его с биологическими жидкостями и тканями. Все это не позволяет получить водные растворы плохо растворимых веществ, а значит, и избежать таких нежелательных явлений, как абсцессы, денатурация белков, некрозы, обезвоживание тканей, эмболии и прочих осложнений, которые наблюдаются при применении масляных и спиртовых растворов в виде инъекций. Проявления токсичности способны стать критерием отбора перспективных лекарственных соединений, если не удается подобрать безопасные композиции, способ и режимы введения готовых ЛФ [47, 51].

Для большинства гидрофобных и труднорастворимых субстанций создание ЛФ достаточно трудоемкая задача, так как молекулы таких веществ неполярны и не смешиваются с таким полярным растворителем как вода, но хорошо растворимы в органических растворителях. Улучшение растворимости ЛВ в воде и органических растворителях предполагает значительное повышение их эффективности и биологической доступности, для достижения этих целей необходимо улучшить растворимость активных фармацевтических субстанций [57].

Ряд препаратов из-за низкой растворимости в воде либо не могут применяться в медицинской практике, либо в значительной степени теряют свой терапевтический эффект. Разработчикам ЛФ приходится учитывать ряд характеристик противоопухолевых препаратов: химическая лабильность,

небольшая широта фармакологического действия,

высокая токсичность, низкие терапевтические дозы, отсутствие специфичности. С учётом данных факторов большинство противоопухолевых препаратов выпускают в виде жидких или лиофилизированных растворов и применяют в виде внутривенных инфузий [49].

Онкологи должны пользоваться всем арсеналом противоопухолевых лекарств и вести борьбу за месяцы и годы жизни пациентов. Однако низкая избирательность противоопухолевого действия некоторых цитотоксических препаратов приводит к дозозависимому эффекту, ограничивающему их применение в клинике. Чем больше доза препарата, тем выше терапевтический эффект и тем больше токсических проявлений. Терапевтические подходы к совершенствованию лекарственной терапии опухолей сфокусированы на разработке новых систем доставки ЛС непосредственно к злокачественной клетке без повреждения нормальной ткани [13].

Для улучшения растворимости гидрофобных соединений используют различные методы и подходы, среди которых выделяют: физические, химические и физико-химические методы, а также некоторые технологические приемы (табл. 1).

Методы повышения растворимости:

1. Физические методы - получение твердых дисперсных систем (ТДС).

2. Химические методы - модификация структуры.

3. Физико-химические методы:

A) добавление сорастворителя; Б) изменение рН;

B) введение в состав веществ липидной природы (масла); Г) комплексообразование.

4. Технологические приемы: А) измельчение;

Б) нагревание;

В) ультразвуковая обработка; Г) эмульгирование;

Д) применение наноструктурированных систем доставки ЛВ к мишеням

(липосомы, мицеллы).

1.2.1. Солюбилизация гидрофобных ЛВ

Солюбилизация - способность мицеллярной фазы поверхностно-активных веществ (ПАВ) самопроизвольно растворять вещества (жидкие, твердые, газообразные), незначительно растворимые или совсем нерастворимые в обычных условиях в дисперсионной среде, с образованием термодинамически стабильного изотропного раствора. Основными факторами, определяющими солюбилизирующую способность водных растворов ПАВ, являются: структура самого ПАВ, фазовое состояние солюбилизата, температура раствора, влияние добавок (со-ПАВ, полимеров, электролитов и др.) [64].

Сорастворители, солюбилизаторы применяемые для получения инъекционных растворов, - это соединения, способствующие повышению растворимости ЛВ, они должны быть совместимы с тканями и физиологическими жидкостями организма, выдерживать стерилизацию, а также обладать оптимальным комплексом технологических (физико-химических и структурно-механических) свойств. В качестве сорастворителей в первую очередь используют высокомолекулярные соединения (ВМС), нашедшие применение в медицине в связи с их индифферентностью. Наиболее широко применяют поливинилпирролидон (ПВП), полиэтиленгликоли (ПЭГ), ДМСО, а также ряд других растворителей [107].

Таблица 1

Методы повышения растворимости для гидрофобных и труднорастворимых фармацевтических субстанций

Методы повышения растворимости Вспомогательные вещества Примеры препаратов

Химические Модификация структуры Аминокислоты, вещества кислотного и щелочного характера Пеметрексед Мелфалан Иринотекан

Физические Получение твердых дисперсных систем Полимерная матрица: поливинилпирролидон и его производные, полиэтиленгликоли, производные акриловой кислоты, эфиры целлюлозы Споранокс Зелбраф Левомицетин

Физико-химические Изменение рН Вещества кислого или основного характера, буферные растворы Гадобутарол Топотекан Алемтузумаб

Добавление сорастворителей (сорастворители) Спирт 95% , пропиленгликоль, глицерин, №метил-2-пирролидон, поли-этоксилированное касторовое масло (Cremophor®), PEG (Lutrol®E 400), поливинилпирролидон (Kollidon®), Soluplus®, Kolliphor®, диметилацетамид, диметилсульфоксид, диметилформамид Алкеран Фотолон Канглайт Этопозид Гексетидин Таксол Митотакс Паксен

Введение в рецептуру веществ липидной природы Масла: касторовое, кукурузное, хлопковое, оливковое, мятное, среднецепочечные триглецириды кокосового и пальмового масел, d-a-токоферол, олеиновая кислота, дистеароилфосфатидилглицерин Даназол Амфотерицин Интралипид Фазлодекс

Комплексо -образование Циклодекстрины (a-циклодекстрин, Р-циклодекстрин, гидроксипропил-Р-циклодекстрин, сульфобутиловый эфир Р-циклодекстрина) Вориконазол Митомицин Арипипразол Омепразол

ПВП

ПВП (коллидон, повидон) - полимер ^винилпирролидона, относится к высокомолекулярным линейным полимерам. Данный класс веществ представлен соединениями, состоящими из молекул линейной структуры длиной порядка 100 мкм, которые способны в низких концентрациях снижать гидродинамическое сопротивление. ПВП по своим физиологическим свойствам аналогичен альбумину крови и способен заменять его: раствор ПВП под названием «перистон», «коллидон» или «субтозан» в больших масштабах применяют для переливания крови при больших потерях, при гемофилии, для лечения шоков и некоторых других заболеваний [63].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гулякин Илья Дмитриевич, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алексеев, К.В. Технология повышения биологической и фармацевтической доступности лекарственных веществ / К.В. Алексеев, Н.В. Тихонова, Е.В. Блынская [и др.] // Вестник новых медицинских технологий. - 2012. - Т. XIX.

- № 4. - С. 43-47.

2. Аршинова, О.Ю. Технология и стандартизация лиофилизированных лекарственных препаратов фотодитазина: дис. канд. фармацевт. наук: 14.04.01 / Аршинова Ольга Юрьевна - М., 2014. - 144 с.

3. Афанасьева, Д.А. Молекулярные механизмы преодоления множественной лекарственной устойчивости липосомальными противоопухолевыми препаратами / Д.А. Афанасьева, М.А. Барышникова, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. - № 1. - С. 3-10.

4. Барышников, А.Ю. Иммунолипосомы - новое средство доставки лекарственных препаратов / А.Ю. Барышников, Н.А. Оборотова // Современная онкология. - 2001. - Т.3. - № 2. - С. 4.

5. Барышникова, М.А. Иммунолипосомы и мишени их действия / М.А. Барышникова, А.Ю. Барышников // Российский химический журнал. - 2012.

- Т. LVI. - № 3-4. - С. 60-67.

6. Беккер, Ю. Хроматография. Инструментальная аналитика: методы хроматографии и капиллярного электрофореза / перевод с нем. В.С. Куровой / Под ред. А.А. Курганова. - М.: Техносфера, 2009. - 472 с.

7. Блохин, Д.Ю. Молекулярные мишени для противоопухолевой терапии: пути: пути передачи сигнала и эпигенетические модуляторы / Д.Ю. Блохин, Е.Ф. Чмутин, П.К. Иванов // Российский биотерапевтический журнал. - 2011.

- Т. 10. - № 4. - С. 81-88.

8. Боят, В. Лекарственные формы паклитаксела / В. Боят, Е.А. Оганесян, В.Ю. Балабаньян, Р.Н. Алятудин // Российский биотерапевтический журнал.

- 2009. - Т. 8. - № 3. - С. 37-44.

9. Бунятян, Н.Д. Методические рекомендации. Тонкослойная (планарная) хроматография. Практические рекомендации по проведению хроматографических исследований в фармацевтическом анализе / Н.Д. Бунятян, Г.В. Раменская, В.П. Пахомов, О.А. Горошко. - М., 2008. - 52 с.

10. Бюлер, Ф. Коллидон: поливинилпирролидон для фармацевтической промышленности: [справочник] / перевод с англ. К.В. Алексеев. - 6-е изд. - Ludwigshafen: BASF, 2001 - 310 с.: ил.

11. Валидация аналитических методик для производителей лекарств: Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств / Под ред. В.В. Береговых. - М.: Литтерра, 2008. - 132 с.

12. Вартанян, А.А. Блокатор васкулогенной мимикрии восстанавливает чувствительность резистентных клеток меланомы к ДНК-алкилирующим агентам / А.А. Вартанян, М.А. Барышникова, О.С. Бурова [и др.] // Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина. - 2016. - Т. 27. - № 2. - С. 165-17.

13. Гарин, А.М. Справочник по лекарственной терапии солидных опухолей / А.М. Гарин, И.С. Базин. - М.: ИНФОТЕХ; ЛЕКСРУС, 2015. - 529 с.

14. Глушен, С.В. Внутриклеточные мишени фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором Фотолон / С.В. Глушен, С.В. Шляхтин, Ю.П. Истомин [и др.] // Труды БГУ. Фармкология и фармация. - 2010. - Т. 5. - № 1. - С. 255-266.

15. ГОСТ Р ИСО 13408-2-2007. Асептическое производство медицинской продукции. Часть 2. Фильтрация. - М.: Стандартинформ, 2007. - 16 с.

16. Государственная фармакопея РФ. 13-ое издание. Том 1. // Федеральная электронная медицинская библиотека. - 2015. [Электронный ресурс] Режим доступа: http://193.232.7.120/feml. (дата обращения 16.08.16 г.)

17. Государственная фармакопея РФ. 13-ое издание. Том 2. // Федеральная электронная медицинская библиотека. - 2015. [Электронный ресурс] Режим доступа: http://193.232.7.120/feml. (дата обращения 16.08.16 г.)

18. Демина, Н.Б. Нанотехнологические аспекты современной лекарственной формы / Н.Б. Демина, С.А. Скатков, А.И. Тенцова // Фармация. - 2012. - № 4. - C. 37-41.

19. Демина, Н.Б. Перспективные стратегии развития технологии наноносителей / Н.Б. Демина, С.А. Скатков, А.И. Тенцова // Фармация. -2012. - № 7. - C. 53-55.

20. Дмитриева, М.В. Липосомальная лекарственная форма Борхлорина / М.В. Дмитриева, Н.А. Оборотова, О.Л. Орлова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13. - № 1. - С. 31-36.

21. Дмитриева, М.В. Наноструктурированные системы доставки противоопухолевых препаратов / М.В. Дмитриева, Н.А. Оборотова, Е.В. Санарова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11. -№ 4. - С.21-27.

22. Душкин, А.В. Механохимическое получение и свойства твердых дисперсий, образующих водорастворимые супрамолекулярные системы / А.В. Душкин, Е.С. Метелева, Ю.С. Чистяченко [и др.] // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 1. - С. 741-749.

23. Душкин, А.В. Механохимическая технология для повышения растворимости лекарственных веществ / А.В. Душкин, Л.П. Сунцова, С.С. Халиков // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 1. - С. 448-457.

24. Жнякина, Л.Е. Исследование физико-химического взаимодействия лекарственных веществ в твердых дисперсных системах: Автореф. дис. канд. фарм. наук: 15.00.02 / Жнякина Лидия Евгеньевна - Самара, 2005. - 23 с.

25. Зангиева, М.Т. Разработка и исследование иммунолипосомальных конструкций in vitro / М.Т. Зангиева, А.А. Матюшин, Д.В. Соколова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13. - № 2. - С. 19-28.

26. Иванова-Радкевич, В.И. Фотодинамическая активность производного тетраазахлорина / В.И. Иванова-Радкевич, Л.В. Умнова, С.В. Барканова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2008. - Т. 7. - № 3. - С. 3941.

27. Игудин, Л.И. Полиэтиленгликоли и их использование в биологии и медицине / Л.И. Игудин, Г.А. Маркман, С.А. Лобань // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1984. - № 4. - С. 17-21.

28. Калимуллина, Л.Б. Токсикология диметилсульфоксида / Л.Б. Калимуллина // Рукопись депонирована в ВИНИТИ. 1978. Д 3191 -78. 27 с.

29. Капланов, К.Д. Опыт мобилизации аутологичных периферических стволовых кроветворных стволовых CD34+ клеток при множественной миеломе / К.Д. Капланов, Л.С. Трегубова, С.В. Егоров [и др.] // Вестник ВолГМУ. - 2010. - № 1 (33). - С. 77-81.

30. Киселева, М.П. Поиск новых противоопухолевых соединений среди производных N-гликозидов индоло[2,3-а]карбазолов / М.П. Киселева, З.С. Смирнова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский онкологический журнал. -2015. - № 2. - С. 33-37.

31. Клочкова, Т.И. Исследования по оптимизации производства и стандартизации лиофилизированных препаратов на примере противоопухолевых лекарственных средств: дис. док. фарм. наук: 15.00.01 / Клочкова Татьяна Ивановна - М., 2005. - 247 с.

32. Клочкова, Т.И. Организация, масшабирование и оптимизация производства лиофилизированных препаратов / Т.И. Клочкова, З.С. Шпрах // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5. - №3. - С. 115-122.

33. Козеев, С.Г. Разработка наноструктурированной липосомальной формы аранозы / С.Г. Козеев, М.А. Барышникова, Д.А. Афанасьева [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т.11. - № 2. - С. 24.

34. Краснюк, И.И. (мл.) Влияние твердых дисперсий на растворимость антибиотиков / И.И. Краснюк (мл.) // Химико-фармацевтический журнал. -2009. - Т. 43. - № 4. - С. 48-50.

35. Краснюк, И.И. (мл.) Влияние твердых дисперсий на растворимость лекарственных веществ / И.И. Краснюк (мл.), В.А. Попков, В.Ю. Решетняк [и др.] // Фармация. - 2004. - № 1. - С.17-21.

36. Краснюк, И.И. (мл.) Повышение биодоступности малорастворимых лекарственных веществ с использованием твердых дисперсий / И.И. Краснюк (мл.), В.А. Попков, В.Ю. Решетняк [и др.] // Российский медицинский журнал. - 2005. - № 6. - С.34-37.

37. Краснюк, И.И. (мл.) Твердые дисперсии с полиэтиленгликолями в фармации / И.И. Краснюк (мл.), В.А. Попков, В.Ю. Решетняк [и др.] // Фармация. - 2005. - № 3. - С.39-42.

38. Крюк, Т.В. Перспективные ингибиторы окисления полиэтиленгликоля в водных растворах / Т.В. Крюк, В.М. Михальчук, Л.В. Петренко [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2002. - Т.36. - № 1. - С. 31-34.

39. Кукушкин, Ю.Н. Диметилсульфоксид - важнейший апротонный растворитель / Ю.Н. Кукушкин // Соросовский образовательный журнал. -1997. - № 9. - С. 54-59.

40. Ланцова, А.В. Разработка лиофилизированной липосомальной лекарственной формы цифелина / А.В. Ланцова, Е.А. Котова, Е.В. Санарова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. - № 2. - С. 79-84.

41. Ластовой, А.П. Исследование свойств нового фотосенсибилизатора Р,Р,Р',Р'-тетраметилтрибензотетраазохлорина / А.П. Ластовой, А.А. Игнатова, А.В. Феофанов [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. -2014. -Т. 48. - № 2. - С. 7-12.

42. Макаров, М.С. Неканонические способы активации тромбоцитов человека / М.С. Макаров // Медицинский алфавит. - 2015. - Т. 3. - № 11. - С. 30-35.

43. Малое предприятие региональный токсиколого-гигиенический информационный центр "ТОКСИ". [Электронный ресурс] Режим доступа: http://toxi.dyndns.org/base/OrganichSoedinSery/Sulfoksidy/Dimetilsulfoksid.htm. (дата обращения: 25.10.13)

44. Матюшин, А.А. Получение и изучение анти-CD5 иммунолипосом митоксантрона in vitro / А.А. Матюшин, О.В. Хугаева, М.А. Барышникова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. - № 1. - С. 3342.

45. Матюшин, А.А. Получение и изучение анти-CD20 иммунолипосом митоксантрона in vitro / А.А. Матюшин, О.В. Хугаева, М.А. Барышникова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13. - № 3. - С. 15-24.

46. Николаева, Л.Л. Парентеральная лекарственная форма нового соединения из класса алкилнитрозомочевины / Л.Л. Николаева, А.В. Ланцова, Е.В. Санарова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. -№ 1. - С. 113.

47. Оборотова, Н.А. Достижения в области современных лекарственных форм противоопухолевых препаратов / Н.А. Оборотова // Российский биотерапевтический журнал. - 2013. - Т. 12. - № 2. - С. 61.

48. Оборотова, Н.А. Липосомальные лекарственные формы противоопухолевых препаратов (обзор) / Н.А. Оборотова // Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т.35. - № 4. - С. 32-38.

49. Оборотова, Н.А. Основные проблемы создания лекарственных форм противоопухолевых препаратов для внутривенного введения / Н.А. Оборотова // Российский биотерапевтический журнал. - 2003. - Т. 2. - № 2. -С. 27-31.

50. Оборотова, Н.А. Противоопухолевые субстанции и их лекарственные формы, созданные в РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН / Н.А. Оборотова // В кн.: «Экспериментальная онкология на рубеже веков» / Под ред. М.И. Давыдова, А.Ю. Барышникова. - М.: издательская группа РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, 2003. - 552 с.: ил.

51. Оборотова, Н.А. Фармацевтические аспекты создания наноструктурированных лекарственных форм противоопухолевых препаратов / Н.А. Оборотова // Российский биотерапевтический журнал. -2009. - Т. 8. - № 1. - С. 8.

52. Оборотова, Н.А. Липосомальные лекарственные формы в клинической онкологии / Н.А. Оборотова, А.Ю. Барышников // Успехи современной биологии. - 2009. - № 5. - С. 464.

53. Оборотова, Н.А. Технологические возможности сублимационной сушки фармацевтических препаратов / Н.А. Оборотова, И.И. Краснюк, Н.В. Томашевская // Фармация. - 2007. - №2. - С. 25-26.

54. Оборотова, Н.А. Биофармацевтические исследования лекарственной формы противоопухолевого препарата БХНМ / Н.А. Оборотова, Н.Е. Рышкова, З.С. Смирнова и др. // Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т.35. - № 2. - С. 46-48.

55. Оборотова, Н.А. Роль новых фармацевтических технологий в повышении избирательности действия противоопухолевых препаратов / Н.А. Оборотова, Е.В. Санарова // Российский химический журнал. - 2012. - Т. LVI. - № 3-4. -С.33-40.

56. Оборотова, Н.А. Биофармацевтические аспекты создания лекарственных форм функиозида / Н.А. Оборотова, З.С. Смирнова, П.В. Лопатин // Медицинский реферативный журнал (МРЖ) - 1982. - №9. - публ. 1489.

57. Оборотова, Н.А. Фармацевтические аспекты разработки липосомальных лекарственных форм для внутривенного введения гидрофобных цитостатиков / Н.А. Оборотова, З.С. Смирнова, А.П. Полозкова [и др.] // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2002. - № 1. - С. 42-45.

58. Оборотова, Н.А. Разработка инъекционных лекарственных форм цитостатиков с использованием растворимого поливинилпирролидона / Н.А. Оборотова, З.С. Шпрах, В.Л. Багирова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т.35. - № 5. - С. 39-43.

59. Орлова, О.Л. Создание лабораторной технологии воспроизведенной лекарственной формы эпирубицина / О.Л. Орлова, А.П. Полозкова, Н.А. Оборотова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2016. - Т. 15. - № 4. - С. 72-77.

60. Пат. № 2548045 РФ, МКИ А61К 31/7008, А61Р 35/00, С07Н 19/04 N гликозиды индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазолов, обладающие противоопухолевой активностью / Л.М. Борисова, И.С. Голубева, О.В. Горюнова [и др.] - № 2014107507/04; заявл. 27.02.2014; опубл. 10.04.2015. - 6 с.

61. Пат. № 2557554 РФ, МКИ А61К 31/7056, А61Р 35/00, С07Н 19/23 Производные индолокарбазолов, блокирующие васкулогенную мимикрию в опухоли / А.А. Вартанян, М.А. Барышникова, В.А. Еремина [и др.] - № 2014136547/04; заявл. 09.09.2014; опубл. 27.07.2015. - 6 с.

62. Перечень редких медицинских технологий Евросоюза. [Электронный ресурс]

Режим доступа:

http://www.rspor.rU/mods/db1/1/Perechen геёкШ 1еепо1оа EU.pdf (дата обращения: 30.11.16)

63. Пластмассы в медицине: сборник статей при участии Ф. Анштета [и др.]: / перевод с нем. / Под ред. Р. Гейнце. - М.: Медгиз, 1957. - 186 с.

64. Почерников, В.И. Научно-практические аспекты солюбилизации концентрированных солей натриевых солей жирных кислот / В.И. Почерников // Процессы и аппараты пищевых производств. - 2010. - №2. -С. 165-173.

65. Райков, А.О. Оптимизация метода получения липосомальной формы митоксантрона / А.О. Райков, А.А. Матюшин, И.И. Краснюк // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13. - № 4. - С. 73-78.

66. Райков, А.О. Липосомы для направленной доставки противоопухолевых препаратов / А.О. Райков, А. Хашем, М.А. Барышникова // Российский биотерапевтический журнал. - 2016. - Т. 15. - № 2. - С. 90-96.

67. Руководство для предприятий фармацевтической промышленности. Методические рекомендации / Под ред. Н.В. Юргеля, А.Л. Младенцева, А.В. Бурдейна [и др.] - М.: Спорт и Культура - 2000, 2007. - 192 с.

68. Рышкова, Н.Е. Химико- фармацевтическое исследование новой лекарственной формы БХНМ / Н.Е. Рышкова, Н.А. Оборотова, З.С. Шпрах [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2000. - Т.34. - № 9. -С. 46-48.

69. Саквина, О.И. Липосомы в направленной доставке противоопухолевых препаратов / О.И. Саквина, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. - 2008. - Т. 7. - № 4. - С. 80-85.

70. Санарова, Е.В. Применение диметилсульфоксида в фармации и медицине (обзор) / Е.В. Санарова, А.В. Ланцова, Н.А. Оборотова / Е.В. Санарова, А.В. Ланцова, Н.А. Оборотова // Биофармацевтический журнал. - 2015. - № 3. - С. 3-9.

71. Санарова, Е.В. Разработка модели липосомальной лекарственной формы нового отечественного аналога гипоталамического гормона соматостатина, обладающего противоопухолевой активностью / Е.В. Санарова, А.В. Ланцова, С. Чжан [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. - № 4. - С. 73-78.

72. Санарова, Е.В. Биофармацевтические исследования новой липосомальной лекарственной формы тиосенса / Е.В. Санарова, З.С. Смирнова, А.П. Полозкова [и др.] // Биофармацевтический журнал. - 2011. - № 6. - С.33-36.

73. Смирнова, З.С. Противоопухолевая активность соединения ЛХС-1208 гликозилированные производные индоло[2,3-а]карбазола) / З.С. Смирнова, Л.М. Борисова, М.П. Киселева [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2010. - Т. 9. - № 2. - С. 80.

74. Смирнова, З.С. Противоопухолевая эффективность прототипа лекарственной формы соединения ЛХС-1208 для внутривенного введения / З.С. Смирнова, Л.М. Борисова, М.П. Киселева [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11. - № 2. - С. 49.

75. Смирнова, З.С. Изучение связи структуры и противоопухолевой активности в ряду ^гликозидов, производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С. Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5. - № 1. - С. 20.

76. Смирнова, З.С. Корреляция цитотоксической и противоопухолевой активности в отношении лейкозов в ряду ^гликозилированных производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С. Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и

др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2007.

- Т. 6. - № 1. - С. 50-51.

77. Смирнова, З.С. Противоопухолевая активность ^гликозидов производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С. Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5. -№ 3. - С. 123-127.

78. Смирнова, З.С. Изучение противоопухолевой активности ^гликозидов замещенных индоло[2,3-а]карбазолов / З.С. Смирнова, И.Ю. Кубасова, Т.Д. Миникер [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2004. - Т. 3. -№ 2. - С. 34.

79. Смирнова, Л.И. Сарколизин-лио для внутреннего применения / Л.И. Смирнова, Н.А. Оборотова, З.С. Шпрах [и др.] // Вестник РОНЦ РАМН. -2001- Т.12. - № 4. - С. 22-27.

80. Теслев, А.А. К вопросу применения твердых дисперсных систем для улучшения биофармацевтических характеристик лекарственных средств / А.А. Теслев // Фармацевтические технологии и упаковка. - 2014. -№2. - С. 18-21.

81. Федорова, П.Ю. Сравнение кинетических свойств различных циклодекстринглюканотрансфераз / П.Ю. Федорова, Е.А. Гильванова, Н.Г. Усанов // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. -2011. - Т. 13. - № 5(3). - С. 203-206.

82. Хабриев, Р.У. Повышение растворимости ангиопротектора методом твердых дисперсий / Р.У. Хабриев, В.А. Попков, В.Ю. Решетняк [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2009. - Т. 43. - № 8. - С. 45-49.

83. Чернышева, Г.А. Фармакокинетика высокомолекулярного полиэтиленоксида / Г.А. Чернышева, В.И. Смольякова, М.Б. Плотников [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2006. - Т.40. - № 9. - С. 7-8.

84. Чикинева, Н.А. Создание и изучение липосомальной лекарственной формы цифелина / Н.А. Чикинева, З.С. Смирнова, О.Л. Орлова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т. 35. - №8 - С. 34-35.

85. Шпрах, З.С. Химико-фармацевтические исследования новой лекарственной формы сарколизина / З.С. Шпрах, Н.А. Оборотова, Л.И. Смирнова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т.35. - № 12. - С. 42-47.

86. A Study of the BRAF Inhibitor Dabrafenib in Combination With the MEK Inhibitor Trametinib in the Adjuvant Treatment of High-risk BRAF V600 Mutation-positive Melanoma After Surgical Resection. (COMBI-AD). [Электронный ресурс] Режим доступа:

http : //clinicaltrials. gov/ct2/show/NCT01682083?term=DMSO&rank=26 .(дата обращения: 25.10.13)

87. A Study to Determine the Relative Bioavailability of the MEK Inhibitor, Trametinib, in Subjects With Solid Tumor Malignancies. [Электронный ресурс] Режим доступа:

http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01725100?term=DMS0&rank=5. (дата обращения: 25.10.13)

88. Abdelwahed, W. Investigation of nanocapsules stabilization by amorphous excipients during freeze-drying and storage / W. Abdelwahed, G. Degobert, H. Fessi // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2006. - Vol. 2. - P.87-94.

89. Alsenz, J. High throughput solubility measurement in drug discovery and development / J. Alsenz, M. Kansy // Adv Drug Deliv Rev. - 2007. - Vol. 59. - P. 546-567.

90. Anhorn, M.G. Freeze drying of human serum albumin (HSA) nanoparticles with different excipients / M.G. Anhorn, H. Hanns-Christian Mahler, K. Langer // International Journal of Pharmaceutics. - 2008. - Vol. 1-2. - P. 162-169.

91. Arun, K. Techniques to improve the absorption of poorly soluble drugs / K. Arun, C.J. Babu, P. Laksmaiah [et al.] // International journal of research in pharmacy and chemistry. - 2012. - Vol. 2. - № 2. - P. 41-54.

92. Baheti, A. Excipients used in lyophilization of small molecules / A. Baheti, L. Kumar, A.K. Bansal // J. Excipients and Food Chem. - 2010. - Vol. 1. - № 1. - P. 41-54.

93. Benito-Gallo, P. Smart Lipid-Based Drug Delivery Systems / P. Benito-Gallo, P. Gershkovich, M. Marlow [et al.] // Smart Pharmaceutical Nanocarriers. - 2016. - Vol. 1 - P. 309-371.

94. Bennett, A. Pharmaceuticals and fine chemicals: Filtration and separation in the diverse fine chemical sectors / A. Bennett // Filtration + Separation. - 2013. -Vol. 50. - № 6. - P. 30-33.

95. Bharali, D.J. Nanoparticles and cancer therapy: A concise review with emphasis on dendrimers / D.J. Bharali, M. Khalil, M. Gurbuz [et al.] // International Journal of Nanomedicine. - 2009. - Vol. 4. - P. 1-7.

96. Blanco, E. Multifunctional micellar nanomedicine for cancer therapy / E. Blanco, C.W. Kessinger, B.D. Sumer, J. Gao // Experimental Biology and Medicine (Maywood). - 2009. - Vol. 234. - № 2. - P.123-131.

97. Brewster, M.E. Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers / M.E. Brewster // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2007. - Vol. 59. - P. 645-666.

98. Carvalho Junior, A.D. Preparation and cytotoxicity of cisplatin-containing liposomes / A.D. Carvalho Junior, F.P. Vieira, V.J. De Melo [et al.] // Brazilian Journal of Medical and Biological Research. - 2007. - Vol. 40. - P. 1149-1157.

99. Catapano, C.G. Accuracy of automated instruments used in the pharmaceutical industry for integrity testing sterilizing filters / C.G. Catapano // J. Pharm. Sci. Techol. - 2003. - Vol. 4. - P. 277-286.

100. Chemo-immunotherapy (Gemcitabine, Interferon-alpha 2b and p53 SLP) in Patients With Platinum-resistant Ovarian Cancer (CHIP). [Электронный ресурс] Режим доступа:

http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01639885?term=DMS0&rank=25. (дата обращения: 25.10.13)

101. Cross-section view of the structures that can be formed by phospholipids in aqueous solutions. [Электронный ресурс] Режим доступа:

https://en.wikipedia.org/wiki/Micelle#/media/File:Phospholipids_aqueous_solution _structures.svg. (дата обращения: 12.12.16)

102. Giri, T.K. Prospects of pharmaceuticals and biopharmaceuticals loaded microparticles prepared by double emulsion technique for controlled delivery / T.K. Giri, C. Choudhary, Ajazuddin [et al.] // Saudi Pharmaceutical Journal. -2013. - Vol. 2. - P.125-141.

103. Hardwicka, L.M. A proposed rationale and test methodology for establishment of acceptance criteria for vacuum integrity testing of pharmaceutical freeze dryers / L.M. Hardwicka, S.L. Naila, J. Jarmana [et al.] // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2013. - Vol. 2. - P.236-239.

104. Huh, K.M. A new hydrotropic block copolymer micelle system for aqueous solubilization of paclitaxel / K.M. Huh, H.S. Min, S.C. Lee [et al.] // Journal of Controlled Release. - 2008. - Vol. 126. - P.122-129.

105. Huober, J. A multicentric observational trial of pegylated liposomal doxorubicin for metastatic breast cancer / J. Huober, W. Fett, A. Nusch [et al.] // BMC Cancer. - 2010. - Vol. 7. - P.10-12.

106. Image of a liposome. [Электронный ресурс] Режим доступа:

https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%9B%D0%B8%D0%BF%D0%BE%D1%81% D0%BE%D0%BC%D0%B0#/media/File:Liposoom.jpg. (дата обращения: 12.12.16)

107. Kawakami, K. Solubilization behavior of a poorly soluble drug under combined use of surfactants and cosolvents / K. Kawakami, N. Oda, K. Miyoshi [et al.] // European journal of pharmaceutical sciences. - 2006. - Vol. 28. - P. 714.

108. Lantsova, A. Biopharmaceutical study of nanostructured formulation of the anticancer drug derivative of nitrosoalkylurea lysomustine / A. Lantsova, E. Kotova, K. Sanarova [et al.] // Journal of Drug Delivery Science and Technology. - 2012. - Vol. 22. - № 6. - P.469-472.

109. Levy, R.V. Types of filtration / R.V. Levy, M.W. Jornitz // Adv. Biochem. Eng. Biotechnol. - 2006. - Vol. 98. - P. 1-26.

110. Li, L.B. Preparation and characterization of Pluronic/TPGS mixed micelles for solubilization of camptothecin / L.B. Li, G. Zhai, Y. Gao // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2008. - Vol. 64. - P. 194-199.

111. Meyer, B.K. Impact of tubing material on the failure of product-specific bubble points of sterilizing-grade filters / B.K. Meyer, D. Vargas // J. Pharm. Sci. Techol. - 2006. - Vol. 4. - P. 248-253.

112. Morral-Ruiz, G. Polyurethane and polyurea nanoparticles based on polyoxyethylene castor oil derivative surfactant suitable for endovascular applications / G. Morral-Ruiz, P. Melgar-Lesmes, Garcia [et al.] // International journal of pharmaceutics. - 2014. - Vol. 461. - № 1. - P. 1-13.

113. Nock, C.J. A phase I study of rebeccamycin analog in combination with oxaliplatin in patients with refractory solid tumors / C.J. Nock, J.M. Brell, J.A. Bokar [et al.] // Invest New Drugs. - 2011. - Vol. 29. - P. 126-130.

114. Ostacolo, L. In vitro anticancer activity of docetaxel-loaded micelles based on poly(ethylene oxide)-poly(epsilon-caprolactone) block copolymers: Do nanocarrier properties have a role? / L. Ostacolo, M. Marra, F. Ungaro [et al.] // Journal of Controlled Release. - 2010. - Vol. 148. - P. 255-263.

115. PDA Technical Report № 26. "Sterilizing Filtration of Liquids." // J.Pharm. Sci. and Technol. - 1998. - 52 p.

116. Pereira Rodrigues, E. Structure - activity relationships in a series of substituted indolocarbazoles: topoisomerase I and protein kinase C ingibition and antitumoral and antimicrobial properties / E. Pereira Rodrigues, L. Belin, M. Sancelme [et al.] // J. Med.Chem. - 1996. - Vol. 39. - P. 4471-4477.

117. Plaks, V. Photodynamic Therapy of Established Prostatic Adenocarcinoma with TOOKAD: A Biphasic Apparent Diffusion Coefficient Change as Potential Early MRI Response Marker / V. Plaks, N. Koudinova, U. Nevo et al. // Neoplasia. - 2004. - Vol. 6. - № 3. - P. 224-233.

118. Plas, D.R. Akt-dependent transformation: there is more to growth than just surviving / D.R. Plas, C.B. Thompson // Oncogene - 2005. - Vol. 24. - P. 74357442.

119. Safety and Effectiveness of a Vaccine for Prostate Cancer That Uses Each Patients' Own Immune Cells. [Электронный ресурс] Режим доступа:

http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00289341 ?term=DMSO&rank=27 (дата обращения: 25.10.13)

120. Safety of Active Immunotherapy in Subjects With Ovarian Cancer. [Электронный ресурс] Режим доступа:

http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01456065?term=DMSO&rank=21 (дата обращения: 25.10.13)

121. Salioua, B. Development and in vitro evaluation of a novel lipid nanocapsule formulation of etoposide / B. Salioua, O. Thomasa, N. Lautrama [et al.] // European Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2013. - Vol. 2. - P.172-180.

122. Sanche, L. Compositions comprising a radiosensitizer and an anti-cancer agent and methods of uses thereof / L. Sanche, G. Charest // заяв. пат. 13/259,213 США. - 2010.

123. Schwandt, A. Phase-II trial of rebeccamycin analog, a dual topoisomerase-I and -II inhibitor, in relapsed "sensitive" small cell lung cancer / A. Schwandt, T. Mekhail, B. Halmos [et al.] // J Thorac Oncol. - 2012 - Vol. 7. - № 4. - P.751-754.

124. Senderowicz, A.M. Inhibitors of cyclin-dependent kinase modulators for cancer therapy / A.M. Senderowicz // Prog Drug Res. - 2005. - Vol. 63. - P. 183206.

125. Siddique, H. Mixed matrix membranes for organic solvent nanofiltration / H. Siddique, E. Rundquist, Y. Bhole [et al.] // Journal of Membrane Science. - 2013. - Vol. 15. - P. 354-366.

126. Sundaram, S. Method for qualifying microbial removal performance of 0.1 micron rated filters. Part IV: Retention of hydrogenophaga pseudoflava (ATCC 700892) and Ralstonia pickettii (ATCC 700591) by 0.2 and 0.22 micron rated filters / S. Sundaram, M. Lewis, J. Eisenhuth [et al.] // J. Pharm. Sci. Techol. -2002. - Vol. 3. - P. 150-171.

127. Talegaonkar, S. Microemulsions: a novel approach to enhanced drug delivery / S. Talegaonkar, A. Azeem, F.J. Ahmad et al. // Recent Patents on Drug Delivery & Formulation. - 2008. - Vol. 2. - №. 3. - P. 238-257.

128. Vaccine Therapy With or Without Imiquimod in Treating Patients Who Have Undergone Surgery for Stage II, Stage III, or Stage IV Melanoma. [Электронный ресурс] Режим доступа:

http: //clinicaltrials. gov/ct2/show/NCT00118313?term=DMSO&rank= 15 (дата обращения: 25.10.13)

129. Vancoillie, J. Continuous melt granulation: Effect of different binders upon granule and tablet properties / J. Vancoillie // Faculty of pharmaceutical sciences. Ghent University. - 2014 - 56 p.

130. Vyas, A. Cyclodextrin based novel drug delivery systems / A. Vyas, S. Saraf // J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem. - 2008. - Vol. 62. - P.23-42.

131. Wen, C. Crassicauline A/ß - cyclodextrin host-guest system: Preparation, characterization, inclusion mode, solubilization and stability / C. Wen, Y. Li-Juan, M. Shui-Xian [et al.] // Carbohydrate Polymers. - 2011. - № 84. - P. 1321-1328.

132. Yen, T. T. H. Comparative studies in vivo of free and liposomal forms of photosensitizer on a base of hydrophilic derivative of chlorine e6 / T.T.H. Yen, I.G. Meerovich, G.A. Meerovich [et al.] // Journal of Drug Delivery Science and Technology. - 2012. - Vol. 22. - № 4. - P. 291-294.

Приложения

Приложение 1 СПЕЦИФИКАЦИЯ на ЛХС-1208,

лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 9 мг

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ

1 2 3

Описание Визуальный Сухая пористая масса желтого цвета

Растворимость Визуальный, ГФ XIII При добавлении к содержимому флакона не менее 2,8 мл воды для инъекций и перемешивании в течение 10 мин должен образовываться однородный раствор оранжевого цвета.

Подлинность Спектрофотометрия Электронный спектр поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца, приготовленных для количественного определения, в области от 200 нм до 500 нм должны иметь максимумы поглощения при длинах волн (287±2) нм, (320±2) нм, слабо интенсивный максимум при (662±2) нм.

ТСХ На полученных хроматограммах пятна ЛХС-1208 идентифицируют по характерной желтой окраске, пятна Kollidon 17 PF - по светло -желтой окраске (после помещения в йодную камеру).

Средняя масса и однородность по массе ГФ XIII От 0,620 г до 0,760 г. Отклонение от средней массы ±10%

Однородность дозирования ГФ XIII 85 - 115%.

Прозрачность раствора ГФ XIII Раствор содержимого флакона в 20 мл воды должен быть прозрачным

рН раствора ГФ XIII, потенциометрически От 3,5 до 4,5

Механические включения РД 42-501-98 Визуальный Счетно -фотометрический Должен выдерживать требования Частиц > 10 мкм - не более 6000/флакон; Частиц > 25 мкм - не более 600/флакон

Потеря в массе при высушивании ГФ XIII Не более 7%

Пирогенность ГФ XIII Препарат должен быть апирогенным

Аномальная токсичность ГФ XIII Препарат должен быть нетоксичным

Микробиологическая чистота ГФ XIII, метод прямого посева Препарат должен быть стерильным

Количественное определение Спектрофотометрия От 8,1 мг до 9,9 мг.

Упаковка и маркировка По 9 мг активного вещества во флаконах из нейтрального стекла, вместимостью 20 мл, укупоренных пробками из резины под обкатку алюминиевыми колпачками. По 10 флаконов вместе с инструкцией по применению укладывают в картонную пачку. Маркировка - в соответствии с НД

Хранение В защищенном от света месте при температуре не выше (4±2)°С.

Срок годности 2 года, исследования продолжаются.

Приложение 2

Приложение 3 ПАТЕНТ РФ №2572691 «Противоопухолевое средство»

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

(19)

RU

(id

|(13)

С1

(51) МПК

А61К 31/7056 (2006.01) А61К 47/48 (2006.01) А61Р 35/00 (2006.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

N

(12) ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

(21X22) Заявка: 2014140819/15, 09.10.2014

(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 09.10.2014

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 09.10.2014

(45) Опубликовано: 20.01.2016 Бюл. № 2

(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: Татарский В В. Механизмы гибели опухолевых клеток при действии новых углеводных производных нндолокарбазолов. Авторефдис. на соиск. уч. ст. ст. канд. биологич. наук. Москва. 2010. UA 103911,10.12.2013. Schwandt A, Mekhail Т, Haimos В, OÜBrien Т, Ma PC, Fu Р, Ivy Р, Dowlati A. Phase-Il trial of rebeccamycin analog, a dual topoisomerase-I and (см. прод.)

Адрес для переписки:

115478, Москва, Каширское ш., 24, ФГБУ "Российский онкологический научный центр имени H.H. Блохина" Российской академии медицинских наук, патентно-лицензионное отделение

(72) Автор(ы):

Ланцова Анна Владимировна (1Ш), Оборотова Наталия Александровна (1Ш), Орлова Ольга Львовна (1Ш), Полозкова Алевтина Павловна (1Ш), Шпрах Зоя Сергеевна (1Ш), Санарова Екатерина Викторовна (1Ш), Смирнова Зоя Сергеевна (Ки), Киселева Марина Петровна (1Ш), Борисова Лариса Михайловна (1Ш), Игнатьева Елена Владимировна (1Ш), Гулякин Илья Дмитриевич (1Ш)

(73) Патентообладатель(и): Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина" РАМН) (¡Ш)

Я С

to Ol

-si

to

CT) <0

О

(54) ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ СРЕДСТВО

(57) Формула изобретения Противоопухолевое средство, содержащее 6-амино-12-(а-Ь-арабинопиранозил) индоло[2,3-а]пирроло [3,4-с]карбазол-5,7-дион, диметилсульфоксид и поливинилпирролидон и при следующих соотношениях компонентов (мг):

б-амино-12-(а-Ыфабинопирано'>ил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4

с]кзрбазол-5,7-дион диметилсульфоксид поливинилпирролидон

8.1-9,9

95,0-125,0 540,0-660,0

(56) (продолжение):

-II inhibitor, in relapsed "sensitive" small cell lung cancer. J Thorac Oncol. 2012 Apr; 7(4):751-4.