Создание и оценка трансгенных растений картофеля устойчивых к грибным болезням тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Крупенин, Роман Вячеславович

• Крупенин, Роман Вячеславович
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Крупенин, Роман Вячеславович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. БОЛЕЗНИ КАРТОФЕЛЯ И ДОСТИЖЕНИЯ ГЕННОЙ ИНЖЕНЕРИИ В БОРЬБЕ С НИМИ.

2.1. Фитофтороз.

2.2. Апьтернариоз.

2.3. Ризоктониоз.

2.4. Рак картофеля.

2.5. Сухая фузариозная гниль.

2.6. Обыкновенная парша.

3. РОЛЬ АНТИМИКРОБНЫХ БЕЛКОВ ДЕФЕНЗИНОВ В ЗАЩИТЕ РАСТЕНИЙ ОТ ФИТОПАТОГЕНОВ.

3.1. Общее строение дефензинов.

3.2. Экспрессия дефензинов в органах растений.

3.3. Антимикробная активность дефензинов.

3.4. Получение трансгенных растений с генами дефензинов и их устойчивость к болезням.

4. ПЕРЕНОС ГЕНОВ В РАСТИТЕЛЬНЫЙ ГЕНОМ С ПОМОЩЬЮ АГРОБАКТЕРИАЛЬНОЙ ТРАНСФОРМАЦИИ.•.

5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

5.1. Объекты исследований.

5.1.1. Растительный материал.

5.1.2. Векторная конструкция и агробактериальные штаммы.

5.1.3. Штаммы фитопатогенов.

5.2. Место проведения и схема полевого и вегетационного опытов.

5.3. Метеорологические условия 2002-2003 гг.

5.4. Микроклональное размножение картофеля в условиях in vitro.

5.5. Методика выделения ДНК из растительных тканей картофеля и ПЦР-анализа.

5.6. Методы оценки трансгенных растений на устойчивость к болезням

5.7. Биохимическая идентификация исходных и трансгенных растений с помощью белковых маркеров.

5.8. Статистическая обработка данных.

6. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

6.1. Оптимизация методики трансформации картофеля.

6.1.1. Анализ чувствительности трансформантов к канамицину.

6.1.2. Получение трансформированных растений картофеля с помощью штаммов LBA4404 и LGV3850 Agrobacterium tumefaciens.

6.1.3. Получение трансформированных растений картофеля с помощью штамма А4 Agrobacterium rhizogenes.

6.2. Оценка трансгенности трансформированных растений картофеля.

6.3. Характеристика устойчивости трансгенных линий картофеля к грибным инфекциям.

6.3.1. Характеристика устойчивости трансгенных линий картофеля к фитофторозу.

6.3.2. Характеристика устойчивости трансгенных линий картофеля к альтернариозу.

6.3.3. Характеристика устойчивости трансгенных линий картофеля к ризоктониозу in vitro.

6.3.4. Лабораторная оценка устойчивости к раку картофеля.

6.3.5. Лабораторная оценка устойчивости к сухой фузариозной гнили.

6.3.6. Визуальная оценка устойчивости к парше обыкновенной.

6.4. Определение урожайности трансгенных растений картофеля.

6.5. Морфологические и физиологические особенности трансгенных линий картофеля.

6.6. Комплексная оценка трансгенных линий картофеля.

6.7. Доказательство соответствия трансгенного и исходного генотипов с помощью белковых маркеров.

7. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВЫРАЩИВАНИЯ ТРАНСГЕННОГО КАРТОФЕЛЯ, УСТОЙЧИВОГО К ГРИБНЫМ

БОЛЕЗНЯМ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание и оценка трансгенных растений картофеля устойчивых к грибным болезням»

Актуальность проблемы. Россия, занимая лидирующее положение по абсолютному количеству производимого картофеля, вместе с тем остается на одном из последних мест по урожайности. Низкое качество семенного материала, в сильной степени зараженного вредоносными патогенами, - один из главных факторов, определяющих хронически низкий уровень урожайности картофеля (Анисимов, 2000). Значительная часть сортов, картофеля остается уязвимой для поражения различными грибными заболеваниями, среди которых весьма ощутимый урон наносят фитофтороз, ризоктониоз, фузариозная сухая гниль и др. (Попкова, Воловик, Шнейдер, 1986). Многочисленные заболевания в значительной степени снижают урожайность картофеля и качество клубней (Постников А.Н., Постников Д.А., 1994; Шуманн, 1999 ). Применение дорогостоящих фунгицидов требует больших материальных затрат.

Создание растений, устойчивых к болезням является непростой задачей для генетиков и селекционеров из-за участия многих генов во взаимодействии растение-патоген. В настоящее время в селекционный процесс в той или иной степени вовлечены многие дикорастущие виды картофеля, служащие донорами генов устойчивости (Камераз и др., 1973). Однако, одним из главных недостатков традиционной, селекции сортов на устойчивость является часто встречающееся при половой гибридизации сцепление с данным локусом резистентности нежелательных генов, снижающих хозяйственную ценность селекционного материала.

Методы генной инженерии позволяют вводить конкретный ген в растение конкретного генотипа, что значительно повышает качество и эффективность селекционной работы. Применительно к картофелю, который размножают вегетативно, и где обычная селекция подразумевает скрещивание между двумя гетерозиготными тетраплоидными формами, применение направленных, точных методов молекулярной селекции особенно актуально (Mackay, 1996).

Относительно недавно в семенах и вегетативных органах различных растений были обнаружены гены, способные экспрессировать пептидные антибиотики - дефензины - короткие белки широкого фунгицидного действия (Broekaert et al., 1995). Одними из самых сильнодействующих являются дефензины из семян редьки (Terras et al., 1995; Парашина и др., 1999).

К настоящему времени получены трансгенные растения томата, табака, капусты, моркови и других культур, несущих ген защитного пептида редьки. Они отличаются повышенной устойчивостью к грибным заболеваниям. Поэтому использование гена растительного дефензина для создания устойчивых к патогенам растений картофеля является новой, привлекательной областью приложения метода генной инженерии, имеющей как большое научное, так и практическое значение.

Цель и задачи исследований. В связи с вышеизложенным в настоящей работе была поставлена цель получить трансгенные растения картофеля на основе гена rs дефензина из семян редьки (Raphanus sativus), оценить их по устойчивости к грибным патогенам и выделить линии, превосходящие исходный сорт по резистентности к болезням.

Исходя из этого предстояло решить следующие задачи:

- оптимизировать методику трансформации для используемых в работе сортов картофеля;

- оценить эффективность различных элементов трансгенных технологий (штаммы Agrobacterium, этапы трансформации, типы эксплантов и др.) для оптимизации встройки и функционирования целевого гена;

- получить растения-регенеранты, несущие ген rs;

- провести тестирование встройки гетерологичной ДНК;

- провести раннее тестирование признаков резистентности к микозам в трансгенных растениях на основе in vitro-тестов и искусственных заражений клубней и взрослых растений;

- провести оценку хозяйственной урожайности трансгенных растений с повышенной устойчивостью к болезням в сравнении с исходным нетрансгенным сортом;

- сравнить трансгенные линии, проявляющие повышенную устойчивость с исходными нетрансгенными формами по морфологическим характеристикам;

- доказать принадлежность трансгенных линий с повышенной устойчивостью к базисному генотипу исходного сорта с помощью биохимического анализа.

Научная новизна. Показана возможность коррекции недостающих признаков устойчивости сортов картофеля с помощью трансформации их конструкциями, несущими гены rs и nptll. Предложены уточняющие параметры методики трансформации линий картофеля. Получены трансгенные линии с комбинированной повышенной устойчивостью к нескольким грибным патогенам. Показана независимость изменения устойчивости к разным грибным патогенам в результате встраивания чужеродных генов.

Практическая ценность работы. Полученные в работе результаты и разработанные методики могут быть использованы при создании трансгенных линий картофеля и их оценке на устойчивость к различным заболеваниям. По 6 перспективным сортам картофеля получено 10 трансгенных линий с комплексной устойчивостью к грибным патогенам.

Трансгенные линии предложены авторам сортов как стартовый материал для всесторонней селекционной проработки в качестве улучшенной сортоформы.

Апробация работы. Материалы исследований были представлены на II молодежной научной конференции "Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии" (Москва, 11 апреля 2002 г.), на I Всероссийской конференции по иммунитету растений к болезням и вредителям (Санкт-Петербург, 2-5 июля 2002 г.), на Второй научной конференции "Актуальные проблемы генетики", посвященной 115-летию со дня рождения Николая Ивановича Вавилова (Москва, 21-22 февраля 2003 г.), на конференции "Современное состояние проблем и достижений в области генетики и селекции", (Алматы, 26-27 марта 2003 г.), на 7-й Пущинской школе-конференции молодых ученых "Биология - наука XXI века" (Пущино, 21-27 апреля 2003 г.).

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Крупенин, Роман Вячеславович

из выводы

1. Показана возможность трансгенного сортоулучшения сортов картофеля по признакам устойчивости к фитофторозу, альтернариозу, сухой фузариозной гнили, обыкновенной парше с помощью конструкции рК22 с целевым геном дефензина редьки rs и маркерным nptll посредством штаммов LBA4404 и LGV3850 Agrobacterium tumefaciens и А4 Agrobacterium rhizogenes.

2. Получено 80 трансгенных линий: 17 сорта Синецвет, 5 сорта Лорх, 29 сорта Голубизна, 14 сорта Жуковский ранний, 12 сорта Ильинский и 3 трансгенные линии сорта Раменский. В соответствии с задачами по коррекции сортов все линии оценены на устойчивость к грибным болезням картофеля: фитофторозу по листьям и по клубням, альтернариозу (линии всех сортов), ризоктониозу (линии сортов Синецвет, Жуковский ранний и Голубизна), к сухой фузариозной гнили (линии сорта Раменский) и парше обыкновенной (линии сорта Лорх). Выявлены трансгенные линии со статистически достоверными положительными отклонениями по устойчивости от исходного сорта.

3. Оптимизирована методика трансформации: найдена оптимальная концентрация канамицина для селекции регенерантов, экспрессирующих маркерный ген nptll — 25 мг/л; установлено положительное влияние темноты на этапе предынкубации эксплантов; подобрана оптимальная экспозиция кокультивации эксплантов картофеля с агробактерией - 1 час; установлено, что воздействие на экспланты низкой положительной температуры 4°С существенно увеличивает выход регенерантов до 82%; установлено влияние генотипа на интенсивность регенерации и выход регенерантов. Сорта Голубизна, Жуковский ранний, Ильинский обладают высоким регенерационным потенциалом, сорт Раменский и Лорх - низким. Подобраны оптимальные концентрации регуляторов роста, обеспечивающие интенсивную регенерацию эксплантов картофеля при трансформации штаммом А4 Agrobacterium rhizogenes - 0,1 мг/л ИУК, 3 мг/л БАП и 10 мг/л

ГК. Установлена зависимость между ярусами .междоузлий, взятых в качестве эксплантов пробирочных растений и выходом регенерантов - экспланты верхних ярусов обладают наибольшей регенерационной способностью по сравнению с эксплантами среднего и нижнего ярусов междоузлий. Установлено влияние агробактериального штамма, несущего генетическую конструкцию с геном rs на выход трансгенов. Наибольший выход трансгенов наблюдался при использовании штамма АЛ Agrobacterium rhizogenes - 15,6 %. Эффективность трансформации при использовании оптимизированной методики составила 1,9-2,7% по сорту JIopx, 6,4-7,0% по сорту Синецвет, 0,9-11,8% по сорту Жуковский ранний, 2,1-9,5% по сорту Ильинский, 5,915,6% по сорту Голубизна и 2,6 по сорту Раменский.

4. Выстроена система доказательств трансгенной природы регенерантов: селекция на канамицин-содержащих средах, ПЦР на целевой rs-ген, анализ частот встречаемости линий с различной степенью устойчивости к патогенам.

5. Оценены частоты встречаемости трансгенов с повышенной устойчивостью по всем исследуемым сортам для фитофтороза по листьям 33-80%, фитофтороза по клубням 20-100%, альтернариоза 25-100%. Максимальные отклонения по данным оценок искусственных заражений и визуальных наблюдений от исходного сорта по

- фитофторозу листьев у линий Л13 на 3,5 балла; Си19 и Си31 на 2,1 баллов; Ж139 на 2,9 балла; И132 на 2,2 балла; Г12 на 1,5 балла;

- фитофторозу клубней у линий Л13 на 1 балл; Си19 и СиЗЗ на 3 балла; Ж139 на 3,2 балла; И125 на 3,2 балла; Г126 на 2,5 балла; Ра105 на 2,6 балла;

- альтернариозу у линий Л2 на 4,3 балла; СиЗЗ на 4,7 балла; Ж139 на 5,7 балла; И104 на 2,2 балла; Г13 и Г23 на 4,4 балла; Pal 05 на 2,6 балла;

- сухой фузариозной гнили у линии Pal05 на 2,2 балла - на основании результатов оценок с помощью искусственных заражений листьев и клубней;

- парше обыкновенной у линии JI13 на 4,5 балла - по результатам визуальной оценке в поле.

6. Оценена урожайность трансгенных растений с повышенной устойчивостью к болезням в сравнении с исходным нетрансгенным сортом в вегетационном и полевых опытах. Отобраны линии с урожайностью на уровне или выше стандарта: Л13 (365 г/раст.), Си19 (300 г/раст.), Си31 (400 г/раст.), Ж139 (600 г/раст.), И115 (700 г/раст.), И132 (600 г/раст.), Г12 (1300 г/раст.), Г13 (700 г/раст.), Г27 (600 г/раст.) и Pal05 (510 г/раст.).

7. В результате анализа линий по комплексной устойчивости и урожайности выделено 10 трансгенных образцов для предложения авторам исходных сортов в качестве стартового материала на улучшенную сортоформу.

8. По фенотипичесиким характеристикам выявлено 11% отличных от стандартов трансгенных линий при сравнении трансгенных линий с исходными нетрансгенными формами.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ

1. Для дальнейших испытаний как сортоулучшенные образцы рекомендуются трансгенные линии с повышенной комплексной устойчивостью к грибным заболеваниям и урожайностью не ниже стандарта: Л13 сорта Лорх, Си19 и Си31 сорта Синецвет, Ж139 сорта Жуковский ранний, И115 и И132 сорта Ильинский, Г12, Г13 и Г27 сорта Голубизна и Ра 105 сорта Раменский.

2. Для использования в скрещиваниях или в качестве родительской формы в селекционном процессе на целевую устойчивость к фитофторозу рекомендуются линии Л13, Си19, Си31, СиЗЗ, Ж139, И125, И132, Г126 и Ра105; на целевую устойчивость к альтернариозу линии Л2, СиЗЗ, Ж139, И104, Г13, Г23 и Ра 105; на целевую устойчивость к сухой фузариозной гнили линию Pal05; на целевую устойчивость к обыкновенной парше картофеля линию Л13.

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Крупенин, Роман Вячеславович, 2004 год

1. Анисимов Б.В. Сорта картофеля, возделываемые в Российской Федерации. Каталог. М.: Информагротех, 1999. - 113 с.

2. Анисимов Б.В. Сортовые ресурсы и передовой опыт семеноводства картофеля. М.: ФГНУ Росинформагротех, 2000. - 152 с.

3. Аш О.А., Коваленко Е.О., Коломиец Т.М., Майсурян А.Н., Мазин

4. B.В. Агробактериальная трансформация томата геном дефензина// Материалы Международной науч.-практ. конф. "Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке". М., 2000. - Т. 1. - С. 113-114.

5. Батинг Г., Контор Ч., Коллинз Ф. и др. Анализ генома. Методы: Пер. с англ. М.: Мир, 1990. - С. 176-190.

6. Бебре Г.Т. Видовой и штаммовый состав возбудителя сухой гнили рода Fusarium в Прибалтике// Защита картофеля от болезней и вредителей. М., 1984. - С. 90-93.

7. Березовский М.И. Особенности проявления сухой фузариозной гнили на клубнях картофеля в Беларуси// Вопросы картофелеводства. — М., 1999.-С. 13-16.

8. Бордукова М.В. Ризоктониоз и белая ножка на картофеле// Картофель и овощи. 1970. - №4. - С. 42-44.

9. Будин К.З. Генетические основы селекции картофеля. Л.: Агропромиздат, 1986. - 192 с.

10. Бурьянов Я.И. Успехи и перспективы генно-инженерной биотехнологии растений// Физиол. растений. 1999. - Т. 46. - №5. —1. C. 930-944.

11. Бусько И.И., Козлова Л.И. Некоторые биологические особенности возбудителя сухой фузариозной гнили картофеля F. sambucinum// Актуал. пробл. соврем, картофелеводства. Минск, 1997. - С. 68-69.

12. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.: Наука, 1964. - 272 с.

13. Воловик А.С. с соавторами. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков (справочник).- М.: Агропромиздат, 1989. -285 с.

14. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство: Пер. с англ./ Под ред. Дж. Дрейпера, Р. Скотта, Ф. Армитиджа, Р. Уолдена. М.: Мир, 1991.-408 с.

15. Горковенко М.Н. Сорта, устойчивые к вирусным и грибным болезням (в условиях Северо-Кавказского региона). Пущино, 1996. - Вып. 2. - С. 92-95.

16. Гостимский С.А. Генетическая изменчивость клеток растений при культивировании// Успехи современной генетики. М.: Наука, 1987.-Вып. 14,-С. 48-63.

17. Гросс O.K. Ризоктониоз картофеля// Защита растений. 1985. - Т. 2. -С. 56.

18. Данченко М.И. Биологические особенности обычной расы возбудителя рака картофеля различного географического происхождения// Защита растений. 1989. - Т. 14. - С. 32-35.

19. Дмитриева Е.П. Разработка методов устойчивости картофеля к альтернариозу и характеристика картофеля по этому признаку: Автореф. на соиск. степ. канд. с.-х. наук. М., 1988. - 21 с.

20. Долягин А.Б., Писаренко Э.К., Капустина В.М. Характеристика Synchytrium endobioticum (Schilb.) при инактивации// Актуал. проблемы картофелеводства. М., 1993. - С. 62-71.

21. Дорожкин Н.А., Вельская С.И. Болезни картофеля. Минск: Наука и техника, 1979. - 314 с.

22. Дорожкин Н.А., Вельская С.И., Алексеева Т.П., Новикова Л.М. Гнили картофеля при хранении// Картофель и овощи. 1982. - №10. - С. 1314.

23. Дорожкин Н.А., Куневич Р.В. Вирулентность и паразитическая специализация штаммов гриба Rhizoctonia solani Kiihn// Микология и фитопатология. 1968. - Т.2. - № 5. - С. 408-413.

24. Дорожкин Н.А., Михальчик В.Т. Методы оценки устойчивости к фузариозной гнили. Селекция и семеноводство, 1979. - №3. - С. 18— 20.

25. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). 5-е изд., доп. и перераб. - М.: Агропромиздат, 1985.-351 с.

26. Дьяков Ю.Т., Филиппович А. Относительная роль генов и полигенов в устойчивости клубней картофеля к фитофторозу// Картофель и овощи. 1967. - №2. - С. 32-36.

27. Ерохина С.А., Данилова Е.А. Методы определения патогенности штаммов парши {Actinomyces) для их использования в лабораторной оценке на устойчивость// Селекция и сортовая агротехника картофеля. Вып. 28. - М., 1977. - С. 75-82.

28. Ефремова Н.Н., Крашенинникова Л.В. Получение трансгенных растений картофеля, экспрессирующих человеческий альфа-интерферон и двунитевую РНК// Вопросы картофелеводства. -Научные труды ВНИИКХ. М., 1994. - С. 74-78.

29. Захарова Л.Н. Оценка сеянцев картофеля на устойчивость к ризоктонии// Науч. труды ВНИИКХ. М., 1979. - Вып. 33. - С. 7982.

30. Захарова JI.H., Михеева Л.П. Поражаемость ростков картофеля ризоктонией при искусственном заражении// Научн. труды Сев.-Зап. НИИ с.-х. М„ 1975. - Вып. 34. - С. 99-101.

31. Иванова Н.Г. Разработка селективного фактора для проведения клеточной селекции на устойчивость к Corynebacterium sepedonicum!7 Использование клеточных технологий в селекции картофеля. Науч. труды. - М., 1987. - С. 26-28.

32. Иванюк В.Г. Взаимодействие рас гриба Alternaria solani (Ell. et Mart.) Jones et Grout, с сортами картофеля// Защита растений. 1991. - Т. 16. -С. 58-66.

33. Иванюк В.Г. Особенности проявления альтернариоза картофеля// Актуал. пробл. адаптив. интенсификации земледелия на рубеже столетий. Минск, 2000. - С. 315-318.

34. Иванюк В.Г., Бусько И.И. Видовой состав возбудителей парши обыкновенной картофеля и меры борьбы с болезней в условиях Белорусской ССР// Защита растений. Минск: Ураджай, 1990. - С. 58-63.

35. Иванюк В.Г., Палилова А.Н. Структура популяции Alternaria solani (Ell. et Mart.) Jones et Grout. возбудителя альтернариоза картофеля и ее динамика в условиях Белоруссии// Микология и фитопатология. -1996. - Т. 30. - Вып. 3. - С. 66-74.

36. Камераз А .Я., Яшина И.М., Склярова Н.П. Генетика устойчивости картофеля к патогенам// Генетика картофеля.- М.: Наука, 1973. С. 175-233.

37. Капустина В.М. Распространенность и развитие ризоктониоза на картофеле в зависимости от сортовых особенностей и климатических условий. Вопросы картофелеводства. - М., 1994. - С. 161-167.

38. Картель Н.А. Биоинженерия: методы и возможности. Минск: Ураджай, 1989.- 143 с.

39. Каталог сортов картофеля селекции ВНИИКХ. М.: ВНИИКХ, 1993. - 109 с.

40. Кваснюк Н.Я., Козловский Б.Е. Альтернариоз картофеля// Защита растений. 1985. - Т. 11. - С. 27-28.

41. Кирай 3., Клемент 3., Ф. Шоймоши, Й. Вереш. Методы фитопатологии: Пер. с англ. М.: Колос, 1974. - 343 с.

42. Комплексная система защиты картофеля от болезней, вредителей и сорняков (практическое руководство). М.: ЦНТИПР, 1995. — 69 с.

43. Константинович А.А., Иванюк В.Г. Особенности проявления фитофтороза картофеля в Белоруссии и некоторые приемы снижения его вредности// Защита растений. Минск: Ураджай, 1991. - С. 7383.

44. Коршунов А.В. Современные технологии возделывания картофеля// Агро XXI, приложение. Эффективные технологии производства картофеля. М., 1999. - С. 9-10.

45. Кузнецова Т.Н. Рак картофеля// Наука практики. 1999. - №3. - С. 6.

46. Кукушкина JI.H., Юрьева Н.О., Кукушкин Н.И. Экспресс-метод диагностики устойчивости к фитофторе сомаклонов картофеля in vitro// Научные труды ВНИИКХ. Вопросы картофелеводства. -1994.-С. 62-66.

47. Куневич Р.В. К вопросу об устойчивости сортов картофеля к ризоктонии// Экспериментальная ботаника. Минск: Высшая школа, 1966. - С.123-128.

48. Курочкина С.Д. Получение трансгенных растений картофеля: Автореф. дисс. на соиск. уч. степ. канд. биолог, наук. Минск, 1995. -21 с.

49. Кучук Н.В. Генетическая инженерия высших растений. Киев: Наукова думка, 1997. - 152 с.

50. Кучук Н.В., Каневский И.Ф. Методы генетической трансформации растений// Физиология растений. 1987. - №3. - С. 30-31.

51. Левенко Б.А. Трансгенные растения. Современное состояние, проблемы, перспективы. Киев: Дошкольник, 2000. - 305 с.

52. Лихтенштейн К., Дрейпер Дж. Клонирование ДНК // Генетическая инженерия растений. Методы. М.: Мир, 1988. - С. 315-380.

53. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. М.: Мир, 1984.-480 с.

54. Методика исследований по защите картофеля от болезней, вредителей, сорняков и иммунитету. М.: ВНИИКХ, 1995. - 106 с.

55. Методические указания по оценке селекционного материала картофеля на устойчивость к фитофторозу, ризоктониозу, бактериальным болезням и механическим повреждениям. М., 1980. -53 с.

56. Методические указания по получению вариантных клеточных линий и растений у разных сортов картофеля. М.: ВАСХНИЛ, 1984. -28 с.

57. Методические указания по получению трансформированных растений картофеля. М.: ВНИИКХ, 1995. - 14 с.

58. Методы оценки картофеля на устойчивость к клубневым гнилям (рекомендации)/ Под. ред. Н.А. Дорожкина. Минск: Наука и техника, 1985. - 17 с.

59. Мусин С.М. Полиморфизм белков картофеля и возможности его использования в селекции и семеноводстве// Использование клеточных технологий в селекции картофеля. Науч. труды. - М., 1987.-С. 77-88.

60. Остерман J1.A. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. М.: Наука, 1983. - 304 с.

61. Остерман JI.A. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот// Электрофорез и ультрацентрифугирование. Практическое пособие. -М.: Наука, 1981.-283 с.

62. Парашина Е.В. Создание и характеристика форм томатов (Lycopersicon esculentum М.), экспрессирующих ген дефензина редьки R.S-AFP2: Автореф. на соиск. степ. канд. биол. наук. М., 1999. - 20 с.

63. Парашина Е.В., Лаврова Н.В., Аветисов В.А. Использование гена защитного пептида (дефензина) из семян редьки для повышения устойчивости томата к фитопатогенным грибам// Материалы IV съезда Об-ва физиологов России. М., 1999. - С. 661-662.

64. Парашина Е.В., Сердобинский Л.А., Калле Е.Г., Лаврова Н.В., Аветисов В.А., Лунин В.Г., Народицкий Б.С. Получение трансгенных растений рапса и томата, экспрессирующих ген дефензина редьки// Физиология растений. 2000. - Т. 47. - № 3. — С.471-478.

65. Парашина Е.В., Шаденков А.А., Лаврова Н.В., Аветисов В.А. Использование гена защитного пептида из семян редьки для повышения устойчивости томата к заболеваниям, вызываемым грибами.// Биотехнология. 1999. - № 6. - С. 35-41.

66. Пересыпкин В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология. — 4-е изд., перераб. и доп. М.: Агропромиздат, 1989. - 480 с.

67. Подгаецкий А.А., Коваль Н.Д. Поиск источников устойчивости к сухой фузариозной гнили// Селекция и биотехнология картофеля. -Научные труды ВНИИКХ. М., 1990. - С.38-43.

68. Поддержание и хранение коллекционных образцов картофеля в условиях in vitro. Методические указания. Л.: ВНИИ растениеводства им. Вавилова (ВИР). - 40 с.

69. Попадьин П.В. Применение агробактериальной трансформации в селекции белокочанной капусты на устойчивость к болезням: Автореф. на соиск. степ. канд. биол. наук. М., 2002. - 20 с.

70. Попкова К.В., Векогон В.Г. Ризоктониоз картофеля// Картофель и овощи. 1967. - №3. - С. 33-34.

71. Попкова К.В., Воловик А.С., Шнейдер Н. Защита картофеля в индустриальной технологии. М.: Россельхозиздат, 1986. -150 с.

72. Попкова К.В., Шнейдер Ю.И., Воловик А.С., Шмыгля В.А. Болезни картофеля. М.: Колос, 1986. - 304 с.

73. Постников А.Д., Постников Д.А. Картофель. Сорта, болезни, вредители, сорняки и меры борьбы с ними. М.: ТОО РУПОР, 1994. -48 с.

74. Рассадина Г.В. Возможности клеточного уровня организации генотипа для повышения устойчивости растений картофеля к патогенам и стрессам// Использование клеточных технологий в селекции картофеля. Науч. труды. - М., 1987. - С. 19-25.

75. Салтыкова Л.П., Тарасова В.П. Методические указания по испытанию картофеля на ракоустойчивость. Л.: ВАСХНИЛ, 1982. -49 с.

76. Самерсов В.Ф., Иванюк В.Г. Фитофтороз картофеля// Защита растений. 1992. - №5. - С.21-22.

77. Селекция картофеля и интенсивная технология его выращивания/ П.И. Альсмик и др. Минск, 1986. - 48 с.

78. Сельскохозяйственная биотехнология/ B.C. Шевелуха, Е.А. Калашникова, С.В. Дегтярев и др.: Под ред. B.C. Шевелухи. -М.: Высш. школа, 1998. 416 с.

79. Сердобинский Л.А. Создание векторных конструкций, содержащих гены фунгицидно-бактерицидных пептидов, и анализ полученных с их помощью растений: Автореф. на соиск. степ. канд. биол. наук. — М., 2002. 20 с.

80. Сердобинский Л.А., Шаденков А.А., Ковалева М.В., Лунин В.Г. Создание генетических конструкций, содержащих гены дефензинов и анализ трансформированных с помощью них растений табака// Материалы IV Об-ва физиологов России. М., 1999.-С. 693.

81. Созинов А.А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции. М.: Наука, 1985. - 272 с.

82. Сорта картофеля селекции ВНИИКХ. М.: Колос, 2000. - 36 с.

83. Справочник картофелевода/ Под. ред. А.И. Замотаева. М.: Агропромиздат, 1987.-351 с.

84. Стратегия и тактика защиты картофеля от фитофтороза. Метод, рекомендации. - М.: ВАСХНИЛ, 1990. - 41 с.

85. Суркова Т.А. Диагностика фузариозных гнилей// Защита растений. -1982.-№11.-С. 36-41.

86. Толкачев Б.С. Устойчивость селекционного материала картофеля к раку// Актуал. проблемы фитовирусологии и защиты растений. -Минск, 1997.-С. 88.

87. Уткин М.С. Иммунитет сортов картофеля к Phytophthora infestans и Rhizoctonia solani и обоснование иммунитета// Труды Всероссийского энтомолого-фитопат. 2-го съезда. Петроград, 1921. - С. 136-152.

88. Хромова Л.М. Перспективы использования клеточно-инженерных работ для создания исходных форм и сортов картофеля// Использование клеточных технологий в селекции картофеля. -Научные труды. М., 1987. -С. 113-124.

89. Ху Чжун, Го Гуаньцинь, Чжао Дунли, Ли Лихуа, Чжэн Гочан. Регенерация побегов из листовых эксплантов Lycium barbarum и агробактериальная трансформация// Физиология растений. — 2000. -Т. 48.-№4.-С. 529-535.

90. Шаденков А.А., Лунин В.Г., Лаврова Н.В. и др. Создание трансгенных растений табака и картофеля, несущих ген пептидного антибиотика Amarantus caudatusll Материалы VIII конференции "Новые направления биотехнологии". М., 1998. - С. 33.

91. Шаденков А.А., Ковалева М.В. и др.// Молекулярная биология. -1996. Т. 30. - №2. - С.454-460.

92. Шпаар Д., Иванюк В., Шуманн П., Постников А. и др. Картофель/ Под ред. Д. Шпаара. Минск: ФУАинформ, 1999. - 272 с.

93. Шуманн П. С поля в хранилище: без окольных путей// Новое сельское хозяйство. 1999. - № 2. - С. 38-39.

94. Шушукова Т.В., Тюкавин Г.Б., Долгов С.В. Генетическая трансформация моркови (Daucus carota) геном суперсладкого белка и геном дефензина редиса// Материалы III Пущинской конференции молодых ученых. Пущино, 1998.- С. 104-105.

95. Яковлева В.А. Рак картофеля// Защита растений. 1989. - Т. 4. - С. 52-53.

96. Albright L.M., Yanofsky M.F., Leroux В., Ma D., Nester E.W. Propcessing of the T-DNA of Agrobacterium tumefaciens generates bordernicks and linear, single stranded T-DNA// J. Bact. 1987. -Vol.169.-P. 1046-1055.

97. Altenbach S.B., Pearson K.W., Leung F.W., Sun S.S.M. Cloning and sequence analysis of a cDNA encoding a Brazil nut protein exceptionally rich in methionine/ Plant Mol. Biol. 1987. - Vol. 8. - P. 239-250.

98. Ampe C., Van Damme J., de Castro L.A.B. et al. The amino-acid sequence of the 2S sulphur-rich proteins from seeds of Brazil nut (Bertholletia excelsa H.B.K.)// Eur. J. Biochem. 1986. - Vol. 159. - P. 597-604.

99. Benhamou N., Broglie K., Broglie R., Chet I. Antifungal effect of bean endochitinase on Rhizoctonia solani, ultrastructural changes and cytochemical aspects of chitin breakdown// Canad. Journal of Microbiol. -1993.-Vol. 39.-P. 318-328.

100. Bevan M.W. Binary Agrobacterium vectors for plant transformation// Nucleic Acids Res. 1984. - Vol. 12. - P. 8711-8721.

101. Bevan M.W., Flavell R.B., Chilton M.D. A chimaeric antibiotic resistance gene as selectable marker for plant cell transformation// Nature. 1983.-Vol. 303.-P. 184-187.

102. Bloch C., Richardson M. A new family of small (5 kDa) protein inhibitors of insect a-amylases from seeds of sorghum {Sorghum bicolor (L)

103. Moench) have sequence homologies with wheat y-purothionins. FEBS Lett. 1991. - Vol. 279. - P. 101-104.

104. Bohlmann H. The role of thionins in plant protection Crit. Rev. Plant Sci. -1994.-Vol. 13.-P. 1-16.

105. Bol J.F., Linthorst H.J.M., Cornellissen B.J.C. Plant pathogenesis-related proteins induced by virus infection// Annu. Rev. Phytopathol. -1990. -Vol.28.-P.l 13-138.

106. Boman H.G. Peptide antibiotics and their role in innate immunity// Annu. Rev. Immunol. 1995. -Vol.13. - P. 61-92.

107. Bounois G. Principles of Gene Cloning and Analysis: A Laboratory Guide. Blackwell Scientific Publication, Oxford, 1987.

108. Brian P.W., Elson G.W., Hemming J.M., Wright J:M. The phutotoxic properties of alternaric acid in relation to the etiology of plant diseases caused by Alternaria solaniII Ann. Appl. Biol. 1962. - Vol. 39. - № 3. -P. 308-321.

109. Broekaert W.F. et al. Antimicrobial peptides from plants// Plant Sci. -1998.-Vol. 16.-P. 297-323.

110. Broekaert W.F. et al. Biocidal proteins// WO 92/21699, 1992.

111. Broekaert W.F. et al. Biocidal proteins// WO 93/05153, 1993.

112. Broekaert W.F., Terras F.R.G., Cammue B.P.A. and Osborn R.W. Plant defensins: novel antimicrobial peptides as components of the host defence system// Plant Physiol. 1995. - Vol. 108. - P. 1353-1358.

113. Broggio M. Ranucci A. Screening potato genotypes for resistance to Alternaria solani through in vitro infection of regenerant calli and micropropagated plantlets// Riv. Agr. subtrop. trop. 1990. - An.84. -№3. — P. 534-537.

114. Bruix et al. Solution structure of gamma 1-H and gamma 1-P. thionins from barley and wheet endosperm determined by 'H-NMR: a structural motif common to toxic arthopod protheins// Biochemistry. 1993. - Vol. 132.-P. 715-724.

115. Butenko P.G. et al. New forms of potato created by cell and protoplast culture methods. Tissue Culture and RES. (Eds: P.Rohlich and E. Bacsy), 1984.-P. 515-527.

116. Callis J., Fromm M., Walbot V. Introns increase gene expression in cultured maize cells// Genes and Development. 1987. -Vol.1. - P. 1183— 1200.

117. Caplan A., Herrera-Estrella L., Inze D., Van Haute D., Van Montagu M., Schell J., Zambryski P. Introduction of genetic material into plant cells// Science. 1983. - Vol. 222. - P. 815-822.

118. Carrer H., Hockenberry T.N., Svab Z., Maliga P. Kanamycin resistance as a selective plastid marker// Mol. and Gen. Genet. 1993. - Vol. 241. - P. 49-56.

119. Chaband M., Passiatore J.E. Parameters affecting kanamycin resistant alfalfa obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation// Plant Cell Report 7. 1988. - Vol. 7. - P. 512-516.

120. Chang M.M., Chiang C.C., Martin M.W., Hadwiger L.A. Expression of a pea disease resistance response gene in the potato cultivar Shepody// Americ. Potato Journal. 1993. - Vol. 70. - P. 635-647.

121. Chiang C.C., Hadwiger L.A. The Fusarium solani-inducQd expression of a pea gene family encoding high cysteine content proteins// Mol. Plant Microbe Interact. 1991. - Vol. 4. - P. 324-331.

122. Collila F.J., Rocher A., Mendez E. Gamma purothionins: amino acid sequence of two polypeptides of a new family of thionins from wheat endosperm// FEBS Lett. 1990. - Vol. 270. - P. 191-194.

123. Constable C.P., Bertrand C., Brisson N. Transgenic potato plants overexpressing the pathogenesis-related Sth-2 gene show unaltered susceptibility to Phytophthora infestans and potato virus XI/ Plant Mol. Biol. 1993. - Vol. 22. - P. 775-782.

124. Constable C.P., Brisson N. The defense related Sth2 gene product of potato shows race - specific accumulation after inoculation with low concentrations of Phytophthora infestans zoospores// Planta. - 1992. -Vol. 188. - №3. - P. 289-295.

125. Epple P., Apel K. and Bohlmann H. An Arabidopsis thaliana thionin gene is inducible via a signal transduction pathway different from that for pathogenesis-related proteins// Plant Physiol. 1995. - Vol. 109. - P. 813— 820.

126. Ganz Т., Lehrer R.I. Defensins// Curr Opin Immunol. 1994. - Vol.6. - P. 584-589.

127. Edwards K., Johnstone C. and Thompson C. A simple and rapid method for the preparation of plant genomic DNA for Plant Cell Repts. analysis// Nucl. Acids Res. 1991. - Vol. 19. - №6. - P. 1349.

128. Fraley R., Rogers S., Horsch R. et al. Expression of bacterial genes in plant cells// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1983. - Vol. 80. - P. 4803-4807.

129. Gao A.-G. et al. Fungal pathogen protection in potato by expression of a plant defensin peptide. Nat. Biotechnol. 2000. - Vol. 18. - P. 13071310.

130. Golds J.S., Marrey L., Maegheim G.J., Jefferson N., Fraley R.T., Waldo M., Lindelmann T. Transformation of Onobrychis sativa using disarmed binary vector in Agrobacterium rhizogenesll Theor. Appl. Genet. 1991. -Vol. 82. - №3. - P. 264-271.

131. Gomi K., Yamamato H., Akimitsu K. Epoxide hydrolase: a mRNA induced by the fungal pathogen alternaria on rough lemon (Citrus jambhiri Lush)// Plant Mol. Biol. 2003. - Vol. 53 - №1. - P. 189-199.

132. Gotz E. Pathothypendefenition fei Ph. infestans (Mont) de Bary mittels in vitro-testortiment// Arch. Phythopathol. Pflanzenschutz. 1985. - Bd 21. -№4. - S. 265-271.

133. Gu Q., Kamata E.E., Morse M.J., Wu H.M., Cheung A.Y. A flower-specific cDNA encoding a novel thionin in tobacco// Mol. Gen. Genet. -1992.-Vol. 234.-P. 89-96.

134. Herrera-Estrella et al. Chimeric genes as selectable markers for plant cell transformation// EMBO J. 1983. - Vol. 24. - P. 987-995.

135. Hoffmann J.A., Hetru C. Insect defensins: inducible antibacterial peptides// Immunol. Today. 1992. - Vol.13. -P. 411-415.

136. Intrieri M.C., Vendramin G., Buiatti M. Horizontal flux of DNA, the case Nicotiana Agrobacterium rhizogenesll Assoc. Genet. Ital. 42 Conv. sci. Riccione, 2-5 ott. 1996. Atti. Assoc. Genet. Ital. - 1996. - Vol. 42. - P. 121-122.

137. Ishibashi N.,Yamauchi D., Minamikawa t. Stored mRNA in cotyledons of Vigna unguiculata seeds: nucleotide sequence of cloned cDNA for a stored mRNA and induction of its synthesis by precocious germination. Plant Mol. Biol. 1990. - Vol. 15. - P. 59-64.

138. Jensen J.S., Marcker K.A., Otten L., Schell J. Nodule-specific expression of a chimaeric soybean leghaemoglobin gene in transgenic Lotus corniculatisll Nature. 1986. - Vol. 321. - P. 669-674.

139. Karunanandaa В., Singh A., Kao T.-H. Characterization of a predominantly pistil expressed gene encoding a y-thionin-like protein of Petunia injlatall Plant Mol. Biol. 1994. - Vol. 26. - P. 459-464.

140. Keinonen-Mettala K., Weissenberg K. von. Improved method for Agrobacterium-mediated gene transfer in silver birch {B etui a pendula)// Abstracts of IX Intern. Congr. Plant Tissue Cell Culture, Jerusalem, June 14-19, 1998.- 1998.-P. 156.

141. Klee H.J., Gordon M.P., Nester E.W. Complementation analysis of Agrobacterium tumefaciens Ti-plasmid mutation affecting oncogenicity// J. Bacterid. 1982. - Vol. 150. - №2. - P. 327-331.

142. Klee H.J., Yanofsky M.F., Nester E.W. Vectors for transformation of higher plants// Biotechnol. 1985. - Vol. 3. - P. 637-642.

143. Lehrer R.I., Lichtenstein A.K., Ganz T. Defensins- antimicrobial and cytotoxic peptides of mammilian cells// Ann. Rev. Immunol. 1993. -Vol. 11.-P. 105-128.

144. Linthorst H.J.M. 1991. Pathogenesis-related proteins of plants// Crit. Rev. Plant Sci.-1991.-Vol. 10.-P. 123-150.

145. Liu D., Raghothama K.G., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Diseases responses to fungal infection in transgenic tobacco and potato plants that overexpress the osmotin gene// Plant Physiol. 1993. - Vol. 102. - P. 165.

146. Mackay G.R. An agenda for future potato research// Potato Research. -1996.-Vol. 39.-P. 387-394.

147. Martini N., Egen M., Runtz I., Strittmatter G. Promoter sequences of a potato pathogenesis-related gene mediate transcriptional activation selectively upon fungal infection// Mol. and General Genet. 1993. - Vol. 236.-P. 179-186.

148. Mascarenhas D., Mettler I.J., Pierce D. Lowe H. Intron-mediated enchancement of geterologous gene expression in maize// Plant Mol. Biol. 1990. - Vol. 15. - P. 913-920.

149. Matern U., Strobel G., Shepard J. Reaction to phytoxins in a potato population derived from mesophyll protoplasts// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978. - Vol. 75. - №10. - P. 4935-4939.

150. Melchers L.S., Regensburg-Tuink A.J.G.,Schilperoort R.A., Hooykaas P.J.J. Specifity of signal molecules in the activation of Agrobacterium virulence gene expression// Mol. Microbiol. 1989. - Vol. 3. - №7. - P. 969-977.

151. Mendez E. et al. Primary structure and inhibition of protein synthesis in eucaryotic cell-free system of a novel thionin, gamma-hordothionin, from barley endosperm// Eur. J. Biochem. 1990. - Vol. 194. - P. 533-539.

152. Moreno M., Segura A., Garcia-Olmedo F. Pseudothionin, a potato peptide active against potato pathogens// Eur. J. Biochem. 1994. - Vol. 223. - P. 135-139.

153. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture// Physiol. Plant. 1962. - Vol. 15. - P. 473497.

154. O'Farrel P.H. High resolution two dimensional electrophoresis of proteins// J. Biol. Chem. 1975. - Vol. 250. - P. 4007-4021.

155. Ollson К. Impact damage, gangrene and dry rot in potato. Important biochemical factors in screening for resistance and quality in breeding material. Svalov, 1989. - 129 p.

156. Ooms G., Hooykaas P.J.J., Moolenaar G., Schilperoort R.A. Crown gall plant tumors of abnormal morphology, induced by Agrobacterium tumefaciens carrying mutated octopone Ti-plasmids: analysis T-DNA functions// Gene. 1981. - Vol. 14. - P. 33-50.

157. Osborn R.W. et al. Isolation and characterization of plant defensins from seeds of Asteraceae, Fabaceae, Hippocastanaceae and Saxifragaceae// FEBS Lett. 1995. - Vol. 368. - P. 257-262.

158. Penninckx I.A.M:A., Eggermont K., Terras F.R.G. et al. Pathogen-induced systemic activation of a plant defensin gene in Arabidopsis follows a salicylic acid-independent pathway// Plant Cell. 1996. - Vol.8. - P. 2309-2323.

159. Perl A., Coutos-Tevenot P., Boulay M. Proteases for the improvement of the plant transformation// Abstracts of IX Intern. Congr. Plant Tissue Cell Culture, Jerusalem, June 14—19, 1998. 1998. - P. 46.

160. Ponstein A.S., Bres-Vloemans S.A., Sela-Buurlage M.B. et al. A novel pathogen- and wound-inducible tobacco (Nicotiana tabacum) protein with antifungal activity// Plant Physiol. 1994. - Vol. 104. - P. 109-118.

161. Shaw C.H., Watson M.D., Carter G.H. et al. The right hand copy of the nopaline Ti-plasmids 25 bp repeat is required for tumor formation// Nucl. Acid Res. 1984. -№12. - P. 6031-6041.

162. Shepard J., Bidney D., Shanin E. Potato protoplast in crop improvement// Science. 1980. - Vol. 208. -№17. - P. 39-44.

163. Spano S., Gordon M.P., Nester E.W., Gottwald F., Teela A., Cordell A.W. Genetic modification of alfalfa (Medicago sativus) development using Ri-plasmid// Biotechnol. 1987. - Vol. 5. - P. 267-274.

164. Stegemann H., Francksen H., Macko V. Potato proteins; genetic and physiological changes, evaluated by one- and two-dimensional PAA-gel-techniques// Z. Natur. 1973. - Vol. 28. - P. 722-732.

165. Stiekema W.I. et al. Molecular cloning and analysis of four potato tuber mRNAs. Plant Mol. Biol. 1988. - Vol. 11. - P. 255-269.

166. Sukhapinda K., Spivey R., Shanin E.A. Ri-plasmid as a helper for introducing vector DNA into alfalfa plants// Plant Mol. Biol. 1987. -Vol. 8.-P. 209-216.

167. Tempe J., Goldman A. Occurrence and biosynthesis of opines// Molecular Biology Plant Tumours. New York, Acad. Press, 1982. - P. 575-584.

168. Tepfer D. Transformation of several species of higher plants by Agrobacterium rhizogenes. Sexual transmission of the transformed genotype and phenotype// Cell. 1984. - Vol. 37. - P. 959-967.

169. Terras et al. A new family of basic cysteine-rich plant antifungal proteins from Brassicaceae species// FEBS Lett. 1993. - Vol. 316. - P. 233-240.

170. Terras et al. Analysis of two novel classes antifungal proteins from radish (Raphanus sativus L.) seeds// J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. - P. 15301-15309.

171. Terras et al. Small cysteine-rich antifungal proteins from radish (Raphanus sativus L.). Their role in host defense// Plant Cell. 1995. - Vol. 7. - P. 573-588.

172. Terras F. R. G., Penninckx I.A.M.A., Goderis I.J., Broekaert W.F. Evidence that the role of plant defensins in radish defense responses is independent of salicylic acid// Planta. 1998. - Vol.206. - P. 117-124.

173. Thevissen K., Ghazi A., De Samblanx G.W., Brownlee C., Osborn R.W. and Broekaert W.F. Fungal membrane responses induced by plant defensins and thionins// J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271. - P. 1501815025.

174. Tinland B. The integration of T-DNA into plant genomes// Trends Plant Sci.- 1996.-Vol. l.-P. 178-184.

175. Tu H.M., Godfrey L.W., Sun S.S.M., Expression of the Brazil nut methionine-rich protein and mutants with increased methionine in transgenic potato// Plant Mol. Biol. 1998. - Vol. 37. - P. 829-838.

176. Van den Elzen P.J.M., Jongedijk E., Melchers L.S., Cornelissen B.J.C. Virus and fungal resistance from laboratory to field// Philosoph. Transactions of the Royal Society of London Series B-Biological Sciences.- 1993. Vol. 342. - P. 271-278.

177. Van Loon L.C., Gerrittsen Y.A.M., Ritter C.E. Identification, purification and characterization of pathogenesis-related proteins from virus-infected Samsun NN tobacco leaves// Plant Mol.Biol. 1987. - Vol.9. - P. 593609.

178. Van Loon L.C., Pierpoint W.S., Boiler Т., Conejero V. Recommendations for naming plant pathogenesis-related proteins// Plant Mol. Biol. Reporter.- 1994. Vol.12. - P. 245-264.

179. Van Loon L.C., Van Strien. The families of pathogenesis-related proteins, their activities, and comparative analysis of PR-1 type proteins// Physiol, and Mol. Plant Pathol. 1999. - Vol. 55. - P. 85-97.

180. Wu G., Shortt B. J., Lawrence E. B. et al. Disease resistance conferred by expression of a gene encoding H202-generating glucose oxidase in transgenic potato plants// The Plant Cell. 1995. - Vol. 7. - P. 1357.

181. Yip W.K., Moore Т., Yang S.F. Differential accumulation of transcripts for four tomato 1-aminocyclopropane-l-carboxylate synthase homologs under various conditions// Proc. Nat-1 Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. - P. 2475-2479.

182. Yu D., Xie Z., Chen C., Fan B. and Chen Z. Expression of tobacco class II catalase gene activates the endogenous homologous gene and is associated with disease resistance in transgenic potato plants// Plant Mol. Biol.1999. Vol. 39. - P. 477-488.

183. Yun D.-J., Bressan R.A. and Hasegawa P.M. Plant antifungal proteins. In: J. Janick (Ed.) Plant Breeding Reviews. John Wiley, New York, 1997. -Vol. 14. - P. 39-88.

184. Zhen W., Chen X., Liang H., Hu Y., Gao Y., Lin Z. Enhanced late blight resistance of transgenic potato expressing glucose oxidase under the control of pathogen-inducible promoter// Chinese Science Bulletin.2000. Vol. 45. - №21. - P. 1982-1987.

185. Zoubenko O.V., Allison L.A., Svab Z., Maliga P. Efficient targeting of foreign genes into the tobacco plastid genome// Nucl. Acid. Res. 1994. -Vol. 22. - P.3819-3824.1. УТВЕРЖДАЮ- t О «01 i- /■> "->v . „„- ^^^-^мсрр^РАСХН