Совершенствование методов индикации генома вируса африканской чумы свиней в объектах ветеринарного надзора тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, кандидат биологических наук Газаев, Исмаил Хизирович

• Газаев, Исмаил Хизирович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Газаев, Исмаил Хизирович

1. ВВЕДЕНИЕ.

1.1 Актуальность темы.

1.2 Степень разработанности проблемы

1.3 Цель и задачи исследований.

1.4 Научная новизна результатов исследований.

1.5 Практическая значимость работы.

1.6 Апробация работы

1.7 Соответствие диссертации паспорту научной специальности

1.8 Публикации.

1.9 Объем и структура диссертации.

1.10 Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1.11 Личный вклад автора в выполнение работы.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1 Характеристика вируса АЧС.

2.2 Эпизоотическая ситуация по АЧС в мире и РФ.

2.3 Пути распространения вируса АЧС.

2.4 Сохраняемость вируса АЧС.

2.5 Патогенез и клинические проявления болезни.

2.6 Лабораторная диагностика АЧС.

2.7 Генотипирование вируса АЧС.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование методов индикации генома вируса африканской чумы свиней в объектах ветеринарного надзора»

1.1 Актуальность темы

Африканская чума свиней (АЧС) — контагиозная, склонная к природной очаговости, как правило, остро протекающая септическая болезнь свиней, характеризующаяся лихорадкой, признаками токсикоза, геморрагическим диатезом и высокой летальностью, сверхострым, острым, подострым и хроническим течением. Болеют домашние и дикие свиньи независимо от породы и возраста. Выжившие животные пожизненно остаются вирусоносителями [Коваленко Я. Р., 1965; Бакулов И. А., 1969; СюринВ. Н., 1972].

Занос возбудителя АЧС в благополучные страны рассматривается специалистами как социальная и экономическая катастрофа. Это связано с огромным экономическим ущербом, причиняемым эпизоотиями данной болезни. Ученые рассматривают АЧС как угрозу для существования видов семейства Suidae [Бакулов И. А., 1969; Moreno М., 1978].

Долгое время считалось, что АЧС, как нозологическая форма болезни, присуща только странам Африки. Однако с появлением африканской чумы свиней в странах Европы - Португалии и Испании в 1957 и 1960 гг. - к этой проблеме было приковано внимание многих стран Европы и Америки.

В официальных средствах массовой информации весной 2007 г. появились сведения о массовой гибели домашних свиней в Грузии. 7 июня 2007 г. референс - лаборатория МЭБ (Пирбрайт, Великобритания) поставила диагноз - АЧС. В результате последующих мониторинговых исследований, проведенных в 2007-2008 гг. на территории Чеченской республики РФ, в 21 случае выделен вирус АЧС от павших и отстрелянных диких свиней. Во второй половине 2008 г. развитие эпизоотического процесса АЧС характеризовалось новым этапом - заносом вируса АЧС на территорию Республики Северная Осетия - Алания и вовлечению в эпизоотическую цепь домашних свиней [Куриннов В. В., 2010].

В последующие годы вспышки болезни регистрировали еще в 17 субъектах Российской Федерации: республиках Кабардино-Балкария, Калмыкия, Дагестан, Ингушетия, Краснодарском и Ставропольском краях, Ростовской, Волгоградской, Астраханской, Ленинградской, Нижегородской, Оренбургской, Архангельской, Мурманской, Тверской, Курской и Воронежской областях [http://www.fsvps.ru].

При анализе путей заноса вируса АЧС в благополучные регионы установлено, что основными путями и факторами передачи вируса АЧС являются контаминированные пищевые отходы и мясопродукты от инфицированных свиней.

Мясо и мясопродукты, как правило, поступают на реализацию в замороженном или охлажденном виде, и если животное было убито в инкубационный период болезни, то вирус АЧС может сохраняться в мясопродуктах длительное время и представлять большую опасность в распространении болезни.

В диагностике инфекционных болезней животных на сегодняшний день нашли широкое применение серологические методы (ИФА, РПИФ) и методы на основе анализа генома (ПЦР с электрофоретичекой детекцией, ПЦР в реальном времени), поскольку они позволяют анализировать в краткие сроки одновременно большое количество проб и применять приборные методы учета реакции [Вишняков И.Ф., 1992; Цыбанов С.Ж., 1995; Agüero М., 2003].

ПЦР с электрофоретической детекцией является практичным, чувствительным и специфичным методом для выявления генома вируса АЧС в крови и органах. Но недостатком ее применения в диагностике является возможность контаминации продуктами реакции и возникновение вследствие этого ложноположительных результатов. Также из-за наличия ингибиторов в пробах некоторых объектов ветеринарного надзора, при проведении полимеразной цепной реакции можно получить ложноотрицательные результаты [Agüero М., 2003].

Проведение соответствующих мероприятий по ликвидации очагов болезни в наиболее сжатые сроки возможно только при своевременной постановке диагноза и контроле продуктов свиноводства, которые могут содержать вирус АЧС и транспортироваться на различные расстояния, в том числе и для торговли. Это обуславливает необходимость разработки и внедрения в ветеринарную практику новых высокочувствительных и специфичных методов индикации вируса африканской чумы свиней, как в пробах органов инфицированных животных, так и в объектах ветеринарного надзора.

Поэтому актуальной задачей является разработка и усовершенствование методов индикации генома вируса АЧС в объектах ветеринарного надзора и внедрение их в практику исследований, а так же изучение сохраняемости вируса АЧС во внешней среде и продуктах животного происхождения.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Газаев, Исмаил Хизирович

6. выводы

1. Разработана и оптимизирована методика выявления генома вируса АЧС на основе ПЦР в реальном времени с использованием внутреннего контрольного образца (ВКО), которая позволяет выявлять геном вируса АЧС в объектах ветеринарного надзора (мясо, шпик, клещи, комбикорм) с аналитической чувствительностью 0,5 lg ГАЕ 50/см или 95 копий ДНК на реакцию.

2. Установлена длительная сохраняемость вируса АЧС штамм «Ставрополь 2009» в мясе и шпике: при температуре 22+27°С в течение 16 дней в титрах 1,5-2,0 lg ГАЕ 50/см3, при температуре 4+6°С в течение 84 дней в титрах 2,0-2,5 lg ГАЕ 50/см3 и при температуре минус 18-К20°С в о течение 118 дней в титрах 2,5-3,0 lg ГАЕ 50/см (срок наблюдения).

3. При исследовании проб крови, мышечной ткани и органов от экспериментально зараженных вирусом АЧС животных, хранящихся при разных температурных режимах, установлено, что метод ПЦР в реальном времени с внутренним контролем позволяет выявлять ДНК вируса АЧС в сроки от 28 до 270 дней в зависимости от температуры хранения проб.

4. В ходе мониторинговых исследований в период 2009-2011 гг. методом стандартной ПЦР и ПЦР в реальном времени исследовано 59056 проб от домашних и диких свиней, при этом в 541 пробе выявлен геном вируса АЧС. Данные ПЦР подтверждены результатами секвенирования, прямой иммунофлуоресценции и биопробы.

5. При исследовании методом стандартной ПЦР и ПЦР в реальном времени 1395 проб иксодовых клещей трех видов, {Ixodes ricinus, Haemaphysalis concina и Rhipicephalus sanguineus), собранных на территории Краснодарского края и республики Абхазия, геном вируса АЧС не выявлен.

6. С использованием методов ПЦР проведено генотипирование семи изолятов вируса АЧС, выделенных в различных регионах РФ в период

2008-2011 гг. На основании анализа пяти вариабельных участков генома В602Ь, КР86Я, 1268Ь и гена 1196Ь вируса АЧС установлено, что все изоляты относятся ко II генотипу вируса АЧС, не имеют каких-либо изменений в данных участках генома, что свидетельствует о едином происхождении изолятов, циркулирующих на территории РФ.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании проведенных исследований разработаны, утверждены и рекомендуются в практику научно-исследовательских и диагностических учреждений следующие разработанные методики:

1. «Тест-система для выявления ДНК вируса АЧС методом ПЦР в реальном времени» (зарегистрирована Россельхознадзором 30.08.2010 (ПВР-1-5.0/02619)) используется в региональных ветеринарных диагностических лабораториях.

2. «Методические рекомендации по дифференциации штаммов вируса африканской чумы свиней методом ПЦР», рассмотренные на секции Биотехнологии Отделения ветеринарной медицины РАСХН (29.10.2009) и утвержденные академиком секретарем Отделения ветеринарной медицины РАСХН Смирновым A.M. (24.12.2009 г.) предлагаются в практику в специализированных лабораториях.

3. «Методические положения по выявлению генома вируса АЧС в образцах биологического материала и объектах ветеринарного надзора» рассмотренные на секции Инфекционной патологии животных Отделения ветеринарной медицины РАСХН (27.04.2011) и утвержденные академиком секретарем Отделения ветеринарной медицины РАСХН Смирновым A.M. (10.11.2011 г.) рекомендуются для использования в ветеринарных лабораториях.

4. «Методические положения по проведению пассивного и активного мониторинга африканской чумы свиней» рассмотренные на секции Инфекционной патологии животных Отделения ветеринарной медицины РАСХН (23.09.2011) и утвержденные академиком секретарем Отделения ветеринарной медицины РАСХН Смирновым A.M. (10.11.2011 г.) предназначены для сотрудников ветеринарных лабораторий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Газаев, Исмаил Хизирович, 2011 год

1. Африканская чума свиней / И. Болоцкий, А. Васильев, В. Семенцов, С. Пруцаков // Свиноферма. 2008. № 9. - С. 43-46.

2. Африканская чума свиней главная проблема для свиноводства России / В. В. Куриннов, Д. В. Колбасов, С. Ж. Цыбанов и др. // Жизнь без опасностей. - 2010. - №3. - С. 82-87.

3. Бакулов, И.А. Африканская чума свиней / И.А. Бакулов. М.: Колос, 1969. - С. 267-290.

4. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина. М.: ВНИТИБП, 1998. - 928 с.

5. Вишняков, И.Ф. Диагностика африканской чумы свиней. IV Метод иммуноферментного анализа / И.Ф. Вишняков, Л.Я. Цыбанова, Г.М.

6. Карпов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ, РАСХН-Покров, 1992. 4.1. - С. 68-70.

7. Вишняков, И.Ф. Перспективы использования методов анализа генома для диагностики особо опасных болезней животных / И.Ф. Вишняков, С.Ж. Цыбанов // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России / ВНИИЭВ. М., 1999. -Т.1. - С. 130-133.

8. Диагностика африканской чумы свиней реакцией гемадсорбции в культурах лейкоцитов / H.H. Крюков, В.Н. Сюрин, 3.JI. Зорина, Б.Р. Сурин //Ветеринария. 1965. - № 10. - С. 19-22.

9. Елсукова A.A. Генотипирование изолятов вируса африканской чумы свиней: канд.биол.наук: 03.02.02 / Елсукова Александра Андреевна. -Покров, 2010. С. 72-96

10. Иванов, A.B. Инфекционные болезни свиней. М., 2006. - С. 5-8.

11. Катастрофа для свиноводческой отрасли // Ветеринария сельскохозяйственных животных. М. - 2009. -№3. -С. 2-5.

12. Коваленко, Я. Р. Африканская чума свиней / Я. Р. Коваленко. М.: Колос, 1965.- 118 с.

13. Коваленко, Я. Р. Африканская чума свиней / Я. Р. Коваленко. М.: Колос, 1972. - 200 с.

14. Козлова, Д.И. Современные проблемы африканской чумы свиней / Д.И. Козлова, В.А. Бесхлебнов. М.: ВНИИТЭИС, 1980. - 57 с.

15. Колонцов A.A. Иммунные реакции и механизмы при заражении африканской чумой свиней / A.A. Колонцов, В.В. Макаров // Сельскохозяйственная биология. Сер. Биология животных. -1993. -№ 4. -С. 12-19.

16. Колонцов, A.A. Вирус африканской чумы свиней: достижения последнего десятилетия 20 века / A.A. Колонцов // Молекул, генетика, микробиология и вирусология. 2001. - № 2. - С. 3-8.

17. Колонцов, A.A. Полипептиды вируса африканской чумы свиней / A.A. Колонцов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -1990.-№ 6. -С. 3-7.

18. Колонцов, A.A. Полипептиды р14 и р 31 вируса африканской чумы свиней ранние белки, локализованные на мембране инфицированной клетки / A.A. Колонцов, A.B. Устин, Н.Г. Шубина // Вопросы вирусологии. -1992. -№3. - С.165-168.

19. Кузнецов, В.А. Технология переработки мяса и других продуктов убоя животных / В.А. Кузнецов, Я.П. Шлипаков. М. -1971. -С.91-98.

20. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М, 1990. - 352 с.

21. Ликвидация африканской чумы свиней в Республике Абхазия / В. Н. Герасимов, С. А. Кукушкин, А. В. Мищенко и др. // Ветеринария. 2008. - № 3. - С. 19-24.

22. Макаров, В.В. Реакции вируса африканской чумы свиней с антителами и причины отсутствия нейтрализации / В.В. Макаров, М.С. Малахова, H.A. Власов // Доклады ВАСХНИЛ. 1991. - №12. - С.27-31.

23. Малоголовкин, A.C. Биологические и генетические характеристики цирковирусов свиней: дис. канд.биол.наук: 03.00.06/03.00.23 / Малоголовкин Александр Сергеевич. -Покров,2009. С. 68 - 71.

24. Руководство по индикации особо опасных болезней сельскохозяйственных животных в объектах ветеринарного надзора и окружающей среды / H.A. Лагуткин, В.Н. Смирнов, В.В. Куриннов, С.Ж. Цыбанов и др. / ВНИИВВиМ, РАСХН. М.: 2000. - 75 с.

25. Самуйленко, А .Я. Инфекционная патология животных. В 2 т./ под ред. А.Я. Самуйленко и др.. М.: ИКЦ «Академкнига», 2006. -Т. 1. - 910 с.

26. Селянинов, Ю.О. Вирус африканской чумы свиней: физическое картирование генома штаммов / Ю.О. Селянинов, В.М. Балышев, С.Ж. Цыбанов // Вестник РАСХН. 2000. - № 5. - С.75-77.

27. Селянинов, Ю.О. Физическое картирование генома вируса африканской чумы свиней / Ю.О. Селянинов, Е.К. Сенечкина // Доклады РАСХН. 1995. - № 2. -С.37-39.

28. Середа, А.Д. Идентификация изолятоспецифического гликополипептида вируса африканской чумы свиней / А.Д. Середа, В.В. Макаров // Ветеринария. -1992. -№1. -С.22-24.

29. Сюрин, В.Н. Африканская чума свиней // Лабораторная диагностика вирусных болезней животных. М.: Колос, 1972. - 416 с.

30. Филогенетический анализ полевых изолятов вируса африканской чумы свиней / И.М. Калабеков, К. Галлардо, А.А. Елсукова и др. // Ветеринария. -2010. №5. - С.31-33.

31. Юбхашини, Э. Африканская чума свиней в республике Маврикий / Э. Юбхашини // Ветеринарный консультант. 2008. - №22. -С. 10-12.

32. A BIR motif containing gene of african swine fever virus, 4CL, is nonessential for growth in vitro and viral virulence / J.G. Neilan Z. Lu, G.F. Kutish et al. // Virology. 1997. - Vol. 230, № 2. - P.252-264.

33. A conserved african swine fever virus I kappa В homolog, 5EL, is nonessential for growth in vitro and virulence in domestic swine / J.G. Neilan, Z. Lu, G.F. Kutish et al. // Virology. 1997. - Vol. 235, № 2. - P.377-385.

34. A conserved african swine fever virus right variable region gene, II1L, is non-essential for growth in vitro and virulence in domestic swine / S.B.

35. Kleiboeker, G.F. Kutish, J.G. Neilan et al. // J. Gen. Virol. 1998. - Vol. 79, №5.-P.l 189-1195.

36. A nonessential african swine fever virus gene UK is a significant virulence determinant in domestic swine // Zsak L., Caler E., Lu Z. et al. // J. Virol. -1998. Vol. 72, № 2. - P. 1028-1035.

37. A reliable enzyme linked immunosorbent assay for african swine fever using the major structural protein as antigenic reagent / E. Tabares, M. Fernandez, E. Salvador-Temprano et al. // Arch. Virol. 1981. - Vol. 70. -P.297-300.

38. A set of African swine fever virus tandem repeats shares similarities with Sar-like sequences / F. Almazan, J.R. Murguia, J.M. Rodriguez et al. // J. Gen. Virol. 1995. - Vol. 36. - P. 729-740.

39. A solid-phase enzyme linked immunosorbent assay using monoclonal antibodies, for the detection of african swine fever virus antigens and antibodies / M.I. Vidal, M. Stiene, J. Henkel et al. // J. Virol. Methods. 1997. - Vol. 66, №2.-P. 211-218.

40. A structural DNA binding protein of african swine fever virus with similarity to bacterial histone-like proteins / M.V. Borca, P.M. Irusta, G.F. Kutish et al. // Arch. Virol. 1996. - Vol. 141, № 2. - P. 301-313.

41. African swine fever / M. Agüero, R. Blasco, P. Wilkinson, E. Vinuela // Virology. 1990. - Vol.176. - P. - 195-204.

42. African swine fever diagnosis. Role of the new tests / M. Arias, M. Pastor, J.M. Escribano et al. // Proc. Workshop Coordinat. Agricult. Res. Lisbon, 1993. - P.185-189.

43. African swine fever virus DNA: deletions and additions during adaptation to growth in monkey kidney cells / E.Tabare's, I. Olivares, G. Santurde, M. J. Garcia, E. Martin, M. E. Carnero // Arch. Virol. 1987. - Vol. 97. - P. 333-346.

44. African swine fever virus encodes two genes which share significant homology with the two largest subunits of DNA-dependent RNA polymerases /

45. RJ. Yanez, M. Boursnell, M.L. Nogal et al. // Nucleic Acids Res. 1993. -Vol. 21, №10. - P. 2423-2427.

46. African swine fever virus gene jl3L encodes a 25-27 k Da virion protein with variable numbers of amino acid repeats / H. Sun, S.C. Jacobs, G.L. Smith et al. // J. Gen. Virol. 1995. - Vol. 76, № 5. - P. 1117-1127.

47. African swine fever virus infection in the argasid host, Ornithodoros porcinus porcinus / S.B. Kleiboeker, T.G. Burrage, G.A. Scoles et al. // J. Virol. 1998. - Vol. 72, № 3. - P. 1711 -1724.

48. African swine fever virus replication in the midgut epithelium is required for infection of Ornithodoros ticks / S.B. Kleiboeker, G.A. Scoles, T.G. Burrage et al. // J. Virol. 1999. - Vol. 73, № 10. - P. 8587-8598.

49. Amino acid sequence and structural properties of protein pl2, an african swine fever virus attachment protein / A. Alcami, A. Angulo, G. Lopez-Otin et al. // J. Virol. 1992. - Vol. 66. - P.60 - 68.

50. Amino acid tandem repeats within a late viral gene define the central variable region of African swine fever virus / P.M. Irusta, M.V. Borca, G.F. Kutish et al. // J. Virology. 1996- Vol. 220. - P. 20-27.

51. An african swine fever virus ERV1-ALR homologue, 9GL, affects virion maturation and viral growth in macrophages and viral virulence in swine / T. Lewis, L. Zsak, T.G. Burrage et al. // J. Virol. 2000. - Vol. 74, № 3. -P.1275-1285.

52. An african swine fever virus gene with similarity to the proto-oncogene bcl-2 and the Epstein-Barr virus gene BHRF1 / J.G. Neilan, Z. Lu, C.L. Afonso et al. // J. Virol. 1993. - Vol. 67. - P. 4391-4394.

53. An african swine fever virus gene with similarity to the T-lymphocyte surface antigen CD2 mediates hemadsorption / M.V. Borca, G.F. Kutish, C.L. Afonso et al. // Virology. 1994. - Vol. 199, № 2. - P.463-468.

54. An african swine fever virus virulence-associated gene NL-S with similarity to the herpes simplex virus ICP34.5 gene / L. Zsak, Z. Lu, G.F. Kutish et al. // J. Virol. 1996. - Vol. 70, № 12. - P. 8865-8871.

55. Analysis of the complete nucleotide sequence of african swine fever virus / R.J. Yanez, J.M. Rodriguez, M.L. Nogal et al. // Virology. 1995. - Vol. 208, № 1. - P.249-278.

56. Anon, F. African swine fever // Rep. Comm. dis. 81th Meeting of USA UA Minneapolis. Minn. 1977. - №18. - P. 21.

57. Anon, F. Fiebre porcine africane en Cuba. // Rep. Comm. Habana. -1971.- P.40-42.

58. Anon, F. Rapport sur la peste porcine africane en Espagne. Madrid, 1978.

59. Apoptosis: a mechanism of cell killing and lymphoid organ impairment during acute african swine fever virus infection / F. Ramiro-Ibanez, A. Ortega, A. Brun et al. // J. Gen. Virol. 1996. - Vol. 77, № 9. - P. 2209-2219.

60. Asfarviridae. Virus Taxonomy / L. K. Dixon, J. M. Escribano, C. Martins, D. L. Rock et al. // Eighth Report of the ICTV, 2005. P. 135-143.

61. Bellani, L. Nouva fase della lotta contro la Peste suina Africana / L. Bellani // Zooprofilassi. 1967. Vol. 26, N 5- 6. P. 274-277.

62. Black, D.N. Purification and physicochemical characteristics of african swine fever virus // J. Gen. Virol. 1976. - Vol. 32. - P. 509-518.

63. Boldrini, G. La peste suina africana in Europa. Una situazione di emergenza che si aggrava / G. Boldrini, // Vet. Ital. 1967. Vol. 18, № 3-4. - P. 238-261.

64. Boinas, F.S. Transmission of african swine fever virus / African swine fever / F.S. Boinas // Proc. Workshop Coordinat. Agricult. Res. 1993. - P. 211222.

65. Caballero, R.G. Application of pRPEL2 plasmid to detect african swine fever virus by DNA-DNA hybridization / R.G. Caballero, E. Tabares // Arch. Virol. 1986. - № 87. - P. 119-125.

66. Camacho, A. Protein p22 of african swine fever virus: an early structural protein that is incorporated into the membrane of infected cells / A. Camacho, E. Vinuela // Virology. 1991. - № 181.-P. 251-257.

67. Castagnoli, B. Rilivi sul facolaio di peste suina africana verifi-catosi nella provincia di Bolzano / B. Castagnoli // Att. Soc. Ital. Sci. Vet. - 1971. - Vol. 28.-P. 510-513.

68. Characterization and molecular basis of heterogeneity of the African swine fever virus envelope protein p54 / F. Rodriguez , C. Alcaraz, A. Eiras, R.J. Yanez et al. // J. Virol. 1994- Vol. 68. - P. 7244-7252.

69. Characterization of p30, a highly antigenic membrane and secreted protein of african swine fever virus / C.L. Afonso, C. Alcaraz, A. Brun et al. // Virology. 1992. - Vol. 189, № 1. - P.368-373.

70. Characterization of pathogenic and non-pathogenic african swine fever virus isolates from Ornithodoros erraticus inhabiting pig premises in Portugal / F.S. Boinas, G.H. Hutchings, L.K. Dixon et al. // J. Gen. Virol. 2004. - № 85. - P. 77-87.

71. Co-circulation of two genetically distinct viruses in an outbreak of African swine fever in Mozambique: no evidence for individual co-infection / A.D. Bastos, M.L. Penrith, F.Macome et al. // Vet. Microbiol. 2004. - Vol. 103, № 3-4.- P. 169-182.

72. Costa, J. V. African swine fever virus, Molecular biology of iridoviruses / J. V. Costa // Kluwer Academic Publishers. Norwell, Mass, 1990. - P. 247270.

73. De Boer, C.J. Immunology of african swine fever / C.J. De Boer, J.C. Pan, W.R. Hess // J. Amer. Vet. Med. Ass. 1972. - Vol. 160, № 4. - P. 528-532.

74. De Tray, D.E. African swine fever / D.E. De Tray // Advances in Veterinary Science. -1963. № 8. - P. 299-333.

75. Deletion of a CD2-like gene, 8-DR, from african swine fever virus affects viral infection in domestic swine / M.V. Borca, C. Carrillo, L. Zsak et al. // J. Virol. 1998. - Vol. 72, № 4. - P.81-89.

76. Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5' to 3' exonuclease activity of Thermus aquaticus DNA polymerase / P. Holland, R. Abramson, R. Watson et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - № 88. -P. 7276-7280.

77. Development of a TaqMan PCR assay with internal amplification control for the detection of african swine fever virus / D.P. King, S.M. Reid, G.H. Hutchings et al. // J. Virol. Methods. 2003. - Vol. 107, № 1. - P.53-61.

78. Dixon, L.K. The structure and function of the african swine fever genome / L.K. Dixon // Rev. Sci. tech. Off. int. Epiz. 1986. - Vol. 5, № 2. - P. 469-475.

79. Donaldson, A.I. The survival of some air borne animal viruses in relation to relative 82 humidity / A.I. Donaldson, N.P. Ferris // Veterinary Microbiology.- 1976. №1. P.413-420.

80. De Kock, G. Swine fever in South Africa / G. De Kock, E. M. Robinson, J. Keppel // Onderstepoort J. Vet. Sci. Ind. 1940. - Vol. 14, N 1-2. - P. 31-93.

81. Enjuanes, L. Isolation and properties of the DNA of african swine fever virus / L. Enjuanes, A.L. Carrascosa, E. Vinuela // J. Gen. Virol. 1976. - № 32.- P. 479-492.

82. Family Asfarviridae / L.K. Dixon, J.V. Costa, J.M. Escribano, D.L. Rock, E. Vinuela, P.J. Wilkinson et al. // Virus taxonomy: Seventh Report of the1.ternational Committee on Taxonomy of Viruses. Summers Academic Press, San Diego, 2000. P. 159-165.

83. General morphology and capsid fine structure of african swine fever virus particles // J.L. Carrascosa, J.M. Carazo, A.L. Carrascosa et al. // Virology. -1984.-Vol. 132.-P. 160-172.

84. Genetic characterisation of African swine fever viruses from outbreaks in southern Africa / C.I. Boshoff,A.D. Bastos, L.J. Gerber, W.Vosloo // Vet Microbiol. 2007. - Vol. 121 - P.45-55.

85. Genotyping field strains of african swine fever virus by partial p72 gene characterization / A.D. Bastos, M.L. Penrith, C. Cruciere et al. // Arch Virol. -2003. Vol. 148, № 4. - P.693-706.

86. Gierloff, B. Europaeisk og afrikansk swine pest / B. Gierloff // Nord. Vet. Med. 1963. - Vol. 15, № 5. - P. 365-394.

87. Greig, A. The localization of african swine fever virus in the tick Ornithodoros moubata porcinus / A. Greig // Arch. ges. Virusforsch. 1972. -Vol. 39, № 1 -3.-P. 240-247.

88. Hairpin loop structure of african swine fever virus DNA / A. Gonzalez, A. Talavera, J.M. Almendral et al. // Nucleic Acids Res. 1986 - № 14. - P. 68356844.

89. Hammond, R. Arecent case of african swine fever in Kenya, East Africa / R. Hammond, D. E. De Tray // J. Amer. vet. Med. Assoc. 1955. - Vol. 126- P. 389-391.

90. Heuschule, W.P. Isolation of african swine fever from a giant forest hog / W.P. Heuschule, L. Coggins // Bull. epiz. diseases Afr. 1965. - Vol. 13, № 3. -P. 255-262.

91. Highly sensitive PCR assay for routine diagnosis of african swine fever virus in clinical samples / M. Aguero, J. Fernandez, L.Romero et al. // J. Clin. Microbiol. 2003. - Vol. 41, № 9. - P. 4431-4434.

92. Intra-genotypic resolution of African swine fever viruses from an East African domestic pig cycle: a combined p72-CVR approach / B.A. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka, W. Vosloo // Virus Genes. 2007. - Vol. 35, № 3. - P. -729-735.

93. Kinetics of African swine fever virus infection in Ornithodoros erraticus ticks / P. Afonso, J. Rebecca, L. K. Dixon // Journal of General Virology. -2006.-P.-63-71.

94. Kleiboeker, S.B. Pathogenesis of african swine fever virus in Ornithodoros ticks / S.B. Kleiboeker, G.A. Scoles // Anim. Health Res. Rev. 2001. - № 2. -P. 121-128.

95. Lucas, A. Classification of african swine fever virus / A. Lucas, R. Carnero, M. Bresso / C. R. Acad. Sci. 1968. - Vol. 266, № 17. - P. 1800-1801.

96. MacDiarmid, S.C. The importation into New Zealand of meat and meat products: A review of the risks to animal health / S.C. MacDiarmid// FAO Animal Health, Manual. 1991. -№11.- P. 37-40.

97. Manual of standards for diagnostic tests and vaccines, 4th edition / OIE. 2000. 590 p.

98. Mapping and sequence of the gene coding for protein p72, the major capsid protein of african swine fever virus / C. Lopez-Otin, J.M. Freije, F. Parra et al. // Virology. 1990. - Vol. 175. - P. 477-484.

99. Mapping and sequence of the gene encoding protein pi7, a major african swine fever virus structural protein / C. Simon-Mateo, J.M. Freije, G. Andres et al. // Virology. 1995. - Vol. 206. - P. 1140-1144.

100. Maurer, F. Pathology of african swine fever-comparison with Hog cholera / F. Maurer, R. J. Griesemer, T. Jones. Amer. J. Vet. Res. 1958. - Vol. 19, № 72. -P. 517-539.

101. McDaniel, H. A. African swine fever / H. A. McDaniel // In Diseases of Swine, 5th edition, Iowa State University Press, Ames, 1980. P. 300-308.

102. Molecular epidemiology of African swine fever in East Africa / B.A. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka, W. Vosloo // Arch.Virol. -2005. Vol. 150. -P. 2439-2452.

103. Montgomery, R.E. On a form of swine fever occurring in British East Africa (Kenya Colony) / R.E. Montgomery // J. Comp. Pathol. 1921. - Vol. 34. -P. 159-191.

104. Moreno, M. Inhibition of african swine fever virus + replication by phosphonoacetics acid / M. Moreno, A. L. Carrascola // J. gen. Virol. 1978. -Vol. 39, № 2. - P. 253-258.

105. Morrison, T.B. Quantification of low-copy transcripts by continuous SYBR Green I monitoring during amplification / T.B. Morrison, J.J. Weis, C.T. Wittwer // BioTechniques. 1998. - № 24. - P.954-958.

106. Nucleotide sequence and variability of the inverted terminal repetitions of african swine fever virus DNA / I. De la Vega, A. Gonzalez, R. Blasco et al. // Virology. 1994. - Vol. 201, № 1. - P. 152-156.

107. Oligonucleotides with fluorescent dyes at opposite ends provide a quenched probe system useful for detecting PCR product and nucleic acid hybridization / K.J. Livak, S.J. Flood, J. Marmaro et al. // PCR Methods Appl. 1995. -№4. -P.357-362.

108. Ortin, J. Cross-links in the DNA of african swine fever virus / J. Ortin, L. Enjuanes, E. Vinuela // J. Virol. 1979. - № 31. - P.579-583.

109. Oura, C.A. African swine fever: a disease characterized by apoptosis / C.A. Oura, P.P. Powell, R.M. Parkhouse // J. Gen. Virol. 1998. - Vol. 79, № 6. - P. 1427-1438.

110. Pan, I.C. African swine fever: application of immunoelectroosmophoresis for the detection of antibody / I.C. Pan, C.J. De Boer, W.R. Hess // Can. J. Comp. Med. 1972. - Vol. 36. - P. 309-316.

111. Phologane, S.B. Intra- and inter-genotypic size variation in the central variable region of the 9RL open reading frame of diverse African swine fever viruses / S.B. Phologane, A.D. Bastos, M.L. Penrith // Virus Genes. 2005. -Vol. 31, №3.-P. 357-360.

112. Pierce, M.A. Distribution and ecology of Ornithodoros moubataporcinus Walton (Acarina) in animal burrows in East Africa / M.A. Pierce // Bull. Entomol. Res. 1974. - Vol. 64. - P. 605-619.

113. Pini, A. African swine fever; an epizootiological review with special reference to the South African situation / A. Pini, D. Hurter // J. S. Afr. vet. Assn. 1975. - Vol. 46, № 3. - P. 227-232.

114. Plowright, W. Evidence for the type of nucleic acid in african swine fever virus / W. Plowright, F. Brown, J. Parker // Arch. ges. Virusforsch. 1966. -Vol. 19, №3.-P. 289-304.

115. Plowright, W. The stability of african swine fever virus with particular reference to heat and pH inactivation / W. Plowright, J. Parker // Arch. ges. Virusforsch. 1967. - Vol. 21, № 3/4, - P. 382-402.

116. Plowright, W. Vector transmission of african swine fever virus / W. Plowright // Hog cholera, classical swine fever and african swine fever / Commission of the European Communities. EUR 5904 EN. 1977. - P. 575587.

117. Proteins specified by African swine fever virus. II. Analysis of proteins in infected cells and antigenic properties / E. Tabarés, J. Martinez, F. Ruiz Gonzalvo, C. Sánchez-Botija // Arch Virol. 1980. - Vol.66, № 2. - P. 119-132.

118. Rapid and biologically safe diagnosis of african swine fever virus infection by using polymerase chain reaction / Y. Steiger, M. Ackermann, C. Mettraux et al. // J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol. 30, №1. - P. 1-8.

119. Rapid and simple method for purification of nucleic acids / R. Boom, C. J. Sol, M. M. Salimans et.al. // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol. 28, № 3. - P. 495-503.

120. Read, S.J. Lightcycler multiplex PCR for the laboratory diagnosis of common viral infections of the central nervous system / S.J. Read, J.L. Mitchell, C.G. Fink // J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39. - P. 3056-3059.

121. Rennie, L. Effects of infection of the tick Ornithodoros moubata with african swine fever virus / L. Rennie, P.J. Wilkinson, P.S. Mellor // Med. Vet. Entomol. 2000. - Vol. 14, №4. - P. 355-360.

122. Rennie, L. Transovarial transmission of african swine fever virus in the argasid tick Ornithodoros moubata / L. Rennie, P.J. Wilkinson, P.S. Mellor // Med. Vet. Entomol. 2001. - Vol. 15, № 2. - P. 140-146.

123. Salas, M. African swine fever virus (Asfarviridae) / M. Salas // Encyclopedia of Virology, 2-nd edn. Vol. 1. 1999. - P. 30-38.

124. Sanchez-Botija, C. Estudio sobre la peste porcina africana en España / C. Sanchez-Botija //Bull. off. internal epiz. 1962. - Vol. 58. - P. 707-727.

125. Sanchez-Botija, C. La peste porcine africaine en Espagne / C. Sanchez-Botija // Bull. off. internat. epiz. 1961. - Vol. 56, № 1-2. - P. 148-175.

126. Sanchez-Botija, C. Laboratory manual for diagnosis on african swine fever / C. Sanchez-Botija, A. Ordas. Madrid, 1977. - P. 133-136.

127. Sanchez-Vizcaino, J.M. African swine fever diagnosis / J.M. Sanchez-Vizcaino // African Swine Fever / Becker Y. (ed.). Boston: Martinus Nijhoff, USA, 1987.-P. 63-71.

128. Serological and immunohistochemical study of african swine fever in wild boar in Spain / J. Perez, A.I. Fernandez, M.A. Sierra et al. // Vet.Rec. 1998. -Vol.143, № 5.-P.136-139.

129. Smith, J. The United States Department of agriculture emergency animal disease prepareones program / J. Smith // Wildlife dis. 1976. - P. 115-120.

130. Terminal and internal inverted repetitions in african swine fever virus DNA / J.M. Sogo, J.M. Almendral, A. Talavera et al. // Virology. 1984. - Vol. 133. -P. 271-275.

131. Terpstra, C. Differential diagnosis between african swine fever and hog cholera / C. Terpstra // African Swine Fever / Becker Y. (Ed.). Boston; Dordrecht: Martinus Nijhoff Publ. - 1987. - P. 73-80.

132. Terpstra, C. Laboratory diagnostics of african swine fever in ASF-free and ASF-endemic countries / C. Terpstra // African swine fever / Galo A. (Ed.), Proc. Workshop for coordination of agricultural research. Lisbon, 1993. - P. 161-167.

133. The african swine fever virus thymidine kinase gene is required for efficient replication in swine macrophages and for virulence in swine / D.M. Moore, L. Zsak, J.G. Neilan et al. // J. Virol. 1998. - Vol. 72, № 12. -P.10310-10315.

134. The morfological characteristics of african swine fever virus and its resemblance to tipula iridescent vims / J.D. Almeida, D. June, A. P. Waterson, W. Plowright // Arch. Ges. Virusforsch. 1967. Vol. 20, № 3. - P. 392-396.

135. Thomson, G.R. The epidemiology of african swine fever: the role of free-living hosts in Africa / G.R. Thomson // Onderstepoort J. Vet. Res. 1985. -Vol. 52.-P. 201-209.

136. Two putative african swine fever virus helicases similar to yeast 'DEAH' pre-mRNA processing proteins and vaccinia virus AT Pases D11L and D6R / RJ.Yanez, J.M. Rodriguez, M. Boursnell et al. // Gene. 1993. - Vol. 134, № 2. - P.161-174.

137. Variable and constant regions in african swine fever virus DNA / R.Blasco, M. Aguero, J.M. Almendral et al. // Virology. -1989. № 168. - P. 330-338.

138. Variable regions on the genome of Malawi isolates of African swine fever virus / K.J. Sumption, G.H. Hutchings, P.J. Wilkinson, L.K. Dixon // J. Gen. Virol. 1990. -Vol. - 71. - P. 2331-2340.

139. Wesley, R.D. Genome relatedness among african swine fever virus isolates by restriction endonuclease analysis / R.D. Wesley, A.E. Tuthill // Prev. Vet. Med. 1984. - № 2. - P. 53-62.

140. Wilkinson, P.J. Transmission of the african swine fever virus / P.J. Wilkinson // Prev. Vet. Med. 1984. - № 2. - P. 71.

141. Yanez, R.J. African swine fever virus encodes a DNA ligase / R.J. Yanez, E. Vinuela//Virology. 1993. - Vol.193, № 1. - P.531-536.

142. Zsak, L. Preclinical Diagnosis of African Swine Fever in Contact-Exposed Swine by a Real-Time PCR Assay / L. Zsak, M. Borca // journal of clinical microbiology. 2005. - P. 112-119.

143. Эпизоотическая ситуация по АЧС электронный ресурс. Режим доступа: http://www.fsvps.ru . - загл. с экрана.