Совершенствование методического обеспечения гигиенической оценки опасности контаминации цистами LAMBLIA INTESTINALIS и ооцистами CRIPTOSPORIDIUM PARVUM объектов окружающей среды и биологического материала тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.02.01, кандидат наук Асланова Мария Михайловна

• Асланова Мария Михайловна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Асланова Мария Михайловна

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

Глава 2. Материалы, методы и объем исследований

2.1. Объекты исследования

2.2.Методы исследования

2.3.Реактивы, тест-наборы

2.4. Объем, направления, виды исследований

2.5. Учет результатов исследований

Собственные исследования

Глава 3. Анализ статистических данных о паразитарной заболеваемости населения Российской Федерации и санитарном состоянии объектов окружающей среды по паразитологическим

показателям

Глава 4. Разработка методов подготовки проб почвы, смывов с поверхностей и плодоовощной продукции, биологического материала

(кала) для внедрения метода по определению ИМС-ИФМ по

определению цист L.intestinalis и ооцист Cr.parvum

4.1. Разработка метода подготовки проб почвы

4.2. Разработка метода подготовки проб смывов с поверхностей

объектов окружающей среды

4.3. Разработка метода подготовки проб смывов с плодоовощной продукции

4.4. Разработка метода подготовки проб биологического материала

(кала)

4.5. Сравнительная оценка показателей выявляемости цист L. intestinalis и ооцист Cr.parvum при разных методах

пробоподготовки образцов

Глава 5. Натурные исследования объектов окружающей среды и биологического материала на наличие цист L. intestinalis и ооцист

Cr.parvum различными методами

5.1. Натурные исследования воды плавательных бассейнов на

наличие цист L. intestinalis и ооцист Cr.parvum

5.2. Натурные исследования биологического материала на наличие

цист L. intestinalis и ооцист Cr.parvum различными методами

5.3. Натурные исследования почв на наличие L.intestinalis и ооцист Cr.parvum различными методами

5.4. Натурные исследования смывов с поверхностей на наличие

L. intestinalis и ооцист Cr.parvum различными методами

Глава 6. Экономическая эффективность применения метода ИМС-

ИФМ для выполнения паразитологических исследований

Глава 7. Заключение

Выводы

Список литературы

Приложения

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АТМ - аналитические трековые мембраны ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения ИМС-ИФМ - иммуномагнитная сепарация с последующим

иммунофлюоресцирующим мечением МП - метод Падченко МР - метод Романенко МУК - методические указания

МФ с АТМ - метод фильтрации через аналитические трековые мембраны ОКИ - острые кишечные инфекции

СанПиН - Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы

ЭФС - метод эфир-формалиновой седиментации

СГМ - социально-гигиенический мониторинг

МСИ - межлабораторные сличительные испытания

ИЛЦ - испытательный лабораторный центр

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование методического обеспечения гигиенической оценки опасности контаминации цистами LAMBLIA INTESTINALIS и ооцистами CRIPTOSPORIDIUM PARVUM объектов окружающей среды и биологического материала»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность проблемы

Паразитарные болезни в мире занимают ведущее место в структуре инфекционной заболеваемости населения. По данным ВОЗ около 4,3 млрд. человек населения Земли имеют паразитарные инвазии. В России ежегодно регистрируется около 1 млн. больных паразитарными болезнями, однако, их реальное число превышает 20 млн. человек [85, 124]. Эти болезни получили название «neglected diseases» (незамеченные болезни), отчасти потому, что их названия трудны для произношения, «однако ущерб, наносимый паразитарной патологией, неизмеримо больше, чем несколько сот выявленных случаев «птичьего гриппа», которым нас пугают уже 10 лет» [212].

Известно более 350 видов возбудителей паразитарных болезней в мире [214]. На территории Российской Федерации распространено более 30 видов, и только 13 из них включены в официальное статистическое наблюдение за паразитарной заболеваемостью населения [123, 124].

Процессы урбанизации населения, повышение антропогенной нагрузки, а также изменение климата, природные катастрофы (недавние наводнения в Краснодарском, Алтайском, Пермском краях, Амурской области и Сибири и др.) приводят к созданию благоприятных условий для развития, длительного выживания и распространения в различных объектах окружающей среды возбудителей паразитарных болезней. Многообразие угроз этих возбудителей здоровью человека и определяют их роль в экологии человека и гигиене окружающей среды [105].

Паразитарная безопасность объектов окружающей среды регламентирована санитарными правилами и нормативами СанПиН 3.2.3 21514 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», техническим регламентом Таможенного союза ТРТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции» и другими нормативно-правовыми документами.

Одними из контролируемых показателей в смывах с плодоовощной

продукции и поверхностей объектов окружающей среды, питьевой воде, в том числе расфасованной в емкости, в воде плавательных бассейнов и поверхностных водных объектов, почве являются цисты Lamblia intestinalis и ооцисты Criptosporidium parvum, имеющие наибольшее эпидемиологическое значение в возникновении и развитии паразитарной заболеваемости населения (СанПиН 2.1.4.1074-01, СанПиН 2.1.5.980-00, СанПиН 2.1.4.1116-02, СанПиН 2.1.7.1287-02).

Данные федеральной статистической отчетности о санитарном состоянии объектов окружающей среды нерепрезентативны в отношении оценки паразитарного загрязнения, так как получены в результате применения архаичных методов паразитологических исследований.

В связи с низкой инфицирующей дозой цист L.intestinalis и ооцист C.parvum [185, 186] чрезвычайно важным является методика определения этих показателей в объектах окружающей среды, которая позволяла бы получать достоверные результаты отличные от нуля и прогнозировать инфекционную паразитарную заболеваемость.

Применение эффективных методов лабораторной диагностики паразитарных болезней и определение их возбудителей в окружающей среде является актуальной задачей практического здравоохранения.

Степень научной разработанности темы

В настоящее время известно около 353 видов паразитов, опасных для человека и животных [5, 6, 33]. Идентификация паразитарного патогена на современном этапе развития лабораторной медицины возможна с использованием микроскопических, иммунных, иммунохимических и высокотехнологических методов анализа, в т.ч. ПЦР и комплекса цифровой и сканирующей автоматизированной микроскопии [3, 12, 19, 24, 142, 143, 145].

В настоящее время разработан ряд нормативно-методических документов, регламентирующих порядок проведения клинико-диагностических (МУК 4.2.3145-13 «Лабораторная диагностика гельминтозов

и протозоозов») и санитарно-паразитологических исследований (МУК4.2.2661-10 «Методы санитарно-паразитологических исследований»).

Однако экспертная оценка отмечает значительное отставание применяемых лабораторных технологий при гигиенической оценке контаминации паразитарными патогенами объектов окружающей среды, отсутствие стандартизированных процедур пробоподготовки, обеспечивающих воспроизводимость, точность и параллелизм исследований.

Все известные модификации унифицированных методов санитарно-паразитологических исследований улучшали эффективность методов, но не предлагали алгоритм стандартизации процедуры подготовки проб и количества подготовленных препаратов для исследований [134, 135].

Существует потребность в разработке новых подходов методического обеспечения санитарно-паразитологического анализа, таких как разработка и применение сорбентов с магнитными свойствами при выделении и идентификации различных микроорганизмов и их антигенов [113, 114, 116, 117].

Магнитоиммуносорбенты используют в качестве твердой фазы для селективного концентрирования на их поверхности различных антигенов и микроорганизмов [66, 67, 68, 69, 70].

Высокие технологические характеристики метода иммуномагнитной сепарации с последующим иммунофлуоресцентным мечением (ИМС-ИФМ) явились толчком для научного поиска возможных вариантов его применения в паразитологических исследованиях для комплексной оценки загрязнения окружающей среды, исходя из разработанности метода при санитарно-паразитологическом анализе воды [58].

Таким образом, технологическим прорывом в санитарной паразитологии должно стать применение ускоренных методов лабораторных исследований, которые основаны на применении иммунных и иммунохимических анализов, имеющих высокую степень специфичности и целевой (диагностической) направленности.

Возможность унификации методов санитарно-паразитологического анализа разных объектов окружающей среды на основе метода ИМС позволит применить принцип методологического и методического единообразия при проведении эпидемиологических обследований в очагах острых кишечных инфекций, а также для оценки рисков возникновения и распространения паразитарных заболеваний.

В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось совершенствование методического обеспечения гигиенической оценки опасности контаминации цистами L. intestinalis и ооцистами C. parvum объектов окружающей среды (смывы с поверхностей, смывы с плодоовощной продукции, почва) и биологического материала (кала).

Для достижения поставленной цели решали следующие задачи:

1. Определить информативность и достоверность федеральных статистических данных о санитарном состоянии объектов окружающей среды по паразитологическим показателям и о паразитарной заболеваемости населения Российской Федерации для оценки риска возникновения паразитарных заболеваний.

2. Разработать методы пробоподготовки образцов почвы, смывов с поверхностей и с плодоовощной продукции, биологического материала (кала) для внедрения метода ИМС-ИФМ в паразитологические исследования на наличие цист L. intestinalis и ооцист C.parvum.

3. Дать сравнительную оценку чувствительности метода ИМС-ИФМ и утвержденных методов санитарно-паразитологического анализа при выявлении цист L. intestinalis и ооцист C.parvum по ретроспективным данным лабораторного контроля и результатам собственных натурных исследований объектов различного природного происхождения.

4. Разработать практические рекомендации по применению метода ИМС-ИФМ для обеспечения методического единообразия в санитарных и клинических паразитологических исследованиях на наличие цист L. intestinalis

и ооцист C.parvum с целью оптимизации и стандартизации лабораторного контроля за паразитарной заболеваемостью населения.

Научная новизна

Доказана низкая чувствительность утвержденных методов паразитологического анализа, использующихся в клинической и санитарной практике, которые не позволяют адекватно оценить уровень загрязнения паразитарными патогенами объектов окружающей среды и биологического материала (кала).

Впервые установлено, что применение разработанных методик определения цист простейших с использованием метода ИМС -ИФМ позволит обнаруживать в объектах окружающей среды и клиническом материале 90 -100% цист L.intestinalis и 70-100% ооцист C.parvum в отличие от методов, утвержденных в действующих нормативных документах, показатель выявляемости которых по определению цист лямблий составляет 55-95%, ооцисты криптоспоридий не обнаруживают.

Впервые разработаны методики обнаружения ооцист C.parvum методом ИМС-ИФМ.

Показана зависимость степени выявляемости цист L. intestinalis и ооцист C.parvum от применяемого метода паразитологического анализа объектов окружающей среды и биологического материала на наличие цист L. intestinalis и ооцист C.parvum.

Практическая значимость и внедрение результатов исследования

Метод ИМС-ИФМ позволит провести индикацию цист L.intestinalis и ооцист C.parvum в пробах из объектов окружающей среды и в клиническом материале и определить единый этиотропный возбудитель в очагах острых кишечных инфекций (ОКИ) паразитарного генеза. Метод ИМС-ИФМ позволит вывести организацию контроля за распространенностью протозоозов на уровень мировых стандартов используемых лабораторных технологий по чувствительности, комплексности и интенсификации применяемых процедур,

а также проводить эпидемиологические расследования очагов ОКИ единым

9

методом, что существенно снизит финансовые затраты и сократит время для получения результата при определении источника загрязнения паразитарными патогенами и способствует эффективному социально-гигиеническому мониторингу за циркуляцией паразитарных патогенов в объектах окружающей среды.

Применение метода ИМС-ИФМ для определения цист ЬЛп1е8Ыпа118 и ооцист С.рагупт в объектах окружающей среды и клиническом материале позволяет выполнять требования действующего СанПиНа 3.2.3215-14 «Профилактика паразитарных болезней на территории РФ».

Метод ИМС-ИФМ определения цист Ьлп1в8ипа118 и ооцист С.рагуыт включен в методические указания МУК 4.2.3016-12 «Санитарно-паразитологические исследования плодоовощной, плодово-ягодной и растительной продукции».

Поданы 4 заявки на патенты: «Способ пробоподготовки образцов почвы для определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий» (№2016148897), «Способ пробоподготовки смывов с поверхностей для определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий» (№2016148898), «Способ определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий в клиническом материале, смывах с объектов окружающей среды, в овощах, в почве адаптированным методом иммуномагнитной сепарации с последующим иммунофлуоресцентным мечением» (№2016148899), «Способ пробоподготовки биологического материала кала для определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий» (№2016148900).

Материалы диссертационной работы включены в программу циклов повышения квалификации в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора (Справка о внедрении № 11-3ФЦ/2754 от 15.08.17 г.), ФГБУ «ЦСП» Минздрава России (ранее ФГБУ «НИИ ЭЧ и ГОС им. А.Н. Сысина» Минздрава России) (Акт о внедрении №18-5/705 от 28.12.2016), НИИ медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России

(Справка о внедрении №03.04-13/500 от 04.10.2017), проводимых для специалистов санитарно-эпидемиологической службы (с 2009 г. по настоящее время).

Положения, выносимые на защиту

1. Недостаточная информативность статистических данных о загрязнении объектов окружающей среды цистами L. intestinalis и ооцистами C.parvum и об уровне паразитарной заболеваемости населения не позволяет проводить релевантную оценку риска возникновения паразитарных заболеваний.

2. Отсутствие единообразия в применяемых методах санитарно -паразитологического анализа проб из объектов окружающей среды и клинического материала приводит к получению ложноотрицательных данных о распространенности заболеваемости лямблиозом и криптоспоридиозом, а также к отсутствию возможности получения достоверной информации о приоритетных источниках инвазий цистами L.intestinalis и ооцистами C.parvum.

3. Разработанные методы подготовки проб почвы, смывов с предметов и с плодоовощной продукции, биологического материала (кала) для внедрения метода ИМС-ИФМ в паразитологические исследования на наличие цист L.intestinalis и ооцист C.parvum позволяют достигнуть высокой чувствительности паразитологических исследований по сравнению с утвержденными методами.

4. Разработанные практические рекомендации по применению метода ИМС-ИФМ обеспечат индикацию цист L.intestinalis и ооцист C.parvum в клиническом материале и в пробах из объектов окружающей среды с высокой чувствительностью, что позволит определять этиотропный возбудитель в очагах острых кишечных инфекций паразитарного генеза, а также проводить количественную оценку риска возникновения паразитарных заболеваний.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Х съезде Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (г. Москва, 12-13 апреля 2012 г.); Х Международном симпозиуме «Экология человека и медико-биологическая безопасность населения» (Ялта, 24 октября - 1 ноября, 2015 г.); VI Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов с международным участием «Окружающая среда и здоровье. Гигиена и экология урбанизированных территорий», посвященной 85-летию ФГБУ «НИИ ЭЧ и ГОС им. А.Н. Сысина» Минздрава России (г. Москва, 13-14 сентября 2016 г.), Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы диагностики и профилактики инфекционных и паразитарных заболеваний на юге России» (г. Ростов-на-Дону, 13-14 октября 2016 г.), Международном форуме Научного совета Российской Федерации по экологии человека и гигиене окружающей среды, посвященном 85-летию ФГБУ «НИИ ЭЧ и ГОС им. А.Н. Сысина» Минздрава России (г. Москва, 15-16 декабря 2016 г.).

Личный вклад автора в работе составляет более 80% и заключается в формулировании проблемы, постановке цели и задач работы, выборе методов исследования, выполнении аналитической и экспериментальной работы, обобщении и интерпретации полученных данных, подготовке научных публикаций. Автор выражает искреннюю глубокую благодарность: своим руководителям- доктору медицинских наук, профессору, член-корреспонденту РАН Синицыной О.О., кандидату медицинских наук- Кузнецовой К.Ю.; кандидату биологических наук Загайновой А.В., кандидату биологических наук Артемовой Т.З., доктору биологических наук, профессору Ингель Ф.И., доктору медицинских наук, профессору- Подуновой Л.Г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 18 работ, из них 9 - в рецензируемых научных журналах, включенных в перечень, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 105 страницах компьютерной верстки и состоит из введения, обзора литературы, материалов, методов и объема исследований, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы, а также содержит 10 приложений. Диссертация иллюстрирована 28 таблицами, 5 рисунками. Библиография включает 215 источников (из них 146 отечественных, 69 -зарубежных работ).

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Приоритетные задачи государственной санитарно-эпидемиологической службы Российской Федерации направлены на усиление методической и материально-технической базы, кадрового потенциала и изменение количества и номенклатуры лабораторных исследований с целью совершенствования механизмов реализации риск ориентированного надзора [1, 2, 3, 4, 32].

В составе лабораторных центров учреждений Роспотребнадзора насчитывается около 1117 лабораторий микробиологического профиля, на базе которых выполняются паразитологические исследования, и многие обозначенные проблемы лабораторной службы для этой группы лабораторного обеспечения надзора являются наиболее значимыми.

Актуальность методического обеспечения паразитарной безопасности среды обитания определяется гигиеническим нормированием показателей возбудителей паразитарных болезней в объектах окружающей среды. В настоящее время известно около 353 видов паразитов, опасных для человека и животных [5, 6, 33].

По подсчетам К.И.Скрябина и В.П. Подъяпольской к 1937 г. в СССР было зарегистрировано 48 видов гельминтов, заразных для человека, причем 33 из них были впервые зарегистрированы в советский период [14, 17].

На территории Российской Федерации распространено более 30 видов возбудителей паразитарных болезней, и только 13 из них включены в официальное статистическое наблюдение за уровнем инфекционной и паразитарной заболеваемости населения в связи с не разработанностью нормативно-правовой и методической базы [87, 88, 89, 90, 91, 92].

В практическом здравоохранении применяется более 60 методов и модификаций паразитологических исследований биологических выделений из организма человека и около 40 методов санитарно-паразитологических

исследований объектов окружающей среды [10, 15, 102], которые в основном применяют микроскопические исследования.

Паразитология как наука начала развиваться после революции 1917 года и построения социалистического общества - СССР, где Конституцией были определены права граждан на достойную жизнь и охрану здоровья [1, 2, 9, 10, 68].

Фундаментальные исследования К.И.Скрябина и его учеников были посвящены морфологии, биологии, филогении и систематике паразитических червей, вопросам эпидемиологии (эпизоотологии) и организации мероприятий по борьбе с гельминтозами человека и хозяйственно-полезных животных, и имели большое значение для дальнейшего изучения гельминтофауны человека и животных [14, 15, 67, 68].

Основоположники российской паразитологической науки, наряду с изучением особенностей жизненного цикла паразита, механизмов заражения и развития патологических состояний человека и животных, изучали морфологию взрослых особей, их личинок и яиц в разные периоды жизнедеятельности, определяли инвазионную стадию паразита и его устойчивость во внешней среде [65, 111, 113].

Эти разработки были заложены в основу методов выделения возбудителей из биологического материала и окружающей среды [102, 103]. Эколого-паразитологическое направление развивала школа В.А. Догеля: велись успешные исследования по изучению сроков развития и выживаемости яиц гельминтов в окружающей среде; изучалось значение и роль предметов обихода внутри детских помещений в эпидемиологии энтеробиоза и гименолепидоза, обсемененности водоемов и сточных вод яйцами гельминтов [16, 17, 67, 128].

В работах Л.В. Громашевского (1930) впервые была дана критическая оценка полей орошения как одного из способов очистки сточных вод населенных пунктов с санитарно-гельминтологической точки зрения [14, 67, 128].

Плановая разработка проблем санитарной гельминтологии была начата в 1930-х годах по предложению академика К.И. Скрябина, его ученицей З.Г.Васильковой.

Во Всесоюзном тропическом институте Наркомздрава РСФСР была организована санитарно-гельминтологическая лаборатория. Результаты исследований по санитарной гельминтологии с 1930 по 1955 гг. были обобщены 3.Г.Васильковой в монографиях «Основы санитарной гельминтологии» (1950) и «Методы гельминтологических исследований» (1955), которыми до сих пор руководствуются паразитологи и эпидемиологи нашей страны [11, 20].

Анализ и обобщение основных результатов исследований по санитарной гельминтологии широко представлены в работе В.А.Гефтер «Изучение проблем медико-санитарной гельминтологии» [14, 118, 128].

В 80-х годах прошлого столетия был сформулирован самостоятельный раздел науки о современной популяционной паразитологии - «санитарная паразитология», основными задачами которой являлось установление закономерностей формирования, функционирования и трансформации паразитарных систем в условиях усиливающейся антропогенной нагрузки на окружающую среду; оценке роли эколого-биологических факторов в эпидемическом процессе паразитарных болезней [117, 118, 119, 120, 121].

Принципиально отличительной особенностью этого периода явилось развитие теоретических, фундаментальных исследований, изучение общих закономерностей взаимодействия организма с факторами окружающей среды, поиск новых информативных показателей и критериев для научно обоснованного регламентирования качества объектов окружающей среды в целях профилактики паразитарных болезней [116, 122, 123, 124].

Н.А.Романенко предложил концепцию критериальной оценки значимости фактического гельминтологического загрязнения окружающей среды на основе взаимосвязи его количественной характеристики с

заболеваемостью населения, что способствовало развитию методологии оценки паразитологического загрязнения [107, 108, 111, 112].

Выдающиеся работы Г.А.Котельникова были посвящены изучению биологического загрязнения окружающей среды и разработке современных методов исследования почвы, овощей, фруктов, ягод, беспозвоночных и позвоночных животных, как промежуточных и резервуарных хозяев возбудителей гельминтозов [7, 9, 11, 25].

Научное наследие Г.А.Котельникова обобщено в монографиях «Гельминтологические исследования животных и окружающей среды» (1984) и «Гельминтологические исследования окружающей среды» (1991), которые до настоящего времени являются настольным руководством не только у ветеринарных, но и у медицинских гельминтологов [14, 16, 88, 128].

Фундаментальные и прикладные исследования в этой области были направлены на изучение роли почвы, сточных вод и их осадков, стоков животноводческих ферм и комплексов, нечистот, твердых бытовых отходов в передаче возбудителей кишечных протозоозов [17, 19, 113].

Крупным вкладом в науку о простейших организмах в описании их морфологии, цитологии, физиологии, размножении и жизненного цикла развития, изменчивости и видообразовании, в вопросы медицинской и ветеринарной протозоологии и зоогеографического распространения Protozoa явились работы В.А.Догеля и его последователей [1, 2, 93].

Изучение патогенного значения многих паразитических Protozoa для человека, домашних и промысловых животных явилось стимулом к развитию протистологии, к изучению эпидемий и эпизоотий и к выработке мер борьбы с ними [16, 28].

Современное состояние санитарной паразитологии тесно связано с социально-экономическими преобразованиями общества. Обеспеченность питьевой водой населения является одним из показателей экономического благополучия, а развитие сети централизованных систем водоснабжения и водоотведения является стратегическим курсом стран [9, 110, 109 ].

Требования к безопасности водопотребления остается важной государственной задачей, которая обеспечивается законодательными актами [9, 10, 11, 104, 105].

Последние годы прошлого столетия были отмечены новым витком развития паразитологической науки, определившим курс на разработку критериев риска и биологической безопасности окружающей среды. Этот период характеризуется крупными водными вспышками криптоспоридиоза в более чем 17 штатах США [176, 183].

Вспышка острой кишечной инфекции в Милуоки (США, 1993 г.) с числом пострадавших более 400 тыс. человек, в т.ч. 54 - со смертельным исходом, обратила внимание общественного здравоохранения не только на проблемы санитарии и гигиены водоснабжения населенных пунктов, но и впервые - на паразитарную природу вспышки, вызванной возбудителями криптоспоридиоза [37, 150, 153, 154].

D.Maklaklin сообщал о 8 водных вспышках криптоспоридиоза, связанных с водой плавательных бассейнов [15, 33, 36]. T.Craun (1984) доказал ведущую роль водоснабжения в качестве передаточного звена в групповых и спорадических заболеваниях криптоспоридиозом и лямблиозом населения [155, 156, 157].

Несмотря на фрагментарность сведений [1, 3, 76, 77, 126, 127, 131, 132, 133], результаты зарубежных экспериментальных исследований подтверждают значение биологических особенностей цист простейших родов Lamblia (Giardia) и Cryptosporidium в формировании водного пути передачи вызываемых заболеваний и актуальность контроля их наличия в воде, а именно:

1) повсеместная распространенность;

2) широкий видовой спектр млекопитающих хозяев;

3) разные источники загрязнения водоемов возбудителями;

4) высокая инвазивность и низкая заражающая доза;

5) микроскопические размеры цист (10х12 мкм) и ооцист (4-6 мкм), позволяющие преодолеть барьеры при фильтровании;

6) длительность выживания в водной среде, особенно при низких температурах (до трех месяцев при 4-8°С);

7) высокая устойчивость к регламентным технологиям дезинфекции при питьевой водоподготовке.

Роль пищевых продуктов в эпидемической цепи факторов передачи также определяется степенью их контаминации возбудителями лямблиоза и криптоспоридиоза, связанной с нарушениями технологических условий приготовления, транспортировки, хранения и их реализации населению [4, 5, 6, 7, 13, 20, 23].

Среди пищевых продуктов важная роль принадлежит термически необработанному молоку и молочным продуктам. Т.В. Романова с соавт. наблюдали вспышку криптоспоридиоза, при которой фактором передачи послужил кефир, приготовленный на детской молочной кухне [109, 114, 144].

Агентство по охране здоровья Великобритании в 1995 году подтвердило этиологическую причину пищевой вспышки криптоспоридиоза с числом заболевших более 300 человек в Англии и в Шотландии, связанную с употреблением листьев салата, продаваемых в сети супермаркетов как готовый к употреблению продукт [147, 148, 149, 152].

Криптоспоридии обладают широкой хозяинной специфичностью. Ооцисты Cryptosporidium parvum способны заражать млекопитающих многочисленных видов, включая человека, с последующим симптомокомплексным проявлением болезни у каждого из хозяев [147, 148, 149].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Асланова Мария Михайловна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абулазизов А. И. Паразитозы у амбулаторных и стационарных больных детей / А. И. Абулазизов, С. Б. Абдудпатахова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. № 1. С. 14-16.

2. Авдюхина Т. И. Лямблиоз. Учебное пособие / Т. И. Авдюхина [и др.]. М.: РМАПО, 2003, 32 с.

3. Авенирова А. И. О значении кишечных простейших в патологии желудочно-кишечного тракта у детей раннего возраста: автореф. дис. ... д -ра. мед. наук / А. И. Авенирова. М. 1954. 45 с.

4. Авчинников А. В., Соболь Р. Г., Рахманин Ю. А., и др. // "Вода: экология и технология"ЭКВАТЭК-2000 : Четвертый международный конгресс. Тезисы докладов / Ред. Л.И. Эльпинер. М.: ЗАО "Фирма СИБИКО Интернэшнл", 2000. С. 215-216.

5. Агафонова Е. В. Современные аспекты диагностики лямблиоза у человека / Е. В. Агафонова, Ю. А. Тюрин, Д. А. Долбин, С. Н. Куликов // РМЖ. 2008. Т.16 №17. С. 1120-1123.

6. Агиров А. Х. Безопасность и физиологическая полноценность питьевой воды централизованных систем водоснабжения республики Адыгея / А. Х. Агиров, Е. Г. Тютюнджан, А. Д. Цикуниб // Гигиена и санитария. 2004. № 2. С. 15-17.

7. Акимова Р. Ф. Сравнительное изучение функции ЖКТ методом клинической копрологии у посещающих д/с детей с лямблиями и без них / Р. Ф. Акимова, Е. Н. Смирнова, А. П. Толмазова // Педиатрия. 1978. №1. С. 85.

8. Александрова В. А. Сравнительная характеристика диагностики и лечения гельминтно-протозойных инвазий у детей на современном этапе / В. А. Александрова, В. Е. Одинцева // Лечащий врач. 2010. №. 8. С. 66-70.

9. Алиев А. А. Криптоспоридиоз (диагностика, культивирование С. parvum в клетках культуры тканей, экспресс-оценка препаратов) // : автореф. дис. ... канд. вет. наук / А. А. Алиев. С-Пб., 1993. 18 с.

10. Астафьев Б. А. Экспериментальные модели паразитозов в биологии и медицине / Б. А. Астафьев, Л. С. Яроцкий, М. Н. Лебедева. Отв. ред. И. В. Тарасевич; АН СССР, Всесоюз. о-во гельминтологов. М. Наука. 1989. 279 с. ил.

11. Бабурина Л. В. Актуальные проблемы лямблиоза в детском возрасте: автореф. дис. ... канд. мед. наук / Л. В. Бабурина. Пермь. 2005. 23 с.

12. Бадулина Л. Ю. Аккредитация испытательных лабораторий Роспотребнадзора на соответствие МС ISO 17025:2005.Реализация 2008-2012 / Л. Ю. Бадулина, В. Г. Сенникова // Здоровье населения и среда обитания. 2012. № 10 (235). С. 15-17.

13. Балашева Т. Ф. Клиника, функциональные и морфологические изменения слизистой оболочки желудка при лямблиозе у детей / Т. Ф. Балашева // Педиатрия. 1978. № 6. С. 90-94.

14. Баранова А. М. Корифеи отечественной медицинской паразитологии /

A. М. Баранова [и др] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2014. №2. С. 53-55

15. Бейер Т. В. Диагностика, клиника, лечение и профилактика криптоспоридиоза: методические рекомендации / Т. В. Бейер [и др.]. Л.: НИИЭМ им. Пастера. 1987. 24 с.

16. Бейер Т. В. Обнаружение криптоспоридиоза человека в Ленинграде / Т.

B. Бейер [и др.] // Медицинская паразитология. 1990. № 2. С. 45-48.

17. Беэр С. А. Паразитизм // Природа. 1996. № 12. С. 19-26.

18. Бейер Т. В. Структура ооцист и вопросы систематики кокцидий / Т. В. Бейер, Н. В. Сидоренко, Н. В. Свежова // Цитология. 2001. Т. 43 N 11. С. 10111012.

19. Бейер Т. В. Электронно-микроскопические исследования криптоспоридий. 2. Стадии гаметогенеза и спорогонии криптоспоридий

Cryptosporidium parvum / Т. В. Бейер, Н. В. Сидоренко // Цитология. 1990. Т. 32 №6. С. 592-598.

20. Бодня Е. И. Роль паразитарных инвазий в развитии патологии органов пищеварения / Е. И. Бодня // Сучасна гастроентеролог 1я. 2006. № 3 (29). С. 3743.

21. Борзунов В. М. Протозойные инвазии и гельминтозы человека. Учебное пособие / В. М. Борзунов, В. К. Веревщиков, Г. И. Донцов. Екатеринбург: Уральская государственная медицинская академия. 2004. 175 с.

22. Бородина О. Н. Обнаружение возбудителя криптоспоридиоза у человека и животных в Туркменистане / О. Н. Бородина, Э. В. Жукова, 3. Ф. Кравец // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1994. №1. С.8 -11.

23. Бочкарев И. И. Взаимоотношения в системе паразит-хозяин при криптоспоридиозе / И. И. Бочкарев, Т. А. Шибалова // Тезисы докладов III конгресса международной ассоциации морфологов. Морфология. СПб. 1996. №2. С. 38-39.

24. Белова Е. Г. Методическое обеспечение санитарно-паразитологического контроля качества природной и питьевой воды / Е. Г. Белова, А. А. Бунаков, Н. А. Самофалова, Г. И. Новосильцев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2003. №4. С. 15-17.

25. Беляков В. Д. Методические основы медико-экологического районирования / В. Д. Беляков // Региональные проблемы здоровья населения России. М. ВИНИТИ. 1993. С. 6-21.

26. Везирова С. Р. Влияние процессов гиперурбанизации на эпидемиологию лямблиоза, рационализация диагностики и профилактики его в городских условиях : автореф. дис. ... канд. биол. наук / С. Р. Везирова. Баку, 2000. 26 с.

27. Волжанин В. М. Криптоспоридиоз // Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы): Руководство для врачей / В. М. Сергиев. Под ред.

В.П.Сергиева, Ю.В. Лобзина, С.С. Козлова. СПб: ООО «Издательство Фолиант». 2006. С 136-141.

28. Гардеробова Л. В. Эпидемиологическая и клинико-лабораторная характеристика вирусных гепатитов в сочетании с лямблиозом у детей : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.30 / Л. В. Гардеробова. С.-Петерб. гос. мед. акад. им. И.И. Мечникова. СПб. 2006. 21 с.

29. Гасанова Т. А. О некоторых особенностях лабораторной диагностики протозоозов в современных условиях / Т. А. Гасанова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. №1. С.20-24.

30. Горохов В. В. Современная эпизоотическая ситуация по основным гельминтозам животных в России / В. В. Горохов, А. В. Успенский // Матер, сов. «Современные проблемы эпиднадзора за паразитозами». М. 2002. С. 43 -48.

31. Гребенев А. Л. Болезни кишечника: (Современ. достижения в диагностике и терапии) / А. Л. Гребенев, Л. П. Мягкова. М. Медицина. 1994. 396, [1] с.

32. Гузеева Т. М. Состояние заболеваемости паразитарными болезнями в Российской Федерации и задачи в условиях реорганизации службы / Т. М. Гузеева // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2008. № 1. С. 3-11.

33. Гузеева Т. М. Состояние диагностики паразитарных заболеваний в Российской Федерации / Т. М. Гузеева, В. П. Сергиев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2011. №4. С.43-45.

34. Гордеева Л. М. Инфекционные и паразитарные болезни: экспресс-информация / Л. М. Гордеева, В. Г. Фирсов. М. 1991. Вып. 10. С. 1-8.

35. Дайтер А. Б. Паразитарные болезни: научное издание / А. Б. Дайтер, А. Ф. Тумка. Л.: Медицина. Ленингр. отд-ние. 1980. 304 с.

36. Дедкова Л. М. Выявление антител к антигенам трофозоитов лямблий иммуноферментным методом: научное издание / Л. М. Дедкова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1999. N 1. С. 46-48 .

37. Дедкова Л.М. Лямблиоз: патогенез и диагностика / Л. М. Дедкова [и др.] // Медицинская паразитология. 1999. № 1. С. 46-48.

38. Денисов М. Ю. Лямблиоз у детей: клиника, диагностика и реабилитация. Учебное пособие / М. Ю. Денисов. Новосибирск. 2007. 30 с.

39. Дмитриева Е. Л. Мероприятия по снижению риска загрязнения окружающей среды ооцистами криптоспоридий / Е. Л. Дмитриева, Н. С. Малышева, Н. А. Плехова, Н. А. Самофалова // Интеграция медицины и образования: Материалы регион. науч. конф. Курск. 2006. С. 21-22.

40. Дмитриева Л. Н. Острые кишечные диарейные заболевания: алгоритм лечения / Л. Н. Дмитриева // РМЖ. 2008. Т. 16. С. 529.

41. Догель В. А. Общая протистология / В. А. Догель. 3-е изд. М.: Советская наука. 1951. 603 с.

42. Дрынов И. Д. Влияние преобразования природы на распространенность паразитарных и инфекционных болезней / И. Д. Дрынов, В. П. Сергиев, Н. А. Малышев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1999. №3. С. 3-6.

43. Дубровский Ю. А. Эпидемиологическое значение почвы и водоемов в природных очагах криптоспоридиоза / Ю. А. Дубровский, Л. П. Емельянова // Микробиология. 2003. № 4. С. 100-103.

44. Емельянова Л. П. Распространенность криптоспоридий в естественных экосистемах / Л. П. Емельянова, С. В. Лисина, Ю. А. Дубровский, В. Ю. Дубровский // Медицинская паразитология. 1999. № 3. С. 14-18.

45. Ермакова Л. А. Оценка эффективности многократного копрологического исследования для диагностики лямблиоза / Л. А. Ермакова, Н. Ю. Пшеничная, Ю. М. Амбалов, Е. А. Черникова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. № 4. С.32-34.

46. Ерошина О. А. МСИ: международная практика / О. А. Ерошина // Контроль качества продукции. 2008. №7. С. 30-31.

47. Зароченцев М. В. Об организации внешнего контроля лабораторных испытаний путем участия в МСИ лабораторий центров гигиены и

эпидемиологии в субъектах Российской Федерации в 2011-2012гг. / М. В. Зароченцев, В. Г. Сенникова, Л. Ю. Бадулина // Здоровье населения и среда обитания. 2012. № 10 (235). С. 11-13.

48. Ириков О. А. Оценка информативности методов лабораторной диагностики лямблийной инфекции / О. А. Ириков // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2008. № 3. С. 22-25.

49. Ириков О. А. Зараженность простейшими кишечника детских коллективов г. Москвы / О. А. Ириков, Т. В. Продеус // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. № 1. С. 11-13.

50. Исследование почвы на яйца гельминтов. Метод Васильковой и Гефтер (1955) // Методы санитарно-паразитологических исследований: МУК 4.2.266110. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011. 63 с.

51. Кадочникова Г. В. Новые возможности диагностики кишечных гельминтозов у детей / Г. В. Кадочникова, Н. Б. Мерзлова, Н. В. Колесник // Труды III Международной научно-профилактической конференции «Эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика паразитарных заболеваний человека». Витебск. 2002. С. 47-48.

52. Камышников B. C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике / B.C. Камышников. Минск: Беларусь, 2000. Т. 1. С.495.

53. Карташев В. В. Криптоспоридиоз у больных ВИЧ-инфекцией в Ростове-на-Дону / В. В. Карташев [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2008. №3. С. 19-21.

54. Козюк П. М. Патогенез, клиника, диагностика, лечение лямблиоза и его микст-формы с дизентерией: автореф. дис. ... докт. мед. наук / П. М. Козюк. Москва. 1989. 42 с.

55. Комаров Ф. И. Современное состояние вопроса о патогенности лямблий / Ф. И. Комаров, В. К. Илинич // Военно -медицинский журнал. 1974. № 10. С. 40-44.

56. Константинова Т. Н. Паразитарные болезни в поликлинической практике / Т. Н. Константинова, Т. И. Авдюхина, М. А. Малькута, Т. М. Гузеева // Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период: Тезисы докладов всероссийской конференции. Ростов-на-Дону. 2011. С.249-254.

57. Коровина Н. А. Лямблиоз у детей: проблема диагностики и выбора / Н. А. Коровина [и др.] // Приложение РМЖ «Болезни Органов Пищеварения» Т. 6. №2. 2004. С. 65-67.

58. Кочергина Е. А. Особенности лечения паразитарных заболеваний / Е. А. Кочергина, И. П. Корюкина, Е. В. Зубов // РМЖ. 2004. №13. С. 815.

59. Крамарь Л. В. Распространенность лямблиоза среди жителей Волгограда / Л. В. Крамарь, Е. В. Резников, О. Г. Крамарь // Медицинская паразитология. 2003. №4. С. 38-39.

60. Красный З. Б. Характеристика источника лямблиозной инвазии и его роль в эпидемическом процессе: автореф. дис. ... канд. мед. наук / З. Б. Красный. М., 1990. 27 с.

61. Куропатенко М. В. Распространенность энтеробиоза, аскаридоза и лямблиоза у детей, больных бронхиальной астмой / М. В. Куропатенко, Н. А. Безушкина, Л. А. Желенина // Аллергология. 2002. №4. С. 38-41.

62. Кучеря Т. В. Вспышка лямблиоза в детском дошкольном учреждении г. Перми / Т. В. Кучеря [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2002. № 2. С. 51-53.

63. Лавдовская М. В. Современные представления об эпидемиологии криптоспоридиоза / М. В. Лавдовская, А. Я. Лысенко // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1993. № 8. С. 49-53.

64. Лавдовская М. В. Система «хозяин — условно-патогенные простейшие». Влияние ионизирующей радиации на распространение криптоспоридиоза и пневмоцистоза / М. В. Лавдовская [ и др.] // Паразитология. 1996. Т. 30/ № 2. С. 153-158.

65. Ларин В. Е. Состояние методического обеспечения санитарно-паразитологического контроля качества воды в России / В. Е. Ларин // ЭКВАТЕК-2002: Материалы конгресса. Под общ. ред. проф. Л. И. Эльпинера. М. 2002. С. 712.

66. Ларин В. Е. Современные аспекты биологии, таксономии, эпидемиологии и методов обнаружения простейших Giardia 1атЬНа в питьевой воде / В. Е. Ларин // Здоровье населения и среда обитания: Информ. бюллетень. 2001. №8 (101). С. 19-23.

67. Лейкина Е. С. Типы очагов основных гельминтозов в СССР / Е. С. Лейкина // Медицинская паразитология. 1984. №2. С. 51-57.

68. Лейкина Е. С Эпидемиологические основы борьбы с гельминтозами / Е. С. Лейкина // Медицинская паразитология. 1985г. № 2. С. 3-6.

69. Лучшев В. И. Гельминтозы человека / В. И. Лучшев, В. И. Лебедев. Краснодар: Советская Кубань. 2000. 124 с.

70. Лысенко А. Я. Клиническая паразитология / Лысенко А. Я., Владимирова М. Г., Кондрашин А. В. ВОЗ, Женева. 2002. 752 с.

71. Лысенко А. Я. Лабораторные методы диагностики паразитарных болезней» / А. Я. Лысенко, А. А. Красильников. М. 1999. 58 с.

72. Лысенко А. Я Своеобразие эпидемиологии паразитарных болезней / А. Я. Лысенко // Медицинская паразитоогия. 1994. № 3. С. 3-8.

73. Малышева Н. С. Почва как фактор высокого риска заражения населения геогельминтозами на территории Курской области / Н. С. Малышева // Современные тенденции в современном образовании: сборник научных трудов в честь 70-летия Курского государственного университета. Курск. 2004. С. 87-90.

74. Малышева Н. С. Санитарно-гельминтологическая характеристика осадков сточных вод и методов их дезинвазин / Н. С. Малышева, А. Н. Борзосеков, С. С. Пехова // Научные труды Федерального научного Центра гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. Вып. №15. Липецк. 2005. С. 421-425.

75. Малов В. А. Острые инфекционные диарейные заболевания: вопросы терапии / В. А. Малов // Лечащий врач. 2007. №5. С. 18.

76. Мерзлова Н. Б. Совершенствование методов диагностики лямблиоза у детей / Н. Б. Мерзлова, Т. Л. Залипаева, Н. И. Тумольская // Актуальные вопросы диагностики и лечения. Вып. 2. Казань. 1998. С. 101.

77. Мерзлова Н. Б. Распространенность и клинико-лабораторная характеристика лямблиозной инвазии в Пермском регионе / Н. Б. Мерзлова, Н. А. Романенко, Л. В. Бабурина, В. Н. Фукалова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2004. № 2. С. 24-27.

78. Методы санитарно-паразитологического анализа воды: Методические указания МУК 4.2.2314-08 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 03.03.2004). М. 2008. 58 с.

79. Международные медико-санитарные правила и реализация глобальной стратегии борьбы с инфекционными болезнями в государствах-участниках СНГ // Материалы VIII Межгосударственной научно -практической конференции государств-участников СНГ / ред.: В. В. Кутырев. Саратов, 2007. 345 с.

80. Новожилов К. А. Актуальность и совершенствование санитарно-гельминтологических методов исследования почвы / К. А. Новожилов, Е. А. Черникова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. М. 2014. №1. С. 58-60.

81. Об использовании методологии оценки риска для управления качеством окружающей среды и здоровья населения в Российской Федерации: постановление Главного Государственного санитарного врача РФ и Главного Государственного инспектора по охране природы от 10 ноября 1997 г. NN 25, 03-19/24-3483.

82. Об усилении мероприятий по предупреждению паразитарных заболеваний и элиминации малярии в Российской Федерации: постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 25.12.2007 № 94. М. 2007.

83. Об утверждении статистического инструментария для организации Роспотребнадзором федерального статистического наблюдения за заболеваемостью населения инфекционными и паразитарными болезнями (с изм. и доп., вступающими в силу с отчета за 2011 год): приказ Росстата от 26.12.2008 N 326 (ред. от 31.12.2010).

84. Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий: ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009. Введ. 2012-01-01. М. Стандартинформ. 2011.

85. Онищенко Г. Г. О мерах по усилению профилактики паразитарных болезней в России / Г. Г. Онищенко // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2003. № 3. С. 3-7

86. Осипова С. О. Иммунологические аспекты лямблиоза (обзор литературы) / С. О. Осипова // Медицинская паразитология. 1982. № 5. С. 57 -62.

87. О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в

2010 году: Государственный доклад. М. 2011. 184 с.

88. О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в

2011 году: Государственный доклад. М. 2012. 301 с.

89. О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в

2012 году: Государственный доклад. М. 2013. 211 с.

90. О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в

2013 году: Государственный доклад. М. 2014. 183 с.

91. О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в

2014 году: Государственный доклад. 2015. 402 с.

92. Оценка соответствия. Общие требования к программам проверок квалификаций лабораторий: ИСО/МЕК 17043: 2010. Введ. 2010-02-01.

93. Павлова Е. А. Лабораторная диагностика паразитарных болезней. Часть 1. Кишечные протозоозы / Е. А. Павлова. М., 1977г. 234 с.

94. Пайков В. Л. Распространенность, возрастная характеристика лямблиоза у детей и подростков Санкт-Петербурга и опыт

противолямблиозной терапии тибералом / В. Л. Пайков, Н. В. Гончар, Т. Н. Микуева, М. М. Батырев // Педиатрия. 1999. №2. С. 88-90.

95. Панаева В. И. Роль межлабораторных сравнительных испытаний в обеспечении качества аналитических измерений / В. И. Панаева // Стандартные образцы. №3. 2009. С.7-14.

96. Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов: методические указания МУК 4.2.735-99 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 25 февраля 1999 г.). М. 1999. 73 с.

97. Плехова Н. А. Совершенствование методов отбора и обработки проб природной и питьевой воды в санитарно -паразитолоческих исследованиях / Н.

A. Плехова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. М. 2008. № 1. С. 48-50.

98. Погорельчук Т. Я. Паразитарные болезни в структуре острых кишечных заболеваний / Т. Я. Погорельчук, В. Л. Олейник, Н. С. Бешко // Медицинская паразитология. 2003. №1. С. 23-25.

99. Подъяпольская В. П. (под редакцией) Методические материалы по оздоровлению населения от гельминтозов / В. П. Подъяпольская. М., 1969. 340 с.

100. Покровский В. И. // Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке / В. И. Покровский, Г. Г. Онищенко, Б. Л. Черкасский. М. Медицина. 2003. 664 с.

101. Покровский В. И. Роль эпидемиологии в сохранении здоровья нации /

B. И. Покровский, Б. Л. Черкасский // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2003. №1. С.4-10.

102. Профилактика лямблиоза: методические указания МУ 3.2.1882-04 (утв. главным государственным санитарным врачом РФ 03.03.2004). М. 62 с.

103. Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации: санитарно-эпидемиологические правила и нормативы СанПиН 3.2.1333-03. М. 2003. 69 с.

104. Рахманин Ю. А. Итоги и перспективы научных исследований по

проблеме экологии человека и гигиены окружающей среды. Материалы, посвященные 70-летию образования НИИЭЧиГОС им. А. Н.Сысина РАМН. М. ГУ НИИ ЭЧиГОС им. А. Н.Сысина РАМН. 2001. 156 с.

105. Рахманин Ю. А. Состояние и актуализация задач по совершенствованию научно-методологических и нормативно-правовых основ в области экологии человека и гигиены окружающей среды / Ю. А. Рахманин, О. О. Синицына // Гигиена и санитария. 2013. №5. С.4-10.

106. Романенко Н. А. Вода и кишечные паразитозы / Н. А. Романенко, Е. Г. Белова, Л. В. Бабурина и др. // Медицинская паразитология. 2004. № 3. С. 3.

107. Романенко Н.А. Надзор за антропогенным воздействием на окружающую среду при кишечных паразитах / Н. А. Романенко, Г. И. Новосельцев // Медицинская паразитология. 1992. № 2. С. 5-7.

108. Романенко Н. А. Новые подходы к профилактике паразитарных болезней человека / Н. А. Романенко Медицинская паразитоогия. 1993. № 4. С. 24-26.

109. Романенко Н. А. О необходимости включения ооцист криптоспоридий в число показателей эпидемической безопасности питьевой воды / Н. А. Романенко, Ю. А. Рахманин, В. П. Сергиев // Гигиена и санитария. 2001. № 1. С. 18-19.

110. Романенко ^ A. Проблемные территории и паразитарные болезни / Н. А. Романенко, В. В. Евдокимов. М. 2004г. 314 с.

111. Романенко Н. А. Санитарная паразитология / Н. А. Романенко, И. К. Падченко, Н. В. Чебышев. М.: Медицина, 2000. 320 с.

112. Романенко Н. А. Совершенствование системы санэпиднадзора -необходимое условие повышения эффективности профилактических мероприятий при паразитозах / Н. А. Романенко , Т. А. Семенова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2000. № 4. С. 3-8.

113. Романенко Н. А. Состояние и перспективы улучшения санитарно-паразитологического контроля качества воды / Н. А. Романенко, Ю. В.

Комисарова, Н. А. Плехова // Здоровье нации - основа процветания России: материалы III Всероссийского форума. Т. 2. -Ч 1. М. 2007. С 228-229.

114. Ройтман В. А. Паразитизм как форма симбиотических отношений / В.

A. Ройтман, С. А. Беэр. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2008. 313 с.

115. Семерджян С. В. Изучение некоторых вопросов биологии лямблий и эпидемиологии лямблиоза: автореф. дис. ... канд. мед. наук / С. В. Семерджян. Ереван, 1982. 24 с.

116. Сергиев В. П. Атлас клинической паразитологии и тропической медицины: учебное пособие для системы послевузовского профессионального образования врачей / В. П. Сергиев. М.: Авторская акад. : Товарищество науч. изд. КМК, 2010. 283 с.

117. Сергиев В. П. Значение паразитарных болезней в патологии человека /

B. П. Сергиев, Н. А. Малышев, И. Д. Дрынов // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1999. № 4. С. 4-9.

118. Сергиев В. П. Инфекционные болезни цивилизации. Прошлое, настоящее, будущее / В. П. Сергиев, И. Д. Дрынов, Н. А. Малышев. М., 2000г. 207 с.

119. Сергиев В. П. «Новые и возвращающиеся» гельминтозы как потенциальный фактор социально-эпидемических осложнений в России / Сергиев В. П. [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2005. №4. С. 6-8.

120. Сергиев В. П. Паразитарные болезни в СССР и задачи по их профилактике / В. П. Сергиев, М. И. Наркевич, Г. Г. Онищенко // Медицинская паразитология. 1989. №5.С. 3-10.

121. Сергиев В. П. Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы): Руководство для врачей / В. П. Сергиев, Ю. В. Лобзин, С. С. Козлов. СПБ. Фолиант. 2006. 586 с.

122. Сергиев В. П. Распространенность паразитарных болезней и их профилактика в России / В. П. Сергиев, М. Н. Лебедева // Меицинская паразитология. 1997. №3. С. 5-9.

123. Сергиев В. П. Регистрация и истинная распространенность паразитарных болезней / В. П. Сергиев // Медицинская паразитология. 1991г. №2. С.3-6.

124. Сергиев В. П. Современные проблемы в сфере паразитарных болезней и их терапии / В. П. Сергиев, К. Ю. Кузнецова // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2014. N 1. С.12-16.

125. Системы менеджмента качества. Требования: ISO 9001:2008. Введ. 2008-12-18. М. Стандартинформ. 156 с.

126. Скрипова Л. В. Влияние экологических факторов на паразитарные болезни протозойной этиологии / Л. В. Скрипова, H. A. Романенко, Г. И. Новосильцев Санитарно-паразитологическая характеристика сточных вод и животноводческих стоков, используемых на орошение в Республике Беларусь // Сб. научн. трудов. Барнаул. 1995г. С. 334-340.

127. Скрипова Л. В. Санитарно-паразитологическая характеристика сточных вод и животноводческих стоков, используемых на орошение в Республике Беларусь / Л. В. Скрипова, H. A. Романенко, Г. И. Новосильцев // Сб. научн. трудов. Барнаул. 1995г. С. 334-340.

128. Скрябин К. И. Строительство гельминтологической науки и практики в СССР [Текст]: [В 4 ч.] / К. И. Скрябин, Н. П. Шихобалова, А. М. Петров, М. М. Левашов; Акад. наук СССР. Гельминтол. лаборатория. М. Изд-во Акад. наук СССР. 1962. Т. 1. 296 с.

129. Соловьев М. М. Заболевания, вызываемые простейшими кишечника / М. М. Соловьев // Медицинская паразитология. 1969. № 3. С. 364.

130. Степанов А. В. Лямблиозная инвазия: Учеб.-метод. рекомендации / А. В. Степанов. Смоленск. 2001. 20 с.

131. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа: ГОСТ Р. 53079.4-2008. Введ. 2008-12-18. М. Стандартинформ. 2009. 66 с.

132. Тихомирова О. В. Новые подходы к терапии кишечных инфекций условно-патогенной этиологии у детей / О. В. Тихомирова // Новое в диагностике и лечении актуальных хронических инфекций: материалы научн. конф. СПб.: В .Мед. А. 2003. С. 11.

133. Тумольская Н. И. Роль лямблий в патологии человека / Н. И. Тумольская / Врач. 2000. № 8.С. 23-25.

134. Туперцева Г. Т. Сравнительная оценка эффективности современных методов лабораторной диагностики лямблиоза у детей с хроническими болезнями органов пищеварения / Туперцева Г. Т. [и др.] // Актуальные проблемы абдоминальной патологии у детей: сб. материалов XV конгресса детских гастроэнтерологов. М. 2008. С. 229-232.

135. Тураходжаева М. Г. Клинико-морфологическая характеристика поражения желудка при лямблиозе: автореф. дис. ... канд. мед. наук / М. Г. Тураходжаева. Москва. 1980. 21 с.

136. Успенский А. В. Разработка и внедрение технологических процессов диагностики и профилактики гельминтозов: автореф. дисс. ... д-ра ветер. наук / А. В. Успенский. М.,1986. 21 с.

137. Чебышев Н. В. Атлас по зоопаразитологии : учебное пособие / Н. В. Чебышев. М.: ММА им. И. М. Сеченова, РУДН, 1997. 171 с.

138. Черникова Е. А. Руководство и атлас по паразитарным болезням человека. Санкт-Петербург, 2005. - www.infectology.ru. / Е. А. Черникова, Е. Н. Морозов // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2006. № 2. С. 62.

139. Чернышенко А. И. Универсальные методы паразитологической лабораторной диагностики кишечных гельминтозов и протозоозов / А. И. Чернышенко, Г. И. Новосельцев, Л. М. Гордеева // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. № 10. С. 125.

140. Чибураев В. И. О внедрении методологии оценки риска в России / В. И. Чибураев, Е. А. Селезнева // Гигиена и санитария. 2003. №6. С. 17 -21.

141. Чобанов Р. Э. Саморегуляция эпидемического процесса при гельминтозах и влияние на нее интенсивных миграционных процессов / Р. Э. Чобанов, И. А. Агаев, Х. Н. Халафли // Химия, биология, медицина. 2000. №3. С. 95-99.

142. Чобанов Р. Э. Эпидемиологические закономерности циркуляции лямблиоза среди городского населения / Р. Э. Чобанов, И. А. Агаев, С. Р. Везирова // Химия, биология, медицина. 2001. № 3. С. 25-29.

143. Шестакова В. Н. Особенности клиники, течения и лечения хронического гастродуоденита у детей в зависимости от фоновых заболеваний (лямблиоз, аскаридоз, туберкулез): автореф. дис. ... канд. мед. наук / В. Н. Шестакова. Смоленск. 1985. 21 с.

144. Шуйкина Э. Е. Аспекты клинической и эпидемиологической иммунологиипри паразитарных болезнях / Э. Е. Шуйкина // Медицинская паразитология. 1989. № 5. С. 87-93.

145. Элынтейн Н. В. Лямблиоз как причина аллергии / Н. В. Элынтейн // Врачебное дело. 1962. № 9. С. 146-148.

146. Эпидемиологический надзор за паразитарными болезнями: Методические указания МУ 3.2.1756-03 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 28.03.2003). М., 2005. 83 с.

147. Anderson R.M., May R.M. Infectious Diseases of Humans. - Oxford: Oxford University Press, 2002. -Р. 234.

148. Anderson, В. C. Prevalence of Cryptosporidium muris-like oocysts among cattle populations of the United States: preliminary report // J. Protozool. -1991b. -Vol. 38. -P.14S-15S.

149. Anderson В. С. Experimental infection in mice of Cryptosporidium muris isolated from a camel //J. Protozool. -1991a. Vol. 38. -P.16S-17S.

150. Armon R., Gold D., Brodsky M., Oron G. Surface and subsurface irrigation with effluents of different qualities and presence of Cryptosporidium oocysts in soil and on crops // Water Sci Technol. 2002. - Vol.46, N 3. -P.115-122.

151. Aiello A., Xiao L., Limor J. Microsatellite analysis of the human and bovine genotypes of Cryptosporidium parvum // J. Eukaryot. Microbiol. -1999. Vol. 46. - P. 46S-47.

152. Alves M., Matos O, Antunes F. Microsatellite analysis of Cryptosporidium hominis and C. parvum in Portugal: a preliminary study // J. Eukaryot. Microbiol. 2003. Vol.50, Suppl. - P. 529-530.

153. Amadi B., Mwiya M., Musuku J., Watuka A., Sianongo S., Ayoub A., Kelly P. Effect of nitazoxanide on morbidity and mortality in Zambian children with cryptsporidiosis: a randomised controlled trial // Lancet. 2002. - Vol.360, N 9343. -P.1375-1380.

154. Amar C.F., Chalmers R.M., Elwin K., Tynan P., McLauchlin J. Blinded evaluation of DNA extraction and genotyping of stained Cryptosporidium on glass slides // Lett Appl Microbiol. 2002. - Vol. 35. - P. 486-488.

155. Amirkhanian Y.A., Kelly J.A., McAuliffe T.L. Psychosocial needs, mental health, and HIV transmission risk behavior among people living with HIV/AIDS in St Petersburg, Russia // AIDS. 2003. - Vol.17, N 16. - P.2367-2374.

156. Ananthasubramanian M., Ananthan S., Vennila R., Bhanu S. Cryptosporidium in AIDS patients in south India: a laboratory investigation // J. Commun Dis. -1997. Vol.29, N 1. - P.29-33.

157. Angus K. W., Hutchison G. , and Munro H. M. Infectivity of a strain of Cryptosporidium found in the guinea-pig (Cavia porcellus) for guinea-pigs, mice and lambs//J. Сотр. Pathol. 1985. - Vol. 95.-P.151-165.

158. Arikan S., Ergtiven S., Akyon Y., Gilnalp A. Cryptosporidiosis in immunocompromised patients in a Turkish university hospital // Acta Microbiol Immunol Hung. 1999. - Vol.46, N 1. -P.33-40.

159. Arrowood M.J., Sterling C.R. Comparison of conventional staining methods and monoclonal antibody-based methods for Cryptosporidium oocyst detection // J. Clin. Microbiol. 1989. - Vol.27, N 7. - P. 1490-1495.

160. Awad-el-Kariem F. M., H. A. Robinson D. A. Dyson D., Evans S., Wright M. T. Fox, and V. McDonald Differentiation between human and animal strains of

Cryptosporidium parvum using isoenzyme typing // Parasitology. 1995. — Vol. 110. -P.129-132.

161. Awad-el-Kariem., F. M. Significant parity of different phenotypic and genotypic markers between human and animal strains of Cryptosporidium parvum // J. Eukaryot. Microbiol. -1996. Vol. 43. - P.70S.

162. Branca F., Burkholder T. Helth and nutrition survey of internally displanced and resident population of Azerbaijan. Fourth regional congress of pediatric societies of Turkish speaking countries with international participation. - Baku, Azerbaijan, 1997. - P. 126-128.

163. Barett S., Hoel M. Optimal Disease Eradication. Health Economics Reseach programme at the University of Oslo. 2003.

164. Brandonisio O., Maggi P., Panaro M., Bramante L., Di Coste A, Angarano G. Prevalence of cryptosporidiosis in HIV-infected patients with diarrhoeal illness // Eur J. Epidemiol. 1993. - Vol.9, N 2. - P.190-194.

165. Babiker A., Darbyshire J., Pezzotti P. et al. Antiparasitic agent atovaquone // Antimicrob. Agents Chemother. -2002. Vol. 46. - P. 1163-1173.

166. Bandoni S.M., and D. W. Duszynski A plea for improved presentation of type material for coccidian // J. Parasitol. 1988. - Vol. 74. - P.519-523.

167. Barker I. K., and P. L. Carbonel Cryptosporidium agni sp.n. from lambs, and Cryptosporidium bovis sp.n. from a calf, with observations on the oocyst //Vol.881.-P.16-23.

168. Caccio S.M. Molecular techniques to detect and identify protozoan parasites in the environment // Acta Microbiol Pol. 2003. - Vol. 52. - P. 23-34.

169. Considine R.F., Dixon David R., Drummond Calum I.// Oocysts of Cryptosporidium parvum and modcegand surfaces in agueods solutions: An Atomic force microscope (AFM) study.// Water Res. 2002 - 36, №14. - P. 3421-3428.

170. Craun J. Waterborne outbreaks of Giardiasis. Current Status // Giardia and Giardiasis: Biol. Pathogen. And Epidemiol. New-York, London, 1984.- P. 243-261.

171. Craun J., Gunther P. Waterborne outbreaks of Giardiasis. Current Status "Giardia and Giardiasis: Biol. Pathogen. And Epidemiol" New-York, London. 1984.Vol. 11. - P. 441-453.

172. Clinton M. Trichinosis WEB M.D. professiona 1- 2010. -Jan. 4. P. 1-5.

173. Daniel Palm J. E., Malin E.L. Weiland, William J. Griffiths. Identification of Immunoreactive Proteins during Acute Human Giardiasis // The Journal of Infectious Diseases. 2003. - S.187. -P.1849-1859.

174. Dai Xiaojun, Hozalski Raymond M. Effect of NOM and biofilm on the removal of Cryptosporidium parvum oocysts in rapid filters.// Water Res. 2002. -36, №14.- P. 3523-3532.

175. Furhess B.W., Beach M.J., Roberts J.M.: Giardiasis surveillance-Unated States, 1992-1997.// Mor- Mortal -Wkly -Rep- CDC- Surveill-Summ.-2000.

176. Fayer R., Ungar B.L.P. Cryptosporidium spp. and cryptosporidiosis // Microbiol. Revs. 1998. - Vol. 50. - P. 458 -83.

177. Fiedler H. Zur Verbreitung von Kryptosporidien unter norddeutschen Linderbostanden // Tierarztl. Unisch. 1995. - № 40. -P. 526 -528.

178. Gastrin B., Gustafsson R., Lundin A. Evaluation of bioluminescence assay for the detection bacteriuria.ScandJinfectDis. 1989, 21 №4 - P. 409-419.

179. Jacobsen C.S., Rasmussen O.F. Development and application of a new method to extract bacterial DNA from soil based on separation of bacteria from soil with cation-exchange resin. Appl. Environ. Microbiol. 1992, 58- P 2458-2462.

180. Kociecka W., Kasprzak W., Pawlowski Z., Lisowska M. Epidemiological studies on giardiasis in Poznan Province // Wiad Parazytol. 1987. - 33(6). -P.593-613.

181. Kulakova L., Singer Steven M., Conrad John, Nash Theodore E. Epigenetic mechanisms are involved in the control of Giardia lamblia antigenic variation // Molecular Microbiology. 2006. - 61(6). - P. 1533-1542.

182. Keene W.E., Mcanulty J.M., Hoesly F.C. et al. A swimming-associated outbreak of hemorrhagic colitis caused by Escherichia coli 0157:H7 and Shigella sonnei.N.Eng.J.Med. 1994, 331(9):579-584.

183. Kartashev V., Ambalov Y., Ponomarenko Y., Karanis P. Cryptosporidiosis in humans - clinical presentation and prognosis in HIV patients from Russia II The 15th Japanese-German Symposium on Protozoan Diseases - Obihiro, Japan, 2006 -P. 54-55.

184. Kiouptsi K., Thekisoe O., Inoue N., Kartashev V., Karanis P. Evaluation and application of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of DNA for the detection of Cryptosporidium // The 15th Japanese-German Symposium on Protozoan Diseases - Obihiro, Japan, 2006 - P. 80-81.

185. Lang H., Beckers S.B. Rapid detection of positive blood cultures with bioluminescence assay in comparison to Gram staining. Zbl.Bakteriol.Mikrobiol.Hyg.(A).l 984,25 8(4):464-471.

186. Lau J., Qian K., Wu P.C., Davis G.L. Ribonucleotide vanadyl complexes inhibit polymerase chain reaction. Nucleic Acids Res. 1993, 21: 2777.

187. Lee J.Y., Deininger R.A. Detection of E.coli in beach water within 1 hour using immunomagnetic separation and PCR ATP bioluminescence. Luminescence.2004, 19:31-36.

188. Lewis G-Т. Is electro dermal testing as effective as skin prick tests for diagnosing? A double blind, randomizedblock design study / G.T. Lewis [et al.] // British Journal of Medicine. - 2001. - V. 322. - Р.131-134.

189. Lima A.A., Sidrim J.J., Lima N.L. et al. Molecular epidemiology of multiply antibiotic-resistant Shigella flexneri in Fortaleza, Brazil. J.Clin.Microbiol. 1997,351061 -1065.

190. Lindahl T. Instability and decay of the primary structure of DNA. Nature. 1993,362: 709-715.

191. Meloni B. P., Lymbery A. J., Thompson R. C. A. Isoenzyme electrophoresis of 30 isolates of Giardia from humans and felines // Am. J. Trop. Med. Hyg. -1988. 38. -P.65-73.

192. Nash Т.Е., Herrington D. A., Losonsky G. A., Levine M. M. Experimental human infection with Giardia lamblia // J. Infect. Dis. 1987. - 156. - P.974-984.

193. Hall A., Nahar Q. Trans R Albendazole as a treatment for infections with Giardia duodenalis in children in Bangladesh.// Soc Trop Med Hyg. 1993 Jan-Feb.

194. Olson M. E., Ceri H., Morck D.W. Giardia vaccination // Parasitol. Today. -2000.- 16(5).-P.213-217.

195. Rendtorff R. C. The experimental transmission of Giardia lamblia among volunteer subjects. Waterborne transmission of giardiasis. U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D.C., 1978. P. 64—81.

196. Roig J., Romeu J., Riera C., Texido A., Dolmingo C., Morera J. Acute eosinophilic pneumonia due to toxocariasis with bronchoalveolar lavage findings. Chest 1992. -P. 102.

197. Sabra A. Niferatel in the treatment of giardiasis // Rev. ta Bras. Clin. Terap. -1973. 2. -P. 62.

198. Simsek Z., Yildiz Zeyrek F., Kurcera M. A. Effect of Giardia Infection on Growth and Psychomotor Development of Children Aged 0-5 Years // Journal of Tropical Pediatrics. 2004. - Vol. 50, №2. - P.90-93.

199. Sopwith W., Osborn K., Chalmers R., Regan M. The changing epidemiology of cryptosporidiosis in North West England // Epidemiol. Infect. 2005. - Vol. 133.-P. 785-793.

200. Srikanth R., Durgadas Naik. Prevalence of Giardiasis due to wastewater reuse for agriculture in the suburbs of Asmara City, Eritrea // International Journal of Environmental Health Research. 2004. - 14(1). - P. 43 - 52.

201. Smith H.V., Corcoran G.D. New drugs and treatment for cryptosporidiosis // Curr Opin Infect Dis. 2004. - Vol.17, N 6. - P.557-564.

202. Stevens D. P., Frank D. M., Mahmoud A. A. F. Thymus dependency of host resistance to Giardia muris infection: studies in nude mice // J. Immunol. -1978.120. -P.680-682.

203. Taylor L.N., Latham S.M., Woolhiuse M. E. Risk factor for human diseasesemergence// Philos. Trans.R.Soc. Lond.B.-2001. -Vol. 356. -P.983-989.

204. Tanriverdi S., Tanyeli A., Baslamisli F. Detection and genotyping of oocysts of Cryptosporidium parvum by real-time PCR and melting curve analysis // J Clin Microbiol. 2002. - Vol.40, N 9. - P.3237-3244.

205. Thompson R.C. A Presidential address: rediscovering parasites using molecular tools- towards revising the taxonomy of Echinococcus, Giardia and Cryptosporidium // Int J Parasitol. 2002. - Vol. 32. - P. 493-496.

206. Upton S. J., Barnard S. M. Two new species of coccidia (Apicomplexa: Eimeriidae) from Madagascar Gekkonids // J. Protozool. — 1987. -Vol. 34. — P.452-454.

207. Vakil N.B., Schwartz S.M., Buggy B.P. et al. Biliary cryptosporidiosis in HIV-infected people after the waterborne outbreak of cryptosporidiosis in Milwaukee // N Engl J Med. 1996. - Vol.334, N 1. - P. 19-23.

208. Vesey G., Slade J.S., Byrne M. et al. A new method for the concentration of Cryptosporidium oocysts from water // J. of Applied Bacteriology. -1993.-87-90.

209. Warren K.S. Helminthes infection. Disease control priorities in developing countries. - Oxford: University Press, 2003. - P.120 .

210. Wolfe M. S. Giardiasis // Pediatr. Clin. North. Am. 1979. - 26. - P.295-303.

211. Wright J.M., Dunn L.A., Upcroft P. Efficacy of antigiardial drugs // Expert Opin. Saf. 2003. -2(6). -P. 529-541.

212. WHO. Global surveillance of emerging and reemerging diseases // Week, epidemiol. Rec. - 2001. - № 29. - P. 218-224.

213. Xiao L., Bern C., Arrowood M., Sulaiman I., Zhou L., Kawai V., Vivar A., Lai A,. Gilman R. Identification of the Cryptosporidium pig genotype in a human patient // J Infect Dis. 2002b. - Vol. 185, N 12. - P. 1846-1848.

214. Zinneman H. H., Kaplan A. P. The association of giardiasis with reduced intestinalsecretory immunoglobulin A // Am. J. Dig. Dis. 1972. - 17. -P.793-799.

215. Zannou D.M., Kinde-Gazard D., Vigan J. Clinical and immunological profile of HIV infected patients in Cotonou, Benin // Med Mai Infect. 2004. -Vol.34, N5. -P.225-228.

П Р И Л О Ж E H И Я

Приложение 1.

Исследование проб почвы на цисты кишечных простейших. Модификация метода Падченко.

1. Из объединенной пробы берут на исследование 25 г почвы

2. Помещают в фаянсовую ступку, постепенно добавляют дистиллированную воду в соотношении 1:2

3. Тщательно растирают до получения гомогенной кашицы

4. Отстаивают в течение 15 мин.

5. Надосадочную жидкость выливают в цилиндрический стакан объемом 250.0мл

6. Промывку повторяют 3 раза и собирают образующиеся промывные воды в стакан.

7. Собранные промывные воды отстаивают 25 мин

8. Надосадочную жидкость удаляют.

9. Осадок промывных вод исследуют под микроскопом двумя способами: - «висячей» капли и «раздавленной» капли

1) микроскопия «висячей» капли без окрашивания: для определения вегетативных форм простейших, наличия и видовой принадлежности личинок почвенных нематод, х400

2) микроскопия «раздавленной» капли с добавлением 1.5% р-ра Люголя под покровным стеклом для видового определения цист простейших, х400

10. Для подсчета количества цист в 1 г почвы:

11. К образовавшемуся осадку в центрифужной пробирке добавляют 10% раствором формалина в соотношении 1:4

12. Взвесь тщательно перемешивают

13. Исследуют под микроскопом 5 капель взвеси и подсчитывают количество цист. Среднеарифметическое значение числа цист в 5 каплях соответствует их количеству в 1 мл, или 1 г почвы.

Приложение 2.

Исследование проб почвы на яйца гельминтов.

Модификация метода Романенко.

Определение показателей загрязненности почвы яйцами гельминтов проводится по методу Романенко. В связи с тем, что на этапе пробоподготовки применяют негостированную лабораторную посуду и принадлежности «широкие стекла», а также не определены стандартизированные объемы применяемых флотационных растворов, соответственно - количество подлежащих микроскопии препаратов с диагностическим осадком, кроме того допущены технические неточности в процедурах, что снижает эффективность метода и достоверность результатов исследования.

Совместно со специалистами НИИ медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского при постановке экспериментальных исследований образцов почвы, почвенных осадков плодовоовощной и растительной продукции проведена техническая модификация унифицированного метода Романенко и оценка эффективности предложенной модификации на серии экспериментальных исследований с искусственным заражением образцов.

Для удобства описания модификации метода Романенко, мы структурировали ход исследования по порядковым номерам и внесли техническую корректировку в текст с выделением шрифта и дополнительной сноской под пункт пробоподготовки.

Ход исследования

14. Из объединенной пробы берут на исследование 4 порции по 25 г почвы

15. Пробы помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл (в случае отсутствия таковых можно пользоваться пробирками объемом 80 - 100 мл, но помещать в них следует не более 15 г почвы)

16. Заливают 3 % раствором натриевой или калиевой щелочи в соотношении 1:1.

17. После этого содержимое пробирок тщательно размешивают, отстаивают в течение 20 - 30 мин.

17а) или центрифугируют при 800 об. 5 мин.

18. Надосадочную жидкость сливают.

19. Пробу промывают 1 раз, независимо от типа почвы:

19а) заливают дистиллированной водой, тщательно размешивают, затем пробирки центрифугируют 3 мин. при 1500 об/мин.; надосадочную жидкость сливают.

20. После промывки в объеме 1:2 к весу исходной навески пробы добавляют 20а) - к 2 порциям почвы насыщенный раствор нитрата натрия (NaNO3 плотность 1,38 - 1,40) для выявления яиц геогельминтов;

- к третьей порции почвы - насыщенный раствор сульфата цинка (ZnSO4) или сульфата магния (MgSO4) в смеси с 5% раствором йодата калия (KI) для выявления яиц Toxocara spp.

- к четвертой порции - насыщенный раствор хлорида цинка (ZnCl плотность 1,78) для выявления яиц O. felineus

Почву тщательно размешивают

21. Полученную смесь центрифугируют

21а) надосадочную жидкость пипеткой разливают в центрифужные пробирки до верхнего мениска раздельно из каждой порции почвенной взвеси

22. Пробирки накрывают предметными стеклами. Одно предметное стекло покрывает 3 рядом стоящие центрифужные пробирки.

Очень важно исключить какую-либо потерю поверхностной пленки. Для этого между краем пробирки и предметным стеклом оставляют пространство шириной не более 10 мм, куда с помощью пипетки вносят насыщенный раствор соли до его соприкосновения с нижней стороной стекла, которое осторожно передвигают до полного покрытия центрифужной пробирки.

23. Через 20 - 25 мин. отстаивания стекла снимают, переворачивая нижней поверхностью вверх, а на их место ставят другие (при необходимости и третьи).

23 а) Время отстаивания условное: до образования ободка кристаллизации на месте соприкосновения предметного стекла (около 12-15 мин).

24. На предметные стекла с поверхностной пленкой наносят 1 - 2 капли 30% раствора глицерина, накрывают их покровными стеклами;

25. Препараты микроскопируют. Для обнаружения яиц гельминтов препарат просматривают при увеличении х10, для определения видоовой принадлежности и определения их жизнеспособности по морфологическим признакам - при увеличении х40.

Расчет интенсивности загрязнения почвы яйцами гельминтов проводится с учетом поправочного коэффициента для определения истинной обсемененности почв яйцами аскарид и власоглавов на 1000 г почвы. Достижение эффективности метода модификации обеспечивает -сокращение промывки пробы до 1 раза;

- замена широких стекол на стандартные предметные стекла, что обеспечивает стандартные условия для микроскопии диагностической пленки;

-снижение расходования реактивов (объемов флотационных растворов); -применение разных флотационных растворов для определения яиц гельминтов разных таксономических групп с разным удельным весом в одной постановке;

-стандартизация объемов рабочих реагентов и их соотношений во взвеси;

-стандартизация количества исследований из каждой порции образца почвы;

- снижение времени на исследование 1 пробы до 20 мин.

Исходные данные апробации санитарно-паразитологического исследования смывов с поверхностей разными методами и методом ИМС-_ ИФМ (п=120) _

№ пробы Результат исследования ВОЗ, абс. Результат исследования окраска по Ц-Н, абс. Результат исследования ИМС-ИФМ, абс.

L.intestin аМ$ Ст.ратуиш L.intestinalis Ст.ратуиш L.intestinalis Ст.ратуиш

1. 16 14 14 13 17 16

2. 16 14 14 13 17 16

3. 16 14 14 13 17 16

4. 16 14 15 13 17 16

5. 16 14 15 13 17 16

6. 16 14 15 13 17 16

7. 17 15 15 13 17 16

8. 17 15 15 13 18 16

9. 16 16 15 13 18 15

10. 16 15 15 13 18 15

11. 16 15 16 13 18 17

12. 16 15 16 14 18 17

13. 16 15 16 14 18 17

14. 16 15 16 14 18 17

15. 16 14 16 14 18 17

16. 16 14 16 13 18 17

17. 16 14 16 13 18 17

18. 16 15 16 13 18 18

19. 16 15 15 13 17 17

20. 16 15 15 13 17 17

21. 17 15 15 13 17 17

22. 17 15 15 13 17 17

23. 17 15 15 13 16 17

24. 17 15 15 13 16 17

25. 16 16 16 13 16 17

26. 16 16 15 13 18 15

27. 16 15 15 13 18 15

28. 16 15 16 13 18 17

29. 16 15 16 14 18 17

30. 16 15 16 14 18 17

31. 16 15 16 14 18 17

32. 16 14 16 14 18 17

33. 16 14 16 13 18 17

34. 16 14 16 13 18 17

35. 16 15 16 13 18 18

36. 16 15 15 13 17 17

37. 16 15 15 13 17 17

38. 17 15 15 13 17 17

39. 17 15 15 13 17 17

40. 17 15 15 13 16 17

№ пробы Результат исследования ВОЗ, абс. Результат исследования окраска по Ц-Н, абс. Результат исследования ИМС-ИФМ, абс.

L.intestin alis Cr.parvum L.intestinalis Cr.parvum L.intestinalis Cr.parvum

41. 17 15 15 13 16 17

42. 16 16 16 13 16 17

43. 16 16 15 13 18 15

44. 16 15 15 13 18 15

45. 16 15 16 13 18 17

46. 16 15 16 14 18 17

47. 16 15 16 14 18 17

48. 16 15 16 14 18 17

49. 16 14 16 14 18 17

50. 16 14 16 13 18 17

51. 17 15 14 13 17 17

52. 16 15 14 13 17 17

53. 16 16 14 13 17 17

54. 16 16 14 13 17 17

55. 17 15 15 13 16 17

56. 17 15 15 13 16 17

57. 16 16 16 13 16 17

58. 16 16 15 13 18 15

59. 16 15 15 13 18 15

60. 16 15 16 13 18 17

61. 16 15 16 14 18 17

62. 16 15 16 14 18 17

63. 16 15 16 14 18 17

64. 16 14 16 14 18 17

65. 16 14 16 13 18 17

66. 16 14 16 13 18 17

67. 17 15 15 13 16 17

68. 17 15 15 13 16 17

69. 16 16 16 13 16 17

70. 16 16 15 13 18 15

71. 17 15 15 13 16 17

72. 17 15 15 13 16 17

73. 16 16 16 13 16 17

74. 16 16 15 13 18 15

75. 16 15 15 13 18 15

76. 16 15 16 13 18 17

77. 16 15 16 14 18 17

78. 16 15 16 14 18 17

79. 16 15 16 14 18 17

80. 16 14 16 14 18 17

81. 16 14 16 13 18 17

82. 16 14 16 13 18 17

83. 17 15 15 13 16 17

84. 17 15 15 13 16 17

85. 16 16 16 13 16 17

86. 16 16 15 13 18 15

№ пробы Результат исследования ВОЗ, абс. Результат исследования окраска по Ц-Н, абс. Результат исследования ИМС-ИФМ, абс.

L.intestin alis Cr.parvum L.intestinalis Cr.parvum L.intestinalis Cr.parvum

87. 16 15 15 13 18 15

88. 16 15 16 14 18 18

89. 16 14 16 14 18 17

90. 16 14 16 13 18 17

91. 16 14 16 13 18 17

92. 17 15 15 13 16 18

93. 17 15 15 13 16 18

94. 16 16 16 13 16 18

95. 16 16 15 13 18 18

96. 16 15 15 13 18 18

97. 16 15 16 14 18 18

98. 16 14 16 14 18 18

99. 17 15 15 13 16 18

100. 1 6 16 16 13 16 18

101. 1 6 16 15 13 18 18

102. 1 6 15 15 13 18 18

103. 1 6 15 16 14 18 18

104. 1 6 14 16 14 18 18

105. 1 7 15 15 13 16 18

106. 1 6 16 16 13 16 18

107. 1 6 16 15 13 18 18

108. 1 6 15 15 13 18 18