Синтез аналогов тимидина, модифицированных по 3`-положению тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Серегин, Кирилл Викторович

• Серегин, Кирилл Викторович
• кандидат химических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат химических наук Серегин, Кирилл Викторович

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

I. Синтез аналогов пиримидиновых нуклеозидов со связью C-N в З'-положении.

1. Синтез З'-азидо- и З'-аминоаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

1.1. Азидоаналоги.

1.2. Аминоаналоги.

2. Синтез З'-алкиламиноаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

2.1. Алкиламиноаналоги тимидина.

2.2. Алкиламиноаналоги уридина.

3. Синтез З'-^ацильных аналогов пиримидиновых нуклеозидов.

4. Синтез З'-сульфамидных аналогов тимидина.

5. Синтез З'-изоциано-З'-дезокситимидина.

6. Синтез аналогов тимидина, несущих по З'-положению электрофильные группы.

7. Синтез производных пиримидиновых нуклеозидов, содержащих по З'-положению гетероциклы.

8. Синтез З'-гидроксиламинопроизводных пиримидиновых нуклеозидов.

9. Синтез З'-нитроаналогов тимидина.

10. Прочие аналоги пиримидиновых нуклеозидов со связью C-N в З'-положении.

10.1. Синтез З'-уреидных аналогов тимидина.

10.2. Синтез аналогов уридина с гидразильной и гуанидиновой группами.

10.3. Синтез З'-фосфорамидатного аналога цитидина.

11. Синтез цитидиновых аналогов из производных уридина.

II. Биологическая активность пиримидиновых нуклеозидов со связью C-N в З'-положении.

1. Биологическая активность З'-амино- и З'-азидоаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

2. Биологическая активность З'-алкиламиноаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

3. Биологическая активность 3'-!\1-ацильных аналогов пиримидиновых нуклеозидов.

4. Биологическая активность З'-сульфамидоаналогов тимидина.

5. Биологическая активность аналогов тимидина с электрофильными группами в З'-положении

6. Биологическая активность пиримидиновых нуклеозидов, содержащих по З'-положению гетероциклический заместитель.

7. Биологическая активность З'-гидроксиламино- и З'-нитроаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Введение.

1. Эффективный синтез З'-амино-З'-дезокситимидина.

2. Синтез З'-Ы-алкильных производных З'-амино-З'-дезокситимидина.

3. Синтез 3'-1М-ацильных производных З'-амино-З'-дезокситимидина.

4. Синтез З'-изотиоциано-З'-дезокситимидина и его производных.

5. Синтез З'-уреидных и З'-тиоуреидных производных З'-амино-З'-дезокситимидина.

6. Синтез З'-М-нитрозопроизводного З'-амино-З'-дезокситимидина.

7. Синтез производного З'-амино-З'-дезокситимидина, содержащего гидразидную функцию по 3'- . положению.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез аналогов тимидина, модифицированных по 3`-положению»

Сегодня весьма остро стоят проблемы борьбы с многочисленными вирусными и онкологическими заболеваниями. Основным направлением в решении этих проблем является поиск высокоэффективных биологически активных агентов среди соединений различных классов. В ряду этих соединений важное место занимают нуклеозид-ные аналоги различной структуры. В настоящее время синтезировано и изучено большое число разнообразных нукпеозидных аналогов, некоторые из которых уже используются в качестве лекарственных препаратов, направленных на борьбу с различными вирусами или тормозящих развитие разных форм злокачественных новообразований. К таким нуклеозидам относятся, например, З'-азидо-З'-дезокси-тимидин (ретровир, АЗТ), 2',3'-дидезокси-3'-тио-1.-рибоцитозин (ламивудин), которые давно применяются для лечения СПИДа как ингибиторы RT HIV, 1-N-(pn6o-фуранозил-1-ил)-1,2,4-триазол-3-карбоксамид (рибавирин), который обладает широким спектром противовирусной активности, арабиноцитозин (цитарабин), который применяется при лечении лейкемии, и многие другие. К сожалению, лечение подобными препаратами сопряжено часто с рядом побочных эффектов, которые ограничивают их применение. Например, длительное лечение ретровиром вызывает угнетение деятельности костного мозга, приводящее к анемии, а также оказывает отрицательное воздействие на печень. Подобные побочные эффекты являются следствием недостаточной для эффективного лечения селективности действия этих препаратов. Другой проблемой при использовании противовирусных агентов является развитие вирусной резистентности, которая может полностью подавить лечебный эффект активного соединения. Среди противоопухолевых препаратов проблема селективности также является очень актуальной. Хорошо известно, что проведение курсов химиотерапии до сих пор может быть сопряжено с рядом тяжелых побочных эффектов, обусловленных именно низкой селективностью цитотоксического действия препаратов. Несмотря на все эти недостатки, во многих случаях нуклеозидные аналоги являются очень эффективными. С другой стороны, структура нуклеозида позволяет проводить множество различных модификаций, тонко варьировать биологическую активность соединения и, таким образом, решать многие проблемы, обнаруживаемые при применении нуклеозидных препаратов. Все это делает поиск новых эффективных биологически активных соединений в ряду нуклеозидных аналогов и разработку новых подходов к их синтезу актуальной задачей и перспективным направлением научных исследований.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

I. Синтез аналогов пиримидиновых нуклеозидов со связью C-N в З'-положении.

1. Синтез З'-азидо- и З'-аминоаналогов пиримидиновых нуклеозидов.

1.1. Азидоаналоги.

Наиболее известным З'-азидоаналогом пиримидиновых нуклеозидов является 3'-азидо-З'-дезокситимидин. Это соединение оказалось очень эффективным против ВИЧ и с 80-ых годов является ведущим препаратом при лечении СПИДа. Впервые это соединение было получено Horwitz et al. [1] в 1964 году. С тех пор было разработано множество методик его получения. Особенно активно синтетические подходы к его синтезу начали разрабатываться после обнаружения у него анти-ВИЧ активности. С некоторыми методиками получения A3T можно ознакомиться по следующим ссылкам [2, 3, 4].

Интересными З'-азидопроизводными являются также аналоги уридина и 2'-дезоксиуридина как близкие по структуре к З'-азидо-З'-дезокситимидину. Например, 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридин (1, R=H) (ex. 1) (CS-87, новуридин) известен как анти-ВИЧ препарат, который ингибирует RT HIV.

Схема 1. о

Методы введения азидогруппы основаны на предварительной активации 3'-положения. Этого можно добиться путем замыкания 2,3-ангидроцикла, 2',3'-ангидроликсоцикла или введением по З'-положению хорошо уходящей группы (сульфонатной или атома галогена). Азидогруппу вводят с помощью азидирующих агентов с одновременным размыканием 2,3'-ангидроцикла, 2',3-ангидроликсоцикла или замещением трео-З'-сульфонатных групп.

Зайцева с сотр. [5] и Hiebl et al. [6, 7] осуществили синтез 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридина (1, R=H) и его б'-О-ТВОМЭ-защищенного производного (1, R=TBDMS) через промежуточный 2,3-ангидропродукт (сх. 1). Для образования 2,3-ангидроцикла Зайцева применила классический подход, который заключается в последовательном мезилировании З'-гидроксильной группы и замыкании цикла при быстрой обработке З'-мезилатного производного (2) кипящим спиртовым раствором NaOH. Выход продукта циклизации (3) составил 58%.

Hiebl et al. [7] провели синтез г.З'-ангидро-б'-О-трет-бутил-диметилсилил-г'.З'-дидезоксиуридина (4) в условиях реакции Мицунобу с трифенилфосфином и DEAD. Те же авторы осуществили замыкание 2,3'-ангидроцикла в присутствии б'-азидо- и б'-формамидогрупп (сх. 2). В первом случае исходный 5'-азидо-3'-0-мезил-2',5'-ди-дезоксиуридин (5) обрабатывали DBU в ТГФ с выходом продукта (6) 95%. Это соединение также было получено другим путем в одну стадию из (7) по реакции Мицунобу. В тех же условиях б'-формамидное производное (8) циклизовали в 2,3'-ангидро-5'-формамидо-2',3',5'-тридезоксиуридин (9).

Схема 2. о

OMs

Nelson et al. [8] синтез 2,3'-ангидро-2',3'-дидезоксиуридина также проводили в классических условиях реакции Мицунобу [9] с помощью трифенилфосфина и DEAD.

После образования ангидроцикла продукт обрабатывают азидирующим агентом: №N3, UN3 или NH4N3 в горячем ДМФА, при этом происходит инверсия конфигурации при С-3' с одновременным раскрытием цикла (сх. 1).

В другом подходе использовались хорошо уходящие группы. Lin et al. [10] получили 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридин (10) (ex. 3), проводя синтез через трео-3'-мезилат. Ксилопроизводное (11) они мезилировали по З'-гидроксильной группе, а затем трео-З'-мезилатную группу замещали азид-ионом при обработке LiN3 в ДМФА с выходом 86%.

Схема 3. о

HN'

TrtO.

OH OMs и но>

V I LiN3 I

OMs

N,

11) 3(Ю)

Krenitsky et al. [11] активировали З'-положение в уридине, введя по нему атом хлора. Хлорирование они осуществляли в ДМАА с помощью ССЦ и трифенилфосфина. Последующее нуклеофильное замещение З'-хлора проводили с помощью LiN3 в ГМФТА.

Интерес представляют и З'-азидопроизводные цитидина. Методы их получения аналогичны методам, применяемым для производных тимидина и уридина. Зайцева с сотр. [5] получили 3'-азидо-2',3'-дидезоксицитидин (12) (сх. 4) из 2-дезокси-цитидина (13) через 2,3'-ангидропроизводное (14). Однако в случае цитидина надо помнить, что при проведении некоторых реакций следует защищать 4-аминогруппу.

16) (14) (17)

12) (18) (19)

Зайцева 2'-дезоксицитидин (13) превращала в 4-1М-диметиламинометилиденовое производное (15), б'-гидроксил которого защищали MMTr-группой, а З'-гидроксиль-ную группу активировали ангидридом трифторметансульфокислоты с образованием производного (16). Этот промежуточный продукт самопроизвольно циклизовался в 2,3'-ангидро-5'-(4-метокситритил)-2',3'-дидезоксицитидин (14), который с помощью Шз превращали в азидопродукт (17) и после удаления 5'-защитной группы получали целевой нуклеозид (12). Этот нуклеозид затем переводился в 5'-трифосфат (18).

Surzhykov и Krayevsky [12] получили разветвленный 3'-азидо-4'-гидроксиметил-3'-дезоксицитидин (20) (сх. 5). В качестве исходного соединения была выбрана 1,2-0-изопропилиден-4-гидроксиметил-а-Р-ксилофураноза (21). Она получалась окислением 1,2-0-изопропилиден-а-0-глюкопиранозы с последующей обработкой раствором параформальдегида с добавлением щелочи. После обработки (21) бензоил-хлоридом было получено дибензоилированое производное (22). З'-Гидроксильную группу активировали обработкой ангидридом трифторметансульфокислоты и полученный трео-З'-трифлат (23) обрабатывали №N3 с общим выходом азидопродукта (24) из (21) 78%. После удаления изопропилиденовой защитной группы и ацетилирования фуранозу (25) конденсировали с силилированным 4-N-ацетилцитозином в присутствии БпСЦ. После удаления всех защитных групп был получен целевой продукт 3'-азидо-4'-гидроксиметил-3'-дезоксицитидин (20).

•о

N3 l-VCH3 СН3

24)

V.

25)

V" J

НСХ.

О^Г 1)ТРР,Ру

Ч 7 2)NH3(B) -«J -**

SnCU

BzO~ рАг, м^У""/

НО м3 ОН

Bz0 N3 ОАс н0 nh2 он

26) (20)

Wojczewski et al. [13] синтезировали 3'-азидо-2',3'-дидезоксицитидин (12) (ex. 6) в 6 стадий с хорошим выходом по классической методике с двойной инверсией конфигурации при С-3'. В качестве исходного соединения был взят 2'-дезокси-цитидин (13). Его превращали в промежуточное 2,3'-ангидропроизводное (27), которое затем ази-дировали UN3. После удаления б'-защитной группы было получено 3'-азидопроизводное (12). Этот нуклеозид затем по методике Ludwig и Eckstein [14] превращался в 5'-трифосфат (18).

Схема 6.

NH

LiN3

ОН

OMs

13)

27)

12) (18) (19)

Эффективный метод для получения азидонуклеозида с арабиноконфигурацией гликона предложили Hollenberg et al. [15] и Perlman et al. [16]. Они вводили азидо

11 группу через раскрытие 2',3'-ангидроликсоцикла. Ключевой промежуточный продукт 2',3'-ангидро-2',3'-дидезоксиликсоуридин (28) авторы получали методом, предложенным Codington et al. [17], который представлен на схеме 7.

Схема 7.

29) (30) (31)

32) (28)

Исходным соединением служил уридин, который превращали в димезильное производное (29). После обработки его разбавленной водной кислотой образовывался 2,2'-ангидронуклеозид (30). Если (30) обрабатывать соляной кислотой в большом количестве водного ацетона (1:1), то после 12 часов почти количественно образуется производное (31). Реакция (31) с ЫНз*НгО протекает с образованием кристаллического эпоксида (32) с сохранением 5'-0-Вг-защитной группы. Ее удаление завершает синтез 2',3'-ангидро-2',3'-дидезоксиликсоуридина (28) с общим выходом 65% из уридина.

Hollenberg et al. [15, 18] описали синтез 3'-азидо-5'-0-бензоил-3'-дезокси-арабиноуридина (33а) (сх. 8) из 2',3'-ангидроликсопроизводного (32). Азидирующим агентом служил NH4N3. Эта аммонийная соль дает слабо кислую реакцию среды, которая ведет к относительно быстрому расщеплению ангидроликсоцикла и позволяет упростить процедуру выделения продукта. Соль вводили в десятикратном избытке, проводили реакцию в кипящем этаноле. Атака азид-ионом протекала регео-селективно с образованием только З'-азидоарабиноизомера (33а) с выходом 86%. I

34а) (34b)

Hummel и Carty [19] повторили этот эксперимент, используя только 2 эквивалента NH4N3. Они выделили не только З'-азидоарабинопродукт (33а), но и его 2'-ксилоизомер (ЗЗЬ). Если же поменять растворитель на ДМФА, то реакция будет протекать независимо о количества азидирующего агента с образованием смеси 3'- и 2'-региоизомеров в соотношении 3,6:1. Perlman et al. [16] повторили эти эксперименты и объяснили причину изменения региоселективности. Они предположили, что атака по 2'-положению протекает по механизму, близкому к SN1, а по З'-положению - по механизму, близкому к Sn2. Изменение количества нуклеофила или природы растворителя может облегчать или затруднять протекание нукпеофильного замещения по одному или другому механизму, влияя, таким образом, на региоселективность раскрытия цикла.

Hollenberg et al. [15] использовали аналогичное 2',3'-ангидроликсонуклеозидное производное (35) (сх. 9) для синтеза З'-азидо-З'-дезоксиарабиноцитидина (36). 2',3'-Ангидро-2',3'-дидезоксиликсоцитидин (35, R=H) был получен ими по методике, описанной в патенте Kanai [20]. Азидирование проводили в тех же условиях, что и с уридиновым аналогом, с помощью NH4N3 в кипящем этаноле. Реакция протекала почти с исключительным образованием арабиноизомера с выходом 76%. Присутствие ксилоизомера было обнаружено в минимальном количестве, судя по результатам тех.

Аналогичную методику применили Webb et al. [21]. Цитидиновое производное (35, R=DMTr) было получено из цитидина по методике Kanai и Ichimo [22] с выходом 30%. Затем 5'-0-ОМТг-защитную группу удаляли водной уксусной кислотой и полученный незащищенный продукт азидировали с помощью №N3 в водном ацетоне с выходом целевого нуклеозида (36) 90%.

Схема 9.

35)

36)

Lin et al. [23] и Lavandera et al. [24, 25] предложили эффективный метод введения азидогруппы в молекулу уридина и в 3'-, и в б'-положения. Для этого в 2'-дезокси-уридине (37а) (сх. 10) одновременно мезилировали 3'- и б'-гидроксилы. Затем диме-зилат (38а) с помощью Et3N в кипящем этаноле превращали в ангидронуклеозид (39а), который далее подвергался нуклеофильному замещению №N3 в ДМФА при 120°С. На последней стадии соблюдение температурного режима - важное условие для получения диазидопродукта (40а) с приемлемым выходом. У авторов он составил 62%.

Схема 10. он

37) О

OMs (38) О

39) a)R=H b)R= /

Br

40)

41)

Levandera et al. [25] применили эту методику также к б-(Е)-(2-бромвинил)-2'-дезоксиуридину (37Ь). Стадию азидирования в этой случае проводили уже при 110°С в присутствии п-нитрофенилового спирта. Нуклеозид (40Ь) был получен с выходом 67%.

1.2. Аминоаналоги.

Методы получения З'-аминоаналогов пиримидиновых нуклеозидов можно условно разделить на две группы. В одну из них входят методики, суть которых заключается в использовании для введения аминогруппы имидных или амидных нуклеозид-ных производных. При этом этот подход может сочетаться как со стратегией синтеза нуклеозидов путем конденсации сахара и гетероциклического основания, так и при использовании в качестве исходных соединений готовых нуклеозидных структур. Согласно стратегии второй группы методов аминопроизводные получаются путем восстановления азидогруппы в соответствующих нуклеозидных азидопредшествен-никах. Спектр методов восстановления азидогруппы, применяемых в химии нуклеозидов, очень широк. Наиболее популярными являются каталитическое восстановление водородом и восстановление по реакции Штаудингера. К менее известным относятся восстановление SnCb, радикальное восстановление н-ВизЭпН, восстановление с помощью NaBhU и муравьиной кислоты. Очень эффективным оказалось применение тиолов и формиата аммония.

Одна из первых методик синтеза АМТ (42) (сх. 11) включала образование промежуточного З'-фталимидного производного. Miller et al. [26] получали такое производное (43) замещением эритро-З'-мезилатной группы фталимидом калия, при этом конфигурация при С-З'сохранялась:

Схема 11. о nh2

42)

Авторы объяснили это сохранение конфигурации протеканием реакции через 2,3'-ангидроинтермедиат, образующийся при нуклеофильном замещении мезилат-ной группы карбонильным атомом кислорода при С-2. Последующая атака фтали-мид-ионом приводит к восстановлению прежней эритроконфигурации в З'-положении.

Таким образом, обработав нуклеозид (44) фталимидом калия в кипящем ДМФА авторы получили соединение (43) в виде аморфного порошка. После алкоголиза его метиламином в метаноле при ~105°С в запаянном сосуде был выделен аминонукле-озид (45). Завершающая стадия детритилирования в кислых условиях превращала (45) в кристаллический AMT (42) с общим выходом 35% из (44).

Другая методика введения фталимидной группы была предложена Motawia et al. [27]. Она заключается в подготовке 1,5-диацетил-2,3-дидезокси-3-фталимидо-фуранозида (46) (сх. 12) и конденсации его с силилированным тимином в присутствии триметилсилилтрифлата в сухом ацетонитриле. Замещенный фуранозид (46) получали из 2-дезокси-0-рибозы, обрабатывая ее системой реагентов фталимид/Р40ю/Н20/н-Виз1М в хлороформе при 40°С и ацитилируя полученное промежуточное фуранозное производное АсгО в хлороформе в присутствии пиридина. К сожалению, выход фуранозида (46) с этих двух стадий составил лишь 18%.

Схема 12.

Voh он| он nh2 (42)

J \J

Первые попытки синтезировать З'-амино-З'-дезоксиуридин (47) (сх. 13) основывались на стратегии конденсации сахара с гетероциклическим основанием. Fox et al. [28, 29, 30] предложили получать подобные нуклеозиды конденсацией защищенных галогеносахаров, содержащих фталимидную группу в З'-положении, и ртутных солей тимина. Kissman и Weiss [31] реализовали эту методику на уридиновых производных. З'-Амино-З'-дезоксиуридин (47) они получали с выходом 19% с двух стадий из 2',5'-О-бензоил-З'-фталимидо-З'-дезоксифуранозилхлорида (48) и ртутной соли 4-этокси-2-пиримидинона (49). В промежуточном нуклеозидном продукте 4-этоксигруппу гид-ролизовали метанольным раствором хлороводорода, а фталимидную и бензоиль-ные защитные группы удаляли н-бутиламином.

1) phtalimid P4O10,n-Bu3N АсО

2) Ас20

ОАс

ОАсп ОАс О

N—О

OEt "Л

Motavia et al. [27] тоже вводили З'-аминогруппу через З'-фталимидное фураноз-ное производное. Они конденсировали его с силилированным урацилом с образованием 5'-0-ацетил-3'-фталимидо-2',3'-дидезоксиуридина (50) (сх. 14). Алкоголиз фта-лимидной группы производили метиламином в этаноле с образованием З'-амино-2',3-дидезоксиуридина (51) с выходом на этой стадии 70%.

Схема 14.

Kissman et al. [31], используя метод Fox первыми получили З'-амино-З'-дезокси-цитидин (52) (сх. 15). Они синтезировали его двумя способами: 1) конденсацией га-логеносахара (48) с ртутной солью 4-1М-ацетилцитозина (53) в кипящем ксилоле с выходом 59% и 2) конденсацией (48) с ртутной солью 4-этокси-2-пиримидинона (49) в кипящем ксилоле с выходом уридинового производного 59%, после чего 4-этокси-группа в (54) замещалась на аминогруппу при обработке метанольным раствором аммиака в запаянном сосуде с выходом 43%. В обоих случаях завершающей стадией было удаление фталимидной и бензоильных защитных групп алкоголизом бути-ламином в кипящем метаноле.

NHAc

NHAc

CI A

N HgCi

53)

OEt i^4

CI

N CIHg

49)

Lichtenhaler et al. [32] провели конденсацию З'-трифторацетамидофуранозного производного (55) (ex. 16) с силилированным 4-[М-ацетилцитозином (56) при катализе SnCI4. Реакция протекала при комнатной температуре с образованием нуклеозида (57), который после удаления защитных групп метанольным раствором MeONa превращался в З'-амино-З'-дезоксицитидин (52) с общим выходом из D-ксилозы 9%.

Схема 16.

N0,

0>

Me3Si

NAc

CI A

М/ч o\r\ T

0 (55)

OAc

MeqSiO'

56)

NH OAc Y

0 (57) nh2 oh

52)

Принципиально иной подход к синтезу З'-аминопроизводных нуклеозидов состоит в использовании уже готовых нуклеозидных структур. АМТ (42) и его 5'-защищенные производные (58), а также соответствующие аналоги уридина и цитидина часто получают восстановлением азидопредшественников. До сих пор наиболее простым и эффективным способом восстановления З'-азидогруппы считалось каталитическое восстановление водородом. Такие превращения для тимидиновых аналогов схематически изображены на схеме 17.

59)

Реакцию каталитического гидрирования для тимидина проводят в протонных растворителях, таких как метанол, этанол или вода. В качестве катализатора, как правило, используют соединения палладия: Pd/C, PdO или Pd(OH)2. Восстановление можно проводить в метаноле [33, 34], в системе метанол-вода [11], этанол-вода [35] или в водном растворе [36] с избыточным давлением водорода 1атм. Реакция также может протекать и при более высоком давлении водорода, например при 3,5атм. [37], причем в указанной статье говориться о том, что перед восстановлением реакционный раствор насыщали азотом в течение 15 минут. В работе Horwitz et al. [1] АЗТ (59) восстанавливали в этаноле над PdO при давлении водорода Затм. Эту методику использовали и другие исследовательские группы [38, 39]. Karl et al. [40] перед гидрированием к раствору в этаноле добавляли небольшое количество муравьиной кислоты.

Каталитическое гидрирование азидоаналогов тимидина может быть проведено и в присутствии различных защитных групп в 5'-положении. Такие эксперименты успешно осуществлялись в присутствии TBDMS-защитной группы [34], бензоильной [37], тритильной [37, 40] и диметокситритильной [40] групп. При этом было замечено, что тип защитной группы влияет на скорость реакции. Восстановление одинакового количества азидопроизводного без защиты заняло два с половиной часа [1], с тритильной - 24 [40], с бензоильной -16 часов [37].

Рисунок 1.

После того как были получены З'-азидоаналоги уридина (рис. 1), к ним тоже стали применять различные методики восстановления азидогруппы. Lin и Mancini [10] восстанавливали 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридин (10) на 10%Pd/C в этаноле при давлении газа Затм с выходом З'-аминопроизводного 86%. Эту методику повторяли и другие лаборатории [41, 36]. Krenitsky et al. [11] провели восстановление того же нуклеозида (10), используя 5%Pd/C, в этаноле с выходом 46%. Nelson et al. [31] удалось достичь почти количественного выхода при каталитическом гидрировании З'-азидо-б'-О-трет-бутилдиметилсилил-г'.З'-дидезоксиуридина на 10%Pd/C в системе этанол-дихлорметан, 2:1.

Для цитидиновых аналогов Lin и Mancini [10, 42] сообщили о получении З'-амино-2',3'-дидезоксицитидина (62) (сх. 18) при каталитическом восстановлении водородом 3'-азидо-2',3'-дидезоксицитидина (12) на 10% Pd/C в метаноле и этаноле при давлении водорода Затм с выходами в обоих случаях 65%.

Другой известный метод восстановления азидогруппы - восстановление по реакции Штаудингера. Реакцию проводят обычно с трифенилфосфином через имино-фосфониевый интермедиат, который затем гидролизуют до целевого аминопродукта.

Подобным образом Matsuda et al. [43] обрабатывали АЗТ трифенилфосфином в пиридине и полученный иминофосфоран (63) (сх. 19) гидролизовали водно-спиртовым раствором аммиака. Выход продукта восстановления составил 68%. Мельник с сотр. [44] для разложения промежуточного иминофосфорана использовали концентрированный водный аммиак. Восстановление они проводили с З'-азидо-б-бензилоксиметил-З'-дезоксиуридином без защитной группы и с п-толуильной группой в 5'-положении и в обоих случаях получили З'-аминопродукт с хорошим выходом. Зайцева с сотр. [5] для восстановления 3'-азидо-3'-дезокситимидин-5'-трифосфата использовали трифенилфосфин в водном диоксане, а промежуточный иминофосфоран разлагали на анионообменной смоле с выходом соответствующего амино-производного 90%. Эта методика была ими применена и к З'-азидо-З'-дезокси

Схема 18.

12)

62)

Схема 19. но цитидин-5'-трифосфату (18) (ex. 6). Выход З'-аминопродукта (19) составил 75%. О восстановлении 5'-трифосфатов АЗТ и 3'-азидо-2',3'-дидезоксицитидина сообщили Wojczewski et al. [13]. Первая стадия, образование иминофосфорана, может быть проведена и в ТГФ.

Zeitseva et al. [45] сообщили о восстановлении трифенилфосфином 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридина в пиридине с последующим разложением образующегося иминофосфорана водным аммиаком. Выход продукта восстановления составил 67%. Ога et al. [46] повторили эту методику на 3'-азидо-2',5'-0-бис(трет-бутилдиметилсилил)-2',3-дидезоксиуридине. Cech и Holletz [47] использовали для восстановления З'-ази-до-2',3'-дидезоксиуридина стратегию твердофазного синтеза с трифенилфосфином, закрепленным на полистирольной смоле. Восстанавливали нуклеозид без защитной группы и с диметокситритильной группой в б'-положении. С незащищенным нуклео-зидом реакцию проводили в диоксане с почти количественным выходом, с 5'-защищенным - в пиридине с выходом 89%, иминофосфоран в обоих случаях разлагали водным аммиаком.

Суржаков и Дяткина [48] восстанавливали трифенилфосфином З'-азидо-производное цитидина в пиридине с последующей обработкой водным аммиаком. Выход З'-аминопродукта составил 93%. Surzhykov и Krayevsky [12] получили З'-ами-но-4'-гидроксиметил-3',4'-дидезоксицитидин (26) (сх. 5) из З'-азидопредшественника (20) по классической методике с трифенилфосфином с выходом 93%. Holletz и Cech [47] восстановили на полистирольной смоле 3'-азидо-2',3'-дидезоксинцитидин до 3'-амино-2',3'-дидезоксицитидина с почти количественным выходом, а его 4-№ацети-лированный аналог - с выходом 94%.

Lavandera et al. [24, 25] применили оба описанных выше метода восстановления для одновременного превращения 3'- и 5'-азидогрупп в аминогруппы в производных уридина. З'.б'-Диазидо-г'.З'.б'-тридезоксиуридин (40а) (схема 10) они восстанавливали водородом на Pd/C в этаноле с выходом 85%. Для (Е)-5-(2-бромвинил)-3',5'-ди-азидо-2',3',5'-тридезоксиуридина (40Ь) применялось восстановление по Штаудингеру, так как каталитическое гидрирование дает побочный продукт по экзоциклической двойной связи. Целевой продукт (41Ь) был получен с выходом 71%.

Кроме каталитического восстановления водородом и восстановления трифенилфосфином иногда применяют другие методики. Zelh et al. [49] предложили восстанавливать АЗТ с помощью SnCI2. Они получили АМТ с выходом 80%. Авторы сообщили, что в условиях реакции защитная группа в образующемся аминосоединении оказывается довольно лабильной, поэтому метод неприемлем для 5'-защищенного

АЗТ. Однако Maillard et а!. [33] удалось сохранить б'-защитную группу при восстановлении с помощью SnCI2 З'-азидо-б'-О-тексилдиметилсилил-З'-дезокситимидина в метаноле и получить З'-амино-б'-О-тексилдиметилсилил-З'-дезокситимидин с выходом 85%.

Zehl et al. [49] предложили способ восстановления АЗТ и его б'-защищенных аналогов с помощью свободнорадикальной реакции. В качестве восстановителя они использовали н-ВизвпН, а инициатором реакции служил азоизобутиронитрил (AIBN). Эффективность методики была продемонстрирована на АЗТ и его 5'-0-Т|1-защищен-ном аналоге.

Handlon et al. [50] первыми применили метод восстановления азидогруппы тио-лами (дитиотриэтолом) для синтеза АМТ из АЗТ. Затем Zelh et al. [49] повторили эту реакцию, проведя ее в воде с добавлением Et3N или NaHC03. Реакция протекала в течение 30-45 минут, и выход целевого продукта составил 96%. Механизм восстановления азидогруппы тиолами был предложен Cartwright et al. [51], которые использовали эту реакцию для восстановления 8-азоаденозина (сх. 20).

Схема 20. R

Согласно этой схеме вначале происходит быстрая обратимая атака дитиола по терминальному у-атому азота азида, затем следуют внутримолекулярная циклизация и выделение молекулярного азота с одновременным образованием циклического дисульфида и аминопроизводного. Скорость внутримолекулярной реакции образования циклического дисульфида зависит от размера образующегося цикла. Так, этан-1,2-дитиол циклизуется более медленно, чем пропан-1,3-дитиол, и скорость восстановления в последнем случае будет выше. При восстановлении монотиолами образование дисульфидов из азидомонотиольного аддукта представляет собой межмолекулярный процесс, так как требует подхода еще одной молекулы монотиола. Поэтому в этом случае реакция протекает значительно медленнее. По всей видимости, стадия присоединения тиола к азиду является самой медленной и определяет скорость всей реакции, поэтому восстановление мо-нотиолом может быть ускорено за счет увеличения концентрации последнего. Например, Шаркин с сотр. [52] провели восстановление азидотиимдина р-меркапто-этанолом за ночь с выходом 46%, взяв тиол с 21-кратным молярным избытком по отношению к нуклеозиду. Кроме концентрации тиола для повышения скорости реакции также следует учитывать основность среды. Максимальная скорость наблюдалась при рН~10, что связано с образованием тиолат-аниона перед реакцией с азидом.

Celewicz et al [53] сообщили о восстановлении азидогруппы комплексным гидридом. Они получили З'-амино-б'-О-тритил-З'-дезокситимидин из З'-азидопредшествен-ника с помощью NaBH4 в кипящем изопропаноле с выходом 93%.

Кроме З'-аминопроизводных с рибо- и дезоксирибоконфигурацией разрабатывались методики для синтеза арабино- и ксилоаналогов. Codington et ai. [17] первые получили З'-амино-З'-дезоксиарабиноуридин (64) (сх. 21) из 2',3'-ангидро-2',3'-диде-зоксиликсоуридина (28) при нагревании его в этаноле, насыщенном аммиаком, с выходом 38%. Они доказали конфигурацию гликона, инвертировав в полученном продукте (64) гидроксильную группу при С-2', превратив его в известный З'-амино-З'-дезоксиуридин (47). Синтез проводили через последовательное ацетилирование 3'-аминогруппы и мезилирование 3'- и 5'-гидроксильных групп гликона с образованием промежуточного продукта (65). Завершающей стадией являлось превращение (65) в целевой продукт (47) при обработке водным раствором AcONa в метилцеллозольве.

Схема 21. но. и но. и „ „ но. и

Х/ шГ у^У у^у

Et0H NH2 NHAc

28) (64) nh2 он

Hollenberg et al. [18] синтезировали З'-амино-б'-О-бензоил-З'-дезоксиарабино-уридин (66) (ex. 22) каталитическим гидрированием З'-азидо-б'-О-бензоил-З'-дез-оксиарабиноуридина (33а).

Схема 22.

33 а) nh2 (66)

Интересная методика была предложена для получения З'-амино-З'-дезокси-ксилоуридина (67) (сх. 23) [54]. В этой методике ключевой стадией является образование циклического карбаматного производного (68). Оно образуется при перегруппировке 2,2'-ангидропредшественника (69) под действием NaH в ДМФА. При этом реакция протекает через последовательное замыкание 2',3'-ангидрорибоцикла и размыкание его при нуклеофильной атаке карбамат-аниона с образованием (68). На последних двух стадиях синтеза производят расщепление циклического карбама-та с помощью LiOH и удаление бензильной группы восстановлением муравьиной кислотой на Pd/C с образованием целевого нуклеозида (67).

Схема 23.

O^NH

OH он

67)

Hassan et al. [55] удалось получить 3'-амино-2'-метилиден-2'-дегидро-2',3'-ди-дезоксиуридин (70) (сх. 24), в котором фуранозный цикл находится в уплощенной

24 конформации. Такую конформацию обеспечивает именно присутствие метилидено-вой группы. Авторы активно обращались к химии селена. Метилиденовая группа формировалась за счет элиминирования фенилселенонового заместителя в промежуточном соединении (71), которое происходило при последовательной обработке его трифенилхлорсиланом и водным аммиаком. Эта стадия представляет собой окислительную [2,3]-сигматропную перегруппировку аллильного селенида, которая описана в [56]. Эта перегруппировка напоминает хорошо известную перегруппировку аллиловых сложных эфиров. Образующееся З'-Ы-бокированное производное (72) затем обрабатывали 98%-ой трифторуксусной кислотой, превращая его в целевой нуклеозид (70) с высоким выходом.

Схема 24.

TrtO и TrtO

U NCS, BocNHOH Trt0 I Et-iN

THF/MeOH

PhSe

N=Se

Boc \

Ph

71)

72)

70)

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Серегин, Кирилл Викторович

выводы

1. Разработан новый эффективный метод синтеза АМТ путем каталитического восстановления АЗТ формиатом аммония. Эффективность метода показана на незащищенном АЗТ и на АЗТ с 5'-защитными группами алкильного, ацильного и си-лильного типа.

2. Впервые получены 4 новых З'-Ы-алкильных производных АМТ. Продемонстрирована эффективность применения для реакции алкилирования АМТ двух субстратов Михаэля, ранее не использовавшихся для этой цели.

3. Получены три серии новых З'-Ы-ацильных и З'-Ы-сульфонильных производных АМТ. Впервые показана перспективность использования для ацилирования АМТ хлорангидридов карбоновых кислот. На серии алифатических и ароматических кар-боновых кислот продемонстрирована применимость для ацилирования АМТ конденсирующего ВОР-реагента.

4. Впервые изотиоцианогруппа по З'-положению тимидина была введена с использованием CSCb. Продемонстрирована перспективность использования изоцианатов и изотиоцианатов для введения уреидной и тиоуреидной группы по З'-поло-жению тимидина.

5. Разработан новый метод введения N-нитрозогруппы по з'-положению тимидина. Получен первый представитель производных этого типа.

6. Впервые продемонстрирована возможность применения реакции прямого ами-нирования для введения гидразидной группы по З'-положению тимидина. С помощью этой реакции получен с высоким выходом новый гидразидный аналог тимидина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Серегин, Кирилл Викторович, 2007 год

1. Jerome P. Horwitz, Jonatan Chua, and Michael Noel. Nucleosides. V. The monomesy-lates of 1-(2'-deoxy-p-D-lyxofuranosyl)thymine. J. Org. Chem., 1964, v.29, pp.2076-2078.

2. Малин A.A., Островский B.A. Синтез производных тимидина как потенциальных лекарственных средств против ВИЧ/СПИДа\\Журнал органической химии, 2001, т.37, №6, с.807-828.

3. Balagopala M.I., Ollapally А.Р., Lee H.J. An Improved Synthesis of Azido-thymidineWNucleosides&Nucleotides, 1996, V.15, №4, pp.899-906.

4. Czernecki S., Valery J.-M. An Efficient Synthesis of 3'-Azido-3'-deoxythymidine (AZT)WSynthesis, 1991, pp.239-240.

5. Зайцева B.E., Дяткина Н.Б., Краевский A.A, Скапцова H.B., Турина О.В., Гнучев Н.В., Готтих Б.Н., Ажаев А.В. Аминонуклеозиды и их производные. XI. Синтез 3'-амино-2',3'-дидезоксинуклеозид-5'-трифосфатов\\Биоорганическая химия, 1984, Т. 10, №5, с.670-680.

6. Hiebl J., Zbiral Е., Balzarini J., De Clercq E. Synthesis, Antiretrovirus Effec, and Phosphorylation Kinetics of 3'-lsocyano-3'-deoxythymidine and 3'-lsocyano-2',3'-dideoxyuridineWJ.Med.Chem., 1990, V.33, pp.845-848.

7. Nelson J.S., Fearon K.L., Nguyen M.Q. J.Org.Chem., 1997, v.62, pp.7278-7287.

8. Mitsunobu O. The Use of Diethyl Azodicarboxylate and Triphenylphosphine in Synthesis and Transformation of Natural ProductsWSynthesis, 1981, p.1-29.

9. Lin T.-Sh., Mancini W.R. Synthesis and Antineoplastic Activity of З'-Azido and 3'-Amino Analogues of Pyrimidine DeoxyribonucleosideWJ.Med.Chem., 1983, V.26, pp.544548.

10. Krenitsky T.A., Freeman G.A., Shaver S.R., Beacham III L.M., Hurlbert S. Cohn N.K., Elwell L.P., Selway W.T. 3'-Amino-2',3'-dideoxyribonucleosides of Some Pyrimidines: Synthesis and Biological ActivitiesWJ.Med.Chem., 1983, V.26, pp.891-895.

11. Surzhukov S.A., Krayevsky A.A. Novel 4'-Branched Nucleo-sidesWNucleosides&Nucleotides, 1994, V.13, №10, pp.2283-2305.

12. Wojczewski С., Faulstich К., Engels J.W. Synthesis and Application of 3-Amino-dye-terminators for DNA SequencingWNucleosides&Nucleotides, 1997, V.16, №5&6, pp.751754.

13. Ludwig J., Eckstein F. Rapid and efficient synthesis of nucleoside 5'-0-(1-thiotriphosphates), 5'-triphosphates and 2',3'-cyclophosphorothioates using 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one\\J.Org.Chem., 1989, V.54, pp.631.

14. Hollenberg D.H., Watanabe K.A., Fox J.J. Nucleosides. 102. Synthesis of Some 3'-Deoxy-3'-Substituted Arabinofuranosylpyrimidine NucleosidesWJ.Med.Chem., 1977, V.20, №1, pp.113-116.

15. Codington J.F., Fecher R., Fox J.J. Nucleosides. XIII. Synthesis of 3'-Amino-3'deoxy-arabinosyl-uracil via 2',3'-Epoxy-lyxosyl NucleosidesWJ.Chem.Soc., 1962, V.27, pp.163167.

16. Reichman U., Hollenberg D.H., Chu C.K., Watanabe K.A., Fox J.J. Nucleosides. 98. Direct Introduction of an Acetamido Group into the Sugar Moiety of Nucleoside Epox-idesWJ.Org.Chem., 1976, V.41, №11, pp.2042-2043.

17. Hummel C.F., Carty R.P. Reaction of Azide Ion with 1-(2,3-Anhydrolyxofuranosyl)Uracil. Isolation of 1-(2-Amino-2-deoxy-(B-D-Xylo-Furanosyl)uracil and 1-(3-Amino-3-deoxy-P-D-arabinofuranosyl)uracil\\Nucleosides&Nucleotides, 1983, V.2, pp.249.

18. Kanai Т., Yamashita C., Ichino M. Japanese patent 7134428.

19. Webb T.R., Mitsuya H., Broder S. 1-(2,3-Anhydro-p-D-lyxofuranosyl)cytosine Derivatives as Potntial Inhibitors of the Human Immunodeficiency VirusWJ.Med.Chem., 1988, V.31, pp.1475-1479.

20. Kanai Т., Ichimo M.WChem.Pharm.Bull., 1968, V.16, pp.1848-1850.

21. Lin T.-S., Zhou R.-X., Scanlon K.J., Brubaker W.F.J., Lee J.J.S., Woods K. Humphreys C., Prusoff W.H. Synthesis and biological activity of several amino nucleoside-platinum(ll) complexesWJ.Med.Chem., 1986, V.29, pp.681-686.

22. Lavandera I., Fernandez S., Ferrero M., De Clercq E., GotorV. Synthesis and Antiviral Activity Assay of Novel (E)-3\5'-Diamino-5-(2-bromovinyl)-2',3',5'-trideoxyuridine\\Nucleosides,Nucleotides&NucleicAcids, 2003, V.22, №5-8, pp.833-836.

23. N. Miller, Jack J. Fox. Nucleosides. XXI. Synthesis of some З'-substituted 2',3'-dideoxyribonucleosides of thymidine and 5-methylcytosine. J. Org. Chem., 1964, v.29, pp.1772-1776.

24. Motawia M.S., Wengel J., Abdel-Megid A.E.-S., Pedersen E.B. A Convenient Route to 3'-Amino-3'-deoxythymidine\\Synth.Commun., 1989, pp.384-387.

25. Fox J.J., Yung N., Davoli J., Brown G.B. Pyrimidine Nucleosides. I. A New Route for the Synthesis of Thymine NucleosidesWJ.Am.Chem.Soc., 1956, v.78, p.2117-2122.

26. Fox J.J., Yung J., Wempen I., Doerr I.L. Pyrimidine Nucleosides. 111. On the Syntheses of Cytidine and Related Pyrimidine NucleosidesWJ.Am.Chem.Soc., 1957, v.79, p.5060-5064.

27. Fox J.J., Yung N., Van Praag D.WFederation Proc., 1957, v.16, p.182

28. Kissman H.M., Weiss M.J. The Synthesis of 1-(Aminodeoxy-P-D-ribofuranosyl)-2-pyrimidinones. New 3'- and 5'-Aminonucleosides\\J.Am.Chem.Soc., 1958, v.80, pp.25752580.

29. Lichtenthaler F.W., Cuny E., Morino T.WChem.Ber., 1979, v.112, pp.2588-2601.

30. Maillard M., Faraj A., Frappier F., Florent J.-C., Grieson D.S., Monneret C. Synthesis of 3'-Substituted-2',3'-dideoxynucleoside Analogs as Potential anti-AIDS DrugWTetr.Lett., 1989, V.30, №15, pp.1955-1958.

31. Matsuda A., Satoh M., Ueda Т., Machida H., Sasaki T. Synthesis and Biological Activities of 3'-Deoxy-3'-lsocyano, -Isothiocyano, and -IsoselenocyanothymidinesWNucleosides&Nucleotides, 1990, V.9, №4, pp.587-597.

32. Hampton A., Kappler F., Chawla R. Design of species- or isozyme-specific enzyme inhibitors. 1. Effect of thymidine substituents on affinity for the thymidine site of hamster cytoplasmic thymidine kinase.-J. Med. Chem., 1979, v.22, №6, pp.621-631.

33. Chu C.K., Schinazi R.F., Ahn M.K., Ullas G.V., Gu Zi P. Structure-Activity Relationships of Pyrimidine Nucelosides as Antiviral Agents for Human Immunodeficiency Virus Type 1 in Peripheral Blood Mononuclear CellsWJ.Med.Chem., 1989, V.32, pp.612-617.

34. Wigerinck P., Van Aercschot A., Janssen G., Claes P. Synthesis and antiviral activity of З'-heterocyclic substituted 3'-deoxythymidines. J. Med. Chem., 1990, v.33, pp.868873.

35. Pannecouque С., Van Poppel К., Balzarini J., Claes P., De Clercq E., Herdewijn P. Synthesis and antiviral evaluation of З'-substituted thymidine analogues derived from 3'-amino-3'-deoxythymidine. Nucleosides & Nucleotides, 1995, v.14, №3-5, pp.541-544.

36. Lin, TS; Prusoff, W. J. Synthesis and biological activity of several amino analogs of thymidineWMed. Chem., 1978, v.21, pp.109-112.

37. Karl R., Lemmen P., Ugi I. Synthesis of 3'-isocyano-3'-deoxythymidine. Synthesis Communications, 1989, pp.718-719.

38. Stolze K., Koert U. Synthesis of З'-Sugar- and Base-Modified Nucleosides and Their Application as Potent Chain Terminators in DNA SequencingWHelvetica Chimica Acta, 1999, V.82, pp.1311-1323.

39. Lin T.-S., Gao Y.-S., Mancini W.R. Synthesis and Biological Activity of Various 3'-Azido and З'-Amino Analogues of 5-Substituted Pyrimidine DeoxyribonucleosidesWJ.Med.Chem., 1983, V.26, pp.1691-1696.

40. Мельник С.Я., Бахмедова А.А., Ярцева И.В., Жукова О.С., Яворская Н.П. Синтез, превращения и биологическая активность модифицированных по углеводу 5-замещенных2'-дезоксиуридинов\\Биоорганическая химия, Т. 17, №8, с.1101-1109.

41. Holletz Т., Cech D. A Facile Procedure for the Reduction of Azido Nucleosides to Amines Using Polymer Bound TriphenylphosphineWSynthesis, 1994, v.8, pp.789-791.

42. Суржаков C.A., Дяткина Н.Б.\\Биоорганическая химия, 1991, т. 19, №7, стр.722-728.

43. Zehl A., Cech D. Synthesis and application of isothiocyanato derivatives of nucleo-sidesWLibigs Ann., 1997, pp.595-600.

44. Handlon a.L., Oppenheimer N.J. Thiol reduction of З'-azidothymidine to 3-aminothymidine: kinetics and biomedical implicationsWPharm. Res., 1988, pp.297-299

45. I. L. Cartwright and D. W. Hutchinson and V. W. Armstrong. The reaction between thiols and 8-azidoadenosine derivatives. Nucleic Acids Research, 1976, v.3, №9, pp.2331-2339

46. Шаркин Ю.А., Ясько M.B., Скоблов А.Ю., Александрова J1.A. Синтез 5'-Н-фосфонатов и фторфосфатов 2'-модифицированных нуклеозидов\\Биоорганическая химия, 1996, Т.22, №4, с.297-302.

47. Celewicz L., Urjasz W., Golankiewicz К. Synthesis of З'-N-Subsituted 3'-Amino-3'-deoxythymidine DerivativesWNucleosides&Nucleotides, 1993, V.12, №9, pp.951-966.

48. Garcia-Alles L.F., Magdalena J., Gotor V. Synthesis of Purine and Pyrimidine 3'-Amino-3'-deoxy- and 3'-Amino-2',3'-dideoxyxylonucleosides\\J.Org.Chem., 1996, V.61, pp.6980-6986.

49. Fitzner J.N., Shea R.G. Asymmetric carbon to nitrogen bond formation using optically-active allylic selenides: a new general method for the synthesis of N-protected optically-active .alpha.-amino acidsWJ.Org.Chem., 1985, v.50, pp.417-419.

50. Jasko M.V., Fedorov l.l„ Atrazhev A.M. Synthesis molecular and crystal structure of 3'-N-alkylamino-3'-deoxythymidines and some biochemical properties of their phosphorous esterWNucleosides&Nucleotides, 1995, v. 14, №1&2, pp.23-37.

51. Greengrass C.W., Hoople D.W.T., Street S.D.A., Hamilton F. 1-(3-cyano-2,3-dideoxy-p-D-erythro-pentofuranosyl)thymine (Cyanothymidine): synthesis and antiviral evaluation against Human Immunodeficiency VirusWJ. Med. Chem., 1989, v.32, pp.618-622.

52. Petersen G.V., Wengel J. Synthesis and Characterization of Short Oligonucleotide Segments Containing Nonnatural Internucleoside Amine- and Amide Link-agesWNucleosides&Nucleotides, 1995, V.14, №3-5, pp.925-928.

53. Petersen G.V., Wengel J. Synthesis of Thymidine Dimes Containing Piperazine in the Internucleoside Linkage and their Incorporation into OligodeoxynucleotidesWTetrahedron, V.51, №7, pp.2145-2154.

54. Fox J.J., Miller N.C. Nucleosides. XVI. Further Studies of Anhydronucleo-sidesWJ.Org.Chem., 1963, V.28, pp.936-941.

55. Tong W., Xi Z., Gioeli C., Chattapadhyaya J. Synthesis of new 2', З'-modified uridine derivatives from 2',3'-ene-2'-phenylselenonyl uridine by Michael addition reac-tionsWTetrahedron, 1991, v.47, №20, pp.3431-3450.

56. Minamoto K., Azuma K., Fujiwara N., Eguchi S. Synthesis and alkali-hydrolysis reactions of some 2,3'-(substituted imino)pyrimidine nucleosides lacking a 2'-hydroxyl groupWJ.Org.Chem., 1989, v.54, №19, pp.4543-4549.

57. Бахмедова A.A., Ярцева И.В., Мельник С.Я. Синтез потенциальных антиметаболитов в ряду модифицированных по углеводу пиримидиновых 2'-дезоксинуклеозидов\\Биоорганическая химия, 1995, Т.21, №1, с.45-48.

58. Дяткина Н.Б., Атражева Е.Д., Александрова Л.А., Краевский А.А., фон Янта-Липински М. Синтез новых терминаторных субстратов ДНК-полимераз нуклеозид-5'-трифосфатов с модифицированным углеводным остатком.\\Биоорганическая химия, 1988, т.14, №6, с.815-819.

59. Michelson А. М., Todd A. R. Deoxyribonucleosides and related compounds. Part V. cycloThymidines and other thymidine derivatives. The configuration at the glycosidic centre in thymidineWJ. Chem. Soc., 1955, pp.816-823.

60. Herdewijn P., Balzarini J., De Clercq E., Pauwels R., Baba M., Broder S. 3'-substituted 2', З'-dideoxynucleoside analogues as potential anti-HIV (HTLV-III/LAV) agentsWJ. Med. Chem., 1987, v.30, pp.1270-1278.

61. Obrecht R., Herrmann R., Ugi I. Isocyanide synthesis with phsphoryl chloride and diisopropylamineWSynth. Commun., 1985, pp.400-402.

62. Schreiber S.L., Ikemoto N., Synthesis of Chemically Reactive Analogues of AZT and their Biological Evaluation against HIVWTetr.Lett., 1988, V.29, №26, pp.3211-3214.

63. Staab H.A., Walther G. Synthese von IsothiocyanatenWLiebigs Ann., 1962, V.657, pp.104-107.

64. Molina P., Alajarin M., Arqes A. Convenient Improved Syntheses of Isocyanates or IsothiocyanatesWSynth.Commun., 1982, pp.596-597.

65. Motavia M.S., Pedersen E.B., Suwinski J.N., Carsten M.WArch.Pharm., 1990, v.323, №12, pp.949-953.

66. Haebich D„ Barth W. Synthesis of З'-О.г.З-Тп'агоМ-уО-З'-deoxythymidinesWHeterocycles, 1989, V.29, №11, pp.2083-2087.

67. Wigerinck P., Van Aerscot A., Claes P., Balzarini J., De Clercq E., Herdewijn P. 3'-(1,2,3-Triazol-1 -yl)-2',3'-dideoxythymidine and 3'-(1,2,3-Triazol-1-yl)-2',3'-dideoxyuridineWJ.Heterocyclic.Chem., 1989, V.26, pp.1635-1637.

68. L'abbe G., Hassner A., Regiochemistry in cycloaddition reactions of vinyl azides with phenylacetyleneWBull.Soc.Chim.Belg., 1971, V.80, pp.209-210.

69. L'abbe G., Galle J.E., Hassner A. Cycloaddition reactions of vinyl azides and P-iodo azides with acetylene estersWTetr.Lett., 1970, pp.303-306.

70. Olsen C.E.WActa Chim.Scand., 1974, В 28, pp.425.

71. Wigerinck P., Van Aershot A., Kerremans L., Balzarini J., De Clercq E., Claes P., Herdewijn P. Synthesis of Thymidine Analogues with a Cyanoimido Substitu-entWNucleosides&Nucleotides, 1991, v. 10, pp.583-584

72. Pannecouque C., Wigerinck P., Van Aershot A., Herdewijn P. Synthesis of Thymidine Analogues with a Cyanoimido SubstituentWTetr.Lett., 1992, v.33, pp.7609-7612.

73. Becker V., Eisenschmidt V.WJ. Prakt. Chem., 1973, v.513, pp.640-648

74. Prisbe E.J., Martin J.C. A Novel and Efficient Preparation of 21,31-DideoxynucleosidesWSynth.Commun., 1985, V.15, pp.401-409.

75. Ariza X., Garces J., Vilarrasa J. Azide- or Fluorina- Containing 2' & З'-Azolyluridines by Regioselective Opening of 1-(2',3'-Anhydro-p-D-lyxofuranosyl)uracils\\Tetr.Lett., 1992, V.33, №28, pp.4069-4072.

76. Tetrazoie-2"-yl)-3'-deoxythymidine 5'-Triphosphate\\Nucleosides&Nucleotides, 1995, V.14, №6, pp.1289-1300.

77. Малин А.А,, Островский В.А., Ясько М.В., Краевский А.А. О селективности взаимодействия 2',3'-ангидро-5'-0-бензоилтимидина с тетразолами\\Журнал органической химии, Т.31, №4, с.628-629.

78. Филичев В.В., Малин А.А., Ясько М.В., Щербинин М.Б., Островский В.А. Синтез 3'-5-(4фторфенил)тетразол-2-ил.-2',3'-дидезокситимидина\\Журнал органической химии, 1998, Т.34, №3, с.477-479.

79. Малин А.А., Корчевская Е.В., Щербинин М.Б., Островский В.А. Механизмы реакций 5'-0-бензоил-2,3'-ангидротимидина с нуклеофилами. III. Кинетика взаимодействия с триэтиламмоний тетразолидом в ДМФА\\Журнал органической химии, 2001, Т.37, №12, с.1848-1851.

80. Tronchet J.M.J., Zsely М., Sultan N. Novel Types of Bicyclonucleosides: Isoxazolidino-furanosylthyminesWNucleosides&Nucleotides, 1994, V.13, №.10, pp.2071-2079.

81. Froechlish M.L., Swartling D.J., Lind R.E., Mott A.W., Bergstrom D.E. An improved synthesis of 3'-keto-5'-0-tritylthymidine\\Nucleosides&Nucleotides, 1989, V.8, pp. 15291535.

82. Pan S., Wang J., Zhao K. Concerted Conjugate Addition of Nucleophiles to Aiken о ates. 2. Sunthesis of 2',3'-Dideoxy-2'-p-fluoro-3'-(/V-hydroxy-/V-methylamino)-D-arabinofuranosyl NucleosidesWJ.Org.Chem., 1999, V.64, pp.4-5.

83. Niu D., Zhao K. Concerted Conjugate Addition of Nucleophiles to Alkenoates. Part I: Mechanism of A/-Alkylhydroxylamine AdditionsWJ.Am.Chem.Soc., 1999, V.121, №11, pp.2456-2459.

84. Takamoto Т., Sudoh R., Nakagawa T. A new synthetic method of nitro sug-arsWTetr.Lett., 1971, pp.2053-2056.

85. Takamoto Т., Sudoh R., Nakagawa T. Studies on nitro sugars : Part II. Synthesis of benzyl 3,5-Di-0-benzyl-2-deoxy-2-Nitro-a-D-xylofuranoside and its transglycosylation with alkaliWCarbohydr.Res., 1973, V.27, pp.135.

86. Weber J.F., Talhouk J.W., Nachman R.J., You T.-P., Halaska R.C., Williams T.M., Mosher T.M. Methyl 2,3-dideoxy-3-nitro-D-erythro-pentofuranoside, isomers and deriva-tivesWJ.Org. Chem., 1986, V.51, pp.2702.

87. Huang J.J., Ragouzcos A., Rideout J.L. A. Novel Synthesis of 3'-Deoxy-3'-nitrothymidine via Nucleophilic Substitution with Nitrite AnionWJ.Heterocyclic Chem., 1995, V.32, pp.691-695.

88. Hansske F.,Madej D., Robins M.J. 2' And З'-ketonucleosides and their arabino and xylo reduction products : Convenient access via selective protection and oxidation of ribo-nucleosidesWTetrahedron, 1984, V.40, pp.125-135.

89. Bartet A.G.M., Graboski G.G. Conjugated nitroalkenes: versatile intermediates in organic synthesisWChem. Reviews, 1986, V.86, pp.751-762.

90. Cheng M.-C., Kim K.,Lin Yi-T, Plummer J.S.,Talhouk J., Wang Y„ You T.-P., Mosher H.S. 3-amino-2,3-dideoxy-D-erythro-furanose derivativesWTetrahedron, 1991, V.47, pp.4861-4868.

91. Tronchet J.M.J., Zsely M., Grand E., Laroze N., Iznaden M., Sollini M., Geoffroy M. Novel Types of Spin Labelled Nucleoside AnaloguesWNucleosides&Nucleotides, 1999, V.18, №4&5, pp.649-650.

92. Lin T.-S., Fischer P.H., Shiau G.T., Prusoff W.H. Antineoplastic agents. 1. Synthesis and antineoplastic activities of chloroethyl- and methylnitrosourea analogues of thymidineWJ.Med.Chem., 1978, V.21, pp.130-133.

93. Baraniak J., Korczynski D., StecW.J. Synthesis of 2',3'-Dideoxyribonucleoside-3'-A/-(2-oxo-1,3,2-oxathiaphospholanes) and Their Reactions with 5-OH Nucleosides and Fluoride lonWJ.Org.Chem., 1999, V.64, pp.4533-4536.

94. Montgomery J.A., Thomas H.J. NitrosoureidonucleosidesWJ.Med.Chem., 1979, V.22, №9, pp. 1109-1113.

95. Townsend L.B., Tipson R.S. Eds., "Nucleic Acid Chemistry", Wiley, New York, 1978, Part 1, p.227.

96. Reese C.B., Skone P.A. The Protection of Thymine and Guanine Residues in Oli-godeoxyribonucleotide SynthesisWJ.Chem.Soc.PerkinTransI, 1984, pp. 1263-1271.

97. Sung W.L.WJ.Chem.Soc.Chem.Commun., 1981, no.19705, 1089.

98. Lin T.-Sh., Prusoff W.H. Synthesis and Biological Activity of Several Amino Analogues of ThymidineWJ.Med.Chem., 1978, V.21, №1, pp.109-112.

99. Hartmann H„ Vogt M.W., Durno A.G., Hirsch M.S., Hunsmann G., Eckstein F. Enhanced in vitro inhibition of HIV-1 replication by S'-fluoro-S'-deoxythymidine compared to several other nucleoside analogsWAIDS Res.Human Retrovir., 1988, V.4, pp.457-466.

100. Cheng Y.-Ch., Prusoff W.H. Mouse Ascites Sarcoma 180 Deoxythymidine Kinase. General Properties and Inhibition StudiesWBiochemistry, 1974, V.13, №6, pp. 1179-1185.

101. Fisher P.H., Lin T.-S., Prusoff W.H. Reversal of the cytotoxicity of 3'-amino-3'-deoxythymidine by pyrimidine deoxyribonucleosidesWBiochem.Pharmacol., 1979, V.28, pp.991.

102. De Clercq E., Van Aerschot A., Herdewijn P., Baba M., Pauwels RM Balzarini J. Anti-HIV-1 Activity of 2',3,-dideoxynucleoside Analogues: Structure-Activity Relation-shipWNucleosides&Nucleotides, 1989, V.8, №5&6, pp.659-671.

103. Balzarini J., Baba M., Pauwels P, Herdewijn P., De Clercq E. Anti-retrovirus activity of З'-fluoro- and З'-azido-substituted pyrimidine 2',3'-dideoxynucleoside ana-loguesWBiochem.Pharmacol., 1988, V.37, pp.2847-2856.

104. Chen M.S., Woods K.L., PrusoffW.H. Molecular basis of the antineoplastic activity of 3'-amino-3'-deoxythymidine\\Mol.Pharm., 1984, V.25, pp.441-445.

105. Fisher P.H., Lin T.-S., PrusoffW.H. Effect of 3'-amino-3'-deoxythymidine on L1210 and P388 leukemias in miceWBiochem.Pharm., 1982, V.31, pp. 125-128.

106. Hampton A., Chawla R.R., Kappler F. Species or Isozyme-Specific Enzyme Inhibitors. 5. Differential Effects of Thymidine Substituents on Affinity for Rat Thymidine Kinase IsozymesWJ.Med.Chem., 1982, V.25, pp.644-649.

107. Kedar P.S., Abbots J., Kovacs J., Lesiak Т., Torrence P., Wilson S. Mechanism of HIV reverse transcriptase: enzyme-primer interaction as revealed through studies of a dNTP analogue, S'-azido-dTTPWBiochemistry, 1990, V.29, pp.3603-3611.

108. Sommadossi J.-P. Nucleoside analogs: similarities and differencesWCIin.Infect.Dis. (Suppl.1), 1993, V.16, S7-15.

109. Зинченко А.И., Барай B.H., Михайлопуло И.А.\\Химия природных соединений, 1989, стр.732-733

110. Ali S.M., Bridson Р.К. Synthesis of Extended Carbamate and Urea Linked Thymidine DimersWNucleosides&Nucleotides, 1996, V.15, №9, pp.1531-1543.

111. Kutterer K.M.K., Just G. Synthesis and hybridization studies of urea and carbamate linked thymidine dimers incorporated into oligodeoxynucleosidesWBioorg.Med.Chem.Lett., 1994, V.4, №3, pp.435-438.

112. Waldner A., De Mesmaeker A., Lebreton J., Fritsch V. Wolf R.M. Ureas as Backbone Replacements for the Phosphodiester Linkage in OligonucleotidesWSynlett, 1994, V.1, pp.57-61.

113. Yamagami K., Fujii A., Arita M. Antitumor Activity of 2'-Deoxy-2'-methylidenecytidine, a New 2-Deoxycytidine DerivativeUCancer Res, 1991, v.51, pp.2319-2323.

114. Matsuda A. Takenuki К., Tanaka M. Nucleosides and nucleotides. 97. Synthesis of new broad spectrum antineoplastic nucleosides, 2'-deoxy-2'-methylidenecytidine (DMDC) and its derivativesWJ.Med.Chem., 1991, v.34, pp.812-819.

115. Fischer P.H., Lin T.-S., Chen M.S., Prusoff W.H. Specific protection against the cytotoxicity of a new class of nitrosoureas by pyrimidine deoxyribonucleo-sidesWBiochem.Pharmacol., 1979, V.28, pp.2973-2978.

116. Lin T.-S., Brubaker W.F., Wang Zi-H., Park S., Prusoff W.H. Antineoplastic Activity of 3'-(Chloroethyl)nitrosourea Analogues of 2'-Deoxyuridine and 2'-Deoxy-5-fluorouridineWJ.Med.Chem., 1986, V.29, pp.862-865.

117. Tronchet J.M.J., Zsely M., Capek K., Komaromi I., Geoffroy M., Clercg E.D., Balzarini J. Anti-HIV derivatives of 1-(2,3-Dideoxy-3-n-hydroxyamino-p-D-№reo-pentofuranosyl)thymine\\Nucleosides&Nucleotides, 1994, V.13, №.9, pp.1871-1889.

118. Tronchet J.M.J., Zsely M., Lassount 0., Grigorov M., Grouiller A. Yet Another Mechanism of HIV Reverse Transcriptase InhibitionWNucleosides&Nucleotides, 1995, V.14, №3-5, pp.511-515.

119. Miller N. Fox J.J. Nucleosides. XXI. Synthesis of Some З'-Substituted 2',3'-Dideoxyribonucleosides of Thymine and 5-Methylcytosine\\J.Chem.Soc., 1964, V.29, pp. 1772-1776

120. A. Hartmann in Houben Weyl Vol. E4, 4th ed., Georg Thiem Verlag, Stuttgart, 1983, p.8531. БЛАГОДАРНОСТИ