Сквален как акцептор прооксидантных воздействий на кожу человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Де Люка Кьяра

• Де Люка Кьяра
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Де Люка Кьяра

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Состав и функции липидов поверхности кожи.

2. Факторы свободнорадикального повреждения липидов кожи.

3. Роль клеток эпидермиса в реакциях кожи на УФ-облучение.

4. Кожа как часть иммунной системы человека.

5. Лилофильные микроорганизмы эпидермиса и их роль в патогенезе себорейного дерматита и разноцветного лишая.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

1 .Сквален - наиболее фотолабильный компонент липидов поверхности кожи.

2. Липоперекиси сквалена в зависимости от дозы активируют или угнетают функциональную активность кератиноцитов.

3. Продукты фотоокисления сквалена подавляют реакцию контактной гиперчувствительности кожи.

4. Роль липопероксидации сквалена в патогенезе разноцветного лишая (pityriasis versicolor).

5. Сквален - уникальный компонент кожи человека среди высших приматов.

6. Содержание сквалена в липидах поверхности кожи при себорейном и атоническом дерматитах.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сквален как акцептор прооксидантных воздействий на кожу человека»

Существует сто девяносто три вида мелких и крупных обезьян. Сто девяносто два из них имеют волосяной покров. Исключение составляет голая обезьяна - Homo sapiens» [11]. Этими словами начинается книга известного антрополога и зоолога Десмонда Морриса «Голая обезьяна». Кожа человека, в отличие от всех остальных приматов, действительно имеет ряд уникальных особенностей: 1) отсутствие развитого волосяного покрова; 2) сильное развитие слоя подкожного жира, имеющего низкую точку плавления около 15°С; 3) наличие на поверхности кожи многочисленных сальных желез, продуцирующих кожное сало (sebum); 4) расположение по всему телу потовых желез.

Следует также отметить, что особенностью человека как вида является открытость его кожного покрова воздействию факторов внешней среды. Поверхность кожи покрыта липидной плёнкой, возникающей за счёт смешения секрета сальных желез (glandulae sebaceae) с липидами, продуцируемыми кератиноцитами. Образованная таким образом плёнка липидов поверхности кожи (ЛПК) включает в себя триглицериды (60%) и продукты их гидролиза (диглицериды, моноглицериды и свободные жирные кислоты), возникающие за счёт липолитической активности резидентной микрофлоры, эфиры восков (24-26 %), холестерин и его эфиры (2.5 - 3,0 %), а также, сквален (11.5 - 12.5 %) -полиненасыщенный тритерпен, который редко встречается в ЛПК других млекопитающих. Большая площадь контакта ЛПК с кислородом воздуха в сочетании с действием ультрафиолетового (УФ) света, от которого кожа человека не экранирована волосяным покровом, создаёт предпосылки для инициации и развития в ЛПК реакций цепного окисления липидов. Кроме того, резидентные организмы поверхности кожи, в частности, возбудитель разноцветного лишая - грибок Pityrosporum orbiculare, также могут подвергать липопероксидации компоненты ЛПК.

Существует предположение, что окисление молекул, входящих в состав ЛПК может быть одной из первых мишеней действия УФ-света и других прооксидантных воздействий на кожу, запускающих последовательность биохимических реакций, вовлеченных в ответ организма на это воздействие. К числу таких реакций относятся: распознавание повреждений в ДНК, инактивация ферментов, генерация активных форм кислорода, фотоактивация синтеза витамина Бз, фотоизомеризация уроканиновой кислоты, окисление арахидоновой кислоты в каскаде синтеза простагландинов. О важной роли свободнорадикальных процессов в коже свидетельствует корреляция между продукцией активных форм кислорода при УФ-облучении и повреждением иммунокомпетентных клеток кожи [39].

Тритерпен сквален, один из компонентов ЛПК, обладает шестью двойными связями, и поэтому является потенциально наиболее окисляемым липидом. Однако степень подверженности сквалена окислительной модификации при прооксидантных воздействиях на кожу и возможная биологическая активность продуктов его пероксидации остаётся невыясненной.

Актуальность исследования процессов свободнорадикального окисления в липидной плёнке, покрывающей кожу человека, обусловлена не только ролью этих процессов в физиологическом ответе на воздействие УФ-света, но и их значением при фототерапии различных кожных заболеваний, а также при воздействии косметических средств и процедур.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Де Люка Кьяра

ВЫВОДЫ

1. Сквален является наиболее фотолабильным компонентом липидов поверхности кожи. Продукты фотоокисления сквалена стимулируют биосинтез ДНК и белков в клетках эпидермиса в малых дозах и вызывают повреждение клеток эпидермиса в более высоких дозах.

2. Липоперекиси сквалена вызывают толерантность к наносимым на кожу антигенам в реакции контактной гиперчувствительности, снижая при этом на 80% АТФазную активность иммунокомпетентных клеток кожи.

3. Показано, что Pityrosporum orbiculare - возбудитель разноцветного (отрубевидного) лишая (pityriasis versicolor) способен индуцировать образование липоперекисей сквалена за счёт инициации свободнорадикального окисления ненасыщенных жирных кислот. Изменение цвета кожных покровов при этом заболевании объясняется действием липоперекисей сквалена на меланогенез.

4. В отличие от человекообразных приматов липиды эпидермиса кожи человека содержат легкоокисляющийся сквален, высокий уровень триглицеридов и продуктов их гидролиза, и низкую концентрацию холестерина.

5. У детей и взрослых с атопическим дерматитом в липидах поверхности кожи снижено содержание сквалена (на 12% у взрослых и на 21 % у детей) и увеличено в 1.6 раза содержание холестерина, а в 1.8 раза его эфиров по сравнению со здоровыми. У лиц с себорейным дерматитом на участках кожи с проявлениями заболевания концентрация сквалена снижена на 10 %, а холестерина и его эфиров повышена на 40%.

Полученные данные позволяют рассматривать сквален как акцептор прооксидантных воздействий на кожу, при этом продукты окисления сквалена подавляют кожную реакцию контактной гиперчувствительности, и в зависимости от дозы инициируют в коже меланогенез или депигментацию.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Уникальной особенностью человека среди приматов и большинства других млекопитающих является наличие в липидах поверхности его кожи достаточно большого количества сквалена (15%). Сквален является тритерпеном, принадлежащим к обширной группе изопреноидов, куда входят такие биологически важные молекулы как бета-каротин, убихинон, токоферол. Хотя в биохимии сквален упоминается чаще всего как предшественник синтеза холестерина, следует иметь в виду, что на этот синтез расходуется только около 10 % сквалена [42], а функциональная роль остального сквалена в организме остаётся невыясненной.

В организме человека наибольшая концентрация сквалена обнаружена в коже, при обилии сквалена в пище он накапливается также и в печени [42]. Каковы же возможные причины концентрации сквалена в коже?

Одним из первых предположений является роль сквалена как антиокси-данта, обладающего высокой способностью подобно бета-каротину тушить синглетный кислород [80], который образуется в реакциях фотоокисления биологических субстратов в присутствии окрашенных соединений - фотосенсибилизаторов. Типичными для синглетного кислорода являются реакции взаимодействия с двойной связью, протекающие с образованием диоксиэтанов, которые в дальнейшем могу переходить в гидроперекиси. Как было показано в работах Д.И.Рощупкина и соавторов, при УФ-облучении полиненасыщенных жирных кислот в присутствии сенсибилизаторов и кислорода происходит образование гидроперекисей липидов, что в последующем приводит к развитию реакций цепного окисления в результате образования радикалов при разложении этих гидроперекисей либо фотохимическим путём, либо в присутствии металлов переменной валетности [2]. Альтернативой химическим реакциям с участием синглетного кислорода является его «тушение» т.е. переход в основное три-плетное состояние. Повышенное образование синглетного кислорода, которое наблюдается в частности, при порфириях сопровождается воспалением и утолщением кожных покровов, а также повышенным шелушением клеток эпидермиса. Последний из упомянутых симптомов обусловлен, по-видимому, окислением ненасыщенных жирных кислот в составе ламелярных бислоёв, заполняющих пространство между кератиноцитами наподобие цемента в кирпичной кладке [54]. В связи с вышесказанным можно ожидать, что уменьшение в ЛПК концентрации сквалена, играющего роль тушителя синглетного кислорода, может также сопровождаться шелушением эпидермиса. Действительно, как следует из полученных результатов, при атопическом дерматите наблюдается заметное снижение концентрации сквалена в ЛПК (табл. 8): у взрослых на 12 %, у детей на 21 %. Несколько меньшее снижение (на 10%) уровня сквалена в ЛПК наблюдается при себорейном дерматите (табл. 9).

С позиций концепции сквалена как тушителя синглетного кислорода находит объяснение уникальность наличия сквалена в ЛПК кожи человека по сравнению с другими приматами. В данном случае отсутствие развитого волосяного покрова, безусловно экранирующего у других животных кожу от фотоповреждений, компенсируется у человека наличием фотопротекторной системы, тушащей синглетный кислород.

В этой связи следует отметить, что разработка фотопротекторных средств для защиты кожи от ультрафиолетового света солнечного излучения должна учитывать не только спектр поглощения протектора, но и химические аспекты его взаимодействия в системе ЛПК. В этом плане использование устойчивости сквалена к УФ-облучению в присутствии тех или иных солнцезащитных средств, предложенное в качестве тест-системы, даёт на наш взгляд более адекватные результаты, чем просто регистрация спектра поглощения этих средств. А именно, представленные на рис. 7 данные по фотоокислению сквалена в присутствии тестируемых фотопротекторов, показали, что ряд синтетических веществ (Р.5000, Р. 1789, СЮ-РА11А), предлагаемых в качестве фотопротекторов, являются по сути фотосенсибилизаторами, оказывающими прооксидант-ный эффект даже при действии УФА-света. И наоборот, отобранные эволюцией вещества из сока алоэ, показали сильный фотопротекторный эффект.

Другим аспектом биологической активности сквалена, часто обсуждаемой в литературе [42], является его антиканцерогенное и дозо-зависимое иммуностимулирующее действие. Предположение об антиканцерогенном действии сквалена основывалось на факте снижения частоты заболеваемости некоторыми видами рака в районах с традиционным использованием богатого скваленом оливкового масла. Антиканцерогенный эффект сквалена был подтвержден в опытах на животных. В этой связи наличие сквалена в ЛПК может рассматриваться как антиканцерогенная защита от рака кожи, индуцируемого УФ-облучением.

Наличие сквалена в кожном сале животных, имеющих хорошо развитый покров шерсти, выдры, бобра, скалёпуса и кинкажу пока не находит объяснения. Однако, примечательно, что покровы всех упомянутых животных часто соприкасаются с водой. Не говоря уже о бобре и выдре, ведущих полуводный образ жизни, американский крот скалёпус, видовое название которого, кстати, ациайсш, красноречиво говорит само за себя, обитает на часто заливаемых полях и лугах. Кинкажу, хотя и живёт на деревьях, но в тропических, дождливых лесах Центральной и Южной Америки. Не исключено, что частое попадание воды на кожу, может создавать, в отличие от сухой кожи, благоприятные условия для развития резидентной микрофлоры. В связи с этим обстоятельством, сквален может угнетать развитие микроорганизмов. Как видно из кинетики роста Р. огЫсЫаге (рис.20), добавление в культуральную среду 1 % сквалена несколько (на 16-17%) подавляет развитие грибка. Примечательно, что в кожном сале скалёпуса сквалена содержится 70 %. Нельзя, конечно, исключать возможности того, что сквален, как уже было сказано, поддерживает высокий уровень барьерных свойств кожи (надежное сцепление кератиноцитов), что особенно важно для полуводных животных.

На первый взгляд вызывает удивление, достаточно высокая фотолабильность сквалена. Как следует из данных по дозовым зависимостям фоторазрушения различных компонентов ЛПК, сквален является самым фотолабильным сол единением. Он разрушается наполовину при дозе около 200 мДж/см , что соответствует 10 минимальным эритемным дозам (МЭД) для чувствительного типа л кожи, поскольку для этого типа кожи 1 МЭД = 20 мДж/см [13]. На широте Москвы при ясном небе в июне за 3 часа можно получить 7 МЭД [13], что соответствует фоторазрушению около 40 % сквалена в ЛПК. Таким образом, исследованные в работе диапазоны доз близки к реально получаемым человеком дозам УФ-облучения при пребывании на открытых местах в течение нескольких часов.

Как известно, на всякое непредвиденное воздействие, заметно влияющее на физиологию организма, существует отработанная эволюцией ответная реакция, называемая обычно стрессом или неспецифическим (общим) адаптационным синдромом. В этой реакции обычно выделяют фазу сопротивления («мобилизация сил» ) и фазу истощения (снижение жизнеспособности или гибель). Эти закономерности отчётливо выявляются и при изученном в данной работе «фотострессе» кожи, вызванной УФ-облучением. Действительно, как видно из полученных данных, образующиеся при малых дозах облучения липоперекиси сквалена оказывали стимулирующий эффект на клетки, интенсифицируя синтез ДНК и белков в кератиноцитах, синтез меланина в меланоцитах (рис. 10-13, табл. 2 и 3). Однако при высоких концентрациях фотоокисленного сквалена эффект был противоположный: снижение синтеза ДНК и белков в кератиноцитах, угнетение меланоцитов вплоть до их гибели. Также липоперекиси сквалена выступают в роли регуляторов реакции контактной гиперчувствительности. Таким образом, сама молекула сквалена выполняет на поверхности кожи роль чувствительного датчика УФ-света, а её дериваты - липоперекиси сквалена выполняют роль регуляторов функционального состояния комплекса кератиноцит-меланоцит-клетки Лангерганса в эпидермисе кожи. Сквален, по-видимому, является своеобразным кумулятивным датчиком не только уровня облучения поверхности кожи, но и, основываясь на факте его липопероксидации под действием Р. огЫсиШге, любых прооксидантных воздействий на кожу. Являясь таким образом акцептором прооксидантных воздействий и датчиком уровня сво-боднорадикальных процессов на поверхности кожи, липоперекиси сквалена передают информацию клеткам эпидермиса и дозо-зависимым образом регулируют их активность. Это подтверждает высказанную ранее гипотезу о роли сква-1 лена как усилителя («энхансера»), реагирующего на опасные для организма дозы УФ-облучения [72]. Представленные в настоящей работе эксперименты полностью подтверждают это предположение и расширяют его, предлагая рассматривать сквален как усилитель любых прооксидантных воздействий на кожу, а не только УФ-света.

Высказанное предположение хорошо объясняет основной симптом разноцветного лишая наличие участков кожи с гипер- и гипомеланозом. Ясно, что малые дозы окисленного сквалена стимулируя меланоциты вызывают гипермеланоз на начальном этапе заболевания. Однако высокие дозы липоперекисей » вызывают, по-видимому, истощение и угнетение жизнедеятельности меланоцитов, что проявляется в депигментации участков кожи.

Предполагаемая схема роли сквалена как акцептора прооксидантных воздействий на кожу приведена на рис. 27.

Дериваты сквалеиа, по-видимому, являются достаточно сильными и физиологически важными регуляторами состояния клеток. Однако сильная зависимость от дозы их физиологических эффектов может приводить к непредсказуемым эффектам. Типичным примером подобной ситуации явился скандал, произошедший в 2001 году в США и Великобритании и связанный с массовым проявлением так называемого «персидского синдрома» («gulf war syndrome» -синдром Персидского залива), обусловленного массовой иммунизацией военнослужащих, участвовавших в войне в Персидском заливе, вакциной, содержащей сквален. Предполагается, что источником заболевания 275000 солдат армий США и Великобритании мог быть сквален, использовавшийся в инъекциях для усиления действия вакцины [20]. Вероятно, медикам казалось, что сквален как естественный метаболит нашего организма не может быть опасным. С другой стороны было известно, что сквален обладает выраженным иммуностимулирующим действием. Однако, по-видимому, введение высоких доз сквалена в кровь приводило к его перокидации и образованию токсичных липоперекисей, атакующих мембраны и нарушающих нормальную жизнедеятельность клеток.

Рис. 27. Схема предполагаемой роли сквалена как акцептора прооксидантных воздействий на кожу.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Де Люка Кьяра, 2002 год

1. Антонов ВФ, Владимиров ЮА, Россельс А, Коркина ЛГ, Корепанова ЕА, Трухманова КИ. Влияние продуктов перекиеного окисления ненасыщенных жирных кислот на транспорт ионов через бимолекулярные фосфолипидные мембраны. Биофизика, 1973;18:668-673

2. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И., Козлов A.B., Осипов А.Н., Рощупкин Д.И., Свободные радикалы в живых системах., Биофизика (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР), 1991, 29,252 с.

3. Деев А.И., Еремина Г.В., Спиричев В.Б. Влияние ретинола на перекисное окисление в фосфолипидных мембранах. Вопросы медицинской химии, 1978, 24(6), 795-798

4. Ежова М. К вопросу об этиологии, клинике и лечении себорейного дерматита. Косметика и медицина, 2001; 5(24): 16-21

5. Кашкин ПН, Шеклаков НД. Отрубевидный лишай. В кн.: Руководство по медицинской микологии. М. Медицина. 1978: 53-56

6. Кошевенко ЮН Разноцветный лишай «банно-пляжная» болезнь. Косметика и медицина, 2001; 4(21): 25-30

7. Кошевенко ЮН. Нарушения пигментации кожи в дерматокосметологии. 2.Гипомеланозы. Косметика и Медицина, 2001; 2(21): 23-34.

8. Марголина A.A. Фотостарение кожи профилактика и лечение. Косметика и медицина, 2001; 2(21): 44-53

9. Марголина A.A. Эрнандес Э.И. Липидный барьер кожи и косметические средства. (Сер. «Теоретическая косметология»), М., 1998,174с.

10. Марголина A.A., Эрнандес Е.И., Зайкина О.Э Новая косметология. М, «Косметика и медицина», 2000,204с

11. Моррис Д. Голая обезьяна. СПб, Амфора/Эврика, 2001, с. 5.

12. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология, М., Мир, 472-487

13. Ультрафиолетовое излучение. Гигиенические критерии состояния окружающей среды 160. Всемирная Организация Здравоохранения, Женева, 1995, 394с.

14. Ярилин А. Кожа и иммунная система. Косметика и медицина. 2001;2(21):5-13

15. Beadle PC, Burton JL. Absorption of ultraviolet radiation by skin surface lipid. Br J Dermatol 1981;104(5):549-551

16. Boniforti L, Passi S, Caprilli F, Nazzaro-Porro M. Skin surface lipids. Identification and determination by thin layer chromatography. Clin Chim Acta, 1973;47:223-231

17. Botek AA, Lookingbill DP The structure and function of sebaceous glands. In "The biology of the skin" (Eds. Freinkel RK, Woodley DT), The Parthenon Publishing Group, New-York, London, 2001, 87-100.

18. Brasch J, Martens H, Sterry W. Langerhans cells accumulation on Chronic Tinea Pedis and Pityriasis Versicolor. Clin. Exp.Dermatol. 1993;18(4): 329-333

19. Breathnach AS, Nazzaro-Porro M, Passi S. Azelaic Acid. Br J Dermatol, 1984;111:115-120

20. Brown P. Illegal vaccine link to Gulf war syndrome. Guardian Monday 2001; July 30

21. Bruls WAG, Slaper H, Van der Leun JC, Berrens L Transmission of human epidermis and stratum corneum as a function of thickness in the ultraviolet and visible wavelengths. Photochem Photobiol, 40 (4): 485-494

22. Burbach GJ, Ansel JC, Armstrong CA. Cytokines in the skin. In "The biology of the skin" (Eds. Freinkel RK, Woodley DT), The Parthenon Publishing Group, New-York, London, 2001,299-331

23. Cassidy DM, Lee CM. Laker MF, Keaiey T. Lipogenesis in isolated human sebaceous glands. FEBS Lett. 1986; 200(1): 173-176.

24. Chan CC, Duhamel L, Ford-Hutchinson A. Leukotriene B4 and 12 hydroxyeicosatetraenoic acid stimulate epidermal proliferation in vivo in guinea pig. J Invest Dermatol, 1985; 85:333-334

25. Cotovio J, Onno L, Justine P, Lamure S, Catroux P. Generation of oxidative stress in human cutaneous models following in vitro ozone exposure. Toxicol In Vitro 2001;15(4-5):357-362

26. De Leo V, Horlik H, Hanson D, Eisenger M, Harber LC. Ultraviolet radiation induces changes in membrane metabolism of human keratinocytes in culture. J Invest Dermatol 1984; 83: 323-326.

27. Dennis KJ, Shibamoto T. Production of malonaldehyde from squalene, a major skin surface lipid, during UV-irradiation. Photochem Photobiol 1989;49(5):711-716

28. Downing DT, Stewart ME, Strauss JS. Estimation of sebum production rates in man by measurement of the squalene content of skin biopsies. Journal of Investigative Dermatology, 1981 ;77(4):358-360

29. Downing DT, Stewart ME. Skin surface lipids of the mole Scalopus aquaticus. Comp Biochem Physiol B 1987;86(4):667-670

30. Downing DT, Strauss JS, Pochi PE. Variability in the chemical composition of human skin surface lipids. J Invest Dermatol 1969;53:322-327.

31. Dreher F, Maibach H. Protective effects of topical antioxidants in humans. Curr Probl Dermatol 2001;29:157-164

32. Elmets CA, Bergstresser PR, Tigelaar RE, Wood PJ, Streilein JW. Analysis of the machanism of unresponsiveness produced by haptens painted on skin exposed to low dose ultraviolet radiation. J Exp Med, 1983;158:781-794

33. Feliciani C, Gupta AK, Sander DN. Keratinocytes and cytokine/growth factors. Crit Rev Oral Medicine 1996;7:300-318

34. Gloor M, Wiegand I, Friederich HC. Uber Menge und Zusammensetzung der Hautoberflachenlipide beim sogenanten seborrhoischen Ekzem. Derm Mschr 1972;158:759-764

35. Hay RJ. Fungi and Skin Disease. London, 1995

36. Hayakawa K, Matsuo I. Effects of PUVA therapy on skin surface lipids: skin surface lipid peroxidation in psoriasis vulgaris and its biological significance. Tokai J Exp Clin Med 1986;ll(5):317-322

37. Hearing VJ Regulation of melanin formation. In Nordlund JJ, Boissy RE, Hearing VJ, King RA, Ortonne J-P, eds The Pigmentary Systems. Physiology and Pathphysiology. New York: Oxford University Press, 1998:307-332

38. Hill HZ, Li W, Xin P, Mitchell DL Melanin: a two edged sword? Pigment Cell Research 1997; 10:158-161

39. Horio T, Okamoto H. Oxygen intermediates are involved in UV radiation-induced damage of Langerhans cells. J Invest Dermatol, 1987; 88: 699-702

40. Jeevan A, Evans R, Brown EL, Kripke ML. Effect of local ultraviolet radiation on the pathogenesis of Mycobacterium laprae-murium infection in mice. Exp Dermatol, 1992;1:152-160

41. Karnovsky G. J Histochem Cytochem, 1965;13:448-453

42. Kelly GS Squalene and its potential clinical uses. Altera Med Rev 1999; 4(1): 29-36

43. Kohno Y, Egawa Y, Itoh S, et al Kinetic study of quenching reaction of singlet oxygen and scavenging reaction of free radical by squalene in n-butanol. Biochem Biophys Acta 1995; 1256:52-56

44. Kragballe K, Fallon JD Increased aggregation and arachidonic acid transformation by psoriatic platelets: evidence that platelet-derived 12-hydroxyeicosatetraenoic acid increases keratinocyte DNA synthesis. Arch Dermatol Res, 1986;278:449-453

45. Leyden JJ. New understandigs of the pathogenesis of acne. J Am Acad Dermatol 1995; 32:15-25.

46. Lindholm JS, Downing DT. Occurrence of squalene in skin surface lipids of the otter, the beaver and the kinkajou. Lipids 1980; 15:1062-1063

47. Lindholm JS, McCormick JM, Colton SW VI, Downing DT,. Variation in the chemical composition of human surface skin lipids among mammals. Comp Biochem Physiol 1981; 69B:75-78.

48. Lookingbill DP, Lookingbill GL, Leppard B. Actinic damage and skin cancer in albinos in northern Tanzania: finding in 164 patients enrolled in an outreach skin care program. J Am Acad Dermatolol 1995;32:653-658

49. Lowe NJ, Stoughton RB. Effects of topical prostaglandin E2 analogue on normal hairless mouse epidermal DNA synthesis. J Invest Dermatol, 1977;68:134-137

50. Lynch DH, Gurish MF, Daynes RA. Relationship between epidermal Langerhans ATPase activity and the induction of contact hypersensitivity. J Immunol 1981; 126: 1892-1897

51. Matsuo I, Yoshino K, Ohkido M. Mechanism of skin surface lipid peroxidation. Curr Probl Dermatol, 1983;11:135-143

52. McLean Nacara. J Histochem Cytochem, 1974; 22: 1077-1083

53. Micali G., Lacarrubba F., Bongu A., West D. The skin barrier. In "The biology of the skin" (Eds. Freinkel RK, Woodley DT), The Parthenon Publishing Group, New-York, London, 2001,219-237

54. Miller SJ, Aly R, Shinefeld HR, EliasPM. In vitro and in vivo antistaphylococcal activity of human stratum corneum lipids. Arch Dermatol, 1988;124: 209-215

55. Morgan E. The Descent of Woman, Souvenir Press, 1972

56. Nazarro-Porro M, Passi S, Picardo M, Mercantini R, Breatchnach AS Lipoxygenase activity of Pityrosporum in vitro and in vivo. Journal of Investigative Dermatology, 1986; 87:108-112

57. Nazzaro-Porro M, Passi S, Boniforti L, Belsito F. Effects of aging on fatty acids in skin surface lipids. J Invest Dermatol, 1979; 73: 112-121

58. Nazzaro-Porro M, Passi S, Caprilli F, Nazzaro P, Morpurgo G, Growth requirement and lipid metabolism of Pityrosporum orbiculare. J Invest Dermatol 1976; 66: 178-182

59. Nazzaro-Porro M, Passi S. Lipogenesi e lipidi cutanei. In: Trattato di Dermatogia (Serri F. ed.), Piccin Nuova Libraria S.p.A, 1986;1; cap.ll, 1-11

60. Nazzaro-Porro M, Passi S. Identification of tyrosinase inhibitors in culture of Pityrosporum. J Invest Dermatol, 1978; 71: 205-208

61. Nazzaro-Porro M, Picardo M, Finotti E, Passi S. Comparative studies on skin lipid peroxidation induced by physical and biological agents. J Invest Dermatol 1987; 89: 320a

62. Nicolaides N, Fu HC, Rice GR. The skin surface lipids of man compared with those of eighteen species of animals. Journal of Investigative Dermatology, 1968; 51:83-89

63. Nicolaides N. Skin lipids: their biochemical uniqueness. Science 1974;186:19-26

64. Noonan FP, De Fabo EC, Kripke ML. Suppression of contact hypersensitivity by UV irradiation and its relationship to UV-induced suppression of tumor immunity. Photochem Photobiol, 1981;34:683-689

65. Noonan FP, De Fabo EC, Pedersen GM, Green MI. Suppression on contact hypersensitivity in mice by ultraviolet irradiation is assosiated with defective antigen presentation. Immunology, 1981;43:527-533

66. Noonan FP, De Fabo EC. Ultraviolet-B-dose-responce curves for local and systemic immunosuppression are identical. Photochem Photobiol, 1990; 52:801-810

67. Nordlund JJ, Boissy RE The biology of melanocytes. In "The biology of the skin" (Eds. Freinkel RK, Woodley DT), The Parthenon Publishing Group, New-York, London, 2001, 113-131

68. Oguchi V, Komura I, Soh Y. Electron microscopic observation of epidermal Langerhans cells in Tinea Versicolor. Nippon Hifika Gakkai Zasshi. 1982; 92 (10): 1055-1060

69. Ohkido M, Yoshino K, Matsuo I. Lipid peroxide of human skin. Curr Probl Dermatol 1980;10:269-278

70. Ohsawa K, Watanabe T, Matsukawa R, Yoshimura Y, Imaeda K. The possible role of squalene and its peroxide of the sebum in the occurrence of sunburn and protection from the damage caused by UV irradiation. J Toxicol Sei 1984;9(2):151-159

71. Okido M, Yoshino K, Matsno I. Lipid peroxides of human skin. In: Bernstain JA, Seiji M, ed. Biochemistry of normal and abnormal differentiation. Basel: Karger, 1984; 261-278

72. Parkin DM, Muir CS, Whelan SL, Gao Y-T, Ferlay J, Powell J ed. Cancer incidence in five continents. 1992; VI (IARC Scientific Publications № 120). Lyon, International Agency for1. Research of Cancer

73. Parry ME, Sharpe GR. Seborrhoeic dermatitis is not caused by an altered immune response to Malassezia yeast. Br J Dermatol, 1998; 139:254-263

74. Porter AMW Why do we have apocrine and sebaceous glands? Journal of the Royal Society of Medicine. 2001, v 94, 236-237.

75. Saint-Leger D, Bague A, Lefebvre E, Cohen E, Chivot M. A possible role for squalene in the pathogenesis of acne. II. In vivo study of squalene oxides in skin surface and intracomedonal lipids of acne patients. Br J Dermatol, 1986;114(5):543-552

76. Schechtman RC, Midgley G, Hay RJ. HIV disease and Malassezia yeasts: a quantitative study of patients presenting with seborrhoeic dermatitis. Br J Dermatol, 1995;133:694-698

77. Schüler G, Steinman RM. Murine epidermal Langerhans cells mature into potent immunostimulatory dendritic cells in vitro. J ExpMed 1985; 161: 526-532

78. Shaath NA. The chemistry of sunscreen. In: Sunscreen. Development, Evaluation and Regulatory Aspects (Lowe NJ, Snaath NA, eds),Marcel Dekker Inc., New York,l990:211-233

79. Shelton RM. Aloe vera. Its chemical and therapeutic properties. Int J Dermatol 1991;30:679-682

80. Soerpono FF, Shinells RA, Cockerell CJ, Comité SL. Seborrheic like dermatitis of acquired immunodeficiency syndrome: a clinicopathological study. J Am Acad Dermatol 1986; 14:242-248

81. Stewart ME. Downing DT. Cook JS, Hansen JR, Strauss JS. Sebaceous gland activity and serum dehydroepiandrosterone sulfate levels in boys and girls. Arch Dermatol 1992; 128(10): 1345-1348.

82. Stewart ME. Sebaceous gland lipids. Semin Dermatol. 1992: 11(2): 100-105.

83. Stierner U, Rosdahl I, Augustsson A, Kagedal B UVB irradiation induces melanocyte increase in both exposed and shielded human skin. J invest Dermatol 1991;97:942-948

84. Biochemistry and Molecular Biology of the Skin, 2nd end. New York: Oxford University Press, 1991: 712-740.

85. Streinlein JW Skin-associated lymphoid tissue (SALT): original and functions. J Invest Dermatol 1983: 80(Suppl): 12-16

86. Szabo G, Gereld AB, Pathak MA, Fitzpatrick TB Racial differences in the fate of melanosomes in human epidermis. Nature 1969;222:1081-1082

87. Terao J, Matsushita S. Geometrical isomers of monohydroperoxides formed by autoxidation of methyl linoleate. Agric Biol Chem 1977; 41: 2401-2405

88. Thiele JJ, Schroeter C, Hsieh SN, Podda M, Packer L. The antioxidant network of the stratum corneum. Curr Probl Dermatol 2001;29:26-42

89. Thiele JJ, Weber SU, Packer L Sebaceous gland secretion is a major physiologic route of vitamin E delivery to skin. Journal of Investigative Dermatology, 1999; 113 (6), 1006-1010

90. Thiele JJ. Oxidative targets in the stratum corneum. A new basis for antioxidative strategies. Skin Pharmacol Appl Skin Physiol 2001 ;14 Suppl 1:87-91

91. Thody AJ, Schuster S. Control and function of sebaceous glands. Physiol. Rev 1989, v.69, 383-416.

92. Tilvis R, Kovanen PT, Miettinen TA. Metabolism of squalene in human fat cells. Demonstration of two-pool system. J Biol Chem 1982;180:189-191

93. Toews GB, Bergstresser PR, Streilein JW. Epidermal Langerhans cell density determines whether contact hypersensitivity or unresponsiveness follows skin painting with DNFB. J Immunol, 1980; 124:445-453

94. Uchi H, Terao H, Furue M. Cytokines and chemokines. J Dermatol Sci 2000;24(Suppl):29-28

95. Ullrich SE. Suppression of lymphoproliferation by hapten-specific suppressor T lymphocytes from mice exposed to ultraviolet radiation. Immunology, 1985;84:343-352

96. Vermeer M, Schmieder GJ, Yoshikawa T, Van den Berg J-W, Metzman MS, Taylor JR,

97. Streilein JW. Effects of ultraviolet B light on cutaneous immune responces of humans with deeply pigmented skin. J Invest Dermatol, 1991; 97: 729-734

98. Vogel. Textbook of practical organic chemistry, 4th edh. Longman, London New York: 330-332

99. Waken P, Burns RP, Ramirez F, Ziotnick D, Ferbel B, Haitians CG, Gaspari AA. Allergens and irritants transcriptionally upregulate CD80 gene expression in human keratinocytes. J Invest Dermatol 2000; 114: 1085-1092.

100. Wikler JR, Nieboer C, Willemze R. Quantitative skin cultures of Pityrosporum yeast in patients seropositive for the human immunodeficiency virus with and without serrohoeic dermatitis. J Am Acad Dermatol, 1992;27: 37-39

101. Wolf K, Stingi G. Cellular interactions and the skin: the epidermis as an immune organ. Triangle 1987;26:139-153

102. Yokozeki H, Katayama I, Ohki 0, Arimura M. IFN gamma differentially regulate CD80 and CD86 expression on human Langerhans cells. Br J Dermatol 1997; 136: 831-837

103. Yoshikawa T, Streilein JW On the genetic basis of the effects of ultraviolet B on cutaneous immunity. Evidence that polymorphisms at the Tnfa and Lps loci govern suscepttibility. Immunogenetics, 1990; 32:398-405

104. Zouboulis CC, Boschnakow A.Chronological ageing and photoageing of the human sebaceous gland. Clin Exp Dermatol 2001; 26(7):600-6071. БЛАГОДАРНОСТИ

105. Выражаю глубокую благодарность академику Российской Академии Медицинских Наук, профессору Юрию Андреевичу Владимирову за ценные замечания и рекомендации по ходу выполнения и представления работы к защите.

106. Особая благодарность двум моим оппонентам профессору Марку Нисоновичу Мерзляку (МГУ им. М.В.Ломоносова) и профессору Александру Яковлевичу Потапенко (РГМУ) за внимательное отношение к работе и конструктивные замечания.

107. Рада воздать должное моей коллеге и соавтору ряда совместных публикаций, ведущему научному сотруднику лаборатории молекулярной биологии РГГМУ Ирине Борисовне Деевой за неоценимую помощь в написании и представлении работы к защите.

108. ABSTRACT Chiara De Luca. Squalene as an acceptor of prooxidant effects on human skin.

109. Homo sapiens (n=30) Gorilla gorilla (n=3) Pongo pyg-maeus (n=3) Pan troglodytes (n=4)

110. Squalene 11.8±0.6 0.00 0.00 0.00

111. Cholesterol esters 1.4±0.2 3.5 46.6 4.9

112. Cholesterol 1.4±0.1 1.7 1.8 1.8

113. Triglycerides 34.1 ±6.5 2.3 tr 3.1

114. Diglycerides 1.3±0.2 0.8 0.4 1.0

115. Monoglycerides 0.4±0.1 tr. tr tr

116. Wax monoesters 24.5±2.1 37.4 2.0 43.6

117. Wax diesters 0.00 tr tr tr

118. Free fatty acids 24.6±6.1 3.4 2.5 7.41. Others 0.5 59.7 64.9 65.1

119. Others lipid fractions such as saturated and unsaturated paraffins, polar lipids, and other unidentified compounds; tr: traces < 0.01 %.