Состав и свойства водных извлечений и меланинов чаги, полученных с применением СВЧ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат химических наук Сысоева, Елена Владиславовна

• Сысоева, Елена Владиславовна
• кандидат химических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат химических наук Сысоева, Елена Владиславовна

СОДЕРЖАНИЕ

Стр.

Список сокращений и условных обозначений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Обзор существующих препаратов на основе березового гриба чаги и области их применения

1.2 Технология получения водных извлечений чаги в промышленных

и бытовых условиях

1.3 Влияние технологии получения на физико-химические свойства водных экстрактов чаги

1.3.1 Теоретические основы экстрагирования

1.3.2 Основные факторы, влияющие на процесс экстрагирования

1.3.3 Влияние способа получения водного извлечения чаги на состояние его коллоидной системы, проявление антиоксидантных и терапевтических свойств

1.4 Химический состав чаги, её водных извлечений и меланина

1.5 Применение микроволнового воздействия для интенсификации физико-химических процессов

1.5.1 Характеристика микроволн и особенности их воздействия

1.5.2 Области применения и исследования микроволнового воздействия на биологические объекты

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Выбор объектов и материалов исследований

2.2. Методы получения водных извлечений из чаги

2.2.1. Получение водных извлечений чаги методом ремацерации

2.2.2 Получение водных извлечений чаги с применением

микроволновой обработки

2.3 Способы выделения меланина из водного извлечения чаги

2.3.1 Осаждение хлористоводородной кислотой

2.3.2 Осаждение меланина 1% раствором гидроксида калия в этаноле

2.3.3 Осаждение водных извлечений чаги хлоридом кальция

2.3.4 Осаждение водного извлечения чаги трихлоруксусной кислотой

2.4 Протеолиз водных извлечений чаги ферментами желудочно-кишечного тракта

2.4.1 Исследование условий протекания протеолиза

2.4.2 Протеолиз водных извлечений чаги, полученных мацерацией с СВЧ обработкой ферментами желудочно-кишечного тракта

2.5 Общие методы анализа

2.5.1 Хроматография

2.5.2 Тонкослойная хроматография 81 2.5.3. Определение белка

2.5.4 Определение количества аминокислот 8

2.5.5 Проведение горизонтального электрофореза меланина

2.5.6 Определение антиоксидантной активности

2.5.7 Определение размера частиц методом фотонно-корреляционной спектроскопии (ФКС)

2.5.8 Определение острой токсичности

2.5.9 Рентгенофлуоресцентный анализ

2.5.10 Рентгеноструктурный анализ 8

2.5.11 Методы статистической обработки результатов экспериментов

ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1 Установление оптимальных условий проведения экстракции чаги

с СВЧ обработкой

3.2 Выделение меланина различными осаждающими агентами

3.3 Протеолиз водных извлечений чаги ферментами желудочно-

кишечного тракта

ВЫВОДЫ

Список использованных источников

Приложение

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

АОА - антиоксидантная активность СВЧ - сверх высокие частоты ТСХ - тонкослойная хроматография

1Т)5о - величина средней дозы, после поступления которой (в желудок, брюшную полость, на кожу) в течение трех суток наступает гибель 50% подопытных животных

ФКС - фотон-корреляционная спектроскопия

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Состав и свойства водных извлечений и меланинов чаги, полученных с применением СВЧ»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Водные извлечения гриба чаги широко применяются в косметике и медицине, в том числе для профилактики и лечения онкологических заболеваний различной этиологии. Водные извлечения чаги представляют собой коллоидную систему, дисперсной фазой которой, а так же и основным компонентом, обеспечивающим их терапевтическую эффективность, является хромогенный комплекс или меланин чаги. Водные извлечения чаги получают с использованием различных методов экстракции: мацерацией, ремацерацией, реперколяцией, -однако все эти процессы длительны и энергоёмки. Интенсификация процессов экстракции при производстве галеновых препаратов является актуальной задачей, так как позволяет усовершенствовать технологический процесс этой стадии производства, рационально использовать ценное лекарственное сырьё, повысить эффективность извлечения экстрактивных веществ, а также во многих случаях повысить активность получаемых препаратов. Для интенсификации экстракции чаги в работе использованы СВЧ (сверхвысокие частоты), ранее не применявшиеся в технологиях получения извлечений из этого сырья.

Цель работы. Разработать способ получения водных извлечений чаги с использованием СВЧ, определить их физико-химические свойства и безопасность применения.

Для достижения цели решались следующие задачи:

- разработать способ экстракции чаги с применением СВЧ;

- определить устойчивость дисперсных фаз водных извлечений чаги, полученных различными способами экстракции, по отношению к

различным осаждающим агентам и исследовать физико-химические свойства полученных меланинов;

- для определения безопасности водных извлечений, полученных с применением в экстракции СВЧ:

- разработать методику проведения гидролиза водных извлечений чаги ферментами желудочно-кишечного тракта, по аналогии с процессами, происходящими с ними in vivo;

- определить наиболее безопасный режим СВЧ при получении водных извлечений чаги.

Научная новизна работы. Впервые для интенсификации процесса экстракции чаги применены СВЧ.

Для выделения меланинов из водных извлечений чаги впервые в качестве осаждающих агентов использованы хлорид кальция и трихлоруксусная кислота, определен их минеральный состав и размер частиц.

Впервые для оценки безопасности водных извлечений и меланинов чаги разработана и применена методика получения гидролизатов водных извлечений чаги - модели гидролизатов этих извлечений, получающихся in vivo, исследование которых подтвердило безопасность водных извлечений чаги, полученных мацерацией с СВЧ обработкой.

Практическая ценность работы. Предложенные способы получения водных извлечений чаги - мацерацией с СВЧ обработкой, позволили более чем в три раза сократить как длительность процесса, так и его энергоёмкость. Меланин из водных извлечений чаги выделен с помощью хлорида кальция, это позволило повысить его выход, изменить структурную организацию, а также компонентный состав по сравнению с меланином, осаждённым хлористоводородной кислотой. Разработанные подходы позволяют повысить эффективность извлечения биологически активных компонентов из сырья

чаги, обеспечить безвредность получаемых продуктов и поэтому могут быть рекомендованы для применения на фармацевтическом производстве.

Внедрение результатов исследования. По способу получения водных извлечений чаги с применением в экстракции СВЧ получен патент на изобретение. Результаты исследований внедрены в учебный процесс Казанского государственного технологического университета в дисциплине «Физиолого-биохимические основы разработки продуктов детского питания».

На защиту выносятся:

- способы экстракции чаги с применением СВЧ и результаты исследования водных извлечений чаги и меланинов;

- способы выделения меланина с применением хлористого кальция и трихлоруксусной кислоты;

- экспериментальные данные по разделению хромогенов и белковых фракций водных извлечений чаги с применением зонального электрофореза;

- экспериментальные данные исследований протеолиза водных извлечений чаги, полученных с применением СВЧ обработки, in vitro, ферментами желудочно-кишечного тракта;

- результаты исследования гидролизатов водных извлечений чаги, полученных с применением СВЧ обработки, и выделенного из них меланина.

Апробация работы. Результаты работы докладывались и обсуждались на: Межрегиональной конференции молодых ученых «Пищевые технологии» (Казань, 2004 г.); III Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2007 г.); 2-ой международной научно-практической конференции (Тамбов, 2009 г.); XI Международной конференции молодых учёных «Пищевые технологии и

биотехнологии» (Казань, 2010 г.); VI Всероссийской конференции «Химия растительных веществ» (Санкт-Петербург, 14-18 июня 2010 г.).

Публикации. Основные результаты работы изложены в 2 статьях, рекомендованных ВАК, 7 публикациях по материалам конференций, 1 патенте на изобретение.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, трёх глав, выводов, библиографического списка. В тексте приведены ссылки на 191 литературных источника. Работа изложена на 157 страницах машинописного текста, содержит 17 рисунков, 33 таблицы.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Сысоева, Елена Владиславовна

выводы

1. Разработан способ получения водных извлечений чаги мацерацией с СВЧ обработкой, позволивший сократить продолжительность процесса экстракции чаги в 3,5 раза, а также более чем в три раза снизить его энергоёмкость, по сравнению с получением водных извлечений чаги ремацерацией.

2. Показано, что экстракция чаги мацерацией с СВЧ обработкой при использовании трёх режимов мощности СВЧ печи (90 Вт, 180 Вт и 360 Вт) позволяет получить водные извлечения чаги с физико-химическими и антиоксидантными свойствами, близкими к свойствам водных извлечений, полученных ремацерацией.

3. Установлено, что использование для выделения меланинов из водных извлечений чаги вместо хлористоводородной кислоты хлорида кальция увеличивает выход меланина в полтора раза, приводит к изменению размеров его частиц и их минерального состава, снижению его антиоксидантной активности; а использование трихлоруксусной кислоты облегчает отделение белковых фракций из меланина с помощью электрофореза.

4. Разработана методика протеолиза водных извлечений чаги ферментами желудочно-кишечного тракта, позволяющая определить глубину протекания этого процесса в условиях, близких к физиологическим.

5. Установлено, что водные извлечения чаги, полученные ремацерацией и мацерацией с СВЧ обработкой в режиме 180 Вт, аналогичны по своим свойствам, имеют близкие показатели глубины протекания протеолиза ферментами желудочно-кишечного тракта, с убыванием количества белка в гидролизатах в среднем на 59%.

6. Показано, что гидролизаты водных извлечений чаги, полученные ремацерацией и мацерацией с СВЧ обработкой в режиме 180 Вт, имеют близкие по размерам частицы меланина с эффективным радиусом около 116 нм, и в полтора раза превышают по антиоксидантной активности исходные водные извлечения. Доказано, что гидролизат водных извлечений, полученный мацерацией с СВЧ обработкой, обладает меньшей токсичностью в сравнении с гидролизатом препарата «бефунгин».

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Сысоева, Елена Владиславовна, 2011 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Шашкина, М.Я Химические и медико-биологические свойства чаги / М.Я. Шашкина, П.Н. Шашкин, A.B. Сергеев // Химико-фармацевтический журнал. -2006. -№10. -С. 37-44.

2. Шиврина, А.Н. Химическая характеристика действующих начал чаги / А.Н. Шиврина // Продукты биосинтеза высших грибов и их использование.

- Л.: Наука, 1966. - С. 49-55.

3. Шиврина, А.Н. О химическом составе чаги / А.Н. Шиврина, Е.В. Ло-вягина, Е.Г. Платонова // Чага и ее лечебное применение при раке IV стадии; под ред. П.К. Булатова, В.И. Долина, П.С. Савельева [и др.]. - Л.: Медгиз, 1959.-С. 55-61.

4. Грибель, Н.В. Некоторые аспекты противоопухолевого действия бе-фунгина в эксперименте / Н.В. Грибель // В кн.: Актуальные проблемы современной онкологии. - Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1988. - С. 54-58.

5. Рачагов, A.A. О лечении больных язвенной болезнью бефунгином / A.A. Рычагов, A.A. Федотов // Советская медицина. - 1973. - №12. - С. 81-84.

6. Федотов, A.A. Влияние бефунгина на центральную нервную систему у больных язвенной болезнью / A.A. Федотов, Ю.И. Родсолайнен // Клиническая медицина. - 1981. - Т.59. - №7 - С. 22-14.

7. Шашкина, М.Я. Чага, Чаговит, Чагалюкс в лечебной и профилактической практике / М.Я. Шашкина, П.Н. Шашкин, A.B. Сергеев, Л.К. Горяйнова.

- М.: ГУ РОНЦ, ОАО «Холдинг «ЭДАС», 2009. - 66 с.

8. Сбитнева, Е. М. Гриб чага против 100 болезней / Е.М. Сбитнева. - М.: РИПОЛ классик, 2009. - 64 с.

9. Гаврилов, А.С Адаптагенное действие препарата чаги / A.C. Гаврилов [и др.] // Хим. фарм. ж. - 2003. - Т. 37. - № 2. - С. 54-56.

Ю.Досычев, Е.А. Лечение псориаза препаратами гриба "Чага" / Е.А. До-сычев, В.Н. Быстрова // Вестник дерматологии и венерологии, 1973. - №5. -С. 79-83.

11 .Лазовская, A.B. О токсичности чаги / A.B. Лазовская // Чага и её лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959. - С. 96-102.

12.Булатов, П.К. Клинические наблюдения больных раком IV стадии при лечении чагой / П.К. Булатов // Чага и её лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959. - С. 261-270.

13.Мартынова, Е.Я. Клинические наблюдения больных раком желудка IV стадии при лечении чагой / Е.Я.Мартынова// Чага и её лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959. - С. 271-278.

М.Мартынова, Е.Я. Клинические наблюдения за больными хроническим гастритом и полипами желудка, леченными препаратами из чаги / Е.Я. Мартынова // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - М.-Л.: Наука, 1961. - С. 225-235.

15. Андреева, С.М. Об изыскании оптимальных условий выделения пигментного комплекса чаги из водных диффузий / С.М. Андреева, П.А. Якимов, Е.В. Алексеева // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - Л.: Наука, 1961. - С. 120-128.

16.Якимов, П.А. Методы переработки чаги в лекарственные формы / П.А. Якимов, Е.В. Алексеева Е.В // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - М.-Л.: Наука, 1961. - С. 129-138.

17.Шиврина, А.Н. О химическом составе чаги / А.Н. Шиврина [и др.] // Чага и ее лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959. - 334 с.

18.Якимов, П.А. Зольные элементы чаги и препараты из нее / П.А. Якимов, М.Ф. Ступак // Сб. статей: Чага иеё лечебное применение. - Л.: Наука, 1959.-С. 50-55.

19.Якимов, П.А. Препарат БИН-чага / П.А. Якимов, П.К. Булатов, М.Н. Березина // Вестн. АН СССР. - 1957. - №4. - С. 88-91.

20.Пат 1805968 Российская федерация, МПК6 А 61 К 35/78. Способ получения средства, обладающего противоязвенной и адаптогенной активно-

стью / Рыжова Г.Л [и др.]; заявитель и патентообладатель ТНЦ СО РАМН; опубл. 30.03.93, Бюл. №12.

21.Рыжова, Г.Л. Химические и фармакологические свойства сухого экстракта чаги / Г.Л. Рыжова, С.С. Кравцова, С.А. Матасова, Н.В. Грибель, В.Г. Пашинский, К.А. Дычко. // Химико-фармацевтический журнал - 1997. - № 10.-С. 44-47.

22.Пат 2076728 Российская федерация, МПК6 А 61 К 35/78. Способ профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний / Бельтюков Е.К., Ломтатидзе В.М., Булаткина Г.Н.; заявитель и патентообладатель Бельтюков Е.К., Ломтатидзе В.М., Булаткина Г.Н.. - № 93028693/14; заявл. 05.31.93; опубл. 10.04.97.

23 .Пат 2167665 Российская федерация, МПК7 А 61 К 35/78, В 02 С 17/00, A61J3/02. Способ получения порошка чаги / Бреднева Н.Д., Щеголев A.A., Ларионов Л.П.; заявитель и патентообладатель Щеголев Анатолий Андреевич. - № 2000109756/14; заявл. 17.04.2000; опубл. 27.05.01.

24.Ларионов, Л.П. Экологически безопасные технологии получения медицинских препаратов в новой лекарственной форме / Л.П. Ларионов [и др.] // В материалах российской научно-практической конференции: «Рациональное использование лекарств». - Пермь: ОЦНИТ ПГТУ, 2004. - С. 59.

25.Пат 2343930 Российская федерация, МПК А 61 К 36/06, В 01 D 11/02. Способ получения водных экстрактов чаги / Сысоева М.А., Хабибрахманова В.Р., Гамаюрова B.C., Кузнецова О.Ю.; заявитель и патентообладатель Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский государственный технологический университет". -№2007113965/15; заявл. 02.04.2007; опубл. 20.01.2009, Бюл.№2. - 5с.

26.Головкин, В.А. Галеновые препараты / В.А. Головкин. - М., 2003. -

31 с.

27.Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д.Машковский. - Т.1. - М.: Новая волна, 2002. - 430с.

28.Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири. 5-е изд., перераб. и доп. / В.Г. Минаева. - Новосибирск: Наука, 1991. - 431 с.

29.Поцелуева, Л.А. Технология лекарственных средств: / Л.А. Поцелуе-ва, С.С. Камаева, Г.Ю. Меркурьева; под ред. Л.А. Поцелуевой. - Казань: КГМУ, 2003 - 233 с.

30.Фармацевтическая технология / под ред. В.И. Погорелова. - Ростов-на-Дону: Феникс, 2002. - С. 242.

31 .Андреева, С.М. К характеристике доброкачественности препарата из чаги / С.М. Андреева // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. -М.-Л.: Наука, 1961. - С. 144-150.

32.Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги. IV. Анти-оксидантная активность. Влияние способа извлечения и применение ком-плексонов, гидроокиси натрия / М.А. Сысоева, О.Ю. Кузнецова, B.C. Гамаю-рова, П.П. Суханов, Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников // Химия растительного сырья. - 2005.-№1.-С. 41-47.

33.Драгендорф, Г. Химическое исследование гриба, встречающегося на белой березе (Betula alba) и близких к ней видах / Г. Драгендорф // Фармацевтический журнал. - 1864. - Т.1. - № 10 - С. 13.

34.Якимов, П.А. Зольные элементы чаги и препараты из нее / П.А. Якимов, М.Ф. Ступак // Чага и её лечебное применение. - Л.: Наука, 1959. - С. 50 -55.

35.Рыжова, Г.Л. Химические и фармакологические свойства сухого экстракта чаги / Г.Л. Рыжова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал -1997.-№10.-С. 44-47.

36.Калашникова, Е.А. Изучение химического состава и стандартизация сырья чаги и лекарственного препарата «Бефунгин»: автореф.дис.... канд.фарм.наук / Е.А. Калашникова. - Пятигорск. - 2003. - 23с.

37.Корсун, В.Ф. Клиническая фитотерапия в онкологии / В.Ф. Корсун, К.А. Трескунов. - Минск: Беларусь, 2003. - С. 172-175.

38.Сушинская, Н.В Получение и физико-химические свойства меланинов из базидиомицетов / Н.В. Сушинская, Т.А. Кукулянская [и др.] // Химия и технология органических веществ - 2004. - сер. 4. - С 193-195.

39.Сысоева, М.А. Исследование золя вводных извлечений чаги III. Влияние состава сырья на выход экстрактивных веществ водных извлечений чаги / М.А. Сысоева, О.Ю. Кузнецова, B.C. Гамаюрова, П.П. Суханов, Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников // Химия растительного сырья. - 2004. - 4. - С.15-21.

40.Сысоева, М.А. Анализ растительного сырья - чаги / М.А.Сысоева, О.Ю.Кузнецова, B.C. Гамаюрова, Ф.Г. Халитов, Г.К. Будников, Г.К. Зиятдинова // Межрегиональная конференция молодых ученых «Пищевые технологии». - Казань. - 2004. - часть II. - С.3-5.

41. Сысоева, М.А. Структурная организация и свойства полифенолов чаги / М.А. Сысоева, О.Ю. Кузнецова, B.C. Гамаюрова // Вестник Казанского технологического университета (КГТУ). - 2005. - №1. - С. 244 - 250.

42.Lee, I.K. New antioxidant polyphenols from the medicinal mushroom Inonotus obliquus / I.K. Гее, Y.S. Kim, Y.W. Jang, J.Y. Jung, B.S. Yun // Bioor-ganic & Medicinal Chemistry Letters. - 2007. - №17. - P. 6678-6681.

43.Zheng, W.F. Phenolic compounds from Inonotus obliquus and their immune-stimulating effects/ W.F. Zheng, Y.X. Zyao, M.M. Zheng, Z.J. Yin, C.F. Chen, Z.W. Wei // Mycosystema. - 2008. - Vol. 27 - №4. - P. 574-581.

44.Сысоева, М.А. Сравнительный анализ меланинов чаги с помощью электронной микроскопии / М.А. Сысоева, М.В. Харина, П.Р. Хуснутдинов, В.А. Гревцев // XI Международная конференция молодых учёных «Пищевые технологии и биотехнологии»: тез. докл. - Казань, 2010. - С. 285.

45.Шиврина, А.Н. К вопросу о биохимии древоразрушающих грибов / А.Н. Шиврина// Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - M.-JL: Наука, 1961. - С. 44-56.

46. Шиврина, А.Н. К вопросу о качественном составе гумиподобных соединений, образуемых древоразрушающими грибами / А.Н. Шиврина, Е.В.

Ловягина, Е.Г. Платонова // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - М.-Л.: Наука, 1961. - С. 70-77.

47.Шиврина, А.Н. Аминокислотный состав гумиподобных веществ, образуемых некоторыми древоразрушающими грибами / А.Н. Шиврина, P.A. Маслова // Почвоведение. - 1963. - №11. - С. 63-67.

48.Шиврина, А.Н. К характеристике комплекса сложных органических соединений чаги / А.Н. Шиврина, Е.В. Ловягина, Е.Г. Платонова // Чага и её лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959. - С. 72-84.

49.Ловягина, Е.В. Изучение кислотного состава чаги методом распределительной хроматографии на бумаге / Е.В. Ловягина, А.Н. Шиврина, Е.Г. Платонова II Чага и её лечебное применение при раке IV стадии. - Л.: Медгиз, 1959.-С. 62-71.

50.Ловягина, Е.В. Изучение продуктов гидролиза действующего начала чаги методами распределительной хроматографии / Е.В. Ловягина, А.Н. Шиврина, Е.Г. Платонова // Биохимия. - 1958. -Т.23. - №1. - С.41-46.

51 .Mazurkiewicz, W. Analisis of aqueous extract of Inooyus obliquus / W.Mazurkiewicz // Acta Pol Pharm. - 2006. - 63. - 6. - P. 497-501.

52.Сысоева, Е.В. Антиоксиданты и их применение / Е.В. Сысоева, М.А. Сысоева // Межрегиональная конференция молодых ученых «Пищевые технологии»: тез. докл. - Казань, 2004. - С. 97-99

53.Якимов, П.А. О причинах изменения устойчивости пигментного комплекса в водных экстрактах из чаги / П.А. Якимов, С.М.Андреева // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. -М.-Л.: Наука, 1961.-С. 113-119.

54.Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги. X. Проте-олиз водного извлечения чаги ферментами желудочно-кишечного тракта / М.А. Сысоева, Е.В. Сысоева, В.Р. Хабибрахманова, B.C. Гамаюрова, Л.А. Кудрявцева // Химия растительного сырья. - 2008 - 2. - С. 81-86.

55.Василисин, C.B. Методы гидролиза белка. Применение продуктов гидролиза / C.B. Василисин, М.В. Головкина., A.C. Бессонов // Материалы

XIII научно-технической конференции «Вузовская наука - СевероКавказскому региону». Естественные и точные науки. Технические и прикладные науки. - Ставрополь: СевКавГТУ, 2009. - Т. 1. - 217 с.

56.Донской, Н.С. Способы выделения белка из молочной сыворотки / Н.С. Донской // Материалы XIII научно-технической конференции «Вузовская наука - Северо-Кавказскому региону». Естественные и точные науки. Технические и прикладные науки. - Ставрополь: СевКавГТУ, 2009. - Т.1. -217 с.

57.Пат 2174012 Российская федерация, МПК7 А 61 К 38/01, А 61 К 35/74, С 12 N 1/21, А 61 Р 37/08. Способы профилактики и лечения аллергии / Исолаури Эрика (FI); Метсяниттю Лена (FI); Корхонен Ханну (FI); Сальми-нен Сеппо (FI); Сювяоя Ева-Лииса (FI); заявитель и патентообладатель Валио Ой (FI). - № 98100444/14; заявл. 12.06.1996; опубл. 27.09.2001.

58.Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы / под. ред. Л.Г. Калинина. - Одеса: "Видавництво Бартнева", 2009. - 144 с.

59.Михеев, А.Н. Особенности и возможности микроволновой химии / А.Н. Михеев, Н.А. Панкрушина // Наука в Сибири. - 2010. - №21. - С. 9.

60.Регламент радиосвязи. Женева, 1959. Издано Министерством связи СССР. - М.: Связьиздат, 1961.

61.Ванецев, А.С. Спекание оксидных порошков с использованием микроволнового воздействия / А.С. Ванецев // В сб. Описание задач спецпрактикума "Химические методы синтеза неорганических веществ и материалов" (часть 2). Под редакцией проф. Кауля А.Р. - М. - 2008. - С. 132-157.

62.Духин, С.С. Диэлектрические явления и двойной слой в дисперсионных системах и полиэлектролитах / С.С. Духин, В.Н. Шилов. - Киев: Наукова Думка. - 1972.-203 с.

63.Леус, Н.Ф. Эффективность применения микроволновой технологии в агропромышленном комплексе /Н.Ф. Леус, С.Г. Коломийчук // Микроволно-

вые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одеса, 2009. - С. 86-88.

64.Лукъянчук, И.И. Микроволновые технологии в фармации / И.И. Лукьянчук, Л.Г. Калинин, В.П. Тучный. // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. - Киев-Одесса, 2000. - С. 143-147.

65.Leontovich, A.W. La microstructure du systeme nerveux (dususteme "neurons") cotnme base des theories de conductibilité etd'excitation dans le systeme nereux / A.W. Leontovich // Comptes Rendues. - 1928 - T. 187. - p. 908.

66.Леонтович, A.B. Нейрон как аппарат переменного тока / A.B. Леонто-вич // Биол. Журн. - 1993 - Т. 11. - № 2-3. - С. 252-291.

67.Malov, N. N. On the short and very short electric waves / N.N. Malov // Physik. Z. - 1933. -V. 34. - P. 883.

68.. Schliephacke, E. Arbeitsgebiete auf dem Kurzwellengebiet / E. Schliephacke // Deutsche Medizinische Wochenschrift. - 1932 - №32. - P. 12351240.

69.Horn, L. Klinische und experimentelle Erfahrungen mit der Kurzwellenbe-handlungdes Gehirnes / L. Horn, O. Kauders, P. Liebesney // Wiener klinische Wochenschrift. - 1934 - № 30. - P. 936-939.

70.Danzer, H. Ultrakurzwellen in Ihren Medizinisch-biologischen Anwendungen / H. Danzer, H.E. Hollmann, B. Rajewsky, H. Schaefer, E. Schliephake. - Leipzig: G. Thieme, 1938. - 308 p.

71.Шейбе, А. О коротких и весьма коротких электрических волнах / А. Шейбе // Успехи физических HayKPhysikalische Zeitschrift. - 1934. - №. 35. -P. 206.

72.Duhem, P. La diathermie et ses applications médicales / P. Duhem. - Paris: Gauthier-Villars, 1928. - 71 p.

73.0кресс, Э. СВЧ энергетика. Применение энергий сверхвысоких частот в медицине, науке и технике: в 3 т. Т. 3. / Э. Окресс. - М.: Мир, 1971 -250 с.

г.г.

1969.-272 с.

/ Г.Г.

в 35 т. Т. 33 /

Н. А. Се-

1936.-С, 325-329.

о.в.

/ о.в.

1996.-Т. 41.-№ 9.-С .4-11. 77.Гапеев, А.Б.

канд....физ.-

/ А.Б. Гапе

Паттерн, 1994. - 145 с. Л.Г.

1997.-111 с.

/ СЛ. Ситько, Л.Н.

/ В.Г.

Т.И. Субботина, A.A. Яшин, [и др.] // 7. -№ 1. - Р. 114-117 80.Техника и

М., 1983.-С. 174. , В.Г. С. 154.

82.Schwan, IIP. Biophysics of diathermy, In Licht, ed.) / H.P.

83.Schwan, H.P. The Absorption of Part One, Biophysical Aspects Int Rev / H P. Med. - 1954. - V. 33. - P. 371-404

84.Schwan, H.P. The absorption of Part two Int Rev / H.P. Schwan, G M. Piersol // - P. 425-448.

85.Moor, F.B. Microwave diathermy, In ed.) / F.B. Moor.

G.M.

/ Л.Г. Ka-Alive, - 1999. - V.

B. M.

- M, 1987. -

eat and Cold (S. 1963. -P. 63. in body // Am. J.

1955.- V. 34.

tnd Cold (S. 1965.-P. 310.

с

86.Гордон, З.В, Вопросы гигиены труда и биологического действия электромагнитных полей сверхвысоких частот / З.В. Гордон. - Л.: Медицина, 1966.- 165 с.

87.. Скурихина, Л.А. Ультравысокочастотная терапия / Л.А. Скурихина // Курортология и физиотерапия: Руководство; под ред. В.М. Боголюбова. -М.: Медицина, 1985. - Т. 1. - С.437-452.

88.Скурихина, Л.А. Лечение токами надтональной частоты / Л.А. Скурихина, В.М. Стругацкий, Л.А. Синицкий // Вопросы курортологии, физио-терпапии и ЛФК. - 1982.-№ 1.-С. 61-62.

89.Ферзаули, А.Н. Обоснование применения методики СВЧ гипертермии при лечении обширных гемангиом у детей / А.Н. Ферзаули [и др.] // I Республиканская науч. практ. конференция с международным участием «Актуальные проблемы детской хирургии»: тез. докл. - Махачкала, 2001. - С. 281.

90.Шафранов, В.В. Использование СВЧ ЭМП для лечения гемангиом сложной анатомической локализации / В.В. Шафранов, A.B. Гераськин, Н.Ю. Быстрова, H.H. Соловьева, Ю.И. Вельская // III Российский конгресс «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии»: тез. докл. - М., 2004. -С. 531.

91.Шафранов, В.В. СВЧ деструкция при лечении гемангиом у детей (клинико-экспериментальное исследование) / В.В. Шафранов [и др.] / Врожденная и наследственная патология головы, лица и шеи у детей: актуальные вопросы комплексного лечения. - М., 2006. - С. 306.

92.Рахманкулов, Д.Л. Применение микроволнового излучения в терапии некоторых заболеваний / Д. Л. Рахманкулов, С. Ю. Шавшукова, И. Н. Виха-рева // Башкирский химический журнал. - 2008. - Т. 15. - № 2. - С. 94-98.

93,Остапенков, А. М. Электрооборудование пищевых предприятий / A.M. Остапенков, А.Т. Птушкин - М.: Агропромиздат, 1989. - С. 77-79.

94.Рахманкулов, Д.Л. Применение микроволнового излучения в пищевой отрасли / Д. Л. Рахманкулов, С. Ю. Шавшукова, И. Н. Вихарева // Башкирский химический журнал. - 2008. - ТЛ5. - № 1. - С. 73-75.

95.Технология микроволновой обработки семян сельскохозяйственных культур: методические рекомендации / под. ред. О.М. Шевчука, В.В. Пона-марёва. - Киев: «Аграрная наука», 2003. - 58 с.

96.Калинин, Л.Г. Определение влияния микроволнового поля на посевные и урожайные качества семян злаковых, масличных и овощных культур / Л.Г. Калинин, В.П. Тучный, Е.А. Левченко, М.О. Киндрук, В.В. Вишневский // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса-Киев, 2000. - С. 66-73.

97.Калинин, Л.Г. Влияние микроволнового поля на фитопатогены - возбудителей основных заболеваний семян злаков и подсолнуха / Л.Г. Калинин, В.П. Тучный, Е.А. Левченко, О.В. Бабаянц // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса-Киев, 2000. - С. 73-77.

98.Полевик, II.Д. Предпосевная обработка клубней картофеля энергией СВЧ / Н.Д. Полевик, Ф.Я. Изаков, H.H. Николаев, A.B. Карелин // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса, 1996. - С. 42-45.

99.Двирникив, В.П. Результат влияния микроволнового электромагнитного поля на свежие томаты с целью увеличения сроков их хранения / В.П. Двирникив [и др.] // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса-Киев, 2000. - С. 18-23.

100. Еремин, А.Д. Экстракция с применением элетрофизических методов / А.Д. Еремин [и др.] // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса, 2009. - С. 14-21.

101. Коломйчук, С.Г. Применение микроволновых технологий для экстрагиро вам ия биологически активных веществ и оценка их биологической активности / С.Г. Коломйчук, Н.Ф. Л eye, Л.З. Бошков // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса, 2009. - С. 57-60.

102. Blanc, B.H. Comparative Study about the Influence on Man by Food Prepared Conventionally and in the Microwave-Oven / B.H. Blanc, Hertel, H.U. -Raum&Zeit. - 1992. - Vol. 3. - №.2. - P. 43.

103. Schrumpf, E. Texture of broccoli and carrots cooked by microwave energy / E. Schrumpf, H. Charley // J. Food Science. - 1975. - № 40. - P. 10251029.

104. Czerski, P. Influence of Microwave Radiation on the Haematopoetic System / Czerski P. [et al.] // Biologic Effects and Health Hazards of Microwave Radiation. - Warschau: Polish Medical Publishers, 1974. - P. 45-52.

105. Kenneth, L.C. Microwawe Radiometry: Its Importance to the Detection of Cancer / L.C. Kenneth // Microwave theoryvand tecniques. - 1982 - Vol. 37. -№ 12.-P. 1862-1869.

106. Кузнецова, О.Ю. Способы получения водных вытяжек чаги / О.Ю. Кузнецова, М.А. Сысоева, B.C. Гамаюрова // II Всероссийская конференция «Химия и технология растительных веществ»: тез. докл. - Казань, 2002.-С. 131.

107. Пат 2406514 Российская федерация, МПК7 А 61 К 36/06, В 01 D 11/02, А 61 Р 39/06. Способ получения водных экстрактов чаги / М.А. Сысоева, Е.В. Сысоева, А.В. Сысоева, B.C. Гамаюрова; заявитель и патентообладатель ГОУВПО"Казанский государственный технологический университет". -№ 2009113400/15; заявл. 09.04.2009; опубл. 20.12.2010, Бюл. № 35. - 5с.

108. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. 11-е изд. - М.: Медицина, 1990 - С 342-343.

109. Сысоева, Е.В. Исследование водных извлечений чаги XV. Проте-олиз водных извлечений чаги, полученных с применением СВЧ / Е.В. Сысоева, М.А. Сысоева, B.C. Гамаюрова, Д.И. Вахитова // Вестник Казанского технологического университета. — 2010 - №9. - С. 609-615.

110. Lenk, W. // Z. Phytotherapie. - 1989. - Vol. 10. - P. 49-51.

111. Крепкова, JI.В. Доклиническое изучение безопасности гепатопро-текторного лекарственного средства силимар / Л. В. Крепкова, Т. А. Сокольская // Химико-фармацевтический журнал : научно-технический и производственный журнал. - 2007. - Т. 41. - № 9. - С. 32-34.

112. Крепкова, Л.В. Доклиническое изучение безопасности лекарственных средств, разработанных на основе расторопши пятнистой / Л. В. Крепкова, A.A. Шкаренков, В.В. Бортникова [и др.] // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2007. - № 3. - С. 27-31.

113. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1990-С. 161.

114. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1990-С. 24.

115. Хроматография на бумаге / под ред. И.М. Хайса - М.: Издательство иностранной литературы, 1962. - 365 с.

116. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография. Т.2. /Ю. Кирхнер. -М.: Изд-во «Мир», 1981. - 524 с.

117. Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги VII. Электрофорез в щелочной среде. Использование боратного буфера / М.А. Сысоева [и др] // Вестник Казанского Технологического Университета (КГТУ). - 2006. - №4. - С. 164-168.

118. Дункан, А. Применение спектроскопии в химии / А. Дункан, В. Горди, Н. Джоно, Ф Матсен. - М.: Издат. ин. лит., 1959. - 260 с.

119. Иванов, H.H. Методы физиологии и биохимии растений / H.H. Иванов. - М.: Наука, 1946. - 225 с.

120. Абдуллин, И.Ф. Электрогенерированный бром - реагент для определения антиоксидантной способности соков и экстрактов/ И.Ф. Абдуллин, Е.Н.Турова, Г.К Будников // Заводск. лаборатория. - 2002. - Т.68. - №9. - С 12-15.

121. Пат 2253114 (RU), МПК7 G Ol N 33/48. Способ определения интегральной антиоксидантной емкости биологических жидкостей / В.И. Погорельцев, Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников; заявитель и патентообладатель Казанский госуд. мед. ун-т. - 2002134634/15; заявл. 23.12.2002; опубл. 27.05.2005, Бюл. №15.-5 с.

122. Сысоева, М.А. Применение фотон-корреляционной спектроскопии в исследовании водной вытяжки чаги / М.А.Сысоева, JI.3.. Ризванова, О.Ю. Кузнецова, B.C. Гамаюрова, Л.А.Кудрявцева // Общероссийская конференция молодых ученых с международным участием «Пищевые технологии». - Казань, 2006. - С. 115-116.

123. Елизарова, О.Н. Пособие по токсикологии для лаборантов / О.Н. Елизарова, Л.В. Жидкова, Т.А. Кочеткова. -М.: «Медицина», 1974. - 168 с.

124. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р. У. Хабриева - Москва, 2000.-398 с.

125. A.c. СССР №1224689. Устройство для рентгенофлюоресцентного анализа состава вещества / Ю.Н. Бурмистенко, И.А. Толоконников. - Бюл. №14.-1986.

126. Блохин, М.А. Методы рентгеноспектральных исследований / М.А. Блохин. - М: ГИТЛ, 1959. - 386 с.

127. Вайнштейн, Э.Е., Рентгеновские спектры атомов в молекулах химических соединений и в сплавах / Э.Е. Вайнштейн - М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1950.-208 с.

128. Бокай, Г.Б. Рентгеноструктурный анализ / Г.Б. Бокай, М.А. По-рай-Кошиц. - М.: Промышленность, 1964. — 215 с.

129. Шишаков, H.A. Основные понятия структурного анализа / H.A. Шишаков. - М.: Химия, 1961. - 366 с.

130. Thathachari, Y.T. Phisical stadies on melanins II. X-ray diffraction/ Y.T. Thathachari, M.S. Blois // Biophisical Journal. - 1969. - 9. - P.77-89

131. Халафян A.A. STATISTICA 6. Статистический анализ данных: Издательство: Бином-Пресс, 2007. - 512 с.

132. Пономарев, В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья / В.Д. Пономарев. - М.: Медицина, 1976. - 202 с.

133. Муравьев, И.А. Технология лекарств в 2 т. / И.А. Муравьев. - М.: Медицина, 1980. - 704 с.

134. Лысянский, В.М. Основные закономерности и анализ комбинированного процесса экстрагирования / В.М. Лысянский, В.Н. Санов // Теор. основы хим. Технологии. - 1979. - № 6. - С. 839-845.

135. Новый справочник химика и технолога. Процессы и аппараты химических технологий ч.П : справочник - СПб.: НПО «Профессионал», 2006, 2007.-916 е.: ил

136. Василик, Н.М. Интенсификация процесса экстракции и совершенствование оборудования для получения настоев / Н.М. Василик, В.М. Лысянский. - М.: ЦНИИТЭИпищпром.,1982. - 19 с.

137. Медведева, В.И. Пути повышения эффективности процесса экстрагирования биологически активных веществ в медицинской, микробиологической и пищевой промышленности / В.И. Медведева, Е.А. Мандрыка. - М.: ВНИИСЭНТИ, 1989. - 63 с.

138. Калинин, Л.Г Системный анализ условий экстрагирования растительного сырья в пищевом и фармацевтическом производстве / Л.Г. Калинин // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса, 2009. - С. 9-13.

139. Гребенюк, С.М. СВЧ-экстракция полезных веществ из растительного сырья / С.М. Гребенюк, Ю.К. Губиев, С.М. Назаров [и др.] // Изв. вузов. Пищевая технология. - 1987. - № 4. - С.77-80.

140. Лукъянчук, И.И. Микроволновая экстракция биологически активных соединений из растительного сырья / И.И. Лукъянчук, А.Н Сагнели // Микроволновые технологии в народном хозяйстве. Внедрение. Проблемы. Перспективы. - Одесса, 2009. - С. 61-65.

141. Пясковский, С. Применение препаратов из чаги при лечении злокачественных опухолей / С. Пясковский, С. Рихтер // Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. - M.-JL: Наука, 1961. -С. 258-263.

142. Методы и технологии получения биологически активных веществ из растительного сырья: учебное пособие / сост. В.В Штрыкова -Томск: Изд-во ТПУ, 2004. - 126 с.

143. Броунштейн, Б.И. Физико-химические основы жидкостной экстракции / Б.И. Броуштейн, А.С. Железняк. - М.: Химия, 1966. - 320 с.

144. Sarna, Т. Identification of melanin in tissues and body fluids / T. Sarna, H.M. Swartz // Folia histochemica et cytochemica. - 1978 - Vol.16 - №4. -P. 275-286.

145. Prota, G. Melanin pigmentation in Mammals / G. Prota, R.H. Thomson // Endeavour. - 1976. - Vol. 35. - № 124. - P. 32-38.

146. Feeney, L. Lipofuscin and melanin of human retinal pigment epithelium. Fluorescence, enzyme cytochemical and ultrastructural studies / L. Feeney // Investigative Ophthalmology and Visual Science. - 1978. - Vol. 17. - № 7 . - P. 583-600.

147. Кутиков, E.C Тканевая терапия / E.C. Кутиков. - M.: Наука, 1983. -250 с.

148. Лях, С.П. Микробные меланины / С.П. Лях, Е.Л. Рубан. - М.: Наука, 1972.-250 с.

149. Либенсон, М.Н. К вопросу о тепловом повреждении пигментированных тканей лазерным излучением / М.Н. Либенсон // В кн.: тез. докл. все-соз. науч. конф.: "Применение методов и средств лазерной техники в биологии и медицине". - Киев, 1981. - С. 207-211.

150. Плотникова, С.И. Влияние меланина на мутационный процесс, индуцированный ионизирующей радиацией в половых клетках животных / С.И. Плотникова, И.Б. Моссэ / В кн.: тез. докл. четвертого всесоюз. сипм. по фенольным соединениям. - Т ашкент, 1982. - С. 37-38.

151. Bloomfield, B.J. Melanins and resistance of fungi to lysis / B.J. Bloomfield, M. Alexander // J. Bacteriol. - 1967. - Vol. 93. - № 4. - P. 12761280.

152. Masson, H.S. The free radical property of melanins / H.S. Masson, D.J. E. Ingrem, Allen B. // Arch. Biochem. Biophys. - 1960. - Vol. 86. - P, 225230.

153. Nicolaus, R.A. Melanins / R.A. Nicolaus [et al.] // Methodicum Chimicum.- 1978.-Vol 11.-P. 190-199.

154. Thomas, M. Melanins / M. Thomas, K. Paech, M.Tracey // Modern methods of plant analisis. -1955.-№4.-P. 661.

155. Борщевская, М.И. Развитие представлений о биохимии и фармакологии меланиновых пигментов / М.И.Борщевская, С.М.Васильева // Вопросы медицинской химии. - 1999. - 4. - С. 54-66.

156. Рубан, E.JL Биологическая функция меланопигмента клеток и предполагаемые механизмы ее обеспечения / Е.Л. Рубан, С.П. Лях // Известия АН СССР. Сер. биология. - 1970. - № 5. - С. 719-724.

157. Жеребин, Ю.А. Фармакологические свойства эномеланиновых пигментов / Ю.А. Жеребин [и др.] // Доклады АНУССР. - 1984 - № 3. - С. 64-67.

158. United States Patent 5,286,979. G 21 К 003/00 Process for absorbing ultraviolet radiation using dispersed melanin / D.L. Berliner [et al]; the applicant and the owner of the patent D.L. Berliner. - № 073284; filed: 07.06.93; published: 15.02.94

159. Сысоева, E.B. Подбор условий анализа белка в водных извлечений из чаги / Е.В. Сысоева, М.А.Сысоева, B.C. Гамаюрова // II Международная научно-практическая конференция «Составляющие научно технического прогресса»: »: тез. докл. - Тамбов, 2009. - С. 125-126.

160. Сысоева, Е.В. Способ выделения белка из водных извлечений чаги / Е.В.Сысоева, М.А.Сысоева, B.C. Гамаюрова, О.А. Короткова // XI Меж-

дународная конференция молодых учёных «Пищевые технологии и биотехнологии»: тез. докл. - Казань, 2010. - С. 286.

161. Ролик, И.С. К вопросу об истории онкологических показаний экстрактов омелы белой ХЕЛИКСОР в инъекциях (по материалам книги «Омела белая в онкологии» немецких авторов Н.Кинле и А.Кине). / И.С. Ролик, А.И. Завадская // Натуротерапия и гомеопатия. - 2006. - №1 - С. 14-24.

162. Лахтин, В.М. Изучение цитоагглютинирующих активностей (фи-толектиновой, рассасывающей агглютинаты и агглютинирующей цветными примесями) в растительных композициях / В.М. Лахтин, В.Ф. Корсун, М.В. Лахтин, Е.В. Корсун // Практическая фитотерапия. - 2004 - № 3. - С. 10-17.

163. Сысоева, М.А. Применение электрофореза для исследования водной вытяжки чаги / М.А.Сысоева, Г.И.Халиуллина, О.Ю.Кузнецова, В.Р.Хабибрахманова, B.C. Гамаюрова // Общероссийская конференция молодых ученых с международным участием «Пищевые технологии»: тез. докл. -Казань, 2006.-С. 113-115.

164. Сысоева, М.А. Исследование биологически активных компонентов водных извлечений чаги с помощью горизонтального электрофореза / М.А.Сысоева, О.Ю.Кузнецова, B.C. Гамаюрова // Общероссийская конференция молодых ученых с международным участием «Пищевые технологии»: тез. докл. - Казань, 2006. - С. 121-122.

165. Сысоева, М.А. Электрофоретическая подвижность хромогенов водного извлечения чаги / М.А. Сысоева, В.Р. Хабибрахманова, О.Ю.Кузнецова, B.C. Гамаюрова, A.C. Опарина // III Всероссийская конференция «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья»: тез. докл. - Барнаул, 2007. - С.210-214.

166. Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги VII. Электрофорез в щелочной среде. Использование боратного буфера / М.А. Сысоева, В.Р. Хабибрахманова, В. С. Гамаюрова, Г.И. Халиуллина // Вестник Казанского технологического университета. - 2006. - 4. - С. 164-168.

167. Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги VI. Электрофорез в кислых средах. Использование ацетатного буфера / М.А. Сысоева [и др.]// Вестник Казанского технологического университета. - 2006. -4.-С. 153-156.

168. Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги V. Электрофорез в кислых средах. Использование муравьиного буфера / М.А. Сысоева [и др.] // Вестник Казанского технологического университета. -2006.-4.-С. 143-147.

169. Березов, Т.Т. Биологическая химия: Учебник / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. - 3-е изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 1998. - с.639.

170. Остерман, JI. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование: практическое пособие / Л.А Остерман. - М.: Наука, 1981. - 288 с.

171. Сысоева, М.А. Исследование золя вводных извлечений чаги IX. Определение размеров частиц дисперсной фазы золя извлечений из чаги / М.А. Сысоева, В.Р. Хабибрахманова, B.C. Гамаюрова, Л.А. Кудрявцева // Химия растительного сырья. - 2008 - 2. - С.75-80.

172. Сысоева, М.А. Исследование золя водных извлечений чаги. XIII. Биологически активные вещества коллоидной системы, формируемой после удаления дисперсной фазы из водного извлечения чаги хлористоводородной кислотой / М.А. Сысоева [и др.] // Химия растительного сырья. - 2009. - №3. -С. 151-156.

173. Сысоева, М.А. Высокоактивные антиоксиданты на основе гриба Inonotus obliquus : автореф. дис. ... докт. хим. Наук / М.А. Сысоева. - М, 2009. -32 с.

174. Максимюк, H.H. О Преимуществах ферментативного способа получения белковых гидролизатов / H.H. Максимюк, Ю.В. Марьяновская // Фундаментальные исследования. - 2009. - № 1 - С. 34-35

175. Основы современной пищевой технологии: учебное пособие / сост. Гореликова Г.А.; Кемеровский технологический институт пищевой промышленности. - Кемерово, 2004. - 100 с.

176. Сарапкина (Белоусова), C.B. Новые технологии усвояемых продуктов на основе белковых гидролизатов / C.B. Сарапкина (Белоусова) // В сборнике научных трудов КНИИХП «Актуальные проблемы качества и безопасности продовольственного сырья и пищевой продукции».-Краснодар: КНИИХП, 2005.-С.106-108.

177. Практическая химия белка: пер. с англ. / под ред. А. Дарбре. - М.: Мир, 1989.-623с.

178. ГОСТ 13496.4-93. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания азота и сырого протеина. - Взамен ГОСТ 13496.4-84; введ. 01.01.1995. - Минск: Национальные стандарт, 2007. - 17с.

179. Остерман JI.A. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М., 1985. 536 с.

180. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография / Ю. Кирхнер. - М.: Мир, 1981.-382 с.

181. Хроматография в тонких слоях / под. ред Э. Шталя. — М.: Мир, 1965.-521 с.

182. Починок, Х.И. Методы биохимического анализа растений / Х.И. Починок. - Киев: «Наукова дужа», 1976. - 245 с.

183. Досон, Р. Справочник биохимика / Р. Донсон [и др.] — М.: Мир, 1991.-544 с.

184. Биохимия белков: практикум для студентов биол. фак. спец. 1-31 01 01 «Биология» / авт. И.В. Семак, Т.Н. Зырьянова, О.И. Губич . - Минск: БГУ, 2007. - 49 с.

185. Leoni, L. Nanoporous biocapsules for the encapsulation of insulinoma cells: biotransport and biocompatibility considerations / L. Leoni, T.A. Desai // IEEE Trans. Biomed. Eng. - 2001. - 48 - 11. - P. 1335-1341.

186. Pelkmans, L. Genome-wide analysis of human kinases in clathrin-and caveolae / raft-mediated endocytosis / L. Pelkmans [et al.] // Nature - 2005 -436-P. 78-86.

187. Барабой, В.А. Структура, биосинтез меланинов, их биологическая роль и перспектива применения / В.А. Барабой // Успехи современной биологии. - 2001. - Т. 121. -№1. - С. 36-46.

188. ГОСТ 12.1.007.-76. Межгосударственный стандарт. Система стандартной безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. - Введ. впервые; введ. 01.01.77 М: ИПК издательство «Стандарт», 1999. - 4 с.

189. Сысоева, Е.В. Протеолиз белков водных извлечений Inonotus obliquus / Е.В. Сысоева, М.А.Сысоева, О.Ю.Кузнецова, В.Р. Хабибрахманова, B.C. Гамаюрова // III Всероссийская конференция «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья»: тез. докл. - Барнаул, 2007. - С.214-215.

190. Сысоева, М.А. Протеолиз водных извлечений чаги ферментами желудочно-кишечного тракта / М.А Сысоева, Е.В. Сысоева, Д.И. Вахитова, B.C. Гамаюрова / XI Международная конференция молодых учёных «Пищевые технологии и биотехнологии»: тез. докл. - Казань, 2010. - С. 284.

191. Сысоева Е.В. Отделение и анализ белковой фракции водных извлечений чаги / Е.В. Сысоева, В.Р. Хабибрахманова, B.C. Гамаюрова, М.А. Сысоева, М.Ю. Макеева, А.А. Ахмадуллина // VI Всероссийская конференция «Химия растительных веществ»: тез. докл. - СПб, 2010. - С. 288.

ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ И ФИЗИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. А. Е. АРБУЗОВА Казанского Научного Центра Российской Академии Наук

Региональный центр государственного контроля качества лекарств (Аттестат аккредитации № 1 от 9 апреля 2002 г.) г. Казань, 420088, ул. А.Е. Арбузова, 8 тел. [phone], факс [phone], e-mail /ohov ¿/iopc.knc.ru

Материал исследования.

Тестируемое вещество: Извлечения из чаги, полученные мацерацией с СВЧ обработкой с использованием различных режимов СВЧ печи - 90вт,180вт и ЗбОвт (название образцов ведётся по режиму СВЧ печи с добавлением индекса И), (15% раствор; 1,5 г сухого остатка/ 10мл), компонентный состав: вода, экстрагируемые вещества чаги

Дата поступления на исследование: апрель-сентябрь 2010 г.

Физическое состояние вещества: темно-коричневая жидкость

Растворитель: вода

Назначение тестируемого вещества: биоактивные добавки.

Поставщик (изготовитель): КГТУ, кафедра пищевой биотехнологии, аспирант Сысоева Елена Владиславовна и д.х.н., доцент Сысоева Мария Александровна (тел. [phone]; e-mail: [e-mail]. oxygen [e-mail])

Метод исследования. Первичную токсикологическую оценку 15% экстрактов чаги И90вт. И180вт и ИЗбОвт при зондовом введении в желудок через рот (per os) проводили в острых опытах на беспородных белых мышах обоего пола массой 19,0±2,0 г., содержавшихся на стандартном рационе питания в условиях природного режима освещения помещения при комнатной температуре. В экспериментальные группы животных отбирали по методу случайных выборок. В контрольном опыте (одна группа; п=6) мышам вводилась вода дистиллированная в эквивалентных опыту количествах. Время наблюдений за экспериментальными животными - 5 суток.

Исполнитель (токсиколог): н.с. Ланцова Алла Васильевна, м.н.с. Ленина O.A.

Результаты опытов. Токсические симптомы: адинамия, нарушения координации движений и дыхания.

4 у'- * Зам. Лвдектопа И

V «_

2010 г.

I. Острая (неспецифическая) токсичность

Протокол испытания извлечений из чаги Г90вт, Г180вт и ГЗбОвт

Нейроторопная активность тестируемых веществ:

Мыши (per os; смерть). Протокол опыта: И90вт

Доза, Смертельный эффект Общее

мг/кг, через 72 часа число

(число мышей) мышей

1300 6 6

2600 2 6

3250 4 6

3900 6 6

5200 6 6

Dose (Concentration) - Effect (probít)

J 3 4 5

Dose (Concentration)

ЛД50= 2913 (2073 + 3369) мг/кг

ЛД0= 1430 мг/кг, ЛД16= 2132 мг/кг, ЛД84= 4368 мг/кг, ЛДюо= 5070 мг/кг, Наклон кривой S = _1,4328_

Мыши (per os; смерть). Протокол опыта: И180вт

Dose (Concentration) • Effect (probit)

Доза, Смертельный эффект Общее

мг/кг, через 72 часа число

(число мышей) мышей

1250 0 6

1875 0 6

2500 3 8

2875 5 8

3125 5 6

3750 6 6

0 2 4 6

Dose (Concentration)

ЛД50= 2705 (2374 -i- 2968) мг/кг

ЛД0= 1355 мг/кг, ЛД16= 1928 мг/кг, ЛД84= 5950 мг/кг, ЛДюо= 8312 мг/кг, Наклон кривой S = _1,8012_ _

Мыши (per os; смерть). Протокол опыта: ИЗбОвт

Доза, Смертельный эффект Общее

мг/кг, через 72 часа число

(число мышей) мышей

2000 0 6

2300 1 6

2560 3 10

3500 5 6

4000 6 6

Dose (Concentration) - Effect (promt)

Dose (Concentration)

ЛД5о= 3043 (2670 3551) мг/кг

ЛД0= 2037 мг/кг, ЛД16= 2240 мг/кг, ЛД84= 4200 мг/кг, ЛДюо= 4875 мг/кг, Наклон кривой S = 1,3693

Заключение по токсичности :

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги И90вт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 2073 мг/кг до 3369 мг/кг (мыши, per os).

2. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаги И90вт относится к III классу опасности (вещества «умеренно опасные»; мыши, per os) [1, 2];

3. Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги И180вт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 2374 мг/кг до 2968 мг/кг (мыши, per os).

2. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаги И180вт относится к III классу опасности (вещества «умеренно опасные»; мыши, per os) [1, 2];

3. Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги ИЗбОвт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 2670 мг/кг до 3551 мг/кг (мыши, per os).

2.Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаги ИЗбОвт относится к III классу опасности (вещества «умеренно опасные»; мыши, per os) [1,2];

3.Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

Литература:

[1] Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном введении (справочник). -М.: Медицина, -1977. -С. 196-197.

[2] Сборник нормативно-методических документов по обращению с отходами производства и потребления. Приложение 1. -M.: Jloryc. -1996, -С. 67-68.

[3] Brooks H.L. In: Pesticide Background Statements. Volume IV. Insecticides. Forest Service, U.S. Department of Agriculture. Agriculture Handbook No. 685, 1989 (http://infoventures.com/e-hlth/pestcide/pest-fac.html)

Зав. лабораторией ХБИ ;>л ^ - ' ^ Зобов В.В.

« л'7. » . l"_2010 г. /' ' ' 'V

ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ И ФИЗИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. А. Е. АРБУЗОВА Казанского Научного Центра Российской Академии Наук

Региональный центр государственного контроля качества лекарств (Аттестат аккредитации № 1 от 9 апреля 2002 г.) г. Казань, 420088, ул. А.Е. Арбузова, 8 тел. [phone], факс [phone], e-mail [e-mail]

Материал исследования.

Тестируемое вещество: Гидролизаты извлечений из чаги, полученных мацерацией с СВЧ обработкой с использованием различных режимов СВЧ печи - ЁЮвт. 180вт и Зб'Овт (название образца® ведется по режиму СВЧ печи с добавлением индекса Г). Гидролиз извлечений из чаги проведён с помощью ферментов желудочно-кишечного тракта. Испытания проведены с использованием образцов Г90вт. Г180вт н ГЗбОвг, взятых в виде 15% раствора; 1,5 г сухого остатка- 10кш, компонентный состав: вода, зкстрашрушые вещества чаги, аци дин-пепсин. энэ£стал

Дата поступления на исследование: апрель-сентябрь 2010 г. Физическое состояние вещества: темно-коричневая жидкость Растворитель: вода

Назначение тестируемого вещества: биоактивные добавки.

П^тягатшк (изготовитель;!: КГТГУ; кафедра пищевой биотехнологии, аспирант Сысоева Елена Владиславовна и д.х.н., доцент Сысоева Мрия Алжксацдроикна (тел. [phone]; е-шаП: шош^ш^Этай т. оху§еп1 130@шай .га)

Метод исследования. Первичную токсикологическую оцен&у 1.5% гвдрошзамв излечений из чаги 1Р0вг„ ПШвт и ПбОи пря зондовом введении в желудок через рот (рег о®) проводили в острых опытах на беспородных белых мшш обоего пола массой 19Д£2?0 г.. содержавшихся на стандартном рационе питания в условиях природного режима освещения помещения при комнатной температуре. В эксперимвнталшые группы животных отбирали по методу случайных выборок. В контролгаом опыте (одна группа; а=б) мышам вводилась вода дистиллированная в эквивалентных опыту количествах. Время наблюдений за зкспериментальными животными - 5 суток.

Исполнитель (токсиколог): н.с. Данцова Алла Васильевна, зя.н.с. Ленива О.А

Результаты опыт ов. Токсические симптомы: адинамия, нарушения координации движений и дыхания

^«МЖВЕРЖДАЮ»

^^ д1Ч)ектора ИОфХ ^ ^ f им; А^рбузова КазНЦ РАН,

B.C. Резник

ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЯ

Извлечения из чаги

I.. Острая (неепецифическая) токсичность

Результаты опытов. Токсические симптомы: адинамия, нарушения координации движений и дыхания.

Заключение по токсичности :

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги Г90вт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 5000 мг/кг (мыши, per os).

2. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаги Г90вт относится к IV классу опасности (вещества «мало опасные»: мыши, per os) (1, 2];

3. Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги Г180вт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 8000 мг/кг (мыши, per os).

2. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаш Г180вт относится к IV классу опасности (вещества «мало опасные»; мыши, per os) [1,2];

3. Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

1. Острая смертельная доза (ЛД50) извлечения из чаги ГЗбОвт на лабораторных мышах в условиях перорального введения находится в пределах от 5000 мг/кг (мыши, per os).

2. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» извлечение из чаги ГЗбОвт относится к IV классу опасности (вещества «мало опасные»; мыши, per os) [1,2];

3. Согласно шкале экотоксикологических категорий - к «практически не токсичным» веществам (млекопитающие, per os) [3].

Литература:

[1] Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном введении (справочник). -М.: Медицина, -1977. -С. 196-197.

[2] Сборник нормативно-методических документов по обращению с отходами производства и потребления. Приложение 1. -М.: Логу с. -1996, -С. 67-68.

[3] Brooks H.L. In: Pesticide Background Statements. Volume IV. Insecticides. Forest Service, U.S. Department of Agriculture. Agriculture Handbook No. 685, 1989 (http://infoventures.com/e-hlth/pestcide/pest-fac.html)

Зав. лабораторией ХБИ Зобов B.B.

« . С » ~ Y_2010 г.

ФНДГ РЛДЬ! ЮН АI ник: ГВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

,н(

г 1 I , 1ь I о

1 ОСУДАРС 1 1(1 УЧРНЖДГ.11И1- ь>1 I

I :•■ 'О; ^^ 1,1*1

«КАЗАНСКИ!« " 5 Г НИМ!'

ТКХИСлЛОГИ'и 1 ^.пИЧ!1!! Ь>

•420015. Казан ь. >.1. к. Маркса. 05 I елеграф-п:лп алрее: Казань-15. КГГУ

АКТ

иу гв1-:рждаюи

Проректор по у чебной работе Казанского 1 осл \ венного

технолог

о внедрений результатов кандидатской диссертации ассистента КГТУ

СЫСОЕВОЙ Е.В.

Комиссия в составе: председателя - декана фак\льтета пищевой инженерии, профессора М.А.Поливанова и членов: '.аведуюшего кафедрой пищевой биотехнологии, доктора химических наук VI.Л. Сысоевой, кандидата химических наук, ассистента кафедры пищевой биотехнологии В.Р. Хабибрахмановой составили настоящий акт о гом. что результаты кан-¡и т8ско1! .шссертации ассистента Сысоевой К.В. "Свойства водных извлечений и мелани-но-! :л! ». полученных с применением СВЧ" использованы в учебном процессе, который пролили ;ся па кафедре ппшевой биотехнологии.

Материалы. изложенные в диссертационной работе Сысоевой Н.В. используются к лабораторном нрак гикуме лиепиплины ('.01.02 Физполого-бнохимичсские основы разработки продуктов детского питания (для студентов обучающихся по специальности 260505 ~ Технология дечекого и функционального питания) для проведения лабораторных работ по протеолизу сырья и продуктов питания с помощью ферментов жел\долно-кишечного тракта

М.4. Сысоева В.Р. Xабибрахманова