Создание искусственного белка-антигена оболочки хантавирусов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Смирнова, Мария Сергеевна

• Смирнова, Мария Сергеевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Смирнова, Мария Сергеевна

Оглавление

Список использованных сокращений

1. Введение

2. Обзор литературы 10 2.1. Введение 10 2.2 Строение хантавирусов

2.2.1. N белок

2.2.2. Белок N8

2.2.3. Белок-предшественник ОРС и его производные: гликопротеины Оп и Ос

12

2.2.4. Формирование пространственной структуры и созревание Оп и Ос

2.2.5. Эндоплазматический (внутривирионный) домен СТ гликопротеинов Оп и Ос

2.2.6. РНК-зависимая РНК-полимераза

2.2.7. Проникновение хантавирусов в клетку

2.2.8. Предполагаемая роль интегринов в проникновении хантавирусов в клетку

2.2.9. Взаимодействия между структурными элементами хантавирусов в процессе транскрипции и репликации. Олигомеризация N белка и упаковка РНК

2.2.10. Взаимодействие с РНК и формирование комплекса КИР

2.2.11. Структура нековалентного комплекса Оп-Ос

2.2.12. Исследования кинетики образования шипикового комплекса

2.2.13. Взаимодействие шипиков с нуклеокапсидом в процессе сборки частиц

26

2.3. Классификация хантавирусов

2.4. Гуморальный иммунный ответ против хантавирусов

2.4.1. Методы изучения гуморального иммунного ответа: эпитопное картирование

2.4.3. Ответ против белков внешней оболочки хантавирусов

2.5. Вакцины для специфической профилактики хантавирусной инфекции

2.6 Диагностика хантавирусной инфекции

3. Материалы и методы

3.1. Материалы 5

3.1.1. Биологические материалы 5

3.1.2. Лабораторные реактивы

3.1.3. Олигонуклеотиды 5

3.2. Методы

3.2.1. Выделение плазмидной ДНК из жидкой среды

3.2.2. Приготовление компетентных клеток Escherichia coli

3.2.3. Трансформация Escherichia coli

3.2.4. Электрофорез в агарозном геле

3.2.5. Ферментация рекомбинантного продуцента

3.2.6. Подготовка проб

3.2.7. Денатурирующий белковый электрофорез в ПААГ

3.2.8. Иммуноблоттинг

3.2.9. Амплификация ДНК методом ПЦР

3.2.10. Выделение фрагментов ДНК из агарозного геля

3.2.11. Гидролиз ДНК эндонуклеазами рестрикции

3.2.12. Лигирование

3.2.13. Выделение тотальной вирусной РНК

3.2.14. Обратная транскрипция

3.2.15. Иммуноферментный анализ

3.2.16. Измерение Р-галактозидазной активности 6

4. Результаты

4.1. Конструирование продуцентов антигенов вируса Добрава с

использованием принципа рационального дизайна

4.1.1 Белки, моделирующие Ы- и С-концевые домены белка вс хантавируса Добрава

4.1.2 Антигены, моделирующие шарнирный район на стыке двух С-концевых доменов хантавируса Добрава

4.1.3 Испытания рекомбинантных штаммов-продуцентов на основе созданных конструкций

4.2. Разработка метода оптимизации технологических свойств антигенов с помощью конструирования и скрининга банков делеционных производных

4.2.1 Отработка методики конструирования и скрининга банков делеционных производных на примере неструктурного антигена Ы85а вируса гепатита С

4.2.2. Создание продуцентов антигенов на основе белка вс вируса Пуумала с использованием метода конструирования и скрининга банков

5. Заключение

6. Выводы

7. Благодарности

8. Список литературы

Приложение

Список использованных сокращений

ANDV - Andes virus, вирус Анды

СНО - Chinese hamster ovary, линия клеток яичников китайских хомячков dNTP - deoxynucleoside triphosphate, дезоксинуклеотидтрифосфат DOBV - Dobrava virus, вирус Добрава

Fab - fragment antigen binding, антиген-связывающий фрагмент; Fc - fragment crystallizable region, константный фрагмент; GFP - green fluorescent protein (зеленый флуоресцентный белок) HCPS - Hantavirus Cardiopulmonary Syndrome, хантавирусный сердечно-легочный синдром

HFRS, ГЛПС - hemorrhagic fever with renal syndrome, геморрагическая лихорадка с почечным синдромом

HTNV - Hantaan virus, вирус Хантаан

ICTV - International Committee on Taxonomy of Viruses, международный комитет по таксономии вирусов

IgG - иммуноглобулины класса G

INF - интерферон

mAbs - моноклональные антитела

NCBI - The National Center for Biotechnology Information

PBS - Phosphate buffered saline, фосфатно-солевой буфер

PBST - фосфатно-солевой буфер с добавлением Tween-20

PKPI - картофельные ингибиторы протеиназ типа Кунитца (potato Kunitz proteinase

inhibitors) PUUV - Puumala virus, вирус Пуумала

RdRp - RNA-dependent RNA polymerase, РНК-зависимая РНК-полимераза

RVFV - Rift Valley Fever Virus, вирус лихорадки долины Рифт

SDS - sodium dodecylsulfate (додецилсульфат натрия)

SDS-ПААГ - полиакриламидный гель с SDS

SNV - Sin Nombre virus, вирус Син Номбре

Vero - линия клеток почки африканской зеленой мартышки

VH - вариабельный домен тяжелой цепи Ig

VL - вариабельный домен легкой цепи Ig

а.к. - аминокислота

а.о. - аминокислотный остаток

БСА, BSA - бычий сывороточный альбумин ДАБ - диаминобензидин ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИПТГ, IPTG - изопропил-Р-1)-тиогалактозид КГБ - карбонат-гидрокарбонатный буфер

МФА, IFA - Immunofluorescence assay, метод иммунофлуоресценции

нт - нуклеогид

п.н. - пар нуклеотидов

ПААГ - полиакриламидный гель

ПЦР, PCR - polymerase chain reaction, полимеразная цепная реакция

ПЭГ - полиэтиленгликоль

РНК - рибонуклеиновая кислота

РТГА - реакция торможения гемагглютинации

ТАЕ - трис-ацетат-ЭДТА

тИФА, ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay (твердофазный

иммуноферментный анализ) ТХУ - трихлоруксусная кислота Ф.о.е. - фокусобразущие единицы ЭДТА - этилендиаминтетраацетат ЭПР - эндоплазматический ретикулум

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание искусственного белка-антигена оболочки хантавирусов»

1. Введение

Хантавирусы являются возбудителем геморрагической лихорадки с почечным синдромом - по данным Роспотребнадзора, одного из наиболее распространённых вирусных природноочаговых заболеваний на территории нашей страны. Аргументируя значимость разработки средств диагностики хантавирусной инфекции, необходимо сослаться на решение коллегии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 10 августа 2012 года. В этом официальном документе сообщается, что в Российской Федерации за последние 10 лет заболеваемость ГЛПС составляет от 3,2 до 6,6 на 100 тысяч населения; 98,3% заболевших приходится на Европейскую часть страны. Наиболее активные природные очаги находятся на территории Поволжья. В последние годы выявлены новые природные очаги в Центральном Федеральном округе, что привело к росту показателей в 3,2 раза. В течение последнего десятилетия наблюдается снижение числа регистрируемых случаев на Дальнем Востоке, Урале и Сибири. Обнаружен уникальный природный очаг ГЛПС в субтропической зоне Краснодарского края на территории Большого Сочи с новым вариантом вируса и новым носителем в конкретном природном биотопе. В многолетней динамике заболеваемости ГЛПС в России отмечается слабо выраженная тенденция к росту со средним приростом 1,7% ежегодно, что связано как с улучшением клинической и лабораторной диагностики, так и с объективным ростом заболеваемости.

Усовершенствование методов серодиагностики ГЛПС, а также разработка системы контроля качества перспективных вакцин, остро востребованных в России, ставит вопрос о разработке технологически эффективного метода получения оболочечных антигенов хантавирусов, прежде всего, белка Gc. Эта задача не решена до настоящего времени нигде в мире.

Получение рекомбинантных белков является типовой задачей, лежащей в основе

многих биотехнологических проектов. Со времен появления модели лактозного оперона

Жакоба и Моно молекулярные биологи и биотехнологи исходят из представления, что

регуляция экспрессии гена осуществляется на уровне промотора и не зависит от

структуры кодируемого белка. Эта модель вполне удовлетворительно описывает

механизм регуляции работы генов в естественном окружении, но мало пригодна для

создания продуцентов гетерологичных и, особенно, искусственно сконструированных

белков. Общеизвестно, что использование даже самых современных и мощных бинарных

промоторных систем, например, на основе промотора Т7, не дает гарантии

детектируемого выхода продуктов слитых или укороченных производных природных

7

генов. Еще реже удается добиться экспрессии in vivo полностью синтетических искусственных генов. Мы предполагаем, что трансляционные системы in vivo способны на стадии, предшествующей релизингу пептидил-тРНК, оценивать способность продукта к формированию компактной глобулярной структуры. Пептидные цепи, не способные к этому, подвергаются немедленной деградации. В рамках этой гипотезы универсальным подходом к конструированию эффективных продуцентов гетерологичных белков является обеспечение их способности к формированию устойчивой глобулярной структуры непосредственно в процессе трансляции.

Проблемы с конструированием рекомбинантных продуцентов часто возникают при работе с мембранными белками и белками с большим числом дисульфидных связей. Эти проблемы особенно характерны при попытках получения в гетерологичных системах вирусных антигенов, как структурных так и неструктурных. Помимо низкого уровня накопления белка сложность составляет высокая токсичность многих вирусных антигенов для клеток рекомбинантных продуцентов. По-видимому, эта особенность структурных и части неструктурных вирусных белков связана с наличием у них способности образовывать мультимолекулярные сети в составе вирусной частицы. Многоцентровые взаимодействия вирусных белков друг с другом и с элементами клетки хозяина при гетерологичной экспрессии способны вносить хаос в передачу сигналов внутри цитоплазмы и с участием мембран. Таким образом, универсальным подходом к снижению токсичности вирусных антигенов могло бы стать их расчленение па отдельные домены, не способные образовывать сети.

Решение задачи по вычленению доменов в составе белков, структура которых неизвестна по причине их недоступности в очищенном состоянии, может быть решена тремя принципиально разными способами:

1. На основе предсказания доменной организации за счёт поиска лучше охарактеризованных гомологов и аналогов;

2. На основе разработки мультиэпитопных синтетических белков, включающих иммунодоминантные пептиды, идентифицированные в структуре белка в результате эпитопного картирования;

3. На основе скринингового подхода, заключающегося в конструировании случайных двусторонних банков делеционных производных генов вирусных антигенов с последующим отбором из него хорошо экспрессирующихся делеционных производных.

В качестве основной модели для решения задачи мы использовали оболочечный белок-антиген Gc хантавирусов Пуумала и Добрава. Кроме того, часть экспериментов по отработке нового метода конструирования и скрининга делеционных банков была выполнена на модели неструктурного белка NS5a вируса гепатита С.

Цель работы:

Целыо настоящей работы является на примере производных оболочечного белка Gc хантавирусов отработать универсальную методологию препаративного получения рекомбинантных вирусных антигенов, используя комбинацию различных методов

Задачи работы:

1. Апробировать подход к конструированию эффективных продуцентов делеционных вариантов белка Gc хантавируса Добрава, основанный на предсказании доменной организации этого белка по аналогии с оболочечными белками других вирусов.

2. На основе анализа опубликованных данных пептидного эпитопного картирования белка Gc хантавирусов предложить структуру короткого иммунодоминантного пептида, добиться его высокоэффективной экспрессии в растворимой форме в составе би- и три-функциональных слитых белков.

3. На модели неструктурного белка NS5a ВГС отработать систему конструирования банков делеционных производных in vitro с помощью ПЦР со случайной затравкой и скрининга этого банка путём отбора клонов, обеспечивающих высокий уровень экспрессии трансгена.

4. С использованием скринингового метода получить набор делеционных производных белка Gc хантавируса Пуумала, обладающих способностью к высокоэффективной экспрессии в Е. coli. Отобрать среди них иммуноположительные варианты.

5. Изучить и сопоставить технологические и иммунохимические свойства полученных рекомбинантных антигенов. Сконструировать на их основе лабораторные тест-системы для иммунохимической детекции специфических антител больных ГЛПС.

2. Обзор литературы

2.1. Введение

Хантавирусы представляют собой покрытые липидной оболочкой сферические вирионы размером 80-140 им. Это сравнительно недавно открытая группа вирусов человека: типовой штамм хантавируса был впервые получен только в 1978 г. {Lee, 1978). Подобно другим членам семейства Bunyaviridae, они имеют трехсегментный геном, состоящий из одноиитевих РНК отрицательной полярности. Большой сегмент генома кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу (репликазу), средний - два гликопротеина внешней мембраны вируса, а малый - N белок, образующий комплекс с вирусным геномом. В Европе и Азии хантавирусная инфекция у человека проявляется в форме геморрагической лихорадки с почечным синдромом (HFRS, ГЛПС). Течение заболевания при этом, как правило, достаточно лёгкое, хотя в последние годы появился ряд сообщений о летальных исходах у пациентов, инфицированных хантавирусом Добрава.

В настоящем обзоре литературных данных мы приводим современные сведения о клинической картине хантавирусной инфекции в России, подходах к классификации хантавирусов (с учетом молекулярно-генетических данных), иммунном ответе на хантавирусы у человека и состоянии дел в области создания вакцин против хантавирусных инфекций. На наш взгляд, такая компоновка позволяет в максимальной степени оценить обоснованность выбранных нами экспериментальных подходов к решению экспериментальной задачи исследования.

2.2 Строение хантавирусов

Хантавирусы представляют собой покрытые липидной оболочкой сферические вирионы размером 80-140 нм. Подобно другим членам семейства Bunyaviridae, они имеют трехсоставный фрагментированный геном. Три сегмента генома - большой (L), средний (М) и малый (S) - кодируют вирусную РНК-зависимую РНК-полимеразу RdRp, поверхностные гликопротеины Gn и Gc и нуклеокапсидный белок N, соответственно. Вирусные белки - RdRp, Gn, Gc и N - имеют молекулярные массы 200, 72, 56 и 45 кДа. Все три сегмента хантавирусной РНК имеют на З'-концах одну и ту же характерную короткую последовательность - 3'-AUCAUCAUCUG-...-5', отличающую их от других буньявирусов. В результате 3' и 5'-концы образуют нековалентную водородную связь, формируя структуру типа «ручка сковороды». Терминальные последовательности РНК сегментов (NCR- не кодирующая область) выполняют ряд важных функций. Они необходимы для узнавания РНК-полимеразы и захвата вирусной РНК нуклеокапсидным N белком

{Severson et al., 1999). Каждый сегмент генома непосредственно ассоциирован с N белком (2100 молекул на каждую частицу) и RdRp (250 молекул на каждую частицу) (под ред. Филдс и др., 1989; Elliot, 1990).

Рис. 1. Модель строения хантавируса

2.2.1. N белок

Кодируемый S сегментом N белок не подвергается гликозилированию в процессе созревания. Его молекулярная масса составляет ~50 кДа (Hussein et al, 2011). N белок наряду с RdRp абсолютно необходим для репликации (Flick et al., 2003). Инициации репликации должна предшествовать транскрипция и трансляция М-сегмента (Patterson & Kolakofsky, 1984), причем, потребность репликации хантавирусов в высоких концентрациях N белка приводит к тому, что свободный N белок, необходимый для формирования капсидов, высвобождается только после окончания репликации (Jonsson & Schmaljohn, 2001). Тримеры N белка связывают консервативную последовательность «ручки сковороды», присутствующую только в комплементарной РНК (кРНК) и вРНК, но отсутствующую в матричных РНК (Hussein et al., 2011). Последние исследования показали, что N белок отвечает за предохранение РНК-праймеров, несущих 5'-кэп (необходимый элемент трансляции в эукариотических клетках) от деградации клеточными Р-тельцами (Mir et al., 2008). Эта функция также существенна для репликации вируса. Иммунофлуоресцентное окрашивание зараженных хантавирусом клеток антителами против N белка или сывороткой пациента с ГЛПС в острой фазе приводит к визуализации характерной зернистой структуры цитоплазмы (Kallio-Kokko et al., 2001; Lee et al., 1978; Yanagihara et al., 1985). Такое окрашивание может быть обусловлено агрегацией N белка

0Goldsmith el al, 1995) или его связыванием с Р-тельцами {Mir et al., 2008). При этом характерно, что N белок имеет тенденцию концентрироваться в перинуклеарной области, и связан с мембраной, хотя лишён трансмембранных доменов {Ravkov & Compatis, 2001).

2.2.2. Белок NS

S сегмент хантавирусов, переносимых грызунами Arvicolinae и Sigmodontinae, содержит дополнительную открытую рамку считывания, перекрывающуюся с рамкой N белка, но транслирующуюся в фазе +1. Возникающий в результате этого гипотетический продукт трансляции получил название NS {Plyusnin & Morzunov, 2001). Экспериментальные исследования с использованием антител, полученных против химически синтезированного фрагмента NS вирусов PUUY и TULV, показали наличие этого пептида в зараженных клетках. Подобно N белку, он оказался локализован преимущественно в перинуклеарной области {Jaaskelainen et al, 2007; Virtanen et al., 2010). Белку NS приписывают функцию прямого подавления синтеза Р-интерферона (IFN-Р) или модуляции активности ядерных факторов NFKp и IRF-3, отвечающих за регуляцию экспрессии генов интерферонов {Jaaskelainen et al., 2007). Иммуномодулирующая функция NS подтверждается тем фактом, что TULV с функциональной рамкой NS выдерживает большее число пассажей в клеточной культуре, склонной к синтезу IFN, чем TULV с искусственно повреждённой рамкой считывания белка NS {Jaaskelainen et al., 2008).

2.2.3. Белок-предшественник GPC и его производные: гяикопротеины Gn и Gc

Белок-предшественник GPC, кодируемый средним сегментом генома хантавирусов,

имеет длину 1133-1158 а.о. {Spiropoulou, 2011). Котрансляционый процессинг GPC комплексом клеточных сигнальных пептидаз по консервативной последовательности WAASA {Lober et al., 2001) приводит к образованию гликопротеинов Gn и Gc (N-и С-концевые части GPC, соответственно, ранее известные как G1 и G2) {Spiropoulou, 2011). Полноразмерный GPC во время инфекции образуется транзиторно и не может быть выявлен экспериментально ни при экспрессии в эукариотических клетках искусственных конструкций на основе кДНК М-сегмента, ни в вирионах {Elliott et al., 1984; Pensiero & Hay, 1992; Spiropoulou et al., 2003). С-концевая TM спираль белка Gn действует как сигнальная последовательность для Gc и включает консервативную последовательность WAASA {Spiropoulou, 2011). В случае HTNV с некоторой эффективностью происходит расщепление по 648 а.о. GPC (6"44WAASA648). Образующийся при этом Gn содержат 588614 а.о. и не подвергается вторичному расщеплению {Lober et al, 2001; Schmaljohn et al., 1987).

2.2.4. Формирование пространственной структуры и созревание Gn и Gc

Специфические антитела против Gn и Gc (Hooper et al, 1999; Schmaljohn et al, 1990), обладающие способностью к нейтрализации вируса, служат удобным инструментом для исследования пространственной структуры GPC, так как избирательно узнают только зрелые гликопротеины, характерные для вириона. Еще один стандартный подход к изучению кинетики созревания гликопротеинов основан на картировании гликозидных остатков. Однако, в случае белков Gn и Gc как зрелые, так и незрелые гликопротеины хантавирусов одинаково чувствительны к воздействию эндогликозидаз (традиционно используется препарат Endo II). Таким образом, их гликозилирование идёт по высоко-маннозному типу, что не позволяет использовать данный подход для анализа кинетики дегликозилирования (Schmaljohn et al., 1986).

Во время инфекции гликопротеины Gn и Gc находятся в комплексе Гольджи (Pensiero & Hay, 1992; Rinisala et al, 1992). N-концевое положение белка Gn в предшественнике само по себе доказывает, что транспорт в комплекс Гольджи белка Gc зависит от экспрессии Gn, но не ясно способен ли белок Gn нормально транспортироваться в отсутствие Gc (Spiropoulou, 2011). Белок Gn других вирусов семейства Bunyaviridae способен к проникновению в комплекс Гольджи, будучи синтезирован в отсутствие Gc (Вирр et al., 1996; Haferkamp et al, 2005; Kikkert et al, 2001; Lappin et al., 1994; Ronnholm, 1992). Для флебовирусов в N-концевой части цитоплазматического домена Gn удалось точно картировать адресную последовательность Gn- CT, обеспечивающую его доставку в комплекс Гольджи (Anderson et al, 1997; Gerrard & Nichol, 2002). Остается неясным, вызваны ли наблюдаемые различия в локализации Gn использованием различных систем экспрессии, или хантавирусы действительно являются единственным родом в составе семейства, белок Gn которых неспособен к автономному транспорту в комплекс Гольджи.

Интересно, что поверхностные гликопротеины вируса SNV транспортируются непосредственно к внешней мембране (Ogino et al, 2004; Spiropoulou et al., 2003). В работе (Spiropoulou et al, 2003) высказано предположение, что этот феномен отражает различия между хантавирусами Старого и Нового Света, в то время как (Ogino et al, 2004) объяснял наблюдаемое явление особенностями выбранной для эксперимента клеточной линии. Не вызывает сомнений однако, что отпочковывание хантавирусов Старого и Нового Света от внешней мембраны во внешнюю среду морфологически выглядит однотипно и не отличается от других членов семейства Bunyaviridae. Таким образом, вопрос о различиях механизмов транспорта производных GPC у хантавирусов Старого и Нового Света остается нерешенным и требует дальнейших исследований.

По ходу созревания белков Gn и Gc происходит присоединение к ним N-гликозидных остатков, что, в свою очередь, влияет на фолдинг белка, связывание с рецептором, слияние с мембранами и, в итоге, на морфогенез вирусных частиц. GPC вируса Хантаан содержит пять сайтов N-гликозилирования в пределах зрелой части Gn (остаток Asn в позициях 134, 235, 347, 399 и 609) и один - в пределах Gc (Asn928) (Schmaljohn et al., 1987). Сайты Asn 134, Asn347, Asn399 и Asn928 присутствуют у всех хантавирусов и заняты гликозидными группировками высоко-маниозного типа {Johansson et al, 2004; Shi & Elliott, 2004). Структура гликозилирования может несколько отличаться у различных хантавирусных видов, например белок Gn вируса Хантаан содержит дополнительный сайт N-гликозилирования - Asn235 {Shi & Elliott, 2004), а белок Gc вируса Пуумала - сайт О-гликозилирования в позиции Thr985 {Johansson et al., 2004). N-гликозилирование нарушает способность белков Gn и Gc образовывать комплекс и, следовательно, влияет на внутриклеточную локализацию и формирование эпитопов {Shi & Elliott, 2004). Удаление массивных цепей гликапов происходит в компартментах центрального и дистального (транс) сегментов аппарата Гольджи. Таким образом, наличие N-гликанов высоко-маннозного типа в гликопротеинах, по-видимому, имеет значение для их траспортировки и метаболизма в проксимальном (цис) сегменте аппарата Гольджи {Shi & Elliott, 2004).

Клетки, зараженные хантавирусами, при кислых условиях среды (при pH ниже 6,3) могут образовывать синцитии {Arikawa et al., 1985). Способность индуцировать слияние клеток различна среди хантавирусных штаммов; инкубация клеток, инфицированных вирусами Пуумала, Хантаан и Сеул, в среде с низким pH приводит соответственно к формированию синцития малого, среднего и большого размера {McCaughey et al., 1999). Образование синцитиев может быть предотвращено добавлением антител против белка Gc или комплекса Gn-Gc {Ogino et al., 2004).

В работе {Iiepojoki et al, 2010) приведены данные комплексного теоретического исследования поведения поверхностных белков хантавирусов при формировании вирусных частиц и инфекции клеток. При этом большое внимание уделяется их сопоставлению с поверхностными белками других Буньявирусов, представителями рода Phlebovius: вируса лихорадки долины Рифт (RVFV) и вируса Уукуниеми (UUKV), а также детально изученными поверхностными белками флавивирусов на примере вируса Леса Семлики (SFV).

Анализ теоретически рассчитанной третичной структуры белка Gc хантавирусов и других членов семейства Bunyaviridae показал, что данный белок принадлежит ко второму

14

классу вирусных белков слияния (Garry & Garry, 2004; Tischler et al., 2005), для которых характерно наличие рН-реактивной петли слияния. Tischler et al. впервые установила, что предполагаемая петля слияния белка Gc в состоянии связывать искусственные мембраны. Позднее с использованием GPC, синтезируемого в клетках эукариот с помощью лентивируснои системы, удалось подтвердить существование и предсказанные свойства петли слияния белка Gc (Cifuentes-Munoz et al., 2010, 2011).

С использованием этих данных была построена обобщенная модель конформационной перестройки белка Gc при проникновении хантавируса в клетку. При нейтральных pH, характерных для цитоплазмы и цистерн аппарата Гольджи, петля слияния вирусных белков слияния второго класса находится в конформации «pre-fusion», то есть, она изолирована от внешней среды, располагаясь внутри гомо- или гетеродимерных комплексов гликопротеинов (White et al., 2008). При закислении pH во вторичных лизосомах предполагаемые гомо- и гетеродимерные комплексы Gn и Gc диссоциируют, и петля Gc оказывается экспонированной на поверхность вирусной частицы (White et al., 2008). Далее происходит слияние петли с мембраной лизосомы, что в свою очередь индуцирует изменения в структуре Gc и способствует его переходу в форму гомотримерного комплекса (White et al., 2008). На нескольких моделях показано, что изменения конформации белков слияния II класса, вызванные низкими значениями pH, как правило, необратимы (White et al., 2008). Однако в случае вируса TUUV экспериментальные данные показывают сохранение у него невысокой остаточной инфекционной способности даже после длительной инкубации в буферах с pH 3 и менее (Hepojoki et al., 2010а; Higa et al., 2012). Таким образом, можно предполагать, что в поддержании структуры комплексов Gc на поверхности хангавирусов участвуют дополнительные факторы, вносящие вклад в их взаимодействие с липидными мембранами (Iiepojoki et al., 2010а; Krey et al., 2005; Sanders, 2000). Анализируя возможную природу этих факторов, необходимо отметить, что в структуре белка Gc различных хантавирусов неоднократно встречается консервативный мотив СххС (Hepojoki et al., 2010а; Strandin et al., 2011b), характерный для белок-специфичных дисульфид-изомераз (Sanders, 2000). Показано, что эти мотивы имеются и в гипотетической петле слияния, ответственной за слияние мембран вирусной частицы и лизосомы в ходе внедрения вируса в клетку.

Участие дисульфидных связей в конформационной перестройке Gc при проникновении хантавируса в клетку может рассматриваться в качестве одного из возможных объяснений высокой стабильности этого белка к воздействию низких pH. Обработка вирионов тиол-специфичными реагентами вызывает резкое падение инфекционности вируса, что позволяет предполагать значительную роль дисульфид-

15

изомераз в переходе белка Ge в активную («фузогенную») конформацшо {Strandin et al., 2011b).

2.2.5. Эндоплазматический (внутривирионный) домен СТ гликопротеинов Gn и Ge

Гликопротеины хантавируеов имеют в своем составе эндоплазматический мини-

домен СТ длиной около ПОа.о. у Gn и 10 а.о. - у Ge {Spiropoiilou, 2011). Последние

исследования показали, что изолированный СТ-домен белка Gn способен выступать в

качестве суррогатной белковой матрицы для сборки частиц хантавируеов (Hepojoki et al.,

2010b; Strandin et al., 2011a). Gn-CT содержит домен типа «цинковый палец» - ZF длиной

приблизительно 50 а.о. При помощи ЯМР показано, что в растворе этот домен способен

формировать гомодимер, получивший обозначение CCHC-ZF (Estrada et al., 2009).

Вторичная структура домен ZF полностью инвариантна для патогенных и непатогенных

хантавируеов, и в составе Gn-CT обладает низкой внутримолекулярной подвижностью

{Estrada et al., 2011). Однако, биологическая функция этого домена не известна.

Экспрессия полноразмерного домена Gn-CT в бактериальных клетках невозможна из-за

его высокой цитотоксичности {Estrada et al., 2011). Это обстоятельство затрудняет

исследование структуры Gn-CT физико-химическими методами. Токсичность Gn-CT

может быть обусловлена его склонностью к неспецифическому связыванию нуклеиновых

кислот {Strandin et al., 201 leí), что приводит к нарушению репликации, транскрипции и

трансляции в клетках бактериальных продуцентов. Существуют данные о том, что

экспрессия домена Gn-CT вирусов Пуумала и Тула в виде слитых белков с глютатион-S-

трансферазой ослабляет его токсичность до приемлемого уровня {Strandin et al., 2011а). С-

концевая трансмембранпая спираль Gn-CT выступает в качестве сигнальной

последовательности для Ge и является дегроном, индуцирующим протеолитический

процессинг Gn-CT {Geimonen et al., 2003a). Функционально активный дегрон

присутствует только в Gn-CT патогенных хантавируеов {Sen et al., 2007), у непатогенных

вирусов Тула и Проспект Хилл имеется гомологичный участок цепи, лишенный

функциональной активности {Wang et al., 2009). Предполагается, что дегрон выполняет

свою функцию за счет агрегации СТ-доменов Gn и адресации агрегатов в каналы

эндоплазматического ретикулума (ER). В С-концевой части домена Gn-CT имеется

высоко консервативный мотив YxxL, причём хантавирусы Нового Света, вызывающие

сердечно-легочный синдром, имеют два таких мотива, которые формируют рецепторный

активаторный мотив, обогащенный тирозином - 1ТАМ {Geimonen et al., 2003b). Второй

мотив YxxL, расположенный на С-конце трансмембранной спирали. В составе вириона он

погружен в липидный бислой, что, по-видимому, должно осложнять его взаимодействие с

рецептором в составе интактного вириона. Таким образом, функция YxxL-мотива

16

хантавирусов не связана с первичной клеточной инфекцией, а реализуется на другой стадии жизненного цикла: при сборке частиц или блокировании внутриклеточных систем противовирусной защиты. Последние исследования показали, что Gn-CT принимает участие в подавлении ответа клетки на хантавирусную инфекцию (AIff et al, 2006; Matthys et al., 2011).

В работе (Matthys & Mackow, 2012) высказано предположение, что подавление интерферонового ответа I типа (преимущественно в форме синтеза интерферона р) при хантавирусной инфекции осуществляется путём блокирования цитоплазматическим доменом белка Gn цитоплазматического домена рецептора STING, локализованного в мембране ЭПР и ответственного за формирование тройного сигнального комплекса TRAF2/TRAF3/TBK1.

2.2.6. РНК-зависимая РНК-полимераза

Самый крупный белок хантавирусов - это кодируемая L сегментом РНК-зависимая РНК-полимераза (RdRp) (Spiropoulou, 2011). Подвижность RdRp в условиях денатурирующего электрофореза соответствует ~250 кДа (Kukkonen et al., 2004). Поскольку цитологические данные показывают, что РНК-полимераза, как и N белок, связана с перинуклеарными мембранами, можно утверждать, что процессы транскрипции и репликации хантавирусов также протекают на поверхностях мембран (Kukkonen et al., 2004; Ravkov & Compans, 2001). Подобно полимеразам других вирусов, RdRp хантавирусов способен осуществлять гомологичную рекомбинацию последовательностей РНК, что, безусловно, сказывается на адаптивных возможностях хантавирусов, особенно в условиях суперинфекции (Plyusnin et al., 2002). Для работы РНК-полимеразы хантавирусов необходимо наличие двухвалентного катиона (Mg или Мп ). Экспериментально показано, что в естественных условиях в составе RdRp превалируют ионы Mn2+ (Schmaljohn & Dalrymple, 1983).

2.2.7. Проникновение хантавирусов в клетку

Описано несколько белков-кандидатов на роль рецептора хантавирусов: «фактор деградации» DAF, рецептор комплемента yClqR, неизвестный белок массой 70 кДа, pi - и рЗ-интегрины (Buranda et al, 2010; Choi et al., 2008; Gavrilovskaya et al, 1998; Krautkramer & Zeier, 2008; Мои et al, 2006). Некоторые эндогенные лектины из состава ЭПР и аппарата Гольджи способствуют проникновению геномной РНК хантавирусов в цитоплазму (Ogino et al., 1999), что заставляет предполагать участие в этом процессе гликозидых остатков на поверхности Gn и Gc. Клеточная инфекция чаще всего начинается с апикальной стороны поляризованных эпителиальных клеток (Ravkov et al.,1997), но в

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Смирнова, Мария Сергеевна, 2013 год

8. Список литературы

1. Abu Daud N.II, Kariwa, H., Tkachenko E., Dzagurnova Т., Medvedkina O., Tkachenko P., Ishizuka M., Scto Т., Miyashita D., Sanada Т., Nakauchi M., Yoshii K., Maeda A., Yoshimatsu K., Arikawa J. and Takashima I. Genetic and antigenic analyses of a Puumala virus isolate as a potential vaccine strain. - J. Vet. Res. - 2008 - V.56, P. 151165.

2. Akey D.L., Malashkevich V.N., Kim P.S. Buried polar residues in coiled-coil interfaces. - Biochemistry - 2001 - V.40, № 21, P.6352-6360.

3. Alfadhli A., Love Z., Arvidson В., Seeds J., Willey J., Barklis E. Hantavirus nucleocapsid protein oligomerization. - J. Virol. - 2001 - V.75, P.2019-2023.

4. Alfadhli A., Steel, E., Finlay, L., Bachinger, H. P., Barklis, E. Hantavirus nucleocapsid protein coiled-coil domains - J Biol Chem - 2002 - V.277, P.27103-27108.

5. Alff P.J., Gavrilovskaya I.N., Gorbunova E., Endriss K., Chong Y., Geimonen E., Sen N., Reich N.C.,Mackow E. R. The pathogenic NY-1 hantavirus G1 cytoplasmic tail inhibits RIG-I- and TBK-1-directed interferon responses - J Virol - 2006 - V.80, P.96769686.

6. Alminaite A., Halttunen V., Kumar V., Vaheri A., Holm L., Plyusnin A. Oligomerization of hantavirus nucleocapsid protein: analysis of the N-terminal coiled-coil domain. - J. Virol. - 2006 - V.80, № 18, P.9073-9081.

7. Andersson A.M., Melin L., Bean A., Pettersson R.F. A retention signal necessary and sufficient for Golgi localization maps to the cytoplasmic tail of a Bunyaviridae (Uukuniemi virus) membrane glycoprotein - J Virol - 1997 - V.71, P.4717-4727.

8. Antic D., Wright K.E., Kang, C.Y. Maturation of Hantaan virus glycoproteins G1 and G2 - Virology - 1992 - V. 189, P.324-328.

9. Arai S. Bennett S.N., Sumibcay L., Cook J.A., Song J.W., Hope A., Parmenter C., Nerurkar V.R., Yates T.L., Yanagihara R. Phylogenetically distinct hantaviruses in the masked shrew (Sorex cinereus) and dusky shrew (Sorex monticolus) in the United States. - Am J Trop Med Hyg. - 2008 b- V.78, №2, P.348-351

10. Arai S., Ohdachi S.D., Asakawa M., Kang H.J., Mocz G., Arikawa J., Okabe N., Yanagihara R. Molecular phylogeny of a newfound hantavirus in the Japanese shrew mole (Urotrichus talpoides). - Proc Natl Acad Sci USA. - 2008 - V.105, №42, P. 1629616301

11. Arai S., Song J.W., Sumibcay L., Bennett S.N., Nerurkar V.R., Parmenter C., Cook J.A., Yates T.L., Yanagihara R. Hantavirus in northern short-tailed shrew, United States. -Emerg Infect Dis. - 2007 - V.13, №9, P. 1420-1423

12. Araki K., Yoshimatsu K., Ogino M., Ebihara II., Lundkvist A., Kariwa H., Takashima I., Arikawa J.Truncated hantavirus nucleocapsid proteins for serotyping Hantaan, Seoul, and Dobrava hantavirus infections. - J. Clin. Microbiol. - 2001 - V.39, №7, P.2397-2404.

13. Arikawa J., Schmaljohn A.L., Dalrymple J.M., Schmaljohn C.S. Characterization of Hantaan virus envelope glycoprotein antigenic determinants defined by monoclonal antibodies. - J. Gen. Virol. - 1989 - V.70, P.615-624.

14. Arikawa J., Takashima, I., Hashimoto, N. Cell fusion by haemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) viruses and its application for titration of virus infectivity and neutralizing antibody - Arch Virol - 1985-Y.86, P.303-313.

15. Avsic-Zupanc T., Toney A., Anderson K., Chu Y.K., Schmaljohn C. Genetic and antigenic properties of Dobrava virus: a unique member of the Hantavirus genus, family Bunyaviridae. - J.Gen. Virol. - 1995 - V.76, P.2801-2808.

16. Barbas C.F., Kang A.S., Lerner R.A., Benkovic S.J. Assembly of combinatorial antibody libraries on phage surfaces: the gene III site. - Proc Natl Acad Sci U S A. - 1991 - V. 15, № 18, P.7978-82.

17. Battisti A. J., Chu, Y. K., Chipman, P. R., Kaufmann, B., Jonsson, C. B., Rossmann, M. G.. Structural studies of Hantaan virus - J Virol - 2011 - V.85, P.835-841.

18. Betenbaugh M., Yu, M., Kuehl, K., White, J., Pennock, D., Spik, K., Schmaljohn, C. Nucleocapsid- and virus-like particles assemble in cells infected with recombinant baculoviruses or vaccinia viruses expressing the M and the S segments of Hantaan virus. - Virus Res - 1995 - V.38, P. 111-124.

19. Boudko S.P., Kuhn R.J., Rossmann M.G. The coiled-coil domain structure of the Sin Nombre virus nucleocapsid protein. - J. Mol. Biol. - 2007 -V. 366, № 5, P. 1538-1544.

20. Brennan B., Li, P., Elliott, R. M. Generation and characterization of a recombinant Rift Valley fever virus expressing a V5 epitope-tagged RNA-dependent RNA polymerase -J Gen Virol - 2011 a - V. 92, P.2906-2913.

21. Brennan B., Welch, S. R., McLees, A., Elliott, R. M. Creation of a recombinant Rift Valley fever virus with a two- segmented genome - J Virol - 201 lb - V.85, P. 1031010318.

22. Brocato R.et.al DNA Vaccine-Generated Duck Polyclonal Antibodies as a Postexposure Prophylacticto Prevent Hantavirus Pulmonary Syndrome (HPS) - PLoSONE, — 2012 — V.7

23. Brummer-Korvenkontio M., Vaheri A., Hovi T., von Bonsdorff C.H., Vuorimies J., Manni T., Penttinen K., Oker-Blom N., Lahdevirta J. Nephropathia epidemica: detection of antigen in bank voles and serologic diagnosis of human infection. - J Infect Dis. -1980-V. 141, №2, P.131-134

24. Bupp K., Stillmock, K., Gonzalez-Scarano, F. Analysis of the intracellular transport properties of recombinant La Crosse virus glycoproteins - Virology - 1996 - V.220, P.485-490.

25. Buranda T., Wu Y., Perez D., Jett S.D., Bondu Hawkins V., Ye C., Edwards B., Hall P., Larson R.S., Lopez G.P., Sklar L.A., Hjelle B. Recognition of DAF and avp3 by inactivated Hantaviruses, towards the development of HTS flow cytometry assays -Anal Biochem. - 2010 - V.402, № 2, P. 151-160

26. Burkhard P., Stetefeld, J., Strelkov, S. V. Coiled coils: a highly versatile protein folding motif- Trends Cell Biol - 2001 - V.l 1, P.82-88.

27. Campos J.A., Aledo J.C., Segura J.A., Alonso F.J., Gomez-Fabre P.M., Nunez de Castro I., Marquez J. Expression of recombinant human L-glutaminase in Escherichia coli: polyclonal antibodies production and immunological analysis of mouse tissues. Biochim. Biophys. Acta. 2003 May 30; 1648(1-2): 17-23

28. Carey D.E., Reuben R., Panicker K.N., Shope R.E., Myers R.M. Thottapalayam virus: a presumptive arbovirus isolated from a shrew in India. - Indian J Med Res. - 1971 - V.59, №11, P.1758-1760

29. Carleton M.D., Musser G.G., Pavlinov I.Ya.,. In: Averianov A.O., Abramson N.I. (Eds.), Myodes Pallas, 1811, is the valid name for the genus of red-backed voles. - Systematics, Phylogeny and Paleontology of Small Mammals, St. Petersburg, - 2003- P.96-98.

30. Chen II., Tang L., Luo Z., Zhang J., Zhang Z., Hu M., Weng J., Liu W., Zhao T., Liu W. Preventive effects of three kinds of inactive vaccines against epidemic hemorrhagic fever (EHF) after 5 years of vaccination. - Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. - 2000 -V. 21,№5,P.347-348.

31. Cheng E., Haque, A., Rimmer, M. A., Hussein, I. T., Sheema, S., Little, A., Mir, M. A.. Characterization of the interaction between hantavirus nucleocapsid protein (N) and ribosomal protein S19 (RPS19) - J Biol Chem - 2011 - V.286, P. 11814-11824.

32. Clieong D.E., Choi J.H., Song J.J., Kim G.J. Construction of non-invasively constitutive expression vectors using a metagenome-derived promoter for soluble expression of proteins. Bioprocess Biosyst Eng. 2013 Jun; 36(6): 667-676.

33. Chizhikov V. E., Spiropoulou, C. F., Morzunov, S. P., Monroe, M. C., Peters, C. J., Nichol, S. T.. Complete genetic characterization and analysis of isolation of Sin Nombre virus - J Virol - 1995 - V.69, P.81328136.

34. Cho H.W., Howard C.R., Lee H.W. Review of an inactivated vaccine against hantaviruses. - Intervirology. - 2002- V.45, № 4-6, P.328-333

35. Choi Y. Ahn C.J., Seong K.M., Jung M.Y., Ahn B.Y. Inactivated Hantaan virus vaccine derived from suspension culture of Vero cells. - Vaccine. - 2003 - V.21, №17-18, P. 1867-1873

36. Choi Y., Kwon, Y. C., Kim, S. I., Park, J. M., Lee, K. H., Ahn, B. Y.. A hantavirus causing hemorrhagic fever with renal syndrome requires gClqR/p32 for efficient cell binding and infection-Virology-2008 -V.381, P. 178-183.

37. Cifuentes-Munoz N., Barriga, G. P., Valenzuela, P. D., Tischler, N. D. Aromatic and polar residues spanning the candidate fusion peptide of the Andes virus Gc protein are essential for membrane fusion and infection - J Gen Virol - 2011 - V.92, P.552-563.

38. Cifuentes-Munoz N., Darlix, J. L., Tischler, N. D. Development of a lentiviral vector system to study the role of the Andes virus glycoproteins - Virus Res - 2010- V.153, P.29-35.

39. Clement J., Colson P., McKenna P. Hantavirus pulmonary syndrome in New England and Europe. - N Engl J Med. - 1994 - V. 25, № 8, P.547-548.

40. Clement J., Heyman P., McKenna P., Colson P., Avsic-Zupanc T. The hantaviruses of Europe: from the bedside to the bench. - Emerg Infect Dis. - 1997 - V. 3, №2, P.205-211.

41. Clement J., Neild G.H., Maes P., Leirs II., Matthys P., Van Ranst M. Symptomatic human hantavirus in the Americas. - Emerg Infect Dis. - 2007 - V. 13, №2, P.345-346

42. Cong Q., Grishin N.V. MESSA: MEta-Server for protein Sequence Analysis. BMC Biol. 2012 Oct 2;10:82. doi: 10.1186/1741-7007-10-82

43. Davies D.R., Padlan E.D., Sheriff S. Antibody-antigen complexes. - Rev. Biochem. -1990-V.59, P.439^173.

44. Dayhoff M.O., Barker W.C., Hunt L.T. Establishing homologies in protein sequences. -Methods Enzymol. - 1983- V.91, P. 524-545

45. Elgh F, Linderholm M, Wadell G, Juto P. The clinical usefulness of a Puumala virus recombinant nucleocapsid protein based enzyme-linked immunosorbent assay in the diagnosis of nephropathia epidemica as compared to an immunofluorescence assay. Clin Diagn Virol 1996; 6: 17-26

46. Elgh F, Lundkvist A, Alexeyev OA et al. Serological diagnosis of hantavirus infections by an enzyme-linked immunosorbent assay based on detection of immunoglobulin G and M responses to recombinant nucleocapsid proteins of five viral serotypes. J Clin Microbiol 1997; 35: 1122-1130.

47. Elgh F., Lundkvist A., Alexeyev O.A., Wadell G., Juto P. A major antigenic domain for the human humoral response to Puumala virus nucleocapsid protein is located at the amino-terminus. - J. Virol. Methods - 1996- V.59,№ 1-2, P. 161-172.

48. Elliot SJ. Mouse glomerular endothelial cells have an insulin receptor., Conti FG, Striker LJ, Striker GE.Horm Metab Res. - 1990 -V. 22(11):P. 557-60.

49. Elliott L. II., Kiley, M. P., McCormick, J. B. Hantaan virus: identification of virion proteins - J Gen Virol - 1984 - V.65, P. 1285-1293.

50. Elliott R.M., Bouloy M., Calisher C.H., Goldbach R., Moyer J.T., Nichol S.T., Petterson R., Plyusnin A., Schmaljohn C. Bunyaviridae. In: Van Regenmortel, M.H.V., Fauquet, C.M., Bishop, D.H.L., Carstens, E.B., Estes, M.K., Lemon, S.M., Maniloff, J., Mayo, M.A., McGeoch, D.J., Pringle, C.R.,Wickner, R.B. (Eds.),Virus Taxonomy: The Classification and Nomenclature of Viruses. The Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. - Academic Press, San Diego - 2000 - P.599-621.

51.Elster C., Fourest, E., Baudin, F., Larsen, K., Cusack, S., Ruigrok, R. W.. A small percentage of influenza virus Ml protein contains zinc but zinc does not influence in vitro Ml-RNA interaction - J Gen Virol - 1994 - V.75, P.37-42.

52. Escadafal C., Avsic-Zupanc T., Vapalahti O., Niklasson B., Teichmann A., Niedrig M., Donoso-Mantke O.et.al. Second External Quality Assurance Study for the Serological Diagnosis of Hantaviruses in Europe - www.plosntds.org - 2012 - V. 6

53. Estrada D. F., Boudreaux D. M., Zhong, D., St Jeor, S. C., De Guzman, R. N.. The hantavirus glycoprotein G1 tail contains dual CCHC-type classical zinc fingers - J Biol Chem - 2009 - V.284, P.8654-8660.

54. Estrada D. F., Conner, M., Jeor, S. C., Guzman, R. N.. The structure of the hantavirus zinc finger domain is conserved and represents the only natively folded region of the Gn cytoplasmic tail - Front Microbiol - 2011- V.2, P.251.

55. Estrada D. F., De Guzman, R. N. Structural characterization of the Crimean-Congo hemorrhagic fever virus Gn tail provides insight into virus assembly - J Biol Cliem -2011 - Y.286, P.21678-21686.

56. Feldmann II., Sanchez, A., Morzunov, S., Spiropoulou, C. F., Rollin, P. E., Ksiazek, T. G., Peters, C. J., Nichol, S. T. Utilization of autopsy RNA for the synthesis of the nucleocapsid antigen of a newly recognized virus associated with hantavirus pulmonary syndrome - Virus Res - 1993 - V. 30, P.351-367.

57. Flick K., Hooper, J. W., Schmaljohn, C. S., Pettersson, R. F., Feldmann, H., Flick, R. Rescue of Hantaan virus minigenomes - Virology - 2003 - V. 306, P.219-224.

58. Fontana J., Loopez-Montero, N., Elliott, R. M., Fernandez, J. J., Risco, C. The unique architecture of Bunyamwera virus factories around the Golgi complex - Cell Microbiol -2008 -V.10, P. 2012-2028.

59. Frank R., Schneider-Mergener J. SPOT synthesisscope of applications, in: Koch, J., Mahler, M. (Eds.), Peptide Arrays on Membrane Supports. - Springer Verlag, Heidelberg - 2002

60. Freiberg A. N., Sherman, M. B., Morais, M. C., Holbrook, M. R., Watowich, S. J. Three-dimensional organization of Rift Valley fever virus revealed by cryoelectron tomography - J Virol - 2008 - V. 82, P. 1034110348.

61. Garry C. E., Garry, R. F. Proteomics computational analyses suggest that the carboxyl terminal glycoproteins of Bunyaviruses are class II viral fusion protein (beta-penetrenes). - Theor Biol Med Model - 2004- V. 1, P. 10.

62. Gavrilovskaya I.N., Brown E.J., Ginsberg M.IL, Mackow E.R.. Cellular Entry of Hantaviruses Which Cause Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Is Mediated by b3 Integrins.-JOURNAL OF VIROLOGY - 1999-V.73,No.5, P.3951-3959

63. Gavrilovskaya I.N., Shepley M., Shaw R., Ginsberg M.H., Mackow E.R. b3 integrins mediate the cellular entry of hantaviruses that cause respiratory failure -Proc.Natl.Acad.Sci.USA. Microbiology. -1998 - V.95, P.7074-7079,

64. Geimonen E., Fernandez I., Gavrilovskaya I. N., Mackow E. R. Tyrosine residues direct the ubiquitination and degradation of the NY-1 hantavirus G1 cytoplasmic tail - J Virol -2003a-V.77, P.10760-10868.

65. Geimonen E., LaMonica R., Springer K., Farooqui Y., Gavrilovskaya I. N., Mackow E. R. Hantavirus pulmonary syndrome-associated hantaviruses contain conserved and functional ITAM signaling elements - J Virol - 2003b - V.77, P. 1638-1643.

66. Gerrard S. R., Nichol, S. T. Characterization of the Golgi retention motif of Rift Valley fever virus GN glycoprotein - J Virol - 2002 - V.76, P. 12200-12210.

67. Gerrard S. R., Nichol, S. T. Synthesis, proteolytic processing and complex formation of N-terminally nested precursor proteins of the Rift Valley fever virus glycoproteins. -Virology - 2007 - V.357, P. 124-133.

68. Gething M. J., McCammon K., Sambrook, J. Expression of wild-type and mutant forms of influenza hemagglutinin: the role of folding in intracellular transport. - Cell - 1986 -V.46, P.939-950.

69. Goldsmit, C. S., Elliott L. H., Peters C. J., Zaki S. R. Ultrastructural characteristics of Sin Nombre virus, causative agent of hantavirus pulmonary syndrome - Arch Virol -1995-V. 140, P.2107-2122.

70. Gott P., Stohwasser R., Schnitzler P., Darai G., Bautz E. K. RNA binding of recombinant nucleocapsid proteins of hantaviruses - Virology - 1993 - V.194, P.332-337.

71. Gott P., Zoller L., Darai G., Bautz E.K. A major antigenic domain of hantaviruses is located on the aminoproximal site of the viral nucleocapsid protein. - Virus Genes -1997-V.14,№ l.P.31-40.

72. Gott P., Zoller L., Yang S., Stohwasser R., Bautz E.K., Darai G. Antigenicity of hantavirus nucleocapsid proteins expressed in E. coli. - Virus Res. - 1991 - V. 19, P.I— 15.

73. Griffiths A.D. Production of human antibodies using bacteriophage. - Curr Opin Immunol. - 1993 - V.5, № 2, P.263-267.

74. Griot C., Gonzalez-Scarano F., Nathanson N. Molecular determinants of the virulence and infectivity of California serogroup Bunyaviruses. - Annu. Rev. Microbiol. - 1993 -V.47, P. 117-138.

75. Guttieri M.C., Bookwalter C., Schmaljohn C. Expression of a human, neutralizing monoclonal antibody specific to Puumala virus G2-protein in stably-transformed insect cells. - J. Immunol. Methods - 2000 - V.246, P.97-108.

76. Habjan M., Penski N., Wagner V., Spiegel M., Overby A. K., Kochs G., Huiskonen J. T., Weber F. Efficient production of Rift Valley fever virus-like particles: the antiviral protein MxA can inhibit primary transcription of bunyaviruses — Virology - 2009 -V.385, P.400-408.

77. Haferkamp S., Fernando L., Schwarz T.F., Feldmann I-L, Flick R. Intracellular localization of Crimean-Congo hemorrhagic fever (CCHF) virus glycoproteins - Virol J — 2005 — V.2, P.42.

78. Hallin G.W., Simpson S.Q., Crovvell R.E., James D.S., Koster F.T., Mertz G.J., Levy H. Cardiopulmonary manifestations of hantavirus pulmonary syndrome - Crit Care Med -1996-24, 252-258.

79. Haque A., Mir M. A. Interaction of hantavirus nucleocapsid protein with ribosomal protein S19 - J Virol - 2010 - V.84, P.12450-12453.

80. Hardestam J., Karlsson M., Falk K.I., Olsson G., Klingstrom J., Lundkvist A. Puumala hantavirus excretion kinetics in bank voles (Myodes glareolus) - Emerg Infect Dis -2008 - V.14, P.1209-1215.

81.IIeider II., Ziaja B., Priemer C., Lindkvist A., Neyts J., Kruger D.H., Ulrich R.A chemiluminescent detection method of hantaviral antigens in neutralisation assays and inhibitor studies. - J. Virol. Methods - 2001 - V.96, P. 17-23.

82. Heiskanen T., Lundkvist A., Soliymani R., Koivunen E., Vaheri A., Lankinen II. Phage-displayed peptides mimicking the discontinuous neutralization sites of puumala Hantavirus envelope glycoproteins. - Virology - 1999 - V.262, P.321-332.

83. Henikoff S., Henikoff J.G. Amino acid substitution matrices from protein blocks. - Proc Natl Acad Sci USA.- 1992 - V.89, №22, P. 10915-10919.

84. Hepojoki J. Glycoprotein interactions in the assembly of hantaviruses. PhD thesis -2011.

85. Hepojoki J., Strandin T., Lankinen H., Vaheri A. Hantavirus structure - molecular interactions behind the scene. - Journal of General Virology - 2012 - V.93, P. 1631-1644

86. Hepojoki J., Strandin T., Vaheri A., Lankinen H. Interactions and oligomerization of hantavirus glycoproteins - J Virol - 2010a - V.84, P.227-242.

87. Hepojoki J., Strandin T., Wang H., Vapalahti O., Vaheri A., Lankinen II. Cytoplasmic tails of hantavirus glycoproteins interact with the nucleocapsid protein - J Gen Virol -2010b- V.91, P.2341-2350.

88. Higa M.M., Petersen J., Hooper J., Doms R. W. Efficient production of Hantaan and Puumala pseudovirions for viral tropism and neutralization studies - Virology - 2012 -V.423, P. 134-142.

89. Hjelle B, Jenison S, Torrez-Martinez N et al. Rapid and specific detection of Sin Nombre virus antibodies in patients with hantavirus pulmonary syndrome by a strip immunoblot assay suitable for field diagnosis. J Clin Microbiol 1997; 35: 600-608

90. Hooper J.W., Kamrud K.I., Elgh F., Custer D., Schmaljohn C.S. DNA vaccination with hantavirus M segment elicits neutralizing antibodies and protects against seoul virus infection. - Virology. - 1999 - V.255, № 2, P.269-278.

91. Huang I-I., Li X., Zehua Z. Genetic immunization with Hantavirus vaccine combining expression of G2 glycoprotein and fused interleukin-2. - Genetic Vaccines and Therapy. — 2008 — V. 6.-P. 15-21.

92. Huang I.K., Pei J., Grishin N.V. Defining and predicting structurally conserved regions in protein superfamilies. Bioinformatics. 2013 Jan 15; 29(2), 175-181

93. Hughes J.M., Peters C.J., Cohen M.L., Mahy B.W. Hantavirus pulmonary syndrome: an emerging infectious disease - Science - 1993 - V.262, P.850-851.

94. Huiskonen J. T., Hepojoki J., Laurinmaki P., Vaheri A., Lankinen H., Butcher S. J., GrUnewald K.. Electron cryotomography of Tula hantavirus suggests a unique assembly paradigm for enveloped viruses - J Virol - 2010 - V.84, P.4889-4897.

95. Huiskonen J. T., Overby A. K., Weber F., Grunewald, K.. Electron cryo-microscopy and single-particle averaging of Rift Valley fever virus: evidence for GN-GC glycoprotein heterodimers - J Virol - 2009 - V.83, P.3762-3769.

96. Hussein I. T., Haseeb A., Haque A., Mir, M. A. Recent advances in hantavirus molecular biology and disease - Adv Appl Microbiol - 2011 - V.74, P.35-75.

97. Jaaskeiainen K.M., Kaukinen P., Minskaya E.S., Plyusnina A., Vapalahti O., Elliott R.M., Weber F., Vaheri A., Plyusnin A. Tula and Puumala hantavirus NSs ORFs are functional and the products inhibit activation of the interferon-beta promoter - J Med Virol-2007-V.79, P.1527-1536

98. Jaaskeiainen K.M., Plyusnina A., Lundkvist A., Vaheri A., Plyusnin A. Tula hantavirus isolate with the full-length ORF for nonstructural protein NSs survives for more consequent passages in interferon-competent cells than the isolate having truncated NSs ORF - Virol J - 2008 - V.5, P.3.

99. Jenison S., Yamada T., Morris C., Anderson B., Torrez-Martinez N., Keller N., Hjelle B. Characterization of human antibody responses to four corners hantavirus infections among patients with hantavirus pulmonary syndrome. - J. Virol. - 1994 - V.68, P.3000-3006.

100. Jin M., Park J., Lee S., Park B., Shin J., Song K. J., Ahn T. I., Hwang S. Y., Aim B. Y., Ahn, K. Hantaan virus enters cells by clathrin- dependent receptor-mediated endocytosis - Virology - 2002 - V.294, P.60-69

101. Johansson P., Olsson M., Lindgren L., Ahlm C., Elgh F., Ilolmstrom A., Bucht G. Complete gene sequence of a human Puumala hantavirus isolate, Puumala Umea/hu: sequence comparison and characterisation of encoded gene products - Virus Res - 2004 — V.105, P.147-155.

102. Johnson A.M., de Souza L.T., Ferreira I.B., Pereira L.E., Ksiazek T.G., Rollin P.E., Peters C.J., Nichol S.T. Genetic investigation of novel hantaviruses causing fatal HPS in Brazil. - J.Med. Virol. - 1999 - V.59, № 4, P.527-535.

103. Johnson K.M. Hantaviruses: history and overview. Curr Top Microbiol Immunol -2001 - V.256,P.1-14.

104. Jones D.T., Taylor W.R., Thornton J.M. The rapid generation of mutation data matrices from protein sequences. - Comput Appl Biosci. - 1992 - V.8, №3, P.275-282

105. Jonsson C.B., Figueiredo L.T., Vapalahti O. A global perspective on hantavirus ecology, epidemiology, and disease - Clin Microbiol Rev - 2010 - V.23, P.412-441.

106. Jonsson C.B., Schmaljohn C.S. Replication of hantaviruses - Curr Top Microbiol Immunol-2001 - V.256, P. 15-32

107. Kallio-Kokko H., Leveelahti R., Brummer-Korvenkontio M., Lundkvist A., Vaheri A., Vapalahti O. Human immune response to Puumala virus glycoproteins and nucleocapsid protein expressed in mammalian cells. - J Med Virol. - 2001 - V.65, №3, P.605-613

108. Kallio-Kokko H., Vapalahti O., Iledman K., Brummer-Korvenkontio M., Vaheri A. Puumala virus antibody and immunoglobulin G avidity assays based on recombinant nucleocapsid antigen. - J. Clin. Microbiol. - 1993 - V.31, P.677-680.

109. Kaukinen P., Koistinen V., Vapalahti O., Vaheri A., Plyusnin A. Interaction between molecules of hantavirus nucleocapsid protein - J Gen Virol - 2001 - V.82, P.1845-1853.

110. Kaukinen P., Kumar V., Tulimaki K., Engelhardt P., Vaheri A., Plyusnin A. Oligomerization of Hantavirus N protein: C-terminal alpha-helices interact to form a shared hydrophobic space. - J. Virol. - 2004 - V.78, № 24, P. 13669-13677.

111. Kaukinen P., Vaheri A., Plyusnin A. Hantavirus nucleocapsid protein: a multifunctional molecule with both housekeeping and ambassadorial duties. - Arch. Virol. - 2005 -V. 150, № 9, P. 1693-1713.

112. Kaukinen P., Vaheri A., Plyusnin A. Mapping of the regions involved in homotypic interactions of Tula hantavirus N protein - J Virol - 2003 - V.77, P.10910-10916.

113. Kawamura M, Shibata H, Kamada H, Okamoto T, Mukai Y, Sugita T, Abe Y, Imai S, Nomura T, Nagano K, Mayumi T, Nakagawa S, Tsutsumi Y, Tsunoda SI. A novel method for construction of gene fragment library to searching epitopes Biochemical and Biophysical Research Communications 346 -2006- P. 198-204

114. Khattak S., Darai G., Siile S., Rösen-Wolff A. Characterization of expression of Puumala virus nucleocapsid protein in transgenic plants. — Intervirology - 2002- V.45, № 4-6, P.334-339

115. Kikkert M., Verschoor A., Kormelink R., Rottier P., Goldbach R. Tomato spotted wilt virus glycoproteins exhibit trafficking and localization signals that are functional in mammalian cells - J Virol - 2001 - V.75, P. 1004-1012.

116. Kim G., Lee Y., Park C. - Arch. Virol. - 1994 - Vol. 134. - P. 85-95

117. King A.M.Q., Adams M.J., Carstens E.B., Lefkowitz E.J. (editors) Virus Taxonomy: Classification and Nomenclature of Viruses: Ninth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego: Elsevier Academic Press. -2011.

118. Klempa В., Fichet-Calvet E., Lecompte E., Auste В., Aniskin V., Meisel H., Barrière P., Koivogui L., ter Meulen J., Krüger D.H. Novel hantavirus sequences in Shrew, Guinea. - Emerg Infect Dis. - 2007 - V.13, №3, P.520-522

119. Klempa В., Tkachenko E.A., Dzagurova Т.К., Yunicheva Y.V., Morozov V.G., Okulova N.M., Slyusareva G.P., Smirnov A., Kruger D.H. Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Caused by 2 Lineages of Dobrava Hantavirus, Russia - Emerging Infectious Diseases Journal - 2008 - V.14, № 4.

120. Koch J., Liang M., Queitsch I., Kraus A.A., Bautz E.K. Human recombinant neutralizing antibodies against hantaan virus G2 protein. - Virology. - 2003 - V.308, №1, P.64-73.

121. Koma T. Yoshimatsu К, Taruishi M, Miyashita D, Endo R, Shimizu K, Yasuda SP, Amada T, Seto T, Murata R, Yoshida H, Kariwa H, Takashima I, Arikawa J. Development of a serotyping enzyme-linked immunosorbent assay system based on recombinant truncated hantavirus nucleocapsid proteins for New World hantavirus infection.- Journal of Virological Methods - 2012 - V. 185, P. 74-81.

122. Koma T., Yoshimatsu K, Pini N, Safronetz D, Taruishi M, Levis S, Endo R, Shimizu K, Yasuda SP, Ebihara H, Feldmann H, Enria D, Arikawa J.. Truncated Hantavirus Nucleocapsid Proteins for Serotyping Sin Nombre, Andes, and Laguna Negra Hantavirus Infections in Humans and Rodents. - JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY - 2010 - V.48, No.5, P. 1635-1642.

123. Kranzusch P.J., Whelan S.P. Arenavirus Z protein controls viral RNA synthesis by locking a polymerase-promoter complex. - Proc Natl Acad Sci USA - 2011 - V.108, P.19743-19748.

124. Krautkramer E., Zeier, M. Hantavirus causing hemorrhagic fever with renal syndrome enters from the apical surface and requires decay-accelerating factor (DAF/CD55). - J Virol - 2008 - V.82, P.4257-4264.

125. Krey T., Thiel H. J., Riumenapf T. Acid-resistant bovine pestivirus requires activation for pH-triggered fusion during entry. - J Virol - 2005 - V.79, P.4191-4200.

126. Kriiger D.H Schonrich G, Klempa B. Human pathogenic hantaviruses and prevention of infection - Human Vaccines - 2011- V.6, P.685-693.

127. Kriiger D.H., Ulrich R., Lundkvist A.A. Hantavirus infections and their prevention. - Microbes Infect. - 2001 - V.3, №13, P.l 129-1144.

128. Kuismanen E. Posttranslational processing of Uukuniemi virus glycoproteins G1 and G2. - J Virol - 1984 - V.51, P.806-812.

129. Kuismanen E., Bang B., Hurme M., Pettersson R.F. Uukuniemi virus maturation: immunofluorescence microscopy with monoclonal glycoprotein-specific antibodies. - J Virol - 1984-V.51.P.137-146.

130. Kukkonen S.K., Vaheri A., Plyusnin, A. Tula hantavirus L protein is a 250 kDa perinuclear membrane-associated protein - J Gen Virol - 2004 - V.85, P.l 181-1189.

131. Liihdevirta J. Nephropathia epidemica in Finland. A clinical histological and epidemiological study. - Ann Clin Res. - 1971- V.3, P. 1-54.

132. Lappin D.F., Nakitare G.W., Palfreyman J.W., Elliott R.M. Localization of Bunyamwera bunyavirus G1 glycoprotein to the Golgi requires association with G2 but not with NSm - J Gen Virol - 1994 - V.75, P.34413451.

133. Larson R.S., Brown D.C., Ye C., Hjelle B. Peptide Antagonists That Inhibit Sin Nombre Virus and Hantaan Virus Entry through the (33-Integrin Receptor - 2005

134. Lee H.W., Baek L.J., Johnson K.M. Isolation of Hantaan virus, the etiologic agent of Korean hemorrhagic fever, from wild urban rats. - J Infect Dis -1982 - V.146, P.638-644.

135. Lee H.W., Chu Y. K., Woo Y.D. Immune responses after two or three doses of Hantavax vaccination against Hantaan virus // Proc. fifth international conference on hemorrhagic fever with renal syndrome, hantavirus pulmonary syndrome and hantaviruses, Lion, Franch - 2001. — P.234-242.

136. Lee H.W., Lee P.W., Johnson K.M. Isolation of the etiologic agent of Korean hemorrhagic fever. - J. Infect. Dis. - 1978 - 137, №3, P.298-308.

137. Lee P.W., Amyx H.L., Gajdusek D.C., Yanagihara R.T., Goldgaber D., Gibbs C.J.Jr. New hemorrhagic fever with renal syndrome-related virus in rodents in the United States. - Lancet. - 1982 -V. 18, № 8312, P. 1405

138. Lee PW., Gibbs CJ., Gajdusek C. et al. Serotypic classification of hantaviruses by indirect immunofluorescent antibody and plaque reduction neutralization tests. Journal of Clinical Microbiology. 1985, Vol. 22, No. 6, 940-944.)

139. Levis S., Morzunov S., Rowe J., Enria D.A., Pini N., Calderon G., Sabattini M., St. Jeor S.C., Genetic diversity and epidemiology of hantaviruses in Argentina. - J. Infect. - 1998 - V.177, P. 529-538.

140. Liang M., Chu Y.K., Schmaljohn C. Bacterial expression of neutralizing mouse monoclonal antibody Fab fragments to Hantaan virus. - Virology - 1996 - V.217, P.262-271.

141. Liang M., Dubel S., Li D., Queitsch I., Li M., Bautz E.K.F. Baculovirus expression cassette vectors for rapid production of complete human IgG from phage display selected antibody fragments. - J. Immunol. Meth. - 2001 - V.247, P. 119-130.

142. Liang M., Guttieri M., Lundkvist A., Schmaljohn C. Baculovirus expression of a human G2-specific, neutralizing IgG monoclonal antibody to Puumala virus. - Virology - 1997 - V.235, P.252-260.

143. Lindgren T., Ahlm C, Mohamed N, Evander M, Ljunggren IIG, Bjorkstrom NK. Longitudinal Analysis of the Human T-Cell Response during Acute Hantavirus Infection, - journal of virology-2011 - Vol.85,No. 19, P.10252-10260

144. Listwan P., Terwilliger T.C., Waldo G.S. Automated, high-throughput platform for protein solubility screening using a split-GFP system. J Struct Funct Genomics. 2009 Mar; 10(1): 47-55

145. Lober C., Anheier B., Lindow S., Klenk H. D., Feldmann H. The Hantaan virus glycoprotein precursor is cleaved at the conserved pentapeptide WAASA. - Virology -2001-V.289, P.224-229.

146. Lopez N., Padula P., Rossi C., Lazaro M.E., Franze-Fernandez M.T. Genetic identification of a new Hantavirus causing severe pulmonary syndrome in Argentina. -Virology - 1996 - V.220, P. 223-226.

147. Lopez N., Padula P., Rossi C., Miguel S., Edelstein A., Ramirez E., Franze-Fernandez M.T. Genetic characterization and phylogeny of Andes virus and variants from Argentina and Chile. - Virus Res. - 1997 - V.50, № 1, P. 77-84.

148. Lozach P.Y., Mancini R., Bitto D., Meier R., Oestereich L., Overby A.K., Pettersson R.F., Helenius A. Entry of bunyaviruses into mammalian cells. - Cell Host Microbe - 2010 - V.7, P.488-499

149. Lundkvist A., Bjorsten S., Niklasson B., Ahlborg N. Mapping of Bcell determinants in the nucleocapsid protein of Puumala virus: definition of epitopes specific for acute immunoglobulin G recognition in humans. - Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 1995 -V.2, № 1, P.82-86.

150. Lundkvist A., Horling J., Nilkasson B. The humoral response to Puumala virus infection (nephropathia epidemica) investigated by viral protein specific immunoassays.

- Arch. Virol. - 1993 -V. 130, P. 121-130.

151. Lundkvist A., Kallio-Kokko H., Sjolander K.B., Lankinen H., Niklasson B., Vaheri A., Vapalahti O. Characterization of Puumala virus nucleocapsid protein: identification of B-cell epitopes and domains involved in protective immunity. -Virology - 1996 - V.216, P.397^106.

152. Lundkvist A., Niklasson B. Bank vole monoclonal antibodies against Puumala virus envelope glycoproteins: identification of epitopes involved in neutralization. -Arch. Virol. - 1992-V. 126, № 1-4, P.93-105.

153. Mackow E.R., Gavrilovskaya I.N. Cellular receptors and hantavirus pathogenesis.

- Curr. Top. Microbiol. Immunol. - 2001 - V.256, P.91-115.

154. Maes P., Clement J., Gavrilovskaya I., Van Ranst M. Hantaviruses: immunology, treatment, and prevention. - Viral Immunol. - 2004 - V.17, №4, P. 481-497.

155. Maes P., Clement J., Van Ranst M. Recent approaches in hantavirus vaccine development. - Expert Rev Vaccines. - 2009 b- V.8, №1, P.67-76.

156. Maes P., Klempa B., Clement J., Matthijnssens J., Gajdusek D.C., Kriiger D.H., Van Ranst M. A proposal for new criteria for the classification of hantaviruses, based on S and M segment protein sequences. - Infect Genet Evol. - 2009 - V.9, №5, P.813-820.

157. Manigold T., Mori A, Graumann R, Llop E, Simon V, Ferrés M, Valdivieso F, Castillo C, Hjelle B, Vial P Highly Differentiated, Resting Gn-Specifie Memory CD8+ T Cells Persist Years after Infection by Andes Hantavirus.- PLoSPathogens - 2010 - V.6

158. Martin M. L., Lindsey-Regnery H., Sasso D.R., McCormick J. B., Palmer E. Distinction between Bunyaviridae genera by surface structure and comparison with Hantaan virus using negative stain electron microscopy. - Arch Virol - 1985 - V.86, P. 17-28.

159. Matthews J.M., Sunde M. Zinc fingers-folds for many occasions. - IUBMB Life 2002 - V.54, P.351-355.

160. Matthys V., Gorbunova E.E., Gavrilovskaya I.N., Pepini T., Mackow, E.R. The C-terminal 42 residues of the Tula virus Gn protein regulate interferon induction. - J Virol - 2011- V.85, P.4752-4760.

161. Matthys V.S., Gorbunova E.E., Gavrilovskaya I.N., Mackow E.R. Andes Virus Recognition of Human and Syrian Hamster P3-Integrins Is Determined by an L33P Substitution in the PSI Domain. - 2010

162. McCaughey C„ Shi X., Elliott R.M., Wyatt D.E., O'Neill H.J., Coyle P.V. Low pH-induced cytopathic effect-a survey of seven hantavirus strains. - J Virol Methods -1999 - V.81, P. 193-197

163. Meyer B.J., Schmaljohn C.S. Persistent hantavirus infections: characteristics and mechanisms. - Trends Microbiol - 2000 - V.8, P.61-67.

164. Mir M.A., Brown B., Hjelle B., Duran W.A., Panganiban A.T. Hantavirus N protein exhibits genus-specific recognition of the viral RNA panhandle. - J Virol - 2006 -V.80,P.l 1283-11292.

165. Mir M.A., Duran W.A., Hjelle B.L., Ye C., Panganiban A.T. Storage of cellular 5' mRNA caps in P bodies for viral cap- snatching. - Proc Natl Acad Sci USA - 2008 -V.105, P. 19294-19299.

166. Mir M.A., Panganiban A.T. A protein that replaces the entire cellular eIF4F complex. - EMBO J - 2008 - V.27, P.3129-3139.

167. Mir M.A., Panganiban A.T. The triplet repeats of the Sin Nombre hantavirus 5' untranslated region are sufficient in cis for nucleocapsid-mediated translation initiation. - J Virol - 2010 - V.84, P.8937-8944.

168. Mir M.A., Panganiban A.T. Trimeric hantavirus nucleocapsid protein binds specifically to the viral RNA panhandle. - J Virol - 2004 - V.78, P.8281-8288.

169. Mir M.A., Sheema S., Haseeb A., Haque A. Hantavirus nucleocapsid protein has distinct m7G cap- and RNA-binding sites. - J Biol Chem - 2010 - V.285, P.11357-11368.

170. Mohamed N, Nilsson E, Johansson P, Klingstrom J, Evander M, Ahlm C, Bucht G. Development and evaluation of a broad reacting SYBR-green based quantitative realtime PCR for the detection of different hantaviruses. J Clin Virol. 2013 Apr;56(4):280-5.

171. Mou D.L., Wang Y.P., Huang C.X., Li G.Y., Pan L., Yang W.S., Bai X.F. Cellular entry of Hantaan virus A9 strain: specific interactions with b3 integrins and a novel 70 kDa protein. - Biochem Biophys Res Commun - 2006 - V.339, P.611-617.

172. Nichol S.T., Spiropoulou C.F., Morzunov S., Rollin P.E., Ksiazek T.G., Feldmann II., Sanchez A., Childs J., Zaki S., Peters C.J. Genetic identification of a hantavirus associated with an outbreak of acute respiratory illness. - Science - 1993 - V.262, P.914-917.

173. Niklasson B, Hornfeldt B, Lundman B. Could myocarditis, insulin-dependent diabetes mellitus, and Guillain-Barre syndrome be caused by one or more infectious agents earned by rodents? Emerg Infect Dis. - 1998 - V.4(2):P. 187-93.

174. Novoa R.R., Calderita G., Cabezas P., Elliott R.M., Risco C. Key Golgi factors for structural and functional maturation of bunyamwera virus. - J Virol - 2005 - V.79, P.10852-10863.

175. Novotny N.. Weissenboeck II., Aberle S., et al. - JAMA. - 1994. - Vol. 4. - P. 1100-1101

176. Ogino M., Yoshimatsu K., Ebihara Ii., Araki K., Lee B.H., Okumura M., Arikawa J. Cell fusion activities of Hantaan virus envelope glycoproteins. - J Virol - 2004 -V.78, P.10776-10782.

177. Ogino M., Yoshimatsu K., Ebihara H., Arikawa J. N-Acetylgalactosamine (GalNAc)-specific lectins mediate enhancement of Hantaan virus infection. - Arch Virol - 1999-V. 144, P. 1765-1777.

178. Olsson G.E., Leirs H., Henttonen H. Hantaviruses and their hosts in Europe: reservoirs here and there, but not everywhere? - Vector Borne Zoonotic Dis - 2010 -V.10, P.549-561.

179. Overby A.K., Pettersson R.F., Griinewald K, Huiskonen, J.T. Insights into bunyavirus architecture from electron cryotomo- graphy of Uukuniemi virus. - Proc Natl Acad Sci U S A - 2008 - V.105, P.2375-2379.

180. Overby A.K., Pettersson R.F., Neve E.P. The glycoprotein cytoplasmic tail of Uukuniemi virus (Bunyaviridae) interacts with ribonucleoproteins and is critical for genome packaging. - J Virol - 2007 - V.81, P.3198-3205.

181. Overby A.K., Popov V., Neve E.P., Pettersson R.F. Generation and analysis of infectious virus-like particles of Uukuniemi virus (Bunyaviridae): a useful system for studying bunyaviral packaging and budding. - J Virol - 2006 - V. 80, P. 10428-10435.

182. Oya A. Japanese encephalitis vaccine. - Acta Paediatr Jpn. - 1988 - V.30, №2, P.175-184.

183. Padula P.J., Colavecchia S.B., Martinez V.P., Gonzalez Delia Valle M.O., Edelstein A., Miguel S.D., Russi J., Riquelme J.M., Colucci N., Almiron M., Rabinovich R.D. Genetic diversity, distribution, and serological features of hantavirus infection in five countries in South America. - J. Clin. Microbiol. - 2000 - V.38, № 8, P.3029-3035.

184. Panganiban A.T., Mir, M.A. Bunyavirus N: eIF4F surrogate and cap-guardian. -Cell Cycle - 2009 - V.8, P. 1332-1337.

185. Parmley S.F., Smith G.P. Antibody-selectable filamentous fd phage vectors: affinity purification of target genes. - Gene. - 1988 - V.20, № 2, P.305-318.

186. Patterson J.L., Kolakofsky D. Characterization of La Crosse virus small-genome transcripts. - J Virol - 1984 - V.49, P.680-685.

187. Pensiero M.N., Hay J. The Hantaan virus M-segment glycoproteins G1 and G2 can be expressed independently. - J Virol - 1992-V.66, P. 1907-1914.

188. Persson R., Pettersson R.F. Formation and intracellular transport of a heterodimeric viral spike protein complex. - J Cell Biol - 1991 - V.l 12, P.257-266.

189. Pettersson R.F., Melin L. Synthesis, assembly, and intracellular transport of Bunyaviridae membrane proteins. In The Bunyaviridae, - Edited by R. M. Elliott. New York: Plenum Press. 1996 - P. 159.

190. Piiparinen H., Vapalahti O., Plyusnin A., Vaheri A., Lankinen H. Sequence analysis of the Puumala hantavirus Sotkamo strain L segment. - Virus Res - 1997 -V.51, P. 1-7.

191. Piper M.E., Sorenson D.R., Gerrard S.R. Efficient cellular release of Rift Valley fever virus requires genomic RNA. - PLoS ONE 6, el8070. - 2011

192. Plyusnin A. Genetics of hantaviruses: implications to taxonomy. - Arch Virol -2002-V. 147, P.665-682.

193. Plyusnin A., Kukkonen S.K., Plyusnina A., Vapalahti O., Vaheri A. Transfection-mediated generation of functionally competent Tula hantavirus with recombinant S RNA segment. - EMBO J - 2002 - V.21, P. 14971503.

194. Plyusnin A., Morzunov S.P. Virus evolution and genetic diversity of hantaviruses and their rodent hosts. - Curr Top Microbiol Immunol - 2001 - V.256, P.47-75.

195. Plyusnin A., Vapalahti O., Vaheri A. Hantaviruses: genome structure, expression and evolution. - J Gen Virol. - 1996 - V.77, № 11, P. 2677-2687.

196. Popugaeva E., Witkowski P.T., Schlegel M., Ulrich R.G., Auste B., Rang A., Kruger D.H., Klempa B. Dobrava-Belgrade Hantavirus from Germany Shows Receptor Usage and Innate Immunity Induction Consistent with the Pathogenicity of the Virus in Humans. - PLoSONE|www.plosone.org, - 2012 - V.7.

197. Ramanathan H.N., Chung D.H., Plane S.J., Sztul E., Chu Y.K., Guttieri M.C., McDowell M., Ali G., Jonsson C.B. Dynein- dependent transport of the Hantaan virus nucleocapsid protein to the endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment. - J Virol-2007-V. 81, P.8634-8647.

198. Ramanathan H.N., Jonsson C.B. New and Old World hantaviruses differentially utilize host cytoskeletal components during their life cycles. - Virology - 2008 - V.374, P.138-150.

199. Ravkov E.V., Compans R.W. Hantavirus nucleocapsid protein is expressed as a membrane-associated protein in the perinuclear region. - J Virol - 2001 - V.75, P. 18081815.

200. Ravkov E.V., Nichol S.T., Compans R.W. Polarized entry and release in epithelial cells of Black Creek Canal virus, a New World hantavirus. - J Virol - 1997 - V.71, P.l 147-1154.

201. Ravkov E.V., Nichol S.T., Peters C.J., Compans R.W. Role of actin microfilaments in Black Creek Canal virus morphogenesis. - J Virol - 1998 - V.72, P.2865-2870.

202. Raymond D.D., Piper M.E., Gerrard S.R., Smith J.L. Structure of the Rift Valley fever virus nucleocapsid protein reveals another architecture for RNA encapsidation. -Proc Natl Acad Sci USA - 2010 - V. 107, P. 11769-11774.

203. Raymond T., Gorbunova E., Gavrilovskaya I.N., Mackow E.R.. Pathogenic hantaviruses bind plexin-semaphorin-integrin domains present at the apex of inactive, bent b3 integrin conformers. - PNAS - 2005 -V. 102 №.4, P. 1163-1168.

204. Ribeiro D., Borst J.W., Goldbach R., Kormelink R. Tomato spotted wilt virus nucleocapsid protein interacts with both viral glycoproteins Gn and Gc in planta. -Virology - 2009 -V.383,P.121-130.

205. Ronka H., Hilden P., Von Bonsdorff C.H.,Kuismanen, E. Homodimeric association of the spike glycoproteins Gl and G2 of Uukuniemi virus. - Virology - 1995 - V.211, P.241-250.

206. Ronnholm R. Localization to the Golgi complex of Uukuniemi virus glycoproteins Gl and G2 expressed from cloned cDNAs. - J Virol - 1992 - V.66, P.4525-4531.

207. Rowe R.K., Pekosz A. Bidirectional virus secretion and nonciliated cell tropism following Andes virus infection of primary airway epithelial cell cultures. - J Virol -2006-V.80, P.1087-1097.

208. Rúan Y., Xu X., Liu W., Deng X, Weng S, Zhou W, Wang Q, Chen L, Fang L, Xu Z, Yan Q, Liu W, Dong G, Gu H, Yu Y, Xu Z. A study on immunogenicity and safety of bivalent inactivated vaccine against hemorrhagic fever with renal syndrome. -Zhonghua Yu Fang Yi Xue Za Zhi. - 1999 - V. 33, №6, P.340-342.

209. Ruó S.L., Sanchez A., Elliott L.H., Brammer L.S., McCormick J.B., Fisher H.S. Monoclonal antibodies to three strains of hantaviruses: Hantaan, R22, and Puumala. -Arch. Virol. - 1991 -V.119, P. 1-11.

210. Ruusala A., Persson R., Schmaljohn C.S., Pettersson R.F. Coexpression of the membrane glycoproteins Gl and G2 of Hantaan virus is required for targeting to the Golgi complex. - Virology - 1992 - V. 186, P.53-64.

211. Saasa N., Yoshida H, Shimizu K, Sánchez-Hernández C, Romero-Almaraz Mde L, Koma T, Sanada T, Seto T, Yoshii K, Ramos C, Yoshimatsu K, Arikawa J, Takashima I, Kariwa H.. The N-terminus of the Montanovirus nucleocapsid protein possesses broadly cross-reactive conformation-dependent epitopes conserved in rodentborne hantaviruses. - Virology - 2012 - V.428, P.48-57.

212. Samarkina O.N., Popova A.G., Gvozdik E.Y., Chkalina A.V., Zvyagin I.V., Rylova Y.V., Rudenko N.V., Lusta K.A., Kelmanson I.V., Gorokhovatsky A.Y. and Vinokurov L.M. (2009) Universal and rapid method for purification of GFP-like proteins by the ethanol extraction. Protein Expr. Purif. 65(1), pp. 108-113.

213. Sanada T., II.Kariwa, S.Ngonda, K.Yoshikawa, T.Seto, V.G.Morozov, E.A.Tkachenko, L.I.Ivanov, K.Yoshimatsu, J.Arikawa, K.Yoshii and I.Takashima.

Development of a diagnostic method applicable to various serotypes of hantavirus infection in rodents. The Journal of Veterinary Medical Science. 2012

214. Sanada T., Kariwa II., Ngonda S., Yoshikawa K., Seto T., Morozov V.G., Tkachenko E.A.,.Ivanov L.I, Yoshimatsu K., Arikawa J., Yoshii K., Takashima I.. Development of a diagnostic method applicable to various serotypes of hantavirus infection in rodents - The Journal of Veterinary Medical Science - 2012

215. Sanders D.A. Sulfhydryl involvement in fusion mechanisms. - Subcell Biochem -2000-V.34, P.483-514.

216. Sant AJ, McMichael A. Revealing the role of CD4+ T cells in viral immunity. - J Exp Med. -2012 -V.209, № 8, P. 1391-1395.

217. Schmaljohn C. Vaccines for hantaviruses - Vaccine - 2009 - V.27 P.61-64

218. Schmaljohn C., Iljelle B. Hantaviruses: a global disease problem. - Emerg Infect Dis. - 1997 - V.3, №2, P.95-104.

219. Schmaljohn C.S., Arikawa J., Hasty S.E., Rasmussen L., Lee II.W., Lee P.W., Dalrymple J.M. Conservation of antigenic properties and sequences encoding the envelope proteins of prototype Hantaan virus and two virus isolates from Korean haemorrhagic fever patients. - J.Gen. Virol. - 1988 - V.69, P. 1949-1955.

220. Schmaljohn C.S., Chu Y.K., Schmaljohn A.L., Dalrymple J.M. Antigenic subunits of Hantaan virus expressed by baculovirus and vaccinia virus recombinants. - J Virol -1990 - V.64, P.3162-3170.

221. Schmaljohn C.S., Dalrymple J.M. Analysis of Hantaan virus RNA: evidence for a new genus of bunyaviridae. - Virology - 1983 - V.131, .№2, P.482-491

222. Schmaljohn C.S., Hasty S.E., Rasmussen L., Dalrymple J.M. Hantaan virus replication: effects of monensin, tunicamycin and endoglycosidases on the structural glycoproteins. - J Gen Virol - 1986 - V.67, P.707-717.

223. Schmaljohn C.S., Schmaljohn A.L, Dalrymple J.M. Hantaan virus M RNA: coding strategy, nucleotide sequence, and gene order. - Virology - 1987 - V.157, P.31-39.

224. Schubert J, Tollmann F, Weissbrich B.Evaluation of a pan-reactive hantavirus enzyme immunoassay and of a hantavirus immunoblot for the diagnosis of nephropathia epidemica. J Clin Virol. 2001 Apr;21(l):63-74.

225. Sen N., Sen A., Mackow E.R. Degrons at the C terminus of the pathogenic but not the nonpathogenic hantavirus G1 tail direct proteasomal degradation. - J Virol - 2007 -V.81, P.4323-4330.

226. Severson W., Partin L., Schmaljohn C.S., Jonsson C.B. Characterization of the Hantaan nucleocapsid protein-ribonucleic acid interaction. - J Biol Chem — 1999 — V.274, P.33732-33739.

227. Severson W., Xu X., Kuhn M., Senutovitch N.. Thokala M., Ferron F., Longhi S., Canard B., Jonsson C.B. Essential amino acids of the Hantaan virus N protein in its interaction with RNA. - J Virol - 2005 - V.79, P. 10032-10039

228. Shi X., Elliott R.M. Analysis of N-linked glycosylation of Hantaan virus glycoproteins and the role of oligosaccharide side chains in protein folding and intracellular trafficking. - J Virol - 2004 - V.78, P.5414-5422.

229. Shi X.H., Hang C.S., Song G., Liang M. Baculovirus expression of M genome segment of Hantaan virus and immunogenic studies of the expressed glycoproteins. -Chin. J. Virol. - 1995 -V. 214, P.208-214.

230. Sinisalo M„ Vapalahti O., Ekblom-Kullberg S., Laine O., Makela S., Rintala H., Vaheri A. Headache and low platelets in a patient with acute leukemia. - J Clin Virol -2010 - V.48, P. 159-161.

231. Smajlovic L. Davoren J, Heyman P, Cochez C, Haas C, Maake C, Hukic M. Development and optimization of a PCR assay for detection of Dobrava and Puumala hantaviruses in Bosnia and Herzegovina, - Journal of Virological Methods - 2012 -V.182, P. 37-42.

232. Snippe M., Willem Borst J., Goldbach R., Kormelink R. Tomato spotted wilt virus Gc and N proteins interact in vivo. - Virology - 2007 - V.357, P. 115-123.

233. Song G. Epidemiological progresses of hemorrhagic fever with renal syndrome in China. - Chin Med J (Engl). - 1999 - V. 112, №5, P.472-477.

234. Song J.W., Baek L.J., Schmaljohn C.S., Yanagihara R. Thottapalayam virus, a prototype shrewborne hantavirus. - Emerg Infect Dis. - 2007 - V.13, №7, P.980-985.

235. Song J.W., Gu S.H., Bennett S.N., Arai S., Puorger M., Hilbe M., Yanagihara R. Seewis virus, a genetically distinct hantavirus in the Eurasian common shrew (Sorex araneus). - Virol J. - 2007b - V.30, P. 114

236. Song J.W., Kang H.J., Song K.J., Truong T.T., Bennett S.N., Arai S., Truong N.U., Yanagihara R. Newfound hantavirus in Chinese mole shrew, Vietnam. - Emerg Infect Dis. - 2007c - V. 13, № 11, P. 1784-1787

237. Song W., Torrez-Martinez N., Irwin W., Harrison F.J., Davis R., Ascher M., Jay M., Hjelle B. Isla Vista virus: a genetically novel hantavirus of the California vole Microtus californicus. - J Gen Virol. - 1995 -V. 76, Pt 12, P.3195-3199

238. Spiropoulou C. Molecular biology of hantavirus infection. In Bunyaviridae: Molecular and Cellular Biology. - Edited by A. Plyusnin, R. M. Elliott. Norfolk, UK: Caister Academic Press. - 2011 - P.41-60.

239. Spiropoulou C.F., Goldsmith C.S., Shoemaker T.R., Peters C.J., Compans R.W. Sin Nombre virus glycoprotein trafficking. - Virology - 2003 - V.308, P.48-63

240. Spiropoulou C.F., Morzunov S., Feldmann H., Sanchez A., Peters C.J., Nichol S.T. Genome structure and variability of a virus causing hantavirus pulmonary syndrome. - Virology - 1994 - V. 200, № 2, P.715-723.

241. Strandin T., Hepojoki J., Wang H., Vaheri A., Lankinen H. The cytoplasmic tail of hantavirus Gn glycoprotein interacts with RNA. - Virology - 201 la - V.418, P.12-20.

242. Strandin T.M., Hepojoki J.M., Wang H., Vaheri A., Lankinen FI.M. Inactivation of hantaviruses by N-ethylmaleimide preserves virion integrity. - J Gen Virol - 201 lb -V.92, P.l 189-1198.

243. Suryanarayana K., Baczko K., ter Meulen V., Wagner R.R. Transcription inhibition and other properties of matrix proteins expressed by M genes cloned from measles viruses and diseased human brain tissue. - J Virol - 1994 - V.68, P. 1532-1543.

244. Svedmyr A., Lee Ii.W., Berglund A., Iloorn B., Nystrom K., Gajdusek D.C. Epidemic nephropathy in Scandinavia is related to Korean haemorrhagic fever. Lancet -1979 -V.313, P.100.

245. Terajima M. Ennis FA.. T Cells and Pathogenesis of Hantavirus Cardiopulmonary Syndrome and Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome - Viruses - 2011 - V.3, P.1059-1073.

246. Thompson J.D., Higgins D.G., Gibson T.J. CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice. - Nucleic Acids Res. - 1994 -V. 22, P.4673-4680.

247. Tischler N.D., Galeno H., Rosemblatt M., Valenzuela P.D.T. Human and rodent humoral immune responses to Andes virus structural proteins. - Virology - 2005 - V. 334, P.319-326

248. Tischler N.D., Gonzalez A., Perez-Acle T., Rosemblatt M., Valenzuela P.D. Hantavirus Gc glycoprotein: evidence for a class II fusion protein. - J Gen Virol - 2005

- V.86, P.2937-2947.

249. Tischler N.D., Rosemblatt M., Valenzuela P.D. Characterization of cross-reactive and serotype-specific epitopes on the nucleocapsid proteins of hantaviruses. - Virus Res.

- 2008 - V.135, №1, P.1-9

250. Tkachenko E., Dekonenko A., Ivanov A., Dzagurova T., Ivanov L., Slonova R., Nurgaleeva R., Stepanenko A., Ivanidze E., Zagidullin I.Hemorrhagic fever with renal syndrome and hantaviruses in Russia. In book "Emergence and Control of Rodent-borne Viral Diseases". France, Elsevier. 1999, 63-72.

251. Tsai TF, Tang YW, Hu SL, Ye KL, Chen GL, Xu ZY. Hemagglutination-inhibiting antibody in hemorrhagic fever with renal syndrome. J Infect Dis. 1984 Dec;150(6):895-8.

252. US Patent 4521509, Benkovic, Putney S., Schimmel, 1985, Method for degrading DNA

253. US Patent 6265159, Sugino, Morito M., Matuo Y., Uchida K. 2001, Method for producing DNA nested deletions by an in vitro reaction using transposase

254. Vaheri A., Mills J.N., Spiropoulou C.F., Hjelle B. Hantaviruses. - In Zoonoses -Biology, Clinical Practice and Public Health, 2nd edn. - Edited by S. R. Palmer, L. Soulsby, D. Brown, P. Torgeson. - Oxford: Oxford University Press. - 2011 -P. 307322

255. Vapalahti O., Kallio-Kokko II., Narvanen A., Julkunen I., Lundkvist A., Plyusnin A., Lehvaslaiho H., Brummer-Korvenkontio M., Vaheri A., Lankinen H. Human B-cell epitopes of Puumala virus nucleocapsid protein, the major antigen in early serological response. - J. Med. Virol. - 1995 - V.46, № 4, P.293-303.

256. Velappan N., Martinez J.S., Valero R., Chasteen L., Ponce L., Bondu-HawkinsV., Kelly C., Pavlik P., Hjelle B., Bradbury A.R. Selection and characterization of scFv antibodies against the Sin Nombre hantavirus nucleocapsid protein. - J. Immunol. Methods - 2007 - V.321, № 1-2, P.60-69.

257. Virtanen J.O., Jaaskelainen K.M., Djupsjobacka J., Vaheri A., Plyusnin A. Tula hantavirus NSs protein accumulates in the perinuclear area in infected and transfected cells. - Arch Virol - 2010 - V. 155, P. 117121.

258. Walsh D. Manipulation of the host translation initiation complex eIF4F by DNA viruses. - Biochem Soc Trans - 2010 - V.38, P. 1511 -1516.

259. Wang II., Strandin T., Hepojoki J., Lankinen II. , Vaheri, A. Degradation and aggresome formation of the Gn tail of the apathogenic Tula hantavirus. - J Gen Virol -2009-V.90, P.2995-3001.

260. Wang M., Rossi C., Schmaljohn C.S. Expression of nonconserved regions of the S genome segments of three hantaviruses: evaluation of the expressed polypeptides for diagnosis of haemorrhagic fever with renal syndrome. - J. Gen. Virol. - 1993 - V.74, P.l 115-1124.

261. Watanabe K., Handa H., Mizumoto K., Nagata K. Mechanism for inhibition of influenza virus RNA polymerase activity by matrix protein. - J Virol - 1996 - V.70, P.241-247.

262. Wei F, Li JL, Ling JX, Chen LJ, Li N, Liu YY, Luo F, Xiong HR, Hou W, Yang ZQ. Establishment of SYBR green-based qPCR assay for rapid evaluation and quantification for anti-Hantaan virus compounds in vitro and in suckling mice.Virus Genes. 2013 Feb;46(l):54-62.

263. Wells R.M., Sosa Estani S., Yadon Z.E., Enria D., Padula,P., Pini N., Mills J.N., Peters C.J., Segura E.L. An unusual hantavirus outbreak in southern Argentina: person-to-person transmission? Hantavirus Pulmonary Syndrome Study Group for Patagonia. -Emerg Infect Dis - 1997a - V.3, P. 171 -174.

264. Wells R.M., Young J., Williams R.J., Armstrong L.R., Busico K., Khan A.S., Ksiazek T.G., Rollin P.E., Zaki S.R. Hantavirus transmission in the United States. -Emerg Infect Dis - 1997b - V.3, P.361-365.

265. Whitcomb J.M, Rashtchian A, Hughes SH.. A new PCR based method for the generation of nested deletions, Nucleic Acids Research, 1993, Vol. 21, No. 17 41434146

266. White J.M., Delos S.E., Brecher M., Schornberg K. Structures and mechanisms of viral membrane fusion proteins: multiple variations on a common theme. - Crit Rev Biochem Mol Biol - 2008 -V.43, P189-219.

267. Xiao S-Y, Yanagihara R, Godec MS, Eldadah ZA, Johnson BK, Gajdusek DC, Asher DM. Detection of hantavirus RNA in tissues of experimentally infected mice using reverse transcriptase-directed polymerase chain reaction. J Med Virol 1991; 33: 277-282

268. Xu X., Severson W., Villegas N., Schmaljohn C.S., Jonsson C.B. The RNA binding domain of the Flantaan virus N protein maps to a central, conserved region. - J Virol - 2002 - V.76, P.3301-3308.

269. Yamada T., I-Ijelle B., Lanzi R., Morris C., Anderson B., Jenison S. Antibody responses to four corners hantavirus infections in the deer mouse (Peromyscus maniculatus): identification of an immunodominant region of the viral nucleocapsid protein. - J. Virol. - 1995 - V.69, P.1939-1943.

270. Yamanishi K., Tanishita O., Tamura M. Development of an inactivated vaccine against virus causing haemorrhagic fever with renal syndrome. - Vaccine -1988-V.6, P.278-282.

271. Yanagihara R., Amyx H.L., Gajdusek D.C. Experimental infection with Puumala virus, the etiologic agent of nephropathia epidemica, in bank voles (Clethrionomys glareolus). - J Virol - 1985 - V.55, P.34-38.

272. Yao Z-Q, Yang W-S, Zhang W-B, Bai X-F. The distribution and duration of Hantaan virus in the body fluids of patients with hemorrhagic fever with renal syndrome. J Infect is 1989; 160:218-224

273. Yasuda Sh. P. Application of Truncated Nucleocapsid Protein (N) for Serotyping ELISA of Murinae-Associated Hantavirus Infection in Rats. - J. Vet. Med. Sci. - 2012 -V.74, № 2, P. 215-219

274. Yoshimatsu K., Arikawa J., Tamura M., Yoshida R., Lundkvist A., Niklasson B., Kariwa H., Azuma I. Characterization of the nucleocapsid protein of Hantaan virus strain 76-118 using monoclonal antibodies. - J. Gen. Virol. - 1996 - V.77, P.695-704.

275. Zamoto-Niikura A., Terasaki K., Ikegami T., Peters C.J., Makino S. Rift valley fever virus L protein forms a biologically active oligomer. - J Virol - 2009 - V.83, P.12779-12789.

276. Zeier M. Hantavirus Causing Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Enters from the Apical Surface and Requires Decay-Accelerating Factor (DAF/CD55)., journal of virology -2008 - V.82, №.9, P.4257^1264.

277. Zoller L, Faulde M, Meisel H, Ruh B, Kimmig P, Schelling U, Zeier M, Kulzer P, Becker C, Roggendorf M, et al.: Seroprevalence of hantavirus antibodies in Germany as determined by a new recombinant enzyme immunoassay. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 14:305-313, 1995

278. Zoller L., Scholz J., Stohwasser R., Giebel L.B., Sethi K.K., Bautz E.K., Darai G. Immunoblot analysis of the serological response in flantavirus infections. - J. Med. Virol. - 1989 - V.27, № 3, P.231-237.

279. Бархалева O.A., Воробьева М.С., Ладыженская И.П., Ткаченко Е.А., Дзагурова Т.К. Вакцина против геморрагической лихорадки с почечным синдромом. - Журнал Биопрепараты-2011 -№ 1 (41) С. 27-30

280. Дзагурова Т.К., Лещинская Е.В., Ткаченко Е.А. и др. Серологическое обследование больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом в Европейской части СССР - Вопр. вирусол. - 1983. -№ 6. - С. 676-680

281. Дзагурова Т.К., Ткаченко Е.А., Чу Е.К. и др. Об этиологической роли хантавирусного серотипа Доброва / Белград в структуре заболеваемости ГЛПС в России - Актуальные проблемы мед. вирусологии: Материалы научной конференции посвящ. 90-летию со дня рождения М.П. Чумакова. - М. 1999. - С.60

282. Иванов А.П. Система иммуноферментного анализа с использованием биотинилированных моноклональных антител для типирования антигенов хантавирусов - Вопр. вирусол. - 1996. -№6. - С. 236-265

283. Кушнарева Т. В., Слонова Р. А., Компанец Г.Г. Функциональная активность гемагглютининов штаммов вируса Хантаан и использование гемаглютинирующих антигенов для диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом // вопросы вирусологии. - 1999. - №4. - С. 186-190

284. Латыпов O.P., Голомидова А.К., Летаров A.B. Характеристика продукта гена wac бактериофага JS98C3, близкородственного фагу JS98 - Вестник КГУ - 2007 -Т. 149. С. 112-122

285. Магазов Р.Ш. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом. — Уфа -

2006 —С. 3-50.

286. Малинин О.В., Михайлов В.Б. Современное течение геморрагической лихорадки с почечным синдромом в Удмуртии. Природно-очаговые инфекции в Удмуртской республике: сборник статей. - ГОУВПО «УдГу», Ижевск, 2007, -С.33-34.

287. Покровский В.И., Пак С.Г., Брико Н.И. Инфекционные болезни и эпидемиология. - М., Гэотар-Мед - 2003

288. Постановление главного государственного санитарного врача РФ от 13 июня

2007 г. № 33

289. Суздальцев A.A., Морозов В.Г., Рощупкин В.И., Трудности в диагностике стертых и атипичных форм геморрагичекой лихорадки с почечным синдромом -Эпидемиология и инфекционные болезни - 2003- N 4.-С.52-53

290. Тютликова Л.А., Храмцов М.М., Анпилогов А.И. Клинико-эпидемиологическая характеристика геморрагической лихорадки с почечным синдромом в Смоленской области. Материалы 1 Всероссийского Ежегодного Конгресса по инфекционным болезням. - М., 2009. - С. 212.

291. Филдс Б. Вирусология (в 3- томах), под ред., Филдс Б. Д.Найпа при участии Р.Ченока и др.; Москва : Мир, 1989

292. Шварёва O.A.,. Юдина О.С,. Некрасова Н.А,. Данилюк Н.К,. Распопин В.В, Гришаев М.П., Яшина Л.Н. Серодиагностика геморрагической лихорадки с почечным синдромом. "Новости "Вектор-Бест" N1(63) 2012

293. Шевелев А.Б., Хоменков В.Г., Кузнецова Т.В., Ковалев Л.И., Лагодная Н.В. Создание продуцента миостатина в виде слитого белка с 6His-GFP на основе Е. coli и изучение его иммуногенности. Сборник статей «Медико-биологические технологии повышения работоспособности в условиях напряженных физических нагрузок». Министерство образования и науки Российской Федерации, Москва, 2004, С. 140-150.