Совершенствование технологии кормовой биологически активной добавки из эндокринно-ферментного сырья тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.04, кандидат наук Кашинова, Эльта Басанговна

• Кашинова, Эльта Басанговна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Кашинова, Эльта Басанговна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение...........................................................................................4

Глава 1 Обзор научно-технической литературы..........................................9

1.1 Обзор рынка кормовых добавок, применяемых для профилактики и лечения заболеваний пищеварительной системы свиней...........................................9

1.1.1 Статистический анализ рынка кормовых добавок России.......................9

1.1.2 Кормовые добавки для профилактики и терапии заболеваний желудочно-кишечного тракта молодняка свиней.......................................................15

1.2 Традиционная концепция выделения биологически активных веществ из сырья животного происхождения............................................................22

1.3 Тканевая специфичность как перспектива совершенствования технологии биологически активных добавок..............................................................26

1.4 Заключение по обзору научно-технической литературы...........................31

Глава 2. Организация эксперимента, объекты и методы исследования...............33

2.1 Объекты исследования.....................................................................33

2.2 Организация и методы исследования...................................................33

2.3 Методы исследований.....................................................................36

2.3.1 Стандартные методы исследований......................................................36

2.3.2 Протеомные методы........................................................................36

2.3.3 Методы извлечения целевых биологически активных веществ................37

2.3.4 Методы исследования биологической активности in vitro.......................38

2.3.5 Методы исследования эффективности in vivo......................................39

Глава 3 Результаты исследования сырьевых источников..............................44

3.1 Результаты исследования химического состава сырья.............................44

Глава 4 Обоснование режимов и результаты оптимизации технологии кормовой добавки.....................................................................................................47

4.1 Научное обоснование параметров экстракции БАВ................................47

4.1.1 Оптимизация скорости перемешивания и времени экстракции...............53

4.1.2 Оптимизация соотношения экстрагент : сырье ...................................57

4.2 Результаты сравнительного исследования полученных экстрактов............62

4.2.1 Результаты анализа аминокислотного состава.....................................62

4.2.2 Результаты исследования белково-пептидного профиля полученных экстрактов.........................................................................................65

4.2.3 Результаты сравнительного анализа белково-пептидного профиля

смешанных экстрактов..........................................................................74

4.3 Комплексные исследования ультрафильтратов.......................................77

4.3.1 Результаты анализа белково-пептидного состава ультрафильтратов.........77

4.3.2 Результаты исследования биологической активности ультрафильтратов

in vitro..............................................................................................81

Глава 5 Оптимизированная технология кормовой добавки с использованием биотехнологических методов и исследование ее эффективности и безопасности методами in vitro и in vivo.....................................................................83

5.1 Обоснование получения комплексной кормовой добавки........................ 83

5.2 Результаты сравнительного исследования биологической активности кормовой добавки in vitro.....................................................................86

5.3 Результаты исследования эффективности кормовой добавки in vivo............89

5.4 Результаты исследования безопасности кормовой добавки.......................93

Глава 6 Технологическая часть...............................................................96

6.1 Характеристика сырья и ингредиентов, используемых для производства кормовой добавки...............................................................................97

6.2 Технология производства кормовой добавки.........................................98

6.3 Методы испытаний безопасности, физико-химических свойств, аминокислотного и белково-пептидного составов кормовой добавки.............101

6.4 Характеристика конечной продукции производства...............................103

6.5 Расчет экономической эффективности производства кормовой добавки.....105

Заключение.....................................................................................107

Список литературы...........................................................................109

Приложения.....................................................................................120

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование технологии кормовой биологически активной добавки из эндокринно-ферментного сырья»

Заболевания желудочно-кишечного тракта свиней представляют собой одну из важных проблем современного свиноводства [11, 27]. Актуальность ее, в первую очередь связана с увеличением поголовья свиней, как следствие, значительного роста объёма перерабатываемой продукции свиноводства. По состоянию на 1 апреля 2015 года было переработано 20 738 тыс. гол. свиней и получено 708,3 тыс. тонн продуктов убоя, что соответствует утвержденной Государственной программе импортозамещения на 2014-2015 гг. Среди многочисленных лекарственных средств, применяемых для сохранения поголовья и лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), наиболее часто применяют курсовые и кормовые антибиотики, однако длительное и нерациональное их использование снижает резистентность организма к грибковым и стафилококковым инфекциям, нарушает процессы пищеварения и обмена веществ, вследствие чего снижается прирост живой массы и качество животноводческой продукции, в том числе, в мясном сырье могут содержаться остаточные количества антибиотических средств. Кроме того, патогены имеют свойство приобретать резистентность к часто- и долго используемым антибиотическим препаратам, что также приводит к неэффективности применения антибиотиков [23, 81, 86].

В настоящее время большую популярность в ветеринарии приобретают средства природного происхождения из животного и рыбного сырья, в связи с их малотоксичностью и устойчивым терапевтическим действием при длительном применении (Старовойтова Н.П., 2004, Иванкина Н.Ф, 2003, Новикова М.В., 2003, Сергеева Г.Х., 2011). Биологически активные вещества (БАВ), выделенные из вторичных продуктов животноводства, в том числе эндокринно-ферментного сырья, могут использоваться в качестве основы для создания средств, направленных на коррекцию патологий ЖКТ свиней, в т.ч. кормовых добавок, которые, отличаясь высокой эффективностью, отсутствием эффектов привыкания и отмены, не будут влиять на качество животноводческой продукции. Кроме того, в современных экономических условиях глобального снижения производственной

мощности предприятий переработка и использование вторичного сырья в качестве кормовых добавок будет способствовать увеличению объёма выпускаемой продукции и рентабельности при реализации побочного сырья [66, 67].

Начиная с 30-х годов прошлого века во ВНИИМП проводились работы по изучению биологических свойств веществ, содержащихся в эндокринно-ферментном и специальном сырье, разрабатывались ферментативные и органопрепараты, такими учеными как Горбатов В.М., Гуров В.А., Белоусов А.А., Стекольников Л.И., Александрова Н.А., Алехина Л.В. Накопленные многочисленные данные, полученные учеными и развитие техники дает возможность значительного усовершенствования методов получения препаратов и кормовых добавок.

В период 2007-2010 гг. была разработана кормовая добавка «Колимак», представляющая собой лиофильно высушенные водные экстракты поджелудочной железы, слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки свиней, содержащая в качестве активных начал смесь ферментов, проферментов и белково-пептидных комплексов. Модельные (in vivo) и клинические исследования на поросятах показали высокий терапевтический и профилактический эффект кормовой добавки при расстройствах пищеварения. С развитием методов выделения и современных знаний об определяющей роли коротких пептидов, возникла необходимость удаления балластных примесей и концентрирования целевых БАВ для увеличения эффективности и биодоступности кормовой добавки. Данный аспект определяет актуальность совершенствования технологии выделения БАВ из вторичного сырья животного происхождения для повышения их содержания, сохранности и контроля в готовом продукте за счёт изменения отдельных стадий, а также детального анализа белково-пептидного состава.

Целью настоящей работы является совершенствование технологии получения целевых биологически активных веществ из эндокринно-ферментного сырья и создание высокоэффективной кормовой добавки для повышения продуктивности и профилактики заболеваний ЖКТ поросят.

В рамках поставленной цели решались следующие основные задачи:

1. Провести анализ способов совершенствования технологии выделения биологически активных веществ из эндокринно-ферментного сырья.

2. Изучить влияние параметров экстракции на выход белково-пептидных веществ и их сохранность при различных режимах экстракции путем определения белково-пептидного и аминокислотного состава исследуемых экстрактов органов.

3. Определить режимы фракционирования с целью совершенствования технологии кормовой добавки путем выявления целевой фракции, подтвердить её биологическую активность методом in vitro.

4. Провести комплексные исследования полученной кормовой биологически активной добавки, включая изучение биологической активности, эффективности и безопасности методами in vitro и in vivo.

5. Разработать комплексный подход к оценке контроля содержания целевых биологически активных веществ в кормовой добавке.

6. Разработать стандарт организации и лабораторный регламент на производство кормовой биологически активной добавки и рассчитать ее себестоимость.

Научная новизна

Установлено, что подбор оптимальных режимов экстракции позволяет увеличить выход БАВ из эндокринно-ферментного сырья. Применение метода ультрафильтрации способствует удалению балластных веществ и концентрированию целевых биологически активных веществ. Методом in vitro установлено, что активность кормовой добавки коррелирует с увеличением содержания веществ пептидной природы. В модельных (in vivo) исследованиях установлен терапевтический эффект кормовой добавки. Разработан комплексный подход к оценке контроля качества и безопасности кормовой добавки, включающий электрофоретические исследования, высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и биологические методы in vitro и in vivo.

Теоретическая и практическая значимость работы

Усовершенствована и научно-обоснована технология биологически активных пептидных веществ животного происхождения, которая может быть использована для получения кормовой добавки для профилактики и лечения заболеваний ЖКТ сельскохозяйственных животных.

Подобраны методы контроля процессов экстракции, очистки и концентрирования биологически активных веществ из эндокринно-ферментного сырья, разработан Лабораторный регламент на производство кормовой добавки, «Программа и методики исследовательских испытаний безопасности, физико-химических свойств, аминокислотного и белково-пептидного составов», СТО 00419779-005-2016 на производство кормовой добавки.

Методология и методы исследования

В работе использованы химические, биохимические и биологические методы, включая методы in vitro и in vivo для оценки действия БАВ, а также физико-химические, электрофоретические и хромато-масс-спектрометрические исследования для анализа белково-пептидного состава биологически активных веществ.

Положения, выносимые на защиту

1. Установлена зависимость влияния параметров экстракции на выход целевых биологически активных веществ из эндокринно-ферментного сырья свиней, определена их сохранность при различных режимах экстракции.

2. Усовершенствована технология кормовой добавки, посредством концентрирования целевых низкомолекулярных биологически активных веществ методом ультрафильтрации.

3. Разработан комплексный подход для контроля содержания биологически активных веществ и определения биологической активности кормовой добавки.

4. Установлено, что усовершенствованная технология позволяет достичь оптимальных характеристик - добавка, являясь слаботоксичной, обладает высокой биологической активностью, улучшает общее состояние животных и способствует нормализации функций пищеварительного тракта.

Степень достоверности и апробация работы

Достоверность результатов работы подтверждается корректным использованием теоретических и экспериментальных методов обоснования полученных результатов, выводов и рекомендаций. Достоверность экспериментальных данных обеспечивается использованием современных средств и методик проведения исследований. Положения теории основываются на известных достижениях фундаментальных и прикладных научных дисциплин, сопряженных с предметом исследования диссертации.

Результаты исследования доложены на: 18-й Международной научно-практической конференции, посвященной памяти Василия Матвеевича Горбатова «Развитие биотехнологических и постгеномных технологий для оценки качества сельскохозяйственного сырья и создания продуктов здорового питания» (г. Москва, 2015); в рамках XIII международной специализированной выставки "Мир биотехнологии 2015" (г. Москва, 2015); Х Международной научной конференции студентов и аспирантов «Техника и технология пищевых производств» (г. Могилев, 2016); IV Международной конференции «Биотехнология: наука и практика» (г. Ялта, 2016). Результаты работы были удостоены:

- Бронзовой медали Всероссийского Смотра-конкурса лучших инновационных разработок «За разработку инновационного средства для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных России» (в соавторстве с Федуловой Л.В.) (г. Волгоград, 2013 г.);

- Персональной стипендии им. В.М. Горбатова в области фундаментальных и прикладных исследований в науке о мясе за 2015 г;

- Диплома РАН за победу в конкурсе на лучшую научно-исследовательскую работу в рамках Х Международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов отделения сельскохозяйственных наук РАН (27 октября 2016 г.).

Заключение диссертации по теме «Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств», Кашинова, Эльта Басанговна

Заключение

1. Проведенный анализ совершенствования технологии кормовой добавки выявил, что для увеличения эффективности и биодоступности биологически активных веществ необходимо оптимизировать параметры экстракции за счет варьирования величины гидромодуля, скорости и времени перемешивания. Установлены оптимальные параметры выделения БАВ, включающие: соотношение сырье : экстрагент - 1:5, скорость перемешивания - 600 об/мин, время экстракции для поджелудочной железы и двенадцатиперстной кишки - 2 часа, слизистой оболочки желудка - 3 часа.

2. Выявлено присутствие в экстрактах поджелудочной железы, слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки белково-пептидных веществ в диапазоне молекулярных масс от 50 до 30 кДа и менее 20 кДа. Анализ пептидного профиля выявил наличие в экстракте поджелудочной железы 16 тканеспецифичных пептидов, в экстрактах слизистой оболочки желудка - 33 и двенадцатиперстной кишки - 35.

3. Установлено, что смесь низкомолекулярных фракций экстрактов исследуемых органов (Мм менее 5 кДа), обладает высокой биологической активностью в исследованиях in vitro. Индекс площади эксплантатов желудка и кишечника куриного эмбриона превышал 50 %, относительно контроля. За счет оптимизации параметров экстракции, выделения и концентрирования низкомолекулярных биологически активных веществ усовершенствована технология кормовой добавки.

4. В эксперименте in vivo выявлена антиульцерогенная активность (превышает 2 единицы) полученной кормовой биологически активной добавки. Показано, что усовершенствованная технология позволяет получить безопасный продукт, обладающий высокой биологической активностью в сравнении с традиционной технологией кормовой добавки.

5. Разработана «Программа и методики исследовательских испытаний безопасности, физико-химических свойств, аминокислотного и белково-пептидного составов» для оценки показателей безопасности и контроля

содержания целевых биологически активных веществ в кормовой добавке.

6. Разработаны СТО 00419779-005-2016 «Добавка кормовая для свиней» и Лабораторный регламент на производство кормовой добавки. Себестоимость производства кормовой добавки составляет 308,6 руб. на 100 г.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Кашинова, Эльта Басанговна, 2016 год

Список литературы:

1. Автоматизированная система Ирена [электронный ресурс]. - Режим доступа: http: //vetrf.ru/vetrf/irena. html/.

2. Андреев, В.П. Эндогенные и экзогенные модификаторы активности №,К-АТФазы / В.П. Андреев, А.В. Зачиняева // Ученые записки Петрозаводского государственного университета. Биологические науки. - 2015. - № 2(147). - С. 716.

3. Афанасьев, С.А. Разработка фундаментальных аспектов формирования морфофункциональных изменений миокарда при сердечной недостаточности / С.А. Афанасьев, М.В. Егорова, Д.С. Кондратьева и др. // Сибирский мед журнал. - 2015. -Т. 30, № 2. - С.44-49.

4. Бабак, О.Я. Патогенетические механизмы формирования неалкогольной жировой болезни печени: фокус на клиническое применение адеметионина / О.Я. Бабак, Е.В. Колесникова // Сучасна гастроентеролопя. -2011. -№ 3 (59). - С.56-63.

5. Белокрылов, Г.А. Аминокислоты как стимуляторы иммуногенеза./ Г.А. Белокрылов, И.М. Молчанова, Е.И.Сорочинская // Доклады АН СССР. - М., 1986. - С.471-473.

6. Божко, А.М. Влияние тканевых препаратов на иммунологический статус поросят / А.М. Божко, Н.В. Безбородов // Материалы конференции "Проблемы с/х производства на современном этапе и пути их решения": XIII междунар. науч.- произв. конференция (19 - 22 мая 2009 г.). - Белгород: Изд-во БелГСХА, 2009. - С. 44.

7. Божко, А.М. Показатели иммуногормональной активности в крови поросят после применения тканевых препаратов «Колимак» и «Динормин» / А.М. Божко, Н.В. Безбородов // Известия ОГАУ. - 2010. - № 3 (27). - С. 192-195.

8. Ботвиньева, В.В. Перспективы диагностики и лечения различных видов анемии у детей / В.В. Ботвиньева, О.Б. Гордеева, Л.С. Намазова-Баранова // Педиатрическая фармакология. - 2012. - Т. 9, № 5. - С. 35-40.

9. Вайнер, А.С. Метаболизм фолатов и врожденные аномалии развития /

А.С. Вайнер, Д.А. Жечев, А.А. Кечин и др. // Мать и дитя в Кузбассе. - 2011. - № 2. - С. 3-10.

10. Вракин, В.Ф. Морфология сельскохозяйственных животных / В.Ф. Вракин // М.: Изательство Гринлайт, 2008. - 616 с.

11. Гафаров, Х.З. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят / Х.З. Гафаров, А.И. Иванов, Е.А. Пепоклоиов и др. // Казань: Фен, 2002. - 590с.

12. Гончарова, О.А. Селенодефицит и возрастозависимая патология (в фокусе дейодиназы / О.А. Гончарова, И.М. Ильина // Международный эндокринологический журнал. - 2015. -№ 4 (68). - С. 87-92.

13. ГОСТ Р 51574 -2000. Соль поваренная пищевая. Технические условия.

- М.: Госстандарт России, 2000. - 15с.

14. ГОСТ Р 54664-2011. Сахар молочный. Технические условия. - М.: Стандартинформ, 2012. - 20 с.

15. ГОСТ 11285-93. Железы поджелудочные крупного рогатого скота и свиней замороженные. Технические условия. - М.: ИПК Издательство стандартов, 1995. - 20 с.

16. ГОСТ 12302-2013. Пакеты из полимерных пленок и комбинированных материалов. Общие технические условия. - М.: Стандартинформ, 2014. - 20 с.

17. ГОСТ 16678-71. Слизистые оболочки сычугов крупного рогатого скота и свиных желудков замороженные. Технические условия. - М.: ИПК Издательство стандартов, 1999. - 5 с.

18. ГОСТ 23042-86. Мясо и мясные продукты. Методы определения жира.

- М.: Стандартинформ, 2010. - 6 с.

19. ГОСТ 25011-81. Мясо и мясные продукты. Методы определения белка. -М.: Стандартинформ, 2010. - 7с.

20. ГОСТ 31727-2012. Мясо и мясные продукты. Метод определения массовой доли общей золы. - М.: Стандартинформ, 2013. - 12с.

21. ГОСТ 32644 -2014. Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Острая пероральная токсичность - метод

определения класса острой токсичности. - М.: Стандартинформ, 2015. - 12с.

22. Гриценко, Н. С. Нарушение сократимости и метаболизма миокарда при длительном приеме изониазида / Н.С. Гриценко, В.Т. Долгих // Сибирский медицинский журнал. - 2009. - Т. 88, № 5. - С. 79-82.

23. Данилевская, Н.В. О некоторых последствиях длительной антибактериальной терапии / Н.В. Данилевская, В.В. Субботин // Journal of Small Animal Practice, Российское издание. - 2012. - Т. 3, №3. - С.56-57.

24. Девеговда, Г. Решение проблемы микотоксинов / Г. Девеговда, К. Аравинд // Комбикорма. - 2002. - № 8. - С. 65-66.

25. Дедов, И. И. Обмен глюкозы и продукция инкретинов у пациентов с ожирением и сахарным диабетом 2 типа после билиопанкреатического шунтирования в модификации HESS-MARCEAU на ранних сроках послеоперационного наблюдения / И.И. Дедов, Е.А. Трошина, Е.В. Ершова, Ю.И. Яшков // Ожирение и метаболизм. - 2015. - Т. 12, № 1. - С. 29-39.

26. Денс, Пол. Применение органических кислот в птицеводстве / Пол Денс // Farm animals. - 2013. - №3-4. - С. 76 - 80.

27. Джупина, С.И. Факторные инфекционные болезни животных/ С.И. Джупина // Ветеринария. - 2005. - №9. - С.17-20.

28. Жматова, Г. В. Методы интенсификации технологических процессов экстрагирования биологически активных веществ из растительного сырья / Г.В. Жматова, А.Н. Нефёдов, А.С. Гордеев, А.Б. Килимник // Вестник Тамбовского государственного технического университета. - 2005. - Т.11, № 3. - С. 701-707.

29. Калашников, А.П. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных / А.П. Калашников, В.И. Фисинин, В.В. Щеглов, Н.Г. Первое и др. - 3-е изд., перераб. и доп. -М.: Минсельхоз РФ РАСХН ВГНИИЖ, 2003. - 359 с.

30. Каминный, А. И. Роль секреторной фосфолипазы А2 в развитии атеросклероза / А.И. Каминный, Т.О. Павлунина, Ю.А. Шувалова, А.А. Коротаева // Атеросклероз и дислипидемии. - 2012. - № 4. - С. 63-67.

31. Каминская, А. Н. LIM-киназа 1 в регуляции когнитивных и

локомоторных и функций Drosophila melanogaster / А.Н. Каминская, А.В. Медведева // Ecological genetics. - 2013. - Т. 11, № 3. - С.63-78.

32. Кобалава, Ж.Д. Артериальная гипертония: ключи к диагностике и лечению / Ж.Д. Кобалава, Ю.В. Котовская, В.С. Моисеев. - М.: Издательская группа «Геостар-медиа», 2009. - 865 с.

33. Колотилова, М.Л. Нейрогенно-генетическая теория этиологии и патогенеза язвенной болезни / М.Л. Колотилова, Л.Н. Иванов // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2014. - Т. 69, № 7-8. - С.10-16.

34. Кормош, Н.Г. Физиологическая роль активных форм кислорода на клеточном уровне и организма в целом - взгляд клинициста. Ч.2 / Н.Г. Кормош // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11, № 1. - С.85-90.

35. Конки, Д. Культура животных клеток. Методы / Д. Конки, Э. Эрба, Р. Фрешни, Б. Гриффитс. - М.: Мир. - 1989. - 333 с.

36. Лаврешин, А. В. Тканевая инженерия корня аорты человека методом децеллюляризации: дис. ...канд.мед.наук: 14.01.26 / Лаврешин Алексей Владимирович. - СПб., 2016 г. - 99 с.

37. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли. - М.: Мир. - 1969. - 646 с.

38. Липкан, Г.Н. Иммобилизационный стресс как модель язвенных поражений пищеварительного канала и объект изучения фармакологических и физических воздействий на живой организм / Г.Н. Липкан, М.В. Мадоян, К.А. Сытникова, А.А. Хижази // Врачебное дело. - 1998. - № 2. - С.13-18.

39. Литвицкий, П.Ф Нарушения обмена витаминов / П.Ф. Литвицкий // Вопросы современной педиатрии. - 2014. - Т. 13, № 4. - С.40-47.

40. Локтионова, Г.Р. Обзоры рынка: Ферменты [Электронный ресурс] // Г.Р. Локтионова // Ценовик: Сельскохозяйственное обозрение. - 2013. - Режим доступа: http://www.tsenovik.ru/articles/obzory-i-prognozy/obzor-rynka-fermenty-/.

41. Лопатина, Е. В. Исследование участия Na/K-АТФазы в регуляции роста эксплантатов ткани сердца в органотипической культуре / Е.В. Лопатина, В.А. Пеннияйнен, А.А. Зайка // Бюллетень экспериментальной биологии и

медицины. - 2005. - Т.140, № 8. - С.150-152.

42. Лысиков, Ю. А. Аминокислоты в питании человека / Ю.А. Лысиков // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2012. - № 2. - С. 88-105.

43. Матвеева, В.Г. Роль триггерного рецептора, экспрессируемого на миелоидных клетках, в активации врожденного иммунитета / В.Г. Матвеева, А.С. Головкин, Е.В. Григорьев, А.В. Понасенко // Общая реаниматология. - 2011. - Т. VII, №3. - С. 70-74.

44. Можейко, Л.А. Энтероинсулярные взаимодействия. Часть I Гастроинтестинальные гормоны и секреция инсулина / Л.А. Можейко // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2012. - № 1 (37). -С. 3-6.

45. Монастырский, О.А. Биозащита зерновых культур от токсиногенных микроорганизмов / О.А. Монастырский // Защита и карантин растений. - 2002. -№ 2. - С. 5-8.

46. Монастырский, О.А. Токсинообразующие грибы, паразитирующие на зерне / О.А. Монастырский // Агро XXI. - 2001. - № 11. - С. 6-7.

47. Нетюхайло, Л. Г. Регуляция метаболических процессов: регуляторные ферменты / Л.Г. Нетюхайло // Вюник проблем бюлогп i медицини. - 2012. - Т. 2, № 2. - С. 292-294.

48. Олейник, Е. С. Получение и характеристика рекомбинантных одноцепочечных вариабельных фрагментов антител (SCFV) против гепаринсвязывающего EGF-подобного фактора роста человека / Е.С. Олейник, А.А. Кабернюк, Д.В. Колибо, С.В. Комисаренко // Biotechnolog. Acta. - 2012. - Т. 5, № 6. - С. 47-56.

49. Папуниди, Э. К. Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса цыплят при включении в их рацион биологически активных добавок / Э.К. Папудини, А. Х. Волков, О. В. Портнов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2015. - Т. 221, № 1. - С. 168-170.

50. Петрович, С.В. Микотоксикозы животных / С.В. Петрович. - М.: Росагропромиздат, 1991. - 238 с.

51. Плиева, А Ф. Исследования компонентного состава свободных аминокислот в соплодиях хмеля обыкновенного / А.Ф. Плиева, Р.Д. Кусова // Успехи современного естествознания. - 2011. - №8. - С.228.

52. Покровский В.С. Ферментные препараты в онкогематологии: актуальные направления экспериментальных исследований и перспективы клинического применения / В.С. Покровский, Е.М. Трещалина // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. -2014. - Т. 7, № 1. - С. 28-38.

53. Посконная, Т.Ф. Требования к безопасности продуктов животного происхождения в Европейском союзе / Т.Ф. Посконная, М. П. Бутко // Ветеринария. - 2007. - № 3. - С.3.

54. Проценко, С. И. Патоморфологический анализ органов гепатопанкреатодуоденальной зоны при жировом панкреонекрозе и его коррекция садостатином (Экспериментальное исследование) / С.И. Проценко, В.Г. Вискунов // Сибирский медицинский журнал . - 2010. - Т. 25, № 3-1. - С. 64-68.

55. Смирнов, А.М. Роль ветеринарной науки в обеспечении благополучия животноводства страны / А.М. Смирнов // Ветеринарная патология. - 2008. - № 4. - С. 44-60.

56. Способ извлечения куриного эмбриона из яйца для дальнейшего получения клеточных трансплантатов из фетальных тканей: пат. 2538701 Рос. Федерация: МПК 51 А 61 К 35/12 / В.А. Мальчевский, С.А. Петров; заявитель и патентообладатель ТюмНЦ СО РАН . - № 2013132327/15; заявл. 11.07.2013; опубл. 10.01.2015 Бюл. № 1.

57. Татарникова, Н. А. Антибиотики в пищевых продуктах / Н.А. Татарникова, О.Г. Мауль // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2014. - № 5 (49). - С. 208-211.

58. Томмэ, М.Ф. Аминокислотное питание свиней и птицы (Методические Материалы) / М.Ф. Томмэ, В.Г. Рядчиков, Н.Г. Григорьев, Н.В. Лобин // М.: Колос, 1967. - 30 с.

59. Ушакова, Н.А. Новое поколение пробиотических препаратов

кормового назначения / Н.А. Ушакова, Р.В. Некрасов, В.Г. Правдин и др. // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 1-0. - С. 184-192.

60. Федоренко, О.Ю. Влияние фосфатидилинозитол-4-фосфат-5-киназы (тип 2 альфа) на активность нейрональных KCNQ-калиевых каналов в ооцитах Хепорш Laevis / О.Ю. Федоренко, С.А. Иванова, В.Я. Семке // Бюллетень СО РАМН. - 2009. - № 2 (136). - С. 59-64.

61. Федулова, Л.В. Анализ возникновения и последствия стрессов у свиней / Л.В. Федулова, А.И. Фокина // Сборник материалов III Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов: «Научное обеспечение инновационных технологий произв. - 2016. - С. 446-451.

62. Хамидуллин, Т. Препарат для нейтрализации микотоксинов / Т. Хамидуллин, В. Кривцов, Р. Данилов // Комбикорма. - 2004. - № 2. - С. 67.

63. Харитонова, Л.А. Ферментотерапия как первый этап лечения постхолецистэктомического синдрома у детей. / Л.А. Харитонова, Р.Р. Курамшин // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2015. - № 1 (113). - С. 55-61.

64. Цибизова, М.Е. Технология протеолитических ферментов широкого спектра действия из внутренних органов прудовых видов рыб / М.Е. Цибизова // Вестник Астраханского государственного технического университета. - 2004. - № 2. - С. 119-123.

65. Цуркан, М.В. Воздействие терагерцового излучения на рост нейритов / М.В. Цуркан, О.А. Смолянская, Н.Г. Брянцева // Научно-технический вестник информационных технологий, механики и оптики. - 2013. - № 1(83). - С. 60-64.

66. Чернуха, И.М. Биотрансформация побочного мясного сырья как инновационный подход к созданию протеомно-пептидных средств направленного действия / И.М. Чернуха, Л.А. Люблинская, Л.В. Федулова // Все о мясе. - 2015. -№ 2. - С. 14-17.

67. Чернуха, И.М. Изучение природы действующего вещества препарата «Динормин» для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний поросят / И.М. Чернуха, Л.А. Люблинская, Л.В. Федулова и др. // Все о мясе. -2014. - № 6.

- С. 36-39.

68. Чернуха, И.М. Изучение природы действующего вещества препарата «Колимак» / И.М. Чернуха, Л.А. Люблинская, Л.В. Федулова и др. // Все о мясе. -2013. - №4. - С. 14-18.

69. Чернуха, И.М. Исследование терапевтических свойств препарата «Колимак» на лабораторных животных / И.М. Чернуха, Л.А. Люблинская, Л.В. Федулова и др. // Все о мясе. - 2013. - № 5. - С. 40-42.

70. Чернуха, И.М. Разработка ферментно-тканевого препарата для лечения желудочно-кишечных расстройств на основе экстрактов тканей желудка, двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы свиней / И.М. Чернуха, Б.В. Уша, А.Н. Макаренко и др. // Ветеринария и кормление. - 2012. - № 4. - С. 12-14.

71. Чуешов, В.И. Промышленная технология лекарств [Электронный ресурс]: электронный учебник. / В.И. Чуешов Е.В. Гладух, О.А. Ляпунова и др. -Электрон.текстовые дан. - Харьков: НФаУ, 2010.

72. Шамберев, Ю.Н. Влияние имплантации лизина на уровень гормонов, обмен веществ и рост молодняка крупного рогатого скота / Ю.Н. Шамберев, И.С. Иванов, В.И. Гаврищук // Известия ТСХА. - 1991. - № 4. - С. 110-119.

73. Шаназаров, Н. А. Роль эпидермального фактора роста и его рецептора в канцерогенезе: молекулярные механизмы их действия / Н.А. Шаназаров, А.Х. Сабиров, С.М. Сироткина // Российский биотерапевтический журнал. - 2009. - Т. 8, № 4. - С.85-89.

74. Шендеров, Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание / Б.А. Шендеров // Вестник Российской Академии медицинских наук. -2005. - № 12. - С. 13-17.

75. Шманенков, Н.А. Аминокислоты в кормлении животных / Н.А. Шманенков. - М.: «Колос», 1970. - 88 с.

76. Штайнер, Т. Регулирование здоровья пищеварительного тракта / Т.Штайнер. - UK: Nottingham University Press, 2006. - 84 с.

77. Яглов В.В. Новые концепции биологии диффузной эндокринной системы: итоги и перспективы ее изучения / В.В. Яглов, Н.В. Яглова // Вестник

Российской академии медицинских наук. - 2012. - Т. 67, № 4. - С.75-81.

78. Abe, K. Conformational rearrangement of gastric H(+),K(+)-ATPase induced by an acid suppressant / K. Abe, K. Tani, Y. Fujiyoshi // Nature Communications. - 2011. - V.2. - P. 155.

79. Bian, Y. An enzyme assisted RP-RPLC approach for in-depth analysis of human liver phosphoproteometry / Y. Bian, C. Song , K. Cheng et al.// Journal of Proteomics. - 2014. - V. 96. - P. 253-62.

80. Bonetto, V.Two alternative processing pathways for a preprohormone: a bioactive form of secretin / V. Bonetto, H. Jörnvall, V. Mutt // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.. - 1995. - V. 92. - P. 11985-89.

81. Chattopadhyay, M. K. Use of antibiotics as feed additives: a burning question/ M. K. Chattopadhyay // Front. Microbiol.. - 2014. - V. 5. - P. 334.

82. Chen, X. Molecular cloning, tissue expression and protein structure prediction of the porcine 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A reductase (HMGR) gene / X. Chen,X. Wang, Z. Li Z et al. // Gene. - 2012. - V. 495. - P. 170-77.

83. Claude, B. Влияние а-казозепина на чувство тревоги у кошек / B. Claude // VetPharma. - 2013. - V. 5-6. - P. 20-22.

84. Fasciotto, B.H. Parastatin (porcine chromogranin A347-419), a novel chromogranin A-derived peptide, inhibits parathyroid cell secretion / B.H. Fasciotto, C.A. Trauss, G.N. Greeley et al. // Endocrinology. - 1993. - V. 133. - P. 461-66.

85. Hamid, M. Physiology of the Gastrointestinal Tract: Two Volume Set. / M. Hamid. - USA : ed. Hamid M. Said, 2012. - 2312 p.

86. Hao, H. Benefits and risks of antimicrobial use in food-producing animals / H. Hao, G. Cheng, Z. Iqbal et al.// Front. Microbiol. - 2014. - V. 5. - P. 288.

87. Kawashima, I. Characterization of pancreatic elastase II cDNAs: two elastase II mRNAs are expressed in human pancreas / I. Kawashima, T. Tani, K. Shimoda et al. // DNA. - 1987. - V. 6. - P. 163-72.

88. Li, X. Molecular characterization, chromosomal and expression patterns of three aquaglyceroporins (AQP3, 7, 9) from pig / X. Li, T. Lei, T. Xia et al. // Comparative Biochemistry and Physiology. - 2008. - V. 149(3). - P. 468-76.

89. Menheniott, T.R. A novel gastrokine, Gkn3, marks gastric atrophy and shows evidence of adaptive gene loss in humans / T.R. Menheniott, A.J. Peterson, L. O'Connor // Gastroenterology. - 2010. - V. 138. - P. 1823-35.

90. Qiu, H. Investigation of LDHA and COPB1 as candidate genes for muscle development in the MYOD1 region of pig chromosome 2 / H. Qiu, X. Xu, B. Fan et al. // Mol. Biol. Rep. - 2010. - V. 37. - P. 629-36.

91. Rouimi, P. Purification and characterization of a glutathione S-transferase Omega in pig: evidence for two distinct organ-specific transcripts / P. Rouimi, P. Anglade, A. Benzekri et al. // Biochem. J.. - 2001. - V. 358. - P. 257-62.

92. Talas, U. Human elastase 1: evidence for expression in the skin and the identification of a frequent frameshift polymorphism / U. Talas, J. Dunlop, S. Khalaf, I.M. Leigh, D.P. Kelsell // J. Invest. Dermatol. - 2000. - V. 114. - P. 165-70.

93. Tanaka, N. Molecular basis for peroxisomal localization of tetrameric carbonyl reductase / N. Tanaka, K. Aoki, S. Ishikura, M. Nagano, Y. Imamura, A. Hara, K.T. Nakamura // Structure. - 2008. - V. 16. - P. 388-97.

94. UniProt Protein data base [электронный ресурс]. - Режим доступа: http : //www.uniprot.org/.

95. Van Laere, A.-S. A regulatory mutation in IGF2 causes a major QTL effect on muscle growth in the pig / A.S. Van Laere, M. Nguyen, M. Braunschweig, C. Nezer, C. Collette et al. // Nature. - 2003. - V. 425 (6960). - P. 832-6.

96. Wang, X.D. Adhesion Force Analysis of Protein Fouling of PVDF Ultrafiltration Membrane Using Atomic Force Microscop / X.D. Wang, M. Zhou, X.R. Meng, L. Wang, D.X. Huang, S.Q. Xia // Huan Jing Ke Xue. - 2015. - V. 36 (8). - P. 2900-5.

97. Weist, S. Effects of thawing, refreezing and storage conditions of tissue samples and protein extracts on 2-DE spot intensity / S. Weist, C. Brunkau, J. Wittke, M. Eravci, O. Broedel, E. Krause, H. Stephanowitz, S. Eravci, A. Baumgartner // Proteomics. - 2010. - V. 10 (7). - P. 1515-21.

98. Xie, L. Molecular cloning and functional characterization of porcine stimulator of interferon genes (STING) / L. Xie, M. Liu, L. Fang, X. Su, K. Cai, D.

Wang, H. Chen, S. Xiao // Developmental & Comparative Immunology. - 2010. - V. 34. - P. 847-54.

99. Xu, Y.J. Differential proteome analysis of porcine skeletal muscles between Meishan and Large White / Y.J. Xu, M.L. Jin, L.J. Wang, A.D. Zhang, B. Zuo et al. // Journal of Animal. - 2009. - V. 87 (8). - P. 2519-27.

100. Yu, M. Evolution of stomach lysozyme: the pig lysozyme gene / M. Yu, D.M. Irwin // Mol. Phylogenet. Evol. - 1996. - V. 5. - P. 298-308.

101. Zhang, N. Molecular characterization and NF-kappaB-regulated transcription of selenoprotein S from the Bama mini-pig / N. Zhang, W. Jing, J. Cheng, W. Cui, Y. Mu, K. Li, X. Lei // Mol. Biol. Rep. - 2011. - V. 38. - P. 4281-86.

102. Zhang, Z. Molecular cloning, expression patterns and subcellular localization of porcine TMCO1 gene / Z. Zhang, D. Mo, P. Cong, Z. He, F. Ling, A. Li, Y. Niu, X. Zhao, C. Zhou, Y. Chen // Mol. Biol. Rep. - 2010. - V. 37 (3). - P. 1611-8.