Совершенствование методов индикации и таксономии семейства Enterobacteriaceae тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Жиглов, Валерий Иванович

• Жиглов, Валерий Иванович
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Жиглов, Валерий Иванович

ВВВДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Сальмонеллез. Распространение и лабораторная диагностика.II

1.2. Колибактериоз

1.3. Таксономия кишечных бактерий.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДУ ЖСЛЕЩОВАНШ.

Глава 3, ПУТИ КОНСТРУИРОВАНИЯ ЭРИТР01ЩТАРШХ АНТИТЕЛЬНЫХ

ДИШЮСТИКУШВ.

Глава 4. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ВОЗШЖЮСТИ СЕРО ЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ С ЭРИТРОЦИТАРНЫМИ ИММУНОРЕАГЕНТАМИ.

4.1. Сравнительная оценка реакций, основанных на феномене пассивной агглютинации, для индикации антигенов.

4.2. Применение эритроцитарных диагностикумов при серологическом обследовании животных

Глава 5. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ТАКСОШМШЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ

5.1. Идентификация энтеробактерий с помощью перфо-картного определителя.

5.2. Серологическое типирование эшерихий

5.3. Подборка оптимального варианта составления поливалентных сывороточных препаратов с целью конструирования диагностической рапид-системы сальмонелл редких групп.

5.4. Составление алфавитного указателя рода salmonella

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование методов индикации и таксономии семейства Enterobacteriaceae»

Единство экологической системы, представленной цепью человек - животное - окружающая среда, диктует настоятельную необходимость объединения усилий ветеринарных и медицинских служб при разработке ряда мероприятий общебиологического профиля. Для решения этой актуальной задачи Министерством здравоохранения, Министерством сельского хозяйства и Восточным отделением ВАСШШГ от 22 мая 1981 года был издан приказ, предусматривающий дальнейшее улучшение эффективности сотрудничества между данными ведомствами, с целью реализации широкой Международной программы, разработанной ВОЗ, по охране здоровья населения от заболеваний, в первую очередь от зоонозов.

Следует отметить, что в настоящее время насчитывается около 190 заболеваний, общих для человека и животных. Среди возбудителей данных заболеваний немаловажное значение принадлежит представителям семейства Enterobacteriaceae , объединяющим микроорганизмы, которые обладают, как правило, широкой видовой патогенностью, вызывают у животных и человека самые разнообразные патологические процессы. Заболевания, обусловленные этими видами бактерий, в ряде случаев характеризуются тяжелым течением, высокой летальностью и наносят ощутимый ущерб народному хозяйству страны.

Особенностью представителей кишечных бактерий является общность ряда морфологических, культуральных и биохимических признаков. В составе их клеточной оболочки выявлен гаптен, входящий в антигенную структуру всех кишечных бактерий. Вследствии этого номенклатура, таксономия и индикация энтеро-бактерий представляет значительные трудности.

Среди всего семейства кишечных бактерий особо следует выделить представителей рода salmonella . Продолжающийся рост сальмонеллезных заболеваний, привлекает в последние годы все более пристальное внимание специалистов во многих странах мира. 'Так, Г.Зейдель (1969) рассматривает сальмонелле зы, как проблему мирового здравоохранения. По его данным, опасность этой инфекции усугубляется для человека тем обстоятельством, что многие бактерии этой группы не вызывают у животных остропротекающих инфекций. Последние переболевают латентно, без существенных изменений в паренхиматозных органах и продукты, получаемые от них, поступают в реализацию без ограничения. Этому способствует и то обстоятельство, что в производственных лабораториях не проводится серологическая идентификация сальмонелл редких груш, способных вызывать в отдельных случаях заболевания у животных и представляющих реальную угрозу для здоровья людей.

Немаловажная роль в патогенезе заболеваний отводится и эшерихиозным бактериям. В настоящее время известно значительное число идентичных для человека и животных патогенных серо типов Е. coli.

Диагностика сальмонеллезной и колибактериозной инфекции сопряжена с рядом трудностей из-за высокой вариабельности культурально-биохимических признаков этих бактерий. В настоящее время индикация кишечных бактерий у животных, как правило, ограничивается использованием бактериологического мето да. Поэтому совершенствование известных методов лабораторной диагностики и изыскание новых эффективных способов, позволяющих в короткие сроки проводить индикацию и таксономическое изучение кишечной группы бактерий, является весьма актуальной задачей. Одним из важных путей совершенствования индикации энтеробактерий является разработка перспективных способов экспресс-диагностики, основанных на применении эрит-роцитарных иммунореагентов, а также оптимизация таксономического изучения выделенных микроорганизмов,

В соответствии с изложенным целью настоящего исследования явилась разработка рациональных путей серологической экспресс-диагностики и оптимизация приемов таксономического изучения энтеробактерий.

При этом, теоретическими задачами явились:

1. Научное обоснование оптимальной схемы экспресс-индикации кишечных инфекций на основе эритроцитарных иммунореагентов.

2. Оптимизация системы таксономического изучения энтеробактерий, путем совершенствования как самого процесса, так и способов обработки полученных данных.

Задачи практического характера, поставленные в работе сводились к следующему:

1. Изучить возможности приготовления эффективных эритроцитарных антительных диагностикумов для серологической экспресс-индикации сальмонелл и эшерихий.

2. Изыскать рациональные схемы экспресс-индикации сальмонелл и эшерихий с помощью эритроцитарных антительных и антигенных иммунореагентов.

3. Изучить и рекомендовать оптимальный способ ручной обработки данных таксономического изучения энтеробактерий с помощью перфокартного определителя.

4. Дать сравнительную оценку различных диагностических рапид-систем, предназначенных для серо типизации энтеробактерий, и на основе оптимального варианта составить 0-сывороточную рапид-систему сальмонелл редких групп.

Особенностями методического подхода являются комплексный характер экспериментов, позволяющий оценить диагностические возможности различных методов экспресс-индикации; широкий набор реакций, применяемых для экспресс-индикации, что позволяет определить и рекомендовать оптимальные пути серологической диагностики; использование нового приема экспресс-индикации, позволяющего проводить поиск энтеробактерий без применения эрит-роцитарных диагностикумов, а также ускорить идентификацию возбудителя инфекции.

Научная новизна:

1. Впервые дана комплексная оценка диагностических возможностей различных вариантов реакций, используемых для экспресс-индикации сальмонелл и эшерихий, с применением антигенных и антительных эритроцитарных иммунореагентов.

2. Разработан новый принцип экспресс-индикатщи сальмонелл 1 и эшерихий при использовании комплексных антительных диагностикумов с помощью многокомпонентной реакции - подавления пассивной гемагглютинации.

3. Разработаны оптимальные варианты ручной обработки данных при таксономическом изучении энтеробактерий с помощью перфокартного определителя и серологической идентификации сальмонелл редких груш с помощью рапид-систем.

4. Апробировано использование сывороточных рапвд-систем в многокомпонентных серологических реакциях с применением поливалентных эритроцитарных иммунореагентов,

В работе защищаются следующие основные положения:

1. При индикации сальмонелл и эшерихий у животных наибольшая результативность (частота получения положительного анализа) отмечена при использовании РИГА с антительными ди-агностикумами и РШГА с антигенными, по сравнению с бактериологическим методом.

2. При обследовании животных на сальмонеллез и эшерихиоз необходимо комплексное использование методов экспресс-индикации антигенов (РИГА и РТПГА) в сочетании с определением уровня гомологичных антител.

3. Новый принцип использования комплексных антительных диагностикумов повышает чувствительность многокомпонентных реакций, основанных на нейтрализации, до уровня РИГА и способствует большей специфичности при исследовании, благодаря взаимному одновременному контролю результатов реакции в нес-колькох рядах.

4.< Применение перфокартного определителя энтеробактерий облегчает работу бактериологов и способствует сокращению сроков постановки бактериологического диагноза.

5. Применение рапид-системы позволяет ускорить идентификацию энтеробактерий. При сопоставлении различных вариантов составления рашад-систем, наиболее перспективными являются биномные комплексные диагностические сыворотки.

Практическая ценность:

1. Модификация второго варианта торможения пассивной геммагглютинации значительно повышает диагностические возможности антигенных эритроцитарных диагностикумов.

2. Разработанный новый принцип использования комплексных антительных диагностикумов в многокомпонентной реакции, повышает чувствительность и специфичность индикации антигенов.

3. В результате широкой сравнительной оценки диагностической ценности различных серологических реакций (три варианта РШГА, РИГА, РОСА и РШЗГ) рекомендованы оптимальные схемы применения эритроцитарных диагностических иммунореагентов при индикации сальмонелл и эшерихий.

4. Усовершенствованный перфокартный определитель энтеро-бактерий, предназначенный для широкого круга бактериологов, позволяет значительно ускорить и упростить постановку бактериологического диагноза.

5. С помощью феномена пассивной гемагглютинации усовершенствован способ серотипирования эшерихиозных культур, сокращающий продолжительность типирования и способствующий более экономному расходованию диагностических препаратов.

6. Разработанная оптимальная сывороточная рапид-система для индикации сальмонелл редких групп, создает благоприятные условия для ее внедрения в биофабричное производство.

7. Составленный алфавитный указатель антигенной диагностической схемы Кауфмана-Уайта (рода Salmonella), является дополнением к определителю Bergey (1974) и предназначен для облегчения работы с литературными источниками.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Жиглов, Валерий Иванович

выводи

1. Наиболее чувствительным серологическим методом экспресс-индикации сальмонелл и эшерихий у животных является ШГА с антительными диагностикумами, позволяющая определять 100 -200 тыс./мл бактериальных клеток для сальмонелл и 400-800 тыс. на мл - для эшерихий.

2. Оптимальным вариантом применения антигенных диагностикумов является модификация второго варианта реакции торможения пассивной гемагглютинации, основными условиями которой являются использование монорецепторных сывороток с кратностью разведения 1,5 и двойная доза вносимого экстракта исследуемого материала.

3. Новый принцип использования поливалентных сальмонелл лезных и эшерихиозных антительных диагностикумов позволяет значительно повысить чувствительность индикации энтеробакте-рий с помощью многокомпонентных реакций.

4. Применение реакции определения сорбированного антигена позволяет расширить возможности экспресс-индикации эшерихий и проводить ее независимо от наличия эритроцитарных диагностикумов.

5. Экспресс-индикация сальмонелл в настоящее время должна базироваться на использовании антигенных эритроцитарных диагностикумов в двух направлениях: определении антител в сыворотках животных с помощью РПГА и обнаружении антигена в фекалиях этих же животных с использованием второго варианта РТПГА.

6. Экспресс-диагностику эшерихиоза целесообразно прово-* дитъ с помощью реакции определения сорбированного антигена. В случае получения положительного результата сенсибилизированные данным способом эритроциты следует применять для исследования аутосывороток.

7. Результат обследования следует считать положительным при наличии хотя бы одного из диагностических признаков: динамики уровня антител, обнаружение антигена с помощью любого из описанных методов экспресс-индикации, а также выделение культуры возбудителя.

8. Применение перфокартного определителя энтеробактерий облегчает работу микробиологов и способствует сокращению постановки бактериологического диагноза.

9. При совершенствовании методов серологического типи-рования кишечных бактерий наиболее перспективным направлением является применение биномных диагностических рапид-систем.

ЗАКЛШЕНИЕ

Анализ данных литературы показывает, что многочисленные представители кишечных бактерий широко распространены, вызывают разнообразные патологические процессы у животных, птиц и людей, наносят значительный ущерб народному хозяйству. Трудность борьбы с кишечными инфекциями в определенной мере обусловлена недостаточной эффективностью методов диагностики.

Диагностика сальмонеллеза и эшерихиоза затруднена из-за большой вариабельности культурально-биохимических свойств этих бактерий, отсутствия достаточного набора диагностических препаратов и рациональной схемы экспресс-диагностики. До настоящего времени лабораторная диагностика энтеробакте-рий в ветеринарии ограничена применением бактериологического метода.

Опыт использования эритроцитарных диагностикумов в медицинской практике показывает, что реакции, основанные на феномене пассивной гемагглютинации, являются наиболее перспективными при решении вопросов ранней и ретроспективной диагностики. В последние годы разработаны новые методы конструирования антительных диагностикумов (Ю.А.Кузьмин с соавт., 1982).

В связи с этим нами была поставлена задача оценить в комплексных опытах на широком наборе иммунных сальмонеллезных и эшерихиозных сывороток чувствительность и специфичность антительных диагностикумов, полученных известными и новыми методами сенсибилизации эритроцитов. Была оценена возможность получения поливалентных сальмонеллезных и эшерихиозных антительных диагностикумов.

Нами подтверждена возможность приготовления высокочувствительных и специфичных моновалентных сальмонеллезных и эше-рихиозных антительных диагностикумов на основе конъюгации солями хрома и амидола. Такие препараты характеризовались значительной чувствительностью индикации (100-200 тыс. кле-ток/ш! сальмонеллезных и 400-800 тыс. клеток/мл эшерихиозных бактерий), простотой изготовления, длительным сроком хранения (до 12 месяцев) даже в жидком виде при консервации 0,05$--ным азидом натрия.

Эритроцитарные диагностикумы используют в РПГА для определения агглютинирующих антител или антигенов, а также в многокомпонентных реакциях, позволяющих определять неполные антитела или неагглютинирующие антигены. Ввиду отсутствия данных о сравнительной диагностической ценности РПГА и различных вариантов реакции торможения пассивной гемагглютина-ции, отсутствии рациональных схем и рекомендаций по экспресс-диагностике с помощью эритроцитарных иммунореагентов, а также результатов применения антительных диагностикумов для индикации сальмонелл и эшерихий среди животных, нами проведена оценка диагностических возможностей различных эритроцитарных диагностикумов в широком эксперименте и массовых обследованиях условно-здоровых и больных телят. Определение антител проводили с помощью антигенных сальмонеллезных и эшерихиозных диагностикумов. Были использованы О-диагностикумы к основным группам сальмонелл производства Московского ИЭМ им. Г.Н.Габричевского и эшерихиозные О-диагностикумы собственного приготовления. Индикацию антигенов осуществляли с помощью РПГА при использовании сальмонеллезных и эшерихиозных антительных диагностикумов, приготовленных конъюгацией с амидолом, с помощью РИГА по модифицированному принципу А.Т.Кравченко и М.И.Соколова, а также двух классических вариантов реакции торможения пассивной гемагглютинации и двух модификаций второго варианта РТПГА.

Результаты экспериментальных исследований показали значительные преимущества РИГА с антительными диагностикумами перед многокомпонентными реакциями с антигенными препаратами. Минимальная выявляемая доза микробов с помощью антительных диагностикумов была в 5 и более раз ниже, чем при использовании антигенных. Следует отметить, что разные варианты реакции торможения пассивной гемагглютинации характеризуются различной чувствительностью. Оптимальными условиями применения антигенных эритроцитарных диагностикумов является следующая модификация второго варианта РТПГА: к разведениям иммунных адсорбированных сывороток с индексом 1,5 вносят двойной объ^ ем исследуемого на антиген материала и один объем диагностикума. Остальные варианты и модификации РТПГА характеризуются недостаточной чувствительностью индикации или вероятностью получения ложных результатов. Все варианты РТПГА и РИГА имеют высокую специфичность.

Определенные преимущества, особенно при массовых обследованиях, имеют поливалентные диагностикумы. Нами разработан принцип получения высокочувствительных антительных поливалентных сальмонеллезных и эшерихиозных диагностикумов на основе набора коммерческих сывороток. При этом недостаточная чувствительность РИГА с определенными сывороточными рецепторами корректируется путем внесения в поливалентный набор дополнительного количества глобулина определенной специфичности, Приготовление антительных диагностикумов на основе поливалентных сывороток собственного комплектования позволяет приблизить чувствительность индикации почти всех серогрупп к таковой с моновалентными диагностикумами. Кроме того, такой способ получения поливалентных антительных диагностикумов позволяет варьировать сыворотками к определенным серог-руппам в зависимости от цели исследования. Такой подход дает возможность получать диагностикум даже с более высокой чувствительностью к определенным рецепторам, по сравнению с соответствующим моновалентным диагностикумом, за счет большей концентрации на поверхности эритроцитов родственных сывороточных рецепторов.

Поливалентные антительные диагностикумы удобно применять в определенных условиях при постановке многокомпонентных реакций. Нами разработана новая серологическая реакция, основанная на принципе нейтрализации, позволяющая повысить чувствительность многокомпонентных реакций, упростить анализ и ускорить получение результатов. Принцип реакции заключается в том, что к экстракту исследуемого материала после нейтрализации определенными моновалентными сыворотками добавляют поливалентный антительный диагностикум, содержащий гомологичные сывороточные рецепторы. Подавление РПГА в одном из рядов с определенной моносывороткой указывает на присутствие в исследуемом материале соответствующего антигена. Такая постановка многокомпонентной реакции позволяет использовать сывороточные рапид-системы, сокращающие количество рядов при исследовании материала.

Таким образом, поливалентные антительные эритроцитарные иммунореагенты открывают новые возможности экспресс-индикации антигенов кишечных бактерий. Их целесообразно использовать для предварительного отбора положительно реагирующих проб вместо 5-6 моновалентных сальмонеллезных и 6-8 эшерихиозных антительных диагностикумов. В случае получения положительных результатов возможна расшифровка по серогруппам при использовании этих же поливалентных диагностикумов в новой многокомпонентной реакции - подавления пассивной гемагглютинации. Использование РППГ повышает специфичность анализа в силу взаимного контроля результатов реакции в нескольких рядах.

Недостаточный ассортимент производственных серий эритро-цитарных диагностикумов, относительная сложность и нестандартность приготовления собственных диагностических препаратов в разных лабораториях диктует необходимость разработки новых приемов серологической диагностики. В этом плане серьезного внимания заслуживает принцип, разработанный А.Т.Кравченко и М.И.Соколовым. Сущность метода заключается в агглютинации эритроцитов, нагруженных экстрактом исследуемого материала, гомологичными предполагаемому антигену сыворотками. Низкая чувствительность метода была связана с использованием нативных эритроцитов.

Нами разработана модификация принципа А.Т.Кравченко и М.И.Соколова на основе формалинизированных эритроцитов - реакция определения сорбированного антигена, позволяющая повысить чувствительность индикации кишечных бактерий на 1-2 порядка (в 10-100 раз). Метод расширяет возможности экспресс

-диагностики и позволяет проводить исследования вне зависимости от набора эритроцитарных диагностикумов.

С помощью серологических реакций в исследуемом материале от животных обнаружено в два раза больше проб с антигенами сальмонелл и эшерихий, чем бактериологическим методом. Совпадение серологических и бактериологических результатов отмечено в 50-66$ случаев.

Таким образом, опыт использования большого набора эритроцитарных диагностикумов (антительные и антигенные сальмонелле зные и эшерихиозные) в двух- и многокомпонентных реакциях с различной направленностью (определение антител и обнаружение антигенов) показывает, что не один из методов серологического или бактериологического анализа в отдельности не в состоянии отразить истинное число пораженных особей. Альтернативой при этом может быть только комплексное применение лабораторных методов. Такой подход реализуется сочетанием различных способов индикации, в зависимости от цели и наличия диагностических препаратов.

Так, лабораторная диагностика сальмонеллезов должна сочетать бактериологический метод с одновременной постановкой серологических реакций, как основы экспресс-диагностики, базирующейся на использовании производственных серий сальмонелле зных диагностикумов, которые следует применять в Р2ПГА для обнаружения гомологичного антигена в фекалиях и в РПГА для определения антител в сыворотках этих же животных. Положительными результатами анализа при этом следует считать: динамику титра РПГА (изменение уровня активности антител более чем в 3 раза); обнаружение антигена с помощью РТПГА независимо от величины разведения исследуемого материала; выделение чистой культуры сальмонелл при бактериологическом исследовании.

Диагностика эшерихиоза должна быть построена по следующей схеме. Ввиду отсутствия выпуска производственных серий эритроцитарных диагностикумов, в основу экспресс-индикации должна быть положена реакция определения сорбированного антигена. В случав получения положительных результатов возможно исследование аутосывороток на наличие антител с помощью этих же эритроцитов, нагруженных экстрактом исследуемого материала. Параллельно проводят бактериологическое исследование с целью выявления и таксономического изучения эшерихиозных изолятов. Оптимальным вариантом при обследовании на сальмонеллез и эше-рихиоз является использование антительных эритроцитарных диагностикумов.

Одной из важных проблем бактериологии остается идентификация возбудителя. Данные обзора литературы показывают всю сложность таксономического изучения кишечных бактерий. В связи с этим особое значение имеет поиск методов, позволяющих в короткие сроки устанавливать видовую принадлежность кишечных бактерий.

Нами была предпринята попытка произвести поиск простого и доступного метода определения видовой принадлежности энтеробактерий. Ранее, как известно, для этой цели были предложены различные методы (числовой код, компьютеры, ЭВМ, система логических карт и др.), но из-за своей сложности и дороговизны они не напши широкого применения. Нами использован пер-фокартный метод обработки информации с применением стандартных перфокарт К-2, на основе которого разработан перфокарт-ный определитель кишечных бактерий.

Предлагаемый перфокартный определитель позволяет проводить по культурально-биохимическим признакам идентификацию 31 представителя кишечных бактерий, в том числе у 4 энтеробактерий - до подрода, у 23 - до вида и у 4 - до подрода. Кроме того, в тексте содержится дополнительная информация о 13 видах эрвиний. С помощью перфокартного определителя можно также проводить таксономию микроорганизмов и с атипичными свойствами.

Проведенная нами идентификация 225 культур энтеробактерий показала, что перфокартный определитель облегчает работу микробиологов, повышает производительность труда, а также существенно сокращает сроки постановки бактериологического диагноза и может быть с успехом использован в работе научно-производственных лабораторий при идентификации представителей семейства кишечных бактерий.

Перфокартный определитель энтеробактерий внедрен в КазНИВИ Восточного отделения ВАСХНИ1, в Алма-Атинской областной ветлаборатории МСХ КазССР, в ЦНИЛе Алма-Атинского меди-ценского института, а также в Алма-Атинском филиале института усовершенствования врачей Минздрава СССР. Перфокартный определитель энтеробактерий и наставление по его применению рассмотрены и одобрены Ученым советом КазНИВИ и ветсекцией Восточного отделения ВАСХНИЛ.

Серотипизацию эшерихиозных О-антигенов в настоящее время проводят в два этапа, причем, если на получение результатов на первом этапе работы требуется 1,5-2 ч , то для второго этапа необходимо затратить 30-40 ч .

Нами предложен способ, позволяющий проводить серотипи-зацию эшерихиозных культур в течение 3,5-4 ч , в основу которого положена высокая резистентность к прогреванию липопо-лисахаридного комплекса эшерихий и, наряду с этим, фиксированных эритроцитов. Способ позволяет сократить расход иммунных сывороточных препаратов и расширяет возможности исследователей, а также создает благоприятные условия использования сенсибилизированных данным способом эритроцитов в различных серологических реакциях, в том числе и с аутосывороткой от больного.

Обнаружение сальмонелл редких групп у людей, сельскохозяйственных животных и птиц по отдельным регионам Казахстана ( от 2,2 до 14,9$ случаев), сообщения ряда исследователей (P.Gaspar, 1979; Y.Lecerf, 1979; J.Harp,1981) об ЭТИОЛОГИческой роли их при заболеваниях сельскохозяйственных животных и птиц указывает на необходимость более тщательного изучения данной группы бактерий.

Вследствии того, что ветеринарные лаборатории не осуществляют серотипирования сальмонелл редких групп, создается опасность инфицирования людей. Однако трудности идентификации данного вида бактерий связаны с необходимостью использования большого набора типоспецифических агглютинирующих сывороток и затрат значительного времени на проведение данных исследований. Поэтому совершенствование способов серотипирования сальмонелл редких групп является важным для лабораторной практики.

Известно преимущество применения поливалентных диагноетических препаратов, составленных в определенной последовательности в виде рапид-системы, для серотипизации отдельных энтеробактерий. Однако в настоящее время отсутствует сравнительная оценка разработанных ранее и вновь предложенных ра-пцд-систем, что затрудняет выбор наиболее оптимального варианта.

На основе проведенного сравнительного анализа было установлено, что использование биномных рапид-систем, предложенных С.А.Лариным (1979), является более перспективным, так как исключает вероятность получения ошибочных данных.

Нами предпринята попытка усовершенствования расчетов и схемы построения биномной рапид-системы, которая и была положена в основу составления комплексных диагностических сывороток, предназначенных для серотипирования сальмонелл редких групп.

В настоящее время описано более 2200 сероваров сальмонелл, а возможное число сочетаний их антигенов оценивается на уровне 9000. В связи с тем, что в различных публикациях, как правило, приводятся только видовые названия сальмонеллезных культур, но не указываются их антигенные формулы, создаются определенные трудности при работе с литературными источниками. Вместе с тем при организации рациональных мероприятий по борьбе с сальмонеллезами важная роль принадлежит как микробиологическим методам обследования, так и использованию полученных данных эпидемиологами, эпизоотологами, инфекционистами.

С целью облегчения работы с литературными источниками нами был составлен алфавитный указатель рода сальмонелл, включающий 24 новых дополнения к схеме Кауфмана-Уайта, На основании этих материалов составлены в соавторстве методические рекомендации, предназначенные для эпидемиологов, эпи-зоотологов и инфекционистов, где приведены особенности таксономического изучения сальмонеллезных культур и указывается на необходимость серологической идентификации сальмонелл редких групп. Данные методические рекомендации одобрены ветсек-цией Восточного отделения ВАСХНИЛ и рекомендованы к печати.

Таким образом, теоретическое значение проведенных нами исследований в целом, заключается.^ научном обосновании рациональных схем экспресс-индикации сальмонелл и эшерихий, а также оптимальных условий идентификации энтеробактерий и обработки получаемой при этом информации. Выявлены оптимальные варианты приготовления антительных поливалентных диагностикумов, разработан новый принцип использования таких препаратов, модифицированы условия постановки ИНГА и РПГА по принципу А.Т.Кравченко и М.И.Соколова. Все это позволило оценить в условиях эксперимента и при массовых обследованиях животных различные пути экспресс-индикации бактериальных антигенов и рекомендовать оптимальные схемы серологической диагностики сальмонеллезов и эшерихиозов, которые имеют свои особенности. Научно обосновано преимущество предлагаемой схемы расчета и составления сывороточной рапид-системы, предназначенной для идентификации сальмонелл редких групп, показан оптимальный вариант ручной обработки информации и составлен алфавитный указатель рода сальмонелл.

Теоретические разработки позволили получить следующие практические результаты,

1. Разработана принципиально новая реакция подавления пассивной гемагглютинации, позволяющая повысить чувствительность многокомпонентных реакций до уровня РПГА с антительными диагностикумами.

2. Модифицирована РПГА по принципу А. Т.Кравченко и М.й. Соколова, что позволяет с высокой результативностью проводить экспресс-индикацию энтеробактерий независимо от наличия эритроцитарных диагностикумов.

3. Показана диагностическая ценность различных реакций, основанных на феномене пассивной гемагглютинации, в эксперименте и при обследовании на сальмонеллез и эшерихиоз.

4. Разработаны оптимальные схемы экспресс-диагностики для сальмонелл и эшерихий, имеющие свои особенности.

5. Проведен сравнительный анализ существующих вариантов сывороточных рапид-систем и на основе оптимального из них составлена диагностическая рапид-система сальмонелл редких групп.

6. Рекомендован удобный и доступный способ ручной обработки информации при таксономическом изучении энтеробактерий.

7. Составлен алфавитный указатель антигенной диагностической- схемы Кауфмана-Уайта, способствующий быстрому выявлению антигенной формулы интересуемого серовара сальмонелл.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Жиглов, Валерий Иванович, 1984 год

1. Абрамова З.И. - Микробиологические методы исследования и микрофлора мочи при гестационных пиелонефритах. "Лабораторное дело", 1976, 15 2, с. 97-100.

2. Агаева Р.А. К методике бактериологической диагностики протеев при кишечной инфекции у детей. "Лабораторное дело", 1975, В II, с. 685-687.

3. Айзенберг Н.Н., Петрус B.C., Плахотнюк В.М. и др. Зикто-ристания тесторных методов классификации для видвору оптимальных дифференциальных ознак микроорганизмов. Микробиол. журнал, 1974, т. 36, № I, с. 13-19.

4. Алешин А.И. Бактериологическая диагностика сальмонелле-зов. Методические рекомендации. Алма-Ата, 1978.

5. Алимходжаев А., Борисов И. Распространение сальмонеллеза среди диких грызунов в Средне-Азиатском пустынном очаге чумы. Реферат.журнал инфекц.бол.животных, 1980, 8, с. 17.

6. Андронова Н.И. Характеристика штаммов энтеробактерий, выделенных из мочи при инфекциях мочевых путей. М.микро-биол., 1978, В 12, с. 55-58.

7. Арбузова В.А. "Вопросы систематики и классификации Entero-bacteriaceae. В кн.: Острые кишечные инфекции. Республиканский сборник. М., 1978, с. 85-95.

8. Арбузова В.А. Современное состояние учения о сальмонелле зах и их эпидемиологическая характеристика. В кн.: Острые кишечные инфекции. Республиканский сборник. М., 1978а, с. 64-69.

9. Ахмедов A.M. Сальмонеллезы (паратифы) молодняка. М., "Колос", 1971, Z40 с.

10. Бабахова М.А. Реакция пассивной гемагглютинации для диагностики колиэнтеритов. В кн.: Сб. докл. по 2-й объеде-ненной научной конференции мед. и научно-исслед, институтов г. Ростова-на-Дону 10-14 мая 1965 г. Ростов-на-Дону, 1965, ч. I, с. 307.

11. Бабахова М.А, Значение реакции нейтрализации антител для ускоренного определения О-антигенов энтеропатогенных . серотипов кишечной палочки в фекалиях детей. Автореф.дисс. канд. Ростов-на-Дону, 1966.

12. Бакулов И.А., Таршис М.Г. География болезней животных зарубежных стран. М., "Колос", 1971, Юо с.

13. Баяр Г.А., Конникова Р.Е., Крылов В.Н. 0 методике постановки реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитами сенсибилизированными антителами. Ж. микробиол., 1966, № 7,с. 97 III .

14. Битная Е.Н. Монорецепторные агглютинирующие сальмонеллез-ные сыворотки, их изготовление и использование в ветеринарной практике. Автореф.дисс.канд. М., 1973.

15. Блохина Н.Н., Леванова Г.Ф. Геносистематика бактерий. М., "Наука", 1976, с. 103-125,

16. Блюгер А Ж, Новицкий И.Н., Теребкова З.Ф. Сальмонел-лез, Рига, " Зинатне", 1975.

17. Бутковский В.Ф. Шмунолшинисцентная диагностика сальмо-неллезного аборта кобыл. Автореф. дисс. канд. М., 1974.

18. Бутковский В.Ф. Экономическая целесообразность мероприятий по борьбе с сальмонеллезным абортом кобыл в Якутской

19. АССР. В кн.: Вопросы краевой патологии животных в Якутии. Научные труды Якутского НИИСХ, Якутск, 1980, т.' 22, с. 4546. .

20. Бюллетень ВОЗ, Женева, 1980, т. 58, JS 1,.с. 20-32. . .

21. Васильева А.В., Егорова М.Н., Шаферова К.А., Сеферова З.И.-Использование реакции нейтрализации.антител при массовом обследовании населения. Ж.микробиол.;, 1976, $ 12, с.117-120.

22. Вильшанская Р.Л,- Характеристика микрофлоры при дисбакте-риозе кишечника: патогенетическое значение дизбактериоза при кишечных расстройствах и эффективность.применения слечебной целью колибактерина. Автореф.дисс.док.М.,1970;

23. Влодавец В.В.!, Исхакова Х.И. Грамотрицательные бактерии как возбудители внутрибольничных инфекций. К.микробиол.,1978, В 8, с. 7-13. . .

24. Волкова А.А.-, Шимиев Ф.М." Испытание цветного антигена для пластинчатой РА при сальмонеллезе овец. В кн.: Инфекционные болезни животных.и вопросы природной очаговости,

25. Фрунзе, " Илим", 1979, с. 102-103.

26. Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с колибак-териозом молодняка сельскохозяйственных животных. "Ветеринария", 1977, JH, с. 120-125.

27. Голубева И.В., Улиско И.Н., Ратинер JQ.A., Киселева Б.С. -Информационный бюллетень Всесоюзного центра по эшерихиям.1. М., 1972.

28. Гончаров П.И., Русин В.А., Петров Н.Б., Павлюченко Н.Н.-Последствие переболевания желудочно-кишечными и респираторными болезнями. "Ветеринария", 1981, № 5, с.47.

29. Грабовский Д.М., Игнатьева Н.Н., Тарасьян Г.И., Киселева М.П. Материалы лабораторной диагностики водной вспышки энтероколита, вызванного энтеропатогенной кишечной палочкой 0I24K72 (BI7). Ж.микробиол., 1967, В 6, с. 55.

30. Грекова Г.Н. Характеристика вульгарного протея, выделенного у больных с острыми расстройствами желудочно-кишечного тракта. Ж. микробиол., 1970, JS 6, с. 50-54.

31. Гришина O.G. Обнаружение антигена энтеробактерий при помощи реакции торможения пассивной гемагглютинации. Ж. микробиол. , 1967, № II, с. 128-133.

32. Демиховский Е.Н., Демидова С.И., Битяк В.В., Златополь-ская М.И. Обнаружение специфического антигена в крови, как метод диагностики брюшного тифа Ж. микробиол., 1949,7, с. 16.

33. Длин A.M. Математическая статистика в технике. М., математика, 1958.

34. Драгунская Д.М. Экспериментальное изучение патогенных свойств Е. coli - возбудителей острых кишечных заболеваний взрослых и детей. Автореф. дисс. канд. Л. , 1973.

35. Дука Т.В., Зайгермахер Г.А., Нзрайлевич О.Б. Клиническая и серологическая диагностика современного.сальмонел-леза. "Клин, медицина", 1981, $ 2, с. 104-106.

36. Егорова М.Н., Шелехова Васильева А.В., Леви М.И.: -Реакция нейтрализации антител, как метод обнаружения антигенов возбудителя брюшного тифа в воде. "Лабораторное дело", 1976, £ 8, с. 501-502.

37. Ежов В.И. Изучение резистентности к антибиотикам уштаммовE. coli "Ветеринария", 1978, 16 8, с. 46.

38. Емельянов Б.М., Садиков В.Е.;, Усачева И.Г. Вторичный сальмонеллез у свиней. Обзорная информация ВНИШТЭИ. М., 1975, 56 с.

39. Емельянов Б.М., Усачева И.Г., Садиков В.Е. Профилактика вторичного сальмонеллеза у свиней. Обзорная информация1. ВНШИТЭИ. М., 1976, ччс.

40. Еременко В.А.-, Долгов А.Ф.' Экспериментальное обоснование возможности применения РИГА для обнаружения в испражнениях антигенов кишечной палочки. "Лабораторное дело", 1978,1. I, с. 35-38.

41. ЗагаевскиЁ И.с., Гюршщкий А.Л. Сальмонеллезы животных, Киев, "Урожай", 1977, !ЧЧ с.

42. Загаевский И.О. Сальмонеллоносительство в тушках птиц. "Ветеринария", 1980, J& 9, с. 66-67.

43. Зарубина Н.А., Калинина Т.И. Микрофлора больных хронической пневмонией в.связи с фазой заболевания. Ж, микро-биол., 1972, Й9, с. 127-130.

44. Зейдель Г. Сальмонеллы - проблема мирового здравоохранения. "Ветеринария", 1969, J6 4, с, II5-II6.

45. Зуев А.С., Нижибицкая И.И., Кудякова JI.H. Биохимическая характеристика и антигенные свойства бактерий аризона, положение об их систематике и разработка препаратов для серологической идентификации. Ж. микробиол., 1972,9, с. II5-I2I.

46. Каймакан П.В., Бровченко А.Н., Кравутенко.А.И. Вопросы эпизоотологии сальмонеллезов. "Ветеринария", 1974, J£ 9с. 52-53. . .

47. Калашникова Г.К., Корнилова И. И. К методике определения гемагглютининов у больных сальмонеллезами. "Лабораторное дело", 1968, 6, с. 339. . .

48. Калина Г.П. Сальмонеллы в окружающей среде. М., "Медицина", 1978.

49. Калицева Л.И., Блох Т.В., Нейгауз Е.Л., Колпащукова 0.Си-Применение реакции торможения пассивной гемагглютинации для выявления брюшнотифозных антигенов. В кн.: Кишечные инфекции. Республиканский сборник, выпуск 6, Д., 1973,с. 16-18.

50. Каменская Н.Н., Мадяева Н.С., Сорокина Г.П. 0 диагностическом значении определения неполных антител методом Кумб-са при брюшном тифе. - Ж.микробиол., 1966, Л 4, с. 12-16.

51. Канатов 10. В. Реакция обнаружения гаптенов с помощью эритроцитов, сенсибилизированных антителами. В кн.: матер. 8 научной конференции противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана, Алма-Ата, 1974а, с. 11-13.

52. Канатов I0.B. Реакция расклеивания сенсибилизированных эритроцитов для обнаружения антигенов и антител. Там же,19746, с. 13-15.

53. Каральник Б.В.Т 0 режиме сенсибилизации эритроцитов Ви-антигеном, I. микробиол., 1963, 8, с. 140.

54. Г.Г. Иммунологическая структура населения в отношении возбудителей бактериальных кишечных инфекций. Труды НИИ ЭМИБ МЗ КазССР, Алма-Ата, 1971, с. 197-205.

55. Каральник Б.В. Эритроцитарные диагностикуш. М., "Медицина", 1976.

56. Каралышк Б.В., Дорошкевич Л.Ц., Каплан С.Г. Реакция угнетения пассивной гемагглютинации - метод выявления неагглютинирующих серологически активных компонентов. "Лабораторное дело", 1975, J& I, с. 46-48.

57. Кауфман Ф. Семейство кишечных бактерий. М., "Медгиз",1959, 3SVc.

58. Керашева С.И., Притчина Е.А. Определение лецитиназной активности бактерий рода Proteus . "Лабораторное дело", 1974, В 2, с. 99-100.

59. Киржаев Ф.С., Бурмистрова Т.И. Способ получения антигена для диагностики пуллороза - тифа птиц. А.С. СССР

60. Js 594173, Б.И. В 7, 1978. 66; Ковалев Г.К. Дикие птицы и сальмонеллезы. S. микробиол., 1982, №2, с. 7-12.

61. Ковалиу С.В. К вопросу о машинной диагностике бактериальной дизентерии у детей. В кн.: Материалы по эпидем. и микробиол. диагностике кишечных и кокковых инфекций. Кишинев, 1976.

62. Коляков Я.Е. Колибактериоз телят. "Ветеринария", 1978, В 4, с. 48-53.

63. Коляков Я.Е., Гительсон С.С., Казрук Л.С. Колибактериоз телят. М., "Колос", 1970, с. 9-24, 51-52.

64. Комплексные методы диагностики острых кишечных инфекций. Методические рекомендации для бактериологических лабораторий. НИИ ЭМИБ МЗ КазССР, Алма-Ата, 1975.

65. Костина К.А., Цой М.А. Некоторые вопросы эпидемиологии сальмонеллезов и организации их профилактики в Казахстане. В кн.: Кишечные инфекции в Казахстане. Труды НИИ ЭМИБ, Алма-Ата, 1980, т. 21, с. 64-72.

66. Кравченко А.Т., Соколов М.И. .Адсорбция специфических полисахаридов бактерий эритроцитами человека. Ж. микробиол., 1946, № 12, с. 10.

67. Кравчук Л.С. Ускоренное обнаружение энтеропатогенных серотипов кишечной палочки с помощью реакции нейтрализации антител. В кн.: Труды ВНИИ ветеринарной санитарии, 1979, т. 63, с. 3-8.

68. Краскина Н.А., Аллилуев А.П., Гуторова Н.М. Реакция пассивной гемагглютинации в диагностике брюшного тифа и хронического брюшнотифозного бактерионосительства. В кн.: Диагностика бактериальных кишечных инфекций и энтеровирусов. М., I9S5, с. 41.

69. Краснов И.П., Митюшин В.^., Аликаев В.А. Дифференциальная диагностика желудочно-кишечных болезней у телят. -"Ветеринария", 1977, № I, с. 95.

70. Крейкин Л.С., Каверина К.Г., Аксенова Е.В., Бутакова Л.Ю.-Протективные свойства антигенных комплексов протея. Ж. микробиол., 1981, le I, с. 60-63.

71. Кузьмин 10.А., Шамардин В.А., Каральник Б.В., Волкош Л.П.-Способ получения эритроцитарного диагностикума. А.с. СССР, 913626, 1981, Б.И. й I.

72. Кулиева Г.Н. К методике использования реакции нейтрализации антител при кишечной колшнфекции. Ж. микробиол., 1977, А* 10, с. 70-72.

73. Лабораторные исследования в ветеринарии. Под ред. В.Я. Антшова и П.Н.Блинова. М., "Колос", 1971, с. 176.

74. Лаврунова С.А. Ускоренная индикация сальмонелл в мясе методами диффузной преципитации в агаре и непрямой имму-нофлюоресценции. Автореф. дисс. канд. М., 1974.

75. Ларин С.А., Жиглов В.И., Визиринская Г.В. Заболевание цыплят, вызванное бактериями рода Serratia. В кн.: Профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных в Казахстане. Труды КазНИВИ, 1979, т. 18, С. 124-127.

76. Ларин С.А. Комплексные поливалентные диагностические сыворотки, схема их приготовления и способ применения.

77. В кн.: Профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных. Алма-Ата, 1979, Труды КазНИВИ, т. 18, с. 130-133.

78. Левенсон В.И., Аллилуев А.П. Определение серологической активности Ви- и О-антигенов брюшнотифозных микробов в реакции задержки гемагглютинации. Ж.микробиол., 1965,1. В 6, с. 47.

79. Леви М.Й., Степанова C.JI., Егорова М.Н., Степанова Е.Й., Митюшина Н.И., Ефимова А.Н., Виноградова А.Д. Обнаружение антигенов возбудителя брюшного тифа в выделениях больных и в смывах с предметов. Ж.микробиол., 1973, Л 5, с. 25-28.

80. Леви М.И., Кулиева Г.Н. Применение реакции нейтрализации антител (после подращивания) для диагностики кишечной коли-инфекции. Ж. микробиол., 1981, № 3, с. 48-52.

81. Лебедев Н.И. Сальмонеллезы: эпидемиология, клиника и профилактика. Минск, "Белорусь", 1980.

82. Ледовских А.П. Обнаружение и изучение динамики неполных антител по реакции Кумбса в бактериальном варианте при сальмонеллезе телят и поросят. Автореф. дисс. канд. Л., 1978.

83. Литински Ю.И., Годованный Б.А., Большаков Н.Я. Обнаружение антигенов сальмонелл в моче, как вспомогательный диагностический метод. Ж.микробиол., 1979, № 10, с. 114115.

84. Малинина Н.П. Значение иммунологической активности сывороточных антител различных классов в реакции бактериолиза у больных сальмонеллезами и носителей сальмонелл. Ж. микробиол., 1974, гё 6, с. 46-49.

85. Малышева Э.Ф. Реакция эритроагглютинации в диагностике тифо-паратифозных заболеваний. Ж. микробиол., 1964, & 9, с. 87.

86. Малявин А.Г., Соловьева B.C., Битная Е.Н. Изготовление поливалентной агглютинирующей сальмонеллезной сыворотки на кроликах и ослах. Труды ГНКИ ветеринарных препаратов МСХ СССР, М., 1974, т. 20, с. 225-227.

87. Маркявичус А.С., Кяушас И.Ф. Выделение сальмонелл из продуктов убоя. "Ветеринария", 1972, $ 2, с. 99-100.

88. Матвиенко Б.А. Сальмонеллы. В кн.: Ветеринарная микробиология. М., "Колос", 1982, с. 154-173.

89. Методические рекомендации по идентификации бактерий рода цитробактер. МЗ СССР, Главное управление по производству бактериальных и вирусных препаратов. М., 1973.

90. Наставление по применению типоспевдфических агглютинирующих 0-сывороток для идентификации энтеропатогенных типов кишечной палочки. М., 1974.

91. Нестерова Г.Н. Патогенетическое значение эколого-физио-логических особенностей бактерий рода Proteus . Горький, Горьковский государственный университет, 1975.

92. Никитин В.М., Посталаки Г.И. Быстрая ориентировочная диагностика колиэнтеритов при помощи цветных нитроцел-люлозных антител. Ж.микробиол., 1974, № 5, с. II2-II3.

93. Никонорова М.Н., Никоноров П.Н. Особенности течения сальмонеллеза у телят в промышленном комплексе. В. кн.: Профилактика болезней сельскохозяйственных животных. Сборник научных трудов Сибирского отделения ВАСХНИЛ. Новосибирск, 1976, с. 173-175.

94. Олейник И.И,, Краева ЭЛ., Бычков З.А. Характеристика возбудителей острой гнойной деструкции легких у детей. Ж. микробиол., 1977, № 10, с. II9-I24.

95. Осколков B.C., Салтыков А.К. Свойства изолятов кишечной палочки, выделенных от птиц. "Ветеринария", 1977, й 2,с. 43-45.

96. Петровская В.Г. 0 так называемых условно патогенных микроорганизмах. К.микробиол., 1974, $ 6, с. 94-101.

97. Петровская В.Г., Марко О.П. Микрофлора человека в норме и патологии, М., "Медицина", 1975.

98. Пехов А.П. Генетика бактерий. М., "Медицина", 1977.

99. Подкопаев В.М., Шишков В.П. Диагностика, лечение и профилактика болезней новорожденных телят. - М., "Колос, 1967, с. I0I-I36.

100. Полоцкий 10.Е. Сравнительный анализ экспериментальных и инфекционных процессов, вызываемых различными энтеропато-генными и не энтеропатогенными кишечными палочками. Авто-реф. дисс. канд. JI., 1968.

101. Полоцкий Ю.Е., Авдеева Г.А. Адгезивность, инвазивность и энтеротоксигенность возбудителей кишечной инфекции. Ж. микробиол.,.1981, № 5, с. 23-32.

102. Поляков А.А., Усачева И.Г. Современные данные о путях распространения еальмонеллеза. Обзорная информация ВНИШТЭИ. М., 1972,124 с.

103. Проскурякова Н.Б., Пролеева В.В; Изучение свойств и этиологической роли Citrobacter о 19 при острых кишечных заболеваниях. Ж. микробиол., 1982, J& 2, с. 45-48.

104. Пяткин К.Д. Микробиология с вирусологией и иммунологи. ей. М., "Медицина", 1971, з^е.

105. Ратинер 10.А. Диагностические рапид-системы - перепеки: тивныи принцип конструирования диагностических препаратов и расчет рапид-систем. Ж.; микробиол., 1982, J£ I,с. 22-26.

106. Ратинер Ю.А. Диагностическая рапид-система для идентификации Н-антигенов эшерихий. Ж. микробиол., 1982а, JS 2, с. 37-41.

107. Раюшкин Б.В., ИШлардин В.А., Гринблят С.П., Пасичник В.П., Наумов В.Н.' Использование серологических методов в эпидемиологическом расследовании при тифо-паратифозных заболеваниях. Труды НИИ ЭМИБ МЗ КазССР, Алма-Ата, 1975, т.II, с. 137-139.

108. Романовская В.А. Сравнительная характеристика различныхметодов нумерического анализа для группирования микроорганизмов. Микробиол. журнал, 1981а, т. 43, J£ I, с. 10-16.

109. Рубцов И.В. Клинико-иммунологические параллели у больных брюшным тифом, леченых левомицетином. "Сов. мед.", 1963,6, с. 76.

110. Садиков В.Е.' Профилактика инфекционных болезней крупного рогатого скота. М., Россельхозиздат., 1982, е.

111. Савельев В.Н. Изучение клебсиелл, выделенных от больных и здоровых людей. Сообщение Ш. Биохимические типы клебсиелл. Ж. микробиол., 1978, с. 103-106. . .

112. Сидоров М.А,, Соколова Н.А.' Колициногенность и колици-ночувствительность энтеропатогенных дяя телят эшерихий. "Ветеринария", 1976, 15 2, с. 42.

113. Сидоров М.А. Как предупредить болезни телят "Ветеринария," 1980, Jfc 8, с. 14.

114. Свдорчук А.А., Архангельский И,И., Караваев Ю.Д. Реакция непрямой гемагглютинации при сальмонеллезе овец. "Ветеринария". 1977, В 8, с. II0-II2.

115. Сидорчук А.А. Усовершенствование диагностики салъмо-неллеза овец. Автореф. дисс. канд. М., 1978.

116. Субботина I0.JI., Пищик Г.И., Девкина М.Т., Розенберг К.Л.,

117. Таги-Заде М.А. Бациллоносительство.и патологические титры при сальмонеллезе у овец. В кн.: Труды Азербайджанского СХИ, Кировобад, 1979, т. 4, с. 7-9 .

118. Тендетник Ю.Я., Туманов Ф.А., Трушина В.В. Определение антител различной иммунохимической природы с целью серологической диагностики сальмонеллезов и бактерионосительства. Ж. мшсробиол., 1974, № 3, с. 37-43.

119. Тимофеева А.А. Некоторые данные о новом виде микробов Y. enterocolitis а и вызываемых ими заболеваниях. В кн.: Вопросы краевой инфекционной патологии восточной сибири. Труды Иркутского мед. института, Иркутск,.1975, т. 122.

120. Тришкина Е.Т., Днсилавян Х.А., Завьянцев В.Е., Коломиец Я.М.1, Иванов В.Я. Характеристика эшерихий, выделенных от телят при желудочно-кишечных болезнях. "Ветеринария", 1977, В 10, с. 55-56.

121. Урбах В.10. Биометрические методы. М., "Математика", 1964, . .

122. Финн В.Г., Чаус В.И. Математическая экспресс-инте-рпритация результатов биохимического типирования для идентификации представителей семейства EntегоЪ асt eri ас еае

123. Ж.микробиол., 1976, с. 29-31.

124. Финн В.Г. Характеристика и клиническое значение бактерий рода citrobacter выделенных от больных острыми кишечными инфекциями. Журнал гигиегы, эпидемиол., микробиол. и иммунол., 1978, 22, № 3, с. 305-309.

125. ХейфецМ.А., Закордонец B.C., Неретина Т.В., Телесина Е.А., Чемодурова О.П. -Обнаружение сальмонелл в органах убитых животных. "Ветеринария", 1973, № I, с. 103105.

126. Цареградская Н.А. Изучение колибактериоза телят. "Ветеринария", 1976, № 7, с. 55-58.

127. Цион Р.А. Дифференциальная диагностика болезней свиней. Л., "Колос", 1970, с. 32-36.

128. Чайка Н.А., Негряну Г.М. Серологическая диагностика бактериальных инфекций. ВНИИМИ, М., 1976, № 2.

129. ИЬмардин В.А., Каральник Б.В. Сенсибилизация эритроцитов препаратами иммуноглобулинов. Методические рекомендации, Алма-Ата, 1981, с. 8.

130. Цкмардин В.А. Научные основы приготовления эритроцитарных иммуноглобулиновых диагностикумов. Автореф. дисс. док. М., 1981.

131. Шзришорина С.И., Савельев В.Н. Изучение клебсиелл, выделенных от больных и здоровых людей. Ж.микробиол., 1972, № 9, с. 134-137.

132. Шестаков Ю.М., Опекунов К.А. Серологическая типизация кишечных палочек, выделенных из продуктов убоя свиней. "Ветеринария", 1977, № 5, с. 94-95.

133. Шляхов Э.Н. Практическая эпидемиология. Кишинев,1. Штиинца", 1981.

134. Шэрохова Г.В. 0 диагностическом значении реакции пассивной гемагглютинации при тифо-паратифозных заболеваниях у детей. Ж.микробиол., 1967, J£ 12, с. 23.

135. Щур И.В. Заболевания сальмонеллезной этиологии. М., "Медицина", 1970.

136. Щеглова В.Н. Динамика антител при сальмонеллезе телят. В кн.: Сб. науч. трудов ЛВИ, 1980, т. 63, с. 129133.

137. Эльтекова Н.И. Адсорбционный метод при обнаружении антигенов брюшнотифозных палочек в испражнениях. В кн.: Сб. науч. тр. Самаркандского мед. ин-та, 1956, /6 9,с. 47.

138. Эпидемиология и профилактика сальмонеллезов. "Методические рекомендации НИИ ЭМИБ МЗ КазССР, Алма-Ата, 1977.

139. Эпизоотология. Под общей редакцией проф. Сосова Р.Ф. М., "Колос", 1969, too*.

140. Якобсон Д.А., Степанский Н.П., Щетинина И.Н., Киреева Л.М., Гаврилов А.Ф. Эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика кишечной колиинфекции (эшерихиозов). Методические рекомендации, Казань, 1979, с. 3-5.

141. Ясутис И.М. Сальмонеллы, выделенные на птицекомплексах по промышленному производству птичьего мяса. Материалы Ш объединенного съезда гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов Казахстана. Алма-Ата, 1980, т. 3, с. 79-80.

142. N p. 317-319. 158. Berbinschi с,Распространение сальмонеллеза среди свиней различного возраста при различных системах выращивания.- Реферат, ж. ветеринария, 1982, В 2, с. 25.

143. Bergey's Manual of determinantive bacteriology, 8th ed., USA, Baltimore, 1974.

144. Bertschinger H., Williams D., Pohlenz J. Experiment ell e Klebsiellen-mastitis beim Schwein. Pathol, et microbi-: ,. ol., 1975, 42, И 4, s. 241-242.

145. Bier.0. Observations preliminaires sur ^hemagglutination e*hemolyse et la conglutination u passives. Ann. Inst. Pasteur, 1951» 81» U 6, p. 65o.

146. Bokkenheuser V., Neter E. Etitrocyte affinity and biological activity of typhoid endotoxin extract. Canad. J. Microbiol., 196.2, 8, Ж 5, p. 6o9.

147. Boyden S„V. The adsorption of proteins on erythrocytes treated with tannic acid and subsequent hemagglutination by antiprotein sera. J. Exp« Med., 1951, 95» P* lo7.

148. Branson D. Enterobacteriaceae identification compared by MORLOC (a new system) and API 2o E. Amer. J. Med. Tech-nol., 1976» 42, 1Ш, p. 267.

149. Bull. World Health Org., 198o, 58. IT 4, p. 519-537. Enteric infections due to Campylobacter, Yersinia, Salmo -nella and Shigella.

150. Castermans A.-Hemagglutination conditionnee par divers extracts de Salmonelles. C.R.Soc.Biol., 1953, 147, 7/8, p. 720.

151. Ceppellini В., De Gregorio M. Emegglitonatione ed emoli-si condizionate mediante glantigene di S.typhi. Boll, 1st.Sieroterap.Milanese, 1953, 32, p. 429.

152. Christenaen S. Y.enterocolitica in Danish pigs. J.appl. Bacteriol., 1980, 48, Ж 3, p. 377-382.

153. Cocks L.T., Wilson A.S. Bnsyme evolution in the Enterobacteriaceae. J.Bacteriol., 1977, 110, p. 793-802.

154. Crovari P. Utilizzazione dei globuli zossi di montone formolati per la ricerca degli anticorpi antisalmonelle, con particolare riferimento alia conservabilita dell'an-tigene. Boll.1st.Sieroterap.Milanese, I960, 39, p. 550.

155. Dolezal M., Dolezal M.U., Porta P. L'impiego di un test di flocculazione per la ricerca di anticorpi specifici per la E. coli, la Рь. aeruginosa, la Proteus e le Salmonella, J. ric. e diagn. lab., 1976, И 1, p. 39-44.

156. Engelbrecht E. A rapid and simple method the identification of enteropathy genie bacteria. Pathol, et microbi-ol.f 1975, 42, и 4, p. 237.

157. Finlayson M.H., Gibbs. В. The enterotube system in the identification of Enterobacteriaceae and Yersinia. S. Afr. Med. J., 1974, 48, Ji ?, p. 257-258.

158. Garsia S.J.E., Soledad M.R.M., Amador Y.A. et al. Into-duccion de un codigo numerico para el estudo taxonomico de las ent erob acteriac eas utilizaiido como substrato el sistema API 20 E. Laboratorio, 1975, 59, Д 359, p. 407-429.

159. Gallien R., IVestphal M. Biochemische Identifizierung von Enterobacteriaceae mit gebrachsfertigen Diagnostikhifen. M.Welt, 1976, 27, Д 25, s. 1264-1266.

160. Gaspar P. Isolation of Salmonella arizonae from an aborted bovine foetus. Bull. anim. Health. Product in Africa, 1979, 26, JN3, p. 230-231.

161. Hechemy К., Stevens K.W., Gaafar H.A. Detection of E.coli Antigens by a Latex Agglutination Test. Appl.Microbiol, 197^, 28, К 2, p. 206-311.

162. Jande J., Simmons R. The agglutination and sensitization of red cells by Metallic cations interactions between Multivalent Metals, and the redcell membrane. Brit. J.Haematol., 1957, 5, N 1, p. 19-38.

163. Kane D. The prevalence of Salmonella infection in sheep at slaughter. JN .Z.veter. J., 1979, 27, H 6, p. 110-113.

164. Karaoni K., Hanna А. Эпидемиологическое исследование инфекций мочевого тракта в Бенгази. Журнал гигиены, эпидемио л., микробиол. и иммунол., 1981,}? 3, с. 245-252.

165. Kirkbride G. Abortive diseases of cattle: their significance and prevalence. Veter.Med.Small Anim. Clin., 1979, 74, N8, p. 1151-1155.

166. Коен P., Моллов Д., Драгонов П. Съвременни проблеми при сальмонелозите у човека. Епидемиол., микробиол. иингаекц. болести, 1980, 17, & I, с. 34-40.

167. Козарев А. Клебсиела бактерии при прасета с диареи и пневмонии. "Ветер. Сб.", 1980, 78, 1?- 2, с. 14-15.

168. Константинов Г., Василева Й., Наумова Ф. Полимикротестза бързо биохимично идентифициране на Enterobacteriaceae. Епидемиол., микробиол. и инфекц. болести, 1982, В 3, с. 250-256.

169. Kopzewski A., Chilinski G. Badania nod nosielstwem pa-leczek rodzaju Salmonella u lisow. Med.Weter., 1981,37, N 3, s. 176-177.

170. Kovarik K. Arizonova infekce u krut, epizootologie a di-agnostika. Veterinarstvi, 1980, H 8, s. 363-364-.

171. Le Minor L., Rohde R., Rowe. B. Supplement N XXI (1977) au schema de Kauffmann-Wuite. Ann. Microbiol. (Inst. Pasteur), 1978, 129 В, N. 2, 209-213.

172. Le Minor L., Bockemuhl J., Rowe B. Supplement JM XXII (1978) au scema de Kauffraann-№±te. Ann. Microbiol.1.st. Pasteur), 1979, 130 В, N 2, p. 191-195.

173. Le Minor L., Bockemuhl J., Rowe B. Supplement N XXIV1980) au Schema de Kauffmann-^/hite. Ann. Microbiol. (Inst. Pasteur), 1981, 132 B, p. 85-89.

174. Маркарян M. Опит за изясняване патологията на ембрионал-ното развитие при кокош яйца, контоминирани с E.coli, Ps. aeruginosa,S.aureus, -"Ветер.Cd.", 1980, 78, В 7,с. 16-18.

175. Masdeu V. Metodes de aislamienbo e identificacion de

176. S. pullorum. Rev.Avicult., 1980, 24, N 2, p. 109-122.

177. Maskell R., Crump J., Lee R. Importance of Serratia marcescens. Lancet, 1977, N 8019, p. 1013.

178. Milcock B. Experimental Klebsiella and Salmonella infection in neonatal swine. Canad.J.com. Med., 1979, 43, N 2, p. 206.

179. Muller G. Die Salmonella im Lebensraum einer Grosstadt. Leipzig, 1965»

180. Neter E., Zalewski N.J. The regnirement of elekbroli-tes for the adsorption of E.coli antigen by red blood cells. J.Bacterid., 1953, 66, N 4, p. 424.

181. Neter E., Harris A.H., Drislane A.M. The detection of enterobacterial infection in institutionalized children by means, of the hemagglutination test. Amer.J.Publ. Health, 1965, 55, 8, p. 1164.

182. Рарр В. Logikai kartyarendzer, logikai muveletek vegze-sere, logikai fuggvenyek rogzitesere Cpl. grafikusan).- Szabadalmi leiras No 164813, Hungaria, 1973»

183. Papp В., Lanyi B. Logikai kartya bacteriumok asonosita-sahoz. Kiserl.Orvostud., 1975, 27, p. 376-380.

184. Pascucci S. Gontrollo deiie colibacillosi aviarie. -Clin.Veter., 1979, 102, N 4, p. 259-269.

185. Phillips J., King A. Serratia marcescens in hospital practice. Lancet, 1977, Я 8010, p. 538.

186. Pivnick H. Canadian perspetive on Salmonella control in poultry. Ann.Meet.United States Anim. Health Assn., Buffalo, N.Y., 1978, 82, p. 438-453.

187. Puente S.J. Bacteriologia del tracto inferior respira-toro. Gac.med.Bilbao, 1976, 73, N 1, p. 38-40.

188. Rabe E.F., Planko M. The antibody response to negative organisms: an explanation of the differences betmsen bacterial and hemagglutinating antibody titers. Pediatrics, 1954, 14, p. 315.

189. Renault L. La colibacillose des volailles. Le courrier avicole, 1980, 36, jm 773, p. 12-14.

190. Reis J. Vereinfachte mikrobiologische Untersuchen sver-fahren. I. Identifizirung von Bacterien nach biochemich-en Kriterien. Hikrokosmos, 1976, N 11, s. 329-335.

191. Rohde R* Serologische Integration aller bekauten Arizona-Species in das Kaufftoam-White Schema. Zbl.Bakt. Hug., 1979, 243, s. 148-176.

192. Salajka E. Kolisepse a enteralni koliinfekce u telat. -Veterinastvi, 1980, 30, N 5, p. 201-203.

193. Soderlind 0., Mollby R. Enterotoxins, 0-groups, and K88, antigen E.coli from neonatal piglets with and without diarrhea. Infect. Immun., 1979, 24, JM 3, p. 611-616.

194. Thiel W. Epidemiologic und Nachweis von Salmonellen. -Kraftfutter, 1969, 52, В 5, s. 230-231.

195. Tzipori S. The aetiology and diagnosis of calf diarrhoea. Veter.Res., 1981, 108, N 24, p. 510-515.

196. Wattel P., Gosselin В., Grigne Ph., Chopin C.# Nynyen N.T., Ravi art В., Houcke Ph. Les pneumopathies necro-santes a germes gram negatif. Lille med., 1976, 21, N 3, p. 184-194.

197. Weiribach R. Die vermendbarkeit. formolbehandelter Erit-rocyten als Antigentrager in der inderekten Hamagglu-tination. (I.Mitt.). Schweiz.Z.allg.Pathol, und Bakteriol., 1958, 21, s. 1043.

198. Weisman J., Singer N. Isolation of Y.pseudotuberkulosis from the Palm dove. Avian Diseases, 1976, 20, N 1, p. 202-204.

199. Westphal 0., Iuderitz 0., Bister P. Veder die Extraktion von Bakterien mit Phenol-V/asser. Ztschr. Naturforsch., 1952, 76, N 2, s. 148-155.

200. Willcox W.R., Lapage S.P., Holmes B.A. Review of numerical methods in bakterial identification. -Antonie van Le-euwenhoek, 1980, 46, N 3, p. 233.

201. Williams B. Bovine Salmonellosis. The bovin practitioner. The offic. publ. of the Amer. assoc. of bovine practitioners, 1980, N 15, p. 122-128.

202. Zheng-shi Y., Qing-wu G. Serological tuping of 3767 local strains of e. coii. Реферат. я. инфекц. болезни животных, 1980, 7, с. 14.1. ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА

203. Агре H.G., Калакуцкий Л.В. Биохимические признаки в систематике актиномицетов. В кн.: Успехи микробиологии. М., "Наука", 1972, № 8, с. 59-60.

204. Ахмедов A.M. Сальмонеллезы молодняка. М., "Колос", 1983, 240 с.

205. Джавец Э., Мельник Дж.Л., Эйдельберг Э.А. Руководство по медицинской микробиологии. М., "Медицина", 1982,т. 2, с. II0-II6.

206. Красильников Н.А. Определитель бактерий и актиномицетов. М.-Л., изд-во АН СССР, 1949.

207. Курылович В., Пашкевич А. Нумерическая таксономия микроорганизмов. В кн.: Успехи микробиологии. М., "Наука" , 1974, № 9, с. 3-17.

208. Надирова Н.М. Некоторые проблемы современной таксономии бактерий. В кн.: Успехи микробиологии. М., "Наука", 1970, № 6, с. 86-101.

209. Петров Р.В., Хаитов P.M., Атауллаханов Р.И. Иммуноге-нетика и искусственные антигены. М., "Медицина", 1983, с. 17-28.

210. Пустовая Л.Ф. Синантропные и дикие птицы как возможный источник болезни Марека и колибактериоза. В кн.: Вопросы природной очаговости болезней. Алма-Ата, изд-во АН КазССР, т. 13, 1983, с. II9-I23.

211. Стьюард М. Аффинность реакции антиген-антитело и ее биологическое значение. В кн.: Структура и функция антител. М., "Мир", 1983, с. II3-I44.

212. Шпегель Г. Общая микробиология. Под ред. Е.JI.Рубина. М., "Мир", 1972, с. 80-82.

213. Adanson М. Histoire natureiie du Senegal Coquillages, Preface. Ed. Bauche, Paris, 1757.

214. Adanson M. Famillies des Plantes, 1, Preface, pp. 154 et seq. Ed. Vincent, Paris, 1763.

215. Cole A.J. Numerical Taxonomy. Ed. A.J.Cole, Acad. Press, London New York, 1969.

216. Lechevalier H.A., Lechevalier M.P., Horan A.C. Report read at paragon cressial meeting et X Intern. Congr. Microbiol., Mexico-city, 1970.

217. Piotrowska-Pilujska I. Badania taksometryczne paleczek. Arizona-Citrobacter. Wroclaw, 1971.

218. Skerman Y.B.D. A guide to the identification of the genera of bacteria. Ed. The Williams a. Wilkins Co., Baltimore,1967.

219. Sokal R.R., Sneath P.H.A. Principles of numerical taxonomy. Ed. W.H.Freemana. Co., San Francisco and London, 1963.

220. Williams S.T., Davies F.L., Cross T. Identification Methods fir Microbiologists. Part В., Acad, press. London1. New York, 1968, p. 111.

221. Yamada K., Komagata К. I Int. Conference on Culture Collections. Tokyo, 1968, p. 23.