Роль межклеточных взаимодействий в развитии гормональной резистентности клеток рака молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Семина Светлана Евгеньевна

• Семина Светлана Евгеньевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Семина Светлана Евгеньевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Стероидные гормоны и их физиологическая роль в развитии молочной железы

1.1.1. Роль эстрогенов в развитии молочной железы

1.1.2. Структура рецепторов эстрогенов

1.1.3. Механизмы действия стероидных гормонов

1.2. Развитие злокачественных опухолей РМЖ

1.2.1. Гормональная резистентность

1.2.2. Механизмы гормональной резистентности РМЖ

1.3. Виды межклеточных взаимодействий и развитие молочной железы

1.3.1. Паракринная регуляция

1.3.2. Паракринная регуляция и развитие РМЖ

1.3.3. Щелевые контакты

1.3.4. Роль щелевых контактов в развитии РМЖ

1.3.5. Экзосомы как тип межклеточных взаимодействий

1.3.6. Участие экзосом в развитии РМЖ

1.4. Межклеточные взаимодействия и развитие гормональной резистентности

1.4.1. Паракринная коммуникация, как элемент в процессе развития гормональной резистентности

1.4.2. Гормональная резистентность и щелевые контакты

1.4.3. Экзосомы и их роль в ответе на антиэстрогены

1.5. Межклеточные взаимодействия и эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП)

1.5.1. ЭМП и опухолевый рост

1.5.2. Межклеточные сообщения, ЭМП и гормональная резистентность 38 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Клеточные культуры

2.2. Получение GFP-позитивных сублиний

2.3. Клонирование и выведение MCF-7/clone R субпопуляции

2.4. Культивирование клеток на культуральных вставках

2.5. Определение количества клеток с помощью камеры Горяева

2.6. MTT-тест

2.7. Выделение экзосом из культуральной среды

2.8. Верификация экзосом методом ПЭМ

2.9. Получение экстрактов экзосом/клеток и SDS-электрофорез в ПААГ

2.10. Иммуноблоттинг

2.11. Транзиторная трансфекция

2.12. Репортерный анализ

2.13. Детекция физиологической активности экзосом

2.14. Анализ микроРНК в препаратах экзосом

2.15. Статистическая обработка результатов

2.16. Список использованных реактивов

2.17. Список оборудования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Межклеточные взаимодействия и развитие гормональной резистентности рака молочной железы

3.1.1. Разработка экспериментальной модели приобретенной гормональной резистентности клеток РМЖ

3.1.2. Получение стабильного GFP-позитивного клона гормоннезависимой сублинии MCF-7/T и гормончувствительной MCF-7

3.1.3. Влияние совместного культивирования гормончувствительных и резистентных клеток на уровень гормонального ответа

3.1.4. Кондиционированная среда и эффект приобретенной резистентности

3.2. Сравнительный анализ действия ингибиторов сигнальных путей на горизонтальный путь передачи гормональной резистентности

3.3. Роль экзосом в развитии приобретенной гормональной резистентности рака молочной железы

3.3.1. Получение и верификация препаратов экзосом

3.3.2. Экзосомы и развитие приобретенной гормональной резистентности

3

3.3.3. Сравнительный анализ экзосом родительских и гормонрезистентных клеток

3.4. Исследование общих характеристик белкового спектра в резистентных

клонах клеток

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Межклеточные взаимодействия и развитие гормональной резистентности рака молочной железы

4.2. Роль экзосом в развитии приобретенной гормональной резистентности рака молочной железы

4.3. Характеристики белкового спектра в резистентных клонах клеток

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

AF1 - активаторная функция

AF2 -активаторная функция

AKT (PKB) - протеинкиназа В

Ap-1 - семейство транскрипционных факторов

BCL 2 (BAK, BIK) - семейство антиапоптотических белков

BRMS1 - breastmetastasis suppressor

CD63, CD81, CD82, CD9 и CD37 - семейства тетраспонинов

Cx - коннексин

DBD - ДНК-связывающий домен

DD - домен димерзации

EBP1 - ErbB3-связывающий белок

ECM - Extra Cellular Matrix (внеклеточный матрикс)

EGF - эпидермальный фактор роста

EGFR (ErbBl / HER1), HER2 (HER2/neu / ErbB2), ErbB3 (HER3), и ErbB4 (HER4) - рецепторы эпидермального фактора роста

EMT-TFs - epithelial-to-mesenchymal transition transcription factors (факторы эпителиально-мезенхимального перехода)

ER - рецептор эстрогена

ERK1/2 (Extracellular signal-regulated kinases) и MEK1/2 - MAP-киназы ERa -эстрогеновый рецептор-а ERp - эстрогеновый рецептор-Р

FGF - fibroblast growth factor (фактор роста фибробластов) GF-growth factor (фактор роста)

GFP (green fluorescent protein) - зеленый флуоресцентный белок GJ - gap junctions (щелевые контакты)

GLUT 1 - glucose transporter 1 (белок-переносчик глюкозы 1) GPR30 - трансмембранный белок семейства GPR

HER2/Neu - human epidermal growth factor receptor 2 (рецептор человеческого эпидермального фактора роста 2)

HIF - hypoxia inducible factor (гипоксия-индуцируемый фактор)

HRE - hypoxia response elements (гипоксия-зависимые элементы)

IGF - insulin-like growth factor (инсулиноподобный фактор роста)

IGFR - insulin-like growth factor receptor (рецептор инсулиноподобного фактора роста)

ILVs - intraluminal vesicles (мультивезикулярные тела) LBD - рецептор-специфического лиганда LDH - lactate dehydrogenase 5 (лактатдегидрогеназа 5) LOX - лизилоксидаза

MAPK - Mitogen-activated protein kinases (митоген-активируемые киназы) miRNA - микроРНК

mTOR - mammalian target of rapamycin (мишень рапамицина у млекопитающих)

MVEs - multivesicular endosomes (мультивезикулярный комплекс)

NCOA3 - nuclear receptor co-activator 3 (ко - активатор ядерного рецептора 3)

NF-kB - nuclear factor kappa B (ядерный фактор каппа B)

NF-kB - ядерный фактор-кВ

NLS - сигнал ядерной локализации

NR3 - ядерные рецепторы

P - фосфорилирование PEPL1 - leucine-rich protein

PI3K - Phosphatidylinositol-3-kinase (фосфатидилинозит-3-киназа) RTK - рецептор тирозинкиназ

SDF-1 - Stromal cell-Derived Factor 1 (фактор стромальных клеток-1) Second messenger - вторичный посредник

SERD - selective estrogen receptor down-regulators (антагонисты рецепторов эстрогенов)

SERMs - селективные модуляторы рецепторов эстрогена

Sp 1— семейство транскрипционных факторов

SPARC - Secreted Protein, Acidic and Rich in Cysteine

TF-transcriptional factor (транскрипционный фактор)

TNF - Tumour Necrosis Factor (фактор некроза опухоли)

VEGF - vascular endothelial growth factor (фактор роста эндотелия сосудов)

АСТ1 - a-connexin carboxyl-terminal

ГФИ-якорь - гликозилфосфатидилинозитола

РМЖ - рак молочной железы

ЭМП - эпителиально-мезенхимальным переходом

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль межклеточных взаимодействий в развитии гормональной резистентности клеток рака молочной железы»

ВВЕДЕНИЕ

По последним данным рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место по частоте диагностирования у женщин и второе в мире — среди онкологических заболеваний. Несмотря на значительные успехи в терапии РМЖ, достигнутые благодаря совершенствованию диагностических тестов, разработке новых лекарственных препаратов, уровень смертности остается достаточно высоким. Так, например, из всех зарегистрированных летальных случаев 15 % приходятся на больных РМЖ [180]. Сегодня известно, что рак молочной железы может быть представлен различными типами новообразований, имеющие некоторые отличия в развитии [149]. Существует набор морфологических и гистологических характеристик, определяющий успех той или иной терапии, но способность опухолевых клеток к развитию резистентности к действию препаратов существенно снижает эффективность противоопухолевой терапии. Примером может являться развитие гормональной резистентности РМЖ, обусловленный переходом опухолевых клеток от эстрогензависимого к эстрогеннезависимому росту [87]. Причинами снижения гормональной зависимости могут быть: утрата клетками РМЖ рецепторов эстрогенов (ER), нарушение баланса между белками-активаторами и супрессорами ER, а также стимуляция сигнальных путей, идущих в обход ER (EGFR, PI3K, NF-кВ), что поддерживает рост клеток РМЖ в отсутствие эстрогенов [25, 103].

На сегодняшний день известно, что межклеточные взаимодействия играют важную роль в развитии не только нормальных тканей, но и опухолевых. Межклеточные взаимодействия реализуются несколькими путями. Во-первых, паракринным путем, т.е. через продукцию в окружающую клетку среду различных ростовых факторов, запускающих сигнальные каскады, отвечающие за рост и пролиферацию клеток [11, 87, 119, 172]. Во-вторых, через образование межклеточных контактов, в частности щелевых (gap junctions - GJ), с возможность обмена через них функционально активными молекулами [41, 48, 50, 55]. И в-третьих, с помощью продукции в межклеточное пространство экзосом

— мельчайших везикул, содержащих метаболически активные белки и некоторые нуклеиновые кислоты, в том числе микроРНК [6, 39, 84, 113, 123]. Межклеточные взаимодействия участвуют в развитии ответа опухолевых клеток на цитостатические препараты [116], в частности - влияют на развитие и распространение множественной лекарственной устойчивости [196], изменение клеточной подвижности и миграции [80], однако значение межклеточных взаимодействий в развитии гормональной резистентности остается неясным. Основной задачей данного исследования явилось определение роли межклеточных взаимодействий в развитии и распространении гормональной резистентности клеток рака молочной железы. На моделях культивируемых in vitro эстрогензависимых и эстрогеннезависимых линий аденокарциномы молочной железы предполагалось исследовать возможные пути развития гормональной резистентности и значение межклеточных взаимодействий в формировании резистентного фенотипа опухолевых клеток.

Целью данного исследования явилось изучение роли межклеточных взаимодействий в развитии гормональной резистентности клеток рака молочной железы.

Задачи исследования:

1. Разработка экспериментальных моделей развития гормональной резистентности РМЖ в условиях длительного культивирования клеток эстрогензависимого РМЖ MCF-7 в присутствии антиэстрогена тамоксифена;

2. Получение стабильных GFP-позитивных клеток эстрогеннезависимых сублиний РМЖ и исследование влияния ко-культивирования чувствительных (GFP-отрицательных) и эстрогеннезависимых (GFP-позитивных) клеток РМЖ на эффективность гормонального ответа клеток.

3. Исследование эффекта разобщения клеточных культур на модуляцию гормонального ответа.

4. Изучение влияния ингибиторов межклеточных взаимодействий на развитие гормональной резистентности клеток РМЖ.

5. Сравнительный анализ экспрессии белков эстрогенового сигналинга и эпителиально-мезенхимального перехода в эстрогензависимых клетках и резистентных клетках РМЖ, в том числе полученных de novo в результате совместного культивирования гормоночувствительных и резистентных клеток.

6. Исследование роли внеклеточных везикул (экзосом) в формировании резистентного фенотипа клеток РМЖ

Методология и методы исследования

Эксперименты проводились in vitro на моделях клеток эстрогензависимого РМЖ линии MCF-7 и резистентной субпопуляции MCF-7/T, полученной путем длительного культивирования клеток MCF-7 с антиэстрогеном тамоксифеном. Выживаемость клеток при действии препарата тамоксифена оценивали с помощью МТТ-теста или при подсчете клеток в камере Горяева. Для анализа активности транскрипционных факторов использовался репортерный анализ, полученные результаты подтверждали иммуноблоттингом. Для выделения, очистки и верификации экзосом применялись методы дифференциального ультрацентрифугирования, просвечивающей электронной микроскопии и иммуноблоттинга маркеров экзосом. Подробное описание методов представлено в разделе «Материалы и методы». Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 16-34-01031.

Научная новизна

Несмотря на активные и успешные исследования молекулярных механизмов, отвечающих за формирование гормональной резистентности клеток РМЖ, значение межклеточных взаимодействий в развитии резистентности остается малоизученным.

Мы предположили, что появление в опухоли популяции клеток, резистентных к гормонам, и дальнейший совместный рост

гормоночувствительных и резистентных клеток может стимулировать распространение гормональной резистентности и на чувствительные клетки -либо паракринным путем, либо через собственно межклеточные контакты.

В результате выполнения настоящего исследования впервые показано, что кокультивирование чувствительных и эстрогеннезависимых клеток рака молочной железы приводит к развитию гормональной резистентности родительских клеток. Мы показали, что развитие подобной генерированной de novo гормональной резистентности клеток рака молочной железы сопровождается нарушением межклеточных взаимодействий, частичным эпителиально-мезенхимальным переходом (ЭМП) и изменением содержания маркерных белков ЭМП. Продемонстрировано, что решающим фактором в подобном «горизонтальном» пути передачи резистентности являются межклеточные взаимодействия, реализуемые в том числе с участием экзосом, продуцируемых резистентными клетками. Определение новых возможных способов развития и передачи гормональной резистентности, а также механизмов сообщения клеток друг с другом, позволяет по-новому взглянуть на механизм опухолевой прогрессии и формирования резистентного фенотипа клеток.

Научно-практическая значимость

На сегодняшний день основным критерием успеха гормональной терапии рака молочной железы является наличие в опухолевых клетках рецепторов эстрогена (ER). Как показывает практика, эффективность гормональной терапии может снижаться в случае развития в опухолевых клетках резистентности к гормональным препаратам. Такой процесс зачастую сопровождается уменьшением содержания ER или его утратой; а также стимуляцией митогенных сигнальных путей, идущих в обход ER и поддерживающих тем самым рост клеток РМЖ в отсутствии эстрогенов [3].

Мы показали, что межклеточные взаимодействия могут влиять на формирование резистентного фенотипа клеток [9], определяя распространение резистентного фенотипа от гормонрезистентных клеток к гормончувствительным

11

клеткам. Полученные результаты позволяют по новому взглянуть на процесс развития гормональной резистентности РМЖ и открывают дополнительные возможности в разработке таргетных препаратов для лечения гормоннезависимого РМЖ.

Положения, выносимые на защиту

1. Совместное культивирование эстрогенчувствительных клеток линии и эстрогеннезависимых клеток рака молочной железы MCF-7/T/GFP приводит к развитию снижению гормональной чувствительности родительских клеток к антиэстрогену тамоксифену.

2. Ранее в лаборатории было показано, что развитие гормональной резистентности тесно связано с активацией Snail 1/Е-кадхерин сигнального пути. Приобретенная de novo гормональная резистентность клеток рака молочной железы также сопровождается нарушением межклеточных взаимодействий, частичным эпителиально-мезенхимальным переходом (ЭМП) и изменением содержания маркерных белков ЭМП: Snail 1 и Е-кадхерина.

3. Установлено, что одними их основных факторов в «горизонтальном» пути передачи резистентности являются межклеточные взаимодействия, реализуемые, в том числе с участием экзосом, продуцируемых резистентными клетками.

4. Проведенный сравнительный анализ транскриптома экзосом позволили идентифицировать ряд микроРНК, дифференциально экспрессируемых в резистентных клетках рака молочной железы. По литературным данным девять из них ассоциированы с развитием гормональной резистентности.

Степень достоверности и апробация результатов

Апробация диссертации состоялась 28 апреля 2017 года на объединенной научной конференции лабораторий: молекулярной эндокринологии, химического канцерогенеза, канцерогенных веществ, природных канцерогенов, механизмов

гибели опухолевых клеток, механизмов канцерогенеза, цитогенетики, онкопротеомики, иммунохимии, регуляции клеточных и вирусных онкогенов НИИ канцерогенеза ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Использование современных методов исследования и статистической обработки данных позволило получить достоверные результаты. Результаты представленного исследования были представлены и обсуждены на конференциях: «IX международный конгресс по биотехнологии: состояние и перспективы развития.» (Москва, 2017); «II всероссийской конференции по молекулярной онкологии», (Москва, 2016); «Петровские чтения» (Санкт-Петербург, 2015); «VIII Съезд онкологов и радиологов стран СНГ и Евразии» (Казань, 2014).

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 98 страницах машинописного текста, содержит 20 рисунков, 1 таблицу и состоит из введения, 4 глав: «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты», «Обсуждение результатов», , заключения, выводов и списка литературы. Список литературы содержит 201 литературный источник, из них 10 - отечественный и 191 - зарубежный.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Стероидные гормоны и их физиологическая роль в развитии молочной железы

1.1.1. Роль эстрогенов в развитии молочной железы

Молочная железа является классическим органом-мишенью, подвергающимся воздействию стероидных гормонов, в том числе эстрогенов. Эстрогены являются основными половыми гормонами, влияющими на фертильность, формирование вторичных половых признаков, участвующими в регуляции менструального цикла, беременности, лактации и др. [4, 17].

Эстрогены — общее название подкласса стероидных женских половых гормонов, производимых, в основном, фолликулярным аппаратом яичников у женщин. Они образуются в организме путем сложной ферментативной реакции из андрогенов в интерстициальных и фолликулярных клетках яичников [2, 173]. В связи с тем, что эстрогены выполняют важную роль в физиологии человека, они также вовлечены и в развитие многих заболеваний, в том числе различных видов злокачественных опухолей [70, 91].

1.1.2. Структура рецепторов эстрогенов

На сегодняшний день установлено, что в реализации биологических эффектов стероидных гормонов участвуют клеточные рецепторы, относящиеся к подсемейству ядерных рецепторов 3 (NR3) [121]. Это подсемейство включает: Рецепторы эстрогенов ER (группа NR3A)

1. Эстрогеновый рецептор-а (ERa; NR3A1, ESR1)

2. Эстрогеновый рецептор-Р (ERP; NR3A2, ESR2) Эстроген-ассоциированные рецепторы ERR (группа NR3B)

1. Эстроген-ассоциированный рецептор-a (ERRa; NR3B1, ESRRA)

2. Эстроген-ассоциированный рецептор-Р (ERRP; NR3B2, ESRRB)

3. Эстроген-ассоциированный рецептор -у (ERRy; NR3B3, ESRRG)

Все члены подсемейства NR3 сходны по своей структуре и состоят из 5 доменов (Рис.1):

1. Аминоконцевой домен А/B может функционировать в качестве гормон-независимого активатора транскрипции и содержит сигнал ядерной локализации (NLS). Его структура зависит от типа рецептора.

2. Высоко консервативный С домен, содержащий ДНК-связывающий домен (DBD), также отвечающий за ядерную локализацию.

3. Шарнирная область, D домен, соединяет С домен с карбоксильной концевой группой E/F домена.

4. E домен, включающий домен связывания рецептор-специфического лиганда (LBD) и домен димерзации (DD). Связывание домена с гормоном приводит к конформационным изменениям, запускающие механизмы транскрипции.

5. F домен является вариабельной частью рецептора и возможно, определяет различие в ответах рецепторов эстрогенов на эстрадиол и другие специфические модуляторы.

Рисунок 1 — Схема строения рецепторов стероидных гомонов [121].

Наиболее мощным эндогенным активатором ER, вырабатываемым в организме женщины, является 17р-эстрадиол (Е2). В отношении ERR лиганды не обнаружены и их относят к орфанным рецепторам, тем не менее функционирующим как транскрипционные факторы [174].

Эффект эстрогенов зависит от соотношения между ERa и ERP, обладающих во многом противоположной активностью [45].

Известно, что ERa и ERß кодируются отдельными генами (Esrl и Esr2 соответственно), расположенными на разных хромосомах [77]. В нормальных тканях молочной железы экспрессируются оба рецептора, но конкретная их локализация изучена недостаточно. Есть данные, что ERa локализованы преимущественно во внутреннем слое эпителиальных клеток, выстилающих ацинусы и дольковые протоки, а также в миоэпителиальных клетках внешнего слоя дольковых протоков. ERß же были обнаружены в стромальных, эпителиальных клетках в ацинусах и протоках [107]. Несмотря на то, что ERa присутствует не во всех тканях молочной железы, он вносит более значительный вклад в развитие молочных желез млекопитающих, чем ERß, эти данные были получены из экспериментов на мышах. У мышей с нокаутом гена ERa было отмечено только рудиментарные молочные железы, не способные к лактации. У мышей с нокаутом гена ERß молочные железы развивались нормально [186]. Функциональные особенности ERß в настоящее время исследованы недостаточно и являются предметом дискуссий [21, 100] .

1.1.3. Механизмы действия стероидных гормонов

Большой прорыв в области изучения механизмов гормонального ответа был сделан в конце 1950-х годов, когда E. Jensen с соавт. предложил двухступенчатую модель взаимодействия гормона с клеткой-мишенью [133]. Согласно этой модели, эстрадиол проникает в клетку и связывается со специфичным рецептором, находящимся в цитозоле клетки [73]. Данный рецептор впоследствии был назван рецептором эстрогена (ERa). Однако, в 1993 году, почти три десятилетия спустя, в лаборатории D. Lubahn были созданы мыши с нокаутом гена ERa. Такие особи отвечали на эстрадиол, так же как контрольные, что служило доказательством существования обходных путей реализации гормонального ответа без участия ERa - что и было подтверждено позднее открытием ERß [114].

На сегодняшний день существует общепринятая схема механизма действия стероидных гормонов, и в частности эстрогенов [76]. Действие эстрогенов может осуществляться несколькими путями (Рис.2) Первый путь - классический

геномный, заключается в прямом связывании лиганда с рецептором, транслокацией рецептора в ядро и взаимодействии этого комплекса с эстроген-чувствительным элементом в промоторе определенного гена [82]. Второй путь -неклассический, подразумевает взаимодействие комплекса лиганд-рецептор с другими транскрипционными факторами (такими как белки семейств Ap-1 и Sp1, NFkB [117]. Третий путь - негеномный - реализуется через активацию лигандом трансмембранного белка GPR30, который запускает сигнальные каскады с помощью вторичных мессенджеров. Это приводит к быстрой физиологической реакции без привлечения генной регуляции [33, 153]. Четвертый путь — лиганд-независимый - может запускаться в случае, когда ER является элементом других сигнальных путей, например, тирозинкиназных рецепторов, таких как EGFR ( Epidermal Growth Factor Receptor), VEGFR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor), IGFR ( Insulin-like Growth Factor 1 Receptor) [3, 96, 101]. Активированные киназы фосфорилируют рецептор эстрогена, инициируют его димеризацию, что приводит к регулированию транскрипции генов и активизации вторичных мессенджеров [22, 95]

Рисунок 2 — Сигнальные пути рецепторов эстрогенов [122].

ER (estrogen receptor) — рецептор эстрогена

ERE (estrogen response element) — эстрогенреспонсивный элемент

GPR30 (G protein-coupled receptor 30)-трансмембранный рецептор, сопряженный с

G-белком

Second messenger - вторичный посредник TF (transcriptional factor) - транскрипционный фактор GF (growth factor) - фактор роста P — фосфорилирование

1.2. Развитие злокачественных опухолей РМЖ

Несмотря на большой прогресс современной медицины, появление высокотехнологичных диагностических и лечебных методик, распространенность онкологических заболеваний во всем мире остается достаточно высокой. Эксперты ВОЗ отмечают высокие показатели заболеваемости и смертности населения от рака в слаборазвитых странах и некоторую тенденцию к снижению данных показателей в странах с высоким уровнем развития экономики и социальной структуры [5]. Снижение смертности от онкологических заболеваний,

18

в частности РМЖ, в развитых странах обусловлено активным внедрением мер профилактики и ранней диагностики [59]. Однако, несмотря на значительный прогресс в лечение и диагностике, рак молочной железы остается самым распространенным заболеванием среди женщин и занимает второе место по смертности среди онкологических больных [165, 180].

На данный момент существует несколько методов терапии РМЖ: хирургическое лечение, химио-, радио- и/или гормональная терапия. Часто для лечения опухолей, содержащих рецепторы эстрогенов и прогестеронов, применяют гормональную терапию. Однако, в опухолевых клетках возможен запуск сигнальных путей, способных повышать их сопротивляемость цитостатическому действию препаратов, что снижает эффективность терапии [67, 162].

1.2.1. Гормональная резистентность

Все методы гормональной терапии РМЖ сводятся к уменьшению пролиферирующего эффекта эстрадиола на клетки опухоли за счет блокирования сигнальных путей идущих через ER или уменьшению концентрации эстрадиола в сыворотке крови и тканях [7, 175]. Эстрогеновая зависимость некоторых форм рака молочной железы, которая определяется наличием у опухоли ER, предопределила применение препаратов-антагонистов рецепторов эстрогенов в терапии этого заболевания. К препаратам-антиэстрогенам относятся SERM (selective estrogen receptor modulators) и SERD (selective estrogen receptor down -regulators). Среди SERM ведущее место в лечении РМЖ занимает препарат тамоксифен [191].

Механизм антиэстрогенового действия тамоксифена объясняется его способностью конкурентно связываться с эстрогеновыми рецепторами в органах-мишенях и препятствовать таким образом образованию эстроген-рецепторного комплекса. В противоположность рецепторному комплексу эстрогена рецепторный комплекс тамоксифена не стимулирует синтез ДНК в ядре, а,

наоборот, угнетает деление клетки, что приводит к регрессии опухолевых клеток в результате их гибели (Рис.3) [185].

Эстрадиол

AF2

Димеризэция рецепторов Т^Р

AF1

AF1 + AF2

активны

Активная фанскрипция (деление опухолевых клеток)

AF1

AF1

Тамоксифен

Частичная инактивация транскрипции (снижение частоты деления опухолевых клеток)

AF1 активен AF2 неактивен

AF1

Рисунок 3 — Механизм действия тамоксифена[185].

Одной из важнейших причин высокого процента смертности больных РМЖ является резистентность опухоли к антиэстрогенам, применяемым в гормонотерапии [8]. Под гормональной резистентностью опухоли понимают устойчивость опухоли к действию гормональных цитостатических препаратов. Такую резистентность можно подразделить на два вида: первичную и вторичную, или приобретенную. Если гормональная резистентность формируется de novo, т.е. до проведения терапии, то её называют первичной. Если резистентность развивается во время проведения гормональной терапии, то её называют вторичной [81].

В обоих случаях эффективность антиэстрогенов, в частности тамоксифена, снижается, что приводит к продолжающемуся росту опухолей. Клинические исследования показали, что рецидив в процессе проведения адъювантной эндокринной терапии отмечается приблизительно у 10-15% пациентов с ER-положительным РМЖ в течение 5 лет [51, 135] .

1.2.2. Механизмы гормональной резистентности РМЖ

Существует несколько молекулярных механизмов, которые поддерживают прогрессию и пролиферацию опухоли в процессе адъювантной терапии тамоксифеном: [136, 163]

• Нарушение экспрессии ER, мутации и альтернативные изоформы рецепторов

Любые изменения ER на уровне белковой структуры или гена могут провоцировать формирование более агрессивного фенотипа опухоли. Литературные данные свидетельствуют, что снижение уровня экспрессии ER приводит к толерантности клеток опухоли к эстрогенам [1, 79]. Мутации в гене Ersl также способствуют развитию гормональной резистентности. Так, анализ двух независимых групп больных с метастазирующим РМЖ показал, что в более чем 10% случаев после лечения тамоксифеном в течении 5 лет появляется мутация в структуре гена Ersl, отвечающая за лиганд—связывающий домен (LBD). Данная мутация также способствует развитию гормональный резистентности[181]. Помимо изменений в экспрессии и мутаций в гене ER, существует большое количество природных изоформ рецепторов, которые являются результатом альтернативного сплайсинга. Недавно было установлено, что экспрессия таких изоформ - укороченных вариантов ERa36 и ER0-1 -сопряжены с пониженной чувствительностью клеток опухоли к эстрогенам [46, 131].

Стоит отметить, что функциональность и уровень ER могут также регулироваться посредством посттрансляционных модификаций, таких как убиквитинирование, фосфорилирование и метилирование. Посредством этих модификаций изменяется взаимодействие ER с его корегуляторами (nuclear receptor co-activator 3 - NCOA3 или Proline-, glutamic acid- and leucine-rich protein 1 - PEPL1) что также может привести к развитию гормональной резистентности [130].

• Нарушение баланса белков-активаторов и белков-супрессоров ER, нарушение взаимодействия ER с белками-активаторами

Известно, что активность ER зависит от связывания с группой

регуляторных протеинов. Следствием нарушения баланса в экспрессии таких

регуляторных белков может быть развитие резистентности к SERM. Было

показано, что повышенная активация транскрипционных факторов AP-1, SP-1 и

21

NF-kB, которые играют ведущую роль в осуществлении эндокринного сигнала по неклассическому геномному пути, также приводит к гормональной резистентности [43, 194, 200].

• Активация в опухолевой клетке эстроген-независимых сигнальных путей

Гормональная резистентность может формироваться за счет активации эстроген-независимых ростовых сигнальных путей, идущих в обход ER. К ним относятся сигнальные пути таких факторов, как: EGF (Epidermal growth factor), IGF (Insulin-like growth factor), FGF( Fibroblast growth factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor и др.) [33, 98, 158, 167, 168]. Также немаловажную роль в снижении чувствительности к антиэстрогенам играют сигнальные пути фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) - фермента, регулирующего рост и устойчивость опухолевых клеток к повреждающим факторам, MAP-киназные каскады (MAPK), некоторые антиапоптотические белки (Akt,Src и др.) [67, 68, 86, 126].

• Нарушение регуляции клеточного цикла и апоптоза

На результат эндокринной терапии существенно влияет изменение клеточного цикла [49]. Фенотип гормонрезистентных клеток характеризуется высокой экспрессией генов клеточного цикла, в том числе таких молекул, как циклин-Dl и циклин-E, являющимися основной движущей силой клеточного деления, [171] а также антиапоптотических белков семейства BCL 2 и низким уровнем про-апоптотических белков BAK, BIK и каспазы 9 [13, 88].

• Возникновение повышенной чувствительности клеток РМЖ к эстрогенам

Повышенная чувствительность к эстрогену также может рассматриваться

как потенциальный сигнал для развития устойчивости к эндокринной терапии.

Ингибиторы ароматазы резко снижают биосинтез эстрогенов, хотя остаточные

количества эстрогена остаются в тканях [92]. Исследования на клеточной линии

MCF-7 (аденокарцинома молочной железы) показали, что после длительной

абляции эстрогенов клетки развивают повышенную чувствительность к

22

остаточному эстрогену. Исследователи предположили, что это явление связано с увеличением экспрессии HER2, гиперактивацией MAPK сигнального пути, изменениями в фосфорилировании ER и как результат - развитию гиперчувствительности рецептора к остаточному эстрогену[38, 118]. Другие исследования показали, что мутации в Esr1 могут привести к появлению мутантных ER, которые активно взаимодействуют с протоонкогеном семейства SRC. Это активное взаимодействие приводит к повышению связывания промотора ER с эстрогеном, и как следствие, повышением его чувствительности к гормону [85].

• Микроокружение как фактор, способствующий развитию гормональной резистентности РМЖ

Опухоль представляют собой сложноорганизованную структуру, состоящую из опухолевых клеток и окружающей ткани - фибробластов, иммунокомпетентных клеток, эндотелия сосудов, внеклеточного матрикса [27, 110]. Литературные данные свидетельствуют, что, как прогрессия опухоли, так и ответ на гормональную терапию зависят от микроокружения опухоли. Действительно, в нескольких работах содержимое стромы рассматривалось как предиктор ответа на терапию РМЖ [178, 179]. Кроме того, было показано, что ответ на тамоксифен связан с гиперэкспрессией генов внеклеточного матрикса (ECM — Extra СeПular Matrix), запускающих целую цепочку ростовых сигнальных путей и способствующих не только росту и пролиферации клеток опухоли, но и их возможной инвазии [36, 83, 146].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Семина Светлана Евгеньевна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Красильников, М. А. Современные подходы к изучению механизма эстрогеннезависимого роста опухолей молочной железы/ М. А. Красильников // Вопросы онкологии.- 2004.-Т. 50, №4. - С.399-405.

2. Берштейн, Л.М. Современная эндокринология гормонозависимых опухолей/ Л.М. Берштейн // Вопросы онкологии.- 2002.-Т. 48, № 4. - С.496-504

3. Красильников, М. А.Сигнальные пути, регулируемые эстрогенами, и их роль в опухолевой прогрессии: новые факты и направления поиска/ М. А. Красильников, А. М. Щербаков//Успехи молекулярной онкологии.- 2014.-Т. 1, №1.- С.18-25.

4. Молекулярный канцерогенез/Под ред. М.А. Красильникова, И.Б. Зборовской. — М.:ООО " ИД "АБВ-пресс", 2016. — 418 с.

5. Любченко, Л.Н. Наследственный рак молочной железы: генетическая и клиническая гетерогенность, молекулярная диагностика, хирургическая профилактика в группах риска/ Л.Н. Любченко, Е.И.Батенева, И.К. Воротникове и др. // Успехи молекулярной онкологии. - 2014.-Т. 1, № 2. —С.16-25.

6. Малек, А.М. МикроРНК: половые гормоны, гормональный канцерогенез, гормоночувствительность опухолевой ткани/ А.М. Малек, Л.М. Берштейн // Успехи молекулярной онкологии.- 2015.-Т. 2, №1- С.4—12

7. Павличенко, О.В. Молекулярный механизм адаптации злокачественных опухолей к гормональным препаратам: роль фосфатидилинозит-3-киназы и фосфоинозитидзависимых белков/ О.В. Павличенко, В.А. Шатская, Е.В. Лузай и др. // Вестник Российской Академии медицинских наук - 2014.- № 12. — С.20-25.

8. Семиглазова, Т.Ю. Новый подход к преодолению резистентности гормонотерапии рака молочной железы./ Т.Ю. Семиглазова, Т.Ю., В.В. Семиглазов, Л.В. Филатова // Фарматека.- 2012.-№ 18. — С.50-56.

9. Семина, С.Е. Межклеточные взаимодействия и развитие гормональной резистентности клеток/ С.Е. Семина, Д.В. Багров, М.А. Красильников// Успехи молекулярной онкологии.- 2015.-Т. 2, № 2 — С.50-55.

10. Чевкина, Е.М., Щербаков, А.М., Журавская, А.Ю., et al. Экзосомы и передача (эпи)генетической информации опухолевыми клетками // Успехи молекулярной онкологии.- 2015.-Vol. 2, № P.8-20.

11. Adjei, A.A., Intracellular signal transduction pathway proteins as targets for cancer therapy/A. A. Adjei, M. Hidalgo // Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology.- 2005.-Vol. 23, № 23 - P.5386-5403.

12. Admyre, C. Exosomes with immune modulatory features are present in human breast milk/ C. Admyre, S. M. Johansson, K. R. Qazi et al. // Journal of immunology.- 2007.-Vol. 179, № 3 - P.1969-1978.

13. Akli, S. Low-molecular-weight cyclin E can bypass letrozole-induced G1 arrest in human breast cancer cells and tumors/ S. Akli, T. Bui, H. Wingate, et al. // Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research.- 2010.-Vol. 16, № 4 - P.1179-1190.

14. Al-Nedawi, K. Intercellular transfer of the oncogenic receptor EGFRvIII by microvesicles derived from tumour cells/K. Al-Nedawi, B. Meehan, J.Micallef et al. // Nature cell biology.- 2008.-Vol. 10, № 5 - P.619-624.

15. Al-Tubuly, A.A. SDS-PAGE and Western Blotting/ A.A. Al-Tubuly // Methods Mol Med.- 2000.-Vol. 40, № P.391-405.

16. Almendro, V. Cellular heterogeneity and molecular evolution in cancer/ V. Almendro, A. Marusyk, K.Polyak // Annual review of pathology.- 2013.-Vol. 8, № P.277-302.

17. Anderson, E. Steroid receptors and cell cycle in normal mammary epithelium/ E. Anderson, R.B. Clarke // Journal of mammary gland biology and neoplasia.- 2004.-Vol. 9, № 1 - P.3-13.

18. Andreeva, O.E. The role of transcription factor Snail1 in the regulation of hormonal sensitivity of in vitro cultured breast cancer cells/ O.E. Andreeva, A. M. Shcherbakov, V. A. Shatskai, M.A.Krasil'nikov// Vopr Onkol.- 2012.-Vol. 58, № 1 -P.71-76.

19. Ansieau, S. Induction of EMT by twist proteins as a collateral effect of tumor-promoting inactivation of premature senescence/ S. Ansieau, J. Bastid, A. Doreau et al. // Cancer cell.- 2008.-Vol. 14, № 1 - P.79-89.

20. Ao, M., Cross-talk between paracrine-acting cytokine and chemokine pathways promotes malignancy in benign human prostatic epithelium/ M. Ao, O.E., Franco, D. Park et al. // Cancer research.- 2007.-Vol. 67, № 9 - P.4244-4253.

21. Barkhem, T. Differential response of estrogen receptor alpha and estrogen receptor beta to partial estrogen agonists/antagonists/ T. Barkhem, B. Carlsson, Y. Nilsson et al. // Molecular pharmacology.- 1998.-Vol. 54, № 1 - P.105-112.

22. Barone, I. Estrogen receptor mutations and changes in downstream gene expression and signaling/ I. Barone, L. Brusco, S. A. Fuqua // Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research.- 2010.-Vol. 16, № 10 - P.2702-2708.

23. Batlle, E. The transcription factor snail is a repressor of E-cadherin gene expression in epithelial tumour cells/ E. Batlle, E. Sancho, C. Franci et al. // Nature cell biology.- 2000.-Vol. 2, № 2 - P.84-89.

24. Berdel, W.E. [Value of angiogenesis inhibitors in tumor diseases-preclinical data] / W. E. Berdel, J. Panse // Onkologie.- 2005.-Vol. 28 Suppl 4, № P.25-28.

25. Berstein, L.M. Cancer endocrinology: noticeable developments in the last decade/ L. M. Berstein // Future Oncol.- 2015.-Vol., № P.

26. Bhowmick, N.A. TGF-beta signaling in fibroblasts modulates the oncogenic potential of adjacent epithelia/ N. A. Bhowmick, A. Chytil, D. Plieth et al. // Science.- 2004.-Vol. 303, № 5659 - P.848-851.

27. Bissell, M.J. Putting tumours in context/ M. J. Bissell, D. Radisky // Nature reviews. Cancer.- 2001.-Vol. 1, № 1 - P.46-54.

28. Bissell, M.J. The organizing principle: microenvironmental influences in the normal and malignant breast/M. J. Bissell, D. C. Radisky, A. Rizki et al. // Differentiation; research in biological diversity.- 2002.-Vol. 70, № 9-10 - P.537-546.

29. Blinkova, L.P. [Detection of uncultivable bacteria forms in probiotic lyophilized preparations]/ L.P. Blinkova, Iu. D.Pakhomov,O. V. Dmitrieva // Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol.- 2013.-Vol., № 3 - P.83-88.

30. Bradford, M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding/ M. M. Bradford // Anal Biochem.- 1976.-Vol. 72, № P.248-254.

31. Brinkman, A.The substrate domain of BCAR1 is essential for anti-estrogen-resistant proliferation of human breast cancer cells/ A. Brinkman, D. de Jong, S. Tuinman et al // Breast Cancer Res Treat.- 2010.-Vol. 120, № 2 - P.401-408.

32. Brooks, M.D. Tumor twitter: cellular communication in the breast cancer stem cell niche/ M.D. Brooks, M.S. Wicha // Cancer discovery.- 2015.-Vol. 5, № 5 -P.469-471.

33. Broselid, S. G protein-coupled receptor 30 (GPR30) forms a plasma membrane complex with membrane-associated guanylate kinases (MAGUKs) and protein kinase A-anchoring protein 5 (AKAP5) that constitutively inhibits cAMP production/ S. Broselid, K. A. Berg, T.A. Chavera et al. // The Journal of biological chemistry.- 2014.-Vol. 289, № 32 - P.22117-22127.

34. Brouwers, J.F. Distinct lipid compositions of two types of human prostasomes/ J.F. Brouwers, M. Aalberts, J.W. Jansen et al. // Proteomics.- 2013.-Vol. 13, № 10-11 - P.1660-1666.

35. Bui, Q.T. Essential role of Notch4/STAT3 signaling in epithelial-mesenchymal transition of tamoxifen-resistant human breast cancer / Q.T. Bui, J.H. Im, S.B. Jeong et al. // Cancer Lett.- 2017.-Vol., № P.

36. Calvo, F. Cell communication networks in cancer invasion/ F. Calvo, E. Sahai // Current opinion in cell biology.- 2011.-Vol. 23, № 5 - P.621-629.

37. Cannito, S. Epithelial-mesenchymal transition: from molecular mechanisms, redox regulation to implications in human health and disease/ S. Cannito, E. Novo, L. V. di Bonzo et al. // Antioxid Redox Signal.- 2010.-Vol. 12, № 12 -P.1383-1430.

38. Chan, C.M. Molecular changes associated with the acquisition of oestrogen hypersensitivity in MCF-7 breast cancer cells on long-term oestrogen deprivation/ C.M. Chan, L.A. Martin, S. R. Johnston et al. // The Journal of steroid biochemistry and molecular biology.- 2002.-Vol. 81, № 4-5 - P.333-341.

39. Chen, W.X. Exosomes from drug-resistant breast cancer cells transmit chemoresistance by a horizontal transfer of microRNAs/ W.X. Chen, X.M. Liu, M.M. Lv et al. // PloS one.- 2014.-Vol. 9, № 4 - P.e95240.

40. Cheng, N. Loss of TGF-beta type II receptor in fibroblasts promotes mammary carcinoma growth and invasion through upregulation of TGF-alpha-, MSP-and HGF-mediated signaling networks/ N. Cheng, N.A. Bhowmick, A. Chytil et al. // Oncogene.- 2005.-Vol. 24, № 32 - P.5053-5068.

41. Choudhary, M. Tumor-induced loss of mural Connexin 43 gap junction activity promotes endothelial proliferation/ M. Choudhary, C. Naczki, W. Chen et al. // BMC cancer.- 2015.-Vol. 15, № P.427.

42. Cittelly, D.M.Downregulation of miR-342 is associated with tamoxifen resistant breast tumors/ D.M. Cittelly, P.M. Das, N.S. Spoelstra et al. // Molecular cancer.- 2010.-Vol. 9, № P.317.

43. Cogswell, P.C. Selective activation of NF-kappa B subunits in human breast cancer: potential roles for NF-kappa B2/p52 and for Bcl-3/ P.C. Cogswell, D.C. Guttridge, W.K. Funkhouser, Jr. A.S. Baldwin // Oncogene.- 2000.-Vol. 19, № 9 -P.1123-1131.

44. Das, S. The Role of MicroRNAs in Diagnosis, Prognosis, Metastasis and Resistant Cases in Breast Cancer / S. Das, T. S. Lin // Curr Pharm Des.- 2016.-Vol., № P.

45. Delfosse, V. Structural and functional profiling of environmental ligands for estrogen receptors/ V.Delfosse, M. Grimaldi, V. Cavailles et al. // Environmental health perspectives.- 2014.-Vol. 122, № 12 - P.1306-1313.

46. Deng, H. ER-alpha variant ER-alpha36 mediates antiestrogen resistance in ER-positive breast cancer stem/progenitor cells/ H. Deng, L. Yin, X. T. Zhang et al.//

The Journal of steroid biochemistry and molecular biology.- 2014.-Vol. 144 Pt B, № P.417-426.

47. Di Leva, G. miRNA clusters as therapeutic targets for hormone-resistant breast cancer/ G. Di Leva, D. G.Cheung, C. M. Croce// Expert Rev Endocrinol Metab.-2015.-Vol. 10, № 6 - P.607-617.

48. Ding, Y. Gap Junction Enhancer Potentiates Cytotoxicity of Cisplatin in Breast Cancer Cells/Y. Ding, T. A. Nguyen // Journal of cancer science & therapy.-2012.-Vol. 4, № 11 - P.371-378.

49. Doisneau-Sixou, S.F. Estrogen and antiestrogen regulation of cell cycle progression in breast cancer cells/ S. F. Doisneau-Sixou, C. M. Sergio, J. S. Carroll et al. // Endocr Relat Cancer.- 2003.-Vol. 10, № 2 - P.179-186.

50. Donahue, H.J. A potential role for gap junctions in breast cancer metastasis to bone/ H. J. Donahue, M. M. Saunders, Z. Li et al. // Journal of musculoskeletal & neuronal interactions.- 2003.-Vol. 3, № 2 - P.156-161.

51. Dowsett, M. Meta-analysis of breast cancer outcomes in adjuvant trials of aromatase inhibitors versus tamoxifen/ M. Dowsett, J. Cuzick, J.Ingle et al. // Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology.-2010.-Vol. 28, № 3 - P.509-518.

52. El-Sabban, M.E. Developmental regulation of gap junctions and their role in mammary epithelial cell differentiation / M.E. El-Sabban, L.F. Abi-Mosleh, R.S. Talhouk // Journal of mammary gland biology and neoplasia.- 2003.-Vol. 8, № 4 -P.463-473.

53. El-Saghir, J.A. Connexins: a junctional crossroad to breast cancer/ J.A. El-Saghir, E.T. El-Habre, M.E. El-Sabban, R.S. Talhouk // The International journal of developmental biology.- 2011.-Vol. 55, № 7-9 - P.773-780.

54. Erler, J.T. Lysyl oxidase is essential for hypoxia-induced metastasis/ J.T. Erler, K.L. Bennewith, M. Nicolau et al. // Nature.- 2006.-Vol. 440, № 7088 - P.1222-1226.

55. Evans, W.H. Gap junctions: structure and function (Review)/ W.H. Evans, P.E. Martin // Molecular membrane biology.- 2002.-Vol. 19, № 2 - P.121-136.

56. Falcone, G.Signaling by exosomal microRNAs in cancer/ G. Falcone, A. Felsani, I. D'Agnano// Journal of experimental & clinical cancer research : CR.- 2015.-Vol. 34, № P.32.

57. Feigenbaum, H. Role of echocardiography in patients with coronary artery disease/ H. Feigenbaum, B. C. Corya, J.C. Dillon et al. // Am J Cardiol.- 1976.-Vol. 37, № 5 - P.775-786.

58. Fentiman, I.S. Cell communication in breast cancer/ I.S. Fentiman // Annals of the Royal College of Surgeons of England.- 1980.-Vol. 62, № 4 - P.280-286.

59. Fitzmaurice, C. Global, Regional, and National Cancer Incidence, Mortality, Years of Life Lost, Years Lived With Disability, and Disability-Adjusted Life-years for 32 Cancer Groups, 1990 to 2015: A Systematic Analysis for the Global Burden of Disease Study/ C. Fitzmaurice, C. Allen, R. M. Barber et al. // JAMA Oncol.- 2016.-Vol., № P.

60. Folgiero, V.Induction of ErbB-3 expression by alpha6beta4 integrin contributes to tamoxifen resistance in ERbeta1-negative breast carcinomas/ V. Folgiero, P. Avetrani, G. Bon et al. // PloS one.- 2008.-Vol. 3, № 2 - P.e1592.

61. Foroni, C. Epithelial-mesenchymal transition and breast cancer: role, molecular mechanisms and clinical impact/ C. Foroni, M. Broggini, D. Generali, G. Damia // Cancer Treat Rev.- 2012.-Vol. 38, № 6 - P.689-697.

62. Friel, A.M. Relevance of circulating tumor cells, extracellular nucleic acids, and exosomes in breast cancer/ A. M. Friel, C. Corcoran, J. Crown, L. O'Driscoll // Breast Cancer Res Treat.- 2010.-Vol. 123, № 3 - P.613-625.

63. Furshpan, E.J. Synaptic functions in rat sympathetic neurons in microcultures. I. Secretion of norepinephrine and acetylcholine/ E.J. Furshpan, S.C. Landis, S.G. Matsumoto, D.D. Potter // The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience.- 1986.-Vol. 6, № 4 - P. 1061-1079.

64. Gakhar, G., Hua, D.H., and Nguyen, T.A. Combinational treatment of gap junctional activator and tamoxifen in breast cancer cells/ G. Gakhar, D.H. Hua, T.A. Nguyen // Anti-cancer drugs.- 2010.-Vol. 21, № 1 - P.77-88.

65. Galindo-Hernandez, O. Extracellular vesicles from MDA-MB-231 breast cancer cells stimulated with linoleic acid promote an EMT-like process in MCF10A cells/ O. Galindo-Hernandez, N. Serna-Marquez, R. Castillo-Sanchez, E.P. Salazar // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids.- 2014.-Vol. 91, № 6 - P.299-310.

66. Generali, D. Hypoxia-inducible factor-1alpha expression predicts a poor response to primary chemoendocrine therapy and disease-free survival in primary human breast cancer/ D. Generali, A. Berruti, M.P. Brizzi et al. // Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research.- 2006.-Vol. 12, № 15 - P.4562-4568.

67. Gershtein, E.S. Phosphorylated Akt1 in human breast cancer measured by direct sandwich enzyme-linked immunosorbent assay: Correlation with clinicopathological features and tumor VEGF-signaling system component levels/ E.S. Gershtein, A.M. Scherbakov, O.A. Anurova et al.// The International journal of biological markers.- 2006.-Vol. 21, № 1 - P.12-19.

68. Gewinner, C. Evidence that inositol polyphosphate 4-phosphatase type II is a tumor suppressor that inhibits PI3K signaling/ C. Gewinner, Z.C. Wang, A. Richardson et al. // Cancer cell.- 2009.-Vol. 16, № 2 - P.115-125.

69. Gigli, I. microRNAs and the mammary gland: A new understanding of gene expression/ I. Gigli, D.O. Maizon// Genetics and molecular biology.- 2013.-Vol. 36, № 4 - P.465-474.

70. Giraldi, T. Steroid signaling activation and intracellular localization of sex steroid receptors/ T. Giraldi, P. Giovannelli, M. Di Donato et al. // Journal of cell communication and signaling.- 2010.-Vol. 4, № 4 - P.161-172.

71. Gleave, M.E. Epidermal growth factor receptor-mediated autocrine and paracrine stimulation of human transitional cell carcinoma/ M.E. Gleave, J.T. Hsieh, H.C. Wu et al. // Cancer research.- 1993.-Vol. 53, № 21 - P.5300-5307.

72. Gopal, S.K. Extracellular vesicles: their role in cancer biology and epithelial-mesenchymal transition/ S.K. Gopal, D.W. Greening, A. Rai et al. // Biochem J.- 2017.-Vol. 474, № 1 - P.21-45.

73. Gorski, J. The nature and development of steroid hormone receptors/ J. Gorski // Experientia.- 1986.-Vol. 42, № 7 - P.744-750.

74. Graveel, C.R. Critical analysis of the potential for microRNA biomarkers in breast cancer management/ C.R. Graveel, H.M. Calderone, J.J. Westerhuis et al. // Breast Cancer (Dove Med Press).- 2015.-Vol. 7, № P.59-79.

75. Grek, C.L.Targeting connexin 43 with alpha-connexin carboxyl-terminal (ACT1) peptide enhances the activity of the targeted inhibitors, tamoxifen and lapatinib, in breast cancer: clinical implication for ACT1/ C.L. GrekRhett, J.S. Bruce// BMC cancer.- 2015.-Vol. 15, № P.296.

76. Gruber, C.J. Production and actions of estrogens/ C.J. Gruber,W. Tschugguel, C. Schneeberger, J. C. Huber // The New England journal of medicine.-2002.-Vol. 346, № 5 - P.340-352.

77. Gustafsson, J.A. ERbeta scientific visions translate to clinical uses/ J. A. Gustafsson// Climacteric : the journal of the International Menopause Society.- 2006.-Vol. 9, № 3 - P.156-160.

78. Haghikia, A.Intracellular application of TNF-alpha impairs cell to cell communication via gap junctions in glioma cell/A. Haghikia, K. Ladage, P. Lafenetre et al. // Journal of neuro-oncology.- 2008.-Vol. 86, № 2 - P.143-152.

79. Harbeck, N. Lost in translation? Estrogen receptor status and endocrine responsiveness in breast cancer/ N. Harbeck, A. Rody// Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology.- 2012.-Vol. 30, № 7 -P.686-689.

80. Harris, D.A. Exosomes released from breast cancer carcinomas stimulate cell movement/ D.A. Harris, S.H. Patel, M. Gucek et al. // PloS one.- 2015.-Vol. 10, № 3 - P.e0117495.

81. Hayes, E. Acquired endocrine resistance in breast cancer: implications for tumour metastasis/ E. Hayes, R. I. Nicholson, S.Hiscox// Frontiers in bioscience.-2011.-Vol. 16, № P.838-848.

82. Heldring, N. Estrogen receptors: how do they signal and what are their targets/ N. Heldring, A. Pike, S. Andersson et al. // Physiological reviews.- 2007.-Vol. 87, № 3 - P.905-931.

83. Helleman, J. Association of an extracellular matrix gene cluster with breast cancer prognosis and endocrine therapy response/ J. Helleman, M. P. Jansen, K. Ruigrok-Ritstier et al. // Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research.- 2008.-Vol. 14, № 17 - P.5555-5564.

84. Hendrix, A. Exosome signaling in mammary gland development and cancer/ A. Hendrix, A. N. Hume// The International journal of developmental biology.-2011.-Vol. 55, № 7-9 - P.879-887.

85. Herynk, M.H. A hypersensitive estrogen receptor alpha mutation that alters dynamic protein interactions/ M.H. Herynk, T. Hopp, Y. Cui et al. // Breast Cancer Res Treat.- 2010.-Vol. 122, № 2 - P.381-393.

86. Hua, G. A negative feedback regulatory loop associates the tyrosine kinase receptor ERBB2 and the transcription factor GATA4 in breast cancer cells/ G. Hua, B. Zhu, F. Rosa et al.// Molecular cancer research : MCR.- 2009.-Vol. 7, № 3 - P.402-414.

87. Huang, J. Downregulation of estrogen receptor and modulation of growth of breast cancer cell lines mediated by paracrine stromal cell signals/J. Huang, P. Woods, D. Normolle, D et al. // Breast Cancer Res Treat.- 2017.-Vol. 161, № 2 - P.229-243.

88. Ishii, Y. Tamoxifen stimulates the growth of cyclin D1-overexpressing breast cancer cells by promoting the activation of signal transducer and activator of transcription 3/ Y. Ishii, S. Waxman, D. Germain// Cancer research.- 2008.-Vol. 68, № 3 - P.852-860.

89. Ito, S. PI3K/Akt signaling is involved in the disruption of gap junctional communication caused by v-Src and TNF-alpha/ S. Ito, T. Hyodo, H. Hasegawa et al. // Biochemical and biophysical research communications.- 2010.-Vol. 400, № 2 - P.230-235.

90. Jansen, M.P. Molecular classification of tamoxifen-resistant breast

carcinomas by gene expression profiling / M.P. Jansen, J.A. Foekens, I.L. van Staveren

86

et al.// Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology.- 2005.-Vol. 23, № 4 - P.732-740.

91. Johnston, S.R. Enhancing Endocrine Therapy for Hormone Receptor-Positive Advanced Breast Cancer: Cotargeting Signaling Pathways/ S.R. Johnston // Journal of the National Cancer Institute.- 2015.-Vol. 107, № 10 - P.

92. Johnston, S.R. Aromatase inhibitors for breast cancer: lessons from the laboratory/ S.R. Johnstonand, M. Dowsett// Nature reviews. Cancer.- 2003.-Vol. 3, № 11 - P.821-831.

93. Jones, R.A. The impact of transgenic IGF-IR overexpression on mammary development and tumorigenesis/ R.A. Jones, R.A., Moorehead// Journal of mammary gland biology and neoplasia.- 2008.-Vol. 13, № 4 - P.407-413.

94. Jongen, W.M. Regulation of connexin 43-mediated gap junctional intercellular communication by Ca2+ in mouse epidermal cells is controlled by E-cadherin/ W.M. Jongen, D.J. Fitzgerald, M. Asamoto et al.// The Journal of cell biology.- 1991.-Vol. 114, № 3 - P.545-555.

95. Kamat, A. Estrogen-mediated angiogenesis in thyroid tumor microenvironment is mediated through VEGF signaling pathways/ A. Kamat, S. Rajoria, A. George et al. // Archives of otolaryngology--head & neck surgery.- 2011.-Vol. 137, № 11 - P. 1146-1153.

96. Kato, S. Activation of the estrogen receptor through phosphorylation by mitogen-activated protein kinase/ S. Kato, H. Endoh, Y. Masuhiro et al.// Science.-1995.-Vol. 270, № 5241 - P.1491-1494.

97. Kim, B.G.Invasive breast cancer induces laminin-332 upregulation and integrin beta4 neoexpression in myofibroblasts to confer an anoikis-resistant phenotype during tissue remodeling/ B.G. Kim, M.Q. Gao, Y.P. Choi et al.// Breast cancer research : BCR.- 2012.-Vol. 14, № 3 - P.R88.

98. Koga, M. Modulation of the growth-inhibitory effects of progestins and the antiestrogen hydroxyclomiphene on human breast cancer cells by epidermal growth factor and insulin/ M. Koga, E.A. Musgrove, R.L. Sutherland// Cancer research.- 1989.-Vol. 49, № 1 - P.112-116.

99. Kohlhapp, F.J. MicroRNAs as mediators and communicators between cancer cells and the tumor microenvironment/ F.J. Kohlhapp, A.K. Mitra, E. Lengyel, M.E. Peter// Oncogene.- 2015.-Vol., № P.

100. Kraus, R.J. Estrogen-related receptor alpha 1 actively antagonizes estrogen receptor-regulated transcription in MCF-7 mammary cells/ R.J. Kraus, E.A. Ariazi, M.L. Farrell, J.E. Mertz// The Journal of biological chemistry.- 2002.-Vol. 277, № 27 -P.24826-24834.

101. Krishnan, V. Mechanism of action of estrogens and selective estrogen receptor modulators/ V. Krishnan, H. Heath H.U. Bryant// Vitamins and hormones.-2000.-Vol. 60, № P.123-147.

102. Kruger, S. Molecular characterization of exosome-like vesicles from breast cancer cells/ S. Kruger, Z. Y. Abd Elmageed, D.H. Hawke et al.// BMC cancer.- 2014.-Vol. 14, № P.44.

103. Kurebayashi, J. Endocrine-resistant breast cancer: underlying mechanisms and strategies for overcoming resistance/ J. Kurebayashi// Breast Cancer.- 2003.-Vol. 10, № 2 - P. 112-119.

104. Lamouille, S. Molecular mechanisms of epithelial-mesenchymal transition/S. Lamouille, J. Xu, R. Derynck// Nat Rev Mol Cell Biol.- 2014.-Vol. 15, № 3 - P.178-196.

105. Lander, A.D. The measure of success: constraints, objectives, and tradeoffs in morphogen-mediated patterning/ A.D. Lander, W.C. Lo, Q. Nie, F.Y. Wan// Cold Spring Harbor perspectives in biology.- 2009.-Vol. 1, № 1 - P.a002022.

106. Le, M.T. miR-200-containing extracellular vesicles promote breast cancer cell metastasis/ M.T. Le, P. Hamar, C. Guo et al.// J Clin Invest.- 2014.-Vol. 124, № 12 - P.5109-5128.

107. Li, S. Immunocytochemical localization of sex steroid hormone receptors in normal human mammary gland/ S. Li, B. Han, G. Liu et al.// The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society.-2010.-Vol. 58, № 6 - P.509-515.

108. Lin, Q. Astrocytes protect glioma cells from chemotherapy and upregulate survival genes via gap junctional communication / Q. Lin, Z. Liu, F. Ling, G. Xu// Mol Med Rep.- 2016.-Vol. 13, № 2 - P.1329-1335.

109. Lippman, M.E. Autocrine and paracrine growth regulation of human breast cancer/ M.E. Lippman, R.B. Dickson, A. Kasid et al.// Journal of steroid biochemistry.-1986.-Vol. 24, № 1 - P.147-154.

110. Littlepage, L.E. Coevolution of cancer and stromal cellular responses/ L.E. Littlepage, M. Egeblad, Z. Werb// Cancer cell.- 2005.-Vol. 7, № 6 - P.499-500.

111. Liu, F. Biomarkers for EMT and MET in breast cancer: An update/ F. Liu, L.N. Gu, B.E. Shan et al.// Oncol Lett.- 2016.-Vol. 12, № 6 - P.4869-4876.

112. Loo, L.W. pp60src-mediated phosphorylation of connexin 43, a gap junction protein/ L.W. Loo, J.M. Berestecky, M.Y. Kanemitsu, A.F. Lau// The Journal of biological chemistry.- 1995.-Vol. 270, № 21 - P.12751-12761.

113. Lopes-Rodrigues, V. Multidrug resistant tumour cells shed more microvesicle-like EVs and less exosomes than their drug-sensitive counterpart cells/ V. Lopes-Rodrigues, A. Di Luca, D. Sousa et al.// Biochim Biophys Acta.- 2016.-Vol. 1860, № 3 - P.618-627.

114. Lubahn, D.B. Alteration of reproductive function but not prenatal sexual development after insertional disruption of the mouse estrogen receptor gene/ D.B. Lubahn, J.S. Moyer, T.S. Golding et al.// Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.- 1993.-Vol. 90, № 23 - P.11162-11166.

115. Luga, V. Exosomes mediate stromal mobilization of autocrine Wnt-PCP signaling in breast cancer cell migration/ V. Luga, L. Zhang, A.M. Viloria-Petit et al.// Cell.- 2012.-Vol. 151, № 7 - P.1542-1556.

116. Lv, M.M. Exosomes mediate drug resistance transfer in MCF-7 breast cancer cells and a probable mechanism is delivery of P-glycoprotein/ M.M. Lv, X.Y. Zhu, W.X. Chen et al.// Tumour Biol.- 2014.-Vol. 35, № 11 - P.10773-10779.

117. Marino, M. Estrogen signaling multiple pathways to impact gene transcription/ M. Marino, P. Galluzzo, P. Ascenzi// Current genomics.- 2006.-Vol. 7, № 8 - P.497-508.

118. Martin, L.A. Enhanced estrogen receptor (ER) alpha, ERBB2, and MAPK signal transduction pathways operate during the adaptation of MCF-7 cells to long term estrogen deprivation/ L.A. Martin, I.Farmer, S.R.Johnston et al.// The Journal of biological chemistry.- 2003.-Vol. 278, № 33 - P.30458-30468.

119. Matsuda, A. MicroRNAs as paracrine signaling mediators in cancers and metabolic diseases/ A. Matsuda, I.K. Yan, C. Foye et al.// Best Pract Res Clin Endocrinol Metab.- 2016.-Vol. 30, № 5 - P.577-590.

120. Matthews, N. Relationship between tumour cell morphology, gap junctions and susceptibility to cytolysis by tumour necrosis factor/ N. Matthews, M.L. Neale// British journal of cancer.- 1989.-Vol. 59, № 2 - P.189-193.

121. May, F.E. Novel drugs that target the estrogen-related receptor alpha: their therapeutic potential in breast cancer/ F.E. May// Cancer management and research.-2014.-Vol. 6, № P.225-252.

122. McCullar, J.S. Cellular targets of estrogen signaling in regeneration of inner ear sensory epithelia/ J.S. McCullar, E.C. Oesterle// Hearing research.- 2009.-Vol. 252, № 1-2 - P.61-70.

123. Melo, S.A. Cancer exosomes perform cell-independent microRNA biogenesis and promote tumorigenesis/ S.A. Melo, H. Sugimoto, J.T. O'Connell et al.// Cancer cell.- 2014.-Vol. 26, № 5 - P.707-721.

124. Merlin, J.L. MTT assays allow quick and reliable measurement of the response of human tumour cells to photodynamic therapy/ J.L. Merlin, S. Azzi, D. Lignon et al.// European journal of cancer.- 1992.-Vol. 28A, № 8-9 - P.1452-1458.

125. Miles, F.L. Insidious changes in stromal matrix fuel cancer progression/ F.L. Miles, R.A. Sikes// Molecular cancer research : MCR.- 2014.-Vol. 12, № 3 -P.297-312.

126. Miller, T.W. Phosphatidylinositol 3-kinase and antiestrogen resistance in breast cancer/ T.W. Miller, J.M. Balko, C.L. Arteaga // Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology.- 2011.-Vol. 29, № 33 -P.4452-4461.

127. Modha, G. Developmental changes in insulin-like growth factor I receptor gene expression in the mouse mammary gland / G. Modha, A. Blanchard, B. Iwasiow et al.// Endocrine research.- 2004.-Vol. 30, № 1 - P.127-140.

128. Mroue, R. Asymmetric expression of connexins between luminal epithelial- and myoepithelial- cells is essential for contractile function of the mammary gland/ R. Mroue, J. Inman, J. Mott et al.// Developmental biology.- 2015.-Vol. 399, № 1 - P.15-26.

129. Muluhngwi, P. Roles for miRNAs in endocrine resistance in breast cancer/ P. Muluhngwi, C.M. Klinge// Endocr Relat Cancer.- 2015.-Vol. 22, № 5 - P.R279-300.

130. Musgrove, E.A. Biological determinants of endocrine resistance in breast cancer/ E.A. Musgrove, R.L. Sutherland// Nature reviews. Cancer.- 2009.-Vol. 9, № 9 -P.631-643.

131. Myers, E. Inverse relationship between ER-beta and SRC-1 predicts outcome in endocrine-resistant breast cancer/ E. Myers, F.J. Fleming, T.B. Crotty et al.// British journal of cancer.- 2004.-Vol. 91, № 9 - P.1687-1693.

132. Niepel, M. Analysis of growth factor signaling in genetically diverse breast cancer lines/ M. Niepel, M. Hafner, E.A. Pace et al.// BMC biology.- 2014.-Vol. 12, № P.20.

133. O'Malley, B.W. Elwood V. Jensen (1920-2012): father of the nuclear receptors/ B.W. O'Malley, S. Khan// Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.- 2013.-Vol. 110, № 10 - P.3707-3708.

134. Oesterreich, S. Estrogen-mediated down-regulation of E-cadherin in breast cancer cells/ S. Oesterreich, W. Deng, S. Jiang et al.// Cancer research.- 2003.-Vol. 63, № 17 - P.5203-5208.

135. Orcurto, A.[Endocrine therapy resistance in metastatic breast cancer: mechanisms and clinical implications]/ A. Orcurto, R. Odermatt, A. Stravodimou, A. Wolfer// Revue medicale suisse.- 2014.-Vol. 10, № 431 - P.1102-1106.

136. Osborne, C.K. Mechanisms of endocrine resistance in breast cancer/ C.K. Osborne, R. Schiff// Annual review of medicine.- 2011.-Vol. 62, № P.233-247.

137. Oshima, A. Structure and closure of connexin gap junction channels/ A. Oshima// FEBS letters.- 2014.-Vol. 588, № 8 - P.1230-1237.

138. Oskarsson, T. Extracellular matrix components in breast cancer progression and metastasis/ T. Oskarsson// Breast.- 2013.-Vol. 22 Suppl 2, № P.S66-72.

139. Ouzounova, M. MicroRNA miR-30 family regulates non-attachment growth of breast cancer cells/ M. Ouzounova, T. Vuong, P.B. Ancey et al.// BMC Genomics.- 2013.-Vol. 14, № P.139.

140. Palazzolo, G. Proteomic analysis of exosome-like vesicles derived from breast cancer cells/ G. Palazzolo, N.N. Albanese, D.I.C. G et al.// Anticancer research. -2012.-Vol. 32, № 3 - P.847-860.

141. Panse, J. Fibroblasts transformed by chemical carcinogens are sensitive to intercellular induction of apoptosis: implications for the control of oncogenesis/ J. Panse, M.L. Hipp, G. Bauer// Carcinogenesis.- 1997.-Vol. 18, № 2 - P.259-264.

142. Peracchia, C. Calmodulin directly gates gap junction channels/ C. Peracchia, A. Sotkis, X.G. Wang et al.// The Journal of biological chemistry.- 2000.-Vol. 275, № 34 - P.26220-26224.

143. Petrelli, A. By promoting cell differentiation, miR-100 sensitizes basal-like breast cancer stem cells to hormonal therapy/ A. Petrelli, R. Carollo, M. Cargnelutti et al.// Oncotarget.- 2015.-Vol. 6, № 4 - P.2315-2330.

144. Pires, B.R.NNF-kappaB Is Involved in the Regulation of EMT Genes in Breast Cancer Cells/ B.R. Pires, A.L. Mencalha, G.M. Ferreira et al.// PloS one.- 2017.-Vol. 12, № 1 - P.e0169622.

145. Pontiggia, O. Establishment of an in vitro estrogen-dependent mouse mammary tumor model: a new tool to understand estrogen responsiveness and development of tamoxifen resistance in the context of stromal-epithelial interactions/ O. Pontiggia, V. Rodriguez, V. Fabris et al.// Breast Cancer Res Treat.- 2009.-Vol. 116, № 2 - P.247-255.

146. Pontiggia, O. The tumor microenvironment modulates tamoxifen

resistance in breast cancer: a role for soluble stromal factors and fibronectin through

92

beta1 integrin/ O. Pontiggia, R. Sampayo, D. Raffo et al.// Breast Cancer Res Treat.-

2012.-Vol. 133, № 2 - P.459-471.

147. Potter, D.D. Synaptic functions in rat sympathetic neurons in microcultures. II. Adrenergic/cholinergic dual status and plasticity/ D.D. Potter, S.C. Landis, S.G. Matsumoto, E.J. Furshpan// The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience.- 1986.-Vol. 6, № 4 - P. 1080-1098.

148. Rameshwar, P. Potential novel targets in breast cancer/ P. Rameshwar// Current pharmaceutical biotechnology.- 2009.-Vol. 10, № 2 - P.148-153.

149. Rampaul, R.S. Prognostic and predictive factors in primary breast cancer and their role in patient management: The Nottingham Breast Team/ R.S. Rampaul, S.E. Pinder, C.W. Elston, I.O. Ellis// Eur J Surg Oncol.- 2001.-Vol. 27, № 3 - P.229-238.

150. Raposo, G. Extracellular vesicles: exosomes, microvesicles, and friends/ G. Raposo, W. Stoorvogel// The Journal of cell biology.- 2013.-Vol. 200, № 4 - P.373-383.

151. Rash, J.E. Ultrastructure, histological distribution, and freeze-fracture immunocytochemistry of gap junctions in rat brain and spinal cord/ J.E. Rash, T. Yasumura, F.E. Dudek// Cell biology international.- 1998.-Vol. 22, № 11-12 - P.731-749.

152. Rasmussen, A.A. Paracrine/autocrine regulation of breast cancer by the insulin-like growth factors/ A.A. Rasmussen, K.J. Cullen// Breast Cancer Res Treat.-1998.-Vol. 47, № 3 - P.219-233.

153. Renoir, J.M. Estrogen receptor signaling as a target for novel breast cancer therapeutics/ J.M. Renoir, V. Marsaud, G. Lazennec// Biochemical pharmacology.-

2013.-Vol. 85, № 4 - P.449-465.

154. Revel, J.P. Hexagonal array of subunits in intercellular junctions of the mouse heart and liver/ J.P. Revel, M.J. Karnovsky// The Journal of cell biology.- 1967.-Vol. 33, № 3 - P.C7-C12.

155. Riches, A. Regulation of exosome release from mammary epithelial and breast cancer cells - a new regulatory pathway/ A. Riches, E. Campbell, E. Borger, S. Powis// European journal of cancer.- 2014.-Vol. 50, № 5 - P.1025-1034.

156. Roy, S. Paracrine signaling mediated at cell-cell contacts/ S. Roy, T.B. Kornberg// BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology.- 2015.-Vol. 37, № 1 - P.25-33.

157. Rupp, A.K. Loss of EpCAM expression in breast cancer derived serum exosomes: role of proteolytic cleavage/ A.K. Rupp, C. Rupp, S. Keller et al.// Gynecologic oncology.- 2011.-Vol. 122, № 2 - P.437-446.

158. Sainsbury, J.R. Epidermal-growth-factor receptors and oestrogen receptors in human breast cancer/ J.R. Sainsbury, J.R. Farndon, G.V. Sherbet, A.L. Harris// Lancet.- 1985.-Vol. 1, № 8425 - P.364-366.

159. Sakakibara, J. Expression of cell polarity protein scribble differently affects prognosis in primary tumor and lymph node metastasis of breast cancer patients/ JSakakibara, M. Sakakibara, N. Shiina et al.// Breast Cancer.- 2016.-Vol., № P.

160. Salameh, A. Pharmacology of gap junctions. New pharmacological targets for treatment of arrhythmia, seizure and cancer?/ A. Salameh, S. Dhein// Biochim Biophys Acta.- 2005.-Vol. 1719, № 1-2 - P.36-58.

161. Saunders, M.M. Breast cancer metastatic potential correlates with a breakdown in homospecific and heterospecific gap junctional intercellular communication/ M.M. Saunders, M.J. Seraj, Z. Li et al.// Cancer research.- 2001.-Vol. 61, № 5 - P.1765-1767.

162. Scherbakov, A.M. The relationships between snail1 and estrogen receptor signaling in breast cancer cells/ A.M. Scherbakov, O.E. Andreeva, V.A. Shatskaya, M.A. Krasil'nikov// J Cell Biochem.- 2012.-Vol. 113, № 6 - P.2147-2155.

163. Scherbakov, A.M. Beta-catenin signaling pathway and the tolerance of breast cancer cells to hypoxic conditions/ A.M.,Scherbakov, L.B. Stefanova, I.A. Yakushina, M.A. Krasilnikov// Klinicheskaia laboratornaia diagnostika.- 2013.-Vol., № 10 - P.68-70, 37-40.

164. Schneider, A. Exosomes: vesicular carriers for intercellular communication in neurodegenerative disorders/ A. Schneider, M. Simons// Cell and tissue research.- 2013.-Vol. 352, № 1 - P.33-47.

165. Sharma, G.N. Various types and management of breast cancer: an overview/ G.N. Sharma, R. Dave, J. Sanadya et al.// J Adv Pharm Technol Res.- 2010.-Vol. 1, № 2 - P.109-126.

166. Shishido, S.N. Gap junction enhancer increases efficacy of cisplatin to attenuate mammary tumor growth/ S.N. Shishido, T.A. Nguyen// PloS one.- 2012.-Vol. 7, № 9 - P.e44963.

167. Shou, J. Mechanisms of tamoxifen resistance: increased estrogen receptor-HER2/neu cross-talk in ER/HER2-positive breast cancer/ J. Shou, S. Massarweh, C.K. Osborne et al.// Journal of the National Cancer Institute.- 2004.-Vol. 96, № 12 - P.926-935.

168. Song, R.X. Estrogen utilization of IGF-1-R and EGF-R to signal in breast cancer cells/ R.X. Song, Y. Chen, Z. Zhang et al.// The Journal of steroid biochemistry and molecular biology.- 2010.-Vol. 118, № 4-5 - P.219-230.

169. Squadrito, M.L. Endogenous RNAs modulate microRNA sorting to exosomes and transfer to acceptor cells/ M.L. Squadrito, C. Baer, F. Burdet et al.// Cell reports.- 2014.-Vol. 8, № 5 - P.1432-1446.

170. Suetsugu, A. Imaging exosome transfer from breast cancer cells to stroma at metastatic sites in orthotopic nude-mouse models/ A. Suetsugu, K. Honma, S. Saji, et al.// Advanced drug delivery reviews.- 2013.-Vol. 65, № 3 - P.383-390.

171. Sutherland, R.L. Cyclins and breast cancer/ R.L. Sutherland, E.A. Musgrove// Journal of mammary gland biology and neoplasia.- 2004.-Vol. 9, № 1 -P.95-104.

172. Taipale, J. The Hedgehog and Wnt signalling pathways in cancer/ J. Taipale, P.A. Beachy// Nature.- 2001.-Vol. 411, № 6835 - P.349-354.

173. Tam, I.S. There and back again: The journey of the estrogen-related receptors in the cancer realm/ I.S. Tam, V. Giguere// The Journal of steroid biochemistry and molecular biology.- 2015.-Vol., № P.

174. Tanida, T. Estrogen-related Receptor beta Reduces the Subnuclear Mobility of Estrogen Receptor alpha and Suppresses Estrogen-dependent Cellular

Function/ T. Tanida, K.I. Matsuda, S. Yamada et al.// The Journal of biological chemistry.- 2015.-Vol. 290, № 19 - P.12332-12345.

175. Tee, M.K. Estradiol and selective estrogen receptor modulators differentially regulate target genes with estrogen receptors alpha and beta/ M.K. Tee, I. Rogatsky, C. Tzagarakis-Foster et al.// Molecular biology of the cell.- 2004.-Vol. 15, № 3 - P.1262-1272.

176. Thery, C. Isolation and characterization of exosomes from cell culture supernatants and biological fluids/ C. Thery, S. Amigorena, G. Raposo, A. Clayton// Curr Protoc Cell Biol.- 2006.-Vol. Chapter 3, № P.Unit 3 22.

177. Thery, C. Exosomes: composition, biogenesis and function/ C. Thery, L. Zitvogel, S. Amigorena// Nature reviews. Immunology.- 2002.-Vol. 2, № 8 - P.569-579.

178. Tlsty, T. Cancer: whispering sweet somethings/ T. Tlsty// Nature.- 2008.-Vol. 453, № 7195 - P.604-605.

179. Tlsty, T.D. Tumor stroma and regulation of cancer development/ T.D. Tlsty, L.M. Coussens// Annual review of pathology.- 2006.-Vol. 1, № P. 119-150.

180. Torre, L.A. Global cancer statistics, 2012/ L.A. Torre, F. Bray, R.L. Siegel et al.// CA Cancer J Clin.- 2015.-Vol. 65, № 2 - P.87-108.

181. Toy, W. ESR1 ligand-binding domain mutations in hormone-resistant breast cancer/ W. Toy, Y. Shen, H. Won et al.// Nature genetics.- 2013.-Vol. 45, № 12 -P.1439-1445.

182. Tsunoda, T. Involvement of large tenascin-C splice variants in breast cancer progression/ T. Tsunoda, H. Inada, I. Kalembeyi et al.// The American journal of pathology.- 2003.-Vol. 162, № 6 - P.1857-1867.

183. Villagrasa, A. Exosomes Derived from Breast Cancer Cells, Small Trojan Horses?/ A. Villagrasa, P.J. Alvarez, A. Osuna et al.// Journal of mammary gland biology and neoplasia.- 2014.-Vol. 19, № 3-4 - P.303-313.

184. Vincent, T. A SNAIL1-SMAD3/4 transcriptional repressor complex promotes TGF-beta mediated epithelial-mesenchymal transition/ T. Vincent, E.P. Neve, J.R. Johnson et al.// Nature cell biology.- 2009.-Vol. 11, № 8 - P.943-950.

185. Wakeling, A.E. Similarities and distinctions in the mode of action of different classes of antioestrogens/ A.E. Wakeling// Endocr Relat Cancer.- 2000.-Vol. 7, № 1 - P.17-28.

186. Walker, V.R. Estrogen receptor knockout mice as a model for endocrine research/ V.R. Walker, K.S. Korach// ILAR journal.- 2004.-Vol. 45, № 4 - P.455-461.

187. Wang, J. Fatty acid synthase is a primary target of MiR-15a and MiR-16-1 in breast cancer/ J. Wang, X. Zhang, J. Shi et al.// Oncotarget.- 2016.-Vol. 7, № 48 -P.78566-78576.

188. Wei, Y. Exosomal miR-221/222 enhances tamoxifen resistance in recipient ER-positive breast cancer cells/ Y. Wei, X. Lai, S. Yu et al.// Breast Cancer Res Treat.- 2014.-Vol. 147, № 2 - P.423-431.

189. Welsch, U. Secretory phenomena in the non-lactating human mammary gland/ U. Welsch, T. Oppermann, M., Mortezza et al.// Annals of anatomy = Anatomischer Anzeiger : official organ of the Anatomische Gesellschaft.- 2007.-Vol. 189, № 2 - P.131-141.

190. Wubbolts, R. Proteomic and biochemical analyses of human B cell-derived exosomes. Potential implications for their function and multivesicular body formation/ R. Wubbolts, R.S. Leckie, P.T. Veenhuizen, et al.// The Journal of biological chemistry.- 2003.-Vol. 278, № 13 - P.10963-10972.

191. Xu, B. Effect of selective estrogen receptor modulators on metabolic homeostasis/ B. Xu, D. Lovre, F. Mauvais-Jarvis// Biochimie.- 2015.-Vol., № P.

192. Xue, Z. Mesenchymal stem cells promote epithelial to mesenchymal transition and metastasis in gastric cancer though paracrine cues and close physical contact/ Z. Xue, X. Wu, X. Chen, et al.// J Cell Biochem.- 2015.-Vol. 116, № 4 - P.618-627.

193. Yang, M. Microvesicles secreted by macrophages shuttle invasion-potentiating microRNAs into breast cancer cells/ M. Yang, J. Chen, F. Su et al.// Molecular cancer.- 2011.-Vol. 10, № P. 117.

194. Yde, C.W. NFkappaB signaling is important for growth of antiestrogen resistant breast cancer cells/ C.W. Yde, K.B. Emdal, B. Guerra, A.E. Lykkesfeldt, // Breast Cancer Res Treat.- 2012.-Vol. 135, № 1 - P.67-78.

195. Yeung, K.T. Epithelial-mesenchymal transition in tumor metastasis/ K.T. Yeung, J. Yang// Mol Oncol.- 2017.-Vol. 11, № 1 - P.28-39.

196. Yu, D.D. Exosomes from adriamycin-resistant breast cancer cells transmit drug resistance partly by delivering miR-222/ D.D.Yu, Y. Wu, X.H. Zhang et al. // Tumour Biol.- 2016.-Vol. 37, № 3 - P.3227-3235.

197. Yuan, J. Acquisition of epithelial-mesenchymal transition phenotype in the tamoxifen-resistant breast cancer cell: a new role for G protein-coupled estrogen receptor in mediating tamoxifen resistance through cancer-associated fibroblast-derived fibronectin and beta1-integrin signaling pathway in tumor cells/ J. Yuan, M. Liu, L. Yang et al.// Breast cancer research : BCR.- 2015.-Vol. 17, № P.69.

198. Zhao, J.J. MicroRNA-221/222 negatively regulates estrogen receptor alpha and is associated with tamoxifen resistance in breast cancer / J.J. Zhao, J. Lin, H. Yang et al.// The Journal of biological chemistry.- 2008.-Vol. 283, № 45 - P.31079-31086.

199. Zhou, W. Cancer-secreted miR-105 destroys vascular endothelial barriers to promote metastasis/ W. Zhou, M.Y. Fong, Y. Min et al.// Cancer cell.- 2014.-Vol. 25, № 4 - P.501-515.

200. Zhou, Y. Enhanced NF kappa B and AP-1 transcriptional activity associated with antiestrogen resistant breast cancer/ Y. Zhou, C. Yau, J.W. Gray et al.// BMC cancer.- 2007.-Vol. 7, № P.59.

201. Zibara, K. Anti-angiogenesis therapy and gap junction inhibition reduce MDA-MB-231 breast cancer cell invasion and metastasis in vitro and in vivo/ K. Zibara, Z. Awada, L. Dib et al.// Scientific reports.- 2015.-Vol. 5, № P.12598.