Синтез редких ω-3 полиненасыщенных жирных кислот и изучение их биохимических свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Голованов Алексей Борисович
Голованов Алексей Борисович
кандидат наук
2021
- Специальность ВАК РФ00.00.00
- Количество страниц 125
Оглавление диссертации кандидат наук Голованов Алексей Борисович
Список сокращений
Введение
Литературный обзор: Роль липидов в воспалительных процессах
1. Введение
2. Классификация липидов
2.1. Сфинголипиды
2.2 Сфингозилсульфофосфорилхолин
2.3 Фосфолипиды и лизофосфолипиды
3. Жирные кислоты как структурные компоненты фосфолипидов и пути их метаболизма
3.1 Монооксигеназный путь, Cyt P-450 зависимый метаболизм
3.2. Циклооксигеназный путь
3.3 Липоксигеназный путь
3.3.1. 5-Липоксигеназа (ALOX5)
3.3.2 15-Липоксигеназа (ALOX15)
3.3.3 Гидропероксидазная активность ALOX и вторичный метаболизм липоксигеназных продуктов
3.3.4 Лейкотриенсинтазная активность
3.3.5 Субстраты липоксигеназ
3.3.6 Физиологическая роль ALOX15
3.3.6.1 Провоспалительные свойства ALOX15
3.3.6.2 Противовоспалительные свойства ALOX15
4. Роль ПНЖК и их метаболитов в купировании воспалительных процессов
5. Заключение
Результаты и обсуждения
1. Химический синтез ПНЖК
54
1.1. Оптимизация технологии получения ПНЖК с использованием модельного ряда Z,Z-диеновых кислот с различной длиной углеводородной цепи
2. Предшественники высших ю-3 ПНЖК в процессах окислительного метаболизма с участием липоксигеназ и циклооксигеназ
2.1 Модель ALOX5
2.2 Модель ALOX15
2.3. Модель COX-1
2.4. Модель COX-2
Экспериментальная часть
1. Химический синтез
1.1. Материалы и общие методы
1.2. Синтез модельного ряда диеновых кислот с различной длиной углеводородноцй цепи
1.2.1. Синтез исходных соединений
1.2.2. Получение (57,87)-тетрадекадиеновой (16), (77,107)-гексадекадиеновой (17) и (1147)-гептадекадиеновой кислот (18) через ацетиленовые предшественники
1.3. Синтез ю-3 арахидоновой (32) и стеаридоновой кислот (33)
1.3.1. Синтез исходных соединений
1.3.2. Синтез (87,117,147,177)-эйкозатетраеновой (32) и (67,97,127,157)-октадекатетраеновой кислот (33) через их ацетиленовые предшественники
2. Биохимические исследования
2.1. Материалы и общие методы
2.2. Получение рекомбинантных препаратов белка
2.3 Исследование соединений 32 и 33 в качестве субстратов и ингибиторов ферментов каскада перекисного окисления липидов
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ АВТОРА ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
ПРИЛОЖЕНИЯ
Список сокращений
AEA - арахидоноилэтаноламид
2AG - 2-арахидоноилглицерин
AIA - адъювантный артрит
AJA - аюлемовая кислота
ALA - а-линоленовая кислота
ALX - рецептор липоксина А4
AP-1 - Белок-активатор-1
ATL - аспирин иницированный липоксин
AUDA - 12-(3-адамантан-1-ил-урейдо)-додекановая кислота
BLT - рецептор лейкотриена B4
С1Р - церамид-1-фосфат
CaLB - кальций зависимый липид связывающий домен
СВ - каннабиноидный рецептор
CerK - церамидкиназа
ChemR23 - хемотоксический рецептор
СОХ - циклооксигеназа
cPLA2 - цитоплазматическая фосфолипаза А2
CYP - цитохром Р450
DAG - 1,2-диацилглицерин
DHA - докозагексаеновая кислота
DHET - дигидроксиэйкозатриеновая кислота
DNBS - сульфонат 2,4-динитробензойной кислоты
ЕАЕ - экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит
Edg - эндотелиальный ген дифференциации
ЕЕТ - эпоксиэйкозатриеновые кислоты
2-EG - эпоксиэйкозатриеноилглицерин
EH - эпоксидгидролаза
eNOS - эндотелиальная NO синтаза
ЕРА - эйкозапентаеновая кислота
FAAH - амидогидролаза жирных кислот
fMLP - п-формил-метионил-лейцил-фенилаланина
FPR - формил пептидный рецептор
GLA - у-линоленовая кислота
GPCR - G белок-сопряжённый рецептор
HETE - гидроксиэйкозатриеновая кислота
HDL - липопротеины высокой плотности
5-HPETE - 5-гидропероксиэйкозатетраеновая кислота
HUVEC - эндотелиальные клетки пупочной вены человека
ICAM - внутриклеточные молекулы адгезии
IKK - субъединица фактора NFkB
iNOS - индуцибельная NO-синтаза
IL - интерлейкин
IP3 - 1,4,5-трифосфат
LA - линолевая кислота
LO (LOX) - липоксигеназа
LPC - лизофосфатидилхолин
LPS - липополисахарид
LT - лейкотриен
LTA4 - лейкотриен A4
LXA4/B4 - липоксин A4/B4
MAFP - метил арахидонил флюорофосфонат
MAPEG- мембранно-связанные белки в метаболизме эйкозаноидов и глутатионов
MCP - моноцитарный хемоаттрактантный белок
mPGES - микросомальная синтаза PGE
NFKB - ядерный транскрипционный фактор кВ
NSAID - нестероидный противовоспалительный препарат
OEA - оленоилэтаноламид
PA - фосфатидная кислота
PAF - фактор активации тромбоцитов или 1-О-алкил-2-ацетил^п-глицеро-3-фосфохолин
PG - простагландин
PGS - простагландинсинтаза
PPAR - рецептор, активируемый веществами, вызывающими пролиферацию пероксисом
PPRE - PPAR-реагирующий элемент
PKC - протеинкиназа C
PLA2 - фосфолипаза A2
PMN - полиморфоядерные клетки
PUFA - полиненасыщенные жирные кислоты
RvD - резолвин D
RvE - резолвин E
RXR - рецептор ретиноевой кислоты S1P - сфингозин-1-фосфат she - растворимая эпоксидгидролаза SPC - сфингозилсульфофосфорилхолин sPLA2 - секреторная фосфолипаза A2
STAT - преобразователь сигнала и активатор транскрипции
TGFp - трансформирующий фактор роста в
ТНС - тетрагидроканнабинол
tPA - тканевой активатор плазминогена
TRPV4 - ванилоидный рецептор TRPV 4-канальный
ТХА2 - тромбоксан А2
TXS - тромбоксансинтаза
VCAM - молекула адгезии сосудистого эндотелия ДФГ - дифосфотидилглицерин (кардиолипин) ФИ - фосфотидилинозит ФЭ - фосфатидилэтаноламин ФС - фосфатидилсерин ФХ - фосфатидилхолин
Введение
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Другие cпециальности», 00.00.00 шифр ВАК
Разработка технологии пробиотических БАД, обогащенных полиненасыщенными жирными кислотами2013 год, кандидат наук Буянтуева, Лариса Валерьевна
Влияние холестерина и его эфиров на синтез лейкотриенов 5-липоксигеназой клеток млекопитающих2006 год, кандидат химических наук Александров, Дмитрий Андреевич
Совершенствование двухстадийной методики хроматомасс-спектрометрического определения свободных и этерифицированных жирных кислот в биологических образцах2016 год, кандидат наук Орлова Татьяна Игоревна
Синтез и изучение модифицированных субстратов и ингибиторов ферментативной трансформации полиненасыщенных кислот2000 год, кандидат химических наук Иванов, Игорь Владимирович
Субстрат-специфические ингибиторы ферментативных систем перекисного окисления липидов2024 год, кандидат наук Журавлев Александр Михайлович
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез редких ω-3 полиненасыщенных жирных кислот и изучение их биохимических свойств»
Актуальность проблемы
Полиненасыщенным жирным кислотам (ПНЖК) принадлежит одно из важных мест в ряду природных физиологически активных соединений. Они играют ключевую роль во многих биологических процессах, таких как иммунный ответ, воспалительные реакции, регуляция генов, процессы старения и др. ПНЖК индуцируют процессы образования факторов транскрипции, регулирующих синтез белка, участвуют в биосинтезе лигандов - медиаторов процессов передачи сигналов трансдукции, входят в состав клеточных мембран, влияя на их динамические свойства такие как текучесть и проницаемость. Высшие жирные кислоты, такие как EPA [(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-эйкозапентаеновая] и DHA [(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докозагексаеновая], могут не только конкурировать с арахидоновой кислотой (АА) в различных системах окислительного метаболизма, но и являться предшественниками целого ряда противовоспалительных биорегуляторов - резольвинов (Rv), нейропротектинов (NP) и маресинов (MaR). Таким образом, в фармакотерапии большинства патологических процессов наблюдается устойчивая тенденция - поиск «физиологических» регуляторов природной структуры, способных комплексно модулировать сложные биохимические процессы организма, а не ингибировать отдельно взятые ферментативные реакции. Редкие полиеновые кислоты, такие как SDA [(6Z,9Z,12Z,15Z)-октадекатетраеновая] и ю-3АА [(8Z,11Z,14Z,17Z)-эйкозатетраеновая], являясь биосинтетическими предшественниками EPA и DHA, были также обнаружены в ряде природных источников, однако их роль в процессах окислительного метаболизма ПНЖК недостаточно хорошо изучена. С целью изучения роли редких кислот в биохимических процессах окислительного метаболизма ПНЖК, и установления связи структура-биологическая функция необходима разработка технологичных конвергентных подходов к полному химическому синтезу этих соединений и их аналогов.
Цели и задачи исследования
Цель данного исследования заключалась в разработке и оптимизации препаративных путей полного химического синтеза ряда редких природных ю-3 полиненасыщенных жирных кислот на основе полиацетиленового подхода, получения индивидуальных образцов соединений и проведении биохимических исследований с целью выявления механизмов их окислительного метаболизма с участием различных ферментативных систем млекопитающих (ALOX и СОХ). Степень разработанности научной тематики
Ряд проведенных ранее исследований показал ключевую противовоспалительную роль ю-3 высших полиненасыщенных жирных кислот EPA и DHA за счет образования вторичных метаболитов, таких как резольвины (Rv) и нейропротектины (NP), играющих ключевую роль на стадии разрешения воспалительных реакций. Являясь биосинтетическими предшественниками EPA и DHA по Д5-десатуразному пути, ю-3АА и SDA, содержащиеся в некоторых продуктах животного и растительного происхождения, могут не только конкурировать с арахидоновой кислотой в основных метаболитических процессах, а в силу своих структурных особенностей также метаболизироваться с образованием Rv- и NP-подобных структур. Аналогичных биохимических исследований с использованием ю-3АА и SDA ранее не проводилось. Научная новизна
В ходе выполнения данной работы:
• Впервые осуществлен химический синтез природных (5Z,8Z)-тетрадекадиеновой, (7Z,10Z)-гексадекадиеновой кислот, а также ранее не описанной в литературе -(1^,14,?)-гептадекадиеновой кислоты, которые были использованы в качестве удобных моделей при оптимизации отдельных стадий универсальных схем синтеза полиеновых кислот.
• Предложены новые препаративные схемы синтеза редких (8Z,11Z,14Z,17Z)-эйкозатетраеновой и (6Z,9Z,12Z,15Z)-октадекатетраеновой кислот через их полиацетиленовые предшественники.
• Показано, что преимущественно (8Z,11Z,14Z,17Z)-эйкозатетраеновая кислота (ю-3AA) может конкурировать с арахидоновой кислотой в ферментативных моделях окислительного метаболизма млекопитающих с участием ALOX и СОХ.
• Показано, что (87,117,147,177)-эйкозатетраеновая кислота (ю-3АА) под действием ALOX15 подвергается вторичному метаболизму с образованием 8,15-дигидрокситриенов с различной конфигурацией системы двойных связей, и, таким образом, подобно ЕРА и DHA, имеет все необходимые структурные предпосылки для образования биологически активных метаболитов.
Практическая значимость
В ходе выполнения данной работы:
• Оптимизирована универсальная схема синтеза полиненасыщенных жирных кислот состава С14-С20 с различным положением системы двойных связей (ю-3 и ю-6) и их производных, на базе которой отработаны препаративные пути синтеза индивидуальных образцов в количествах, необходимых для проведения биологических исследований. Разработанная схема может быть одновременно использована в синтезе кратно-меченых соединений на стадии каталитического гидрирования.
• Проведен сравнительный анализ основных коммерчески доступных модификаций обращенно-фазовых стационарных фаз С18, используемых при выделении и очистке продуктов каталитического гидрирования, оптимизированы условия выделения индивидуальных соединений с чистотой >99% с применением ОФ-ВЭЖХ.
• Показано, что для очистки и выделения препаративных количеств ПНЖК наиболее подходящими являются стационарные фазы с закрытыми силанольными группами типа Luna С18(2).
• Показана возможность использования катализатора Брауна (Р-2 Ni) для каталитического гидрирования метилен-разделенных полиацетиленовых систем, содержащих более 2-х тройных связей. Подобраны условия для достижения высокой регио- и стереоселективности процесса восстановления системы тройных связей в систему Z-двойных связей.
Основные положения, выносимые на защиту
• Оптимизация универсальных схем препаративного синтеза полиненасыщенных жирных кислот с применением (5Z,8Z)-тетрадекадиеновой, (7Z,10Z)-гексадекадиеновой и (11Z,14Z)-гептадекадиеновой кислот.
• Синтез редких природных (87,117Д47,177)-эйкозатетраеновой и (67,97,127,157)-октадекатетраеновой кислот.
• Исследование редких ю-3 ПНЖК в различных ферментных моделях окислительного метаболизма млекопитающих.
Апробация работы и публикации
Основные результаты работы были представлены на всероссийской конференции «Идеи и наследие А.Е. Фаворского в органической и металлорганической химии ХХ1в.» (Санкт-Петербург, 2010), на IV молодежной конференции ИОХ РАН (Москва, 2010), на XIX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011), на Х чтениях памяти академика Ю.А. Овчинникова (Москва-Пущино, 2011), на международном съезде по органической химии (Казань, 2011), на всероссийской конференции с международным участием «Современные достижения химии непредельных соединений: алкинов, алкенов, аренов и гетероаренов», посвященной наследию М.Г. Кучерова (Санкт-Петербург, 2014), на пятой междисциплинарной конференции «Молекулярные и биологические аспекты химии, фармацевтики и фармакологии» (Судак, 2019). По теме диссертации опубликовано 6 научных статей и 8 тезисов докладов на международных и российских конференциях. Личный вклад автора
Автору принадлежит решающий вклад в проведение всех синтетических и аналитических исследований, а также непосредственное участие в анализе и интерпретации результатов и подготовке научных публикаций. Выполнение работы
Работа является частью научных исследований, проводимых на кафедре химии и технологии биологически активных соединений, медицинской и органической химии им. Н.А. Преображенского ИТХТ им. М.В. Ломоносова в рамках программы «Участник молодежного научно-инновационного конкурса» («У.М.Н.И.К.») ГПД № 12-07 «Разработка методов синтеза биологически активных полиненасыщенных жирных кислот растительного происхождения» 2012 г., гос. задания Минобрнауки РФ 4.128.2014/К «Разработка фундаментальных подходов к синтезу новых физиологически активных соединений для диагностики и терапии онкологических заболеваний» 20142016 гг., гос. задания Минобрнауки РФ 4.9761.2017/Б «Разработка фундаментальных
подходов к поиску и синтезу новых противоопухолевых агентов и диагностикумов на основе биологически активных соединений» 2017-2019 гг., гранта РФФИ 19-54-12002 «Аллостерические эффекторы липоксигеназ как потенциальные лекарственные препараты» 2019-2021 гг. и гос. задании Министерства науки и высшего образования Российской Федерации 0706-2020-0019 «Физические и химические основы создания новых материалов и технологий для диагностики и терапии социально значимых заболеваний» 2020-2022 гг.
Литературный обзор: Роль липидов в воспалительных процессах
1. Введение.
Липиды являются важными структурными компонентами биологических мембран. Многие виды липидов выступают в качестве сигнальных молекул, регулирующих протекание различных внутри- и межклеточных процессов, таких как пролиферация, апоптоз, а также воспалительные реакции. Биологически активные липидные регуляторы образуются в результате гидролиза мембранных липидов в основном при помощи фосфолипаз, что приводит к образованию свободных жирных кислот и лизофосфолипидов, которые либо напрямую оказывают своё действие, либо преобразуются в активные медиаторы. Данный обзор посвящен современному состоянию исследований роли липидных медиаторов, способствующих как инициации, так и купированию воспалительных процессов в организме млекопитающих. В число таких медиаторов входят полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), эйкозаноиды, в том числе эпоксиэйкозатриеновые кислоты (ЕЕТ), активаторы рецепторов, вызывающих пролиферацию пероксисом (PPAR), каннабиноиды, сфинголипиды, церамиды, сфингозин-1-фосфат и сфингозилфосфорилхолин (Рисунок 1) [1].
Липиды, являясь не только структурными компонентами мембран или субстратами различных биохимических процессов, представляют собой центральную связующую платформу, которая регулирует направление и скорость внутриклеточных и межклеточных сигнальных реакций, оказывающих существенное влияние на процессы протекания воспалительных реакций. Воспаление является важным клеточным ответом, регулируемым различными механическими, химическими или иммунологическими стрессовыми факторами. Тонкий баланс между этими воздействиями определяет течение патологического процесса: прогрессирование или купирование заболевания. Воспалительный ответ - это сложная последовательность регулируемых событий, которая начинается с образования провоспалительных медиаторов, мобилизующих клетки имунной системы к месту воспаления. Данный процесс сопровождается противовоспалительной фазой, при которой воспаленные ткани стремятся защитить себя от вредных воздействий. Признанным фактом является центральная роль воспаления в патогенезе заболеваний, характерных для западного образа жизни. Это
такие патологии как опухолеобразование, атеросклероз, диабет, астма, а также нейродегенеративные расстройства - инсульт, болезни Альцгеймера и Паркинсона [2-6]
Рисунок 1. Действие липидов как регуляторов воспалительного процесса
Накопление информации о том, что липиды могут выступать в качестве лигандов и активаторов рецепторов клеточных мембран (например, семейство S1P-рецепторов, ранее обозначавшееся как рецепторы гена дифференциации эндотелия (Edg)) и транскрипционных факторов (PPAR, ОТкВ) заставило вновь сфокусировать внимание на мембранных липидах и производных от них медиаторах. Блокирование биосинтеза эйкозаноидов (простагландинов, тромбоксанов, лейкотриенов) в иммунных клетках и воспаленных тканях является важным инструментом терапии ряда заболеваний, при этом активация сигнального липид-зависимого каскада (образования резольвинов, протектинов, липоксинов, эпоксиэйкозатриеновых кислот) в иммунных клетках и
компетентных тканях способствует купированию воспалительного ответа [7]. В силу того, что многие липидные молекулы (медиаторы) контролируют протекание воспалительных реакций, пути их биосинтеза могут представлять собой потенциальные мишени для терапии широкого ряда заболеваний.
2. Классификация липидов
Разнообразие химического строения липидов чрезвычайно осложняет их классификацию, вследствие чего в настоящее время единая система классификации отсутствует. В соответствии с химическими свойствами липиды делят на две группы: 1) нейтральные липиды, 2) полярные липиды. Каждая из групп включает несколько классов липидов. Обычно классификация базируется на наиболее существенных особенностях строения, но в сложных структурах выбор определяющего признака не всегда однозначен. К группе нейтральных липидов относятся глицеролипиды, диольные липиды, гликолипиды, сфинголипиды, эфиры холестерина, воска. В каждый класс входят соединения нескольких типов в зависимости от природы, числа и положения заместителей.
Р
О
О
О
м
4—о—р—ОХ I
о-
I II
о- о
он
ОР
Рисунок 2. Некоторые представители фосфолипидов
Полярные липиды разделены на три подгруппы в соответствии с характером кислотного остатка: фосфолипиды, фосфонолипиды и сульфолипиды. Первые две подгруппы включают фосфорсодержащие соединения, но различаются характером связи спиртового компонента с фосфорным остатком. В фосфолипидах имеется связь О—Р, в фосфонолипидах С—Р. Наиболее хорошо изучены фосфолипиды и известно большое число представителей этого класса липидов. В подгруппу фосфолипидов входят глицерофосфолипиды, фосфогликолипиды, сфинголипиды и диольные фосфолипиды; они аналогичны соответствующим классам нейтральных липидов и могут быть получены из них, однако содержат большее число типов, вследствие дополнительной вариабельности в строении из-за возможности замещения в остатке фосфорной кислоты [8] (Рисунок 2). В подгруппы фосфонолипидов и сульфолипидов входят аналогичные соединения тех же типов.
2.1. Сфинголипиды
Внимание исследователей в настоящий момент привлекают липиды, отвечающие за воспалительный процесс в организме. Два сфинголипида, церамид и сфингозин-1-фосфат (Б 1Р) - обладают ключевыми регулирующими функциями в клетке, выстраивая так называемый клеточный реостат, определяющий рост клетки и апоптоз (Рисунок. 3). Известно, что баланс между церамидами и Б1Р является ключевым фактором, определяющим баланс между про- и противовоспалительными действиями.
Первое подтверждение было предоставлено Ва11ои и др., продемонстрировавшими, что сфингозин и церамид с короткой цепью усиливают стимулируемое цитокином образование PGE2 в культуре фибробластов кожи человека. Ва11ои и др. показали, что церамид усиливает экспрессию мРНК СОХ-2, не затрагивая экспрессию мРНК PLA2 [9]. Более того, ВаЫ^е и др. сообщают, что церамид вызывает высвобождение арахидоновой кислоты из макрофагов1, что позволяет предположить, что церамид оказывает стимулирующее воздействие на фермент PLA2 [10]. В соответствии с этими данными церамид также стимулирует высвобождение арахидоновой кислоты в
1 Макрофаги (от др.-греч. цакро^ — большой, и фауо^ — пожиратель (синонимы: гистиоцит-макрофаг, гистофагоцит, макрофагоцит, мегалофаг-пожиратель), полибласты, клетки мезенхимальной природы в животном организме, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков погибших клеток и других чужеродных или токсичных для организма частиц. Термин «макрофаги» введён Мечниковым.
2
мезенхимальных клетках почек за счет прямого соединения с кальций-зависимым
липид-связывающим доменом (CaLB) фермента cPLA2 при изменении концентрации
2+
Са и, таким образом, направляет фермент к мембране и повышает его активность [11]. В лабораторных анализах активности фермента с использованием рекомбинантного белка cPLA2, церамид также повышает каталитическую активность.
Недавно было высказано предположение, что в клеточных культурах церамид 1-фосфат (С№) может напрямую активировать cPLA2 [12,13], хотя такое воздействие на клеточную культуру наблюдалось только тогда, когда добавляли к клеткам вместе с додеканом в качестве растворителя, который обладал значительной цитотоксичностью [14]. Додекан ранее показал себя как стимулятор образования опухолей на примере модели канцерогенеза кожи.
Участие и генерирующего его фермента церамидкиназы (СегК) в
образовании воспалительного PGE2 было подтверждено данными биологических испытаний, показывающими, что снижение СегК посредством трансфекции siRNA отрицательно регулирует вызываемое цитокином высвобождение арахидоновой кислоты в колонии клеток рака легких. Так, согласно этим исследованиям, от ингибитора СегК можно было бы ожидать противовоспалительного действия. Недавно разработанный ингибитор СегК, NVP-231, 1С50 которого находится на уровне 10 нмоль/л, не оказывал никакого эффекта на вызванную агонистом активность cPLA2, высвобождение арахидоновой кислоты и образование PGE2 ни в нейтрофилах, ни в макрофагах, ни в фибробластах [15]. Более того, клеточные культуры с недостатком СегК по-прежнему демонстрировали активацию cPLA2 при стимуляции различными агонистами. Это практически исключает роль в активации cPLA2. Кроме того, у млекопитающих с недостатком СегК в экспериментальных моделях воспаления не было обнаружено внешних признаков протекания воспалительных процессов, ассоциированных с миграцией нейтрофилов в активированный эндотелий, активной или пассивной кожной анафилаксией или артритами, вызываемыми антигенами или серозной жидкостью. Однако при тестировании на модели скоротечной пневмонии мыши с недостатком
2 Мезенхима (от др.-греч. цесо^ — средний и еу%одо<; — сочный) — зародышевая соединительная ткань большинства многоклеточных животных и человека.
CerK наблюдалась нейтропения и более серьезные поражения при заражении Streptococcus pneumoniae, что можно объяснить нарушением гомеостаза нейтрофилов [16].
Предположение о способности церамида вызывать воспалительные реакции в животном организме было высказано Gulbins [17], который показал, что у млекопитающих с муковисцидозом и недостатком регулятора трансмембранной проводимости (в этом случае муковисцидоз развивается с возрастом, в следствие чего животные становятся очень восприимчивыми к легочным инфекциям) церамид также с годами накапливается в дыхательных путях. Это приводит к легочным воспалениям, отмиранию эпителиальных клеток дыхательных путей, отложению DNA в бронхах и высокой восприимчивости к тяжелым заражениям Pseudomonas aeruginosa. Использование амитриптилина, который вызывает протеолитический распад и, следовательно, потерю функции кислотной сфингомиелиназы за несколько минут своего действия, нормализует содержание церамида в легких и предотвращает все патологические симптомы, включая восприимчивость к инфекции [17].
Принимая во внимание провоспалительное действие церамида, а также реостатную модель, использующую S1P в качестве молекулы-детектора церамида, весьма интересно отметить, что S1P может оказывать и противовоспалительное действие. Однако по этому вопросу существуют противоречивые данные. Pettus отмечал [18], что S1P фибробластов повышают экспрессию COX-2 и образование PGE2. Более того, вызываемая цитокином экспрессия COX-2, которая приводит к повышению уровня PGE2, снижались при уменьшении уровня сфингозинкиназы-1 посредством трансфекции siRNA. Это вызывает предположение о положительном регулирующем действии S1P при образовании эйкозаноидов в фибробластах [18].
Так же существуют данные о том, что S1P демонстрирует противовоспалительное действие за счет отрицательной регуляции биосинтеза провоспалительных ферментов, включая sPLA2 и iNOS, повышение уровня образования которых наблюдается при воспалении. Поскольку ясно, что при синтезе простагландинов PLA2, а не COX лимитирует скорость образования данного медиатора, указанное воздействие S1P на sPLA2 также блокирует образование PGE2 [19].
Рисунок 3. Химическая структура сфинголипидов и их производных
Более того, Hughes и др. показали, что S1P вызывает образование макрофагов противовоспалительного фенотипа, что может оказаться важным для антиатерогенного действия, приписываемого S1P и его "переносчику" — HDL [20]. В дальнейшем был проведен ряд исследований, подтверждающих противовоспалительную и антиатерогенную функцию S1P [21]. Однако вопрос о том, какой из рецепторов S1P вносит основной вклад, остается открытым. В этом контексте Nofer и др. [22] предположили, что в атеропротективном действии HDL, которое по меньшей мере частично осуществляется посредством активации eNOS, увеличением образования NO и расширением сосудов, участвует рецептор S1P3 [22]. Существуют данные о том, что
активация эндотелиальных рецепторов S1Р5, вызывает противовоспалительную
с» 3 « ^
реакцию и препятствует взаимодеиствию моноцит - эндотелии, процесса, который является ключевым при атеросклерозе в живых организмах. Более того, вклад рецептора S1P1 подчеркивается тем, что селективный агонист рецептора S1P2 - SEW2871 имитирует действие S1P [23].
Рецептор S1P2 также связан с воспалительными реакциями. В этом контексте, Skoura и др. [24] сообщали, что рецептор S1P2 подвергается стимуляции в эндотелиальных клетках сетчатки во время гипоксического стресса. Более того, снижение экспрессии СОХ-2 и повышение экспрессии eNOS наблюдалось у животных с недостатком рецептора S1P2, что позволяет рассматривать процесс, вызываемый рецептором S1P2, как важное молекулярное событие в патологическом ангиогенезе сетчатки [24].
Механизм, с помощью которого S1P подавляет способствующие воспалению гены, также можно проследить на мезенхимальных клетках почек. Выяснилось, что S1P активирует сигнальный путь TGFp/Smad и, таким образом, имитирует вызванные TGFp клеточные реакции в нескольких типах клеток, включая мезенхимальные клетки, кератиноциты4 и дендритные клетки5 [19]. Похожий противоспалительный механизм также задействован при терапии с использованием иммуномодулирующего препарата FTY720 (финголимода) (Рисунок 3). FTY720 был впервые описан как мощный иммуносупрессор, действующий посредством возврата лимфоцитов во вторичные лимфоидные органы, что вызывает сильное уменьшение количества периферических лимфоцитов, не затрагивая общее количество клеток [25]. В мезенхимальных клетках почек FTY720 не только активирует сигнальный путь TGFp/Smad, но также снижает вызываемую цитокином эксперессию sPLA2. FTY720 продемонстрировал терапевтическое действие во многих моделях заболеваний, связанных с воспалительными процессами, таких как адъювантный и коллагеновый артриты,
3 Моноцит (от греч. |iovo<; — «один» и котос; — «вместилище», «клетка») — крупный зрелый одноядерный лейкоцит группы агранулоцитов диаметром 12—20 мкм с эксцентрично расположенным полиморфным ядром, имеющим рыхлую хроматиновую сеть, и азурофильной зернистостью в цитоплазме.
4 Кератиноцит — клетка эпителиальной ткани эктодермального происхождения, промежуточные филаменты которой представлены белком кератином. Кератиноциты составляют основную массу эпидермиса кожи млекопитающих. Дифференцировка этих клеток включает в себя ороговение.
5 Дендритные клетки или дендроциты (Dendritic cells (DCs)) — это гетерогенная популяция антиген-презентирующих клеток костно-мозгового происхождения.
моделирование колита, поражение тканей почек и печени, вызванное ишемией/реперфузией6, моделирование острого вирусного миокардита, моделирование аутоиммунного диабета, моделирование легочного воспаления, эндотоксическое поражение легких и хронический гломерулонефрит, вызываемый антителами. FTY720 также продемонстрировал зависящее от S1P3-рецептора сосудорасширяющее действие и ослабление атеросклероза у млекопитающих с недостатком аполипопротеина Е (ApoE). Важно отметить, что FTY720 доказал свою высокую эффективность в сокращении симптомов при моделировании экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (EAE), что позволило начать тестирование FTY720 в качестве средства для лечения рассеянного склероза.
Более того, селективный агонист SlPi-рецептора - SEW2871 улучшает состояние при острой почечной недостаточности, при моделировании повреждения почек, вызванного ишемией/реперфузией. SEW2871 оказывает противовоспалительное действие при диабете типа 1 и предотвращает взаимодействие моноцит-эндотелий за счет понижающего регулирования экспрессии VCAM-1 [23].
Все эти данные позволяют с уверенностью утверждать, что SlP-миметики и агонисты/антагонисты SlP-рецепторов могут оказывать существенное влияние на воспалительные реакции при различных патологиях.
2.2 Сфингозилсульфофосфорилхолин
Сфингозилсульфофосфорилхолин (SPC) представляет собой лизосфинголипид, имеющий структурное сходство со сфингозин-1-фосфатом (S1P) и лизофосфатидилхолином (LPC) (Рисунок 3). Уровень SPC в серозной жидкости находится в диапазоне ~130 нмоль/л [26], что контрастирует с очень высоким уровнем S1P в серозной жидкости. Потенциальный вклад SPC в физиологию и патофизиологию пока мало
понятен. С наибольшей вероятностью о роли SPC в сердечно-сосудистой физиологии
2+
можно судить исходя из Ca -мобилизирующего действия SPC. Предполагают, что функция SPC в ренотубулярной системе почек состоит в вызывании диуреза, натриуреза и
6 Ишемия (лат. ischaemia, греч. (схаща, от шхю — задерживаю, останавливаю и гада — кровь) — местное малокровие, чаще обусловленное сосудистым фактором (сужением или полной обтурацией просвета артерии), приводящее к временной дисфункции или стойкому повреждению ткани или органа. Реперфузия - возбновление тока крови
кальциуреза. Воздействие SPC на сосуды вызывает дополнительный интерес из-за его связи с HDL, являющимся общепризнанным атеропротективным фактором, действующим посредством различных параллельных защитных механизмов, таких как ингибирование NFkB и стимуляция пути Akt/eNOS [27,28].
Похожие диссертационные работы по специальности «Другие cпециальности», 00.00.00 шифр ВАК
Изменение липидного состава мышц и липидного мешка представителя арктической ихтиофауны люмпена пятнистого LEPTOCLINUS MACULATUS в постэмбриональном развитии2018 год, кандидат наук Пеккоева Светлана Николаевна
Разработка технологии рыбьего жира "Витойл" в мягких желатиновых капсулах2013 год, кандидат наук Запорожская, Лариса Ивановна
Регуляция концентрации внутриклеточного кальция и метаболизма арахидоновой кислоты при действии на клетки2001 год, кандидат химических наук Строкин, Михаил Львович
РОЛЬ ЛИПИДОВ В ПРОЦЕССАХ ПРОВЕДЕНИЯ ВОЗБУЖДЕНИЯ И РЕГЕНЕРАЦИИ ПОВРЕЖДЕННЫХ СОМАТИЧЕСКИХ НЕРВОВ2016 год, кандидат наук Исакина Марина Владимировна
Липоксигеназное окисление полиненасыщенных жирных кислот1999 год, доктор химических наук Судьина, Галина Федоровна
Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Голованов Алексей Борисович, 2021 год
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Spector A.A. The Importance of Free Fatty Acid in Tumor Nutrition // Cancer Res. 1967. Vol. 27, № 9. P. 1580-1586.
2. Capra V. et al. Eicosanoids and Their Drugs in Cardiovascular Diseases: Focus on Atherosclerosis and Stroke // Med. Res. Rev. 2013. Vol. 33, № 2. P. 364-438.
3. Grosser T., Ricciotti E., FitzGerald G.A. The Cardiovascular Pharmacology of Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drugs // Trends in Pharmacological Sciences. 2017. Vol. 38, № 8. P. 733-748.
4. Patrignani P., Patrono C. Aspirin and Cancer // Journal of the American College of Cardiology. 2016. Vol. 68, № 9. P. 967-976.
5. Sala A. et al. Two-pronged approach to anti-inflammatory therapy through the modulation of the arachidonic acid cascade // Biochemical Pharmacology. 2018. Vol. 158. P. 161-173.
6. Wang D., Dubois R.N. Eicosanoids and cancer // Nature Reviews Cancer. 2010. Vol. 10, № 3. P. 181-193.
7. Burns C.P., North J.A. Adriamycin transport and sensitivity in fatty acid-modified leukemia cells // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Res. 1986. Vol. 888, № 1. P. 1017.
8. Ballou L.R. et al. Interleukin-1-mediated PGE2 production and sphingomyelin metabolism. // J. Biol. Chem. 1992. Vol. 267, № 28. P. 20044-20050.
9. Степанов А.Е., Краснопольский Ю.М., Швец В.И. Физиологически активные липиды. Москва: Наука, 1991.
10. Balsinde J., Balboa M.A., Dennis E.A. Inflammatory activation of arachidonic acid signaling in murine P388D1 macrophages via sphingomyelin synthesis // J. Biol. Chem. 1997. Vol. 272, № 33. P. 20373-20377.
11. Huwiler A. et al. Ceramide binds to the CaLB domain of cytosolic phospholipase A 2 and facilitates its membrane docking and arachidonic acid release // FASEB J. 2002. Vol. 15, № 1. P. 7-9.
12. Pettus B.J. et al. Ceramide 1-Phosphate Is a Direct Activator of Cytosolic Phospholipase
A2 // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279, № 12. P. 11320-11326.
13. Stahelin R. V et al. Ceramide-1-phosphate binds group IVA cytosolic phospholipase a2 via a novel site in the C2 domain // J. Biol. Chem. 2007. Vol. 282, № 28. P. 2046720474.
14. Tauzin L. et al. Effects of ceramide-1-phosphate on cultured cells: dependence on dodecane in the vehicle // J. Lipid Res. 2006. Vol. 48, № 1. P. 66-76.
15. Graf C. et al. Targeting Ceramide Metabolism with a Potent and Specific Ceramide Kinase Inhibitor // Mol. Pharmacol. 2008. Vol. 74, № 4. P. 925-932.
16. Graf C. et al. Neutropenia with Impaired Immune Response to Streptococcus pneumoniae in Ceramide Kinase-Deficient Mice // J. Immunol. 2008. Vol. 180, № 5. P. 3457-3466.
17. Teichgräber V. et al. Ceramide accumulation mediates inflammation, cell death and infection susceptibility in cystic fibrosis // Nat. Med. 2008. Vol. 14, № 4. P. 382-391.
18. Pettus B.J. et al. The sphingosine kinase 1/sphingosine-1-phosphate pathway mediates COX-2 induction and PGE 2 production in response to TNF-a // FASEB J. 2003. Vol. 17, № 11. P. 1411-1421.
19. Xin C. et al. Sphingosine 1-phosphate cross-activates the Smad signaling cascade and mimics transforming growth factor-ß-induced cell responses // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279, № 34. P. 35255-35262.
20. Hughes J.E. et al. Sphingosine-1-Phosphate Induces an Antiinflammatory Phenotype in Macrophages // Circ. Res. 2008. Vol. 102, № 8. P. 950-958.
21. van der Giet M., Tölle M., Kleuser B. Relevance and potential of sphingosine-1-phosphate in vascular inflammatory disease // Biol. Chem. 2008. Vol. 389, № 11. P. 1381-1390.
22. Nofer J.R. et al. HDL induces NO-dependent vasorelaxation via the lysophospholipid receptor S1P3 // J. Clin. Invest. 2004. Vol. 113, № 4. P. 569-581.
23. Whetzel A.M. et al. Sphingosine-1 phosphate prevents monocyte/endothelial interactions in type 1 diabetic NOD mice through activation of the S1P1 receptor // Circ. Res. 2006. Vol. 99, № 7. P. 731-739.
24. Skoura A. et al. Essential role of sphingosine 1-phosphate receptor 2 in pathological angiogenesis of the mouse retina // J. Clin. Invest. 2007. Vol. 117, № 9. P. 2506-2516.
25. Brinkmann V. et al. The immune modulator FTY720 targets sphingosine 1-phosphate receptors // J. Biol. Chem. 2002. Vol. 277, № 24. P. 21453-21457.
26. Liliom K. et al. Sphingosylphosphocholine is a naturally occurring lipid mediator in blood plasma: a possible role in regulating cardiac function via sphingolipid receptors // Biochem. J. 2015. Vol. 355, № 1. P. 189-197.
27. Nofer J.R., Assmann G. Atheroprotective effects of high-density lipoprotein-associated lysosphingolipids // Trends Cardiovasc. Med. 2005. Vol. 15, № 7. P. 265-271.
28. Schmidt A. et al. The antiatherogenic and antiinflammatory effect of HDL-associated lysosphingolipids operates via Akt ^ NF-kappaB signalling pathways in human vascular endothelial cells // Basic Res. Cardiol. 2006. Vol. 101, № 2. P. 109-116.
29. Murch O. et al. Sphingosylphosphorylcholine reduces the organ injury/dysfunction and inflammation caused by endotoxemia in the rat // Crit. Care Med. 2008. Vol. 36, № 2. P. 550-559.
30. Xin C. et al. Sphingosylphosphorylcholine acts in an anti-inflammatory manner in renal mesangial cells by reducing interleukin-1ß-induced prostaglandin E 2 formation // J. Lipid Res. 2007. Vol. 48, № 9. P. 1985-1996.
31. Farooqui A.A., Horrocks L.A. Phospholipid Metabolism in Brain // Glycerophospholipids in the Brain. New York, NY: Springer, 2006. P. 1-34.
32. Kim T.-H. Bid-Cardiolipin Interaction at Mitochondrial Contact Site Contributes to Mitochondrial Cristae Reorganization and Cytochrome c Release // Mol. Biol. Cell. 2004. Vol. 15, № 7. P. 3061-3072.
33. Glunde K. et al. Choline phospholipid metabolism in cancer: Consequences for molecular pharmaceutical interventions // Mol. Pharm. 2006. Vol. 3, № 5. P. 496-506.
34. Glunde K., Serkova N.J. Therapeutic targets and biomarkers identified in cancer choline phospholipid metabolism // Pharmacogenomics. 2006. Vol. 7, № 7. P. 1109-1123.
35. Сергеева М. Г., Варфоломеева А.Т. Каскад арахидоновой кислоты. Москва: Народное образование, 2006. 254 p.
36. Nathoo N., Barnett G.H., Golubic M. The eicosanoid cascade: Possible role in gliomas and meningiomas // J. Clin. Pathol. 2004. Vol. 57, № 1. P. 6-13.
37. Wang D., Dubois R.N. The role of COX-2 in intestinal inflammation and colorectal cancer // Oncogene. 2010. Vol. 29, № 6. P. 781-788.
38. McCarty M.F. Minimizing the cancer-promotional activity of cox-2 as a central strategy in cancer prevention // Med. Hypotheses. 2012. Vol. 78, № 1. P. 45-57.
39. Dufour M. et al. PGE2-induced colon cancer growth is mediated by mTORC1 // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2014. Vol. 451, № 4. P. 587-591.
40. Yang P., Jiang Y., Fischer S.M. Prostaglandin E3 metabolism and cancer // Cancer Letters. 2014. Vol. 348, № 1-2. P. 1-11.
41. Xia D. et al. Prostaglandin E 2 promotes intestinal tumor growth via DNA methylation // Nat. Med. 2012. Vol. 18, № 2. P. 224-226.
42. Tsai M.J. et al. Montelukast induces apoptosis-inducing factor-mediated cell death of lung cancer cells // Int. J. Mol. Sci. 2017. Vol. 18, № 7. P. 1353.
43. Kiss L. et al. Direct and simultaneous profiling of epoxyeicosatrienoic acid enantiomers by capillary tandem column chiral-phase liquid chromatography with dual online photodiode array and tandem mass spectrometric detection // Anal. Bioanal. Chem. 2008. Vol. 392, № 4. P. 717-726.
44. Zhan T., Rindtorff N., Boutros M. Wnt signaling in cancer // Oncogene. 2017. Vol. 36, № 11. P. 1461-1473.
45. Go R.E., Hwang K.A., Choi K.C. Cytochrome P450 1 family and cancers // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2015. Vol. 147. P. 24-30.
46. Peng H. et al. Inhibition of soluble epoxide hydrolase in macrophages ameliorates the formation of foam cells — Role of heme oxygenase-1 — // Circ. J. 2019. Vol. 83, № 12. P. 2555-2566.
47. Wang D., DuBois R.N. Measurement of Eicosanoids in Cancer Tissues // Methods in Enzymology. 2007. Vol. 433. P. 27-50.
48. Wu L. et al. PPARa ligand, AVE8134, and cyclooxygenase inhibitor therapy synergistically suppress lung cancer growth and metastasis // BMC Cancer. 2019. Vol.
19, № 1. P. 1-16.
49. Chen C. et al. Cytochrome P450 2J2 is highly expressed in hematologic malignant diseases and promotes tumor cell growth // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2011. Vol. 336, № 2. P. 344-355.
50. Conde-Estevez D. Targeted cancer therapy: interactions with other medicines // Clin. Transl. Oncol. 2017. Vol. 19, № 1. P. 21-30.
51. Liu W. et al. CYP2J2 Overexpression Increases EETs and Protects Against HFD-Induced Atherosclerosis in ApoE -/- Mice // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2016. Vol. 67, № 6. P. 491-502.
52. Zhao G. et al. Epoxyeicosatrienoic acids protect rat hearts against tumor necrosis factor-a-induced injury // J. Lipid Res. 2012. Vol. 53, № 3. P. 456-466.
53. Arbab A.S. et al. Combination of vatalanib and a 20-HETE synthesis inhibitor results in decreased tumor growth in an animal model of human glioma // Onco. Targets. Ther. Dove Press, 2016. Vol. 9. P. 1205.
54. Bushkofsky J.R. et al. Cyp1b1 affects external control of mouse hepatocytes, fatty acid homeostasis and signaling involving HNF4a and PPARa // Arch. Biochem. Biophys. 2016. Vol. 597. P. 30-47.
55. Wu L. et al. PPARa ligand, AVE8134, and cyclooxygenase inhibitor therapy synergistically suppress lung cancer growth and metastasis // BMC Cancer 2019 191. 2019. Vol. 19, № 1. P. 1-16.
56. Skrypnyk N. et al. PPARa Activation Can Help Prevent and Treat Non-Small Cell Lung Cancer // Cancer Res. 2014. Vol. 74, № 2. P. 621-631.
57. Spector A.A., Norris A.W. Action of epoxyeicosatrienoic acids on cellular function // Am. J. Physiol. Physiol. 2006. Vol. 292, № 3. P. C996-C1012.
58. Moreno J.J. New aspects of the role of hydroxyeicosatetraenoic acids in cell growth and cancer development // Biochem. Pharmacol. 2009. Vol. 77, № 1. P. 1-10.
59. Vriens J. et al. Modulation of the Ca2+ permeable cation channel TRPV4 by cytochrome P450 epoxygenases in vascular endothelium // Circ. Res. 2005. Vol. 97, № 9. P. 908-915.
60. Node K. et al. Anti-inflammatory properties of cytochrome P450 epoxygenase-derived eicosanoids // Sciene. 1999. Vol. 285, № 5431. P. 1276-1279.
61. Inceoglu B. et al. Soluble epoxide hydrolase inhibition reveals novel biological functions of epoxyeicosatrienoic acids (EETs) // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2007. Vol. 82, № 1-4. P. 42-49.
62. Node K. et al. Activation of Gas Mediates Induction of Tissue-type Plasminogen Activator Gene Transcription by Epoxyeicosatrienoic Acids // J. Biol. Chem. 2001. Vol. 276, № 19. P. 15983-15989.
63. Zeldin D.C. et al. CYP2J Subfamily Cytochrome P450s in the Gastrointestinal Tract: Expression, Localization, and Potential Functional Significance // Mol. Pharmacol. 2018. Vol. 51, № 6. P. 931-943.
64. Yang L. et al. The role of epoxyeicosatrienoic acids in the cardiovascular system // Br. J. Clin. Pharmacol. 2015. Vol. 80, № 1. P. 28-44.
65. Yang W. et al. Characterization of Epoxyeicosatrienoic Acid Binding Site in U937 Membranes Using a Novel Radiolabeled Agonist, 20-125I-14,15-Epoxyeicosa-8(Z)-Enoic Acid // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2008. Vol. 324, № 3. P. 1019-1027.
66. Behm D.J. et al. Epoxyeicosatrienoic Acids Function as Selective, Endogenous Antagonists of Native Thromboxane Receptors: Identification of a Novel Mechanism of Vasodilation // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2008. Vol. 328, № 1. P. 231-239.
67. Chen J.K. et al. Identification of novel endogenous cytochrome P450 arachidonate metabolites with high affinity for cannabinoid receptors // J. Biol. Chem. 2008. Vol. 283, № 36. P. 24514-24524.
68. Hajra L. et al. The NF-kappa B signal transduction pathway in aortic endothelial cells is primed for activation in regions predisposed to atherosclerotic lesion formation // Proc. Natl. Acad. Sci. 2002. Vol. 97, № 16. P. 9052-9057.
69. Ng V.Y. et al. Cytochrome P450 eicosanoids are activators of peroxisome proliferator-activated receptor a // Drug Metab. Dispos. 2007. Vol. 35, № 7. P. 1126-1134.
70. Edin M.L. et al. P450 enzymes in lipid oxidation // Cytochrome P450 Struct. Mech. Biochem. Fourth Ed. Cham, 2015. P. 881-905.
71. Davis B.B. et al. Inhibitors of soluble epoxide hydrolase attenuate vascular smooth muscle cell proliferation // Proc. Natl. Acad. Sci. 2002. Vol. 99, № 4. P. 2222-2227.
72. Marion-Letellier R., Savoye G., Ghosh S. Polyunsaturated fatty acids and inflammation // IUBMB Life. 2015. Vol. 67, № 9. P. 659-667.
73. Morita I. Distinct functions of COX-1 and COX-2 // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2002. Vol. 68-69. P. 165-175.
74. Vara-Messler M. et al. A potential role of PUFAs and COXIBs in cancer chemoprevention // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2015. Vol. 120. P. 97-102.
75. Shimizu T. Lipid Mediators in Health and Disease: Enzymes and Receptors as Therapeutic Targets for the Regulation of Immunity and Inflammation // http://dx.doi.org/10.1146/annurev.pharmtox.011008.145616. 2009. Vol. 49. P. 123-150.
76. de Bus I. et al. The role of n-3 PUFA-derived fatty acid derivatives and their oxygenated metabolites in the modulation of inflammation // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2019. Vol. 144. P. 106351.
77. Kang Y.J. et al. Regulation of intracellular cyclooxygenase levels by gene transcription and protein degradation // Prog. Lipid Res. 2007. Vol. 46, № 2. P. 108-125.
78. Samuelsson B., Morgenstern R., Jakobsson P.-J. Membrane Prostaglandin E Synthase-1: A Novel Therapeutic Target // Pharmacol. Rev. tics, 2007. Vol. 59, № 3. P. 207-224.
79. Jones R., Giembycz M., Woodward D. Prostanoid receptor antagonists: development strategies and therapeutic applications // Br. J. Pharmacol. 2009. Vol. 158, № 1. P. 104145.
80. Ivanov I. et al. Molecular enzymology of lipoxygenases // Arch. Biochem. Biophys. 2010. Vol. 503, № 2. P. 161-174.
81. Brash A.R. Lipoxygenases: occurrence, functions, catalysis, and acquisition of substrate. // J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274, № 34. P. 23679-23682.
82. Haeggström J.Z., Funk C.D. Lipoxygenase and Leukotriene Pathways: Biochemistry, Biology, and Roles in Disease // Chem. Rev. 2011. Vol. 111, № 10. P. 5866-5898.
83. Kuhn H., Banthiya S., van Leyen K. Mammalian lipoxygenases and their biological relevance // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P.
308-330.
84. Hamberg M., Samuelsson B. Prostaglandin endoperoxides. Novel transformations of arachidonic acid in human platelets. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1974. Vol. 71, №
9. P. 3400-3404.
85. Schewe T. et al. A lipoxygenase in rabbit reticulocytes which attacks phospholipids and intact mitochondria // FEBS Lett. 1975. Vol. 60, № 1. P. 149-152.
86. Kuhn H., Banthiya S., Van Leyen K. Mammalian lipoxygenases and their biological relevance // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P. 308-330.
87. Funk C.D. et al. Lipoxygenase genes and their targeted disruption // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2002. Vol. 68-69. P. 303-312.
88. Funk C.D. et al. Lipoxygenase genes and their targeted disruption // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2002. Vol. 68-69. P. 303-312.
89. Mancini A.D., Di Battista J.A. The cardinal role of the phospholipase A 2/cyclooxygenase-2/ prostaglandin e synthase/prostaglandin E 2 (PCPP) axis in inflammostasis // Inflamm. Res. 2011. Vol. 60, № 12. P. 1083-1092.
90. Savari S. et al. Cysteinyl leukotrienes and their receptors: Bridging inflammation and colorectal cancer // World J. Gastroenterol. 2014. Vol. 20, № 4. P. 968-977.
91. Romano M. Lipoxin and aspirin-triggered lipoxins // ScientificWorldJournal. 2010. Vol.
10. P. 1048-1064.
92. Pace-Asciak C.R. The hepoxilins and some analogues: A review of their biology // Br. J. Pharmacol. 2009. Vol. 158, № 4. P. 972-981.
93. Sachs-Olsen C. et al. Eoxins: A new inflammatory pathway in childhood asthma // J. Allergy Clin. Immunol. 2010. Vol. 126, № 4. P. 859-867.e9.
94. Yoo S., Lim J., Hwang S. Resolvins: Endogenously-Generated Potent Painkilling Substances and their Therapeutic Perspectives // Curr. Neuropharmacol. 2013. Vol. 11, № 6. P. 664-676.
95. Serhan C.N., Petasis N.A. Resolvins and Protectins in Inflammation Resolution // Chem. Rev. 2011. Vol. 111, № 10. P. 5922-5943.
96. Takahashi Y. et al. Investigation of the oxygenation of phospholipids by the porcine leukocyte and human platelet arachidonate 12-lipoxygenases // Eur. J. Biochem. 1993. Vol. 218, № 1. P. 165-171.
97. Pekarova M. et al. Mutagenesis of triad determinants of rat Alox15 alters the specificity of fatty acid and phospholipid oxygenation // Arch. Biochem. Biophys. 2015. Vol. 571. P. 50-57.
98. Kuhn H. et al. Oxygenation of biological membranes by the pure reticulocyte lipoxygenase // J. Biol. Chem. 1990. Vol. 265, № 30. P. 18351-18361.
99. Belkner J. et al. Oxygenation of lipoproteins by mammalian lipoxygenases // Eur. J. Biochem. 1993. Vol. 213, № 1. P. 251-261.
100. Rädmark O. et al. 5-Lipoxygenase, a key enzyme for leukotriene biosynthesis in health and disease // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P. 331-339.
101. Kühn H., O'Donnell V.B. Inflammation and immune regulation by 12/15-lipoxygenases // Prog. Lipid Res. 2006. Vol. 45, № 4. P. 334-356.
102. Liu M., Yokomizo T. The role of leukotrienes in allergic diseases // Allergol. Int. 1970. Vol. 64, № 1. P. 17-26.
103. Berger W., De Chandt M.T.M., Cairns C.B. Zileuton: Clinical implications of 5-Lipoxygenase inhibition in severe airway disease // Int. J. Clin. Pract. 2007. Vol. 61, № 4. P. 663-676.
104. Zhang H.P. et al. Montelukast for prevention and treatment of asthma exacerbations in adults: Systematic review and meta-analysis // Allergy Asthma Proc. 2014. Vol. 35, № 4. P. 278-287.
105. Weiss J.W. et al. Bronchoconstrictor effects of leukotriene C in humans // Science (80-. ). 1982. Vol. 216, № 4542. P. 196-198.
106. Dahlen S.E. Treatment of asthma with antileukotrienes: First line or last resort therapy? // Eur. J. Pharmacol. 2006. Vol. 533, № 1-3. P. 40-56.
107. Mayatepek E. Leukotrienes // Physician's Guid. to Treat. Follow. Metab. Dis. 2006. Vol. 357, № 18. P. 365-367.
108. Romano M., CLARIA J. Cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase converging functions on cell proliferation and tumor angiogenesis: implications for cancer therapy // FASEB J. 2003. Vol. 17, № 14. P. 1986-1995.
109. Bogatcheva N. V. et al. Arachidonic acid cascade in endothelial pathobiology // Microvasc. Res. 2005. Vol. 69, № 3. P. 107-127.
110. Shureiqi I. et al. The critical role of 15-lipoxygenase-1 in colorectal epithelial cell terminal differentiation and tumorigenesis // Cancer Res. 2005. Vol. 65, № 24. P. 11486-11492.
111. Schewe T. 15-lipoxygenase-1: A prooxidant enzyme // Biol. Chem. 2002. Vol. 383, № 3-4. P. 365-374.
112. Bryant R.W. et al. Leukotriene formation by a purified reticulocyte lipoxygenase enzyme // J. Biogical Chem. 1985. Vol. 260, № 6. P. 3548-3555.
113. Brash A.R. et al. Mechanistic studies of the dioxygenase and leukotriene synthase activities of the porcine leukocyte 12S-lipoxygenase // Arch. Biochem. Biophys. 1989. Vol. 273, № 2. P. 414-422.
114. Garssen G.J., Vliegenthart J.F.G., Boldingh J. An anaerobic reaction between lipoxygenase, linoleic acid and its hydroperoxides // Biochem. J. 1971. Vol. 122, № 3. P. 327-332.
115. Garssen G.J., Vliegenthart J.F.G., Boldingh J. The origin and structures of dimeric fatty acids from the anaerobic reaction between soya-bean lipoxygenase, linoleic acid and its hydroperoxide // Biochem. J. 1972. Vol. 130, № 2. P. 435-442.
116. De Groot J.J.M.C. et al. The detection of linoleic acid radicals in the anaerobic reaction of lipoxygenase // Biochim. Biophys. Acta (BBA)/Lipids Lipid Metab. 1973. Vol. 326, № 2. P. 279-284.
117. Streckert G., Stan H.J. Conversion of linoleic acid hydroperoxide by soybean lipoxygenase in the presence of guaiacol: Identification of the reaction products // Lipids. 1975. Vol. 10, № 12. P. 847-854.
118. Hartel B. et al. Self-Inactivation by 13-Hydroperoxylinoleic Acid and Lipohydroperoxidase Activity of the Reticulocyte Lipoxygenase // Eur. J. Biochem. 1982. Vol. 126, № 2. P. 353-357.
119. Salzmann U. et al. Pentane formation during the anaerobic reactions of reticulocyte lipoxygenase. Comparison with lipoxygenases from soybeans and green pea seeds // Biochim. Biophys. Acta (BBA)/Lipids Lipid Metab. 1984. Vol. 795, № 3. P. 535-542.
120. Kühn H. et al. The stoichiometry of oxygen uptake and conjugated diene formation during the dioxygenation of linoleic acid by the pure reticulocyte lipoxygenase. Evidence for aerobic hydroperoxidase activity // Biochim. Biophys. Acta (BBA)/Lipids Lipid Metab. 1986. Vol. 876, № 2. P. 187-193.
121. Zheng Y., Brash A.R. Dioxygenase activity of epidermal lipoxygenase-3 unveiled: Typical and atypical features of its catalytic activity with natural and synthetic polyunsaturated fatty acids // J. Biol. Chem. 2010. Vol. 285, № 51. P. 39866-39875.
122. Zheng Y., Brash A.R. On the Role of Molecular Oxygen in Lipoxygenase Activation // J. Biol. Chem. 2010. Vol. 285, № 51. P. 39876-39887.
123. Munoz-Garcia A. et al. The importance of the lipoxygenase-hepoxilin pathway in the mammalian epidermal barrier // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2014. Vol. 1841, № 3. P. 401-408.
124. Pace-Asciak C.R. Pathophysiology of the hepoxilins // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P. 383-396.
125. Nigam S. et al. Structure, biochemistry and biology of hepoxilins: An update // FEBS J. 2007. Vol. 274, № 14. P. 3503-3512.
126. Zafiriou M.P. et al. Hepoxilin A3 protects ß-cells from apoptosis in contrast to its precursor, 12-hydroperoxyeicosatetraenoic acid // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2011. Vol. 1811, № 6. P. 361-369.
127. Gregus A.M. et al. Systematic analysis of rat 12/15-lipoxygenase enzymes reveals critical role for spinal eLOX3 hepoxilin synthase activity in inflammatory hyperalgesia // FASEB J. 2013. Vol. 27, № 5. P. 1939-1949.
128. Krieg P. et al. Aloxe3 knockout mice reveal a function of epidermal lipoxygenase-3 as hepoxilin synthase and its pivotal role in barrier formation // J. Invest. Dermatol. 2013. Vol. 133, № 1. P. 172-180.
129. Pace-Asciak C.R. Pathophysiology of the hepoxilins // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P. 383-396.
130. Ueda N. et al. Stereoselective hydrogen abstraction in leukotriene A4 synthesis by purified 5-lipoxygenase of porcine leukocytes // Prostaglandins. 1986. Vol. 32, № 1. P. 43-48.
131. Belkner J. et al. The oxygenation of cholesterol esters by the reticulocyte lipoxygenase // FEBS Lett. 1991. Vol. 279, № 1. P. 110-114.
132. Lu X. et al. Overproduction, purification, and characterization of extracellular lipoxygenase of Pseudomonas aeruginosa in Escherichia coli // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2013. Vol. 97, № 13. P. 5793-5800.
133. Garreta A. et al. Structure and interaction with phospholipids of a prokaryotic lipoxygenase from Pseudomonas aeruginosa // FASEB J. 2013. Vol. 27, № 12. P. 48114821.
134. Banthiya S. et al. Structural and functional basis of phospholipid oxygenase activity of bacterial lipoxygenase from Pseudomonas aeruginosa // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2016. Vol. 1861, № 11. P. 1681-1692.
135. Kühn H. et al. Overexpression, purification and characterization of human recombinant 15-lipoxygenase // Biochim. Biophys. Acta (BBA)/Lipids Lipid Metab. 1993. Vol. 1169, № 1. P. 80-89.
136. Grüllich C. et al. Inhibition of 15-lipoxygenase leads to delayed organelle degradation in the reticulocyte // FEBS Lett. 2001. Vol. 489, № 1. P. 51-54.
137. Kühn H., Brash A.R. Occurrence of lipoxygenase products in membranes of rabbit reticulocytes: Evidence for a role of the reticulocyte lipoxygenase in the maturation of red cells // J. Biol. Chem. 1990. Vol. 265, № 3. P. 1454-1458.
138. Kühn H., Belkner J., Wiesner R. Subcellular distribution of lipoxygenase products in rabbit reticulocyte membranes // Eur. J. Biochem. 1990. Vol. 191, № 1. P. 221-227.
139. Rapoport S.M., Schewe T. The maturational breakdown of mitochondria in reticulocytes // BBA - Rev. Biomembr. 1986. Vol. 864, № 3-4. P. 471-495.
140. Van Leyen K. et al. A function for lipoxygenase in programmed organelle degradation // Nature. 1998. Vol. 395, № 6700. P. 392-395.
141. Witztum J.L., Steinberg D. Role of Oxidized Low Density Lipoprotein // J. Clin. Invest.
1991. Vol. 88. P. 1785-1792.
142. Libby P. Inflammation in Atherosclerosis // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2012. Vol. 32, № 9. P. 2045-2051.
143. Upston J.M. et al. Oxidation of free fatty acids in low density lipoprotein by 15-lipoxygenase stimulates nonenzymic, a-tocopherol-mediated peroxidation of cholesteryl esters // J. Biol. Chem. 1997. Vol. 272, № 48. P. 30067-30074.
144. Belkner J., Stender H., Kühn H. The rabbit 15-lipoxygenase preferentially oxygenates LDL cholesterol esters, and this reaction does not require vitamin E // J. Biol. Chem. 1998. Vol. 273, № 36. P. 23225-23232.
145. Zhao L. et al. 12/15-Lipoxygenase gene disruption and Vitamin e administration diminish atherosclerosis and oxidative stress in apolipoprotein e deficient mice through a final common pathway // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2005. Vol. 78, № 1-4. P. 185-193.
146. George J. et al. 12/15-Lipoxygenase gene disruption attenuates atherogenesis in LDL receptor-deficient mice // Circulation. 2001. Vol. 104, № 14. P. 1646-1650.
147. Gertow K. et al. 12- and 15-lipoxygenases in human carotid atherosclerotic lesions: Associations with cerebrovascular symptoms // Atherosclerosis. 2011. Vol. 215, № 2. P. 411-416.
148. Powell W.S., Rokach J. Biosynthesis, biological effects, and receptors of hydroxyeicosatetraenoic acids (HETEs) and oxoeicosatetraenoic acids (oxo-ETEs) derived from arachidonic acid // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2015. Vol. 1851, № 4. P. 340-355.
149. Kühn H. Biosyntheses, metabolization and biological importance of the primary 15-lipoxygenase metabolites 15-hydro(pero)xy-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenoic acid and 13-hydro(pero)xy-9Z,11E-octadecadienoic acid // Prog. Lipid Res. 1996. Vol. 35, № 3. P. 203-226.
150. Higgs G.A., Salmon J.A., Spayne J.A. The inflammatory effects of hydroperoxy and hydroxy acid products of arachidonate lipoxygenase in rabbit skin // Br. J. Pharmacol. 1981. Vol. 74, № 2. P. 429-433.
151. Ramis I. et al. In vivo release of 15-hete and other arachidonic acid metabolites in nasal
secretions during early allergic reactions // Prostaglandins. 1991. Vol. 42, № 5. P. 411420.
152. Henricks P. et al. Chemotactic activity of 9- and 13-hydroxy-linoleic acid for bovine and human polymorphonuclear leukocytes // Eur. J. Pharmacol. 2003. Vol. 183, № 2. P. 622-623.
153. Schwenk U. et al. Identification of 5-oxo-15-hydroxy-6,8,11,13-eicosatetraenoic acid as a novel and potent human eosinophil chemotactic eicosanoid // J. Biol. Chem. 1992. Vol. 267, № 18. P. 12482-12488.
154. Feltenmark S. et al. Eoxins are proinflammatory arachidonic acid metabolites produced via the 15-lipoxygenase-1 pathway in human eosinophils and mast cells // Proceedings of the National Academy of Sciences. 2008. Vol. 105, № 2. 680-685 p.
155. Claesson H.E. On the biosynthesis and biological role of eoxins and 15-lipoxygenase-1 in airway inflammation and Hodgkin lymphoma // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2009. Vol. 89, № 3-4. P. 120-125.
156. Kundumani-Sridharan V. et al. 12/15-Lipoxygenase Mediates High-fat Diet-induced Endothelial Tight Junction Disruption and Monocyte Transmigration // J. Biol. Chem. 2013. Vol. 288, № 22. P. 15830-15842.
157. Othman A. et al. 12/15-Lipoxygenase-Derived Lipid Metabolites Induce Retinal Endothelial Cell Barrier Dysfunction: Contribution of NADPH Oxidase // PLoS One. 2013. Vol. 8, № 2. P. e57254.
158. Chattopadhyay R. et al. Withdrawal: 12/15-Lipoxygenase-dependent ROS production is required for diet-induced endothelial barrier dysfunction // J. Lipid Res. 2019. Vol. 60, № 4. P. 909-909.
159. Martínez-Clemente M. et al. Disruption of the 12/15-lipoxygenase gene (Alox15) protects hyperlipidemic mice from nonalcoholic fatty liver disease // Hepatology. 2010. Vol. 52, № 6. P. 1980-1991.
160. Freire M.O., Van Dyke T.E. Natural resolution of inflammation // Periodontol. 2000. 2013. Vol. 63, № 1. P. 149-164.
161. Spite M., Claria J., Serhan C.N. Resolvins, specialized proresolving lipid mediators, and their potential roles in metabolic diseases // Cell Metab. 2014. Vol. 19, № 1. P. 21-36.
162. Serhan C.N. et al. Macrophage proresolving mediator maresin 1 stimulates tissue regeneration and controls pain // FASEB J. 2012. Vol. 26, № 4. P. 1755-1765.
163. Fierro I.M. et al. Lipoxin A4 and Aspirin-Triggered 15-epi-Lipoxin A4 Inhibit Human Neutrophil Migration: Comparisons Between Synthetic 15 Epimers in Chemotaxis and Transmigration with Microvessel Endothelial Cells and Epithelial Cells // J. Immunol. 2003. Vol. 170, № 5. P. 2688-2694.
164. Ereso A.Q. et al. Lipoxin A4 Attenuates Microvascular Fluid Leak During Inflammation // J. Surg. Res. 2009. Vol. 156, № 2. P. 183-188.
165. Kebir D. El, Filep J.G. Modulation of neutrophil apoptosis and the resolution of inflammation through 02 integrins // Front. Immunol. 2013. Vol. 4, № MAR. P. 60.
166. Ohira T. et al. Resolvin E1 receptor activation signals phosphorylation and phagocytosis // J. Biol. Chem. 2010. Vol. 285, № 5. P. 3451-3461.
167. Sala A., Folco G., Murphy R.C. Transcellular biosynthesis of eicosanoids // Pharmacol. Reports. 2010. Vol. 62, № 3. P. 503-510.
168. Altmann R. et al. 13-Oxo-ODE is an endogenous ligand for PPARy in human colonic epithelial cells // Biochem. Pharmacol. 2007. Vol. 74, № 4. P. 612-622.
169. Limor R. et al. Lipoxygenase-derived metabolites are regulators of peroxisome proliferator-activated receptor y-2 expression in human vascular smooth muscle cells // Am. J. Hypertens. 2008. Vol. 21, № 2. P. 219-223.
170. Martin H. Role of PPAR-gamma in inflammation. Prospects for therapeutic intervention by food components // Mutat. Res. - Fundam. Mol. Mech. Mutagen. 2010. Vol. 690, № 1-2. P. 57-63.
171. Oskolkova O. V et al. Oxidized Phospholipids Are More Potent Antagonists of Lipopolysaccharide than Inducers of Inflammation // J. Immunol. 2010. Vol. 185, № 12. P. 7706-7712.
172. Munger K.A. et al. Transfection of rat kidney with human 15-lipoxygenase suppresses inflammation and preserves function in experimental glomerulonephritis // Proc. Natl. Acad. Sci. 2002. Vol. 96, № 23. P. 13375-13380.
173. Kronke G. et al. 12/15-Lipoxygenase Counteracts Inflammation and Tissue Damage in
Arthritis // J. Immunol. 2009. Vol. 183, № 5. P. 3383-3389.
174. Kronke G. et al. The 12/15-lipoxygenase pathway promotes osteoclast development and differentiation // Autoimmunity. 2009. Vol. 42, № 4. P. 383-385.
175. Bagga D. et al. Differential effects of prostaglandin derived from omega-6 and omega-3 polyunsaturated fatty acids on COX-2 expression and IL-6 secretion // Proc. Natl. Acad. Sci. 2003. Vol. 100, № 4. P. 1751-1756.
176. Davidson M.H., Benes L.B. The future of n-3 polyunsaturated fatty acid therapy // Curr. Opin. Lipidol. 2016. Vol. 27, № 6. P. 570-578.
177. McGuinness J. et al. Pretreatment with ©-3 fatty acid infusion to prevent leukocyte-endothelial injury responses seen in cardiac surgery // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 2008. Vol. 136, № 1. P. 135-141.
178. Leslie C.A. et al. Dietary fish oil modulates macrophage fatty acids and decreases arthritis susceptibility in mice. // J. Exp. Med. 1985. Vol. 162, № 4. P. 1336-1349.
179. McKenney J.M., Sica D. Role of prescription omega-3 fatty acids in the treatment of hypertriglyceridemia // Pharmacotherapy. 2007. Vol. 27, № 5. P. 715-728.
180. Perelas A., Tsoulkani A., Perrea D. Effects of Lipid-Lowering Drugs on Adiponectin // Curr. Vasc. Pharmacol. 2010. Vol. 8, № 6. P. 836-848.
181. Serhan C.N. Lipoxin biosynthesis and its impact in inflammatory and vascular events // Biochim. Biophys. Acta - Lipids Lipid Metab. 1994. Vol. 1212, № 1. P. 1-25.
182. Brady H.R., Serhan C.N. Adhesion promotes transcellular leukotriene biosynthesis during neutrophil-glomerular endothelial cell interactions: Inhibition by antibodies against CD18 and L-selectin // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. Vol. 186, № 3. P. 1307-1314.
183. Claria J., Serhan C.N. Aspirin triggers previously undescribed bioactive eicosanoids by human endothelial cell-leukocyte interactions. // Proc. Natl. Acad. Sci. 1995. Vol. 92, № 21. P. 9475-9479.
184. Mitchell S. et al. Lipoxins, aspirin-triggered epi-lipoxins, lipoxin stable analogues, and the resolution of inflammation: Stimulation of macrophage phagocytosis of apoptotic neutrophils in vivo // J. Am. Soc. Nephrol. 2002. Vol. 13, № 10. P. 2497-2507.
185. Svensson C.I., Zattoni M., Serhan C.N. Lipoxins and aspirin-triggered lipoxin inhibit inflammatory pain processing // J. Exp. Med. 2007. Vol. 204, № 2. P. 245-252.
186. Hong S. et al. Resolvin E1 Metabolome in Local Inactivation during Inflammation-Resolution // J. Immunol. 2008. Vol. 180, № 5. P. 3512-3519.
187. Clish C.B. et al. Local and systemic delivery of a stable aspirin-triggered lipoxin prevents neutrophil recruitment in vivo // Proc. Natl. Acad. Sci. 2002. Vol. 96, № 14. P. 8247-8252.
188. Wu S.H. et al. Signal transduction involved in protective effects of 15(R/S)-methyl-lipoxin A4 on mesangioproliferative nephritis in rats // Prostaglandins Leukot. Essent. Fat. Acids. 2007. Vol. 76, № 3. P. 173-180.
189. Leonard M.O. et al. 15-Epi-16-(para-fluorophenoxy)-lipoxin A4-methyl ester, a synthetic analogue of 15-epi-lipoxin A4, is protective in experimental ischemic acute renal failure // J. Am. Soc. Nephrol. 2002. Vol. 13, № 6. P. 1657-1662.
190. Guilford W.J., Parkinson J.F. Second-generation beta-oxidation resistant 3-oxa-lipoxin A4 analogs // Prostaglandins Leukot. Essent. Fat. Acids. 2005. Vol. 73, № 3-4. P. 245250.
191. Petasis N.A. et al. Design and synthesis of benzo-lipoxin A4 analogs with enhanced stability and potent anti-inflammatory properties // Bioorganic Med. Chem. Lett. 2008. Vol. 18, № 4. P. 1382-1387.
192. Arita M. et al. Resolvin E1 selectively interacts with leukotriene B4 receptor BLT1 and ChemR23 to regulate inflammation. // J. Immunol. 2007. Vol. 178, № 6. P. 3912-3917.
193. Bannenberg G., Arita M., Serhan C.N. Endogenous receptor agonists: Resolving inflammation // ScientificWorldJournal. 2007. Vol. 7. P. 1440-1462.
194. Frohn M. et al. New "chemical probes" to examine the role of the hFPRL1 (or ALXR) receptor in inflammation // Bioorganic Med. Chem. Lett. 2007. Vol. 17, № 23. P. 66336637.
195. Hecht I. et al. A Novel Peptide Agonist of Formyl-Peptide Receptor-Like 1 (ALX) Displays Anti-Inflammatory and Cardioprotective Effects // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2008. Vol. 328, № 2. P. 426-434.
196. Wood L.G. et al. Lyprinol reduces inflammation and improves lung function in a mouse model of allergic airways disease // Clin. Exp. Allergy. 2010. Vol. 40, № 12. P. 17851793.
197. Whitehouse M.W. et al. Anti-inflammatory activity of a lipid fraction (lyprinol) from the NZ green-lipped mussel // InflammoPharmacology 1997 53. 1997. Vol. 5, № 3. P. 237246.
198. Halpern G.M. Novel anti-inflammatory mechanism of action of Lyprinol® in the AIA rat model // Prog. Nutr. 2008. Vol. 10, № 3. P. 146-152.
199. Shiels I., Whitehouse M. Lyprinol: anti-inflammatory and uterine-relaxant activities in rats, with special reference to a model for dysmenorrhoea. // Allerg. Immunol. (Paris). 2000. Vol. 32, № 7. P. 279-283.
200. Treschow A.P. et al. Novel anti-inflammatory ю-3 PUFAs from the New Zealand green-lipped mussel, Perna canaliculus // Comp. Biochem. Physiol. Part B Biochem. Mol. Biol. 2007. Vol. 147, № 4. P. 645-656.
201. Бумагин Р.А., Пономарёв А.Б. Б.И.П. Синтез аллилацетиленов из терминальных ацетиленов и аллилгалогенидов // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1987. P. 1565-1567.
202. Голованов А.Б., Гроза Н.В. М.Г.И. Применение ацетиленовой стратегии синтеза для получения природных полиненасыщенных жирных кислот и их аналогов // Тонкие химические технологии. 2012. Vol. 7, № 5. P. 23-27.
203. Lindlar H. A New Catalyst for Selective Hydrogenation // Helv. Chim. Acta. 1952. Vol. 35. P. 446-450.
204. Oger C. et al. Are Alkyne Reductions Chemo-, Regio-, and Stereoselective Enough To Provide Pure (Z)-Olefins in Polyfunctionalized Bioactive Molecules? // Chem. Rev. 2013. Vol. 113, № 3. P. 1313-1350.
205. Burke S.D., Danheiser R.L. Oxidizing and reducing agents // Handbook of Reagents for Organic Synthesis. John Wiley & Sons, 1999. 493-498 p.
206. Brown H.C., Brown C.A. The Reaction of Sodium Borohydride with Nickel Acetate in Ethanol Solution--A Highly Selective Nickel Hydrogenation Catalyst // J. Am. Chem. Soc. 2002. Vol. 85, № 7. P. 1005-1006.
207. USP L## packings for HPLC columns [Electronic resource]. URL: https://www.hplc.eu/Downloads/USP_HPLC_Packings.pdf (accessed: 04.10.2021).
208. HPLC Column | Phenomenex | Lichrosorb [Electronic resource]. URL: https://www.phenomenex.com/Products/HPLCDetail/LiChrosorb/RP-18?returnURL=/Products/Search/HPLC (accessed: 03.10.2021).
209. Phenomenex HPLC Part: Luna® 5 ^m C18(2) 100 Ä, LC Column 250 x 4.6 mm, Ea (Part#: 00G-4252-E0) [Electronic resource]. URL: https://www.phenomenex.com/products/part/00g-4252-e0?culture=ru (accessed: 03.10.2021).
210. Ivanov I. et al. Mutations of Triad Determinants Changes the Substrate Alignment at the Catalytic Center of Human ALOX5 // ACS Chem. Biol. 2019. Vol. 14, № 12. P. 27682782.
211. Kuhn H. et al. The evolutionary hypothesis of reaction specificity of mammalian ALOX15 orthologs // Prog. Lipid Res. 2018. Vol. 72. P. 55-74.
212. Kozlov N. et al. Functional characterization of novel ALOX15 orthologs representing key steps in mammalian evolution supports the Evolutionary Hypothesis of reaction specificity // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Cell Biol. Lipids. 2019. Vol. 1864, № 3. P. 372-385.
213. Bryant R.W. et al. Leukotriene formation by a purified reticulocyte lipoxygenase enzyme. Conversion of arachidonic acid and 15-hydroperoxyeicosatetraenoic acid to 14, 15-leukotriene A4. // J. Biol. Chem. 1985. Vol. 260, № 6. P. 3548-3555.
214. Panigrahy D. et al. Resolution of inflammation: An organizing principle in biology and medicine // Pharmacol. Ther. 2021. Vol. 227. P. 107879.
215. Krause M. et al. A novel fed-batch based cultivation method provides high cell-density and improves yield of soluble recombinant proteins in shaken cultures // Microb. Cell Fact. 2010. Vol. 9, № 2. P. 10.
БЛАГОДАРНОСТИ
В заключение автор хотел бы поблагодарить своих руководителей, которые в разный период времени непосредственно принимали участие в создании данной работы. Это, прежде всего, профессора Г.И. Мягкову, доктора химических наук И.В. Иванова, кандидата химических наук Н. В. Грозу.
Данная работа представляет собой междисциплинарное исследование и включает в себя некоторые методы химического синтеза, аналитической химии, биохимии, выполнялась в течение длительного времени с участием различных исследовательских групп и лабораторий. Особую благодарность автор выражает проф. Х. Кюну (Н. Кикп, Институт биохимии Медицинского университета Charite, г. Берлин, Германия), который предоставил возможность проведения биохимических исследований.
Автор крайне признателен к.х.н. С.В. Еремину (ИТХТ им М.В. Ломоносова, РТУ МИРЭА), которого автор считает своим учителем в области жидкостной хроматографии, за предоставленную возможность по получению хроматографически чистых образцов целевых соединений; н.с. А.О. Ружицкому (ФИЦ «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН) за помощь в освоении хромато-масс спектральных методов и подтверждение структуры полученных соединений; к.х.н. С.П. Иванову (АО «Институт пластмасс им Г.С. Петрова») за предоставленную возможность в проведении исследований с применением ядерного магнитного резонанса и техническую поддержку при выполнении данной работы; к.ф.-м.н. Д.А. Чешкову (ГНЦ РФ АО «ГНИИХТЭОС») за проведенные исследования по установлению и подтверждению конфигурации двойных связей полученных соединений.
Особую благодарность автор выражает членам кафедры химии и технологии биологически активных соединений им. Н.А. Преображенского (ИТХТ им. М.В. Ломоносова, РТУ МИРЭА), которые взяли на себя труд ознакомиться с данной работой и сделали ряд критических замечаний, улучшивших диссертацию. Всех соавторов публикаций по теме диссертации, которые принимали участие в реализации экспериментальной части данной работы.
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ АВТОРА ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Статьи:
1. Kuhn H., Kozlov N., Humeniuk L., Ufer C., Ivanov I., Golovanov A., Stehling S., Heydeck D. Functional characterization of novel ALOX15 orthologs representing key steps in mammalian evolution supports the evolutionary hypothesis of reaction specificity// Biochim. Biophys. Acta. 2019. Vol. 1864. P.372-385.
2. Ivanov I., Golovanov A. B., Ferretti C., Canyelles-Nino M., Heydeck D., Stehling S., Lluch J. M., Gonzalez-Lafont A., & Kühn H. Mutations of Triad Determinants Changes the Substrate Alignment at the Catalytic Center of Human ALOX5 // ACS Chemical Biology. 2019. Vol. 14, №12. Р. 2768-2782.
3. Golovanov A.B., Ivanov I.V., Groza N.V., Myagkova G.I. Synthesis of rare polyunsaturated fatty acids: Stearidonic and ю-3 arachidonic // Chem. Nat Compd. 2015. Vol. 51, № 6. P. 1038-1041.
4. Golovanov A.B., Ganina K.D., Groza N.V., Eremin S.V., Myagkova G.I. Synthesis of the ю6 (5Z ,8Z )-Tetradecadienoic and (7Z ,10Z )-Hexadecadienoic Polyene Fatty Acids // Chem. Nat Compd. 2015. Vol. 51, № 1. Р. 26-30.
5. Голованов А.Б., Гроза Н.В., Мягкова Г.И. Применение ацетиленовой стратегии синтеза для получения природных полиненасыщенных жирных кислот и их аналогов// Вестник МИТХТ. 2012. Т.7, №5. С. 23-27
6. Гроза Н.В., Наливайко Е.А., Голованов А.Б., Мягкова Г.И. Терапевтическая роль полиненасыщенных жирных кислот и их производных в патофизиологических процессах// Вестник МИТХТ. 2012. Т. 7, №5. С. 3-16
Тезисы:
1. Журавлев А.М., Голованов А.Б., Ганина К.Д., Гроза Н.В., Иванов И.В. Регуляция активности липоксигеназ на аллостерическом уровне - перспективный подход для создания новых лекарственных препаратов // Сборник тезисов докладов пятой междисциплинарной конференции «Молекулярные и Биологические аспекты Химии, Фармацевтики и Фармакологии», Судак, Россия, 15-18 сентября 2019 года. С. 143.
2. Голованов А.Б., Ганина К.Д., Гроза Н.В., Мягкова Г.И. Синтез редких ненасыщенных омега-6 жирных кислот с применением ацетиленовых соединений //
Сборник тезисов докладов Всероссийской конференции с международным участием «Современные достижения химии непредельных соединений: алкинов, алкенов, аренов и гетероаренов», посвященной наследию М.Г. Кучерова, Санкт-Петербург, Россия, 26 марта-28 марта 2014 года. С. 46.
3. Groza N.V., Golovanov A.B., Belozerskaya T.A., Miagkova G.I. Rare unsaturated fatty acids with antimicrobial properties // Proceedings of International interdisciplinary scientific conference "Biologically active substances and materials: fundamental and applied problems", NovySvet, Ukraine. May 27-June 1. 2013. V. 1. P. 194.
4. Голованов А.Б., Гроза Н.В., Мягкова Г.И., Химический синтез полиненасыщенных жирных кислот и их модифицированных аналогов // Сборник тезисов докладов Научной конференции по биоорганической химии и биотехнологии «X чтения памяти академика Юрия Анатольевича Овчинникова». Москва-Пущино, Россия. 14-17 ноября 2011 г.- С.18.
5. Golovanov A., Groza N., Miagkova G., Development of methods for the synthesis of unsaturated fatty acids higher plants origin // International congress on organic chemestry, Kazan, Russia. 2011. P. 370
6. Наливайко Е.А., Голованов А.Б., Мягкова Г.И., Гроза Н.В. Химический синтез биологически активных ненасыщенных жирных кислот и их аналогов// Тезисы докладов IV молодежной конференции ИОХ РАН, Москва, Россия. 2010. С. 145-146.
7. Голованов А.Б., Мягкова Г.И., Гроза Н.В. Разработка новых подходов к синтезу ненасыщенных жирных кислот природной структуры// Тезисы докладов II Международной конференции РХО им. Д.И. Менделеева «Инновационные химические технологии и биотехнологии материалов и продуктов», Москва, Россия. 2010. С. 27-28
8. Голованов А.Б., Назаров П.Е., Мягкова Г.И., Гроза Н.В. Разработка методов синтеза диеновых и триеновых жирных кислот// Тезисы докладов всероссийской конференции «Идеи и наследие А.Е. Фаворского в органической и металлорганической химии ХХ!в.», Санкт-Петербург, Россия. 2010. С. 58
ПРИЛОЖЕНИЯ
ЯМР спектры метилового эфира 5,8-тетрадекадииновой кислоты (10)
ЯМР спектры (5Z,8Z)-mempademdueHoeoü кислоты (16)
ЯМР спектры метилового эфира гексадека-7,10-дииновой кислоты (11)
ЯМР спектры (7Z,10Z)-гексадекадиеновой кислоты (17)
ЯМР спектры метилового эфира 11,14-гептадекадииновой кислоты (12)
ЯМР спектры (11Z,14Z)-гептадекадиeновой кислоты (18)
-174.3187
_/-82.2781 ^80.7843 Г 75.3019 г 74.2706 Ч- 73.9749 -73.2014
-68.3484
-51.5448
-28.5536 -24.9290
-13.9415 -12.4704
ЯМР спектры метилового эфира 6,9,12,15-октадекатетраиновой кислоты (29)
180.1272
О S
Я
N
N
i—i
N
i—i
ä i
CJ
Я О
Co £
съ о
Où
о
я s
S
О
-180.1575
/-34.1346 j- 30.5479
29.1754 27.0143 25.8314 25.7328 24.4740 20.7281 14.4040
-5.3697
--1.6551
-1.4216
-2.8061
-1.6551 -1.4216
-0.9687
О
S
Чз
N N
NO
N i
о
^
^ S
X о
аь О
S §
О
1: Gorilla_ALOX15_ENSGGOT00000033782 (01/2016) 2: Homo_ALOX15
^п^У: 615/662 (92.9%)
Gorilla_ALOX1
Homo_ALOX15
Gorilla_ALOX1
Homo_ALOX15
Gorilla_ALOX1
Homo_ALOX15
Gorilla_ALOX1
^пю ALOX15
1 -----------------------------------------CRPQETEFK
1 MGLYRIRVSTGASLYAGSNNQVQLWLVGQHGEAALGKRLWPARGKETELK
10 VEVPEYLGPLLFVKLRKRHLLKDDAWFCNWISVQGPGAGDEVRFPCYRWV ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
51 VEVPEYLGPLLFVKLRKRHLLKDDAWFCNWISVQGPGAGDEVRFPCYRWV 60 EGNGVLSLPEGTGRTVGEDPQGLFQKHREEELEERRKLYRWGNWKDGLIL
|| мммммммммммммммммммммммм
101 EGNGVLSLPEGTGRTVGEDPQGLFQKHREEELEERRKLYRWGNWKDGLIL
110 NMAGAKLYDLPVDERFLEDKRVDFEVSLAKGLADLAIKDSLNVLTCWKDL || ММММММММММММММММММММММММ 151 NMAGAKLYDLPVDERFLEDKRVDFEVSLAKGLADLAIKDSLNVLTCWKDL
Gorilla_ALOX1 160
Homo_ALOX15 2 01
Gorilla_ALOX1 210
Homo_ALOX15 251
Gorilla_ALOX1 2 60
Homo_ALOX15 301
Gorilla_ALOX1 310
Homo_ALOX15 351
Gorilla_ALOX1 3 60
Homo_ALOX15 4 01
Gorilla_ALOX1 410
Homo_ALOX15 451
Gorilla_ALOX1 4 60
Homo_ALOX15 5 01
Gorilla_ALOX1 510
Homo_ALOX15 551
Gorilla_ALOX1 5 60
Homo_ALOX15 601
Gorilla_ALOX1 610
^пю ALOX15 651
DDFNRIFWCGQSKLAERVRDSWKEDALFGYQFLNGANPWLRRSAHLPAH |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||.
DDFNRIFWCGQSKLAERVRDSWKEDALFGYQFLNGANPWLRRSAHLPAR
LVFPPGMEELQAQLEKELEGGTLFEADFSLLDGIKANVILCSQQHLAAPL ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
LVFPPGMEELQAQLEKELEGGTLFEADFSLLDGIKANVILCSQQHLAAPL
VMLKLQPDGKLLPMVIQLQLPRTGSPPPPLFLPTDPPMAWLLAKCWVRSS ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VMLKLQPDGKLLPMVIQLQLPRTGSPPPPLFLPTDPPMAWLLAKCWVRSS
DFQLHELQSHLLRGHLMAEVIVVATMRCLPSIHPMFKLIIPHLRYTLEIN ||||||||||||||||||||||||||||||||||:|||||||||||||||
DFQLHELQSHLLRGHLMAEVIVVATMRCLPSIHPIFKLIIPHLRYTLEIN
VRARTGLVSDMGIFDQIMSTGGGGHVQLLKQAGAFLTYSSFCPPDDLADR ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VRARTGLVSDMGIFDQIMSTGGGGHVQLLKQAGAFLTYSSFCPPDDLADR
GLLGVKSSFYAQDALRLWEIIYRYVEGIVSLHYKTDVAVKDDPELQTWCR ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
GLLGVKSSFYAQDALRLWEIIYRYVEGIVSLHYKTDVAVKDDPELQTWCR
EITEIGLQGAQDRGFPVSLQARDQVCHFVTMCIFTCTGQHASVHLGQLDW ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
EITEIGLQGAQDRGFPVSLQARDQVCHFVTMCIFTCTGQHASVHLGQLDW
YSWVPNAPCTMRLPPPTTKDATLETVMATLPNFHQASLQMSITWQLGRRQ ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
YSWVPNAPCTMRLPPPTTKDATLETVMATLPNFHQASLQMSITWQLGRRQ
PVMVAVGQHEEEYFSGPEPKAVLKKFREELAALDKEIEIRNAKLDMPYEY ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PVMVAVGQHEEEYFSGPEPKAVLKKFREELAALDKEIEIRNAKLDMPYEY
LRPSVVENSVAI ||||||||||||
LRPSVVENSVAI
621
662
9 50 59 100 109 150 159 200 209 250 259 300 309 350 359 400 409 450 459 500 509 550 559 600 609 650
Приложение 1. Аминокислотная последовательность ALOX15 гориллы (15-липоксигенитующий фермент) и ее сравнение с ALOX15 человека (15-липоксигенирующий фермент
# 1: XP_0128 68635.1_Kangaroo rat_ALOX15
# 2: NP 001131.3 Homo ALOX15
# Identity: XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP_001131.3_H XP_012868635. NP 001131.3 H
503/663 (75.9%)
1 MVVYRIRVSTGGSLYAGSNNPVQMWLVGQHGESALGVLLRPSRAKEDEFK 5 0
|.:||||||||.||||||||.||:||||||||:|||..|.|:|.|| ММ
1 MGLYRIRVSTGASLYAGSNNQVQLWLVGQHGEAALGKRLWPARGKETELK 5 0
51 VDVSEYLGPLLFVKLQKWHLIQDDAWFCNWISVKGPGDGGAEYRFPCYRW 100
51 VEVPEYLGPLLFVKLRKRHLLKDDAWFCNWISVQGPG-AGDEVRFPCYRW 99
101 LEGRGTLTLPEGTACTVVEDTQGLFKKHREEELKEREKVYRWGNWKDGLI 150
:М-1-|:1ММ--М-М-ММ:1МММ:М-|:1МММММ
100 VEGNGVLSLPEGTGRTVGEDPQGLFQKHREEELEERRKLYRWGNWKDGLI 14 9
151 LNLAGKRLSDLPADERFLEDKLMEFETSLWGLASFWKLPINWTHWND 200
150 LNMAGAKLYDLPVDERFLEDKRVDFEVSLAKGLADLAIKDSLNVLTCWKD 199
201 PDDFDCIFRSSYGKLAGRVRDSWKDDAFFGYQFLNGANPMLLRCCVRLPA 250
■ М1:.М.....11|.ММ11|:||.||1М11111|::М----III
200 LDDFNRIFWCGQSKLAERVRDSWKEDALFGYQFLNGANPVVLRRSAHLPA 249
251 RLVFPPGMEELQAQLEKELQGGTLFVADFSLLDGIKANVIHFRQQFLAAP 300
|МММММММММ:|ММ-МММММММ---М- ММ
250 RLVFPPGMEELQAQLEKELEGGTLFEADFSLLDGIKANVILCSQQHLAAP 299
301 LVLLKLQPDGQLLPMAIQLELPKIGSTPPPIFLPSDPPVVWLLAKCWVRS 350
300 LVMLKLQPDGKLLPMVIQLQLPRTGSPPPPLFLPTDPPMAWLLAKCWVRS 349
351 CDFQLHELQSHLLRGHLMAEVFAVATMRCLPTIHPVYKLLHPHLRYTMEI 400
-ММММММММММ--ММММ:М|::М:-МММ:М
350 SDFQLHELQSHLLRGHLMAEVIVVATMRCLPSIHPIFKLIIPHLRYTLEI 399
4 01 NLRARNGLVSDCGVFDQIMSTGGGGHVDVVKRAGDLVTYSSFCPPDDLKE 45 0
400 NVRARTGLVSDMGIFDQIMSTGGGGHVQLLKQAGAFLTYSSFCPPDDLAD 449
451 RGLLDVKSSYYAQDALRLWEVIHRYVEGILDLYYKTDEAVREDHELQHWC 500
ПИ.ММ:|ММММ|:|:МММ:.|:ИИ.М::|.М |.||
450 RGLLGVKSSFYAQDALRLWEIIYRYVEGIVSLHYKTDVAVKDDPELQTWC 499
501 REITETGLQGAQDRGFPTSLETQAQACQFVTMCIFTCTGQHSSVHLGQLD 550
500 REITEIGLQGAQDRGFPVSLQARDQVCHFVTMCIFTCTGQHASVHLGQLD 549
551 WLSWVPNAPCTMRLPPPTTKDATMETLMDTLPNPYQASLQINIIWHLGRP 600
ЫММММММММММ:И:|.МП.:|ММ::Ы. |||.
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.