Синтез и исследование свойств кватернизированных производных хитозана, получение наночастиц серебра на основе новых производных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Луньков Алексей Павлович

• Луньков Алексей Павлович
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Луньков Алексей Павлович

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений и условные обозначения

Глава 1. Введение

1.1 Актуальность исследования и степень разработанности тематики

1.2 Цели и задачи исследования

1.3 Научная новизна исследования

1.4 Теоретическая и практическая значимость работы

1.5 Методология и методы исследования

1.6 Положения, выносимые на защиту

1.7 Личный вклад автора в проведение исследования

1.8 Степень достоверности

1.9 Апробация работы

1.10 Публикации

1.11 Связь работы с государственными программами

1.12 Объём и структура диссертации

Глава 2. Литературный обзор

1. Хитозан: общие положения

2. Химическая модификация хитозана

2.1 Синтез кватернизированных производных хитозана

2.1.1 Прямое алкилирование аминогрупп хитозана

2.1.2. Восстановительное алкилирование хитозана

2.1.3 Взаимодействие с эпоксидами и их производными

2.1.4 Клик-реакции различных производных хитозана

3. Биологическая активность кватернизированных производных хитозана

3.1 Антибактериальная и фунгицидная активность производных

4. Использование полисахаридов и их производных для модификация неорганических НЧ

4.1 Физико-химические свойства НЧ

4.2 Синтез НЧ в присутствии полисахаридов

4.2.1 Синтез H4Ag с использованием хитозана и его производных

Глава 3. Основная часть

1. Материалы и методы

2. Получение и характеристика образцов низкомолекулярного хитозана

3. Синтез и изучение свойств катионных производных хитозана

3.1 Синтез низкомолекулярных веществ

3.1.1 Синтез 2-(азидометил)оксирана (АМО)

3.1.2 Синтез 4-формил-К,К,К-триметилбензенамминий йодид (ТМБ)

3.1.3 Синтез (К,К,К-триэтиламмоний)пропаргил бромида

3.1.4 Синтез (К,К,К-триметиламмоний)пропаргил бромида

3.1.5. Синтез 1-пропаргил-3-метилимидазолий бромида

3.2 Синтез производных хитозана

3.2.1 Синтез К-[(2-гидрокси-3-триметиламмоний)пропил]хитозан хлорида (ГТМХ)

3.2.2 Синтез К,К,К-триметил хитозан хлорида (ТМХ)

3.2.3 Синтез К-[(2-гидроксипропил)-3-азидо]хитозана (АзХ)

3.2.4. Синтез К-[4-(К,К,К-триметиламмоний)бензил]хитозан хлорида (ТМБХ)

3.2.5 Синтез К-[(2-гидроксипропил-1,2,3-триазол-4-ил)-Ы,К,К-

триметилметанаммоний]хитозан хлорида, К-[(2-гидроксипропил-1,2,3-

триазол-4-ил)-^^^триэтилметанаммоний]хитозан хлорида и N-[((2-гидроксипропил-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-1-метилимидазол]хитозан хлорида (ГТТМ, ГТТЭ и ГТМИ)

3.3 Характеристика производных хитозана

3.3.1 Определение степени замещения ГТМХ, ТМХ, АзХ, ГТТЭ, ГТТМ и ГТМИ

3.3.2 Зависимость растворимости производных хитозана от pH

3.3.3 Определение степени замещения производных хитозана ГТМХ

3.3.4 Изучение антибактериальной активности производных хитозана

3.3.5. Изучение влияния производных на метаболическую активность F. oxysporum (МТТ)

3.3.6 Растворимость ГТМХ производных в воде

3.3.7 Определение заряда ГТМХ производных

3.3.8 Определение характеристической вязкости ГТМХ производных

3.3.9 Ферментативная деградация ГТМХ производных

3.3.10 Изучение фунгицидной активности ГТМХ производных

3.3.11 Хелатирующая активность ГТМХ производных в отношении ионов Fe2+

3.3.12 Влияние ГТМХ производных на гемолиз эритроцитов

4. Синтез и изучение свойства ГТМХ производных хитозана с галловой кислотой (ГТМХ-ГК)

4.1 Синтез кватернизированного хитозана с галловой кислотой (ГТМХ-ГК)

4.2 Ингибирующая активность ГТМХ-ГК производных в отношении ДФПГ (1,1-дифенил-2-пикрилгидразил) радикалов

4.3 Хелатирующая активность ГТМХ производных в отношении ионов Fe2+

5. Синтез OTAg в среде ГТМХ-ГК

5.1 Характеристика НЧAg

5.2 Изучение антибактериальной активности НЧAg

5.3 Изучение цитотоксичности НЧ

5.4 Изучение влияния НЧAg на компоненты крови

6. Обсуждение результатов

6.1 Получение и характеристика образцов низкомолекулярного хитозана

6.2 Синтез и изучение свойств катионных производных хитозана

6.2.1. Синтез ГТМХ производных хитозана

6.2.2 Синтез ТМХ производных хитозана

6.2.3 Синтез АзХ производных хитозана

6.2.4 Синтез ТМБХ производных хитозана

6.2.5 Синтез ГТТЭ, ГТТМ и ГТМИ производных хитозана

6.2.6 Характеристика растворимости производных хитозана (ГТМХ, ТМХ, АзХ, ТМБХ, ГТТЭ, ГТТМ, ГТМИ)

6.2.7 Характеристика антибактериальной активности производных хитозана (ГТМХ, ТМХ, АзХ, ТМБХ, ГТТЭ, ГТТМ, ГТМИ)

6.2.8 Влияние производных на метаболическую активность F. Oxysporum . 91 6.2.9. Заключение к пункту

6.3 Изучение свойств и оптимизация условий синтеза ГТМХ производных хитозана

6.3.1 Оптимизация условий синтеза ГТМХ производных хитозана

6.3.2 Изучение растворимости ГТМХ производных хитозана

6.3.3 Определение характеристической вязкости ГТМХ

6.3.4 Определение хелатирующей активности ГТМХ

6.3.5 Ферментативная деградация ГТМХ производных

6.3.6 Изучение фунгицидной активности ГТМХ

6.3.7 Влияние ГТМХ на компоненты крови

6.4 Синтез и изучение свойств ГТМХ-ГК производных хитозана

6.4.1 Синтез ГТМХ-ГК производных хитозана

6.4.2 Ингибирующая активность ГТМХ-ГК производных в отношении ДФПГ (1,1-дифенил-2-пикрилгидразил) радикалов

6.4.3 Хелатирующая активность ГТМХ-ГК производных в отношении ионов Fe2+

6.5 Синтез НЧ серебра (OTAg) в среде ГТМХ-ГК

6.5.1 Антибактериальная активность НЧAg

6.5.2 Изучение цитотоксичности НЧAg

6.5.3 Изучение размерных характеристик НЧAg методом АСМ

6.5.4 Изучение гемосовместимости НЧAg

Выводы

Заключение

Благодарности

Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез и исследование свойств кватернизированных производных хитозана, получение наночастиц серебра на основе новых производных»

Глава 1. Введение

1.1 Актуальность исследования и степень разработанности тематики

В настоящее время наблюдается значительный рост и развитие такой дисциплины, как биотехнология. В классическом представлении биотехнология подразумевает культивирование микроорганизмов с целью получения полезных для человека продуктов. Однако в последние десятилетия данное понятие значительно расширилось и включает в себя области, затрагивающие в том числе бионанотехнологии и биомедицину. В настоящее время значительно развивается ряд технологий наномедицинской отрасли. К ним относятся адресная доставка биологически активных веществ, а также создание новых бактерицидных средств. Инфекции, вызванные микроорганизмами, а именно грамположительными и грамотрицательными бактериями, вирусами, грибками, являются одной из основных проблем в клинической практике, фармацевтической и пищевой отрасли [1-3]. Повсеместный рост резистентности микроорганизмов является естественным биологическим ответом на неконтролируемое использование антимикробных препаратов. Основой для наномедицинских технологий часто выступают различные биополимеры. Среди них особо выделяются хитин и хитозан. Данные биополимеры представляют собой полисахаридные структуры, получаемые из природных источников, тоесть со значительно меньшими затратами нефтехимического сырья в отличие от синтетических полимерных продуктов. Подход с использованием дальнейшей химической модификации даёт значительную гибкость в получении структур, которые невозможно или затруднительно синтезировать в живых системах. Стоит отметить, что помимо стандартных подходов органической химии в последнее время всё чаще используют клик-химию для получения новых полисахаридных структур на основе хитозана [4]. Среди реакций клик-химии катализируемое медью азид-алкиновое циклоприсоединение (СиААС), часто относят к «зелёной» химии, поскольку реакция может протекать в водных растворах, характеризуется низкими затратами

энергии, высокой эффективностью (минимальное количество побочных продуктов, экономия атомов) [5].

Наноматериалы на основе хитозана, его производных и наночастиц (НЧ) металлов, рассматриваются в качестве антимикробных, фунгицидных, противовирусных агентов и таким образом, могут использоваться для решения перечисленных выше проблем, объединяя потенциал производных полисахарида и неорганических НЧ для создания наноразмерных биологически активных систем. Хитозан обладает важными свойствами, такими как биодеградируемость, биосовместимость, низкая токсичность. В связи с комплексным, в отличие от классических антибиотиков, механизмом антибактериального действия хитозана и его производных, развитие специфической резистентности бактерий является маловероятным [6,7]. Помимо доставки биологически активных веществ и создания бактерицидных средств хитозан и его производные также широко исследуются в таких направлениях, как тканевая инженерия, доставка генетического материала, доставка ферментов, инкапсуляция клеток, ранозаживление [8].

Таким образом, исследования в области синтеза новых производных хитозана, создания биологически активных систем с антимикробными свойствами на основе хитозана, его производных и НЧ металлов, в частности серебра, представляют собой актуальную задачу.

1.2 Цели и задачи исследования

Цель исследования - синтез и изучение свойств катионных производных низкомолекулярного хитозана, анализ взаимосвязи структура-активность. Поиск путей эффективного синтеза новых катионных производных хитозана с использованием клик-химии. Создание биологически активных нанодисперсных систем на основе хитозана, его катионных производных и наночастиц серебра (НЧAg). Для достижения этих целей были поставлены задачи:

1. Изучить процесс азотнокислого гидролиза хитозана, охарактеризовать полученные фракции низкомолекулярного хитозана (НМХ) методами высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), ядерного магнитного резонанса (1Н ЯМР);

2. Синтезировать и охарактеризовать ряд К-замещённых производных хитозана с различными степенями замещения (СЗ). Определить структуру (^ ЯМР) и основные характеристики производных;

3. Исследовать физико-химические и биологические свойства ряда катионных производных хитозана: растворимость, антимикробную активность;

4. Оптимизировать условия синтеза наиболее перспективных катионных производных;

5. Синтезировать и охарактеризовать производные с галловой кислотой (ГК) на основе НМХ. Определить структуру и основные характеристики производных методами 1Н ЯМР, ИК;

6. Изучить физико-химические и биологические свойства катионных производных: растворимость, хелатирующую, антибактериальную, фунгицидную активность и гемосовместимость. Исследовать антиоксидантную активность производных с ГК в модельном эксперименте;

7. Синтезировать НЧAg в среде производных хитозана с ГК, охарактеризовать их методами УФ, трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ), атомно-силовой микроскопии (АСМ), динамического светорассеяния (ДСР), энергодисперсионной рентгеновской спектроскопии (ЭДС). Исследовать биологические свойства НЧAg: антибактериальную активность, цитотоксичность в отношении эукариотических клеточных линий и влияние на основные компоненты крови.

1.3 Научная новизна исследования

Научная новизна представленного исследования заключается в следующем:

• Проведён анализ взаимосвязи структура-активность ряда N замещённых катионных производных хитозана;

• Впервые рассмотрено взаимодействие хитозана с 2-(азидометил)оксираном, показана возможность проведения реакции азид-алкинового циклоприсоединения азидных производных с использованием каталитической системы Си0/АсОН под действием ультразвука (УЗ). Были наглядно продемонстрированы преимущества предложенного метода;

• В результате клик-реакции синтезированы новые катионные производные хитозана, содержащие 1,2,3-триазольный фрагмент;

• Оптимизированы условия получения катионного производного хитозана К-[(2-гидроксипропил)-3-триметиламмоний]хитозан хлорида;

• Изучены новые бифункциональные производные природного полимера, имеющие две ковалентно связанные функциональные группы, обуславливающие наличие антимикробной, восстановительной и хелатирующей активностей;

• Катионные бифункциональные производные хитозана использовались в качестве среды для синтеза НЧAg, характеризующихся высокой стабильностью и проявляющих биологическую активность.

1.4 Теоретическая и практическая значимость работы

Теоретическая значимость исследования заключается в установлении взаимосвязи структурных характеристик катионных производных хитозана с проявляемой биологической активностью. Рассмотрены новые катионные производные хитозана, представлен усовершенствованный протокол для получения «клик-производных», который может использоваться для простого и эффективного синтеза ряда новых гомологичных полисахаридных структур.

Установленные в ходе работы закономерности позволят сформулировать требования к производным биополимеров, которые могут использоваться для создания устойчивых поликатионных хелатирующих комплексов с НЧ металлов. Получен патент Российской Федерации: №2701914.

1.5 Методология и методы исследования

В рамках данной работы были использованы следующие методы и подходы: классические методы органической химии - спектральные методы анализа: ЯМР, 2Д ЯМР, ИК, масс-спектрометрия (МС). Для определения молекулярно-массовых характеристик хитозана использовали хроматографические методы анализа (ВЭЖХ). Методы клеточной биологии (определение цитотоксичности, антимикробной активности), физико-химические методы анализа НЧ (АСМ, ДСР, ТЭМ, ЭДС).

1.6 Положения, выносимые на защиту

1. Азотнокислый гидролиз хитозана может быть использован для получения НМХ с молекулярной массой (ММ) до 14 кДа (ВЭЖХ);

2. Биологическая активность (антимикробная) в случае К-замещённых кватернизированных производных хитозана в значительной степени определяется структурой заместителя. Рост степени замещения (СЗ) может иметь как положительный, так и отрицательный эффект на антимикробную активность. При этом увеличение СЗ ведёт к однозначному росту растворимости соединений;

3. Реакция азид-алкинового циклоприсоединения под действием УЗ в присутствии уксусной кислоты и металлической меди может быть использована для эффективного синтеза новых катионных производных хитозана. Продукт реакции характеризуется низким содержанием остаточной меди;

4. Исчерпывающая степень К-замещения хитозана (93%) в процессе синтеза ^[(2-гидрокси-3-триметиламмоний)пропил]хитозан хлорида (ГТМХ) достигается спустя 3 часа при 85°С;

5. Введение галловой кислоты в структуру ГТМХ позволяет значительно повысить антиоксидантную и хелатирующую активность катионных производных;

6. Синтез наночастиц серебра (H4Ag) в среде кватернизированных производных с ковалентно связанной галловой кислотой обеспечивает снижение токсичности НЧ в отношении эукариотических клеточных линий (кератиноцитов HaCaT и гепатокарциномы Colo 357).

1.7 Личный вклад автора в проведение исследования

Экспериментальные результаты, представленные в диссертации, получены лично автором или при его непосредственном участии на всех этапах работы. Соискатель самостоятельно определил цели и задачи, составил план работы, принимал активное участие в проведении исследований и анализе полученных результатов. Автором была проведена значительная работа над текстом статей, а также представление их в редакции журналов, переписка с редакторами и рецензентами. В работах, опубликованных в соавторстве, основополагающий вклад принадлежит автору. На защиту вынесены только те положения и результаты экспериментов, в получении которых роль соискателя была определяющей.

1.8 Степень достоверности

Достоверность представленных в диссертационной работе данных определяется использованием современных физико-химических методов анализа. Все эксперименты проводили на сертифицированном оборудовании в трех и более независимых повторностях

1.9 Апробация работы

Материалы работы были представлены на «XXIX Зимней молодежной научной школы перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии» (Москва, 2017), XIV Международной конференция «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Севастополь, 2018), «XXXI Зимней молодежной научной школе перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии» (Москва, 2019), Пятнадцатой

Конференции Польского Хитинового Общества: «Новые аспекты в химии и применении хитина и его производных» (XXV Conference if Polish Chitin Society «New Aspects in chemistry and application of chitin and its derivatives») (Торунь, 2019), Пятнадцатой Общероссийской конференции с международным участием «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Архангельск, 2021). Работа была удостоена премии им. П.П. Шорыгина в 2020 году за лучшие разработки в области хитинологии.

1.10 Публикации

Основные результаты работы опубликованы в 12 статьях в рецензируемых научных изданиях, индексируемых в базах данных Web of Science, Scopus, в 2 статьях в изданиях, индексируемых в базах данных РИНЦ, 7 публикациях в сборниках материалов и тезисов докладов конференций, получен 1 патент РФ.

1.11 Связь работы с государственными программами

Работа выполнена при поддержке РФФИ (проект №19-33-90011 «Аспиранты»).

1.12 Объём и структура диссертации

Материалы диссертации изложены на 135 страницах машинописного текста, включают 56 рисунков и 6 таблиц. Диссертация содержит разделы: Введение, Литературный обзор, Материалы и методы, Результаты и их обсуждение, Выводы, Заключение и Список литературы, включающий 115 наименований.

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Луньков Алексей Павлович

Выводы

1. Показано, что азотнокислый гидролиз высокомолекулярного хитозана ММ 1040 кДа, СД 86% может быть использован для получения низкомолекулярного хитозана с ММ до 14 кДа, СД 98%;

2. В ряду различных катионных производных хитозана на основе низкомолекулярного хитозана (ТМХ, ГТМХ, АзХ, ТМБА, ГТТЭ, ГТТМ, ГТМИ) (ММ 28 кДа, СД 93%.) с различными СЗ, только в случае ГТМХ рост СЗ вёл к росту активности конечного соединения;

3. Производные хитозана, содержащие азидную функциональную группу (АзХ), были успешно модифицированы с использованием клик-химии, в частности реакции азид-алкинового [3+2] циклоприсоединения под действием ультразвука в присутствии металлической меди. Введение различных катионных функциональных групп в результате клик-реакции обеспечивает рост антибактериальной активности высокомолекулярного соединения (ГТТЭ, ГТТМ, ГТМИ);

4. Достижение исчерпывающей степени замещения в процессе синтеза ГТМХ происходит спустя 3 часа в водной среде при 85°С;

5. Увеличение количества четвертичных аммониевых групп в цепи полимера ведёт к росту растворимости производных. Кватернизированные производные ГТМХ в крови в интервале концентраций 1 -10 мкг/мл не вызывают гемолиз эритроцитов;

6. Введение галловой кислоты в структуру ГТМХ в результате синтеза ГТМХ-ГК значительно повышает хелатирующую и антиоксидантную активность соединения (в 40 раз);

7. Восстановление Ag+1 в процессе синтеза НЧAg в растворе производного хитозана ГТМХ-ГК обеспечивает формирование положительно заряженных НЧAg с низкой цитотоксичностью;

9. Показана гемосовместимость низкотоксичных НЧAg на основе ГТМХ-ГК, которые в концентрации до 9 мкг/мл не влияли на основные компоненты крови, а также не влияли на агрегацию тромбоцитов, индуцированную раствором АДФ.

Заключение

В представленной работе были рассмотрены следующие аспекты:

1. Азотнокислый гидролиз высокомолекулярного хитозана

2. Синтез и изучение свойств кватернизрованных производных хитозана

3. Синтез клик-производных хитозана

4. Синтез НЧAg с использованием ГТМХ-ГК и изучение их характеристик

На основе полученного в результате азотнокислого гидролиза НМХ

синтезирован ряд водорастворимых кватернизированных производных.

Рассмотрены закономерности изменения их физико-химических, биологических

свойств и степени замещения. Показано, что рост степени замещения не всегда

коррелирует с ростом биологической активности конечного производного.

Синтезированы новые, не описанные ранее катионные водорастворимые

производные хитозана: ГТТЭ, ГТТМ и ГТТИ в результате азид-алкинового [3+2]

циклоприсоединения. Показано, что «клик-модификация» хитозана может

осуществляться в простой каталитической системе под действием ультразвука.

Продемонстрированы преимущества предложенного подхода. Показано, что

кватернизированные ГТМХ производные обладают высокой растворимостью и

хелатирующей способностью. Впервые синтезировано производное ГТМХ-ГК,

содержащее как четвертичную аммониевую группу, так и ковалентно связанную

галловую кислоту. Показано, что новое производное обладает повышенной

хелатирующей и антиоксидантной активностью. Представлен подход с

использованием нового производного хитозана в качестве матрицы для синтеза

НЧAg, проявляющих низкие цитотоксические свойства в отношении

эукариотических клеточных линий. Показано, что полученные НЧ устойчивы и не

изменяют своих свойств в течение длительного времени.Сравнение НЧAg,

синтезированных с помощью различных производных НМХ с ГК, показало, что

наличие четвертичных аммониевых групп играет ключевую роль в проявляемых

122

цитотоксических свойствах. Полученные результаты могут быть использованы в дальнейшем для создания устойчивых поликатионных хелатирующих комплексов с НЧ металлов на основе биополимеров. Особенности и закономерности процесса формирования НЧAg на основе хитозана и его производных, влияние молекулярно-массовых характеристик на свойства наноматериала, требуют дальнейшего изучения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Луньков Алексей Павлович, 2022 год

Список литературы

1. Cheung R.C.F., Ng T.B., Wong J.H, Chan W.Y. Chitosan: An update on potential biomedical and pharmaceutical applications // Marine Drugs. 2015. Vol. 13, № 8. P. 5156-5186.

2. Hamed I., Ozogul F., Regenstein J.M. Industrial applications of crustacean byproducts (chitin, chitosan, and chitooligosaccharides): A review // Trends Food Sci. Technol. 2016. Vol. 48. P. 40-50.

3. Kong M., Cheng X.G., Xing K., Park H.J. Antimicrobial properties of chitosan and mode of action: A state of the art review // Int. J. Food Microbiol. 2010. Vol. 144, № 1. P. 51-63.

4. Kritchenkov A.S., Skorik Y.A. Click reactions in chitosan chemistry // Russ. Chem. Bull. 2017. Vol. 66, № 5. P. 769-781.

5. Trujillo M., Hull-Crew C., Outlaw A., Stewart K., Taylor L., George L., Duensing A., Tracey B., Schoffstall A. Green methodologies for copper(I)-catalyzed azide-alkyne cycloadditions: A comparative study. Molecules. 2019. Vol. 24, P. 1-12.

6. Ma Z., Kim.D, Adesogan A.T., Ko S., Galvao K., Jeong K.C. Chitosan Microparticles Exert Broad-Spectrum Antimicrobial Activity against Antibiotic-Resistant Micro-organisms without Increasing Resistance // ACS Appl. Mater. Interfaces. 2016. Vol. 8, № 17. P. 10700-10709.

7. Li J., Zhuang S. Antibacterial activity of chitosan and its derivatives and their interaction mechanism with bacteria: Current state and perspectives // Eur. Polym. J. 2020. Vol. 138, № September. P. 109984.

8. Narmani A., Jafari S.M. Chitosan-based nanodelivery systems for cancer therapy: Recent advances // Carbohydr. Polym. 2021. Vol. 272, № July. P. 118464.

9. Ahsan S.M., Thomas M., Reddy K.K. Chitosan as biomaterial in drug delivery and tissue engineering // Int. J. Biol. Macromol. 2017. P. 97-109.

10. Хитин и хитозан: природа, получение и применение / Pastor A.A. (перевод с испанского) под ред. Варламов В.П., Немцев С.В., Тихонов В.Е., Российское хитиновое общество, 2009. 292 С.

11. Хитозан/под ред. Скрябин К.Г., Михайлов С.Н., Варламов В.П. Центр "Биоинженерия" РАН, 2013. 593 С.

12. Jiang T., James R., Kumbar S.G., Laurencin C.T. Chitosan as a Biomaterial: Structure, Properties, and Applications in Tissue Engineering and Drug Delivery // Natural and Synthetic Biomedical Polymers. 1st ed. 2014. P. 91-113.

13. Choi C., Nam J.P., Nah J.W. Application of chitosan and chitosan derivatives as biomaterials // J. Ind. Eng. Chem. The Korean Society of Industrial and Engineering Chemistry, 2015. P. 1-10.

14. Stefan J., Lorkowska-zawicka B., Kaminski K., Szczubialka K., Nowakowska M., Korbut R. The current view on biological potency of cationically modified chitosan. J Phys. Pharm. 2014. № 21. P. 341-347.

15. Ahmed S., Ahmad M., Ikram S. Chitosan: A Natural Antimicrobial Agent-A Review // J. Appl. Chem. 2014. Vol. 3, № 2. P. 493-503.

16. Badawy M.E.I. Structure and antimicrobial activity relationship of quaternary N-alkyl chitosan derivatives against some plant pathogens // J. Appl. Polym. Sci. 2010. Vol. 117, № 2. P. 960-969.

17. Wang W., Xue C., Mao X. Chitosan: Structural modification, biological activity and application // Int. J. Biol. Macromol. , 2020. Vol. 164. P. 4532-4546.

18. Kritchenkov A.S., Egorov A.R., Artemjev A.A., Kritchenkov I.S., Volkova O.V., Kurliuk A.V., Shakola T.V., Rubanik V.V., Rubanik V.V., Tskhovrebov A.G., Yagafarov N.Z., Khrustalev V.N. Ultrasound-assisted catalyst-free thiol-yne click reaction in chitosan chemistry: Antibacterial and transfection activity of novel cationic chitosan derivatives and their based nanoparticles // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 143. P. 143-152.

19. Kritchenkov A.S., Egorov A.R., Dysin A.P., Volkova O.V., Zabodalova L.A., Suchkova E.P., Kurliuk A.V, Shakola T.V. Ultrasound-assisted Cu(I)-catalyzed azide-alkyne click cycloaddition as polymer-analogous transformation in chitosan chemistry. High antibacterial and transfection activity of novel triazol betaine chitosan derivatives and their nanoparticles // Int. J. Biol. Macromol. 2019. Vol. 137. P. 592-603.

20. Domard A., Rinaudo M., Terrassin C. New method for the quaternization of chitosan // Int. J. Biol. Macromol. 1986. Vol. 8, № 2. P. 105-107.

21. de Britto D., Assis O.B.G. A novel method for obtaining a quaternary salt of chitosan // Carbohydr. Polym. 2007. Vol. 69, № 2. P. 305-310.

22. Rathinam S., Olafsdôttir S., Jônsdôttir S., Hjâlmarsdôttir M.A., Mâsson M. Selective synthesis of N,N,N-trimethylated chitosan derivatives at different degree of

substitution and investigation of structure-activity relationship for activity against P. aeruginosa and MRSA // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 160. P. 548-557.

23. Muzzarelli R.A.A., Tanfani F. The N-permethylation of chitosan and the preparation of N-trimethyl chitosan iodide // Carbohydr. Polym. 1985. Vol. 5, № 4. P. 297-307.

24. Kowapradit J., Opanasopit P., Ngawhiranpat T., Apirakaramwong A., Rojanarata T., Ruktanonchai U., Sajomsang W. Methylated N-(4-N,N-dimethylaminobenzyl) chitosan, a novel chitosan derivative, enhances paracellular permeability across intestinal epithelial cells (Caco-2) // AAPS PharmSciTech. 2008. Vol. 9, № 4. P. 1143-1152.

25. Raik S.V., Poshina D.N., Lyalina T.A., Polyakov D.S., Vasilyev V.B., Kritchenkov A.S., Skorik Y.A. N-[4-(N,N,N-trimethylammonium)benzyl]chitosan chloride: Synthesis, interaction with DNA and evaluation of transfection efficiency // Carbohydr. Polym. 2018. Vol. 181. P. 693-700.

26. Wei L., Li Q., Tan W., Dong F., Luan F., Guo Z. Synthesis, Characterization, and the Antioxidant Activity of Double Quaternized Chitosan Derivatives // Molecules., 2017. Vol. 22, № 3. P. 501.

27. Nam C.W., Kim Y.H., Ko S.W. Modification of polyacrylonitrile (PAN) fiber by blending with N-(2-hydroxy)propyl-3-trimethyl-ammonium chitosan chloride // J. Appl. Polym. Sci. 1999. Vol. 74, № 9. P. 2258-2265.

28. Lim S.H., Hudson S.M. Synthesis and antimicrobial activity of a water-soluble chitosan derivative with a fiber-reactive group // Carbohydr. Res. 2004. Vol. 339, № 2. P. 313-319.

29. Xiao B., Wan Y., Wang X., Zha Q., Liu H., Qiu Z., Zhang S. Synthesis and characterization of N-(2-hydroxy)propyl-3-trimethyl ammonium chitosan chloride for potential application in gene delivery. // Colloids Surf. B. Biointerfaces. 2012. Vol. 91, № 1. P. 168-174.

30. Gruskiene R., Deveikyte R., Makuska R. Quaternization of chitosan and partial destruction of the quaternized derivatives making them suitable for electrospinning // Chemija. 2013. Vol. 24, № 4. P. 325-334.

31. Santos D.M. Dos, Bukzem A.D.L., Campana-Filho S.P. Response surface methodology applied to the study of the microwave-assisted synthesis of quaternized chitosan // Carbohydr. Polym. 2016. Vol. 138. P. 317-326.

32. Haldón E., Nicasio M.C., Pérez P.J. Copper-catalysed azide-alkyne cycloadditions (CuAAC): An update // Org. Biomol. Chem. 2015. Vol. 13, № 37. P. 9528-9550.

33. Tashakkorian H., Hasantabar V., Mostfazadeh A., Golpour M. Transparent chitosan based nanobiocomposite hydrogel: Synthesis, thermophysical characterization, cell adhesion and viability assay // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 144. P. 715-724.

34. Tan W., Zhang J., Mi Y., Dong F., Li Q., Guo Z. Enhanced antifungal activity of novel cationic chitosan derivative bearing triphenylphosphonium salt via azide-alkyne click reaction // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 165. P. 1765-1772.

35. Tan H., Ma R., Lin C., Liu Z., Tang T. Quaternized chitosan as an antimicrobial agent: Antimicrobial activity, mechanism of action and biomedical applications in orthopedics // Int. J. Mol. Sci. 2013. Vol. 14, № 1. P. 1854-1869.

36. Sadeghi A.M.M., Amini M., Avadi M.R., Siedi F., Rafle-Tehrani M., Junginger H.E. Synthesis, Characterization, and Antibacterial Effects of Trimethylated and Triethylated 6-NH2-6-Deoxy Chitosan // J. Bioact. Compat. Polym. 2008. Vol. 23, № May 2008. P. 262-275.

37. Sajomsang W., Tantayanon S., Tangusuthadol V., Daly W. Quaternization of N-aryl chitosan derivatives: synthesis, characterization, and antibacterial activity // Carbohydr. Res. 2009. Vol. 344, № 18. P. 2502-2511.

38. Vidar O., Holappa J., Malainer C., Steisson H., Hjalmarsdottir M., Nevalainen T., Masson M. Antibacterial activity of N-quaternary chitosan derivatives: Synthesis, characterization and structure activity relationship (SAR) investigations // Eur. Polym. J. 2010. Vol. 46, № 6. P. 1251-1267.

39. Xu T., Xin M., Li M., Huang H., Zhou S., Liu J. Synthesis, characterization, and antibacterial activity of N,O-quaternary ammonium chitosan // Carbohydr. Res. 2011. Vol. 346, № 15. P. 2445-2450.

40. Badawy M.E.I., Rabea E.I., Taktak N.E.M. Antimicrobial and inhibitory enzyme activity of N-(benzyl) and quaternary N-(benzyl) chitosan derivatives on plant pathogens // Carbohydr. Polym. 2014. Vol. 111. P. 670-682.

41. Jia Z., Shen D., Xu W. Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan // Carbohydr. Res. 2001. Vol. 333(1), P. 1-6.

42. Rathinam S., Olafsdottir S., Jonsdottir S., Hjalmarsdottir M.A, Masson M. The antibacterial structure-activity relationship for common chitosan derivatives // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 165. P. 1686-1693.

43. Jamkhande P.G., Ghule N.W., Bamer A.H., Kalaskar M.G. Metal nanoparticles synthesis: An overview on methods of preparation, advantages and disadvantages, and applications // J. Drug Deliv. Sci. Technol. 2019. Vol. 53, № July. P. 101174.

44. Gold K., Slay B., Knacksted M., Gaharwar A.K. Antimicrobial Activity of Metal and Metal-Oxide Based Nanoparticles // Adv. Ther. 2018. Vol. 1, № 3. P. 1700033.

45. Abd Elrahman A.A., Mansour F.R. Targeted magnetic iron oxide nanoparticles: Preparation, functionalization and biomedical application // J. Drug Deliv. Sci. Technol. 2019. Vol. 52, № January. P. 702-712.

46. Marassi V., Di Cristo L., Smith S.G.J., Ortelli S., Blosi M., Costa A.L., Reschiglian P., Volkov Y., Prina-Mello A. Silver nanoparticles as a medical device in healthcare settings: A five-step approach for candidate screening of coating agents // R. Soc. Open Sci. 2018. Vol. 5, № 1.

47. Liu L., Hao Y., Deng D., Xia N. Nanomaterials-based colorimetric immunoassays // Nanomaterials. 2019. Vol. 9, № 3.

48. Eaton P., Doria G., Pereira E., Baptista P.V., Franco R. Imaging gold nanoparticles for DNA sequence recognition in biomedical applications // IEEE Trans. Nanobioscience. 2007. Vol. 6, № 4. P. 282-288.

49. Фролов Г.Ю. Поверхностные явления и дисперсные системы. Учебник для вузов. Москва: Химия, 1989. - 464 с.

50. Сергеев Г.Б. Нанохимия. Москва: изд-во МГУ, 2003. - 288 с.

51. Mohan T. Maver T., StiglicfA.D., Stana-Kleinschek K., Kargl R. 3D bioprinting of polysaccharides and their derivatives: From characterization to application // Fundamental Biomaterials: Polymers. 2018. P. 105-141.

52. Swierczewska M., Han H.S., Kim K., Park J.H., Lee S. Polysaccharide-based nanoparticles for theranostic nanomedicine // Adv. Drug Deliv. Rev. 2016. Vol. 99. P. 70-84.

53. Rai M., Ingle A.P., Birla S., Yadav A., Alves Dos Santos C. Strategic role of selected noble metal nanoparticles in medicine // Crit. Rev. Microbiol. Informa Healthcare USA, Inc, 2016. Vol. 42, № 5. P. 696-719.

54. Barui A.K., Das S., Patra C.R. Biomedical applications of green-synthesized metal nanoparticles using polysaccharides // Functional Polysaccharides for Biomedical Applications. 2019. 329-355 p.

55. Wei D., Sun W., Qian W., Ye Y., Ma X. The synthesis of chitosan-based silver nanoparticles and their antibacterial activity // Carbohydr. Res. 2009. Vol. 344, № 17. P. 2375-2382.

56. Long Y., Ran X., Zhang L., Guo Q., Yang T., Gao J, Cheng H, Cheng T., Shi C., Su Y. A method for the preparation of silver nanoparticles using commercially available carboxymethyl chitosan and sunlight // Mater. Lett. North-Holland, 2013. Vol. 112. P. 101-104.

57. Mathew T. V., Kuriakose S. Photochemical and antimicrobial properties of silver nanoparticle- encapsulated chitosan functionalized with photoactive groups // Mater. Sci. Eng. C. 2013. Vol. 33, № 7. P. 4409-4415.

58. Chen K., Shena Z., Luoa J., Wanga X., Suna R. Quaternized chitosan/silver nanoparticles composite as a SERS substrate for detecting tricyclazole and Sudan i // Appl. Surf. Sci. 2015. Vol. 351. P. 466-473.

59. Kumar-Krishnan S., Prokhorov E., Hernández-Iturriaga M., Mota-Morales J.D., Vázquez-Lepe M., Kovalenko Y., Sanchez I.C., Luna-Bárcenas G. Chitosan/silver nanocomposites: Synergistic antibacterial action of silver nanoparticles and silver ions // Eur. Polym. J. 2015. Vol. 67. P.242-251.

60. Huang X., Pang Y., Liu Y., Zhou Y., Wang Z., Hu Q. Green synthesis of silver nanoparticles with high antimicrobial activity and low cytotoxicity using catechol-conjugated chitosan // RSC Adv. Royal Society of Chemistry, 2016. Vol. 6, № 69. P. 64357-64363.

61. Soliman G.M., Zhang Y.L., Merle G., Cerruti M., Barralet J. Hydrocaffeic acid-chitosan nanoparticles with enhanced stability, mucoadhesion and permeation properties // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2014. Vol. 88, № 3. P. 1026-1037.

62. Raghavendra G.M., Jung J., Kim D., Varaprasad K., Seo J. Identification of silver cubic structures during ultrasonication of chitosan AgNO3 solution // Carbohydr. Polym. 2016. Vol. 152. P. 558-565.

63. Chang T.Y., Chena C.C., Chenga K.M., China C.Y., Chena Y.H., Chena X.A., Sunc J.R., Younga J.J., Chiueh T.S. Trimethyl chitosan-capped silver nanoparticles with positive surface charge: Their catalytic activity and antibacterial spectrum including multidrug-resistant strains of Acinetobacter baumannii // Colloids Surfaces B Biointerfaces. 2017. Vol. 155. P. 61-70.

64. Dananjaya S.H.S. Erandanib W.K.C.U., Kimb C.H., Nikapitiyac C., Leec J., De Zoysa M. Comparative study on antifungal activities of chitosan nanoparticles and chitosan silver nano composites against Fusarium oxysporum species complex // Int. J. Biol. Macromol. 2017. Vol. 105. P. 478-488.

65. Ma D., Tong Han T., Karimian M., Abbasi N., Ghaneialvar H., Zangeneh A. Immobilized Ag NPs on chitosan-biguanidine coated magnetic nanoparticles for

130

synthesis of propargylamines and treatment of human lung cancer // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 165. P. 767-775.

66. Elshaarawy R.F.M., Ismail L.A., Alfaifi M.Y., Rizk M.A., Eltamany E.E. Christoph Janiak Inhibitory activity of biofunctionalized silver-capped N-methylated water-soluble chitosan thiomer for microbial and biofilm infections // Int. J. Biol. Macromol. 2020. Vol. 152. P. 709-717.

67. Lyalina T., Zubareva A., Lopatin S., Zubov V., Sizova S., Svirshchevskaya E. Correlation Analysis of Chitosan Physicochemical Parameters Determined by Different Methods // Org. Med. Chem. 2017. Vol. 1, № 3. P. 1-9.

68. Gharakhanian E.G., Deming T.J. Versatile synthesis of stable, functional polypeptides via reaction with epoxides // Biomacromolecules. 2015. Vol. 16, № 6. P. 1802-1806.

69. Publication A. TRIMETHYLAMINE // Org. Synth. 1921. Vol. 1, № September. P. 75.

70. Rrnarsson O.V. Holappa J., Jonsdottir S., Steinsson H., Masson M. N-selective "one pot" synthesis of highly N-substituted trimethyl chitosan (TMC) // Carbohydr. Polym. 2008. Vol. 74, № 3. P. 740-744.

71. Qin C., Xiao Q., Li H., Fang M., Liu Y., Chenb X., Li Q. Calorimetric studies of the action of chitosan-N-2-hydroxypropyl trimethyl ammonium chloride on the growth of microorganisms // Int. J. Biol. Macromol. 2004. Vol. 34, № 1-2. P. 121-126.

72. Шагдарова Б.Ц., Дрозд Н.Н., Ильина А.В., Логвинова Ю.С., Варламов В.П. Нейтрализация антикоагулянтной активности гепарина ^[(2-Гидрокси-3-триметиламмоний)пропил]хлорид-производными хитозана // Прикладная биохимия и микробиология. 2016. Vol. 52, № 4. P. 421-428.

73. Shagdarova B. Lunkov A, Il'ina A., Varlamov V. Institute Investigation of the properties of N-[(2-hydroxy-3-trimethylammonium) propyl] chloride chitosan derivatives // Int. J. Biol. Macromol. 2019. Vol. 124. P. 994-1001.

74. Karpova N.V. Shagdarova B.Ts., Lyalina, T.S., Il'ina, A.V., Tereshina, V.M., Varlamov V.P. Influence of the Main Characteristics of Low Weight Chitosan on the Growth of the Plant Pathogenic Fungus Botrytis rinerea // Appl. Biochem. Microbiol. 2019. Vol. 55, № 4. P. 405-413.

75. Шагдарова Б.Ц. «Получение алкилированных и ацилированных производных хитозана и исследование их биологических свойств»: дисс. канд. биол. наук: 03.01.06. 2016. P. 134.

76. Verheul R.J., Amidi M., van Steenbergen M.J., van Riet E., Jiskoot W., Hennink W.E. Influence of the degree of acetylation on the enzymatic degradation and in vitro biological properties of trimethylated chitosans // Biomaterials. 2009. Vol. 30, № 18. P. 3129-3135.

77. Ильина А.В., Шагдарова Б.Ц., Луньков А.П., Куликов С.Н., Варламов В.П. Исследование антимикотической активности in vitro металлокомплексов кватернизированного производного хитозана с ионами меди, "Микробиология" // Микробиология. 2017. Vol. 80, № 5. P. 586-592.

78. Yen M.T., Yang J.H., Mau J.L. Antioxidant properties of chitosan from crab shells // Carbohydr. Polym. 2008. Vol. 74, № 4. P. 840-844.

79. Dash B.C., Rethore G., Monaghan M., Fitzgerald K., Gallagher W., Pandit A., The influence of size and charge of chitosan/polyglutamic acid hollow spheres on cellular internalization, viability and blood compatibility // Biomaterials. 2010. Vol. 31, № 32. P. 8188-8197.

80. Guo P., Andersonb J.D., Bozellb J.J., Zivanovica S. The effect of solvent composition on grafting gallic acid onto chitosan via carbodiimide // Carbohydr. Polym. 2016. Vol. 140. P. 171-180.

81. Луньков А.П., Б.Ц. Шагдарова, Ю.В. Жуйкова, А.В. Ильина, В.П. Варламов Свойства функциональных пленок на основе производного хитозана с галловой кислотой // Прикладная биохимия и микробиология. 2018. Vol. 54, № 5. P. 483-490.

82. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immunol. Methods. 1983. Vol. 65, № 1-2. P. 55-63.

83. Denuziere A. Ferrier D., Damour O., Domard A. Chitosan - chondroitin sulfate and chitosan - hyaluronate polyelectrolyte complexes: Biological properties // Biomaterials. 1998. Vol. 19, № 14. P. 1275-1285.

84. Born G.V.R. Aggregation of Blood Platelets by Adenosine Diphosphate and its Reversal // Nature. 1962. Vol. 194, № 4832. P. 927-929.

85. Дрозд Н.Н. Луньков А.П., Ильина А.В., Варламов В.П. Гемосовместимость в опытах in vitro наночастиц серебра на основе конъюгата кватернизированного хитозана с галловой кислотой // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2019. Vol. 158, № 10. P. 496-500.

86. Yue W., Yao P., Wei Y. Influence of ultraviolet-irradiated oxygen on depolymerization of chitosan // Polym. Degrad. Stab. 2009. Vol. 94, № 5. P. 851-858.

87. Holme H.K., Forosa H., Pettersena H., Dornisha M., Smidsrud O. Thermal depolymerization of chitosan chloride // Carbohydr. Polym. 2001. Vol. 46, № 3. P. 287294.

88. Vasil'eva T.M., Lopatin S.A., Varlamov V.P. Production of the low-molecular-weight chitin and chitosan forms in electron-beam plasma // High Energy Chem. 2016. Vol. 50, № 2. P. 150-154.

89. Kasaai M.R., Arul J., Charlet G. Fragmentation of chitosan by acids // Sci. World J. 2013. Vol. 2013.

90. Wang L.C., Wua H., Ji J., Xuea F., Liua R. Preparation, analysis and antioxidant evaluation of the controlled product of polysaccharide from Mactra veneriformis by mild acid hydrolysis // Carbohydr. Polym. 2016. Vol. 137. P. 709-718.

91. Salim E., Galais A., Trombotto S. 4-(Hexyloxy)aniline-linked chitooligosaccharide-2,5-anhydro-D-mannofuranose // Molbank. 2014. Vol. 2014, № 1. P. 1-4.

92. Pandit A., Khare L., Ganatra P., Jain R., Dandekar P. Intriguing role of novel ionic liquids in stochastic degradation of chitosan // Carbohydr. Polym. 2021. Vol. 260, № February. P. 117828.

93. Mourya V.K., Inamdar N.N., Choudhari Y.M. Chitooligosaccharides: Synthesis, characterization and applications. 2011. Vol. 53, № 7. P. 583-612.

94. Kritchenkov A.S., Egorov A.R., Kurasova M.N., Volkova O.V., Meledina T.V., Lipkan N.A., Tskhovrebovd A.G., Kurliuke A.V., Shakolae T.V., Dysin A.P., Egorov M.Yu., Savicheva E.A., dos Santosc W.M. Novel non-toxic high efficient antibacterial azido chitosan derivatives with potential application in food coatings // Food Chem. 2019. Vol. 301, № July. P. 125247.

95. Ryu H.J., Mahapatra S.S., Yadav S.K, Cho J.W. Synthesis of click-coupled graphene sheet with chitosan: Effective exfoliation and enhanced properties of their nanocomposites // Eur. Polym. J. Pergamon, 2013. Vol. 49, № 9. P. 2627-2634.

96. Boopathi S.K., Hadjichristidis N., Gnanou Y., Feng X. Direct access to poly(glycidyl azide) and its copolymers through anionic (co-)polymerization of glycidyl azide // Nat. Commun. 2019. Vol. 10, № 1. P. 1-9.

97. Raik S.V, Mashel T.V., Muslimov A.R., Epifanovskaya O.S., Trofimov M.A., Poshina D.N., Lepik K.V., Skorik Yu.A. N-[4-(N,N,N-trimethylammonium)benzyl]chitosan chloride as a gene carrier: The influence of polyplex composition and cell type // Materials (Basel). 2021. Vol. 14, № 9. P. 2467.

98. Kuang G.C., Michaels H.A., Simmons J.T., Clark R.J., Zhu L. Chelation-assisted, copper(II)-acetate-accelerated azide-alkyne cycloaddition // J. Org. Chem. 2010. Vol. 75, № 19. P. 6540-6548.

99. Sarode P.B., Bahekar S.P., Chandak H.S. DABCO/AcOH Jointly Accelerated Copper(I)-Catalysed Cycloaddition of Azides and Alkynes on Water at Room Temperature // Synlett. 2016. Vol. 27, № 19. P. 2681-2684.

100. Rostovtsev V.V., Green L.G., Fokin V.V., Sharpless K.B. A stepwise huisgen cycloaddition process: Copper(I)-catalyzed regioselective "ligation" of azides and terminal alkynes // Angew. Chemie - Int. Ed. 2002. Vol. 41, № 14. P. 2596-2599.

101. Wu T., Zivanovic S., Douglas G. Hayes D.G., Weiss J. Efficient reduction of chitosan molecular weight by high-intensity ultrasound: Underlying mechanism and effect of process parameters // J. Agric. Food Chem. 2008. Vol. 56, № 13. P. 5112-5119.

102. Chavez K.L., Hess D.W. A Novel Method of Etching Copper Oxide Using Acetic Acid // J. Electrochem. Soc. 2001. Vol. 148, № 11. P. G640.

103. DeMeo S. Does copper metal react with acetic acid? // J. Chem. Educ. 1997. Vol. 74, № 7. P. 844-846.

104. Hafer E., Holzgrabe U., Kraus K., Adams K., Hook J.M., Diehl B. Qualitative and quantitative 1H NMR spectroscopy for determination of divalent metal cation concentration in model salt solutions, food supplements, and pharmaceutical products by using EDTA as chelating agent // Magn. Reson. Chem. 2020. Vol. 58, № 7. P. 653-665.

105. Tan W. Li Q., Dong F., Wei L., Guo Z. Synthesis, characterization, and antifungal property of chitosan ammonium salts with halogens // Int. J. Biol. Macromol. 2016. Vol. 92. P. 293-298.

106. Guo Z. Xing R., Liu S., Zhong Z., Ji X., Wang L., Li P. Antifungal properties of Schiff bases of chitosan, N-substituted chitosan and quaternized chitosan // Carbohydr. Res. 2007. Vol. 342, № 10. P. 1329-1332.

107. Guo Z., Xing R., Liu S., Zhong Z., Ji X., Wang L., Li P. The influence of the cationic of quaternized chitosan on antifungal activity // Int. J. Food Microbiol. 2007. Vol. 118, № 2. P. 214-217.

108 Kasaai M.R. Determination of the degree of N-acetylation for chitin and chitosan by various NMR spectroscopy techniques: A review // Carbohydr. Polym. 2010. Vol. 79, № 4. P. 801-810.

109 Kritchenkov A.S., Egorov A.R., Skorik Yu.A. Azide pre-click modification of chitosan: N-(2-azidoethyl)chitosan // Russian Chemical Bulletin, International Edition. 2018. Vol. 67, № 10. P. 1915-1919.

110. Hosseinnejad M., Jafari S.M. Evaluation of different factors affecting antimicrobial properties of chitosan // Int. J. Biol. Macromol. 2016. Vol. 85. P. 467-475.

111. Varma A., Deshpande S., Kennedy J. Metal complexation by chitosan and its derivatives: a review // Carbohydr. Polym. 2004. Vol. 55, № 1. P. 77-93.

112. Kurita K. Chemistry and application of chitin and chitosan // Polym. Degrad. Stab. 1998. Vol. 59, № 1-3. P. 117-120.

113. Valko M., Rhodesb C.J., Moncola J., Izakovic M., Mazur M. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer // Chem. Biol. Interact. 2006. Vol. 160, № 1. P. 1-40.

114. Xing R., Liu S., Yu H., Guo Z., Li Z., Li P. Preparation of high-molecular weight and high-sulfate content chitosans and their potential antioxidant activity in vitro // Carbohydr. Polym. 2005. Vol. 61, № 2. P. 148-154.

115. Weber M., Steinle H., Golombek S., Hann L., Schlensak C., Wendel H.P., Meltem A.A. Blood-Contacting Biomaterials: In vitro Evaluation of the Hemocompatibility // Front. Bioeng. Biotechnol. 2018. Vol. 6, № July. P.1-11.