Соматические и наследственные молекулярно-генетические изменения, ассоциированные с развитием немелкоклеточного рака легкого тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Чижиков, Виктор Викторович

• Чижиков, Виктор Викторович
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чижиков, Виктор Викторович

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Возможности использования детекции молекулярных нарушений, характерных для немелкоклеточного рака легкого, в клинической практике.

1.1 Введение.Ю

1.2 Рак легкого : элементы эпидемиологии и гистологическая классификация.

1.3 Наследуемые особенности генома как факторы риска развития рака легкого.

1.3.1 Аллельный полиморфизм в локусе протоонкогена Hras 1.

1.3.2 Полиморфизм генов, продукты которых участвуют в метаболизме канцерогенов.

1.4 Молекулярно-генетические изменения, используемые для ранней диагностики рака легкого.

1.4.1 Мутации онкогенов и генов-супрессоров.

1.4.2 Метилирование промоторов генов-супрессоров.

1.4.3 Нарушения микросателлитных маркеров.

1.4.4 Экспрессия генов.

1.5 Молекулярно-генетические изменения, используемые для прогнозировании течения рака легкого.:.

1.5.1 Аллельный полиморфизм протоорсогенов.

1.5.2 Мутации онкогенов и генов-супрессоров.

1:5.3 Нарушения микросателлитных маркеров.

I.5.4 Экспрессия генов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Соматические и наследственные молекулярно-генетические изменения, ассоциированные с развитием немелкоклеточного рака легкого»

В настоящее время рак легкого (PJI) является наиболее распространенной формой злокачественных опухолей в промышленно развитых странах [Landis et al., 1998; Pisani and Spiro, 1999]. Кроме того, это заболевание имеет, как правило, агрессивное течение и плохой прогноз. Таким образом, выявление факторов, детерминирующих риск возникновения или прогрессию PJI представляется одной из наиболее актуальных проблем молекулярной онкологии.

Важную роль в возникновении немелкоклеточного рака легкого (HMPJT) играют канцерогенные факторы внешней среды, особенно канцерогены табачного дыма. Предполагается, что значительную опасность представляет ионизирующее излучение, а также хронические неспецифические заболевания легких (XH3JI), нередко являющиеся фоновыми процессами для данного заболевания [Чучалин А.Г. с соавт., 1998; Заридзе Д.Г., 2000].

В настоящее время не подлежит сомнению, что вероятность возникновения PJI, его гистогенез и характер прогрессии в значительной степени определяются как наследственными особенностями генома, так и характером его повреждений в процессе жизнедеятельности организма [Зборовская И.Б. и Татосян А.Г., 1998]. Наследственная предрасположенность к развитию тех или иных форм опухолей определяется наличием индивидуальных комбинаций аллелей различных генов и некодирующих последовательностей. В этой связи значительный интерес представляет аллельный полиморфизм в локусе протоонкогена Hras 1. Установлена статистически достоверная ассоциация между наличием у индивидуума определенных аллелей Hras 1 и повышенным риском развития рака молочной железы, толстой кишки, мочевого пузыря и острой лейкемии [Krontiris et al., 1993]. В ряде исследований подобная связь была показана и в отношении PJI, хотя информация по данному вопросу противоречива [см. Гл. 1.3.1].

Среди соматических нарушений генома наибольшего внимания заслуживают делеции различных Локусов хромосом Зр, 9р21 и 17р 13, мутации в генах K-ras и р53, а также гиперметилирование промотора гена р1бШК4А, которые являются наиболее частыми и ранними молекулярными нарушениями, регистрируемыми при различных типах РЛ [Sekido et al, 1998; Zochbauer-Muller et al., 2001]. Многочисленные исследования, проведенные за последние несколько лет, показали, что данные изменения могут быть выявлены в образцах мокроты, бронхиального лаважа и плазмы крови, полученных от больных PJL Эти результаты позволяют рассматривать генетические абберации в качестве перспективных маркеров для ранней диагностики данного заболевания. Использование молекулярных маркеров представляется особенно важным в силу того, что современные методы диагностики PJI не позволяют обнаружить опухоль на раннней стадии, когда условия для ее лечения и прогноз наиболее благоприятны [Porter, 2000]. Однако их внедрение в клиническую практику ограничивается отсутствием убедительных данных об их специфичности в отношении онкопатологии. Таким образом, результаты тестирования индивидуумов, имеющих высокий риск возникновения РЛ и здоровых доноров с использованием наиболее перспективных молекулярных маркеров на сегодняшний день представляется крайне необходимыми.

Другим частым соматическим нарушением в клетках НМРЛ являются делеции различных локусов теломерного района короткого плеча хромосомы 1, которые ассоциированы с поздними стадиями заболевания и могут иметь прогностическое значение [Gasparian et al., 1998]. Предполагается, что этот район содержит ген (гены) -супрессор, инактивация которого существенна для прогрессии НМРЛ. Основным способом картирования таких генов является анализ потери гетерозиготности высокополиморфных микросателлитных маркеров, с высокой частотой распределенных по всему геному. Среди генов, локализованных в настоящей области на сегодняшний день наиболее вероятным кандидатом на роль опухолевого супрессора является ген р73 (1р36.33). Продукт этого гена проявляет структурное и отчасти функциональное сходство с известным опухолевым супрессором р53 [Kaghad et al., 1997; Jost et al., 1997]. Однако в отличие от р53, нарушение функций которого является чрезвычайно частым генетическим событием при многих видах неоплазий, в том числе и при РЛ, мутации в гене р73 в опухолях человека, не были обнаружены [Nomoto et al., 1998; Mai et al., 1998a; Icyimia et al., 1999; Yokomizo et al., 1999]. Кроме того, информация о характере экспрессии данного гена при НМРЛ и в нормальном бронхиальном эпителии недостаточна и противоречива [Nomoto et al., 1998; Mai et al., 1998c],

Целью данной работы являлся анализ наследственных факторов и соматических молекулярно-генетических изменений ассоциированных с развитием НМРЛ и изучение возможности их использования в клинической практике для формирования групп риска, повышения возможностей ранней диагностики а также точности прогнозирования течения данного заболевания.

В соответствии с поставленной целью предполагалось решить следующие экспериментальные задачи:

1. Создать банк нуклеиновых кислот, выделенных из операционного материала больных немелкоклеточным раком легкого, биопсийиных материалов и клеток периферической крови индивидуумов, имеющих высокий риск возникновения данной патологии, а также здоровых доноров.

2. Исследовать полиморфные аллели минисателлита Hrasl как молекулярные маркеры, ассоциированные с риском возникновения рака легкого и хронических неспецифических заболеваний легких.

3. Исследовать мутации гена K-ras, гиперметилирование промотора генар16ШК4А и нарушения микросателлитных маркеров, расположенных в семи хромосомных районах, наиболее часто делецируемых в клетках немелкоклеточного рака легкого, в бронхиальном эпителии ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС и курильщиков, не имевших контакта с радиацией, в сравнении с индивидуумами, не подвергавшимися канцерогенной экспозиции.

4. Исследовать частоту потери гетерозиготности микросателлитных маркеров локализованных в субтеломерной и теломерной областях короткого плеча хромосомы 1 при немелкоклеточном раке легкого. Определить возможность использования детекции этих'маркеров для прогнозирования течения данного заболевания.

5. Исследовать частоту делеций гена р73 в опухолях легких и изучить характер его экспрессии в клетках немелкоклеточного рака легкого и нормальном бронхиальном эпителии.

В рамках данной работы была впервые обнаружена повышенная частота "редких" аллелрй минисателлита Hras 1 у пациентов с XH3JI. Мы впервые показали, что присутствие радиоактивной пыли в альвеолярных макрофагах ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС коррелирует с появлением определенного спектра молекулярных нарушений их в бронхиальном эпителии. Был подобран новый спектр молекулярных маркеров, ассоциирующийся с присутствием диспластических изменений в бронхиальном эпителии индивидуумов, подвергшихся канцерогенной экспозиции и позволяющий прогнозировать вероятность их появления в отдаленные сроки. Нам удалось осуществить 9 подробное картирование делеций в субтеломерной и теломерной областях короткого плеча хромосомы 1 в клетках HMPJI и исключить генр73 из списка потенциальных супрессоров РЛ.

Результаты, полученные в ходе проведенного исследования имеют не только теоретическое значение для понимания механизмов возникновения НМРЛ и ХНЗЛ но и практическую ценность. Принимая во внимание результаты настоящей работы, в НИИ Пульмонологии МЗ РФ была учреждена программа, имеющая своей целью удаление радиоактивных частиц из легких ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС с помощью терапевтических бронхо-альвеолярных лаважей (БАЛ).

Молекулярно-генетические маркеры, исследованные в данной работе, могут быть использованы для формирования групп канцерогенного риска, ранней диагностики РЛ и прогнозирования течения данного заболевания. Необходимо отметить, что методы, использованные в настоящем исследовании, вполне доступны и могут быть адаптированы к применению в клинических лабораториях.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Чижиков, Виктор Викторович

IV. Выводы.

1. Частота встречаемости "редких" аллелей минисателлита протоонкогена Hrasl достоверно повышена у больных немелкоклеточным раком легкого и хроническими неспецифическими заболеваниями легких по сравнению со здоровыми У индивидуумами.

2. Наличие в геноме "редких" и "тяжелых" аллелей минисателлита Hrasl является признаком неблагоприятного прогноза для больных немелкоклеточным раком легкого. Генотип al/al ассоциирован с благоприятным прогнозом течения данного заболевания.

3. Молекулярные нарушения, характерные для немелкоклеточного рака легкого, обнаружены в бронхиальном эпителии 72.2% курящих и 57.1% некурящих ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, а также 57.1% курильщиков, не имевших контакта с радиацией, но ни у одного из 23 индивидуумов не подвергавшихся канцерогенной экспозиции. Экспозиция канцерогенами табачного дыма и длительное присутствие радиоактивной пыли в легких коррелируют с появлением аллельных делеции локусов Зр12, Зр14.2, Зр21, Зр22-24, Зр25, 9р21 и 17р13, а также мутациями гена K-ras и гиперметилированием промотора гена р1бШК4А . Частота делеций в локусе Зр14.2 достоверно повышена у ликвидаторов аварии на ЧАЭС по сравнению с курильщиками, не имевшими контакта с радиацией.

4. Молекулярные нарушения в клетках бронхиального эпителия индивидуумов, подвергнувшихся канцерогенной' экспозиции, обнаруживаются раньше гистологических изменений. Повышенное количество молекулярных изменений (преимущественно мутации гена K-ras, гиперметилирование промотора гена р16ШК4А а также делеции локусов Зр14.2, Зр25 и 17р13) было зарегистрировано в дисплазиях и фокусах нормального эпителия или гиперплазиях/метаплазиях, впоследствии превратившихся в дисплазии.

5. В бронхиальном эпителии индивидуумов, подвергнувшихся канцерогенной экспозиции потеря геторозиготности локуса Зр14.2 коррелирует с пониженным уровнем экспрессии мРНК гена FHIT, локуса Зр22-24 - с пониженной экспрессией мРНК гена hMLHl и микросателлитной нестабильностью, а локуса 9р21 и гиперметилирование промотора р16ШК4А - с пониженным уровнем экспрессии мРНК данного гена

6. Определены два наименьших района перекрывания делеций на коротком плече хромосомы 1: НР1 (D1S417-D1S2730) и НР2 (D1S450-D1S243), потеря

1.6. Заключение.

Несмотря на постоянную модернизацию методов диагностики, большинство пациентов на момент постановки диагноза имеют неоперабельную форму заболевания. Кроме того, у 75% больных наблюдаются постоперационные рецидивы и метастазы [Горбунова и Бесова, 1998]. В настоящее время предпринимаются постоянные попытки, направленные на улучшение выживаемости больных РЛ. Помимо совершенствования непосредственно

35 хирургических и терапевтических методов лечения они также сосредоточены на формировании групп канцерогенного риска, разработке новых методов ранней диагностики и прогнозирования течения данного заболевания. Использование достижений молекулярной онкологии в клинической практике позволяют надеяться на существенное улучшение результатов лечения этого грозного заболевания в недалеком будущем. Использование молекулярно-генетических тестов может расширить возможности диагностики онкопатологии легких а также способствовать разработке более точных прогностических критериев. В недалеком будущем это может значительно повысить эффективность медицинской помощи и существенно снизить затраты на обследование и лечение онкологических больных. Таким образом, работы, направленные на изучение молекулярно генетических нарушений в клетках PJI представляются очень актуальными. Эти исследования необходимы для разработки более специфичных молекулярных маркеров, а также более чувствительных методов их детекции.

П МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

П.1 Характеристика обследованных больных.

В исследование включены 266 больных НМРЛ, 53 пациента с ХНЗЛ и 207 здоровых доноров. Количество индивидуумов, препараты которых были проанализированы в нашей работе, приводится в табл. 2 и в соответствующих разделах главы III (Результаты собственных исследований).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чижиков, Виктор Викторович, 2001 год

1. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза // М., Мир, 1978. 463 с.

2. Гаспарьян А.В., Зборовская И.Б., Мукерия А.Ф., Пахомов А.Г., Татосян А.Г, Заридзе Д.Г. Редкие аллели минисателлита Hras 1 ассоциируются с повышенным риском возникновения аденокарцином легкого у человека // Генетика. 1998. Т.34. С.1537-1541.

3. Гланц С. Медико-биологическая статистика. // М., Практика, 1999. 459 с.

4. Горбунова В.А., Бесова Н.С. Лечение распространенных форм немелкоклеточного рака легкого. Сб статей "Новое в терапии рака легкого", М., 1998, С.48-57.

5. Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е. Рак легкого // М., Радикс, 1994. 209 с.

6. Заридзе Д.Г. Эпидемиология и этиология злокачественных новообразований // Канцерогенез / Под ред. Д.Г. Заридзе. М.: Научный мир, 2000. С.21-56.

7. Зборовская И.Б., Татосян А.Г. Молекулярно-генетические маркеры при раке легкого: онкогены и гены-супрессоры. Сб статей "Новое в терапии рака легкого", М., 1998, С.5-17.

8. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза//Биохимия. 2000. Т.65. С.5-34.

9. Полоцкий Б.Е. Рак легкого. Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук, Москва, 1995.

10. Татосян А.Г. Онкогены // Канцерогенез / Под ред. Д.Г. Заридзе. М.: Научный мир, 2000. С.57-74.

11. Трахтенберг А.Х. Рак легкого М., Медицина, 1987. 303 с.

12. Чумаков П.М. р53: выбор между жизнью и смертью // Биохимия. 2000. Т.65. С.34-48.

13. Чучалин А.Г., Черняев А.Л., Вуазен К. Патология органов дыхания у ликвидаторов аварии на Чернобыльской АЭС. М., Грантъ, 1998. 190 с.

14. Aaltonen LA, Peltomaki P, Leach FS, Sistonen P, Pylkkanen L, Mecklin JP, Jarvinen H, Powell SM, Jen J, Hamilton SR. Clues to the pathogenesis of familial colorectal cancer // Science. 1993. V.260. P.812-816.

15. Amundson S.A., Myer T.G., Fornance A. Roles for p53 in growth arrest and apoptosis: putting on the brakes after genotoxic stress // Oncogene. 1998. V.17. P.3287-3299.

16. Auerbach 0, Stout AP, Hammond FC, Garfinkel L. Changes in bronchial epithelium in relation to smoking and cancer of the lung // New Engl J Med. 1961. V. 265. P.253-267.

17. Bargmann C, Hung M, Weinberg R. The neu oncogene encodes an epithelial groth factor-related protein // Nature. 1986. V.319. P.226-230.

18. Bieche I., Champeme M.N., Matifas F., Cropp C.S., Callahan R., Lidereau R. Two distinct regions involved in lp deletion in human primary breast cancer // Cancer Res. 1993. V.53. P. 1990-1993.

19. Bieche I, Khodja A, Lidereau R. Deletion mapping of chromosomal region lp32-pter in primary breast cancer // Genes Chromosomes Cancer. 1999. V.24. P.255-263.

20. Bos JL. The ras gene family and human carcinogenesis // Mutat Res. 1988. V.195. P.255-271.

21. Burd CG, Dreyfiiss G. RNA binding specificity of hnRNP Al: significance of hnRNP Al high-affinity binding sites in pre-mRNA splicing // EMBO J. 1994. V. 13. P. 1197-204.

22. Capon D.J., Chen E.Y., Levinson A.D., Seeburg P.H., Geoddel D.V. Complete nucleotide sequences of the T24 human bladder carcinoma oncogene and its normal homologue//Nature. 1983. V.302. P.33-37.

23. Caporaso N, DeBaun M, Rothman N. Lung cancer and CYP2D6 (the debrisoquine plymorphism): sources of heterogeneity in the proposed association // Pharmacogenetics. 1995. V.5.P.129-134.

24. Chang JW, Chen YC, Chen CY, Chen JT, Chen SK, Wang YC. Correlation of genetic instability with mismatch repair protein expression and p53 mutations in non-small cell lung cancer // Clin Cancer Res. 2000. V.6. P. 1639-46.

25. Chen ZL, Perez S, Holmes EC, Wang HJ, Coulson WF, Wen DR, Cochran AJ. Frequency and distribution of occult micrometastases in lymph nodes of patients with non-small-cell lung carcinoma // J Natl Cancer Inst. 1993. V. 17. P.493-8.

26. Chiba I., Takahashi Т., Nau M. Mutation of p53 gene a frequently in primary, resected non-small cell lung cancer // Oncogene. 1990. V.5. P. 1603-1610.

27. Christinsen P, Gotzsche P, Brosen K. The sparteine /debrisoquine (CYP2D6) oxidation polymorphism and the risk of lung cancer: a meta analysis // Eur. J. Clin. Pharmocol. 1997. V.51. P.389-393.

28. Chowdary DR, Dermody JJ, Jha KK, Ozer HL. Accumulation of p53 in a mutant cell line defective in the ubiquitin pathway // Mol Cell Biol. 1994. V. 14. P. 1997-2003.

29. Cohen-Jonathan E., Bernhard E., McKenna W.G. How does radiation kill cells? // Current opinion in chemical biology. 1999. V.3. P.77-83.

30. Cooper CA, Carby FA, Bubb VJ, Lamb D, Kerr KM, Wyllie AH. The pattern of K-ras mutation in pulmonary adenocarcinoma defines a new pathway of tumour development in the human lung // J Pathol. 1997. V. 181. P.401-404.

31. Cote RJ, Beattie EJ, Chaiwun B*Shi SR, Harvey J, Chen SC, Sherrod AE, Groshen S, Taylor CR. Detection of occult bone marrow micrometastases in patients with operable lung carcinoma // Ann Surg. 1995. V.222. P.415-423.

32. Cox G, Walker FA, Muller S, Abrams KR, Steward WP, O'Byrne KJ. Does immunointensity account for the differences in prognostic significance of Bcl-2 expression in non-small cell lung cancer? // Pathol Oncol Res. 2000. V.6. P.87-92.

33. Crofts F, Taioli E, Trachman J, Cosma G, Currie D, Toniolo P, Garte S. Functional significance of different human CYP 1A1 genotyes // Carcinogenesis. 1994. V.15. P.2961-2963.

34. Dameron KM, Volpert OV, Tainsky MA, Bouck N. Control of angiogenesis in fibroblasts by p53 regulation of thrombospondin-1 // Science. 1994. V.9. P. 1582-1584.

35. De Laurenzi V., Costanzo A., Barcaroli D., Terrinoni A., Falco M., Annicchiaro-Petruzzelli M., Levrero M., Melino G. Two new splice variants, gamma and delta, with different transcriptional activity // J Exp Med. 1998. V.188. P. 1763-1768.

36. Ding S.F., Habib N.A., Delhanty J., Wiliamson R., Dooley J. Loss of heterozygosity on chromosome 1 and 11 in carcinoma of the pancreas // Br J Cancer. 1992. V.65. P. 809812.

37. Donehower LA, Harvey M, Slagle BL, McArthur MJ, Montgomery CA Jr, Butel JS, Bradley A. Mice deficient for p53 are developmentally normal but susceptible to spontaneous tumours //Nature. 1992. V.19. P.215-221.

38. Ebina M, Steinberg SM, Mulshine JL, Linnoila RI. Relationship of p53 overexpression and up-regulation of proliferating cell nuclear antigen with the clinical course of non-small cell lung cancer // Cancer Res. 1994. V.54. P.2496-2503.

39. Esteller M, Sanchez-Cespedes M, Rosell R, Sidransky D, Baylin SB, Herman JG. Detection of aberrant promoter hypermethylation of tumor suppressor genes in serum DNA from non-small cell lung cancer patients // Cancer Res. 1999. V.59. P.67-70.

40. Field Ж, Liloglou T, Xinarianos G, Prime W, Fielding P, Walshaw MJ, Turnbull L. Genetic alterations in bronchial lavage as a potential marker for individuals with a high risk of developing lung cancer // Cancer Res. 1999. V.59. P.2690-2695.

41. Fielding P, Turnbull L, Prime W, Walshaw M, Field Ж. Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1 up-regulation in bronchial lavage specimens: a clinical marker of early lung cancer detection // Clin Cancer Res. 1999. V.5. P.4048-4052.

42. Fishel R, Lescoe MK, Rao MR, Copeland NG, Jenkins NA, Garber J, Kane M, Kolodner R. The human mutator gene homolog MSH2 and its association with hereditary nonpolyposis colon cancer // Cell. 1993. V.3. P. 1027-1038.

43. Fleischhacker M, Beinert T, Possinger K. Molecular genetic characteristics of lung cancer-useful as real' tumor markers? // Lung Cancer. 1999. V.25. P.7-24.

44. Fong C.T., Dracopoli N.C., White P.S., Merrill P.T., Housman D.E., Brodeur G. Loss of heterozyhosity of the short arm of chromosome 1 in human neuroblastomas: correlation with N-myc amplification // Proc Natl Acad Sci USA. 1989. V.86. P.3753-3757.

45. Fong KM, Zimmerman PV, Smith PJ. Tumor progression and loss of heterozygosity at 5q and 18q in non-small cell lung cancer // Cancer Res. 1995a. V.55. P.220-223.

46. Fong KM, Kida Y, Zimmerman PV, Smith PJ. Loss of heterozyhosity frequently affects chromosome 17q in non-small cell lung cancer // Cancer Res. 1995b. V.55. P.4268-4272.

47. Fong K.M., Kida Y., Zimmerman P.V., Smith P.J. MYCL genotypes and loss of heterozyhosity in non-small cell lung cancer // Br J Cancer. 1996. V.74. P. 1975-1978.

48. Fontanini G, Vignati S, Bigini D, Mussi A, Lucci M, Angeletti C, Basilo F, Bevilacqua G. Bcl-2 protein: a prognostic factor inversely correlated in non-small-cell lung cancer//Br J Cancer. 1997. V.71. P. 1003-1007.

49. Franklin WA, Gazdar AF, Haney J, Wistuba II, La Rosa FG, Kennedy T, Ritchey DM, Miller YE. Widely dispersed p53 mutation in respiratory epithelium. A novel mechanism for field carcinogenesis // J Clin Invest. 1997. V.15. P.2133-2137.

50. Foulds L. Neoplastic development. Acad. Press.- London.-1969.-Vol. 1.

51. Gasparian AV, Laktionov KK, Belialova MS, Pirogova NA, Tatosyan AG, Zborovskaya IB. Allelic imbalance and instability of microsatellite loci on chromosome lp in human non-small-cell lung cancer // Br J Cancer. 1998. V.77. P. 1604-1611.

52. Gazdar A. Molecular markers for the diagnosis and prognosis of lung cancer // Cancer. 1992. V.69. P. 1592-1599.

53. Gendrel C., Boulet A., Dutreix M. (CA/GT)n microsatellites affect homologous recombination during yeast meiosis // Genes & Dev. 2000. V.14. P. 1261-1268.

54. Graeber A.J., Osmanian C., Lowe S.W., Graccia A.J. Hipoxia-mediated selection of cells with diminished apoptotic potential in solid tumors // Nature. 1996 V.379 P.88-91.

55. Green M., Krontiris T.G. Allelic variation of reporter gene activation by the Hras 1 minisatellite // Genomics. 1993. V.17. P.429-434.

56. Greenblatt MS, Bennett WP, Hollstein M, Harris CC. Mutations in the p53 tumor suppressor gene: clues to cancer etiology and molecular pathogenesis // Cancer Res. 1994. V.15. P.4855-4878.

57. Harbour JW, Lai SL, Whang-Peng J, Gazdar AF, Minna JD, Kaye FJ. Abnormalities in structure and expression of the human retinoblastoma gene in SCLC // Science. 1988. V.241. P.353-357.

58. Harpole DH Jr, Herndon JE 2nd, Wolfe WG, Iglehart JD, Marks JR. A prognostic model of recurrence and death in stage I non-small cell lung cancer utilizing presentation, histopathology, and oncoprotein expression // Cancer Res. 1995. V.55. P.51-56.

59. Harrington EA, Fanidi A, Evan GI. Oncogenes and cell death // Curr Opin Genet Dev. 1994. V.4. P. 120-129.

60. Hartl D.L., Clark A.G. Principles of population genetics // Sunderland, Sinauer associates, 1989. chapter 1.

61. Heighway J., Tatcher N, Cerny Т., Hasleton P.S. Genetic predisposition to human lung cancer // Br J Cancer. 1986. V.53. P.453-457.

62. Herman JG, Graff JR, Myohanen S, Nelkin BD, Baylin SB. Methylation-specific PCR: a novel PCR assay for methylation status of CpG islands // Proc Natl Acad Sci U S A. 1996. V.93. P.9821-9826.

63. Hermeking H, Lengauer C, Polyak К, He TC, Zhang L, Thiagalingam S, Kinzler KW, Vogelstein B. 14-3-3 sigma is a p53-regulated inhibitor of G2/M progression // Mol Cell. 1997. V.l.P.3-11.

64. Herzog C.R., Wang Y., You M. Allelic loss of distal chromosome 4 in mous lung tumors localize a putative tumor suppressor gene to a region homologous with human chromosome 1 p36//Oncogene. 1995. V.ll. P.1811-1815.

65. Hirsch FR, Franklin WA, Gazdar AF, Bunn PA Jr. Early detection of lung cancer: clinical perspectives of recent advances in biology and radiology // Clin Cancer Res. 2001. V.7. P.5-22.

66. Hirvonen A, Saarokoski S, Linnainmaa K, Koskinen K, HusgafVel-Pursiainen K, Mattson K, Vainio H. Glotatione S-transferasa and N-acetyltransferase genotypes and asbestos-associated pulmonary disoders // J Natl Cancer Inst. 1996. V.88. P.1853-1856.

67. Hoggard N., Brintnell В., Howell A., Weissenbach J., Varley J. Allelic imbalance on chromosome 1 in human breast cancer. 2. Microsatellite repeat analysis // Genes Chrom Cancer. 1995. V. 12. P. 24-31.

68. Huang CL, Taki T, Adachi M, Konishi T, Higashiyama M, Kinoshita M, Hadama T, Miyake M. Mutations of p53 and K-ras genes as prognostic factors for non-small cell lung cancer // Int J Oncol. 1998. V.12. P.553-563.

69. Ichihara A, Tanaka K. Roles of proteasomes in cell growth // Mol Biol Rep. 1995. V.21. P.49-52.

70. Icyimia S., Nimura Y., Kageyama H. P73 at chromosome lp36.3 is lost in advanced stage neuroblastoma but its mutation is infrequent // Oncogene. 1999. V.18. P. 1061-1066.

71. Ji L, Fang B, Yen N, Fong K, Minna JD, Roth JA. Induction of apoptosis, inhibition of tumorigenecity, and suppression of tumor growth by adenovirus vector-mediated FHIT gene overexpression in vitro and in vivo // Cancer Res. 1999. V.59. P.3333-3339.

72. Jiang W, Kahn SM, Guillem JG, Lu SH, Weinstein Ш. Rapid detection of ras oncogenes in human tumors: applications to colon, esophageal, and gastric cancer // Oncogene. 1989. V.4. P.923-928.

73. Jiang S, Sato Y, Kuwao T, Kameya T. Expression of Bcl-2 oncogene protein is prevalent in small cell lung carcinomas // J Pathol. 1995. V.77. P. 135-138.

74. Jiang S, Kameya T, Sato Y, Yanase N, Yoshimura H, Kodama T. Bcl-2 protein expression in lung cancer and close correlation with neuroendocrine differentiation // Am J Pathol. 1996. V.148. P.837-846.

75. Johnson B, Makneh R, Simmons A, Gazdar A, Burch D, Cashell А. Мус family DNA amplification in SCLC primary tumors and cell lines. Cancer Res. 48:5163-5166, 1988.

76. Jost C.A., Marin M.C. and Kaelin W.G. p73 is a human p53-related protein that can induce apoptosis // Nature. 1997. V.389. P. 191-194.

77. Kaghad M., Bonnet H., Yang A., Creancier L., Biscan J.C., Lelias J.M. Monoallellically expressed gene related to p53 at lp36, a region frequently deleted in neuroblastoma and other human cancers // Cell. 1997. V.90. P.808-819.

78. Kaiser U, Schilli M, Haag U, Neumann K, Kreipe H, Kogan E, Havemann K. Expression of bcl-2 protein in small cell lung cancer // Lung Cancer. 1996. V.15. P.31-40.

79. Kamb A, Gruis NA, Weaver-Feldhaus J, Liu Q, Harshman K, Tavtigian SV, Stockert E, Day RS 3rd, Johnson BE, Skolnick MH. A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types // Science. 1994. V.264. P.436-440.

80. Kasperczyc A., DiMartino N.A., Krontiris T.G. Minisatellite allele diversification: the origin of rare alleles at the Harasl'locus // Am J Hum Genet. 1990. V.47. P.854-859.

81. Kawajiri K, Eguchi H, Nakachi K, Sekiya T, Yamamoto M. Association of CYPA1 germ line polymorphisms with mutations of the p53 gene in lung cancer // Cancer Res. 1996. V.56. P.72-76.

82. Kawashima K, Nomura S, Hirai H, Fukushi S, Karube T, Takeuchi K, Naruke T, Nishimura S. Correlation of L-myc RFLP with metastasis, prognosis and multiple cancer in lung-cancer patients // Int J Cancer. 1992. V.50. P.557-561.

83. Keohavong P, DeMichele MA, Melacrinos AC, Landreneau RJ, Weyant RJ, Siegfried JM. Detection of K-ras mutations in lung carcinomas: relationship to prognosis // Clin Cancer Res. 1996. V.2. P.411-418.

84. Kern J, Schwartz D, Nordberg J, Weiner D, Greene M, Torney L, Robinson R. pl85neu expression in human lung adenocarcinomas predict shortened survival // Cancer Res. 1990. V.50. P.5184-5191.

85. Kim YC, Park КО, Kern JA, Park CS, Lim SC, Jang AS, Yang JB. The interactive effect of Ras, HER2, P53 and Bcl-2 expression in predicting the survival of non-small cell lung cancer patients // Lung Cancer. 1998. V.22. P.181-90.

86. Kim DH, Nelson HH, Wiencke JK, Christiani DC, Wain JC, Mark EJ, Kelsey KT. Promoter methylation of DAP-kinase: association with advanced stage in non-small cell lung cancer // Oncogene. 2001a. V.20. P. 1765-1770.

87. Kim DH, Nelson HH, Wiencke Ж, Zheng S, Christiani DC, Wain JC, Mark EJ, Kelsey KT. pl6(Ink4a) and histology-specific methylation of cpg islands by exposure to tobacco smoke in non-small cell lung cancer // Cancer Res. 2001b. V.61. P.3419-3424.

88. Kraus J.A., Albrecht S., Wiestler O., von Schweinits D., Piesch T. Loss of heterozyhosity on chromosome 1 in human hepatoblastoma // Int J Cancer. 1996. V.67. P.467-471.

89. Krontiris T.G., Di Martino N.A., Colb M., Parkinson D.R. Unique allelic restriction fragments of the human Ha-ras locus in leukocyte and tumor DNAs of cancer patients // Nature. 1985. V.313. P.369-374.

90. Krontiris T.G., DiMartino N.A., Mitcheson H.D., Lonergan J.A., Begg C., Parkinson D.R. Human hypervariable sequences in risk assessment: rare Ha-ras alleles in cancer patients //Environ. Health Perspect. 1987. V.76. P.147-153.

91. Landis, S.H., Murray, Т., Bolden, A., and Wingo, P.A. Cancer statistics, 1998. CA Cancer J Clin. 1998. V.48. P.6-29.

92. Lavigueur A, Maltby V, Mock D, Rossant J, Pawson T, Bernstein A. High incidence of lung, bone, and lymphoid tumors in transgenic mice overexpressing mutant alleles of the p53 oncogene // Mol Cell Biol. 1989. V.9. P.3982-3991.

93. Lee JS, Yoon A, Kalapurakal SK, Ro JY, Lee JJ, Tu N, Hittelman WN, Hong WK. Expression of p53 oncoprotein in non-small-cell lung cancer: a favorable prognostic factor//J Clin Oncol. 1995. V.13. P.1893-1903.

94. Legrand M, Stucker I, Marez D, Sabbagh N, LoGuidice J, Broly F. Influence of a mutation reducing the catalytic activity of the cytochrome P450 CYP2D6 on lung cancer susceptibility // Carcinogenesis. 1996. V. 17. P.2267-2269.

95. Li S, Rosell R, Urban A, Font A, Ariza A, Armengol P, Abad A, Navas JJ, Monzo M. K-ras gene point mutation: a stable tumor marker in non-small cell lung carcinoma // Lung Cancer. 1994. V.ll. P. 19-27.

96. Lidereau R, Escot C, Theillet C, Champeme MH, Brunet M, Gest J, Callahan R. High frequency of rare alleles of the human c-Ha-ras-1 proto-oncogene in breast cancer patients // J Natl Cancer Inst. 1986. V.77. P.697-701.

97. Liester I., Weith A., Bruderlien S., Schwab M. Human colorectal cancer: high frequency of deletions at chromosome lp35 // Cancer Res. 1990. V.50. P.7232-7535.

98. Liloglou T, Ross H, Prime W, Donnelly RJ, Spandidos DA, Gosney JR, Field Ж. p53 gene aberrations in non-small-c ell lung carcinomas from a smoking population // Br J Cancer. 1997b. V.75. P. 1119-1124.

99. Liloglou T, Maloney P, Xinarianos G, Hulbert M, Walshaw MJ, Gosney JR, Turnbull L, Field Ж. Cancer-specific genomic instability in bronchial lavage: a molecular tool for lung cancer detection // Cancer Res. 2001. V.61. P.1624-1628.

100. Lindstedt B.A., Ryberg D., Haugen A. Rare alleles at different VNTR loci among lung-cancer patients with microsatellite instability in tumors // Int J Cancer. 1997. V.70. P.412-415.

101. Lindstedt B-A., Ryberg D., Zienolddiny S., Khan H., Haugen A. Hras 1 alleles as susceptibility markers for lung cancer: relationship to microsatellite instability in tumors // Anticancer Res. 1999. V.19. P.5523-5528.

102. Linke S.P., Clarkin K.S., DiLeonardo A., Tsou A., Wahl G.M. A reversible, p53-dependent G0/G1 cell cycle arrest induced by ribonucleotidt depletion in the absence of detectable DNA damage // Genes Dev. 1996. V.10. P.934-947.

103. Little C, Nau M, Carney D, Gazdar A, Minna J. Amplification and expression of the c-myc oncogene in human lung cancer cells // Nature. 1983. V.306. P.194-196.

104. London S, Daly A, Leathart J, Navidi W, Carpenter C, Idle J. Genetic polymorphism of CYP2D6 and lung cancer risk in African-Americans and Caucasians in Los-Angeles County // Carcinogenesis. 1997. V. 18. P. 1203-1214.

105. Macchiarini P, Fontani G, Hardin M, Squartini F, Angeletti C. Relation of neovascularisation to metastasis of non-small cell lung cancer // Lancet. 1992. V.340. P.145-146.

106. Mai M., Huang H., Reed C., Qian C., Smith J.B., Alderete В., Jenkins R., Smith D.I., Liu W. Genomic organization and mutation analysis of p73 in oligodendromas with chromosome lp-arm deletions//-Genomics. 1998a. Y.51. P.359-363.

107. Mai M., Qian C., Yokomizo A., Tindall D.J., Bostwick D., Polychronakos С, Liu W. Loss of imprinting and allele switching of p73 in renal cell carcinoma // Oncogene. 1998b. V. 17. P. 1739-1741.

108. Mai M., Yokomizo A., Qian C., Yang P., Tindall D.J., Smith D.J., Liu W. Activation ofp73 silent allele in lung cancer // Cancer Res. 1998c. V.58. P.2347-2349.

109. Mao L, Hruban RH, Boyle JO, Tockman M, Sidransky D. Detection of oncogene mutations in sputum precedes diagnosis of lung cancer // Cancer Res. 1994. V.54. P. 16341637.

110. Martinsson Т., Sjoberg R.M., Hedborg F., Kogner P. Deletion of Chromosome lp loci and micro satellite instability in neuroblastomas analysed with short-tandem repeat polymorphisms//Cancer Res. 1995. V.55. P.5681-5686.

111. Matsuzaki M., Nagase S Abe Т., Miura K., Shiiba K., Horii A. Detailed mapping on chromosome Ip32-p36 in human colorectal cancer: identification of three regions of common allelic loss // Int J Oncol. 1998. V.13. P.1229-1233.

112. Mattern J, Koomagi M, Volm M. Association of vascular endothelian growth factor expression with intratumaral vessel density and tumor cell proliferation in human epidermoid lung carcinoma // Br J Cancer. 1996. V.73. P.931-934.

113. McLaren R, Kuzu I, Dunnill M, Harris A, Lane D, Gatter КС. The relationship of p53 immunostaining to survival in carcinoma of the lung // Br J Cancer. 1992. V.66. P.735-738.

114. Merlo A, Herman JG, Mao L, Lee DJ, Gabrielson E, Burger PC, Baylin SB, Sidransky D. 5' CpG island methylation is associated with transcriptional silencing of the tumour suppressor pl6/CDKN2/MTSl in human cancers // Nat Med. 1995. V.l. P.686-692.

115. Mills N, Fishman C, Rom W. Increased prevalence of K-ras oncogene mutations in lung adenocarcinoma // Cancer Res. 1995a. V54. P. 1444-1447.

116. Mills NE, Fishman CL, Scholes J, Anderson SE, Rom WN, Jacobson DR. Detection of K-ras oncogene mutations in bronchoalveolar lavage fluid for lung cancer diagnosis // J Natl Cancer Inst. 1995b. V.87. P.1056-1060.

117. Minamoto T, Mai M, Ronai Z. K-ras mutations:early detection in molecular diagnosis and risk assessment of colorectal, pancreas, and lung cancer-a review // Cancer Detection Prev. 2000. V.24. P. 1-12.

118. Micke P, Hengstler JG, Ros R, Bittinger F, Metz T, Gebhard S, Beeh KM, Oesch F, Buhl R. c-erbB-2 Expression in small-cell lung cancer is associated with poor prognosis // Int J Cancer. 2001. V.92. P.474-479.

119. Miozzo M, Sozzi G, Musso .K, Pilotti S, Incarbone M, Pastorino U, Pierotti MA. Microsatellite alterations in bronchial and sputum specimens of lung cancer patients // Cancer Res. 1996. V.56. P.2285-2288.

120. Mitsudomi T, Lyama T, Kusano T, Ohsaki T, Nakanishi R, Shirakusa T. Mutations of the p53 gene as a predictor of poor prognosis in patients with non-small cell lung cancer // Proc Am Assoc Cancer Res. 1993. V.34. P.516.

121. Mitsudomi T, Oyama T, Nishida K, Ogami A, Osaki T, Sugio K, Yasumoto K, Sugimachi K, Gazdar A. Loss of heterozygosity at 3p in non-small cell lung cancer and its prognostic implication//Clinical Cancer Res. 1996. V.2. P.1185-1189.

122. Miyashita T, Harigai M, Hanada M, Reed JC. Identification of a p53-dependent negative response element in the bcl-2 gene // Cancer Res. 1994. V.54. P.3131-3135.

123. Miyashita T, Reed JC. Tumor suppressor p53 is a direct transcriptional activator of the human bax gene // Cell. 1995. V.80. P.293-299.

124. Moll R. Cytokeratins as markers of differentiation. Expression profiles in epithelia and epithelial tumors // VerofFPathol. 1993. V. 142. P. 191-197.

125. Molley J.F., Brother M.B., Fong C.T., White P.S., Brodeur G. Consistent association of lp loss of heterozyhosity with pheochromacytomas from patients with multiple endocrine neoplasia type 2 syndromes // Cancer Res. 1992. V.52. P.770-774.

126. Morgan DO. Cyclin-dependent kinases: engines, clocks, and microprocessors // Annu Rev Cell Dev Biol. 1997. V.13. P.261-291.

127. Mukhopadnhyay Т., Roth J., Maxwell S.A. Altered expression of the p50 subunit of the NF-kB transcription factor complex in non-small cell lung carcinoma // Oncogene. 1995. V.ll. P.999-1003.

128. Nelson MA, Wymer J, Clements N Jr. Detection of K-ras gene mutations in nonneoplastic lung tissue and lung cancers // Cancer Lett. 1996. V. 103. P.115-121.

129. Nelson HH, Christiani DC, Mark EJ, Wiencke Ж, Wain JC, Kelsey KT. Implications and prognostic value of K-ras mutation for early-stage lung cancer in women // J Natl Cancer Inst. 1999. V.91. P.2032-2038.

130. Neumaier M, Gerhard M, Wagener C. Diagnosis of micrometastases by the amplification of tissue-specific genes // Gene. 1995. V.159. P.43-47.

131. Nguyen VN, Mirejovsky P, Mirejovsky T, Melinova L, Mandys V. Expression of cyclin Dl, Ki-67 and PCNA in non-small cell lung cancer: prognostic significance and comparison with p53 and bcl-2 // Acta Histochem. 2000. V.102. P.323-338.

132. Nomoto S., Haruki N., Kondo M., Konishi H., Takahashi Т., Takahashi Т., Takahashi T. Search for mutations and examination of allelic expression imbalance of the p73 gene at lp36.33 in human lung cancers // Cancer Res. 1998. V.58. P. 1380-1383.

133. Ohta Y, Watanabe S, Murakami S, Oda M, Hayashi Y, Nonomura A, Endo Y, Sasaki T. Vascular endothelial growth factor and lymph node metastasis in primary lung cancer //Br J Cancer. 1997. V.76. P.1041-1045.

134. Orita M, Suzuki Y, Sekiya T, Hayashi K. Rapid and sensitive detection of point mutations and DNA polymorphisms using the polymerase chain reaction // Genomics. 1989.V.5. P.874-879.

135. Palmisano WA, Divine KK, Saccomanno G, Gilliland FD, Baylin SB, Herman JG, Belinsky SA. Predicting lung cancer by detecting aberrant promoter methylation in sputum // Cancer Res. 2000. V.60. P.5954-5958.

136. Parkin DM, Pisani P, Ferlay J. Global cancer statistics // С A Cancer J Clin. 1999. V.49. P.33-64.

137. Passlick B, Izbicki JR, Haussinger K, Thetter O, Pantel K. Immunohistochemical detection of P53 protein is not associated with a poor prognosis in non-small-cell lung cancer//J Thorac Cardiovasc Surg. 1995. V.109. P. 1205-1211.

138. Passlick B, Izbicki JR, Kubuschok B, Thetter O, Pantel K. Detection of disseminated lung cancer cells in lymph nodes: impact on staging and prognosis // Ann Thorac Surg. 1996. V.61. P.177-182.

139. Peck K, Sher YP, Shih JY, Roffler SR, Wu CW, Yang PC. Detection and quantitation of circulating cancer cells in the peripheral blood of lung cancer patients // Cancer Res. 1998. V.58. P.:2761-2765.

140. Perri P, Praml C, Savelyeva L, Pillmann A, Schwab M. Fine mapping of distal lp loci reveals TP73 atDlS468 // Cytogenet Cell Genet. 1999. V.84. P.lll-114.

141. Person I, Johansson I, Ingelman-$undberg M. In vitro kinetics of two human CYP1A1 variant enzymes suggested to be associated with interindividual differences in cancer susceptibility //Biochem Biophys Res Commun. 1997. V.231. P.227-230.

142. Petty T.L., Weinmann G.G. Building a national strategy for the prevention and management of and research in chronic obstructive pulmonary disease // JAMA. 1997. V. 277. P. 246-53.

143. Pisani P, Parkin DM, Bray F, Ferlay J. Estimates of the worldwide mortality from 25 cancers in 1990 // Int J Cancer. 1999. V.83. P.870-873.

144. Polyak K, Xia Y, Zweier JL, Kinzler KW, Vogelstein B. A model for p53-induced apoptosis// Nature. 1997. V.389. P.300-305.

145. Porter J, Spiro S. Detection of early lung cancer // Thorax. 2000. V.55. P.56-62.

146. Powell CA, Klares S, O'Connor G, Brody JS. Loss of heterozygosity in epithelial cells obtained by bronchial brushing: clinical utility in lung cancer // Clin Cancer Res. 1999. V.5. P.2025-2034.

147. Rhyu MS. Molecular mechanisms underlying hereditary nonpolyposis colorectal carcinoma // J Natl Cancer Inst. 1996. V.88. P.240-251.

148. Quinlan DC, Davidson AG, Summers CL, Warden HE, Doshi HM. Accumulation of p53 protein correlates with a poor prognosis in human lung cancer // Cancer Res. 1992. V.52. P.4828-4831.

149. Ravi R, Mookerjee B, van Hensbergen Y, Bedi GC, Giordano A, El-Deiry WS, Fuchs EJ, Bedi A. p53-mediated repression of nuclear factor-kappaB RelA via the transcriptional integrator p300 // Cancer Res. 1998. V.58. P.4531-4536.

150. Richardson C, Johnson B. The biology of lung cancer // Semin Oncol. 1993. V.20. P.105-127.

151. Rodenhuis S, Slebis R. Clinical significance of ras oncogene activation in human lung cancer//Cancer Res. 1992. V.52. P.2665-2669.

152. Ronai Z, Yakubovskaya M, Zhang E, et al., K-ras mutation in sputum of patients with or without lung cancer // J Cell Biochem. 1997. V.25 (suppl). P. 172-176.

153. Rosell R, Li S, Skacel Z, Mate JL, Maestre J, Canela M, Tolosa E, Armengol P, Barnadas A, Ariza A. Prognostic impact of mutated K-ras gene in surgically resected non-small cell lung cancer patients // Oncogene. 1993. V.8. P.2407-2412.

154. Raycroft L, Wu HY, Lozano G. Transcriptional activation by wild-type but not transforming mutants of the p53 anti-oncogene // Science. 1990. V.249. P. 1049-1051.

155. Ryberg D., Tefre Т., Skaug V., Stangeland L., Ovrebo S., Naalsund A., Borresen A-L., Haugen A. Allele diversity of the Ha-ras-1 variable number of tandem repeat in Norwegian lung cancer patients // Environ Health Perspect. 1992. V.98. P. 187-189.

156. Ryberg D., Lindstedt B.A., Zienolddiny S., Haugen A. A hereditory genetic marker closely associated with microsatellite instability in lung cancer // Cancer Res. 1995. V.55. P.3996-3999.

157. Saccomanno G, Archer VE, Auerbach O, Saunders RP, Brennan LM. Development of carcinoma of the lung as reflected in exfoliated cells // Cancer. 1974. V.33. P.256-270.

158. Sato S., Nakamura Y., Tsuchya E. 1994. Difference of allelotype between squamos cell lung carcinoma and adenocarcinoma of the lungs // Cancer Res. V.54. P. 5652-5655.

159. Scagliotti G, Micela M, Gubetta L, Leonardo E, Cappia S, Borasio P, Pozzi E. Prognostic significance of Ki-67 labelling in resected non small cell lung cancer // Eur J Cancer. 1993a. V.29. P.363-365.

160. Scagliotti G, Leonardo E, Cappia C, Maseiro P, Micela M, Gubetta L, Pozzi E. Epidermal groth factor receptor and neu-oncogene expression in lung cancer // Proc Am Soc Clin Oncol. 1993b. V. 12. P.238.

161. Schmid G, Wang ZQ, Wesierska-Gadek J. Compensatory expression of p73 in PARP-deficient mouse fibroblasts as response to a reduced level of regularly spliced wild-type p53 protein// BiochemBiophysResCommun. 1999. V.255. P.399-405.

162. Schwerdtle R.F., Storker S., Neuhaus C. 1996. Allelic losses at chromosomes lp, 2p, 6p, Юр, 13q, 17p and 21 q significantly correlate with the chromophobe subtype of renal cell carcinoma // Cancer Res. 1996. V.56. P.2927-2930.

163. Secido Y, Fong K, Minna J. Progress in understanding the molecular pathogenesis of human lung cancer // Biochem Biophis Acta. 1998. V.1378. P.21-59.

164. Serrano M, Hannon GJ, Beach D. A new regulatory motif in cell-cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4 //Nature. 1993. V.366. P.704-707.

165. Sherr CJ. Cancer cell cycles // Science. 1996. V.274. P. 1672-1677.

166. Schramm K, Krause K, Bitroff-Leben A. Activated K-ras is involved in regulation of integrin expression in human colon carcinoma cells. Int J Cancer. 2000. V.86. P. 155-164.

167. Simon M., von Deimling A., Larson J.J. Allelic losses on chromosomes 14,10 and 1 in atypical and malignant meningiomas: a genetic model of meningioma progression // Cancer Res. 1995. V.55. P. 4695-4701.

168. Slebos RJ, Hruban RH, Dalesio O, Mooi WJ, Offerhaus GJ, Rodenhuis S. Relationship between K-ras oncogene activation and smoking in adenocarcinoma of the human lung // J Natl Cancer Inst. 1991. V.83. P.1024-1027.

169. Smith ML, Chen IT, Zhan Q, Bae I, Chen CY, Gilmer TM, Kastan MB, O'Connor PM, Fornace AJ Jr. Interaction of the p53-regulated protein Gadd45 with proliferating cell nuclear antigen // Science. 1994. V.266. P. 1376-1380.

170. Sozzi G., Moizzo M., Donghi R. Deletions of 17p and p53 mutations in preneoplastic lesions of the lung // Cancer Res. 1992. V.52. P. 6079-6082.

171. Sozzi G., Musso K, Ratcliffe C, Goldstraw P, Pierotti M, Pastoriano U. Detection of microsatellite alterations in plasma DNA of non-small cell lung cancer patients: a prospect for early diagnosis // Clin Cancer Res. 1999. V.5.P2689-2692.

172. Sugimura H, Hamada GS, Suzuki I, Iwase T, Kiyokawa E, Kino I, Tsugane S. CYP1A1 and CYP2E1 polymorphism and lung cancer, case-control study in Rio de Janeiro, Brazil // Pharmacogenetics. 1995. V.5. P. 145-148.

173. Sugio K, Ishida T, Yokoyama H, Inoue T, Sugimachi K, Sasazuki T. ras gene mutations as a prognostic marker in adenocarcinoma of the human lung without lymph node metastasis // Cancer Res. 1992. V.52. P.2903-2906.

174. Sunahara M., Ichimia S., Nimura Y., Takada N., Sato Y., Todo S., Nakagawara A. Mutational analysis of the p73 gene localized at chromosome lp36.3 in colorectal carcinomas // Int J Oncol. 1998. V. 13. P.319-323.

175. Suzuki H, Takahashi T, Kuroishi T, Suyama M, Ariyoshi Y, Takahashi T, Ueda R. p53 mutations in non-small cell lung cancer in Japan: association between mutations and smoking // Cancer Res. 1992. V.52. P.734-736.

176. Sweet RW, Yokoyama S, Kamata T, Feramisco JR, Rosenberg M, Gross M. The product of ras is a GTPase and the T24 oncogenic mutant is deficient in this activity // Nature. 1984. V.311. P.273-275.

177. Tager IB, Rosner B, Tishler Py, Speizer FE, Kass EH. Household aggregation of pulmonary function and chronic bronchitis // Am. Rev. Respir. Dis. 1976. V. 114. P. 485492.

178. Taioli E, Crofts F, Trachman J, Demopoulos R, Toniolo P, Garte SJ. A specific African-American CYP1A1 polymorphism is associated with adenocarcinoma of the lung // Cancer Res. 1995. V.55. P.472-473.

179. Takagi Y, Koo LC, Osada H, Ueda R, Kyaw К, Ma CC, Suyama M, Saji S, Takahashi T, Tominaga S. Distinct mutational spectrum of the p53 gene in lung cancers from Chinese women in Hong Kong // Cancer Res. 1995. V.55. P.5354-5357.

180. Takahashi T, Nau MM, Chiba I, Birrer MJ, Rosenberg RK, Vinocour M, Levitt M, Pass H, Gazdar AF, Minna JD. p53: a frequent target for genetic abnormalities in lung cancer// Science. 1989. V.246. P.49V494.

181. Tamai S, Sugimura H, Caporaso NE, Resau JH, Trump BF, Weston A, Harris CC. Restriction fragment length polymorphism analysis of the L-myc gene locus in a case-control study of lung cancer // Int J Cancer. 1990. V.46. P.411-415.

182. Tang X, Khuri FR, Lee JJ, Kemp BL, Liu D, Hong WK, Mao L. Hypermethylation of the death-associated protein (DAP) kinase promoter and aggressiveness in stage I non-small-cell lung cancer// J Natl Cancer Inst. 2000. V.92. P.1511-1516.

183. Tateishi M, Ishida T, Mitsudomi T, Sugimachi K. DNA polimerase-alpha as a putative early relapse marker in non-small cell lung cancer: An immunohistochemical study // Cancer. 1991a. V.69. P.925-929.

184. Tateshi M, Ishida T, Mitsudomi T, Kaneko S, Sugimachi K. Prognostic value of c-erbB-2 protein expression in human lung adenocarcinoma and squamous cell carcinoma // Eur J Cancer. 1991b. V.27. P. 1372-1375.

185. Tatosyan A, Galetzkii A, Kisseleva N, Asanova A, Zborovskaya I, Spitkovsky D, Revasova P, Martin E, Kisselev F. Oncogene expression in human tumors // Int. J. Cancer. 1985. V.37. P.731-736.

186. Tockman MS, Gupta PK, Pressman NJ, Mulshine JL. Cytometric validation of immunocytochemical observations in developing lung cancer // Diagn Cytopathol. 1993. V.9. P.615-622.

187. Top B, Mooi WJ, Klaver SG, Boerrigter L, Wisman P, Elbers HR, Visser S, Rodenhuis S. Comparative analysis of p53 gene mutations and protein accumulation in human non-small-cell lung cancer // Int J Cancer. 1995. V.64. P.83-91.

188. Trepicchio W.L., Krontiris T.G.- Members of the rel/NF-kB famili of transcriptional regulatory proteins bind the Hras 1 minisatellite DNA sequence // Nucleic Acids Res. 1992. V.20. P.2427-2434.

189. Tschentscher P, Wagener C, Neumaier M. Sensitive and specific cytokeratin 18 reverse transcription-polymerase chain reaction that excludes amplification of processed pseudogenes from contaminating genomic DNA // Clin Chem. 1997. V.43. P.2244-2250.

190. Tsuchya ENakamura Y., Weng S.Y., Nakamura Y., Tsuchya S., Sugano H., Kitagawa T. Allelotype of non-small cell lung carcinoma comparison between loss of heterozyhosity in squamos cell carcinoma and adenocarcinoma // Cancer Res. 1992. V.52. P.2478-2481.

191. Tsukada T, Tomooka Y, Takai S, Ueda Y, Nishikawa S, Yagi T, Tokunaga T, Takeda N, Suda Y, Abe S, Matsuoma I, Ikawa Y, Aizawa A. Enhanced proliferative potential in culture of cells from p53-deficient mice // Oncogene. 1993. V.8. P.3313-3322.

192. Tungekar N, Gatter K, Dunnill M, Mason D. Ki-67 immunostaining and survival in operable lung cancer//Histopathology. 1991. V.19. P.545-550.

193. Turner-Warwick M., Lebowitz M., Burrows В., Johnson A. Cryptogenic fibrosing alveolitis and lung cancer // Thorax. 1980. V. 35. P. 496-499.

194. Utrera R, Collavin L, Lazarevic D, Delia D, Schneider C. A novel p53-inducible gene coding for a microtubule-localized protein with G2-phase-specific expression // EMBO J. 1998. V.17. P.5015-5025.

195. Van Meir EG, Polverini PJ, Chazin VR, Su Huang HJ, de Tribolet N, Cavenee WK. Release of an inhibitor of angiogenesis upon induction of wild type p53 expression in glioblastoma cells //Nat Genet. 1994. V.8. P. 171-176.

196. Vega FJ, Iniesta P, Caldes T, Sanchez A, Lopez JA, de Juan C, Diaz-Rubio E, Torres A, Balibrea JL, Benito M. p53 exon 5 mutations as a prognostic indicator of shortened survival in non-small-cell lung cancer // Br J Cancer. 1997. У.16. P.44-51.

197. Vineis P, Caporaso N. The analysis of restriction fragment length polymorphism in human cancer: a review from an epidemiological perspective // Int J Cancer. 1991. V.47. P.26-30.

198. Volm M, Mattern J. Immunohistochemical detection of p53 in non-small-cell lung cancer // J Natl Cancer Inst. 1994. V.86. P. 1249.

199. Volm M, Koomagi J, Mattern J. Prognostic value of vascular endothelial growth factor and its receptor Flt-1 in squamous cell lung cancer // Int J Cancer. 1997. V.74. P.64-68.

200. Volm M, Mattern J, Koomagi R. Angiostatin expression in non-small cell lung cancer // Clin Cancer Res. 2000. V.6. P.3236-3240.

201. Walker R, The histopathologic evaluation of nuclear organizer region proteins // Histopathology. 1988. V.12. P.221-223.

202. Wang YC, Lee HS, Chen SK, Yang SC, Chen CY. Analysis of K-ras gene mutations in lung carcinomas: correlation with gender, histological subtypes, and clinical outcome // J Cancer Res Clin Oncol. 1998. V.124. P.517-522.

203. Washimi O, Nagatake M, Osada H, Ueda R, Koshikawa T, Seki T, Takahashi T, Takahashi T. In vivo occurrence of pl6 (MTS1) and pl5 (MTS2) alterations preferentially in non-small cell lung cancers // Cancer Res. 1995. V.55. P.514-517.

204. Weiner D, Norberg J, Robinson R, Nowell P, Gazdar A, Greene M, Williams W, Cohen J, Kern J. Expression of the neu gene encoded protein (pl85neu) in human non-small cell carcinomas of the lung // Cancer Res. 1990. V.50. P.451-455.

205. Weston A, Caporaso NE, Perrin LS, Sugimura H, Tamai S, Krontiris TG, Trump BF, Hoover RN, Harris CC. Relationship of H-ras-1, L-myc, and p53 polymorphisms with lung cancer risk and prognosis // Environ Health Perspect. 1992. V.98. P.61-67.

206. Westra WH, Baas 10, Hruban RH, Askin FB, Wilson K, Offerhaus GJ, Slebos RJ. K-ras oncogene activation in atypical alveolar hyperplasias of the human lung // Cancer Res. 1996. V.56. P.2224-2228.

207. White G.R.M., Santibanez-Koref M., Heighway J., Tatcher N. Constitutional frequencies of c-Ha-ras alleles inpatients with different types of lung cancer // Br. J. Cancer. 1990.V. 61. P. 186.

208. Wistuba II, Lam S, Behrens C, Virmani AK, Fong KM, LeRiche J, Samet JM, Srivastava S, Minna JD, Gazdar AF. Molecular damage in the bronchial epithelium of current and former smokers // J Natl Cancer Inst. 1997. V.89. P. 1366-1373.

209. Wistuba I, Behrens C, Milchgrub S, Bryant D, Hung J, Minna J, Gazdar A. Sequential molecular abnormalities are involved in the multistage development of squamous cell lung carcinoma//Oncogene. 1999. V.18. P.643-650.

210. Wittinghofer A, Scheffzek K, Ahmadian MR. The interaction of Ras with GTPase-activating proteins // FEBS Lett. 1997. V.410. P.63-67.

211. Xinarianos G, Liloglou T, Prime W, Maloney P, Callaghan J, Fielding P, Gosney JR, Field Ж. hMLHl and hMSH2 expression correlates with allelic imbalance on chromosome 3p in non-small cell lung carcinomas // Cancer Res. 2000. V.60. P.4216-4221.

212. Xu HJ, Quinlan DC, Davidson AG, Hu SX, Summers CL, Li J, Benedict WF. Altered retinoblastoma protein expression and prognosis in early-stage non-small-cell lung carcinoma // J Natl Cancer Inst. 1994. V.86. P.695-699.

213. Yamomoto T, Ikawa S, Akiyama T, Semba K, Nomura N, Miyajima H, Saito T, Toyoshima K. Similarity of protein encoded by the c-erbB-2 gene to epidermal groth factor receptor//Nature. 1986. V.319. P.230-234.

214. Yin Y, Terauchi Y, Solomon GG, Aizawa S, Rangarajan PN, Yazaki Y, Kadowaki T, Barrett JC. Involvement of p85 in p53-dependent apoptotic response to oxidative stress // Nature. 1998. V.391. P.707-710.

215. Yokomizo A., Mai M., Tindall D.J., Cheng L., Bostwick D., Naito S., Smith D., Liu W. Overexpression of the wild type p73 gene in human bladder cancer // Oncogene. 1999. V.18. P.1629-1633.

216. Yokota J., Wada M., Yashida Т., Nogushi H., Terasaki Т., Shimosato Y., Sugimura Т., Terada M. Heterogeneity of lung cancer cells with respect of amplification and rearrangment of myc family genes // Oncogene. 1988. V.2. P.607-611.

217. Zhang Z, Fasco M, Huang L, Guengerich F, Kaminsky L. Characterization of purified human recombinant cytochrome P4501A1-Ile462 and -Val462: assessment of a role for the rare allele in carcinogenesis // Cancer Res. 1996. V.56. P.3926-3933.

218. Я благодарю академика РАМН, профессора А.Г. Чучалина за предоставленную возможность исследования маркеров ранних стадий рака легкого у ликвидаторов аварии на Чернобыльской АЭС.

219. Выражаю глубокую благодарность к.б.н. А.В. Гаспарьяну за помощь в освоении экспериментальных методик.

220. Я благодарен С.Ю. Чикиной, ^.м.н. Г.В. Унгиадзе и к.м.н. К.К. Лактионову за предоставление клинического материала.

221. Хочется также поблагодарить всех сотрудников лабораторий регуляции вирусных и клеточных онкогенов, и методов скрининга канцерогенов за постоянную поддержку и помощь в обсуждении полученных результатов.