Синергизм и конкуренция в процессах взаимодействия белков с полимерными сорбентами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор химических наук Демин, Александр Александрович

• Демин, Александр Александрович
• доктор химических наук
• 2002

Оглавление диссертации доктор химических наук Демин, Александр Александрович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. МНОГОКОМПОНЕНТНАЯ СОРБЦИЯ БЕЛКОВ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР)

1.1. Основные принципы взаимодействия белков с поверхностью.

1.2. Интерференция веществ в многокомпонентном процессе.

1.3. Сведения о синергизме в процессах многокомпонентной сорбции белков.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Модельные белки

2.2. Определение концентрации белков в многокомпонентном растворе.

2.3. Методы изучения сорбции белков.

2.4. Выбор сорбентов для изучения синергетических эффектов многокомпонентной сорбции белков.

ГЛАВА 3. СИНТЕЗ И ИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ ГЕТЕРОСЕТ

ЧАТЫХ СОРБЕНТОВ С ВАРЬИРУЕМЫМ СОДЕРЖАНИЕМ

ИОНОГЕННЫХ ГРУПП.

3.1. Синтез и исследование гетеросетчатых анионитов.

3.2. Гетеросетчатые аниониты с варьируемым содержанием ионогенного мономера.

3.3. Гетеросетчатые катиониты с варьируемым содержанием ионогенного мономера.

ГЛАВА 4. ПРИНЦИПЫ СОЗДАНИЯ КОМПОЗИЦИОННЫХ СОРБЕНТОВ

ДЛЯ ПРЕПАРАТИВНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ БЕЛКОВ.

4.1. Требования к сорбентам для препаративной хроматографии

4.2. Особенности микродисперсных сорбентов.

4.3. Создание композиционных сорбентов.

4.4. Диффузия белков в бипористых гранулах.

4.5. Целлосорбенты, использованные при исследовании процессов 96 многокомпонентной сорбции белков.

ГЛАВА 5. МНОГОКОМПОНЕНТНАЯ СОРБЦИЯ БЕЛКОВ НА ИОНООБМЕННЫХ СОРБЕНТАХ ДЛЯ ПРЕПАРАТИВНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

5.1. Определение области максимального связывания белков

5.2. Эффекты синергизма в процессах сорбции пар инсулин-рибонуклеаза, инсулин- лактальбумин на различных сорбентах.

5.3. Причины возникновения синергетических эффектов.

5.4. Влияние свойств белков на синергетические эффекты.

5.4.1. Играет ли роль в возникновении синергетических эффектов различие изоэлектрических точек модельных белков?

5.4.2. Роль асимметрии распределения заряженных групп на поверхности белковой глобулы в процессе заполнения сорбента.

5.4.3. Влияние конформации белковых макромолекул на процессы многокомпонентной сорбции.

5.5. Изменения избирательности в процессе заполнения зерна сорбента.

5.6. Переход от синергизма к конкуренции при ослаблении взаимодействия белок-сорбент.

ГЛАВА 6. ПОДХОД К СОЗДАНИЮ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ СОРБЕНТОВ

ДЛЯ ИОНООБМЕННОЙ ПРЕПАРАТИВНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

6.1. Необходимость создания ионообменных сорбентов нового типа.

6.2. Влияние концентрации ионогенных групп сорбента на выбор сорбционного механизма.

6.2.1. Влияние степени сульфирования «Полисорба» на соотношение сорбции инсулина и рибонуклеазы.

6.2.2. Сорбция бинарных белковых растворов на гетеросетчатых сорбентах с варьируемым содержанием ионогенных групп.

6.3. Влияние синергетических эффектов на разделение белков в процессах ионообменной хроматографии.

6.3.1. Фронтально-вытеснительная хроматография модельной смеси инсулина и лактальбумина на анионитах с варьируемой концентрацией ионогенных групп.

6.3.2. Использование ионообменного сорбента с уменьшенной концентрацией ионогенных групп в процессе получения высокоочищенного инсулина.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синергизм и конкуренция в процессах взаимодействия белков с полимерными сорбентами»

Бурный прогресс биотехнологии вызывает соответствующее развитие методов выделения и очистки биологически активных веществ (БАВ). Переход к индустриальным масштабам процессов очистки БАВ требует отхода от элюционных методов хроматографии. В тех случаях, когда используется препаративная хроматография высокого давления, построенная на элюционном разделении, необходима предочистка с целью максимального повышения содержания в смеси целевого компонента - только в этом случае можно вести наработку препаратов БАВ с большими загрузками колонн. Использование сорбентов, обладающих большой сорбционной емкостью по отношению к целевому веществу, позволяет уменьшить размеры хроматографических колонн и объемы используемых растворов, что очень важно с точки зрения экономичности проводимых процессов. Как правило, при выборе сорбента стремятся достичь максимальной емкости при сохранении требуемого разделения целевого продукта и сопутствующих примесей.

Наиболее предпочтительными для препаративных процессов являются полимерные сорбенты, для которых большие сорбционные емкости по БАВ являются следствием полифункциональности взаимодействий с БАВ и высокопроницаемой сетчатой полимерной структуры, содержащей поры и каналы, превосходящие по размерам сольватированные молекулы целевого вещества. Кроме того, полимерные сорбенты обладают важным преимуществом, оставаясь стабильными при промывке щелочными растворами, используемыми для асептики и регенерации.

В препаративных методах выделения и очистки БАВ важное место занимает ионообменная хроматография низкого давления. Экономичность и легкое укрупнение методов, разработанных в лаборатории, до производственных масштабов в ряде случаев делает этот метод незаменимым. Не является преувеличением утверждение, что вклад отечественных ученых в создание препаративной ионообменной хроматографии БАВ является пионерским [1]. Еще в 50-ые годы использование полимерных ионобменных сорбентов для широкомасштабного производства антибиотиков позволило обеспечить независимость нашей страны от зарубежных поставок. В дальнейшем методы ионообменной хроматографии с успехом были использованы для выделения антибиотиков, витаминов, а также белковых гормонов и ферментов [2-4].

На протяжении ряда лет в лаборатории физической химии полиэлектролитов ИВ С РАН ведутся работы по синтезу и исследованию сорбентов для препаративной хроматографии крупных органических ионов и созданию методов выделения и очистки на их основе. Целью исследований являлось создание сорбентов с максимальной сорбционной емкостью по отношению к крупным органическим ионам, в частности к белкам, и увеличение проницаемости полимерных сеток с целью уменьшения диффузионных затруднений. Большим успехом на этом пути было создание гетеросетчатых карбоксильных катионитов. Стремление к интенсификации динамических сорбционных процессов путем улучшения кинетики гетерогенного массообмена привело к созданию композиционных сорбентов (целлосорбентов).

Использование перечисленных сорбентов позволило успешно решить ряд прикладных задач. Вместе с тем большой опыт работ по выделению и очистке биологически активных соединений показывает, что в отличие от процессов выделения и очистки сравнительно низкомолекулярных ионов (например, антибиотиков) эффективность разделения белков на таких сорбентах не всегда соответствует современным требованиям относительно чистоты получаемых препаратов. Возможная причина этого состоит в том, что современные полимерные ионообменные сорбенты имеют емкости по белкам, достигающие сотен миллиграммов белка на миллилитр сорбента. При таких концентрациях белков в фазе сорбента создаются условия для латеральных взаимодействий сорбированных макромолекул и многослойной укладки. При разработке хроматографических методов разделения сложных смесей белков необходимо брать в расчет возможность межбелковых взаимодействий в фазе сорбента, которые могут оказать серьезное влияние на эффективность разделения.

В конечном счете, проблемы хроматографнческого разделения в интерактивных методах хроматографии определяются взаимодействием многокомпонентных смесей веществ с поверхностью и полимерными сетками. Разработка представлений о взаимодействии многокомпонентных смесей белков с полимерной поверхностью и полимерными сетками является одной из актуальных проблем современной химии. С многокомпонентной адсорбцией белков исследователи и разработчики сталкиваются при создании и изучении материалов, совместимых с кровью и тканями, выращивании клеточных культур на твердой подложке, взаимодействии контактных линз со слезами и др. Очевидно, что исследования процессов многокомпонентной сорбции белков имеют огромное значение и для разработки принципов препаративного хроматографнческого разделения белковых смесей.

Исследования процессов взаимодействия белков с полимерными сорбентами сопряжены с трудностями, возникающими вследствие того, что каждый белок обладает уникальными химическими, физическими и биохимическими свойствами. Сложная трехмерная структура белка приводит к различным типам взаимодействий с сорбентом. Эти трудности усугубляются, когда от исследований поведения белка в простейшей системе: сорбент - раствор белка, переходят к системам, включающим многокомпонентные белковые смеси. Работы по многокомпонентной сорбции и хроматографии базируются на представлениях о взаимовлиянии компонентов раствора при взаимодействии с веществом твердой фазы. Это взаимовлияние может осуществляться в виде конкуренции за ограниченное число сорбционных центров или в виде синергизма. В подавляющем большинстве работ исследование процессов многокомпонентной сорбции белков ведут, используя представления о конкуренции. Даже в тех случаях, когда исследователи имеют дело с материалами, обладающими ограниченной способностью к связыванию белков, такой подход не всегда бывает оправдан. Исследование взаимодействия смешанных белковых растворов с высокоемкостными ионообменными сорбентами для препаративной хроматографии, выполненное нами, показывает, что процессы сорбции могут сопровождаться значительными синергетическими эффектами. Эти эффекты оказывают огромное влияние на селективность сорбции и эффективность хроматографического разделения.

В связи с вышеизложенным представляемое в данной работе направление исследований, а именно, исследование взаимодействия многокомпонентных белковых смесей с высокоемкостными полимерными сорбентами для препаративной ионообменной хроматографии белков с целью определения условий, определяющих выбор между конкурентным и синергетическим механизмом многокомпонентной белковой сорбции, является актуальным как с теоретической точки зрения, так и для решения прикладных задач. Выявление факторов, влияющих на выбор между конкуренцией и синергизмом, позволит оптимизировать процессы тонкого разделения белков в препаративных хроматографических процессах.

Работа выполнялась в соответствии с плановыми исследованиями Института высокомолекулярных соединений РАН по госбюджетной теме «Поиск новых принципов повышения эффективности разделения биологически активных веществ в хроматографии» (№ государственной регистрации 01.99.0004673) при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (код проекта 9803-32435) и Санкт-Петербургского научного центра РАН (инициативный научный проект №21, 2000 г.).

Целью настоящей работы являлся поиск путей повышения эффективности разделения белков в ионообменной хроматографии.

С этой целью были синтезированы и охарактеризованы серии гетеросетчатых анионитов и катионитов, а также композиционных сорбентов с варьируемым числом ионогенных групп, детально изучено влияние на процесс многокомпонентной сорбции белков таких факторов как структура полимерных ионообменных сорбентов (макропористые, гетеросетчатые, композиционные), тип ионогенных групп сорбента (амино, сульфо, карбоксильные) и их концентрация в полимерной матрице, значения рН внешнего раствора, определяющие степень ионизации сорбента. В качестве модельных объектов были выбраны белки, отличающиеся изоэлектрическими точками, асимметрией расположения зарядов на поверхности белковой глобулы, конформацией. Для минимизации влияния морфологии сорбентов на диффузию белков в гранулы сорбента в работе были использованы белки с молекулярными массами до 25 кД.

Ввиду сложности рассматриваемых процессов исследование взаимодействия проводили в модельных системах, включающих сорбент и бинарный белковый раствор: инсулин-рибонуклеаза, инсулин-лактальбумин, инсулин-протамин, рибонуклеаза-лизоцим, рибонуклеаза-трипсин, рибонуклеаза-химотрипсин, рибонуклеаза-протамин.

Научная новизна. В ходе работы синтезированы и исследованы новые типы ионообменных сорбентов для препаративной хроматографии белков. Впервые проведено систематическое исследование взаимодействия бинарных белковых смесей с высокоемкостными ионообменными сорбентами. Исследование последовательной и совместной сорбции белков на сорбентах различных типов, показало, что в условиях, близких к условиям максимального связывания, определяемого значениями рН внешнего раствора, процесс осложнен явлениями синергизма: отсутствует вытеснение одного белка другим, более того в статических условиях увеличивается поглощение одного белка в присутствии второго. Установлено, что к синергетическим явлениям в процессах многокомпонентной сорбции приводит прочное связывание белка с сорбентом, определяемое в первую очередь количеством фиксированных ионогенных групп сорбента, приходящихся на одну молекулу белка. Уменьшение локальной концентрации ионогенных групп обеспечивает переход от синергетического механизма многокомпонентной сорбции к конкурентному. Впервые установлена связь эффективности разделения белковой смеси во фронтально-вытеснительном процессе с механизмом многокомпонентной сорбции. Показано, что только при реализации чисто конкурентного механизма сорбции белков становится возможным во фронтальных режимах хроматографического процесс насыщать сорбент избирательно сорбируемым белком.

Практическая значимость работы. Показано, что стремление добиться максимальной избирательности сорбента по отношению к данному белку путем создания ионообменных сорбентов с высокой плотностью ионообменных групп и проведения процесса сорбции в условиях близких к условиям максимального связывания белка может привести к реализации синергетического механизма многокомпонентной сорбции белков. В этом случае вследствие взаимодействий белок-белок в фазе сорбента падает эффективность разделения белковых компонентов в хроматографическом процессе. Определены факторы, влияющие на выбор механизма многокомпонентной сорбции белков. Синтезированы новые типы сорбентов с уменьшенной концентрацией ионогенных групп и продемонстрировано, что их использование позволяет повысить эффективность разделения белковых смесей.

Основные положения, выдвигаемые на защиту.

1. При последовательной и совместной сорбции белков на высокоемкостных сорбентах для препаративной хроматографии в условиях близких к условиям максимального связывания, как правило, наблюдаются отклонения от конкуренции за ограниченное число сорбционных центров.

2. В фазе сорбента при этом реализуется многослойная укладка белков. Части белковых молекул приходится взаимодействовать с сорбентом, модифицированным другим белком, при этом положение белков в сорбционном ряду, определяющем сродство белков с сорбентом, может меняться, т.е. в ходе заполнения гранул сорбента может происходить инверсия селективности сорбции белков. При одном и том же соотношении белок1 - белок 2 - сорбент концентрация белков в фазе сорбента может быть различной и зависит от порядка приведения белков в контакт с сорбентом.

3. Синергизм процессов многокомпонентной сорбции белков определяется прочностью взаимодействия белок-сорбент, ослабление связывания приводит к переходу от синергизма к конкуренции.

4. Синергизм взаимодействия препятствует разделению белков в хроматографических процессах. Для эффективного разделения белковых смесей во фронтально - вытеснительных процессах необходимо обеспечить реализацию конкурентного механизма сорбции. и

5. Как одна из возможностей обеспечения конкурентных условий в процессах многокомпонентной сорбции белков предлагается создание сорбентов со сниженной концентрацией ионогенных групп.

Апробация работы. Материалы работы были доложены на 20-ой конференции по высокомолекулярным соединениям (Алма-Ата - 1985), 5-ой Всесоюзной конференции «Методы получения и анализа химических реактивов» (Олайне - 1987), 5-ой Всесоюзной конференции «Биосинтез ферментов микроорганизмами.» (Ташкент - 1988), 1-ой Всесоюзной конференции «Препаративная хроматография ФАВ на полимерных сорбентах» (Ленинград -1988), Всероссийском симпозиуме «Биосепарация-96» (Санкт-Петербург - 1996), международной конференции «Новые подходы к полимерному синтезу и формированию макромолекул» (Санкт-Петербург - 1997), Всероссийском симпозиуме по теории и практике хроматографии (Москва - 1998), 16-ом Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Санкт-Петербург - 1998), Всероссийском симпозиуме по химии поверхности, адсорбции и хроматографии (Москва - 1999), 3-ем международном симпозиуме «Молекулярная подвижность и порядок в полимерных системах» (Санкт-Петербург - 1999), юбилейной научной конференции НИИОЧБп «Фундаментальные и прикладные вопросы биотехнологии и медицины» (Санкт-Петербург - 2000), международной конференции «Мембранные и сорбционные процессы» (Сочи - 2000), международной конференции «Иониты-2001» (Воронеж - 2001).

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Демин, Александр Александрович

Заключение

Основные практические рекомендации работы состоят в том, что при создании препаративных методов выделения и очистки белков необходимо предусмотреть двухэтапное использование ионообменных сорбентов с различными характеристиками. На первом этапе при разделении экстрактов животного и растительного сырья, продуктов микробного синтеза должны использоваться сорбенты с большой емкостью по отношению к белку, т.е. с большой плотностью ионогенных групп, что позволяет отделить от небелковых примесей и значительно их сконцентрировать. Нельзя не подчеркнуть, что в ряде случаев использование катионитов с высокой плотностью карбоксильных групп позволяет получить целевой белок с заданной степенью очистки. В качестве примеров можно привести создание процессов выделения и очистки террилитина и нейроаминидазы [204,205]. В тех случаях, когда целевому белку сопутствуют примеси близких по свойствам белков, необходимо на втором этапе для тонкого разделения использовать сорбенты со сниженным содержанием ионогенных групп.

По-видимому, такой путь является оптимальным. Хотя уход от условий максимального связывания путем изменения рН так же обеспечивает необходимые для тонкого разделения белков условия конкурентной сорбции, возможны ситуации, когда при изменении рН снижается емкость сорбента по целевому белку и в то же время увеличивается связывание примесных белков. При этом разделение белков может ухудшиться. Увеличение ионной силы, ослабляя электростатическое взаимодействие белков с сорбентом, может привести к увеличению связывания белков с сорбентом за счет гидрофобных взаимодействий. Поэтому использование ионообменных сорбентов со сниженной концентрацией ионогенных групп является универсальным методом повышения эффективности препаративного разделения белков.

Проведено систематическое исследование взаимодействия бинарных белковых смесей как с известными ранее, так и со специально синтезированными высокоемкостными сорбентами для препаративной ионообменной хроматографии. Показано, что в условиях близких к условиям максимального связывания, определяемого значениями рН раствора, процесс взаимодействия осложнен явлениями синергизма: отсутствует вытеснение одного белка другим, более того в статических условиях увеличивается поглощение одного белка в присутствии второго.

2.Показано, что наличие синергетических эффектов не зависит от морфологии использованных в работе сорбентов и от типа ионогенных групп. На характер наблюдаемых синергетических явлений не влияет ни различие в изоэлектрических точках глобулярных белков, ни асимметрия расположения заряженных групп на поверхности белковых глобул.

3.В условиях максимального связывания реализуется многослойная укладка белков, в ходе заполнения гранул может происходить инверсия селективности сорбции белков. При одном и том же компонентном составе белковой смеси конечные концентрации белков в фазе сорбента зависят от порядка приведения белков в контакт с сорбентом.

4. Совокупность полученных данных позволяет утверждать, что к синергетическим явлениям в процессах многокомпонентной сорбции приводит прочное связывание белков с фиксированными ионогенными группами сорбента.

5.Ослабление связывания белков при изменении рН (уменьшение степени диссоциации ионогенных групп сорбента или перезарядка белка) приводит к конкурентному механизму многокомпонентной сорбции. Такой же результат

168 достигается и при уменьшении концентрации ионогенных групп в матрице сорбента.

6.Исследование динамики сорбции и десорбции белков показало, что только при реализации конкурентного механизма сорбции становится возможным осуществление эффективных фронтально-вытеснительных процессов ионообменной хроматографии.

7. На примере очистки инсулинового препарата продемонстрирована возможность использования гетеросетчатого анионита АДГЭ-10-4 в процессах биотехнологии.

Список литературы диссертационного исследования доктор химических наук Демин, Александр Александрович, 2002 год

1. Самсонов Г.В. Сорбция и хроматография антибиотиков. -М., Л.: Изд.АН СССР, 1960.-175 с.

2. Шатаева Л.К., Кузнецова Н.Н., Елькин Г.Э. Карбоксильные катиониты в биологии. -Л.: Наука, 1979.-286 с.

3. Самсонов Г.В., Меленевский А.Т. Сорбционные и хроматографические методы физико-химической биотехнологии. -Л.: Наука, 1986.-229 с.

4. Samsonov G.V. Ion exchange sorption and preparative chromatography of biologically active molecules. -New York, London: Plenum Press Co, 1986. -163 p.

5. Andrade J.D. Principles of protein adsorption. //In: Surface and interfacial aspects of biomedical polymers: V.2. Protein adsorption. Ed. by J.D.Andrade. -New York: Plenum Press, 1985. -P.l-122.

6. Norde W. Adsorption of proteins from solution at the solid-liquid interface. // Adv. Colloid Interface Sci. -1986.-V.25.-P.267-340.

7. Lu C.F., Nadarajah A., Chittur K.K. A comprehensive model of multiprotein adsorption on surfaces. // J.Colloid Interface Sci.-1994.-V.168, №1.-P. 152-161.

8. Nadarajah A., Lu C.F., Chittur K.K. Modeling the dynamics of protein adsorption to surfaces. // In: Protein at interfaces II. Fundamentals and applications. Eds. by T.A.Horbett, J.L.Brash.-Washington: Am.Chem.Soc., -1995.-P.181-194.

9. Взаимодействие молекул белка с сетчатым полиэлектролитом в растворе. /Паутов В.Д., Кузнецова Н.П., Мишаева Р.Н., Ануфриева Е.В. // Высокомолек. соед. -1983.-Т.А25, №8 С.1599-1603.

10. Scopes R.K. Protein purifications: principles and practice.-2nd ed.-New-York, Berlin: Springer-Verlag, 1988. -329 p.

11. Retention model for high-performance ion—exchange chromatography. /Kopaciewich W., Rounds M.A., Fausnaugh J., Regnier F.E. // J.Chromatogr.-1983-V.266.-P.3-21.

12. Kopaciewich W., Regnier F.E. Mobil phase selection for the high-performance ion-exchange chromatography of proteins. // Anal.Biochem.-1983.-V.133.-P.251-259.

13. Rounds M.A., Regnier F.E. Evaluation of a retention model for high-performance ion-exchange chromatography using two different displacing salts. // J.Chromatogr-1984.-V.283.-P.37^15.

14. Lesins V., Ruckenstein E. Chromatographic probing of protein-sorbent interactions. // J.Colloid Interface Sci.-1989. V.I 32, №2.-P.566-577.

15. A domain approach to the adsorption of complex proteins: preliminary analysis and application to albumin. /Andrade J.D., Hlady В., Wei A.-P., Golander C.-G. // Croatica Chemica Acta.-1990.-V.63, №3.-P.527-538.

16. Шатаева JI.K., Широхова Т.О., Самсонов Г.В. Кинетика сорбции инсулина на пористых карбоксильных катионитах. // Коллоид.журн.-1975.-Т.38, №3-С.530-534.

17. Morrissey B.W., Stromberg R.R. The conformation of adsorbed blood proteins by infrared bound fraction measurements. // J.Colloid Interface Sci.-1974.-V.46, №1-P. 152-164.

18. McRitchie F. The adsorption of proteins at the solid/liquid interface. // J.Colloid Interface Sci.-1972.-V.38, №2.-P.484-488.

19. Drager R.R., Regnier F.E. Application of the stoichiometric displacement model of retention to anion-exchange chromatography of nucleic acids. // J.Chromatogr-1986.-V.359.-P. 147-163.

20. Multivalent ion-exchange model of biopolymer chromatography for mass overload conditions. /Cysewski P., Jaulmes A., Lemque R., Sebille В., Vidal-Madjar C., Jilge G. //J.Chromatogr.-1991.-V.548, №l+2.-P.61-79.

21. Velayudhan A., Horvath C. On the stoichiometric model of electrostatic interaction chromatography for biopolymers. // J.Chromatogr. 1986.-V.367, №1.-P.160-162.

22. Velayudhan A., Horvath C. Preparative chromatography of proteins. Analysis of the multivalent ion-exchange formalism. .// J.Chromatogr.-1988.-V.443.-P.13-29.

23. Cramer S.M., Brooks C.A. Ion-exchange displacement chromatography. //In: Chromatography in biotechnology. Ed. by Horvath Cs.-Washington: Am.Chem.Soc., 1992.-P.27-42.

24. Determination of ion-exchange equilibrium parameters of amino acid and protein systems by an impulse responce technique. /Whitley R.D., Brown J.M., Karajgikar N.D., Wang N.H.L. // J.Chromatogr.-1989.-V.483.-P.263-287.

25. Yon R.J. Cooperative cluster model for multivalent affinity interactions involving rigid matrices. // J.Chromatogr.-1988.-V.457.-P. 13-23.

26. Livingstone A.G., Chase H.A. Preparation and characterization of adsorbents for use in high-performance liquid affinity chromatography. // J.Chromatogr-1989-V. 481.-P. 159-174.

27. Gill D.S., Roush D.J., Wilson R.C. Adsorption heterogeneity and thermodynamic driving forces in anion exchange equilibria of cytochrome b5. // J.Colloid Interface Sci.- 1994.-V.167, JVol.-P.l-7.

28. Самсонов Г.В., Тростянская, Елькин Г.Э. Ионный обмен. Сорбция органических веществ. -JI: Наука, 1969. -335 с.

29. Электронная микроскопия гетеропористых биосорбентов. /Чернова И.А., Погодина Т.Е., Шатаева JI.K., Самсонов Г.В.// Высокомолек. соед. -1983. -Т.22А, №11. С.2403-2409.

30. Полторак О.М., Чухрай Е.С. Физико-химические основы ферментативного катализа. М. 1971.- 311 с.

31. Полторак О.М., Чухрай Е.С., Пряхин А.Н. Ассоциация белка при различных способах иммобилизации ферментов и проблемы оптимизации биокатализаторов. // Журн. физ. химии. -1978. -Т.52, №5. -С.1089 .

32. Камышный А.А. Адсорбция глобулярных белков на твердых носителях: некоторые физико-химические характеристики. //Журн. физ. химии. 1981. -Т.55, №3. -С.562

33. Sevastianov V.I., Laksina O.V. Adsorption desorption processes of proteins at solid/blood interfaces. // J.ColloidInterface Sci.-1986.-V.l 12, №l.-P.279-289.

34. Interaction of fibrinogen with solid surfaces of varying charge and hydrophobic-hydrophilic balance. /Brash J.L., Uniyal S., Pusineri C., Schmitt A. // J.Colloid Interface Sci.-1983.-V.95, N1.-P.28-36.

35. Castillo E.J., Koenig J.L., Anderson J.M., Jentoft N. Protein adsorption on soft contact lenses. // Biomaterials.- 1986.-V.7, Nl.-P.9-16.

36. Brynda E., Cepalova N.A., Stol M. Equilibrium adsorption of human fibrinogen on hydrophobic and hydrophilic surfaces. // J.Biomed.Mater.Res.-1984.-V.18, N6.-P.685-693.

37. Penners G., Priel Z., Silberberg A. Irreversible adsorption of triple helical soluble collagen monomers from solution to glass and others surfaces. // J.Colloid Interface Sci.-1981.-V.80, №2.-P.437^144.

38. Young B.R., Pitt W.G., Cooper S.L. Protein adsorption on polymeric biomaterials. I. Adsorption isotherms. // J.Colloid Interface Sci.-1988.-V.124, №l.-P.28-43.

39. Fraaije J.G.E.M., Lyklema J. Can a protein adsorb on its own? The thermodynamics of ion participation. // Croat.Chem.Acta.-1990.-V.63, №3-P.517-525.

40. Fraaije J.G.E.M., Lyklema J. Thermodynamics of ion binding by proteins. Phenomenological linkage relations for binding of electrolyte and interpretation by double layer theory. //Biophys.Chem.-1991.-V.39, №1.-P.31-44.

41. Fraaije J.G.E.M., Norde W, Lyklema J. Interfacial thermodynamics of protein adsorption, ion co-adsorption and ion binding in solution. II. Model interpretation of ion exchange in lysosyme chromatography. // Biophys.Chem.-1991.-V.40, №3.-P.317-327.

42. Jennissen H.P. Affinity separation/Hydrophobic separation chromatography. //In surface and interfacial aspects of biomedical polymers: protein adsorption. Ed. by J.D.Andrade.- New York: Plenum Press, 1985- P.295-322.

43. Barbucci R., Casolaro M., Magnani A. Characterization of biomaterial surfaces: ATR-FTIR, potentiometric and calorimetric analysis. // Clinical Mater-1992-V.ll, N1-4.-P.37-51.

44. Northrup S.N. Diffusion-controled ligand binding to multiple competing cell-bound receptors. // J.Phys.Chem.-1988.-V.92, N20.-P.5847-5850.

45. McCammon J.A., Harvey S.C. Dynamics of proteins and nucleic acids-Cambridge etc.: Cambridge Univ. Press, England, 1989.-234 p.

46. Norde W., Haynes C.A. Reversibility and the mechanism of protein adsorption. // In: Protein at interfaces II. Fundamentals and applications. Eds. by T.A.Horbett, J.L.Brash.-Washington: Am.Chem.Soc., 1995.-P.26-40.

47. Иорданский A.JI., Заиков Г.Е. Адсорбция белков в процессах взаимодействия полимеров с кровью и модельными растворами. // Высокомолек.соед-1983 -Т. А25, N3,- С.451-476.

48. Andrade J.D.and Hlady V. Plasma protein adsorption: the big twelve. // Ann.New York Acad.Sci.-1987. V.516.-P.158-172.

49. Rabe Т.Е., Tilton R.D. Surface diffusion of adsorbed proteins in the substrate glass transition temperature. // J.Colloid Interface Sci-1993.-V.159, N1.-P.243-245.

50. Исследование изменения структуры плазменных белков при адсорбции методом ЭПР / Зимина JI.A., Иорданский A.JL, Полищук А.Я., Григорян Г.Л., Моисеев Ю.В., Заиков Г.Б. // Высокомолек.соед.-1980.-Т. А22, №9.-С.2143-2148.

51. Иорданский А.Л., Уланов Б.П., Зимина Л.А., Заиков Г.Е. Структура слоев плазменных белков на гидрофобной полимерной поверхности // Докл. АН СССР.-1979.-Т.249, №2.-С.480-482.

52. Watkins R.W., Robertson Ch.R. A total internal-reflection technique for the examination of protein adsorption. // J.Biomed.Mater.Res.-1977.-V.ll, N6.-P.915-938.

53. Helfferich F.G., Klein G. Multicomponent chromatography: Theory of Interference-New York: Marcel Dekker, 1970.-419 p.

54. Wankat P.C. Large scale adsorption and chromatography.-CRC Press, Boca Raton (FL), 1986.-V.1-182 p.-V.2-179 p.

55. Hearn M.T.W.; Anspach B. Chemical, physical and biological concepts in isolation and purification of proteins. //In: Separation processes in biotechnology Ed. by Asenjo J.A.; New York: Marsel Dekker, Inc. 1990, -P. 17-65.

56. Bellot J.C., Condoret J.S. Theoretical study of the ion-exchange preparative chromatography of a two-protein mixture. // J.Cromatogr.-1993 V.635, №1,- P.1-17.

57. Nicoud R.M., Seidel-Morgenstern A. Adsorption isotherms. Experimental determination and application to preparative chromatography. // Isol.Purif.-1996.V.2, №3 .-P. 165-200.

58. Jain J.S., Snoeyink V.L. Adsorption from bisolute systems on active carbon. // J.Water Pollut Contr. Fed.-1973.-V.45, №12.-P.2463-2479.

59. Ram A.B., Sadana A. High resolution fractionation processes: chromatographic techniques. //Isol.Purif.-1994.-V.l.-P.45-62.

60. Mao Q.M., Hearn M.T.W. Optimization of affinity and ion-exchange chromatographic processes for the purification of proteins. // Biotechnol.Bioeng-1996.-V.52, №2.-P.204-222.

61. Helfferich F.G., James D.B. An equilibrium theory for rare-earth separation by displacement development. // J.Chromatogr.-1970.-V.46, №1.-P. 1-28.

62. Rhee H.-K., Amundson N.R. Analysis of multicomponent separation by displacement development. // AIChE J.-1982.-V.28, №3.-P.423^l33.

63. Helfferich F.G. Conceptual view of column behavior in multicomponent adsorption or ion-exchange systems // AIChE Symp.Ser.-1984.-V.80, №233.-P.l-13.

64. Frenz J., Horvath Cs. High performance displacement chromatography: calculation and experimental verification of zone development // AIChE J.-1985.-V.31, №>3.-P.400-414.

65. Hellferich F.G. Theory of multicomponent chromatography. A state of the art report. // J.Chromatogr.-1986.-V.373, №l.-P.45-60.

66. Katti A.M., Guiochon G.A. Prediction of band profiles in displacement chromatography by numerical integration of a semi-ideal model. // J.Chromatogr-1988.-V.449, №l.-P.25-40.

67. Golshan-Shirasi S., Guiochon G. Theoretical explanation of the displacement and tag-along effects. // Chromatographia.- 1990.-V.30, №11/12.-P.613-617.

68. Zhu J., Katti A.M., Guiochon G. Effect of displacer impurities on chromatographic profiles obtained in displacement chromatography. // Anal.Chem-1991.-V.63, №19.-P.2183-2188.

69. Yu Q., Do D.D. Computer simulations of displacement chromatography of systems with species-dependent saturation capacities. // J.Chromatogr.-1991 V.538, №2.-P.285-292.

70. Golshan-Shirasi S., El Fallah M.Z., Guiochon G. Effect of the intersection of the individual isotherms in displacement chromatography. // J.Chromatogr.-1991-V.541, №l-2.-P. 195-206.

71. Katti A.M., Dose E.V., Guiochon G. Comparison of the performances of overloaded elution and displacement chromatography for a given column. // J.Chromatogr.-1991.-V.540, №l-2.-P.l-20.

72. Huang J.X., Horvath Cs. Adsorption isotherms on high-performance liquid chromatographic sorbents. I. Peptides and nucleic acid constituents on octadecyl-silica. //J. Chromatogr.-1987.-V.406-P.275-284.

73. Huang J.X., Horvath Cs. Adsorption isotherms on high-performance liquid chromatographic sorbents. II. Proteins on cation exchangers with silica support. // J.Chromatogr.- 1987.-V.406.-P.285-294.

74. Katti A.M., Guiochon G. Quantitative comparison between the experimental band profiles of binary mixtures in overloaded elution chromatography and their profiles predicted by the semi-ideal model. // J.Chromatogr-1990.-V.499.-P.21-35.

75. Jacobson S., Golshan-Shirazi S., Guiochon G. Chromatographic band profiles and band separation of enantiomers at high concentration. // J.Am.Chem.Soc.-l990-V.112, №18.-P.6492-6498.

76. Katti A.M., Huang J.-X., Guiochon G. Prediction of the elution bands of proteins in preparative liquid chromatography. // Biotechnol.Bioeng.-1990.-V.36.-P.288-292.

77. Ruzgas T.A., Razumas V.J., Kulys J.J. Sequential adsorption of gamma interferon and bovine serum albumin on hydrophobic silicon surfaces. // J.Colloid Interface Sci.- 1990.-V. 151.-P. 136-143.

78. Hortacsu A., McCoy B.J. Chromatographic separation of dynamically interchanging protein isomers. // Isol. Pur if. 1996.-V.2.-P.133-148.

79. Hossein Md.M., Do D.D. Displacement chromatography of a binary mixture of proteins effect of protein aggregation. // Isol. Purif.-1996.-V.2, №2-P. 149-164.

80. Koj A., Hatton M., Wong K.L., Regoeczi E. Isolation and partial characterization of rabbit plasma (^-antitrypsin. // Biochem.J.-1978.-V.169, №3.-P.5 89-596.

81. De Bokx, Baarslag P.C., Urbach H.P. Modeling of displacement chromatography using non-ideal isotherms. // J.Chromatogr.-1992.-V.594, №l-2.-P.9-22.

82. Jandera P., Guichon G. Adsorption isotherms of cholesterol and related compounds in non-aqueous reversed phase chromatographic systems. // J.Chromatogr.-1992.-V.605, №1.-P. 1-17.

83. Tanford C. Protein denaturation. // Adv.Protein Chem.- 1968.-V.23.-P. 121-282.

84. Zhu J., Katti A.M., Guiochon G. Comparison of various isotherm models for predicting competitive adsorption data. // J.Chromatogr.-1991.-V.552, №l,2.-P.71-89.

85. Le Van M.D., Vermeulen T. Binary Langmuir and Freundlich isotherms for the ideal adsorbed solutions. // J.Phys.Chem.- 1981.-V.85, №22.-P.3247-3250.

86. Li Y.-L., Pinto N.G. Influence of lateral interactions on preparative protein chromatography. I. Isotherm behavior. // J.Chromatogr.A.-1994.-V.658.-P.445-457.

87. Li Y.-L., Pinto N.G. Model for ion-exchange equilibria of macromolecules in preparative chromatography.// J.Chromatogr.A.-1995.-V.702.-P.l 13-123.

88. Ruthven D.M. Principles of adsorption and adsorption processes.- New York: Wiley Interscience, 1984; 247 p.

89. Wei J., Hearn M.T.W. Protein interaction with immobilized metal affinity ligands with high ionic strength buffers. //Anal.Biochem.- 1996.-V.242, №l.-P.45-54.

90. McKay G., Duri B.A. Prediction of multicomponent adsorption equilibrium data using empirical correlations. // Chem.Eng.J. 1989.-V.41.-P.9-23.

91. Johnston A., Arnold F.N. The Temkin model describes heterogeneous protein adsorption. //Biochim.Biophys.Acta,- 1995.-V.1247.-P.293-297.

92. Dowd V., Yon R.J. Heterogeneous binding of aldolase to phosphocellulose: interpretation in terms of a concerted cluster model of multivalent affinity. // J.Chromatogr.- 1992.-V.627.-P.145-151.

93. Srivastava S.K., Tyagi R. Competitive adsorption of substituted phenol by activated carbon developed from the fertiliser waste slurry. // J.Water Res-1995-P.483^188.

94. Калиничев А.И. Нелинейная теория многокомпонентной динамики сорбции и хроматографии. // Успехи химии.-1996.-Т.65, №2.-С. 103-124.

95. Arnebrant Т., Walgren М.С. Proteins surfactant interactions at solid surfaces. // In: Proteins at interfaces II. Eds. by T.A.Horbett, J.L.Brash.-Washington.: Am.Chem.Soc., 1995.-P.239-254.

96. Tanford C. The hydrophobic effect: formation of micelles and biological membranes New York John Wiley & Sons, Inc, 1980. 312 p.

97. Arnebrant Т., Nilander T. Sequential and competitive adsorption of lactoglobulin and casein on metal surfaces. // J.Colloid Interface Sci.-1986.-V.l 11, №2.-P.529-533.

98. Wahlgren M.C., Arnebrant Т., Paulson M.A. The adsorption from solutions of p-lactoglobulin mixed with lactoferrin or lysozyme onto silica and methylated silica surfaces. // J.Colloid Interface Sci.-1993.-V.158.-P.46-53.

99. Collagen at interfaces. II: Competitive adsorption at collagen against albumin and fibrinogen. / Deyme M., Baszkin A., Proust J.E., Perez E., Albrecht G., Boissonnade M.M. // J.Biomed.Mater.Res.-1987.-V.21, №3.-P.321-328.

100. Baszkin A., Boissonade M.M. Competitive adsorption of albumin against collagen at solution-air and solution-polyethylene interfaces. // J.Biomed.Mater.Res.-1993-V.27,№2.-P. 145-152.

101. Sevastianov V.I, Kulik E.A., Kalinin I.D. The model of continuous heterogenity of protein-surface interactions for human serum albumin and human immunoglobulin G adsorption onto quartz // J.Colloid Interface Sci.-1991.-V.145, №1.-P. 191-206.

102. Vroman L., Adams A.L. Identification of rapid changes at plasma-solid interfaces. // J.Biomed.Mater.Res.-1969.-V.3, №l.-P.43-67.

103. Proteins, plasma and blood in narrow spaces of clot-promoting surfaces. /Vroman L., Adams A.L., Fischer G.C., Munoz P.C., Stanford M. // Adv.Chem.Ser.-1982,-V.199.-P.265-276.

104. Warkentin P.H., Lundstrom I., Tengvall P. Protein-protein interactions affecting proteins at surfaces. // In: Protein at interfaces II. Fundamentals and applications. Eds. by T.A.Horbett, J.L.Brash.-Washington.: Am.Chem.Soc., 1995.-P.163-180.

105. Malmsten M, Lassen B. Ellipsometry studies of protein adsorption at hydrophobic surfaces. // In: Protein at interfaces II. Fundamentals and applications. Eds. T.A.Horbett, J.L.Brash.-Washington.: Am.Chem.Soc., 1995.-P.228-237.

106. Adsorption competition between albumin and monoclonal immuno-gamma globulins on polystyrene latices. /Elgersma A.V., Zsom R.L.J, Lyklema J., Norde W. // J.Colloid Interface Sci.-1992.-V.152, №2.-P.410-428.

107. Chow S.N., Ho-Yuen B., Lee C.Y.G. Applications of monoclonal antibodies in solid-phase immunoassays of human luteinizing hormone // J.Appl.Biochem.-1985-V.7, №2,-P.l 14-121.

108. Lahav J. Competitive binding of thrombospondin, fibronectin, and fibrinogen to adsorbed proteins in multicomponent systems // J.Colloid Interface Sci.-1987.-V.119, №l.-P.262-274.

109. The adsorption of bovine serum albumin on positively and negatively charged polystyrene latices. /Elgersma A.V., Zsom R.L.J, Norde W., Lyklema J. // J.Colloid Interface Sci.-1990.-V.138, №1.-P. 145-156.

110. The adsorption of different types of monoclonal immunoglobulin on positively and negatively charged polystyrene latices. /Elgersma A.V., Zsom R.L.J, Norde W., Lyklema J. // Colloids and Surfaces.-1991.-V.54, №l-2.-P.89-101.

111. Arai T., Norde W. The behavior of some model proteins at solid-liquid interfaces. 2. Sequential and competitive adsorption. // Colloids and Surfaces.-1990.-V.51.-P.17-28.

112. Slack S.M., Bohnert J.L., Horbett T.A. The effects of surface chemistry and coagulation factors on fibrinogen adsorption from plasma. // Ann. New York Acad.Sci. 1987. -V. 516. -P. 223-243.

113. Beissinger R.L., Leonard E.F. Sorption kinetics of binary protein solutions: general approach to multi-component systems. // J.Colloid Interface Sci.-1982.-V.85-P.521-533.

114. Lee R.G., Adamson C., Kim S.W. Competitive adsorption of plasma proteins onto polymer surfaces. // Thrombosis Res 1974.-V.4.-P.485-490.

115. Adsorption behavior of multicomponent protein mixtures containing a. -proteinase inhibitor with the anion exchanger, 2 (diethylamino)ethyl -spherodex. /Finette G.V.S., Baharin B.S., Mao Q.-M., Hearn M.T.V. // Biotechnol.Prog.-1997.-V.-13.-P.265-275.

116. Scopes R.K. Protein Purification. New York.: Springer Verlag. -1994 - P.22-43.

117. W.Xu, F.E.Regnier. Protein-protein interactions on weak-cation exchange sorbent surfaces during chromatographic separations. //J.Chromatogr.-1998-V.828.-P.357-364.

118. Vroman L., Adams A.L. Adsorption of proteins out of plasma and solutions in narrow spaces. // J.Colloid Interface Sci.-1986.-V.Ill, №20.-P.391^02.

119. High-performance liquid chromatography as a technique to measure the competitive adsorption of plasma proteins onto latices. /Lensen H.G.W., Bargeman D., Bergveld P., Smolders C.A., Feijen T. // J.Colloid Interface Sci-1984.-V.99, №l.-P.l-8.

120. Zsom R.L.J. Dependence of preferential bovine serum albumin oligomer adsorption on the surface properties of monodisperse polystyrene latices. // J.Colloid Interface Sci.-1986.-V.l 11, №2.-P.434-445.

121. Automatic assay of urinary protein using Coumassie brilliant blue G-250. /Sano K., Kanamori K., Shiba A., Nahao M. // Anal.Biochem.-1981.-V.l 13.-P.197-201.

122. Структура и сорбционные свойства биотехнологического катионита СГ-1М по отношению к сывороточным белкам. /Чернова И.А., Шатаева Л.К., Крылова В.В., Блега М., Жукова Н.Г., Водолазов Л.И., Ласкорин Б.Н. //Журн.прикл.химии.-1991 .-Т.64, №3 .-С.686-691.

123. Чернова И.А., Самсонов Г.В. Структура гетерогенных сетчатых карбоксильных катионитов. //Высокомолек.соед. 1979.-Т.А21, №7-С.1608-1614.

124. О структуре и проницаемости биосорбента KMT М /Кузнецова H.H., Юрченко B.C., Папукова К.П., Муравьева Т.Д., Дубинина Н.И., Цуканова Л.М., Самсонов Г.В. //Высокомолек. соед-1979.-Т.Б21, №4.-С.244-248.

125. Гидратация сшитых карбоксильных сополимеров и особенности их пространственного строения /Юрченко B.C., Пасечник В.А., Кузнецова H.H., Рожецкая K.M., Соловьева Л .Я., Самсонов Г.В. // Высокомолек.соед-1979 -Т.А21, №1.-С.179-187.

126. Юрченко B.C., Папукова К.П., Самсонов Г.В. Взаимодействие с водой карбоксильных гетеросетчатых полиэлектролитов // Высокомолек.соед-1989.-Т.А32, №1.-С.61-65.

127. Полянский Н.Г., Горбунов Г.В., Полянская H.A. Методы исследования ионитов. М.: Химия, 1976. 208 с.

128. Обратимая сорбция гепарина на гетеросетчатых анионитах. /Демин A.A., Соловьев A.A., Никифорова Е.С., Папукова К.П., Самсонов Г.В. //Журн. прикл. химии. -1996. -Т.69, №5. -С.759-763.

129. Аниониты с регулируемым вкладом ион-ионных и гидрофобных взаимодействий в сорбцию биологически активных веществ./ Демин A.A., Папукова К.П., Никифорова Е.С., Самсонов Г.В. //Теория и практика сорбционных процессов. -Воронеж, 1999. -Вып.24. -С. 14-16.

130. Сетчатые полиоснования на основе №(1,1-диметил-3-диметиламинопропил) метакриламида и амидных кроссагентов./ Папукова К.П., Никифорова Е.С., Демин A.A., Самсонов Г.В. //Журн. прикл. химии. -2000 Т.73, №4,- С.631-633.

131. Кинетика сорбции инсулина и рибонуклеазы на иммобилизованных микродисперсиях сульфокатионита КУ-23. / Демин A.A., Дубинина Н.И., Меленевский А.Т., Папукова К.П., Пирогов B.C., Самсонов Г.В. // Журн.прикл.хим.-1984.-Т.57, №10.-С.2212-2217.

132. Кинетика сорбции инсулина на целлосорбентах, содержащих разное количество микродисперсии ионитов. / Дубинина Н.И., Меленевский А.Т., Демин A.A., Пирогов B.C., Папукова К.П., Самсонов Г.В. // Журн. прикл. ХИМ.-1986.-Т.59, №3.-С.610-613.

133. Кинетика сорбции физиологически активных веществ на полимерных композиционных сорбентах типа «Целлосорб». / Меленевский А.Т., Демин A.A., Тищенко Г.А., Пирогов B.C., Папукова К.П., Самсонов Г.В. // Журн.физ.хим.-1988.-Т.62, №8.-С.2138-2141.

134. Демин A.A., Пирогов B.C., Самсонов Г.В. Получение кристаллического инсулина со сниженной антигенностью. // Хим.-фарм.журн.-1987.-№5-С.612-615.

135. Меленевский А.Т., Демин A.A., Папукова К.П. Влияние кинетических и равновесных факторов на процессы сорбции и десорбции крупных органических ионов. // Журн.прикл.химии.-1992.-Т.65, №4 -С.935-938.

136. Сочетание ситового эффекта и ионообменной хроматографии в процессе очистки и выделения а2 интерферона на целлосорбенте ЦС-КУ-23. /Демин A.A., Самсонов Г.В., Пирогов B.C., Папукова К.П. // Прикл. биохим. микробиол.-1997.-Т.ЗЗ, №1.-С.28-30.

137. Демин A.A., Папукова К.П. Изменения пористости макропористого сорбента в ходе механической деструкции. // Журн.прикл.хим —2000.-Т.73, №5-С.844-847.

138. Improved separation of biologically active substances on some composite sorbents. /Demin A.A., Melenevsky A.T., Papukova K.P., Samsonov G.V. // European Polymer J. 2001.- Y.37, №1, - C.l 13-117.

139. О режимах сорбции медленно диффундирующих веществ в неподвижном слое. /Самсонов Г.В., Елькин Г.Э., Лебедев Ю.Я., Момот H.H. // В сб. Иониты и ионный обмен. Под ред. Самсонова Г.В. и Романкова Г.П.-Л.: Наука, 1975.-С.98-102.

140. Туницкий H.H. // Диффузия и случайные процессы. Новосибирск, 1970186 с.

141. О кинетике ионного обмена на ионитах в растворах средних концентраций. /Туницкий H.H., Каминский М.Д., Попков Ю.М., Николаев Н.И. // Докл. АН СССР.-1970.-Т. 193 .-С.649-652.

142. Иониты, сорбенты, носители. Каталог Изд. Черкассы, 1983 - 93 с.

143. Pelzbauer Z., Forst V. The Electron-Microscopic evalution of the porosity of ion exchangers. // Collect.Czechosl.Chem. Commun.-1966.-V.31.-P.2338-2343.

144. Кленин В.И., Щеголев С.Ю., Лаврушин В.И. Характеристические функции светорассеяния дисперсных систем.-Саратов.: Изд.Саратовск. ун-та, 1977176 с.

145. Щегол ев С.Ю., Кленин В.И. Определение размера и показателя преломления частиц из спектра мутности дисперсных систем. // Оптика и спектроскопия.-1971.-Т.31, №5.-С.794-802.

146. Bite M.G., Berezenco S., Reed F.J.S. Macrosorb kieselguhr-agarose composite adsorbents: new tools for downstreem process design and scale up. // In: Separations for biotechnology. Eds. by M.S.Verrall, M.J.Hudson.-London, 1987-P.193-199.

147. Peska J., Stamberg J., Pelzbauer Z. Regenerated cellulose in the bead form. Aftertreatments and their effects on the porous structure of cellulose. // Cell.Chem.Technol.-l 978.-V.21 .-P.419^128.

148. Лесене Й.В., Марушка A.B., Моцкайтите Б.Н. Получение целлюлозных гранул из растворов ацетилцеллюлозы. // Химия древесины.-1987.-№4-С.36-40.

149. Композиционные сорбенты для препаративной хроматографии физиологически активных веществ при низком давлении. / Папукова К.П., Пирогов B.C., Меленевский А.Т., Самсонов Г.В., Никифорова Е.С., Серохова И.В. //Журн.прикл.химии-1993 -Т.66, №3.-С.639-644.

150. Папукова К.П., Никифорова Е.С., Ежова Н.М., Самсонов Г.В. Способ получения композиционных анионитов. Патент РФ №1819272. 1993.

151. Золотарев П.П, Дубинин М.М. Об уравнениях, описывающих внутреннюю диффузию в гранулах адсорбента. // Докл. АН СССР.-1973.-Т.210.-С.136-139.

152. Золотарев П.П., Улин В.И. Начальная стадия внутридиффузионной кинетики адсорбции в адсорбенте с бипористой структурой. // Изв. АН СССР. Сер.хим.-1975.-№12.-С. 2370-2373.

153. Об описании процесса ионного обмена в гетерогенных ионообменных материалах. /Николаев Н.И., Золотарев П.П., Попков Ю.М., Улин В.И. // В кн.: Теория и практика сорбционных процессов.-Воронеж, 1981.-Вып. 14-С.12-14.

154. Decker Р., Hoeller Н. Ein zeitgradientenverfahren zur fraktionierung von kornigen materialien, insbesondere ionenaustauscherhharzen, durch Sedimentation. // J.Chromatogr.-1962.-V.7, №3.-P.392-399.

155. Malinsky Y., Seidl J. Jonexove skelety XIII. Sulfonace. //Chemicky Prumysl-1964.-V.14(39), №8.-P.416^119.

156. Макропористые фосфорорганические катеониты. /Николаев A.B., Грибанова И.Н., Холькина И.Д., Яковлева Н.И. // Изв.Сибирского Отделения АН СССР. Сер.хим.наук.-1967.-Вып.З, №7.-С.86-90.

157. Демин A.A., Дынкина И.М. Явления синергизма в процессах сорбции инсулина и рибонуклеазы катионитами. //Журн.физ. химии. -1995. -Т.69, №4.-С.718-721.

158. Демин A.A., Могилевская А.Д., Самсонов Г.В. Влияние конформации белковых макромолекул на процессы многокомпонентной сорбции. //Журн. прикл. химии. 1995. -Т.68, №9. -С. 1453-1455.

159. Демин A.A., Могилевская А.Д., Самсонов Г.В. Изменения избирательности в процессе многокомпонентной сорбции белков. //Журн. прикл. хим. -1996. -Т.69, №1. -С. 31-34.

160. Демин A.A., Могилевская А.Д., Самсонов Г.В. Особенности многокомпонентной сорбции белков катионитсодержащими композитами.// Журн. физ. химии. -1996,- Т.70,№11. -С.2059-2062.

161. Demin A.A., Mogilevskaya A.D., Samsonov G.V. Synergistic effects in the processes of protein multicomponent sorption. // J.of Chromatography A. -1997. -V. 760. -P.105-115.

162. Препаративное выделение гонадотропина и урокиназы на карбоксильных катионитах. /Демин А.А., Чернова И.А., Потапенко В.Е., Топоркова Е.Б., Шатаева JI.K. //Прикладная биохимия и микробиология. -1999.-Т.35, №4-С.382-387.

163. Демин А.А., Папукова К.П., Никифорова Е.С. Влияние асимметрии распределения зарядов белковой глобулы на процесс заполнения сорбента. //Журн. физ. химии. 2001. - Т.75, №1. - С. 156-160.

164. Demin A. A., Samsonov G.V. Peculiarities of protein sorption on high capacity ion exchangers //In book of abstracts "HPLC-96" San-Francisco. 1996. P.210.

165. Demin A.A., Melenevsky A.T., Chizhova E.B., Samsonov G.V. Phenomena of synergism and competition during multicomponent protein sorption // In book of abstracts "ISPPP'96". Luxembourg. 1996. P.176.

166. Бреслер C.E. Введение в молекулярную биологию.-JT.: Наука, 1973 578 с.

167. McKenzie Н., White F.T. Lysozyme and alfa-lactalbumine: structure, function, and interrelationships. //Adv. Protein Chem. -1991. -V.41. -P. 173-315.

168. Черкасов A.H., Пасечник В.А. Мембраны и сорбенты в биотехнологии Л., 1991.-С.112.

169. Tanford Ch., Wagner M.L. Hydrogen ion equilibria of lysozyme. //J.Amer.Chem.Soc. 1954,-V.76, №12. - P.3331-3336.

170. Donovan J.W., Laskowsky M., Scheraga H.A. Abnormal ionizable groups in lysozyme. //J.Amer.Chem.Soc. I960,- V.82, №9. -P.2154-2163.

171. Тенфорд Ч. Физическая химия полимеров. М.: Химия, 1965. - 772 с.

172. Структура и сорбционные свойства макропористого карбоксильного катионита КМ-2п. /Радзявичюс К.И., Шатаева Л.К., Самсонов Г.В., Жукова Н.Г., Зорина А.И., Ласкорин Б.Н. // Высокомолек. соед. -1982.-Т.А24, №5. -С. 1066-1071.

173. G.Weitzel. Chemie und physiologie biogener zink-verbindungen. //Angew. Chem. -1956. -V. 68, №17/18. -P.566-573.

174. Hypothesis of three-dimensional arrangement of polypeptide chain in trypsin. /Keil В., Dlouha V., Holeysovsky V., Sorm F. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1968. -V.33, №7. - P.2307-2315.

175. Кольцова С.В. Влияние электростатических взаимодействий на формирование и свойства растворимых гетеробелковых конъюгатов на основе протеолитических ферментов. // Биоорган, химия. -1995. Т.21, №6. -С.408-420.

176. Zinc-induced secondary structure transitions in human sperm protamines. /Gatewood J.M., Shrott G.P., Schmidt C.W., Bradbury E.M. //J.Biol.Chem. -1990. -V.265, №33. -P.20667-20672.

177. Адсорбция на заряженной поверхности макромолекул с неальтернирующими дипольными моментами. /Скворцов A.M., Бирштейн Т.М., Жулина Е.Б., Горбунов А.А. // Высокомолекуляр.соед. -1976. -Т.А18, №9. С.2097-2102.

178. Sophianopulos A.J., Van Holde К.Е. Physical studies of muramidase (lysosyme) II. PH-depended dimerization. //J.Biol.Chem. 1964. -V.239, №8. - P.2516-2524.

179. Меленевский A.T., Чижова Е.Б., Папукова К.П. Сорбция белков лизоцима и цитохрома С на карбоксильном катионите КМДМ-6-5. //Журн. физ.химии. -1999. Т.73, №9. -С. 1693-1696.

180. Меленевский А.Т., Чижова Е.Б., Папукова К.П., Многокомпонентная сорбция белковых систем лизоцим цитохром С и рибонуклеаза - цитохром С на карбоксильном катионите КМДМ-6-5. //Журн. физ.химии. - 2000. -Т.74, №8. -С.1454-1457.

181. Влияние степени сульфирования «Полисорба» на соотношение сорбции инсулина и рибонуклеазы. /Демин А.А., Папукова К.П., Никифорова Е.С., Самсонов Г.В. //Журнал физ. химии. 2000. -Т. 74, №4. -С.689-693.

182. Папукова К.П., Демин A.A., Никифорова Е.С. Аниониты для хроматографии белков на основе N-( 1,1 -диметил-3-диметиламинопропил)акриламида с кроссагентами амидного типа //Сорбционные и хромато графические процессы. -2001, Т.1, №3, С. 408-414.

183. Влияние синергетических эффектов на процессы разделения белков в ионообменной хроматографии. /Демин A.A., Папукова К.П., Никифорова Е.С., Павлова E.H. // Журн. прикл. химии. -2001 Т.74,№4. - С.625-629.

184. Дмитренко JI.B., Островский Д.И., Самсонов Г.В., Тугунов С.С., Сидорова Н.Д., Константинов B.JL, Смирнова Л.М., Люстгартен E.H. Способ получения кристаллического инсулина. АС СССР №389793. Бюлл. изобр. №30, 1973.

185. Демин A.A., Пирогов B.C., Самсонов Г.В., Дубинина H.H., Папукова К.П. Способ получения кристаллического инсулина со сниженной антигенностью. АС СССР №1238296.

186. Ривз У.Г. Иммунология диабета и инсулинотерапия // В кн. Последние достижения в клинической иммунологии. Под. ред. Томпсона P.A. М.: Медицина, 1983, 496 с.

187. Самсонов Г.В., Кольцова C.B., Шатаева Л.К., Кузнецова H.H., Рожецкая K.M., Парадеева И.К., Федорова З.Д. Способ выделения фермента тромболитического действия. Авт. свид. СССР № 584034. Бюл. изобр., 1977, №46, С.60.

188. Выделение нейраминидазы холерных вибрионов на карбоксильном катионите./Шатаева Л.К., Чернова И.А., Самсонов Г.В., Кобринский Г.Д., Соловьев В.Д., Домарадский И.В.// Вопр. мед. химии. 1978 - №4. - С.569-572.191

189. Демин A.A. Ионообменные сорбенты для препаративной хроматографии белков (новые подходы). //Сорбционные и хроматографические процессы.2001, Т.1, №2, -С. 268-270.

190. Меленевский А.Т., Демин A.A., Папукова К.П. Влияние pH раствора на выбор между конкуренцией и синергизмом при сорбции белковых смесей //Сорбционные и хроматографические процессы. 2001, Т.1, №2, - С. 289293.

191. Папукова К.П., Демин A.A., Никифорова Е.С. Аниониты для хроматографии белков на основе 1Ч-(1,1-диметил-3~диметиламинопропил)акриламида с кроссагентами амидного типа //Сорбционные и хроматографические процессы. -2001, Т.1, №3, С. 408-414.

192. Влияние pH раствора на выбор между конкуренцией и синергизмом при сорбции лизоцима и рибонуклеазы карбоксильным катионитом. /Демин A.A., Папукова К.П., Никифорова Е.С., Павлова E.H. //Журнал физ. химии.2002.-Т. 76, №6. -С.1118-1122.