Совершенствование средств и способов профилактики и лечения колибактериоза свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Татарников, Кирилл Викторович

• Татарников, Кирилл Викторович
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Татарников, Кирилл Викторович

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ............................................................ 10

2.1 Характеристика и физиология микроорганизмов и питательные среды для их выращивания................................................................. 10

2.2 Виды и характеристика Е. coli, формы течения и средства профилактики колибактериоза свиней................................................... 16

2.3 Биотехнологические основы повышения эффективности антибиотиков......................................................................... 26

2.4 Проблемы и механизмы повышения эффективности пробиотиков в свиноводстве........................................................................ 32

2.5 Влияние магнитных полей на биологические свойства

микроорганизмов.....'.......................................................... 35

Заключение............................................................................. 38

3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.......................................... 39

3.1 Материалы и методы исследований......................................... 39

3.2 Результаты разработки и апробации минеральной питательной среды для выращивания и выделения Е. coli..................................... 47

3.3 Влияние электрогеомагнитного воздействия на биологические свойства Е. coli...................................................................................... 51

3.4 Мониторинг чувствительности региональных Е. coli к

антибиотикам........................................................................ 53

3.5. Изыскание способов получения колибактериозной анатоксин-вакцины с повышенной иммуногенной и протективной активностью.................................................................................................. 55

3.6 Результаты повышения биоцидного действия антибиотиков в отношении Е. coli и лечебной эффективности амоксициллина и

энрофлоксацина при колибактериозе поросят..........................................................................63

3.7 Антибиотикотерапия желудочно-кишечных болезней поросят с

применением пробиотических препаратов..........................................................................70

4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ....................................................76

5 ВЫВОДЫ........................................................................................................................................................90

6 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ....................................................................................................92

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ......................................................................................................................93

ПРИЛОЖЕНИЯ............................................................................................................................................113

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

КАВ — Колибактериозная анатоксин - вакцина

МПК - минимальная подавляющая концентрация

АБП - антибактериальные препараты

ПМП - постоянное магнитное поле

Е. coli - кишечная палочка

ХТП - химиотерапевтические препараты

МИК - минимальная ингибирующая концентрация

МПА - мясопептонный агар

МПГБ - мясопептонный глицериновый бульон

'S - sensitive, чувствительный

R - resistore, резистентный

I - intermediate, промежуточный

РНК - рибонуклеиновая кислота

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

Н - антиген - жгутиковый

О - антиген - соматический

К - антиген - капсульный

АБК - ацидофильная бульонная культура

ПАБК - пропионоацидофильная бульонная культура

ПАСК - парааминосалициловая кислота

ЛПС - липополисахаридный комплекс

МКГ - микрограмм [одна тысячная 1 мг]

АМП - аденозинмонофосфат

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование средств и способов профилактики и лечения колибактериоза свиней»

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Кишечную палочку впервые выделил из кишечника и фекалий детей немецкий врач Теодор Эшерих в 1885 году.

Разнообразный род Е. coli отличается по ферментативным, серологическим свойствам, подвижности, патогенности, иммуногенности, антигенности, чувствительности к антибиотикам, образованию и свойствам токсинов, строению, выделению колицина, вызывающие гибель без лизиса родственных бактерий [Шахов А.Г, 2007; Самуйленко А.Я.,2005; Виноходов В.О., 2001; Панин А.Н., 2007].

Для специфической профилактики колибактериоза изготавливают моно и ассоциированные инактивированные вакцины путем выращивания лабора-торно-производственных отечественных и зарубежных штаммов Е. coli на мясогидролизатном или казеиногидролизатном бульоне с последующей де-токсикацией и полимеризацией комплекса токсинов 0,5 - 0,7% раствором формальдегида [Самуйленко А.Я., 2005; Панин А.Н., 2007; Гордон А., 2006].

Наличие в бульонах балластных веществ мяса, казеина и низкое накопление биомассы микроорганизмов снижает иммуногенную и протективную эффективность анатоксин - вакцин. Поэтому возникает необходимость создания синтетических питательных средств с доступными компонентами, обеспечивающих стабильно высокое накопление кишечной палочки и высокоэффективных детоксикаторов и полимеризаторов бактериальных экзо- и эндотоксинов вместо 0,5 - 1 % растворов формальдегида. [Покровский В. И, 1999; Воробьев А. А, 1999; Федоров Ю. Н, 2005].

Протективная активность колибактериозной вакцины во многом зависит от способа и места введения с учетом роли местного иммунитета [Н. Безредка, 1925; Виноходов В. О., 2000; Урбан В. П., 1985; Королева Е. А., 2011].

Многолетнее применение противомикробных препаратов, физико-химическое воздействие привело к образованию у Е. coli устойчивости ко многим антибактериальным препаратам.

Соединение одних антибиотиков с другими, клавулановой и органическими кислотами, внесение в состав энрофлоксацина трилона - Б, аргинина, колимицина не обеспечило качественного прорыва в повышении биоцидного и лечебного действия лекарственных средств [Ковальчук Н. М., 2001; Дев-ришев Д. А., 2010; Шахов А. Г., 2003].

Полимеризация антибиотиков по принципу получения анатоксин - вакцин с помощью 0,2% раствора формальдегида или 0,1% раствора глутарового альдегида и этония позволило повысить их биоцидное действие в отношении Е. coli и лечения животных больных колибактериозом [Д. А. Евглевский, 2012-2013]. Актуальность разработки минеральной питательной среды, принципиально новой технологии получения и применения колибактериоз-ной анатоксин-вакцины, повышения биоцидной и лечебной эффективности антибиотиков, определили выбор темы, цель, задачи и направление исследований.

Цель работы. Целью научных исследований явилось совершенствование жидкой и плотной минеральной питательной среды для выделения и выращивания Е. coli, повышение иммуногенной и протективной активности ко-либактериозной анатоксин-вакцины и биоцидного и лечебного действия энрофлоксацина и амоксициллина.

Для достижения поставленной цели определены следующие задачи:

1. Разработать и апробировать экономически доступную и эффективную минеральную питательную среду для выращивания и выделения Е. coli;

2. Изучить влияние геомагнитного воздействия на биологические свойства Е. coli;

3. Разработать рациональную технологию получения и способов применения колибактериозной анатоксин-вакцины;

4. Повысить биоцидные и лечебные свойства энрофлоксацина и амоксициллина полимеризацией формальдегидом или глутаровым альдегидом, отдельно и с алкилдиметилбензиламмонием хлоридом в отношении Е. coli и колибактериозе поросят.

Научная новизна. На основе сущности и механизмов физиологических процессов у микроорганизмов, способности глутарового альдегида с ал-килдиметилбензиламмония хлорида обеспечивать полимеризацию с образованием крупных полимерных соединений и их детоксикацию, впервые изучены и определены:

• Установлены параметры повышения устойчивости Е. coli к энро-флоксацину и амоксициллину и температуре в железорудных регионах Курской и Белгородской областей;

• Определен состав минеральной жидкой питательной среды для максимального накопления Е. coli и концентрации комплекса токсинов вместо балластных веществ мясо- и казеиногидролизатном бульоне при изъятии дорогостоящих аспарагина и глицина;

• Научно обоснована технология изготовления колибактериозной анатоксин-вакцины;

® На основе повышения протективной эффективности при оральном введении поросятам колибактериозной анатоксин-вакцины, по сравнению с подкожной вакцинацией, подтверждена роль местного иммунитета, обоснованная Безредка Н.;

• Повышение биоцидного действия энрофлоксацина и амоксициллина в отношении Е. coli и терапевтической эффекивности при колибактериозе поросят достигнуто полимеризацией 0,1% глутаровым альдегидом и 0,1% раствором алкилдиметилбензиламмония хлорида при 40°С в течение 2-3 суток по принципу инактивации, полимеризации и детоксикации бактериальных анатоксин-вакцин.

Практическая ценность. Разработанная жидкая минеральная питательная среда обеспечивает накопление до 75 - 90 млрд/мл Е. coli в течение 2 - 3 суток выращивания для получения колибактериозной анатоксин-вакцины, а плотная среда с 2,5% агаром для оперативного выделения микроорганизмов. Эффективность полимеризации и детоксикации комплекса колибакте-риозных токсинов 0,2 - 0,3% глутарового альдегида с 0,2 - 0,3% алкилдиме-

тилбензиламмония хлорида позволяет исключить использования канцерогенного формальдегида и ртутьсодержащего мертиолята.

Установленное повышение устойчивости Е. coli, выделенных в железорудных регионах Курской и Белгородской областей к энрофлоксацину и амоксициллину и температуре необходимо учитывать при терапии поросят, больных колибактериозом и проведении ветеринарно-санитарных мероприятий.

Оральное введение поросятам колибактериозной анатоксин-вакцины по сравнению с подкожной вакцинацией увеличивает протективные свойства биопрепарата и подтверждает теорию и практическую ценность местного иммунитета, предложенные Безредка Н.

Повышение биоцидных свойств энрофлоксацина и амоксициллина полимеризацией по принципу технологии изготовления анатоксин-вакцины позволяет снизить дозу препарата и сроки лечения желудочно-кишечных болезней поросят, вызванные полирезистентными Е. coli отдельно и в ассоциации с другими микроорганизмами.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты разработки и апробации жидкой и плотной минеральной питательной среды для выделения и выращивания Е. coli;

2. Влияние геомагнитного воздействия на биологические свойства Е. coli;

3. Материалы изыскания рациональной технологии получения колибактериозной анатоксин-вакцины;

4. Иммуногенные и протективные свойства колибактериозной анатоксин-вакцины при подкожном и оральном введении поросятам;

5. Биоцидные и лечебные свойства модифицированного полимеризацией энрофлоксацина и амоксициллина в отношении Е. coli и при колибатериозе поросят.

Апробация работы. Результаты исследований рассмотрены на расширенном заседании кафедры эпизоотологии, радиобиологии и фармакологии и

представлены в трех докладах в материалах международных научно-практических конференций «Актуальные проблемы агропромышленного производства», Курск, 2013г.

Публикация результатов исследований. По теме диссертационной работы опубликовано 12 научных статей, в том числе 9 в изданиях, рецензируемых ВАК РФ, получен 1 патент на изобретение №2476210 от 27.02.2013г.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста и включает общую характеристику работы, обзор литературы, материалы и результаты исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список литературы, приложения.

Работа иллюстрирована 14 таблицами, 7 рисунками. Список литературы содержит 213 источников, в том числе 84 иностранных.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика и физиология микроорганизмов и питательные среды для их выращивания

Систематика микроорганизмов включает три надцарства: 1) безъядерные (акариоты) - вирусы; 2» предъядерные (прокариоты) - бактерии и 3) ядерные (эукариоты) от греч. а - нет, pro - до +karyon - ядро - это грибы, растения, животные.

Вирусы являются неклеточными образованиями, содержащие один вид нуклеиновой кислоты - РНК или ДНК. Их насчитывают более 4-х тысяч видов. Для выращивания вирусов используют: 1) птичьи эмбрионы (куриные и т.д.); 2) культуры клеток из эмбрионов, органов и тканей молодых животных; 3) восприимчивые лабораторные животные.

В отличие от вирусов бактерии имеют генетический аппарат, содержащий два вида нуклеиновых кислот, в целом полноценен, но не оформлен в ядро. Поэтому бактерии объединены в надцарство - предъядерные или прокариоты.

Клетки грибов, растений и животных содержат два вида нуклеиновых кислот, но в отличие от бактерий их надцарственный, генетический материал сформирован в ядро клетки. Поэтому их относят к надцарству ядерные или эукариоты.

На основании сходства определенных признаков возбудители инфекционных болезней подразделяются на множество видов: бактерии, вирусы, грибы, микоплазмы, хламидии, риккетсин, вибрионы, спириллы, спирохеты, нитевидные формы бактерий - актиномицеты, раньше назывались лучистыми грибами. Из актиномицетов получают более 20% всех антибиотиков (стрептомицин, тетрациклин, нистатин, эритромицин, рифампицин).

Кроме того изучены вироиды, вызывающие более 100 болезней растений, вызываемые необычными вирусами, а также прионы - низкомолекулярные белки, не имеющие нуклеиновой кислоты, не вызывают ответных иммунных реакций организма, весьма устойчивы к высоким температурам и из-

лучениям.

Кроме вирусов животных, вироидов растений выделены у многих бактерий - вирусы, названные бактериофагами, вызывающие разрушение, лизис многих бактерий, в том числе бацилл сибирской язвы, стафилококков, сальмонелл и т.д.

По форме бактерии подразделяются на палочковидные, кокковидные, извитые и ветвящиеся.

Стафилококки (от греч. 81арЬу1е - виноградная гроздь) представляют кокки, расположенные в виде грозди винограда, в результате деления кокков в разных плоскостях. Бактерии делятся поперечным делением на две дочерние клетки - кишечная палочка, сальмонеллы в течение 20-30 минут, а мико-бактерии туберкулеза в течение 20 -24 часов.

Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки, цитоплазматиче-ской мембраны, цитоплазмы с включениями и ядра (нуклеод). Некоторые бактерии имеют капсулу, микрокапсулу, слизь, жгутики, фимбрии и в неблагоприятных условиях образуют обезвоженную структуру, называемую спорой.

Клеточная стенка участвует в процессе деления клетки и транспорте метаболитов. Наиболее толстая клеточная стенка у грамположительных бактерий толщиной до 50 нм, у грамотрицательных - около 15-20 нм.

Клеточная стенка бактерий содержит полисахариды, липиды, белки (протеины) и основной компонент (90%) многослойный пептидокликан (му-реин), обеспечивающий прочность и форму бактерий. С пептидогликаном клеточной стенки грамположительных бактерий связаны тейхоевые кислоты (от греч. Те1сЬоз - стенка). Строение и состав пептидной части пептидогли-кана у грамотрицательных бактерий стабильны, а у грамположительных бактерий аминокислоты пептидогликана отличаются по составу и последовательности [9, 32, 70, 173].

Грамотрицательные бактерии после воздействия спиртом утрачивают генциановиолетовый краситель, обесцвечиваются и при обработке фуксином

окрашиваются в красный цвет. Это обусловлено меньшим количеством пеп-тидогликана.

У грамположительных бактерий при окраске по Граму (Грам - датский микробиолог, предложивший окраску бактерий в 1884г.) образуется сине-фиолетовая окраска из-за связывания генциацианвиолета с йодом.

В состав бактерий входят вода - около 80% ее массы, в спорах количество воды уменьшается до 18-20%. Бактерии содержат более 2000 различных белков, а в целом белки составляют 40-80% сухой массы бактерий [41, 43, 45].

Белки бактерий обладают ферментативной, иммуногенной, антигенной, вирулентной активностью и имеют видовую принадлежность. Кроме белков бактерии содержат две нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК), углеводы, липи-ды, минеральные элементы - фосфор, калий, натрий, сера, железо, кальций, магний, цинк, медь, кобальт, марганец, углерод и азот.

Выход вещества из клетки, в том числе экзотоксинов происходит за счет диффузии и участия транспортных систем. Для роста микробов необходимо вносить в питательные среды аминокислоты для построения белков, пурины, пиримидины для образования нуклеиновых кислот и витамины, входящие в состав ферментов. Проникновение питательных веществ в бактериальную клетку происходит в результате простой диффузии.

Ферменты макро- и микроорганизмов участвуют в процессах анаболизма (синтеза) и катаболизма (распада), т.е. метаболизма. Изучено более 2000 ферментов [45, 52, 62, 7].

У бактерий различают эндоферменты, участвующие в дыхание, питании и делении клетки и в биосинтезе различных структурных элементов клетки.

В то же время экзоферменты выделяются ферментной системой клетки в окружающую среду, для расщепления макромолекул питательной среды до простых соединений, которые усваиваются клеткой. Кроме того экзоферменты бактерий выполняют защитную функцию путем инактивации антибиоти-

ков [79, 80, 96, 98].

Некоторые экзоферменты (нейромидаза, ферменты агрессии и др.) бактерий разрушают ткань и клетки, обеспечивая проникновение микробов и их токсинов в ткани организма. Ферменты микроорганизмов используют в качестве активных веществ, в генетической инженерии и применяют в легкой и пищевой промышленности, в качестве биодобавок в стиральные порошки для расщепления и уничтожения органических загрязнений [39, 45, 82].

Ферментативное различие у бактерий используют для их идентификации. Сахаролитические свойства ферментов (расщепление Сахаров) определяют по конечным продуктам образования щелочей, кислот, сероводорода, аммиака и др. Определяют Е. coli на дифференциально - диагностических средах Эндо, Гиса, Плоскирева и др.

В частности пестрый ряд среды Гиса состоит из МПБ или полужидкого мясопептонного агара с добавлением углевода (лактозы, манита и др.) и индикатора РН (меняющего цвет при расщеплении углевода с кислотообразо-ванием и пузырьков газа).

Среды Эндо и Левина представляют собой МПА с лактозой и индикатором РН (фуксин и пр.) На этих средах бактерии расщепляющие лактозу с образованием кислоты окрашены в красный цвет с металлическим блеском (среда Эндо для кишечной палочки) или в темно-синий цвет на среде Левина. В то же время бактерии (сальмонеллы, дизентерийные палочки) не расщепляющие лактозу на этих средах образуют неокрашенные колонии.

Протеолитические свойства бактерий определяют по разжижению желатина и разложению белка с образованием индола, сероводорода и аммиака. По отношению к молекулярному кислороду бактерии подразделяются на три группы: 1) облигатные (обязательные аэробы), растущие на средах с доступом кислорода; 2) облигатные (строгие анаэробы), растущие на средах без кислорода, который для них токсичен; 3) факультативные бактерии, растущие как при наличии, так и отсутствии кислорода.

Размеры бактерий колеблются от 0,2 до 10 мкм (1 мкм равняется 1000

нанометров), а вирусов от 20 до 400 нм. В настоящее время, известно около 7000 видов бактерий и 4-х тысяч вирусов. Бактерии размножаются бинарными делением на две одинаковые клетки. При оптимальных условиях роста бактерии делятся через 20 - 40минут. Рост палочковидных бактерий происходит в длину, а у кокков во всех направлениях. Для выращивания бактерий используют жидкие, плотные и полужидкие питательные среды [11, 38, 217].

Жидкие среды готовят на основе водных растворов бульонов и гидро-лизатов мяса, казеина, крови. Для получения плотных сред к ним добавляют агар, желатин или силикогель. Агар представляет собой сложный полисахарид из морских водорослей, который растворяется при 90 - 100° и сохраняет жидкое состояние до 45°С. Для приготовления плотных сред агар добавляют в бульон в концентрации 2 - 3%, а в полужидкие до 0,5 - 0,7 % [126, 83, 207].

В качестве универсального источника азота и углерода в питательные среды добавляют пептоны - продукты неполного расщепление белков (протеинов) с помощью ферментов (пепсина, дрожжей и т.д.).

Различают универсальные среды - мясопептонный бульон (МПБ = мясная вода +1% пептона + 0,5% №СЬ) и мясопептонный агар (МПА = МПБ + 2-3% агара).

В настоящее время проводятся исследования с использованием синтетических сред вместо МПБ.

Кроме универсальных сред для выращивания микробов используют дифференциально - диагностические, селективные, избирательные, обогатительные, а также дифференциально - селективные; специальные, например для выделения микобактерий - среда Левенштейна - Иенсена и синтетические, приготовленные из известных химических ингредиентов и полусинтетические с добавлением продуктов природного происхождения [79, 80, 52, 194].

Повышение эффективности биопрепаратов требует от исследователей разработки питательных сред, отличающихся постоянством состава и свободных от продуктов неопределенного химического характера - белков, экс-

трактивных веществ мяса, пептонов, продуктов растительного происхождения. Такими являются питательные среды, составленные из различного набора химически чистых солей, аминокислот, микроэлементов.

В 1893 г., благодаря работам русского ученого К.В. Ушинского, была впервые установлена возможность культивирования патогенных микроорганизмов без утраты Присущих им свойств на растворах солей, не содержащих продуктов животного и растительного происхождения. Автор приготовил среду следующего состава: глицерина — 50 мл, хлористого натрия - 5 - 7 г, хлористого кальция - 0.1 г, сернокислого магния - 4 г, двузамещенного фосфорнокислого - 1,0 г и молочнокислого аммония - 10 г на 1 л дистиллированной воды. В другом варианте своей среды он ввел 3,4 г аспарагиновокис-лого натрия.

На описанных вариантах сред автор с успехом выращивал холерный вибрион, бактерии рожи свиней, Е. coli, сальмонеллы.

Рассматривая, предложенную автором, среду с позиций современных знаний биохимии питания микроорганизмов, необходимо указать, что она содержит все жизненно необходимые минеральные элементы: магний, калий, ионы серной и фосфорной кислоты и источник углерода, глицерин.

Полученные результаты стали прообразом большинства синтетических питательных сред.

В последующем была изучена роль в физиологии микроорганизмов серы, кальция, меди, железа, кобальта, витаминов и аминокислот.

Следует указать, что фосфор и калий постоянно составляют самое большое количество минерального остатка. Они входят в состав нуклеиновых кислот, некоторых липидов и ферментов.

Кроме того, ионы фосфора и калия наряду с ионами натрия необходимы для поддержания осмотического давления среды, для выполнения функций буфера в среде. Ионы кальция, магния и серы необходимы для функции внутриклеточных энзимов. Ион серы при этом активно включается в клеточные белки. Ион магния активирует почти все энзимы, требующие наличия

двухвалентных катионов.

Краткий отбор литературы дает основание утверждать, что минеральные питательные среды с аспарагином, глицерином, и с ионами железа, цинка и т.д. обеспечивают сохранение морфологических и биологических свойств микроорганизмов, а лимонная кислота цикла Кребса, растворение ингредиентов.

При сочетании различных веществ необходимо помнить, что они могут взаимодействовать друг с другом, образуя при этом различные соединения Особенно важно создавать такие условия для роста бактерий, при которых не происходило бы осаждения углекислых и фосфорнокислых солей. Поэтому необходимо учитывать совместимость, стабильность и нестабильность вносимых ингредиентов среды.

В питательных средах при культивировании микроорганизмов, так называемые несущественные элементы для жизнедеятельности клетки, могут оказывать косвенное влияние, или могут создавать благоприятные физико-химические условия среды, способствовать полному растворению основных ингредиентов в питании бактерий. Разделение элементов питательной среды на основные, или существенные, и на дополнительные, или несущественные метаболиты является условным и ориентировочным [96, 122, 126, 217, 218].

Достигнутые успехи в конструировании минеральных питательных сред создают перспективу совершенствования существующих, и поиска новых, более эффективных, экологически безопасных, технологически доступных и выгодных ингредиентов в составе питательных сред, обеспечивающих высокое накопление бактериальной массы при изготовлении вакцины и анатоксинов.

2.2 Виды и характеристика Е. coli, формы течения и средства профилактики колибактериоза свиней

Эшеризиоз свиней, колибактериоз, колидиарея, колиинфекция, колиба-циллез - остро протекающая инфекционная болезнь поросят, характеризующаяся диареей, явлениями токсемии, реже септицеии, и сопровождающаяся

высокой смертностью.

Возбудитель колибактериоза, впервые в 1885 г., выделил из кишечника детей молодой немецкий врач Теодор Эшерих. В 1937 г. род Escherichia включен в состав семейства Enterobacteriaceae. В 1988 г. международный комитет для Е. coli рекомендовал термин «бловар», «серовар», «фаговар» вместо «биотип», «серотип» и «фаготип» [13, 14, 207, 214].

Е. coli - одиночные короткие палочки с закругленными концами, иногда биполяры и нитевидной формы. Обычная длина кишечной палочки составляет 1 — 1,5 км, ширина 0,6 - 0,8 мкм, но встречаются очень мелкие и длинные (до 3-3,5 мкм) варианты. Е. coli не образуют спор, слабоподвижны, редко встречаются неподвижные варианты. По Граму кишечная палочка красится отрицательно (красные цвет).

Кишечная палочка входит в микроценоз организма, является постоянным обитателем толстого кишечника млекопитающих, птиц, рыб, рептилий, амфибий, ее можно обнаружить на различных видах растений.

Кишечная палочка в пищеварительном тракте животных и человека утилизирует остатки непереваренной пищи, корма, синтезирует биологически активные витамины группы В, биотин, витамин К, никотиновую и панто-теновую кислоты и вырабатывают антибиотикоподные вещества - колицины и микроциды [77, 137, 143].

Плазмиды, бактериофаги, антибактериальные препараты, факторы внешней среды способствуют Е. coli расширить среду обитания, паразитиро-вания [82, 83, 123]. В итоге у Е. coli выработалась способность вызывать разные формы инфекции путем адаптации тропизма к другим органам, тканям [82, 98, 147, 220]. Е. coli после разрушения, лизиса гемолизом эритроцитов способны использовать освободившийся гемоглобин в качестве источника железа [23, 149, 159].

Кроме того, эшерихиозные гемолизины, эндотокины, энтеротоксины, цитолизины способны разрушать другие микроорганизмы и фагоциты, делая их нежизнеспособными [19, 97, 129, 163, 218].

Несмотря на то, что бактериальные микроорганизмы в 2000 раз меньше клеток органов и тканей животных и человека у них в процессе эволюции сформировались физиологические процессы и механизмы самозащиты [38, 49,214,217].

Постоянное применение антибактериальных препаратов в отношении Е. coli привело к возникновению резистентности более чем к 35 моно- и комбинированным средствам [34, 48, 55, 203].

Скорость размножения и география распространения антибиоустойчи-вых микроорганизмов и их нарастание создают угрозу для животных и человека, т.к. традиционные поиски новых более эффективных биоцидных средств практически исчерпали свои возможности [31, 32, 34, 149].

В последнее время возрос интерес к изучению получения и применения бактериофагов, литических ферментов, пробиотиков, бактерий - антагонистов антимикробных пептидов и субстанций бактериального происхождения - бактериоцины [187, 191].

Патогенные факторы Е. coli - адгезины, инвазии, экзотоксины, цито-токсины и эндотоксины контролируются хромосомными и плазмидными генами и умеренно конвертирующими фагами [109, 193,208].

Обеспечение патогенности эшерехий не возможно без участия плаз-мид. К плазмидам относят генетический аппарат клеточных органоидов -митохондрий, пластид, а также группы сцепления, не являющиеся жизненно важными для микроорганизмов [173, 175, 183].

У Е. coli изучено более 30 различных колицинов, которые обозначаются буквами латинского алфавита - А, В, С и другие.

Колицины - вещества белковой природы, способные подавлять рост й развитие родственных микроорганизмов, путем адсорбции на рецепторах клетки, вызывают нарушения микробного метаболизма [51, 53, 144].

В настоящее время колицины кишечной палочки широко применяются в комплексе с антибактериальными препаратами - энронит (энрофлоксацин), эндометрамат - К (генталицин + колистин сульфат) [справочник Видаль ве-

теринар, 2013].

У Е. coli почти все компоненты (белки, липополисахариды, нуклеопро-теиды) обладают антигенными (иммуногенными) свойствами и вызывают иммуногенную перестройку организма [10, 32, 33, 182].

Автор теории местного иммунитета Безредка A.M. считал, что каким бы путем ни вводили вакцину против кишечных инфекций, происходит «вакцинация» кишечника, наиболее чувствительной к этим инфекциям органа. При подкожной иммунизации «вакцинация» кишечника наступает окольным путем, а при энтеральной - кишечник вакцинируется непосредственно [13, 14, 17, 137, 171].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Татарников, Кирилл Викторович, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Безгин В.М. Основы промышленной биотехнологии/ В.М. Безгин, Н.Н.Быкова, В.В. Козлов//Учеб. Пособие, Изд-во Курской ГСХА, 2011. -С.512

2. Безредка А. М. Местная иммунизация. Париж, 1925. - С. 217

3. Бектимиров Т.А. Международные требования к испытанию стабильности медицинских препаратов//М.: Биопрепараты.- 2006. - №3[23]. -С.28-30.

4. Бектимиров Т.А. Принципы оценки иммунологической эффективности вакцин/ Т.А. Бектимиров,М.Я. Горбунов, Н.М. Никитюк//М.: Биопрепараты.- 2007. - №1. - С. 14-16.

5. Белобородова A.B. Новые показания для фторхинолонов при лечении инфекционных болезней// Антибиотики и химиотерапия. - 2009. - Т.54. -№1-2,-С.25-28.

6. Белоусов В.И. Требования к питательным средам /В.И. Бело-усов//Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными болезнями: Сб. статей междунар. науч.-практ. конф. - Покров. - 2000. - С.230-232.

7. Бельский В.В. Биофизические и медико-биологические аспекты магнитобиологии / В.В. Бельский, м.П. Попов, П.В. Калуцкий // Курск, КГМУ, 1997. - 147с.

8. Бокун А. А. Применение пробиотиков в животноводстве/ А. А. Бо-кун, С. В. Деревянко, Г. М. Дяченко // Ветмедицина.

9. Болотников И. А. Физико - биохимические основы иммунитета/ И. А. Болотников, Ю. В. Конопатов. //Л.: Наука, 1987. - С. 210

Ю.Бортничук В. А. Разробки та застусування пробиотика «Бактонорм» при шлунково - кишковых хворобах новонароджених телят/ В. А. Бортничук, Н. Г. Сорокина, М. Г. Наконечная// Ветмедицина.

11. Бургасов П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточному произ-водству/П.Н. Бургасов//М.: Медицина, 1978.-С439.

12. Бырдаров C.B. Экспериментальная микробиология// София: Медицина, 1965.-С.112-113.

13. Василюк О.Я. Возможности снижения заболеваемости поросят ко-либактериозом методами молекулярной генной диагностики / О.Я. Василюк, H.A. Лобан // Вет. медицина Беларуси. - 2006. - №. 1. - С. 9-11.

14. Виноходов В. О. Биотехнология профилактики колибактериоза птиц/ В. О. Виноходов// С - Петербург, Ломоносов, 2000. - С. 370- 410.

15. Виноходов В.О. Фармакопрофилактика колибактериоза птиц [экс^ периментально-производственные исследования]: Автореф. дисс. канд. вет. наук/В.О. Виноходов//Л., 1985. - С. 21

16. Войтенко В.Д. Повышение эффективности антибиотикотерапии// Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки: Экспресс-информ

СПб. - 2003. - Вып.14. - С. 19-20

17. Войтенко В.Д. Аэрозоли неомицина в сочетании с иммуностимулятором при экспериментальном колибактериозе цыплят/ В.Д. Войтенко// Международный вестник ветеринарии. - 2004. - №1. -С.58-60.

18. Волкова, М.В. Экологические аспекты вакцинации против эшери-хиоза сельскохозяйственных животных / М.В. Волкова // Материалы международной научно-практической конференции «От теории - к практике: вопросы современной ветеринарии, биотехнологии и медицины». - Саратов. ГНУ СНИВИ РАСН./ ИП Моисеева Е.В., 2011.-С. 59-62.

19. Волынец Л.К. Колибактериоз в свиноводческих хозяйствах/ Л.К. Волынец, Ю.Г. Балицкий//Ветеринария. - 1991. - №1. - С.41-43.

20. Воробьев A.A. Анатоксины/ A.A. Воробьев, H.H. Васильев, А.Т. Кравченко//М.: Медицина, 1965. - С. 240.

21. Воробьев A.A. Микробиология и иммунология/ A.A. Воробьев//М.: Медицина, 1999. - С.470.

22. Воробьёв, A.A. Современные направления в разработке иммунно-биологических препаратов/ A.A., Воробьёв// ЖМЭИ, 2009, №5.- С. 16-21.

23. Воронин Е.С. Иммунология/Е.С. Воронин, А.М. Петров, Д.А. Дев-

ришев//М.: Колос, 2002. - С.75-87.

24. Воронин, Е.С. Основы биотехнологических процессов/ Е.С., Воронин, И.В. Тихонов, Т.Н., Грязнева//Учеб.пос. М., МГА ВМ и Б.,2005 - С. 864.

25. Воронина, Е.И. Применение дизпаркола при желудочно-кишечных заболеваниях поросят / Е.И. Воронина, С.И. Плотников, В.В. Чернов // Ветеринария. - 2009. - № 9. - С. 16-17.

26. Герман В.В. Разработка средств специфической защиты животных на основе инактивированных антигенов и современных адъювантов/ В.В. Герман, Б.Т. Стегний// Харьков: Ветеринарная медицина. - 2003- Вып.81. - С. 172-177.

27. Гинцбург, A.A. "Quorumsensing или социальное поведение бактерий/ A.A., Гинцбург, Т.С., Ильина, Ю.М. Романова// ЖМЭИ, 2011, №5. - С. 106-108.

28. Глаголев С.М. Применение диастопа для лечения колибактериоза и сальмонеллеза у поросят/ С.М. Глаголев, В.В. Набоева //Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. Международная научно-производственная конференция, посвященная 100 летию со дня рождения профессора Авророва A.A.- Воронеж, 2006. - С. 1039-1041.

29. Голиков, A.B. Эффективность байтрила при инфекционных болезнях животных / A.B. Голиков, В.Н. Скворцов, Н.В. Семенова // Ветеринария. - 1994. - №1. - С. 29-30.

30. Гордон А. Вакцины, вакцинация и иммунный ответ/А., Гордон, Р., Алистер// М., Медицина, 2006.- С.344.

31. Горелов A.B. Пробиотики: Механизмы действия и эффективность при инфекциях желудочно-кишечного тракта/ A.B. Горелов, Д.В.УсенкоЮпидемиология и инфекционные болезни. - 2005. - №4 - С.52-56

32. Гречухин А.Н. Современный подход к терапии при ассоциированных инфекциях / А.Н. Гречухин, Т.Б. Юхова // Ветеринария. - 2009. - № 9.-С. 8-10.

33. Гречухин А.Н. Практическое руководство по ветеринарным об-

работкам в свиноводческих хозяйствах / А.Н. Гречухин - С. - Петербург, 2010.-С. 408.

34. Гриценко В.А. Экологические и медицинские аспекты симбиоза Esherihiacoli и человека/ В.А. Гриценко, О.В. Бухарин// Микробиология. -2000.-№3.-С. 92-99.

35. Гуськова Т.А. Антибактериальные препараты /Т.А. Гуськова,Л.А. Чичерина, JI.K. Романова и др. // Сб. трудов ВНИХФИ. 1984; 51-4.

36. Данилевская Н. В. Пробиотики в ветеринарии/ Н. В. Данилевская, М. Сидоров, В. В. Субботин// Ветеринария, 2000, №11.- С. 17 - 22.

37. Данилевская Н. В. Фармакостимуляция продуктивности животных пробиотическими препаратами. Автореф. Докт. Дис., 2007. - С. 36.

38. Девришов Д.А. Протективная активность вакцины ОКЗ/Д.А. Дев-ришов, Е.С. Воронин//Ветеринария. - 1999. - №4. - С. 14-17

39. Девришов Д.А. Разработка и изучение свойств иммуномодуляторов и биологических препаратов для профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных: Автореф. дис. д-ра биол. наук/ Д.А.Девришов//М., 2000. - С. 53.

40. Духанин В.В. Резистентность кишечной палочки и сальмонелл к антибиотикам, температуре в условиях повышенного геомагнитного поля// Острые кишечные инфекции. - Л., 1987 - Вып.11. - С.49-52.

41. Доценко В.А. Опыт применения иммуногенного препарата, изготовленного из условно-патогенной микрофлоры/ В.А. Доценко, P.C. Луганский// Харьков: Ветеринарная медицина. - 2005. - Вып.85. - С.390-392.

42. Евглевский Д.А. Среды для выделения и культивирования кишечной палочки и сальмонелл/ Д.А. Евглевский, С.А. Макавчик// Ветеринарный консультант. - 2004. - №22. - С. 19-20.

43. Ефанова, Л.И. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Л.И. Ефанова, Е.Т. Сайдулдин; под ред. А.Г. Шахова. - Воронеж: ВГАУ, 2004. - С. 391.

44. Ефанова Л.И., Сайтфиллин Е.Т. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных/ Л.И. Ефанова, Е.Т. Сайтфиллин //Воронеж: ВГАУ, 2004, С. 269-272.

45. Зароза В.Г. Новое о возбудителях колибактериоза и факторах их вирулентности/Зароза В.Г.//Ветер.газ., 1994. -№17.

46. Заславская Н.В. Выживаемость бактерий, находящихся в составе со- обществ, в присутствии антибиотиков и металлов: Автореф. дис. канд. мед. наук/ Н.В. Заславская //СПб., 2001.- С. 20.

47. Змушко Н.И. Клиническая иммунология/ Е.И. Змушко, Е.С. Белозе-ров, Ю.А. Митин//СПб.: Питер, 2001. —576с.

48. Иванов М.М. Антибиотикорезистентность и пути ее преодоления// Российский ветеринарный журнал. - 2009. - №4. - С.60-63.

49. Калуцкий П.В. Магнитное поле как экологический фактор / П.В. Калуцкий, В.В. Киселева // Материалы международного экологического форума, Курск, 1995. -С.116-117.

50. Ким P.E. Сравнительная эффективность различных способов лечения острых желудочно-кишечных болезней телят/ P.E. Ким, В.П. Урбан, Г.Е. Лигай // Пути интенсификации производства молока и мяса, профилактика болезней сельскохозяйственных животных в современных условиях: Тез.докл.Рос. науч.-практ. конф. - Смоленск, 1992. - С.157-158

51. Климова Е.А. Рациональная антибактериальная терапия/Е.А. Климова //Справочник врача общей практики. - 2006. - №10. - С.55-58.

52. Ковалев В.Ф. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник/В.Ф. Ковалев и др.// М.: Агропромиздат, 1988. - С. 222.

53. Ковальчук Н.М. Антигенная вариабельность и вирулентность эпизоотических штаммов эшерихий/ Н.М. Ковальчук// Природные и интелекту-альные ресурсы Сибири [Сибресурс-7-2001]: 7-я Междунар. науч. -прак. конф. - Томск, 2001. - С.269-271.

54. Ковальчук Н.М. Подбор питательных сред и методов культивиро-

вания эшерихий для накопления термостабильного энтеротоксина/ Н. М. Ко-вальчук// Материалы Всероссийской конф. - Красноярск, 1999. - С. 10-15.

55. Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология./ Колычев Н.М., Госманов Р.Г. - М.:КолосС, 2003, С.289-294.

56. Королёва, Е.А. Разработка вакцинных препаратов/Е.А. Королёва, P.M., Зигангирова// ЖМЭИ, 2011,№6.- С. 120-125.

57. Коробов A.B. Справочник ветеринарного врача /A.B. Коробов// М.: ООО «Аквариум-Принт», 2006. - С. 110-115.

58. Коротяев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология/ А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. — СПб.: Специальная литература, 1998.-С. 558.

59. Красников Г.А. Влияние антибиотиков на органы иммунитета при вакцинации/ Г.А. Красников, Б.Т. Стегний// Харьков: Ветеринарная медицина. - 2003. - Вып.81. - С. 162-170.

60. Ломако Ю.В. Производственное испытание ассоциированной вакцины против колибактериоза и протейной инфекции телят и поросят/ Ю. В. Ломако, Н. Н. Андросин// Вет. медицина. - Харьков, 2005. - Т. 2. - С. 685 -687.

61. Макавчик, С.А. Колибактериоз птиц// Автореф. Канд. Вет. Наук СПБ.-2007,- С. 19.

62. Макарова М. А. Маркеры вирулентности у штаммов Е. coli/ М. А. Макарова, Л. А. Кафтырева, Н. С. Григорьева// ЖМЭИ, 2012. - №3. - С. 27 -29.

63. Масьянов Ю.Н. Иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространенных болезнях и его коррекция: Автореф. дисс. докт. вет. наук/Ю.Н. Масьянов// Воронеж, 2009. - С.48.

64. Матвеев К.И. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней/К.И. Матвеев//М.: Медицина, 1973. - С. 422.

65. Медуницин Н.В. Экспериментальный комитет ВОЗ по биологической ситуации/ Н.В. Медуницин// М.: Биопрепараты,- 2008. - №1. - С.21-23.

66. Медуницын, H.B. Основы иммунопрофилактики и терапии инфекционных болезней./ Н.В. Медуницын, В.И. Покровский// Учеб. Пособ.:М.: ГЭОТАР-Медиа,2007 - С. 525.

67. Мечников И. И. Невосприимчивость к инфекционным болезням. М, 1947.-С. 698.

68. Мешалова А. М. Теоретические основы и принципы конструирования энтеральных вакцин// М.: Медицина, 1974. - С. 145.

69. Мишагин Ю. Ф. Колибактериоз/ Ю. Ф. Мишагин// Руководство по инфекционным болезням животных. - Ростов н/Д. - 2008. - С. 499.

70. Овчинникова J1.K. Школа фармаколога: эффективность и безопасность фторхинолонов/ JI.K. Овчинникова, Р.И. Ягудина, Е.А. Овчинникова// Российские аптеки. - 2000 - №9

71. Озерцковский H.A. Бактерийные, сывороточные и вирусные лечебно-профилактические препараты/Н.А. Озерцковский, Г.И. Останина// СПб.: Фолиант, 1999.-С. 470.

72. Першин Б. Б. Вакцинация и местный иммунитет// Медицина, 1990. -С. 263.

73. Покровский В. И Медицинская микробиология/ В. И. Покровский, O.K. Поздеев. - М.: ГОЭТАР, Медицина, 1999. - С. 170.

74. Полякова O.A. Биологические свойства патогенных эшерихий и принципы отбора производственных штаммов/ O.A. Полякова, Н.И. Евглев-ская, Т.Н. Исханова, 1991.-т. 56.-С. 19-26.

75. Рабинович М.И. Несовместимость и побочное действие лекарств, применяемых в ветеринарии: учеб.пособие для вузов по спец.111201 «Вете-ринария»/М.И. Рабинович//М.: Колос, 2006. - С. 247.

76. Радчук H.A. Использование специфической профилактики колибак-териоза птиц/ Н. А. Радчук, А. А. Бирюкова, J1. И. Рожнова// Сб. науч. тр. ЛВН, 1992.-С. 77-79.

77. Радчук Н. А. Колибактериоз птиц/ Н. А. Радчук// JL: Агропромиз-дат, 1991.-С. 207.

78. Райкис Б.Н. Общая микробиология с вирусологией и иммунологией/ Б.Н. Райкис, В.О. Пожарская, А.Н. Кадиев//М., 2002. - С. 233.

79. Рамон Г. 40 лет исследовательской работы/ Г. Рамон// М.:Медицина, 1969.-С. 148.

80. Раскин Б.М. Проблема питательных сред на современном этапе// ЖМЭИ. - 1998. - №6. - С.84-88.

81. РаскиН Б.М. Отечественные питательные среды и перспективы их разработки/ Б. М. Раскин, В. О. Пожарская// М., Медицина, 2007. - С. 233.

82. Рахманина И.А. К разработке специфической профилактики коли-бактериоза/ И. А. Рахманина, Т. А. Грошева// Тр. ВИЭВ, 1990., т. 51. - С. 102 - 105.

83. Романова Ю.М. Бактериальные биоплёнки//ЖМЭИ, 2011,№3-С.99-105.

84. Савов Д. Колисептицемия//Болести по птиците// София, Земиз-дат,1967.

85. Самуйленко А .Я. Биотехнология производства новых ветеринарных препаратов/ А.Я. Самуйленко, В.И. Еремец, Т.А. Авдеева// Харьков: Ветеринарная медицина. - 2003. - Вып.82. - С.734-736.

86. Самуйленко А.Я. Биологические и технологические аспекты разработки и производства пробиотических препаратов// Харьков: Ветеринарная медицина. - 2005. - Вып.85. - С.959-961.

87. Самуйленко А.Я. Перспективные направления в технологии культивирования бактерий при производстве вакцин для ветеринарной медицины/ А.Я. Самуйленко, А.А. Раевский// Харьков: Ветеринарная медицина. -2005. - Вып.85. -С.961-963.

88. Светоч Э.А., Гусев В.В. Этиология постотъемной коллидиареи сви-ней/Э.А. Светоч, В.В. Гусев//Ветеринария. - 2005. №12. - С. 23-26.

89. Сидоров М.А. Иммуногенные свойства токсинов эшерихий/ М.А. Сидоров, Т.Д. Курашвили // Иммунитет сельскохозяйственных животных: Тр. ВИЭВ. - М., 1979.-t.50.-C. 78-82.

90. Сидоров М.А. Колибактериоз [колиинфекция, колидиарея] новорожденных телят/ М.А. Сидоров // Итоги науки и техники. Животноводство и ветеринария. - М., 1980. - Т. 13. - С. 60.

91. Скворцов В.Н. Антимикробная активность ципрофлоксаци-на/В.Н. Скворцов, А.А.Балбуцкая//Международный вестник ветеринарии, 2012 СПб.,№2.-С.40-42.

92. Смирнов М.А. Совершенствование средств диагностики, профилактики и лечения поросят, больных колибактериозом. Автореф. канд. Дис., Курск-2010.-С. 21

93. Страчунский JI.C. Антибактериальная терапия. Практическое руководство/ JI.C. Страчунский, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова// Москва, 2000. - с. 1-11.

94. Страчунский JI.C. Состояние антибиотикорезистентности в России/ Л.С.Страчунский // Клиническая фармакология и терапия. - 2000, №2. -С. 6-9.

95. Степанова Э.Д. Модификация питательных сред для выделения и выращивания условно-патогенных микроорганизмов / Э.Д. Степанова, Р.Ю. Юносова // Журнал микробиология, 2012, №2, С. 117-119.

96. Субботин В.М. Современные лекарственные средства в ветеринарии: серия «Ветеринария и животноводство»/В.М. Субботин, С.Г. Субботина, И.Д.Александров// Ростов-на-Дону: «Феникс», 2000. - С. 359- 424.

97. Супотницкий М.В. Микроорганизмы, токсины и эпидемии/М.В. Супотницкий//М.: Вузовская книга, 2002. - С. 278.

98. Терновская Л.Н. Питательная среда для выделения и культивирования бифидобактерий/ Л. Н. Терновская, Т. Э. Калиника, С. М. Суханова// Журн. микробиол., 2011, №6. - С. 124 - 127.

99. Тец В.В. Изменение вирулентности энтеробактерий в присутствии субингибирующих концентраций антибиотиков/ Тец В.В., Норманн Л. Л.// Антибиотики и химиотерапия. - 1991. - Т.36. - №4. - С.20-22.

100. Триполитова A.A. Бактериальные токсины и анатоксины/ А.А.Триполитова// Пособие для врачей. - Томск: Изд-во Томского универси-

тета, 1981.-С. 219.

101. Торбан М.А. Механизмы обезвреживания токсинов формалином// ЖМЭИ. - 1970. - №4. - С.83-86

102. Трунов А.И. Динамические взаимодействия между показателями иммунной системы// Тезисы докладов 1 съезда иммунологов России. - Новосибирск, 2002. - С.484-488.

103. Тулина Н.В. Наставление по применению тулина в качестве иммуностимулирующего средства/ Н.В. Тулина// Утверждено Департаментом Ветеринарии 11 сентября 2000г.-№13; 5-2/2140.

104. Урбан В.П. Проблемы ветеринарной иммунологии/В .П. Ур-бан//М.: Агропромиздат, 1985.-С. 286.

105. Урбан В. П. Болезни молодняка/ В. П. Урбан// М.: Колос, 1984. -С. 243.

106. Ушкалова Е. Значение лекарственных форм для рациональной антибиотикотерапии. Лекарственная форма Солютаб/ Ушкалова Е.//Врач. -2007. -№3. С. 63-66.

107. Федоров Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят//Ветеринария. - 1996. -№11.- С.3-6.

108. Федоров Ю.Н. Иммунокоррекция: применение и механизмы действия иммуностимулирующих препаратов// Ветеринария. - 2005. - №1.- С.3-6.

109. Федосеева В.Н. Бактериальные вакцины в лечении инфекционных заболеваний//М.: Биопрепараты.-2006. - №4[24]. - С. 16-19.

110. Хаитов P.M. Современные представления о защите организма от инфекций/Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин// Иммунология. - 2001. - №1 - С.61-66.

111. Хаитов P.M. Иммунная система и ее особенности строения и функционирования в норме и патологии/ P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин// Иммунология. - 2007. - №5. - С.4-7.

112. Харитонов JI.B. Биологическая эффективность пробиотика на основе мол очно-кислых бактерий для телят/ Л.В. Харитонов, В. А. Обрывков// Биологические основы высокой продуктивности сельскохозяйственных жив-

х.: Тез.докл. Междунар. конф. - Боровск, 1990. - 4.1. - С.55-56.

113. Хитрова А.Е., Сергеев В.А., Алипер Т.И. Эффективность применения комбинированных вакцин серии комбовак/ А.Е. Хитрова, В.А. Сергеев, Т.И. Алипер // Ветеринария.-2007. №7.-С. 17-18.

114. Челноков В. А. Физиологический статус телят после применения микрокапсульного препарата, включающего пробиотик и селен. Автореф. канд. дис., Курск, 2013. - С. 21.

115. Червинец В.М. Изменчивость эшерихий в условиях экспериментального моделирования флюктуаций геомагнитного поля//Влияние магнитных полей на биологические объекты: Материалы 3-го всесоюзного симпозиума - Калининград, 1975. -С. 54.

116. Червинец В.М., Изменчивость эшерихий в условиях геомагнитного поля. // Влияние магнитных полей на биологические объекты: Материалы Всесоюзного симпозиума - Калининград, 1990. - С.54-60.

117. Червинец В.М., Антибактериальная активность серебряного ге-ля/В.М. Червинец, В.М. Бондаренко//ЖМЭИ,2011,№4. -С.88-92.

118. Чернощеков К.А. Метод изучения геомагнитного поля на жизнедеятельность микроорганизмов кишечной группы/К.А. Черноще-ков//ЖМЭИ - 1999.- №9.-С. 82-85.

119. Чернощеков К.А. Метод изучения геомагнитного поля на жизнедеятельность микроорганизмов кишечной группы/ К.А. Чернощеков//ЖМЭИ, 2003. -№3.- С. 82-85.

120. Чижевский А. J1. Вся жизнь/ А. JI. Чижевский// М., Сов. Россия, 1974.-С. 207.

121. Чижевский А. Л. Эхо солнечных бурь/ А. Л. Чижевский// М.: Мысль, 1976.-С. 376.

122. Чуприна Р.П. Сравнительная характеристика отечественных и зарубежных вакцин//М.: Биопрепараты,- 2006. - №4[24]. - С.27-28.

123. Шапиро Н.И. К обоснованию теории детоксикации экзоток-синов/Н.И. Шапиро, И.В. Москвичева//Труды Московской ИВС.-1973.- №6.-

С. 18-30.

124. 122 Шапиро Н.И. Микроорганизмы, вирусы, бактерии и гри-бы/Н.И. Шапиро//СПб.: Элби-СПб, 2003.-С. 324.

125. Шахов А.Г. Этиология и профилактика желудочно-кишечных й респираторных болезней телят и поросят // Ветеринарный консультант. — №1.-. 2003.-С. 11-13.

126. Шахов А.Г. Применение иммуномодуляТоров при вакцинацйй животных против сальмонеллеза/ А.Г. Шахов, Ю.Н. Масьянов, Ю.Н. Бригадиров//Ветеринария. - 2006. - №6. - С.21 -26.

127. Шевелева М.А. Применение пробиотиков при антибиотикотера-пии// Антибиотики и химиотерапия. - 2009. - Т.54. - №3-4. - С.61-70.

128. Шепилова Р.Г. К вопросу оценки диагностической эффективности питательных сред/ Р.Г. Шепилова, JI. А. Нефедова// Стандарты, штаммы и методы контроля биопрепаратов, М., 1996. - С. 136-143.

129. Abrahamson D.R., Rodewald R. Evidence for the sorting of endocytic vesicle conents during the receptor - mediated transport of IgG across the newborn rat intestine// J. Cell. Biol. - 1999. - V. 91. - P. 270 - 280.

130. Actan H. Characterisation of attaching-effacing Escherichia coli isolated from animals at slaughter in England and Wales // Veterinary Microbiology. - 2004. - Vol. 102. - № 1/2. - P. 43 - 53.

131. Anderson J. IgM in bone marrow derived lymphocytes Synthesis surface deposition turnover and carbohydrate composition in stimulated mouse В cell // Evr. J. Iwunol. - 1994. - V. 4. - P. 170 - 180.

132. Axselsson L.T., Chung Т. C., Dobrogosz W., Lindgren S. // Microbiol. Ecol. HithDis.- 1989. Vol. 2.-P. 131 -236.

133. Bachmann P. A. Viral gastroenteritis in calves cause and prevention // Mod. vet. pract. - 1983. - Vol. 64, N 7. - P. 559 - 565.

134. Barrington G. M., BesserT. E.,Lavis W.C. e. a. Expression of immunoglobulin G1 receptors in bovine mammary epithelial cells and mammary ltuko-cytes// J. Dairy Sci. - 1997. - V. 80. - P. 86 - 93.

135. Barna I., Balauca I.V. Sindromulimmunodeficatar dab indit la animale. 1.1, encozele bovine. Lucr. J. /Inct. Agron. Fac. Med. Veter., Cluj - Napoca, 1999.-VoI.17-P. 131-146.

136. Baster A. A receptor for antibody on B lymphocytes. II. Immunochemical and electron microscopy characteristics // J. Exp. Med. - 1992. - V. 135. -P. 627 - 642.

137. BesserT. E., Gay C. C., Szenci O. Decreased colostral immunoglobulin absorption in calves with postnatal respiratory acidosis // J. Am. Med Assoe. -1999. - Vol. 196 -N 8. - P. 1247 - 1249.

138. BesserT. E.,Szenci O. Decreased colostral immunoglobulin absorption in calves with postnatal respiratory acidosis // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1999. - V. 196. -P. 1239- 1443.

139. Bianchi A.T. Development of the B- and T-cell comportments in porcine lymphoid organs from birth to adulat life: an immunohistological approach // Vet. Immunol. Immunopathol. - 1992. - V. 33. - P. 201 -202.

140. Binns R.M., Licence S.N. Patterns of migration of labelledblod lymphocyte subpopulations: evidence for two types of Peyers patch in the young pig // Adv. Exp. Med. Biol. - 1995. - V. 186. - P. 661 - 668.

141. Booher, S. L. Persistence of Escherichia coli 0157 : H7 in experimentally infected swine / S. L. Booher, N.A. Comick, H.W. Moon // Veterinary Microbiology. - 2002. - Vol. 89. - № 1. - P. 69 - 81.

142. Bortolussi H., Hewlett S., Rajaraman K. Deficient priming activity of newborn cord blood - derived polymorphonuclearneutrophilicgranulocutes with einopolvsaccha ride and tumor necrosis factor-L triggered with formyl-metnionul-leucyl-phenilalanine. // Pediatr. Res. - 1993. - V. 34. - № 3. - P. 243 - 248.

143. Bourne F. J., Curtis J. The transfer of immunoglobulinsIgG IgA and IgM from serum to colostrum and milk in the sow // Immunol. - 1993. - V. 24. -P. 157- 162.

144. Bowman E. P. The intestinal chemokine thymus-expressed chemokine [CCL25] attracts IgA antibody-secreting cells // J. Exp. Med. - 2002. - V. 195. -P.

269 - 275.

145. Brandon M. R., Watson D. L., Lascelles A. K. The mechanism of transfer of immunoglobulin into mammary secretion of cows// Aust. J. Biol. Med. Sci. - 1999. -V. 49. - P. 613 - 623.

146. Brandzaeg P. Role of secretory antibodies in the defence against infection // Int. J. Med. Microbiol. - 2003. - V. 293. - P. 3 - 15.

147. Brandzaeg P. The B-cell system of human mucosae and exocrine glands // Immunol. Rev. - 1999. - V. 171. - P. 45 - 87.

148. Brenner D.L. Opposition to the proposal to the family name Entero-bacteriaceae // Int. J. System. Bad. 1983. Vol. 33. № 4. P. 892 - 895.

149. deBrito B. G., Gaziri L. C. J., Vidotto M. C. Virulence factors and clonal relationships among E. coli strains isolated from broiler chickens with cellulitis. Inf. &Immun, 2003, 71, 7, 4175 - 4177.

150. Brown K. M., Arthur J. R. Selenium selenoproteins and human health // Publik. Health. Nutz. - 2009. - 4 [2B], - P. 593 - 599.

151. Brown W.R., Kloppel T.M. The liver and IgA: immunological, cell biological and clinical implications // Hepatology. - 1999. - V. 9. - P. 763 - 784.

152. BrownW.R., Kloppel T.M. The role of the liver in translocation of IgA into the gastrointestinal tract // Immunol. Invest. - 1999. - V. 18. - P. 269 -285.

153. Butler J. E. Comparative quantitation of bovine serum IgGl , IgG2, IgA and IgM antibodies using the amplified enzymelinkedimmunosorbent assay [a -ELISA] / Am. J. Vet. Res. - 1999. - V. 41. P. 1479 - 1491.

154. Chevillo N.F. Interaction of blood-borac Escherichia coli with phagocytes of spleen and liver of turkeys //Am. J. Vet. Res. 1998. V. 43: 1030 - 1040.

155. Colibacilosis. In H.G. Purchase. A Laboratory Manual for the Isolation and Identification ot Avian Pathogenes, 1989, 3rd ed. American Association of Avian Patnologists. Kennet Square. PA. P. 12-13.

156. Derfrancisca R. Antimicrobial resistance of commensal Escherichia coli from dairy cattle associated with recent multi-resistant salmonellosis outbreaks

// Veterinary Microbiology. - 2004. - Vol. 98. -№ 1. - P. 55 - 61.

157. Dijk, A. J. The effect of dietary spray-dried porcine plasma on clinical response in weaned piglets challenged with a pathogenic Escherichia coli / A.J.vanDijk, P. M. M. Enthoven, S. G. C.van der Hoven, et al. // Veterinary Microbiology. - 2002. - Vol. 84. - iss 3. - P. 207 - 218.

158. Dho M. Adhesive properties and iron uptake ability in Escherichia coli lethal and nonlethal for chichs // Avian Dis. 1994. 28: 1016 - 1025.

159. Dho M. Escherichia coli colonization of the trachea in poultry: Comparison of virulent and avirulent strains in gnotogenic chickens// Avian Dis. 1998. 26: 787-797.

160. Dimitrova A. Comparative study of «Bioxan-emulsum» in suckling pigs for prophylaxis of bacterial enteritis / A. Dimitrova, R. Bankova, S. Yordanov, et al. // Год. Софийскийунив. «Св. КлиментОхридский», Биол. фак. -2005.-Р. 411 -417.

161. Dosois С.М. Bacterial colonization and in viva expression of FI [type I] fimbrial antigens in chickens experimentally infected with pathogenic Escherichia coli / C.M. Dosois , N. Chanteloup, M. Dho-Moulin, A. Bree, C. Desautels and J.M. Fairbrother // Avian Dis. 1994. 38: 231 - 239.

162. Ederman R. Summary of works hop on Enteropathogenic E. coli / Ederman R., Levine M. // J. of Infect. Diseases. - 1993.-V. 7. - № 6. = P. 1108 -1118.

163. Evans D.J. Hemagglutination pattern of enterotoxic and enterotoxigenic E. coli determined with human bovine children and guinea pig erythrocytes in the presenct and absens of mannose / Evans D.J., Evans D.G., Duport H.L. // J. Inf. Immun. - 1999. - V.23. - № 2. - P. 336 - 376.

164. Fujioka H. Immunocytochemicalcolocalization of specific immunoglobulin A with sendaivtrus protein in infected polarized epithelium // J. Exp. Med. - 1998. -V. 188. -P. 1223 - 1229.

165. Gaastra W., deGraaf F.K. Host specific fimbrial adhesions in noninvasive enterotoxigenic E. coli strains // Microbiol. Rev. 1982. Vol. 46. .№ 2. P.

129-161.

166. Casali P., Sehttino E.W. Structure and function of antibodies.// Carr. Top. Microbiol. &Immunol. - 1996. - V. 210. - P. 167 - 179.

167. Georgieva R. Dynamics of T-suppressor and T-helper lymphocytes plaqueforming cells during normal pregnancy in the sow // I. Reprod. Immunol. -1994. -V. 6. - P. 151 - 156.

168. Ginns C.A., Browning G.F., Benham M.L., Whithear K.G. Development and application of aerosol challenge method for reproduction of avian colibacilosis. Avian Pathol, 1998, 27, 505 - 511.

169. Gutzwiller A. Effect of colostrums intake on diarrhea in cadence in new-born calves / A. Gutzwiller // Schweiz. Arch. Tierheilkd. — 2002. — Vol. 144. №2/-P. 654-656.

170. Cyles C. L. A heat-labile enterotoxin from strains of E. coil enteropa-togenic for pig/ Gyles C.L., Barnum D.A. //J. Infect. Dis. — 1969. — № 120. — P. 419-426.

171. Gyles C.L. Naturally occurring plasmid earring genes for enterotoxin production and drug resistance / Gyles C.L. // Science. — 1977. — V.198. — № 4313.—P.198 - 199.

172. Gyles C.L. The enterotoxins plasmids of E. coli/ Gyies C. L., Falkows S., So M. // J. Infect. Dis. — 1974. — V.130. — № 1. — P. 40 - 49.

173. Hall G.A. Comparision in gnotobiotic pigs of lesions by verotoxigenic and non-verotoxigenie E. coli// Hall G. A., Chanter N., Bland A. P. // Vet. pathol. — 1988. -№3. -P.205 -210.

174. Hall G. A. Dysentery caused by E, coli [S. - 102 - 9] in calves: natural and experimental disease/ Hall G.A., Reynolds D. J., Chanter N. et al. // Vet. Pathol. - 1985. - V. 22. - № 2. - P. 156 - 163.

175. Hosband A. I. Veterinary Immunology // N. V. 1998. - P. 357 - 365.

176. Kato I., Endo-Tanka K., Yokokura T. Suppressive effects of the oral administration of Lactobacillus casei on type 2 collagen induced arthritis in DBA mice //Life Sci. - 1998. -Vol. 63. - N. 8. - P. 635 - 644.

177. Konffman F. The bacteriology of Enterobacteriaceae / Kopengagen: Munksgoard. 1976.-273 P.

178. Kummar A. Occurrence of enterogenicenterotoxigenic E. coli in cow, calves and infant children/ Kummar A., Sharma V., Thapliyal D. // Indian J. Comp. Microbiol. Infect. Dis. - 1982. - V.3.- № 3. - P. 174 - 177.

179. Liar H. Classification of Escherichia coli // In C. L. Gyles ted. Escherichia coli in Domestic Animals and Humans. CAB Intl. Wallingford. United Kingdom, 1994.

180. Lobb R.R. Integrin-immunoglobulin superfamily interactions in endothelial leukocyte adhesion. Adhesion: It's Role in Inflammatory Diesease // Eds. J. M. Harlan, D.Y. Liu. - W.H. Freeman. - New York. - 1992.

181. Lopes B.M. Yersinia enterocolitica: production de toxinathermosta-blecomoindencepatogenicidad / Lopes B.M., Jimennes M.L., Gomez C.M. // Rev. saindehig. Publica. - 1991. - V. 55. - № 7 - 8. - P. 795 - 802.

182. Macpherson A. Mucosal antibodies in inflammatory bowel disease are directed against intestinal bacteria //Gut. - 1996. -V. 38. - P. 365 - 375.

183. Maruoka T. Identification of the rat IgA Fc receptor encoptor in the ieukocyte receptor complex // Immunogentics. — 2004. — V. 55. — P. 712-716.

184. Matsuzaki T., Chin J. Modulating immune response with probiotic bacteria // Immunol. Cell Biol. — 2000. — Vol. 78, N L —P. 670 - 673.

185. Mazanec M.B. Intracellular neutralization of influenza virus by immunoglobulin A anti-hemagglutininmonpclonal antibodies// J. Virol.— 1995.— V. 69.- P. 1339 -1343.

186. Melamed D., Leitner G. and Heller E. D. A vaccine against avian colibacillosisbaced on ultrasonic inactivation of Escherichia coli // Avian Dis. 1991. 35: 17-22.

187. Mellata M. Dho-Moulin M., Dosois C.M. et al. Rose of virulence factors in resistance of avian pathogenic E. coli to serum and in pathogenicity. Inf&Immun, 2003, 71, 1, 536 - 540.

188. Nagy B. Azenteropathogen E. coil torzsekvirulenciafactorainakmutasa

a borjakhasmenesemk diagnostic kajban/ Nagy B., Nagy G. // Magyar allator. Lap-ja. - 1992. —V. 37. —№8. —P. 512-517.

189. Nagy B. Pathogenese der enteralin E. coli infection bein-ewgenorenenFerkeln und Kalbern/ Nagy B. , Moon H.W. , Isaacson R.E. // Whien. Tier. March. — 1999. —B. 66. — № 1. — P. 15 - 19.

190. Neumann E., Oliviera M.A., Cabral C.M. et. al. Monoassociationvith Lactobacillus acidophilus UFV-H2b20 simulates the immune defense mechanisms of germfree mice // Braz. J. Med. Biol. Res. — 1998. — Vol. 31, N 12. - P. 1565 -1573

191. Provence D. L., Curtiss R. Isolation and characterization of a gene involved in hemagglutination by an avian pathogenic E. coli strain. Inflmmun, 1994,

62, 1369-1380.

192. Rampen C., Mallard B. A. Effect of peripartum stress and healton circulating bovine lymphocyte subsets // Vet. Immunol. Immunopath. — 1997. — V. 59. -P.79-91.

193. Sieckmann D.G. The use of anti-immunoglobulins to induce a signal for cell division in B lymphocytes via their membrane IgM and IgD // Immunol. Rev. - 1980.-V. 52.-P. 55.

194. Smeaton T.C. Ehithelial cell renewal and antibody transfer in the intestine of the fetal and neonatal lamb // Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. -1995. - V.

63. - P. 41-51.

195. Smith E.M. Lymphocyte production of endorphins and endor-phinmediatedimmunoregulatory activity // J. Immunol. - 1995. - V. 135. - P. 779 -782.

196. Snoeck V. The IgA system: a comparison of structure and function in different species // Vet. Res. - 2006. - V. 37. - P. 455 - 467.

197. Springer W., Luskus C. Infectious bronchitis and mixed infections of Mycoplasma synoviae and Escherichia coli in gnotobiotic chickens. I. Synergistic role in the airsacculitissvndrome// Infect Immum. - 1994. 10: 578 - 589.

198. Veda J. Etiological studies on enterotoxigenic E. coli among isong

isolates from domestic animals in Japan/ J. Veda, N. Taracodoet. al // Nat. Inat. Anim. Health Quart. — 1999. —V. 21. — №2. - P. 108 -109.

199. Watkins D. A., Miller B. F., Neil D. H. In vivo inhibitory effects of Lactobacillus acidophilus against pathogenic Escherichia coli in gnotobiotic chicks // Poultry Scienc, 1992. N 61. P. 1298-1308.

200. Weinack O. M., Snoeyenbos G. H., Smyser C. E and Soerjadi A. S. Competitive exclusion of intestinal colonization of Escherichia coli in chicks //AvianDis. 1994. 25: 696 - 705.

201. Weaver D.M. Passive transfer of colostralimmunoglobulins in calves// J. Vet. Int. Med. - 2009. - V. 14. - P. 469-577.

202. White D. G., Dho-Moulm M., Wilson R. A. and Whittam T, S. Clonal relationships and variation in virulence among Escherichia coli strains of avian origin //MicrobPathog. 1993. 14: 399-09.

203. Williams P.P. Immunomodulating effect of intestinal absorbed maternal colostral lymphocytes by neonatal pigs// Can.Vet. Res. - 1993. - V. 58. - P. 1-8.

204. Wilson M.R., Svendsen J. Immunity to Escherichia coli in pigs: The role of milk in protective immunity to E. coli enteritis// Can. J. Comp. Med. -1999. -V. 35.-P. 239-243.

205. Wooley R.E., Nolan L.K., Brown J., Gibs P.S., Giddings C.W. and Turner K.S. Association of K-l capsule smooth lipopolysaccaharidestraT gene, and colicin V prodaction with complement resistance and virulence of avian Escherihia coli//Avian Dis. 1993.37: 1092-1096.

206. Wooley R. E., Nolan L. K., Brown J., Gibbs P. S. and Bounous O. I-Phenotypic expression of recombinant plasmids pKTI07 and pHKIl in an avirulent avian Escherichia coli//Avian Dis. 1994. 38: 127-134.

207. Wooley R. E., Spears K. R., Brown J., Nolan L. K. and Dekich M. A. Characteristics of conjugative R-plasmids from pathogenic avian Escherichia coli //Avian Dis. 1992. 36: 348-352.

208. Wooley R. E., Spears K. R., Brown J., Nolan L. K. and Fletcher O. J. Relationship of complement resistance and selected virulence factors in pathogenic

avian Escherichia coli// Avian Dis. 1992. 36: 679-684.

209. Wooley R. E., Nolan L. K., Brown J., Gibbs P. S., Giddings C. W. and Turner K. S. Association of K-I capsule smooth lipopolysaccharides, traT gene, and colicin V production with complement resistance and virulence of avian Escherichia coli//Avian Dis. 1993. 37: L092-1096.

210. Wooley R. E., Brown J., Gibbs P. S., Nolan L. K. and Turner K. R. Effect of normal intestinal flora of chickens on colonization by virulent colicin V-producing, avirulent and mutant colicin V-producing avian Escherichia coli //Avian Dis. 1994.38: 141-145.

211. Wray C. Laboratory diagnosis of Escherichia coli infections// In Esch-erihia coli in Domestic Animals and Humans [Ed. C. L. Gyles], CAB International, Wallingford Oxen. 1994. P. 596 - 628.

212. Wray C. and Woodward M. J. Laboratory diagnosis of Escherichia coli infections // In Escherichia coli in Domestic Animals and Humans [Ed. C L Gyles], CAB International, Wallingford Oxen. 1994. P. 595-628.

213. Yerushalmi Z., Smorodinsky N. I., Naveh M. W. and Ron E. Z. Adherence pill of avian strains of Escherichia coli 078 // Infect Immun. 1990. 58: 1129-1131.

ПРИЛОЖЕНИЯ

ЖЖЖЖЖЖ Ж

жжжжжж ж ж

ж

Li

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№2476210

* \ >■

СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ К РЕЗИСТЕНТНЫМ Е.coli

"л ' ¿К "

,Автор(ы<);- см ¿ на обороте

Ж

Ж

российская федерация

(19)

О

см tO

см

RU

(И)

,03)

С1

(51) МПК

А61К 31/00 (2006 01)

C12Q 1/04 (2006 01)

А61К 31/04 (2006 01)

федеральная служба по интеллектуальной собственности

_ я . - 1

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ,

(21)(22) Заявка- 2011141638/10,* 13.10.2011

(24) Дата начала отсчета срока действия патента 13.10.2011

Приоритет(ы)

(22) Дата подачи заявки. 13.10.2011

(45) Опубликовано 27.02:2013 Бюл. № 6*

fi

(56) Список документов,^цитированных в отчете о поиске 1Ш 2400218 С1,27Ю9.2010и5 2006027648 А1, 30 11.2006. НИ 0700745 А2, 28.07.2009. Ш 20050130288 А1, 16.06.2005. ЬШ 2377014 С1, 27.12.2009.

Адрес для переписки

305021, г.Курск, ул. К. Маркса, 70, КГСХА

(72) Автор(ы)

Евглевский Анатолий Алексеевич (1Ш), Евглевский Дмитрий Анатольевич (1Ш), Худяков Сергей Иванович (1Ш), Тимкова Ел*ена Анатольевна (1Ш), Татарников Кирилл Викторович (1Ш)

(73) Патентообладатель(и).

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И Иванова Министерства сельского хозяйства Российской Федерации (1Ш)

(54) СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ К РЕЗИСТЕНТНЫМ Е.соН

(57) Реферат

Способ по изобретению включает детоксикацию и полимеризацию 150-200 мг/мл испытуемых антибиотиков вначале 0,15±0,05% раствором глутарового альдегида при 38-40°С в течение 2-3 суток, а затем 0,1% раствором этония или 0,1% раствором

алкилдиметил бензил аммония или 0,1% раствором Биопага - Д при 38-40°С в течение 23 суток Использование способа повышает в 1,5-2,0 раза активность антибиотика по сравнению с производственными препаратами и обеспечивает бактерицидную эффективность к антибиотикоустойчивым Е coli 2 пр

73

м -с» ■ч о> го

о

Утверждаю

Временное наставление

энрофлок

.вано: Проректор по научной работе рекой I проф. Пигорев И.Я.

17 сентября 2014г.

применению экспериментального амоксициллина.

Общие сведения

Для овышения биоцидного и лечебного действия химического антибиотика энрофлоксацина вводят в его состав колистин, трилон-Б, аргинин и т.д. Однако и указанные компоненты не обеспечивают необходимого действия, так как, появляются микроорганизмы устойчивые к ним.

Обоснование приоритетного способа

Изготовления экспериментального энрофлоксацина с повышенным биоцидным и лечебным действием явилось возможность полимеризации структуры антибиотика глутаровым альдегидом с

алкилдиметилбензиламмония хлоридом и ли с этонием явилось их использование в полимеризации бактериальных токсинов высокая способность до 90 % биоразложение глутарового альдегида, а также превышение в 2-3 раза биоцидного действия на микроорганизмы по сравнению с формальдегидом.

Способ получения

Экспериментального энрофлоксацина или амоксициллина с глутаровым альдегидом и алкилдиметилбензиламмония хлорида или с этонием включает:

1. Растворение 100 г энрофлоксацина в 1 л дистиллированной воде.

2. Полимеризация раствора энрофлоксацина глутаровым альдегидом с алкилдиметилбензиламмония хлорида до 0,1% концентрации или 0,2% этония при 38-40°С в течение 3-4 суток.

3. Расфасовка по флаконам, закрытие пробками и этикетировка. Срок хранения- 3 года при 5-25 °С.

Биоцидные свойства экспериментального энрофлоксацина и амоксициллина

Антибиотики мкг/мл Е.соН 1000/мл (свежевыделенные) Е.соН 10000/мл (свежевыделенные) Лабораторные Е.соН 10000/мл

Производственный амоксициллин 3,2 мкг/мл + - -

Экспериментальный амоксициллин 3,2 мкг/мл с глутаровым альдегидом + + +

Производственный энрофлоксацин 2,4 мкг/мл + - -

Производственный энрофлоксацин с колистином 2,4 мкг/мл + - -

Экспериментальный энрофлоксацин с глутаровым альдегидом, этонием, алкилдиметилбензин 2,4 мкг/мл + + +

В целом экспериментальный энрофлоксацин или амоксициллин с глутаровым альдегидом с алкилдиметилбензиламмония хлоридом или этонйя проявлял биоцидное действие на 1 ООО/мл и 10000/мл вирулентных Е.соН.

Энтеральное введение экспериментального амоксициллина или энрофлоксацина обеспечивает после 2-3 суточного выпаивания ( 2 грамма на голову) утром и вечером прекращение диареи у поросят, зараженных Ютысячами вирулентных Е.соП выпаиванием с водой.

Ст.н.с., к.в.н.

Лечебные свойства

Курского НИИ АПП Аспирант Курской ГСХА

Татарников К.В

Евглевский Д.А.

Утверждаю совано: Проректор по научной работе и м Курско^ГСХА проф. Пигорев И.Я.

17 сентября 2014г.

Временное наставление пЗ^МШтовлению и применению колибактериозной анатоксин-вакцины (КАВ) для оральной и подкожной вакцинации поросят.

1.0бщие сведения

Основным недостатком существующих отечественных и зарубежных колибактериозных анатоксин-вакцин является выращивание производственных или свежевыделенных патогенных Е.соН на мясопептонном глицериновом бульоне, и проведение детоксикации и полимеризации экзо-, эндо и суперэнтеротоксинов 0,5-0,7 % формальдегидом или (3- пропилактоном, использование ртутьсодержащего консерванто-мертиолята , которые обладают канцерогенным действием. При этом формальдегид и (3- пропилактон не обеспечивают полноту детоксикации токсинов и соответственно не способны превратить их в полноценные анатоксины.

Способ получения колибактериозной анатоксин-вакцины

Технология получения экспериментальной вакцины с повышенными иммуногенными и протективными свойствами включает:

1 .Выращивание Е.соН на предложенной жидкой минеральной

(синтетической) питательной среде в течение 3-4 суток до 75-90 млрд/мл микроорганизмов.

2. Автоклавирование при 1,0 атм. В течение 30 минут.

3. Детоксикацию и полимеризацию экзо-, эндо и суперэнтеротоксинов вначале 0,3-0,4 % глутаровым альдегидом при 38-40°С в течение 3-5 суток, а затем 0,3 % этония или 0,2 % алкилдиметилбензиламмония хлорида при 3840 °С в течение 5 суток.

4. Расфасовка препарата по флаконам, закрытие резиновыми пробками, обкатывание алюминиевыми колпачками стерилизация при 1 атм. В теченйе 20-30 мин.

5. Этикетировка флаконов с вакциной.

Порядок применения

Экспериментальная колибактериозная анатоксин-вакцина вводится двумя методами:

а) подкожно поросятам (2-4 мес.) по 7-10 мл двукратно с интервалом 14-15 суток;

б) орально путем выпойки с водой, кормом по 25-30 мл с концентрацией 75±10 млрд/мл микробных тел ежедневно в течение 5-7 суток.

Протективные (защитные) профилактические свойства КАВ

Колибактериозная анатоксин-вакцина при оральном (90%) и подкожном (70%) введении обеспечивает защиту поросят от подкожного (150 тыс.Е.соП), и энтерально с водой (150 тыс.Е.соП) заражения.

Иммуногенная активность

У вакцинированных поросят в сыворотке крови образуются гемагглютинирующие антитела в титре 1:200-1:400, т.е. сыворотка крови в указанном разведении способны вызвать агглютинацию (склеивание) эритроцитов кролика, барана.

Ст.н.сотрудник, к.в.н. Курского НИИ АЛЛ

Аспирант Курской ГСХА

Евглевский Д.А.

Татарников К.В.