Роль оксида азота и участие нейрональных стволовых клеток в патогенезе экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита и рассеянного склероза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Данилов, Александр Игоревич

• Данилов, Александр Игоревич
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Данилов, Александр Игоревич

Список сокращений.

Введение.

Глава I. Обзор литературы

1.1. Роль оксида азота в патогенезе рассеянного склероза.

1.2. Роль оксида азота в патогенезе аутоиммунного эксперименталь- 22 ного энцефаломиелита.

1.3. Современные представления о процессах ремиелинизации при 37 рассеянном склерозе и экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

Глава II. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика обследованных групп больных.

2.2. Капиллярный электрофорез как метод определения продуктов 50 окисления оксида азота в биологических средах.

2.3. Метод активной иммунизации крыс вида Dark Auguti миелино- 51 вым олигодендроцитарным белком с последующим назначением L-NAME посредством осмотических минипомп.

2.4. Метод оценки состояния специфического гуморального иммун- 53 ного ответа в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ELISA).

2.4.1. Оценка степени активации Т клеточного звена иммунной систе- 54 мы с помощью метода ELISPOT.

2.4.2. Маркировка эпендимальных клеток головного и спинного мозга 55 крыс, переносящих аутоиммунный экспериментальный энцефаломиелит. Методы выделения нервной ткани с последующим иммуногистохимическим окрашиванием.

2.4.3. Методы статистической обработки результатов.

Глава III. Результаты собственных исследований.

3.1. Продукты окисления оксида азота как маркеры активности вое- 60 палительного процесса при рассеянном склерозе.

3.2. Влияние ингибитора NOS на клиническое течение эксперимен- 70 тального аутоиммунного энцефаломиелита и интенсивность воспалительного процесса.

3.3 Влияние ингибиторов NOS на Т клеточный иммунный ответ при 80 экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

3.4. Влияние внутрижелудочкового назначения ингибитора NOS L- 84 NAME на состояние гуморального иммунного ответа на модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

3.5. Влияние ингибиторов NOS на системный метаболизм оксида 89 азота в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

3.6 Нейрональные стволовые клетки как потенциальный источник 93 ремиелинизации при воспалительно демиелинизирующих заболеваниях нервной системы.

Глава IV. Заключение и общие выводы.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль оксида азота и участие нейрональных стволовых клеток в патогенезе экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита и рассеянного склероза»

Актуальность проблемы

Рассеянный склероз является самой частой неврологической причиной инвалидизации лиц трудоспособного возраста (25 -40 лет), за исключением травматических поражений. (Lassman et al., 2001, что определяет актуальность его изучения. Рассеянный склероз является хроническим аутоиммунным заболеванием нервной системы, протекающим с поражением белого вещества головного и реже, спинного, мозга, что сопровождается образованием очагов воспаления и демиелинизации (Trapp B.D. et al., 1999). Заболевание в типичных случаях характеризуется хроническим, рецидивирующе-ремиттирующим, течением с последующим вторичным прогрессированием, сопровождающимся накоплением органических неврологических нарушений. (Lassman H. et al., 2001) Основными чертами патоморфологии P.C. являются наличие очагов демиелинизации, олигодендроцитарной гибели и ак-сональной дегенерации (Prineas and McDonald 1997), а так же наличие гли-альных очагов. Полагают, что под воздействием инициирующего события, в роли которого могут выступать инфекционные (Steiner I., 2001), средовые и генетические (Compston A., et al 2002) факторы, происходит реактивация ау-тореактивных клонов преимущественно Т лимфоцитов, нарушению гемато-энцефалического барьера с последующим развитием иммунно-опосредованного воспалением и демиелинизацией (Silber Е., Sharief М.К., 1999).

Несмотря на более чем вековую историю изучения проблемы, оценка степени активности воспалительно-демиелинизирующего процесса представляет серьёзную проблему. Диагностика осуществляется с помощью совокупности клинических критериев (Poser 1983) а так же посредством магнитно резонансной томографии (М.Р.Т.). Наличие клинически не проявляющихся обострений, (Kraus J. et al., 2002), необходимость повторного динамического наблюдения с применением специальных контрастирующих методик MPT (Miller D.H., et al., 1996) затрудняет процесс диагностики и делает поиск лабораторных маркеров активности воспалительного процесса особенно актуальным. Среди всего многообразия эффекторных молекул, принимающих участие в повреждении олигодендроцитов, оксид азота играет особо важную роль. Являясь продуктом синтеза семейства синтетеаз оксида азота (NOS) из аминокислоты JI аргинина, N0 потенциально нейротокичен (Dawson et al., 1994), способен оказывать прямое токсическое действие на культивируемые олигодендроциты. Биоптаты больных рассеянным склерозом содержат повышенное содержание iNOS м РНК по сравнению с интактными зонами мозга (Bagasra О. et al., 1995), что позволяет считать продукты окисления NO перспективными кандидатами на роль индикаторов активности заболевания.

Совокупность эпидемиологических (частота встречаемости рассеянного склероза по данным ВОЗ составляет 1:1000 среди населения северной Европы) и этических причин послужила стимулом для изучения роли оксида азота в патогенезе аутоиммунных заболеваний нервной системы на экспериментальной модели рассеянного склероза - экспериментального аутоимунно-го энцефаломиелита (Э.А.Э.), который развивается под воздействием иммунизации восприимчивых видов животных различными антигенами (Wekerley et al., 1994) или переносом CD4+ Т клеток (Ben Nun et al., 1981, Pattinelly et al., 1981) и проявляется параличами конечностей и хвоста, нарушениями зрения и атаксией. Способность ингибиторов NOS модулировать клиническое течение экспериментального аутоимунного энцефаломиелита известна с работ Koprowski (1993), однако механизм действия остается не известным. Известно (Cross et al., 1994, Zhao et al., 1996), что назначение аминогуанидина приводило к улучшению клинического течения экспериментального аутоимунного энцефаломиелита на мышах и крысах (Brenner et al., 1997, Zielasek et al., 1995). В то же время назначение N(omega) -nitro-L- arginine-methylester способствовало утяжелению заболевания и повышению летальности (Ruuls et al., 1996, Gold et al., 1997). Более того, назначение NMA PVG крысам привело к развитию тяжелого энцефаломиелита у животных, считавшихся полностью резистентным к развитию экспериментального аутоимунного энцефаломиелита (Cowden et al., 1998, Willenborg et al., 1998). Следует так же отметить, что все упомянутые модели являются монофазными, со слабой выраженностью демиелинизации, а, следовательно, не вполне адекватными для изучения рассеянного склероза. Таким образом, изучение последствий назначения ингибиторов iNOS на крысах Dark Auguti, иммунизированных миелиновым олигодендроцитарным белком, представляется актуальным.

Поскольку мишенью аутоиммунно-опосредованного воспаления при рассеянном склерозе и Э.А.Э. являются олигодендроциты, то изучение механизмов, лежащих в основе процессов ремиелинизации является актуальным. В случае усиления процессов ремиелизации возможно восстановить утраченные неврологические функции, предотвратить аксональное повреждение и прогрессирование неврологических симптомов. Присутствие ремиелинизации было доказано для многих экспериментальных моделей травматического и аутоиммунного повреждения (Bornstein М.В. and Raine С.S. 1969, Blake-more et al., 1974; Linington et al., 1988; Rodriguez et al., 1992; Reynolds and Wilkin, 1993; Carroll and Jennings, 1994), однако источники клеток - предшественников олигодендроцитов попрежнему неизвестными. Идентификация нейрональных стволовых клеток, как самоподдерживающейся, полипотент-ной популяции, способной дифференцироваться в астроциты, олигодендроциты и нейроны, и реагирующей на повреждение Ц.Н.С. пролиферацией и миграцией, открывает новые возможности для изучения роли этих клеток в патогенезе экспериментального аутоимунного энцефаломиелита.

Цели исследования:

1. Изучение возможности использования продуктов окисления оксида азота в качестве лабораторного маркера активности воспалительно де-миелинизирующего процесса при рассеянном склерозе.

2. Изучение возможности модулирования воспалительно-демиелинизирующего процесса с помощью ингибиторов синтетазы оксида азота на модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

3. Изучение роли нейрональных стволовых клеток в патогенезе экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

Задачи:

1. Исследовать особенности системного метаболизма оксида азота в ходе течения экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита и у больных рассеянным склерозом, и, сопоставив динамику клинической картины заболевания с изменениями концентрацией продуктов окисления оксида азота в ликворе и сыворотки крови, выяснить, может ли содержание нитритов в ликворе и сыворотке крови служить индикатором активности воспалительного процесса.

2. Изучить влияние интравентрикулярного и системного введения ингибитора синтетазы оксида азота на клиническое течение и степень выраженности воспаления при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

3. Исследовать влияние ингибитора синтетазы оксида азота на степень выраженности Т-клеточного иммунного ответа в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

4. Изучить влияние ингибитора синтетазы оксида азота на В-клеточное звено иммунного ответа в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.

5. Изучить реакции и изменения нейрональных стволовых клеток при развитии аутоимуно опосредованного воспаления и демиелинизации при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

Положения, выносимые на защиту:

1. Продукты окисления оксида азота в ликворе являются маркером активности воспалительного процесса при рассеянном склерозе.

2. Интратекальное и системное назначение L-NAME приводит к ослаблению клинических проявлений экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита на крысах Dark Agouti, и подавлению процессов воспаления. Интратекальное и системное назначение NOS ингибиторов оказывает модулирующее влияние на интенсивность Т клеточного иммунного ответа, смещая баланс Thl/Th2 в сторону преобладания Th2 клеток.

3. В ответ на развитие экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита происходит активация нейрональных стволовых клеток, которые пролиферируют, мигрируют из внутренней стенки центрального канала спинного мозга в очаги демиелинизации и дифференцируются в олиго-дендроциты, являясь эндогенным источником ремиелинизации.

4. В процессе миграции нейрональные стволовые клетки подвергаются прямой макрофагальной атаке, что может служить причиной незавершенной ремиелинизации при экспериментальном аутоимунном энцефаломиелите.

Научная новизна работы:

Продемонстрировано наличие корреляции между клинической картиной заболевания и концентрацией нитритов в ликворе от больных рассеянным склерозом.

На экспериментальной модели рассеянного склероза продемонстрирована возможность ослабления клинических проявлений экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита посредством интравентрикулярного и системного введения эфира нитрометиларгинина (L-NAME). Показано его влияние как противовоспалительного агента применительно к экспериментальному аутоиммунному энцефаломиелиту.

Впервые продемонстрировано влияния ингибиторов синтетазы оксида азота на специфический и неспецифический иммунный ответ. Изучены особенности метаболизма оксида азота на фоне перенесения Э.А.Э.

Исследована реакция нейропальных стволовых клеток на развитие очагов демиелинизации в спинном мозге при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

Научно-практическая значимость работы:

Показана возможность использования продуктов окисления оксида азота в качестве лабораторного маркера активности воспалительно демиелинизи-рующего процесса у больных с рассеянным склерозом. Изучены последствия терапевтического использования ингибиторов синтетазы оксида азота на экспериментальной модели рассеянного склероза. Идентифицированы источники ремиелинизации при Э.А.Э., которыми являются нейрональные стволовые клетки.

Апробация работы:

Основные положения диссертации доложены на Международном конгрессе «Second International conference in Biology, Chemistry and therapeutic Application of Nitric Oxide".(Prague 2001)

Публикации: По теме диссертации опубликовано 3 печатных работы

1 .Danilov, A. I., Andersson, M., Bavand, N., Wiklund, N. P., Olsson, T. and Brun-din L. "Nitric oxide metabolite determinations reveal continuous inflammation in multiple sclerosis"// J. Neuroimmunol. - 2003 -Vol. 36 - P. 112 - 128.

2. Lou Brundin, Hjalmar Brismar, Alexandre I Danilov, Tomas Olsson and Clas B. Johansson "Neural stem cells - a potential source for remyelination in neuroin-flammatory disease" //."Brain Pathology" - 2003 - Vol. 13 - P. 322 - 328.

3. Danilov, A. I., Andersson, M., Bavand, N., Wiklund, N. P., Olsson, T. and Brundin L. "Nitric oxide metabolites in Multiple sclerosis" // "Nitric oxide ; biology and chemistry" - 2002 - Vol 6. - N. 4 - P. 377-378.

Объем и структура работы Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с изложением материалов и методов исследования, глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов и выводов. Список литературы включает 298 источников (из них 25 отечественных и 273 зарубежных). Работа изложена на 155 страницах машинописного текста, содержит 4 таблицы и 19 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Данилов, Александр Игоревич

ВЫВОДЫ

1. Измерение содержания нитритов в ликворе больных с рассеянным склерозом может служить индикатором (в дополнение к М.Р.Т. исследованию) активности воспалительного процесса, продолжающегося как в периоды клинической ремиссии, так и во время вторичного прогрессирования заболевания с максимальной интенсивностью в периоды обострения.

2. Ингибитор NOS, эфир нитрометиларгинина (L-NAME) при системном и особенно внутрижелудочковом назначении в дозе 0,032 мг/день в индукционную фазу иммунного ответа экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, вызываемого иммунизацией крыс миелинивым олигодендроци-тарным протеином, облегчает тяжесть течения экспериментального аутои-мунного энцефаломиелита, достоверно снижая степень воспалительных изменений в Ц.Н.С.

3. Предполагаемый механизм противоспалительного действия внутрижелу-дочкового введения L-NAME не обусловлен подавлением Т клеточного звена иммунного ответа при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите; назначение L-NAME крысам, переносящим Э.А.Э., вызывает усиление гуморального ответа, проявляющегося повышенным синтезом анти-M.O.G. антител.

4. Усиление синтеза специфических антител происходит вне зависимости от пути введения L-NAME, преимущественно за счет иммуноглобулинов класса IgGi, что свидетельствует о смещении баланса Thl/Th2 клеток в сторону преобладания Т хелперов 2 типа, за счет чего может подавляться развитие воспаления.

5. В ответ на развитие экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита происходит активация нейрональных стволовых клеток, которые пролифери-руют, мигрируют из внутренней стенки центрального канала спинного мозга в очаги демиелинизации и дифференцируются в олигодендроциты, являясь эндогенным источником ремиелинизации.

6. Нейрональные стволовые клетки могут становиться объектом прямой мак-рофагальной атаки на пути их миграции из внутренней стенки центрального канала спинного мозга в очаги демиелинизации, что может служить причиной незавершеннной ремиелинизации при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

Глава IV Заключение и общие выводы

Как уже упоминалось в литературном обзоре, рассеянный склероз является аутоиммунно-опосредованным заболеванием, являющимся самой частой из неврологических причин, приводящих к инвалидизации лиц трудоспособного возраста, что определяет актуальность изучения аспектов патогенеза иммуно-опосредованного повреждения нервной ткани, а так же процессов регенерации. Согласно современным представлениям патогенез P.C. представляется гетерогенным, однако в конечном итоге приводящим к повреждению и гибели олиго-дендроцитов, аксональному повреждению и аксональной дегенерации. Среди всего многообразия механизмов повреждения олигодендроцитов, таких как, антитело опосредованная цитотоксичность (Genain et al.,., 1995), активация проте-аз системы апоптоза (Bonetti and Raine, 1997; Dowling et al.,., 1997a), прямое ци-тотоксическое действие IL-2, IL-6, TNF a INFy, секретируемых миелин специфическими T хелперами 1 типа (Brouckaert et al.,., 1993) и активированной мик-роглией (Martino G, 2000), важная роль отводится оксиду азота, как одному из молекул эффекторов. Обнаружение повышенной экспрессии iNOS mRNA в а так же нитротиротирозин содержащих клеток в очагах активной демиелиниза-ции (Bagasra О et al., 1995, Во et al., 1994, De Groot et al., 1997) a так же TNFot (Hofman et al., 1989) и INFy (Traugott U. и Lebon P; 1988), являющиеся мощными активаторами экспрессии iNOS, а так же ряд экспериментальных исследований, показавших способность к индукции iNOS и повышенной продукции N0 клеток микроглии (Hewett S.J. et al., 1993, Hooper D.C. et al., 1995), приводивших к цитотоксическому действие на олигоденодроциты и нейроны (Boje et al., 1992), привело к формированию концепции нитрозативно оксидативного стресса играющего важную роль в патогенезе P.C. Как уже обсуждалось в главе №3, основным непрямым способам изучения активности нитрозативного стресса у больных с P.C. является определения продуктов окисления оксида азота в лик-воре и сыворотке крови. Вследствие противоречивости литературных данных по этому вопросу нами было произведен анализ содержания нитратов, нитритов, тирозина, нитротирозина, хлортирозина и нитрогидроксифенил ацетиловой кислоты в ликворе больных P.C. Полученные нами данные убедительно показывают, что гиперпродукция-N0 в Ц.Н.С. происходит на всем протяжение заболевания, являясь максимально выраженной в периоды клинически выраженных обострений, умеренно выраженной в периоды неуклонного прогрессиро-вания, и наименее выраженной в периоды ремиссий, что позволяет использовать продукты окисления оксида азота в качестве суррогатного маркера активности заболевания. Полученные нами данные согласуются с данными Acar G. (Acar G. et al., 2003), где было убедительно показано, что высокое содержание нитрита в ликворе во время обострения коррелировало с присутствием активных очагов на МРТ, проведенном с использованием гадолиния.

Принимая во внимание данные, полученные на клиническом материале, несомненный интерес представляет изучение последствий подавления гиперпродукции оксида азота в условиях экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита. Как уже отмечалось в обзоре литературы, эффект от применения ингибиторов NOS на Э.А.Э. моделях весьма противоречив и разниться от полного подавления клинических и патоморфологических признаков Э.А.Э. (Cross et al., 1994, Okuda et al.,., 1995, Zhao et al.,., 1996, Scott et al., 1996, Brenner et al.,., 1997) до аггравации заболевания (Ruuls et al.,., 1996, Gold et al., 1997) и даже развития Э.А.Э. под влиянием ингибиторов NOS у видов грызунов, ранее считавшихся резистентными к индукции заболевания (Staykova M.A. et al., 2002). Совокупность экспериментальных данных привела к формированию гипотезы о том, что NO может обладать как патогенным, так и протективным действием при Э.А.Э. Так же обсуждается вопрос о том, что сам по себе NO обладает протективными свойствами, а весь спектр патогенных эффектов NO в Ц.Н.С. может быть обусловлен другими молекулами, в частности пероксинит-ритом, который является мощным оксидантом (Beckman et al., 1990). В то же время обсуждается вопрос о том, что гиперпродукция N0 обуславливает различные эффекты в динамике иммунного ответа при Э.А.Э., будучи патогенной в индукционную фазу, участвовать в механизмах протекции в фазу прогрессии заболевания (Okuda et al., 1998).

Настоящее исследование было выполнено на крысах породы Dark Agouti, иммунизированные M.O.G., как на модели, наиболее адекватно отражающей основные черты патоморфологии P.C., такие как наличие очагов иммунно опосредованного воспаления и демиелинизации, а так же релапсирующе ремитти-рующий паттерн заболевания. (Lassman H. et al., 1998). В проведенных нами экспериментах назначение неселективного ингибитора NOS L-NAME в дозе 0,00,032 мг/день приводило к значительному смягчению клинического течения Э.А.Э. как при системном, так и внутрижелудочковом назначении. Полученный эффект был связан со снижением интенсивности воспаления, что было верифицировано патоморфологически. Фармакологическая адекватность использования L-NAME была подтверждена путем измерения продуктов окисления NO сыворотке. Примечательно, что клинический эффект был более выражен при внутрижелудочковом назначении, по сравнению с системным. С целью оценки влияния назначения L-NAME в индукционную фазу иммунного ответа на степень активации Т клеточного звена иммунной системы, было проведено сравнение групп леченых системно и интравентрикулярно в отношении уровня4 продукции INFy стимулированными спленоцитами посредством метода ELISPOT (Olsson Т 1990). Полученные результаты свидетельствуют о том, что не смотря на более выраженный клинический эффект в группе, получавшей L-NAME интравентрикулярно, уровень продукции INFy был достоверно выше, по сравнению с группой получавшей L-NAME подкожно, что позволяет предположить, что наблюдаемый противовоспалительный эффект не связан с подавлением активности Т клеточного звена системного иммунного ответа. Учитывая полученные результаты, особый интерес представляет изучение влияние L-NAME на специфический гуморальный иммунный ответ, играющий важную роль в патогенезе развития демиелинизации как при P.C. (Storch МК 1998) так и при M.O.G. индуцированном Э.А.Э. (Lassmann H. et al., 1998). Изучение титра специфических анти-M.O.G. антител в динамике Э.А.Э. выявило, что независимо от пути введения назначение L-NAME в дозе 32мг/день приводило к усилению синтеза антител, а анализ типовой принадлежности показал, что усиление происходит в основном за счет иммуноглобулинов типа IgGl. Причем уровень синтеза был достоверно выше в группе крыс леченных системно. Общеизвестно, что иммуноглобулины подкласса IgGl синтезируется под влиянием цитоки-нов, продуцируемых Th2 клетками (IL 4, IL 5, IL 10, IL 12, TGFß) обладающих противовоспалительными функциями применительно к Э.А.Э. (Svanborg et al., 1995, Liblau et al., 1995). Следовательно, на основании полученных результатов можно предположить, что назначение L-NAME в индукционную фазу Э.А.Э. вызывает либо активацию существующей популяции Th2 клеток или смещение баланса дифференцировки Т клеток в сторону преобладания Th2 клеток. Тенденция к более высокому содержанию общего IgG в группе крыс получавших L-NAME подкожно по сравнению с интравентрикулярным введением согласуется с данными по оценке Т клеточного иммунитета. Представляется возможным, что сниженная способность к продукции INF у может отражать функциональное доминирование Th2 клеток в данной группе по сравнению с группой, получавшей ингибитор NOS интратекально. Полученные нами данные косвенно подтверждают роль N0, как фактора стимулирующего дифференцировку Thl, указывая на патогенность гиперпродукции N0 в индукционную фазу иммунного ответа при Э.А.Э., а так же несомненно требуют проведения ряда дополнительных исследований по изучению влияния L-NAME на спектр продуцируемых цитокинов в динамике Э.А.Э.

Другим аспектом патогенеза Э.А.Э. явившимся предметом нашего изучения стала проблема изучения реакции нейрональных стволовых клеток на ауто-иммуно опосредованное воспаление и демиелинизацию и идентификация их, как потенциальных источников ремиелинизации при Э.А.Э. Как уже неоднократно отмечалось в обзоре литературы, принципиальная возможность ремиелинизации при Р.С была доказана ещё Марбургом (Marburg О 1906), однако причины её несостоятельности остаются неизвестными. Наличие факта ремиелинизации было многократно подтверждено на различных экспериментальных моделях (Bornstein MB and Raine CS 1969, Blakemore 1974; Linington et al., 1988; Rodriguez et al., 1992, Reynolds and Wilkin, 1993; Carroll and Jennings, 1994), однако источник клеток предшественников олигодендроцитов до недавнего времени оставался неизвестным, а идентификация этих клеток осуществлялась с помощью иммуногистохимических маркеров, таких как GalC, NG2, PDGFa и 04. Идентификация клеток эпендимы, как популяции полипотентных нейрональных стволовых клеток (Johansson et al., 1999) позволило нам проследить судьбу этих клеток в динамике M.O.G. индуцированного Э.А.Э. Результаты проведенных экспериментов показали, что клетки эпендимального слоя, меченные липофильным красителем Dil, делятся, мигрируют из внутренней стенки центрального канала в очаги демиелинизации, расположенные в дорзальных канатиках. Причем максимальное количество мигрировавших клеток наблюдалось на 10 день после иммунизации, оставаясь стабильно высоким вплоть до 20 дня от начала эксперимента. Непосредственно в очаге воспаления нейрональ-ные стволовые клетки дифференцируются в олигодендроциты, являясь тем самым источником ремиелинизации при Э.А.Э. Обнаружение Dil меченых клеток, колокализованных с ED1 положительными клетками указывает на то, что нейрональные стволовые клетки могут являться объектом прямой макрофагальной атаки при Э.А.Э. Следует отметить, что полученные нами данные подтверждают исследования Nathalie Picard-Riera (Nathalie Picard-Riera et al., 2002), в которых был доказан факт пролиферации, миграции и дифференцировки в олигодендроциты нейрональных стволовых клеток, происходящих из субвен-трикулярной зоны, в очагах демиелинизации в мозолистом теле. Результаты нашей работы позволяют предположить, что нейрональные стволовые клетки обладают значительным миграционным потенциалом, способны реагировать на повреждение Ц.Н.С. пролиферацией и дифференцировкой, манипулирование которыми может являться одной из многообещающих терапевтических стратегий при лечении P.C. Одной из таких стратегий является трансплантация нейрональных стволовых клеток, которая в показала свою эффективность в экспериментальных условиях. Так в работе Pluchino, S. (Pluchino, S et al., 2003) син-генные нейрональные стволовые клетки, введенные внутрижелудочково и внутривенно мышам, переносящим Э.А.Э., были обнаружены в очагах демиелинизации, где они дифференцировались в олигодендроциты, способные мие-линизировать поврежденные аксоны, что сопровождалось снижением степени демиелизации и аксонального повреждения, что в свою очередь послужило причиной клинического и нейрофизиологического улучшения Э.А.Э. Примечательно, что вновь образовнные олигодендроциты были преимущественно донорского происхождения, в то время как количество олигодендроцитов, образованных из эндогенных источников было незначительно. Указанные данные совпадают с нашими, поскольку количество клеток, окрашенных Dil и экспрес-сирующих 04 антиген, обнаруженных на криостатных срезах спинного мозга, проходящих через середину очага демиелинизации было невелико. Таким образом, причина неспособности эндогенных стволовых клеток к эффективной ре-миелинизации остается неизвестной. Однако существующие на сегодняшний день экспериментальные данные позволяют предположить, что вероятными причинами, тормозящими дифференцировку стволовых клеток в очаге демиелинизации, могут являться недостаточность ростовых факторов, а так же молекулы - эффекторы, принимающие участие в повреждении олигодендроцитов. Так, например, назначение фибробластного ростового фактора (FGF2) переносящим M.O.G. индуцированный энцефаломиелит крысам приводило к клиническому улучшению и значительно увеличивало количество клеток предшественников олигодендроцитов (Ruffini 2001), обеспечивая усиление процессов ре-миелинизации и снижение степени аксонального повреждения. Токсические метаболиты в воспалительно демиелинизирующем очаге могут играть роль в повреждении клеток предшественников, в частности оксид азота и пероксинит-риты (Brosnan CF 1994).

Кроме того, оксид азота может являться фактором, отвечающим за прекращение клеточной пролиферации и начало клеточной дифференцировки. Так, например, в ходе эмбрионального развития крыс было показано, что усиление экспрессии NOS мРНК в Ц.Н.С. совпадает по времени с прекращением деления клеток предшественников и началом их дифференцировки (Bredt and Snyder, 1994). А в Ц.Н.С. взрослых мышей NOS позитивные нейроны располагаются в непосредственной близости от участков интенсивного нейрогенеза (Moreno-Lopez et al., 2000). Применение ингибитора NOS L-NAME в ходе эмбриогенеза головастика рода Xenopus приводило к увеличению количества пролифери-рующих клеток и увеличению количества вещества мозга, в то время как введение NO донора приводило к противоположному эффекту (Peunova N. et al.,

2001). Примечательно, что внутрижелудочковое введение L-NAME посредством осмотических минипомп здоровым крысам приводило к усилению процессов нейрогенеза в субвентрикулярной зоне и ростральном миграционном пути, источником которого являлись нейрональные стволовые клетки (Packer М et al.,

2002). Вопрос о том, в какой степени эффекты NO как регулятора пролиферации и дифференцировки стволовых клеток, реализуются при Э.А.Э., а так же влияние L-NAME на пролиферацию, миграцию и дифференцировку нейрональных стволовых клеток, являющихся источниками ремиелинизации при ЭАЭ, остается неизученным, и требующим проведением дополнительных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Данилов, Александр Игоревич, 2004 год

1. Бойко А.Н., Фаворова О.О. Рассеянный склероз: молекулярные и клеточные механизмы. Молекулярная биология (Москва) -1995-№29-т.4-с.727 -749.

2. Бойко В.М. Гусев Е.И. Бета-интерферон при лечении рассеянного склероза: сравнительное исследование и необходимость индивидуального подбора терапии при различных типах течения. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова-2002 прил.-с.65 - 67.

3. Бриннар В.В., Позер Ч.М. Лабораторная диагностика рассеянного склероза // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова. 2002 - прил.- с. 7- 14.

4. Вилков Г.А., Хоружая Т.А. Течение экспериментального аллергического энцефаломиелита у собак с нарушенной функцией гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы.// Патология Физиология Экспериментальная терапия.- 1968 №12 - т.6 - с.73 - 74.

5. Вилков Г.А, Межова Л.И. Пассивный перенос экспериментального аутои-мунного энцефаломиелита посредством сывороточных антимозговых антител. // Бюллютень экспериментальной биологической медицины.-1974-№78-т. 11-е. 76-79.

6. Вилков Г.А, Мартирозян В.В., Межова Л.И., Мзокова В.М. Имунные комплексы при рассеянном склерозе и экспериментальном аллергическом эгце-фаломиелите. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова.-1979-№79-т.2-с.139 -42.

7. Гервазиева В.Б., Сверановская В.В. Определение циркулирующих анти-миелиновых антител и фиксации гамма глобулинов при экспериментальном аллергическом энцефаломиелите. // Журнал микробиологии Эпидемиологии и Иммунобиологии.-1973-№50-т.9-с.21 25.

8. Горбачев В.И., Ковалев В.В. Роль оксида азота в патогенезе поражений центральной нервной системы. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова 2002 - прил. №7. - с.9 - 16.

9. Грибкова И.В., Шуберт Р., Серебряков В.Н. Изучение влияния NO на калльций зависимые натриевые каналы крысиных аортальных гладкомышеч-ных клеток. // Российский журнал физиологии им. И.М. Сеченова 2002 -№88-t9-c.il 19- 1205.

10. Дьяконова И.Н., Равкина Л.И., Матвеева Т.И., Камзев В.Д., Краснова В.М. Хронический эксперментальный энцефаломиелит у взрослых макак резусов.// Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова -1982-№82-T.7-C.40 45.

11. Заприянова Е., Делева Д., Бакалска М., Фильчев Н. Хронический релап-сирующий аллергический энцефаломиелит у крыс вида Люис, как модель рассеянного склероза. // Мофология 1997 №112 - т.6 - с. 25 -28

12. Зинченко А.Р., Шамрей Р.К. Вирус нейтрализующие и антимозговые антитела при рассеянном склерозе и рассеянном энцефаломиелите. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова 1968 - №68 - т.4 - с.541 -548.

13. Карлов В.А., Хохлов А.П., Рязанцев В.В, Навасардьянц Д.Г., Савин A.A. Клиническое значение определения содержания нитратов в крови больных с диссеминированым склерозом. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова 1995 - №95-т.5 - с. 27 - 30.

14. Мачерет E.JL, Ярош A.A., Корчемный В.А., Панченко Л.П. Морфологическое сравнение поражения нервной системы при рассеянном склерозе и экспериментальном аллергическом энцефаломиелите.// Врачебное Дело — 1987 -№12-с. 64- 68.

15. Миллер А., Ениня Г., Метра М., Платкаис А., Кукайне Р. Молекулы клеточной адгезии как маркеры иммунологической активности при рассеянном склерозе. / Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова — 2003 -№103 т. 1 - с.35 - 38.

16. Милютин JT.B., Вилков Г.А., Трапезонцеева Р.А, Аргинин эстеразная, каллекреиновая и антитриптиновая активность при экспериментальном аллергическом энцефаломиелите у собак. // Вопр Мед Химии -1975 -№21 т.З -с.254 - 258.

17. Равкина Л.И. Тюфанов A.B. Морфологические изменил в центральной нервной системы обезьян с хроническим экспериментальным аллекгическим энцефаломиелитом. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова -1975-№75-т. 7-с. 1011 1017.

18. Стебикова Е.Ф Экспериментальный аллергический энцефаломиелит у собак. // Патология Физиология Экспериментальная терапия. №10 - т.2 - с.68 -73.

19. Тотолян H.A., Лучакова О.С. Антитела к мозговым галактоцереброзидам в сыворотке и цереброспинальной жидкости пациентов с рассеянным склерозом. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова 1996 - №96 -т.4 - с.75 - 77.

20. Тотолян Н.А., Трофимова Т.Н., Скоромец А.А., Тютин Л.А., Поздняков А.В., Тучкова И.К. Возможности магнитно резонансной визуализации при диагностике рассеянного склероза. // Журнал неврологии и Психиатрии им. С.С. Корсакова 2002 - прил. - с.32 - 41.

21. Шубладзе А.К., Бучкова Е.Н., Ванаг К.А. Хронический энцефаломиелит у белых крыс и морских свинок. // Вопросы вирусологии. 1976 - №4 - с. 410 -415.

22. Храпов Н.В., Маленкова И.В., Ванин А.Ф. S-нитрозотиоловые и динитро-зотиоловые железосодержащие комплексы как источник оксида азота у животных. // Биофизика 1995 - №40 - т1- с. 117-121.

23. Acar G., Idiman F., Kirkali G., Cakmakci H., Ozakbas S. Nitric oxide as an activity marker in multiple sclerosis. // J. Neurol. 2003 - Vol.250 - P.588 - 592

24. Ahern G.P., Hsu S.F., Jackson M.B. Direct actions of nitric oxide on rat neurohypophysial K+ channels. // J. Physiol, (bond) 1999 - Vol 520-P. 165 - 176.

25. Ahern G.P., Hsu S.F., Klyachko V.A., Jackson M.B. Induction of persistent sodium current by exogenous and endogenous nitric oxide. // J. Biol. Chem. -2000 Vol. 275 -P.28810 - 28815.

26. Albina J.E., Henry W.L. Jr. Suppression of lymphocyte proliferation through the nitric oxide synthesizing pathway. // J. Surg. Res. 1991 -Vol. 50 - P. 403 -409.

27. Altrnan J., and Das G.D. Autoradiographic and histological evidence of postnatal neurogenesis in rats. //J. Comp. Neurol 1965 - Vol. 124 - P. 319 -335.

28. Andersson K.E. Neurotransmitters and neuroreceptors in the lower urinary tract. // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 19968 - Vol. 5 - P. 361 - 365

29. Archer D.R., Cuddon P.A., Lipsitz D., Duncan I.D. Myelination of the canine central nervous system by glial cell transplantation: a model for repair of human myelin disease. // Nat. Med. 1997 - Vol. 3 - P. 54- 59.

30. Arenella L., Herdon R. Mature oligodendrocytes. Division following experimental demyelination in adult animals. // Archives in Neurology 1984 - Vol. 41 -P. 1162- 1165.

31. Armstrong R.C., Dorn H.H., Kufta C.V., Friendman E. and Dubosis-Dalco M.E. Preoligodendrocytes from adult human CNS. // Journal of Neuroscience -1992-Vol. 12-P. 1538- 1547.

32. Barnes P.J., Liew F.Y. Nitric oxide and asthmatic inflammation. // Immunol. Today 1995-Vol. 16-P. 128- 130.

33. Beattie M.S., Bresnahan J.C., Komon J., Tovar C.A., Van Meter M., Anderson D.K., Faden A.I., Hsu C.Y., Noble L.J., Salzman S., Young W. Endogenous repairafter spinal cord contusion injuries in the rat. // Exp. Neurol.- 1997 Vol. 148 -№2-P. 453 - 63.

34. Ben-Nun A., Wekerle H., Cohen I.R. The rapid isolation of clonable antigen-specific T lymphocyte lines capable of mediating autoimmune encephalomyelitis. //Eur. J. Immunol 1981 - Vol. 11 - P. 195 - 199.

35. Pharmacology. Vol. "Nitric Oxide" - P443 - 492 (Springer, Heidelberg, 2000).

36. Billiar T.R Nitric oxide. Novel biology with clinical relevance. // Ann. Surg. -1995-Vol. 221-P. 339 349.

37. Blakemore W.F. Remyelination of the superior cerebellar peduncle in the mouse induced by cuprizone. // Journal of Neurological Sciences 1974 — Vol. 20 -P. 63 -72.

38. Blakemore W.F. and Patterson R.C. Suppression of remyelination in the CNS by X-irradiation. // Acta Neuropatho.l 1978 - Vol. 42 - P. 105 - 113.

39. Bo L., Dawson T.M., Wesselingh S., Mork S., Choi S., Kong P.H., Hanley D., Trapp B.D. Induction of nitric oxide synthase in demyelinating regions of multiple sclerosis brains. // Ann. Neurol. 1994 - Vol. 16 - P. 778 - 786.

40. Bogdan C. Nitric oxide and immune responce. // Nature 2001 - Vol. 2 - №10 -P. 907 -916.

41. Boje K.M., Arora P.K. Microglial-produced nitric oxide and reactive nitrogen oxides mediate neuronal cell death. // Brain Res. 1992 - Vol. 587 - P. 250 - 256.

42. Bonetti B., Raine C.S. Multiple sclerosis: oligodendrocytes display cell death-related molecules in situ but do not undergo apoptosis. // Ann. Neurol — 1997 -Vol. 42-P. 74-84.

43. Brenman J.E., Bredt D.S. Synaptic signaling by nitric oxide. // Curr. Opin. Neurobiol 1997 - Vol. 7 - P. 374 - 378.

44. Brenner T., Brocke S., Szafer F., Sobel R.A., Parkinson J.F., Perez D.H., Steinman L. Inhibition of nitric oxide synthase for treatment of experimental autoimmune encephalomyelitis. // J. Immunol. 1997 - Vol. 158 - P. 2940 - 2946.

45. Bredt D.S., Snyder S.H. Transient nitric oxide synthase neurons in embryonic cerebral cortical plate, sensory ganglia, and olfactory epithelium. // Neuron 1994 -Vol. 13-P. 301-313.

46. Bornstein M.B., Raine C.S. Experimental allergic encephalomyelitis: demyelination, remyelination and sclerosis in cultured mammalian CNS tissue. // Trans. Am. Neurol. Assoc. 1969 - Vol. 94 - P. 46 - 47.

47. Brosnan C.F., Bornstein M.B., Bloom B.R. The effects of macrophage depletion on the clinical and pathologic expression of experimental allergic encephalomyelitis.//J. Immunol. 1981 - Vol. - 126-P. 614-620.

48. Brosnan C.F., Battistini L., Raine C.S., Dickson D.W., Casadevall A., Lee S.C. Reactive nitrogen intermediates in human neuropathology: an overview. // Dev. Neurosci. 1994-Vol. 16-P. 152 - 161.

49. Brouckaert P., Libert C., Everaerdt B., Takahashi N., Cauwels A., Fiers W. Tumor necrosis factor, its receptors and the connection with interleukin 1 and in-terleukin 6. // Immunobiology 1993 - Vol. 187 - P. 317 - 329.

50. Brown A., McFarlin D.E., Raine C.S. Chronologic neuropathology of relapsing experimental allergic encephalomyelitis in the mouse. // Lab. Invest. 1982 - Vol. 46 - P. 171 - 185.

51. Bruck W., Schmied M., Suchanek G., Bruck T., Breitchopf H., Poser S., Pid-dlesdan S.; Lassmann H. // Oligodendrocytes in the early course of multiple sclerosis. Annals of Neurology 1994 - Vol. 35 - P. 65 - 73.

52. Brundin L., Morcos E., Olsson T., Wiklund N.P., Andersson M. Increased intrathecal nitric oxide formation in multiple sclerosis; cerebrospinal fluid nitrite as activity marker. // Eur. J. Neurol. 1999 - Vol. 6 - P. 585 - 590.

53. Charcot M. Histologic de la sclerose en plague. // Gaz Hop (Paris) 1868 -Vol 41 - P. 554-; 558.

54. Calabrese V., Bates T.E., Stella A.M. NO synthase and NO-dependent signal pathways in brain aging and neurodegenerative disorders: the role of oxidant/antioxidant balance. // Neurochem. Res 2000 - Vol. 25 - P. 1315-1341.

55. Carrol W.M., Jennings A.R.; Ironside L.J. Identification of the adult resting progenitor cell by autoradiographic tracking of oligodendrocyte precursors in experimental CNS demyelination. //Brain 1998 - Vol. 121 - P. 293 - 302.

56. Chang A., Nishiyama A., Peterson J., Prineas J., Trapp B.D. NG2-positive oligodendrocyte progenitor cells in adult human brain and multiple sclerosis lesions. // J. Neurosci. 2000 - Vol. 20 - P. 6404 - 6412.

57. Garthwaite G., Goodwin D.A., Garthwaite J. Nitric oxide stimulates cGMP formation in rat optic nerve axons, providing a specific marker of axon viability. // Eur. J. Neurosci. 1999 - Vol. 11 - P. 4367 - 4372.

58. Castelijns J.A., Barkhof F. Magnetic resonance imaging as a marker for muti-ple sclerosis. // Biomed. and pharmacotherapy 1999 - Vol. 53 - P. 351 - 357.

59. Clancy R.M., Leszczynska-Piziak J., Abramson S.B., Nitric oxide, an endothelial cell relaxation factor, inhibits neutrophil superoxide anion production via a direct action on the NADPH oxidase. // J. Clin. Invest. 1992 - Vol. 90 — P. 1116 — 1121.

60. Compston A., Sawcer S. Genetic analysis of multiple sclerosis. // Curr. Neurol. Neurosci. Rep. 2002 - Vol. 2 - №3 - P. 259 -266.

61. Crow J.P, Ischiropoulos H. Detection and quantitation of nitrotyrosine residues in proteins: in vivo marker of peroxynitrite. // Methods Enzymol. 1996 - Vol. 269-P. 185- 194.

62. Cross A.H., Manning P.T., Stern M.K., Misko T.P. Evidence for the production of peroxynitrite in inflammatory CNS demyelination. // J. Neuroimmunol. -1997-Vol. 80-P. 121 130.

63. Cross A.H., Manning P.T., Keeling R.M., Schmidt R.E., Misko T.P. Peroxynitrite formation within the central nervous system in active multiple sclerosis. // J. Neuroimmunol. 1998 - Vol. 88 - P. 45 - 56.

64. Damoiseaux J.G., Dopp E.A., Calame W., Chao D., MacPherson G.G., Dijkstra C.D. Rat macrophage lysosomal membrane antigen recognized by monoclonal antibody EDI.//Immunology 1994-Vol. 83-P. 140- 147.

65. Dawson J.W. The histology of disseminated sclerosis. // Trans. Roy. Soc. Ed-inb.- 1916-Vol. 50-P. 517-740.

66. Deakin A.M., Payne A.N., Whittle B.J.R. The modulation of IL-6 and TNFa release by nitric oxide following stimulation of J774 cells with LPS and IFN gamma. // Cytokine 1995 - Vol. 7 - P. 408-416.

67. Delacourte A. Pathological tau proteins of Alzheimer's disease as a biochemical marker of neuro.brillary degeneration. // Biomed. Pharmacother. 1994 - Vol. 48-P. 287-95.

68. De Waegh S.M., Lee V.M., Brady S.T. Local modulation of neurofilament phosphorylation, axonal caliber, and slow axonal transport by myelinating Schwann cells. // Cell 1992 - Vol. 68 - №3 - P. 451 -463.

69. Ding M., Wong J.L., Rogers N.E., Ignarro L.J., Voskuhl R.R., Gender differences of inducible nitric oxide production in SJLrJ mice with experimental autoimmune encephalomyelitis. // J. Neuroimmunol. 1997 - Vol. 77 - P. 99 — 106.

70. Ding M., Zhang M., Wong J.L., Rogers N.E., Ignarro L.J., Voskuhl R.R. Antisense knockdown of inducible nitric oxide synthase inhibits induction of experimental autoimmune encephalomyelitis in SJL/J mice. // J. Immunol. 1998 - Vol. 160-P. 2560-2564.

71. Doetsch F., Garcia-Verdugo J.M., and Alvarez-Buylla A. Cellular composition and three-dimensional organization of the subventricular germinal zone in the adult mammalian brain. // J. Neurosci. 1997 - Vol. 17 - P. 5046 - 5061.

72. Dowling P., Husar W., Menonna J., Donnenfeld H., Cook S., Sidhu M. Cell death and birth in multiple sclerosis brain. // J. Neurol. Sci. 1997 - Vol. 149 - P. 1 -11.

73. Dowling P., Raval S., Húsar W., Casaccia-Ponnefil P., Chao M., Cook S., Blumberg B. Expression of the p75 neurotrophin receptor in oligodendrocytes in multiple sclerosis brain. // Neurology 1997 - Vol. 48 - P. 25.

74. Dawson M.R., Levine J.M., Reynolds R. NG2-expressing cells in the central nervous system: are they oligodendroglial progenitors? // J. Neurosci. Res 2000 -Vol. 61 - P. 471 -479.

75. Dawson V.L., Brahmbatt H.P., Mong J.A., and Dawson T.M. Expression of inducible nitric oxide synthase causes delayed neurotoxicity in primary mixed neuronal glial cell cultures. // Neuropharmacology 1994 - Vol. 33 - P. 1425 - 1430.

76. Ehren I., Hosseini A., Lundberg J.O., Wiklund N.P. Nitric oxide: a useful gasiin the detection of lower urinary tract inflamation. // J. Urol. Aug 1999 - Vol. 162 ^ - №2 - P. 327 - 329.

77. Engel U. and Wolswijk G. Oligodendrocyte-type 2 astrocyte (0-2A) progenitor cells derived from adult rat spinal cord: in vitro characteristics and response to PDGF, bFGF and NT-3. // Glia 1996 - Vol. 16 - P. 16 - 26.

78. Fenyk-Melody J.E., Garrison A.E., Brunnert S.R., Weidner J.R., Shen F., Shelton B.A., Mudgett J.S. Experimental autoimmune encephalomyelitis is exacerbated in mice lacking the NOS2 gene. // J. Immunol. 1998 - Vol. 160 - P. 2940 -2946.

79. Ferguson В., Matyszak M.K., Esiri M.M., Perry V.H. Axonal damage in acute multiple sclerosis lesions. // Brain 1997 - Vol. 120 - P. 393 - 399.

80. Filippi M., Paty D.W., Kaposs L., Barkhof F., Compston D.A., Thommpston A.J. Corellation between changes in disabitlity and T2 weighted brain MRI activity in multiple sclerosis: a follow up study. // Neurology 1995 - Vol. 45 - P. 255 -260.

81. French-Constant C. and Raff M. C. Proliferating bipotential glial progenitor cells in adult rat optic nerve. // Nature 1986 - Vol. 319 - P. 499 - 502.

82. French-Constant C. Pathogenesis of multiple sclerosis. // Lancet — 1994 -Vol. 343 №8892 P. 271 - 275.

83. Fuchs E., Cleveland D.W. A structural scaffolding of intermediate filaments in health and disease. // Science 1998 - Vol. 279 - P. 514 - 519.

84. Garthwaite J.; Boulton C.L. Nitric oxide signaling in the central nervous system. // Annu. Rev. Physiol. 1995 - Vol. 57 - P. 683 - 706.

85. Genain C.P., Cannella B., Hauser S.L., Raine C.S. Identification of autoantibodies associated with myelin damage in multiple sclerosis. // Nat. Med. 1999 -Vol. 5-P. 170- 175.

86. Genain C.P., Nguyen M.H., Letvin N.L., Pearl R., Davis R.L., Adelman M., Lees M.B., Linington C., Hauser S.L. Antibody facilitation of multiple sclerosislike lesions in a nonhuman primate. // J. Clin. Invest. 1995 - Vol. 96 - P. 2966 -2974.

87. George Paxinos and Charles Watson "The rat brain in stereotactic coordinates." Third edition, Academic Press 1997.

88. Gensert J.M., Goldman J.E. Endogenous progenitors remyelinate demyeli-nated axons in the adult CNS. // Neuron 1997 - Vol. 19 - P. 197 - 203.

89. Gerritse K., Deen C., Fasbender M., Ravid R., Boersma W., Claassen E. The involvement of specific anti myelin basic protein antibody-forming cells in multiple sclerosis immunopathology. // J. Neuroimmunol. 1994 - Vol. 49 - P. 153 -159.

90. Giovannoni G., Heales S.J., Silver N.C., O'Riordan J., Miller R.F., Land J.M., Clark J.B., Thompson E.J. Raised serum nitrate and nitrite levels in patients with multiple sclerosis. // J. Neurol. Sci. 1997 - Vol. 145 - P. 77 - 81.

91. Giovannoni G. Cerebrospinal fluid and serum nitric oxide metabolites in patients with multiple sclerosis. // Mult. Scl. 1998 - Vol. 4 - P. 27 - 30

92. Giovannoni G., Miller N.A., Losseff M., Sailer N., Lewellyn-Smit A.J.Thompson E.J. Serum inflammatory markers and clinical/MRI markers of disease progression in multiple sclerosis. // J Neurol. 2001 - Vol. 248 - P. 487 -495.

93. Griffith O.W., Stuehr D.J. Nitric oxide synthases: Properties and catalytic mechanism. // Annu. Rev. Physiol. 1995 - Vol. 57 - P. 707 - 736.

94. Godfraind C., Freidrich V.L., Holmes K.V. and Dubois-Dalco M. In vivo analysis of glial cell phenotypes during a viral demyelinating disease in mice. // Journal of Cell Biology 1989 - Vol. 109 - P. 2405 - 2416.

95. Gold R., Zielasek J., Kiefer R., Toyka K.V., Hartung H.P. Secretion of nitrite by Schwann cells and its effect on T-cell activation in vitro. // Cell Immunol. -1996-Vol. 168-P. 69-77.

96. Gold D.P., Schroder K., Powell H.C., Kelly C.J. Nitric oxide and the immunomodulation of experimental allergic encephalomyelitis. // Eur. J. Immunol. -1997 Vol. 27 - P. 2863 - 2869.

97. Heneka T.M, Douglas L., Feinstein L. Expression and function of inducible nitric oxide synthase in neurons. // J. of Neuroimmunol. 2001 - Vol. 114 - P. 8 -18.

98. Herulf M., Ljung T., Hellstrom P.M, Weitzberg E. and Lundberg J.O.N. Increased luminal nitric oxide in inflammatory bowel disease as shown with a novel minimally invasive method. // Scand. J. Gastroenterol. 1998 - Vol. 33 - №2 - P. 164-169.

99. Hewett S.J., Corbett J.A., McDaniel M.L., Choi D.W. Interferon-gamma and interleukin-1 beta induce nitric oxide formation from primary mouse astrocytes. // Neurosci. Lett. 1993 - Vol. 164 - P. 229 - 232.

100. Hewett S.J., Misko T.P., Keeling R.M., Behrens M.M., Choi D.W., Cross A.H. Murine encephalitogenic lymphoid cells induce nitric oxide synthase in primary astrocytes. J. Neuroimmunol. 1996 - Vol. 64 - P. 201 - 208.

101. Hofman F.M., Hinton D.R., Johnson K., Merrill J.E. Tumor necrosis factor identified in multiple sclerosis brain. // J. Exp. Med. 1989 - Vol. 170 - P. 607 -612.

102. Hooper D.C., Ohnishi S.T., Kean R., Numagami Y., Dietzschold B., Ko-prowski H. Local nitric oxide production in viral and autoimmune diseases of the central nervous system. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1995 - Vol. 92 - P. 5312 -5316.

103. Hsieh S.T., Kidd G.J., Crawford T.O., Xu Z., Lin W.M., Trapp B.D. Regional modulation of neurofilament organization by myelination in normal axons. // J. Neurosci. 1994 - Vol. 14 - P. 6392 - 6401.

104. Hua L.L., Liu J.S., Brosnan C.F., Lee S.C. Selective inhibition of human glial inducible nitric oxide synthase by interferon-beta: implications for multiple sclerosis. // Ann. Neurol. 1998 - Vol. 43 - P. 384 - 387.

105. Johansson C.B., Momma S., Clarke D.L., Risling M., Lendahl U., Frisen J. Identification of a neural stem cell in the adult mammalian central nervous system. // Cell 1999 - Vol. 96 - P. 25 - 34.

106. Johansson C.B., Svensson M., Wallstedt L., Janson A.M., Frisen J. Neural stem cells in the adult human brain. // Exp. Cell. Res. 1999 - Vol. 253 - P. 733 -736.

107. Kabat E.A., Freedman D.A., Murey J.P. A study of the cristalline albumin, gamma globulin, and total protein in the cerebrospinal fluid of one hundred case of multiple sclerosis and in other diseases. // Am. J. Ved. Sci. 1950 - Vol. 219 - P. 55 - 64.

108. Kanner J., Harel S., Granit R., Nitric oxide, an inhibitor of lipid oxidation by lipoxygenase, cyclooxygenase and heM.O.G.lobin. // Lipids 1992 - Vol. 27 - P. 46-49.

109. Kapaki E., Paraskevas G.P., Michalopoulou M., Kilidiereas K. Increased cerebrospinal fluid tau protein in multiple sclerosis. // Eur. Neurol. 2000 - Vol. 43 - P. 228-232.

110. Kerlero de Rosbo N., Honegger P., Lassmann H., Matthieu J.M. Demyeli-nation induced in aggregating brain cell cultures by a monoclonal antibody against myelin/oligodendroglia glycoprotein. // J. Neurochem. 1990 - Vol. 55 - P. 583 -587.

111. Keirstead H.S., Blakemore W.F. Identification of post-mitotic oligodendrocytes incapable of remyelination within the demyelinated adult spinal cord. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1997 - Vol. 56 - P. 1191 - 1201.

112. Kurtzske J.F. Natural history and clinical outcome measure for multiple sclerosis studies. Why at the present time does EDSS scale remain a preferred outcome measure to evaluate disease evolution. // Neurol. Sci. 2000 - Vol. 21 - P. 339-334.

113. Kwon N.S., Stuehr D.J., Nathan C.F. Inhibition of tumor cell ribonucleotide reductase by macrophage-derived nitric oxide. // J. Exp. Med. 1991 - Vol. 174 -P. 761 - 767.

114. Lassman H. Comparative neuropathology of chronic experimental allergic encephalomyelitis and multiple sclerosis. // New York Springer Verlag.- 1983 P. 37-72.

115. Lassmann H., Bruck W. and Lucchinetti C. Heterogeneity of multiple sclerosis pathogenesis: implications for diagnosis and therapy. // Trends Mol Med -2001 Vol. 7-P. 115 -121.

116. Leone A.M., Francis P.L., Rhodes P., Moncada S. A rapid and simple method for the measurement of nitrite and nitrate in plasma by high performance capillary electrophoresis. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994 - Vol. 200 P. 951 - 957.

117. Levine J.M., Stallcup W.B. Plasticity of developing cerebellar cells in vitro studied with antibodies against the NG2 antigen. // Neurosci. 1987 - P. 2721 -2731.

118. Levine J.M., Stingtone F. and Lee Y.S. Development and differentiation of glial precursor cells in the rat cerebellum. // Glia 1993 - Vol. 7 - P. 307 - 321.

119. Levine J.M. Increased expression of the NG2 chondroitin-sulfate proteoglycan after brain injury. // Journal of Neuroscience 1994 - Vol. 14 - P. 4716 -4730.

120. Levin J. M., Enquist L. W. & Card J. P. (1998) Reactions of oligodendrocyte precursor cells to alpha herpesvirus infection of the central nervous system. Glia 23,316-328.

121. Liblau R.S., Singer S.M., McDevitt H.O. Thl and Th2 CD4+ T cells in the pathogenesis of organ-specific autoimmune diseases. // Immunol. Today 1995 -Vol. 16-P. 34-38.

122. Lin R.F., Lin T.S., Tilton R.G., Cross A.H. . Nitric oxide localized to spinal cords of mice with experimental allergic encephalomyelitis: an electron paramagnetic resonance study. // J. Exp. Med. 1993 - Vol. 178 - P. 643 - 648.

123. Linington C., Engelhardt B., Kapocs G., Lassman H. Induction of persistently demyelinated lesions in the rat following the repeated adoptive transfer of encephalitogenic T cells and demyelinating antibody. // J. Neuroimmunol. 1992 -Vol. 40-P. 219-224.

124. Linington C., Hauser S.L. Antibody facilitation of multiple sclerosis-like lesions in a nonhuman primate. // J. Clin. Invest. 1995 - Vol. 96 - P. 2966 - 2974.

125. Link J., Soderstrom M., Olsson T., Hojeberg B., Ljungdahl A., Link H. Increased transforming growth factor-beta, interleukin-4, and interferon-gamma in multiple sclerosis. // Ann. Neurol. 1994 - Vol. 36 - P. 379 - 386.

126. Lipton S.A., Choi Y.B., and Pan Z.H. A redox based mechanism for the neuroprotective and neurodestructive effects of nitric and related nitroso-compounds. // Nature 1993 - Vol. 364 - P. 626 - 632.

127. Lobzin VS, Zhulev NM, Tiukakina AB, Badzgaradze IuD. Multiple and multilevel compression radiculoneuropathies. // 1992. Lik Sprava. - Vol. 7. - P. 89-92.

128. Lois C., and Alvarez-Buylla A. Proliferating subventricular zone cells in the adult mammalian forebrain can differentiate into neurons and glia. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993 -Vol. 90 - P. 2074 - 2077.

129. Lorente J.A., Landin L., Renes E., De Pablo R., Jorge P., Rodena E., Liste D. Role of nitric oxide in the hemodynamic changes.of sepsis. // Crit. Care Med. -1993 -Vol. 21-P. 759 -767.

130. Lucchinetti C., Bruck W., Parisi J., Scheithauer B., Rodriguez M., Lassmann H. Heterogeneity of multiple sclerosis lesions: implications for the pathogenesis of demyelination. // Ann. Neurol. 2000 - Vol. 47 - P. 707 - 717.

131. Ludowyk P.A., Hughes W., Hugh A., Willenborg D.O., Rockett IC.A., Parish C.R. Astrocytic hypertrophy: an important pathological feature of chronic experimental autoimmune encephalitis in aged rats. // J. Neuroimmunol. — 1993 -Vol. 48-P. 121-134.

132. Ludwin S.K. and Szuchet, S. Myelination by mature ovine oligodendrocytes in vivo and in vitro: evidence that different steps in the myelination process are independently controlled. // Glia 1993 - P. 219-231.

133. Luks A. An exact substitute of the Kruskal-Wallis test for several two-member samples. // Acta Univ. Palacki. Olomuc. Fac. Med. 1980 - Vol. 94 - P. 373 - 383.

134. Luskin M.B. Restricted proliferation and migration of postnatally generated neurons derived from the forebrain subventricular zone. // Neuron — 1993 Vol. 11,-P. 173 - 189.

135. Lyons J.A., San M., Happ M.P., Cross A. B-cells are critical to induction encephalomyelitis and multiple sclerosis. // Neurology 1999 - Vol. 45 - P. 1115.

136. Lycke J.N., Karlsson J.E., Andersen O., Rosengren L.E. Neurofilament protein in cerebrospinal fluid: a potential marker of activity in multiple sclerosis. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry -1998 Vol. 64 - P. 402 - 404.

137. Machleidt T., Kramer B., Adam D., Neumann B., Schutze S., Wiegmann K., Kronlce M. Function of the p55 tumor necrosis factor receptor "death domain" mediated by phosphatidylcholinespecific phospholipase. // C. J. Exp. Med. 1996 -Vol. 184-P. 725 -733.

138. Marburg O. Die sogenannte 'alcute Multiple Sklerose'. Jahrb. Psychiatrie -1906-Vol. 27-P. 211-312.

139. Martino GR., Furlan E., Brambilla A., Bergami F., Ruffini M., Gironi P.L., Poliani L., Grimaldi M.E., Comi G. Cytokines and immunity in multiple sclerosis: the dual signal hypothesis. // Journal of Neuroimmunology 2000 - Vol. 109 - P. 3-9.

140. McMillan R.M., Hasselbacher P., Hahn J.L., Harris E.D. Interactions of murine macrophages with monosodium urate crystals: stimulation of lysosomal enzyme release and prostaglandin synthesis. // J. Rheumatol. 1981 - Vol. 8 - P. 555 -562.

141. Merrill J.E., Strom S.R., Ellison G.W., Myers L.W. In vitro study of mediators of inflammation in multiple sclerosis. // J. Clin. Immunol. 1989 - Vol. 9 - P. 84-96.

142. Merrill J.E., Koyanagi Y., Zack J., Thomas L., Martin F., Chen I.S. Induction of interleukin-1 and tumor necrosis factor alpha in brain cultures by human immunodeficiency virus type 1. //J. Virol. 1992 - Vol. 66 - №4 - P. 2217 -2225.

143. Merrill J.E., Benveniste E.N. Cytokines in inflammatory brain lesions: helpful and harmful. // Trends. Neurosci. 1996 - Vol.19 - №8 - P. 331 - 338 i

144. Miller D.H., Rudge P., Johnson G., Kendall B.E., Macmanus D.G., Moseley I.F. Serial gadolinium enchanced magnetic resonance imaging in multiple sclerosis. // Brain 1988 - Vol. 111 - P. 927 - 939.

145. Miller D.H., Barkhof F., Mnauta J.P. Gadolinium enchancement increases the sensitivity of MRI in detecting the disease activity in multiple sclerosis. // Brain 1993 - Vol. 116 - P. 1077 - 1094.

146. Miller D.H. Guidelines for MRI monitoring of the treatment of multiple sclerosis: recommendations of the US Multiple Sclerosis Society's task force. // Mult. Scler. 1996 - Vol. 1 - P. 335 - 338.

147. Mills C.D. Molecular basis of "suppressor" macrophages. Arginine metabolism via the nitric oxide synthetase pathway. // J. Immunol. 1991 - Vol. 146 - P. 2719-2723.

148. Misko T.P., Trotter J.L., Cross A.H. Mediation of inflammation by encepha-litogenic cells: interferon gamma induction of nitric oxide synthase and cyclooxy-genase 2. // J. Neuroimmunol. 1995 - Vol. 61 - P. 195 - 204.

149. Moreno-Lopez B., Noval J.A., Gonzalez-Bonet L.G., Estrada C. Morphological bases for a role of nitric oxide in adult neurogenesis. // Brain Res. — 2000 -Vol. 30-P. 244-250.

150. Myers K.J., Sprent J., Dougherty J.P., Ron Y. Synergy between encephalito-genic T cells and myelin basic protein-specific antibodies in the induction of ex- \ perimental autoimmune encepalomyelitis. // J. Neuroimmunol. 1991 - Vol. 41 —1. P. 1-8.

151. Nathan C.F., Hibbs J.B. Role of Nitric oxide synthesis in macrophages an-timicrobal activity. // Curr. Opin. Immunol. 1991 - Vol. 3 - №1 - P. 65 - 70.

152. Nazliel B., Tasakiran D, Irkec C., Kutay Pou S.A. Serum nitric oxide metabolites in patients with multiple sclerosis. // Journal of Clinical Neuroscience -2002 -Vol. 9 №5 - P. 530 - 532.

153. Neumann H., Cavalie A., Jenne D.E., Wekerle H. Induction of MHC class I genes in neurons. // Science 1995 - Vol. 269 - P. 549 - 552.

154. Nicoletti F. Activation of group III metabotropic glutamate receptors inhibits the production of RANTES in glial cell cultures. // J. Neurosci. 2002 - Vol. 22 -P. 5403 - 5411.

155. Nishiiyama A., Yu M., Drazba J.A. and Tuohy V.K. Normal and reactive NG2+ glial cells are distinct from resting and activated microglia. // Journal of Neuroscience Research 1997 - Vol. 48 - P. 299 - 312. &

156. Olsson T. Cytokine-producing cells in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis. Neurology 1995 - Vol. 45 - P. 1 1 - 15.

157. Olsson T., Zhi W.W., Hojeberg B., Kostulas V., Jiang Y.P., Anderson G., Ekre H.P., Link H. Autoreactive T lymphocytes in multiple sclerosis determined by antigen- induced secretion of interferon-gamma. // J. Clin. Invest. 1990 - Vol. 86-P. 981 -985.

158. Ortiz-Ortiz L., Nakamura R.M., Weigle W.O. T cell requirement for experimental allergic encephalomyelitis induction in the rat. // J. Immunol. 1976 -Vol. 117 P. 576-579.

159. Ozava K., Suchanek G., Breitschopf H., Bruck W., Budka H., Jellinger K. and Lassman H. Patterns of oligodendroglia pathology in multiple sclerosis. // Brain 1994-Vol. 117-P. 1311 - 1322.

160. Palmer R.M.J., Ferrige A.G., Moncada S. Nitric oxide release account for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor. // Nature 1987 -Vol.327 -P. 524 - 526.

161. Palmer T.D., Takahashi J., and Gage F.H. The adult rat hippocampus contains primordial neural stem cells. // Mol. Cell. Neurosci. 1997 - Vol. 8 - P. 389 -404.

162. Panitch H.S., Hirsch R.L., Schindler J., Johnson K.P. Treatment of multiple sclerosis with gamma interferon: exacerbations associated with activation of the immune system. // Neurology 1987 - Vol. 37 - P. 1097 - 1102.

163. Packer M., Goldman S. Enikopolov G. Inhibition of nitric oxide synthase in the brain stimulates cell proliferation in mammalian adult neurogenic and non neurogenic regions. // Nitric oxide 2002 - Vol 6 - № 4 - P. 443.

164. Peltola J.; Uklconen M.; Moilanen E.; Elovaara II. Increased nitric oxide products in CSF in primary progressive MS may reflect brain atrophy. // Neurology 2001 - Vol. 57 - P. 895 - 896.

165. Penderis J, Shields S.A. and Franklin R.G.M. Impaired remyelination and depletion of oligodendrocyte progenitors does not occur following repeated episodes of focal demyelination in the rat central nervous system. // Brain 2003 -Vol. 10-P. 1093-1098.

166. Peunova N., Scheinker V., Cline H., and Enikolopov G. Nitric Oxide is an essential negative regulator of cell proliferation in Xenopus brain. // The Journal of Neuroscience 2001 - Vol.21 - P. 8809-8818.

167. Pilz R.B., Suhasini M., Idriss S., Meinkoth J.L., Boss G.R. . Nitric oxide and cGMP analogs activate transcription from AP-1 -responsive promoters in mammalian cells. // FASEB 1995 - Vol.9 - P. 552 - 558.

168. Pozza M., Bettelli C., Aloe L., Giardino L., Calza L. Further evidence for a role of nitric oxide in experimental allergic encephalomyelitis: aminoguanidine treatment modifies its clinical evolution. // Brain Res. 2000 - Vol. 855 — P. 39 -46.

169. Prineas J.W. and Connell F. Remyelination in multiple sclerosis. // Annals of Neurology 1979 - Vol. 5 - P. 22 - 31.

170. Prineas J.W., Kwon E.E., Goldenberg P.Z., Ilyas A.A., Quarles R.H., Benjamins J.A., Sprinkle T.J. Multiple sclerosis. Oligodendrocyte proliferation and differentiation in fresh lesions. // Lab. Invest. 1989 - Vol. 61 - P. 489 - 503.

171. Prineas J.W., Barnard R.O., Revesz T., Kwon E.E., Sharer L., Cho E.S. Multiple sclerosis. Pathology of recurrent lesions. // Brain 1993 - Vol. 116 - P. 681 - 693.

172. Prineas J.W., Barnard R., Kwon E., Sharer L.and Cho E. Multiple sclerosis: remyelination of nascent lesions. // Annals of Neurology 1993 - Vol. 33 - P. 137 - 151.

173. Prineas J.W., McDonald W.I. Demyelinating diseases. // In: Graham, D.I., Lantos, P.L. Eds., Greenfield's Neuropathology 1997. (Oxford Univ. Press, New York), P. 813-896.

174. Pluchino S., Quattrini A., Brambilla E., Gritti A., Salani G., Dina G., Galli R., Del Carro U., Amadio S., Bergami A., Furlan R., Comi G., Vescovi A.L., Mar

175. Martino G. Injection of adult neurospheres induces recovery in a chronic model of multiple sclerosis. // Nature 2003 - Vol. 422 - P. 688 - 694.

176. Raine C., Scheinberg L. and Walts J. Multiple sclerosis: oligodendrocyte survival and proliferation in an active established lesion. // Laboratory Investigation 1981 - Vol. 45 -P. 534 - 546.

177. Raine C.S., Moore G.R., Hintzen R., Traugott U. Induction of oligodendrocyte proliferation and remyelination after chronic demyelination. Relevance to multiple sclerosis. // Lab. Invest. 1988 - Vol. 59 - P. 467 - 476.

178. Raine C.S., Wu E. Multiple sclerosis: remyelination in acute lesions. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1993 - Vol. 52 - P. 199 - 204.

179. Raine C.S., Canella В., Hauser S.L., Genain C.P. Demyelination in primate autoimmune encephalomyelitis and acute multiple sclerosis lesions: a case for antigen-specific antibody mediation. // Ann. Neurol. 1999 - Vol. 46 - P. 144 - 160.

180. Rees D.D., Palmer R.M. and Moncada S. Role of endothelium-derived nitric oxide in the regulation of blood pressure. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989 -Vol. 86-P. 3375-3378.

181. Reynolds B.A. and Weiss S. Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian nervous system. // Science 1992 - Vol. 255 -P. 1707- 1710.

182. Reynolds B.A. and Weiss S. Clonal and population analyses demonstrate that an EGF-responsive mammalian embryonic precursor is a stem cell. // Dev. Biol. 1996 -Vol.175-P. 1-13.

183. Reynolds R., di Bello I.C., Meeson A., Piddlesden S. Comparison of a Chemically Mediated and an Immunologically Mediated Demyelinating Lesion Model. // Methods 1996 - Vol. 10 - P. 440 - 452.

184. Reynolds R. and Wilkin G. Cellular reaction to an acute demyelinat-ing/remyelinating lesion of the rat brain stem: localisation of GD3 immunoreactiv-ity. // Journal of Neuroscience Research 1993 - Vol. 36 - P. 405 - 422.

185. Roel C., Van der Veen, Therese A. Dietlin, Ligaya P. and J. Dixon Gray Nitric Oxide Inhibits the Proliferation of T-Helper 1 and 2 Lymphocytes without Reduction in Cytokine Secretion. // Cellular Immunology 1999 - Vol. 193 - № 2 -P. 94-201.

186. Rodrigues M. Central nervous system demyelination and remyelination in multiple sclerosis and viral models of the disease. // J. Neuroimmunology 1992 -Vol. 40-P. 255 -264.

187. Ruuls S.R., Van Der Linden S., Sontrop K., Huitinga I., Dijkstra C.D. Aggravation of experimental allergic encephalomyelitis (EAE) by administration of nitric oxide (NO) synthase inhibitors. // Clin. Exp. Immunol. 1996 - Vol. 103 -P. 467 - 474.

188. Salter M., Knowels R. G., Moncada S. Widespread tissue distribution, species distribution and changes in activity of Ca ^-independent nitric oxide synthases. //FEBS lett; 1991 - Vol. 291 - P. 145 - 149.

189. Salvemini D., Misko T.P., Masferrer J.L., Seibert K., Currie M.G., Needle-man P. Nitric oxide activates cyclooxygenase enzymes. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1993 - Vol.90 - P. 7240 - 7244.

190. Scolding N., Franklin R., Stevens S., Heldin C.H., Compston A., Newcombe J. Oligodendrocyte progenitors are present in the normal adult human CNS and in the lesions of multiple sclerosis. // Brain 1998 - Vol. 121 - P. 2221 - 2228.

191. Scott G.S., Williams K.I., Bolton C. A pharmacological study on the role of nitric oxide in the pathogenesis of experimental allergic encephalomyelitis. // Inflamm. Res. 1996 - Vol. 45 P. 524 - 529.

192. Sherman M.P., Griscavage J.M., Ignarro L.J. Nitric oxide-mediated neuronal injury in multiple sclerosis. // Med. Hypotheses 1992 - Vol. 39 - P. 143 - 146.

193. Shibasaki H., McDonald W.I. and Kuroiwa Y. Racial modification of clinical picture of multiple sclerosis: comparison between British and Japanese patients. // J. Neurol. Sci. 1981 - Vol.49 - P. 253-71.

194. Silber E., K. Sharief M.K. Axonal degeneration in the pathogenesis of multiple sclerosis. // Journal of the Neurological Sciences 1999 - Vol. 170 - P. 1118.

195. Simmons R.D., Willenborg D.O. Direct injection of cytokines into the spinal cord causes autoimmune encephalomyelitis-like inflammation. // J Neurol Sci -1990-Vol. 100-P. 37-42.

196. Snider B.J., Choi J., Turetsky D.M. Nitric oxide reduces Ca2+ and Zn2+ influx through voltage-gated Ca2+ channels and reduces Zn2+ neurotoxicity. // Neuroscience 2000 - Vol. 100 - P. 651 - 661.

197. Smith K.J.; Kapoor R.; Hall S.M.; Davies M. Electrically active axons degenerate when exposed to nitric oxide. // Ann. Neurol. 2001 - Vol. 49 - P. 470 -476.

198. Snyder D.H., Valsamis M.P., Stone S.H., Raine C.S. Progressive demyelina-tion and reparative phenomena in chronic experimental allergic encephalomyelitis. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1975 - Vol. 34 - P. 209 - 221.

199. Sommer I. and Schachner M. Cells that are 04-antigen-positive and 01-antigen negative differentiate into 01 antigen-positive oligodendrocytes. // Neuroscience Letters 1981 - Vol. 29-P. 183 - 188.

200. Spéciale L., Sarasella M., Ruzzante S., Caputo D., Mancuso R., Calvo M.G., Guerini F.R., Ferrante P. Endothelin and nitric oxide levels in cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis. // J. Neurovirol. 2000 - Vol.6 - Suppl. 2 - P. 62 - 66.

201. Stamler J.S., Singel D.J., Loscalzo J. Biochemistry of nitric oxide and its re-dox-activated forms. // Science 1992 - Vol. 258 - P. 1898 - 1902.

202. Stendahl-Brodin L., Link H. Relation between benign course of multiple sclerosis and low grade humoral immune response in cerebrospinal fluid. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1980 - Vol. 43 - P. 102 - 105.

203. Steiman L. The pathogenesis of multiple sclerosis consists of an inflammatory and neurodegnerative phase. Better understanding of these stages has aided the development of specific therapeutic targets. // Nature immunology 2001 -Vol. 2 - №9.

204. Steiner I., Nissipiani P., Wirguin I. Infectious and ethiology and pathogenesis of multiple sclerosis. // Curr. Neurol. Neurosci. Rep. 2001 - Vol. 1 - №3 - P. 271 -276.

205. Storch M., Lassman H. Pathology and pathogenesis of demyelinating diseases. // Curr. Opin. Neurol. 1997 - Vol. 10 P. 192.

206. Storch M.K., Piddlesden S., Haltia M., Livanainen M., Morgan P., Lassman H. Multiple sclerosis: in situ evidence for antibody- and complement-mediated demyelination. // Ann. Neurol. 1998 - Vol. 43 - P. 465 - 471.

207. Svenningsson A., Petersson A.S., Andersen O., Hansson G.K. Nitric oxide metabolites in CSF of patients with MS are related to clinical disease course. // Neurology 1999-Vol. 53-P. 1880 - 1882.

208. Tada Y., Ho A., Matsuyama T., Male T.W. Reduced incidence and severity of antigen-induced autoimmune diseases in mice lacking interferon regulatory fac-tor-1. // J. Exp. Med. 1997 - Vol. 185 - P. 231 - 238.

209. Temple S., Alvarez-Buylla A. Stem cells in the adult mammalian central nervous system. // Curr. Opin. Neurobiol. 1999 - Vol. 9 - P. 135 - 141.

210. Trapp B.D., Bo L., Mork S., Chang A. Pathogenesis of tissue injury in MS lesions. // J. Neuroimmunol. 1999 - Vol. 98 №1 - P. 49 - 56.

211. Traugott U., Lebon P. Interferon-gamma and la antigen are present on astrocytes in active chronic multiple sclerosis lesions. // J Neurol. Sci. 1988 - Vol.84 -P. 257-264.

212. Tschaikowsky K., Schmidt J., Meisner M. Modulation of mouse endotoxin shock by inhibition of phosphatidylcholine-specific phospholipase C. J. Pharmacol. // Exp. Ther. 1998 - Vol. 285 - P. 800 - 804.

213. Vane J.R., Mitchell J.A., Appleton I., Tomlinson A., Bishop-Bailey D., Croxtall J., Willoughty D.A. Inducible isoforms of cyclooxygenase and nitric oxide synthase in inflammation. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1994 - Vol. 91 -2046-2050.

214. Van der Veen R.C., Hinton D.R., Incardonna F., Hofman F.M. Extensive peroxynitrite activity during progressive stages of central nervous system inflammation. // J. Neuroimmunol. 1997 - Vol. 77 - P. 1 - 7.

215. Vandvik B. Oligoclonal IgG and free light chains in the cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis and infectious diseases of the central nervous system. // Scand. J. Immunol. 1977 - Vol.6 - P. 913 - 922.

216. Warren K.G., Catz I. Increased synthetic peptide specificity of tissue-CSF bound anti-MBP in multiple sclerosis. // J. Neuroimmunol. — 1993 Vol. 43 - P. 87-96.

217. Weiss S., Dunne C., Hewson J., Wohl C., Wheatley M., Peterson A.C. and Reynolds B.R. Multipotent CNS stem cells are present in the adult mammalian spinal cord and ventricular neuroaxis. // J. Neurosci. 1996 - Vol. 16 - P. 7599 -7609.

218. Wekerle H., Kojima K., Lannes-Vieira J., Lassmann H., Linington C. Animal models of multiple sclerosis. // Ann. Neurol. 1994 - Vol. 36 - P. 47 - 53.

219. Wink D.A., Kasprzak IC.S., Maragos C.M., Elesperu R.K., Misra M., Du-nams T.M., Cebula T.A. Koch W.H. Andrews A.W, Allen J.S. DNA deaminating ability and genotoxicity of nitric oxide and its progenitors. // Science 1991 - Vol. 254-P. 1001 - 1003.

220. Wolswijk G., Noble M. Identification of an adult-specific glial progenitor cell. // Development 1989 - Vol. 105 - P. 387 - 400.

221. Wolswijk G. Chronic stage multiple sclerosis lesions contain a relatively quiescent population of oligodendrocyte precursor cells. // J. Neurosci. 1998 -Vol. 18-P. 601-609.

222. Wolswijk G. GD3+ cells in the adult optic nerve are ramified microglia rather than 0-2A adult progenitor cells. // Glia 1994 - Vol. 10 - P. 244 - 249.

223. Wren D., Wolswijk G. and Noble M. In vitro analysis of the origin and maintenance of 02A adult progenitor cells. Journal of Cell Biology 1992 - Vol. 16-P. 167- 176.

224. Yamashita T., Ando Y., Obayashi K., Uchino M., Ando M. Changes in nitrite and nitrate (N02-/N03-) levels in cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis. J. Neurol. Sci. 1997 - Vol. 153 - P. 32 - 34.

225. Zielasek J., Tausch M., Toyka K.V., Hartung H.P. Production of nitrite by neonatal rat microglial cellsrbrain macrophages. // Cell. Immunol. 1992 - Vol. 141 P. Ill - 120.

226. Zielasek J., Jung S., Gold R., Liew F.Y., Toyka K.V., Hartung H.P. Administration of nitric oxide synthase inhibitors in experimental autoimmune neuritis and experimental autoimmune encephalomyelitis. // J. Neuroimmunol. 1995 - Vol. 58 -P. 81 -88.

227. Zhou L., Trapp B.D., Miller R.H. Demyelination in the central nervous system mediated by an anti- oligodendrocyte antibody. // J. Neurosci. Res. 1998 -Vol. 54-P. 158 - 168.