Скрининг гена злокачественного гипертермического синдрома (MHS-гена) у свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Фролкин, Дмитрий Анатольевич

• Фролкин, Дмитрий Анатольевич
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Фролкин, Дмитрий Анатольевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1. Злокачественный гипертермический синдром (MHS) в 7 свиноводстве

1.2. Молекулярно-генетические аспекты злокачественного 15 гипертермического синдрома (MHS) у свиней

1.3. Физиолого-биохимические аспекты стресса у свиней с PSE

1.4. Сравнительный анализ методов диагностики PSE- 24 синдрома

1.5 Селекция на стрессустойчивость

ГЛАВА 2. Материалы и методика исследований

2.1. Животные, используемые для анализа

2.2. Реактивы и оборудование

2.3. Методы, используемые для анализа

2.3.1. Методика ПЦР-ПДРФ для определения аллельных 40 вариантов гена RYR1 у свиней

2.3.2. Галотановый тест для определения стрессчувствительности

2.3.3. Определение групп крови и установление связи с гало- 43 танчувствительностью или резистентностью

ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований

3.1. Оптимизация методики выделения ДНК из крови свиней 44 для ПЦР анализа

3.2. Совершенствование методики ПЦР-ПДРФ для 46 определения аллельных вариантов гена RYR1 у свиней

3.3. Определение частот встречаемости аллелей и генотипов 51 гена RYR1 у различных популяций свиней Российской Федерации

3.4. Сопоставление результатов определения стрессовой 65 чувствительности свиней методом ПЦР и галотанового теста

3.5. Связь генотипов по RYRl-гену с аллелями л оку сов групп 69 крови

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Скрининг гена злокачественного гипертермического синдрома (MHS-гена) у свиней»

Селекция на мясность сопровождается определенными негативными последствиями, и в первую очередь она связана с нежелательной повышенной чувствительностью свиней к стрессам, что в конечном счете снижает качество свинины и формирует появление специфического его порока, получившего название PSE (pale - бледный, soft - мягкий, exudative - эксудативный). [Johnson В., 1970; Kolb Е., 1987; Vestergaard Т., 1987; Плященко С.И., Сидоров В.Т., 1987; Максимов Г.В., 1995; Hanset R. at al., 1995].

У чувствительных к стрессу свиней под действием стресса (например, транспортного) наблюдается чрезвычайно сильное снижение pH на фоне высокой температуры туши (38-40°С), что и приводит к образованию PSE - мяса [ Mitchel, Heffron., 1982; Lahucky R. at al., 1995]. Так, например, годовой ущерб вследствии падежа свиней в результате транспортных стрессов достигает в ФРГ 500 млн. марок [Muller Е., 1975], в Швеции - 3 млн. крон [Allen U., 1979], в Англии - 800 тыс.ф. ст. [Fabiansson S. et al., 1979], в США - 250 млн. долларов [Scheper J., 1979].

Для оценки стрессчувствительности свиней в практике мирового свиноводства широкое распространение получил галотановый тест, с помощью которого у животных выявляют в раннем возрасте предрасположенность к стрессу, как следствие, к формированию мяса низкого качества. Этот тест широко используется в программах разведения свиней [Blendl H. et al., 1982; Водолазская В., 1982,1983; Willeke H. et al., 1984; Lengerken G. et al., 1985; Pfeiffer H., 1986; Федоров B.X.,1987; Kallweit E., 1987; Гончарова Л.К. и др.,1988; Бабеев А., 1993; Knjazev S. P. at al., 1995; Gudilin J. J. at al., 1995].

Перспективным направлением считается использование в селекции свиней молекулярной генной диагностики злокачественного гипертермического синдрома (MHS -malignant hyperthermia syndrome) [Брем Г., Бренинг Б., 1993].

Молекулярно-генетический метод типирования рианодин-рецепторного гена (RYR1) описан К. Otsu et al. (1992); E. Nakajima et al. (1994) и др. Данный тест, в отличии от галотанового теста позволяет провести чёткую идентификацию генотипов свиней (NN и Nn - стрессустойчивых и пп -чувствительных к стрессу) [Förster M. et al., 1992].

Цель и задачи исследования. Целью исследования являлось:

- оптимизация методики выделения ДНК из крови свиней для ПЦР анализа;

- совершенствование методики ПЦР-ПДРФ для определения аллельных вариантов гена RYR1 у свиней.

- определение и проведение сравнительного анализа частот встречаемости аллелей и генотипов гена RYR1 у различных пород и популяций свиней Российской Федерации;

- проведение сравнительного анализа результатов определения стрессовой чувствительности свиней методом ПЦР и галотанового теста;

- установление связи аллеллей локусов групп крови с различными генотипами по ЯУЮ у свиней породы СМ-1, оценённых методом ПЦР;

Для достижения цели ставились следующие задачи:

- определить аллельные варианты гена ЯУЮ у свиней различных пород РФ методом ПЦР-ПДРФ;

- определить галотанчувствительность методом галотанового теста;

- выявить животных, носителей МНЕ-генотипа в популяции, оцененной по реакции на галотан, с помощью метода ПЦР-ПДРФ;

- изучить группы крови и установить связь со стрессчувствительностью или стрессрезистентностью у свиней породы СМ-1;

Научная новизна и практическая значимость работы. Впервые у пород свиней, разводимых в Российской Федерации, методом ПЦР-ПДРФ была проведена оценка на носительство мутантного гена МШ-синдрома. Установлены частоты встречаемости аллелей и генотипов гена ЯУЮ в различных популяциях свиней крупной белой породы, свиней СМ-1 и крупной черной пород. У свиней породы СМ-1, оцененных методом ПЦР, изучены полиморфизм по 13 системам групп крови и полиморфных белков, а так же связь аллеллей локусов групп крови с различными генотипами по КУШ-гену.

Разработан оптимальный метод выделения ДНК из крови свиней для ПЦР анализа, не требующий использования дорогостоящего фермента протеиназы К. При этом также существенно снижаются затраты времени по сравнению с другими методами.

Сравнительный анализ методов диагностики злокачественного гипертермического синдрома (MHS) доказал преимущество ПЦР-ПДРФ метода перед галотановым тестом.

В результате проведенных исследований показано, что при разработке программ, направленных на понижение частоты гена, определяющего стрессчувствительность, комплекс профилактических мер зависит от частоты встречаемости аллеля п. В породах и стадах, подверженных MHS - синдрому , для эффективного генотипирования животных и разведения стрессрезистентных свиней предлагается внедрение метода ПЦР-ПДРФ.

Положения, выносимые на защиту. Разработка оптимальной методики выделения ДНК из крови свиней для ПЦР анализа и режима использования методики ПЦР-ПДРФ для определения аллельных вариантов RYRl-гена у свиней. Сравнительный анализ результатов определения гена злокачественного гипертермического синдрома у свиней методом ПЦР и галотановым тестом. Популяционный анализ частот аллелей и генотипов гена RYR 1 у различных пород свиней Российской Федерации.

Публикация материалов. По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на годовых отчетах отдела сертификации и эколого-генетических исследований, Ученого Совета ВНИИ животноводства в 1996-1999гг, на II международной конференции. (УААН. Киев, 1996), международной научно-практической конференции «Повышение эффективности ведения свиноводства» (Быково, 1999).

Объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, трех глав, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы. Материал изложен на 104 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц, 5 рисунков, 1 диаграмму. Список литературы включает 161 источник, в том числе 120 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Фролкин, Дмитрий Анатольевич

ВЫВОДЫ

1. Впервые в условиях Российской Федерации методом ПЦР-ПДРФ была проведена оценка на носительство аллелей RYR 1- гена у различных пород и популяций свиней крупной белой породы племенных хозяйств Московской, Самарской и Тульской областей, а также СМ-1 и крупной черной породы соответственно из Липецкой и Рязанской областей,.

2. Проведена оптимизация методики выделения ДНК из крови свиней для ПЦР-ПДРФ-анализа. Данная методика может быть рекомендована для выделения ДНК из крови свиней при необходимости проведения быстрого анализа большого числа проб. При этом не требуется использование дорогостоящего фермента протеиназы К, а так же существенно снижаются затраты труда и времени по сравнению с другими методиками.

3. Модифицирована и усовершенствована методика ПЦР-ПДРФ для анализа полиморфных вариантов RYR 1- гена у свиней. При использовании предложенного метода ПЦР-ПДРФ, амплифицируемый и рестрикционные фрагменты легко идентифицируются в стандартном (1,6-2%) агарозном геле и снижается время проведения электрофореза.

4. Установлены частоты встречаемости аллелей и генотипов гена КУЮ, а также проведен сравнительный анализ частот встречаемости аллелей и генотипов гена КУЮ у различных популяций свиней крупной белой породы, свиней СМ-1 и крупной черной пород.

5. Сравнительный анализ результатов определения чувствительности свиней к стрессу методом ПЦР и галотанового теста свидетельствует о надежности и высокой степени достоверности ДНК- теста. В отличии от галотанового теста, метод ПЦР-ПДРФ позволяет идентифицировать как устойчивые к стрессу гомозиготные (N14) и гетерозиготные (№1), так и чувствительные к стрессу гомозиготные (пп) рецессивных генотипы.

6. Изучен полиморфизм по 13 системам групп крови и полиморфным белкам у свиней породы СМ-1. Установлена связь гетерозиготного генотипа (N11) с рецессивным Н -/- локусом групп крови.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Исходя из низкой частоты втсречаемости чувствительного к стрессу аллеля п КУЯ 1-гена у свиней пород крупная белая, крупная черная и СМ-1, рекомендуем племенным хозяйствам Российской Федерации в первую очередь проводить тестирование племенных и ремонтных хряков.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Фролкин, Дмитрий Анатольевич, 2000 год

1. Амерханов Х.А., Марзанов Н.С. Генетики работают на будущее // Племенное дело. 1999. - №1. С.7-9.

2. Бабеев A.A. Теоретические и практические аспекты совершенствования пород и гибридизации в свиноводстве // Автореф. дис. докт. с-х. наук. Дубровицы. 1993. 48 с.

3. Безенко С.П. Влияние групповых изоантигенов на сочетаемость пар// Второй Всесоюзный симпозиум по иммунологии воспроизведения. М.: ВИЖ. 1980. - 103 с.

4. Бекенев В. Селекция свиней на пригодность к промышленной технологии // Тез. докл. Всес. конф. общества генетиков и селекционеров. Кишинев. 1982.-Т. 4.-167 с.

5. Бекенев В.А., Гришина Е.Ф., Морева З.И. Продуктивность выводимых заводских линий свиней крупной белой породы: В сб.: "Селекция в животноводстве Сибири".1985.

6. Брем Г., Бренинг Б. Использование в селекции свиней молекулярной генной диагностики злокачественного гипертермического синдрома (MHS) // Генетика 1993. - Т. 29. - N 6. - С. 1009 -1013.

7. Василенко Д.Я. Оправдана ли селекция на узкую специализацию // Зоотехния 1991.-№ 3.-С. 15 - 17.

8. Водолазская В. Откормочные и мясные качества стрессустойчивых и стрессчувствительных свиней // Свиноводство. 1983. - №. 3. - С.З.

9. Водолазская В. Стресс-чувствительность чистопородных и помесных свиней // Свиноводство. 1982. - №. 9. - С. 38 - 39.86

10. П.Волощик П., Дмитриева Н., Нетеса А. Определение стресс-чувствительности галотановым методом // Свиноводство.-1981.-№1.-С. 3435.

11. Гильман З.Д. Пути и методы изучения качества свинины в колхозах и совхозах Белорусской ССР // Сб. науч. трудов ВАСХНИЛ -1977.1. С. 125-131.

12. Гончарова Л., Данилин А., Солдаткина Ю., Баран Л. Динамика молочной продуктивности и аминокислотный состав молока свиноматок -первоопоросок, оцененных по реакции на галотан // Тр.УралНИИ СХ -1988.-Т. 52.-С. 72-75.

13. Данилин А. В. Селекционно-генетические особенности различных пород свиней, разводимых в Рязанской области // Автореферат дис. канд. с-х наук. Дивово. - 1998. - 20с.

14. Зиновьева Н. А., Попов А. Н., Эрнст Л. К. и др. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве // Дубровицы. 1998. 47с.

15. Кошелева Г.Н. Физиолого-биохимические аспекты стресса у свиней, обуславливающие появление PSE мяса // Сб. науч. трудов НИСГИЖ 1994. -Вып. 1. - С. 116-123.

16. Ладан П. Е., Козловский В.Г., Степанов В.И. Методы повышения качества свинины. М.: Колос, 1977. - С. 98 - 110.

17. Ладан П. Е., Степанов В. И., Максимов Г. В. Подверженность организма свиней действию некоторых стрессовых факторов // Докл. ВАСХНИЛ. -1977. № 10. - С. 26 - 28.

18. Максимов Г.В. Качество мясной продукции и стрессустойчивость свиней в связи с селекцией на мясность // Сельскохозяйственная биология. 1995. - №2.-С. 13-35.

19. Марзанов Н.С. Иммунология и иммуногенетика овец и коз. Кишинев: Штиинца, 1991. -237 с.

20. Медведев В., Ткачев А. Повышение качества свинины методами направленной селекции // Сб. науч. трудов Ленинградского СХИ -1978. -Т. 342. С. 74 - 76.

21. Никитченко И.Н. Гетерозис в свиноводстве. Л.: Агропромиздат. 1987. -215 с.

22. Никитченко И.Н., Романов Ю.Д., Трощенкова Л.В. Новый метод оценки свиней по устойчивости к стресс-синдрому // Информационный листок. -Минск.- 1982. N214. -2 с.

23. Никитченко Н. Способ определения стресс-устойчивости свиней с помощью галотана // Рекомендации МСХ СССР по внедрениюдостижений науки и передового опыта в производство. М.: -1981. -С.51 - 52.

24. Павленя В.П. Естественная резистентность организма чистопородных и помесных свиней и их продуктивность // Сб.науч. трудов Горки, 1980. -619 с.

25. Плохинский H.A. Руководство по биометрии для зоотехников. М.: Колос, 1969. - 256 с.

26. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Воздействие стрессовых факторов на здоровье и продуктивность сельскохозяйственных животных. Минск. -1981.-42 с.

27. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Стрессы у сельскохозяйственных животных. М.: ВО Агропромиздат. 1987. - 192 с.

28. Рыбалко В.П. Специализированная линия мясных свиней. Киев.1989.

29. Сагло А. Возрастные особенности естественной резистентности и физиологическая реактивность организма поросят раннего отъема // Сб. науч. тр. МВА 1973.-Т. 66.-С. 118- 119.

30. Сизова М. Естественная резистентность свиней пород крупная белая, ландрас и их помесей в условиях Алтайского края и ее роли в свиноводстве // Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Алтайский НИИСХ.-1973. -18 с.

31. Соловьев Н.В., Жиркова Н.Р. Новый тип свиней в украинской степной белой породе // Тез.докл.5-го съезда генетиков и селекционеров Украины. Киев. -1986. N 5. - С.102-103.

32. Сысоев А.А. Воспроизводительная функция при стрессах у свиней на комплексах // Сб. тр. Воронежского СХИ. 1981. - Т. 114. - С. 103 - 108.

33. Тихонов В.Н. Генетика мини-свиней.- Новосибирск. -1990. 209 с.

34. Тихонов В.Н. Иммуногенетика и биохимический полиморфизм домашних и диких свиней. Новосибирск: Колос. 1991. - 301 с.

35. Ткачев А.Ф., Билько Л.Л., Островский А.С. Новая специализированная линия

36. Рекса 599 в уэльской породе. Киев. 1989.

37. Устинов Д.А. Стрессы у поросят // В кн. :Поведение животных в условиях промышленных комплексов. М.: 1979. - С. 152 -164.

38. Федоров В.Х. Продуктивность и показатели резистентности организма свиней в связи с их генотипом // Автореф. канд. дис. Персиановка. 1987.

39. Фомичев Ю.П., Клецко Н.Г., Татулов Ю.В. Мониторинг качества свинины в процессе производства и переработки // Генетика, селекция и воспроизводство сельскохозяйственных животных. Москва. - 1994. - С. 107-116.

40. Хуан Jly Шен Биохимические и иммуногенетические маркеры крови и перспективы их использования в разведении свиней Китая и России // Автореф. дис.докт.биол. наук. Дубровицы. 1994. - 48 с.

41. Allen W. Losses of pigs due to the "acute stresssyndrome" in the United Kingdom // Muscle function and porcine meat quality. 1979. - P. 495 - 499.

42. Andresen E. Linear sequence of the autosomal loci PHI, H and 6-PGD in pigs // Ibid. 1971. -№ 2. - P. 119-120.

43. Bauer H. Halothantest passe der MHS-Gentest kommt !// Zeitschrift fur Schweineproduktion. - 1992. - V. 40. - №. 1. - S.3.

44. Bekenev V. A., Muratov A. A. The prediction of the sous productivity by stress-reactivity method // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

45. Beckmann G. Neue Wege in der Stressicherung beim Schwein // Schweinewelt. 1991. -B. 16. -S. 25-26.

46. Blendl H.M., Hollwich W., Matzke P., Hartl. Halothan-Test als Selektionsmethode beim Schwein bisherige Erfahrungen aus der Mastprufungsanstalt Grub // Bayerisches Landwirtschaftliches Jahrbuch. -1981.-h. 4.-S.- 475 -483.

47. Boon J. Keep an eye on PSE // Pig Farming. 1976. - V. 24. - № 9. - P. 63 - 64.

48. Brucker R. Mitochondrienuntersuchungen und Untersuchungen am Sarkoplasmateticulum an Poland-China-Schweinen, die Malignet Hyperthermie erkrankt waren // Der Anestesist. 1971. - V. 20. - S.324.

49. Brenig B., Jurs S., Brem G. The porcine PHIcDNA linked to the halothane gene defects a IlindHI and Ilsal RFLP in normal and malignant hyperthermia susceptible pigs // Nucl. Acids Res. 1990. - V. 18. - P. 388.

50. Brenig B., Brem G. Genomic organisation and analysis of the 5 end of the porcine ryanodine receptor gene (RYRI) // FEBS Letters. 1992. - V. 298. - P. 277 - 279.

51. Bulla J. Usiknove a jatocne vlastnosti osipanych vo vztahuk reakcii na halotanovy test //Nas. chov. 1981. - V. 43. - №. 10. - S. 464 - 465.

52. Campion D., Topel D. Rolle des Skelettmuskels bei der Malignen Hyperthermie // Animal SCI. 1975. - V.41. - S.779.

53. Carlson I., Christian L. Production and carcass traits of PSS normal and stress carrier swine // Am. Landrace. 1979. - 28. № 6. - P. 87 - 90.

54. Davies W., Harbitz I., Fries R. et al. Porcine malignant hyperthermia carrier detection and chromosomal assignment using a linked prode// Anim. Genet. -1988. -V.19. P. 203 -212.

55. Denborough M. Mitochondrien- und andere Untersuchungen an australischen Landschweinen, die an maligner Hyperthermie leiden // Der Anestesist. 1971.- V. 20. S.324.

56. Dvorak J. Vysledky DNA testu u prasat. Brno. -1997. -37 s.

57. Dvorak J. Molekularni gen;etika zvirat // Mendelova zemedelska a lesnicka univerzita v Brne. 1997. - 80 S.

58. Eikelenboom G. et al. Results of halothane testung in offspring of Dutch Landrace boars of different halothane phenotypes // Livest. Product. Sc. 1980. -V.7. -№. 3.- P. 283 -289.

59. Eikelenboom G. Production characteristics of dutch landrace and dutch jorkshire pigs as related to their susceptibility for the halothane induced malignant hyperthermia syndrome // Livest. product. Sc. - 1978. - V. 5. - №. 3.- P. 277 284.

60. Eikelenboom G., Minkema D. Prediction of pale, soft and exudative muscle with a nonlethal test for the halothaneinduced porcine malignant hyperthermal Syndrome // Neth. J. Vet. Sei. 1974. - V. 99. - 421 s.

61. Estany J., Sorensen D. Estimation of genetic parameters for litter size in Danish Landrace and Yorkshire pigs // Animal Science. 1995. - V. 60. - P. 315 - 324.

62. Fabiansson S. Mortality among pigs during transport and waiting time before slaughter in Sweden // Surd. J. agr. Res. 1979. - V.9. - № 1. - P. 25 - 28.

63. Falkenberg H., Hammer H., Ritter E. Abshagen Untersuchungen zur genetishen Determiniertheit der Besamungstauglichkeit von Jungebern // Arch. Tierz.-1988.-№31.-S. 489-499.

64. Falkenberg H., Hammer H., Ritter E. Genetische und phenotypische Beziehungen zwischen Merkmalen der Mast- und Ansatzleistung von Ebern in zentralen Aufzuchtstationen // Arch. Tierz. 1989. - V. 32. - S. 163-171.

65. Falkenberg H., Matthes W., Schwerin M. MHS- und Ck-Tests bei Schweinen, deren Beziehungen zueinander sowie zu weiteren Leistungsmerkmalen // Arch. Tierz. 1993. - V.36. - S. 175 - 188.

66. Falkenberg H., Ritter E., Abshagen H. Untersuchung genetischer Aspekte an Spermamerkmalen von Jungebern // Arch. Tierzucht. 1982. - V. 25. - S. 95 -107.

67. Fill M., Coronado R., Mickelson J. R., Vilven J. Abnormal Ryanodine Receptor Channels in Malignant Hyperthermia. // Biophysica. 1990. J. 50.P. 471 475.

68. Finger K.W., Dzapo V., Wassmuth R. Morphometrische Untersuchung am Muskulus longissimus dorsi von Schweinerassen unterschiedlicher Konstitutionen // Tierzucht und Zuchtungsbiol. 1986. - 103. - S. 59 - 68.

69. Forster M., Brening B., Brem G. et al. Der MHS-Gentest fur die sichere Stresresistenzzuchtung beim Schwein // Schweine-Zucht und Schweine-Mast. -1992. Bd. 40. - S. 4 - 6.93

70. Greimann K. Untersuchungen über den Einfluss verschiedener Futgsreqimes homologen und heterologen Kolostrums auf die Immunglobulin -Konzentrationen im Serum mutterlos auf gezogener Ferkel // Diss, medicin veter. Hannover. 1994. -139 s.

71. Grosse-Lembeck K. Untersuchungen zur Entwicklung von Mutterlinien, dargestellt an der Deutschen Landrasse in Schleswig-Holsten // Diss, an der Agrarwissenschaftl. Fakultat. Kiel. - 1983.

72. Gudilin J. J., Hart V. V., Petukhov V. L., Zhuchaev K. V. Estimation of susceptibility to the porcine stress syndrom // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4 7. 1995.

73. Gustafson S., Proper J. A., Bowie E. J. W., Sommer S. S. Parameters affecting the yield of DNA from human blood // Anal. Biochem. 1987. - V. 165. - P. 294 - 296.

74. Hanset R., Sealais S., Grobet L. From the classical to the halothane-resistant Pietrain in Rehal // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

75. Hardge T., Scholz A. The influence of RYR-genotype and breed on fattening performance, carcass value and meat guilty // 45th Annual Meeting of the

76. European Association of Animal Production. Edinburgh. September 5-8. 1994.

77. Hardge T., Gregor G. The influence of RYR1-genotype on male fertility in pigs // 46 th Annual Meeting of the EAAP. Prague. September 4-7. 1994.

78. Haugwitz T., Lengerken G. Untersuchungen zur methodischen Durchfuhrung des Halothantests beim Schwein // Arch. Tierzucht. 1985. - V. 28. - №. 2. - S. 147 - 155.

79. Hennebach H. Untersuchungen zur Voraussage der Fleischbeschafenheit mit Hilfe der Muskelbiopsie am lebenden Schwein // Arch. Tierzucht. 1979. - V. 22.-h. 3.-S. 153 - 165.

80. Hilbert F. Zusammenhange zwischen physikochemischen Fleischparametern und molekulargenetischer PSE-Diagnostik // Wiener Tierarztliche Monatsschrift. 1994. - № 81. - S.52.

81. Hilbert F., Fleckna G., Seiwald G., Mayr W. PCR-Analyse des Ryanodinrezeptorgens zur MHS-Genotypisierung bei österreichischen Schweinerassen // Wiener Tierarztliche Monatsschrift 1994. - V. 81. - S. 129 -134.

82. Hojny J., Hradecky J., Hruban V. Recombination between the S and the H blood group loci in pigs // Anim. Blood Groups Biochem. Genet. 1984. - V. 15.-P. 29-36.

83. Johnson B. We must put an end to pale, soft, watery pork // Progr. Farmer. -1970. -V.85. -№ 10. P.43-35.

84. Jorgensen P. Assotiation mith porcine halothane sensitivity and meat quality // Muskle function and porcine meat quality.-1979.-P.386-395.

85. Johansson K., Kennedy B. Estimation of genetic parameters for reproductive traits in pigs. Acta Agric.Scand. 1985. - V. 35. - P. 421 - 431.

86. Juneja R.K., Gahne B., Edifors-Lilja I. Genetic variation a pig serum portein locus Po-2 and its assignment to the Phi, Hal, S , H, Pgd linkage group // Animal Blood Groups and Biochemical Genetics. 1983. - № 1. - P. 11-17.

87. Kallweit E. Methods for evaluation of meat quality in research and practice used in member states of the European Community. Current Topics Vet. Med. Anim. Sci. 1987. V.33. - P. 107 - 116.

88. Kallweit E. Zuchmassnahmen zur Verbesserung' der Stressresistenz und Fleischbeschaffenheit // Zuchtungskunde. -1987. V.9.- № 6.- S. 406 - 415.

89. Kallweit E., Schmidt U., Unshelm J. Methodische Probleme des Halothantests // Zuchtungskunde. 1980. - V.52. - № 2. - S. 114 - 121.96

90. Knjazev S. P., Hart V. V., Zhuchaev K. V. Efficiency of selection for reducing of swine stress-sensitivity // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

91. Kolb E. Neue biochemische Erkenntnisse zur Entstelung der Stressanfalligkeit und zu den Veränderungen bei Schweinen mit blasser weicher und wassriger Fleischqualitat (PSE-Fleisch) // Tierzucht. 1987. - V. 41. - № 12. - S. 557 -559.

92. Komar E. Stan czynnosciowy watroby u swin w znieczuleniu ogolnym wywolanum dozylnum podaniem modnika cloratu/ nembutalu, cuna rkonu i Erevinarkonu // Pol. arch, weter. 1980. - V. 21. - №. 4. - P. 423 - 437.

93. Kovalenko V. F. Method of determining stress-liability in piglets // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

94. Kuryl J., Korwin-Kossakowska A., Kocwin-Podsiadla. Relation between the point mutation at position 1843 in Ryanodine Receptor gene (RYR 1) and occurence of PSE Meat in pigs // Animal Science Papers and Reports. -1995. -V. 13-№ 1.-P.11-16.

95. Lahucky R., Cheat K. S., Cheat A. M. et al. Heterogenity of meat quality and possibility to predict on live pigs // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

96. Le Roy P., Sellier P. The current french breeding programme for improvement of meat quality in pigs // Procedings of the 2nd International Conference. 7 - 8 November. Siedle. - Poland. - 1994. - P. 1 - 13.

97. Lee G., Haley C. Comparative farrowing to weaning performance in Meishan and Large White pigs and their crosses // Animal Science. 1995. - V. 60. - S. 269-280.

98. Lengerken G. Eignung biochemischer Kennwerte und ausgewählter Regulationsaysteme fur die Fruherkennung einer Pradisposition zur Ausbildung von Fleischqualitatsmangeln beim Schwein // Diss, zur Promotion. Leipzig. -1977. - 165 s.

99. Lengerken G., Schwalbe M., Schlenker G. Zuchterische Maßnahmen zur Verbesserung von Belastungsempfindlichkeit und Fleischbeschaffenheit beim Schwein // Tierzucht. 1982. -V. 36. - H. 6. - S. 257 - 259.98

100. MacLennan D. H., Phillips M. S. Malignant Hyperthermia. // Science. -1992. -V. 256. P. 789 - 794.

101. McGloghlin P. Genetic aspects of pig meat quality. Pig News Inform. 1980. -V. 1. - №. l.-P. 8-9.

102. McCarthy T. V., Healy S. J. M., Heffron J. J. A., Lehane M., Deufel T., Lehman-Horn F., Farral M., Johnson K. J. Localisation of the Malignant Hyperthermia susceptibility locus to human chromosome 19ql2-13.2. // Nature. 1990. V. 343. P. 562-564.

103. Mickelson J. R., Ross J. A., Reed B. K.,Louis C. F. Enhanced Ca2+-induced calcium release by isolated sarcoplasmic reticulum vesicles from Malignant Hyperthermia suscebtible pig muscle // Biochimica et Biophysica Acta. -1986. -V. 86. P. 318-328.

104. Mickelson J. R., Gallant E. M., Rempel W. E. et al. Effect of the halothane-sensitivegene on sarcoplasmic reticulum function // American Journal of Physiology. -1989. V. 257. - P. 787-794.1. Q9

105. Mlynek J. Gene effect of HAL gene on productivity and biochemical indices in pigs // 46 th Annual Meeting of the European Association of Animal Production. Prague. September 4-7. 1995.

106. Muller E. Ursachen und Bekampfungsmoglichkeiten von Verlusten bei Schweinetransporten // Der Prakt. Tierarzt. 1975. - V. 56 . - H. 11. - S. 664 -670.

107. Nakajima E., Sun Y., Yazawa T. et al. PSR-SSCP screening for detection of a point mutation in the swine RYRI gene.- Proc. of the XXIV International Conference on Animal Genetics. Prag. 1994. - 44 s.

108. Petri W. et al. Untersuchungen zur Stressanfalligkeit beim Schwein // Tierzuchter. 1979. - V. 31. - №. 12. - S. 496 -498.

109. Pfeiffer H. Massnahmen zur Selektion wiederstandsfahiger Zuchttiere und Erzeugung qualitatsgerehter Schlachtschweine // Tierzucht. 1986.- V. 40. - № 3.-S. 126- 129.1. AOO

110. Pommier S., Houde A. Effect of the genotype for Malignant Hyperthermia as determined by restriction endonuclease assay on the guality charaöteristics of commercial pork loins // J. of Anim. Sei. 1993. - 71. - P. 420 - 425.

111. Prunner R. Molekulargenetische Untersuchungen des Malignen Hyperthermie Syndroms mittels PCR bei Deutschen Landrasseschweinen in Osterreich // Wiener Tierarztliche Monatsschrift. 1993. - № 80. - S.319.

112. Rasmussen B.A., Christian L.L. H blood types in pigs as pred ictors of stress susceptiblity // Science. - 1976. - V.191. - №. 4230. - P. 947 - 948.

113. Rasmusen B.A. Isozymes in swine breeding // Current Topics in Biol. Med. Res.-N.Y. 1983.-Vol.11.-P.249-268.

114. Rempel W., Yu Lu M., Mickeson J. et al. The effect of skeletal muscle ryanodine receptor genotype on pig performance and carcass guality traits // Animal Science. 1995. - V. 60. - P. 249 - 257.

115. Rydhmer L., Lundeheim N., Johansson K. Genetic parameters for reproduction traits in sows and relations to performance-test measurements // J. Anim. Breed. Genet. 1995. - V. 112. - P. 33 - 42.

116. Saiki R. K., Scharf S. J., Faloona F. at al. Enzymatic amplification of b-globulin genomic sequencec and restriction site analysis for diagnostic of sickle cell anemia // Science. 1985. - V. 230. - P. 1350 - 1354.1. AOi

117. Saiki R. K., Gelfand D. H., Stoffel S., Scharf S. J. at al. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA-polymerase // Science. 1988. - V. 239. - P. 487 - 491.

118. Schlenker G., Jugert L., Mudra K., Pohle M., Heinze C. Spermaqualitat von Ebern unterschiedlicher Halothanempfindlichkeit // Mh. Vet.-Med. 1984. - V. - 39.- S. 760 - 763.

119. Schmitten F. Zuchterische Möglichkeiten zur Verbesserung der Fleischbeschaffenheit // Vortrag anlalich der 35. Hochschultagung der Landw. Fakultat der Universität. Bonn. - 1982.

120. Schmitten F., Schepers K. Untersuchungen zur Diagnose der Stressanfalligkeit und ihrer Beziehungen zu Leistungseigenschaften beim Schwein // Zuchtungskunde. 1981. -V. 53. - №. 4. - S. 215 - 252.102102

121. Technology. Brazil.- 1995. 35 p. 147. Sigl G. Genotyp-Diagnostik des Malignen Hyperthermie-Syndroms bei österreichischen Schweinerassen // Wiener Tierarztliche Monatsschrift. - 1993. -№80.-S. 319.

122. Simpson S.P., Webb A.J. Growth and carcass performance of british landrace pigs heterozygots at the halothane locus // Anim. Prod. 1989. - V. 49. - P. 503- 509.

123. Smith W., Wilson A. A note on some factors influencing muscle pH, values in commercial pig carcasses // Anim. Prod. 1978. - V. 26. - №. 2. - P. 229 - 232. 150. Steane D., Webb A.J. New stress lines set up // Pig Farming. - 1979. - V. 27.- S. 84 85.

124. Sybesma W., Eikelenboom G. Malignant hyperthermia syndrome in pigs // Neth. J. vet. Sei. 1969. - V. 2. - 155 s.

125. Van der Steen H. Material and genetic influences on production and reproduction traits in pigs // Diss. Agric. Univ. of Wagenigen. Holland. -1983.

126. Vangen O. Genetic control of reproduction in pigs: from partur ition to puberty. Proc. of the 3th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production // Lincoln. 1986. - P. 168 - 179.

127. Versterlung S. Stressproblemer hos swin. En arsag til pludseli ge dodsfald // Uceskrift for Jordbrug. 1979. - V.124. - №. 24. - P. 518 - 520.

128. Vestergaard T. Obicttive e metod: per la selezione suina // Riv. Suinicolt.-1987. -Y.28. N 9. -P.21 -32.

129. Vorschlage N.N. zur Entwicklung strasresistenter Sauenlinien in der Schweinzucht // Zuchtungskunde. -1983. Bd.55. - S. 1-4.

130. Watanade S. Further evidence for the existence of the PHJ , Hal haplotype in the Landrace breed // Anim. Blood Groups biochem .-1978.-V. 94.-P.253 256.

131. Webb A.J., Grundy B. Kitchin P. Within-litter effect of the Hal-1843 heterozygote on lean growth in pigs. Proceedings of the 5th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production. Guelph.-1994.-August.-P. 7-12.

132. Webb A. Role of the halothane test in pig improvement // Pig News. Inform. -1981.-V. 2. №. l.-P. 17-23.

133. Webb A., Jordan C. Halothane sensitivity as a field test for stress susceptiblity in the pig // Anim. Prod. -1978. V. 26. - №. 2. - S. 157 - 168.

134. Webb A.J., Jordan C.H. The halothane test in genetic improveme nt programmes: experiments with Pietrain / Kampshire / Muscle function and porcine meat qality. 1979, - P. 418 -426.

135. Wu C., Chem Y., Zhang Q. Chinese Breeds of domestic animals for gene mapping // Beltsville Symposium XX; Biotechnologys role in the genetic improvement of farm animals. 1995. - P. 59.