Синтез и изучение аналогов рибавирина, содержащих ненасыщенные заместители в положении 5 гетероциклического основания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат наук Прутков Александр Николаевич

• Прутков Александр Николаевич
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Прутков Александр Николаевич

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Нуклеозиды имидазола, 1,2,3-триазола и пиразола

1.2 Нуклеозиды 1,2,4-триазола

1.2.1 Аналоги рибавирина по остатку сахара

1.2.2. Аналоги рибавирина по карбоксамидной группе

1.2.3 Нуклеозиды 5-замещенных 1,2,4-триазол-3-карбоксамидов

1.3 Получение нуклеозидов 1,2,4-триазола

1.3.1 Рибозилирование

1.3.2 Введение заместителей в 1,2,4-триазольное кольцо при нуклеозиде

Глава 2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.1 Синтез производных 5-замещенных 1,2,4-триазол-3-карбоновых кислот

2.2 Рибозилирование производных 5-арилэтенил-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты

2.2.1 Химико-ферментативный способ получения рибозидов

2.2.2 Химические способы получения рибозидов

2.3. Введение заместителей в 1,2,4-триазольное кольцо нуклеозида

2.3.1. Окисление этилового эфира 1-(2,3,5-три-О-ацетил-Р-0-рибофуранозил)-5-гидроксиметил-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты (20)61

2.3.2 Получение целевых нуклеозидов с помощью реакции Виттига

2.3.3 Получение целевых нуклеозидов с использованием реакции Хорнера-Вадсворта-Эммонса

2.4 Исследование биологической активности

Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ВЫВОДЫ

ПУБЛИКАЦИИ АВТОРА

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез и изучение аналогов рибавирина, содержащих ненасыщенные заместители в положении 5 гетероциклического основания»

Актуальность проблемы

Широта распространения вирусных заболеваний, их изменчивость и высокая контагиозность порождает, в связи с развитием современных систем транспорта и глобализацией, угрозу перерастания локальных эпидемий в пандемии. Вирусные гепатиты и вирус гриппа являются широко распространенными и опасными инфекциями. Кроме того, в последние десятилетия в мире наблюдалось возникновение (в том числе и повторное) эпидемий опасных вирусных инфекций, например, вспышка вируса Эбола в Западной Африке и эпидемия ближневосточного респираторного синдрома (MERS) на Ближнем Востоке и в Южной Корее. Или COVID-19, инфекционное вирусное заболевание вызванное новым, ранее неизвестным коронавирусом. Впервые зарегистрированная 31.12.2019 в Китае, болезнь получила широкое распространение и переросла в пандемию. На 11.10.2020 г. число зарегистрированных случаев инфицирования превышало 37 млн., а число смертей составило около 1 млн. (по данным Всемирной организации здравоохранения). COVID-19 оказал серьезное влияние на социальную и экономическую сферы всего мирового сообщества.

В связи с этим остро стоит проблема по поиску новых средств профилактики и интенсивной терапии в экстремальных ситуациях и в периоды эпидемий.

Поэтому в настоящий момент актуальной задачей современной биоорганической и медицинской химии, несомненно, является поиск новых селективных противовирусных агентов и изучение механизмов их действия, путей их направленной модификации и взаимосвязей структура - активность.

Одно из важных направлений в медицинской химии - изучение аналогов природных нуклеозидов, соединений, структурно подобных природным компонентам нуклеиновых кислот. Многие модифицированные нуклеозиды применяются в химиотерапии раковых заболеваний и вирусных инфекций. В последнее время ведутся исследования по поиску нуклеозидов, обладающих противотуберкулезными и антибактериальными свойствами.

Данная работа посвящена изучению способов получения и биологических свойств аналогов нуклеозидов, содержащих в качестве гетероциклического основания 1,2,4-триазол-3-карбоксамид, содержащий в 5 положении алкил/арилэтенильный заместитель (структурные аналоги рибавирина -1-Р^-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамида - лекарственного препарата, широко применяемого в терапии вирусных инфекций). Этот класс соединений интересен тем, что он может сочетать в себе как минимум два вида биологической активности: противовирусную и противоопухолевую. Такая модификация структуры позволит более полно оценить возможный фармакологический потенциал нуклеозидов 1,2,4-триазола и, в перспективе, получить новые лекарственные препараты с определенным спектром биологического действия.

Работа является частью научных исследований, проводимых на кафедре биотехнологии и промышленной фармации Института тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова «РТУ МИРЭА» по гранту РФФИ 14-03-31267 мол_а (2014-2015 гг.), гранту Президента РФ для государственной поддержки молодых российских ученых МК-7350.2015.4 (2015-2016 гг.) и гранту Президента РФ для государственной поддержки ведущих научных школ НШ-7946.2016.11 (2016-2017 гг.).

Цель и задачи работы

Целью работы является разработка путей синтеза аналогов нуклеозидов, содержащих в качестве гетероциклического основания 5-алкил/арилэтенил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, что позволило бы оценить влияние структуры заместителя в положении 5 гетероциклического основания на наблюдаемые биологические свойства в ряду подобных нуклеозидов, расширить знания об отношении структура - активность и предложить новые потенциальные фармакологически активные агенты.

В ходе выполнения работы решались следующие задачи:

• Синтез производных 5-замещенных 1,2,4-триазол-3-карбоновых кислот.

• Сравнение эффективности химического и химико-ферментативного способов рибозилирования для получения нуклеозидов 5-замещенных 1,2,4-триазол-3-карбоксамидов.

• Разработка подходов к получению 5-замещенных аналогов рибавирина, содержащих ненасыщенные заместители.

• Изучение биологической активности полученных аналогов нуклеозидов.

Научная новизна

В ходе настоящего исследования предложен метод синтеза производных 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты, содержащих ненасыщенные заместители в 5-ом положении гетероцикла. Подтверждено, что 1,2,4-триазол-3-карбоксамиды, содержащие объемные заместители в 5-ом положении не являются субстратами генно-инженерных пуриннуклеозидфосфорилаз.

Проведен сравнительный анализ методов химического гликозилирования для получения 5-замещенных нуклеозидов 1,2,4-триазола. Для повышения селективности образования 1-Р-О-рибофуранозидов предпочтительно использовать прямую конденсацию гетероциклического основания с тетраацетатом рибозы в присутствии кислого катализатора. Определены физико-химические свойства полученных изомерных нуклеозидов.

Предложены способы селективного окисления этилового эфира 1-(2,3,5-три-О-ацетил-Р^-рибофуранозил)-5-гидроксиметил-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты.

Разработаны методы синтеза целевых нуклеозидных аналогов, содержащих ненасыщенные заместители, из общих предшественников с помощью реакций Виттига и Хорнера-Вадсворта-Эммонса. Получены нуклеозиды, содержащие 5-алкил/арилэтенил заместители с цис- и транс- конфигурацией двойной связи.

Впервые получены и исследованы 11 новых аналогов нуклеозидов. Изучена их противовирусная активность по отношению к вирусу гепатита С, вирусу гриппа и вирусу простого герпеса, и их противоопухолевые свойства. Подтверждено

влияние ригидной структуры заместителя в 5 положении гетероциклического основания (1,2,4-триазол-3-карбоксамида) на наличие противовирусных свойств.

Теоретическая и практическая значимость

Выполнен сравнительный анализ методов химического гликозилирования при получении 5-замещенных аналогов рибавирина. Определено влияние структуры заместителя в 5-ом положении основания на селективность процесса. Приведены рекомендации по определению изомерной структуры продуктов рибозилирования методами ЯМР-спектроскопии.

Оптимизирован способ получения этилового эфира 1-(2,3,5-три-О-ацетил-Р-D-рибофуранозил)-5-формил-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты - исходного соединения для функционализации 5-ого положения гетероциклического основания заместителями различных типов. Определены границы применения реакции Хорнера-Вадсворта-Эммонса с различными карбонильными соединениями и этиловым эфиром 1-(2,3,5-три-О-ацетил-Р^-рибофуранозил)-5-[(диэтоксифосфорил)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты. Показано преимущественное образование транс-изомеров в реакции Хорнера.

Данные о биологической активности полученных нуклеозидов, позволили оценить влияние структуры арилвинильных заместителей, а также цис- и трансизомерии двойной связи на биологическую активность. В ряду полученных аналогов нуклеозидов. наибольшую противовирусную активность по отношению к вирусу гепатита С проявляли Е-изомеры. Цитотоксичность 5-алкилэтенил замещенных аналогов рибавирина была больше по сравнению с цитотоксичностью 5-арилэтенил производных.

Показано, что некоторые из полученных нуклеозидов проявляют противовирусные свойства сравнимые с рибавирином при меньшей цитотоксичности. Можно рассматривать их в качестве соединений-кандидатов для создания новых противовирусных лекарственных препаратов.

Положения, выносимые на защиту

1. Синтез производных 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты, содержащей ненасыщенные заместители в 5-ом положении гетероциклического основания.

2. Изучение способов рибозилирования для получения 5-замещенных аналогов рибавирина.

3. Синтез 5-алкил/арилэтенил замещенных 1-Р-0-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамидов.

4. Результаты исследования биологической активности полученных аналогов нуклеозидов.

Публикации и апробация работы

По материалам научной работы опубликовано 4 статьи в журналах, включенных в перечень рецензируемых журналов ВАК и в международные базы цитирования Scopus и Web of Science, получен 1 патент РФ.

Результаты, полученные во время исследования, были представлены и доложены на следующих всероссийских и международных научных конференциях: Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2015», Москва, 13-17 апреля 2015; XV Ежегодной международной молодежной конференции ИБХФ РАН-ВУЗы, Москва, 23-25 ноября 2015 г.; Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2016», Москва, 11-15 апреля 2016 г; конференции «Медицинская и биоорганическая химия», входящей в кластер конференций по органической химии «ОргХим-2016», Санкт-Петербург (пос. Репино), 27 июня - 1 июля 2016 г.; III всероссийском научной форуме «Наука будущего - наука молодых», организованного Министерством образования и науки Российской Федерации, Нижний Новгород, 12-14 сентября 2017 г.

Личный вклад автора

Автором выполнен весь объем синтетической части работы, проведены физико-химические исследования и интерпретированы полученные результаты, проанализирован массив данных, полученных в ходе биологических исследований, сформулированы цель, задачи и выводы работы, подготовлены научные публикации в соавторстве и представлены доклады по теме диссертации на конференциях различного уровня.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Присутствие в молекулах биологически активных веществ гетероциклов, содержащих атомы азота, оказывает влияние на фармакокинетику, фармакодинамику, биодоступность лекарственного средства. Вещества содержащие моноциклические азолы (имидазол, 1,2,4-триазол и другие) проявляют широкий спектр биологической активности. На их основе уже используются, или активно разрабатываются новые противовирусные и противоопухолевые препараты, антибиотики, и другие лекарственные средства [1, 2].

В литературном обзоре рассмотрены аналоги нуклеозидов, содержащих в качестве оснований пятичленные азотные гетероциклы и их механизмы действия, и приведены способы получения нуклеозидов 1,2,4-триазола.

1.1 Нуклеозиды имидазола, 1,2,3-триазола и пиразола

AICAR (акадезин) - 5-амино-1-Р^-рибофуранозилимидазол-4-карбоксамид (1) (рис. 1.1) играет важную роль в регуляции клеточного метаболизма и оказывает серьезное влияние на различные процессы метаболизма. В клетках AICAR фосфорилируется аденозинкиназой до 5'-монофосфата, который является активатором аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназы. Также было показано, что он является ингибитором ЖР 90 (белок теплового шока с молекулярной массой 90 кДа) - белка-мишени для разработки противоопухолевых препаратов [3, 4].

AICAR нашел широкое применение в медицине при лечении ишемических повреждений сердца, сахарного диабета и ожирения. Также он обладает ярко выраженным противоопухолевым действием. Ведутся исследования по возможности его применения для лечения хронического лимфоцитарного лейкоза, остеосаркомы и некоторых других видов опухолей [3-8].

Мизорибин (брединин) - 5-гидрокси-1-Р-0-рибофуранозилимидазол-4-карбоксамид (2) (рис. 1.1) изначально был выделен из почвенных грибов ЕиретаПтт Ь^еМ1атт и было показано, что он обладает слабыми

противобактериальными свойствами [3, 9]. Он проявляет свойства иммунодепрессанта, за счет своей способности ингибировать пролиферацию лимфоцитов, однако не получил повсеместного применения в клинической практике из-за относительно низкой эффективности in vivo по сравнению с другими препаратами. Монофосфат мизорибина, в отличие от монофосфата AICAR, является одним из самых эффективных ингибиторов ИМФДГ (инозинмонофосфатдегидрогеназа) - фермента, который участвует в биосинтезе нуклеозидов и является мишенью в поиске противовирусных и противоопухолевых препаратов. Нуклеозид 2 проявляет противовирусную активность в отношении вируса гриппа и некоторых других, но пока не нашел применения в данной области

[3, 10].

EICAR - 1^^-рибофуранозил-5-этинилимидазол-4-карбоксамид (3) (рис. 1.1) обладает широкими противовирусным и противоопухолевым спектрами действия. Он демонстрирует высокую эффективность по отношению к парамиксовирусам, ортомиксовирусам, реовирусам и некоторым другим вирусам, за исключением коронавируса, вызывающего SARS (тяжелый острый респираторный синдром). Механизм его противовирусного действия также, как и у мизорибина, заключается в ингибировании ИМФДГ, но из-за высокой токсичности он не был допущен для лечения вирусных инфекций [3, 11-14].

Перечисленные нуклеозиды имидазола 1-3 имеют схожее строение, однако обладают разными механизмами действия. Несмотря на то, что они не нашли применения в качестве противовирусных препаратов, в настоящий момент активно ведутся исследования по поиску аналогов или модификации структур 1-3 для создания новых активных и безопасных соединений [15-18] из-за широкого спектра их биологической активности.

Рис. 1.1. Нуклеозиды имидазола: AICAR -1, мизорибин - 2, EICAR - 3.

1,2,3-Триазол может отлично имитировать строение различных гетероциклов, особенно пятичленных аза-гетероциклов [19]. Например, 1-Р-О-рибофуранозил-5-этинил-1,2,3-триазол-4-карбоксамид (ETCAR, 4) (рис. 1.2) является аналогом Е1СДЯ 3 по основанию. Было показано, что 5'-монофосфат ETCAR является ингибитором ИМФДГ. Благодаря этому, он проявляет заметные противовирусные свойства по отношению к вирусу гриппа и респираторному синцитиальному вирусу, но, одновременно с этим, и высокую цитотоксичность.

5-Пропинил-1-Р-0-рибофуранозил-1,2,3-триазол-4-карбоксамид (5) (рис. 1.2), как гомолог ЕТСДЯ, не проявлял заметных противовирусных свойств и был менее токсичным, хотя его 5'-монофосфат был способен ингибировать ИМФДГ [20, 21].

В отличие от ЕТСДЯ 4, 1-Р^-рибофуранозил-1,2,3-триазол-4-карбоксамид (6) (рис. 1.2) не подвергается фосфорилированию клеточными киназами и потому не проявляет заметных противовирусных или цитостатических свойств, хотя химически полученный 5'-монофосфат эффективно ингибирует ИМФДГ [3, 20].

Рис. 1.2. Нуклеозиды 1,2,3-триазола.

Пиразофурин - 4-гидрокси-3^^-рибофуранозилпиразол-5-карбоксамид (7) (рис. 1.3), является С-нуклеозидом. Впервые был выделен из бактерий Streptomyces Candidus [22]. Он является ингибитором оротидинмонофосфатдекарбоксилазы, важного фермента в биосинтезе нуклеотидов пиримидина. Обладает широким спектром противомикробного и противовирусного действия. В частности, он активен по отношению к вирусу везикулярного стоматита, относящегося к семейству Rhabdoviridae. Ожидается, что из-за сходства семейства Rhabdoviridae с семейством Filoviridae (вирус Эбола), 7 также будет активен по отношению к филовирусам [13, 23, 24]. Тем не менее из-за высокой токсичности in vivo, пиразофурин не нашел применения в клинической практике [23].

N-Нуклеозиды пиразола (4-иод-1^^-рибофуранозилпиразол-3-карбоксамид (8), 1^^-рибофуранозил-4-(фенилэтинил)пиразол-3-карбоксамид (9) и 4-пропинил-1^-0-рибофуранозилпиразол-3-карбоксамид (10)) (рис. 1.3) были исследованы на наличие противовирусного действия к полиовирусам, а именно встраивания в синтезируемую вирусную РНК и взаимодействия с РНК-зависимой-РНК-полимеразой. Несмотря на то, что трифосфат вещества 8 встраивается в РНК при репликации вместо урацила довольно эффективно, противовирусный эффект был слабо выражен. По всей видимости, это связано с низкой мутагенностью 8. Другой причиной низкой активности соединений 8-10 может быть низкая степень фосфорилирования N-нуклеозидов пиразола клеточными киназами [25].

Рис. 1.3. Пиразофурин 7 и N-нуклеозиды пиразола 8-10.

Таким образом, несмотря на широкий спектр биологической активности нуклеозидов 1-10, они пока не нашли применение в терапии вирусных инфекций и опухолевых заболеваний.

1.2 Нуклеозиды 1,2,4-триазола

Рибавирин (виразол, 1-Р^-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, 11) (рис. 1.4) стал первым синтетическим аналогом нуклеозидов с широким спектром активности по отношению как РНК, так и ДНК вирусам in vitro. В частности, этот препарат применяется в терапии инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом у детей, остается единственным препаратом, используемым для лечения вирусных геморрагических лихорадок, вызываемых аренавирусами (например, вирус Ласса), буниавирусами (например, вирус

лихорадки Крым-Конго и хантавирусы), в комбинации с интерфероном используется в терапии гепатита С. Рибавирин оказался клинически эффективен против коронавирусов, вызывающих пневмонию (SARS). Также ведутся исследования для применения комбинации рибавирина с интерфероном для лечения MERS (ближневосточный респираторный синдром) [3, 26-29]. По отношению к лечению COVID-19, рибавирин в качестве монотерапии был эффективен лишь в высоких дозах. Однако его применение в комбинации с интерфероном или лопинавиром и ритонавиром позволяло сократить время реабилитации пациентов и уменьшить риск сопутствующих заболеваний у пациентов с легкой и средней формой заболевания [30-32].

Помимо противовирусного применения, 11 проходит клинические испытания (1 и 2 фазы) в качестве противоопухолевого препарата в терапии лейкимии, глиомы и некоторых других видов опухолей [33-36].

Появление новых препаратов с прямым противовирусным действием против ВГС (вирус гепатита С) и внедрение их в практику позволило переходить к новым методам лечения гепатита С. Так, например, большинство методов, предлагаемых на данный момент, исключают применение пегилированного интерферона, в то время как рибавирин остаётся важным компонентом терапии ХГС (хронический гепатит С). Это связано с тем, что помимо усиления вирусологического эффекта рибавирин также предохраняет от рецидива заболевания [37, 38].

о

но- -

N —N

ОН ОН

11

Рис. 1.4. Рибавирин.

На сегодняшний день предложено шесть возможных механизмов противовирусного действия рибавирина. Во-первых, монофосфат рибавирина может ингибировать ИМФДГ, что за счет снижения концентрации гуанозинтрифосфата приводит к уменьшению репликации вирусного генома. Во-вторых, рибавирин оказывает иммуномодулирующее воздействие на интерферон-стимулируемые гены. В-третьих, рибавиринтрифосфат ингибирует РНК-зависимую-РНК-полимеразу. В-четвертых, возможно ингибирование гуанозинтрифосфат зависимых ферментов кэпирования или встраивание рибавирина как 5'-кэп аналога. В-пятых, может происходить встраивание рибавирина в РНК вируса, что приводит к летальным мутациям. В-шестых, механизм, обуславливающий его противоопухолевую активность, ингибирование фактора трансляции еШ4Е (фактор инициации трансляции эукариот 4Е) [3, 33, 3944].

Обычно не все эти механизмы вносят вклад в общую активность рибавирина по отношению к конкретному типу вируса. При исследовании на резистентных клеточных линиях было показано, что в зависимости от клеточного метаболизма рибавирина ингибирование вируса может происходить через различные механизмы в разных типах клеток [3, 43].

Основное ограничение рибавирина - это большое количество побочных эффектов при его употреблении в качестве лекарственного препарата. В основном они связаны с гемолитической анемией, что приводит к снижению применяемой дозы препарата.

В последнее время активно ведется поиск производных рибавирина. Ожидается, что новые производные рибавирина позволят найти зависимость между структурой нуклеозидных аналогов 11 и их субстратной специфичностью в отношении вирусных ферментов, и это позволит пролить свет на возможные механизмы биологического действия данного класса соединений. Новые аналоги рибавирина можно разделить на три типа: нуклеозиды 1,2,4-триазол-3-карбоксамида, модифицированные по сахарному остатку; производные

рибавирина, модифицированные по карбоксамидной группе; и нуклеозиды 5-замещенной 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты (ТКК).

1.2.1 Аналоги рибавирина по остатку сахара

Левовирин (1-Р-Ь-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, 12) - L-энантиомер рибавирина (рис. 1.5). Обладает схожим иммуномодулирующим действием, что и рибавирин. Клинические испытания 12 для терапии гепатита С показали, что этого недостаточно для его дальнейшего применения в качестве противовирусного препарата [44].

о

он он 12

Рис. 1.5. Левовирин.

Известно, что 1,5-ангидрогекситольные аналоги нуклеозидов имитируют конформацию рибонуклеозидов. Сообщалось, что такие производные, содержащие в качестве оснований 5-йодурацил, 5-этилурацил, цитозин или гуанин, являются селективными ингибиторами репликации вирусов. 1,5-ангидро-2-(1,2,4-триазол-3-карбоксамид-1-ил)-2-дезокси^-альтрогексит (13), 1,5-ангидро-3-О-метил-2-(1,2,4-триазол-3-карбоксамид-1-ил)-2-дезокси^-альтрогексит (14), метил-2-(1,2,4-триазол-3-карбоксамид-1-ил)-2-дезокси^-альтрогексопиранозид (15) и метил-3-О-метил-2-(1,2,4-триазол-3-карбоксамид-1-ил)-2-дезокси^-альтрогексопиранозид (16), комбинирующие в себе ТКА (1,2,4-триазол-3-карбоксамид) и гекситольный фрагмент (рис. 1.6), не проявляли заметной активности по отношению к вирусам простого герпеса первого и второго типа, вирусу желтой лихорадки и некоторым другим РНК и ДНК вирусам. Низкую активность проявляет аналог 14 по

отношению к вирусу диареи крупного рогатого скота (ИД50=64 мг/мл), в то время как у рибавирина ИД50=18±5 мг/мл [45].

о

ЗШРЦШ 15: Р1 = Н

14:Р1 = СН3 16:Р1=СН3

Рис. 1.6. 1,5-Ангидрогекситолъные аналоги рибавирина 13-16.

В ходе поиска новых соединений, обладающих мутагенной активностью, были исследованы 2'-дезоксипроизводное рибавирина (1-(2-дезокси-Р-0-рибофуранозил)-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, 17) и его 5'-трифосфат (1-(2-дезокси-Р^-рибофуранозил)-1,2,4-триазол-3-карбоксамид-5'-трифосфат, 18) (рис. 1.7). Было показано, что в течение 2,5 месяцев 1мМ раствор 17 не ингибирует репликацию ВИЧ-1 (вирус иммунодефицита человека). Авторы связали это с несколькими возможными причинами: во-первых, отсутствие фосфорилирования нуклеозида 17 в клетках; во-вторых, 18 не является субстратом для обратной транскриптазы; в-третьих, встроившись в вирусную ДНК, 17 не способен вызвать мутации в вирусном геноме. Для подтверждения этого было изучено встраивание 18 в праймер ДНК. Было показано, что он эффективно встраивается вместо природных нуклеозидов, причем количество замещений увеличивается в следующем ряду: dU>dG=dC>dA [46].

Рис. 1.7. 2 '-Дезокси производное рибавирина 17 и его трифосфат 18.

Ациклическое производное рибавирина (1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, 19), которое является аналогом ацикловира (2-амино-9-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он, 20) (рис. 1.8) не проявляло активности по отношению к вирусу герпеса, гриппа, и другим вирусам. Также у 19 отсутствовала противобактериальная и противоопухолевая активности [47].

Рис.1.8. Ациклическое производное рибавирина 19 и ацикловир 20.

Однако, введение различных заместителей в гетероциклическое основание соединения 19 позволило получить вещества, обладающие заметными противовирусными и противоопухолевыми свойствами [48-56].

Так, были получены и исследованы на наличие активности по отношению к вирусу табачной мозаики соединения 21-24, содержащие 1,2,3-триазольный фрагмент (рис. 1.9) [48, 49].

23 24

Рис. 1.9. Ациклические аналогирибавирина содержащие 1,2,3-триазол.

Из них сравнимой (или превосходящей) с рибавирином противовирусной активностью обладали метиловый эфир 2-[(2-бензилоксиэтокси)метил]-5-[4-(4-метилфенил)-1,2,3-триазол-1-ил]-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты (25), 5-[4-(гидроксиметил)-1,2,3-триазол-1-ил]-1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (26), 1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-5-(5-пентил-1,2,3-триазол-4-ил)-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (27), 1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-5-[5-(4-пентилфенил)гидроксиметил)-1,2,3-триазол-4-ил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (28) (производные ациклонуклеозидов 22 и 23) (рис. 1.10). Производные 21 не проявляли заметной активности [48, 49].

Ациклонуклеозиды 24 исследовались на наличие противоопухолевого действия. Среди них, самым активным оказался метиловый эфир 1-[(2-ацетилоксиэтокси)метил]-5- [1-(пирен-1 -илметил)-1,2,3-триазол-4-ил]-1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты (29) (рис. 1.10). Соединение 29 также оказывает иммуномодулирующее действие [50].

Интересно, что изменение структуры 29, а именно модификация сахарного остатка (например, рибофуранозид), изменение пиренового фрагмента (замена

пирена на нафталин или антрацен) замена 1,2,3-триазольного фрагмента, приводило к полной потере активности [50].

Рис. 1.10. Ациклические аналоги рибавирина с 1,2,3-триазольным фрагментом,

обладающие биологической активностью.

Также были получены ациклонуклеозиды, содержащие S-, N и O-арильные заместители в ядре 1,2,4-триазола: 5-ариламино-1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамиды (30), 3-ариламино- 1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-5-карбоксамиды (31), 5-арилтио- 1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамиды (32), 5-арилокси- 1-[(2-ацетилоксиэтокси)метил]-1,2,4-триазол-3-карбоксамиды (33) (рис. 1.11) [51-53].

32 33

Рис. 1.11. Ациклические аналогирибавирина содержащие ArO-, ArNH-, ArS-

заместители.

Противовирусная активность ациклонуклеозидов 32 изучали по отношению к ВГС на клеточной линии ^^5-2. Ни одно из них не обладало заметной активностью. Авторы связывали это со строением молекулы 32. Видимо, серный мостик между 1,2,4 триазолом и арильными фрагментами оказывает негативное влияние на пространственное строение молекулы и взаимное расположение функциональных групп [52].

Среди ариламино- 31 и арилокси-производных 33 были получены перспективные противоопухолевые вещества. Их активность исследовали на клетках рака простаты и поджелудочной железы. Наиболее активными оказались 2-[(2-гидроксиэтокси)метил]-5-[(4-пентилфенил)амино]-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (34), 2-[(2-гидроксиэтокси)метил]-5-[(1-пиренил)амино]-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (35) и 1-[(2-ацетилоксиэтокси)метил]-5-(4-гептилфенокси)-1,2,4-триазол-3-карбоксамид(36) (рис. 1.12). Изменение структуры заместителя (уменьшение длины алкильной цепи), замена карбоксамидной группы на сложноэфирную приводило к снижению противоопухолевого действия [51, 53]. Интересно, что аналоги 34 и 35 по положению гликозидной связи (производные 30) не проявляли биологической активности [51].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Прутков Александр Николаевич, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Recent Synthetic Strategies for Monocyclic Azole Nucleus and Its Role in Drug Discovery and Development / Neha et al. // Curr. Org. Synth. - 2018. - V. 15. - P. 321-340;

2. Chemical Synthesis of Nucleoside Analogues / ed. by P. Merino. - Hoboken, N.J. : Wiley, 2013. - 912 p;

3. Zeidler, J. Bioactive nucleoside analogues possessing selected five-membered azaheterocyclic bases / J. Zeidler, D. Baraniak, T. Ostrowski // Eur. J. Med. Chem.

- 2015. - V. 97. - P. 409-418.

4. Акадезин вызывает неапоптотическую гибель опухолевых клеток / В.А. Глазунова и др. // Acta Naturae. - 2013. - Т.5. - №3. - 78-82 с.;

5. Drew, B.G. Acadesine, an adenosine-regulating agent with the potential for widespread indications / B.G. Drew, B.A. Kingwell // Expert Opin. Pharmacother.

- 2008. - V. 9. - P. 2137-2144;

6. Effect of 5-Aminoimidazole-4-Carboxamide-1-P-d-Ribofuranoside Infusion on In Vivo Glucose and Lipid Metabolism in Lean and Obese Zucker Rats / R. Bergeron et al. // Diabetes. - 2001. - V. 50. - P. 1076-1082;

7. 5-Aminoimidazole-4-carboxamide-1- в -D-ribofuranoside Inhibits Cancer Cell Proliferation in Vitro and in Vivo via AMP-activated Protein Kinase / R. Rattan et al. // J. Biol. Chem. - 2005. - V. 280. - P. 39582-39593;

8. AICAR induces mitochondrial apoptosis in human osteosarcoma cells through an AMPK-dependent pathway / Morishita et al. // Int. J. Oncol. - 2017. - V.50. - P. 23-30;

9. Ishikawa, H. Mizoribine and mycophenolate mofetil / H. Ishikawa // Curr. Med. Chem. - 1999. - V. 6. - P. 575-597.

10.Nair, V. Inosine monophosphate dehydrogenase as a probe in antiviral drug discovery / V. Nair, Q. Shu // Antivir. Chem. Chemother. - 2007. - V. 18. - P. 245258.

11.Nucleosides and Nucleotides. 96. Synthesis and antitumor activity of 5-ethynyl-1-P-D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide (EICAR) and its derivatives / N. Minakawa et al. // J. Med. Chem. - 1991. - V. 34. - P. 778-786.

12. Antiviral activities of 5-ethynyl-1-b-Dribofuranosylimidazole-4-carboxamide and related compounds / E.D. Clercq et al. // Antimicrob. Agents Chemother. - 1991.

- V. 35. - P. 679-684.

13. Clercq, E.D. New Nucleoside Analogues for the Treatment of Hemorrhagic Fever Virus Infections / E.D. Clercq // Chem. Asian J. - 2019. - V. 14. - P. 3962 -3968;

14.Enhancement of the infectivity of SARS-CoV in BALB/c mice by IMP dehydrogenase inhibitors, including ribavirin / D.L. Barnard et al. // Antivir. Res.

- 2006. - V.71. - P. 53-63.

15.New synthetic AICAR derivatives with enhanced AMPK and ACC activation / O. Scudiero et al. // J. Enzym. Inhib. Med. Chem. - 2016. - V.31. - P. 748-753;

16. Synthesis and biological evaluation of novel imidazole nucleosides as potential anti-dengue virus agents / Y. Okano et al. // Bioorg. Med. Chem. - 2019. - V.27.

- P. 2181-2186;

17.Design, synthesis and evaluation of a series of acyclic fleximer nucleoside analogues with anti-coronavirus activity / H. L. Peters et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2015. - V.25. - P. 2923-2926;

18. Chen, Z. Thiophene-expanded guanosine analogues of Gemcitabine / Z. Chen, T.C. Ku and K.L. Seley-Radtke // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2015. - V.25. - P. 42744276;

19.The 1,2,3-triazole ring as a bioisostere in medicinal chemistry / E. Bonandi et al. // Drug Discov. Today. - 2017. - V.22. - P. 1572-1581;

20. 5-Ethynyl-1-b-D-ribofuranosyl- 1H-[1,2,3]-triazole-4-carboxylic acid amide (ETCAR) and its analogues: synthesis and cytotoxic properties / T. Ostrowski et al. // Bioorg. Med. Chem. - 2011. - V. 19. - P. 4386-4398;

21.Antivirally active ribavirin analogues - 4,5-disubstituted 1,2,3-triazole nucleosides: biological evaluation against certain respiratory viruses and

computational modeling / A. Krajczyk et al. // Antivir. Chem. Chemother. - 2014.

- V. 23. - P. 161-171;

22.Review: biologically active pyrazole derivatives / A. Ansari et al. // New J. Chem.

- 2014. - V. 41. - P. 16-41;

23.Clercq, E.D. Vesicular stomatitis virus (VSV) as a paradigm for predicting antiviral activity against Ebola virus (EBOV) / E.D. Clercq // Marmara Pharm J. - 2015. -V. 19. - P. 141-152;

24.Ku?ukguzel, §.G. Recent advances in bioactive pyrazoles / §.Guniz Ku?ukguzel and Sevil §enkarde§ // Eur. J. Med. Chem. - 2015. - V. 97. - P. 786-815;

25.Effects of introduction of hydrophobic group on Ribavirin base on mutation induction and Anti-RNA viral activity / K. Moriyama et al. // J. Med. Chem. -2008. - V. 51. - P. 159-166

26.Ribavirin and interferon alfa-2a for severe Middle East respiratory syndrome coronavirus infection: a retrospective cohort study / A.S. Omrani et al. // Lancet Infect. Dis. - 2014. - V. 14. - P. 1090-1095;

27. Investigating the Influence of Ribavirin on Human Respiratory Syncytial Virus RNA Synthesis by Using a High-Resolution Transcriptome Sequencing Approach / W. Aljabr et al. // J. Virol. - 2016. - V. 90. - P. 4876-4888;

28.Ribavirin in the treatment of SARS: A new trick for an old drug? / G. Koren et al.// Can. Med. Assoc. J. - 2003. - V. 168. - P. 1289-1292;

29.Huggins, J.W. Prospects for Treatment of Viral Hemorrhagic Fevers with Ribavirin, a Broad Spectrum Antiviral Drug / J.W. Huggins // Rev. Infect. Dis. -1989. - V. 11. - P. S750-S761;

30. Triple combination of interferon beta-1b, lopinavir-ritonavir, and ribavirin in the treatment of patients admitted to hospital with COVID-19: an open-label, randomised, phase 2 trial / I. F.-N. Hung et al. // Lancet - 2020. - V. 395. - P. 1695-1704;

31. Jean, S.-S. Treatment options for COVID-19: The reality and challenges / S.-S. Jean, P.-I. Lee and P.-R. Hsueh // J. Microbiol. Immunol. Infect. - 2020. - V. 53.

- p. 436-443;

32.Elfiky, A.A. Anti-HCV, nucleotide inhibitors, repurposing against COVID-19 // A.A. Elfiky // Life Sci. - V. 248. - Article 117477;

33.Metabolism, Biochemical Actions, and Chemical Synthesis of Anticancer Nucleosides, Nucleotides, and Base Analogs / J. Shelton et al. // Chem. Rev. -2016. - V. 116. - P. 14379-14455;

34. Use of an anti-viral drug, Ribavirin, as an anti-glioblastoma therapeutic / F. Volpin et al. // Oncogene. - 2017. - V. 36. - P. 3037-3047;

35.Efficacy of ribavirin against malignant glioma cell lines: Follow-up study / Y. Ochiai et al. // Oncol. Rep. - 2018. - V. 39. - P. 537-544;

36.Ribavirin as a potential therapeutic for atypical teratoid/rhabdoid tumors / J. Casaos et al. // Oncotarget. - 2018. - V. 9. - P. 8054-8067;

37.Nucleotide Polymerase Inhibitor Sofosbuvir plus Ribavirin for Hepatitis C / E.J. Gane et al. // N. Engl. J. Med. - 2013. - V. 368. - P. 33-44;

38.Koh, C. What is the future of ribavirin therapy for hepatitis C? / C. Koh, T.J. Liang // Antivir. Res. - 2014. - V. 104. - P. 34-39;

39.Ribavirin augments doxorubicin's efficacy in human hepatocellular carcinoma through inhibiting doxorubicin-induced eIF4E activation / J. Tan et al. // J. Biochem. Mol. Toxicol. - 2018. - V. 32. - e22007;

40.Ribavirin targets eIF4E dependent Akt survival signaling / K. Tan et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2008. - V. 375. - P. 341-345;

41.Determining Ribavirin's mechanism of action against Lassa virus infection / P. Carrillo-Bustamante et al. // Sci. Rep. - 2017. - V. 7. - 11693;

42. Paeshuyse, J. Ribavirin for the treatment of chronic hepatitis C virus infection:a review of the proposed mechanisms of action / J. Paeshuyse, K. Dallmeier and J. Neyts // Curr. Opin. Virol. - 2011. - V. 1. - P. 590-598;

43.Beaucourt, S. Ribavirin: a drug active against many viruses with multiple effects on virus replication and propagation. Molecular basis of ribavirin resistance / S. Beaucourt and M. Vignuzzi // Curr. Opin. Virol. - 2014. - V. 8. - P. 10-15;

44.Graci, J.D. Mechanisms of action of ribavirin against distinct viruses / J.D. Graci, C.E. Cameron // Rev. Med. Virol. - 2006. - V. 16. - P. 37-48;

45. Ribavirin derivatives with a hexitol moiety: synthesis and antiviral evaluation / A.V. Aerschot et al. // Antivir. Chem. Chemother. - 2003. - V. 14. - P. 23-30;

46.In search of new inhibitors of HIV-1 replication: synthesis and study of 1-(2'-deoxy-P-D-ribofuranosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide as a selective viral mutagenic agent / V. Vivet-Boudou et al. // Nucleos. Nucleot. Nucleic Acids. -2007. - V. 26. - P. 743-746;

47.Modifications on the heterocyclic base of acyclovir: synthesis and antiviral properties / L.M. Beauchamp et al. // J. Med. Chem. - 1985. - V. 28. - P. 982-987;

48.Bitriazolyl acyclonucleosides with antiviral activity against tobacco mosaic virus / W. Li et al. // Tetrahedron Lett. - 2008. - V. 49. - P. 2804-2809;

49.Bitriazolyl acyclonucleosides synthesized via Huisgen reaction using internal alkynes show antiviral activity against tobacco mosaic virus / M. Wang et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2011. - V. 21. - P. 354-357;

50. A Novel Bitriazolyl Acyclonucleoside Endowed with Dual Antiproliferative and Immunomodulatory Activity / Y. Xia et al. // J. Med. Chem. - 2012. - V. 55. - P. 5642-5646;

51.Ligand-Mediated Highly Effective and Selective C-N Coupling for Synthesizing Bioactive N-Aryltriazole Acyclonucleosides / Y. Fan et al. // Org. Lett. - 2010. -V. 12. - P. 5712-5715;

52. S-Aryltriazole acyclonucleosides: Synthesis and biological evaluation against hepatitis C virus / Y. Liu et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2010. - V. 20. - P. 3610-3613;

53.Microwave promoted C-O coupling for synthesizing O-aryloxytriazole nucleoside analogues / M. Cong et al. // New J. Chem. - 2015. - V. 39. - P. 3889-3893;

54. Arylethynyltriazole acyclonucleosides inhibit hepatitis C virus replication / R. Zhu et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2008. - V. 18. - P. 3321-3327;

55.A novel arylethynyltriazole acyclonucleoside inhibits proliferation of drug-resistant pancreatic cancer cells / M. Wang et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. -2010. - V. 20. - P. 5979-5983;

56. Acyclonucleosides bearing coplanar arylethynyltriazole nucleobases: synthesis, structural analysis, and biological evaluation / M. Chen et al. // New J. Chem. -2017. - V. 41. - P. 8509-8519;

57. Safety and efficacy of viramidine versus ribavirin in ViSER2: randomized, doubleblind study in therapy-naive hepatitis C patients / P. Marcellin et al. // J. Hepatol.

- 2010. - V. 52. - P. 32-38;

58. Synthesis and antiviral activity of 1,2,4-triazole-3-thiocarboxamide and 1,2,4-triazole-3-carboxamidine ribonucleosides / J.T. Witkowski et al. // J. Med. Chem.

- 1973. - V. 16. P. 935-937;

59.A novel nucleoside analog, 1-P-D-ribofuranosyl-3-ethynyl-[1,2,4]triazole (ETAR), exhibits efficacy against a broad range of flaviviruses in vitro / M. McDowell et al. // Antivir. Res. - 2010. - V. 87. - P. 78-80;

60. Synthesis of 1-P-D-ribofuranosyl-3-ethynyl-[1,2,4]triazole and its in vitro and in vivo efficacy against Hantavirus / D.-H. Chung et al. // Antivir. Res. - 2008. - V. 79. - P. 19-27;

61. Synthesis of bitriazolyl nucleosides and unexpectedly different reactivity of azidotriazole nucleoside isomers in the Huisgen reaction / Y. Xia et al. // Org. Biomol. Chem. - 2007. - V. 5. - P. 1695-1701;

62.N-Aryltriazole ribonucleosides with potent antiproliferative activity against drug-resistant pancreatic cancer / Y. Liu et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2010. - V. 20. - P. 2503-2507;

63. An efficient mixed-ligand Pd catalytic system to promote C-N coupling for the synthesis of N-arylaminotriazole nucleosides / Y. Fan et al. // Chem. Eur. J. - 2012.

- V. 18. - P. 2221-2225;

64.Novel Triazole Ribonucleoside down-regulates heat shock protein 27 and induce potent anticancer activity on drug-resistant pancreatic cancer / Y. Xia et al. // J. Med. Chem. - 2009. - V. 52. - P. 6083-6096;

65. Targeting heat shock factor 1 with a triazole nucleoside analog to elicit potent anticancer activity on drug-resistant pancreatic cancer / Y. Xia et al. // Cans. Lett.

- 2012. - V. 318. - P. 145-153;

66.Nucleoside analog inhibits microRNA-214 through targeting heat-shock factor 1 in human epithelial ovarian cancer / Y.-F. Chen et al. // Canc. Sci. - 2013. - V. 104. - P. 1683-1689;

67. Discovery of novel arylethynyltriazole ribonucleosides with selective and effective antiviral and antiproliferative activity / J. Wan et al. // J. Med. Chem. - 2009. - V. 52. - P. 1144-1155;

68.Chemistry of Nucleosides and Nucleotides. Chapter 1, The Synthesis and Reactions of Pyrrole, Pyrazole, Triazole, Indole, lndazole, and Benzotriazole Nucleosides and Nucleotides / M.N. Preobrazhenskaya and I.A. Korbukh; ed. by L.B. Townsend. - V. 3. - New York: Springer, 1994. - P. 1-105;

69.Nucleic Acids in Chemistry and Biology. Chapter 3, Nucleosides and Nucleotides / ed. by G.M. Blackburn et al. - 3rd Ed. - Cambridge: The Royal Society of Chemistry, 2006. - P. 77-142;

70. Chemistry and Biology of Nucleosides and Nucleotides / ed. by R.E. Harmon, R.K. Robins and L.B. Townsend. - New York: Academic Press, 1978. - 490 p.;

71. Design, synthesis, and broad spectrum antiviral activity of 1-b-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide and related nucleosides / J.T. Witkowski et al. // J. Med. Chem. - 1972. - V.15. - P. 1150-1154;

72.Naik, S. R. Synthesis of nucleosides of 5-substituted-1,2,4-triazole-3-carboxamides / S.R. Naik, J.T. Witkowski, R.K. Robins // J. Heterocycl. Chem. -1974. - V. 11. - P. 57-61;

73. Wu, Q. Design, synthesis, and characterization of photolabeling probes for the study of the mechanisms of the antiviral effects of ribavirin / Q. Wu, F. Qu, J. Wan, et al. // Helv. Chim. Acta. - 2004. - V. 87. - P. 811-819;

74.Youssefyeh, R.D. 4'-Substituted Nucleosides. 4. Synthesis of Some 4'-Hydroxymethyl Nucleosides / R.D. Youssefyeh, J.P.H. Verheyden, J.G. Moffatt // J. Org. Chem. - 1979. - V. 44. - P. 1301-1309;

75. Synthesis of 2',3'-dideoxyribavirin / Y.S. Sanghvi et al. // Nucleos. Nucleot. -1987. - V. 6. - P. 761-774;

76.Regioselective synthesis of virazole using benzyl cyanoformate as a synthon / Y. Ito et al. // Tetrahedron Lett. - 1979. - V. 20. - P. 2521-2524;

77.Efficient synthesis of 3-formyl-1,2,4-triazole nucleoside using diethoxyacetonitrile as a synthon / T. Murakami et al. // Heterocycles. - 1981. - V. 15. - P. 301-304;

78.Нуклеозиды 1,2,4-триазола: возможности и ограничения химико-ферментативного способа получения / И.Д. Константинова и др. // Биоорганическая химия. - 2013. - Т.39. - №1. - С.61-80;

79. An Efficient Chemoenzymatic Process for Preparation of Ribavirin / V. Sakharov et al. // Int. J. Chem. Eng. - 2015. - Article ID 734851. - 5 p.;

80. Synthesis of 5-aryltriazole ribonucleosides via Suzuki coupling and promoted by microwave irradiation / J. Wan et al. // Tetrahedron Lett. - 2006. - V. 47. - P. 6727-6731.

81.Pd(dba)2 vs Pd2(dba)3: An in-Depth Comparison of Catalytic Reactivity and Mechanism via Mixed-Ligand Promoted C-N and C-S Coupling Reactions / M. Cong et al. // Org. Lett. - 2014. - V.16. - P. 4074-4077;

82.Pd-catalyzed oxidative alkenylation for synthesizing arylvinyltriazole nucleosides / J. Tang, M. Cong, Y. Xia, et al. // Org. Biomol. Chem. - 2015. - V. 13. - P. 110114;

83.Rapid Synthesis of 1,3,5-Substituted 1,2,4-Triazoles from Carboxylic Acids, Amidines, and Hydrazines / G.M. Castanedo et al. // J. Org. Chem. - 2011. - V. 76. - P. 1177-1179;

84. A convenient synthesis of 3,5-disubstituted-1,2,4-triazoles / J.E. Francis et al. // Tetrahedron Lett. - 1987. - V. 28. - P. 5133-5136;

85.Potts, K.T. The Chemistry of 1,2,4-Triazoles / K.T. Potts // Chem. Rev. - 1961. -V. 61. - P. 87-127;

86.The Chemistry of Heterocyclic Compounds: Triazoles 1,2,4 / C. Temple; ed. by J.A. Montgomery. - V. 37. - Hoboken, N.J.: Wiley, 1981. - 791 p;

87.Highly stereoselective synthesis of Lamivudine (3TC) and Emtricitabine (FTC) by a novel N-glycosidation procedure / M.F. Caso et al. // Org. Lett. - 2015. - V. 17. - P. 2626-2629;

88.Jahnz-Wechmann, Z. Transglycozilation reaction of 1,2,4-triazole nucleosides / Z. Jahnz-Wechmann, J. Zeidler, J. Boryski // Presented at XlXth International Roundtable on Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, Aug. 27-Sept. 3, 2010, Lyon, France, Abstr. PB174;

89.Прутков А.Н. Синтез 5-метиленокси замещенных гомологов 1,2,4-триазол-3-карбоксамида и рибавирина: магистерская диссертация. МИТХТ им. М.В. Ломоносова, Москва, 2014.

90.Direct One-Pot Synthesis of Nucleosides from Unprotected or 5-O-Monoprotected d-Ribose / A.M. Downey et al. // Org. Lett. - 2015. - V. 17. - P. 4604-4607;

91. Synthesis of Nucleosides through Direct Glycosylation of Nucleobases with 5-O-Monoprotected or 5-Modified Ribose: Improved Protocol, Scope, and Mechanism / A.M. Downey et al. // Chem. Eur. J. - 2017. -V. 23. - P. 3910-3917;

92.Merbouh, N. Preparation of tetramethylpiperidine-1-oxoammonium salts and their use as oxidants in organic chemistry. A review / N. Merbouh, J.M. Bobbitt, C. Bruckner // Organic Preparations And Procedures Int. - 2004. - V.36. - P. 1-31;

93.Use of Silver Carbonate in the Wittig Reaction / L. Jedinak et al. // J. Org. Chem. - 2013. - V. 78. - P. 12224-12228.