Роль хлорид-анионов в функционировании ангиотензин-превращающего фермента тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.15, кандидат химических наук Моисеева, Наталья Анатольевна

• Моисеева, Наталья Анатольевна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Моисеева, Наталья Анатольевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Глава 1 Общие сведения об ангиотензин-превращающем ферменте.

1.1. Локализация и функции ангиотензин-превращающего фермента в организме.

1.2. Структура гена ангиотензин-превращающего фермента.

1.3. Первичная структура ангиотензин-превращающего фермента и особенности углеводной компоненты фермента.

1.4. Пространственная структура ангиотензин-превращающего фермента.

1.4.1. Пространственная структура С-домеиа ангиотензин-превращающего фермента человека.

1.4.2. Пространственные структуры комплексов С-домена ангиотензин-превращающего фермента с лизиноприлом, каптоприлом и эналаприлатом.

1.4.3. Пространственные модели N-домена ангиотензин-превращающего фермента и комплекса N-домена с лизиноприлом.

1.4.4. Механизм функционирования активных центров ангиотензин-превращающего фермента.

1.5. Каталитические свойства отдельных N- и С-доменов ангиотензинпревращающего фермента и доменов в составе соматического фермента.

Глава 2 Активация ангиотензин-превращающего фермента хлорид-анионами.

2.1. Влияние хлорид-анионов на N- и С-домены ангиотензинпревращающего фермента.

2.2. Аминокислоты, отвечающие за связывание хлорид-анионов в ангиотензин-превращающем ферменте.

2.3. Хлорид-связывающие центры в С-домене и в гомологах ангиотензинпревращающего фермента.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 3 Материалы и методы исследования.

3.1. Материалы.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Синтез аффинного сорбента.

3.2.2. Выделение и очистка соматического ангиотензинпревращающего фермента.

3.2.3. Выделение и очистка тестикулярного ангиотензин-превращающего фермента.

3.2.4. Получение N-домена соматического ангиотензин-превращающего фермента.

3.2.5. Определение концентрации и чистоты выделенных препаратов фермента.

3.2.6. Обессоливание ангиотензин-превращающего фермента.

3.2.7. Подготовка образцов к секвенированию.

3.2.8. Кинетические измерения.

3.2.9. Исследование структуры ангиотензин-превращающего фермента

Ф методами биоинформатики.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ I

Глава 4 Получение трех форм ангиотензин-превращающего фермента.

4.1. Получение и характеристика соматического ангиотензинпревращающего фермента быка.

4.2. Получение и характеристика тестикулярного ангиотензинпревращающего фермента быка.

4.3. Получение N-домена ангиотензин-превращающего фермента быка.

4.3.1. Каталитические характеристики N-домена ангиотензинпревращающего фермента.

Глава 5 Влияние хлорид-анионов на кинетические характеристики ангиотензин-превращающего фермента.

5.1. Влияние хлорид-анионов на кинетические параметры гидролиза

Cbz-Phe-His-Leu под действием С- и N-доменов ангиотензин-превращающего фермента.

5.1.1. Определение влияния ионной силы раствора на активности С- и N-доменов ангиотензин-превращающего фермента быка.

5.1.2. Определение механизма действия хлорид-анионов в реакции гидролиза Cbz-Phe-His-Leu под действием N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента.

5.2. Влияние хлорид-анионов на кинетические параметры гидролиза Fa-Phe-Gly-Gly под действием С- и N-доменов ангиотензинпревращающего фермента.

5.2.1. Определение механизма действия хлорид-анионов в реакции гидролиза Fa-Phe-Gly-Gly под действием N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента.

5.3. Влияние хлорид-анионов на кинетические параметры гидролиза Cbz-Phe-His-Leu под действием соматического ангиотензин-превращающего фермента и определение механизма действия хлорид-анионов в реакциях, катализируемых данной формой фермента.

Глава 6 Построение моделей пространственных структур N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента быка.

6.1. Сравнение аминокислотных последовательностей N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента быка и человека.

6.2. Общие сведения о пространственных моделях N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента быка.

6.2.1. Аминокислоты, отвечающие за связывание субстрата Cbz-Phe-His-Leu в N- и С-доменах ангиотензин-превращающего фермента быка.

6.2.2. Пространственное расположение потенциальных центров связывания хлорид-анионов в моделях ^N- и С-доменов ангиотензин-превращающего фермента быка.

6.2.3. Роль С12 в функционировании однодоменных форм ангиотензинпревращающего фермента быка.

6.2.4. Оценка разницы в энергиях связывания хлорид-аниона С12 с Nи С-доменами ангиотензин-превращающего фермента.

6.2.5. Роль СП в функционировании однодоменных форм ангиотензин-превращающего фермента быка.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль хлорид-анионов в функционировании ангиотензин-превращающего фермента»

Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ, известный также как пептидил-дипептидаза А, ЕС 3.4.15.1), широко распространенный в организме человека и животных, является ключевым ферментом регуляции сосудистого тонуса. Огромный интерес к этому ферменту во всем мире связан с тем, что синтезированные ингибиторы АПФ оказались очень эффективными при терапии различных видов гипертонии, сердечно-сосудистой недостаточности и инфаркте миокарда. Ингибиторы АПФ стали лекарством номер 1 в кардиологии, и в настоящее время ежедневно более 200 млн. человек принимают их в качестве антигипертензивных препаратов. Кроме того, имеются сведения о положительном эффекте перорального введения ингибиторов АПФ при атеросклерозе и при инсулин-зависимом диабете.

С другой стороны, АПФ является привлекательным объектом исследования для биохимиков, поскольку сочетает в себе ряд уникальных свойств, таких как наличие двух гомологичных каталитически активных доменов с несколько различными свойствами в составе одной полипептидной цепи, существование в составе фермента специфического углевод-связывающего центра, активация фермента анионами.

В настоящее время остаются не выясненными вопросы о взаимодействии доменов в составе АПФ, о причинах существования отрицательной кооперативности активных центров фермента, о природе конформационных изменений в структуре молекулы при связывании лиганда, о механизме активации АПФ анионами, о механизме шеддинга АПФ с мембраны и т.д.

Особый интерес вызывает активация АПФ анионами. Активные центры, расположенные на разных доменах, обладают разным сродством к анионам. Кроме того, в зависимости от гидролизуемого субстрата, профили активации фермента анионами сильно различаются. В различных тканях организма концентрация хлорид-анионов различна, в связи, с чем в зависимости от локализации АПФ, может предпочтительно "работать" тот или иной домен фермента и может меняться круг гидролизуемых под действием АПФ субстратов. Это, в свою очередь, ставит вопрос о создании тканеспецифичных ингибиторов к отдельным доменам

АПФ. В 2003 году была расшифрована кристаллическая структура С-домена АПФ человека, продемонстрировавшая наличие двух центров связывания хлорид-анионов даже в однодоменной форме фермента. Все эти данные ставят вопрос о выявлении роли хлорид-анионов и описании механизма действия хлорид-анионов в реакциях, катализируемых АПФ. Однако, несмотря на несомненную актуальность исследования активации доменов АПФ данный вопрос остается практически неизученным.

Целью данной работы является комплексное исследование взаимодействия хлорид-анионов с однодоменными формами АПФ и двудоменным соматическим ферментом, что включает в себя изучение влияния хлорид-анионов на кинетику реакций, катализируемых различными формами АПФ, и структурное обоснование особенностей влияния хлорид-анионов на различные формы фермента. В качестве объекта исследования был выбран фермент быка.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Катализ», Моисеева, Наталья Анатольевна

ВЫВОДЫ

Предложен способ получения каталитически активного N-домена АПФ путем селективной термоденатурации С-домена в составе двудоменного соматического фермента с последующим протеолизом его трипсином.

Определены кинетические параметры гидролиза двух субстратов - Cbz-Phe-His-Leu и Fa-Phe-Gly-Gly - под действием двух однодоменных форм АПФ при различных концентрациях хлорид-анионов. Предложена кинетическая схема, описывающая механизм функционирования однодоменных форм АПФ, учитывающая связывание с ферментом двух хлорид-анионов, один из которых является активатором, а другой ингибитором фермента. Показано, что константы активации N- и С-доменов АПФ хлорид-анионами различаются на два порядка, а константы ипгибирования имеют близкие значения.

Определены кинетические параметры гидролиза субстрата Cbz-Phe-His-Leu под действием двудоменного соматического АПФ при различных концентрациях хлорид-анионов. Проанализирован механизм функционирования данной формы АПФ с учетом связывания четырех хлорид-анионов. Выявлено взаимное влияние доменов в составе соматического АПФ.

Построены модели пространственных структур С- и N-доменов АПФ быка. Показано существование двух потенциальных центров связывания хлорид-анионов на каждом из доменов.

Рассчитаны энергии связывания активирующего хлорид-аниона с С- и N-доменами АПФ, свидетельствующие о существенно лучшем связывании данного аниона с N-доменом АПФ. Показано, что присутствие остатка Тгр в С12-связывающем центре N-домена АПФ может рассматриваться как одна из причин более высокого сродства активирующего хлорид-аниона к N-домену. Предложено структурное объяснение улучшения связывания ингибирующего хлорид-аниона с С-доменом АПФ при связывании субстрата.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Моисеева, Наталья Анатольевна, 2006 год

1. Soubrier F., Alhenc-Gelas F., Hubert C., Allegrini J., John M., Tregear G., and Corvol P. Two putative active centers in human angiotensin I-converting enzyme revealed by molecular cloning. (1988), Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 85, 93869390.

2. Erdos E.G., and Skidgel R.A. The angiotensin I-converting enzyme. (1987), Lab. Invest., 56, 345-348.

3. Friedland J., Setton C., and Silverstein E. Induction of angiotensin-converting enzyme in human monocytes in culture. (1978), Biochem. Biophys. Res. Commun., 83, 843-849.

4. Costerousse O., Allegrini J., Lopez M., and Alhenc-Gelas F. Angiotensin I-converting enzyme in human circulatory mononuclear cells. Genetic polymorphism in T-lymphocytes. (1993), Biochem. J., 290, 33-40.

5. Strittmatter S.M., Kapiloff M.S., and Snyder S.H. 3H.Captopril binding to membrane associated angiotensin converting enzyme. (1983), Biochem. Biophys. Res. Commun., 112, 1027-1033.

6. Сахаров И.Ю., Данилов C.M., и Сухова Н.В. Очистка и исследование физико-химических свойств ангиотензинпревращающего фермента из печени человека. (1987), Бюлл. Экспер. Биол. Мед., 103, 308-310.

7. Sakharov I.Y., Danilov S.M., and Dukhanina E.A. Affinity chromatography and some properties of the angiotensin-converting enzyme from human heart. (1987), Biochim. Biophys. Acta, 923, 143-149.

8. Laliberte F., Laliberte M.F., Alhenc-Gelas F., and Chevillard C. Cellular and subcellular immunohistochemical localization of angiotensin-converting enzyme in the rat adrenal gland. (1987), Lab. Invest., 56, 364-371.

9. Igic R., and Kojovic V. Angiotensin I converting enzyme (kininase II) in ocular tissues. (1980), Exp. Eye Res., 30, 299-303.

10. Defendini R., Zimmerman E.A., Weare J.A., Alhenc-Gelas F, and Erdos E.G. Angiotensin-converting enzyme in epithelial and neuroepithelial cells. (1983), Neuroendocrinology, 37, 32-40.

11. Strittmatter S.M., Lo M.M.S., Javitch J.A., and Snyder S.H. Autoradiographic visualization of angiotensin-converting enzyme in rat brain with 3HJcaptopril: localization to a striatonigral pathway. (1984), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81, 1599-1603.

12. Esther C.R., Marino E.M., Howard Т.Е., Michaud A., and Corvol, P. The critical role of tissue angiotensin-converting enzyme as revealed by gene targeting in mice. (1997), J. Clin. Invest., 99, 2375-2385.

13. Corvol P., Williams T.A., and Soubrier, F. Peptidyl dipeptidase A: angiotensin I-converting enzyme. (1995), Methods Enzymol., 248, 283-305.

14. Ramachandran R., Sen G.C., Misono K., and Sen I. Regulated cleavage-secretion of the membrane-bound angiotensin-converting enzyme. (1994), J. Biol. Chem., 269,2125-2130.

15. Das M., Hartley J.L., and Soffer R.L. Serum angiotensin-converting enzyme. Isolation and relationship to the pulmonary enzyme. (1977), J. Biol. Chem., 252, 1316-1319.

16. El-Dorry H.A., MacGregor J.S., and Soffer R.L. Dipeptidyl carboxypeptidase from seminal fluid resembles the pulmonary rather than testicular isoenzyme. (1983), Biochem. Biophys. Res. Commun., 115, 1096-1100.

17. Yasui Т., Alhenc-Gelas F., Corvol P., and Menard J. Angiotensin I-converting enzyme in amniotic fluid. (1984), J. Lab. Clin. Med., 104, 741-751.

18. Schweisfurth H., and Schioberg-Schiegnitz S. Assay and biochemical characterization of angiotensin I-converting enzyme in cerebrospinal fluid. (1984), Enzyme, 32, 12-19.

19. Ehlers M.R., and Riordan J.F. Angiotensin-converting enzyme: new concepts concerning its biological role. (1989), Biochemistry, 28, 5311-5318.

20. Corvol P., and Williams T.A. Peptidyl-dipeptidase A/angiotensin I-converting enzyme. (1998), in Handbook of Proteolytic Enzymes (Edited by: Barrett A.J., Rawlings N.D., and Woessner J.F.) pp. 1066-1076, Academic Press.

21. Turner A.J., and Hooper N.M. The angiotensin-converting enzyme gene family: genomics and pharmacology. (2002), Trends Pharmacol. Sci., 23, 177-183.

22. Eriksson U., Danilczyk U., and Penninger J.M. Just the beginning: novel functions for angiotensin-converting enzyme. (2002), Curr. Biol., 12, R745-R752.

23. Gibbons G.H. Vasculoprotective and cardioprotective mechanism of angiotensin-converting enzyme inhibition: the homeostatic balance between angiotensin II and nitric oxide. (1997), Clin. Cardiol., 20, 18-25.

24. Skeggs L.T., Kahn J.R., and Shumway N.P. The preparation and function of the hypertensin-converting enzyme. (1956), J. Exp. Med., 103, 295-299.

25. Ruschityka F.T., Noll G., and Luscher T.F. The endothelium in coronary artery diseases. (1997), Cardiology, 88, 3-19.

26. Yang H.Y.T., Erdos E.G., and Levin Y. A dipeptidyl carboxypeptidase that converts angiotensin I and inactivates bradykinin. (1970), Biochim. Biophys. Acta, 214, 374-376.

27. Soffer R.L., and El-Dorry H.A. Angiotensin-converting enzyme: immunologic, structural, and developmental aspects. (1983), Fed. Proc., 42, 2735-2739.

28. Chrysant S.G. Vascular remodeling: the role of angiotensin-converting enzyme inhibitors. (1998), Am. Heart J., 135, S21-S30.

29. Parving H.H., Tarnow L., and Rossing P. Renal protection in diabetes an emerging role for calcium antagonists. (1997), Cardiology, 88, 56-62.

30. Skidgel R.A., and Erdos E.G. Novel activity of human angiotensin I converting enzyme: release of the NH2- and COOH-terminal tripeptides from the luteinizing hormone-releasing hormone. (1985),Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82, 1025-1029.

31. Skidgel R.A., Engelbrecht S., Johnson A.R., and Erdos E.G. Hydrolysis of substance P and neurotensin by converting enzyme and neutral endopeptidase. (1984), Peptides, 5, 769-776.

32. El-Dorry H.A., Bull H.G., Iwata K., Thornberry N.A., Cordes E.H., and Soffer R.L. Molecular and catalytic properties of rabbit testicular dipeptidyl carboxypeptidase. (1982), J. Biol. Chem., 257, 14128-14133.

33. Velletri P.A. Testicular angiotensin I-converting enzyme (E.C. 3.4.15.1). (1985), Life Sci., 36, 1597-1608.

34. Reeves P.G., and O'Dell B.L. Zinc deficiency in rats and angiotensin-converting enzyme activity: comparative effects on lung and testis. (1988), J. Nutr., 118, 622626.

35. Scallon B.J., Fung W.J., Tsang T.C., Li S., Kado-Fong H., Huang K.S., and Kochan J.P. Primary structure and functional activity of a phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D. (1991), Science, 252, 446-448.

36. Tujioka H., Misumi Y., Takami N., and Ikehara Y. Posttranslational modification of glycosylphosphatidylinositol (GPI)-specific phospholipase D and its activity in cleavage of GPI anchors. (1998), Biochem. Biophys. Res. Commun., 251, 737-743.

37. Leisle L., Parkin E.T., Turner A.J., and Hooper N.M. Angiotensin-converting enzyme as a GPIase: a critical reevaluation. (2005), Nat. Med., 11, 1139-1140.

38. Fuchs S., Frenzel K., Hubert C., Lyng R., Muller L., Michaud A., Xiao H.D., Adams J.W., Capecchi M.R., Corvol P., Shur B.D., and Bernstein K.E. Male fertility is dependent on dipeptidase activity of testis ACE. (2005), Nat. Med., 11, 1140-1142.

39. Deddish P.A., Wang J., Michel В., Morris P.W., Davidson N.O., Skidgel R.A., and Erdos E.G. Naturally occurring active N-domain of human angiotensin I-converting enzyme. (1994), Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 91, 7807-7811.

40. Deddish Р.А., Wang L.-X., Jackman H.L., Michel В., Wang J., Skidgel R.A., and Erdos E.G. Single-domain angiotensin I converting enzyme (kininase II): characterization and properties. (1996), J. Pharmacol. Exp. Ther., 279, 15821589.

41. Биневский П.В., Никольская И.И., Позднее В.Ф., и Кост О.А. Получение и характеристика N-домена ангиотенгин-превращающего фермента быка. (2000), Биохимия, 65, 765-774.

42. Hubert С., Houot А.-М., Corvol P., and Soubrier F. Structure of the angiotensin I-converting enzyme gene. Two alternate promoters correspond to evolutionary steps of a duplicated gene. (1991), J. Biol. Chem., 266, 15377-15383.

43. Riordan J.F. Angiotensin-I-converting enzyme and its relatives. (2003), Genome Biol., 4(8): 225.

44. Ehlers M.R.W., Schwager S.L., Scholle R.R., Manji G.A., Brandt W.F., and Riordan J.F. Proteolytic release of membrane-bound angiotensin-converting enzyme: role of the juxtamembrane stalk sequence. (1996), Biochemistry, 35, 9549-9559.

45. Erdos E.G., and Gafford J.T. Human converting enzyme. (1983), Clin. Exp. Hypertens. Part A - Theory and Pract., 5, 1251-1262.

46. Das M., and Soffer R.L. Pulmonary angiotensin-converting enzyme. Structural and catalytic properties. (1975), J. Biol. Chem., 250, 6762-6768.

47. Conroy J.M., Hartley J.L., and Soffer R.L. Canine pulmonary angiotensin-converting enzyme. Physicochemical, catalytic and immunological properties. (1978), Biochim. Biophys. Acta, 524,403-412.

48. Kost O.A., Bovin N.V., Chemodanova E.E., Nasonov V.V., and Orth T.A. New feature of angiotensin-converting enzyme: carbohydrate-recognizing domain. (2000),/. Mol. Recognit., 13, 360-369.

49. Hartley J.L., and Soffer R.L. On the oligosaccharide moiety of angiotensin-converting enzyme. (1978), Biochem. Biophys. Res. Commun., 83, 1545-1552.

50. Ripka J.E., Ryan J.W., Valido F.A., Chung A.Y., Peterson C.M., and Urry R.L. N-glycosylation of forms of angiotensin converting enzyme from four mammalian species. (1993), Biochem. Biophys. Res. Commun., 196, 503-508.

51. Shai S.Y., Fishel R.S., Martin B.M., Berk B.C., and Bernstein K.B. Bovine angiotensin converting enzyme cDNA cloning and regulation. Increased expression during endothelial cell growth arrest. (1992), С ire. Res., 70, 12741281.

52. Orth Т., Voronov S., Binevski P., Saenger W., and Kost O. Glycosylation of bovine pulmonary angiotensin-converting enzyme modulates its catalytic properties. (1998), FEBSLett., 431, 255-258.

53. Lattion A.L., Soubrier F., Allegrini J., Hubert C., Corvol P., and Alhenc-Gelas F. The testicular transcript of the angiotensin I-converting enzyme encodes for the ancestral, non-duplicatedform of the enzyme. (1989), FEBS Lett., 252, 99-104.

54. Kumar R.S., Kusari J., Roy S.N., Soffer R.L., and Sen G.C. Structure of testicular angiotensin-converting enzyme. A segmental mosaic isozyme. (1989), J. Biol. Chem., 264, 16754-16758.

55. Howard Т.Е., Shai S.Y., Langford K.G., Martin B.M., and Bernstein K.E. Transcription of testicular angiotensin-converting enzyme (ACE) is initiated within the 12th intron of the somatic ACE gene. (1990), Mol. Cell. Biol., 10, 42944302.

56. Ehlers M.R.W., Chen Y.-N.P., and Riordan J.F. The unique N-terminal sequence of testis angiotensin-converting enzyme is heavily O-glycosylated and unessential for activity or stability. (1992), Biochem. Biophys. Res. Commun., 183, 199-205.

57. Kasturi S., Jabbar M.A., Sen G.C., and Sen I. Role of glycosylation in the biosynthesis and activity of rabbit testicular angiotensin-converting enzyme. (1994), Biochemistry, 33, 6228-6234.

58. Sturrock E.D., Yu X.C., Wu Z., Biemann K., and Riordan J.F. Assignment of free and disulfide-bonded cysteine residues in testis angiotensin-converting enzyme: functional implications. (1996), Biochemistry, 35, 9560-9566.

59. Sturrock E.D., Danilov S.M., and Riordan J.F. Limited proteolysis of human kidney angiotensin-converting enzyme and generation of catalytically active N-and C-terminal domains. (1997), Biochem. Biophys. Res. Commun., 236, 16-19.

60. Елисеева Ю.Е. Структурно-функциональные особенности ангиотензин-превращающего фермента. (1998), Биоорг. химия, 24, 262-270.

61. Ehlers M.R.W., Chen Y.-N.P., and Riordan J.F. Spontaneous solubilization of membrane-bound human testis angiotensin-converting enzyme expressed in Chinese hamster ovary cells. (1991), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 1009-1013.

62. Beldent V., Michaud A., Wei L., Chauvet M.-T., and Corvol P. Proteolytic release of human angiotensin-converting enzyme. (1993), J. Biol. Chem., 268, 2642826434.

63. Ehlers M.R.W., Schwager S.L., Chubb A.J., Scholle R.R., Brandt W.F., and Riordan J.F. Proteolytic release of membrane proteins: studies on a membrane-protein solubilizing activity in CHO cells. (1997), Immunopharmacology, 36, 271278.

64. Sadhukhan R., Sen G.C., Ramchandran R., and Sen I. The distal ectodomain of angiotensin-converting enzyme regulates its cleavage-secretion from the cell surface. (1998),Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 138-143.

65. Chubb A.J., Schwager S.L.U., Merwe E.V., Ehlers M.R.W., and Sturrock E.D. Deletion of the cytoplasmic domain increases basal shedding of angiotensin-converting enzyme. (2004), Biochem. Biophys. Res. Commun., 314, 971-975.

66. Pang S., Chubb A.J., Schwager S.L., Ehlers M.R., Sturrock E.D., and Hooper N.M. Roles of the juxtamembrane and extracellular domains of angiotensin-converting enzyme in ectodomain shedding. (2001), Biochem. J., 358, 185-192.

67. Woodman Z.L., Schwager S.L.U., Redelinghuys P., Carmona A.K., Ehlers M.R., and Sturrock E.D. The N-domain of somatic angiotensin-converting enzyme negatively regulates ectodomain shedding and catalytic activity. (2005), Biochem. J., 389,739-744.

68. Sturrock E. D., Natesh R., van Rooyen J. M., and Acharya K. R. Structure of angiotensin I-converting enzyme. (2004), Cell. Mol. Life Sci., 61, 2677-2686.

69. Natesh R., Schwager S.L.U., Sturrock E.D, and Acharya K.R. Crystal structure of the human angiotensin-converting enzyme-lisinopril complex. (2003), Nature, 421, 551-554.

70. Gordon K., Redelinghuys P., Schwager S.L.U., Ehlers M.R.W., Papageorgiou A.C., Natesh R., Acharya K.R., and Sturrock E.D. Deglycosylation, processing and crystallization of human testis angiotensin-converting enzyme. (2003), Biochem. J., 371, 437-442.

71. Natesh R„ Schwager S.L.U., Evans H.R. Sturrock E.D, and Acharya K.R. Structure details on the binding of antihypertensive drugs captopril and enalaprilat to human testicular angiotensin I-converting enzyme. (2004), Biochemistry, 43, 8718-8724.

72. Воронов C.B., Биневский П.В., Зуева H.A., Палюлин В.А., Баскин И.И., Орлова М.А., и Кост О.А. Структурно-функциональные особенности гомологичных доменов ангиотензинпревращающего фермента. (2003), Биоорганическая химия, 29, 470-478.

73. Hooper N.M. Families of zinc metalloproteases. (1994), FEBS Lett., 354, 1-6.

74. Holm L., and Sander C. Protein folds and families: sequence and structure alignments. (1999), Nucleic Acids Res., 27, 244-247.

75. Brown C.K., Madauss K., Lian W., Beck M.R., Tolbert W.D., and Rodgers D.W. Structure of neurolysin reveals a deep channel that limits substrate access. (2001), Proc.Natl. Acad. Sci. USA, 98, 3127-3132.

76. Arndt J.W., Нао В., Ramakrishnan V., Cheng Т., Chan S.I., and Chan M.K. Crystal structure of a novel carboxypeptidase from the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus furiosus. (2002), Structure (Camb.), 10, 215-224.

77. Hausrath A.C., and Matthews B.W. Thermolysin in the absence of substrate has an open conformation. (2002), Acta. Crystallogr. D Biol. Crystallogr., 58, 10021007.

78. Naqvi N., Liu K., Graham R. M., and Hussain A. Molecular basis of exopeptidase activity in the C-domain of human angiotensin I-converting enzyme. Insights into the origins of its exopeptidase activity. (2005), J. Biol. Chem., 280, 6669-6675.

79. Fernandez J.H., Hayashi M.A.F., Camargo A.C.M., and Nashich G. Structiral basis of the lisinopril-binding specificity in N- and C-domains of human somatic ACE. (2003), Biochem. Biophys. Res. Commun., 308, 219-226.

80. Acharya K.R., Sturrock E.D., Riordan J.F., and Ehlers M.R. ACE revisited: a new target for structure-based drug design. (2003), Nature reviews, 2, 891-902.

81. Tzakos A.G. and Gerothanassis I.P. Domain-selective ligand-binding model and atomic level pharmacophore refinement in angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitors. (2005), Chembiochem., 6, 1089-1103.

82. Marcic В., Deddish P. A., Jackman H. L., Erdos E. G., and Tan F. Effects of the N-terminal sequence of ACE on the properties of its C-domain. (2000), Hypertension, 36, 116-121.

83. Fernandez J. H., Neshich G., and Camargo А. С M. Using bradykinin-potentiating peptide structure to develop new antihypertensive drugs. (2004), Genet. Mol. Res., 3, 554-563.

84. Kim H.M., Shin D.R., Yoo O.J., Lee H., and Lee J.O. Crystal structure of Drosophila angiotensin I-converting enzyme bound to captopril and lisinopril. (2003), FEBSLett., 538, 65-70.

85. Ray K., Hines C.S., Coil-Rodriguez J., and Rodgers D.W. Crystal structure of human thimed oligopeptidase provides insight into substrate recognition, regulation, and localization. (2004), J. Biol. Chem., 279, 20480-20489.

86. Hangauer D.G., Monzingo A.F., and Matthews B.W. An interactive computer graphics study of thermolysin-catalyzed peptide cleavage and inhibition by N-carboxymethyl dipeptides. (1984), Biochemistry, 23, 5730-5741.

87. Matthews B.W. Structural basis of the action of thermolys in and related zinc peptidases. (1988), Acc. Chem. Res., 21, 333-340.

88. Ehlers M.R., and Riordan J.F. Angiotensin-converting enzyme: zinc- and inhibitor-binding stoichiometrics of the somatic and testis isozymes. (1991), Biochemistry, 30,7118-7126.

89. Wei L., Alhenc-Gelas F., Corvol P., and Clauser E. The two homologous domains of human angiotensin I-converting enzyme are both catalytically active. (1991), J.Biol.Chem., 266, 9002-9008.

90. Deddish P. A., Jackman H. L., Skidgel R. A., and Erdos E. G. Differences in the hydrolysis of enkephalin congeners by the two domains of angiotensin converting enzyme. (1997), Biochem. Pharmacol., 53, 1459-1463.

91. Wei L., Clauser E., Alhenc-Gelas F., and Corvol P. The two homologous domains of human angiotensin I-converting enzyme interect differently with competitive inhibitors. (1992), J. Biol. Chem., 267, 13389-13405.

92. Voronov S., Zueva N., Orlov V., Arutyunyan A., and Kost O. Temperature-induced selective death of the C-domain within angiotensin-convertin enzyme molecule. (2002), FEBS Lett., 522, 77-82.

93. Jaspard E., Wei L., and Alhenc-Gelas F. Differences in the properties and enzymatic specificies of the two active sites of angiotensin I-converting enzyme (Kininase II). (1993), J.Biol.Chem., 268, 9496-9503.

94. Deddish P. A., Marcic В., Jackman H. L., Wang H.Z., Skidgel R. A., and Erdos E. G. N-Domain-specific substrate and C-domain inhibitors of angiotensin-converting enzyme: angiotensin (1-7) and keto-ACE. (1998), Hypertension, 31, 912-917.

95. Araujo M.C., Melo R.L., Cesari M.H., Juliano M.A., Juliano L., and Carmona A.K. Peptidase specificity characterization of C- and N-terminal catalytic sites of angiotensin I-converting enzyme. (2000), Biochemistry, 39, 8519-8525.

96. Cotton J., Hayashi M.A., Cuniasse P., Vazeux G., Ianzer D., De Camargo A.C., and Dive V. Selective inhibition of the C-domain of angiotensin I converting enzyme by bradykinin potentiating peptides. (2002), Biochemistry, 41, 6065-6071.

97. Binevski P.V., Sizova E.A., Pozdnev V.F., and Kost O.A. Evidence for the negative cooperativity of the two active sites within bovine somatic angiotensin-converting enzyme. (2003),FEBSLett., 550, 84-88.

98. Andujar-Sanchez M., Camara-Artigas A., and Jara-Perez V. A calorimetric study of the binding of lisinopril, enalapril and captopril to angiotensin-converting enzyme. (2004), Biophys. Chem., Ill, 183-189.

99. Skirgello O.E., Binevski P.V., Pozdnev V.F., and Kost O.A. Kinetic probes for inter-domain co-operation in human somatic angiotensin-converting enzyme. (2005), Biochem. J., 391, 641-647.

100. Skeggs L.T., Marsh W.H., Kahn J.R., and Shumway N.P. The existence of two forms of hyper tens in. (1954), J. Exp. Med., 99, 275-282.

101. Gorenstein C., and Snyder, S.H. Two distinct enkephalinases: solubilization, partial purification and separation from angiotensin converting enzyme. (1979), Life Sci., 25, 2065-2070.

102. Oshima G., Nagasawa K., and Kato J. Renal angiotensin I-converting enzyme as a mixture of sialo- and asialo-enzyme, and a rapid purification method. (1973), J. Biochem., 80, 477-483.

103. Na K.-J., and Lee H.-J., Role of chloride ion as allosteric activator of angiotensin-converting enzyme. (1983), Arch. Biochem. Biophys., 227, 580-586.

104. Bunning P., and Riordan J.F. Activation of Angiotensin Converting Enzyme by Monovalent Anions. (1983), Biochemistry, 22, 110-116.

105. Dorer F.E., Kahn J. R., Lentz К. E., Levine M., and Skeggs L. T. Purification and properties of angiotensin-converting enzyme from hog lung. (1972), С ire. Res., 31, 356-366.

106. Dorer F.E., Kahn J. R., Lentz К. E., Levine M., and Skeggs L. T. Hydrolysis of bradykinin by angiotensin-converting enzyme. (1974), Circ. Res., 34, 824-827.

107. Fernley R. T. Equine angiotensin converting enzyme: a zinc metalloenzyme. (1977), Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 4, 267-281.о

108. Inokuchi J., and Nagamatsu A. Tripeptidyl carboxypeptidase activity ofkininase II (angiotensin-converting enzyme). (1981), Biochim. Biophys. Acta., 662, 300-307.

109. Jaspard E., and Alhenc-Gelas F. Catalytic properties of the two active sites of angiotensin I-converting enzyme on the cell surface. (1995), Biochem. Biophys. Res. Commun., 211, 528-534.

110. Cheung H.-S., Wang F.-L., Ondetti M. A., Sabo. E. F., and Cushman D. W. Binding of peptide substrates and inhibitors of angiotensin-converting enzyme. (1980), J. Biol. Chem., 255, 401-407.

111. Persson A. V., Russo S. F., and Wilson I.B. A new chromogenic substrate for angiotensin-converting enzyme. (1978), Anal. Biochem., 91, 674-683.

112. Rohrbach M., Williams E. В., and Rolstad R. A. Purification and substrate specificity of bovine angiotensin-converting enzyme. (1981), J. Biol. Chem., 256, 225-230.

113. Ehlers M. R., and Kirsch R. E. Catalysis of angiotensin I hydrolysis by angiotensin-converting enzyme: effect of chloride and pH. (1988), Biochemistry, 27, 5538-5544.

114. Shapiro R., Holmquist В., and Riordan J.F. Anion Activation of Angiotensin Converting Enzyme: Dependence on Nature of Substrate. (1983), Biochemistry, 22, 3850-3857.

115. Шарафутдинов Т.З. Молекулярная и кинетическая характеристика ангиотензин-превращающего фермента из легких быка. (1990), Дисс. канд. хим. наук, МГУ, Москва.

116. Riordan J.F., Harper J.W., and Martin M. The catalytic mechanism of angiotensin converting enzyme and related enzymes. (1986), Journal of Cardiovascular pharmacology, 8,29-34.

117. Harper J.W., Shapiro R., and Riordan J.F. Observation of a Chloride-Dependent Intermediate during Catalysis by Angiotensin Converting Enzyme Using Radiationless Energy Transfer. (1987), Biochemistry, 26, 1284-1288.

118. Shapiro R., and Riordan J.F. Inhibition of Angiotensin Converting Enzyme: Dependence on Chloride. (1984), Biochemistry, 23, 5234-5240.

119. Liu X., Fernandez M., Wouters M.A., Heyberger S., and Husain A. Arg'098 is critical for the chloride dependence of human angiotensin I-converting enzyme C-domain catalytic activity. (2001), J. Biol. Chem., 276, 33518-33525.

120. Shapiro R., and Riordan J.F. Critical Lysine Residue at the Chloride Binding Site of Angiotensin Converting Enzyme. (1983), Biochemistry, 22, 5315-5321.

121. Dutzler R., Campbell E. В., Cadene M., Chalt В. Т., and MacKinnon R. X-ray structure of a CIC chloride channel at 3.0A reveals the molecular basis of anion selectivity. (2002), Nature, 415, 287-294.

122. Sen I., Kasturi S., Jabbar M.A., and Sen G.C. Mutations in two specific residues of testicular angiotensin-converting enzyme change its catalytic properties. (1993), J. Biol. Chem., 268, 25748-25754.

123. Chen Y.N.P., and Riordan J.F. Identification of essential tyrosine and lysine residues in angiotensin converting enzyme: evidence for a single active site. (1990), Biochemistry, 29, 10493-10498.

124. Tipnis S.R., Hooper N.M., Hyde R., Karran E., Christie G., and Turner A.J. A human homolog of angiotensin-converting enzyme. Cloning and functional expression as a captopril-insensitive carboxypeptidase. (2000), J. Biol. Chem., 275, 33238-33243.

125. Vickers C., Hales P., Kaushik V., Dick L., Gavin J., Tang J., Godbout K., Parsons Т., Baronas E., Hsieh F„ Acton S., Patane M., Nichols A., and Tummino P.)

126. Guy J.L., Jackson R.M., Jensen H.A., Hooper N.M., and Turner A.J. Identification of critical active-site residues in angiotensin-converting enzyme-2 (ACE2) by site-directed mutagenesis. (2005), FEBSJ., 272, 3512-3520.

127. Sundberg L., and Porath J. Preparation of adsorbents for biospecific affinity chromatography. Attachment of group-containing ligands to insoluble polymers by means of bifuctional oxiranes. (1974), J. Chromatogr., 90, 87-98.

128. Кост O.A., Гринштейн C.B., Никольская И.И., Шевченко А.А., и Биневский П.В. Выделение солюбилизированной и мембранной форм соматического ангиотензин-превращающего фермента каскадной аффинной хроматографией. (1997), Биохимия, 62, 375-383.

129. Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., и Джонс К. (1991), Справочник биохимика, Мир, Москва, 461-466.

130. Bull H.G., Thornberry N.A., and Cordes E.H. Purification of angiotensin-converting enzyme from rabbit lung and human plasma by affinity chromatography. (1985), J. Biol. Chem., 260, 2963-2972.

131. Hooper N.M., and Turner A.J. Isolation of two differentially glycosylated forms of peptidyl-dipeptidase A (angiotensin-converting enzyme) from pig brain: a re-evaluation of their role in neuropeptide metabolism. (1987), Biochem. J., 241, 625-633.

132. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. (1970), Nature, 227, 668-672.

133. Helmerhorts E., and Stokes G.B. Microcentrifuge desalting: a rapid, quantitative method for desalting small amounts of protein. (1980), Anal. Biochem., 104, 130135.

134. Holmquist В., Bunning P., and Riordan J.F. A continuous spectrophotometric assay for angiotensin-converting enzyme. (1979), Anal. Biochem., 95, 540-548.

135. Bieth J.-G. Theoretical and practical aspects of proteinase inhibition kinetics. (1995), Methods Enzymol., 248, 59-84.

136. Conroy J.M., and Lai C.I. A rapid and sensitive fluorescence assay for angiotensin-converting enzyme. (1978), Anal. Biochem., 87, 556-561.

137. Cornish-Bowden A. Fundamentals of enzyme Kinetics, revised ed.; Portland Press: London, 1999; 32-33.

138. Thompson J.D., Gibson T.J., Plewniak F., Jeanmougin F., and Higgins D.J. The CLUSTAL X windows interface: flexble strategies for multiple sequence alingment aided by quality analysis tools. (1997), Nucleic Acids Res., 25, 4876-4882.

139. Sybyl6.6. Tripos Inc. 1699 South Hanley Road, St. Louis, MO 63144, http://www.tripos.com.

140. Berman H.M., Westbrook J., Feng Z., Gilliland G„ Bhat T.N, Weissig H., Shindyalov I.N., and Bourne P.E. The Protein Data Bank. (2000), Nucleic Acids Res., 28, 235-242.

141. Laskowski R.A., Macarthur M.W., Moss D.S., and Thornton J.M. PROCHECK: a program to check the stereochemical quality of protein structures. (1993), J. Appl. Cryst., 26, 283-291.

142. Sen I., Samanta H., Livingston W., and Sen G.C. Establishment of transfected cell lines producing testicular angiotensin-converting enzyme. Structural relationship between its secreted and cellular forms. (1991), J. Biol. Chem., 266, 21985-21990.

143. Harris R.B., and Wilson I.B. Physicochemical characteristics of homogeneous bovine lung angiotensin-I converting enzyme. (1982), Int. J. Peptide Protein Res., 20,167-176.

144. Воронов C.B., Биневский П.В., Еремин C.A. и Кост О.А. Метод поляризации флуоресценции в исследовании различных форм ангиотензин превращающего фермента. (2001), Биохимия, 66, 968-975.

145. Kabsch W., and Sander С. Dictionary of protein secondary structure: pattern recognition of hydrogen-bonded and geometrical features. (1983), Biopolymers, 22, 2577-2637.a