Роль супрессора р53 и онкогенов Ras-Raf-MARK сигнальных путей в регуляции точек проверки клеточного цикла тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Саблина, Анна Александровна

• Саблина, Анна Александровна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Саблина, Анна Александровна

Введение

Актуальность проблемы

Цели и задачи исследования.

Научная новизна и практическая значимость работы.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общие принципы регуляции клеточного цикла

1.1.1. циклины и циклин-зависимые киназы

1.1.2. Стимуляция клеточного деления

1.2. Общие представления о "сверочных точках" клеточного цикла

1.3. р53 - ключевой компонент " сверочных точек" клеточного цикла

1.3.1. Функции опухолевого супрессора р

1.3.2. Механизм р53-зависимой остановки клеточного цикла в g^ фазе

1.3.3. Участие р53 в контроле перехода из 60 в Б фазу

1.3.4. р53-зависимая остановка клеточного цикла в Б фазе

1.3.5. Роль р53 в контроле перехода из 0>2 в митоз

1.3.6. Участие р53 в контроле точки проверки сборки веретена деления

1.4. р53 - сенсор разнообразных нарушений клетки и клеточного цикла

1.4.1. Механизмы функциональной активации р

1.4.2. Активация р53 при уменьшении пула нуклеотид-трифосфатов

1.4.3. Механизмы активации р53 при повреждениях ДНК

1.4.4. Индукция р53 при гипоксии

1.4.5. Индукция р53 при активации онкогенов

1.4.6. Индукция р53 в ответ на нарушение цитоскелета

1.4.7. Влияние клеточных контактов на функциональную активность 43 р

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль супрессора р53 и онкогенов Ras-Raf-MARK сигнальных путей в регуляции точек проверки клеточного цикла»

Актуальность проблемы

В основе неопластической трансформации клетки лежат нарушения работы систем контроля клеточного цикла, так называемых «сверочных точек» (checkpoints). Их нормальное функционирование предотвращает избыточную пролиферацию нормальных клеток, а также размножение аномальных клеток, в которых уже возникли или могут возникнуть различные генетические изменения. Кроме того, функция сверочных точек клеточного цикла ответственна за блокирование дальнейшей пролиферации клеток, в которых вследствие активации онкогенов наблюдается перманентная стимуляция клеточного деления. Таким образом, нарушение работы сверочных точек клеточного цикла приводит к возникновению постоянно пролиферирующих кпонов клеток, обладающих повышенной генетической нестабильностью, что предопределяет неуклонную опухолевую прогрессию, т.е. появление и отбор все более автономных и агрессивных клонов.

Согласно современным представлениям, опухолевый супрессор р53, нарушение функции которого является наиболее универсальным изменением в опухолевых клетках, играет ключевую роль в регуляции работы сверочных точек клеточного цикла. Ранее в нашей и других лабораториях были получены данные об участии р53 в контроле за сохранением правильного числа хромосом в клетке. В частности было показано, что при инактивации р53 скорость накопления клеток с нарушениями числа хромосом резко возрастает (Carder et ai., 1993; Tsukada et al., 1993; Agapova et al., 1996). Однако, механизмы этого феномена оставались практически не изученными.

Активация Ras-Raf-MAPK сигнального пути - событие, которое также очень часто наблюдается в новообразованиях человека. Она вызывает стимуляцию размножения клеток, изменения их морфологии и подвижности (Downward, 1996; Копнин, 2000), и, кроме того, в определенных клеточных контекстах, в частности в клетках с инактивированным р53, повышает нестабильность генома (Agapova et al., 1999). С другой стороны было показано, что активация Ras-Raf-MAPK сигнального пути в нормальных фибробластах грызунов может вызывать активацию р53 и остановку клеточного цикла (Lin et al., 1998). В связи с этим возникает вопрос о влиянии экспрессии онкогена ras и/или активации Raf-MAPK сигнального пути на функционирование сверочных точек клеточного цикла в зависимости от активности опухолевого супрессора р53.

Цели и задачи исследования.

Целью настоящей работы являлось изучение роли р53 и компонентов Raf-MAP киназного каскада в контроле сверочных точек клеточного цикла. Было запланировано решение следующих экспериментальных задач:

1. Исследовать роль р53 в контроле сверочных точек клеточного цикла, активируемых в ответ на разрушение тубулинового цитоскелета и/или дисфункцию веретена деления.

2. Изучить роль р53 в контроле пролиферации клеток, в которых произошло неправильное расхождение хромосом.

3. Исследовать роль компонентов Raf-MAP киназных каскадов в активации р53, возникающей вследствие разрушения микротрубочек и/или неправильной сегрегации хромосом.

4. Проанализировать влияние экспрессии активированных онкогенов ras и туе на функционирование р53-зависимых и р53-независимых сверочных точек клеточного цикла.

Научная новизна и практическая значимость работы.

Исследованы р53-зависимые механизмы, ответственные за поддержание диплоидного набора хромосом в клетке. Показано, что р53 не является ключевым компонентом точки проверки сборки веретена, контролирующей правильное взаимодействие кинетохоров с микротрубочками. Однако, впервые обнаружено, что при деполимеризации микротрубочек наблюдаются накопление и транскрипционная активация р53 и, как следствие, остановка клеточного цикла в G1. Показано, что сигналом для активации р53 в клетках крысиных фибробластов при разрушении микротубочек является рост фокальных контактов. Другим механизмом, предотвращающим накопление клеток с измененным числом хромосом, является функциональная активация р53 и контролируемых им сверочных точек клеточного цикла в ответ на появление микроядер, возникающих вследствие неправильной сегрегации хромосом в митозе. Впервые продемонстрировано, что активация р53 при разрушении микротрубочек или образовании микроядер опосредуется через Raf-MAP киназный каскад.

Исследовано влияние онкогена ras на функционирование сверочных точек клеточного цикла в зависимости от активности р53. Впервые показано, что при сохранении функции р53 экспрессия активированного онкогена ras хотя и вызывает морфологическую трансформацию, не отменяет остановку клеточного цикла в поврежденных клетках. При этом экспрессия онкогена ras в клетках с инактивированной функцией р53 приводит к дальнейшей отмене 8 функционирования сверочной точки в и практически полной инактивации функции сверочной точки в 02.

Результаты проведенной работы способствуют лучшему пониманию механизмов опухолевой прогрессии, что является важным для создания принципиально новых методов лечения злокачественных новообразований.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Саблина, Анна Александровна

Заключение

Нарушение функционирования систем, предотвращающих дальнейшее размножение клеток, в которых уже произошли или могут произойти различные генетические перестройки, является одной из главных причин возникновения неопластической трансформации. Опухолевый супрессор р53, нарушение функции которого является наиболее часто встречающимся изменением в различных новообразованиях человека, является ключевым компонентом сверочных точек клеточного цикла. Многочисленные сигнальные пути отслеживают состояние клетки, и в случае возникновения повреждений или сбоев, угрожающих приобретению наследственных изменений, вызывают активацию белка р53. Нарушение функционирования р53 приводит к бесконтрольному накоплению генетических повреждений и, в частности, возникновению клонов с измененным числом хромосом (Carder et al., 1993; Tsukada et al., 1993; Agapova et al., 1996). Однако, механизм контроля p53 за сегрегацией хромосом оставался непонятным. В настоящей работе мы показали, что р53 не участвует в контроле сверочной точки сборки веретена, которая активируется в ответ на дисфункцию веретена деления. Однако, мы выявили два неизвестных ранее фактора, вызывающих функциональную активацию р53. Во-первых, было обнаружено, что к ней приводит рост фокальных контактов, возникающий при деполимеризации микротрубочек. Во-вторых, мы показали, что сигналом к активации р53 является образование микроядер. По-видимому, индуцируемая активированным р53 остановка клеточного цикла в ответ на данные стимулы представляет собой один из механизмов, предотвращающих возникновение клеток с нарушенным числом хромосом.

Исследование механизма активации р53 в обработанных колцемидом клетках показало, что активация Raf-MAP киназного каскада ответственна за активацию р53 и контролируемой им сверочной точки в G1 фазе клеточного цикла как при разрушении тубулинового цитоскелета, так и при образовании микроядер. Заметим, что активация этого же сигнального пути вызывает р53-зависимую остановку клеточного цикла в клетках, трансформированных онкогеном ras (Lin et al., 1998). С другой стороны, активация Ras-Raf-MAPK сигнального пути - событие, которое довольно часто наблюдается в различных новообразованиях человека, - играет ключевую роль в способности онкогенов ras стимулировать вход в S фазу (Gille and Downward, 1999; Копнин, 2000). В связи с этим возникал вопрос: что обусловливает такое разнонаправленное действие онкогена ras на клеточный цикл? В частности, представляло интерес выяснить как активация Ras-MAPK сигнального пути влияют на работу сверочных точек клеточного цикла в клетках с разным статусом р53.

Мы обнаружили, что при сохранении функции р53 экспрессия активированного онкогена ras, хотя и вызывает морфологическую трансформацию, не отменяет остановку клеточного цикла в поврежденных клетках. Ингибирование остановки таких клеток в G1 может быть вызвано дополнительной гиперэкспрессией онкогена туе или инактивацией функции р53, причем задержка поврежденных клеток в G2 при этом не отменяется. Интересно, что экспрессия онкогена ras в клетках с инактивированной функцией р53 приводит к дальнейшему ослаблению функционирования сверочной точки в G1 и практически полной инактивации функции сверочной точки в G2. Таким образом, нам удалось выявить кооперативное действие инактивации р53 и активации ras-регулируемых сигнальных путей в негативной регуляции

126 сверенных точек клеточного цикла, по-крайней мере, в клетках крысиных фибробластах.

Исходя из вышеизложенного, можно полагать, что перманентное повышение активности Раэ-РаММАРК сигнального пути вызывает активацию р53 и, как следствие, остановку клеточного цикла, в результате чего пролиферация аномальных клеток блокируется. В то же время, активация этого сигнального пути в р53-дефектных клетках вызывает инактивацию функции сверочных точек, что способствует возникновению генетически измененных клонов.

1. Исследованы р53-зависимые механизмы, ответственные за поддержание диплоидного набора хромосом в клетке. Показано, что р53 не является ключевым компонентом точки проверки сборки веретена, контролирующей правильное взаимодействие кинетохоров с микротрубочками. Однако, при деполимеризации микротрубочек в клетках крысиных и человечьих фибробластов наблюдаются накопление и транскрипционная активация р53 и, как следствие, остановка клеточного цикла в

2. При разрушении микротрубочек в крысиных фибробластах сигналом для активации р53 является рост фокальных контактов. В клетках, в которых обработка колцемидом не приводит к росту фокальных контактов (человеческие эпителиальные клетки линии МСР-7) или при блокировании образования фокальных контактов прикреплением к поли-1-лизину не происходит повышение активности р53 в ответ на деполимеризацию микротрубочек.

3. Обнаружено, что другим механизмом, предотвращающим накопление клеток с измененным числом хромосом, является функциональная активация р53 и контролируемых им сверочных точек клеточного цикла в ответ на образование микроядер, возникших вследствие неправильной сегрегации хромосом в митозе. Степень активации р53 в этом случае прямо коррелирует с числом микроядер в клетке.

4. Показано, что активация р53 при разрушении микротрубочек или образовании микроядер опосредуется через КаМ\/1АР киназный каскад.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Саблина, Анна Александровна, 2000 год

1. Зайчук Т.Д., Н.В. Кузнецов, B.C. Оссовская, Б.П. Копнин, П.М. Чумаков. 1993. Специфические ДНК-связывающие свойства онкобелка р53 из опухолевых клеток человека. Докл. РАН. 330:386-389.

2. Иванов, А. В. 1999. Изучение роли антионкогена р53 в механизме устойчивости к трансформации онкогеном ras. Автореферат.

3. Иванов, А. В., П.Б. Копнин, Р. В. Кондратов, В. С. Оссовская, Б. П. Копнин, и П.М. Чумаков. 2000. Мутация р53 необходима для стабильной трансформации клеток REF52 онкогенами myc+ras. Мол. Биол., in press.

4. Копнин, Б.П. 2000. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза. Биохимия. 65:5-33.

5. Чумаков, П.М. 2000. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью. Биохимия. 65:34-46.

6. Agapova, L.S., G.V. llyinskaya, N.A. Turovets, A.V. Ivanov, P.M. Chumakov, and B.P. Kopnin. 1996. Chromosome changes caused by alterations of p53 expression. Mutat. Res. 354:129-138.

7. Agapova, L.S., A.V. Ivanov, A.A. Sablina, P.B. Kopnin, O.I. Sokova, P.M. Chumakov, and B.P. Kopnin. 1999. p53-dependent effects of RAS oncogene on chromosome stability and cell cycle checkpoints. Oncogene. 18:31353142.

8. Agarwal, M.L., A. Agarwal, W.R. Taylor, O. Chernova, Y. Sharma, and G.R. Stark. 1998. A p53-dependent S-phase checkpoint helps to protect cells from DNA damage in response to starvation for pyrimidine nucleotides. Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 95:14775-80.

9. Agarwal, M.L., A. Agarwal, W.R. Taylor, and G.R. Stark. 1995. p53 controls both the G2/M and the G1 cell cycle checkpoints and mediates reversible growth arrest in human fibroblasts. Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 92:8493-8497.

10. Alevizopoulos, K., J. Vlach, S. Hennecke, and B. Amati. 1997. Cyclin E and c-Myc promote cell proliferation in the presence of p16INK4a and of hypophosphorylated retinoblastoma family proteins. EMBO J. 16:5322-5333.

11. An, W.G., M. Kanekal, M.C. Simon, E. Maltepe, M.V. Blagosklonny, and L.M. Neckers. 1998. Stabilization of wild-type p53 by hypoxia-inducible factor 1a. Nature. 392:405-408.

12. Bachelder, R.E., A. Marchetti, R. Falcioni, S. Soddu, and A.M. Mercurio. 1999. Activation of p53 function in carcinoma cells by the alpha6beta4 integrin. J. Biol. Chem. 274:20733-20737.

13. Balcer-Kubiczek, E.K., J. Yin, K. Lin, G.H. Harrison, J.M. Abraham, and S.J. Meltzer. 1995. p53 mutational status and survival of human breast cancer MCF-7 cell variants after exposure to X rays or fission neutrons. Radiat. Res. 1425:256-262.

14. Banin, S., L. Moyal, S.-H. Shieh, Y. Taya, C.W. Anderson, L. Chessa, N.I. Smorodinsky, C. Prives, Y. Reiss, Y. Shiloh, and Y. Ziv. 1998. Enhanced phosphorylation of p53 by ATM in response to DNA damage. Science. 281:1674-1677.

15. Bershadsky, A., A. Chausovsky, E. Becker, A. Lyubimova, and B. Geiger. 1996. Involvement of microtubules in the control of adhesion-dependent signal transduction. Curr. Biol. 6:1279-1289.

16. Bishop, J.M. 1991. Molecular themes in oncogenesis. Cell. 64:235-248.

17. Blattner, C„ E. Tobiasch, M. Litfen, H.J. Rahmsdorf, and P. Herrlich. 1999. DNA damage induced p53 stabilization: no indication for an involvement of p53 phosphorylation. Oncogene. 18:1723-1732.

18. Brehm, A., E.A. Miska, D.J. McCance, J.L. Reid, A.J. Bannister, and T. Kouzarides. 1998. Retinoblastoma protein recruits histone deacetylase to repress transcription. Nature. 391:597-601.

19. Brown, C.R., S.J. Doxsey, E. White, and W.J. Welch. 1994. Both viral (adenovirus E1B) and cellular (hsp 70, p53) components interact with centrosomes. J. Cell Physiol. 160:47-60.

20. Buckbinder, L., R. Talbott, B.R. Seizinger, and N. Kley. 1994. Gene regulation by temperature-sensitive p53 mutants: identification of p53 response genes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91:10640-10644.

21. Bunz, F. 1998. Requirement for p53 and p21 to sustain G2 arrest after DNA damage. Science. 282:1497-1501.

22. Cahill, DP., C. Lengauer, J. Yu, G.J. Riggins, J.K. Willson, S.D. Markowitz, K.W. Kinzler, and B. Vogelstein. 1998. Mutations of mitotic checkpoint genes in human cancers. Nature. 392:300-303.

23. Calabro, V., T. Parisi, A. Di Cristofano, and G. La Mantia. 1999. Suppression of Ras-mediated NIH3T3 transformation by p19ARF does not involve alterations of cell growth properties. Oncogene. 18:2157-2162.

24. Campbell, S.L., R. Khosravi-Far, K.L. Rossman, G.J. Clark, and C.J. Der.1998. Increasing complexity of Ras signaling. Oncogene. 17:1395-1413.

25. Canman, C.E., D.-S. Lim, K.A. Cimprich, Y. Taya, K. Tamai, K. Sakaguchi, E. Appella, M.B. Kastan, and J.D. Siliciano. 1998. Activation of the ATM kinase by ionizing radiation and phosphorylation of p53. Science. 281:1677-1679.

26. Carder, P., A.H. Wyllie, C.A. Purdie, R.G. Morris, S. White, J. Piris, and C.C. Bird. 1993. Stabilised p53 facilitates aneuploid clonal divergence in colorectal cancer. Oncogene. 8:1397-1401.

27. Chan, T.A., H. Hermeking, C. Lengauer, K.W. Kinzler, and B. Vogelstein.1999. 14-3-3cr is required to prevent mitotic catastrophe after DNA damage. Nature. 401:616-620.

28. Chen, J., P.K. Jackson, M.W. Kirschner, and A. Dutta. 1995. Separate domains of p21 involved in the inhibition of Cdk kinase and PCNA. Nature. 374:386-388.

29. Chen, J., P. Saha, S. Kornbluth, B. Dynlacht, and A. Dutta. 1996. Cyclin-binding motifs are essential for the function p21/cip1. Mol. Cell. Biol. 16:46734682.

30. Chen, P., N. Ellmore, and B.E. Weissman. 1994. Functional evidence for a second tumor suppressor gene on human chromosome 17. Mol. Cell.Biol. 14:534-542.

31. Chernov, M., C.V. Ramana, V.V. Adler, and G.R. Stark. 1998. Stabilization and activation of p53 are regulated independently by ifferent phosphorylation events. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95:2284-2289.

32. Cho, Y., S. Gorina, P.D. Jeffrey, and N.P. Pavletich. 1994. Crystal structure of a p53 tumor suppressor-DNA complex: understanding tumorigenic mutations. Science. 265:346-355.

33. Chowdary, D.R., J.J. Dermody, K.K. Jha, and H.L. Ozer. 1994. Accumulation of p53 in a mutant cell line defective in the ubiquitin pathway. Mol. Cell. Biol. 14:1997-2003.

34. Comer, K.A., P.A. Dennis, L. Armstrong, J.J. Catino, M.B. Kastan, and C.C. Kumar. 1998. Human smooth muscle alpha-actin gene is a transcriptional target of the p53 tumor suppressor protein. Oncogene. 16:1299-1308.

35. Cross, S.M., C.A. Sanchez, C.A. Morgan, M.K. Schimke, S. Ramel, R.L. Idzerda, W.H. Raskind, and B.J. Reid. 1995. A p53-dependent mouse spindle checkpoint. Science. 267:1353-1356.

36. Dameron, K.M., O.V. Volpert, M.A. Tainsky, and N. Bouck. 1994a. Control of angiogenesis in fibroblasts by p53 regulation of thrombospondin-1. Science. 265:1582-1584.

37. Dameron, K.M., O.V. Volpert, M.A. Tainsky, and N. Bouck. 1994b. The p53 tumor suppressor gene inhibits angiogenesis by stimulating the production of thrombospondin. Cold Spring Harb.Symp.Quant.Biol. 59:483-489.

38. Debbas, M., and E. White. 1993. Wild-type p53 mediates apoptosis by E1A, which is inhibited by E1B. Genes Dev. 7:546-554.

39. Del Sal, G., E.M. Ruaro, R. Utrera, C.N. Cole, A.J. Levine, and C. Schneider. 1995. Gas1 -induced growth suppression requires a transactivation-independent p53 function. Mol. Cell. Biol. 15:7152-7160.

40. Dhanasekaran, N., and E. Premkumar Reddy. 1998. Signaling by dual specificity kinases. Oncogene. 17:1447-55.

41. Di Leonardo, A., S.P. Linke, K. Clarkin, and G.M. Wahl. 1994. DNA damage triggers a prolonged p53-dependent G1 arrest and long- term induction of Cip1 in normal human fibroblasts. Genes Dev. 8:2540-2551.

42. Downward, J. 1996. Control of ras activation. Cancer Surveys. 27:87-100.

43. Dulic, V., W.K. Kaufmann, S.J. Wilson, T.D. Tlsty, E. Lees, J.W. Harper, S.J. Elledge, and S.I. Reed. 1994. p53-dependent inhibition of cyclin-dependent kinase activities in human fibroblasts during radiation-induced G1 arrest. Cell. 76:1013-1023.

44. Elledge, S.J. 1996. Cell cycle checkpoints: preventing an identity crisis. Science. 274:1664-1672.

45. Enomoto, T. 1996. Microtubule disruption induces the formation of actin stress fibers and focal adhesions in cultured cells: possible involvement of the rho signal cascade. Cell Struct. Funct. 21:317-326.

46. Ewen, M.E., and S.J. Miller. 1996. p53 and translational control. Biochim. Biophys. Acta. 1242:181-184.

47. Facchini, L.M., and L.Z. Penn. 1998. The molecular role of Myc in growth and transformation: recent discoveries lead to new insights. FASEB J. 12:633-651.

48. Fan, J., and J.R. Bertino. 1997. K-ras modulates the cell cycle via both positive and negative regulatory pathways. Oncogene. 14:2595-2607.

49. Filmus, J., A.I. Robles, W. Shi, M.J. Wong, L.L. Colombo, and C.J. Conti. 1994. Induction of cyclin D1 overexpression by activated ras. Oncogene. 9:3627-3633.

50. Fritsche, M., C. Haessler, and G. Brandner. 1993. Induction of nuclear accumulation of the tumor-suppressor protein p53 by DNA-damaging agents. Oncogene. 8:307-318.

51. Fuchs, S.Y., V. Adler, T. Buschmann, Z. Yin, X. Wu, S.N. Jones, and Z. Ronai. 1998a. JNK targets p53 ubiquitination and degradation in nonstressed cells. Genes Dev. 12:2658-2663.

52. Fuchs, S.Y., V. Adler, M.R. Pincus, and Z. Ronai. 1998b. MEKK1/JNK signaling stabilizes and activates p53. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95:1054110546.

53. Fukasawa, K., T. Choi, R. Kuriyama, S. Rulong, and G. F. Vande Woude. 1996. Abnormal centrosome amplification in the absence of p53. Science 271: 1744-1747.

54. Funk, W.D., D.T. Pak, R.H. Karas, W.E. Wright, and J.W. Shay. 1992. A transcriptionally active DNA-binding site for human p53 protein complexes. Mol. Cell. Biol. 12:2866-2871.

55. Gabrielli, B.G., J.M. Clark, A.K. McCormack, and K.A.O. Ellem. 1997. Ultraviolet light-induced G2 phase cell cycle checkpoint blocks cdc25-dependent progression into mitosis. Oncogene. 15:749-758.

56. Galaktionov, K., X. Chen, and D. Beach. 1996. Cdc25 cell-cycle phosphatase as a target of c-myc. Nature. 382:511-517.

57. Giaccia, A.J., and M.B. Kastan. 1998. The complexity of p53 modulation: emerging patterns from divergent signals. Genes Dev. 12:2973-83.

58. Gille, H., and J. Downward. 1999. Multiple ras effector pathways contribute to G(1) cell cycle progression. J. Biol. Chem. 274:22033-22040.

59. Ginsberg, D., F. Mechta, M. Yaniv, and M. Oren. 1991. Wild-type p53 can down-modulate the activity of various promoters. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88:9979-9983.

60. Goga, A., X. Liu, T.M. Hambuch, K. Senechal, E. Major, A.J. BErk, O.N. Witte, and C.L. Sawyers. 1995. p53 dependent growth suppression by the c-Abl nuclear tyrosine kinase. Oncogene. 11:791-799.

61. Gopalkrishnan, R.V., E.W.F. Lam, and C. Kedinger. 1998. The p53 tumor suppressor inhibits transcription of the TATA-less mouse DP1 promoter. J. Biol. Chem. 273:10972-10978.

62. Gottlieb, T.M., and M. Oren. 1996. p53 in growth control and neoplasia. Biochim. Biophys. Acta. 1287:77-102.

63. Graeber, T.G., C. Osmanian, T. Jacks, D.E. Housman, C.J. Koch, S.W. Lowe, and A.J. Giaccia. 1996. Hypoxia-mediated selection of cells with diminished apoptotic potential in solid tumours. Nature. 379:88-91.

64. Grana, X., and E.P. Reddy. 1995. Cell cycle control in mammalian cells: role of cyclins, cyclin dependent kinases (CDKs), growth suppressor genes and cyclin-dependent kinase inhibitors (CKIs). Oncogene. 11:211-219.

65. Gu, W., X.L. Shi, and R.G. Roeder. 1997. Synergistic activation of transcription by CBP and p53. Nature. 387:819-823.

66. Guan, J.L., and D. Shalloway. 1992. Regulation of focal adhesion-associated protein tyrosine kinase by both cellular adhesion and oncogenic transformation. Nature. 358:690-692.

67. Guilford, P., J. Hopkins, J. Harraway, M. McLeod, N. McLeod, P. Harawira, H. Taite, R. Scoular, A. Miller, and A.E. Reeve. 1998. E-cadherin germline mutations in familial gastric cancer. Nature. 392:402-405.

68. Hainaut, P., and J. Milner. 1993. Redox modulation of p53 conformation and sequence-specific DNA binding in vitro. Cancer Res. 53:4469-4473.

69. Hall, P.A., J.M. Kearsey, P.J. Coates, D.G. Norman, E. Warbrick, and L.S. Cox. 1995. Characterisation of the interaction between PCNA and Gadd45. Oncogene. 10:2427-2433.

70. Hannon, G.J., D. Demetrick, and D. Beach. 1993. Isolation of the Rb-related p130 through its interaction with CDK2 and cyclins. Genes Dev. 7:2378-2391.

71. Harper, J.W., S.J. Elledge, K. Keyomarsi, B. Dynlacht, L.H. Tsai, P. Zhang, S. Dobrowolski, C. Bai, L. Connell-Crowley, and E. Swindell. 1995. Inhibition of cyclin-dependent kinases by p21. Mol. Biol. Cell. 6:387-400.

72. Harvey, D.M., and A.J. Levine. 1991. p53 alteration is a common event in the spontaneous immortalization of primary BALB/c murine embryo fibroblasts. Genes Dev. 5:2375-2385.

73. He, Z., B.T. Brinton, J. Greenblatt, J.A. Hassell, and C.J. Ingles. 1993. The transactivator proteins VP16 and GAL4 bind replication factor A. Cell. 73:1223-1232.

74. Helin, K. 1998. Regulation of cell proliferation by the E2F transcription factors. Curr. Opinion Gen. Dev. 8:28-35.

75. Hennig, U.G., N.L. Rudd, and D.I. Hoar. 1988. Kinetochore immunofluorescence in micronuclei: a rapid method for the in situ detection of aneuploidy and chromosome breakage in human fibroblasts. Mutat Res. 203:405-414.

76. Hermeking, H., C.Lengauer, K. Polyak, T.C. He, L. Zhang, S. Thiagalingam, K.W. Kinzler, and B. Vogelstein. 1997. 14-3-3cr is a p53-regulated inhibitor of G2/M progression. Mol. Cell. 1: 3-11.

77. Hirano, Y., K. Yamato, and N. Tsuchida. 1995. A temperature sensitive mutant of the human p53, Val138, arrests rat cell growth without induced expression of cip1/waf1/sdi1 after temperature shift-down. Oncogene. 1085:1879-1885.

78. Honda, R., and H. Yasuda. 1999. Association of p19(ARF) with Mdm2 inhibits ubiquitin ligase activity of Mdm2 for tumor suppressor p53. EMBO J. 18:22-27.

79. Howe, A.K., and R.L. Juliano. 1998. Distinct mechanisms mediate the initial and sustained phases of integrin-mediated activation of the Raf/MEK/mitogen-activated protein kinase cascade. J. Biol. Chem. 273:27268-27274.

80. Hunter, T. 1997. Oncoprotein Networks. Cell. 88:333-346.

81. Hunter, T., and J. Pines. 1994. Cyclins and cancer II: cyclin D and CDK inhibitors come of age. Cell. 79:573-583.

82. Hupp, T.R., and D.P. Lane. 1994. Regulation of the cryptic sequence-specific DNA-binding function of p53 by protein kinases. Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 59:195-206.

83. Ishizaka, Y., M.V. Chernov, C.M. Burns, and G.R. Stark. 1995. p53-dependent growth arrest of REF52 cells containing newly amplified DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92:3224-3228.

84. Iwasaka, T., P.S. Zheng, M. Ouchida, H. Yamasaki, M. Yokoyama, and H. Sugimori. 1996. Cytologic changes in two cervical carcinoma cell lines aftertransfection of the wild-type p53 gene. Acta Obstet Gynecol Scand. 75:797-803.

85. Jayaraman, J., and C. Prives. 1995. Activation of p53 sequence-specific DNA binding by short single strands of DNA requires the p53 C-terminus. Cell. 81:1021-1029.

86. Jayaraman, L., K.G. Murthy, C. Zhu, T. Curran, S. Xanthoudakis, and C. Prives. 1997. Identification of redox/repair protein Ref-1 as a potent activator of p53. Genes Dev. 11:558-570.

87. Jordan, M.A., D. Thrower, and L. Wilson. 1992. Effects of vinblastine, podophyllotoxin and nocodazole on mitotic spindles. Implications for the role of microtubule dynamics in mitosis. J. Cell Sci. 102:401-416.

88. Kamijo, T., J.D. Weber, G. Zambetti, F. Zindy, M.F. Roussel, and C.J. Sherr. 1998. Functional and physical interactions of the ARF tumor suppressor with p53 and Mdm2. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95:8292-8297.

89. Kamijo, T., F. Zindy, M.F. Roussel, D.E. Quelle, J.R. Downing, R.A. Ashmun, G. Grosveld, and C.J. Sherr. 1997. Tumor suppression at the mouse INK4a locus mediated by the alternative reading frame product p19ARF. Cell. 91:649-659.

90. Kapoor, M., and G. Lozano. 1998. Functional activation of p53 via phosphorylation following DNA damage by UV but no y-irradiation. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 95:2834-2837.

91. Kastan, M.B., O. Onyekwere, D. Sidransky, B. Vogelstein, and R.W. Craig. 1991. Participation of p53 protein in the cellular response to DNA damage. Cancer Res. 51:6304-6311.

92. Kastan, M.B., Q. Zhan, W.S. el Deiry, F. Carrier, T. Jacks, W.V. Walsh, B.S. Plunkett, B. Vogelstein, and A.J.J. Fornace. 1992. A mammalian cell cycle checkpoint pathway utilizing p53 and GADD45 is defective in ataxia-telangiectasia. Cell. 71:587-597.

93. Kaverina, I., K. Rottner, and J.V. Small. 1998. Targeting, capture, and stabilization of microtubules at early focal adhesions. Journal Of Cell Biology. 142:181-190.

94. Kawada, M., S. Yamagoe, Y. Murakami, K. Suzuki, S. Mizuno, and Y. Uehara. 1997. Induction of p27/kip1 degradation and anchorage independence by Ras through the MAP kinase signaling pathway. Oncogene. 15:629-637.

95. Kearsey, J.M., M.K. Shivji, P.A. Hall, and R.D. Wood. 1995. Does the p53 up-regulated Gadd45 protein have a role in excision repair?. Science. 270:1004-1005.

96. Kern, S.E., K.W. Kinzler, A. Bruskin, D. Jarosz, P. Friedman, C. Prives, and B. Vogelstein. 1991. Identification of p53 as a sequence-specific DNA-binding protein. Science. 252:1708-1711.

97. Khan, S.H., and G.M. Wahl. 1998. p53 and pRb prevent rereplication in response to microtubule inhibitors by mediating a reversible G1 arrest. Cancer Res. 58:396-401.

98. Khanna, K.K., and M.F. Lavin. 1993. Ionizing radiation and UV induction of p53 protein by different pathways in ataxia-telangiectasia cells. Oncogene. 8:3307-3312.

99. Khanna, K.K., K.E. Keating, S. Kozlov, S. Scott, M. Gatei, K.Hobson, Y. Taya, B. Gabrielli, D. Chan, S.P. Lees-Miller, and M.F. Lavin. 1998. Nature Gen. 20:398-400.

100. Khosravi-Far, R., M.A. White, J.K. Westwick, P.A. Solski, M. Chrzanowska

101. Wodnicka, L. Van Aelst, M.H. Wigler, and C.J. Der. 1996. Oncogenic Ras activation of Raf/mitogen-activated protein kinase-independent pathway is sufficient to cause tumorigenic transformation. Mol. Cell Biol. 16:3923-3933.

102. King, R.W., P.K. Jackson, and M.W. Kirschner. 1994. Mitosis in transition. Cell. 79:563-571.

103. Ko, L.J., and C. Prives. 1996. p53: puzzle and paradigm. Genes Dev. 10:1054-72.

104. Kolch, W., G. Heidecker, P. Lloyd, and U.R. Rapp. 1991. Raf-1 protein kinase is required for growth of induced NIH/3T3 cells. Nature. 349:426-428.

105. Labbe, J.C., A. Picard, G. Peaucellier, J.C. Cavadore, P. Nurse, and M. Doree. 1989. Purification of MPF from starfish: identification as the H1 histone kinase p34cdc2 and a possible mechanism for its periodic activation. Cell. 57:253-63.

106. Lambert, P.F., F. Kashanchi, M.F. Radonovich, R. Shiekhattar, and J.N. Brady. 1998. Phosphorylation of p53 Serine 15 increases interaction with CBP. J. Biol. Chem. 273:33048-33053.

107. Land, H., L.F. Parada, and R.A. Weinberg. 1983. Tumoric conversion of primary embryo fibroblasts requires at least two cooperating oncogenes. Nature. 304:596-602.

108. Lanni, J.S., and T. Jacks. 1998. Characterization of the p53-dependent postmitotic checkpoint following spindle disruption. Mol. Cell Biol. 18:1055-64.

109. Lavin, M.F., and Y. Shiloh. 1997. The genetic defect in Ataxia-Telangiectasia. Annu. Rev. Immunol. 15:177-202.

110. Lee, S., B. Elenbaas, A. Levine, and J. Griffith. 1995. p53 and its 14 kDa C-terminal domain recognize primary DNA damage in the form of insertion/deletion mismatches. Cell. 81:1013-1020.

111. Lees Miller, S.P., K. Sakaguchi, S.J. Ullrich, E. Appella, and C.W. Anderson. 1992. Human DNA-activated protein kinase phosphorylates serines 15 and 37 in the amino-terminal transactivation domain of human p53. Mol.Cell Biol. 12:5041-5049.

112. Levine, A.J. 1990. Tumor suppressor genes. Bioessays. 12:60-66.

113. Levine, A.J. 1997. p53, the cellular gatekeeper for growth and division. Cell. 88:323-331.

114. Li, R., and M.R. Botchan. 1993. The acidic transcriptional activation domains of VP16 and p53 bind the cellular replication protein A and stimulate in vitro BPV-1 DNA replication. Cell. 73:1207-1221.

115. Li, Y., C.W. Jenkins, M.A. Nichols, and Y. Xiong. 1994. Cell cycle expression and p53 regulation of the cyclin-dependent kinase inhibitor p21. Oncogene. 9:2261-2268.

116. Lin, A.W., M. Barradas, J.C. Stone, L. van Aelst, M. Serrano, and S.W. Lowe. 1998. Premature senescence involving p53 and p16 is activated in response to constitutive MEK/MAPK mitogenic signaling. Genes Dev. 12:3008-30019.

117. Lin, D., M.T. Shields, S.J. Ullrich, E. Appella, and W.E. Mercer. 1992. Growth arrest induced by wild-type p53 protein blocks cells prior to or near the restriction point in late G1 phase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:9210-9214.

118. Lin, J., J. Chen, B. Elenbaas, and A.J. Levine. 1994. Several hydrophobic amino acids in the p53 amino-terminal domain are required for transcriptional activation, binding to mdm-2 and the adenovirus 5 E1B 55-kD protein. Genes Dev. 8:1235-1246.

119. Linke, S.P., K.C. Clarkin, A. Di Leonardo, A. Tsou, and G.M. Wahl. 1996. A reversible, p53-dependent G0/G1 cell cycle arrest induced by ribonucleotide depletion in the absence of detectable DNA damage. Genes Dev. 10:934-947.

120. Liu, J.-J., J.R. Chao, M.G. Jiang, S.Y. Ng, J.J.Y. Yan, and H.F. Yang-Yen. 1995. Ras transformation results in an elevated level of cyclin D1 and acceleration of G1 progression in NIH 3T3 cells. Mol. Cell Biol. 15:3654-3663.

121. Liu, X., C.W. Miller, P.H. Koeffler, and A.J. Berk. 1993. The p53 activation domain binds the TATA box-binding polypeptide in Holo-TFIID, and a neighboring p53 domain inhibits transcription. Mol. Cell Biol. 13:3291-3300.

122. Livingstone, L.R., A. White, J. Sprouse, E. Livanos, T. Jacks, and T.D. Tlsty. 1992. Altered cell cycle arrest and gene amplification potential accompany loss of wild-type p53. Cell. 70:923-935.

123. Lopez-Girona, A., B. Furnari, O.R. Mondesert, and P. Russell. 1999. Nuclear localization of Cdc25 is regulated by DNA damage and a 14-3-3 protein. Nature. 397:172-175.

124. Lu, H., and A.J. Levine. 1995. Human TAFII31 protein is a transcriptional coactivator of the p53 protein. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 9295:5154-5158.

125. Luo, Y., J. Hurwitz, and J. Massague. 1995. Cell-cycle inhibition by independent CDK and PCNA binding domains in p21Cip1. Nature. 375:159161.

126. Leveillard, T., and B. Wasylyk. 1997. The MDM2 C-terminal region binds to TAFII250 and is required for MDM2 regulation of the cyclin A promoter. J. Biol. Chem. 272:30651-61.

127. Maltzman, W., and L. Czyzyk. 1984. UV irradiation stimulates levels of p53 cellular tumor antigen in nontransformed mouse cells. Cell Biol. 4:1689-1694.

128. Marshall, C.J. 1996. Ras effectors. Curr. Opin. Cell Biol. 8:197-204.

129. Matsushime, H., D.E. Quelle, S.A. Shurtleff, M. Shibuya, C.J. Sherr, and J.Y. Kato. 1994. D-type cyclin-dependent kinase activity in mammalian cells. Mol. Cell Biol. 14:2066-2076.

130. Meek, D.W. 1998. Multisite phosphorylation and the integration of stress signals at p53. Cell Signalling. 10:159-66.

131. Meyerson, M., and E. Harlow. 1994. Identification of G1 kinase activity for cdk6, a novel cyclin D partner. Mol. Cell Biol. 14:2077-2086.

132. Michalovitz, D., O. Halevy, and M. Oren. 1990. Conditional inhibition of transformation and of cell proliferation by a temperature-sensitive mutant of p53. Cell. 62:671-680.

133. Milner J.and J.V. Watson. (1990) Addition of fresh medium induces cell cycle and conformation changes in p53, a tumour suppressor protein. Oncogene, 5: 1683-1690.

134. Milne, D.M., D.G. Campbell, F.B. Caudwell, and D.W. Meek. 1994. Phosphorylation of the tumor suppressor protein p53 by mitogen- activated protein kinases. J. Biol. Chem. 269:9253-9260.

135. Mittnacht, S. 1998. Control of pRB phosphorylation. Curr. Opin. Gen. Dev. 8:21-27.

136. Momand, J., G.P. Zambetti, D.C. Olson, D. George, and A.J. Levine. 1992. The mdm-2 oncogene product forms a complex with the p53 protein and inhibits p53-mediated transactivation. Cell. 69:1237-1245.

137. Mosner, J., T. Mummenbrauer, C. Bauer, G. Sczakiel, F. Grosse, and W. Deppert. 1995. Negative feedback regulation of wild-type p53 biosynthesis. EMBOJ. 14:4442-4449.

138. Murakami, H., and H. Okayama. 1997. Cell cycle checkpoint control. Experim. Mol. Med. 26:1-11.

139. Murray, A.W. 1995. The genetics of cell cycle checkpoints. Curr. Opin. Gen. Dev. 5:5-11.

140. Nguyen, K.T., B. Liu, K. Ueda, M.M. Gottesman, I. Pastan, and K.V. Chin. 1994. Transactivation of the human multidrug resistance (MDR1) gene promoter by p53 mutants. Oncol. Res. 6:71-77.

141. Nusse, M., M. Kramer, S. Viaggi, A. Bartsch, and S. Bonatti. 1987. Antikinetochore antibodies and flow karyotyping: new techniques to detectaneuploidy in mammalian cells induced by ionizing radiation and chemicals. Mol. Toxicol. 1:393-405.

142. O'Connor, D.J., E.W. Lam, S. Griffin, S. Zhong, L.C. Leighton, S.A. Burbidge, and X. Lu. 1995. Physical and functional interactions between p53 and cell cycle co- operating transcription factors, E2F1 and DP1. EMBO J. 14:6184-6192.

143. Okasaki, K., and N. Sagata. 1995. MAP kinase activation is essential for oncogenic transformation of NIH 3T3 cells by Mos. Oncogene. 10:1149-1157.

144. Orr-Weaver, T.L., and R.A. Weinberg. 1998. A checkpoint on the road to cancer. Nature. 392:223-224.

145. Palmero, I., C. Pantoja, and M. Serrano. 1998. p19ARF links the tumour suppressor p53 to Ras. Nature. 395:125-126.

146. Passalaris, T. M., J. A. Benanti, L. Gewin, T. Kiyono, and D. A. Galloway. 1999. The G2 checkpoint is maintained by redundant pathways. Mol. Cell. Biol. 19:5872-5881.

147. Paulovich, A.G., D.P. Toczyski, and L.H. Hartwell. 1997. When checkpoints fail. Cell. 88:315-321.

148. Pawson, T., and T.M. Saxton. 1999. Signaling networks-do all roads lead to the same genes? Cell. 97:675-678.

149. Peng, C.-Y., P.R. Graves, R.S. Thoma, Z. Wu, A.S. Shaw, and H. Piwnica-Worms. 1997. Mitotic and G2 checkpoint control: regulation of 14-3-3 protein binding by phosphorylation of Cdc25C on serine-216. Science. 277:15011505.

150. Porter, A.C., and R.R. Vaillancourt. 1998. Tyrosine kinase receptor-activated signal transduction pathways which lead to oncogenesis. Oncogene. 17:1343-1352.

151. Prives, C„ and P.A. Hall. 1999. The p53 pathway. J. Path. 187:112-126.

152. Rainwater, R., D. Parks, M.E. Anderson, P. Tegtmeyer, and K. Mann. 1995. Role of cysteine residues in regulation of p53 function. Mol. Cell Biol. 15:38923903.

153. Raycroft, L., J.R. Schmidt, K. Yoas, M.M. Hao, and G. Lozano. 1991. Analysis of p53 mutants for transcriptional activity. Mol. Cell Biol. 11:60676074.

154. Reed, M., B. Woelker, P. Wang, Y. Wang, M.E. Anderson, and P. Tegtmeyer. 1995. The C-terminal domain of p53 recognizes DNA damaged by ionizing radiation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92:9455-9459.

155. Rieder, C.L., R.W. Cole, A. Khodjakov, and G. Sluder. 1995. The checkpoint delaying anaphase in response to chromosome monoorientation is mediated by an inhibitory signal produced by unattached kinetochores. J. Cell Biol. 130:941-948.

156. Rieder, C.L., A. Schultz, R. Cole, and G. Sluder. 1994. Anaphase onset in vertebrate somatic cells is controlled by a checkpoint that monitors sister kinetochore attachment to the spindle. J. Cell Biol. 127:1301-1310.

157. Rittling, S. R. and D. T. Denhardt. 1992. p53 mutations in spontaneously immortalized 3T12 but not 3T3 mouse embryo cells. Oncogene. 7:935-942.

158. Robertson, K.D., and P.A. Jones. 1998. The human ARF cell cycle regulatory gene promoter is a CpG island which can be silenced by DNA methylation and down-regulated by wild-type p53. Mol. Cell Biol. 18:64576473.

159. Rommel, C., G. Radziwill, J. Lovric, J. Noeldeke, T. Heinicke, D. Jones, A. Aitken, and K. Moelling. 1996. Negative regulation of Raf activity by binding of 14-3-3 to the amino terminus of Raf in vivo. Oncogene. 12:609-619.

160. Rubtsova, S.N., R.V. Kondratov, P.B. Kopnin, P.M. Chumakov, B.P. Kopnin, and J.M. Vasiliev. 1998. Disruption of actin microfilaments by cytochalasin D leads to activation of p53. FEBS Lett. 430:353-357.

161. Rudner, A.D., and A.W. Murray. 1996. The spindle assembly checkpoint. Curr. Opin. Cell Biol. 8:773-780.

162. Ruley, H.E. 1990. Transforming collaborations between ras and nuclear oncogenes. Cancer Cells. 2:258-268.

163. Sabapathy K., M. Klemm, R. Jaenisch and E.F. Wagner. 1997. Regulation of ES cell differentiation by functional and conformational modulation of p53. EMBO J. 16:6217-6229.

164. Sablina, A.A., L.S. Agapova, P.M. Chumakov, and B.P. Kopnin. 1999. p53 does not control the spindle assembly cell cycle checkpoint but mediates G1 arrest in response to disruption of microtubule system. Cell Biol. Internatl. 23:323-334.

165. Sablina, A.A., G.V. Ilyinskaya, S.N. Rubtsova, L.S. Agapova, P.M. Chumakov, and B.P. Kopnin. 1998. Activation of p53-mediated cell cycle checkpoint in response to micronuclei formation. J. Cell Sci. 111:977-984.

166. Saha, P., Q. Eichbaum, E.D. Silberman, B.J. Mayer, and A. Dutta. 1997. p21/cip1 and cdc25a: competition between an inhibitor and a activator of cyclin-dependent kinases. Mol. Cell. Biol. 17:4338-4345.

167. Sakaguchi, K., J.E. Herrera, S. Saito, T. Miki, M. Bustin, A. Vassilev, C.W. Anderson, and E. Appella. 1998. DNA damage activates p53 through a phosphorylation/acetylation cascade. Genes Dev. 12:2831-2841.

168. Sakamuro, D., P. Sabbatini, E. White, and G.C. Prendergast. 1997. The polyproline region of p53 is required to activate apoptosis but not growth arrest. Oncogene. 15:887-898.

169. Schlaepfer, D.D., and T. Hunter. 1998. Integrin signalling and tyrosine phosphorylation: just the FAKs? Trends Cell Biol. 8:151-157.

170. Schneider, E., M. Montenarh, and P. Wagner. 1998. Regulation of CAK kinase activity by p53. Oncogene. 17:2733-2741.

171. Serrano, M., H. Lee, L. Chin, C. Cordon-Cardo, D. Beach, and R.A. DePinho. 1996. Role of the INK4a locus in tumor suppression and cell mortality. Cell. 85:27-37.

172. Seto, E„ A. Usheva, G.P. Zambetti, J. Momand, N. Horikoshi, R. Weinmann, A.J. Levine, and T. Shenk. 1992. Wild-type p53 binds to the TATA-binding protein and represses transcription. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:12028-12032.

173. Shaulsky, G„ N. Goldfinger, M.S. Tosky, A.J. Levine, and V. Rotter. 1991. Nuclear localization is essential for the activity of p53 protein. Oncogene. 6:2055-2065.

174. Sherr, C.J. 1998. Tumor surveillance via the ARF-p53 pathway. Genes Dev. 12:2984-2991.

175. Sherr, C.J., and J.M. Roberts. 1995. Inhibitors of mammalian G1 cyclin-dependent kinases. Genes Dev. 9:1149-1163.

176. Shieh, S.-Y., M. Ikeda, Y. Taya, and C. Prives. 1997. DNA damage-induced phosphorylation of p53 alleviates inhibition by MDM2. Cell. 91:325-334.

177. Shieh, S.-Y., Y. Taya, and C. Prives. 1999. DNA damage-inducible phosphorylation of p53 at N-terminal sites including a novel site, Ser 20, requires tetramerization. EMBO J. 18:1815-1823.

178. Siliciano, J.D., C.E. Canman, Y. Taya, K. Sakaguchi, E. Appella, and M.B. Kastan. 1997. DNA damage induces phosphorylation of the amino terminus ofp53. Genes Dev. 11:3471-3481.

179. Simbulan-Rosenthal, C.M., D.S. Rosenthal, R. Luo, and M.E. Smulson. 1999. Poly(ADP-ribosyl)ation of p53 during apoptosis in human osteosarcoma cells. Cancer Res. 59:2190-2194.

180. Sionov, R.V., and Y. Haupt. 1999. The cellular response to p53: the decision between life and death. Oncogene. 18:6145 6157.

181. Smith, M.L., I.T. Chen, Q. Zhan, I. Bae, C.Y. Chen, T.M. Gilmer, M.B. Kastan, P.M. O'Connor, and A.J.J. Fornace. 1994. Interaction of the p53-regulated protein Gadd45 with proliferating cell nuclear antigen. Science. 266:1376-1380.

182. Stewart, N., G.G. Hicks, F. Paraskevas, and M. Mowat. 1995. Evidence for a second cell cycle block at G2/M by p53. Oncogene. 10:109-115.

183. Stopper, N., G.G. I. Eckert, D. Schiffmann, D. L. Spencer, and W.J. Caspary. 1994. Is micronucleus induction by aneugens an early event leading to mutagenesis? Mutagen. 9:411-416.

184. Sturzbecher, H.W., R. Brain, C. Addison, K. Rudge, M. Remm, M. Grimaldi, E. Keenan, and J.R. Jenkins. 1992. A C-terminal alpha-helix plus basic region motif is the major structural determinant of p53 tetramerization. Oncogene. 7:1513-1523.

185. Takenaka, I., F. Morin, B.R. Seizinger, and N. Kley. 1995. Regulation of the sequence-specific DNA binding function of p53 by protein kinase C and protein phosphatases. J. Biol. Chem. 270:5405-5411.

186. Tao, W., and A.J. Levine. 1999. P19(ARF) stabilizes p53 by blocking nucleo-cytoplasmic shuttling of Mdm2. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96:69376941.

187. Tarunina, M., and J.R. Jenkins. 1993. Human p53 binds DNA as a protein homodimer but monomeric variants retain full transcription transactivation activity. Oncogene. 8:3165-3173.

188. Taylor, W.R., M.L. Agarwal, A. Agarwal, D.W. Stacey, and G.R. Stark. 1999. p53 inhibits entry into mitosis when DNA synthesis is blocked. Oncogene. 18:283-295.

189. Thut, C.J., J.L. Chen, R. Klemm, and R. Tjian. 1995. p53 transcriptional activation mediated by coactivators TAFII40 and TAFII60. Science. 267:100104.

190. Tishler, R.B., D.M. Lamppu, S. Park, and B.D. Price. 1995. Microtubule-active drugs taxol, vinblastine, and nocodazole increase the levels of transcriptionally active p53. Cancer Res. 55:6021-6025.

191. Truant, R., H. Xiao, C.J. Ingles, and J. Greenblatt. 1993. Direct interaction between the transcriptional activation domain of human p53 and the TATA box-binding protein. J. Biol. Chem. 268:2284-2287.

192. Tsukada, T., Y. Tomooka, S. Takai, Y. Ueda, S. Nishikawa, T. Yagi, T. Tokunaga, N. Takeda, Y. Suda, S. Abe, and et al. 1993. Enhanced proliferative potential in culture of cells from p53- deficient mice. Oncogene. 8:3313-3322.

193. Van den Heuvel, S., and E. Harlow. 1993. Distinct role for cycline-dependent kinases in cell cycle control. Science. 262: 2050-2054.

194. Venot, C., M. Maratrat, V. Sierra, E. Conseiller, and L. Debussche. 1999. Definition of a p53 transactivation function-deficient mutant and characterization of two independent p53 transactivation subdomains. Oncogene. 18:2405-2410.

195. Vlach, J., S. Hennecke, and B. Amati. 1997. Phosphorylation-dependent degradation of the cyclin-dependent kinase inhibitor p27. Embo Journal. 16:5334-5344.

196. Walker, K.K., and A.J. Levine. 1996. Identification of a novel p53 functional domain that is necessary for efficient growth suppression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93:15335-15340.

197. Wallner, J., H. Gisslinger, B. Gisslinger, A. Gsur, M. Gotzl, S. Zochbauer, and R. Pirker. 1994. MDR1 gene expression in chronic lymphocytic leukemia. Leuk.Lymphoma. 13:333-338.

198. Wang, X., K. Ohnishi, A. Takahashi, and T. Ohnishi. 1998. Poly(ADP-ribosyl)ation is required for p53-dependent signal transduction induced by radiation. Oncogene. 17:2819-2825.

199. Wang, X.W., H. Yeh, L. Schaeffer, R. Roy, V. Moncollin, J.M. Egly, Z. Wang, E.C. Freidberg, M.K. Evans, and B.G. Taffe. 1995. p53 modulation of TFIIH-associated nucleotide excision repair activity. Nature Genet. 10:188195.

200. Wang, Y., and C. Prives. 1995. Increased and altered DNA binding of human p53 by S and G2/M but not G1 cyclin-dependent kinases. Nature. 376:88-91.

201. Wang, Y., M. Reed, P. Wang, J.E. Stenger, G. Mayr, M.E. Anderson, J.F. Schwedes, and P. Tegtmeyer. 1993. p53 domains: identification and characterization of two autonomous DNA-binding regions. Genes Dev. 7:2575-2586.

202. Wary, K.K., F. Mainiero, S.J. Isakoff, E.E. Marcantonio, and F.G. Giancotti. 1996. The adaptor protein She couples a class of integrins to the control of cell cycle progression. Cell. 87:733-743.

203. Wary, K.K., A. Mariotti, C. Zurzolo, and F.G. Giancotti. 1998. A requirement for caveolin-1 and associated kinase Fyn in integrin signaling and anchorage-dependent cell growth. Cell. 94:625-634.

204. Waterman, M.J.F., E.S. Stravridi, J.L.F. Waterman, and T.D. Halazonetis. 1998. ATM-dependent activation of p53 involves dephos-phorylationand association with 14-3-3 proteins. Nature. Genet. 19:175-178.

205. Whitacre, C.M., H. Hashimoto, M.L. Tsai, S. Chatterjee, S.J. Berger, and N.A. Berger. 1995. Involvement of NAD-poly(ADP-ribose) metabolism in p53 regulation and its consequences. Cancer Res. 55:3697-3701.

206. Whitehead, R.H., F.A. Macrae, D.J. St. John, and J. Ma. 1985. A colon cancer cell line (LIM1215) derived from a patient with inherited nonpolyposis colorectal cancer. J. Natl. Cancer Inst. 74:759-765.

207. Williams, B.O., L. Remington, D.M. Albert, S. Mukai, R.T. Bronson, and

208. T. Jacks. 1994. Cooperative tumorigenic effects of germline mutations in Rb and p53. Nature Genet 7:480-484.

209. Winston, J.T., S.R. Coats, Y.-Z. Wang, and W.J. Pledger. 1996. Regulation of the cell cycle machinery by oncogenic Ras. Oncogene. 12:127-134.

210. Wogan, G.N. 1992. Molecular epidemiology in cancer risk assessment and prevention: recent progress and avenues for future research. Environ. Health Perspect. 98:167-178.

211. Woo, R.A., K.G. McLure, S.P. Lees-Miller, D.E. Rancourt, and P.W. Lee. 1998. DNA-dependent proteinkinase acts upstream of p53 in response to DNA damage. Nature. 394:700-704.

212. Woods, C.M., J. Zhu, P.A. McQueney, D. Bollag, and E. Lazarides. 1995. Taxol-induced mitotic block triggers rapid onset of a p53- independent apoptotic pathway. Mol. Med. 1:506-526.

213. Wu, X., J.H. Bayle, D. Olson, and A.J. Levine. 1993. The p53-mdm-2 autoregulatory feedback loop. Genes Dev. 7:1126-1132.

214. Wu, X., and A.J. Levine. 1994. p53 and E2F-1 cooperate to mediate apoptosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91:3602-3606.

215. Wyllie, F.S., M.F. Haughton, J.P. Blaydes, M. Schlumberger, and D. Wynford-Thomas. 1995. Evasion of p53-mediated growth control occurs by three alternative mechanisms in transformed thyroid epithelial cells. Oncogene. 10: 2345-2347.

216. Xiong, Y., G.J. Hannon, H. Zhang, D. Casso, R. Kobayashi, and D. Beach. 1993. p21 is a universal inhibitor of cyclin kinases. Nature. 366:701704.

217. Zastawny, R.L., R. Salvino, J. Chen, S. Benchimol, and V. Ling. 1993. The core promoter region of the P-glycoprotein gene is sufficient to confer differential responsiveness to wild-type and mutant p53. Oncogene. 8:15291535.

218. Zhang, W., and A.B. Deisseroth. 1994. Conformational change of p53 protein in growth factor-stimulated human myelogenous leukemia cells. Leuk. Lymphoma. 14: 251-255.

219. Zhang, Y., and Y. Xiong. 1999. Mutations in human ARF exon 2 disrupt its nucleolar localization and impair its ability to block nuclear export of MDM2 and p53. Mol. Cell. 3:579-591.

220. Zhang, Y., Y. Xiong, and W.G. Yarbrough. 1998. ARF promotes MDM2 degradation and stabilizes p53: ARF-INK4a locus deletion impairs both the Rb and p53 tumor suppression pathways. Cell. 92:725-734.

221. Zindy, F., C.M. Eischen, D.H. Randle, T. Kamijo, J.L. Cleveland, C.J. Sherr, and M.F. Roussel. 1998. Myc signaling via the ARF tumor suppressor regulates p53-dependent apoptosis and immortalization. Genes Dev. 12:2424-2433.